FR3013593A1 - USE OF A CARPOBROTUS EDULIS EXTRACT IN A COSMETIC COMPOSITION - Google Patents
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Abstract
La présente invention se rapporte à l'utilisation d'un extrait de Carpobrotus edulis en tant qu'agent cosmétique pour améliorer l'aspect de la peau par stimulation de la synthèse des protéines impliquées dans la différenciation épidermique et/ou stimulation de la transglutaminase et/ou stimulation de la synthèse de lipides membranaires par les kératinocytes. La présente invention se rapporte également à une composition cosmétique ou dermatologique comprenant un extrait de Carpobrotus edulis et un véhicule cosmétiquement et/ou dermatologiquement acceptable, ladite composition comprenant 0,0001 à 5 % en poids dudit extrait de Carpobrotus edulis par rapport au poids total de la composition, la valeur de 1 % étant exclue. Enfin, la présente invention se rapporte à un dispositif se présentant sous une forme choisie parmi un pot, un flacon-pompe, une lingette, un masque, un dispositif transdermique, un patch, un spray, une capsule ou une gélule, ledit dispositif comprenant une telle composition, ainsi qu'à un procédé cosmétique pour améliorer l'aspect de la peau, comprenant une application sur la peau d'une telle composition cosmétique, et également à une utilisation d'une telle composition dermatologique, pour son utilisation dans un produit dermatologique destiné à l'amélioration de la peau d'un sujet.The present invention relates to the use of an extract of Carpobrotus edulis as a cosmetic agent for improving the appearance of the skin by stimulating the synthesis of proteins involved in epidermal differentiation and / or stimulation of transglutaminase and / or stimulation of the synthesis of membrane lipids by keratinocytes. The present invention also relates to a cosmetic or dermatological composition comprising an extract of Carpobrotus edulis and a cosmetically and / or dermatologically acceptable vehicle, said composition comprising 0.0001 to 5% by weight of said extract of Carpobrotus edulis relative to the total weight of the composition, the value of 1% being excluded. Finally, the present invention relates to a device in a form chosen from a pot, a pump bottle, a wipe, a mask, a transdermal device, a patch, a spray, a capsule or a capsule, said device comprising such a composition, as well as a cosmetic process for improving the appearance of the skin, comprising an application to the skin of such a cosmetic composition, and also to a use of such a dermatological composition, for its use in a Dermatological product for improving the skin of a subject.
Description
UTILISATION D'UN EXTRAIT DE CARPOBROTUS EDULIS DANS UNE COMPOSITION COSMETIQUE Domaine technique La présente invention se rapporte à une utilisation d'un extrait de Carpobrotus edulis, ainsi qu'à une composition comprenant un extrait deCarpobrotus edulis, et à un procédé et un dispositif impliquant cette composition.The present invention relates to a use of an extract of Carpobrotus edulis, as well as to a composition comprising an extract of Carobobrotus edulis, and to a method and a device involving the use of an extract of Carpobrotus edulis. this composition.
La présente invention trouve une application dans le domaine de la cosmétique et de la dermatologie, plus particulièrement de la cosmétique cutanée. Dans la description ci-dessous, les références entre crochets ([ ]) renvoient à la liste des références présentée à la fin du texte.The present invention finds application in the field of cosmetics and dermatology, more particularly cutaneous cosmetics. In the description below, references in brackets ([]) refer to the list of references at the end of the text.
Etat de la technique La peau est un organe vital à part entière qui se compose de trois tissus distincts, assumant chacun différents rôles grâce à différents types cellulaires et différentes structures.State of the art The skin is a vital organ in its own right which consists of three distinct tissues, each assuming different roles through different cell types and structures.
Le tissu le plus en surface et donc le plus exposé est l'épiderme. Cet épithélium pluristratifié (Malpighien) et kératinisant, dont la partie la plus externe est la couche cornée, se compose de différentes cellules associées à de nombreuses fonctions de barrière de protection. Les majoritaires sont les kératinocytes qui, par leurs processus de prolifération/différenciation, aboutissent à la formation de la couche cornée connue pour son aspect et ses propriétés hydrophobes, compactes et étanches. Le rôle majeur de l'épiderme est d'apporter à la peau et donc au corps humain une première ligne de protection contre les agressions extérieures, comme les agressions physiques, chimiques, hydriques et bactériologiques. Le rôle majeur de l'épiderme est donc d'apporter à la peau, via la différenciation et le stratum corneum, une première ligne de protection contre les agressions, notamment physiques, chimiques, thermiques, hydriques, bactériologiques. En position intermédiaire, le derme est un tissu conjonctif investi majoritairement de fibroblastes et de protéines matricielles donnant à la peau ses qualités de compressibilité et d'élasticité connues. Au sein de la trame conjonctive, s'intercalent aussi d'autres cellules et structures, tel un important réseau circulatoire et nutritif, constitué des vaisseaux sanguins et des capillaires lymphatiques, ainsi que les annexes épidermiques (poils, ongles, glandes pilosébacées et glandes sudoripares) qui prennent naissance dans le derme profond. L'hypoderme, situé en profondeur et constitué en majeure partie de lobules graisseux (adipocytes), assure une fonction de support primaire, de protection mécanique et thermique et joue aussi un rôle de stockage des réserves énergétiques rapidement mobilisables pour tous les besoins biologiques, comme par exemple le renouvellement cellulaire, la défense de l'organisme ou la contraction musculaire. La différenciation kératinocytaire est une maturation orientée des kératinocytes épidermiques en cornéocytes (kératinocytes de la couche cornée) durant laquelle les cellules changent de taille, de morphologie, de composition biochimique, de nature membranaire, d'activité biologique. Les cornéocytes sont des kératinocytes morts anucléés, qui s'empilent à la surface de la peau, avant de desquamer. Ils forment ainsi une couche compacte et très hydrophobe à travers de laquelle la pénétration d'agents exogènes ou les déperditions hydriques ne sont normalement pas possibles. Ce processus de différenciation s'accompagne aussi de modifications des composantes et de structures cellulaires comme les jonctions interkératinocytaires qui sont de plus en plus représentées en fonction de la différenciation. La différenciation kératinocytaire et tous les mécanismes l'accompagnant sont très fortement calcium-dépendante.The most surface tissue and therefore the most exposed is the epidermis. This multilayered (Malpighian) and keratinizing epithelium, the outermost part of which is the stratum corneum, consists of different cells associated with many protective barrier functions. The majority are keratinocytes which, by their proliferation / differentiation processes, result in the formation of the horny layer known for its appearance and its hydrophobic properties, compact and tight. The major role of the epidermis is to provide the skin and therefore the human body with a first line of protection against external aggressions, such as physical, chemical, waterborne and bacteriological attacks. The major role of the epidermis is therefore to provide the skin, via differentiation and stratum corneum, a first line of protection against aggression, including physical, chemical, thermal, water, bacteriological. In the intermediate position, the dermis is a connective tissue mainly invested with fibroblasts and matrix proteins giving the skin its qualities of compressibility and elasticity known. Within the conjunctive framework, other cells and structures are inserted, such as an important circulatory and nutritive network, consisting of blood vessels and lymphatic capillaries, as well as the epidermal appendages (hair, nails, pilosebaceous glands and sweat glands). ) that originate in the deep dermis. The hypodermis, located in depth and consisting for the most part of fatty lobules (adipocytes), provides a primary support function, mechanical and thermal protection and also plays a role in storing energy reserves quickly mobilized for all biological needs, such as for example cell renewal, defense of the body or muscle contraction. Keratinocyte differentiation is an oriented maturation of epidermal keratinocytes into corneocytes (keratinocytes of the stratum corneum) during which the cells change size, morphology, biochemical composition, membrane nature, and biological activity. Corneocytes are dead anucleated keratinocytes, which pile up on the surface of the skin, before desquamating. They thus form a compact and highly hydrophobic layer through which the penetration of exogenous agents or water losses are not normally possible. This process of differentiation is also accompanied by modifications of the components and cellular structures such as interkeratinocyte junctions which are increasingly represented as a function of differentiation. The keratinocyte differentiation and all the accompanying mechanisms are very strongly calcium-dependent.
