FR3007945A1 - EGG VACCUM PRESERVATION METHOD OF EPHESTIA KUEHNIELLA - Google Patents
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Abstract
L'invention concerne une méthode de conservation et/ou de conditionnement d'œufs d'Ephestia Kuehniella dans laquelle les œufs d'Ephestia Kuhniella sous atmosphère contrôlée, dans un contenant hermétique, et de préférence sous vide, ainsi que des œufs d'Ephestia Kuehniella susceptibles d'être obtenus selon ladite méthode et un kit comprenant un contenant hermétique, lequel contenant hermétique comprend des œufs d'Ephestia Kuehniella susceptibles d'être obtenus selon la méthode de l'invention. L'invention a aussi pour objet l'utilisation d'œufs d'Ephestia Kuehniella susceptibles d'être obtenus selon la méthode de l'invention pour nourrir des prédateurs.The invention relates to a method for preserving and / or conditioning eggs of Ephestia Kuehniella in which the eggs of Ephestia Kuhniella under a controlled atmosphere, in an airtight container, and preferably under vacuum, as well as eggs of Ephestia Kuehniella obtainable by said method and a kit comprising a hermetic container, which hermetic container comprises eggs of Ephestia Kuehniella obtainable according to the method of the invention. The subject of the invention is also the use of Ephestia Kuehniella eggs that can be obtained according to the method of the invention for feeding predators.
Description
L'invention concerne une méthode de conservation et/ou de conditionnement d'oeufs d'Ephestia Kuehniella dans laquelle les oeufs d'Ephestia Kuhniella sont maintenus sous atmosphère contrôlée, dans un contenant hermétique, et de préférence sous vide, ainsi que des oeufs d'Ephestia Kuehniella susceptibles d'être obtenus selon ladite méthode et un kit comprenant un contenant hermétique, lequel contenant hermétique comprend des oeufs d'Ephestia Kuehniella susceptibles d'être obtenus selon la méthode de l'invention. L'invention a aussi pour objet l'utilisation d'oeufs d'Ephestia Kuehniella susceptibles d'être obtenus selon la méthode de l'invention pour nourrir des prédateurs. L'agriculture et la sylviculture font régulièrement appel à des agents de contrôle biologiques pour protéger les productions végétales des ravageurs, des agents pathogènes ou des plantes adventices. Les agents de contrôle biologiques sont le plus souvent des organismes naturels antagonistes de ces ravageurs, tels que des phytophages (dans le cas d'une plante adventice), des parasitoïdes (arthropodes...), des prédateurs (nématodes, arthropodes, vertébrés, mollusques, chauves-souris...) ou des agents pathogènes (virus, bactéries, champignons...). Cette démarche nécessite de réintroduire l'agent de contrôle biologique, sous forme de prédateurs vivants et en nombre suffisant pour atteindre l'effet recherché. L'alimentation des agents de contrôle biologique est par conséquent déterminante dans le procédé d'élevage envisagé. Les oeufs d'Ephestia Kuehniella sont couramment utilisés pour l'élevage des agents de contrôle biologiques, en particulier de prédateurs (Macrolophus, Orius, coccinelles) ou de parasitoïdes (Trichogrammatidae). On sait donc déjà produire Ephestia Kuehniella de façon industrielle pour l'élevage d'entomophages. Cette proie de substitution est en outre de manutention facile du fait que les oeufs sont tous individualisés et se présentent sous forme d'une "poudre". Ephestia Kuehniella, ou pyrale de la farine, est un insecte de l'ordre des lépidoptères de 20 à 25 mm d'envergure. L'insecte adulte a une petite tête globuleuse, ses ailes antérieures sont grisâtres et satinées, avec des points noirs, et ses ailes postérieures, finement frangées, sont blanchâtres. La ponte débute juste après l'accouplement et peut produire 200 à 300 oeufs blancs et de forme elliptique. Ephestia Kuehniella vit jusqu'à deux semaines, même si son métabolisme est susceptible de changer avec la température. En effet, Ephestia Kuehniella peut rester vivante plus longtemps à des températures de -10°C voire -15°C, grâce à un phénomène d'hibernation. Il est donc possible de prolonger l'espérance de vie de population adultes d'Ephestia Kuehniella en les conservant au froid, puis de les placer dans des conditions appropriées pour la ponte lorsque cela est nécessaire.The invention relates to a method for preserving and / or conditioning eggs of Ephestia Kuehniella in which the eggs of Ephestia Kuhniella are kept under a controlled atmosphere, in an airtight container, and preferably in a vacuum, as well as in eggs. Ephestia Kuehniella obtainable according to said method and a kit comprising a hermetic container, which hermetic container comprises eggs of Ephestia Kuehniella obtainable according to the method of the invention. The subject of the invention is also the use of Ephestia Kuehniella eggs that can be obtained according to the method of the invention for feeding predators. Agriculture and forestry regularly use biological control agents to protect crop production from pests, pathogens or weeds. Biological control agents are most often natural organisms antagonistic to these pests, such as phytophages (in the case of a weed plant), parasitoids (arthropods ...), predators (nematodes, arthropods, vertebrates, molluscs, bats ...) or pathogens (viruses, bacteria, fungi ...). This approach requires reintroduction of the biological control agent in the form of live predators and in sufficient numbers to achieve the desired effect. The feeding of the biological control agents is therefore crucial in the breeding process envisaged. Eggs of Ephestia Kuehniella are commonly used for the breeding of biological control agents, especially predators (Macrolophus, Orius, ladybugs) or parasitoids (Trichogrammatidae). It is therefore already known to produce Ephestia Kuehniella industrially for the breeding of entomophages. This prey of substitution is also easy handling because the eggs are all individualized and are in the form of a "powder". Ephestia Kuehniella, or flour borer, is an insect of the order Lepidoptera 20-25 mm wingspan. The adult insect has a small globular head, its anterior wings are greyish and satiny, with black dots, and its hind wings, finely fringed, are whitish. Oviposition begins immediately after mating and can produce 200 to 300 white and elliptical eggs. Ephestia Kuehniella lives up to two weeks, although her metabolism is likely to change with temperature. Indeed, Ephestia Kuehniella can remain alive longer at temperatures of -10 ° C or -15 ° C, thanks to a phenomenon of hibernation. It is therefore possible to prolong the life expectancy of the adult population of Ephestia Kuehniella by keeping them cool and then placing them in conditions suitable for laying when necessary.
