FR2996449A1 - Topical cosmetic composition, useful for e.g. caring skin and keratinous material, comprises polysaccharide, glucosaccharide and an aqueous composition containing trace elements and mineral salts - Google Patents
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Abstract
La présente invention concerne une composition cosmétique comprenant un polysaccharide, un glucosaccharide et une composition aqueuse contenant des oligo-éléments et des sels minéraux. La présente invention concerne également un procédé de traitement cosmétique des matières kératiniques à l'aide d'une telle composition, ainsi qu'une utilisation cosmétique de ladite composition, notamment pour la régulation de l'homéostasie de la peau et des matières kératiniques.The present invention relates to a cosmetic composition comprising a polysaccharide, a glucosaccharide and an aqueous composition containing trace elements and mineral salts. The present invention also relates to a process for the cosmetic treatment of keratin materials using such a composition, as well as a cosmetic use of said composition, in particular for the regulation of homeostasis of the skin and keratin materials.
Description
Composition cosmétique comprenant un polysaccharide, un glucosaccharide et une composition aqueuse contenant des oligo- éléments et des sels minéraux La présente invention concerne une composition cosmétique comprenant un polysaccharide, un glucosaccharide et une composition aqueuse contenant des oligo-éléments et des sels minéraux. La présente invention concerne également un procédé de traitement cosmétique des matières kératiniques à l'aide d'une telle composition, ainsi qu'une utilisation cosmétique de ladite composition, notamment pour la régulation de l'homéostasie de la peau et des matières kératiniques. La peau est une enveloppe à la fois souple et résistante, constituée de plusieurs couches dont l'épiderme, qui est la couche la plus superficielle de la peau. C'est un épithélium squameux stratifié kératinisé qui se renouvelle continuellement. L'épaisseur moyenne de l'épiderme est de 100 i.tm mais peut varier de 501am sur les paupières à 1 mm sur la paume des mains ou la plante des pieds. L' épiderme, épithélium de revêtement a pour fonction particulière de constituer une barrière protégeant efficacement le milieu interne de l'environnement et, en tout premier lieu, de la dessication. En effet, l'eau est un constituant majoritaire de notre organisme et représente 60 à 65 % du poids corporel d'un humain adulte.The present invention relates to a cosmetic composition comprising a polysaccharide, a glucosaccharide and an aqueous composition containing micronutrients and mineral salts. The present invention also relates to a process for the cosmetic treatment of keratin materials using such a composition, as well as a cosmetic use of said composition, in particular for the regulation of homeostasis of the skin and keratin materials. The skin is an envelope that is both supple and resistant, made up of several layers including the epidermis, which is the most superficial layer of the skin. It is a keratinized stratified squamous epithelium that is continuously renewed. The average thickness of the epidermis is 100 i.tm but can vary from 501am on the eyelids to 1 mm on the palms of the hands or the soles of the feet. The epidermis, a coating epithelium has the particular function of constituting a barrier effectively protecting the internal environment environment and, first and foremost, desiccation. Indeed, water is a major constituent of our body and represents 60 to 65% of the body weight of an adult human.
La fonction primaire de l'épiderme est ainsi de produire la couche cornée ou stratum corneum qui forme une couche protectrice semi-perméable. Les principaux composants de la couche cornée sont les cornéocytes et les lipides bilamellaires intercellulaires. La résistance mécanique de la peau est conférée par les cornéocytes, qui sont incorporés dans une enveloppe cornée composée de protéines fortement réticulées, notamment la loricrine, l'involucrine et la filaggrine. Les bicouches lipidiques adjacentes assurent la rétention de l'eau et régulent le mouvement des électrolytes.The primary function of the epidermis is thus to produce the horny layer or stratum corneum which forms a semi-permeable protective layer. The main components of the stratum corneum are corneocytes and intercellular bilamellar lipids. The mechanical resistance of the skin is conferred by corneocytes, which are incorporated in a horny envelope composed of highly crosslinked proteins, including loricrin, involucrine and filaggrin. Adjacent lipid bilayers provide water retention and regulate the movement of electrolytes.
La caspase-14 est responsable de la synthèse de la filaggrine, elle-même à l'origine de la formation d'agrégats de kératine et autres protéines dans la couche supérieure de l'épiderme pour constituer le stratum corneum.Caspase-14 is responsible for the synthesis of filaggrin, itself responsible for the formation of aggregates of keratin and other proteins in the upper layer of the epidermis to form the stratum corneum.
En fait, la transformation enzymatique de la profilaggrine conduit à deux produits finaux, la filaggrine et un peptide N-terminal. La filaggrine agrège des filaments de kératine en macrofibrilles dans la partie basse de la couche cornée. Quand elle approche de la surface cutanée, la filaggrine est principalement dégradée en acides aminés libres, qui forment une partie majeure d'un complexe très hygroscopique, le facteur naturel d'hydratation ou NMF (Natural moisturing factor), qui est important pour le maintien de l'hydratation de la couche cornée et de la souplesse de la peau. La barrière cutanée protège l'organisme contre des facteurs externes de contraintes physiques (facteurs mécaniques, thermiques et rayons UV, notamment), chimiques (tensioactifs, exposition prolongée à l'eau, solvants, etc.) et environnementaux. De plus, la peau, en tant que barrière, protège l'organisme contre la perte d'ions essentiels, d'eau et de protéines sériques. La barrière cutanée est également le reflet de processus systémiques, de maladies, d'activités pathologiques et d'aspects liés au mode de vie. On sait en effet que la peau a tendance à se dessécher du fait de facteurs environnementaux, psychologiques ou hormonaux. Or, il est important que la peau soit bien hydratée et ne subisse pas de perte en eau risquant d'entraîner un flétrissement et un dessèchement de la peau. Plusieurs facteurs de modifications sont ainsi à prendre en compte : la pollution (poussières, gaz d'échappement, etc...), le froid, la chaleur, l'humidité, la sécheresse, ou le stress et une nutrition inadaptée fragilisent notre écosystème en altérant la fonction de barrière de l'épiderme. De même, l'utilisation excessive des produits d'hygiène tels que les savons acides ou alcalins pour le bain ou la douche va entraîner des modifications. Appliqués sur de larges surfaces de peau, ils modifient les conditions physiologiques ambiantes de la surface cutanée. Il subsiste donc un besoin de compositions cosmétiques permettant le maintien de l'homéostasie et de l'hydratation de la peau et des matières kératiniques face aux agressions journalières. Ainsi, le but de la présente invention est de permettre la formulation de compositions cosmétiques à usage topique pour le maintien de la fonction barrière de la peau et des matières kératiniques.In fact, enzymatic transformation of profilaggrin leads to two end products, filaggrin and an N-terminal peptide. Filaggrin aggregates keratin filaments into macrofibrils in the lower part of the stratum corneum. When it approaches the skin surface, filaggrin is mainly degraded into free amino acids, which form a major part of a highly hygroscopic complex, the natural moisturing factor (NMF), which is important for maintaining hydration of the stratum corneum and the suppleness of the skin. The cutaneous barrier protects the body against external factors of physical constraints (mechanical factors, thermal and UV rays, in particular), chemical (surfactants, prolonged exposure to water, solvents, etc.) and environmental factors. In addition, the skin, as a barrier, protects the body against the loss of essential ions, water and serum proteins. The skin barrier is also a reflection of systemic processes, diseases, pathological activities and lifestyle issues. It is known that the skin tends to dry out because of environmental factors, psychological or hormonal. However, it is important that the skin is well hydrated and does not lose water, which can wilt and dry the skin. Several factors of modifications are thus to take into account: the pollution (dust, exhaust gases, etc ...), the cold, the heat, the humidity, the drought, or the stress and an unsuitable nutrition weaken our ecosystem by altering the barrier function of the epidermis. In the same way, the excessive use of hygiene products such as the soaps acid or alkaline for the bath or the shower will involve modifications. Applied to large areas of skin, they modify the physiological conditions of the skin surface. There is therefore still a need for cosmetic compositions that make it possible to maintain the homeostasis and hydration of the skin and keratin materials in the face of daily aggressions. Thus, the object of the present invention is to allow the formulation of cosmetic compositions for topical use for maintaining the barrier function of the skin and keratin materials.