Les jonctions intercellulaires sont des zones caractéristiques des membranes des cellules épithéliales qui permettent une adhérence forte des cellules entre elles. Elles représentent des zones d'interaction de la membrane plasmique avec le cytosquelette et de fait, des zones de communication intercellulaire. On peut les subdiviser en trois catégories : jonctions d'ancrage, jonctions communicantes et jonctions imperméables. Les jonctions d'ancrage sont des structures qui joignent mécaniquement les cellules entre elles avec des arrangements intracytoplasmiques plus ou moins complexes. Ce sont les jonctions intermédiaires / jonctions adhérentes (zonula adherens) directement responsables du maintien de la forme cellulaire et directement impliquée dans la communication puisque à l'origine de nombreux signaux cellulaires; et les desmosomes et hemidesmosomes qui assurent une adhérence solide et durable en agissant comme un "bouton-pression" (jonctions prédominantes dans la peau et les plus solides). Participant directement à la fonction barrière de l'épiderme, les jonctions interkératinocytaires sont impliquées dans la régulation de l'hydratation de la peau et dans la protection de celle-ci. La différenciation kératinocytaire s'accompagne aussi d'un changement morphologique des cellules et d'une évolution de leurs membranes. Celles-ci adoptent une nature céramidique au cours de la différenciation. Une enzyme, la transglutaminase (présente dans les couches granuleuses de l'épiderme) assure l'initiation de cette transformation fondamentale. Grace à elle, la composante lipidique augmente donc au cours de la différenciation terminale, assurant ainsi une barrière hydrophobe progressive jusqu'à la surface de l'épiderme. Ainsi les échanges in/out (perte en eau) et out/in (pénétration d'agents ou de microorganismes hydrophiles) sont très limités. D'où le rôle de fonction barrière physique générale de l'épiderme et de la peau.Intercellular junctions are characteristic areas of epithelial cell membranes that allow strong cell adhesion to one another. They represent areas of interaction of the plasma membrane with the cytoskeleton and, in fact, areas of intercellular communication. They can be subdivided into three categories: anchor junctions, communicating junctions and impervious junctions. Anchorage junctions are structures that mechanically join the cells together with more or less complex intracytoplasmic arrangements. These are the intermediate junctions / adherent junctions (zonula adherens) directly responsible for the maintenance of the cellular form and directly involved in the communication since at the origin of numerous cellular signals; and desmosomes and hemidesmosomes that provide strong and durable adhesion by acting as a "snap" (predominant junctions in the skin and the strongest). Participating directly in the barrier function of the epidermis, interkeratinocyte junctions are involved in the regulation of skin hydration and in the protection thereof. Keratinocyte differentiation is also accompanied by a morphological change of cells and an evolution of their membranes. These adopt a ceramidic nature during differentiation. An enzyme, transglutaminase (present in the granular layers of the epidermis) ensures the initiation of this fundamental transformation. Thanks to it, the lipid component thus increases during the terminal differentiation, thus ensuring a progressive hydrophobic barrier to the surface of the epidermis. Thus exchanges in / out (loss of water) and out / in (penetration of agents or microorganisms hydrophilic) are very limited. Hence the role of general physical barrier function of the epidermis and skin.
La fonction barrière de l'épiderme est essentielle. Celle-ci a tendance à s'altérer avec l'âge ou dans certaines situations transitoires, provoquant des défauts de desquamation, dartres, aspect sec et inhomogène, altération du teint et de la couleur. La renforcer est donc un processus anti- âge et un processus favorisant l'hydratation et la fonction barrière de la peau ; pour des bénéfices cosmétiques de lissage, d'éclat, de teint et de couleur homogène. La solution cosmétique la plus courante est physique, il s'agit de renforcer la barrière de surface par un apport lipidique. Mais celle-ci est transitoire et manque d'efficacité car elle n'influence pas directement le processus biologique naturel de différenciation épidermique. Les molécules de la famille des rétinoïdes influencent directement ce processus mais en provoquant aussi une réaction inflammatoire. De plus, ces molécules ne sont pas d'origine naturelle.The barrier function of the epidermis is essential. It tends to deteriorate with age or in certain transient situations, causing defects of desquamation, scars, dry and inhomogeneous appearance, alteration of complexion and color. Reinforcing it is therefore an anti-aging process and a process promoting the hydration and the barrier function of the skin; for cosmetic benefits of smoothness, radiance, complexion and homogeneous color. The most common cosmetic solution is physical, it is to strengthen the surface barrier by a lipid contribution. But it is transient and inefficient because it does not directly influence the natural biological process of epidermal differentiation. Molecules of the family retinoids directly influence this process but also causing an inflammatory reaction. Moreover, these molecules are not of natural origin.
Il existe donc un réel besoin de fournir des compositions et des procédés de traitements cosmétiques permettant de renforcer la fonction barrière de la peau grâce à des principes actifs d'origine naturelle efficaces durablement.There is therefore a real need to provide compositions and methods of cosmetic treatments for reinforcing the barrier function of the skin with active ingredients of natural origin that are permanently effective.
Description de l'invention La présente invention a précisément pour but de répondre à ces besoins et inconvénients de l'art antérieur. Les inventeurs sont les tout premiers à avoir mis en évidence que l'utilisation d'un extrait de Carpobrotus edulis permet précisément de répondre efficacement au besoin précité. Le genre Carpobrotus appartient à la famille des Aizoaceae (ou Mésembryanthémaceae) qui comprend 29 espèces dont 23 de la république sud-africaine. Les autres sont originaires du Chili ou de Californie (Delange Y., 2011, Edition Eugen Ulmer, Plantes succulentes, [1]).Description of the Invention The present invention is specifically intended to meet these needs and disadvantages of the prior art. The inventors are the first to have demonstrated that the use of an extract of Carpobrotus edulis makes it possible precisely to respond effectively to the aforementioned need. The genus Carpobrotus belongs to the family Aizoaceae (or Mesembryanthémaceae) which includes 29 species including 23 from the South African Republic. The others are native to Chile or California (Delange Y., 2011, Eugen Ulmer Edition, Succulents, [1]).
Ce sont des plantes rampantes à feuilles succulentes de section triangulaire. Du grec, karpos signifie fruit et brota signifie comestible. Carpobrotus edulis est aussi appelée griffe de sorcière en raison de la forme de ses feuilles ou figue des Hottentots en raison de ses fruits charnus comestibles ([1]). Les feuilles et la pulpe des feuilles de Carpobrotus sp. renferment de nombreux tanins, flavonoïdes et acides organiques (Van der Watt E., Pretorius JC., 2001, 76, 87-91, Journal of Ethnopharmacology, Purification and identification of active antibacterial components in Carpobrotus edulis L. ([2]); Falleh H., Oueslati S.,and all., 2011, 127, 1732-1738, Food Chemistry, LC/ESI-MS/MS characterization of procyanidins and propelargonidins responsible for the strong antioxidant of the edible halophyte Mesembryanthemum edule L. ([3]); Falleh H., Ksouri R., and all., 2012, 11, 2, 243-249, Tropical journal of pharmaceutical research, Ultrasound-assisted extraction : Effect of extraction time and solvent power on the levels of polyphenols and antioxidant activity of Mesembryanthemum edule L. Aizoaceae shoots ([4]); Van Wyk BE, Van Oudtshoorn B., Gericke N., 2009, 2eme édition, Medicinal Plants of South Africa ([5])). Traditionnellement, le jus des feuilles est utilisé comme antiseptique pour les infections de la bouche et de la gorge ainsi qu'en traitement contre les sinusites, diarrhées, l'eczéma infantile et la tuberculose. Le jus est également appliqué pour apaiser les démangeaisons, les piqûres, les blessures et les brûlures ([5]). Les tanins confèrent aux feuilles des propriétés astringentes. Quelques études scientifiques ont également démontré, en prise orale des propriétés antiseptiques et in vitro des propriétés antimicrobiennes et antioxydantes (([2]); Falleh H., Riadh K., 2009, 47, 2308-2313, Food and chemical toxicology, Interspecific variability of antioxidant activities and phenolic composition in Mesembryanthemum genus ([6]) ; Bouftira I., Chedly A.,Souad S., 2012, 2, 359-365, Advances in chemical engineering and science, Antioxydant and antibacterial properties of mesembryanthemum crystallinum and carpobrotus edulis extracts ([7]) ; Couplan F., 2011, Editions Sang de la Terre, Mangez vos soucis ( [8] )). En cosmétique, le document W02007144723 décrit l'utilisation d'un extrait de Carpobrotus edulis en tant qu'agent contre les démangeaisons et/ou anti-inflammatoires sur des peaux ayant subi une agression extérieure, notamment due au soleil, à une piqûre. Toutefois, ce document ne décrit pas d'effet sur la différenciation des kératinocytes épidermiques. Les inventeurs ont, de manière inattendue, mis en évidence qu'un extrait de Carpobrotus edulis. possède au moins l'un des effets suivants : renforcer et/ou améliorer la différenciation épidermique, améliorer la différenciation des kératinocytes, améliorer la fonction barrière et l'hydratation de l'épiderme. Avantageusement, l'extrait permet d'apporter notamment un effet sur la surface de la peau, d'éclat, de lissage, de douceur, d'amélioration du teint et d'aspect général de la peau.They are creeping plants with succulent leaves of triangular section. From Greek, karpos means fruit and brota means edible. Carpobrotus edulis is also called witch's claw because of the shape of its leaves or Hottentots fig because of its edible fleshy fruits ([1]). The leaves and leaf pulp of Carpobrotus sp. contain numerous tannins, flavonoids and organic acids (Van der Watt E., Pretorius JC., 2001, 76, 87-91, Journal of Ethnopharmacology, Purification and Identification of Active Antibacterial Components in Carpobrotus edulis L. ([2]); Falleh H., Oueslati S., et al., 2011, 127, 1732-1738, Food Chemistry, LC / ESI-MS / MS characterization of procyanidins and propelargonidins responsible for the strong antioxidant of the edible halophyte Mesembryanthemum edule L. ([ 3]), Falleh H., Ksouri R., et al., 2012, 11, 2, 243-249, Tropical Journal of Pharmaceutical Research, Ultrasound-Assisted Extraction: Effect of Extraction Time and Extreme Power on the Levels of Polyphenols Antibiotic activity of Mesembryanthemum edule L. Aizoaceae shoots ([4]), Van Wyk BE, Van Oudtshoorn B., Gericke N., 2009, 2nd edition, Medicinal Plants of South Africa ([5])). Traditionally, leaf sap is used as an antiseptic for infections of the mouth and throat as well as treatment for sinusitis, diarrhea, infantile eczema and tuberculosis. Juice is also applied to soothe itching, bites, wounds and burns ([5]). The tannins give the leaves astringent properties. Some scientific studies have also demonstrated, in oral antiseptic and in vitro properties of antimicrobial and antioxidant properties ([2]), Falleh H., Riadh K., 2009, 47, 2308-2313, Food and Chemical Toxicology, Interspecific Variability of antioxidant activities and phenolic composition in Mesembryanthemum genus ([6]), Bouftira I., Chedly A., Souad S., 2012, 2, 359-365, Advances in chemical engineering and science, Antioxidant and antibacterial properties of mesembryanthemum crystallinum and carpobrotus edulis extracts ([7]); Couplan F., 2011, Blood of the Earth Editions, Eat your worries ([8])). In cosmetics, WO2007144723 describes the use of an extract of Carpobrotus edulis as an agent against itching and / or anti-inflammatory skin externally aggression, especially due to the sun, a sting. However, this document does not describe an effect on the differentiation of epidermal keratinocytes. The inventors have unexpectedly demonstrated that an extract of Carpobrotus edulis. has at least one of the following effects: to strengthen and / or improve epidermal differentiation, to improve the differentiation of keratinocytes, to improve the barrier function and the hydration of the epidermis. Advantageously, the extract makes it possible to provide, in particular, an effect on the surface of the skin, radiance, smoothing, softness, improvement of the complexion and general appearance of the skin.
