FI95999C - K2P-prostabilointi - Google Patents
K2P-prostabilointi Download PDFInfo
- Publication number
- FI95999C FI95999C FI913908A FI913908A FI95999C FI 95999 C FI95999 C FI 95999C FI 913908 A FI913908 A FI 913908A FI 913908 A FI913908 A FI 913908A FI 95999 C FI95999 C FI 95999C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- mmol
- citrate
- acid
- process according
- hcl
- Prior art date
Links
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims abstract description 77
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 8
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 claims description 34
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 30
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 claims description 29
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 claims description 29
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 29
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 28
- SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 6-aminohexanoic acid Chemical compound NCCCCCC(O)=O SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 27
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 claims description 27
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 25
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims description 22
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 claims description 17
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 claims description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 14
- XOAAWQZATWQOTB-UHFFFAOYSA-N taurine Chemical compound NCCS(O)(=O)=O XOAAWQZATWQOTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- -1 amino compound Chemical class 0.000 claims description 12
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 12
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 claims description 11
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 claims description 10
- DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N Uridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N 0.000 claims description 10
- GYDJEQRTZSCIOI-LJGSYFOKSA-N tranexamic acid Chemical compound NC[C@H]1CC[C@H](C(O)=O)CC1 GYDJEQRTZSCIOI-LJGSYFOKSA-N 0.000 claims description 10
- 229960000401 tranexamic acid Drugs 0.000 claims description 10
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 9
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 9
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 claims description 9
- JJMDCOVWQOJGCB-UHFFFAOYSA-N 5-aminopentanoic acid Chemical compound [NH3+]CCCCC([O-])=O JJMDCOVWQOJGCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229960002684 aminocaproic acid Drugs 0.000 claims description 8
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical compound NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- KIDHWZJUCRJVML-UHFFFAOYSA-N putrescine Chemical compound NCCCCN KIDHWZJUCRJVML-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- XFNJVJPLKCPIBV-UHFFFAOYSA-N trimethylenediamine Chemical compound NCCCN XFNJVJPLKCPIBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 claims description 7
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 claims description 7
- QCTBMLYLENLHLA-UHFFFAOYSA-N aminomethylbenzoic acid Chemical compound NCC1=CC=C(C(O)=O)C=C1 QCTBMLYLENLHLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 229960003375 aminomethylbenzoic acid Drugs 0.000 claims description 7
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 claims description 7
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 claims description 7
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 claims description 7
- 229960003080 taurine Drugs 0.000 claims description 7
- MBBZMMPHUWSWHV-BDVNFPICSA-N N-methylglucamine Chemical compound CNC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBBZMMPHUWSWHV-BDVNFPICSA-N 0.000 claims description 6
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 claims description 6
- VHRGRCVQAFMJIZ-UHFFFAOYSA-N cadaverine Chemical compound NCCCCCN VHRGRCVQAFMJIZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 6
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 6
- KPGXRSRHYNQIFN-UHFFFAOYSA-N 2-oxoglutaric acid Chemical compound OC(=O)CCC(=O)C(O)=O KPGXRSRHYNQIFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- UQXNEWQGGVUVQA-UHFFFAOYSA-N 8-aminooctanoic acid Chemical compound NCCCCCCCC(O)=O UQXNEWQGGVUVQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 5
- DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N beta-L-uridine Natural products O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N 0.000 claims description 5
- XFFFRUGIPVJPLF-UHFFFAOYSA-N butanoic acid;guanidine Chemical compound NC(N)=N.CCCC(O)=O XFFFRUGIPVJPLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 claims description 5
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N uracil arabinoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229940045145 uridine Drugs 0.000 claims description 5
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 4
- PWGJDPKCLMLPJW-UHFFFAOYSA-N 1,8-diaminooctane Chemical compound NCCCCCCCCN PWGJDPKCLMLPJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- XDOLZJYETYVRKV-UHFFFAOYSA-N 7-Aminoheptanoic acid Chemical compound NCCCCCCC(O)=O XDOLZJYETYVRKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000005700 Putrescine Substances 0.000 claims description 4
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 claims description 4
- 235000011087 fumaric acid Nutrition 0.000 claims description 4
- NAQMVNRVTILPCV-UHFFFAOYSA-N hexane-1,6-diamine Chemical compound NCCCCCCN NAQMVNRVTILPCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 claims description 4
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 claims description 4
- 229940099690 malic acid Drugs 0.000 claims description 4
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 claims description 4
- XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N metformin Chemical compound CN(C)C(=N)NC(N)=N XZWYZXLIPXDOLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 4
- 229930194542 Keto Natural products 0.000 claims description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000000969 carrier Substances 0.000 claims description 3
- PWSKHLMYTZNYKO-UHFFFAOYSA-N heptane-1,7-diamine Chemical compound NCCCCCCCN PWSKHLMYTZNYKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000000468 ketone group Chemical group 0.000 claims description 3
- SXJVFQLYZSNZBT-UHFFFAOYSA-N nonane-1,9-diamine Chemical compound NCCCCCCCCCN SXJVFQLYZSNZBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 3
- 239000002718 pyrimidine nucleoside Substances 0.000 claims description 3
- 239000002719 pyrimidine nucleotide Substances 0.000 claims description 3
- 150000003230 pyrimidines Chemical class 0.000 claims description 3
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 2
- 125000000649 benzylidene group Chemical group [H]C(=[*])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 claims description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000006273 (C1-C3) alkyl group Chemical group 0.000 claims 1
- SUTWPJHCRAITLU-UHFFFAOYSA-N 6-aminohexan-1-ol Chemical compound NCCCCCCO SUTWPJHCRAITLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 claims 1
- 150000004715 keto acids Chemical group 0.000 claims 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 24
- 101000801481 Homo sapiens Tissue-type plasminogen activator Proteins 0.000 abstract 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 68
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 55
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 39
- 108090000373 Tissue Plasminogen Activator Proteins 0.000 description 25
- 102000003978 Tissue Plasminogen Activator Human genes 0.000 description 25
- 229960000187 tissue plasminogen activator Drugs 0.000 description 25
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 22
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 21
- FZHXIRIBWMQPQF-VANKVMQKSA-N L-glucosamine Chemical compound O=C[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CO FZHXIRIBWMQPQF-VANKVMQKSA-N 0.000 description 16
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 14
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 12
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 9
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 6
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 6
- 125000002059 L-arginyl group Chemical group O=C([*])[C@](N([H])[H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])C(=N[H])N([H])[H] 0.000 description 5
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 239000002211 L-ascorbic acid Substances 0.000 description 4
- 235000000069 L-ascorbic acid Nutrition 0.000 description 4
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N Guanidine Chemical compound NC(N)=N ZRALSGWEFCBTJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000019766 L-Lysine Nutrition 0.000 description 3
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 3
- SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N dimethylaminoamidine Natural products CN(C)C(N)=N SWSQBOPZIKWTGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 3
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 3
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- 229940012957 plasmin Drugs 0.000 description 3
- LINDOXZENKYESA-UHFFFAOYSA-N 1,2-dimethylguanidine Chemical compound CNC(N)=NC LINDOXZENKYESA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 2
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 2
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-REOHCLBHSA-N L-lactic acid Chemical compound C[C@H](O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N Pentane Chemical compound CCCCC OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000013566 Plasminogen Human genes 0.000 description 2
- 108010051456 Plasminogen Proteins 0.000 description 2
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 description 2
- 235000012538 ammonium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 description 2
- 150000001735 carboxylic acids Chemical group 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 2
- 150000002357 guanidines Chemical class 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 2
- UHDGCWIWMRVCDJ-UHFFFAOYSA-N 1-beta-D-Xylofuranosyl-NH-Cytosine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BLFRQYKZFKYQLO-UHFFFAOYSA-N 4-aminobutan-1-ol Chemical compound NCCCCO BLFRQYKZFKYQLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LQGKDMHENBFVRC-UHFFFAOYSA-N 5-aminopentan-1-ol Chemical compound NCCCCCO LQGKDMHENBFVRC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 101100283604 Caenorhabditis elegans pigk-1 gene Proteins 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-PSQAKQOGSA-N Cytidine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-PSQAKQOGSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 241000027355 Ferocactus setispinus Species 0.000 description 1
- 108010031891 KHRR 296-299 AAAA T103N Proteins 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N N-methyl-guanidine Natural products CNC(N)=N CHJJGSNFBQVOTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150004094 PRO2 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- GYDJEQRTZSCIOI-UHFFFAOYSA-N Tranexamic acid Chemical compound NCC1CCC(C(O)=O)CC1 GYDJEQRTZSCIOI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000003593 chromogenic compound Substances 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008139 complexing agent Substances 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N cytidine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 229920006158 high molecular weight polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 229940116298 l- malic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N silicic acid Chemical compound O[Si](O)(O)O RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000003381 solubilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- WPLOVIFNBMNBPD-ATHMIXSHSA-N subtilin Chemical compound CC1SCC(NC2=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C(C)CC)C(=O)NC(=C)C(=O)NC(CCCCN)C(O)=O)CSC(C)C2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C1NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C1NC(=O)C(=C/C)/NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(NC(=O)C2NC(=O)CNC(=O)C3CCCN3C(=O)C(NC(=O)C3NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(=C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(N)CC=4C5=CC=CC=C5NC=4)CSC3)C(C)SC2)C(C)C)C(C)SC1)CC1=CC=CC=C1 WPLOVIFNBMNBPD-ATHMIXSHSA-N 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/22—Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
- A61K38/49—Urokinase; Tissue plasminogen activator
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
- A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
- A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
- A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Soil Conditioners And Soil-Stabilizing Materials (AREA)
- Transition And Organic Metals Composition Catalysts For Addition Polymerization (AREA)
- Finger-Pressure Massage (AREA)
Description
, 95999 K2P-prostabilointi - K2P-prostabilisering
Ihmisen kudosplasminogeeniaktivaattorilla (t-PA) on suurta 5 terapeuttista merkitystä hajotettaessa verihyytymiä esimerkiksi sydäninfarktien yhteydessä. t-PA hajottaa verihyytymät aktivoimalla plasminogeenin plasmiiniksi. Plasmiini puolestaan liuottaa fibriinin, proteiinimatriisin pääkom-ponentin hyytyneestä verestä.
