FR2929945A1 - Procede d'extraction de mangiferine et d'isomanfigerine. - Google Patents

Abstract

La présente invention concerne des procédés d'extraction et d'isolement de dérivés de xanthone glycosylée, en particulier la mangiférine et l'isomangiférine, à partir de plantes de la famille des Rubiacées, notamment du genre Coffea. L'invention concerne également les extraits obtenus par de tels procédés, ainsi que des compositions contenant de tels extraits destinées à être utilisées à des fins cosmétiques ou pharmaceutiques.

Description

Procédé d'Extraction de la Mangiférine et de l'Isomangiférine La présente invention concerne un procédé d'obtention de dérivés C-glycosylés de xanthone, en particulier la mangiférine et l'isomangiférine, à partir de 5 plantes de la famille des Rubiacées, notamment du genre Coffea. La mangiférine et l'isomangiférine sont des produits naturels présents dans un certain nombre de plantes. Dérivés C-glycosylés de xanthone, ils possèdent de nombreuses propriétés intéressantes du point de vue cosmétique et pharmaceutique. 10 Il a en effet été mis en évidence que la mangiférine, tout comme d'autres dérivés de xanthone, ont des propriétés antidiabétiques (Miura et al., 2001), anti-oxydantes (Garrido et al., 2004), antiallergiques (Pinto et al., 2005), anti-hyperlipidémiques (Muruganandan et al., 2005), et anti-carcinogéniques (Pinto et al., 2005), ainsi que des propriétés cardiotoniques et diurétiques (GB 1 099 764). Il a également été 15 suggéré que la mangiférine pouvait être utilisée dans le traitement des maladies et conditions cliniques causées par le virus de l'herpès (GB 2 108 383). De plus, en raison de ses activités anti-collagénase, anti-élastase, anti-tyrosinase, anti-radicalaire, et photoprotectrices dans la région des rayonnements ultra-violets (UV), la mangiférine est utile pour protéger la peau contre les rayonnements UV, pour 20 améliorer sa qualité structurelle et pour apporter une aide à la lutte contre le vieillissement cutané biologique et/ou actinique (WO 96/16632). Par ailleurs, il a été démontré que la mangiférine active l'expression des protéines de stress thermique (ou "heat-shock proteins") et inhibe l'expression des métalloprotéases matricielles, améliorant ainsi la réponse cellulaire au stress thermique (U.S. 2006/0088560). 25 La mangiférine et l'isomangiférine (dont les structures chimiques sont présentées sur la Figure 1) appartiennent à la famille des xanthones. Cette famille forme un large groupe de produits naturels que l'on trouve, en règle générale, seulement chez certaines familles de plantes supérieures, chez les lichens et chez les champignons (Sultanbawa, 1980; Hostettmann et Hostetmann, 1989). Une analyse 30 de la littérature scientifique a montré que 515 différentes xanthones naturelles ont été identifiées de janvier 2000 à décembre 2004 (c'est-à-dire en l'espace de seulement 5 années), 278 de ces xanthones étant de nouvelles xanthones découvertes pour la première fois (Viera et Kijjoa, 2005). En dépit de leur haute diversité biochimique, les xanthones de plantes supérieures sont principalement associées avec les familles des Clusiaceae et des Gentianaceae. On les trouve occasionnellement dans des familles phylogénétiquement distantes comme les Iridaceae, Liliaceae, Anacardiaceae, Euphorbiaceae ou les Verbenaceae. Ainsi, la mangiférine, qui a initialement été isolée de Mangifera indica L. (Anacardiaceae), est naturellement présente dans un certain nombre d'espèces de la famille des Fabaceae, Gentianaceae, Anacardiaceae, Flacourtiaceae, Polypodiaceae, Guttiferae, Leguminosae, Hippocrateaceae, Sapotaceae, Convolvulaceae, Liliaceae, Iridaceae, et Poaceae. Tout comme les autres xanthones naturelles identifiées à ce jour, ni la mangiférine, ni l'isomangiférine n'ont été isolées de plantes de la famille des Rubiacées à laquelle appartiennent, en particulier, le gardénia (genre Gardenia), le quinquina (genre Cinchona), et le caféier (genre Coffea). En raison de son impact sur la qualité du café, il existe beaucoup d'informations sur la composition chimique des grains de café verts ou grillés. La plupart des études ont été menées sur des espèces cultivées, comme le Coffea arabica et le Coffea canephora. La composition biochimique des grains de café a également été étudiée pour certaines des 103 espèces sauvages identifiées à ce jour (Anthony et al., 1993; Campa et al., 2005a; Campa et al., 2005b), révélant que les sucres, lipides, acides chlorogéniques, acides aminés, caféine et trigonelline sont généralement les principaux composés qui s'accumulent durant le développement du grain de café (Tressl, 1989; Ho et al., 1993). La diversité inter- et intra-spécifique du contenu métabolique a été étudiée de façon extensive (Clifford, 1985; Rogers, 1999), et les résultats obtenus ont montré que les acides chlorogéniques, qui sont des composés phénoliques solubles, s'accumulent fortement dans les grains verts, excepté dans le cas des espèces sauvages comme le Coffea pseudozanguebariae. Par contraste, très peu d'analyses biochimiques ont été menées sur les feuilles des espèces sauvages ou cultivées. Les études les plus récentes ont évalué le contenu en caféine et trigonelline dans les feuilles de C. arabica (Zheng et Ashihara, 2004) et en acide chlorogénique dans les feuilles de C. pseudozanguebariae (Bertrand et al., 2003) et C. canephora (Mondolot et al., 2006).

Les inventeurs ont, pour la première fois, mis en évidence la présence de dérivés de xanthone, en particulier de xanthones C-glycosylées, dans des plantes de la famille des Rubiacées, et ont développé des méthodes d'extraction et d'isolement de tels dérivés. En particulier, les inventeurs ont montré que les feuilles de certaines espèces de caféiers contiennent des quantités significatives de xanthones C-glycosylées, notamment de mangiférine et d'isomangiférine. D'une manière générale, l'invention se rapporte donc à des procédés d'obtention de xanthones C-glycosylées à partir d'une ou de plusieurs plantes de la famille des Rubiacées, préférablement d'une ou de plusieurs plantes du genre Coffea.

