[go: up one dir, main page]

HU214917B - Mikroorganizmusokat tartalmazó granulált készítmény, eljárás ennek előállítására és alkalmazása - Google Patents

Mikroorganizmusokat tartalmazó granulált készítmény, eljárás ennek előállítására és alkalmazása Download PDF

Info

Publication number
HU214917B
HU214917B HU9700096A HU9700096A HU214917B HU 214917 B HU214917 B HU 214917B HU 9700096 A HU9700096 A HU 9700096A HU 9700096 A HU9700096 A HU 9700096A HU 214917 B HU214917 B HU 214917B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
water
composition
weight
granular
granular composition
Prior art date
Application number
HU9700096A
Other languages
English (en)
Other versions
HUT76428A (en
Inventor
William Baettig
Margarete Enzmann
Original Assignee
Novartis Ag.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Novartis Ag. filed Critical Novartis Ag.
Publication of HUT76428A publication Critical patent/HUT76428A/hu
Publication of HU214917B publication Critical patent/HU214917B/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
    • C12N11/10—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a carbohydrate
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/20—Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • A01N63/27—Pseudomonas
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
    • C12N11/08—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/80—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for fungi
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C12N9/52—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from bacteria or Archaea
    • C12N9/54—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from bacteria or Archaea bacteria being Bacillus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C12N9/58—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from fungi
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
    • C12P21/06—Preparation of peptides or proteins produced by the hydrolysis of a peptide bond, e.g. hydrolysate products
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/60—Buffer, e.g. pH regulation, osmotic pressure

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Compositions Of Macromolecular Compounds (AREA)
  • Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)

Abstract

A találmány tárgya granűlált készítmény, amely 50–99 tömeg% finőmelőszlású vízőldhatatlan szervetlen vagy szerves szűbsztrátból és egy,mikrőőrganizműsőkat tartalmazó pőlimer rétegből áll, mely pőlimer a)filmképző, vízőldható és keresztkötésektől mentes pőlimer, és agranűlált készítmény legalább 0,5 és maximűm 40 tömeg% vizet (akészítményre vőnatkőztatva) tartalmaz, vagy b) filmképző,keresztkötéses szerkezetű pőliszacharid, amely karbőxil- vagy szűlfát-csőpőrtőkat tartalmaz és vízben káliűm-iőnők jelenlétében dűzzadásraképes, mimellett a káliűm-iőnők és a pől mer karbőxil- vagy szűlfát-csőpőrtjainak mólaránya 0,001:1–1:1, és a granűlált készítménylegalább 0,5 és maximűm 40 tömeg% vizet (a készítményre vőnatkőztatva)tartalmaz. A találmány tárgya tővábbá eljárás a granűlált készítményelőállítására, amely a találmány szerint növények védelmérealkalmazható betegségek vagy rővarkártevők ellen. ŕ

