FR2989270A1 - Composition cosmetique cutanee anti-age contenant des activateurs de l'aconitase mitochondriale - Google Patents

Abstract

L'invention concerne une composition cosmétique cutanée anti-âge, caractérisée en ce qu'elle comprend comme ingrédient actif activateur de l'aconitase mitochondriale au moins un composé de type polyphénolique en mélange avec des excipients inertes acceptables en cosmétique cutanée. L'invention concerne également l'utilisation de cette composition pour lutter contre les manifestations physiques du vieillissement cutané et pour protéger la peau contre les effets des agressions extérieures tels que les rayonnements ultraviolets.

Description

Le domaine technique de la présente invention est celui des compositions cosmétiques destinées aux soins cutanés. Depuis quelques années, la mitochondrie se révèle être un des organites les plus importants de la cellule pour limiter et ralentir les phénomènes de vieillissement. La mitochondrie intervient dans de nombreux métabolismes cellulaires comme par exemple la production d'énergie cellulaire. C'est un composant cellulaire présentant une particularité importante car elle possède son propre acide désoxyribonucléique (ADN) appelée ADN mitochondriale (ADN mt). Ainsi, la mitochondrie est un constituant cellulaire très particulier. Lorsque cet ADN mt est détérioré, ce qui peut se faire dès l'état primitif des cellules, cela peut entraîner d'importants dysfonctionnements cellulaires. Par exemple, ces dysfonctionnements peuvent être à l'origine, dans le cas de la peau, d'un vieillissement cutané rapide et précoce. Ceci est particulièrement vrai au niveau des cellules cutanées comme les kératinocytes. L'aconitase (ou encore nommée citrate (isocitrate) hydrolyase) est une enzyme clef au niveau de la mitochondrie pour son bon fonctionnement. On trouve cette enzyme par exemple dans le cycle de Krebs et elle intervient également dans la réparation de l'ADN mitochondriale (ADN mt) (Biochimica et Biophysica acta 1790 (2009), 1021-1029). Il est donc intéressant d'activer cette aconitase mitochondriale pour maintenir la mitochondrie dans un bon état de fonctionnement. Dans le domaine de la cosmétique cutanée, la protection des mitochondries représente donc une des cibles d'action les plus importantes pour limiter le vieillissement cutané. Les activateurs d'aconitase mitochondriale connus actuellement sont de nature peptidique. En effet, on connaît la demande de brevet FR-2 915 379 qui décrit l'utilisation, dans une composition cosmétique topique, d'un principe actif de nature peptidique issu de l'hydrolyse du riz. Ce principe actif, défini comme un mélange de composés majoritairement peptidiques ou polypeptidiques, est destiné à activer l'aconitase et protéger les mitochondries. On connait également la demande de brevet FR-2 915 378 qui décrit l'utilisation, dans une composition cosmétique topique, d'un principe actif de nature peptidique issu de l'hydrolyse des protéines du soja. Là aussi, le principe actif, défini comme un mélange de composés majoritairement peptidiques ou polypeptidiques, est destiné à activer l'aconitase et protéger les mitochondries.

