[go: up one dir, main page]

FR3007982A1 - Stabilisation des cellules dedifferenciees de rose. - Google Patents

Stabilisation des cellules dedifferenciees de rose. Download PDF

Info

Publication number
FR3007982A1
FR3007982A1 FR1356654A FR1356654A FR3007982A1 FR 3007982 A1 FR3007982 A1 FR 3007982A1 FR 1356654 A FR1356654 A FR 1356654A FR 1356654 A FR1356654 A FR 1356654A FR 3007982 A1 FR3007982 A1 FR 3007982A1
Authority
FR
France
Prior art keywords
composition
metal ion
plant
chelating agent
dedifferentiated
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
FR1356654A
Other languages
English (en)
Other versions
FR3007982B1 (fr
Inventor
Cecile Saquet-Gouville
Marie Ourcival
Dang Man Pham
Martine Dubois
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
LOreal SA
Original Assignee
LOreal SA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by LOreal SA filed Critical LOreal SA
Priority to FR1356654A priority Critical patent/FR3007982B1/fr
Priority to PCT/IB2014/062860 priority patent/WO2015001524A2/fr
Publication of FR3007982A1 publication Critical patent/FR3007982A1/fr
Application granted granted Critical
Publication of FR3007982B1 publication Critical patent/FR3007982B1/fr
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/40Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing nitrogen
    • A61K8/44Aminocarboxylic acids or derivatives thereof, e.g. aminocarboxylic acids containing sulfur; Salts; Esters or N-acylated derivatives thereof
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9789Magnoliopsida [dicotyledons]
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08Anti-ageing preparations
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q5/00Preparations for care of the hair
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/51Chelating agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/52Stabilizers

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

Utilisation d'un agent chélateur d'ions métalliques à titre d'agent stabilisant dans une composition comprenant des cellules dédifférenciées d'une plante de l'espèce Rosa sp., ou comprenant un extrait ou un lyophilisat de celles-ci.