La Demanderesse a maintenant découvert, de manière surprenante, que l'association d'un polysaccharide, d'un glucosaccharide et d'une composition aqueuse contenant des oligoéléments et des sels minéraux permettait d'atteindre ces objectifs. La présente invention a donc pour objet une composition cosmétique topique comprenant, dans un milieu physiologiquement acceptable, au moins une quantité efficace d'un polysaccharide, au moins une quantité efficace d'un glucosaccharide et au moins une quantité efficace d'une composition aqueuse contenant des oligoéléments et des sels minéraux.The Applicant has now discovered, surprisingly, that the combination of a polysaccharide, a glucosaccharide and an aqueous composition containing trace elements and mineral salts made it possible to achieve these objectives. The subject of the present invention is therefore a topical cosmetic composition comprising, in a physiologically acceptable medium, at least one effective amount of a polysaccharide, at least one effective amount of a glucosaccharide and at least one effective amount of an aqueous composition containing trace elements and mineral salts.
La présente invention concerne également un procédé cosmétique de soin de la peau et des matières kératiniques comprenant au moins une étape d'application sur la peau et/ou les matières kératiniques d'une composition cosmétique topique selon l'invention. La présente invention a également pour objet l'utilisation de la composition selon l'invention pour son action sur la fonction barrière de la peau et des matières kératiniques. La présente invention a également pour objet l'utilisation de la composition selon l'invention pour son action sur l'homéostasie de la peau et des matières kératiniques.The present invention also relates to a cosmetic process for the care of the skin and keratinous materials comprising at least one step of applying to the skin and / or the keratinous materials of a topical cosmetic composition according to the invention. The present invention also relates to the use of the composition according to the invention for its action on the barrier function of the skin and keratin materials. The present invention also relates to the use of the composition according to the invention for its action on the homeostasis of the skin and keratin materials.
La présente invention a également pour objet l'utilisation de la composition selon l'invention pour son action sur l'amélioration de l'hydratation de la peau et des matières kératiniques.The present invention also relates to the use of the composition according to the invention for its action on improving the hydration of the skin and keratin materials.
D'autres objets, caractéristiques, aspects et avantages de l'invention apparaîtront encore plus clairement à la lecture de la description et des exemples qui suivent. Le polysaccharide utilisé dans les compositions selon l'invention contient de préférence au moins du glucose, du galactose et de l'acide glucuronique. Le polysaccharide selon l'invention est de préférence une molécule bio-synthétisée par une bactérie symbiotique : Rhizobium Sp. Cette bactérie synthétise le polysaccharide en période de sécheresse, pour former un film hydratant autour des racines de la plante associée, et extraire l'eau présente dans le sol en petites quantités. Le polymère concentre ainsi l'eau pour créer des réserves suffisantes à la survie de la plante. De préférence, ce polysaccharide présente la structure suivante : -3- 4)- GIcA - (1 -1.." 4) - 13 - Glcp - (1 -3.." 4) - 13 - Glcp -(1 -a." 6 ) a- Glcp - (1 4) - a - Galp - 6 1 13 -Galp - (1 3) - - Galp /\ 4 6 C / \ H3C COOH A titre de polysaccharide commercialement disponible selon l'invention, on peut citer la gomme de Rhizobium vendue sous le nom de Soligel par la société Soliance (France). Dans les compositions selon l'invention, le polysaccharide utilisé est présent à une concentration comprise entre 0.01 % et 10% en poids de la composition finale. Préférentiellement, la composition aqueuse contenant des oligo-éléments et des sels minéraux contient également au moins un composé choisi parmi le cuivre, le manganèse, le zinc, le silicium, le calcium, le magnésium, le potassium et le sodium. Les concentrations respectives en ces oligo-éléments peuvent être de moins de 0.05 [tg/L pour le cuivre, de l'ordre de 3. [tg/L pour le manganèse, de l'ordre de 8 à 9 [tg/L pour le zinc et de l'ordre de 3300 [tg/L pour le silicium. Les concentrations respectives en sels minéraux peuvent être de l'ordre de 400 mg/L de calcium, de l'ordre de 1200 mg/L de magnésium, de l'ordre de 14 mg/L de potassium et de l'ordre de 630 mg/L de sodium. Un exemple de composition aqueuse contenant des oligoéléments et des sels minéraux est la poudre de mer obtenue après évaporation d'eau de mer dessalée et reconstituée (Seltag, France), de l'eau de mer puisée dans un réservoir naturel en Bretagne à grande profondeur (Eau de Source Marine, Soliance), un extrait de végétaux marins reconstitué tel que l'extrait de Cinéraire maritime (Setalg, France) ou l'extrait de Nori Micronisé (Lessonia). La composition aqueuse contenant des oligo-éléments et des sels minéraux est de préférence l'Eau de Source Marine (Soliance).Other objects, features, aspects and advantages of the invention will emerge even more clearly on reading the description and examples which follow. The polysaccharide used in the compositions according to the invention preferably contains at least glucose, galactose and glucuronic acid. The polysaccharide according to the invention is preferably a molecule bio-synthesized by a symbiotic bacterium: Rhizobium Sp. This bacterium synthesizes the polysaccharide during a period of drought, to form a moisturizing film around the roots of the associated plant, and to extract the water. present in the soil in small amounts. The polymer thus concentrates the water to create sufficient reserves for the survival of the plant. Preferably, this polysaccharide has the following structure: -3- (4) - GIcA - (1 -1 .. "4) - 13 - Glcp - (1 -3 .." 4) - 13 - Glcp - (1 -a (6) a-Glcp - (1 4) - a - Galp - 6 1 13 - Galp - (1 3) - - Galp / \ 6C / 3HCOOH As a commercially available polysaccharide according to the invention, mention may be made of the Rhizobium gum sold under the Soligel name by the company Soliance (France) In the compositions according to the invention, the polysaccharide used is present at a concentration of between 0.01% and 10% by weight of the final composition Preferably, the aqueous composition containing trace elements and mineral salts also contains at least one compound chosen from copper, manganese, zinc, silicon, calcium, magnesium, potassium and sodium. in these trace elements may be less than 0.05 [tg / L for copper, of the order of 3. [tg / L for manganese, of the order of 8 to 9 [tg / L for zinc and of the order of 3300 [tg / L for silicon. The respective concentrations of inorganic salts can be of the order of 400 mg / L of calcium, of the order of 1200 mg / L of magnesium, of the order of 14 mg / L of potassium and of the order of 630 mg / L of sodium. An example of an aqueous composition containing trace elements and inorganic salts is the sea powder obtained after evaporation of desalinated and reconstituted seawater (Seltag, France), seawater drawn from a natural reservoir in Brittany at great depth (Marine Source Water, Soliance), a reconstituted marine plant extract such as marine Cineraria extract (Setalg, France) or Nori Micronized extract (Lessonia). The aqueous composition containing trace elements and mineral salts is preferably Marine Spring Water (Soliance).