La demande de brevet FR-2 915 397 décrit quant à elle une composition contenant, en tant que principe actif protecteur des mitochondries, un peptide capable d'activer l'aconitase. Ce peptide, de formule générale décrite, comprend de 3 à 50 résidus d'acides aminés et plus particulièrement de 3 à 8 résidus. Enfin, la demande de brevet FR-2 938 766 décrit une composition cosmétique comprenant en tant que principe actif, activateur de l'aconitase et protecteur des mitochondries, un hydrolysat peptidique de feuilles de vigne. Ce principe actif contient des composés de nature peptidique qui sont des peptides de moins de 10 kDa. Dans toutes ces demandes de brevet, le principe actif peut être associé à un autre principe actif qui favorise son action. Ce principe actif additionnel peut être un composé ayant une action anti-radicalaire ou anti-oxydante et choisi parmi les extraits polyphénoliques de plantes. Ainsi, l'art antérieur montre bien que le composé de nature peptidique est le composé activateur d'aconitase le plus connu et le plus utilisé. Les composés phénoliques étant 30 utilisés comme anti-radicalaire ou anti-oxydant. Ces compositions nécessitent donc la présence de deux ingrédients actifs pour une action la plus complète possible ce qui est coûteux au niveau de la fabrication. De plus, les composés phénoliques sont réputés présenter des inconvénients 35 dans les compositions cosmétiques. Le but de la présente invention est de fournir une composition cosmétique cutanée dans laquelle l'activateur de l'aconitase est un composé phénolique facilement disponible et permettant une diminution des coûts de fabrication et une action complète. L'invention a donc pour objet une composition cosmétique 5 cutanée anti-âge, caractérisée en ce qu'elle comprend comme ingrédient actif activateur de l'aconitase mitochondriale au moins un composé de type polyphénolique en mélange avec des excipients inertes acceptables en cosmétique cutanée. Selon une caractéristique de l'invention, l'ingrédient 10 actif est la delta-viniférine. Selon une autre caractéristique de l'invention, l'ingrédient actif est présent, par rapport à la masse totale de la composition, en une quantité comprise entre 0,05% et 5% d'une solution dont la concentration en delta-viniférine est 15 comprise entre 10 ppm et 10 000 ppm. Selon une autre caractéristique de l'invention, l'ingrédient actif est présent, par rapport à la masse totale de la composition, en une quantité comprise entre 0,1% et 2,5% d'une solution dont la concentration en delta-viniférine 20 est comprise entre 50 et 500 ppm. Selon une caractéristique de l'invention, la composition se présente sous la forme de crèmes, gels, émulsions eau dans huile, émulsions huile dans eau, laits, lotions, sérums ou tout autre forme appropriée pour l'application topique. 25 L'invention concerne également l'utilisation de la composition selon l'invention pour lutter contre les manifestations physiques du vieillissement cutané. Selon une caractéristique de l'invention, la composition est utilisée pour protéger la peau contre les effets des 30 agressions extérieures. Selon une caractéristique de l'invention, les agressions extérieures sont constituées par les rayonnements ultraviolets. La composition selon l'invention permet donc à l'aide 35 d'un seul ingrédient actif d'obtenir à la fois une protection contre les radicaux libres et une activation de l'aconitase.

