FI77875C - Foerfarande foer framstaellning av nya terapeutiskt anvaendbara peptider. - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av nya terapeutiskt anvaendbara peptider. Download PDFInfo
- Publication number
- FI77875C FI77875C FI834320A FI834320A FI77875C FI 77875 C FI77875 C FI 77875C FI 834320 A FI834320 A FI 834320A FI 834320 A FI834320 A FI 834320A FI 77875 C FI77875 C FI 77875C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- obz
- groups
- boc
- spmb
- conh
- Prior art date
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 20
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 9
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N D-alanine Chemical compound C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims abstract description 4
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims abstract description 3
- UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N serine phosphoethanolamine Chemical compound [NH3+]CCOP([O-])(=O)OCC([NH3+])C([O-])=O UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 30
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 21
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 16
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 15
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 claims description 11
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 6
- 150000003573 thiols Chemical group 0.000 claims description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 3
- 101100516563 Caenorhabditis elegans nhr-6 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 102100030878 Cytochrome c oxidase subunit 1 Human genes 0.000 claims description 2
- 101100295738 Gallus gallus COR3 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 101100295741 Gallus gallus COR4 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 101000919849 Homo sapiens Cytochrome c oxidase subunit 1 Proteins 0.000 claims description 2
- 101000605122 Homo sapiens Prostaglandin G/H synthase 1 Proteins 0.000 claims description 2
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 claims description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 2
- 230000003525 myelopoietic effect Effects 0.000 abstract description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 abstract description 3
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 abstract description 3
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 abstract description 3
- -1 etc. Chemical class 0.000 description 43
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 24
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 14
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 11
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 11
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical class Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 8
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 7
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 7
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 6
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 6
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 6
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 5
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 5
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 5
- 238000007327 hydrogenolysis reaction Methods 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 4
- 229910000042 hydrogen bromide Inorganic materials 0.000 description 4
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 4
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 5-oxo-L-proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 3
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 3
- 125000006242 amine protecting group Chemical group 0.000 description 3
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 3
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 238000009903 catalytic hydrogenation reaction Methods 0.000 description 3
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 3
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 3
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000011132 hemopoiesis Effects 0.000 description 3
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 3
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 3
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 3
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 3
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 3
- WMMKLGOAKIPZJN-YTFOTSKYSA-N (2s)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2s)-3-carboxy-2-[[(2s)-4-carboxy-2-[[(2s)-5-oxopyrrolidine-2-carbonyl]amino]butanoyl]amino]propanoyl]amino]-3-sulfanylpropanoyl]amino]hexanoic acid Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1 WMMKLGOAKIPZJN-YTFOTSKYSA-N 0.000 description 2
- MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 1,2-Divinylbenzene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1C=C MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 description 2
- NADWTMLCUDMDQI-ACZMJKKPSA-N Glu-Asp-Cys Chemical compound C(CC(=O)O)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N NADWTMLCUDMDQI-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 2
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 102000002704 Leucyl aminopeptidase Human genes 0.000 description 2