Ainsi, un premier objet de l'invention se rapporte à l'utilisation d'un extrait de Carpobrotus edulis en tant qu'agent cosmétique pour améliorer l'aspect de la peau par stimulation de la synthèse des protéines impliquées dans la différenciation épidermique et/ou stimulation de la transglutaminase et/ou stimulation de la synthèse de lipides membranaires par les kératinocytes. On entend par « améliorer l'aspect de la peau », au sens de la présente invention, tout effet permettant d'obtenir un avantage sur l'aspect de la peau par rapport à l'aspect de la peau avant utilisation de l'extrait selon l'invention. A titre d'exemple, l'amélioration de l'aspect de la peau peut être une amélioration d'au moins une caractéristique de la surface de la peau choisie parmi l'éclat, le lissage, la douceur, la couleur et le teint. On entend par « stimulation de la synthèse des protéines impliquées dans la différenciation épidermique », au sens de la présente invention, la stimulation des cellules épidermiques pour produire des protéines permettant, directement ou indirectement, aux cellules de l'épiderme particulièrement aux kératinocytes, de changer de taille et/ou de morphologie et/ou de composition biochimique et/ou de nature membranaire et/ou d'activité biologique. Ces protéines impliquées dans la différenciation épidermique peuvent être par exemple la kératine1 (kératine présente dans les kératinocytes différenciés), l'involucrine (protéine présente dans les kératinocytes différenciés de la couche granuleuse), la kalikréinel (enzyme de desquamation), la Fatty Acid Binding Protein (protéine impliquée dans la synthèse des lipides de surface), la Sulfotransferase (enzyme impliquée dans la synthèse des lipides de surface), cette liste n'étant pas limitative.Thus, a first object of the invention relates to the use of an extract of Carpobrotus edulis as a cosmetic agent for improving the appearance of the skin by stimulating the synthesis of proteins involved in epidermal differentiation and / or or stimulation of transglutaminase and / or stimulation of membrane lipid synthesis by keratinocytes. For the purposes of the present invention, the term "improve the appearance of the skin" is understood to mean any effect that makes it possible to obtain an advantage over the appearance of the skin in relation to the appearance of the skin before use of the extract according to the invention. For example, improving the appearance of the skin may be an improvement in at least one skin surface characteristic selected from brightness, smoothness, softness, color, and complexion. The term "stimulation of the synthesis of the proteins involved in epidermal differentiation", within the meaning of the present invention, the stimulation of the epidermal cells to produce proteins allowing, directly or indirectly, the cells of the epidermis, particularly the keratinocytes, to change in size and / or morphology and / or biochemical composition and / or membrane nature and / or biological activity. These proteins involved in epidermal differentiation may be, for example, keratin1 (keratin present in differentiated keratinocytes), involucrine (a protein present in differentiated keratinocytes in the granular layer), kalikreinel (desquamation enzyme), fatty acid binding. Protein (protein involved in the synthesis of surface lipids), Sulfotransferase (enzyme involved in the synthesis of surface lipids), this list not being limiting.
On entend par « stimulation de la transglutaminase », au sens de la présente invention, une activité de la transglutaminase augmentée qualitativement ou quantitativement par rapport à son activité avant utilisation de l'extrait selon l'invention. On entend par « stimulation de la synthèse de lipides membranaires par les kératinocytes » une production de lipides membranaires par les kératinocytes augmentée qualitativement ou quantitativement par rapport à une production avant utilisation de l'extrait selon l'invention. L'utilisation de l'extrait selon l'invention peut prévenir et/ou atténuer les effets de l'âge sur la peau.For the purposes of the present invention, the term "stimulation of transglutaminase" is intended to mean an activity of transglutaminase increased qualitatively or quantitatively with respect to its activity before use of the extract according to the invention. The term "stimulation of the synthesis of membrane lipids by keratinocytes" a production of membrane lipids by keratinocytes increased qualitatively or quantitatively with respect to a production before use of the extract according to the invention. The use of the extract according to the invention can prevent and / or attenuate the effects of age on the skin.
On entend par « effets de l'âge sur la peau », tout signe provoqué par le vieillissement, éventuellement prématuré, d'un individu, comme par exemple les rides, les ridules, la sécheresse cutanée, la perte d'elasticité de la peau, le ternissement de la peau, l'affaissement de la peau, l'apparition de tâches pigmentaires, cette liste n'étant pas limitative.The term "effects of age on the skin" means any sign caused by the aging, possibly premature, of an individual, such as, for example, wrinkles, fine lines, dry skin, loss of elasticity of the skin. , dulling of the skin, sagging of the skin, the appearance of pigmentary spots, this list not being limiting.
L'utilisation de l'extrait selon l'invention peut hydrater la peau. On entend par « hydrater la peau », au sens de la présente invention, un apport de nutriments, notamment d'eau, qualitatif ou quantitatif, augmenté par rapport à avant utilisation de l'extrait selon l'invention. L'utilisation de l'extrait selon l'invention peut améliorer et/ou 30 accélérer, qualitativement ou quantitativement, la différenciation épidermique.The use of the extract according to the invention can moisturize the skin. For the purposes of the present invention, the term "hydrate the skin" means a supply of nutrients, in particular water, qualitative or quantitative, increased with respect to before use of the extract according to the invention. The use of the extract according to the invention can improve and / or accelerate, qualitatively or quantitatively, epidermal differentiation.
On entend par « différenciation épidermique », au sens de la présente invention, tout changement de taille et/ou de morphologie et/ou de composition biochimique et/ou de nature membranaire et/ou d'activité biologique des cellules de l'épiderme comme les kératinocytes, les mélanocytes, les cellules de Langerhans et les cellules de Merkel. L'utilisation de l'extrait selon l'invention peut renforcer la fonction barrière de l'épiderme. On entend par « renforcer la fonction barrière de l'épiderme », au sens de la présente invention, la restauration ou le maintien d'un niveau normal des échanges in/out (perte en eau) et out/in (pénétration d'agents ou de microorganismes hydrophiles) de la peau. L'extrait utilisé dans l'invention peut être un extrait de tout ou partie de la plante. Il peut s'agir d'un extrait issu de la plante entière. Alternativement, il peut s'agir d'un extrait de racine. Alternativement, il peut s'agir d'un extrait d'une partie aérienne de Carpobrotus edulis. Dans ce cas, cette partie peut être choisie parmi la fleur, le fruit, la tige et la feuille, ou un de leurs mélanges. Plus particulièrement, il peut s'agir d'un extrait de plusieurs parties aériennes entières non fleuries, comme un mélange de feuilles et de tiges.For the purposes of the present invention, the term "epidermal differentiation" is intended to mean any change in size and / or morphology and / or biochemical composition and / or membrane nature and / or biological activity of the cells of the epidermis, such as keratinocytes, melanocytes, Langerhans cells and Merkel cells. The use of the extract according to the invention can enhance the barrier function of the epidermis. For the purposes of the present invention, the term "reinforcing the barrier function of the epidermis" is intended to mean the restoration or maintenance of a normal level of exchanges in / out (loss of water) and out / in (penetration of agents). or hydrophilic microorganisms) of the skin. The extract used in the invention may be an extract of all or part of the plant. It can be an extract from the whole plant. Alternatively, it may be a root extract. Alternatively, it may be an extract of an aerial part of Carpobrotus edulis. In this case, this part can be chosen from the flower, the fruit, the stem and the leaf, or a mixture thereof. More particularly, it may be an extract of several unflourished whole aerial parts, such as a mixture of leaves and stems.