Description

DOMAINE DE L'INVENTION La présente invention se rapporte à l'utilisation d'agent chélateurs pour la stabilisation d'une composition comprenant des cellules dédifférenciées d'une plante de l' espèce Rosa sp.
Plus particulièrement, la mise en oeuvre d'un agent chélateur d'ions métalliques permet de stabiliser une composition comprenant des cellules dédifférenciées d'une plante de l'espèce Rosa sp., ou comprenant un extrait ou un lyophilisat de celles-ci ART ANTERIEUR L'utilisation de cellules végétales dédifférenciées à des fins cosmétiques est un concept qui a émergé depuis une vingtaine d'années. Les cellules végétales dédifférenciées sont nées des travaux de Haberland en 1902. Durant ces 40 dernières années, des cultures cellulaires végétales ont été mises en oeuvre pour la production de métabolites d'intérêt ou pour la multiplication végétale à l'identique (embryogenèse somatique). Cette biotechnologie végétale repose sur le concept de la « totipotence cellulaire », qui propose que toute cellule végétale soit capable de se dédifférencier et de régénérer un autre individu identique à celui dont elle est issue. Une cellule végétale dédifférenciée peut être obtenue à partir d'une cellule de plante provenant d'un organe différencié, tel que, par exemple, la feuille, la tige, la racine, le pétale. Lorsque cette cellule différenciée est mise en culture, elle peut retourner à un état dédifférencié, c'est-à-dire qu'elle perd sa spécificité cellulaire de feuille, tige, racine ou pétale, et redevient capable éventuellement d'engendrer la plante entière. Une cellule végétale dédifférenciée est l'équivalent d'une véritable cellule souche végétale, issue de cellules méristèmatiques de plantes, et n'ayant pas de passé biologique spécifique d'un organe. WO 2009/151302 et KR 2009-0118877 décrivent des compositions anti-âges ou antioxydantes contenant des cellules végétales indifférenciées, dérivées du cambium de Panax ginseng ou d'un végétal du genre Taxus.
EP 1 985 280 décrit l'utilisation de cellules végétales dédifférenciées issues d'une plante de la famille des Rosacées, et en particulier du pommier Malus domestica, pour protéger les cellules souches de la peau face à différents stress intrinsèques et extrinsèques, et notamment pour traiter les atteintes de la peau ou des cheveux liées à l'âge.
EP 1 699 423 décrit l'utilisation d'un lyophilisat de cellules végétales dédifférenciées, issues d'une plante halophile, pour rajeunir l'aspect de la peau. DE-A-102 009 027 361 et EP 2 266 529 décrivent l'utilisation de cellules végétales dédifférenciées, notamment issues d'une plante du genre Malus, pour traiter les fibres de kératine du cheveu, et en particulier les protéger contre les UV, ou pour le traitement de la peau âgée. Enfin, EP 0 909 556 décrit l'utilisation d'un extrait d'un végétal de la famille des Rosacées, notamment d'une rose, éventuellement obtenu à partir de cellules végétales indifférenciées, comme antagoniste de la bradykinine pour le traitement de différentes affections, notamment cutanée. Les inventeurs ont observé que des cellules végétales dédifférenciées de rose, ou un extrait ou un lyophilisat de celles-ci, se sont révélés particulièrement aptes et efficaces pour traiter des peaux agées ou des cheveux agés. Cependant, les inventeurs ont observé que des compositions comprenant des cellules végétales dédifférenciées de rose, et en particulier des compositions comprenant des cellules dédifférenciées de rose obtenues par un procédé comprenant une étape de congélation puis décongélation ou une étape de lyophilisation, possède une stabilité réduite au cours du temps. Le demandeur a observé qu'avec la durée de stockage, une composition comprenant des cellules végétales dédifférenciées de rose ou comprenant un extrait ou un lyophilisat de celles-ci, présente une coloration jaunâtre, voire une coloration brunâtre, et peut contenir des agrégats de couleur noire. Ces caractéristiques, qui matérialisent une altération de la composition avec le temps, apparaissent quelques heures à quelques jours après l'obtention de la composition. Notamment, ces caractéristiques de jaunissement de la composition, de brunissement de la composition, ou de formation d'agrégats de couleur noire, apparaissent quelques heures à quelques jours après l'obtention de la composition par un procédé comprenant une étape de congélation puis décongélation. Ces modifications visibles de la composition au cours du temps signifient une stabilité réduite de celle-ci, avec une altération qui s'accentue avec la durée de stockage.
Cette dégradation de l'aspect visuel, qui résulterait d'un changement de couleur, par un changement de texture qui résulterait ou non de la présence d'agrégats, ou par une combinaison de plusieurs de ces altérations, est incompatible avec une formulation de la composition dans un produit cosmétique.
Notamment, ces changements de couleur et/ou de texture d'une composition comprenant des cellules dédifférenciées d'une plante de l'espèce Rosa sp. ou un extrait ou un lyophilisat de celles-ci, signifient l'occurrence d'une altération physico-chimique de la composition, ces changements étant susceptibles de réduire le ou les effets cosmétiques de celle-ci avec l'accroissement de la durée de stockage. Il existe donc un besoin d'identifier des solutions techniques permettant d'accroître les propriétés de stabilité de compositions comprenant des cellules dédifférenciées d'une plante de l'espèce Rosa sp, ou comprenant un extrait ou un lyophilisat de celles-ci. Plus particulièrement, il existe un besoin pour conférer une préservation dans le temps de l'homogénéité de texture d'une composition comprenant des cellules dédifférenciées d'une plante de l'espèce Rosa sp., ou comprenant un extrait ou un lyophilisat de celles-ci, c'est-à-dire un besoin pour retarder, ou pour réduire, ou pour bloquer la formation d'agrégats de matière végétale. Il existe aussi un besoin pour maintenir au cours du temps l'aspect visuel d'une composition comprenant des cellules dédifférenciées d'une plante de l'espèce Rosa sp., ou comprenant un extrait ou un lyophilisat de celles-ci, c'est-à-dire un besoin pour retarder, ou pour réduire, ou pour bloquer le jaunissement ou le brunissement de la composition. RESUME DE L'INVENTION La présente invention se rapporte à l'utilisation d'un agent chélateur d'ions métalliques à titre d'agent stabilisant dans une composition comprenant des cellules dédifférenciées d'une plante de l'espèce Rosa sp., ou comprenant un extrait ou un lyophilisat de celles-ci. Dans un autre aspect, l'invention se rapporte à un procédé pour stabiliser une composition comprenant des cellules dédifférenciées d'une plante de l'espèce Rosa sp.,ou comprenant un extrait ou un lyophilisat de celles-ci, lequel procédé comprend au moins une étape de mise en contact desdites cellules dédifférenciées, dudit extrait ou dudit lyophilisat de celles-ci, avec un agent chélateur d'ions métalliques. Un autre aspect de l'invention se rapporte à une composition stable comprenant des cellules dédifférenciées d'une plante de l'espèce Rosa sp., ou comprenant un extrait ou un lyophilisat de celles-ci, ladite composition comprenant, à titre d'agent stabilisant, un agent chélateur d'ions métalliques.
Selon un autre aspect, l'invention se rapporte à l'utilisation cosmétique d'une composition stable telle que définie dans la présente description, à titre d'agent actif pour le soin de la peau âgée ou des cheveux âgés.
LEGENDE DE LA FIGURE Figure 1: Clichés de microscopie photonique de compositions de cellules végétales dédifférenciées de rose après conservation à température ambiante. Figure 1 A : cliché de microscopie au grossissement (x10) en lumière non polarisée d'une composition de cellules de Rose Lancôme obtenue selon un procédé comprenant une étape de congélation puis décongélation. Figure 1 B : cliché de microscopie au grossissement (x10) en lumière polarisée d'une composition de cellules de Rose Lancôme obtenue selon un procédé comprenant une étape de congélation puis décongélation.
DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION De manière surprenante, les inventeurs ont montré que l'ajout d'un agent chélateur d'ions métalliques, tel que par exemple l'EDTA ou un sel d'EDTA, permet de stabiliser une composition comprenant des cellules dédifférenciées d'une plante de l'espèce Rosa sp., ou comprenant un extrait ou un lyophilisat de celles-ci. Il est ainsi montré selon l'invention que l'ajout d'un agent chélateur d'ions métalliques, tel que par exemple l'EDTA ou un sel d'EDTA, permet de maintenir une texture homogène, sans altération visible de l'aspect d'origine de ladite composition au cours du temps de stockage. Au sens de l'invention, on entend par « stabilisation » le fait que la composition, au cours de sa conservation ou son stockage, conserve un aspect visuel, notamment sa couleur, et une texture identique ou proche de celle de la composition fraichement obtenue par le procédé , c'est-à-dire une texture homogène et un aspect visuel incolore, ou légèrement blanchâtre. La présence d'un agent chélateur d'ions métalliques dans la composition a pour effet de retarder, de réduire, ou de bloquer la formation d'agrégats de matière végétale, ce qui englobe les agrégats visibles à nu et les agrégats visibles seulement par une observation par microscopie optique. Ainsi, avec une composition comprenant un agent chélateur d'ions métalliques tel que défini dans la présente description, on observe une absence d'agrégats de matière végétale, ou au moins la présence d'une quantité réduite d'agrégats est visible après observation par microscopie optique.
La présence d'un agent chélateur d'ions métalliques dans la composition a aussi pour effet de retarder, de réduire, ou de bloquer le jaunissement ou le brunissement de la composition, comme cela peut être observé directement à nu ou par microscopie photonique.
Du fait de l'absence d'agrégats de matière végétale, ou du fait de la présence d'une quantité réduite d'agrégats de matière végétale, et du fait l'absence d'un jaunissement ou d'un brunissement détectable, l'aspect visuel et la texture de la composition est identique ou similaire à l'aspect d'origine de la composition, c'est-à-dire à l'aspect visuel et la texture de la composition telle qu'immédiatement issue du procédé utilisé pour la préparer.