Les procédés d'extraction, d'isolement et de purification développés par les inventeurs permettent, en particulier, d'obtenir des dérivés de xanthone, comme la mangiférine et l'isomangiférine, ayant des propriétés cosmétiques et/ou pharmaceutiques intéressantes. Dans certains modes de réalisation préférés, le procédé d'extraction de la présente invention est effectué sur les parties aériennes de caféiers, notamment sur les feuilles. Dans ce cas, le procédé de l'invention présente, entre autres avantages, celui de pouvoir être conduit tout au long de l'année, presque tous les caféiers étant des arbres à feuilles persistantes. Le procédé selon la présente invention est caractérisé en ce qu'il comprend une étape d'extraction effectuée sur du matériel préalablement lyophilisé et réduit en poudre fine. Cette extraction est effectuée avec un mélange eau/solvant organique polaire, préférablement eau/alcool, plus préférablement encore eau/méthanol dans un rapport volumétrique 20/80. L'étape d'extraction est préférablement effectuée par sonication. L'extraction produit un extrait comprenant au moins une xanthone C- glycosylée, en particulier de la mangiférine et/ou de l'isomangiférine. Le procédé selon la présente invention peut de plus comprendre une étape permettant d'isoler au moins une xanthone C-glycosylée à partir de l'extrait obtenu précédemment. Cette étape peut être menée par n'importe quelle méthode appropriée, par exemple par chromatographie. Selon le procédé de l'invention, on soumet l'extrait à une chromatographie liquide moyenne pression sur colonne de cellulose éluée d'abord avec de l'eau pour obtenir une fraction 1 qui contient de la mangiférine, puis avec un mélange eau/méthanol pour obtenir une fraction 2 qui contient de l'isomangiférine. La mangiférine peut être obtenue substantiellement pure par filtration sur gel de la fraction 1. La chromatographie liquide moyenne pression de la fraction 2 sur colonne de cellulose éluée avec un mélange eau/éthanol fournit l'isomangiférine substantiellement pure.

L'invention concerne aussi des extraits contenant au moins une xanthone C-glycosylée, et obtenus à partir de plantes de la famille des Rubiacées, notamment de caféiers. Les extraits peuvent, en particulier, comprendre de la mangiférine, de l'isomangiférine, ou un mélange des deux. Préférablement, les extraits sont obtenus en utilisant un des procédés décrits ici, ou une variante de ces procédés. Dans certains modes de réalisation préférés, la mangiférine ou l'isomangiférine est le composant majeur d'un extrait selon l'invention. L'invention se rapporte également à des xanthones C-glycosylées substantiellement pures, en particulier la mangiférine et l'isomangiférine, obtenues à partir de plantes de la famille des Rubiacées, notamment de caféiers.

Préférablement, les xanthones sont obtenues en utilisant un des procédés décrits ici, ou une variante de ces procédés. Enfin, l'invention concerne aussi des préparations pharmaceutiques ou cosmétiques contenant une xanthone C-glycosylée substantiellement pure ou un extrait comprenant au moins une xanthone C-glycosylée, dans lesquelles la xanthone C-glycosylée ou l'extrait est obtenu à partir de plantes de la famille des Rubiacées, notamment de caféiers. Préférablement, l'extrait ou la xanthone C-glycosylée est obtenu en utilisant un des procédés d'extraction décrits ici, ou une variante de ces procédés. Une préparation pharmaceutique ou cosmétique selon l'invention peut éventuellement contenir au moins un principe actif supplémentaire.

Une description plus détaillée de certains modes de réalisation préférés de l'invention est donnée ci-dessous. D'une manière générale, la présente invention se rapporte à des procédés d'obtention de xanthones glycosylées, en particulier de xanthones C-glycosylées.

Dans le contexte de l'invention, le terme "xanthone glycosylée" est entendu comme incluant toute molécule ayant un noyau xanthone (c'est-à-dire une structure tricyclique également appelée dibenzo gamma-pyrone ou 9-oxo-xanthène) ayant subi une glycosylation, à savoir la fixation d'un groupement répondant à la formule 3 présentée Figure 1. Une xanthone est "C-glycosylée" lorsqu'elle porte, attaché à un (ou plus) de ses atomes de carbone, une molécule de glucose. Dans le cas de la mangiférine et de l'isomangiférine, le noyau xanthone porte quatre radicaux hydroxyles substitués sur les carbones 1, 3, 6 ou 7 des deux noyaux phénoliques. La glycosylation est effectuée sur le carbone 2 du noyau xanthone pour la mangiférine, sur le carbone 4 pour l'isomangiférine.

Les procédés de la présente invention sont effectués à partir de plantes de la 10 famille des Rubiacées, en particulier les caféiers (genre Coffea). Les caféiers sont originaires d'Afrique tropicale mais sont cultivés partout sur la planète dans les zones tropicales et subtropicales. Les caféiers sont des plantes pérennes qui se présentent sous la forme d'arbustes ou d'arbres, avec des générations d'une trentaine d'années. Leurs feuilles sont lancéolées, d'un vert foncé et brillant. 15 Leurs fruits (couramment appelés "cerises") restent verts longtemps, et mettent plusieurs mois à mûrir. Pour les espèces cultivées, ils peuvent être récoltés quand ils commencent à virer au rouge sombre. Les caféiers sont généralement cultivés pour leurs graines qui donnent après torréfaction, le café, l'une des boissons les plus consommées sur la planète. Le café 20 est le deuxième produit d'exportation, en valeur, dans le commerce mondial. Sa culture et sa commercialisation font vivre plus de 125 millions de personnes en Amérique latine, Afrique et Asie. Deux espèces sont cultivées dans la zone intertropicale, Coffea arabica (environ 70% de la production) et Coffea canephora (environ 30%). En plus de ces deux espèces les plus cultivées, les botanistes ont 25 décrit une centaine d'espèces sauvages, ce qui traduit une très grande diversité génétique (Davis et al., 2006). Les caféiers convenant à l'utilisation dans le procédé de la présente invention peuvent appartenir à n'importe quelle espèce appropriée du genre Coffea. Ainsi, un caféier utilisé dans le procédé de l'invention peut être d'une espèce généralement 30 cultivée pour la production de café, ou, alternativement, d'une espèce sauvage (c'est-à-dire d'une espèce qui n'est pas cultivée pour la production de café). Dans certains modes de réalisation, les plantes utilisées dans le procédé selon l'invention sont de la même espèce de caféier. Alternativement, les plantes peuvent provenir de différentes espèces de caféier. D'une manière générale, les caféiers qui peuvent être utilisés dans le procédé d'extraction de la présente invention peuvent être choisis, par exemple, parmi, Coffea abbayesii, Coffea abeokutae, Coffea affinis, Coffea alleizettii, Coffea ambanjensis, Coffea ambongensis, Coffea andrambovatensis, Coffea ankaranensis, Coffea anthonyi, Coffea arabica L., Coffea arenesiana, Coffea augagneurii, Coffea bakossii, Coffea benghalensis, Coffea bertrandii, Coffea betamponensis, Coffea bissetiae, Coffea boinensis, Coffea boiviniana, Coffea bonnieri, Coffea brevipes, Coffea bridsoniae, Coffea buxifolia, Coffea canephora, Coffea carrissoi, Coffea charrieriana, Coffea commersoniana, Coffea congensis, Coffea costatifructa, Coffea coursiana, Coffea dactylifera, Coffea decaryana, Coffea Dewevrei, Coffea dubardii, Coffea eugenioides, Coffea fadenii, Coffea farafanganensis, Coffea fotsoana, Coffea fragilis, Coffea gallienii, Coffea grevei, Coffea heimii, Coffea heterocalyx, Coffea homollei, Coffea humbertii, Coffea humblotiana, Coffea humilis, Coffea jumellei, Coffea kapakata, Coffea khasiana, Coffea kianjavatensis, Coffea kihansiensis, Coffea kimbozensis, Coffea kivuensis, Coffea Klainii, Coffea labatii, Coffea lancifolis, Coffea leonimontana, Coffea leroyi, Coffea liaudii, Coffea liberica, Coffea ligustroides, Coffea littoralis, Coffea lulandoensis, Coffea macrocarpa, Coffea magnistipula, Coffea mangoroensis, Coffea manombensis, Coffea mapiana, Coffea mauritiana, Coffea mayombensis, Coffea mcphersonii, Coffea millotii, Coffea minutiflora, Coffea mogenetii, Coffea mongensis, Coffea montekupensis, Coffea montis-sacri, Coffea moratii, Coffea mufindiensis, Coffea myrtifolia, Coffea perrieri, Coffea pervilleana, Coffea pocsii, Coffea pseudozanguebariae, Coffea pterocarpa, Coffea quillou, Coffea racemosa, Coffea rakotonasoloi, Coffea ratsimamangae, Coffea resinosa, Coffea rhamnifolia, Coffea richardii, Coffea rupestris, Coffea sahafaryensis, Coffea sakarahae, Coffea salvatrix, Coffea sambavensis, Coffea schliebenii, Coffea sessiliflora, Coffea sp Moloundou, Coffea stenophylla, Coffea tetragona, Coffea togoensis, Coffea travancorensis, Coffea tricalysioides, Coffea tsirananae, Coffea vatovavyensis, Coffea vavateninensis, Coffea vianneyi, Coffea vohemarensis, Coffea wightiana, Coffea zanguebariae, et leurs hybrides.