Plus préférentiellement, la composition aqueuse contenant des oligo-éléments et des sels minéraux est dessalinisée. Dans les compositions selon l'invention, la composition aqueuse contenant des oligo-éléments et des sels minéraux est présente dans des proportions comprises entre 0.1% et 20% en poids de la composition finale. De préférence, le glucosaccharide utilisé dans les compositions selon l'invention est un alpha glucane oligosaccharide. Plus préférentiellement, cet alpha glucane oligosaccharide est obtenu par la réaction d'une glycosyl transférase sur du maltose et du saccharose.More preferably, the aqueous composition containing trace elements and inorganic salts is desalinated. In the compositions according to the invention, the aqueous composition containing trace elements and inorganic salts is present in proportions of between 0.1% and 20% by weight of the final composition. Preferably, the glucosaccharide used in the compositions according to the invention is an alpha glucan oligosaccharide. More preferably, this alpha glucan oligosaccharide is obtained by the reaction of a glycosyl transferase on maltose and sucrose.
Sa structure est de préférence du type :35 6 OH CH2OH HO O O HO OH (a 1-2) Un exemple de glucosaccharide selon l'invention est le produit BioEcolia® vendu par la société Solabia (France). 10 Le glucosaccharide selon l'invention est présent dans des proportions comprises entre 0.1 % et 20 % en poids de la composition finale. La composition selon l'invention peut comprendre au moins un agent épaississant. 15 La composition selon l'invention peut comprendre en outre un ou plusieurs tensioactif(s), de préférence naturels ou d'origine naturelle, et choisi(s) parmi les tensioactifs anioniques, cationiques, non ioniques, amphotères ou zwittérioniques. De préférence, on utilisera de 1 à 30 % de ces ingrédients 20 cosmétiques dans des compositions cosmétiques en fonction du type de formulation (sérum, crème, gel ...). On peut se reporter au document « Encyclopedia of Chemical Technology, KIRK-OTHMER », volume 22, p. 333-432, 3ème édition, 1979, WILEY, pour la définition des propriétés et des fonctions 25 (émulsionnant) des tensioactifs, en particulier p.347-377 de cette référence, pour les tensioactifs anioniques, amphotères et non ioniques.Its structure is preferably of the type: ## STR1 ## An example of a glucosaccharide according to the invention is the BioEcolia® product sold by the company Solabia (France). The glucosaccharide according to the invention is present in proportions of between 0.1% and 20% by weight of the final composition. The composition according to the invention may comprise at least one thickening agent. The composition according to the invention may furthermore comprise one or more surfactant (s), preferably natural or of natural origin, and chosen from anionic, cationic, nonionic, amphoteric or zwitterionic surfactants. Preferably, from 1 to 30% of these cosmetic ingredients will be used in cosmetic compositions depending on the type of formulation (serum, cream, gel, etc.). Reference can be made to the document "Encyclopedia of Chemical Technology, KIRK-OTHMER", Vol. 22, p. 333-432, 3rd edition, 1979, WILEY, for the definition of the properties and functions (emulsifier) of surfactants, in particular p.347-377 of this reference, for anionic, amphoteric and nonionic surfactants.
La composition selon l'invention peut se présenter sous forme de solution aqueuse, hydroalcoolique ou huileuse, de dispersion du type lotion ou sérum, d'émulsion de consistance liquide ou semiliquide du type lait, d'une crème blanche ou colorée, d'une pommade, obtenues par dispersion d'une phase grasse dans une phase aqueuse (H/E) ou inversement (E/H) ou multiple (H/E/H ou E/H/E) ou de suspension ou émulsion de consistance molle, semi-solide ou solide du type crème, de gel, ou de microémulsions. Elle peut éventuellement être appliquée sur la peau sous forme d'aérosol ou se présenter sous forme solide, et par exemple sous forme de stick. L'homme de métier veillera à choisir les éventuels additifs et leurs quantités de manière à ce qu'ils ne nuisent pas aux propriétés des compositions de la présente invention. La composition selon l'invention se présente de préférence sous la forme d'un gel aqueux. La composition peut être une composition de soin, notamment être un produit de soin de la peau tels qu'une base de soin pour la peau, un gel de soin (soin de jour, de nuit, anti-rides), une base de maquillage ; une composition de soin pour les lèvres (baume à lèvres), une composition de protection solaire ou autobronzante. La composition peut également être une composition de maquillage, notamment de maquillage de la peau, comme un fond de teint, un fard à joue, un fard à paupière, un produit anti-cernes, un produit de maquillage du corps.The composition according to the invention may be in the form of an aqueous, aqueous-alcoholic or oily solution, a dispersion of the lotion or serum type, a milk-type liquid or semiliquid consistency emulsion, a white or colored cream, a ointment, obtained by dispersion of a fatty phase in an aqueous phase (O / W) or conversely (W / O) or a multiple phase (W / O / W or W / O / W) or suspension or emulsion of soft consistency, semi-solid or solid type cream, gel, or microemulsions. It may optionally be applied to the skin in the form of an aerosol or be in solid form, and for example in the form of a stick. Those skilled in the art will take care to choose the possible additives and their amounts so that they do not adversely affect the properties of the compositions of the present invention. The composition according to the invention is preferably in the form of an aqueous gel. The composition may be a care composition, in particular a skin care product such as a skin care base, a care gel (day care, night care, anti-wrinkle treatment), a makeup base. ; a care composition for the lips (lip balm), a sun protection composition or self-tanning. The composition may also be a make-up composition, especially a make-up of the skin, such as a foundation, a blush, an eyeshadow, a concealer product, a body make-up product.
La présente invention concerne également un procédé de traitement cosmétique des matières kératiniques, et/ou de la peau, qui consiste à appliquer sur lesdites matières une quantité efficace d'une composition telle que décrite ci-dessus. Cette application peut être suivie ou non d'un rinçage.The present invention also relates to a process for the cosmetic treatment of keratinous substances, and / or the skin, which consists in applying to said materials an effective amount of a composition as described above. This application may or may not be followed by rinsing.