La composition selon l'invention présente l'avantage d'être plus stable par rapport aux autres compositions cosmétiques à base de polyphénol. D'autres caractéristiques, détails et avantages de 5 l'invention seront mieux compris à la lecture du complément de description qui va suivre de modes de réalisation donnés à titre d'exemple en relation avec les exemples de composition, la partie expérimentale et les figures 1 et 2. Un des facteurs de dégradation de l'ADN mitochondrial 10 (ADN mt) au niveau cutané concerne les agressions extérieures. Ces agressions extérieures peuvent par exemple résulter d'une exposition trop importante à des radiations de type UV. En effet, cette agression liée aux UV peut entrainer des modifications de cet ADN mt via la production de radicaux 15 libres et donc un vieillissement cutané précoce. Des études ont en outre démontré qu'un déficit en aconitase est associé à un stress oxydatif et un vieillissement et peut être impliqué dans une diminution graduelle de la fonction des mitochondries. L'aconitase joue 20 un rôle prépondérant dans la réparation de l'ADN mt dégradé. Avec l'âge, la stimulation de cette enzyme devient moins importante, ce qui entraine un vieillissement cutané par dégradation cellulaire (Biochimica et Biophysica acta 1790 (2009) , 1021-1029). 25 Or, l'activité mitochondriale est importance pour les cellules de la peau comme les kératinocytes (Journal of Investigative dermatology, (2007), 127, 1084-1093). La demanderesse a récemment mis en évidence qu'un composé de type polyphénolique, plus particulièrement un dérivé du 30 resvératrol, a la capacité surprenante de protéger à la fois les cellules souches kératinocytaires agressées par un stress UV, mais aussi pour activer l'aconitase kératinocytaire, ce qui constitue une nouveauté en terme de protection cutanée. L'intérêt d'un tel résultat sur l'aconitase, 35 contrairement à ce qui était connu jusque là, est lié au fait que non seulement on obtient une augmentation de l'activité de l'aconitase mais aussi une bonne protection cellulaire des cellules souches kératinocytaires. Les polyphénols sont connus dans la littérature pour piéger les radicaux libres mais sont aussi répertoriés pour 5 avoir de fortes activités d'inhibition enzymatique. Le composé de type polyphénolique selon l'invention est le dérivé du resvératrol, la delta-viniférine (numéro CAS 681293-15-2.), de structure chimique : OH OH 10 Cette molécule est obtenue par action d'une laccase du champignon Botrytis cinerea sur le resvératrol. Les résultats obtenus ici avec la composition selon l'invention sur la protection mitochondriale par activation 15 de l'aconitase sont donc totalement inattendus. En effet, rien n'indiquait que la delta-viniférine pourrait avoir un effet sur l'activation de cette enzyme. Ceci est particulièrement intéressant pour diverses applications cutanées notamment dans l'anti-âge. En effet, 20 cela permet de prolonger l'activité des mitochondries matures par activation de l'aconitase. De plus, cela permet de préserver les mitochondries des cellules souches kératinocytaires. La composition selon l'invention permet ainsi d'obtenir 25 une amélioration au niveau de l'aspect des rides et des ridules, ainsi qu'au niveau de l'hydratation et de la fermeté cutanée. On obtient également un teint plus éclatant et uniforme et une amélioration des manifestations physiques du vieillissement cutané par exemple au niveau des tâches de 30 sénescence. HO OH Structure de la delta-viniferine Les compositions selon l'invention sont préparées selon les étapes suivantes en relation avec les compositions décrites aux exemples 1 et 3 sans caractère limitatif. La phase grasse, phase A, est préparée à une température 5 comprise entre 60°C et 80°C. La phase aqueuse, phase B, est préparée également à une température comprise entre 60°C et 80°C. La crème de type émulsion est ensuite réalisée en versant la phase A dans la phase B sous agitation. L'agitation est ensuite ralentie pour le refroidissement. 10 La phase contenant le principe actif, phase D, est incorporée à l'émulsion ainsi que la phase contenant les excipients restants, phase C à une température d'environ 60°C. Dans le cas de l'exemple 2, la phase aqueuse A est 15 préparée puis mélangée à la phase B contenant le principe actif. Enfin, le sérum est obtenu en ajoutant la phase C. Les compositions selon l'invention peuvent comprendre des gélifiants, des émulsionnants, des émollients, des agents hydratant, des colorants, des parfums, des conservateurs ou 20 tout autre ingrédient habituellement utilisé dans les compositions cosmétiques cutanée. Les compositions selon l'invention sont destinées à être utilisées pour des applications cutanées de 1 à 2 fois par jour sur les zones à traiter. 25 Exemples de compositions topiques : Les quantités indiquées dans les exemples ci-dessous sont en pourcentage par rapport à la masse totale de la composition. 