Dans certains modes de réalisation préférés, les caféiers utilisés dans un procédé d'extraction sont choisis parmi Coffea arabica, Coffea eugenioides, Coffea heterocalyx, Coffea pseudozanguebariae, Coffea sp Moloundou, et leurs hybrides. Le procédé de la présente invention est généralement effectué à partir de tout ou d'une portion de la partie aérienne de plantes de la famille des Rubiacées, en particulier de caféiers. Dans le contexte de la présente invention, on entend par "partie aérienne d'une plante", la portion de la plante que l'on nomme communément feuillage, et qui se trouve au dessus du sol. D'une manière générale, la partie aérienne ou feuillage d'une plante comprend les feuilles, les tiges, les fleurs, et les fruits. Dans certains modes de réalisation préférés, le procédé d'extraction de l'invention s'effectue en utilisant les feuilles de caféier. Comme mentionné plus haut, les feuilles de caféier sont généralement persistantes, et constituent donc une source quasi-permanente de matière première. Les inventeurs ont montré que des xanthones C-glycosylées, en particulier la mangiférine, sont présentes en concentration plus élevée dans les jeunes feuilles que dans les feuilles plus âgées de Coffea pseudozanguebariae (voir Exemples). Ainsi, dans certains modes de réalisation, un procédé d'extraction selon l'invention est effectué préférablement avec de jeunes feuilles de caféier. Dans le contexte de la présente invention, on entend par "jeunes feuilles", des feuilles dont la longueur est au moins deux fois inférieure à la longueur de la feuille adulte. Il est hautement probable que l'évolution de la concentration en xanthone C-glycosylée en fonction du stade de développement des feuilles varie d'une espèce à l'autre. L'homme de l'art saura quantifier la présence de xanthones C-glycosylées dans des feuilles de caféier, étudier leurs variations en fonction du développement des feuilles, et déterminer le stade de développement correspondant à la concentration la plus élevée. Par exemple, une telle détermination pourra être effectuée par une méthode d'analyse HPLC, comme celle développée par les inventeurs (voir Exemples). Dans tout ce qui suit, la description de l'invention est donnée principalement en référence à l'utilisation de feuilles de caféiers. Il est entendu qu'elle ne se limite pas à ce cas particulier, et que l'utilisation d'autres plantes de la famille des Rubiacées et/ou d'autres portions de la partie aérienne de ces plantes est comprise dans la présente invention.

L'homme de l'art comprendra que de nombreuses méthodes d'extraction et d'isolement peuvent être utilisées pour obtenir au moins une xanthone C-glycosylée à partir des feuilles de caféier, la nature de la méthode d'extraction n'étant pas un élément critique ou limitant.