Au sens de l'invention, on entend par « cellule végétale dédifférenciée » toute souche cellulaire issue d'organes d'un rosier de l'espèce Rosa sp. et obtenue par des conditions de culture in vitro spécifiques, ne présentant plus aucun caractère de spécialisation et apte, sous l'effet d'une induction, à toute différenciation conforme à leur génome et à générer à elle seule un plant entier de végétal dont elle provient. De telles cellules sont capables de vivre par elles- mêmes et non en dépendance avec d'autres cellules. Les cellules végétales dédifférenciées sont donc distinctes des cellules végétales indifférenciées qui existent naturellement chez les végétaux. Dans des conditions normales les cellules végétales expriment environ 20 % de leur génome, les 80 % restant n'étant exprimés qu'en réponse à des conditions environnementales particulières. La mise en culture in vitro de ces cellules dans des conditions de culture particulières permet de « reprogrammer » les cellules et ainsi d'accéder à une partie de ce génome non exprimé. Certains composés, difficiles à obtenir par extractions de plantes, deviennent plus accessibles dans des cultures cellulaires. Ainsi, avantageusement, les végétales cellules dédifférenciées permettent d'accéder à de nouveaux composés non présents dans la plante entière ou d'augmenter de façon significative l'expression de molécules connues mais retrouvées en très petite quantité dans la plante entière. Des cellules végétales dédifférenciées peuvent être obtenues à partir de toute plante de l'espèce Rosa sp. Ces cellules peuvent être obtenues à partir d'un matériel végétal issu de plantes entières ou de parties de plante comme les feuilles, les tiges, les fleurs, les pétales, les sépales, ou les racines cultivées in vivo ou in vitro. Par culture in vivo, on entend toute culture de type classique c'est à dire en sol à l'air libre ou en serre, ou encore hors-sol.
Par culture in vitro, on entend l'ensemble des techniques connues de l'homme du métier qui permet de manière artificielle l'obtention d'un végétal ou d'une partie d'un végétal. La pression de sélection imposée par les conditions physicochimiques lors de la croissance des cellules végétales in vitro permet d'obtenir un matériel végétal standardisé et disponible tout au long de l'année contrairement aux plantes cultivées in vivo. Préférentiellement selon l'invention, on utilise un végétal issu de culture in vivo. De préférence, des cellules végétales dédifférenciées de l'invention sont obtenues à partir d'au moins une feuille d'une plante de l'espèce Rosa sp. Le genre Rosa comporte plus de 1000 espèces parmi lesquelles on peut citer Rosa 10 alba, Rosa alpina, Rosa canina, Rosa cinnamonea, Rosa gallica, Rosa repens, Rosa rubrifolia, Rosa rubiginosa, Rosa sempervirens, Rosa spinosissima, Rosa stylosa, Rosa tomentosa, ou encore Rosa villosa. De manière préférée encore, les cellules végétales dédifférenciées de l'invention, sont obtenues à partir d'un rosier Rose Lancôme, et plus particulièrement à partir d'un rosier 15 Rose Lancôme delboip. Un tel rosier est disponible commercialement, par exemple, auprès de la société Delbard. Le rosier Lancôme est un hybride de thé ayant pour parenté femelle un hybride obtenu par croisement des variétés Dr. Albert Schweitzer x [Michèle Meilland x Bayadèrel et ayant été pollinisé par la variété Melmet. 20 Selon la méthode de culture choisie, et en particulier selon le milieu de culture choisi, il est possible d'obtenir, à partir d'un même explant, des cellules végétales dédifférenciées présentant des caractères différents. Un milieu de culture convenant à l'obtention de cellules végétales dédifférenciées de l'invention est bien connu de l'homme du métier et peut comprendre du NH4NO3 ; KNO3 25 CaC12,2H20 ; MgSO4 ; KH2PO4 ; MnSO4,4H20 ; ZnSO4,7H20 ; KI ; Na2Mo04,2H20 ; CuSO4,5H20 ; FeSO4,7H20 ; du myo-inositol ; de l'acide nicotinique ; de la pyridoxine HC1; de la thiamine HC1; du saccharose ; de la kinétine ; du Na2EDTA,2H20 ; de l'acide naphtalène acétique et leurs mélanges. La culture est effectuée à une température allant de 24 à 30°C, pour une pression 30 partielle d'02 d'environ 10 %. La culture est effectuée en lots (batch) pendant 7 à 10 jours. Elle peut être effectuée en fermentation à écoulement discontinu (fed batch) ou en continu.
Après culture dans un milieu adapté, les cellules végétales dédifférenciées de l'invention sont récoltées par filtration. Les cellules végétales dédifférenciées ainsi récoltées peuvent être alors mises en contact avec un agent chélateur d'ions métalliques. A ce stade, les cellules végétales dédifférenciées peuvent subir, préalablement à toute autre étape de traitement subséquent, une étape de congélation suivie d'une étape de décongélation. Les cellules végétales dédifférenciées décongelées peuvent être alors mises en contact avec un agent chélateur d'ions métalliques. Les cellules végétales dédifférenciées peuvent alors être lyophilisées ou être soumises à un procédé d'extraction, ces méthodes étant bien connues de l'homme de l'art.
Selon la présente invention on met en oeuvre des cellules végétales dédifférenciées fraîches, ou lyophilisées, ou leurs extraits, ou formulées dans des compositions stables, c'est-à-dire en présence d'un agent chélateur d'ions métalliques. Les cellules végétales dédifférenciées lyophilisées peuvent être ré-extraites dans un mélange comprenant un chélateur d'ions métalliques. La lyophilisation des cellules végétales dédifférenciées permet avantageusement de séparer les actifs des charges de biopolymères, telles que les polysaccharides des parois cellulaires. Les cellules dédifférenciées peuvent être lyophilisées, puis remises en suspension dans un mélange comprenant un chélateur d'ions métalliques. Les débris cellulaires susceptibles d'être présents dans la suspension obtenue sont éliminés, par exemple par passage dans une seringue puis centrifugation. La suspension débarrassée des débris cellulaires peut être utilisée comme actif dérivé de cellules végétales dédifférenciées selon l'invention. Toute méthode d'extraction connue de l'homme du métier peut être utilisée pour préparer un extrait de cellules végétales dédifférenciées selon l'invention. Un « extrait », selon la présente invention, se rapporte à toute ou partie d'une fraction comprenant le contenu cellulaire des cellules dédifférenciées d'une plante de l'espèce Rosa sp. Le contenu cellulaire comprend de manière non limitative la fraction membranaire, la fraction cytoplasmique, la fraction cytosolique, les organelles telles que les mitochondries, les chloroplastes, les protoplastes et leur mélange. Un extrait peut-être total, c'est-à-dire qu'il contient la totalité des fractions cellulaires, et peut être obtenu par n'importe quelle méthode bien connue de l'homme du métier, par exemple, par broyage de la matière végétale au moyen de billes ou de grains de sable, congélation/décongélation, sonication, passage à la presse de French, lyse enzymatique ou chimique de la paroi végétale, etc.
A titre d'extrait convenant à l'invention, on peut citer les extraits aqueux, alcooliques ou utilisant un solvant organique, avantageusement un solvant organique alcoolique. Par solvant aqueux on entend tout solvant constitué totalement ou pour part d'eau.
On peut citer ainsi l'eau elle-même, les solvants hydro-alcooliques en toute proportion ou encore les solvants constitués d'eau et d'un composé comme le propylène glycol en toute proportion. Parmi les solvants alcooliques on peut citer notamment le méthanol, l'éthanol, le propanol, le propanediol, le butanol, le butanediol. Une méthode d'extraction convenant à l'invention peut comprendre une première étape de broyage des cellules végétales dédifférenciées, par exemple dans une solution aqueuse à froid, puis une deuxième étape d'élimination des particules en suspension de la solution aqueuse issue de la première étape, et une troisième étape de stérilisation de la solution aqueuse issue de la deuxième étape. Cette solution aqueuse correspond à un extrait. L'extrait obtenu peut ensuite être lyophilisé par toutes méthodes classiques de lyophilisation. On obtient ainsi une poudre qui peut être utilisée directement ou bien mélangée dans un solvant approprié avant utilisation. Les cellules végétales dédifférenciées de l'invention peuvent également être mises en oeuvre sous forme d'un lyophilisat. Un tel lyophilisat peut être obtenu par toute méthode de lyophilisation connue de l'homme de l'art.
Il est compris que ces différentes méthodes de traitement mettent en oeuvre la présence d'un chélateur d'ions métalliques, en particulier d'EDTA ou un de ses sels, à titre d'agent stabilisant d'une solution comprenant cellules dédifférenciées d'une plante de l'espèce Rosa sp.
Utilisations et procédés La présente invention se rapporte, dans un premier aspect, à l'utilisation d'un agent chélateur d'ions métalliques à titre d'agent stabilisant dans une composition comprenant des cellules dédifférenciées d'une plante de l'espèce Rosa sp., ou comprenant un extrait ou un lyophilisat de celles-ci.
Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, le procédé pour stabiliser une composition comprenant des cellules dédifférenciées d'une plante de l'espèce Rosa sp., ou comprenant un extrait ou un lyophilisat de celles-ci, comprend au moins une étape de mise en contact desdites cellules dédifférenciées, dudit extrait ou dudit lyophilisat de celles-ci, avec un agent chélateur d'ions métalliques.