Lorsque l'application de la composition est suivie d'un rinçage, le temps de pose de la composition sur les matières kératiniques va de quelques secondes à 60 minutes, mieux de 5 secondes à 30 minutes, encore mieux de 10 secondes à 10 minutes.When the application of the composition is followed by rinsing, the exposure time of the composition on the keratin materials ranges from a few seconds to 60 minutes, better from 5 seconds to 30 minutes, even better from 10 seconds to 10 minutes.
De préférence, les compositions selon l'invention ne sont pas rincées. Les compositions selon l' invention peuvent être avantageusement utilisées pour le soin et/ou le maquillage des matières kératiniques, et plus particulièrement de la peau. De préférence, les compositions selon l'invention sont utilisées pour leur action sur la fonction barrière de la peau et des matières kératiniques. De manière particulièrement préférée, les compositions selon l'invention sont utilisées pour leur action sur l'homéostasie de la peau et des matières kératiniques, ainsi que pour leur action sur l'amélioration de l'hydratation de la peau et des matières kératiniques. Les exemples suivants servent à illustrer l'invention sans toutefois présenter un caractère limitatif.Preferably, the compositions according to the invention are not rinsed. The compositions according to the invention may advantageously be used for the care and / or the makeup of keratinous substances, and more particularly of the skin. Preferably, the compositions according to the invention are used for their action on the barrier function of the skin and keratin materials. In a particularly preferred manner, the compositions according to the invention are used for their action on the homeostasis of the skin and keratin materials, as well as for their action on improving the hydration of the skin and keratin materials. The following examples serve to illustrate the invention without being limiting in nature.
Exemple 1 : Evaluation de la cytotoxicité de la composition selon l'invention Ce test sert à définir la dose maximum tolérable que l'on peut utiliser sur les cellules sans effet toxique, par une quantification rapide et sensible de la prolifération et de la viabilité cellulaires en fonction des compositions selon l'invention. Brièvement, le test colorimétrique est basé sur l'activité d'une enzyme mitochondriale, la succinate déshydrogénase, qui dégrade le substrat MTT j aune (3 44, 5-diméthylthiazol-2y1]-2, 5- diphényltétrazolium bromide) en cristaux de formazan (violet). La quantité de sel formazan produite par les cellules à partir du MTT indique la vitalité cellulaire et se mesure par spectrophotométrie à 570 nm. Les cellules à tester, kératinocytes de la lignée HaCaT sont ensemencées à raison de 10000 cellules/puits, dans 2000_, de milieu DMEM (Lonza, France) supplémenté par 10% Sérum de veau foetal (Lonza, France) et 5% L-Glutamine (Lonza, France), puis placées dans un incubateur à CO2 (5% de CO2) à 37°C jusqu'à une confluence d'environ 85%. Ensuite le milieu est remplacé par 2000_, de milieu identique frais contenant les différentes concentrations de compositions selon l'invention. Les compositions sont préparées de la sorte : Les échantillons d'Eau de Source Marine (Soliance) et de polysaccharide (Soligel, Soliance) sont conservés au frais jusqu'à utilisation. L'échantillon de glucosaccharide (Bioecolia, Solabia) est conservé à température ambiante. On prépare tout d'abord une solution mère concentrée 10 fois. Eau de Source Marine 12,50% 3125pL Soligel 1% 250 mg Bioecolia 5% 1250 mg Eau stérile qsp pour 25mL 15 A partir de la solution mère, on prépare une solution 51 qui comporte 50% de solution mère diluée dans 50% de milieu de culture cellulaire (DMEM supplémenté par 10% SVF et 5%L-Glutamine), puis on prépare les solutions SA à SH par dilution en cascade dans le même milieu de culture. 20 concentrations (%) Solution mère 51 SA SB SC Eau de Source Marine 12,50% 6,25% 3,13% 1,56% 0,78% Soligel 1% 0,50% 0,25% 0,13% 0,06% Bioecolia 5% 2,50% 1,25% 0,63% 0,31% % de dilution 10X 5X 2,5X 1,25X 0,625X concentrations (%) SD SE SF SG SH Eau de Source 0,39% 0,20% 0,10% 0,05% 0,02% Marine Soligel 0,03% 0,02% 0,01% 0,00% 0,00% Bioecolia 0,16% 0,08% 0,04% 0,02% 0,01% % de dilution 0,312X 0,156X 0,078X 0,0395X 0,0195X10 Les aliquots sont conservés en tubes stériles immédiatement congelés à -20°C, puis conservés à -80°C. Après ajout de ces différentes solutions, les cellules sont réincubées pendant 24h avant réalisation du test MTT. Ensuite, on prépare 2 mL de solution fraîche de MTT en diluant la poudre à 5mg/ml (Sigma) dans du PBS. En condition stérile, on ajoute 200_, de solution de MTT à chaque puits. Après homogénéisation, on remet la plaque à incuber à 37C, 5% CO2) pour permettre la métabolisation du MTT pendant 3 à 4 heures. On prépare la solution de solubilisation du MTT (DMSO/Isopropanol - 1:1). On retire le milieu en veillant à laisser dans la plaque les cristaux de formazan formés, on sèche la plaque avec du papier absorbant. Ensuite, on resuspend les cristaux de formazan avec 2000_, de solution de solubilisation de MTT, on laisse agiter à 15Orpm pendant 15 minutes à température ambiante pour bien suspendre les cristaux de formazan. Les résultats sont exprimés en densité optique à 570nm, en retranchant la valeur de la densité optique à 670nm qui représente le bruit de fond. Le résultat est exprimé en fonction du pourcentage d'absorption par rapport au pourcentage d'absorption relevé pour les cellules contrôles (non traitées par un composé). blanc Contrôle Dilution Dilution 1,25x 0,6254x 0,09 1,465 1,295 1,375 0,085 1,479 1,199 1,197 0,087 1,485 1,141 1,146 0,088 1,413 1,164 1,153 0,088 1,903 1,252 1,234 moyenne 0,0876 1,549 1,210 1,221 écart-type 0,0018 0,1999 0,0632 0,0931 % vitalité 100 75 76 Dilution Dilution Dilution Dilution 0,3125x 0,156x 0,078x 0,039x 1,384 1,812 1,439 1,276 1,251 1,278 1,295 1,312 1,279 1,402 1,342 1,384 1,255 1,298 1,265 1,464 1,336 1,401 1,333 1,339 moyenne 1,301 1,438 1,334 1,355 écart-type 0,0574 0,2166 0,0658 0,0725 % vitalité 80 91 85 84 Les dilutions de la solution mère de 0,156x et 0,078x donnent des cytotoxicités similaires, avec une meilleure précision pour 0,07x.EXAMPLE 1 Evaluation of the Cytotoxicity of the Composition According to the Invention This test serves to define the maximum tolerable dose that can be used on cells without toxic effect, by rapid and sensitive quantification of cell proliferation and viability. according to the compositions according to the invention. Briefly, the