Quelle que soit l'utilisation envisagée, l'extrait de Carpobrotus edulis peut être obtenu par tout procédé connu de l'homme du métier. L'extrait de Carpobrotus edulis, peut être un extrait obtenu par pressage seul (sans solvant) ou être un extrait aqueux, alcoolique ou hydroalcoolique. Par exemple, la composition peut comprendre tout ou partie des composés hydrophiles et/ou hydrosolubles qui sont présents dans la plante, en particulier dans les feuilles de la plante, et qui en sont extraits au moyen d'un solvant choisi parmi l'eau, les alcools, et les mélanges de ces solvants. Les alcools employés peuvent être des monoalcools et/ou des polyols, par exemple des diols ou triols, tels que les glycols et le glycérol. L'eau employée peut être l'eau constitutive de la plante. Par eau constitutive de la plante, on entend l'eau naturellement contenue dans les tissus végétaux. A titre d'exemple, l'extrait peut être obtenu en employant comme solvant d'extraction de l'eau, ou un alcool, ou un mélange de plusieurs alcools, ou un mélange d'eau et d'au moins un alcool. Par exemple, l'extrait peut être un extrait aqueux des parties aériennes non fleuries, comme la tige ou la feuille, ou leur mélange. Le solvant d'extraction employé pour préparer l'extrait utilisé dans le cadre de la présente invention peut être choisi parmi l'éthanol, le propylène glycol, le butylène glycol, le dipropylène glycol, le méthylpropanediol, le propane-1,3-diol, la glycérine, l'eau, l'eau constitutive de la plante ou un mélange de ces solvants. Les mélanges de ces solvants peuvent-être réalisés dans toutes les proportions possibles. L'extrait de Carpobrotus edulis peut être obtenu à partir d'une ou plusieurs parties aériennes (feuilles, tiges, fleurs ou fruit) de la plante fraîche, ou de la plante cryobroyée, ou de la plante congelée, ou de la plante ayant subi une ou plusieurs étapes de congelation/décongelation, ou de la plante séchée. La plante peut être non broyée (entière), broyée ou coupée préalablement.Whatever the use envisaged, the extract of Carpobrotus edulis can be obtained by any method known to those skilled in the art. The extract of Carpobrotus edulis, can be an extract obtained by pressing alone (without solvent) or be an aqueous extract, alcoholic or hydroalcoholic. For example, the composition may comprise all or part of the hydrophilic and / or water-soluble compounds which are present in the plant, in particular in the leaves of the plant, and which are extracted therefrom by means of a solvent chosen from water, alcohols, and mixtures of these solvents. The alcohols employed may be monoalcohols and / or polyols, for example diols or triols, such as glycols and glycerol. The water used can be the constitutive water of the plant. By constituent water of the plant is meant the water naturally contained in the plant tissues. For example, the extract can be obtained by using as the extraction solvent water, or an alcohol, or a mixture of several alcohols, or a mixture of water and at least one alcohol. For example, the extract may be an aqueous extract of unflourished aerial parts, such as the stem or leaf, or their mixture. The extraction solvent used to prepare the extract used in the context of the present invention may be chosen from ethanol, propylene glycol, butylene glycol, dipropylene glycol, methylpropanediol and propane-1,3-diol. , glycerine, water, the constituent water of the plant or a mixture of these solvents. The mixtures of these solvents can be made in all possible proportions. The extract of Carpobrotus edulis can be obtained from one or more aerial parts (leaves, stems, flowers or fruit) of the fresh plant, or the cryobrushed plant, or the frozen plant, or the plant that has undergone one or more stages of freezing / thawing, or dried plant. The plant can be unmilled (whole), crushed or cut beforehand.
Selon un mode d'obtention de l'extrait, la plante ainsi préparée peut être mise en contact avec un solvant du type précité, préférentiellement un mélange eau/alcool. L'extraction peut être conduite en mélangeant le broyat et le solvant et en soumettant ce mélange à une agitation de façon à optimiser les échanges entre le broyat et le solvant d'extraction.According to a mode of obtaining the extract, the plant thus prepared can be brought into contact with a solvent of the aforementioned type, preferably a water / alcohol mixture. The extraction can be carried out by mixing the ground material and the solvent and subjecting this mixture to stirring so as to optimize the exchanges between the ground material and the extraction solvent.
L'extraction peut être conduite à une température de 40 à 80°C, et pendant une durée de l'ordre de 1 à 4 heures. Il est à noter que l'extrait employé dans la présente invention peut être purifié préalablement à sa mise en oeuvre dans la composition. Cette purification peut par exemple être effectuée par extraction liquide-liquide, par précipitation ou par chromatographie préparative.The extraction can be conducted at a temperature of 40 to 80 ° C, and for a period of the order of 1 to 4 hours. It should be noted that the extract used in the present invention may be purified prior to its use in the composition. This purification may for example be carried out by liquid-liquid extraction, by precipitation or by preparative chromatography.
Selon un autre mode d'obtention de l'extrait, le procédé de préparation de l'extrait peut ne pas mettre en oeuvre de solvant. En effet, l'eau présente dans une ou plusieurs parties aériennes, par exemple le fruit, les feuilles, les tiges, ou les fleurs de Carpobrotus edulis, dite constitutive, peut suffire à solubiliser les molécules extractibles. L'extraction de Carpobrotus edulis peut être conduite par pressage mécanique ou par centrifugation de la plante par exemple fraîche, cryobroyée, congelée, ou congelée/décongelée, préalablement broyée ou entière, de manière à laisser s'écouler l'eau constitutive et ainsi épuiser le contenu des tissus de la plante. A l'issue de cette étape, une enzyme ou un mélange d'enzymes peut être ajouté pour lyser tout ou partie des éléments solides végétaux présents dans l'extrait brut précédemment obtenu. L'extrait brut peut être éventuellement filtré préalablement à son emploi dans la composition de l'invention. Il est à noter que l'extrait employé dans la présente invention peut être purifié et/ou concentré préalablement à sa mise en oeuvre dans la composition. Cette purification et/ou concentration peut par exemple être effectuée par extraction liquide-liquide, par précipitation, par chromatographie préparative, par ultrafiltration ou par osmose inverse. Le filtrat peut être soit utilisé tel quel, soit stabilisé par rajout de glycérine, soit séché. Il peut par exemple être séché par évaporation sous vide, par atomisation, par lyophilisation ou par tout autre moyen approprié connu de l'homme du métier. Dans ce mode de réalisation, l'extrait employé peut se présenter préférentiellement sous la forme d'une dispersion ou d'une solution dans un milieu liquide. Dans un autre mode de réalisation, un procédé de préparation d'un extrait de Carpobrotus edulis. peut comprendre les étapes suivantes : mise en contact de parties aériennes de Carpobrotus edulis avec un solvant polaire précité ou pressage ou broyage 3013 593 11 d'une ou des parties aériennes de Carpobrotus edulis (extrait aqueux), éventuellement centrifugation, éventuellement chauffage, 5 éventuellement agitation, éventuellement enzymolyse, éventuellement refroidissement, filtration du mélange, le filtrat constituant l'extrait de Carpobrotus edulis, 10 éventuellement stabilisation ou séchage du filtrat obtenu. Dans le cadre de l'invention, l'agent cosmétique s'entend d'un agent à visée exclusivement esthétique, à l'exclusion de toute utilisation thérapeutique. Un autre objet de l'invention se rapporte à une composition 15 cosmétique ou dermatologique comprenant un extrait de Carpobrotus edulis. et un véhicule cosmétiquement et/ou dermatologiquement acceptable, ladite composition comprenant 0,0001 à 5 % en poids dudit extrait de Carpobrotus sp. par rapport au poids total de la composition, la valeur de 1 % étant exclue. 20 Toutes les caractéristiques de l'extrait de Carpobrotus edulis mentionnées ci-avant pour l'utilisation de l'invention, ainsi que toutes les caractéristiques de l'utilisation de l'extrait décrites ci-avant, s'appliquent mutatis mutandis à la composition de l'invention. On entend par « composition cosmétique », dans la présente 25 invention, toute composition à visée cosmétique, c'est à dire esthétique, une composition pouvant être mise en contact avec les parties superficielles du corps humain, par exemple l'épiderme, les systèmes pileux et capillaires, les organes externes, les dents et les muqueuses externes. Avantageusement, une composition cosmétique permet, 30 exclusivement ou principalement de les protéger, parfumer, maintenir en bon état, modifier leur aspect ou en corriger les défauts superficiels.According to another mode of obtaining the extract, the process for preparing the extract may not use a solvent. Indeed, the water present in one or more aerial parts, for example the fruit, leaves, stems, or flowers of Carpobrotus edulis, called constitutive, may be sufficient to solubilize the extractable molecules. The extraction of Carpobrotus edulis can be carried out by mechanical pressing or by centrifugation of the plant, for example fresh, cryobrested, frozen, or frozen / thawed, previously ground or whole, so as to let the constitutive water flow and thus exhaust the contents of the tissues of the plant. At the end of this step, an enzyme or a mixture of enzymes may be added to lyse all or part of the plant solids present in the previously obtained raw extract. The crude extract may be optionally filtered prior to use in the composition of the invention. It should be noted that the extract used in the present invention can be purified and / or concentrated prior to its use in the composition. This purification and / or concentration may for example be carried out by liquid-liquid extraction, by precipitation, by preparative chromatography, by ultrafiltration or by reverse osmosis. The filtrate can be used as it is, stabilized by addition of glycerin, or dried. It may for example be dried by evaporation under vacuum, by spraying, by freeze-drying or by any other appropriate means known to those skilled in the art. In this embodiment, the extract employed may be preferentially in the form of a dispersion or a solution in a liquid medium. In another embodiment, a process for preparing an extract of Carpobrotus edulis. may comprise the following steps: contacting the aerial parts of Carpobrotus edulis with a polar solvent mentioned above or pressing or grinding one or more aerial parts of Carpobrotus edulis (aqueous extract), optionally centrifugation, optionally heating, possibly stirring, optionally enzymolysis, optionally cooling, filtration of the mixture, the filtrate constituting the Carpobrotus edulis extract, optionally stabilizing or drying the filtrate obtained. In the context of the invention, the cosmetic agent is an agent for exclusively aesthetic purposes, to the exclusion of any therapeutic use. Another subject of the invention relates to a cosmetic or dermatological composition comprising an extract of Carpobrotus edulis. and a cosmetically and / or dermatologically acceptable vehicle, said composition comprising 0.0001 to 5% by weight of said extract of Carpobrotus sp. relative to the total weight of the composition, the value of 1% being excluded. All the characteristics of the Carpobrotus edulis extract mentioned above for the use of the invention, as well as all the characteristics of the use of the extract described above, apply mutatis mutandis to the composition. of the invention. In the present invention, the term "cosmetic composition" is intended to mean any cosmetic composition, that is to say aesthetic, a composition that can be brought into contact with the superficial parts of the human body, for example the epidermis, the hair and capillaries, external organs, teeth and external mucous membranes. Advantageously, a cosmetic composition allows, exclusively or mainly to protect them, perfume, maintain in good condition, change their appearance or correct the superficial defects.