1 0
Luontainen t-PA koostuu useammasta funktionaalisesta domee-nista F, E, K1 , K2 ja. Domeeni P sisältää proteolyyttisesti aktiivisen keskustan, joka saa aikaan plasminogeenin hajoamiseen plasmiiniksi. t-PA:n tai erilaisten t-PA-muteiinien, 15 joista jotkin alueista F, E, K1 ja K2 on deletoitu, geeniteknologinen valmistaminen eukaryootti- ja prokaryoottiso-luissa on tunnettua. Tällöin prokaryooteista peräisin olevat t-PA-johdannaiset syntetoidaan glykosyloimattomassa muodossa, mikä on päinvastoin kuin luontaisen t-PA:n ta-20 pauksessa.
Edelleen on tunnettua, että sokeriosuus vaikuttaa merkittävästi proteiinien liukenevuuteen ja aggregaatioon (J. Biol.
Chem. 263 (1988), 8832-8837). Nyt on todettu, että glykosy-25 loimaton t-PA-muteiini, jossa on domeenikoostumus K2P, on oleellisesti huonommin liukeneva, kuin hieman glykosyloitu ·1· t-PA-johdannainen. Tämä glykosyloimaton t-PA-variantti liu kenee vain vähäisessä määrin tavanomaisesti proteiinien liukoisaksi tekemiseen tarkoitettuihin puskureihin, kuten 30 esimerkiksi 50 mmoolia/1 Na-sitraatti, pH 6, 50 mmoolia/1 fosfaattipuskuri tai fysiologinen NaCl-liuos. Terapeuttisena vaikuttavana aineena käytettäessä tulee kuitenkin gly-kosyloimattoman t-PA-johdannaisen K2P-pro entsymaattisen toiminnan olla selvästi korkeampi, vähintään 1,4 MU/ml, 35 edullisesti 1,4 MU/ml - 10 MU/ml.
EP-A-0 217 379:stä on tunnettua lisätä prokaryooteista peräisin olevan t-PA:n (t-PA pro) liukenevuutta neutraaleilla tai hieman aikalisillä arginiiniformuloinneilla. Tämän 2 95999 menetelmän haittana on kuitenkin se, että t-PA pro:n hyvä liukenevuus saavutetaan vain hyvin korkeilla arginiinikon-sentraatioilla. Sitä paitsi erittäin konsentroidun t-PA-johdannaisen K2P pro stabiilius on neutraaleissa tai hieman 5 aikalisissä olosuhteissa vähäinen.
Siten keksinnön kohteena on kehittää formulointeja, jotka sisältävät glykosyloimatonta t-PA-johdannaista K2P pro, jonka entsymaattinen toiminta on vähintään 1,4 MU/ml, jol-10 loin t-PA-johdannaisen stabiilius säilyy pitkän aikaa.
Keksinnön tehtävä ratkaistaan glykosyloimattoman t-PA-joh-dannaisen K2P pro, jonka entsymaattinen toiminta on vähintään 1,4 MU/ml ja pH-arvo vähintään 4,5-6,5, farmaseutti-15 sella valmisteella, jolloin tämä koostumus sisältää sit-raattia ja vähintään yhtä yhdistettä, joka on peräisin ryhmästä, joka koostuu a) askorbiinihaposta, b) EDTA:sta, 20 kaavan
R^N - R - X
aminoyhdisteistä, jolloin X - SO3H, (CH)NH2)-C02H, CO2H, H, NH2 tai OH, R - C-|-Cg-alkyleeni, edullisesti C4~C7-alkylee-ni, C3-Cö-sykloalkyleeni tai bentsylideeni ja R^ ja R2 ovat 25 toisistaan riippumatta H tai C-| -C3~alkyyli, d) kaavan
Y H
( I
H2N-C-N-Z
30 guanidiinianalogiyhdisteistä, jolloin Y - Η2Ν+ tai 0, z - H tai (CH2)m v, (CH2)mCH(NH2)-C02H, CH(C02H)-(CH2)mC02H, V - NH2 tai 002Η ja 35 m - 1-4, e) yhdellä tai useammalla hydroksyyli-, keto- ja/tai muulla karboksyyliryhmällä substituoiduista karbonihapoista, f) dimetyylibiguanidista, g) pyrimidiininukleosideista ja pyrimidiininukleotideista, il · «4» IM»' 1 3 95999 h) trehaloosista, glukosamiinista, N-metyyliglukamiinista.
K2P:llä ymmärretään esillä olevan keksinnön mukaisesti t-PA-johdannaista, joka koostuu kehä 2- ja proteaasidomeenis-5 ta ja alkaa siten aminohapoista 174-180 ja päättyy aminohappoon 527. K2P pro voi sisältää lisäksi osittain tai kokonaan aminohapot -3 (Gly) - + 5 (Ile). Tällöin on edullinen proteiini, joka alkaa aminohaposta 176 ja sisältää mahdollisesti alueelta -3-5 lisäksi aminohapot Ser, Tyr, Gin 10 eteenkytkettynä. Tämä kuvaus noudattaa T.J.R Harrisin, Protein Engineering, 1. painos (1987) 449-458 t-Pa:lle antamaa nimistöä. Tällaisen t-PA-johdannaisen K2P pro valmistaminen on kuvattu EP-A-0 382 174:ssä. K2P pro:n entsymaattinen toiminta on annettu standardiyksikkönä U WHO:n määritelmän 15 mukaisesti. Aktiivisuuden määrittely tapahtuu H. Lillin, ZGIMAL 42 (1987), 478-486, mukaisesti.
Sitraattipuskuri on osoittautunut erityisen sopivaksi K2P pro:n liukoisaksi tekemiseen. Sitraattikonsentraation tulee 20 olla esimerkiksi vähintään 5 mmoolia/1, edullisesti 5-100 mmoolia/1, erityisen edullisesti 50 mmoolia/1. pH-arvo säädetään lisätyn yhdisteen emäksisyyden mukaan edullisesti HCl:lla tai emäksellä, kuten esimerkiksi NaOH:lla tai KOH:11a.