Cependant, la fréquence des pontes de cet insecte est elle aussi largement tributaire des conditions de température de la culture de cette pyrale. Dans les lieux chauffés, en l'absence d'hibernation ou de vie ralentie, on peut espérer obtenir 3 à 6 générations par an. Dans le cas d'hibernation ou de vie ralentie, le nombre de générations sera bien entendu moindre. Il reste donc difficile et coûteux de s'approvisionner régulièrement en oeufs d'Ephestia Kuehniella. L'approvisionnement en oeufs d'Ephestia Kuehniella étant le facteur limitant dans l'élevage des agents de contrôle biologiques, diverses approches ont été développées. Une première approche consiste à utiliser des aliments dits artificiels pour l'élevage des agents de contrôle biologiques, plus particulièrement des prédateurs.However, the frequency of laying of this insect is also largely dependent on the temperature conditions of the crop of this moth. In heated places, in the absence of hibernation or slowed down life, one can expect to obtain 3 to 6 generations per year. In the case of hibernation or slowed down life, the number of generations will of course be less. It therefore remains difficult and expensive to regularly stock eggs of Ephestia Kuehniella. Since the egg supply of Ephestia Kuehniella is the limiting factor in the breeding of biological control agents, various approaches have been developed. One approach is to use so-called artificial foods for breeding biological control agents, especially predators.
Ainsi, la demande W00049897 décrit l'utilisation de milieux nutritifs qui sont dépourvus de constituants obtenus à partir d'insectes. Cette méthode cependant ne fournit pas d'éléments nutritifs comparables aux proies habituelles des agents de contrôle biologiques, et pourrait nuire au bon développement des populations ainsi nourries.Thus, the application W00049897 describes the use of nutrient media which are devoid of constituents obtained from insects. However, this method does not provide nutrients comparable to the usual prey of biological control agents, and could hinder the healthy development of the populations thus fed.
Une deuxième approche consiste à utiliser, pour l'élevage des agents de contrôle biologiques, des oeufs d'Ephestia Kuehniella transformés de façon à pouvoir être conservés. Par exemple, le brevet FR 2 460 620 décrit une méthode de préparation de parasitoïdes à partir d'oeufs d'Ephestia Kuehniella conditionnés. Dans la méthode de ce brevet, les oeufs d'Ephestia Kuehniella sont tués par les ultraviolets ou le froid, puis éventuellement conservés à 3 degrés pendant une durée maximale de 14 jours. Par ailleurs, la demande WO 2011/010308 utilise, en tant qu'aliment pour divers insectes auxiliaires, des oeufs d'insectes desséchés parmi lesquels des oeufs 5 d'Ephestia Kuehniella mélangés à des composés antiagglomérants. Néanmoins, ces formes de préparation et de conditionnement des oeufs d'Ephestia Kuehniella présentent l'inconvénient d'altérer la structure des oeufs, et probablement leurs qualités nutritives. En effet, il a été démontré, dans le cas particulier où les oeufs d'Ephestia Kuehniella étaient utilisés pour l'élevage de parasitoïdes, que la 10 conservation des oeufs pendant 30 jours à 3°C réduisait considérablement leur capacité à être parasités par des Trichogramma. Or, il est bien connu que les parasitoïdes ne peuvent se développer normalement sur des oeufs dont les tissus sont altérés. Ainsi, les formes connues de préparation et de conditionnement des oeufs d'Ephestia 15 Kuehniella conduisent à une altération des oeufs préjudiciable à leur utilisation ultérieure qui ne permet pas un stockage des oeufs sur une longue période. Il existe donc un besoin d'une méthode de conservation des oeufs d'Ephestia Kuehniella qui permette de les conserver sur une longue durée, sans altérer les propriétés nécessaires à l'élevage d'agents de contrôle biologiques, particulièrement 20 des prédateurs. Les utilisateurs cherchent le plus souvent à utiliser des oeufs qui ont conservé visuellement les caractéristiques des oeufs frais, telles que leur couleur blanche et une forme ovoïde intacte. On estime ainsi généralement que les propriétés des oeufs d'Ephestia Kuehniella sont conservées si ceux-ci restent blancs et ne s'affaissent pas au cours de la conservation. Ces caractéristiques sont facilement 25 mesurables visuellement par l'homme du métier, par exemple en comparant la couleur des oeufs après conservation avec celle des oeufs frais, qui sont blancs, et avec celle des oeufs laissés à température ambiante pendant plusieurs jours, par exemple au moins trois jours, qui quant à eux sont jaunes.A second approach is to use Ephestia Kuehniella eggs for the rearing of biological