Dans la présente, on entend part « composition dermatologique » toute composition à visée dermatologique c'est à dire une composition pouvant être mise en contact avec les parties superficielles du corps humain, pour un traitement de la peau, des muqueuses et des phanères, ongles, cheveux, poils. Par « véhicule cosmétiquement ou dermatologiquement acceptable », on entend un véhicule adapté pour une utilisation en contact avec des cellules humaines et animales cutanées, en particulier les cellules de l'épiderme, sans toxicité, irritation, réponse allergique indue et similaire, et proportionné à un rapport avantage/risque raisonnable. Le véhicule cosmétiquement acceptable peut être choisi parmi l'eau, l'allantoïne, la glycérine, le méthylpropanediol, cette liste n'étant pas limitative. La composition de l'invention peut être obtenue par tout procédé approprié connu de l'homme du métier pour la fabrication d'une composition cosmétique. Il peut s'agir, par exemple d'un simple mélange. Il peut s'agir également, par exemple, d'un procédé comprenant une étape d'incorporation d'une phase interne dans une phase externe au moyen d'un émulseur, par exemple d'une turbine de type rotor-stator. Il peut s'agir également par exemple d'un procédé utilisant la Température d'Inversion de Phase (TIP), ce procédé étant classiquement utilisé par l'homme de l'art pour obtenir des émulsions huile dans eau dont les gouttelettes dispersées sont particulièrement fines, par exemple avec un diamètre de 0,1 à 1 pm. Selon l'invention, la composition cosmétique ou dermatologique peut comprendre de 0,0001 à 5 % en poids d'extrait de Carpobrotus edulis, par exemple, la composition peut comprendre de 0,0001 à 1°A, la valeur de 1% étant exclue, ou entre 0,0001% et 3 %, la valeur de 1% étant exclue, ou de 0,001 à 3 %, la valeur de 1% étant exclue, ou de 0,0005 à 0,5 %, la valeur de 1% étant exclue, ou de 0,001 à 1 %, la valeur de 1% étant exclue, ou de 0,01 à 1 %, la valeur de 1% étant exclue, ou de 0,05 à 5%, la valeur de 1`)/0 étant exclue, en poids d'extrait de Carpobrotus edulis par rapport au poids total de la composition. La composition cosmétique ou dermatologique de la présente invention peut se trouver sous toute forme appropriée pour une application cosmétique ou dermatologique. Avantageusement, la composition est une composition à usage topique. Il peut s'agir par exemple d'une composition sous une forme choisie dans le groupe comprenant une émulsion huile dans eau ou eau dans huile ou un mélange de ces émulsions.In the present context, the term "dermatological composition" is intended to mean any composition for dermatological purposes, that is to say a composition which can be brought into contact with the superficial parts of the human body, for a treatment of the skin, mucous membranes and integuments, nails , hair, hairs. By "cosmetically or dermatologically acceptable vehicle" is meant a vehicle adapted for use in contact with cutaneous human and animal cells, in particular the cells of the epidermis, without toxicity, irritation, undue allergic response and the like, and proportionate to a reasonable benefit / risk ratio. The cosmetically acceptable vehicle may be chosen from water, allantoin, glycerin and methylpropanediol, this list not being limiting. The composition of the invention can be obtained by any suitable method known to those skilled in the art for the manufacture of a cosmetic composition. It may be, for example a simple mixture. It may also be, for example, a method comprising a step of incorporating an internal phase into an external phase by means of an emulsifier, for example a rotor-stator type turbine. It may also be for example a method using Phase Inversion Temperature (TIP), this method being conventionally used by those skilled in the art to obtain oil-in-water emulsions whose dispersed droplets are particularly fine, for example with a diameter of 0.1 to 1 μm. According to the invention, the cosmetic or dermatological composition may comprise from 0.0001 to 5% by weight of extract of Carpobrotus edulis, for example, the composition may comprise from 0.0001 to 1 ° A, the value of 1% being excluded, or between 0.0001% and 3%, the value of 1% being excluded, or from 0.001 to 3%, the value of 1% being excluded, or from 0.0005 to 0.5%, the value of 1 % being excluded, or from 0.001 to 1%, the value of 1% being excluded, or from 0.01 to 1%, the value of 1% being excluded, or from 0.05 to 5%, the value of 1% ) / 0 being excluded, by weight of extract of Carpobrotus edulis with respect to the total weight of the composition. The cosmetic or dermatological composition of the present invention may be in any form suitable for cosmetic or dermatological application. Advantageously, the composition is a composition for topical use. It may be for example a composition in a form selected from the group consisting of an oil-in-water or water-in-oil emulsion or a mixture of these emulsions.