Description

A találmány tárgya granulált készítmény, amely
1. egy szilárd, vízoldhatatlan és finom eloszlású szubsztrátumot,
2. egy vízoldható vagy víz hatására megduzzadó filmképző polimert, amely nem tartalmaz kovalens keresztkötéseket vagy többértékű kationokkal képezett keresztkötéseket tartalmaz,
3. mikroorganizmusokat és
4. vizet tartalmaz. A találmány további tárgya eljárás az említett granulált készítmény előállítására, amely növények védelmére használható fel betegségek és rovarkártevők ellen.
Újabban jelentősen megnövekedett a növényvédelem azon ágának jelentősége, amely spóraképző vagy vegetatív sejteket (mikroorganizmusokat) alkalmaz. Az ilyen biológiai hatású szerek alkalmazásának előfeltétele az, hogy ezeket használható készítményekké (szuszpenzió-koncentrátumok, diszpergálható porok, granulátumok vagy különösen kiszórható granulátumok) tudjuk feldolgozni. A készítmények előállítása azonban nagy nehézségekkel jár. így például nem jöhet szóba olyan eljárás a legtöbb vegetatív sejt és egyes spórák esetében, amely 40 °C-nál magasabb hőmérsékleteket alkalmaz, mivel a mikroorganizmusok ennek során károsodnak és az életképesség jelentős csökkenése figyelhető meg. Ugyancsak problémát jelent a tárolás, mivel szobahőmérsékleten nem kerülhető el a sejtek elhalásából eredő életképesség-csökkenés, vagy ha a készítményt alacsony hőmérsékleten kell tárolni, az életképesség csökkenése.
A legtöbb mikroorganizmus-készítmény polimer gélekből áll, amelyek polivalens kationokkal keresztkötéseket képeznek és ezek a mikroorganizmusokat tartalmazzák. Ilyen készítményt ír le például D. R. Fravel et al. (Phytopathology, Vol. 75, No. 7, p. 774-777, 1985), polimer anyagként alginátot alkalmazva. Ez a közlemény ismerteti szubsztrátumok egyidejű alkalmazását is. Az ilyen készítményeket rendszerint úgy állítják elő, hogy természetes vagy szintetikus gélképző polimerek (például alginátok) oldatait és többértékű fémionok vizes oldatait különálló cseppek képzése közben összekeverik, mimellett a mikroorganizmusok az egyik vagy mindkét reagáló oldatban szuszpendálhatók. A gélképződés akkor indul meg, amikor a mikroorganizmusszuszpenziót csepegtetve hozzáadják a gélképző szer oldatához. Ezek a gélrészecskék a továbbiakban száríthatok. Ezt az eljárást ionotróp gélképzésnek nevezik. A szárítás fokától függően ez az eljárás kompakt és kemény polimer-pelleteket eredményez, többértékű kationokkal alkotott keresztkötésekkel, amelyek a mikroorganizmusokat és a szubsztrátumot lényegében homogén eloszlásban tartalmazzák. A részecskenagyság maximum 5 mm lehet.
A 97 571 számú közzétett európai szabadalmi bejelentés részlegesen keresztkötésekbe vitt poliszacharid alapú készítményeket ír le, amelyek a mikroorganizmusokon kívül szubsztrátként finom eloszlású kovasavat tartalmazhatnak; a keresztkötések kialakítására Ca2+ ionok alkalmazhatók. A készítmények vízaktivitása 0,3-nél nem lehet nagyobb. Granulált készítményekre, amelyek szubsztrátként vermikulitet tartalmaznak, és az ionotróp gélképzési eljárással előállított kompakt alginát pelletekre vonatkozik W. J. Connick et al. cikke (New Directions in Biological Control; Altematives fór Supressing Agricultural Pests and Diseases, p. 345-372, 1990). Ilyen készítményeket ír le D. R. Fravel is (Pesticide formulations and Application Systems, Vol. 11, ASTM STP 1112, American Society fór Testing and Materials, Philadelphia, p. 173-179, 1992).
Ezeknek a keresztkötéses gélkészítményeknek az a hátránya, hogy a gél vízoldhatatlansága miatt lassan szabadul fel belőlük a biológiai hatóanyag és rendszerint nagy - néhány milliméternél nagyobb - átmérőjű részecskék képződnek. Gyorsabb felszabadulás elérésére a készítményeket pufferoldatokkal kell előkezelni. Ez nehézségeket okoz a végfelhasználó számára és korlátozza a kezelés biztonságosságát. Magasabb populációsűrűségek mellett (109 telepképző egység/g-nál nagyobb értékek esetén), amelyek az alkalmazási sebesség csökkentéséhez szükségesek, a rendszerek általában nem kielégítő stabilitásúak és hidegen való tárolás válik szükségessé a lényeges veszteségek elkerülésére. A készítmény előállítására a gélképző polimereket vízben kell oldani, ami egyes esetekben nehéz és csak magasabb hőmérsékleten hajtható végre. Használható granulált készítmény előállításához szükséges eljárási lépés a csepp alakú gél kialakítása. Egy ilyen eljárás ipari méretekben való végrehajtására szolgáló műszaki berendezés biztosítása bonyolultnak és drágának minősíthető. Az így kapott részecskék víztartalma még mindig magas; elfogadható tárolási stabilitás biztosítására ezt szárítással még csökkenteni kell. Ez a szárítási lépés az eljárást még drágábbá teszi, a mikroorganizmusok további károsodás veszélyének való kitételével jár és tovább csökkentheti ezek életképességét. A szakember számára még nem ismertek olyan stabilan tárolható granulált készítmények, amelyek vízoldható vagy víz hatására duzzadó polimereken alapulnak és ionotróp gélképzés nélkül állíthatók elő.
Meglepő módon azt találtuk, hogy lehetséges
a) granulált mikroorganizmus-készítmények előállítása polimer rétegben ionotróp gélképzés nélkül és részben a polimer teljes feloldása nélkül;
b) a szárítás során fellépő élősejtpusztulás által okozott veszteségek lényeges csökkentése;
c) magas tárolási stabilitás elérése, különösen szobahőmérsékleten;