control agents so that they can be preserved. For example, patent FR 2,460,620 describes a method for preparing parasitoids from packaged Ephestia Kuehniella eggs. In the method of this patent, the eggs of Ephestia Kuehniella are killed by ultraviolet or cold, and then possibly kept at 3 degrees for a maximum duration of 14 days. Furthermore, the application WO 2011/010308 uses, as a feed for various auxiliary insects, dried out insect eggs, including eggs of Ephestia Kuehniella mixed with anti-caking compounds. Nevertheless, these forms of preparation and conditioning of eggs of Ephestia Kuehniella have the disadvantage of altering the structure of the eggs, and probably their nutritional qualities. Indeed, it has been demonstrated, in the particular case where the eggs of Ephestia Kuehniella were used for rearing parasitoids, that the preservation of the eggs for 30 days at 3 ° C considerably reduced their ability to be parasitized by parasites. Trichogramma. However, it is well known that parasitoids can not develop normally on eggs whose tissues are altered. Thus, the known forms of preparation and conditioning of eggs of Ephestia Kuehniella lead to an alteration of eggs detrimental to their subsequent use which does not allow storage of eggs over a long period. There is therefore a need for a method of preserving the eggs of Ephestia Kuehniella which allows them to be kept for a long time without altering the properties necessary for the breeding of biological control agents, particularly predators. Users most often seek to use eggs that have visually retained the characteristics of fresh eggs, such as their white color and an intact ovoid shape. It is generally believed that the properties of Ephestia Kuehniella eggs are preserved if they remain white and do not collapse during storage. These characteristics are easily measurable visually by those skilled in the art, for example by comparing the color of the eggs after storage with that of the fresh eggs, which are white, and with that of the eggs left at room temperature for several days, for example at at least three days, which in turn are yellow.
Les Inventeurs ont ainsi découverts de façon surprenante qu'en conservant les oeufs d'Ephestia Kuehniella sous vide dans un contenant hermétique, il est possible de stocker ces oeufs de façon prolongée sans pourtant altérer leurs propriétés. Les oeufs d'Ephestia Kuehniella ainsi conservés restent blancs et ne s'affaissent pas, même après de longues périodes de conservation. L'invention a ainsi pour premier objet une méthode de conservation d'oeufs d'Ephestia Kuehniella caractérisée en ce que les oeufs d'Ephestia Kuhniella sont maintenus sous atmosphère contrôlée, dans un contenant hermétique. Au sens de la présente invention, on entend par « atmosphère contrôlée » une atmosphère dont la composition gazeuse est déterminée. La composition gazeuse de l'invention pourra en particulier comprendre des gaz rares, qui ont la propriété d'être inertes. Préférentiellement, l'atmosphère contrôlée de l'invention est un mélange gazeux comprenant au moins un des gaz compris dans la liste consistant en le diazote, l'argon, le protoxyde d'azote, l'hélium et le dioxyde de carbone. Par « diazote », on entend au sens de la présente demande le gaz formé de molécules diatomiques composées de deux atomes d'azote et noté N2. Par « argon », on entend au sens de la présente demande le gaz formé d'atomes d'argon et noté Ar.The inventors have thus surprisingly discovered that by keeping the eggs of Ephestia Kuehniella under vacuum in an airtight container, it is possible to store these eggs for a prolonged period without, however, altering their properties. The eggs of Ephestia Kuehniella thus preserved remain white and do not collapse, even after long periods of conservation. The invention thus firstly relates to a method for preserving eggs of Ephestia Kuehniella, characterized in that the eggs of Ephestia Kuhniella are kept under a controlled atmosphere in an airtight container. For the purposes of the present invention, the term "controlled atmosphere" means an atmosphere whose gaseous composition is determined. The gaseous composition of the invention may in particular comprise rare gases, which have the property of being inert. Preferably, the controlled atmosphere of the invention is a gaseous mixture comprising at least one of the gases included in the list consisting of dinitrogen, argon, nitrous oxide, helium and carbon dioxide. By "dinitrogen" is meant for the purposes of this application the gas formed of diatomic molecules composed of two nitrogen atoms and denoted N2. By "argon" is meant in the sense of the present application the gas formed argon atoms and noted Ar.