Selon l'invention, la composition cosmétique ou dermatologique peut par exemple se trouver sous une forme choisie dans le groupe comprenant un gel aqueux ou hydroalcoolique, une crème aqueuse ou hydroalcoolique et une lotion aqueuse ou hydroalcoolique. Ces formulations utilisables pour la mise en oeuvre de la présente invention sont connues dans l'état de la technique par les formulateurs. Dans ces exemples de composition, il suffit d'ajouter l'extrait de carpobrotus de la présente invention pour obtenir une composition conforme à la présente invention. Selon l'invention, la composition peut être sous une forme choisie parmi un onguent, une crème, une huile, un lait, une pommade, une poudre, un tampon imbibé, une solution, un gel, un sérum, un baume, un beurre, une lotion, une suspension, un savon ou une émulsion. L'extrait de la présente invention peut être utilisé dans une composition cosmétique ou dermatologique seul ou en combinaison avec d'autres substances ou ingrédients actifs ou inactifs cosmétiquement ou dermatologiquement. Les substances ou ingrédients inactifs sont ceux qui n'agissent pas cosmétiquement ou dermatologiquement. Il s'agit des éléments de la composition permettant notamment d'accompagner l'extrait, de constituer une formulation particulière, de conserver l'extrait actif dans le temps, cette liste n'étant pas limitative. En résumé de tout produit de base pouvant se trouver dans les compositions cosmétiques ou dermatologiques classiques. Par opposition, les substances ou ingrédients actifs sont ceux qui dans l'application cosmétique ou dermatologique visée ont une action esthétique et/ou médicale. Ainsi, l'extrait de Carpobrotus edulis de la présente invention, peut être la seule substance ou ingrédient actif d'une composition, ou il peut être associé à d'autres substances ou ingrédients actifs d'une composition cosmétique ou dermatologique. Un autre objet de l'invention se rapporte à un dispositif pouvant se présenter sous une forme choisie parmi un pot, un flacon-pompe, une lingette, un masque, un dispositif transdermique, un patch, un spray, une capsule ou une gélule, ledit dispositif comprenant un extrait ou une composition selon l'invention. Un autre objet de l'invention se rapporte à un procédé de soin cosmétique ou dermatologique pour améliorer l'aspect de la peau, par exemple pour un effet anti-âge et/ou hydratant, notamment permettant de stimuler la synthèse des protéines impliquées dans la différenciation épidermique, de stimuler la transglutaminase et/ou de stimuler la synthèse de lipides membranaires par les kératinocytes, comprenant une application sur la peau d'une composition selon l'invention. Avantageusement, le procédé permet d'améliorer la surface de la peau, l'éclat, le lissage, la douceur, le teint et l'aspect général de la peau, ou toute caractéristique relative à l'utilisation de l'extrait telle que mentionnée ci-avant. Dans le cadre des procédés cosmétiques selon l'invention, ou de l'utilisation selon l'invention, l'utilisation s'entend d'une utilisation non- thérapeutique, par exemple pour le traitement des peaux normales, c'est- à-dire des peaux ne présentant ou n'étant pas susceptible de présenter un état pathologique. Il peut également s'agir de peaux ne présentant pas de trace visible ou perceptible d'une agression extérieure, comme des démangeaisons, des coups de soleil, des brûlures, des piqûres, des signes d'inflammation, de plaie, cette liste n'étant pas limitative.According to the invention, the cosmetic or dermatological composition may, for example, be in a form chosen from the group comprising an aqueous or aqueous-alcoholic gel, an aqueous or aqueous-alcoholic cream and an aqueous or hydroalcoholic lotion. These formulations that can be used for the implementation of the present invention are known in the state of the art by the formulators. In these examples of composition, it is sufficient to add the carpobrotus extract of the present invention to obtain a composition according to the present invention. According to the invention, the composition may be in a form chosen from an ointment, a cream, an oil, a milk, an ointment, a powder, a soaked swab, a solution, a gel, a serum, a balm or a butter. , a lotion, a suspension, a soap or an emulsion. The extract of the present invention may be used in a cosmetic or dermatological composition alone or in combination with other substances or ingredients that are active or inactive cosmetically or dermatologically. Inactive substances or ingredients are those that do not act cosmetically or dermatologically. It is about the elements of the composition allowing in particular to accompany the extract, to constitute a particular formulation, to preserve the active extract in the time, this list not being limiting. In summary of any basic product that can be found in conventional cosmetic or dermatological compositions. In contrast, the active substances or ingredients are those which in the cosmetic or dermatological application referred to have an aesthetic and / or medical action. Thus, the extract of Carpobrotus edulis of the present invention, may be the only substance or active ingredient of a composition, or it may be associated with other substances or active ingredients of a cosmetic or dermatological composition. Another subject of the invention relates to a device which may be in a form chosen from a pot, a pump bottle, a wipe, a mask, a transdermal device, a patch, a spray, a capsule or a capsule, said device comprising an extract or a composition according to the invention. Another subject of the invention relates to a cosmetic or dermatological treatment method for improving the appearance of the skin, for example for an anti-aging and / or moisturizing effect, in particular for stimulating the synthesis of the proteins involved in the treatment. epidermal differentiation, to stimulate transglutaminase and / or to stimulate the synthesis of membrane lipids by keratinocytes, comprising an application to the skin of a composition according to the invention. Advantageously, the method makes it possible to improve the surface of the skin, the radiance, the smoothness, the softness, the complexion and the general appearance of the skin, or any characteristic relating to the use of the extract as mentioned above. In the context of the cosmetic processes according to the invention, or of the use according to the invention, the use means a non-therapeutic use, for example for the treatment of normal skin, that is to say skin that does not have or is not likely to present a pathological condition. It may also be skin that does not have a visible or noticeable trace of external aggression, such as itching, sunburn, burns, bites, signs of inflammation, sores. being not limiting.
De préférence, toute utilisation cosmétique et tout procédé cosmétique selon l'invention sont respectivement des utilisations cosmétiques non-thérapeutiques et procédés cosmétiques non-thérapeutiques.Preferably, any cosmetic use and any cosmetic process according to the invention are respectively non-therapeutic cosmetic uses and non-therapeutic cosmetic processes.
Un autre objet de l'invention se rapporte à une composition dermatologique telle que définie ci-avant, pour son utilisation dans un produit dermatologique destiné à l'amélioration de l'aspect de la peau d'un sujet.Another subject of the invention relates to a dermatological composition as defined above, for its use in a dermatological product intended to improve the appearance of the skin of a subject.
D'autres avantages pourront encore apparaître à l'homme du métier à la lecture des exemples ci-dessous, donnés à titre illustratif EXEMPLES Exemple 1 : Préparation de l'extrait de Carpobrotus edulis Dans les exemples suivants, l'extrait de Carpobrotus edulis a été préparé comme suit. Les parties aériennes entières non fleuries (mélange de feuilles et tiges) de Carpobrotus edulis ont été congelées puis décongelées, pour être pressées mécaniquement. L'extrait aqueux ainsi obtenu (extrait brut) a ensuite été filtré jusqu'à une filtration stérilisante. Exemple 2 : Effet de l'extrait de Carpobrotus edulis sur les protéines impliquées dans la différenciation des kératinocytes Différentes études ont été réalisées sur des kératinocytes humains normaux, obtenus à partir de plasties abdominales, ensemencés en monocouche (réf. : NHEK341) dans les conditions de culture adéquates, à savoir dans un milieu KSFM (keratinocytes serum free medium, KSFM invitrogen) à une température de 37°C, sous atmosphère à 5% de CO2 et saturée en humidité. Après 24h, le milieu a été remplacé par du milieu contenant l'extrait de Carpobrotus edulis (0,02%) ou l'élément de référence (CaCl2 à 1,5mM, induisant la différenciation). 24h après, les cultures ont été arrêtées et l'expression des marqueurs d'intérêt (PCR-array mQPA HNHEK-64) a été évaluée par RT-PCR sur les ARNm extraits des tapis cellulaires. Les données du tableau I ci-dessous concernent le pourcentage de viabilité des kératinocytes ayant subi différents traitements.Other advantages may still be apparent to those skilled in the art on reading the examples below, given for illustrative purposes. EXAMPLES Example 1: Preparation of the extract of Carpobrotus edulis In the following examples, the extract of Carpobrotus edulis a was prepared as follows. Whole un flowering (leaf and stem mix) parts of Carpobrotus edulis were frozen and thawed to be mechanically pressed. The aqueous extract thus obtained (crude extract) was then filtered until sterilizing filtration. EXAMPLE 2 Effect of the extract of Carpobrotus edulis on the proteins involved in the differentiation of keratinocytes Various studies were carried out on normal human keratinocytes, obtained from abdominal plasties, seeded in a monolayer (ref .: NHEK341) under the conditions suitable cultures, namely in KSFM medium (keratinocytes serum free medium, KSFM invitrogen) at a temperature of 37 ° C., under an atmosphere at 5% CO 2 and saturated with moisture. After 24 h, the medium was replaced with medium containing Carpobrotus edulis extract (0.02%) or the reference element (1.5 mM CaCl 2, inducing differentiation). 24 hours later, the cultures were stopped and the expression of the markers of interest (PCR-array mQPA HNHEK-64) was evaluated by RT-PCR on the mRNAs extracted from the cell mats. The data in Table I below relate to the percentage of viability of the keratinocytes having undergone different treatments.
Tableau I : ARN stimulé ARN Implications (>200Y0) réprimé (<50%) Carpobrotus K1, _ amélioration de la edulis Involucrine différenciation Desmogléine 1 protéines de structures des desmosomes, fonction barrière Kalikréine 7 desquamation Fatty Acid BP synthèse des lipides Sulfotransferase hydratation/nutrition Les marqueurs listés dans le tableau ont été significativement surexprimés par le traitement et sont impliqués dans la différenciation, dans la desquamation, d'une façon générale dans la fonction barrière de l'épiderme. Exemple 3 : Effet de l'extrait de Carpobrotus edulis sur la transglutaminase La différenciation des kératinocytes épidermiques humains normaux (KHN) est étudiée par la mesure de l'expression de la transglutaminase.Table I: RNA stimulated RNA Implications (> 200Y0) repressed (<50%) Carpobrotus K1, _ edulis improvement Involucrin differentiation Desmoglein 1 desmosome structural proteins, barrier function Kalikrein 7 desquamation Fatty Acid BP lipid synthesis Sulfotransferase hydration / nutrition The markers listed in the table have been significantly overexpressed by the treatment and are involved in differentiation, in desquamation, generally in the barrier function of the epidermis. EXAMPLE 3 Effect of the extract of Carpobrotus edulis on transglutaminase The differentiation of normal human epidermal keratinocytes (KHN) is studied by measuring the expression of transglutaminase.