Cette mise en contact des cellules végétales dédifférenciées avec l'agent chélateur d'ions métalliques est réalisée à n'importe quelle étape d'un procédé d'obtention de ladite composition, dudit extrait ou lyophilisat. Dans certains modes de réalisation, la mise en contact de l'agent chélateur d'ions métalliques avec les cellules végétales dédifférenciées est réalisée à l'étape finale d'un procédé pour l'obtention d'une composition non stabilisée de cellules dédifférenciées de l'espèce Rosa sp., ou d'un extrait ou d'un lyophilisat de celles-ci. A titre illustratif, l'agent chélateur d'ions métalliques peut être ajouté à la composition finale non stabilisée de cellules dédifférenciées d'une plante de l'espèce Rosa sp., ou à un extrait ou un lyophilisat de celles-ci, afin de disposer d'une composition stable ou stabilisée telle que définie dans la présente invention. Dans certains modes de réalisation, l'agent chélateur d'ions métalliques est mis en contact avec les cellules végétales dédifférenciées de Rosa sp. à une pluralité d'étapes, parmi les étapes comprises dans le procédé d'obtention de la composition desdites cellules dédifférenciées, ou d'un extrait ou d'un lyophilisat de celles-ci.
Dans certains modes de réalisation, le procédé comprend au moins les étapes suivantes : a) fournir une composition, sous forme liquide, comprenant des cellules végétales dédifférenciées d'une plante de l'espèce Rosa sp, ou comprenant un extrait ou un lyophilisat de celles-ci, et b) ajouter un agent chélateur d'ions métalliques à la composition sous forme liquide fournie à l'étape a). De manière générale, la composition sous forme liquide peut être choisie parmi une suspension et une solution. Dans un mode de réalisation préféré, les cellules végétales dédifférenciées d'une plante de l'espèce Rosa sp., un extrait ou un lyophilisat de celles-ci peuvent se présenter sous la forme d'une suspension. Dans un autre mode de réalisation préféré, un extrait ou un lyophilisat de cellules végétales dédifférenciées d'une plante de l'espèce Rosa sp. peuvent être mis en oeuvre sous la forme d'une solution.
De manière avantageuse, l'agent chélateur d'ions métalliques comprend un groupement mono-, di-, tri- ou tétra-amine, sur lequel est fixé de manière covalente un ou plusieurs groupement(s) dérivé(s) de l'acide acétique.
Ainsi, de manière avantageuse, l'agent chélateur est choisi parmi les composés de formule générale (I) : RRN-((CH2)2-NRR)x (formule I), pour laquelle x est égal à 1, 2, 3, 4 ; et pour laquelle R est avantageusement CH2-COOR', pour lequel R' est choisi parmi H et Na. Dans certains modes de réalisation, l'agent chélateur d'ions métalliques, pour la mise en oeuvre des utilisations ou des procédés conformes à la présente invention, est choisi parmi l'EDTA (acide éthylènediamine tetraacétique), le DTPA (acide diéthylène triamine penta acétique), le MGDA (acide méthylglycine diacétique), le GLDA (acide glutamique 10 diacétique), le NTA (acide nitrilotriacétique), le TTHA (acide triéthylène tetraaminehexaacétique), EDDS (acide éthylènediamine disuccinique) et leurs sels. Dans un mode de réalisation avantageux, l'agent chélateur d'ions métalliques est un sel sodique. Dans certains modes de réalisation, l'agent chélateur d'ions métalliques est un 15 dérivé de l'EDTA, par exemple un dérivé de 1'EDTA choisi parmi le sel disodique d'EDTA et un sel tetrasodique d'EDTA (par exemple le sel tetrasodium EDTA commercialisé sous la désignation Versene 220 Crystals Chelating Agent® par la Société Dow Chemicals). Dans certains modes de réalisation, l'agent chélateur d'ions métalliques est choisi parmi le sel de tetrasodium glutamate diacétate (C9H13N08, par exemple commercialisé sous la 20 désignation Dissolvine GL-47® par la Société Akzo Nobel), le composé trisodium éthylènediamine disuccinate (CioH13N208, par exemple commercialisé sous la désignation Natrlquest E30® par la Société Innospecactive Chemicals) ou encore le Dans un mode de réalisation préférentiel, l'agent chélateur d'ions métalliques est utilisé à une concentration variant de 0,01 % p/p (poids/poids) à 10 % p/p, de préférence à une 25 concentration variant de 0,1 % p/p à 5 % p/p, par rapport au poids total de ladite composition. De préférence, l'agent chélateur d'ions métalliques est l'EDTA, ou un de ses sels, et est utilisé à une concentration variant de 0,01 % p/p (poids/poids) à 10 % p/p, de préférence à une concentration variant de 0,1 % p/p à 5 % p/p, par rapport au poids total de ladite composition. 30 Compositions La présente invention se rapporte à une composition, notamment une composition à usage topique comprenant des cellules dédifférenciées d'une plante de l'espèce Rosa sp., ou comprenant un extrait ou un lyophilisat de celles-ci, ladite composition comprenant un agent chélateur d'ions métalliques. Une telle composition est préférentiellement une composition cosmétique, par exemple une composition cosmétique à usage topique. La présente invention se rapporte aussi à une composition stable de cellules dédifférenciées d'une plante de l'espèce Rosa sp., d'un extrait ou d'un lyophilisat de celles-ci, comprenant, à titre d'agent stabilisant, un agent chélateur d'ions métalliques. De manière avantageuse, l'agent chélateur d'ions métalliques est choisi parmi l'EDTA (acide ethylenediamine tetraacétique), le DTPA (acide diéthylène triamine penta acétique), le MGDA (acide méthylglycine diacétique), le GLDA (acide glutamique diacétique), le NTA (acide nitrilotriacétique), le TTHA (acide triéthylène tetraaminehexaacétique), l'EDDS (acide éthylènediamine disuccinique) et leurs sels. Selon un mode particulier de l'invention, l'agent chélateur d'ions métalliques peut être l'EDTA ou un de ses sels. De manière avantageuse, l'agent chélateur, et en particulier l'EDTA, ou un de ses sels, peut être présent à une concentration variant de 0,01 % p/p (poids/poids) à 10 % p/p, de préférence à une concentration variant de 0,1 % p/p à 5 % p/p, par rapport au poids total de ladite composition. Des cellules végétales dédifférenciées de l'invention, un lyophilisat ou un extrait de celles-ci, peuvent être formulés dans toutes compositions convenant à un usage cosmétique 20 ou pharmaceutique. Une composition selon l'invention comprend un milieu physiologiquement ou pharmaceutiquement acceptable. Après culture dans un milieu adapté, les cellules végétales dédifférenciées de l'invention sont récoltées par filtration et peuvent être lyophilisées ou extraites ou mises en 25 solution. Avantageusement, les cellules végétales dédifférenciées de l'invention, un extrait ou un lyophilisat de celles-ci peuvent être formulé(e)s ou mis(es) en solution dans de l'eau ou un solvant organique hydrosoluble, ou un mélange de ceux-ci. Un solvant organique hydrosoluble convenant à l'invention peut être choisi parmi 30 des composés hydrocarbonés en C2 à Cg, de préférence en C3 à C6, et comprenant de 2 à 6 groupes hydroxyles, de préférence de 3 à 5 groupes hydroxyles, et leurs mélanges. Parmi les solvants organiques hydrosolubles convenant à l'invention, on peut citer notamment les glycols ayant de 2 à 8 atomes de carbone tels que l'éthylène glycol, le propylène glycol ou 1,3-propanediol, le 1,3-butylène glycol, le dipropylène glycol, le glycérol, le sorbitol, et leurs mélanges De manière préférée, convient tout particulièrement à l'invention le propylène glycol ou 1,3-propanediol. Un solvant organique hydrosoluble peut constituer de 20 à 99,9 % en poids de la composition le contenant, de préférence de 30 à 90 %, de préférence de 40 à 80 %, et de préférence encore de 50 à 70 % en poids de la composition le contenant. Une eau convenant à l'invention peut être une eau thermale et/ou minérale, notamment choisie parmi l'eau de Vittel, les eaux du bassin de Vichy et l'eau de la Roche Posay. L'eau peut constituer peut constituer de 20 à 99,9 % en poids de la composition la contenant, de préférence de 30 à 90 %, de préférence de 40 à 80 %, et de préférence encore de 50 à 70 % en poids de la composition la contenant. Avantageusement, l'eau constitue jusqu'à 50 % en poids de la composition la contenant. Selon un mode de réalisation préféré, une préparation comprenant des cellules végétales dédifférenciées de l'invention, ou comprenant un extrait ou un lyophilisat de celles- ci, peut comprendre au moins un agent gélifiant hydrophile. Un tel agent permet d'éviter ou de réduire la décantation des cellules. Un agent gélifiant hydrophile convenant à l'invention peut être choisi parmi des polymères polysaccharidiques, et leurs mélanges. Au sens de la présente invention, on entend désigner par « polymère polysaccharidique » toute macromolécule glucidique formée par l'enchaînement d'un grand nombre de sucres élémentaires comme par exemple le xylose, le glucose, le galactose, le rhamnose, le mannose, le fucose, l'arabinose et leurs acides respectifs. Les polymères polysaccharidiques particulièrement adaptés à la présente invention sont de préférence choisis parmi les polymères de poids moléculaires allant de 10 à 250 kDa. Peuvent notamment être cités à titre de polymères polysaccharidiques convenant à l'invention la pectine ; la gomme de guar ; la cellulose ; la dextrine ; la maltodextrine ; l'amidon ; la gomme de Tara ; la gomme de Caroube ; l'inuline ; la gomme d'acacia ; la gomme d'arabique ; les polymères riches en fucose, tel que le Fucogel ; les carraghénanes ; la gomme de Konjac ; la gomme de xanthane ; le dextrane ; le chitosane ; la gomme Adragante ; la gomme de Ghatti ; la gomme de Karaya ; la gomme de tamarin ; l' agar-agar ; l'alginate ; la gomme de Gellane ; et leurs mélanges. On utilise de préférence la gomme xanthane, la gomme de caroube, la gomme guar, la gomme gellane, l'agar-agar, l'alginate, et leurs mélanges.
Selon un mode de réalisation préféré, une préparation comprenant des cellules végétales dédifférenciées de l'invention, ou comprenant un extrait ou un lyophilisat de celles-ci, peut comprendre une gomme de xanthane. Un agent gélifiant peut être présent à raison de 0,01 % à 10 % en poids, et de préférence de 0,1 % à 5 % en poids de polymère(s) polysaccharidique(s), par rapport au poids total de la composition. Selon un autre mode de réalisation préféré, une préparation comprenant des cellules végétales dédifférenciées de l'invention, ou comprenant un extrait ou un lyophilisat de celles-ci, peut comprendre au moins un sucre.