- 108010004098 Leucyl aminopeptidase Proteins 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N Pyrrole Chemical compound C=1C=CNC=1 KAESVJOAVNADME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 2
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 2
- DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N Tert-Butanol Chemical compound CC(C)(C)O DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N Titan oxide Chemical compound O=[Ti]=O GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 150000001412 amines Chemical group 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 2
- NEPLKJAINOWIJL-DHNNRRLOSA-N dnc014884 Polymers C1C2=CC3=CC=CC=C3N2[C@@]2(C)[C@@H]1[C@@]1(C)CCC(=O)C(C)(C)[C@@H]1CC2 NEPLKJAINOWIJL-DHNNRRLOSA-N 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 210000003722 extracellular fluid Anatomy 0.000 description 2
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 2
- 239000007922 nasal spray Substances 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 125000006503 p-nitrobenzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1[N+]([O-])=O)C([H])([H])* 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 description 2
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 2
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 2
- 238000007127 saponification reaction Methods 0.000 description 2
- ODZPKZBBUMBTMG-UHFFFAOYSA-N sodium amide Chemical compound [NH2-].[Na+] ODZPKZBBUMBTMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 2
- 238000009492 tablet coating Methods 0.000 description 2
- 239000002700 tablet coating Substances 0.000 description 2
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 2
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 2
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WZURYSXYWOWZPJ-QMMMGPOBSA-N (3s)-3-amino-4-(4-nitrophenoxy)-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WZURYSXYWOWZPJ-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- MOHYOXXOKFQHDC-UHFFFAOYSA-N 1-(chloromethyl)-4-methoxybenzene Chemical compound COC1=CC=C(CCl)C=C1 MOHYOXXOKFQHDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JVSFQJZRHXAUGT-UHFFFAOYSA-N 2,2-dimethylpropanoyl chloride Chemical compound CC(C)(C)C(Cl)=O JVSFQJZRHXAUGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 2-amino-4,6-dichloropyrimidine-5-carbaldehyde Chemical group NC1=NC(Cl)=C(C=O)C(Cl)=N1 GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQFSYHWITGFERZ-UHFFFAOYSA-N 2-bromoethanesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)CCBr OQFSYHWITGFERZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxybenzoic acid Chemical class OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKTYGPATCNUWKN-UHFFFAOYSA-N 4-nitrobenzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 JKTYGPATCNUWKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 4-nitrophenol Chemical compound OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N Acrylic acid Chemical group OC(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- 229920000623 Cellulose acetate phthalate Polymers 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GKQLYSROISKDLL-UHFFFAOYSA-N EEDQ Chemical compound C1=CC=C2N(C(=O)OCC)C(OCC)C=CC2=C1 GKQLYSROISKDLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- KYFSMWLWHYZRNW-ACZMJKKPSA-N Gln-Asp-Cys Chemical compound C(CC(=O)N)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N KYFSMWLWHYZRNW-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical class NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 235000010643 Leucaena leucocephala Nutrition 0.000 description 1
- 240000007472 Leucaena leucocephala Species 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 229910000978 Pb alloy Inorganic materials 0.000 description 1
- OZJHCMYAXLCFKU-UHFFFAOYSA-N Polyavolensinone Natural products CC1(C)C2CCC3n4c(CC3(C)C2(C)CCC1=O)cc5ccccc45 OZJHCMYAXLCFKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 229920000037 Polyproline Polymers 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 101000928724 Pseudomonas putida 4-cresol dehydrogenase [hydroxylating] flavoprotein subunit Proteins 0.000 description 1
- 230000018199 S phase Effects 0.000 description 1
- 229920001800 Shellac Polymers 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 150000008065 acid anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 1
- HSDAJNMJOMSNEV-UHFFFAOYSA-N benzyl chloroformate Chemical compound ClC(=O)OCC1=CC=CC=C1 HSDAJNMJOMSNEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 229940105329 carboxymethylcellulose Drugs 0.000 description 1
- 229940096529 carboxypolymethylene Drugs 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 229940081734 cellulose acetate phthalate Drugs 0.000 description 1
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 1
- 239000012612 commercial material Substances 0.000 description 1
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 1
- 229940125782 compound 2 Drugs 0.000 description 1
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 1
- 229940125898 compound 5 Drugs 0.000 description 1
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 1
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 1
- 239000012050 conventional carrier Substances 0.000 description 1
- 239000013256 coordination polymer Substances 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001944 cysteine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 108010016616 cysteinylglycine Proteins 0.000 description 1