Les transglutaminases I et III catalysent la formation des enveloppes cornées durant la différenciation des kératinocytes en stabilisant les structures par polymérisation de différentes protéines. La différenciation a été étudiée par la mesure de l'incorporation de l'une d'elles, la cadavérine, couplée à un marqueur fluorescent pour la détection.Le rapport de l'incorporation de la fluorescéine-cadavérine sur la quantité de protéines renseigne sur l'activité de la transglutaminase par unité de cellules en fonction du traitement réalisé. Le rapport de la viabilité cellulaire sur la quantité de protéines 10 confirme que le résultat d'activité métabolique cellulaire est bien indépendant du nombre de cellules. Le rapport de l'incorporation de la fluorescéine sur la viabilité cellulaire : il s'exprime en ng de FC (fluorescéine-cadavérine) incorporé / pg de résorufine produite et il donne le taux de différenciation réel des 15 KHN, permettant de comparer les conditions entre elles. Le calcul du pourcentage de différenciation des cellules pour un actif par rapport à son témoin solvant est ensuite réalisé. Les kératinocytes ont été ensemencés en monocouche selon les 20 conditions définies dans l'exemple précédant. Le traitement est réalisé par l'extrait de Carpobrotus edulis (0,1°A) ou par la référence négative (le rétinol, 10-6M). Après les 10 et 12 jours de traitement, les analyses sont réalisées. 25 Les résultats obtenus sont validés par la présence du témoin de prolifération (T prolif), pour lequel est obtenu le plus faible taux d'incorporation de fluorescéine-cadavérine par rapport à la quantité totale de cellules. En opposition, le témoin de différenciation (T diff) présente un taux en moyenne 3 fois plus important à J12 (soit après 12 jours de 30 traitement). Le rétinol, utilisé comme molécule de référence négative, valide le modèle puisqu'il ralentit l'incorporation de FC ainsi que la mortalité cellulaire par rapport au témoin éthanol (T EtOH). L'extrait de Carpobrotus edulis stimule la différenciation des cellules jusqu'à +152% pour une concentration de 0,1% après 10 jours de traitement, comme le montre le tableau II: Tableau II : Incorporati on de FC (en ng de FC/pg de protéines) Viabilité cellulaire (en pg de resorufin/pg de protéines) Incorpora tion de FC/ Viabilité cellulaire (différenciati on/ témoin corresponda nt) Gain en % Témoin de J10 0,0013 0,0502 0,0262 0,0 prolifération J12 0,0019 0,0501 0,0379 0,0 Témoin de J10 0,0012 0,0135 0,0911 +247,9 Par différenciation rapportAu T prolif J12 0,0076 0,0067 1,1371 +2902,3 Rétinol J10 0,0004 0,0188 0,0207 -86,8 Par rapport au T EtOH 10-6M J12 0,0005 0,0183 0,0270 -98,3 Ethanol J10 0,0019 0,0120 0,1568 +72,2 Par 2.10-2 % rapport au T Diff J12 0,0078 0,0049 1,5722 +38,3 . J10 0,0023 0,0099 0,2297 +152,2 Par Carpobrotus a rapport au T Diff 0,1% J12 0,0089 0,0054 1,6527 +45,3 Exemple 4 : Effet de l'extrait de Carpobrotus edulis sur la synthèse des lipides kératinocytaires Les kératinocytes humains normaux sont ensemencés en plaques 24 puits (Costar-Corning Incorporated, réf 3524) comme précédemment en KSFM complet (Invitrogen), c'est à dire supplémenté des 50 pg/ml de BPE (invitrogen) et des 5 ng/ml d'EGF (invitrogen). Chaque condition est réalisée en quadruplicat, et les traitements sont effectués dans 3 milieux de culture différents : - Milieu de prolifération (KSFM, Keratinocyte Free Medium, Invitrogen) - Milieu de "faible" différenciation = milieu de prolifération + 1mM de Butyrate de sodium + 0,9mM de chlorure de calcium (CaCl2) = diff 1 - Milieu de "forte" différenciation = milieu de prolifération + 1mM de Butyrate de sodium + 1,5mM de chlorure de calcium (CaCl2) = diff 2 Le nombre de plaques est alors doublé afin de pouvoir réaliser 2 temps de lecture. A J6, lorsque les KHN sont à 90-95% de confluence, les actifs sont mis au contact des cellules dans les milieux cités ci-dessus, soit : Une partie des plaques reste en milieu de prolifération avec : - l'actif dilué à deux concentrations et le témoin milieu seul Une partie des plaques est passée en milieu diff 1 : - l'actif dilué à deux concentrations et le témoin milieu seul Une partie des plaques est passée en milieu diff 2 : - l'actif dilué à deux concentrations et le témoin milieu seul L'extrait de Carpobrotus edulis est testé à 5 et 0,5%. A J9 et J10 de prolifération (soit J3 et J4 de différenciation), une mesure de l'activité mitochondriale est effectuée par la méthode colorimétrique au WST-1 (Roche Diagnostics, réf 1644807) afin d'évaluer la viabilité cellulaire. L'utilisation de ce réactif non cytotoxique permet d'effectuer un second dosage sur les cellules. Une coloration au NileRed (nom commercial : AdipoRed®, Lonza, réf PT-7009) est alors réalisée pour quantifier les lipides et plus particulièrement les triglycérides.Transglutaminases I and III catalyze the formation of corneal envelopes during differentiation of keratinocytes by stabilizing the structures by polymerization of different proteins. Differentiation was studied by measuring the incorporation of one of them, cadaverine, coupled to a fluorescent marker for detection. The ratio of the incorporation of fluorescein-cadaverine on the amount of protein provides information on the activity of transglutaminase per unit of cells as a function of the treatment carried out. The ratio of cell viability to the amount of protein confirms that the result of cellular metabolic activity is well independent of the number of cells. The ratio of fluorescein incorporation to cell viability: it is expressed in ng of FC (fluorescein-cadaverine) incorporated / pg of resorufin produced and it gives the real differentiation rate of 15 KHNs, making it possible to compare the conditions between them. The calculation of the percentage of differentiation of the cells for an active relative to its solvent control is then carried out. The keratinocytes were seeded in a monolayer according to the conditions defined in the preceding example. The treatment is carried out with the extract of Carpobrotus edulis (0.1 ° A) or by the negative reference (retinol, 10-6M). After 10 and 12 days of treatment, the analyzes are performed. The results obtained are validated by the presence of the proliferation control (T prol), for which the lowest level of fluorescein-cadaverine incorporation is obtained with respect to the total amount of cells. In contrast, the differentiation control (T diff) has an average rate that is 3 times higher on D12 (ie after 12 days of treatment). Retinol, used as a negative reference molecule, validates the model since it slows FC incorporation as well as cell death compared to the ethanol control (T EtOH). The extract of Carpobrotus edulis stimulates cell differentiation up to + 152% at a concentration of 0.1% after 10 days of treatment, as shown in Table II: Table II: Incorporation of FC (in ng of FC) / μg of protein) Cell viability (in μg of resorufin / μg of protein) FC incorporation / Cell viability (differentiation / control corresponds) Gain in% Control of J10 0.0013 0.0502 0.0262 0.0 Proliferation J12 0.0019 0.0501 0.0379 0.0 J10 control 0.0012 0.0135 0.0911 +247.9 By differentiation ratio T prol J12 0.0076 0.0067 1.1371 +2902.3 Retinol J10 0.0004 0.0188 0.0207 -86.8 Relative to T EtOH 10-6M J12 0.0005 0.0183 0.0270 -98.3 Ethanol J10 0.0019 0.0120 0.1568 +72, 2 By 2.10-2% relative to T Diff J12 0.0078 0.0049 1.5722 +38.3. J10 0.0023 0.0099 0.2297 +152.2 By Carpobrotus relative to T Diff 0.1% J12 0.0089 0.0054 1.6527 +45.3 Example 4: Effect of Carpobrotus edulis extract on the synthesis of keratinocyte lipids Normal human keratinocytes are inoculated into 24-well plates (Costar-Corning Incorporated, ref. 3524) as previously in complete KSFM (Invitrogen), that is to say supplemented with 50 μg / ml of BPE (invitrogen) and 5 ng / ml of EGF (invitrogen). Each condition is carried out in quadruplicate, and the treatments are carried out in 3 different culture media: - Proliferation medium (KSFM, Keratinocyte Free Medium, Invitrogen) - Medium of "weak" differentiation = proliferation medium + 1mM of sodium butyrate + 0.9mM calcium chloride (CaCl2) = diff 1 - Medium of "strong" differentiation = proliferation medium + 1mM sodium butyrate + 1.5mM calcium chloride (CaCl2) = diff 2 The number of plates is then doubled in order to achieve 2 playback times. At day 6, when the KHN are at 90-95% confluence, the active agents are put in contact with the cells in the media mentioned above, ie: A part of the plates remains in the middle of proliferation with: - the active diluted at two concentrations and the control medium alone Part of the plates is passed in diff 1 medium: - the active diluted at two concentrations and the control medium alone Part of the plates is passed in diff 2 medium: - the active diluted in two concentrations and the control medium alone The extract of Carpobrotus edulis is tested at 5 and 0.5%. At D9 and D10 of proliferation (ie D3 and D4 differentiation), a measurement of the mitochondrial activity is carried out by the WST-1 colorimetric method (Roche Diagnostics, ref. 1644807) in order to evaluate cell viability. The use of this non-cytotoxic reagent makes it possible to perform a second assay on the cells. A staining with NileRed (trade name: AdipoRed®, Lonza, ref PT-7009) is then performed to quantify lipids and more particularly triglycerides.