25
Yllättäen todettiin, että glykosyloimattoman K2P pro:n liu-kenevuus muihin puskurijärjestelmiin, esimerkiksi fosfaattipuskuriin, on samassa ionivahvuudessa samassa pH-arvossa oleellisesti vähäisempi. On osoittautunut sopivaksi säätää 30 alkalisten sitraattiliuosten pH-arvo HCl:lla, so. että koostumus sisältää lisäksi kloridi-ioneita. Kloridi-ionien läsnäollessa ovat nimittäin yllättäen erittäin konsentroidut glykosyloimattoman K2P pro:n liuokset oleellisesti stabiilimpia kuin esimerkiksi fosfaatti-ionien läsnäollessa.
35 Happamien sitraattiliuosten pH-arvo säädetään tavanomaisesti NaOHrlla.
Keksinnön mukaiseen farmaseuttiseen valmisteeseen sopii pH- arvo 4,5-6,5, erityisen edullisesti pH-arvo 5-6. Tavaili- 4 95999 sesti luontaiseen t-PA:han käytetyissä formulaatioissa, joiden pH-arvo on >7, ei-glykolysoidun t-PA-johdannaisen K2P pro stabiilisuus liuoksessa hounonee yllättäen huomattavasti. Siten K2P pro:n yksiketjuinen muoto on stabiili 5 pH:ssa 7,2 ja pHzssa 8 arginiinilla puskuroiduissa liuoksissa vain muutamia päiviä huoneenlämpötilassa tai korkeammissa lämpötiloissa. Keksinnön mukainen farmaseuttinen valmiste sisältää askorbiinihappoa edullisesti 0,1-1 moolia/1, erityisen edullisesti 0,2-0,3 moolia/1.
1 0 EDTAzn pitoisuuden tulee olla edullisesti 1-200 mmoolia/1, erityisen edullisesti 10-100 mmoolia/1.
Keksinnön mukaiseen koostumukseen käytetään aminoyhdisteinä 15 edullisesti tauriinia, ε-aminokapronihappoa, traneksaami-happoa, lysiiniä, ornitiinia, δ-aminovaleriaanahappoa, p-aminometyylibentsoehappoa, 8-amino-oktaanihappoa ja/tai traneksaamihappoa ja/tai lysiiniä. Erityisen edullista on e-aminokapronihapon, p-aminometyylibentsoehapon, 7-amino-20 heptaanihapon, traneksaamihapon ja/tai lysiinin käyttö. Edulliset konsentraatiot ovat 0,5-20 mmoolia, erityisen edulliset 1-120 mmoolia.
Yhtä sopivia ovat 4-aminobutanoli-1 , 5-aminopentanoli-1 , 25 6-aminoheksanoli-1, 1 ,9-diaminononaani, 1,8-diamino-oktaa-ni, 1,7-diaminoheptaani, 1,6-diaminoheksaani, 1,5-diamino-·* pentaani, 1 , 4-diaminobutaani ja/tai 1,3-diaminopropaani.
Keksinnön mukaiseen valmisteeseen sopivien α,ω-diamiinien ja a,ω-aminoalkohollien konsentraatiot ovat edullisesti 10-30 100 mmoolia/1.
. Tauriinia ja analogisia yhdisteitä käytetään edullisesti 0,1-0,5 moolia/1, erittäin edullisesti 0,1-0,3 moolia.
35 Lisäksi keksinnön mukaiseen koostumukseen käytetään guani-diinianalogiyhdisteinä edullisesti ureaa, guanidiinivoihap-poa ja/tai arginiinia. Ureakonsentraatio on edullisesti 0,1-4 moolia/1, erityisen edullisesti 0,5-2 moolia/1. Muiden guanidiinianalogiyhdisteiden osalta konsentraatio on 5 95999 edullisesti 10-200 mmoolia/1, erityisen edullisesti 50-100 mmoolia/1. Karbonihapoiksi, jotka on substituoitu hydrok-si-, keto- tai/ja muilla karboksyyliryhmillä, sopivat ome-nahappo, maitohappo, fumaarihappo ja/tai 2-oksoglutaarihap-5 po. Niiden konsentraatio on edullisesti 0,001-1 moolia/1, edullisesti 0,01-0,5 moolia/1.
Dimetyyliguanidiinia käytetään konsentraatioina 50-400 mmoolia/1, erityisen edullisesti 100-300 moolia/1.
10
Pyrimidiininukleosidiksi tai pyrimidiininukleotidiksi sopivat esimerkiksi tymidiini, sytosiini ja uridiini tai vastaavat nukleotidit. Substanseina käytetään edullisesti konsentraatioina 1-300 mmoolia/1, erityisen edullisesti 10-300 15 mmoolia/1.
Trehaloosia, glukosamiinia ja N-metyyliglukamiinia käytetään edullisesti konsentraatioina 1-500 mmoolia/1, erityisen edullisesti 10-300 mmoolia/1.
20
Lisäksi keksinnön kohteena on keksinnön mukainen koostumus, joka sisältää lisäksi yhtä tai useampaa a-aminokarbonihap-poa, erityisesti histidiiniä.
25 Seuraavaksi esitetään joitakin erityisen edullisia esillä olevan keksinnön mukaisia valmisteita. Eräs formulointi si-• ' sältää 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl:a, pH 6, 2 moolia/1 ureaa. Toinen formulointi sisältää 50 mmoolia/1 Na-sitraat-tia, pH 6 ja 0,5 moolia/1 - 1 moolia/1 guanidiinia. Eräs 30 toinen formulointi sisältää 50 mmoolia/1 Na-sitraattia, pH 6, ja 0,3 moolia/1 tauriinia. Eräs toinen formulointi sisältää 500 mmoolia/1 Na-sitraattia, pH 6, ja 0,2 moolia/1 - 0,3 moolia/1 askorbiinihappoa. Lisäksi eräs toinen formulointi sisältää 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl:a, pH 35 6, ja 300 mmoolia/1 dimetyyliguanidiinia. Eräs toinen for mulointi sisältää 50 mmoolia Na-sitraatti/HCl:a, pH 6, ja 1 0-300 mmoolia tymidiiniä, uridiinia tai sytosiinia tai 1 ΟΙ 00 mmoolia/1 yhtä edellä mainittua α,ω-diamiinia tai yhtä edellä mainittua a,ω-aminoalkoholia. Eräs toinen formuloin- 6 95999 ti sisältää 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl:a, pH 6, ja 10-300 mmoolia trehaloosia, glukosamiinia tai N-metyyligluka-miinia.
5 Lisäksi eräs erityisen edullinen keksinnön mukainen formulointi sisältää 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl:a, pH 6, ja 1 mmoolia/1 - 10 mmoolia ε-aminokapronihappoa, s-aminovale-riaanahappoa, 7-aminoheptaanihappoa, 8-amino-oktaanihappoa, p-aminometyylibentsoehappoa, L-lysiiniä, ornitiinia tai 10 traneksaamihappoa. Nämä substanssit saavat aikaan yllättävän jo vähäisenä mooliylimääränä (10-40-kertainen) K2P:n pro:n erinomaisen liukenevuuden.
Lisäksi edullisia ovat myös formuloinnit, jotka sisältävät 15 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl:a, pH 6, ja guanidiinianalo- giyhdistettä, erityisesti arginiinlia ja guanidiinivoihap-poa, konsentraationa 50-100 mmoolia. Eräs toinen formulointi sisältää 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl:a, pH 6, ja 10-500 mmoolia omenahappoa, maitohappoa, fumaarihappoa tai 2-20 oksoglutaarihappoa. Lisäksi eräs toinen formulointi sisältää 50 mmoolia/1 Na-sitraattia, pH 6, ja 10-100 mmoolia/1 EDTA.
Kuten esimerkeistä on havaittavissa, saavat myös useamman 25 edellä mainitun yhdisteen ja sitraatin kombinaatiot aikaan K2P pro:n hyvän liukenevuuden. Sopivia ovat lysiinin kombinaatiot arginiinin, ornitiinin, glukosamiinin tai/ja ty-midiinin kanssa tai EDTA:n kombinaatiot -aminokaproniha-pon, lysiinin, arginiinin, glukosamiinin ja/tai tymidiinin 30 kanssa. Sopivia ovat myös muut vähintään kahden edellä mainituista yhdisteistä kombinaatiot sitraatin kanssa.