30 Ces exemples de compositions ne sont en rien limitatifs mais illustrent que l'ingrédient actif de l'invention présente une activité même dans des compositions finales commerciales. Pour des raisons de facilité de formulation, dans ces 35 exemples, la delta-viniférine est utilisée sous la forme commerciale viniderm®. Il s'agit d'une mise en solution de la delta-viniférine dans du propane diol 1,3 eau respectivement 70/30, à une concentration d'environ 200 ppm. Exemple 1 : Crème protectrice cutanée. INGREDIENTS QUANTITÉ (%) INCI NAME PHASE A Dub PTL (Stéarinerie 2,00 Pentaerythrityl tetralaurate Dubois) Dub VCI 10 (Stéarinerie 3,00 Isodecyl neopentanoate Dubois) Dub PTO (Stéarinerie 1,50 Pentaerythrityl tetraethylhexanoate Dubois) DC 2503 (Dow Corning) 2,00 Stearyl dimethicone Céramidone (UCIB, 1,00 Octyldodecyl PCA Solabia group) PHASE B Eau déminéralisée Qsp 100 Aqua Ultrez 10 (Noveon) 0,20 Carbomer Conservateurs 1,00 Arlatone LC (Croda) 3,50 Sorbitan stearate / Sorbityl laurate PHASE C Covabead LH 85 (Sensient) 1,00 Methylmethacrylate cross polymer NaOH 10% 0,50 Sodium hydroxide Fucogel (Solabia) 5,00 Biosaccharide gum-1 PHASE D Viniderm® (Solabia) 1,00 Propanediol / Aqua / Vitis vinifera / Extrait de jus de raisin Perfume Violette sérum 0,10 Fragrance anti-âge (Expressions parfumées) Exemple 2 : Sérum protecteur cutané INGREDIENTS QUANTITÉ (%) INCI NAME PHASE A Eau déminéralisée Qsp 100 Aqua Conservateurs 1,00 Sepimax Zen (Seppic) 1,20 Polyacrylate crosspolymer-6 Glycerine 4,00 Glycerin Butylene glycol 3,00 Butylene glycol PHASE B Vinidere (Solabia) 3,00 Propanediol / Aqua / Vitis vinifera / Extrait de jus de raisin Glycolift (Solabia) 10,00 Biosaccharide gum-4 / Eau / Alpha-glucan oligosaccharide / Propanediol / Algin PHASE C Symsol PF3 (Symrise) 0,50 Aqua, Pentylene glycol, Sodium lauryl sulfoacetate, Sodium oleoyl sarcosinate, Sodium chloride, Disodium sulfoacetate, Sodium oleate, Sodium sulfate Perfume Violette sérum 0,10 Fragrance anti-âge (Expressions parfumées) Exemple 3 : Crème anti-âge INGREDIENTS QUANTITÉ (%) INCI NAME PHASE A Emulium kappa (Gattefossé) 4,00 Candelilla/Jojoba/Rice bran Polyglyceryl-3 esters (et) Glyceryl stearate (et) Cetearyl alcohol (et) Sodium stearoyl lactylate Tegosoft AC (Evonik) 2,00 Isoamyl cocoate Parafol 14-97 (Sasol) 3,00 Tetradecane Cétiol C5 (Cognis) 2,00 Coco-caprylate Tegosoft CR (Evonik) 2,00 Cetyl ricinoleate Nacol 16 98 (Sasol) 1,00 Cetyl alcohol Céramidone (UCIB, 1,00 Octyldodecyl PCA Solabia group) PHASE B Eau déminéralisée Qsp 100 Aqua Conservateur 1,00 Zemea (Dupont) 3,00 Propanediol Ecogel (Lucas Meyer) 2,00 Lysolecithin / Sclerotium gum / Xanthan gum / Pullulan PHASE C Fucocert (Solabia) 5,00 Biosaccharide gum-1 Covabead glass (Sensient) 2,00 Magnesium silicate PHASE D Viniderm® (Solabia) 0,25 Propanediol (et) Eau (et) Vitis vinifera extrait de jus de raisin Parfum Marine High Tech 0801972 (Expressions parfumées) 0,20 Fragrance Partie expérimentale : Dans les tests réalisés ici, on utilise de la delta- viniférine en solution à une concentration de 200 ppm dans un mélange propane diol 1,3 / eau dans des proportions respectivement de 70/30. Ce produit est trouvé sous la dénomination commerciale Viniderm®. L'ingrédient actif est ici testé seul pour éviter les problèmes d'interactions. Le placebo est constitué d'eau. 1) Evaluation biologique de l'action de la delta-5 viniférine sur la protection des cellules souches de type kératinocytaires à travers la viabilité cellulaire via l'activité mitochondriale. Des cellules souches épidermiques kératinocytaires sont isolées selon la méthode décrite par Dong (Cell biology int. 10 2007, 31, 733). Ces cellules sont cultivées avec un milieu de culture classique à 37°C. Après 24 heures, le milieu de culture est remplacé par du milieu de culture frais avant l'irradiation aux UV. Les cellules sont alors irradiées avec une dose d'UV B + 15 A selon les doses suivantes de 250 mJ/cm2 pour les UV B et 3,6 J/cm2 pour les UV A. Un témoin non irradié est également effectué en parallèle (contrôle sans UV). A la fin de l'irradiation par UV, le milieu est remplacé 20 par un autre milieu de culture. Ce milieu contient le produit à tester soit avec une concentration en principe actif de 0,019%, soit une concentration de 0,056%. Ce milieu peut également ne pas contenir le produit à tester (contrôle + UV). Les cellules sont incubées pendant 24 heures à 37°C. 25 La viabilité cellulaire est alors observée en utilisant le test classiquement connu en biologie, le test MTT. Dans ce test MTT, le réactif est un sel de tetrazolium (bromure de 3-[4,5 -diméthylthiazol-2-yl] 2,5-diphényl tétrazolium) qui est relié à la succinate déshydrogénase, une 30 enzyme mitochondriale. Ce composé est absorbé par les cellules vivantes puis métabolisé par les enzymes mitochondriales en un composé bleu violet, le formazan, qui sera ensuite dosé spectrophotométriquement à 540 nm. La densité optique est alors directement proportionnelle à 35 l'activité enzymatique mitochondriale qui détermine le nombre de cellules vivantes.