Un sucre convenant à l'invention peut être un monosaccharide en C4 à C6, et peut notamment être choisi parmi l'inositol, le mannitol, le glucose, le sucrose, le tréhalose, le maltose, le xylitol, le fructose, et leurs mélanges. La teneur sucre dans une composition de l'invention peut varier de 1 à 80 % en poids, par exemple de 5 à 75 % en poids, en particulier de 10 à 70 % en poids, par rapport au poids total de la composition. Selon un mode de réalisation préféré, les cellules végétales dédifférenciées de l'invention, un extrait ou un lyophilisat de celles-ci peuvent être formulé(e)s en présence d'eau, de 1,3-propanediol, d'un agent chélateur d'ions métalliques, et/ou de gomme xanthane. Les cellules végétales dédifférenciées de l'invention, un extrait ou un lyophilisat de celles-ci, peuvent être mis(es) en oeuvre en une quantité représentant de 0,001 % à 50 % en poids de matière sèche par rapport au poids total de la composition les contenant, et préférentiellement en une quantité représentant de 0,01 % à 30 % en poids de matière sèche par rapport au poids total de la composition. Dans un mode de réalisation préféré, les cellules végétales dédifférenciées de l'invention, un extrait ou un lyophilisat de celles-ci, peuvent être mis(es) en oeuvre en une quantité représentant de 0,1 % à 30 % en poids de matière sèche par rapport au poids total de la composition les contenant, et avantageusement en une quantité représentant de 0,1 % à 20 % en poids de matière sèche par rapport au poids total de la composition. Des cellules végétales dédifférenciées de Rosa sp. de l'invention, un lyophilisat ou un extrait de celles-ci, peuvent être formulé(e)s dans toute composition cosmétique, notamment destinée à être ingérée, injectée ou appliquée sur la peau, les cheveux, les ongles ou les muqueuses (buccale, jugale, gingivale, génitale, conjonctive). Selon le mode d'administration retenu, une composition de l'invention peut se présenter sous toutes les formes galéniques normalement utilisées.
Pour une application topique sur la peau, une composition peut avoir la forme notamment de solution aqueuse ou huileuse ou de dispersion du type lotion ou sérum, d'émulsions de consistance liquide ou semi-liquide du type lait, obtenues par dispersion d'une phase grasse dans une phase aqueuse (émulsion huile dans eau ou H/E) ou inversement (émulsion eau dans huile ou E/H), ou de suspensions ou émulsions de consistance molle du type crème ou gel aqueux ou anhydres, ou encore de microcapsules ou micro-particules, ou de dispersions vésiculaires de type ionique et/ou non ionique. Ces compositions sont préparées selon les méthodes usuelles. Ces compositions peuvent également consister en des préparations solides constituant des savons ou des pains de nettoyage ou être conditionnées sous forme de composition pour aérosol comprenant également un agent propulseur sous pression. Une composition destinée à être appliquée sur les cheveux peut se présenter sous forme de solutions aqueuses, alcooliques ou hydroalcooliques, ou sous forme de crèmes, de gels, d'émulsions, de mousses ou encore sous forme de compositions pour aérosol comprenant également un agent propulseur sous pression. Une telle composition peut être présentée sous forme d'une composition pour le soin capillaire, tel qu'un shampooing, une lotion de mise en plis, une lotion traitante, une crème ou un gel coiffant, une composition de teintures (notamment teintures d'oxydation), un shampooing colorant, une lotion restructurante, une composition de permanente (notamment une composition pour le premier temps d'une permanente), une lotion ou un gel antichute. Pour une administration en sous-cutanée ou en intradermique, une composition peut se présenter sous forme de lotion aqueuse, huileuse ou sous forme de sérum. Une composition convenant à l'ingestion peut se présenter sous forme de capsules, de granulés, de sirops ou de comprimés.
Les quantités des différents constituants des compositions selon l'invention sont celles classiquement utilisées dans les domaines considérés. Lorsqu'une composition est une émulsion, la proportion de la phase grasse peut aller de 5 % à 80 % en poids, et de préférence de 5 % à 50 % en poids par rapport au poids total de la composition. Les huiles, les cires, les émulsionnants et les co-émulsionnants utilisés dans une composition sous forme d'émulsion sont choisis parmi ceux classiquement utilisés dans le domaine cosmétique. L'émulsionnant et le co-émulsionnant peuvent être présents, dans une composition, en une proportion allant de 0,3 % à 30 % en poids, et de préférence de 0,5 à 20 % en poids par rapport au poids total de la composition.
Lorsqu'une composition est une solution ou un gel huileux, la phase grasse peut représenter plus de 90 % du poids total de la composition. De façon connue, une composition cosmétique telle que définie par la présente invention peut comprendre également des adjuvants habituellement utilisés dans le domaine cosmétique, tels que des gélifiants hydrophiles ou lipophiles, des additifs hydrophiles ou lipophiles, des conservateurs, des antioxydants, des solvants, des parfums, des charges, des filtres, des absorbeurs d'odeur et des matières colorantes. Les quantités de ces différents adjuvants sont celles classiquement utilisées dans le domaine cosmétique, et sont comprises, par exemple, entre 0,01 % et 10 % du poids total de la composition. Ces adjuvants, selon leur nature, peuvent être introduits dans la phase grasse, dans la phase aqueuse et/ou dans les sphérules lipidiques. Comme huiles ou cires utilisables dans l'invention, on peut citer les huiles minérales (huile de vaseline), les huiles végétales (fraction liquide du beurre de karité, huile de tournesol), les huiles animales (perhydrosqualène), les huiles de synthèse (huile de Purcellin), les huiles ou cires siliconées (cyclométhicone) et les huiles fluorées (perfluoropolyéthers), les cires d'abeille, de carnauba ou paraffine. On peut ajouter à ces huiles des alcools gras et des acides gras (acide stéarique). Comme émulsionnants utilisables dans l'invention, on peut citer par exemple le stéarate de glycérol, le polysorbate 60 et le mélange de PEG-6/PEG-32/Glycol Stéarate vendu sous la dénomination de TefoseR 63 par la société Gattefosse. Comme solvants utilisables dans l'invention, on peut citer les alcools inférieurs, notamment l'éthanol et l'isopropanol, le propylène glycol. Comme gélifiants hydrophiles utilisables dans l'invention, on peut citer les polymères carboxyvinyliques (carbomer), les copolymères acryliques tels que les copolymères d'acrylates/alkylacrylates, les polyacrylamides, les polysaccharides tels que l'hydroxypropylcellulose, les gommes naturelles, de préférence le xanthane, et les argiles, et, comme gélifiants lipophiles, on peut citer les argiles modifiées comme les bentones, les sels métalliques d'acides gras comme les stéarates d'aluminium et la silice hydrophobe, éthylcellulose, polyéthylène.
Utilisation cosmétique Selon un mode préféré, une composition selon la présente invention, peut faire l'objet d'une utilisation cosmétique à titre d'agent actif pour le soin de la peau âgée ou des cheveux âgés.
Par exemple, une composition selon la présente invention peut être mise en oeuvre pour traiter et/ou prévenir un défaut esthétique consécutif à un défaut du renouvellement tissulaire de la peau âgée ou des cheveux âgés chez un individu en ayant besoin ; pour renforcer, améliorer, voire restaurer, un aspect jeune de la peau et/ou de la chevelure.
Cette composition peut être administrée, notamment, par voie orale, sous-cutanée, intradermique ou topique, et de préférence par voir topique. Cette composition peut être administrée de façon journalière par exemple, à raison, par exemple, d'une administration unique par jour ou d'une administration deux fois par jour, par exemple une fois le matin et une fois le soir.
Une composition conforme à la présente invention peut être formulée, par exemple, sous une forme adaptée à une administration topique, comme par exemple sous la forme d'un gel, d'une lotion, de crème, de mousse. Par ailleurs, une composition conforme à l'invention peut être formulée, par exemple, sous une forme adaptée à une administration orale, comme par exemple, sous la forme de gélule, de dragée, d'émulsion, de comprimé, de capsule ou d'ampoule buvable. Une quantité efficace d'un actif de l'invention peut être administrée en une dose unique par jour ou en doses fractionnées sur la journée, par exemple deux à trois fois par jour. Une composition cosmétique selon l'invention peut avantageusement être mise en oeuvre sur une période de temps variant d'une semaine à plusieurs semaines, voire plusieurs mois, cette période pouvant par ailleurs être répétée après des périodes de non traitement, pendant plusieurs mois voire plusieurs années. A titre d'exemple, l'administration d'un actif selon l'invention peut être répétée, par exemple, 2 à 3 fois par jour, ou plus, et généralement sur une durée prolongée d'au moins 4 semaines, voire 4 à 15 semaines, avec le cas échéant une ou plusieurs périodes d'interruption.
Au sens de l'invention, on entend par « peau » toute la surface cutanée d'un individu, y compris le cuir chevelu. Au sens de l'invention, on entend par « cheveu » un ensemble comprenant la tige pilaire et le follicule pileux. Par « peau âgée », on entend un état esthétique général de la peau résultant du vieillissement chronologique et/ou du vieillissement photo-induit. Plus particulièrement, la composition selon la présente invention vise à prévenir et/ou réduire et/ou traiter des signes cutanés du vieillissement.
Par « signes cutanés du vieillissement », on entend toutes les modifications de l'aspect extérieur de la peau dues au vieillissement qu'il soit d'origine chronologique et/ou photo-induit. A titre d'exemple de ces modifications considérées dans l'invention, on peut citer une surface peu homogène et moins lisse, un épiderme aminci et/ou moins performant en terme de fonction barrière (qui se répare moins vite suite à des agressions), les rides et ridules, la peau flétrie, le manque d'élasticité et/ou de tonus de la peau, l'amincissement du derme et/ou la dégradation des fibres de collagène, ce qui entraîne l'apparence de peau molle et ridée. On entend également toutes les modifications internes de la peau qui ne se traduisent pas systématiquement par un aspect extérieur modifié, comme par exemple toutes les dégradations internes de la peau, et plus particulièrement la dégradation des fibres d'élastine, ou fibres élastiques, consécutives à une exposition aux rayonnements ultra-violets. En particulier, les signes cutanés du vieillissement visés par l'invention sont choisis parmi un amincissement de la peau, une perte de fermeté, une perte d'élasticité, une perte de densité, ou une perte de tonicité de la peau, une sécheresse de la peau, une altération de l'aspect de surface de la peau, une apparition d'un microrelief marqué de la peau, une apparition de rugosité, une formation et/ou une présence de ridules et/ou de rides, une altération de l'éclat du teint de la peau, un aspect papyracé de la peau, une altération de l'odeur de la peau, un affaissement de la peau, ou un flétrissement de la peau.