,·. Keksinnön kohteena on myös lääkeaine, joka perustuu K2P
pro:hon vaikuttavana aineena, liuoksena tai lyofilisaatti-35 na, jossa on esitettyjä substansseja ja mahdollisesti vielä muita farmaseuttisesti siedettäviä lisä-, apu-, kanto- ja täyteaineita.
7 95999
Keksinnön mukaisia farmaseuttisia valmisteita käytetään edullisesti injektio- tai infuusioliuoksina. Tämä voi tapahtua siten, että asetetaan käyttöön ruiskutusvalmis liuos, jonka koostumus on keksinnön mukainen. On myös mahdol-5 lista, asettaa käyttöön farmaseuttisia valmisteita, jotka ovat lyofilisaattien muodossa. Nämä rekonstituoidaan sitten itsessään tunnetuilla injektointiin sopivilla väliaineilla tai liuoksilla. Injektointiväliaineena sopii erityisen edullisesti käytettäväksi vesi, joka sisältää injektioliu-10 oksissa tavanomaisia lisäaineita, kuten stabilointiainetta, liuotusvälitysainetta, puskuria ja isotonisia lisäaineita, esimerkiksi fysiologisen NaCl-konsentraation. Tällaisia lisäaineita ovat esimerkiksi manniitti, tartraatti-tai sitraattipuskuri, etanoli, kompleksinmuodostaja, kuten 15 etyleenidiamiinitetraetikkahappo ja sen ei-toksiset suolat, sekä korkeamolekyyliset polymeerit, kuten nestemäinen po-lyetyleenioksidi viskositeetin säätämiseksi. Nestemäisten injektionesteiden kantoaineiden tulee olla steriilejä ja ne täytetään edullisesti ampulleihin.
20
Lisäksi esillä oleva keksintö käsittää myös K2P pro:n käytön keksinnön mukaisten farmaseuttisten valmisteiden valmistamiseen.
25 Seuraavat esimerkit valaisevat keksinnön konkreettisia suoritusmuotoja.
Esimerkki 1
Urean vaikutus glykosyloimattomien t-PA-muteiinien, joissa 30 on domeenikoostumus K2P, liukenevuuteen.
Tässä esimerkissä kuvataan urean vaikutusta K2P pro:n liu-. kenevuuteen (valmistus on EP-AO 382 174 mukainen) sitraat- tipuskuroiduissa liuoksissa pH:n ollessa 6,0. Kuten taulu-35 kosta 1 on nähtävissä, K2P pro on 50 mmoolin/1 sitraatti-puskurissa pH:ssa 6,0 vain rajallisesti liukeneva. Ureaa lisäämällä voidaan liukenevuutta parantaa huomattavasti.
Optimi on 2 moolia/1 ureaa.
8 95999
Suorittaminen 170 ml puhdistettua K2P pro:ta (liuotettuna 0,5 mooliin/1 arginiini/H3PC>4, pH 7,2) konsentroidaan ultrasuodatuksella Amicon YM 10-kalvon päällä. 1 ml konsentraattia (aktiivi-5 suus 5,8 MU/ml) dialysoidaan vasten taulukossa 1 esitettyä puskuria. Näytteiden sentrifugoinnin jälkeen mitataan ent-symaattinen toiminta kirkkaassa sakkaa peittävässä nesteessä.
10 Entsymaa tt inen toiminta annetaan tilavuustoimintana MU/ml:ssa sekä kokonaistoimintana MU:ssa.
K2P-aktiivisuuden mittaus voidaan määrittää tavanomaisella tavalla pilkkomalla kromogeeninen substraatti (H. Lill, 15 ZGIMAL 42 (1987), 478-486). Yksikkö U on t-PA-aktiivisuuden yksikkö WHON:n National Institute for Biological Standards and Control, mukainen.
Taulukko 1 20
Puskuri Aktiivisuus
MU/ ml MU
50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6,0 1,03 1,24 25 8 moolia/1 ureaa 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6,0 2,76 3,59 6 moolia/1 ureaa 30 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6,0 3,46 4,67 4 moolia/1 ureaa 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6,0 4,20 5,67 2 moolia/1 ureaa 35 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6,0 2,62 3,27 1 mooli/1 ureaa 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6,0 0,32 0,93
11 ; - H;t ISt> Ilta : I
9 95999
Esimerkki 2
Erilaisten substanssien vaikutus K2P pro:n liukenevuuteen.
Tässä esimerkissä kuvataan erilaisten substanssien vaiku-5 tusta K2P pro:n liukenevuuteen sitraattipuskuroiduissa liuoksissa pH:n ollessa 6. Erinomaiset liukenevuudet (>2 MU/ml) saavutetaan tauriinilla, askorbiinihapolla, lysii-nillä, EACA:lla, traneksaamihapolla, dimetyylibiguanidilla, glukosamiinilla, trehaloosilla, N-metyyliglukamiinilla, 10 uridiinilla, sytidiinillä, p-aminometyylibentsoehapolla, fumaarihapolla ja oksoglutaarihapolla. Lisäksi on havaittavissa, että sitraattipuskuri saa aikaan samassa moolikon-sentraatiossa t-PA-johdannaisen paremman liukenevuuden kuin NH4HCO3-, Tris- tai fosfaattipuskuri.
1 5
Suorittaminen:
Katso esimerkki 1 .
Konsentraatti: 20 Aktiivisuus: 5,8 MU/ml
Taulukko 2
Puskuri Aktiivisuus
25 MU/ ml MU
50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6,0 1,92 2,11 50 mmoolia/1 ornitiiniä 30 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/NaOH, pH 6,0 2,67 4,00 0,3 moolia/1 tauriinia ... 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/NaOH, pH 6,0 4,00 4,20 0,3 moolia/1 askorbiinihappoa 35 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6,0 3,88 5,80
10 mmoolia/1 EACA
50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6,0 2,6 3,32 ,0 95999
10 mmoolia/1 L-lysiiniM
50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6,0 5,54 7,36 10 moolia/1 traneksaamihappoa 5 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6,0 2,96 3,40 0,3 moolia/dimetyylibiguanidia 50 mmoolia/1 Tris/HCl, pH 7,2 0,04 0,06 1 0 50 mmoolia/1 NH4HCO3 0,12 0,19 50 mmoolia/1 Na2HP04, pH 7,2 0,15 0,23 15 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6,0 0,32 0,93 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6,0 2,02 2,02 0,3 moolia/1 glukosamiinia 20 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 3,52 3,17 0,3 moolia/1 trehaloosia 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 1,57 1,88 0,1 moolia/1 tymidiiniä 25 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 6,32 7,58 0,3 moolia/1 uridiiniä 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 3,8 4,94 30 30 mmoolia/sytosiiniä 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 3,46 5,03 10 mmoolia/1 p-aminometyyli-bentsoehappoa 35 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/NaOH, pH 6 1 ,53 1 ,68 0,3 moolia/1 omenahappoa 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/NaOH, pH 6 1,59 1,98 1 1 95999 0,3 moolia/1 maitohappoa 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/NaOH, pH 6 4,32 5,16 0,3 moolia/1 fumaarihappoa 5 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/NaOH, pH 6 4,24 4,66 0,3 moolia/1 2-oksoglutaarihappoa 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 3,36 3,70 10 0,3 moolia/1 N-metyyliglukamiinia
Esimerkki 3 ε-aminokapronihapon (EACA) vaikutus K2P pro:n liukenevuu-teen 1 5
Suorittaminen:
Katso esimerkki 1
Konsentraatti: 20 Aktiivisuus: 6,3 MU/ml
Taulukko 3
Puskuri Aktiivisuus
25 MU/ml MU
50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6,0 0,34 0,48 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6,0 3,81 4,57
30 10 mmoolia/1 EACA
. 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6,0 3,52 4,86
.· „ 5 mmoolia/1 EACA
35 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6,0 2,70 3,83
1 mmoolia/1 EACA
50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6,0 0,58 0,75
0,1 mmoolia/1 EACA
12 95999
Taulukko 3 osoittaa, että jo 1-10 mmoolin/1 EACA-konsent-raatio (10-40-kertaisena ylimääränä verrattuna K2P pro:hon saa aikaan merkittävän liukoisuuden paranemisen sitraatti-puskuroiduissa liuoksissa pH:n ollessa 6,0.