Les inventeurs ont développé un procédé particulier caractérisé en ce qu'il consiste à mettre en oeuvre une étape d'extraction de feuilles de caféier avec un mélange d'eau et de solvant organique polaire, pour obtenir un extrait contenant au moins une xanthone C-glycosylée. Avant extraction, les feuilles de caféiers sont broyées, préférablement sous forme de poudre, par exemple, sous forme de fine poudre. Le broyage peut être réalisé à température ambiante ou à froid, au moyen de toute méthode appropriée (par exemple en utilisant un système mortier et pilon). Au préalable, les feuilles sont préférablement déshydratées par lyophilisation. Alternativement (et généralement avec un moindre rendement), le broyage peut être réalisé sur des feuilles fraiches (c'est-à-dire non déshydratées par lyophilisation). Dans ce dernier mode de réalisation, les feuilles sont congelées avant d'être broyées. Selon la présente invention, après broyage, les feuilles sont extraites avec un mélange d'eau et de solvant organique polaire. Le solvant organique polaire est avantageusement choisi parmi les alcools linéaires ou ramifiés en C1-C3, et des mélanges de ces alcools en des proportions appropriées. Dans certains modes de réalisation, le solvant organique polaire est un alcool tel que le méthanol, l'éthanol, ou un mélange de méthanol et d'éthanol. Dans un mode de réalisation préféré, le mélange d'eau et de solvant organique polaire est un mélange d'eau et de méthanol. Préférablement, un tel mélange contient moins d'eau que de méthanol. Par exemple, le méthanol et l'eau sont présents dans un rapport volumétrique allant de environ 65/35 à environ 90/10, préférablement environ 80/20. L'extraction peut être effectuée par n'importe quelle méthode appropriée, en particulier n'importe quelle méthode favorisant la rupture des membranes cellulaires et/ou subcellulaires des cellules de plantes. Ces méthodes peuvent être basées sur des techniques mécaniques, chimiques, et/ou biochimiques. De telles méthodes sont connues dans l'art et incluent, par exemple, le broyage mécanique (utilisant, par exemple, mortier et pilon, broyeur de type Potter-Elveljhem, ou broyeur de type Dounce), déchiquetage mécanique (par exemple, Waring BlenderTM, ou broyeur Virtis), sonication, cavitation, choc osmotique, utilisation de composés favorisant l'homogénéisation (détergents, agents abrasifs, etc.), utilisation d'enzymes lytiques (protéases, nucléases, lipases), etc. Toute combinaison appropriée de ces méthodes peut également être utilisée dans le procédé d'extraction de la présente invention. Dans certains modes de réalisation, l'extraction est effectuée par sonication. L'homme du métier saura déterminer les conditions et durée de l'étape de sonication pour mener à bien l'extraction, et saura également adapter ces conditions et durée pour optimiser l'extraction. Les facteurs qui peuvent être pris en compte pour une telle démarche incluent, sans restriction, la quantité de produit de départ (c'est-à-dire les feuilles broyées), la nature du mélange eau/solvant organique polaire utilisé, la proportion quantité de produit de départ / volume du mélange eau/solvant organique utilisé, etc. La sonication peut se faire à température ambiante ou à basse température. La sonication produisant de la chaleur, il peut être préférable d'effectuer cette étape à froid (par exemple, "sur glace", et dans une chambre froide). L'étape d'extraction (c' est-à-dire, extraction avec un mélange eau/solvant organique polaire, accompagnée ou non d'une sonication) peut être répétée plusieurs fois. L'extraction fournit un extrait qui comprend, entre autres composants, au moins une xanthone C-glycosylée. Dans certains modes de réalisation préférés, un extrait obtenu à partir de feuilles de caféier comme décrit ici, comprend de la mangiférine, de l'isomangiférine, ou un mélange des deux. Dans le contexte de la présente invention, on entend par "extrait" toute substance obtenue par une opération physique, chimique et/ou biotechnologique à partir de feuilles de caféier et/ou de cellules de feuilles de caféier. Préférablement, par rapport à la matière première (les feuilles séchées de caféier), un extrait est enrichi en xanthone(s) C-glycosylée(s) (c'est-à-dire comprend une plus haute teneur en xanthone(s) C-glycosylée(s) que les feuilles séchées). Dans certains modes de réalisation, l'extrait obtenu à partir de feuilles de caféier est le produit final du procédé de l'invention. Un tel extrait peut être sous forme liquide ou sous forme de poudre après séchage par atomisation, évaporation et/ou lyophilisation. Dans d'autres modes de réalisation, le procédé de l'invention comprend, en outre, une étape permettant d'isoler au moins une xanthone C-glycosylée d'un extrait obtenu à partir de feuilles de caféier.

A partir d'un extrait comme décrit ci-dessus, l'homme de l'art peut développer une grande variété de méthodes pour isoler le (ou les) dérivé(s) de xanthone contenu(s) dans l'extrait. La méthode développée par les inventeurs comprend une chromatographie liquide, plus précisément par chromatographie liquide moyenne pression. De manière plus spécifique, selon le procédé de l'invention, un extrait obtenu à partir de feuilles de caféier est soumis à une chromatographie liquide moyenne pression sur colonne de cellulose. L'élution de cette colonne avec de l'eau fournit une première fraction (fraction 1) qui contient de la mangiférine. Après élution de la fraction 1, une deuxième élution de la colonne de cellulose avec un mélange d'eau et d'alcool (par exemple eau/méthanol dans le rapport volumétrique 10/90) fournit une deuxième fraction (fraction 2) qui contient de l'isomangiférine.

La mangiférine contenue dans la fraction 1 peut être obtenue substantiellement pure en soumettant la fraction 1 à une chromatographie de filtration sur gel, en particulier sur une colonne de billes de SephadeX LH2O (c'est-à-dire un dérivé du dextran, composé de chaines de glucose liées par des liaisons osidiques). L'élution de cette colonne avec de l'eau fournit de la mangiférine substantiellement pure. Dans le contexte de la présente invention, quand le terme "substantiellement pure" est utilisé pour caractériser une xanthone C-glycosylée, il se rapporte à une xanthone C-glycosylée ayant une pureté d'au moins environ 90%, préférablement d'au moins environ 95%, plus préférablement encore d'au moins environ 97%, par exemple, 98%, 99% ou plus. Si désiré, la mangiférine ainsi obtenue peut être cristallisée (par exemple, par lyophilisation). La mangiférine sèche purifiée existe sous la forme d'aiguilles prismatiques de couleur jaune pâle. L'isomangiférine contenue dans la fraction 2 peut être obtenue substantiellement pure en soumettant la fraction 2 à une chromatographie liquide moyenne pression, préférablement sur colonne de cellulose éluée avec un mélange alcooUeau (par exemple, un mélange éthanol/eau dans un rapport volumétrique 80/20). Si désiré, l'isomangiférine ainsi obtenue peut être cristallisée (par exemple, par lyophilisation). L'isomangiférine sèche purifiée existe sous la forme d'aiguilles prismatiques de couleur jaune pâle.

Les extraits obtenus à partir de feuilles de caféier et contenant au moins une xanthone C-glycosylée sont couverts par la présente invention. Dans de tels extraits, la xanthone C-glycosylée (par exemple, la mangiférine ou l'isomangiférine) peut être présente à n'importe quelle concentration. L'invention se rapporte également aux xanthones C-glycosylées substantiellement pures, extraites et isolées à partir de feuilles de caféier. Ainsi, dans un mode de réalisation préféré, la présente invention fournit des extraits comprenant un mélange de mangiférine et d'isomangiférine. Dans un autre mode de réalisation préféré, la présente invention fournit de la mangiférine substantiellement pure ou contenue dans un extrait. Dans encore un autre mode de réalisation préféré, la présente invention fournit de l'isomangiférine substantiellement pure ou contenue dans un extrait. Préférablement les extraits et les xanthones C-glycosylées sont obtenus selon un des procédés décrits ici, ou une variante de ces procédés.