colorimetric assay is based on the activity of a mitochondrial enzyme, succinate dehydrogenase, which degrades the substrate MTT male (3,4-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide) into formazan crystals. (purple). The amount of formazan salt produced by the cells from MTT indicates cellular vitality and is measured spectrophotometrically at 570 nm. The cells to be tested, keratinocytes of the HaCaT line are inoculated at a rate of 10,000 cells / well, in 2000, with DMEM medium (Lonza, France) supplemented with 10% fetal calf serum (Lonza, France) and 5% L-Glutamine. (Lonza, France), then placed in a CO2 incubator (5% CO2) at 37 ° C to a confluence of about 85%. Then the medium is replaced by 2000_, fresh identical medium containing the different concentrations of compositions according to the invention. The compositions are prepared in this way: Marine Source Water (Soliance) and polysaccharide (Soligel, Soliance) samples are kept cool until used. The glucosaccharide sample (Bioecolia, Solabia) is stored at room temperature. Firstly, a stock solution concentrated 10 times is prepared. Marine Source Water 12.50% 3125pL Soligel 1% 250 mg Bioecolia 5% 1250 mg Sterile water qsp for 25mL 15 From the stock solution, a solution 51 is prepared which comprises 50% of stock solution diluted in 50% of medium cell culture (DMEM supplemented with 10% FCS and 5% L-Glutamine), then the SA to SH solutions are prepared by cascade dilution in the same culture medium. 20 concentrations (%) Stock solution 51 SA SB SC Source water Marine 12,50% 6,25% 3,13% 1,56% 0,78% Soligel 1% 0,50% 0,25% 0,13% 0.06% Bioecolia 5% 2.50% 1.25% 0.63% 0.31%% dilution 10X 5X 2.5X 1.25X 0.625X concentrations (%) SD SE SF SG SH Source Water 0, 39% 0.20% 0.10% 0.05% 0.02% Marine Soligel 0.03% 0.02% 0.01% 0.00% 0.00% Bioecolia 0.16% 0.08% 0 , 04% 0.02% 0.01%% dilution 0.312X 0.156X 0.078X 0.0395X 0.0195X10 The aliquots are stored in sterile tubes immediately frozen at -20 ° C and stored at -80 ° C. After adding these different solutions, the cells are reincubated for 24 hours before carrying out the MTT test. Then, 2 mL of fresh MTT solution is prepared by diluting the powder to 5 mg / ml (Sigma) in PBS. Under sterile conditions, 200 μl of MTT solution is added to each well. After homogenization, the plate is incubated at 37C, 5% CO2) to allow metabolism of MTT for 3 to 4 hours. The solubilization solution of MTT (DMSO / Isopropanol - 1: 1) is prepared. The medium is removed, leaving the formed formazan crystals in the plate, and the plate is dried with absorbent paper. Then, the formazan crystals were resuspended with 2000 μl of MTT solubilization solution, stirred at 15 rpm for 15 minutes at room temperature to suspend the formazan crystals. The results are expressed in optical density at 570 nm, subtracting the value of the optical density at 670 nm which represents the background noise. The result is expressed as a function of the percentage of absorption relative to the absorption percentage recorded for the control cells (not treated with a compound). white Control Dilution Dilution 1.25x 0.6254x 0.09 1.465 1.295 1.375 0.085 1.479 1.199 1.197 0.087 1.485 1.141 1.146 0.088 1.413 1.164 1.153 0.088 1.903 1.252 1.234 average 0.0876 1.549 1.210 1.221 standard deviation 0.0018 0.1999 0, 0632 0.0931% vitality 100 75 76 Thinning Thinning Thinning Thinning 0.3125x 0.156x 0.078x 0.039x 1.384 1.812 1.439 1.276 1.251 1.278 1.295 1.312 1.279 1.402 1.342 1.384 1.255 1.298 1.265 1.464 1.336 1.401 1.333 1.339 mean 1.301 1.438 1.334 1.355 standard deviation 0.0574 0.2166 0.0658 0.0725% Vitality 80 91 85 84 Dilutions of the stock solution of 0.156x and 0.078x give similar cytotoxicities, with better accuracy for 0.07x.
Cette dernière concentration sera donc utilisée pour la suite des tests. Elle correspond à un pourcentage pour chacun des éléments de: Eau de Source Marine 0,89% Soligel 0,07% Bioecolia 0,35% Exemple 2 : Effet protecteur de la composition sur les cellules Des kératinocytes de lignée HaCaT sont mis en culture en 96 puits (8500 cellules/puits) dans du milieu DMEM (Lonza) supplémenté par 10% de SVF (Lonza) et 1% de L-Glutamine (Lonza) jusqu'à confluence (4 jours). On induit alors leur différenciation par ajout de calcium (1,45mM) pendant 24h. Les cellules sont ensuite incubées soit 48h (pour la (3- défensine), soit 5 jours avec un milieu de culture contenant la composition de l'exemple 1 à la dilution de 0,078x. Le milieu de culture est ensuite remplacé pendant 4h par du milieu de culture seul. Ensuite, les cellules sont fixées, puis marquées par des anticorps ciblant différentes protéines. Une mesure est également effectuée sur le noyau des cellules (ce dernier marquage permettant de contrôler le nombre de cellules par puits). Le marquage par anticorps s'effectue de la façon suivante : on rince les cellules au PBS à 37°C, on fixe les cellules par une solution de PBS contenant 4% de paraformaldéhyde pendant 16mn, on rince à nouveau 5 mn au PBS à 37°C, on ajoute en quantité suffisante du NH4C1 pendant 10mn à 50mM, on rince 5 mn au PBS, puis on fait agir du Triton 0.1% pendant 3mn pour perméabiliser les cellules et on rince pendant 5 mn au PBS.This last concentration will be used for further tests. It corresponds to a percentage for each of the elements of: Marine Source Water 0.89% Soligel 0.07% Bioecolia 0.35% Example 2: Protective Effect of the Composition on the Cells HaCaT line keratinocytes are cultured in vitro. 96 wells (8500 cells / well) in DMEM medium (Lonza) supplemented with 10% FCS (Lonza) and 1% L-Glutamine (Lonza) until confluence (4 days). Their differentiation is then induced by adding calcium (1.45 mM) for 24 hours. The cells are then incubated for 48 hours (for (3-defensin) or 5 days with a culture medium containing the composition of Example 1 at a dilution of 0.078 × The culture medium is then replaced for 4 hours with Then, the cells are fixed and then labeled with antibodies targeting different proteins, and a measurement is also performed on the nucleus of the cells (the latter labeling makes it possible to control the number of cells per well). is carried out in the following manner: the cells are rinsed with PBS at 37 ° C., the cells are fixed with a solution of PBS containing 4% of paraformaldehyde for 16 minutes, then rinsed again for 5 minutes with PBS at 37 ° C., NH4Cl is added in sufficient quantity for 10 minutes to 50 mM, rinsed for 5 minutes with PBS, then 0.1% Triton is stirred for 3 minutes to permeabilize the cells and rinsed for 5 minutes with PBS.