Par « protoxyde d'azote », on entend au sens de la présente demande le gaz formé de molécules composées de deux atomes d'azote et d'un atome d'oxygène et noté N20. Par « hélium », on entend au sens de la présente demande le gaz formé d'atomes d'hélium et noté He. Par « dioxyde de carbone », on entend au sens de la présente demande le gaz formé 25 de molécules composées de deux atomes d'oxygène et d'un atome de carbone et noté CO2. Afin d'obtenir une atmosphère contrôlée selon l'invention, l'homme du métier pourra ajouter au moins l'un de ces gaz à l'intérieur du contenant comprenant les 30 oeufs, par exemple par injection. De cette façon, la composition gazeuse à l'intérieur du contenant hermétique correspondra à un mélange de l'air ambiant et du ou des gaz injectés. La composition gazeuse est particulièrement avantageuse lorsqu'elle comprend peu de dioxygène, car ce type de composition permet de minimiser les processus d'oxydation. Plus précisément, les inventeurs ont déterminé que les oeufs présentent une meilleure conservation lorsque la composition gazeuse a une concentration d'02 de moins de 10 %. Préférentiellement, l'atmosphère contrôlée de l'invention est un mélange gazeux comprenant une concentration d'02 de moins de 15 %.By "nitrous oxide" is meant within the meaning of the present application the gas formed of molecules composed of two nitrogen atoms and one oxygen atom and denoted N20. By "helium" is meant in the sense of the present application the gas formed of helium atoms and denoted He. For the purposes of the present application, "carbon dioxide" is understood to mean the gas formed of molecules composed of two oxygen atoms and one carbon atom and denoted CO2. In order to obtain a controlled atmosphere according to the invention, the person skilled in the art can add at least one of these gases to the interior of the container comprising the eggs, for example by injection. In this way, the gaseous composition inside the hermetic container will correspond to a mixture of the ambient air and the injected gas (s). The gaseous composition is particularly advantageous when it comprises little oxygen, since this type of composition makes it possible to minimize the oxidation processes. More specifically, the inventors have determined that the eggs have better preservation when the gaseous composition has an O 2 concentration of less than 10%. Preferably, the controlled atmosphere of the invention is a gaseous mixture comprising an O 2 concentration of less than 15%.
En outre, les inventeurs ont établi que la conservation des oeufs est améliorée si la composition gazeuse à l'intérieur du contenant hermétique est enrichie en CO2. Préférentiellement, l'atmosphère contrôlée de l'invention est un mélange gazeux comprenant une concentration de CO2 d'au moins 2 %.In addition, the inventors have established that the conservation of the eggs is improved if the gaseous composition inside the hermetic container is enriched in CO2. Preferably, the controlled atmosphere of the invention is a gaseous mixture comprising a CO2 concentration of at least 2%.
Selon un mode de réalisation avantageux, la méthode de l'invention est caractérisée en ce que l'atmosphère contrôlée de l'invention est un mélange gazeux comprenant une concentration d'Oz de moins de 15 % et une concentration de CO2 d'au moins 2 %.According to an advantageous embodiment, the method of the invention is characterized in that the controlled atmosphere of the invention is a gaseous mixture comprising an Oz concentration of less than 15% and a CO2 concentration of at least 2%.
En outre, les inventeurs ont observé que la conservation des oeufs, en particulier des oeufs d'Ephestia Kuhniella, est meilleure lorsque ces oeufs sont conservé sous vide. Selon un mode de réalisation particulier, les oeufs d'Ephestia Kuhniella sont maintenus en outre sous vide.In addition, the inventors have observed that the preservation of eggs, in particular eggs of Ephestia Kuhniella, is better when these eggs are kept under vacuum. According to a particular embodiment, the eggs of Ephestia Kuhniella are furthermore maintained under vacuum.
Au sens de la présente invention, on entend par « sous vide » une dépression de l'intérieur du contenant par rapport à la pression extérieure au contenant dans des conditions de stockage. Au sens de la présente invention, la pression atmosphérique est la pression atmosphérique mesurée à l'altitude à laquelle se trouve le contenant. Préférentiellement, l'intérieur du contenant a une pression inférieure à la pression atmosphérique extérieure au contenant, Préférablement, la pression atmosphérique normale est la pression atmosphérique normalisée, à savoir 1013,25 hPa.For the purposes of the present invention, the term "under vacuum" means a depression of the interior of the container relative to the pressure outside the container under storage conditions. For the purposes of the present invention, the atmospheric pressure is the atmospheric pressure measured at the altitude at which the container is located. Preferably, the interior of the container has a pressure lower than the atmospheric pressure outside the container. Preferably, the normal atmospheric pressure is the normalized atmospheric pressure, namely 1013.25 hPa.