Toutes les expériences sont renouvelées 3 fois. Ce test traduit donc parfaitement la viabilité cellulaire des kératinocytes via l'activité mitochondriale. Les résultats obtenus sont représentés à la figure 1 qui 5 est un graphique illustrant la viabilité cellulaire en fonction du traitement appliqué aux cellules. Dans le cas de l'échantillon de contrôle sans irradiation aux UV (contrôle sans UV), on obtient 100% de viabilité cellulaire. 10 Dans le cas de l'échantillon de contrôle irradié aux UV (contrôle + UV), on obtient 77% de viabilité cellulaire. Dans le cas de cellules irradiées avec des UV et traitées avec une solution selon l'invention contenant 0,019% de Viniderm®, on obtient 89% de viabilité cellulaire. 15 Dans le cas de cellules irradiées avec des UV et traitées avec une solution selon l'invention contenant 0,056% de Viniderm®, on obtient 91% de viabilité cellulaire. On constate qu'avec un traitement des cellules irradiées à l'aide d'une solution selon l'invention avec une 20 concentration de 0,056% de Viniderm®, on observe un très bon résultat puisqu'on est très proche des résultats obtenus avec l'échantillon de contrôle sans UV. La composition selon l'invention permet donc bien de maintenir un bon fonctionnement cellulaire au niveau 25 mitochondrial après irradiation aux UV. 2) Evaluation de l'activité mitochondriale via l'activité de l'aconitase. Des monocouches de kératinocytes humains issues d'une 30 plastie abdominale d'une femme de 36 ans sont cultivées. On teste ici l'ingrédient actif seul pour éviter les problèmes d'interactions. Les kératinocytes sont alors incubés soit en absence de l'ingrédient actif (contrôle), soit en présence de 35 l'ingrédient actif à la concentration de viniderm® à 0,06% dilué directement dans le milieu de culture.

A la fin de la période d'incubation, la quantification de l'activité mitochondriale a été réalisée par mesure en spectrophotométrie de l'isomérisation du citrate en isocitrate par l'aconitase, dans les extraits mitochondriaux des tapis cellulaires. Les résultats obtenus sont représentés à la figure 2 qui est un graphique représentant l'activité de l'aconitase (en mU/g de protéine) en fonction du traitement appliqué aux cellules.

Les résultats présentés montrent que, dans les conditions expérimentales retenues, le composé viniderm® à 0,06% induit une augmentation significative de 63% de l'activité de l'aconitase mitochondriale.