d) igen magas mikroorganizmus populációs sűrűség elérése kiváló tárolási stabilitás biztosítása mellett;
e) a biológiai hatóanyag gyors felszabadulásának elérése és
f) különösen a vegetatív baktériumsejtek magas fokú stabilizálásának elérése oly módon, hogy a mikroorganizmusokat egy vízoldható vagy víz hatására duzzadó filmképző polimerben, amely nem tartalmaz kovalens keresztkötéseket vagy polivalens kationokkal képezett keresztkötéseket tartalmaz, visszük fel egy szubsztrátumra vagy al2
HU214 917B kalmazzuk azzal együtt, mimellett a készítmény legalább 0,5 tömeg% vizet (a készítmény teljes tömegére vonatkoztatva) tartalmaz.
A találmány egyik tárgya granulált készítmény, amely finom eloszlású szubsztrátból és egy, mikroorganizmusokat tartalmazó polimer rétegből áll, amely polimer
a) filmképző, vízoldható és keresztkötésektől mentes polimer, és a granulált készítmény legalább 0,5 tömeg% vizet (a készítményre vonatkoztatva) tartalmaz, vagy
b) filmképző, keresztkötéses szerkezetű poliszacharid, amely karboxil- vagy szulfátcsoportokat tartalmaz és vízben kálium-ionok jelenlétében duzzadásra képes és a granulált készítmény legalább 0,5 tömeg% vizet (a készítményre vonatkoztatva) tartalmaz.
A „keresztkötésektől mentes” kifejezés a találmány leírása keretében azt jelenti, hogy nem adagolunk monomer keresztkötésképző ágenseket (amelyek kovalens kötések keletkezéséhez vezetnek), vagy polivalens kationokat (amelyek ionotróp gélképződéshez vezetnek).
A „keresztkötéses szerkezetű” a jelen szövegösszefüggésben azt jelenti, hogy egyetlen polimerből vagy két polimer keverékéből hidrogénkötéseken keresztül vagy kálium-ionok elektrosztatikus kölcsönhatása révén térháló alakul ki. Ezáltal hőre reverzibilis térszerkezet (gél) képződik, amely melegítés hatására ismét oldatba megy. Jellegzetes példa a karragenin kifejezett kettős spirál szerkezete kálium-ionok jelenlétében vagy a karragenin és a szentjánoskenyér-gyanta keverékéből létrejött szerkezetes képződmény. A többértékű ionok hatására végbemenő, hőre irreverzíbilis szerkezet kialakulása nem esik az előbbi meghatározás alá.
A poliszacharid 1 ismétlődő szerkezeti egységére számítva 1 vagy több karboxil- vagy szulfát-csoport lehet jelen. A jelen szövegösszefüggésben a vízoldható kifejezés azt jelenti, hogy az 5-95 °C hőmérséklet-tartományban legalább 5 tömeg%-os vizes polimer oldat állítható elő.
A granulált készítmény a mikroorganizmusokat előnyösen 0,1-10 tömeg%, előnyösen 0,3-5 tömeg% és legelőnyösebben 0,5-3 tömeg% mennyiségben (szárazanyag, 1 kg készítményre vonatkoztatva) tartalmazza. (A granulált készítményben a komponensek összmennyisége mindig 100%).
A sejtkoncentráción alapuló populációsűrűség különösen magas lehet. A mikroorganizmusok kitüntetett populációsűrűsége lxl05-lxl0n telepkéző egység/g granulált készítmény. Szobahőmérsékleten való tárolás mellett ez az élősejt-koncentráció a találmány szerinti készítményben maximum 10 hónapon át tartható fenn, amelynek során csak kisebb mértékű (a telepképzőegység-szám tekintetében egy nagyságrendnél alacsonyabb) mikroorganizmus-veszteség következik be.
A maradék víztartalom előnyösen legalább 1 tömeg%, előnyösebben legalább 3 tömeg% és legelőnyösebben legalább 5 tömeg%. A víztartalom felső határértéke előnyösen 40 tömeg%, előnyösebben maximum 30 tömeg% és legelőnyösebben maximum 20 tömeg%. A víztartalom felső határértékét a vivőanyag, a polimer vízoldhatósága és a készítmény előállítására alkalmazott eljárás határozza meg. A bevonásos módszerek (például a fluidágyas bevonás) esetében könnyen elérhető a 0,5-20 tömeg% víztartalom, míg az extrudálásos módszerek esetében a víztartalom magasabb lehet (jellegzetesen 0,5-40 tömeg%). A finomeloszlású szubsztrát átlagos részecskenagysága 1 pm-0,8 cm, előnyösebben 10 pm-0,5 cm és legelőnyösebben 20 pm-0,2 cm lehet. A szubsztrát lehet egy szervetlen vagy szerves anyag. Gombák esetében kitüntetetten szerves anyagot, míg vegetatív sejtek (baktériumok) esetében szervetlen anyagokat alkalmazunk. A vízoldhatatlan szerves anyagra jellegzetes példa az aprított korpa, szalma, íűrészpor és a cellulóz. Különösen alkalmas szervetlen szubsztrátumok a vízoldhatatlan fémoxidok és fémsók (SiO2, A12O3, BaSO4, CaCO3) vagy az alkálifémek vagy alkáliföldfémek szilikátjai vagy alumíniumszilikátjai. A szilikátok közül kitüntetettek a csillámok. Jellegzetes példa a szilikátokra az ásványi agyag, attapulgit, szilikagél, porított mész, diatóma-föld, wollasztonit, olivin, montmorillonit és a vermikulit. Különösen kitüntetett a vermikulit.
A szubsztrát mennyisége általában 50-99 tömeg%, előnyösen 65-95 tömeg% és legelőnyösebben 75-90 tömeg%.
A granulált készítmény átlagos részecskenagysága 0,01-8 mm. Kitüntetett átlagos részecskenagyság-tartomány a 0,2-4 mm és különösen kitüntetett átlagos részecskenagyság a 0,5-2 mm.
A filmképző, vízoldható és keresztkötésmentes polimer lehet szintetikus vagy természetes eredetű. A szintetikus polimerekre jellemző példák a polivinil-alkohol, polietilén-glikol vagy a polivinil-pirrolidon homo- és kopolimeijei, valamint a poliakril-amidok. A természetes polimerek főként poliszacharidok, adott esetben származék alakban. Kitüntetett szerves polimerek nagy számban ismertek, például ilyen a keményítő, alginátok, karragének, előnyösen a kappa-, tau- vagy lambda-karragén, xantán, szentjánoskenyér-gumi vagy a metil-cellulózok. Az előbbiek keverékei is alkalmazhatók.