Les Inventeurs ont en particulier découvert que les oeufs d'Ephestia Kuehniella pouvaient être stockés durablement lorsqu'ils étaient conservés sous vide. Selon un mode de réalisation avantageux, la méthode de l'invention est caractérisée en ce que le vide est compris entre 10% et 99% du vide absolu, préférentiellement 5 entre 20% et 80% du vide absolu. Au sens de la présente invention, 0% de vide correspond à la pression atmosphérique à l'extérieur du contenant, mesurée à l'altitude à laquelle se trouve le contenant. Préférentiellement, 0% de vide correspond à une pression à l'intérieur du contenant 10 hermétique de 1013,25 hPa. Au sens de la présente invention, le vide absolu correspond à une pression nulle. Au sens de la présente invention, les termes « contenant hermétique » signifient tout contenant qui une fois fermé empêche tout échange physico-chimique, en particulier 15 gazeux, entre l'intérieur et l'extérieur du contenant. En particulier, l'homme du métier choisira des contenants dont les matériaux et/ou l'agencement permettent d'éviter tout échange physico-chimique, en particulier gazeux, entre des systèmes soumis à des pressions différentes, tels que par exemple les contenants thermoplastiques. Par « thermoplastique » il est fait référence à un matériau 20 polymérique obtenu par polymérisation de monomères comprenant au moins un atome de carbone, et susceptible d'être, de manière répétée, ramolli par chauffage et durci par refroidissement. Un grand nombre de contenants hermétiques sont bien connus et régulièrement utilisés pour la conservation sous vide de matière organique, qu'il n'est donc pas nécessaire de décrire en détail ici. 25 Le contenant hermétique selon l'invention peut se présenter sous toute forme et sous toutes les dimensions adaptées au stockage des oeufs d'Ephestia Kuehniella. En particulier, le contenant selon l'invention peut être une boîte, une poche souple ou un flacon.In particular, the inventors have found that eggs of Ephestia Kuehniella can be stored durably when stored under vacuum. According to an advantageous embodiment, the method of the invention is characterized in that the vacuum is between 10% and 99% of the absolute vacuum, preferably between 20% and 80% of the absolute vacuum. For the purposes of the present invention, 0% vacuum corresponds to the atmospheric pressure outside the container, measured at the altitude at which the container is located. Preferably, 0% vacuum corresponds to a pressure inside the sealed container of 1013.25 hPa. For the purposes of the present invention, the absolute vacuum corresponds to a zero pressure. Within the meaning of the present invention, the term "hermetic container" means any container which once closed prevents any physicochemical exchange, in particular gaseous, between the inside and the outside of the container. In particular, those skilled in the art will choose containers whose materials and / or arrangement make it possible to avoid any physico-chemical exchange, in particular gaseous, between systems subjected to different pressures, such as, for example, thermoplastic containers. . By "thermoplastic" is meant a polymeric material obtained by polymerization of monomers comprising at least one carbon atom, and capable of being repeatedly softened by heating and cured by cooling. A large number of hermetic containers are well known and regularly used for vacuum storage of organic material, so it is not necessary to describe in detail here. The hermetic container according to the invention may be in any form and in any size suitable for storing Ephestia Kuehniella eggs. In particular, the container according to the invention may be a box, a flexible bag or a bottle.
Les Inventeurs ont par ailleurs découvert qu'il était possible d'améliorer la conservation des oeufs d'Ephestia Kuehniella, en les maintenant en outre dans un intervalle de températures appropriées.The inventors have furthermore discovered that it is possible to improve the conservation of the eggs of Ephestia Kuehniella, by keeping them moreover in an appropriate temperature range.
Selon un mode de réalisation avantageux, la méthode de l'invention est caractérisée en ce que les oeufs d'Ephestia Kuehniella sont en outre maintenus à une température comprise entre -18°C et -80'°C, préférentiellement entre -18°C et -50°C, encore préférentiellement entre -18°C et -30°C.According to an advantageous embodiment, the method of the invention is characterized in that the eggs of Ephestia Kuehniella are furthermore maintained at a temperature of between -18 ° C. and -80 ° C., preferably between -18 ° C. and -50 ° C, more preferably between -18 ° C and -30 ° C.
Les Inventeurs ont été particulièrement surpris de trouver que les oeufs d'Ephestia Kuehniella peuvent être conservés selon la méthode de l'invention pendant plus de 150 jours sans que les propriétés des oeufs d'Ephestia Kuehniella ne s'en trouvent altérées. La méthode de l'invention est ainsi particulièrement avantageuse dans les cas où il s'avère nécessaire ou utile de conserver les oeufs d'Ephestia Kuehniella pendant une longue période, avant qu'ils ne soient utilisés. Selon un mode de réalisation avantageux, la méthode de l'invention est caractérisée en ce qu'elle est mise en oeuvre pendant plus de 60 jours, préférentiellement pendant plus de 120 jours, encore plus préférentiellement pendant plus de 150 jours.The inventors were particularly surprised to find that the eggs of Ephestia Kuehniella can be preserved according to the method of the invention for more than 150 days without the properties of the eggs of Ephestia Kuehniella being altered. The method of the invention is thus particularly advantageous in cases where it is necessary or useful to keep the eggs of Ephestia Kuehniella for a long time before they are used. According to an advantageous embodiment, the method of the invention is characterized in that it is carried out for more than 60 days, preferentially for more than 120 days, even more preferably for more than 150 days.