L'invention concerne également des préparations pharmaceutiques, para-pharmaceutiques ou cosmétiques comprenant une xanthone C-glycosylée substantiellement pure ou un extrait contenant au moins une xanthone C-glycosylée comme défini ci-dessus. Préférablement, la xanthone C-glycosylée est la mangiférine ou l'isomangiférine. En raison des propriétés de la mangiférine (et de certains de ses dérivés) mentionnées plus haut, une composition cosmétique selon l'invention peut être utilisée pour limiter les effets nocifs des radiations UV sur la peau, les lèvres et les cheveux, pour améliorer la qualité structurelle de la peau, pour lutter contre le vieillissement de la peau, et/ou pour prévenir ou réduire les effets de variation de température sur la peau, les lèvres et les cheveux. Une composition cosmétique selon l'invention peut être utilisée comme telle, ou alternativement peut être incorporée dans un produit cosmétique ou de soin corporel. Ainsi une composition cosmétique de l'invention peut être ajoutée à des crèmes ou des lotions pour le visage, les mains, les pieds ou le corps (par exemple, crèmes de jour, crèmes de nuit, laits corporels, détergents et savons, lotions, laits, gels ou mousses de soin de la peau); des produits de maquillage; des crèmes, gels, huiles ou lotions d'autobronzants; des écrans solaires; des produits capillaires (par exemple, shampooings, après-shampooings, produits de coloration, crèmes, gels ou mousses de coiffage), produits de rasage et après-rasage; baumes pour les lèvres, etc. Une composition cosmétique de la présente invention peut être formulée sous forme solide, semi-solide, ou liquide. Le choix de la formulation se fera généralement en fonction de l'application à laquelle la composition est destinée. Des formulations appropriées à une utilisation cosmétique sont connues dans l'art et incluent, par exemple, les émulsions simples (par exemple, émulsions huile-dans-eau ou eau-dans-huile), émulsions multiples, microémulsions, gels aqueux ou hydroalcooliques, huiles, solutions aqueuses ou solutions hydroalcooliques, mousses, crèmes, laits, huiles, lotions, pâtes, bâtonnets, poudres, crayons, etc.

Pour la préparation de telles formulations, un extrait ou une xanthone C-glycosylée de l'invention peut être mélangé à au moins un excipient approprié (par exemple, huiles végétales ou minérales, cires végétales ou minérales, silicones, alcools, acides gras, lanoline, eau, etc.) ou être incorporé dans des vecteurs de type liposomes, macrosphères, microsphères, nanosphères, macroparticules, microparticules, nanoparticules, macrocapsules, microcapsules, nanocapsules, ou encore être absorbé sur des polymères organiques poudreux, des talcs, bentonites et autres supports minéraux. Une composition cosmétique de l'invention peut également contenir des additifs tels que des adjuvants antibactériens, des parfums, des lipides d'extraction et /ou de synthèse, des polymères gélifiants et viscosants, des tensio-actifs, des émulsifiants, etc. De façon générale, une composition cosmétique de l'invention comprend une quantité efficace d'extrait ou de xanthone C-glycosylée, c'est-à-dire une quantité d'extrait ou de xanthone C-glycosylée qui est suffisante pour remplir son rôle ou action désigné(e) (par exemple, le rôle ou l'action désigné(e) peut être de procurer une photoprotection efficace contre les rayonnements UV). Par exemple, dans certains modes de réalisation, une composition cosmétique de l'invention peut comprendre entre environ 0,01% et environ 5% en poids d'extrait ou de xanthone C-glycosylée sous forme de poudre, ou entre environ 0,01% et environ 25% en poids d'extrait ou de xanthone C-glycosylée sous forme encapsulée. Les compositions à usage cosmétique de la présente invention peuvent, en outre, contenir au moins un principe actif cosmétique supplémentaire (c'est-à-dire, en plus de l'extrait ou de la xanthone C-glycosylée). On entend par "principe actif cosmétique", tout composé ou substance qui peut être utilisé(e) dans le soin pour le corps, la peau, les cheveux, etc., et est généralement appliqué localement. Les principes actifs cosmétiques qui peuvent être utilisés dans la présente invention peuvent appartenir à diverses familles de composés et substances, y compris les extraits végétaux, extraits marins, extraits tissulaires, petites molécules de synthèse, etc. De tels principes actifs sont connus dans l'art. Par exemple, un principe actif cosmétique approprié peut être avantageusement sélectionné parmi les substances augmentant la protection cutanée (par exemple, vitamines, céramides, substances anti-radicalaires, filtres UV), les substances ayant un effet cicatrisant sur la peau (par exemple, protéines, acide hyaluronique, acides aminés) ou anti-inflammatoire, les substances qui limitent les effets nocifs du soleil (filtres solaires), les produits bronzants et auto-bronzants, les substances facilitant le bon état du cuir chevelu et celui des cheveux (par exemple, minéraux, vitamines, céramides, extrait protéique, mucopolysaccharides, acides de fleurs et/ou de fruits), les substances anti-âges et/ou anti-rides, les toniques, les détergents, les substances ayant une activité sur la sensibilité cutanée, etc. Dans de telles compositions cosmétiques de l'invention, chaque principe actif supplémentaire est généralement présent en quantité suffisante pour exercer son activité.

Il est entendu qu'une composition cosmétique de la présente invention peut également être incorporée dans une préparation destinée au traitement de certaines allergies, démangeaisons, irritations, ou rougeurs de la peau, y compris les lèvres et le cuir chevelu. Un extrait ou une xanthone C-glycosylée selon l'invention peut être administré comme tel ou sous la forme d'une préparation ou composition pharmaceutique en présence d'au moins un véhicule ou excipient physiologiquement acceptable. Dans le contexte de la présente invention, on entend par "véhicule ou excipient physiologiquement acceptable" tout milieu ou additif qui n'interfère pas avec l'efficacité de l'activité biologique du principe actif (ici, l'extrait ou la xanthone C-glycosylée), et qui n'est pas excessivement toxique pour le patient, aux concentrations auxquelles il est administré.

Les compositions pharmaceutiques de la présente invention peuvent être administrées en utilisant toute combinaison de dosage et voie d'administration qui est efficace pour obtenir l'effet thérapeutique désiré. La quantité exacte à administrer peut varier d'un patient à un autre, en fonction de l'âge, la condition générale du patient, la nature et la gravité de la maladie, etc. La voie d'administration (orale, parentérale, rectale, pulmonaire, nasale, cutanée, transdermique, mucosale, etc.) peut être choisie en fonction de la nature de la maladie et de l'effet thérapeutique désiré (par exemple, effet antidiabétique, antiallergique, anti-hyperlipidémique, cardiotonique, ou diurétique de l'extrait ou de la xanthone C-glycosylée de l'invention). L'administration peut être locale ou systémique.