Les altérations de la qualité du cheveu apparaissent avec l'âge consistent en particulier à un changement d'aspect de la fibre (cheveu fin, terne, sans tenue, mou), sans éclat, et/ ou grisonnant, plus facilement cassant, ainsi qu'une perte de densité capillaire. La présente composition vise ainsi à restaurer/maintenir une bonne densité capillaire, et/ou à améliorer la qualité de la chevelure et/ou des fibres capillaires, et en particulier les cheveux vieillis. Plus particulièrement, les cellules végétales dédifférenciées de l'invention, un extrait ou un lyophilisat de celles-ci, permettent de prévenir une perte de densité capillaire et de protéger, renforcer ou améliorer la qualité des cheveux vieillis afin de conférer un aspect jeune et dense à une chevelure.30 EXEMPLES EXEMPLE 1 : Stabilité d'une composition comprenant un extrait végétal de cellules dédifférenciées de rose en présence d'un chélateur d'ions métalliques 1) Culture de cellules végétales dédifférencies de rosier (rose Lancôme) à partir de tissu végétal. Des feuilles d'un rosier (Rose Lancôme) ont été décontaminées par les techniques habituelles de l'homme de l'art, et placées sur le milieu de culture suivant :MICRO NUTRIMENTS mg /1 NH4NO3 1650 KNO3 1900 CaC12 , 2H20 (CX41) 440 MgSO4 180,8 KH2PO4 170 MICRO NUTRIMENTS mg /1 MnSO4, 4H20 22,3 ZnSO4 , 7H20 8,6 KI 0,83 Na2Mo04 , 2H20 0,25 CuSO4 , 5H20 0,025 Na2 EDTA, 2H20 37,3 FeSO4 , 7H20 27,8 VITAMINES mg /1 MYO - INOSITOL 100 NICOTINIC ACID 0,5 PYRIDOXINE HC1 ( B6 ) 0,5 THIAMINE HC1 ( B1 ) 0,1 HORMONES mg /1 Acide naphtalène acétique 10 Kinétine 0,06 SOURCE CARBONEE mg /1 Saccharose 30000 Les hormones utilisées sont des hormones naturellement présentes chez les végétaux.
Suite aux repiquages successifs, des cellules végétales dédifférenciées cultivables en fermenteur et donc industrialisables ont été obtenues. Les paramètres utilisés pour le contrôle de la culture en bioréacteur sont les suivants : Température : de 24°C à 30°C, et préférentiellement 26-27°C Aération : 10 % de pression partielle en oxygène (p02), régulée par air stérile entrant (VVM : Volume d'air / volume de fermenteur/ Minute) et/ou par agitation en évitant toute contrainte due à des forces de cisaillement sur les cellules. La production par culture en lots (batch) dure de 8 à 14 jours. Les cellules sont alors récoltées par filtration sur toile de 80jam de porosité. 2) Traitement des différents lots de cellules végétales dédifférenciées de rosier Les cellules dédifférenciées de Rose Lancôme obtenues dans la partie 1) sont séparées en 2 lots distincts. Le lot n° 1 (« bl ») de cellules dédifférenciées est soumis à une étape de congélation, à -20°C (sur carboglace), puis à une première étape de décongélation lente à 4°C pendant une nuit (12 heures) puis une deuxième étape de décongélation au bain-marie à 3040°C pendant 8 heures. Après ces étapes de congélation/décongélation les cellules végétales dédifférenciées sont soumises à une étape de re-suspension du lot décongelé dans un mélange comprenant de l'eau, en présence de 1,3 propane-diol (60 % en poids du mélange) et de gomme xanthane (1 % en poids du mélange), à raison de 10 % en poids de biomasse fraîche par rapport au poids total de la composition. Au sens du procédé, la combinaison des étapes de congélation puis de décongélation peut aussi être désignée étape de « lyophilisation par congélation puis décongélation ». Le lot n° 2 (« b2 ») de cellules dédifférenciées, n'ayant pas subi d'étapes de congélation/décongélation, est formulé dans un mélange d'eau, en présence de 1,3 propane- diol (60 % en poids du mélange), de gomme xanthane (1 % en poids du mélange) et d'un sel d'EDTA disodique (0.25 % en poids du mélange), à raison de 10 % en poids de biomasse fraîche par rapport au poids total de la composition. L'EDTA est connu pour être un chélateur très puissant des ions calciums, zinc, magnésium, cuivre et manganèse, ainsi que de certaines espèces ferriques. 3) Analyse de l'aspect visuel et de la texture des solutions obtenues selon les lots n°1 et no2 L'aspect des solutions a été effectué visuellement (coloration) et par microscopie optique (agrégation) sur des solutions à TO (immédiatement après re-suspension du lyophilisat), 1 jour (T-1j), 15 jours (T-15j), 1 mois (T-30j) et 2 mois (T-60j) après resuspension du lyophilisat et conservation à température ambiante à l'abri de la lumière. L'étape de conservation a aussi été testée à d'autres températures, telles que 4°C, 40°C ou 45°C.
Les observations par microscopie optique ont été réalisées en lumière non polarisée et en lumière polarisée (Leica DM LB2, Leica Microsystems, Allemagne). 4) Résultats 4.1) Aspects des solutions comprenant des cellules dédifférenciées de roses à température ambiante Une composition comprenant des cellules dédifférenciées de roses selon le lot n°1 se présente, juste après sa préparation, sous la forme d'un gel translucide dans lequel sont observées des cellules de couleur beiges/marrons en suspension. Cette composition reste stable jusqu'à T-15j après sa préparation et présente un jaunissement important à T-30j et T-60j, lorsqu'elle est conservée à température ambiante (voir Tableau 1). En revanche, en présence du sel disodique d'EDTA, la composition selon le lot n°2 se présente sous la forme d'un gel translucide avec des cellules blanches, voire de couleur blanc cassé clair, juste après fabrication. La survenue du jaunissement est à la fois moins intense et retardée au cours du temps, puisque une légère coloration jaunâtre n'est observée qu'au bout de T-30j (voir Tableau 1). Tableau 1 : Appréciation de l'aspect visuel (coloration) des solutions des lots n° 1 et n° 2 à température ambiante. Lot n° Coloration T-Oj T-lj T-15j T-30j T-60j 1 Gel translucide avec Idem T-Oj Idem T-Oj Jaunit Jaunit cellules beige/marron en suspension 2 Gel translucide avec Idem T-Oj Idem T-Oj Jaunit très Jaunit très cellules blanches / blanc légèrement légèrement cassé en suspension Une observation à nu des compositions de cellules dédifférenciées de roses selon les lots n°1 et n°2 sont exemptes d'agrégats à T-Oj (voir Tableau 2). Quelques micro-agrégats sont formés dans le lot de cellules dédifférenciées de rose n°2, dès le 1" jour de conservation (T-1j) à température ambiante (voir Tableau 2). Cependant, alors que le nombre des agrégats augmente considérablement dans la composition selon le lot n°1 après 15, 30 et 60 jours de conservation (T-15j, T-30j et T-60j), la composition selon le lot n°2, qui contient l'agent chélateur d'ions métalliques EDTA disodique, ne présente aucun agrégat, même après 60 jours de conservation à température ambiante (T-60j) (voir Tableau 2). Tableau 2 : Appréciation de la texture, par la présence d'agrégats, des solutions des lots n° 1 et n° 2 à température ambiante. Lot n° Agrégats T-Oj T-lj T-15j T-30j T-60j 1 Aucuns Quelques Quelques Quelques Quelques agrégats agrégats agrégats agrégats 2 Aucuns Aucuns Aucuns Aucuns Aucuns L'observation en microscopie optique confirme les observations effectuées à nu. En effet, une composition selon le lot n°1, c'est-à-dire comprenant des cellules dédifférenciées de rose ayant subi des étapes de congélation/décongélation sans ajout de chélateur d'ions métalliques, révèle la présence d'agrégats (Figure 1). A noter que ces agrégats sont visibles aussi bien par microscopie en lumière non polarisée (Figure 1A) qu'en lumière polarisée (Figure 1B). En revanche, les agrégats sont inexistants lorsque les cellules végétales dédifférenciées de rose sont mises en suspension dans une solution comprenant un agent chélateur des ions métalliques (sel d'EDTA disodique ; non montré). 4.2) Observations des agrégats dans des solutions comprenant des cellules dédifférenciées de rose à des températures de 4°C, 40°C et 45°C On observe la formation d'agrégats dans le lot n°1, à toutes les températures testées, dès un jour après fabrication (T-1j).
Pour le lot n°2, il n'a pas été observé d'agrégats, pour les trois températures de conservation testées, aux temps testés (T-lj et T-15j). 5) Conclusions Il semble ainsi que le sel d'EDTA disodique est capable de conférer une stabilité à une composition comprenant des cellules végétales dédifférencies de rosier. La présence d'EDTA disodique dans la composition améliore donc l'homogénéité, empêchant la formation d'agrégats de matière végétale, et permet en outre de maintenir la couleur initiale blanc/blanc cassé des cellules de roses, lors du processus de conservation ou de stockage de la composition dans le temps. EXEMPLE 2 : Exemples de formulations 1) Crème de jour Ingrédients % (poids/poids) Hydroxyde de sodium 0,16995 Adénosine 0,04 EDTA disodique 0,025 Conservateur 0,7 Huile minérale 2 Beurre de karité (Butyrospermum parkii) 1,5 Extrait de rose conforme au lot n°2 de l'exemple 1 10 Polyisobutène hydrogéné 3 Gomme de xanthane 0,2 Polyacrylate de sodium 0,6 Diméthicone 4 Eau Qsp 100 Glycérine 5 Acide stéarique 1,5 2) Lotion Ingrédients % (poids/poids) Hydroxyde de sodium 0,114 EDTA disodique 0,1 Conservateur 0,7 Extrait de rose conforme au lot n°2 de l'exemple 1 1 Gomme de xanthane 0,02 Eau Qsp 100 Glycérine 3 Propylène glycol 5 Huile de ricin hydrogénée PEG-60 0,6 L'application topique d'une crème de jour ou d'une lotion conforme à la présente invention procure un effet bénéfique dans le traitement et/ou la prévention d'un défaut esthétique consécutif à un défaut du renouvellement tissulaire de la peau âgée ou des cheveux âgés, et/ou dans le renforcement, l'amélioration, voire la restauration d'un aspect jeune de la peau et/ou de la chevelure.