Selon un mode de réalisation avantageux, la méthode de l'invention est caractérisée en ce qu'elle est mise en oeuvre pendant 60 à 180 jours, préférentiellement 120 à 180 jours. L'invention a pour deuxième objet des oeufs d'Ephestia Kuehniella susceptibles d'être obtenus selon la méthode de l'invention. Les oeufs ainsi obtenus peuvent être utilisés dans toutes les méthodes d'élevages d'agents de contrôle biologiques connues, et remplace avantageusement les oeufs d'Ephestia Kuehniella frais ou conservés selon d'autres procédés.According to an advantageous embodiment, the method of the invention is characterized in that it is carried out for 60 to 180 days, preferably 120 to 180 days. The second subject of the invention is eggs of Ephestia Kuehniella that can be obtained according to the method of the invention. The eggs thus obtained can be used in all methods of breeding known biological control agents, and advantageously replaces the eggs of Ephestia Kuehniella fresh or preserved by other methods.
L'invention a par conséquent aussi pour objet l'utilisation d'oeufs d'Ephestia Kuehniella susceptibles d'être obtenus selon la méthode de l'invention pour nourrir des prédateurs.The invention therefore also relates to the use of Ephestia Kuehniella eggs that can be obtained according to the method of the invention for feeding predators.
L'invention a pour autre objet un kit comprenant un contenant hermétique, lequel contenant hermétique comprend des oeufs d'Ephestia Kuehniella susceptibles d'être obtenus selon la méthode de l'invention. Figure 1 : Taux d'oeufs d'Ephestia Kuehniella affaissés, 96 heures après décongélation, en fonction de leur méthode de conservation. Dans la condition A, les oeufs sont conservés de manière classique (conservation au froid). Dans la condition B, les oeufs sont conservés selon la méthode de l'invention . Figure 2 : Taux d'oeufs d'Ephestia Kuehniella jaunis, 96 heures après décongélation, en fonction de leur méthode de conservation. Dans la condition A, les oeufs sont conservés de manière classique (conservation au froid). Dans la condition B, les oeufs sont conservés selon la méthode de l'invention. Figure 3 : Taux de fécondité d'Orius laevigatus selon leur alimentation. Dans la condition A, les larves sont nourries par des oeufs conservés de manière classique (conservation au froid). Dans la condition B, les larves sont nourries par des oeufs conservés selon la méthode de l'invention Figure 4 : Taux de transformation de larves d'Orius laevigatus en adulte selon leur alimentation. Dans la condition A, les larves sont nourries par des oeufs conservés de manière classique (conservation au froid). Dans la condition B, les larves sont nourries par des oeufs conservés selon la méthode de l'invention Les exemples suivants sont fournis ici à titre d'illustration et ne sont pas, sauf indication contraire, destinés à être limitatifs.Another object of the invention is a kit comprising a hermetic container, which hermetic container comprises Ephestia Kuehniella eggs that can be obtained according to the method of the invention. Figure 1: Ephestia Kuehniella eggs depressed, 96 hours after thawing, based on their method of conservation. In condition A, the eggs are preserved in a conventional manner (cold storage). In condition B, the eggs are preserved according to the method of the invention. Figure 2: Yellow eggs of Ephestia Kuehniella, 96 hours after thawing, based on their method of conservation. In condition A, the eggs are preserved in a conventional manner (cold storage). In condition B, the eggs are preserved according to the method of the invention. Figure 3: Fertility rate of Orius laevigatus according to their diet. In condition A, the larvae are fed conventionally preserved eggs (cold storage). In condition B, the larvae are fed with eggs preserved according to the method of the invention. FIG. 4: Conversion rate of Orius laevigatus larvae into adults according to their diet. In condition A, the larvae are fed conventionally preserved eggs (cold storage). In condition B, the larvae are fed with eggs preserved according to the method of the invention. The following examples are provided by way of illustration and are not, unless otherwise indicated, intended to be limiting.
Exemple 1 : Les oeufs d'Ephestia conservés selon la méthode de l'invention restent blancs et ne s'affaissent pas, contrairement aux oeufs conservés selon les méthodes de l'art antérieur. Selon une première condition A, des oeufs d'Ephestia sont introduits dans un contenant hermétique, puis congelés à une température comprise entre -30°C et - 18°C. Dans cette première condition, les oeufs ne sont donc pas conservés sous vide. Parallèlement, selon une deuxième condition B, des oeufs d'Ephestia sont introduits dans un contenant hermétique, puis ce contenant est mis sous vide de façon à obtenir entre 70% et 99% de vide. De l'azote est ensuite injecté dans le contenant hermétique de façon à obtenir entre 20% et 50% de vide. Les oeufs dans le contenant sont ensuite congelés à une température comprise entre -30°C et -18°C Les oeufs correspondant aux deux conditions sont stockés à une température comprise entre -30°C et -18°C pendant 1 à 7 mois.Example 1: The eggs of Ephestia preserved according to the method of the invention remain white and do not sag, unlike eggs preserved according to the methods of the prior art. According to a first condition A, eggs of Ephestia are introduced into an airtight container and then frozen at a temperature between -30 ° C and -18 ° C. In this first condition, the eggs are not stored under vacuum. In parallel, according to a second condition B, eggs of Ephestia are introduced into an airtight container, then this container is evacuated so as to obtain between 70% and 99% of vacuum. Nitrogen is then injected into the sealed container to obtain between 20% and 50% vacuum. The eggs in the container are then frozen at a temperature between -30 ° C and -18 ° C. The eggs corresponding to the two conditions are stored at a temperature between -30 ° C and -18 ° C for 1 to 7 months.