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 229940043239 cytotoxic antineoplastic drug Drugs 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N diphenylmethanamine Chemical group C=1C=CC=CC=1C(N)C1=CC=CC=C1 MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 1
- DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N ethyl mercaptane Natural products CCS DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 150000002306 glutamic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 1
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 1
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 description 1
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000003840 hydrochlorides Chemical class 0.000 description 1
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hydrogen chloride Substances Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000041 hydrogen chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010324 immunological assay Methods 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 150000002668 lysine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- JQAACYUZYRBHGG-UHFFFAOYSA-L magnesium pidolate Chemical compound [Mg+2].[O-]C(=O)C1CCC(=O)N1.[O-]C(=O)C1CCC(=O)N1 JQAACYUZYRBHGG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 210000001501 megacaryocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000011278 mitosis Effects 0.000 description 1
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 210000000066 myeloid cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 1
- 125000000636 p-nitrophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1*)[N+]([O-])=O 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 239000007793 ph indicator Substances 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- NMHMNPHRMNGLLB-UHFFFAOYSA-N phloretic acid Chemical compound OC(=O)CCC1=CC=C(O)C=C1 NMHMNPHRMNGLLB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 108010026466 polyproline Proteins 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 229920002689 polyvinyl acetate Polymers 0.000 description 1
- 239000011118 polyvinyl acetate Substances 0.000 description 1
- 229940075065 polyvinyl acetate Drugs 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 239000003380 propellant Substances 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 210000000664 rectum Anatomy 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- ZLGIYFNHBLSMPS-ATJNOEHPSA-N shellac Chemical compound OCCCCCC(O)C(O)CCCCCCCC(O)=O.C1C23[C@H](C(O)=O)CCC2[C@](C)(CO)[C@@H]1C(C(O)=O)=C[C@@H]3O ZLGIYFNHBLSMPS-ATJNOEHPSA-N 0.000 description 1
- 239000004208 shellac Substances 0.000 description 1
- 229940113147 shellac Drugs 0.000 description 1
- 235000013874 shellac Nutrition 0.000 description 1
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 239000010936 titanium Substances 0.000 description 1
- 239000004408 titanium dioxide Substances 0.000 description 1
- 235000010215 titanium dioxide Nutrition 0.000 description 1
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
- C07K7/067—Hemoregulatory peptides based on sequence Glp-Glu-Asp-Cys-Lys
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Public Health (AREA)
- Hematology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Oncology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Optical Fibers, Optical Fiber Cores, And Optical Fiber Bundles (AREA)
Description
77875
Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten peptidien valmistamiseksi
Keksintö koskee uusien peptidien valmistusta, joilla 5 on hemopoieesia inhiboiva vaikutus.
Monissa tehokkaimmista syövän hoitomenetelmistä käytetään hyväksi soluille myrkyllisiä lääkeaineita, jotka hyökkäävät syöpäsoluja vastaan mitoosin ja S-vaiheen aikana. Normaaleihin kudossoluihin, joissa tapahtuu solun jalo kautumista, vaikutetaan tavallisesti samanaikaisesti, mutta pääosa tällaisista soluista on lepäävää eikä siten hyökkäyksen vaikutuksesta herkästi vioittuva. On kuitenkin havaittu, että tällaiset soluille myrkylliset lääkkeet eivät ainoastaan hyökkää lisääntyviä kudossoluja vastaan, vaan 15 pyrkivät työntämään suuren osan normaalisti lepäävistä he-mopoieettisista luuytimen kantasoluista solukiertoon tehden ne siten herkiksi hyökkäykselle.
Luuydinsolut ovat peräisin monitehoisista kanta-soluista, jotka kypsyvät muodostaen monimutkaisen popu-20 laation morfologisesti erilaisia soluja, nimittäin mega-karyosyyttejä, erytrosyyttejä, granulosyyttejä ja lymfosyyttejä. Ainoastaan 10 % monitehoisista kantasoluista pystyy jakautumaan jatkuvasti. Kypsymisen alkuvaiheessa jokainen lisääntyvistä kantasoluista tulee "saatetuksi" 25 johonkin spesifiseen morfologisesti erilliseen muotoon, joka mahdollisesti johtaa johonkin edellä esitetyistä neljästä kypsästä solutyypistä. Kun solut lisääntyvät, ne asteittain menettävät edelleen lisääntymisvoimansa ja kypsät solut, esimerkiksi erytrosyytit tai granulosyytit, 30 eivät voi enää jakautua. Koska kypsät solut täten jatkuvasti kuolevat, on olennaista, että vähemmän kypsien solujen ja erityisesti monitehoisten kantasolujen lisäänty-miskyky ylläpidetään.
Nyt on keksitty tiettyjä peptidejä, jotka pystyvät 35 selektiivisesti estämään lepääviä kantasoluja joutumasta 2 77875 kiertoon. Peptidien uskotaan olevan luonnossa esiintyvän granulolopsieesin estotekijän analogeja. Tätä estoteki-jää on löydetty pienissä määrissä luuydinuutteista.