La formulation d'une composition pharmaceutique de la présente invention peut varier en fonction de la voie d'administration et du dosage. Après formulation avec au moins un véhicule ou excipient physiologiquement acceptable, une composition pharmaceutique de l'invention peut être sous toute forme appropriée pour l'administration à un mammifère, y compris l'homme, par exemple sous la forme de tablettes, comprimés, dragées, capsules, sirops, onguents, solutions injectables, suppositoires, etc. L'homme de l'art sait sélectionner les véhicules et excipients les plus appropriés à la préparation d'un certain type de formulation. Ainsi, par exemple, les excipients tels que l'eau, 2,3-butanediol, solution de Ringer, solution isotonique de chlorure de sodium, mono ou diglycérides synthétiques, et acide oléique sont souvent utilisés pour la formulation de préparations injectables. Les compositions liquides, y compris les émulsions, microémulsions, solutions, suspensions, sirops, élixirs, etc., peuvent être formulées en présence de solvants, d'agents solubilisants, d'émulsifiants, d'huiles, d'acides gras, et d'autres additifs comme des agents de suspension, des conservateurs, des édulcorants, des aromes, des agents viscosants, des colorants, etc. Les compositions solides pour administration par voie orale peuvent être formulées en présence d'un excipient inerte comme le citrate de sodium, et éventuellement d'additifs tels que des agents liants, des agents humectants, des agents de désintégration, des accélérateurs d'absorption, des agents lubrifiants, etc. Dans certains modes de réalisation, une composition pharmaceutique de la présente invention est formulée pour une libération immédiate du principe actif (ici, une xanthone C-glycosylée tel que la mangiférine ou isomangiférine). Alternativement, une composition pharmaceutique peut être formulée pour une libération prolongée du principe actif. De nombreuses stratégies sont connues dans l'art pour provoquer une libération prolongée d'un principe actif, comme par exemple par augmentation du temps de séjour dans l'estomac, en utilisant des enrobages sensibles au pH et/ou à des actions enzymatiques, ou des enrobages bioadhésifs qui s'accrochent aux parois de l'estomac ou de l'intestin, ou encore en utilisant des systèmes d'encapsulation comme mentionné ci-dessus. Les compositions pharmaceutiques de la présente invention peuvent, en outre, contenir au moins un principe actif pharmaceutique supplémentaire (c'est-à-dire, en plus de l'extrait ou de la xanthone C-glycosylée). On entend par "principe actif pharmaceutique", tout composé ou substance dont l'administration a un effet thérapeutique ou un effet bénéfique à la santé ou condition générale d'un patient à qui il est administré. Ainsi, un principe actif pharmaceutique peut être actif contre la maladie que l'on veut soigner par administration de la composition pharmaceutique; peut être actif contre une condition associée à la maladie que l'on veut soigner par administration de la composition pharmaceutique; ou peut accroître la disponibilité et/ou l'activité de la xanthone C-glycosylée comprise dans la composition pharmaceutique. Des exemples de principes actifs pharmaceutiques qui peuvent être présents dans une composition de la présente invention incluent, sans limitation, des agents anticancéreux, des anti-inflammatoires, des agents d'anti-hypertension (par exemple, diurétiques, agents bloquants béta-adrénergiques, agents calcium bloquants, alphaadrénocepteur agonistes, sympatholytiques, et vasodilateurs), des agents antipyrétiques, des agents antipruritiques et/ou antihistaminiques, des agents anti- diabétiques, des agents hypolipémiques, des agents anti-arrythmiques, etc. La présente invention concerne également une méthode de traitement comprenant une étape dans laquelle une quantité efficace d'une composition pharmaceutique décrite ici est administrée à un patient. Cette méthode peut, en particulier, être utilisée pour le traitement d'une maladie ou condition clinique pour laquelle l'administration d'une xanthone C-glycosylée ayant des propriétés antidiabétiques, anti-oxydantes, antiallergiques, anti-hyperlipidémiques, anti- carcinogéniques, cardiotoniques et/ou diurétiques est bénéfique. Dans le contexte de la présente invention, on entend par "traitement" une méthode qui a pour but (1) de retarder ou prévenir le début d'une maladie ou condition clinique; (2) de ralentir ou d'arrêter la progression, l'aggravation, ou la détérioration des symptômes de la maladie; (3) d'apporter des améliorations des symptômes de la maladie; et/ou (4) de guérir la maladie. Un traitement peut être administré avant le début de la maladie pour une action préventive, ou il peut être administré après initiation de la maladie, pour une action thérapeutique. Un patient est généralement un mammifère, préférablement un humain. A moins qu'ils ne soient définis d'une autre manière, tous les termes techniques et scientifiques utilisés ici ont la même signification que celle couramment comprise par un spécialiste ordinaire du domaine auquel appartient cette invention. De même, toutes les publications, demandes de brevet, tous les brevets et toutes autres références mentionnés ici sont incorporés par référence. Les exemples suivants et les figures sont présentés pour illustrer certains 20 modes de réalisation des procédures décrites ci-dessus et ne doivent en aucun cas être considérés comme une limite à la portée de l'invention. Exemples Exemple 1 : Feuilles de Caféiers Des feuilles de Coffea pseudozanguebariae ont été collectées sur des arbres 25 cultivés dans des serres tropicales (lumière naturelle, températures de 25°C la nuit et 28°C la journée, et une humidité relative de 78-82%) au centre de recherches IRD de Montpellier (France). Pour les procédures d'extraction, d'isolement et de purification des composés, de jeunes feuilles (de moins de 4 cm de long) ont été récoltées sur 5 génotypes différents. Quatre cent (400) grammes des feuilles 30 collectées ont immédiatement été congelés dans l'azote liquide avant lyophilisation (72 heures). Pour l'évaluation biochimique du contenu des feuilles, 3 axes de 5 noeuds (formés par deux feuilles opposées) ont été sélectionnés sur deux arbres âgés de 15 ans. Les noeuds ont été classés de Noeud 1 pour les plus jeunes (feuilles juvéniles), à Noeud 5 pour les plus âgés (feuilles adultes). Les bourgeons en développement n'ont pas été considérés. Le Noeud 5 correspond aux feuilles à la base d'une nouvelle pousse sur la partie lignifiée d'une branche. Pour chaque arbre, les feuilles de même Noeud ont été rassemblées, pesées, et immédiatement congelées dans l'azote liquide avant d'être lyophilisées.