A polimereknek kompatíbilisnek kell lenniük a mikroorganizmusokkal. A kompatibilitást a szakember egyszerűen meg tudja állapítani, a mikroorganizmus és a polimer összehozásával. Különösen kitüntetettek az alginátok és a karragének. Különösen kitüntetett vivőanyag-vízoldható polimer kombináció a vermikulit kappa-karragénnel együtt való alkalmazása.
A filmképző, keresztkötéses szerkezetű, víz hatására duzzadó polimer lehet egy poliszacharid, előnyösen a kappa- vagy tau-karragén, szentjánoskenyér-gumi, xantán vagy ezek keveréke, amely kálium-ionok jelenlétében képződik. Ezek a polimerek hőre reverzibilis géleket képeznek, amelyekre intermolekuláris hidrogénkötések vagy ionkötések jellemzők.
A vízoldható vagy víz hatására duzzadó polimer mennyisége 0,1-20 tömeg%, előnyösen 0,10 tömeg% és legelőnyösebben 0,5-5 tömeg% lehet.
A kálium-ionoknak a polimer karboxil- vagy szulfát-csoportjaihoz viszonyított mólaránya 0,001:1-1:1.
A mezőgazdaságban a fertőző rovarok vagy a növényi betegségek ellen használható mikroorganizmusok ismertek; ilyeneket ír le például a 472 494 számú közzétett európai szabadalmi leírás.
Megfelelő mikroorganizmusok a mono- vagy multicelluláris gombák vagy baktériumok, különösen a következők: Rhizobium spp., Metharizium, Fusarium, Trichoderma, Streptomyces, Gliocladium, Penicillium, Talaromyces, Verticillium vagy Colleotrichum. Kitüntetett mikroorganizmusok a következők: Pseudomonas spp., Serratia spp., Bacillus spp., Agrobacter spp., Exserohilum spp., Enterobacter spp. Különösen előnyben részesítjük a Pseudomonas aurantiaca ATTC No. 55169-et.
Mikroorganizmusokkal befolyásolhatók egyes gyomnövények, rovarok és jellegzetesen a következő gombák által okozott megbetegedések: Rhizoctonia solani, Rhizoctonia oryzae, Phytium ultimum, Fusarium oxysporum spp., Alphanomyces laevis, Phytophtora infestans, Botrytis spp., Sclerotinia sclerotiorum, Bacillus sp., Michrodochium nivale, Thielaviopsis basicola, Gaeumanomyces graminis és elvben minden egyéb, patogén mikroorganizmusok (Erwinia carotovora, Saccharomyces cerevisiae, Xanthomonas vesicatoria, Pseudomonas syringae) által okozott megbetegedés.
A Pseudomonas aurantiaca ATCC No. 55169 számos, az előbbiekben említett betegség ellen hatásos különböző növényekben. Különösen jelentős a Rhizoctonia solani ellen gyapoton, uborkán, káposztán, gerániumon, nebáncsvirágon és mikulás-virágon kifejtett védőhatás.
A klasszikus cseppszerű granulált készítmények előállítása (például W. J. Connik: formulation of living biological control agents with alginate, American Chem. Soc., ÁCS Symposium Series 1988, Vol. 371, p. 241-250; D. R. Fravel et al.: Encapsulation of potential biocontrol agents in alginate, Phytopathology 75, p. 774—777, 1985; K. E. Stormo et al.: Preparation of encapsulated microbial cells fór environmental application, Applied and Environmental Microbiology, p. 727-730, 1992) olyan granulátumokat eredményez, amelyek láthatóan oldhatatlanok és még pufferoldatokban is csak nagyon lassan oldódnak fel, így a mikroorganizmusok felszabadulása nagyon lassan vagy egyáltalán nem következik be.
Meglepő módon azt találtuk, hogy a találmány szerinti eljárással előállított granulátumok a mikroorganizmusok nagyon gyors felszabadulását teszik lehetővé. A készítmény pufferben vagy vízben - a polimertől függően - 0,5-től néhány órára kiterjedő idő alatt elbomlik, azaz a polimer réteg leválik vagy megduzzad és így a teljes mikroorganizmus-mennyiség 24 órán belül a talajba jut.
A találmány további tárgya eljárás egy granulált készítmény előállítására, amely finom részecskeeloszlású szubsztrátból és egy, mikroorganizmusokat tartalmazó polimer rétegből ál, amely polimer
a) filmképző, vízoldható és keresztkötésektől mentes polimer, és a granulált készítmény legalább 0,5 és maximum 40 tömeg% vizet (a készítményre vonatkoztatva) tartalmaz, vagy
b) filmképző, keresztkötéses szerkezetű poliszacharid, amely karboxil- vagy szulfátcsoportokat tartalmaz és vízben kálium-ionok jelenlétében duzzadásra képes és a granulált készítmény legalább 0,5 és maximum 40 tömeg% vizet (a készítményre vonatkoztatva) tartalmaz, azzal jellemezve, hogy
i) az a) granulátum előállítására egy filmképző és vizoldható polimert szuszpendálunk vagy maximum 95 °C hőmérsékleten oldunk és ebben a szuszpenzióban vagy oldatban - szobahőmérsékletre való lehűtés után - egy mikroorganizmust szuszpendálunk, vagy ii) a b) granulátum előállítására egy karboxil- vagy szulfátcsoportokat tartalmazó poliszacharidot kálium-ionokat tartalmazó vizes pufferoldatban szuszpendálunk, majd a mikroorganizmust ebben az oldatban szuszpendáljuk, iii) a kapott szuszpenziót porlasztással közvetlenül felvisszük a finom részecskeeloszlású szubsztrátra vagy összekeverjük ezzel a finom részecskeeloszlású szubsztráttal és iv) a vizet (a granulált készítményre vonatkoztatva 0,5—40 tömeg% koncentráció eléréséig) eltávolítjuk. Ha az a) készítmény előállításához filmképző és víz hatására duzzadó polimert alkalmazunk, a szuszpenziót előnyösen a 10-30 °C hőmérséklet-tartományban állítjuk elő. A filmképző és víz hatására duzzadó polimer oldatának előállítására a polimer típusától függően a 25-95 °C hőmérséklet-tartományt vesszük figyelembe.