Il est alors possible de corréler le taux de lipides mesuré à la quantité cellulaire présente, comme le montre les tableaux III, IV et V : Tableau III : expression moyenne des lipides en milieu de prolifération (%) Jour de différenciation 3 4 Témoin Fixé à 100 Extrait de Carpobrotus 5% (v/v) 531 273 Extrait de Carpobrotus 0,5% (v/v) 206 167 Tableau 2 : expression moyenne des lipides en milieu de "faible" différenciation (%) Jour de différenciation 3 4 Témoin Fixé à 100 Extrait de Carpobrotus 5% (v/v) 406 256 Extrait de Carpobrotus 0,5% (v/v) 150 122 Tableau 3: expression moyenne des lipides en milieu de "forte" différenciation (%) Jour de différenciation 3 4 Témoin Fixé à 100 Extrait de Carpobrotus 5% (v/v) 155 154 Extrait de Carpobrotus 0,5% (v/v) 100 118 Dans toutes les conditions, l'extrait de Carpobrotus edulis stimule la synthèse des lipides kératinocytaires, participant ainsi à la barrière lipidique de surface, à la rétention de l'eau, à la limitation de la PIE (Perte Insensible en Eau) ; à la fonction barrière de l'épiderme d'une façon générale. Exemple 5 : Formulation de l'extrait de Carpobrotus edulis dans un soin de type sérum25 Composants Pourcentage o en poids) W Eau Qsp 100 Glycérine 5,000 Jus de feuilles d'Abe barbadensis 4,000 Sorbitol 4,000 Huile de noix de coco hydrogéné 3,000 Alcool 2,800 Polymère croisé de Polydimethylsiloxane (PDMS) et Polydimethylsiloxane (PDMS) 2400 Sel de sodium d'acide carbonique pyrrolidone 2,000 Stéarate de sorbitane 1,700 Extrait d'Acer saccharum 1,400 Beurre de Butyrospermum parkii 1,100 Extrait de feuille d'Agave tequilana 1,000 Ceteth-20 0,700 Alcool stéarylique (Octadécanol) 0,700 Extrait de carpobrotus edulis 1,000 Parphum 0,400 Acide salicylique 0,300 Gomme de xanthane 0,300 Acide sorbique 0,150 Soude 0,120 Acétate de tocophérol 0,100 Mangiférine 0,004 Exemple 6 : Formulation de l'extrait de Carpobrotus edulis dans un soin de jour Composants Pourcentage Wo en poids) Eau Qsp 100 Glycérine 5,000 Cocoate d'ethylhexyle 5,000 Méthylpropanediol 4,000 Alcool cétylique 3,500 Stéarate de glycérol et stéarate de poly éthylène glycol- 100 3 500 Huile de Cocotier 3,000 Huile de graines de Helianthus annuus 3,000 Myristate de myristyle 2,000 Huile de graines de sésame 2,000 Acide stéarique 1,500 Eau d'Hamamelis virginiana 1,100 Stéarate de glycérol AE 1,000 2-phénoxyéthanol 0,600 Extrait de carpobrotus edulis 1,000 Parfum 0,500 Eau et glycérine et alcool et extrait de fleur de Calendula officinalis 0500 Gomme de xanthane 0,150 Polymère croisé d'Acrylates / acrylate d'alkyle C10-30 0,100 Acide sorbique 0,100 Allantoïne 0,100 Acétate de tocophérol 0,100 Soude 0,030 EDTA tétrasodique 0,025 Mangiférine 0,004 Exemple 7 : Formulation de l'extrait de Carpobrotus edulis dans un soin de nuit Composants Pourcentage o en poids) W Eau Qsp 100 Glycérine 6,000 Alcool cétéarylique et Ceteareth-33 4,200 Méthylpropanediol 4,000 Cocoate d'ethylhexyle 4,000 Huile de soja 4,000 Myristate de myristyle 3,000 Alcool cétylique 3,000 Huile de noix de coco hydrogéné 3,000 Polydimethylsiloxane (PDMS) 3,000 Mannuronate de méthylsilanol 3,000 Polyacyladipate-2 de bis-diglycéryle 2,000 Lactate de sodium méthylsilanol 2,000 Stéarate de sorbitane 1,000 Beurre de Butyrospermum parkii 1,000 2-phénoxyéthanol 0,700 Extrait de carpobrotus edulis 1,000 Copolymère d'ammonium acryloyldimethyltaurate / VP 0,500 Parfum 0,400 Linoléate d'éthyle 0,300 Gomme de xanthane 0,150 Acide sorbique 0,150 Allantoïne 0,100 EDTA tétrasodique 0,100 Acétate de tocophérol 0,100 Palmitate de rétinol 0,100 Extrait d'Hippophae rhamnoides 0,070 Soude 0,060 Mangiférine 0,004 REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES [1] Delange Y., 2011, Edition Eugen Ulmer, Plantes succulentes. 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Example 5: Formulation of Carpobrotus edulis extract in a serum-type care 25 Components Percentage by weight W Water Qs 100 Glycerin 5,000 Abe barbadensis leaf juice 4,000 Sorbitol 4,000 Hydrogenated coconut oil 3,000 Alcohol 2,800 Cross polymer of Polydimethylsiloxane (PDMS) and Polydimethylsiloxane (PDMS) 2400 Sodium salt of carbonic acid pyrrolidone 2,000 Sorbitan stearate 1,700 Acer saccharum extract 1,400 Butyrospermum parkii butter 1,100 Agave tequilana 1,000 leaf extract Ceteth-20 0,700 Stearyl alcohol ( Octadecanol) 0.700 Carpobrotus edulis extract 1.000 Paraffin 0.400 Salicylic acid 0.300 Xanthan gum 0.300 Sorbic acid 0.150 Soda 0.120 Tocopherol acetate 0.100 Mangiferin 0.004 Example 6: Formulation of Carpobrotus edulis extract in a day care component Percentage by weight Water Qsp 100 Glycerine 5,000 Ethylhexyl Cocoate 5,000 Methylpropanediol 4,000 Cetyl Alcohol 3,500 St glycerol and polyethylene glycol stearate- 100 3,500 Coconut oil 3,000 Helianthus annuus seed oil 3,000 Myristyl myristate 2,000 Sesame seed oil 2,000 Stearic acid 1,500 Water Hamamelis virginiana 1,100 Glycerol stearate AE 1,000 2- phenoxyethanol 0,600 Carpobrotus edulis 1,000 extract Scent 0,500 Water and glycerin and alcohol and flower extract of Calendula officinalis 0500 Xanthan gum 0,150 Acrylates / alkyl acrylate cross polymer C10-30 0,100 Sorbic acid 0,100 Allantoin 0,100 Tocopherol acetate 0,100 Soda 0.030 tetrasodium EDTA 0.025 Mangiferin 0.004 Example 7: Formulation of Carpobrotus edulis extract in a night care Component Percentage by weight W Water Qsp 100 Glycerin 6,000 Cetearyl alcohol and Ceteareth-33 4,200 Methylpropanediol 4,000 Cocoate ethylhexyl 4,000 Oil soybean 4,000 Myristyl Myristate 3,000 Cetyl Alcohol 3,000 Hydrogenated Coconut Oil 3,000 Polydimethylsiloxane (PDMS) 3,000 Methylsilanol Mannuronate 3,000 Bis-Diglyceryl 2-Polyacyladipate 2,000 Sodium Methylsilanol 2,000 Sorbitan stearate 1,000 Butyrospermum parkii 1,000 1,000 2-phenoxyethanol 0.700 Carpobrotus edulis 1,000 extract Copper acryloyldimethyltaurate / PV 0.500 copolymer Fragrance 0.400 Ethyl linoleate 0.300 Xanthan gum 0.150 Sorbic acid 0.150 Allantoin 0.100 Tetrasodium tetrasodium 0.100 Tocopherol acetate 0.100 Retinol palmitate 0.100 Hippophae rhamnoides extract 0.070 Soda 0.060 Mangiferine 0.004 BIBLIOGRAPHIC REFERENCES [1] Delange Y., 2011, Eugen Edition Ulmer, Succulent plants. [2] Van der Watt E., Pretorius JC., 2001, 76, 87-91, Journal of Ethnopharmacology, Purification and Identification of Active Antibacterial Components in Carpobrotus edulis L. [3] Falleh H., Oueslati S., and all ., 2011, 127, 1732-1738, Food Chemistry, LC / ESI-MS / MS characterization of procyanidins and propelargonidins responsible for the strong antioxidant of the edible halophyte Mesembryanthemum edule L. [4] Falleh H., Ksouri R., and et al., 2012, 11, 2, 243-249, Tropical Journal of Pharmaceutical Research, Ultrasound-assisted Extraction: Effect of extraction time and solvent power on the levels of polyphenols and antioxidant activity of Mesembryanthemum edule L. Aizoaceae shoots. [5] Van Wyk BE, Van Oudtshoorn B., Gericke N., 2009, 2nd Edition, 20 Medicinal Plants of South Africa. 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