Exemple 2 : Extraction de Dérivés de Xanthone Des feuilles de Coffea pseudozanguebariae lyophilisées et broyées en poudre (80 g) ont été extraites 3 fois par sonication (20 minutes, 24 KHz, R.E.U.S.-GEX 180, Contes, France) avec un mélange de méthanol et d'eau (MeOH:H2O, 8:2) à température ambiante (3 x 700 mL). Le méthanol a ensuite été éliminé par concentration. Après lyophilisation, l'extrait aqueux a été soumis à une chromatographie liquide moyenne pression sur colonne (400 mm x 47 mm, Buchi, Flawil, Suisse) de cellulose microcristalline (Avicel, Merck, Darmstadt, Allemagne) éluée avec de l'eau pour obtenir une fraction 1, puis avec un mélange de méthanol et d'eau (MeOH:H2O, 9:1) pour obtenir une fraction 2. La fraction 1 a ensuite été purifiée sur colonne Sephadex LH2O (500 mm x 25 mm, Fluka, Basel, Suisse) et éluée avec de l'eau pour obtenir le composé 1. Pour obtenir le composé 2, la fraction 2 a été soumise à une chromatographie liquide moyenne pression sur colonne (210 mm x 47 mm, Buchi) de cellulose microcristalline (Avicel, Merck) et éluée avec un mélange d'éthanol et d'eau (EtOH:H2O, 8:2).

Exemple 3 : Spectrométrie de Masse et Résonance Magnétique Nucléaire 25 (RMN) Les analyses de spectrométrie de masse des composés 1 et 2 ont été effectuées avec un spectromètre Micromass Q-TOF (Waters, Milford, MA, Etats-Unis) utilisant une source d'ionisation par electrospray en mode positif. Les spectres de RMN des composés 1 et 2 ont été enregistrés sur un 30 spectromètre Avance DRX-400 (Bruker-Biospin GmbH, Allemagne) à 400,13 MHz pour 'H, et à 100,62 MHz pour 13C. Les déplacements chimiques sont donnés en ppm/TMS avec le signal 13C du DMSO-d6 à 39,98 ppm. Les spectres de RMN ont été interprétés en utilisant les versions gradients des séquences classiques de COSY, HMQC et HMBC.

Exemple 4 : Identification des Composés 1 et 2 Les spectres de masse obtenus pour les composés 1 et 2 suggèrent que ces composés sont des isomères proches. Les deux spectres enregistrés présentent un signal (M+H) à m/z 423. Le spectre 1H enregistré pour 1 dans le DMSO-d6 présente trois singulets à 7,371, 6,845 et 6,374 ppm, et un système complexe à 7-spin entre 3,0 et 5,0 ppm. L'analyse de ce système de deuxième ordre a révélé des constantes de couplage typiques d'une entité glucose (voir, par exemple Silva et Pinto, Curr. Med. Chem., 2005, 12 : 2481-2497) : 4,594 (J= 9,9 Hz, H-1'), 4,047 (J= 9,9 et 8,4 Hz, H-2'), 3,202 (J= 8,4 et 8,6 Hz, H-3'), 3,123 (J= 8,6 et 9,2 Hz, H-4'), 3,171 (J= 9,2, 5,9 et 1,8 Hz, H-5'), 3,688 (J= 11,8 et 1,8 Hz, H-6'a) and 3,406 ppm (J= 11,8 et 5,9 Hz, H-6'b). Le déplacement chimique de C-1' à 73,6 ppm suggère une liaison C-C entre le sucre et l'aglycone. Les autres déplacements chimiques (Figure 3) ont permis de postuler que le composé 1 est la mangiférine (Figure 1). Cela a été confirmé par comparaison avec les spectres reportés dans la littérature (Fujita et Inoue, 1982; Catalano et al., 1996), et avec les spectres d'un échantillon authentique de mangiférine.

Le spectre 1H du composé 2 dans le même solvant présente également 3 singulets à 7,365, 6,829 et 6,229 ppm et est très proche du spectre du composé 1 excepté que les signaux attribuables à l'entité sucre sont larges et n'ont pas permis la détermination des constantes de couplage. Cependant, les signaux 13C sont ceux de l'entité glucose comme pour le composé 1. Comparaison avec les valeurs publiées pour le 1,3,6,7-tétrahydroxanthone lui-même (Fraga et Chauduri, 1979) a indiqué que dans le composé 2, l'entité glucose est attachée à la position 4 de la xanthone. Les déplacements chimiques 13C enregistrés, et listés dans la Figure 3, comparés à ceux trouvés dans la littérature, confirment que le composé 2 est l'isomangiférine (Figure 1).

Exemple 5 : Evaluation Biochimique par Analyse HPLC Pour la quantification des xanthones dans les extraits de feuilles, les feuilles ont été broyées en une poudre fine, et les composés phénoliques ont été extraits 3 fois selon la méthode décrite par Ky et al., 2001. Les xanthones et dérivés ont été identifiés au vu de leur temps de rétention et spectres d'absorption UV (Figure 2), en utilisant la procédure d'analyse HPLC décrite ci-dessous. Le système HPLC utilisé est équipé d'une colonne (250 mm x 4 mm, Merck, Darmstadt, Allemagne) de LiChrospher 100 RP-18 (5 m), une colonne de garde de C18, et un détecteur photodiode (Shimadzu, SPD-M20A). Le système d'élution utilisé (0.8 mL/min) contient une éluant A constitué d'une solution aqueuse d'acide phosphorique (2M), et d'un éluant B constitué de méthanol. Le gradient utilisé est le suivant: 0 minute, 25% éluant B; 0-40 minutes, 80% éluant B, linéaire. Le temps de rétention et les caractéristiques spectrales de chaque échantillon ont été comparés à ceux d'un échantillon référence de mangiférine (Extrasynthese, Lyon, France).

Exemple 6 : Quantification des Composés 1 et 2 dans les feuilles de Caféier La quantification des composés 1 et 2 dans les feuilles de Coffea pseudozanguebariae a été effectuée par analyse HPLC comme décrit plus haut. Les résultats obtenus sont présentés Figure 4. La mangiférine apparait comme la xanthone la plus abondante, avec un pourcentage de plus de 6% du poids sec des jeunes feuilles. Cette teneur en mangiférine est plus élevée que celle déterminée dans le Mangifera zeylanica (Herath et al., 1970) or Cyclopia genistoides (Joubert et al., 2006). Le continu en mangiférine dans les feuilles plus âgées est plus faible, et diminue durant la croissance des feuilles. Par contre, le contenu en isomangiférine est constant durant le développement des feuilles, et d'une manière générale, est plus faible que le contenu en mangiférine.