Keksinnön kohteena on menetelmä kaavan (I) mukais-5 ten terapeuttisesti käyttökelpoisten peptidien ja niiden fysiologisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, HN-CH-CONH-CH-CONH—CH—CONH—CH—CO(NH—R —CO) NHCH-COX2 1 J 4H2>2 iH2 fH2 " <^B2> 4 10 ° COX1 C00H SH ÄH2 (I) jossa NH-R^-CO on glysiini tai D-alaniini ja kaikki muut 1 2 aminohappotähteet ovat L-muodossa, X ja X , jotka voi-15 vat olla samanlaisia tai erilaisia, ovat OH- tai NH2~ ryhmiä ja n on 0 tai 1.
Keksinnön mukaisten peptidien fysiologisesti hyväksyttävät suolat käsittävät happoadditiosuoloja, kuten hydroklorideja, hydrobromideja, sulfaatteja jne, samoin 20 kuin suoloja emästen kanssa, kuten alkalimetallisuoloja, esim. natrium- tai kaliumsuoloja.
Aminohappotäde, joka sijaitsee toisessa asemassa N-päästä katsottuna, näyttää olevan ratkaiseva, koska peptidi pyroGlu-Asp-Asp-Cys-LysOH, joka oli oletettu luonnos-25 sa esiintyväksi granulopoieesia estäväksi tekijäksi, osoittautui olevan inaktiivinen. Johtuen erittäin pienistä määristä käytettävissä olevaa luonnon granulopoieesitekijää luonnossa esiintyvän aineen rakennetta ei ole määritetty. Sitä ei ole koskaan saatu kiteisessä tai täydellisen puh-30 taassa muodossa eikä tiedetä, voitaisiinko tähän päästä käyttäen pelkästään luonnossa esiintyvää materiaalia. Vastakohtana tälle voidaan keksinnön mukaiset peptidit saada kiteisessä muodossa, joka on sopiva farmaseuttista käyttöä varten ja suhteellisen suurissa määrissä, vapaina saastut-35 tavista luonnollista alkuperää olevista peptideistä ja proteiineista.
3 77875
Keksinnön mukaiset edulliset yhdisteet ovat: 1. L-pyroGlutamyyli-L-glutamyyli-L-aspartyyli-L-kysteinyy-li-L-lysiini; 2. L-pyroGlutamyyli-L-glutamyyli-L-aspartyyli-L-kysteinyy- 5 li-glysyyli-L-lysiini; 3. L-pyroGlutamyyli-L-glutaminyyli-L-aspartyyli-L-kystei-nyyli-L-lysiini; 4. L-pyroGlutamyyli-L-glutamyyli-L-aspartyyli-L-kysteinyy-li-D-alanyyli-L-lysiini; ja 10 5. L-pyroGlutamyyli-L-glutamyyli-L-aspartyyli-L-kysteinyy- li-L-lysiiniamidi.
Edellä esitetyn kaavan mukaisilla yhdisteillä on taipumusta monimutkaiseen aktiivisuusmalliin, joka ilmeisesti on annoksesta riippuva. Erityisesti yhdiste (1) , kun 15 sitä injektoidaan hiiriin suhteellisen matalalla annosta-solla, estää selektiivisesti myelopoieettista systeemiä, nimittäin morfologisesti tunnistettavia soluja ja lajimää-rättyjä kantasoluja, kun taas muihin solulinjoihin, jotka ovat peräisin monitehoisista kantasoluista, ei vaikuteta.
_7 20 Väkevyydessä 10 M solun ulkopuolisessa nesteessä tapahtuu merkittävä vähennys ääreisgranulosyyteissä, joka vähennys on suurin kypsissä soluissa. Yhden injektion jälkeen väkevyydessä 10 ^ M näyttää päävaikutus kohdistuvan lajimäärättyihin kantasoluihin. Suuremmilla annoksilla, 5 25 esim. injektiolla väkevyydessä 10 M kuutena peräkäisenä päivänä tapahtuu vielä voimakasta vähenemistä lajimäärät-tyjen kantasolujen populaatiossa, mutta myös monitehoiset kantasolut ja erytrosyyttien tuotanto alenevat. Väkevyydellä 10^ M kolmen viikon aikana havaitaan koko verenmuo-30 dostussysteemin voimakasta stimuloitumista imusolujen tuotanto mukaan lukien. Samanlaisia tuloksia antavat yhdisteet (2)-(5), vaikkakin lievästi erilaisilla tehokkuusta-soilla.