Ensuite on fait agir du PBS contenant 3% de BSA(Sigma) et 10% goat serum (Life Technology Invitrogen) pendant lh, afin de bloquer les sites non spécifiques. Les anticorps primaires sont dilués au 1/50 dans du PBS contenant 1% de BSA puis sont mis à incuber pendant 2h à température ambiante (sauf la Caspase 14 pour laquelle la dilution de l'anticorps est au 1/100). On opère un rinçage pendant 5 mn au PBS. Référence des anticorps primaires utilisés: anticorps réf, fournisseur origine Anti-CASP14 Humain 157h00023581-a01 Tebu-bio souris Anti-FLG HPA030188 Sigma lapin Anticorps monoclonal Anti-KLK5, (C-terminal) SAB1403169 Sigma souris Anticorps monoclonal Anti-OCLN (1G7) CB1044-10OUG Merck- souris Millipore Anticorps polyclonal 036sc-20798 Tebu-bio lapin Anti Beta-defensine 2 (FL-64) IgG Puis on procède pendant 2 heures à température ambiante au marquage par l'anticorps secondaire adéquat choisi en fonction de l'origine des anticorps primaires (voir le tableau récapitulatif des anticorps primaires). Ce sera : - soit une solution de PBS avec un anticorps anti-lapin couplé Alexa 488 (Life Technology Invitrogen) dilué au 1/200 dans le cas où l'anticorps primaire est de lapin; - soit une solution de PBS avec un anticorps anti-souris couplé Alexa 488 (Life Technology Invitrogen) dilué au 1/200 dans le cas où l'anticorps primaire est de souris. Dans les deux cas, les solutions contiennent également du réactif de Hoechst (Life Technology Invitrogen) dilué au 1/5000. Après deux lavages de 5 minutes chacun au PBS contenant 1% de Tween20® (Sigma), on rince au PBS seul pendant 5mn, puis on ajoute 100111 PBS par puits. La mesure de la fluorescence est faite par un spectrophotomètre à fluorescence Enspire (Perkin Elmer) à 2 longueurs d'onde : 1-quantification du marquage des protéines : Excitation 495 nm/Emission 519 nm 2-quantification du marquage des noyaux cellulaires : Excitation 361 nm/ Emission 486 nm. On détermine alors la fluorescence relative (entre la a) sur l'expression de la caspase 14 : Cette protéase est impliquée dans la formation du NMF. Elle permet d'assurer hydratation et photoprotection au niveau de la couche 25 cornée. La caspase 14 est une protéase non apoptotique exprimée principalement dans l'épiderme par les kératinocytes. Elle est présente dans les couches de différenciations de l'épiderme, mais n'est activée qu'à l'interface entre la couche granuleuse et la couche cornée, indiquant que la protéase joue un rôle majeur dans la différenciation 30 terminale des kératinocytes. Par son action sur la maturation de la filaggrine, la caspase 14 est impliquée dans la cornification de l'épiderme. La protéase jouerait également un rôle dans la maturation des cornéodesmosomes. fluorescence des protéines et celles des noyaux cellulaires).Next, PBS containing 3% BSA (Sigma) and 10% goat serum (Life Technology Invitrogen) was reacted for 1 h in order to block non-specific sites. The primary antibodies are diluted 1/50 in PBS containing 1% BSA and are then incubated for 2 hours at room temperature (except Caspase 14 for which the dilution of the antibody is 1/100). Rinsing is carried out for 5 minutes with PBS. Reference of primary antibodies used: antibody ref, supplier origin Anti-CASP14 Human 157h00023581-a01 Tebu-bio mice Anti-FLG HPA030188 Sigma rabbit monoclonal antibody Anti-KLK5, (C-terminal) SAB1403169 Sigma mouse monoclonal antibody Anti-OCLN (1G7) CB1044-10OUG Merck-mouse Millipore Polyclonal Antibody 036sc-20798 Tebu-bio rabbit Anti Beta-defensin 2 (FL-64) IgG Then one proceeds for 2 hours at room temperature to the labeling with the appropriate secondary antibody chosen according to the origin of the primary antibodies (see the summary table of primary antibodies). This will be: - either a PBS solution with an Alexa 488 coupled anti-rabbit antibody (Life Technology Invitrogen) diluted to 1/200 in the case where the primary antibody is rabbit; or a PBS solution with an Alexa 488 conjugated anti-mouse antibody (Life Technology Invitrogen) diluted to 1/200 in the case where the primary antibody is mouse. In both cases, the solutions also contain Hoechst reagent (Life Technology Invitrogen) diluted 1/5000. After two washes of 5 minutes each with PBS containing 1% Tween20® (Sigma), rinsed with PBS alone for 5 minutes, then 100111 PBS per well. The measurement of the fluorescence is made by a fluorescence spectrophotometer Enspire (Perkin Elmer) at 2 wavelengths: 1-quantification of the labeling of the proteins: Excitation 495 nm / Emission 519 nm 2-quantification of the labeling of the cell nuclei: Excitation 361 nm / Emission 486 nm. The relative fluorescence (between a) and the expression of caspase 14 is then determined: This protease is involved in NMF formation. It ensures hydration and photoprotection at the level of the horny layer. Caspase 14 is a non-apoptotic protease expressed mainly in the epidermis by keratinocytes. It is present in the differentiation layers of the epidermis, but is activated only at the interface between the granular layer and the stratum corneum, indicating that the protease plays a major role in the terminal differentiation of keratinocytes. By its action on the maturation of filaggrin, caspase 14 is involved in the cornification of the epidermis. Protease also plays a role in the maturation of corneodesmosomes. fluorescence of proteins and those of cellular nuclei).