Claims (11)

  1. REVENDICATIONS1. Utilisation d'un agent chélateur d'ions métalliques à titre d'agent stabilisant dans une composition comprenant des cellules dédifférenciées d'une plante de l'espèce Rosa sp., ou comprenant un extrait ou un lyophilisat de celles-ci.
  2. 2. Procédé pour stabiliser une composition comprenant des cellules dédifférenciées d'une plante de l'espèce Rosa sp., un extrait ou un lyophilisat de celles-ci, lequel procédé comprend au moins une étape de mise en contact desdites cellules dédifférenciées, dudit extrait ou dudit lyophilisat de celles-ci, avec un agent chélateur d'ions métalliques.
  3. 3. Procédé selon la revendication 2 comprenant au moins les étapes suivantes : a) fournir une composition, sous forme liquide ou gélifiée, de cellules végétales dédifférenciées d'une plante de l'espèce Rosa sp, d'un extrait ou d'un lyophilisat de celles-ci, et b) ajouter un agent chélateur d'ions métalliques à la composition sous forme liquide ou gélifiée fournie à l'étape a).
  4. 4. Utilisation selon la revendication 1 ou procédé selon l'une des revendications 2 et 3, dans lequel l'agent chélateur d'ions métalliques est choisi parmi 1'EDTA (acide ethylenediamine tetraacétique), le DTPA (acide diéthylène triamine penta acétique), le MGDA (acide méthylglycine diacétique), le GLDA (acide glutamique diacétique), le NTA (acide nitrilotriacétique), le TTHA (acide triéthylène tetraaminehexaacétique), EDDS (acide éthylènediamine disuccinique) et leur sels.
  5. 5. Utilisation selon la revendication 1 ou procédé selon l'une des revendications 2 à 4, dans lequel l'agent chélateur d'ions métalliques est 1'EDTA ou un de ses sels.
  6. 6. Utilisation selon la revendication 1 ou procédé selon l'une des revendications 2 à 5, dans lequel l'agent chélateur d'ions métalliques, de préférence 1'EDTA ou un de ses sels, est utilisé à une concentration variant de 0,01 % p/p à 10 % p/p, de préférence à une concentration variant de 0,1 % p/p à 5 % p/p, par rapport au poids total de ladite composition.
  7. 7. Composition comprenant des cellules dédifférenciées d'une plante de l'espèce Rosa sp., ou comprenant un extrait ou un lyophilisat de celles-ci, ladite composition comprenant un agent chélateur d'ions métalliques.
  8. 8. Composition selon la revendication 7, dans laquelle l'agent chélateur d'ions métalliques est choisi parmi 1'EDTA (acide ethylenediamine tetraacétique), le DTPA (acide diéthylène triamine penta acétique), le MGDA (acide méthylglycine diacétique), le GLDA(acide glutamique diacétique), le NTA (acide nitrilotriacétique), le TTHA (acide triéthylène tetraaminehexaacétique), EDDS (acide éthylènediamine disuccinique) et leur sels.
  9. 9. Composition selon la revendication 7, dans laquelle l'agent chélateur d'ions métalliques est 1'EDTA ou un de ses sels.
  10. 10. Composition selon l'une des revendications 7 à 9, dans laquelle l'agent chélateur d'ions métalliques, de préférence 1'EDTA ou un de ses sels, est présent à une concentration variant de 0,01 % p/p à 10 % p/p, de préférence à une concentration variant de 0,1 % p/p à 5 % p/p, par rapport au poids total de ladite composition.
  11. 11. Utilisation cosmétique d'une composition selon l'une des revendications 7 à 10 à titre d'agent actif pour le soin de la peau âgée ou des cheveux âgés.
FR1356654A 2013-07-05 2013-07-05 Stabilisation des cellules dedifferenciees de rose. Active FR3007982B1 (fr)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR1356654A FR3007982B1 (fr) 2013-07-05 2013-07-05 Stabilisation des cellules dedifferenciees de rose.
PCT/IB2014/062860 WO2015001524A2 (fr) 2013-07-05 2014-07-04 Stabilisation de cellules différenciées issues de la rose