5
Esimerkki 4
Askorbiinihapon (EACA) vaikutus K2P pro:n liukenevuuteen
Suorittaminen: 10 Katso esimerkki 1
Konsentraatti:
Aktiivisuus: 6,3 MU/ml 15 Taulukko 4
Puskuri Aktiivisuus
MU/ml MU
20 50 mmoolia/l Na-sitraatti/HCl, pH 6,0 0,34 0,48 50 mmoolia/l Na-sitraatti/NaOH, pH 6,0 4,04 4,24 0,3 moolia/1 askorbiinihappoa 25 50 mmoolia/l Na-sitraatti/NaOH, pH 6,0 2,40 2,93 0,2 moolia/1 askorbiinihappoa
Taulukon 4 tulokset osoittavat, että K2P pro:n liukenevuus paranee sitraattipuskuroiduissa liuoksissa edelleen lisät-30 täessä askorbiinihappoa.
Esimerkki 5 . K2P pro:n stabiilisuuden pH-riippuvuus arginiinipitoisissa liuoksissa 35
Puhdistettu K2P pro dialysoidaan vasten taulukossa 5 esitettyä 0,5 moolia/1 Arg/H3P04-puskuria ja se varastoidaan annoksiin jaettuna -20, 25 ja 37 °C:ssa. 3, 7, 14 ja 21 vuorokauden kuluttua testataan kulloinkin 1 näytteen aktii- 95999 13 visuus ja stimuloitavuus lisäämällä fibriiniä ja analysoidaan SDS-elektroforeettisesti (lähtöarvot: aktiivisuus 1,3 MU/ml; stimuloituvuus: 28). Taulukkoon 5 kootut tiedot osoittavat, että pH:hon 8 ja pHrhon 7,2 varastoitujen näyt-5 teiden aktiivisuus on noussut merkittävästi 3 vast. 7 vuorokauden 37 °C:ssa varastoinnin jälkeen samalla kun stimuloitavuus on vähentynyt. 25 °C:ssa tulee, vaikkakin ajallisesti viivästyneenä, samaten aktiivisuuden nousu ja stimu-loitavuuden väheneminen. 14-21 vuorokauden kuluttua havai-10 taan aktiivisuuden väheneminen.
Taulukko 5
Aktiivisuus (MU/Ml)/Stimuloitavuus
Aika -20 °C_25 °C_37 °C
15 pH 8,0 3 vrk 1,22/36 1,47/24 1,45/15 7 vrk 1,23/44 1,87/15 2,38/13 14 vrk 1,37/33 2,08/9 1,1/10 21 vrk 1,37/- 2,14/10 1,0/7 20 pH 7,2 3 vrk 1,12/39 1,5/27 1,7/20 7 vrk 1 ,17/45 1 ,7/21 2,1/13 14 vrk 1 ,38/32 1 ,7/9 1 ,9/9 25 21 vrk 1,22/25 1,7/11 1,52/8 ’ pH 6,0 3 vrk 0,93/34 1,43/31 1,54/34 7 vrk 1,05/46 1,27/42 1,58/36 30 14 vrk 1,23/39 1,04/20 1,45/14 21 vrk 1,43/26 0,95/16 1,00/8 pH 5,5 3 vrk 0,85/32 1,47/40 1,08/39 35 7 vrk 1,4/47 1,53/68 1,54/48 14 vrk 1,2/32 1,3/26 1,3/24 21 vrk 1,36/26 0,95/25 0,95/21 1 4 95999 Näiden muutosten rinnalla havaitaan K2P pro:n molekyylipai-non lasku (elektroforeesi SDS-PAGE:lla).
Esimerkki 6 5 Kloridi- ja fosfaatti-ionien vaikutus K2P pro:n stabiili-suuteen arginiini-(Arg)-pitoisissa liuoksissa
Puhdistettu K2P pro dialysoidaaan vasten jäljempänä esitettyä arginiinipitoista puskuria ja se varastoidaan annoksiin 10 jaettuna -20, 25 ja 37 °C:ssa. 2, 7 ja 14 vuorokauden kuluttua testataan kulloinkin 1 näyte SDS-elektroforeettises-ti. Osoittautuu, että yksiketjuinen muoto on kloridi-ionien läsnäollessa oleellisesti stabiilimpi kuin fosfaatti-ionien läsnäollessa. Kun kloridipitoisissa liuoksissa 7 vrk:n 37 15 °C:ssa pH:ssa 7,2 ja 8 varastoinnin jälkeen vasta 10 % - 20 % näytteestä on hajonnut, on hajonneen materiaalin osuus fosfaattipuskuroiduissa liuoksissa 60 % - 90 %.
Puskuri: 20 0,5 moolia/1 Arg/H3P04, pH 8,0 0,5 moolia/1 Arg/HCl, pH 8,0 0,5 moolia/1 Arg/H3P04, pH 7,2 0,5 moolia/1 Arg/HCl, pH 7,2 25 Esimerkki 7 e-aminokapronihapon vaikutus K2P pro:n liukenevuuteen sit-raatti- ja fosfaattipuskuroiduissa liuoksissa
Puhdistettu K2P pro konsentroidaan ultrasuodattamalla 4,2 30 MU/ml:ksi ja se dialydoidaan vasten taulukossa 8 esitettyä puskuria ja sentrifugoidaan. Näytteiden sentrifugoinnin jälkeen mitataan aktiivisuus kirkaassa sakan päällä olevas-, sa nesteessä.
35 95999
Taulukko 6 1 5
Puskuri Aktiivisuus MU/ml MU 5 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 0,32 0,93 50 mmoolia/1 Na2HP04/H3PC>4, pH 6 0,07 0,10 10 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 3,30 4,60
2 mmoolia/1 EACA
50 mmoolia/1 Na2HP04/H3P04, pH 6 0,90 1/39 2 mmoolia/1 EACA 1 5 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 2,43 3,52 2 mmoolia/1 EACA 0,15 moolia/1 NaCl 20 50 mmoolia/1 Na2HP04/H3PC>4, pH 6 1,08 1,57 2 mmoolia/1 EACA 0,15 moolia NaCl
Taulukko 6 osoittaa, että liukenevuus paranee EACA:11a sit-25 raattipuskuroiduissa liuoksissa oleellisesti paremmin kuin fosfaattipurkuroiduissa liuoksissa.
Esimerkki 8
Traneksaamihapon (TES) vaikutus K2P pro:n liukenevuuteen 30
Suorittaminen:
Katso esimerkki 1 i > «
Konsentraatti: 35 Aktiivisuus: 4,2 MU/ml
Taulukko 7 16 95999
Puskuri Aktiivisuus
MU/ml MU
5 _.__ 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 2,66 3,60
10 mmoolia/1 TES
50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 2,54 3,30
10 5 mmoolia/1 TES
50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 2,35 3,29
1 mmooli/1 TES
15 Tulokset osoittavat, että traneksaamihapolla (TES)11 saavutetaan samalainen K2P pro:n liukenevuus kuin EACAtlla.
1) trans-4-aminometyylisykloheksaanikarbonihappo 20 Esimerkki 9 ω-aminokarbonihappojen vaikutus K2P pro:n liukenevuuteen
Suorittaminen:
Katso esimerkki 1 25
Konsentraatti: *’ Aktiivisuus: 4,2 MU/ml
Taulukko 8 30
Puskuri Aktiivisuus
MU/ml MU
50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 0,32 0,93 35 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 3,12 4,05 10 mmoolia/1 8-amino-oktaanihappoa 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 3,54 4,42 1 7 95999 10 mmoolia/1 7-aminoheptaanihappoa 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 4,22 2,90 10 mmoolia/1 EACA 5 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 1,83 2,47 10 mmoolia/1 <5-aminovaleriaanahappoa
Esimerkki 10 10 Guanidiinianalogien vaikutus K2P pro:n liukenevuuteen
Suorittaminen:
Katso esimerkki 1 15 Konsentraatti:
Aktiivisuus: 4,2 MU/ml
Taulukko 9 20 Puskuri Aktiivisuus
MU/ml MU
50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 1,42 2,06 50 mmoolia/1 arginiinia 25 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 2,21 3,08 ·· 5 mmoolia/1 guanidiinivoihappoa
Tulokset osoittavat, että guanidiiniryhmallä parannetaan 30 selvästi K2P projn liukenevuutta.