A mikroorganizmusokat a polimer szuszpenzióhoz vagy a lehűtött polimer oldathoz 40 °C alatti hőmérsékleten, előnyösen 30 °C alatt adjuk hozzá.
Az eljárás egy másik változata esetében a b) készítményt úgy állítjuk elő, hogy egy karboxil- vagy szulfátcsoportokat tartalmazó poliszacharidot kálium-ionokat tartalmazó vizes pufferoldatban oldunk magasabb hőmérsékleten, például 70 °C-on, vagy hasonló körülmények között oldunk két polimert, amelyek reagálnak egymással. Ezekből a lehűtött oldatokból termikusán reverzibilis gél képződik. A mikroorganizmusokat valamivel a megszilárdulási pont elérése előtt, 40 °C alatti hőmérsékleten adagoljuk.
A puffer egy többértékű sav kálium-iont tartalmazó sója lehet. Különösen előnyben részesítjük a kereskedelemben kapható foszfátpuffereket. A dihidrogén-foszfát/monohidrogén-foszfát aránytól függően a pH 6,5-7,5-re állítható be. A kitüntetett pH 7.
A puffer koncentrációja előnyösen 0,00001M-lM, legelőnyösebben 0,005M-0,05M.
A vizet a lehető legenyhébb körülmények között távolítjuk el, előnyösen szobahőmérsékleten vagy maximum 35 °C-ig terjedő magasabb hőmérsékleten.
A víz eltávolítására szolgáló berendezések és eljárások ismertek. A legjobb módszer függ a feldolgozásra kerülő adag viszkozitásától. A találmány szerinti granulált készítmények ismert módon, a szokásos berendezés alkalmazásával állíthatók elő. A bevonáshoz előnyösen a komponensek összekeveréséhez alkalmazott porlasztásos módszereket használjuk fel, általában
HU 214 917 Β fluidágyas reaktorban. E módszer esetében a polimert és a mikroorganizmust tartalmazó oldatot vagy szuszpenziót a fluidágyban porlasztással felvisszük a szubsztrátra és így egyidejűleg szárítást is végzünk. Az eljárás egy másik megvalósítási módja esetében egy ismert extrudálási eljárással új granulált készítményt állítunk elő. Ez abban áll, hogy valamennyi komponenst egy keverőben összekeverjük a szükséges mennyiségű vízzel és a keveréket egy perforált lemezen préseljük át. A granulátum ezután a kívánt méretre aprítható és szárítható.
Egycsavaros extruderek, granulátorok, szubgranulátorok, perforált lemezek stb. alkalmazhatók.
A találmány szerinti eljárás olyan granulált készítményt eredményez, amelyben a szubsztrátot vékony polimer réteg vonja be és ebben a polimer rétegben vannak eloszlatva a mikroorganizmusok. Rendszerint nem elkülönült bevont részecskéket kapunk, hanem agglomerátumokat, amelyek számos, szabálytalan alakú szubsztrátrészecskéből állnak.
A választott keverési és szárítási eljárás függvényében különböző alakú részecskékhez jutunk. így az extrudálási eljárás hengeres pelleteket eredményez, amelyekben a szubsztrát és a mikroorganizmus lényegében egymástól függetlenül van bevonva a polimer anyaggal, míg a fluidágyas berendezésben alkalmazott porlasztásos módszer olyan szubsztrát agglomerátumokat szolgáltat, amelyekben a részecskéket a mikroorganizmust tartalmazó polimer réteg vonja be. Kitüntetett ez a részecske, mivel a vékony polimer rétegből különösen gyorsan szabadulnak fel a mikroorganizmusok.
A találmány szerinti granulált készítmények minden esetben szilárd, szabadon áramló keverékek, amelyek közvetlenül, kiszórással alkalmazhatók. Kezelésük egyszerű és biztonságos, mivel a földeken való felhasználáshoz közvetlenül betölthetők a gépi berendezésekbe. A használt mennyiség a mikroorganizmustól függően 1-20 kg lehet.
A találmány szerinti granulált készítmények növények, növényrészek (gyümölcs, virágzat, levelek, szár, gumó, gyökér) vagy a különböző kultúrnövények termőhelyei (talaj) kezelésére használhatók fel és ennek során az ott előforduló gyomnövények, ártalmas rovarok vagy kórokozók gátolhatok vagy elpusztíthatok.
A granulált készítmények más vegyszerekkel egyidejűleg vagy azok után alkalmazhatók a kezelendő területeken vagy növényeken. Más vegyszerek lehetnek a műtrágyák, mikrotápanyagokat leadó szerek vagy a növényi növekedést befolyásoló más anyagok. Szelektív herbicidek, valamint inszekticidek, fungicidek, baktericidek, nematocidek, molluszkicidek vagy ezek keverékei is alkalmazhatók.
A találmány tárgya továbbá a találmány szerinti granulált készítmények alkalmazása növények kórokozók által kiváltott fertőzésektől vagy rovarkárosodástól való védelmére. A hatás kultúrnövények és dísznövények mezőgazdaságban, illetve a kertészetben fellépő betegségei ellen irányul, különösen ami a gabonaféléket, gyapotot, zöldségféléket, szőlőt, gyümölcsöket, olajnövényeket és virágos növényeket illeti. A különösen fontos zöldségfélék között említjük meg az uborkát, káposztát és babot, a virágos növények közül pedig a mikulásvirágot, a gerániumot és a nebáncsvirágot.
A találmányt a következő példákkal szemléltetjük. A „%” értékek „tömeg%”-ot jelentenek.
Al példa
Pseudomonas aurantiaca ATCC No. 55169-cel beoltunk 10 x 250 ml Luria-f. húslevest, 16 órán át rázógépen tenyésztjük a kultúrákat és ezután centrifugáljuk ezeket. A pelleteket pH 740 ml 0,01M foszfát-pufferben (K2HPO4:KH2PO4 = 1:0,78) szuszpendáljuk. 100 ml foszfát-puffért 70 °C-ra melegítünk és hozzáadunk 0,7 g kappa-karragenint; így 0,7%-os kappakarragenin oldatot - 0,01M foszfát-pufferben - kapunk. Ezt az oldatot a megszilárdulási pont közelébe hűtjük le és összekeverjük a mikroorganizmus-szuszpenzióval.
A keveréket porlasztással felvisszük egy 100 g vermikulitból képezett fluidágyra és így a következő összetételű granulált készítményt kapjuk:
16% maradék víz
1,5% (szárazanyag) mikroorganizmus
81,9% vermikulit
0,6% kappa-karragén.
A kiindulási koncentráció körülbelül 1 x 1010 CFU/g (telepképző egység/g).
A tárolási stabilitás meghatározására megfelelő időközökben meghatározzuk a koncentrációt. A következő adatokat kapjuk:
Tárolási idő, nap CFU/g 4 °C-on CFU/g szobahőmérsék- leten
0 1,1x101° 1,1x10'°
20 1,2x10'° 1,2x10'°
130 1,0x10'° 9,1x10°
317 1,6x10° 1,4x10°
A2 példa g kappa-karragént 40 g 0,01M foszfát-pufferrel keverünk össze. Hozzáadunk 10 g (30% szárazanyag) Pseudomonas aurantiaca ATCC No. 55169 sejtpelletet, amelyet 50 literes fermentorban állítottunk elő. A polimert és a mikroorganizmust tartalmazó keveréket összekeverjük 120 g vermikulit porral, majd extrudáljuk. A kapott granulátumokat a kívánt víztartalom eléréséig fluidágyban szárítjuk. A granulált készítmény összetétele a következő:
18% maradék víz
1,8% (szárazanyag) mikroorganizmus
77% vermikulit
3,2% kappa-karragén.
A kiindulási koncentráció körülbelül 3,3 χ 1010 CFU/g (telepképző egység/g).
HU 214 917 Β
Tárolási idő, nap CFU/g4°C-on CFU/g szobahőmérsék- leten
0 3,3xl010 3,3χ10>°
33 3,0*1010 2,3x101»
123 6,7x10’ 1,6x10’
174 5,9x10’ 7,8x10®
A 3 példa
Pseudomonas aurantiaca ATCC No. 55169-cel beoltunk 250 ml Luria-f. húslevest, 16 órán át rázógépen tenyésztjük a kultúrákat és ezután centrifugáljuk ezeket. A pelleteket pH 740 ml 0,01M foszfát-pufferben (K2HPO4:KH2PO4 = 1:0,78) szuszpendáljuk.
A mikroorganizmus-szuszpenziót összekeverjük 100 ml 0,01M foszfát-pufferrel elkészített 3%-os alginát oldattal (1. és 2. példát) és a keveréket porlasztással felvisszük egy 100 g vermikulitból képezett fluidágyra. így a következő összetételű granulált készítményt kapjuk:
12% maradék víz
0,5% (szárazanyag) mikroorganizmus
85,5% vermikulit
2,5% nátrium-alginát.
A kiindulási koncentráció körülbelül 7,6 χ 108 CFU/g (telepképző egység/g).
Tárolási idő, nap CFU/g4°C-on CFU/g szobahőmérsék- leten
0 7,6*10® 7,6x10®
20 3,3x10® 2,7x10®
74 3,3x10® 1,6x10®
Az A4 és az A5 példához a Pseudomonas aurantiaca ATCC No. 55169 spontán mutánsát alkalmazzuk. A mutánst a következő módon állítjuk elő: Pseudomonas aurantiaca ATCC No. 55169-et 0,00005% rifampicint tartalmazó Luria-agaron szélesztünk és a spontán rezisztens mutánsokat ismert módon elkülönítjük, majd tenyésztjük.
A4. példa
Rifampicin-rezisztens Pseudomonas aurantiaca ATCC No. 55169-cel beoltunk 250 ml Luria-f. húslevest, 16 órán át rázógépen tenyésztjük a kultúrákat és ezután centrifugáljuk ezeket. A pelleteket az 1. példa szerint 42 g koncentráció eléréséig 0,01M foszfát-pufferben szuszpendáljuk.
A mikroorganizmus-szuszpenziót összekeverjük azonos mennyiségű polivinil-alkohol oldattal (Mowiol 40-88, Hoechst, 16%) és a keveréket porlasztással felvisszük egy 100 g vermikulitból képezett fluidágyra, így a következő összetételű granulált készítményt kapjuk:
10% maradék víz
0,5% (szárazanyag) mikroorganizmus 84% vermikulit 5,5% polivinil-alkohol.
A kiindulási koncentráció körülbelül 1,1 χ 109 CFU/g (telepképző egység/g).
Tárolási idő, nap CFU/g 4 °C-on CFU/g szobahőmérsék- leten
0 1,1x10’ 1,1x10’
70 8,3x10® 1,1x10®
120 7,0x10® 5,3x10®
A5. példa
Rifampicin-rezisztens Pseudomonas aurantiaca ATCC No. 55169-cel beoltunk 250 ml Luria-f. húslevest, 16 órán át rázógépen tenyésztjük a kultúrákat és ezután centrifugáljuk ezeket. A pelleteket az 1. példa szerint 40 ml koncentráció eléréséig 0,01M foszfát-pufferben szuszpendáljuk.
A mikroorganizmus-szuszpenziót összekeverjük 100 ml 3%-os kappa-karragenin-szuszpenzióval, amelyet a 2. példa szerint 0,01M foszfát-pufferrel készítettünk, és a keveréket porlasztással felvisszük egy 100 g vermikulitból képezett fluidágyra. így a következő összetételű granulált készítményt kapjuk:
12% maradék víz
0,5% (szárazanyag) mikroorganizmus
85% vermikulit
2,5% kappa-karragenin.
A kiindulási koncentráció körülbelül 1,1 χ 109 CFU/g (telepképző egység/g).
Tárolási idő, nap CFU/g4°C-on CFU/g szobahőmérsék- leten
0 1,1x10’ 1,1x10’
90 3,1x10® 1,4x10®
211 5,3x10® 5,2x10®
A6. példa g kappa-karragenint összekeverünk 40 ml 0,01M foszfát-pufferrel. Fusarium nygamait 50 literes fermentorban Richard-f. táptalajban 120 órán át tenyésztünk és 5 g centrifugált spórát hozzáadunk a szuszpenzióhoz. A polimer-mikroorganizmus keveréket homogénen összekeveijük 120 g vermikulit porral, majd a keveréket extrudáljuk. A kapott granulált készítményt a kívánt víztartalom eléréséig fluidágyban szárítjuk. A következő összetételű granulált készítményt kapjuk:
13% maradék víz
0,5% (szárazanyag) mikroorganizmus
81% vermikulit
5,5% kappa-karragenin.
HU 214 917 Β
Tárolási idő, nap CFU/g4°C-on CFU/g szobahőmérsék- leten
0 3,8* 10s 3,8xl08
43 2,4x108 2,8 xlO8
76 3,0* 108 l,5xl08
119 4,2xl08
167 1,3x10« 1,4χ108
210 1,3χ108 1,6χ108
Bl. példa
Meghatározott tárolási időtartamok után - szobahőmérsékleten és melegházi körülmények között - meghatározzuk az Al. példa szerint előállított granulált készítmény biológiai aktivitását. A standard vizsgálati feltételek a következők: kultúrnövény: gyapot patogén: Rhizoctonia solani
A granulált készítményt 16 g/liter (a cserép térfogatára vonatkoztatva) mennyiségben adjuk a cserépbe bemért szubsztráthoz.
hónapon át szobahőmérsékleten való tárolás után nem figyelhető meg a biológiai aktivitás csökkenése.