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR1356654A FR3007982B1 (fr) 2013-07-05 2013-07-05 Stabilisation des cellules dedifferenciees de rose.

Publications (2)

Publication Number Publication Date
FR3007982A1 true FR3007982A1 (fr) 2015-01-09
FR3007982B1 FR3007982B1 (fr) 2015-08-21

Family

ID=49322570

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FR1356654A Active FR3007982B1 (fr) 2013-07-05 2013-07-05 Stabilisation des cellules dedifferenciees de rose.

Country Status (2)

Country Link
FR (1) FR3007982B1 (fr)
WO (1) WO2015001524A2 (fr)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR3075641A1 (fr) * 2017-12-21 2019-06-28 L'oreal Utilisation cosmetique d’un milieu de culture acellulaire a titre d’agent actif pour le soin des matieres keratiniques

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3135341B1 (fr) 2015-08-27 2019-02-20 Latvijas Universitate Compositions cosmétiques de blanchiment de la peau contenant des extraits dérivés de propagation in vitro d'hypericum hirsutum

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1064932A1 (fr) * 1999-07-02 2001-01-03 L'oreal Utilisation de cellules végétales dédifférenciées
EP1985280A2 (fr) * 2007-04-27 2008-10-29 Mibelle AG Produit cosmétique destiné à l'application topique en vue de la protection et du renouvellement de cellules souches de la peau, qui résulte de cellules végétales dédifférenciées
FR2926021A1 (fr) * 2008-01-03 2009-07-10 Oreal Utilisation de derives c-glycoside a titre d'actif vasculaire
US20090208544A1 (en) * 2002-03-20 2009-08-20 Rachid Ennamany Method of obtaining phytoalexins
US20110165610A1 (en) * 2007-03-14 2011-07-07 Tony Baker Compositions, systems, and methods for preservation and/or stabilization of a cell and/or macromolecule

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2768622B1 (fr) 1997-09-22 1999-11-26 Oreal Extrait de rosacees en tant qu'antagoniste de bradykinine
FR2864446B1 (fr) 2003-12-29 2006-03-03 Secma Biotechnologies Marines Utilisation dans une composition cosmetique ou pharmaceutique d'au moins un lyiphilisat de cellules vegetales dedifferenciees afin de depigmenter et/ou eclaircir, de proteger et de regenerer l'epiderme
KR101100867B1 (ko) 2008-05-14 2012-01-02 주식회사 운화 주목의 형성층 또는 전형성층 유래 식물줄기세포주를 유효성분으로 함유하는 항산화, 항염증 또는 항노화용 조성물
RU2500386C2 (ru) 2008-06-13 2013-12-10 Унхва Корпорейшн ПРОТИВОВОЗРАСТНАЯ ИЛИ АНТИОКСИДАНТНАЯ КОМПОЗИЦИЯ, СОДЕРЖАЩАЯ В КАЧЕСТВЕ АКТИВНОГО ИНГРЕДИЕНТА ЛИНИЮ РАСТИТЕЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК, ПОЛУЧЕННЫХ ИЗ КАМБИЯ Panax ginseng, ВКЛЮЧАЯ ЖЕНЬШЕНЬ ДИКОГО ТИПА И ЖЕНЬШЕНЬ КОРЕЙСКИЙ
DE102009027199A1 (de) 2009-06-25 2010-12-30 Henkel Ag & Co. Kgaa UV-Schutz-Kosmetikum
DE102009027361A1 (de) 2009-06-30 2011-01-05 Henkel Ag & Co. Kgaa Haarschutz-Kosmetikum II

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1064932A1 (fr) * 1999-07-02 2001-01-03 L'oreal Utilisation de cellules végétales dédifférenciées
US20090208544A1 (en) * 2002-03-20 2009-08-20 Rachid Ennamany Method of obtaining phytoalexins
US20110165610A1 (en) * 2007-03-14 2011-07-07 Tony Baker Compositions, systems, and methods for preservation and/or stabilization of a cell and/or macromolecule
EP1985280A2 (fr) * 2007-04-27 2008-10-29 Mibelle AG Produit cosmétique destiné à l'application topique en vue de la protection et du renouvellement de cellules souches de la peau, qui résulte de cellules végétales dédifférenciées
FR2926021A1 (fr) * 2008-01-03 2009-07-10 Oreal Utilisation de derives c-glycoside a titre d'actif vasculaire

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
"AkzoNobel Functional Chemicals Chelates", 1 April 2010 (2010-04-01), XP055115797, Retrieved from the Internet <URL:https://www.akzonobel.com/dissolvinegl/system/images/AkzoNobel_Gl_Technical_brochure_tcm80-42056.pdf> [retrieved on 20140429] *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR3075641A1 (fr) * 2017-12-21 2019-06-28 L'oreal Utilisation cosmetique d’un milieu de culture acellulaire a titre d’agent actif pour le soin des matieres keratiniques

Also Published As

Publication number Publication date
FR3007982B1 (fr) 2015-08-21
WO2015001524A3 (fr) 2015-04-23
WO2015001524A2 (fr) 2015-01-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CA2395283C (fr) Utilisation d&#39;un extrait d&#39;au moins un vegetal du genre vaccinium comme agent anti-glycation
FR2814950A1 (fr) Utilisation d&#39;au moins un extrait d&#39;au moins un vegetal de la famille des ericaceae, dans des compositions destinees a traiter les signes cutanes du vieillissement
EP3370833B1 (fr) Extrait synergique de palmaria palmata
EP2986347B1 (fr) Applications cosmetiques de lactobacillus pentosus
WO2005072698A1 (fr) Utilisation d&#39;un extrait d&#39;acmella oleracea pour son effet botox like dans une composition cosmetique anti-rides
FR3018191A1 (fr) Utilisations cosmetiques de la swertiamarine
FR2915897A1 (fr) Composition cosmetique comprenant un extrait d&#39;adenium obesum, son utilisation et une methode de soin cosmetique en comportant l&#39;application.
EP3173065B1 (fr) Extrait alcoolique de parties aériennes de solidago virgaurea subsp. alpestris, son procédé d&#39;obtention, et composition cosmétique ou dermatologique le contenant
EP3980123B1 (fr) Extrait de graines de moringa peregrina riche en 2,5-diformylfuran, son procédé d&#39;obtention et son utilisation dans des compositions cosmétiques
FR2985423A1 (fr) Utilisation cosmetique de cellules vegetales dedifferenciees.
FR3007982A1 (fr) Stabilisation des cellules dedifferenciees de rose.
EP3134101B1 (fr) Utilisation de cellules vegetales de bougainvillier pour l&#39;encapsulation d&#39;ingredients actifs
FR3104416A1 (fr) Extraits de bourgeons de roses
FR3097762A1 (fr) Utilisation d&#39;un extrait hydro-alcoolique d&#39;Onagre pour hydrater la peau et améliorer la fonction barrière
EP1174120B1 (fr) Utilisation d&#39;un extrait d&#39;une Iridacée dans une composition destinée à stimuler les défenses immunitaires
FR2994843A1 (fr) Utilisation cosmetique de cellules vegetales dedifferenciees
FR2809012A1 (fr) Extrait de cellules d&#39;au moins un vegetal de la famille pontederiaceae et son utilisation comme agent anti-pollution
FR3113236A1 (fr) Fraction purifiée de fucoïdanes pour la préparation de compositions cosmétiques et/ou dermatologiques anti-age.
FR3060999B1 (fr) Utilisation cosmetique de l&#39;arthrofactine
FR3076461A1 (fr) Composition cosmétique de prévention active des signes de l’âge.
EP1427387B1 (fr) Produit cosmetique pour les soins de la peau
WO2019077268A1 (fr) Composition cosmétique de prévention active des signes de l&#39;âge
FR3032115B1 (fr) Composition comprenant une association de niosomes et de derive c-glycoside, d&#39;extrait de crocus sativus et/ou d&#39;extrait de fleur de crocus sativus, pour reguler la pigmentation cutanee
FR2859102A1 (fr) Utilisation d&#39;un extrait de rhodiola crenulata par voie topique
FR3105259A1 (fr) Cellules végétales dédifférenciées non élicitées deLavandula angustifolia, ses extraits et ses utilisations cosmétiques

Legal Events

Date Code Title Description
PLFP Fee payment

Year of fee payment: 4

PLFP Fee payment

Year of fee payment: 5

PLFP Fee payment

Year of fee payment: 6

PLFP Fee payment

Year of fee payment: 8

PLFP Fee payment

Year of fee payment: 9

PLFP Fee payment

Year of fee payment: 10

PLFP Fee payment

Year of fee payment: 11

PLFP Fee payment

Year of fee payment: 12