Témoin négatif (sans AcI) Témoin En présence de la différencié (avec composition de Ca) l'exemple 1 0,04 1,01 1,11 Pourcentage observé 0% (témoin) 110% 122% On note une augmentation de l'expression de la caspase 14 de 12 % en présence de la composition cosmétique pendant 5 jours par rapport aux cellules différenciées témoins. b) sur l'expression de la kalikréine 5 Cette protéase permet la maturation de la filaggrine, qui a pour effet le renforcement des cornéocytes et permet donc le maintien de l'efficacité de la barrière cutanée. Témoin négatif Témoin En présence de (sans AcI) différencié (avec la composition Ca) de l'exemple 1 0,04 0,34 0,43 Pourcentage observé 0% 98% 121% En présence de la composition cosmétique, l'expression de la kalikréine 5 est augmentée de 22% par rapport aux cellules différenciées témoins après 5 jours en contact avec la composition de l'exemple 1 sur les cellules contrôles. Les améliorations de l'expression de caspase 14 et de kalikréine 5 en condition physiologique traduisent la capacité des composants de la composition cosmétique testée à améliorer la différenciation cellulaire pour renforcer l'épiderme grâce à une amélioration de la formation de NMF et une amélioration de la maturation de la filaggrine, ce qui va ainsi améliorer l'efficacité de la fonction barrière assurée par la couche cornée. Ainsi, en conditions physiologiques, la composition de l'exemple 1 améliore l'expression des protéases responsables de la maturation et de la différenciation des kératinocytes, permettant ainsi de renforcer la fonction barrière. c) Sur l'expression de l'occludine : Cette protéine d'adhérence est spécifique du tissu épithélial. Elle appartient à la famille des protéines des jonctions serrées, qui scellent les cellules épithéliales et endothéliales entre elles. Le rôle de cette protéine est de bloquer la circulation des fluides pour assurer l'étanchéité des compartiments tissulaires. Cette augmentation traduit une meilleure régulation de la perméabilité de l'épithélium cutané qui permet de réduire la perte insensible en eau. Témoin négatif Témoin En présence de la (sans AcI) différencié composition de (avec Ca) l'exemple 1 0,42 0,98 1,25 Pourcentage observé 0% 82% 105% En présence de la composition de l'exemple 1, l'expression de l'occludine, qui est diminuée lors de l'induction de la différenciation par le Ca de 20%, est rétablie à un niveau 5% supérieur à son niveau originel. d) sur l'expression de la f3-défensine : La f3-défensine est un peptide antimicrobien (PAM). Synthétisé par les cellules épithéliales, ce peptide contribue au système de défense immunitaire inné de l'organisme par son activité antimicrobienne et anti-inflammatoire. Témoin négatif Témoin En présence de la (sans AcI) différencié (avec composition de Ca) l'exemple 1 0,15 0,45 0,52 Pourcentage observé 0% 139% 163%25 On note une augmentation de l'expression de la f3-défensine de plus de 20% grâce à l'ajout de la composition selon l'exemple 1 pendant 48h dans le milieu de culture cellulaire. L'effet observé sur l'expression de l'occludine traduit la capacité de la composition selon l'exemple 1 à induire le rétablissement de l'adhésion intercellulaire, et ainsi à renforcer l'intégrité de la fonction barrière de l'épiderme. Enfin la nette augmentation de l'expression de la f3-défensine indique une capacité de cette composition à activer un système de défense.Negative control (without AcI) Control In the presence of the differentiated (with Ca composition) Example 1 0.04 1.01 1.11 Observed percentage 0% (control) 110% 122% Increased expression of caspase 14 of 12% in the presence of the cosmetic composition for 5 days compared to the differentiated control cells. b) on the expression of kalikrein 5 This protease allows the maturation of filaggrin, which has the effect of strengthening the corneocytes and thus allows the maintenance of the effectiveness of the cutaneous barrier. Negative Control Control In the presence of (without AcI) differentiated (with the Ca composition) of Example 1 0.04 0.34 0.43 Observed percentage 0% 98% 121% In the presence of the cosmetic composition, the expression of kalikrein 5 is increased by 22% relative to the differentiated control cells after 5 days in contact with the composition of Example 1 on the control cells. Improvements in the expression of caspase 14 and kalikrein in physiological condition reflect the ability of the components of the cosmetic composition tested to enhance cell differentiation to strengthen the epidermis through improved NMF formation and improved maturation of filaggrin, which will thus improve the efficiency of the barrier function provided by the stratum corneum. Thus, under physiological conditions, the composition of Example 1 improves the expression of proteases responsible for the maturation and differentiation of keratinocytes, thus making it possible to reinforce the barrier function. c) Expression of Occludin: This adhesion protein is specific for epithelial tissue. It belongs to the family of tight junction proteins, which seal the epithelial and endothelial cells together. The role of this protein is to block the flow of fluids to seal the tissue compartments. This increase reflects a better regulation of the permeability of the cutaneous epithelium which makes it possible to reduce the insensitive loss in water. Negative Control Control In the presence of the (without AcI) differentiated composition of (with Ca) Example 1 0.42 0.98 1.25 Percentage observed 0% 82% 105% In the presence of the composition of Example 1, the expression of occludin, which is decreased upon induction of 20% Ca differentiation, is restored to a level 5% higher than its original level. d) on the expression of f3-defensin: f3-Defensin is an antimicrobial peptide (PAM). Synthesized by epithelial cells, this peptide contributes to the innate immune system of the body by its antimicrobial and anti-inflammatory activity. Negative Control Control In the presence of the differentiated (without AcI) (with Ca composition) Example 1 0.15 0.45 0.52 Percentage observed 0% 139% 163% 25 There is an increase in the expression of f3 defensin more than 20% by adding the composition according to Example 1 for 48 hours in the cell culture medium. The effect observed on the expression of occludin reflects the ability of the composition according to Example 1 to induce the restoration of intercellular adhesion, and thus to enhance the integrity of the barrier function of the epidermis. Finally, the marked increase in the expression of f3-defensin indicates a capacity of this composition to activate a defense system.