On huomattava, että mitään estovaikutusta ei ha-35 väitä muiden kudosten soluilla ja erityisesti kasvainso- 77875 4 luilla, jotka liittyvät ei-myelopoieettisiin kudoksiin.
Ne suojaavat siten myelopoieettisen systeemin selektiivisesti. Peptideillä on kuitenkin suojaava vaikutus syöpä-soluihin, jotka liittyvät myelopoieettiseen systeemiin, 5 esimerkiksi myeloleukemiasoluihin, eikä niitä voida käyttää selektiivisesti tällaisten syöpien hoitoon.
Nämä peptidit eivät ole merkittävästi myrkyllisiä. Lisäksi kaikki havaitut hematologiset vaikutukset olivat palautuvia eikä mitään makroskooppisia muutoksia havaittu 10 muissa elimissä eläimillä, joihin oli injektoitu peptidiä.
Kuten edellä esitettiin, pyrkii hemopoieesin ja erityisesti granulopoieesin estäminen estämään lepäävien solujen jakautumista ja siten niiden muuttumista herkäksi solumyrkyllisten syövänvastaisten lääkkeiden, esimerkiksi 15 sytosiini-arabinosidin vaikutukselle.
On huomattu, että käsiteltäessä soluja keksinnön mukaisilla peptidillä, kuten yhdisteellä (1), estovaikutus myelopoieettisiin soluihin ei ole pelkästään palautuva, vaan itseasiassa tällaisten solujen tuotanto lisään-20 tyy hetkellisesti epänormaalisti, niin että normaali solu-populaatio palautuu hyvin nopeasti ja itse asiassa ylittyy tilapäisesti.
Edellä esitetyn suojaavan vaikutuksen lisäksi solu-. . myrkkyterapiassa voidaan keksinnön mukaisia peptidejä 25 käyttää myös sellaisten syöpäsolujen lisääntymisen pysäyttämiseen, jotka liittyvät myelopoieettiseen systeemiin, esimerkiksi hoidettaessa myeloleukemiaa. Näitä peptidejä voidaan käyttää missä tahansa kliinisessä tilanteessa, jossa halutaan muuttaa hemopoieesia. Joissakin tapauksis-30 sa keksinnön mukaisia peptidejä voidaan käyttää myös suhteellisen suurina annoksina stimuloimaan myelopoieettista systeemiä, kun tämä on riittämättömän aktiivinen.
5 77875
Koska peptidien on havaittu panevan liikkeelle tietyn vaikutuksen samansukuisiin ei-myeloidi-soluihin, kuten lymfopoieesiin, niitä voidaan käyttää myös solun lisääntymisen selektiiviseen modifiointiin muissa elimissä.
5 Yleensä suojaavan vaikutuksen aikaansaamiseksi so luille myrkyllisiä lääkkeitä vastaan annetaan keksinnön mukaisia peptidejä ihmispotilaille injektoimalla annos alueella 1-10 mg, esimerkiksi 4-5 mg/70 kg kehon painoa/ päivä. Jos antaminen tapahtuu tiputtamalla tai vastaavilla 10 menetelmillä, voi annos olla väliltä 3-300 mg/70 kg kehon painoa, esimerkiksi noin 100 mg, kuuden päivän ajan. Periaatteessa on toivottavaa aikaansaada peptidin väkevyys -9 -4 noin 10 M - 10 M potilaan solun ulkopuolisessa nesteessä.
Yleensä yhdistetty hoito solumyrkyllisten lääkkei-15 den, kuten sytosiini-arabinosidin, kanssa vaatii huolellisen ajoituksen sen varmistamiseksi, että myelopoieettinen systeeni on suojattu niin kauan kuin solumyrkyllistä lääkettä on vielä läsnä.
Keksinnön mukaisista yhdisteistä voidaan formuloi-20 da farmaseuttisia yhdistelmiä, jotka aktiivisena aineosana sisältävät ainakin yhden kaavan (I) mukaisen yhdisteen, tai sen fysiologisesti yhteensopivan suolan, yhdessä farmaseuttisen kantajan tai apuaineen kanssa. Keksinnön mukaisia yhdistelmiä voidaan antaa esimerkiksi suun kautta, 25 nenän kautta tai ruoansulatuskanavan ulkopuolisesta tai peräsuolen kautta.