Esimerkki 11 v EDTA:n vaikutus K2P pro:n liukenevuuskäyttäytymiseen 35 Suorittaminen:
Katso esimerkki 1
Konsentraatti:
Aktiivisuus: 4,2 MU/ml is 95999
Taulukko 10
Puskuri Aktiivisuus
MU/ml MU
5 ____ 50 mmoolia/1 EDTA/NaOH, pH 6 0,22 0,03 0,3 moolia/1 EDTA/NaCH, pH 6 1,95 1,95 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/NaOH, pH 6 1,80 2,25
50 mmoolia/1 EDTA
1 0 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/NaOH, pH 6 3,36 4,03
100 mmoolia/1 EDTA
50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 0,32 0,93 1 5
Taulukko 10 osoittaa, että EDTA:n ja sitraatin kombinaatiolla enemmän kuin additiivinen vaikutus K2P pro:n liuke-nevuuteen.
20 Esimerkki 12
Aminohappojen yksinään tai kombinaationa vaikutus K2P pro:n 1iukenevuuteen
Suorittaminen: 25 Katso esimerkki 1
Konsentraatti:
Aktiivisuus: 4,2 MU/ml 30 Taulukko 11
Puskuri Aktiivisuus
MU/ml MU
35 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 1,42 2,06 50 mmoolia/1 arginiinia 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 2,81 3,94 10 mmoolia/1 L-lysiiniä 1 9 95999 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 2,00 2,6 1 mmoolia/1 L-lysiiniä 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 2,56 3,84 5 10 mmoolia/1 L-lysiiniä 10 mmoolia/1 arginiiniä 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 3,27 4,9 10 mmoolia/1 lysiiniä 10 50 mmoolia/1 arginiiniä 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 3,18 4,13 10 mmoolia/1 lysiiniä 10 mmoolia/1 arginiiniä 15 10 mmoolia ornitiiniä 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 2,70 3,78 10 mmoolia/1 lysiiniä 50 mmoolia/1 arginiiniä 20 10 mmoolia ornitiiniä 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 3,34 4,30 10 mmoolia/1 lysiiniä 50 mmoolia/1 arginiiniä 25 50 mmoolia ornitiiniä ' Esimerkki 13 ω-aminoalkoholien vaikutus K2P pro:n liukenevuuteen 30 Suorittaminen:
Katso esimerkki 1
Konsentraatti:
Aktiivisuus: 4,9 MU/ml 35
Taulukko 12 20 9 5 9 9 9
Puskuri Aktiivisuus
MU/ml MU
5 _ 50 ramoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 1,84 2,4 50 mmoolia/1 4-aminobutanoli-1 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 2,54 3,55 10 50 mmoolia/1 5-aminopentanoli-1
Esimerkki 14
Erilaisten substanssien kombinaatioiden vaikutus K2P pro:n 1iukenevuuteen 1 5
Suorittaminen:
Katso esimerkki 1
Konsentraatti: 20 Aktiivisuus: 5,5 MU/ml
Taulukko 13
Puskuri Aktiivisuus
25 MU/ml MU
:* 50 mmoolia/1 Na-sitraattia, pH 6 4,24 5,08 pH
50 mmoolia/1 EDTA 1 mmooli/1 EACA
30 50 mmoolia/1 glukosamiinia 50 mmoolia/1 Na-sitraattia, pH 6 3,63 5,08
10 mmoolia/1 EDTA 1 mmooli/1 EACA
35 10 mmoolia/1 glukosamiinia 50 mmoolia/1 Na-sitraattia, pH 6 3,70 5,14
10 mmoolia/1 EDTA 1 mmooli/1 EACA
il Μ'Ί Siili H-l a ; 21 95999 10 mmoolia/1 glukosamiinia 50 mmoolia tymidiiniä 50 mmoolia/1 Na-sitraattia, pH 6 4,00 5,40
5 50 mmoolia/1 EDTA
1 mmooli/1 lysiiniä 50 mmoolia/1 glukosamiinia 50 mmoolia/1 Na-sitraattia, pH 6 3,04 3,95
10 50 mmoolia/1 EDTA
1 mmooli/1 lysiiniä 10 mmoolia/1 glukosamiinia 50 mmoolia/1 Na-sitraattia, pH 6 3,12 4,52
15 10 mmoolia/1 EDTA
1 mmooli/1 lysiiniä 10 mmoolia/1 glukosamiinia 10 mmoolia tymidiiniä 20 50 mmoolia/1 Na-sitraattia, pH 6 2,60 3,77 10 mmoolia/1 EDTA 1 mmooli/1 lysiiniä 10 mmoolia arginiiniä 10 mmoolia/1 glukosamiinia 25 10 mmoolia/1 tymidiiniä : 50 mmoolia/1 Na-sitraattia, pH 6 2,94 4,12 10 mmoolia/1 EDTA 1 mmooli/1 lysiiniä 30 25 mmoolia arginiiniä 10 mmoolia/1 glukosamiinia 10 mmoolia/1 tymidiiniä 50 mmoolia/1 Na-sitraattia, pH 6 2,80 3,64 35 1 mmooli/1 lysiiniä 10 mmoolia arginiiniä 10 mmoolia/1 glukosamiinia 10 mmoolia/1 tymidiiniä 22 95999 50 ramoolia/1 Na-sitraattia, pH 6 3,20 4,32 10 mmoolia/1 EDTA 1 mmooli/1 lysiiniä 25 mmoolia arginiiniä 5 10 mmoolia/1 glukosamiinia 25 mmoolia/1 tymidiiniä 50 mmoolia/1 Na-sitraattia, pH 6 4,56 5,90 10 mmoolia/1 EDTA 10 1 mmooli/1 lysiiniä 25 mmoolia arginiinia 10 mmoolia/1 glukosamiinia 50 mmoolia/1 tymidiiniä 15 50 mmoolia/1 Na-sitraattia, pH 6 3,24 4,54 1 mmooli/1 lysiiniä 25 mmoolia/1 arginiinia 10 mmoolia/1 glukosamiinia 50 mmoolia/1 tymidiiniä 20 50 mmoolia/1 Na-sitraattia, pH 6 3,54 4,95 1 mmooli/1 lysiiniä 25 mmoolia/ arginiiniä 10 mmoolia/1 glukosamiinia 25 25 mmoolia/1 tymidiiniä 50 mmoolia/1 Na-sitraattia, pH 6 3,60 4,68 1 mmooli/1 lysiiniä 25 mmoolia/1 arginiiniä 30 50 mmoolia/1 glukosamiinia 25 mmoolia/1 tymidiiniä 50 mmoolia/1 Na-sitraattia, pH 6 5,85 5,85 1 mmooli/1 lysiiniä 35 25 mmoolia/1 arginiiniä 100 mmoolia/1 glukosamiinia 25 mmoolia/1 tymidiiniä il UL.t Mii i I ill ! 23 9 5 9 9 9
Esimerkki 15 α/ω-diamiinien vaikutus K2P pro:n liukenevuuteen
Suorittaminen: 5 Katso esimerkki 1
Konsentraatti:
Aktiivisuus: 4,9 MU/ml 10 Taulukko 14
Puskuri Aktiivisuus
MU/ml MU
15 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 3,12 4,05 50 mmoolia/1 1,9-diaminononaania 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 2,80 3,64 50 mmoolia/1 1,8-diamino-oktaania 20 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 3,42 4,45 50 mmoolia/1 1,6-diaminoheksaania 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 3,52 4,40 25 50 mmoolia/1 1,5-diaminopentaania : 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 3,96 5,15 50 mmoolia/1 1,4-diaminobutaania 30 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6 3,33 4,23 50 mmoolia/1 1,3-diaminopropaania
Claims (23)
- 95999 24
- 1. Menetelmä glykosyloimattoman t-PA-johdannaisen, joka koostuu Kringle 2- ja proteaasidomeenista ja alkaa jollakin aminohapoista 174-180 ja päättyy aminohappoon 527 ja joka voi 5 lisäksi sisältää kokonaan tai osittain aminohapot -3(Gly) -+5(Ile) (K2P pro), ja jonka entsymaattinen aktiivisuus on vähintään 1,4 MU/ml ja pH-arvo vähintään 4,5-6,5, farmaseuttisen valmisteen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että t-PA-johdannainen K2P pro liuotetaan sitraatin ja vähintään yhden seuraa-10 vista yhdisteistä kanssa: a) askorbiinihappo, b) EDTA, c) kaavan rjr2N - R - X 15 aminoyhdiste, jolloin X = S03H, CH(NH2)-C02H, C02H, H, NH2 tai OH, R = Cj-C9-alkyleeni, edullisesti C4-C7-alkyleeni, C3-C6-syk-loalkyleeni tai bentsylideeni ja R1 ja R2 ovat toisistaan riippumatta H tai C,-C3-alkyyli, d) kaavan
- 20. H Il I H2N-C-N-Z guanidiinianalogiyhdiste, j olioin Y - H2N+ tai 0,
- 25 Z = H tai (CH2)mV, (CH2)mCH(NH2) -C02H, CH(C02H) - (CHj) mC02H, : V = NH2 tai C02H ja m = 1-4, e) yhdellä tai useammalla hydroksyyli-, keto- tai/ja muulla 30 karboksyyliryhmällä substituoidut karbonihapot, f) dimetyylibiguanidi, . g) pyrimidiininukleosidit ja pyrimidiininukleotidit, • h) trehaloosi, glukosamiini, N-metyyliglukamiini, ja saatu liuos saatetaan sopivaan farmaseuttiseen antomuotoon. 35
- 2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että aminoyhdiste on tauriini, e-aminokapronihappo, traneksaa-mihappo, lysiini, ornitiini, δ-aminovaleriaanahappo, p-amino-metyylibentsoehappo, 4-aminobutanoli-l, 5-aminopentanoli-l, 6- 11 : . HIM I I 1 M - - f 25 95999 aminoheksanoli-l, 1,9 -diaminononaani, 1,8-diamino-oktaani, 1,7-diaminoheptaani, 1,6 -diaminoheksaani, 1,5-diaminopentaani, I, 4-diaminobutaani, 1,3-diaminopropaani, 8-amino-oktaanihappo ja/tai 7-aminoheptaanihappo. 5
- 3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että guanidiinianalogiyhdiste on urea, guanidinovoihappo tai/ ja arginiini.