Tous les mois après le début de la congélation, un échantillon de chacune des deux conditions est décongelé, laissé à 25°C pendant 96 heures, puis l'affaissement des oeufs et leur coloration sont évalués, par observation sous loupe binoculaire, en les comparant à des oeufs frais. Le protocole suivit est le suivant : Des oeufs sont prélevés à partir des deux conditions décrites ci-dessus, grâce à un support collant (de type scotch ou post-it) marqué de manière à identifier les oeufs. Certaines zones du support collant peuvent ainsi être passées au préalable sur un tampon encreur pour que les oeufs soient visibles. Les oeufs sont ensuite laissés à 25°C pendant 96 heures.Every month after the beginning of the freezing, a sample of each of the two conditions is thawed, left at 25 ° C for 96 hours, then the collapse of the eggs and their coloration are evaluated, by observation under a binocular loupe, comparing them to fresh eggs. The following protocol is as follows: Eggs are taken from the two conditions described above, thanks to a sticky medium (Scotch type or post-it) marked to identify the eggs. Some areas of the sticky medium can thus be passed beforehand on an ink pad so that the eggs are visible. The eggs are then left at 25 ° C for 96 hours.
Le taux d'affaissement et le taux de jaunissement sont ensuite calculés après observation sous loupe binoculaire.The rate of subsidence and the rate of yellowing are then calculated after observation under a binocular microscope.
Le taux d'affaissement correspond au nombre d'oeufs affaissés sur le nombre total d'oeufs dans l'échantillon observé. On considère qu'un oeuf est affaissé lorsqu'au moins 3/4 de sa forme n'est pas ovoïde. Le taux de jaunissement correspond au nombre d'oeufs jaunis (en comparaison avec des oeufs frais) sur le nombre total d'oeufs dans l'échantillon observé. Les résultats sont présentés dans les tableaux ci-dessous, ainsi que dans les figures 1 et 2. Temps de la Taux d'oeufs Taux d'oeufs affaissés Gain conservation affaissés Condition B : Sous vide entre -30°C et - Condition A : 18°C (en mois) Atmosphère normale 0 3,00% 3,45% 1 6,70% 5,68% 15,20% 3 8,70% 6,07% 30,20% 5 16,00% 7,06% 55,90% 7 22,20% 6,39% 71,20% Tableau 1 : Taux d'oeufs affaissés Le gain (G) correspondant est calculé par l'équation suivante : G= (Taux d'oeufs affaissés Condition B- Taux d'oeufs affaissés Condition A)*100/ Taux d'oeufs affaissés Condition A Temps de la Taux d'oeufs jaunis Taux d'oeufs Gain conservation entre Condition A : jaunis -30°C et -18°C Atmosphère Condition B : (en mois) normale Sous vide 0 4,20% 4,80% 1 6,10% 5,61% 8,09% 3 7,10% 6,67% 6,00% 5 7,80% 5,87% 21,00% 7 11,20% 7,31% 34,70% Tableau 2 : Taux d'oeufs jaunis Le gain (G) correspondant est calculé par l'équation suivante G= (Taux d'oeufs jaunis Condition B- Taux d'oeufs jaunis Condition A)*100/ Taux d'oeufs affaissés Condition Conclusion : Les proportions d'oeufs affaissés ou jaunis sont plus importantes lorsque les oeufs ont été simplement conservés au froid, plutôt que lorsqu'ils ont été conservés selon la méthode de l'invention. La différence entre les deux types de méthode est d'autant plus importante que la durée de conservation est longue. La méthode de l'invention permet ainsi de conserver des oeufs pendant de longues durées, sans altérer leurs propriétés, contrairement aux méthodes déjà connues. Exemple 2: Les oeufs d'Ephestia conservés selon la méthode de l'invention permettent d'obtenir une population de prédateurs plus féconde qu'avec des oeufs conservés selon une méthode classique. Des adultes Orius laevigatus (femelles) sont élevées dans les conditions standards suivantes : 25°C / 75% HR ; photopériode L:D=16:8 Élevage en boîtes aérées de surface 0,017 m2 Les Orius laevigatus sont nourries pendant 10 jours: - soit avec des oeufs ayant été conservés selon la condition A de l'exemple 1, (ci-après « condition A ») soit avec des oeufs ayant été conservés selon la condition B de l'exemple 1, (ci-après « condition B ») La fécondité journalière des femelles Orius laevigatus est suivie pendant 10 jours. La fécondité journalière moyenne pour chacune des deux conditions ci-dessus est représentée figure 3. Conclusion : La fécondité journalière des Orius laevigatus est plus importante lorsque les oeufs ont été conservés selon la méthode de l'invention (condition B), plutôt que lorsqu'ils ont été conservés selon la méthode de l'art antérieur (condition A).The rate of subsidence is the number of eggs collapsed on the total number of eggs in the observed sample. An egg is considered to be collapsed when at least 3/4 of its shape is not ovoid. The yellowing rate is the number