En condition physiologique, la composition de l'exemple 1 améliore la fonction barrière grâce au renforcement d'une part de la différenciation cellulaire, d'autre part de l'adhésion, et donc de la cohésion intercellulaire. De plus, la composition cosmétique de l'exemple 1 renforce également la fonction barrière en stimulant les défenses immunitaires cellulaires innées de l'organisme, permettant à l'épiderme de mieux résister aux attaques de l'environnement. Exemple 3 : On observe les modifications observées après avoir traité les cellules par la composition cosmétique à tester, puis induit un stress chimique sur les cellules pour simuler une agression de la peau. Brièvement, les cellules sont incubées pendant 5 jours avec un milieu de culture contenant la composition de l'exemple 1 à la dilution de 0,078x. Le milieu de culture est ensuite remplacé pendant 4h par du milieu de culture contenant du SDS (0.025%) pour altérer chimiquement la structure des membranes cellulaires et ainsi mimer une perturbation de la fonction barrière de la peau. Ensuite, les cellules sont fixées, puis marquées par des anticorps ciblant différentes protéines. Une mesure est également effectuée sur le noyau des cellules (ce dernier marquage permettant de contrôler le nombre de cellules par puits). Les étapes suivantes du protocole sont les mêmes qu'à l'exemple précédent. a) sur l'expression de la filaggrine Cette protéine de la couche granuleuse est essentielle à la fonction barrière : elle assure l'arrangement des filaments de kératine et joue un rôle capital pour la formation de la couche cornée. Elle est significativement altérée en cas de dermatite atopique. Témoin négatif (sans AcI) Témoin En présence de la différencié (avec composition de Ca) l'exemple 1 0,23 3,04 4,65 Pourcentage observé 0% 144% 220% On observe une hausse de l'expression de filaggrine de 120% sur les cellules traitées par la composition de l'exemple 1, puis ayant subi un traitement par le SDS par rapport aux cellules témoins différenciées. La composition de l'exemple 1 a permis à la cellule de réagir pour assurer, suite à une perturbation chimique, une augmentation très significative de la filaggrine. Ceci permet d'agir directement sur la synthèse du composé majeur pour la cohésion des cornéocytes, ce qui renforce leur structure. L'augmentation de l'expression de la filaggrine après induction du stress par SDS traduit une amélioration de la régulation de l'homéostasie de la peau, qui réagit mieux face aux perturbations de l'environnement. Ainsi, en conditions hostiles, lorsque la fonction barrière est altérée, la composition de l'exemple 1 agit sur la synthèse de filaggrine pour activer la maturation des cornéocytes et assurer ainsi une régulation efficace qui rétablira plus rapidement l'homéostasie de l'épiderme.In physiological condition, the composition of Example 1 improves the barrier function by reinforcing, on the one hand, cell differentiation, on the other hand adhesion, and therefore intercellular cohesion. In addition, the cosmetic composition of Example 1 also enhances the barrier function by stimulating the innate cellular immune defenses of the body, allowing the epidermis to better withstand attacks from the environment. Example 3 The observed changes are observed after having treated the cells with the cosmetic composition to be tested, and then induced a chemical stress on the cells to simulate an attack on the skin. Briefly, the cells are incubated for 5 days with a culture medium containing the composition of Example 1 at a dilution of 0.078x. The culture medium is then replaced for 4 hours by culture medium containing SDS (0.025%) to chemically alter the structure of the cell membranes and thus mimic a disturbance of the skin barrier function. Then the cells are fixed and then labeled with antibodies targeting different proteins. A measurement is also performed on the nucleus of the cells (the latter marking making it possible to control the number of cells per well). The following steps of the protocol are the same as in the previous example. a) on the expression of filaggrin This protein of the granular layer is essential for the barrier function: it ensures the arrangement of the keratin filaments and plays a key role in the formation of the stratum corneum. It is significantly impaired in atopic dermatitis. Negative control (without AcI) Control In the presence of the differentiated (with Ca composition) Example 1 0.23 3.04 4.65 Percentage observed 0% 144% 220% An increase in the expression of filaggrin of 120% on the cells treated with the composition of Example 1, then having undergone treatment with SDS compared to the differentiated control cells. The composition of Example 1 allowed the cell to react to ensure, following a chemical disturbance, a very significant increase in filaggrin. This makes it possible to act directly on the synthesis of the major compound for the cohesion of corneocytes, which reinforces their structure. The increased expression of filaggrin after stress induction by SDS reflects an improvement in the regulation of skin homeostasis, which responds better to environmental disturbances. Thus, under hostile conditions, when the barrier function is impaired, the composition of Example 1 acts on the synthesis of filaggrin to activate the maturation of the corneocytes and thus provide effective regulation that will restore epidermal homeostasis more rapidly.
Exemple 4 : Crème apaisante et rééquilibrante Dans les exemples suivants, toutes les quantités sont indiquées en pourcentage massique de matière active par rapport au poids total de la composition. Nom INCI % Eau QSP 100 Beurre de Butyrospermum Parkii 5 Squalane 4 Propanediol 2 Glycérine 2 Pentylène Glycol 1 Diméthicone 1 Alcool Cétylique 1 Maris Aqua (*) 10 Huile de Persea Gratissima 1 Polyacrylate de Sodium 1 Stéarate de Glycéryle & Stéarate de PEG-100 1 Polyglycérides Oléique/Linoléique/Linolénique 1 Alpha-Glucane Oligosaccharide 10 Acétate de Tocophéryl 0,1 Conservateur QS Gomme de Rhizobian (**) 0.01 (*) Eau de Source Marine (Soliance) (**) gomme de Rhizobium Soligel (Soliance) Exemple 5 : Crème apaisante et nourrissante Nom INCI % Eau QSP 100 CI 75810 0,004 Carbomer 0,5 Gomme de Rhizobian (*) 0.01 Glycérine 6,00 Propanediol 4,55 Phytate de Sodium 0,05 Dioxyde de Titane 0,10 Acide Citrique 0,10 Beurre de Butyrospermum Parkii 5,00 Alcool Isostéarylique & Cocoate de Butylène 6,00 Glycol & Ethylcellulose Diméthicone 4,00 Alcool Cétylique 5,00 Alcool Stéarylique 5,00 Triglyceride Caprylique/Caprique 2,20 Aqua & Trométhamine 3,00 Polyacrylate de Sodium 0,30 CI 77891 & CI 77019 & Oxyde d'Etain 2,00 Dextran Sulphate de Sodium (Sodium dextran sulfate) 0 20 Maris Aqua (**) 10 Alpha-Glucane Oligosaccharide 10 Extrait d'Alchemilla Vulgaris & Extrait d'Equisetum 5,00 Arvense & Extrait tige et feuille d'Hedera Helix Butylène Glycol & Extrait de racine de Ruscus 2,00 Aculeatus Glycérine & Aqua & Coco-Glucoside & Acide 3,00 Sorbique & Acétyl Tetrapeptide-15 Tocophérol 0,03 Conservateur QS (*) gomme de Rhizobium Soligel (Soliance) (**) Eau de Source Marine (Soliance)EXAMPLE 4 Soothing and rebalancing cream In the following examples, all the quantities are indicated as a percentage by weight of active material relative to the total weight of the composition. INCI Name% Water QSP 100 Butyrospermum Parkii 5 Squalane 4 Propanediol 2 Glycerin 2 Pentylene Glycol 1 Dimethicone 1 Cetyl Alcohol 1 Aqua Maris (*) 10 Persea Oil Gratissima 1 Sodium Polyacrylate 1 Glyceryl Stearate & PEG-100 Stearate 1 Oleic / Linoleic / Linolenic Polyglycerides 1 Alpha-Glucan Oligosaccharide 10 Tocopheryl Acetate 0.1 Preservative QS Rhizobian Gum (**) 0.01 (*) Marine Source Water (Soliance) (**) Rhizobium Gum Soligel (Soliance) Example 5: Cream soothing and nourishing INCI name% Water QSP 100 CI 75810 0.004 Carbomer 0.5 Rhizobian gum (*) 0.01 Glycerin 6.00 Propanediol 4.55 Sodium Phytate 0.05 Titanium Dioxide 0.10 Citric Acid 0, 10 Butyrospermum Parkii Butter 5.00 Isostearyl Alcohol & Butylene Cocoate 6.00 Glycol & Ethylcellulose Dimethicone 4.00 Cetyl Alcohol 5.00 Stearyl Alcohol 5.00 Caprylic / Caprique Triglyceride 2.20 Aqua & Tromethamine 3.00 Sodium Polyacrylate 0.30 C I 77891 & CI 77019 & Tin Oxide 2.00 Dextran Sodium Sulphate (Sodium dextran sulfate) 0 20 Aqua Maris (**) 10 Alpha-Glucan Oligosaccharide 10 Extract of Alchemilla Vulgaris & Equisetum Extract 5.00 Arvense & Extract Hedera Helix Butylene Glycol Stem & Leaf Extract & Ruscus Root Extract 2.00 Aculeatus Glycerin & Aqua & Coco-Glucoside & Acid 3.00 Sorbic & Acetyl Tetrapeptide-15 Tocopherol 0.03 Preservative QS (*) Gum Rhizobium Soligel (Soliance) (**) Marine Spring Water (Soliance)
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