- 4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että substituoitu karbonihappo on omenahappo, maitohappo, fu-maarihappo tai/ja 2-oksoglutaarihappo.
- 5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, 15 että lisätään lisäksi yhtä tai useampaa a-aminokarbonihappoa, edullisesti histidiiniä.
- 6. Jonkin patenttivaatimuksen 1-5 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että sitraatin konsentraatio on 5-100 mmoolia/1, 20 edullisesti 50 mmoolia.
- 7. Jonkin patenttivaatimuksen 1-6 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lisätään lisäksi kloridi-ioneita.
- 8. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että käytetään 50 mmoolia/1 Na-sitraattia, pH 6, ja 0,1-1 moo-lia/1, edullisesti 0,2-0,3 moolia/1, askorbiinihappoa.
- 9. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, 30 että käytetään 50 mmoolia/1 Na-sitraattia, pH 6, ja 1-200 mmoolia/1, edullisesti 10-100 mmoolia/1, EDTA. «
- 10. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että käytetään 50 mmoolia/1 Na-sitraattia, pH 6, ja 0,1-0,5 35 moolia/1, edullisesti 0,1-0,3 moolia/1, tauriinia. II. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että käytetään 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6, ja 0,5-20 95999 26 mmoolia/1, edullisesti 1-10 mmoolia/1, e -aminokapronihappoa, δ-aminovaleriaanahappoa, lysiiniä, ornitiiniä, traneksaamihap-poa, p-aminometyylibentsoehappoa, 7-aminoheptaanihappoa ja/tai 8-amino-oktaanihappoa. 5
- 12. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että käytetään 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6, ja 10-100 mmoolia/1 4-aminobutanoli-l, 5-aminopentanoli-l, 6-aminohek-sanoli-1, 1,9 -diaminononaania, 1,8-diamino-oktaania, 1,7-di- 10 aminoheptaania, 1,6-diaminoheksaania, 1,5-diaminopentaania, 1,4-diaminobutaania tai 1,3-diaminopropaania.
- 13. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että käytetään 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6, ja 0,1-4 15 moolia/1, edullisesti 0,5-2 moolia, ureaa.
- 14. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että käytetään 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6, ja 10-200 mmoolia/1, edullisesti 50-100 mmoolia, guanidinovoihappoa tai 20 arginiiniä.
- 15. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että käytetään 50 mmoolia/1 Na-sitraattia, pH 6, ja 0,001-1 moolia/1, edullisesti 0,01-0,5 moolia omenahappoa, maitohap- 25 poa, fumaarihappoa tai 2-oksoglutaarihappoa.
- 16. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että käytetään 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6, ja 50-400 mmoolia/1, edullisesti 100-300 mmoolia, dimetyylibiguanidia. 30
- 17. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, : että käytetään 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6, ja 1-300 mmoolia/1, edullisesti 10-300 mmoolia/1 tymidiiniä, sytosiiniä tai uridiiniä. 35
- 18. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että käytetään 50 mmoolia/1 Na-sitraatti/HCl, pH 6, ja 1-500 27 95999 mmoolia/1, edullisesti 10-300 mmoolia, trehaloosia, glukos-amiinia tai N-metyyliglukamiinia.
- 19. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, 5 että käytetään 50 mmoolia/1 Na-sitraattia ja patenttivaatimuksen 1 ryhmästä a)-h) olevien yhdisteiden kombinaatiota.
- 20. Jonkin patenttivaatimuksista 1-19 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että siihen lisätään lisäksi muita tavanomai- 10 siä farmaseuttisia lisä-, apu- ja/tai kantoaineita.