Keksinnön mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää myös eläinlääketieteessä.
Keksinnön mukaiset yhdisteet voidaan antaa tavan-30 omaisissa farmakologisissa antomuodoissa, kuten tabletteina, päällystettyinä tabletteina, nenäsuihkeena, liuoksina, emulsioina, jauheena, kapseleina tai jatkuvissa va-pautumismuodoissa. Tavanomaisia farmaseuttisia apuaineita sekä myös tavallisia valmistusmenetelmiä voidaan käyttää 6 77875 näiden muotojen valmistukseen. Tabletteja voidaan valmistaa esimerkiksi sekoittamalla aktiivinen aineosa tai aineosat tunnettujen apuaineiden, kuten esimerkiksi ]aimennusaineiden, kuten kalsiumkarbonaatin, kalsiumfos-5 faatin tai laktoosin, hajotusaineiden, kuten maissitärkke-lyksen tai algiinihapon, sideaineiden, kuten tärkkelyksen tai gelatiinin, liukuaineiden, kuten magnesiumstearaa-tin tai talkin, ja/tai aineiden kanssa jatkuvan vapautumisen saamiseksi, kuten karboksipolymetyleenin, karboksime-10 tyyliselluloosan, selluloosa-asetaattiftalaatin tai poly-vinyyliasetaatin kanssa.
Tabletit voivat haluttaessa koostua useasta kerroksesta. Päällystettyjä tabletteja voidaan valmistaa päällystämällä ytimiä, jotka on saatu samalla tavalla kuin tab-15 letit, aineilla, joita tavallisesti käytetään tabletin päällystykseen, esimerkiksi polyvinyylipyrrolidonilla tai sellakalla, arabikumilla, talkilla, titaanidioksidilla tai sokerilla. Jatkuvan vapautumisen saavuttamiseksi tai yhteensopimattomuuksien välttämiseksi voi myös ydin koos-20 tua useasta kerroksesta. Tabletin päällyste voi myös koostua useista kerroksista jatkuvan vapautumisen aikaansaamiseksi, jossa tapauksessa voidaan käyttää edellä tableteille mainittuja apuaineita.
Injektioliuoksia valmistetaan esimerkiksi tavalli-25 seen tapaan, kuten lisäämällä säilöntäaineita, kuten p- hydroksibentsoaatteja, tai stabiloimisaineita, kuten EDTA. Liuokset täytetään sitten injektiopulloihin tai ampulleihin.
Nenäsuihkeet voidaan muodostaa samalla tavalla vesipitoisessa liuoksessa ja pakata suihkesäiliöihin joko 30 aerosoli-ponneaineen kanssa tai varustettuna laitteella käsin puristamista varten. Kapselit, jotka sisältävät yhden tai useampia aktiivisia aineosia, voidaan valmistaa esimerkiksi sekoittamalla aktiiviset aineosat inerttien kanti-mien, kuten laktoosin tai sorbitolin kanssa ja täyttämällä 35 seos gelatiinikapseleihin.
7 77875
Sopivia peräpuikkoja voidaan valmistaa esimerkiksi sekoittamalla aktiivinen aineosa tai aktiiviset aine-osayhdistelmät tavanomaisten kantajien kanssa, joita tavallisesti käytetään tähän tarkoitukseen, kuten luonnon 5 rasvojen tai polyetyleeniglykolin tai niiden johdannaisten kanssa.
Annosyksiköt, jotka sisältävät tämän keksinnön mukaisia yhdisteitä, sisältävät edullisesti 1-10 mg, esimerkiksi 4,5 mg kaavan (I) peptidiä.
10 Keksinnön mukaisia uusia peptidejä voidaan myös käyttää immunologisissa analyysimenetelmissä. Peptidi liitetään silloin kovalenttisesti sopivaan suurmolekyy-liseen kantajaan, kuten albumiiniin, polysiiniin tai po-lyproliiniin ruiskutettavaksi vasta-ainetta tuottaviin 15 eläimiin (esim. kaniineihin, marsuihin tai vuohiin).