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Claims (17)

1. Revendications1. Procédé d'obtention de xanthones C-glycosylées, en particulier la mangiférine et/ou l' isomangiférine, comprenant une étape d'extraction de la partie aérienne d'au moins une plante de la famille des Rubiacées, préférablement d'au moins une plante du genre Coffea.
2. 2. Procédé selon la revendication 1, dans lequel la plante du genre Coffea est choisie parmi Coffea abbayesii, Coffea abeokutae, Coffea affinis, Coffea alleizettii, Coffea ambanjensis, Coffea ambongensis, Coffea andrambovatensis, Coffea ankaranensis, Coffea anthonyi, Coffea arabica L., Coffea arenesiana, Coffea augagneurii, Coffea bakossii, Coffea benghalensis, Coffea bertrandii, Coffea betamponensis, Coffea bissetiae, Coffea boinensis, Coffea boiviniana, Coffea bonnieri, Coffea brevipes, Coffea bridsoniae, Coffea buxifolia, Coffea canephora, Coffea carrissoi, Coffea charrieriana, Coffea commersoniana, Coffea congensis, Coffea costatifructa, Coffea coursiana, Coffea dactylifera, Coffea decaryana, Coffea Dewevrei, Coffea dubardii, Coffea eugenioides, Coffea fadenii, Coffea farafanganensis, Coffea fotsoana, Coffea fragilis, Coffea gallienii, Coffea grevei, Coffea heimii, Coffea heterocalyx, Coffea homollei, Coffea humbertii, Coffea humblotiana, Coffea humilis, Coffea jumellei, Coffea kapakata, Coffea khasiana, Coffea kianjavatensis, Coffea kihansiensis, Coffea kimbozensis, Coffea kivuensis, Coffea Klainii, Coffea labatii, Coffea lancifolis, Coffea leonimontana, Coffea leroyi, Coffea liaudii, Coffea liberica, Coffea ligustroides, Coffea littoralis, Coffea lulandoensis, Coffea macrocarpa, Coffea magnistipula, Coffea mangoroensis, Coffea manombensis, Coffea mapiana, Coffea mauritiana, Coffea mayombensis, Coffea mcphersonii, Coffea millotii, Coffea minutiflora, Coffea mogenetii, Coffea mongensis, Coffea montekupensis, Coffea montissacri, Coffea moratii, Coffea mufindiensis, Coffea myrtifolia, Coffea perrieri, Coffea pervilleana, Coffea pocsii, Coffea pseudozanguebariae, Coffea pterocarpa, Coffea quillou, Coffea racemosa, Coffea rakotonasoloi, Coffea ratsimamangae, Coffea resinosa, Coffea rhamnifolia, Coffea richardii, Coffea rupestris, Coffea sahafaryensis, Coffea sakarahae, Coffea salvatrix, Coffea sambavensis, Coffea schliebenii, Coffea sessiliflora, Coffea spMoloundou, Coffea stenophylla, Coffea tetragona, Coffea togoensis, Coffea travancorensis, Coffea tricalysioides, Coffea tsirananae, Coffea vatovavyensis, Coffea vavateninensis, Coffea vianneyi, Coffea vohemarensis, Coffea wightiana, Coffea zanguebariae, et leurs hybrides, préférablement parmi Coffea arabica, Coffea eugenioides, Coffea heterocalyx, Coffea pseudozanguebariae, Coffea sp Moloundou et leurs hybrides.
3. 3. Procédé selon la revendication 1 ou la revendication 2, dans lequel l'étape d'extraction est effectuée sur les feuilles de la plante, en particulier les jeunes feuilles.
4. 4. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1-3, dans lequel l'extraction est effectuée avec un mélange d'eau et de solvant organique polaire, préférablement un mélange d'eau et d'alcool, en particulier d'eau et de méthanol, pour obtenir un extrait comprenant au moins une xanthone C-glycosylée.
5. 5. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1-4, dans lequel la partie aérienne est broyée, préférablement sous forme de poudre, et éventuellement séchée, préférablement par lyophilisation.
6. 6. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1-5, dans lequel l'extraction est effectuée par sonication, préférablement par sonication à basse température.
7. 7. Procédé selon l'une quelconque des revendications 4-6, dans lequel l'extraction est effectuée ave un mélange méthanol/eau, préférablement dans un rapport volumétrique 80/20.
8. 8. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1-7, comprenant, en outre, une étape permettant d'isoler d'au moins une xanthone C-glycosylée par chromatographie de l'extrait obtenu dans l'étape d'extraction.
9. 9. Procédé selon la revendication 8, dans lequel la chromatographie de l'extrait comprend une chromatographie liquide moyenne pression, préférablementune chromatographie liquide moyenne pression effectuée sur colonne de cellulose.
10. 10. Procédé selon la revendication 9, dans lequel la colonne de cellulose est éluée : d'abord avec de l'eau pour obtenir une fraction 1 contenant de la mangiférine, puis avec un mélange d'eau et d'alcool, préférablement d'eau et de méthanol, plus préférablement encore d'eau et de méthanol dans le rapport volumétrique 10/90, pour obtenir une fraction 2 contenant de l'isomangiférine.
11. 11. Procédé selon la revendication 10, comprenant, en outre, une étape de purification de la mangiférine contenue dans la fraction 1, préférablement sur colonne de Sephadex, plus préférablement encore sur colonne de Sephadex éluée avec de l'eau.
12. 12. Procédé selon la revendication 10, comprenant, en outre, une étape de purification de l'isomangiférine contenue dans la fraction 2 par chromatographie liquide moyenne pression, préférablement par chromatographie liquide moyenne pression sur colonne de cellulose éluée avec un mélange alcool/eau, plus préférablement encore sur colonne de cellulose éluée avec un mélange éthanol/eau dans un rapport volumétrique 80/20.
13. 13. Extrait contenant au moins une xanthone C-glycosylée, préférablement la mangiférine et/ou l'isomangiférine, dans lequel l'extrait est obtenu selon le procédé de l'une quelconque des revendications 1-12.
14. 14. Extrait selon la revendication 13, dans lequel la mangiférine ou l'isomangiférine est le composant majeur.
15. 15. Xanthone C-glycosylée substantiellement pure, préférablement la mangiférine ou l'isomangiférine, dans lequel la xanthone C-glycosylée est obtenue selon le procédé de l'une quelconque des revendications 1-12.
16. 16. Composition comprenant un extrait selon la revendication 13 ou la revendication 14 ou une xanthone C-glycosylée selon la revendication 15, et au moins un véhicule ou excipient approprié, caractérisée en ce que la composition est destinée à être utilisée à des fins cosmétiques ou pharmaceutiques.
17. 17. Composition selon la revendication 16, comprenant en outre au moins un principe actif cosmétique ou un principe actif pharmaceutique.