- 21. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että farmaseuttinen antomuoto on injektioliuos tai lyofili-saatti. 15
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE3942141A DE3942141A1 (de) | 1989-12-20 | 1989-12-20 | K2p pro-stabilisierung |
| DE3942141 | 1989-12-20 | ||
| PCT/EP1990/002250 WO1991008765A1 (de) | 1989-12-20 | 1990-12-19 | K2p pro-stabilisierung |
| EP9002250 | 1990-12-19 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI913908A0 FI913908A0 (fi) | 1991-08-19 |
| FI95999B FI95999B (fi) | 1996-01-15 |
| FI95999C true FI95999C (fi) | 1996-04-25 |
Family
ID=6395924
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI913908A FI95999C (fi) | 1989-12-20 | 1991-08-19 | K2P-prostabilointi |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5352452A (fi) |
| EP (1) | EP0458950B1 (fi) |
| JP (1) | JPH0660108B2 (fi) |
| KR (1) | KR920700681A (fi) |
| AT (1) | ATE94408T1 (fi) |
| AU (1) | AU625307B2 (fi) |
| CA (1) | CA2046861C (fi) |
| DE (2) | DE3942141A1 (fi) |
| DK (1) | DK0458950T3 (fi) |
| ES (1) | ES2060357T3 (fi) |
| FI (1) | FI95999C (fi) |
| HU (2) | HUT59318A (fi) |
| NO (1) | NO305585B1 (fi) |
| WO (1) | WO1991008765A1 (fi) |
Families Citing this family (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3942141A1 (de) * | 1989-12-20 | 1991-06-27 | Boehringer Mannheim Gmbh | K2p pro-stabilisierung |
| DE3942143A1 (de) * | 1989-12-20 | 1991-06-27 | Boehringer Mannheim Gmbh | T-pa pro stabilisierung |
| ES2082465T3 (es) * | 1991-04-16 | 1996-03-16 | Boehringer Mannheim Gmbh | Unidad farmaceutica de envasado que contiene activadores de plasminogeno para la administracion multiple de bolos. |
| WO1993022335A1 (en) * | 1992-04-30 | 1993-11-11 | Cor Therapeutics, Inc. | Stable polypeptide composition |
| DE4405426A1 (de) * | 1994-02-21 | 1995-08-24 | Boehringer Mannheim Gmbh | Pharmazeutisches Präparat enthaltend Plasminogenaktivator (t-PA) oder dessen Derivate |
| ATE238807T1 (de) * | 1997-11-07 | 2003-05-15 | Chiron Corp | Zusammensetzung um die löslichkeit von igf-i zu erhöhen |
| US6767892B1 (en) * | 1997-11-07 | 2004-07-27 | Chrion Corporation | Compositions providing for increased IGF-I solubility |
| US6733985B1 (en) * | 1999-05-19 | 2004-05-11 | International Technidyne Corporation | Preparation of stable liquid and dried synthetic prothrombin time reagents |
| US20060019234A1 (en) * | 2004-07-22 | 2006-01-26 | Shanbrom Technologies, Llc | Modern blood banking employing improved cell preservation composition |
| DK1899462T3 (da) * | 2005-07-02 | 2011-06-06 | Arecor Ltd | Stabile vandige systemer omfattende proteiner |
| GB0700523D0 (en) * | 2007-01-11 | 2007-02-21 | Insense Ltd | The Stabilisation Of Proteins |
Family Cites Families (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5951220A (ja) * | 1982-08-02 | 1984-03-24 | Asahi Chem Ind Co Ltd | 新規なプラスミノ−ゲン・アクチベ−タ−およびその製法ならびにこれを含有する薬剤 |
| EP0156169B1 (en) * | 1984-02-29 | 1991-12-18 | Asahi Kasei Kogyo Kabushiki Kaisha | An aqueous solution of a tissue plasminogen activator dissolved therein at an increased concentration and a method |
| ZW14486A1 (en) * | 1985-07-29 | 1986-10-22 | Smithkline Beckman Corp | Pharmaceutical dosage unit |
| ATE83153T1 (de) * | 1985-09-10 | 1992-12-15 | Eisai Co Ltd | Einen gewebe-plasminogen-aktivator enthaltende zusammensetzung. |
| US4777043A (en) * | 1985-12-17 | 1988-10-11 | Genentech, Inc. | Stabilized human tissue plasminogen activator compositions |
| JPH0678241B2 (ja) * | 1986-04-02 | 1994-10-05 | エーザイ株式会社 | ｔＰＡ医薬組成物 |
| DE3718889A1 (de) * | 1987-06-05 | 1988-12-22 | Behringwerke Ag | Verfahren zur herstellung einer loesung hoher spezifischer volumenaktivitaet von einem protein mit gewebe-plasminogenaktivator (t-pa)-aktivitaet, loesung, enthaltend protein mit t-pa-aktivitaet und verwendung der loesung in der human- und veterinaermedizin |
| US4898826A (en) * | 1987-12-10 | 1990-02-06 | Invitron Corporation | Method to solubilize tissue plasminogen activator |
| AU4187389A (en) * | 1988-08-02 | 1990-03-05 | Invitron Corporation | Method for preparing tpa compositions |
| US4980165A (en) * | 1989-01-27 | 1990-12-25 | Genetics Institute, Inc. | Pharmaceutical formulations of plasminogen activator proteins |
| DE3942145A1 (de) * | 1989-12-20 | 1991-06-27 | Boehringer Mannheim Gmbh | T-pa-solubilisierung |
| DE3942144A1 (de) * | 1989-12-20 | 1991-06-27 | Boehringer Mannheim Gmbh | Stabilisierung von k1k2p pro |
| DE3942141A1 (de) * | 1989-12-20 | 1991-06-27 | Boehringer Mannheim Gmbh | K2p pro-stabilisierung |
| DE3942143A1 (de) * | 1989-12-20 | 1991-06-27 | Boehringer Mannheim Gmbh | T-pa pro stabilisierung |
| DE3942142A1 (de) * | 1989-12-20 | 1991-06-27 | Boehringer Mannheim Gmbh | Stabilisierung von glykosyliertem t-pa |
| JPH0813750B2 (ja) * | 1990-03-01 | 1996-02-14 | 持田製薬株式会社 | 経口用トロンビン製剤 |
-
1989
- 1989-12-20 DE DE3942141A patent/DE3942141A1/de not_active Withdrawn
-
1990
- 1990-12-19 EP EP91901736A patent/EP0458950B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1990-12-19 KR KR1019910700925A patent/KR920700681A/ko not_active Application Discontinuation
- 1990-12-19 HU HU912738A patent/HUT59318A/hu unknown
- 1990-12-19 DK DK91901736.8T patent/DK0458950T3/da active
- 1990-12-19 WO PCT/EP1990/002250 patent/WO1991008765A1/de active IP Right Grant
- 1990-12-19 ES ES91901736T patent/ES2060357T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1990-12-19 HU HU912738A patent/HU216793B/hu unknown
- 1990-12-19 DE DE91901736T patent/DE59002760D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1990-12-19 US US07/730,938 patent/US5352452A/en not_active Expired - Lifetime
- 1990-12-19 AT AT91901736T patent/ATE94408T1/de not_active IP Right Cessation
- 1990-12-19 AU AU70443/91A patent/AU625307B2/en not_active Ceased
- 1990-12-19 JP JP3502062A patent/JPH0660108B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1990-12-19 CA CA002046861A patent/CA2046861C/en not_active Expired - Lifetime
-
1991
- 1991-08-19 NO NO913238A patent/NO305585B1/no not_active IP Right Cessation
- 1991-08-19 FI FI913908A patent/FI95999C/fi active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA2046861A1 (en) | 1991-06-21 |
| HUT59318A (en) | 1992-05-28 |
| EP0458950B1 (de) | 1993-09-15 |
| HU216793B (hu) | 1999-08-30 |
| DE59002760D1 (de) | 1993-10-21 |
| AU625307B2 (en) | 1992-07-09 |
| EP0458950A1 (de) | 1991-12-04 |
| KR920700681A (ko) | 1992-08-10 |
| JPH04503683A (ja) | 1992-07-02 |
| AU7044391A (en) | 1991-07-18 |
| ATE94408T1 (de) | 1993-10-15 |
| NO913238D0 (no) | 1991-08-19 |
| WO1991008765A1 (de) | 1991-06-27 |
| DK0458950T3 (da) | 1993-12-27 |
| US5352452A (en) | 1994-10-04 |
| FI913908A0 (fi) | 1991-08-19 |
| DE3942141A1 (de) | 1991-06-27 |
| HU912738D0 (en) | 1992-01-28 |
| FI95999B (fi) | 1996-01-15 |
| CA2046861C (en) | 2001-04-10 |
| NO913238L (no) | 1991-08-19 |
| ES2060357T3 (es) | 1994-11-16 |
| JPH0660108B2 (ja) | 1994-08-10 |
| NO305585B1 (no) | 1999-06-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US6204036B1 (en) | Stable transglutaminase preparations and processes for their production | |
| JP2006515882A (ja) | 組織因子経路インヒビター（ｔｆｐｉ）または組織因子経路インヒビター改変体を含有する安定化水性組成物 | |
| HU202761B (en) | Process for producing stabilized erythropoietin compositions | |
| FI95999C (fi) | K2P-prostabilointi | |
| EP1260230A1 (en) | Preparations stabilized over long time | |
| KR100356934B1 (ko) | 플라스미노겐활성화제를포함하는의약제제 | |
| US4980165A (en) | Pharmaceutical formulations of plasminogen activator proteins | |
| KR890000103A (ko) | 조직 플라스미노겐 활성화제(t-PA) 활성을 갖는 단백질의 고농도 용액의 제조방법, t-PA 활성을 갖는 단백질을 함유하는 용액, 및 인체 및 수의약제에 있어서 용액의 용도 | |
| US5409699A (en) | Compositions containing glycosylated molecules having human tissue type plasminogen activator enzymatic activity | |
| FI96000C (fi) | t-PA pro:n stabilointi | |
| FI98601C (fi) | Menetelmä glykosyloimattoman t-PA-johdannaisen K1K2P farmaseuttisen valmisteen valmistamiseksi | |
| JPH06247870A (ja) | インターロイキン−６を含有する医薬製剤 | |
| JPS61221129A (ja) | 安定なγ‐インターフエロン製剤 | |
| AU738891B2 (en) | Stable transglutaminase preparations and process for producing them | |
| JP2001081040A (ja) | 組織プラスミノーゲンアクティベーター含有組成物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| BB | Publication of examined application |