of yellowed eggs (compared to fresh eggs) on the total number of eggs in the observed sample. The results are shown in the tables below, as well as in Figures 1 and 2. Egg Rate Time Slacked Egg Rate Slumped Conservation Gain Condition B: Vacuum between -30 ° C and - Condition A: 18 ° C (in months) Normal atmosphere 0 3.00% 3.45% 1 6.70% 5.68% 15.20% 3 8.70% 6.07% 30.20% 5 16.00% 7 , 06% 55.90% 7 22.20% 6.39% 71.20% Table 1: Sloughed egg rate The corresponding gain (G) is calculated by the following equation: G = (Slumped egg rate Condition B- Sloughed Egg Rate Condition A) * 100 / Slumped Egg Rate Condition A Yellowness Rate Egg Rate Egg Conservation Gain Condition A: Yellow -30 ° C to -18 ° C Atmosphere Condition B: (in months) normal Vacuum 0 4.20% 4.80% 1 6.10% 5.61% 8.09% 3 7.10% 6.67% 6.00% 5 7.80% 5,87% 21,00% 7 11,20% 7,31% 34,70% Table 2: Yellowness egg rate The corresponding gain (G) is calculated by the following equation G = (Yellows egg rate Condition B- Yellowed egg rate C A) * 100 / Sloughed egg rate Condition Conclusion: The proportions of collapsed or yellowed eggs are larger when the eggs were simply kept cold rather than when they were preserved according to the method of the invention. . The difference between the two types of method is all the more important as the shelf life is long. The method of the invention thus makes it possible to preserve eggs for long periods without altering their properties, contrary to the methods already known. Example 2: The eggs of Ephestia preserved according to the method of the invention make it possible to obtain a more fertile predator population than with eggs preserved according to a conventional method. Adult Orius laevigatus (females) are reared under the following standard conditions: 25 ° C / 75% RH; photoperiod L: D = 16: 8 Rearing in aerated canisters 0.017 m2 The Orius laevigatus are fed for 10 days: - either with eggs that have been preserved according to condition A of example 1, (hereinafter "condition A ") With eggs having been preserved according to condition B of example 1, (hereinafter" condition B ") The daily fertility of Orius laevigatus females is monitored for 10 days. The average daily fertility for each of the two above conditions is shown in Figure 3. Conclusion: The daily fecundity of Orius laevigatus is greater when the eggs have been preserved according to the method of the invention (condition B), rather than when they have been preserved according to the method of the prior art (condition A).
Les oeufs conservés selon la méthode de l'invention sont plus nutritifs et permettent une plus grande fécondité des prédateurs que les oeufs conservés de façon classique. Exemple 3 : Les oeufs d'Ephestia conservés selon la méthode de l'invention permettent d'obtenir une meilleure survie des larves de prédateurs qu'avec des oeufs conservés selon une méthode classique. Des larves de Orius laevigatus sont élevées dans les conditions standard suivantes : - 25°C / 75% HR ; photopériode L:D=16:8 - Élevage en boîtes aérées de surface 0,017 m2 Les larves d'Orius laevigatus sont nourries pendant 14 jours: soit avec des oeufs ayant été conservés selon la condition A de l'exemple 1, (ci-après « condition A ») soit avec des oeufs ayant été conservés selon la condition B de l'exemple 1, (ci-après « condition B ») La survie des larves Orius laevigatus est évaluée par le pourcentage de larve atteignant le stade adulte, aussi appelé taux de transformation des larves en adulte. Le nombre de larves passant au stade adulte est mesuré pendant 14 jours. Le taux deEggs preserved according to the method of the invention are more nutritious and allow greater fecundity of predators than conventionally preserved eggs. Example 3: The eggs of Ephestia preserved according to the method of the invention make it possible to obtain a better survival of the predator larvae than with eggs preserved according to a conventional method. Larvae of Orius laevigatus are reared under the following standard conditions: - 25 ° C / 75% RH; photoperiod L: D = 16: 8 - Aerated aerated box culture 0.017 m2 The Orius laevigatus larvae are fed for 14 days: either with eggs that have been preserved according to condition A of example 1, (hereinafter "Condition A") with eggs that have been preserved according to condition B of example 1, (hereinafter "condition B"). The survival of the Orius laevigatus larvae is evaluated by the percentage of larvae reaching the adult stage, also called larval transformation rate in adults. The number of larvae passing into the adult stage is measured for 14 days. The rate of
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