Claims (37)

  1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK
    1. Granulált készítmény, amely 50-99 tömeg% finom eloszlású vízoldhatatlan szervetlen vagy szerves szubsztrátból és 0,1-20 tömeg%, mikroorganizmusokat 0,1-10 tömeg%-ban tartalmazó polimer rétegből áll, amely polimer
    a) egy filmképző, vízoldható és keresztkötésektől mentes polimer, és a granulált készítmény legalább 0,5 és maximum 40 tömeg% vizet (a készítményre vonatkoztatva) tartalmaz, vagy
    b) filmképző, keresztkötéses szerkezetű poliszacharid, amely karboxil- vagy szulfát-csoportokat tartalmaz és vízben kálium-ionok jelenlétében duzzadásra képes, mimellett a kálium-ionok és a polimer karboxilvagy szulfát-csoportjainak mólaránya 0,001:1-1:1, és a granulált készítmény legalább 0,5 és maximum 40 tömeg% vizet (a készítményre vonatkoztatva) tartalmaz.
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti granulált készítmény, amely a mikroorganizmusokat a készítmény tömegére vonatkoztatva 0,3-5 tömeg% mennyiségben tartalmazza.
  3. 3. Az 1. igénypont szerinti granulált készítmény, amely a mikroorganizmusokat a készítmény tömegére vonatkoztatva 0,5-3 tömeg% mennyiségben tartalmazza.
  4. 4. Az 1. igénypont szerinti granulált készítmény, amely a mikroorganizmusokat a készítmény 1 g-jára vonatkoztatva 1 x 105 -1 χ 1012 telepképző egység populációsűrűségben tartalmazza.
  5. 5. Az 1. igénypont szerinti granulált készítmény, amelynek maradék víztartalma legalább 1 tömeg% a készítmény tömegére vonatkoztatva.
  6. 6. Az 1. igénypont szerinti granulált készítmény, amelynek maradék víztartalma legalább 3 tömeg% a készítmény tömegére vonatkoztatva.
  7. 7. Az 1. igénypont szerinti granulált készítmény, amelynek maradék víztartalma legalább 5 tömeg% a készítmény tömegére vonatkoztatva.
  8. 8. Az 1. igénypont szerinti granulált készítmény, amelyben a finom részecskeeloszlású szubsztrát átlagos részecskenagysága 1 μιη-0,8 cm.
  9. 9. Az 1. igénypont szerinti granulált készítmény, amelyben a finom részecskeeloszlású szubsztrát átlagos részecskenagysága 10 μιη-0,5 cm.
  10. 10. Az 1. igénypont szerinti granulált készítmény, amelyben a finom részecskeeloszlású szubsztrát átlagos részecskenagysága 20 μπι-0,2 cm.
  11. 11. Az 1. igénypont szerinti granulált készítmény, amelyben a vízoldhatatlan szubsztrát aprított korpa, szalma, fűrészpor vagy cellulóz.
  12. 12. Az 1. igénypont szerinti granulált készítmény, amelyben a szervetlen szubsztrát egy vízoldhatatlan fémoxid, fémsó (SiO2, A12O3, BaSO4, CaCO3) vagy egy alkálifém- vagy alkáliföldfém-szilikát vagy alumínium-szilikát.
  13. 13. Az 1. igénypont szerinti granulált készítmény, amelyben a vízoldhatatlan szubsztrát ásványi agyag, attapulgit, szilikagél, porított mész, diatómaföld, wollasztonit, olivin, montmorillonit vagy vermikulit.
  14. 14. Az 1. igénypont szerinti granulált készítmény, amelyben a vízoldhatatlan szubsztrát vermikulit.
  15. 15. Az 1. igénypont szerinti granulált készítmény, amelyben a szubsztrát mennyisége a készítményre vonatkoztatva 65—95 tömeg%.
  16. 16. Az 1. igénypont szerinti granulált készítmény, amelyben a szubsztrát mennyisége a készítményre vonatkoztatva 75-90 tömeg%.
  17. 17. Az 1. igénypont szerinti granulált készítmény, amelynek átlagos részecskenagysága 0,01-8 mm.
  18. 18. A 17. igénypont szerinti granulált készítmény, amelyben az átlagos részecskenagyság 0,20—4 mm.
  19. 19. A 17. igénypont szerinti granulált készítmény, amelyben az átlagos részecskenagyság 0,5-2 mm.
  20. 20. Az 1. igénypont szerinti granulált készítmény, amelyben a filmképző, vízoldható és keresztkötésektől mentes polimer egy szintetikus vagy természetes polimer.
  21. 21. Az 1. igénypont szerinti granulált készítmény, amelyben a filmképző, vízoldható és keresztkötésektől mentes polimer a polivinil-alkohol, polietilén-glikol vagy a polivinil-pirrolidon homo- vagy kopolimetje, vagy egy poli-akril-amid.
  22. 22. Az 1. igénypont szerinti granulált készítmény, amelyben a filmképző, vízoldható és keresztkötésektől mentes polimer egy poliszacharid vagy ennek egy származéka.
  23. 23. A 22. igénypont szerinti granulált készítmény, amelyben a filmképző, vízoldható és keresztkötésektől mentes polimer keményítő, alginát, karragenin, kappavagy tau-karragenin, xantán, szentjánoskenyér-gumi, metil-cellulóz vagy az előbbiek keveréke.
  24. 24. A 23. igénypont szerinti granulált készítmény, amelyben a filmképző, vízoldható és keresztkötésektől
    HU214 917B mentes polimer kappa- vagy tau-karragenin vagy egy alginát.
  25. 25. Az 1. igénypont szerinti granulált készítmény, amelyben a filmképző, keresztkötéses szerkezetű, víz hatására duzzadó, karboxil- vagy szulfát-csoportokat tartalmazó polimer kappa- vagy tau-karragenin, xantán vagy szentjánoskenyér-gumi és xantán keveréke.
  26. 26. Az 1. igénypont szerinti granulált készítmény, amelyben a filmképző, keresztkötéses szerkezetű, víz hatására duzzadó, karboxil- vagy szulfát-csoportokat tartalmazó polimer kappa- vagy tau-karragenin.
  27. 27. Az 1. igénypont szerinti granulált készítmény, amelyben a mikroorganizmus a következők egyike: Rhizobium spp., Metharizium, Fusarium, Trichoderma, Streptomyces, Gliocladium, Penicillium, Talaromyces, Verticillium vagy Colleotrichum, Pseudomonas spp., Serratia spp., Bacillus spp., Agrobacter spp., Exserohilum spp., Enterobacter spp. vagy a Pseudomonas aurantiaca ATCC No. 55169.
  28. 28. Az 1. igénypont szerinti granulált készítmény, amelyben a mikroorganizmus a Pseudomonas aurantiaca ATCC No. 55169.
  29. 29. Eljárás granulált készítmény előállítására, amely 50-99 tömeg% finom részecskeeloszlású vízoldhatatlan szervetlen vagy szerves szubsztrátból és egy, 0,1-20 tömeg% mennyiségben mikroorganizmusokat tartalmazó polimer rétegből áll, amely polimer
    a) filmképző, vízoldható és keresztkötésektól mentes polimer, és a granulált készítmény legalább 0,5 és maximum 40 tömeg% vizet (a készítményre vonatkoztatva) tartalmaz, vagy
    b) filmképző, keresztkötéses szerkezetű poliszacharid, amely karboxil- vagy szulfát-csoportokat tartalmaz és vízben kálium-ionok jelenlétében duzzadásra képes, mimellett a káliumionok és a polimer karboxilvagy szulfát-csoportjainak mólaránya 0,001:1-1:1, és a granulált készítmény legalább 0,5 és maximum 40 tömeg% vizet (a készítményre vonatkoztatva) tartalmaz, azzal jellemezve, hogy
    i) az a) granulátum előállítására egy filmképző és vízoldható polimert szuszpendálunk vagy maximum
    95 °C hőmérsékleten oldunk és ebben a szuszpenzióban vagy oldatban - szobahőmérsékletre való lehűtés után - egy mikroorganizmust szuszpendálunk, vagy ii) a b) granulátum előállítására egy karboxil- vagy szulfát-csoportokat tartalmazó poliszacharidot kálium-ionokat tartalmazó vizes pufferoldatban szuszpendálunk, majd a mikroorganizmust ebben az oldatban szuszpendáljuk, iii) a kapott szuszpenziót porlasztással közvetlenül felvisszük a finom részecskeeloszlású szubsztrátra vagy összekeverjük ezzel a finom részecskeeloszlású szubsztráttal és iv) a vizet (a granulált készítményre vonatkoztatva minimum 0,5 és maximum 40 tömeg% koncentráció eléréséig) eltávolítjuk.
  30. 30. A 29. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a szuszpenziót előnyösen a 10—30 °C hőmérséklet-tartományban készítjük el.
  31. 31. A 29. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az oldatot előnyösen a 25-95 °C hőmérséklettartományban készítjük el.
  32. 32. A 29. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a mikroorganizmust 40 °C-nál alacsonyabb hőmérsékleten adjuk a polimer oldatához vagy szuszpenziójához.
  33. 33. A 29. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a mikroorganizmust 30 °C-nál alacsonyabb hőmérsékleten adagoljuk.
  34. 34. A 29. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy pufferként kálium-hidrogénfoszfát és káliummonohidrogénfoszfát keverékét alkalmazzuk.
  35. 35. A 34. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az oldat vagy a szuszpenzió pH-ját 7-re állítjuk be.
  36. 36. A 34. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a puffer koncentrációját a 0,00001 M-l M tartományba állítjuk be.
  37. 37. Az 1. igénypont szerinti granulált készítmény alkalmazása növények rovarok kártevő tevékenységétől vagy rovarok által okozott betegségektől való megvédésére.
HU9700096A 1994-07-14 1995-07-03 Mikroorganizmusokat tartalmazó granulált készítmény, eljárás ennek előállítására és alkalmazása HU214917B (hu)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CH225494 1994-07-14

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HUT76428A HUT76428A (en) 1997-08-28
HU214917B true HU214917B (hu) 1998-07-28

Family

ID=4229480

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9700096A HU214917B (hu) 1994-07-14 1995-07-03 Mikroorganizmusokat tartalmazó granulált készítmény, eljárás ennek előállítására és alkalmazása

Country Status (21)

Country Link
US (1) US20020015988A1 (hu)
EP (1) EP0770126A1 (hu)
JP (1) JPH11505403A (hu)
KR (1) KR970704873A (hu)
CN (1) CN1090237C (hu)
AU (1) AU705188B2 (hu)
BG (1) BG101170A (hu)
BR (1) BR9508398A (hu)
CA (1) CA2192681A1 (hu)
CZ (1) CZ9297A3 (hu)
FI (1) FI970103A0 (hu)
HU (1) HU214917B (hu)
IL (1) IL114573A (hu)
NO (1) NO970136L (hu)
NZ (1) NZ289842A (hu)
PL (1) PL317965A1 (hu)
RU (1) RU2160990C2 (hu)
SK (1) SK280088B6 (hu)
TW (1) TW345486B (hu)
WO (1) WO1996002638A1 (hu)
ZA (1) ZA955830B (hu)

Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2255052C2 (ru) * 2003-01-17 2005-06-27 Открытое акционерное общество "Акционерная компания по транспорту нефти "ТРАНСНЕФТЬ" Способ очистки водной среды от загрязнения нефтепродуктами и биопрепарат для очистки водной среды от загрязнения нефтепродуктами
KR20050048056A (ko) * 2003-11-18 2005-05-24 (주)케이비피 경구용 소모 필름 조성물
US7374786B2 (en) * 2004-01-09 2008-05-20 Biosys Corporation Bioimmune-aggressin composition for suppression of xanthomonad infections in agriculture crops
RU2327350C2 (ru) * 2005-04-22 2008-06-27 Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт сельскохозяйственной микробиологии Способ борьбы с почвенными фитопатогенными грибами и вызываемыми ими заболеваниями растений
NL2003797C2 (en) 2009-11-12 2011-05-16 A J Zwart Beheer B V Improved soil supplement.
CO7200056A1 (es) * 2013-08-27 2015-02-27 Univ Antioquia Gelación iónica sobre sólidos
US9877486B2 (en) 2014-01-31 2018-01-30 AgBiome, Inc. Methods of growing plants using modified biological control agents
CN110915818B (zh) 2014-01-31 2022-04-26 农业生物群落股份有限公司 经修饰的生物防治剂及其用途
CN104004623A (zh) * 2014-06-09 2014-08-27 泰安生力源生物工程有限公司 一种固态发酵基质的传质传热改良方法
RU2730863C2 (ru) 2015-09-11 2020-08-26 Новозимс Биоаг А/С Стабильные композиции с инокулянтом и способы их получения
CN106399290B (zh) * 2016-10-08 2019-09-13 上海明奥环保科技有限公司 一种利用多糖植物胶制备包埋微生物的方法
CN113260256A (zh) * 2018-10-26 2021-08-13 丹尼斯科美国公司 稳定的微生物组合物和干燥工艺
CN109438087A (zh) * 2018-12-27 2019-03-08 天津环微生物科技有限公司 一种速溶颗粒型农用微生物菌剂及制备方法和使用方法
MX2021015088A (es) * 2019-06-07 2022-01-18 Agbiome Inc Composiciones y metodos para mejorar la salud de la planta y controlar la fitoenfermedad.

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2453215A1 (fr) * 1979-04-05 1980-10-31 Rhone Poulenc Ind Procede d'inclusion de micro-organismes dans une matrice de polymere
SU927789A1 (ru) * 1980-02-26 1982-05-15 Опытное конструкторско-технологическое бюро Института технической теплофизики АН УССР Способ получени бактериального удобрени
US4886664A (en) * 1982-06-18 1989-12-12 Rhone-Poulenc, S.A. Low-water-activity inocula for biological control
EP0202409A3 (en) * 1985-03-25 1989-02-01 Miles Inc. A process for the production of viable and stable dry microorganisms for food and agricultural purposes
CA1278434C (en) * 1985-04-25 1991-01-02 Alan Paau Bacterial agricultural inoculants
FR2646777B1 (fr) * 1989-05-12 1993-09-03 Bio Serae Lab Procede de preparation d'un produit particulaire antimicrobien, produit antimicrobien obtenu et applications
AU6719090A (en) * 1989-10-31 1991-05-31 Genencor International, Inc. Dust-free coated enzyme formulation
IT1258418B (it) * 1992-07-09 1996-02-26 Siapa Spa Granuli liofilizzati contenenti microorganismi fungini, e procedimentoper la loro preparazione.
JPH0739376A (ja) * 1993-08-04 1995-02-10 Kansai Paint Co Ltd 微生物固定化用担体

Also Published As

Publication number Publication date
KR970704873A (ko) 1997-09-06
CA2192681A1 (en) 1996-02-01
RU2160990C2 (ru) 2000-12-27
NZ289842A (en) 1998-12-23
SK3197A3 (en) 1997-08-06
IL114573A (en) 1999-06-20
NO970136D0 (no) 1997-01-13
FI970103A7 (fi) 1997-01-10
US20020015988A1 (en) 2002-02-07
WO1996002638A1 (en) 1996-02-01
IL114573A0 (en) 1995-11-27
AU2980495A (en) 1996-02-16
CN1152936A (zh) 1997-06-25
JPH11505403A (ja) 1999-05-21
CZ9297A3 (en) 1997-05-14
CN1090237C (zh) 2002-09-04
TW345486B (en) 1998-11-21
HUT76428A (en) 1997-08-28
ZA955830B (en) 1996-01-17
NO970136L (no) 1997-03-06
BR9508398A (pt) 1998-05-26
EP0770126A1 (en) 1997-05-02
FI970103L (fi) 1997-01-10
PL317965A1 (en) 1997-05-12
SK280088B6 (sk) 1999-08-06
AU705188B2 (en) 1999-05-20
FI970103A0 (fi) 1997-01-10
MX9700377A (es) 1998-06-28
BG101170A (bg) 1997-08-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4859377A (en) Starch encapsulation of entomopathogens
HU214917B (hu) Mikroorganizmusokat tartalmazó granulált készítmény, eljárás ennek előállítására és alkalmazása
JPH05502661A (ja) 殺虫剤の輸送系と昆虫誘引物質
AU2016207759B2 (en) Agricultural composition
US20080187981A1 (en) Thermo-stable bio-matrix
JPH0585902A (ja) 生分解性ポリマーを含有する徐放性農薬製剤及びその製造方法
AU662756B2 (en) Methods and compositions of adherent starch granules for encapsulating pest control agents
JP2004525094A (ja) 徐放性農薬の製造方法
AU2001284560A1 (en) A thermo-stable bio-matrix
AU2001284560A2 (en) A thermo-stable bio-matrix
US20040022860A1 (en) Release composition and method of preparation
JPH02212406A (ja) 土壌病害の防除剤および土壌病害の防止方法
Tripathi et al. Polymeric macroporous formulations for the control release of mosquitocidal Bacillus sphaericus ISPC-8
CA1340319C (en) Bacterial sporangia encapsulated prior to lysis of the bacteria
CN113662016B (zh) 一种颗粒剂、其制备方法及其应用
JP2001078751A (ja) 微生物製剤および微生物の保存方法
MXPA97000377A (en) Granular formulation containing microorganisms, a process for the preparation and use of the
JP3085895B2 (ja) エキセロヒルム・モノセラスに属する新規な菌株及びその用途
CN118556717B (zh) 一种抗紫外微生物组合物及其制备方法和应用
Shasha et al. Starch matrices for slow release of pesticides
WO2001089297A2 (en) A bioinsecticide formulation consisting of bacillus thuringiensis var israelensis, and its concerning manufacture proceedings
CN112868667B (zh) 一种速溶性防腐剂颗粒及其制备方法
Wolf Encapsulamento de Trichoderma harzianum em matrizes à base de nanocelulose e carboximetilcelulose para aplicação na agricultura
AU2080788A (en) Starch encapsulation of biocontrol agents
AU2007201792A1 (en) A release composition and method of preparation

Legal Events

Date Code Title Description
DGB9 Succession in title of applicant

Owner name: NOVARTIS AG., CH

HMM4 Cancellation of final prot. due to non-payment of fee