Erittäin spesifisiä vastaseerumeita saadaan käyttämällä hyvin tunnettuja absoptio-menetelmiä suurmolekyylistä kantajaa käyttäen. Liittämällä peptidimolekyyliin radioaktiivinen isotooppi (3H, 14C, ^N) voidaan helposti 20 suunnitella radioimmunoanalyysi ja käyttää tätä peptidin määrittämiseen erilaisissa biologisissa nesteissä, kuten seerumissa (plasma), virtsassa ja aivo-selkäydinnesteessä.
Kaavan (I) mukaisia peptidejä valmistetaan siten, että kaavan (II) mukaisesta suojatusta yhdisteestä, 30 R2N-CH-CONH-CH-CONH-CH-CONH-CH-CO(NH-R1-CO)n~NH-CH-COR7 «k>2 <Jh2 ch2 <ch2)4 COR3 COR4 SR5 NHR6 (II) 77875 β 2 6 jossa R ja R ovat amiiniryhmien suojaryhmiä tai vetyato- 3 4.7 ...
meja, R , R ja R ovat NH--ryhmia, suojattuja aminoryh- Δ 5 mia tai karboksyyliryhmiä tai OH-ryhmiä ja R on tioliryh-raän suojaryhmä, poistetaan suojaryhmät, edullisesti happo-5 hydrolyysillä, ja tuote muutetaan haluttaessa fysiologisesti hyväksyttäväksi suolaksi.
Läsnäolevat reaktiokykyiset ryhmät (amino, tioli ja/tai karboksyyli) suojataan kokonaissynteesin aikana ja viimeisenä vaiheena on siten suojauksen purkaminen suojalo tusta kaavan (I) mukaisesta johdannaisesta. Normaalisti kaikki -COOH-ryhmät, kaikki -Nl^-ryhmät, pyroglutamyyli-tähteen -NH-ryhmä ja kysteinyyli-tähteen -SH-ryhmä suojataan.
Tunnetaan laaja valikoima suojaryhmiä aminohappoja varten ja niistä ovat esittäneet esimerkkejä Schröder, 15 E. ja Lubke, K., The Peptides, niteet 1 ja 2, Academic Press, New York, Lontoo, 1965 ja 1966; Pettit, G.R.,
Synthetic Peptides, niteet 1-4, Van Nostrand, Reinhold,
New York 1970, 1971, 1975 ja 1976, Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemie, Synthese von Peptiden, nide 15, 20 Gerog Thiene Verlag, Stuttgart 1974; ja Amino Acids, Peptides and Proteins, niteet 4-8, The Chemical Society, Lontoo 1972, 1974, 1975 ja 1976.
Käyttökelpoisia amiinisuojaryhmiä ovat esim. kar-bobentsoksi-, (jota tämän jälkeen myös merkitään Z:lla) 25 trityyli, t-butoksikarbonyyli (jota tämän jälkeen merkitään myös Boc:llä) sekä asyyliryhmät, kuten esimerkiksi asetyyli-ryhmä tai formyyliryhmä.
Karboksyylisuojaryhmiä, joita voidaan käyttää, ovat esimerkiksi helposti lohkaistavat esteriryhmät, kuten bents-30 yyli (jota tämän jälkeen merkitään myös Bz:lla), p-nitro-bentsyyli- tai t-butyyliryhmät.
Tiolisuojaryhmiä ovat p-metoksibentsyyli- ja sulfo-etyyliryhmät.
On selvää, että on olemassa laaja alue muita tällai-35 siä ryhmiä, kuten esimerkiksi edellä mainituissa kirjaili- s 77875 suusviitteissä yksityiskohtaisesti esitetyt, ja kaikkien tällaisten ryhmien käyttö edellä kuvatuissa menetelmissä kuuluu tämän keksinnön piiriin.
Karboksyy]i-suojaryhmät voidaan liittää tavanomaisin 5 menetelmin, esim. reaktiolla sopivan esteröimisreagenssin, esimerkiksi alkoholin, kuten bentsyyli- tai p-nitrobentsyy-lialkoholin kanssa hapon, esim. p-tolueenisulfonihapon läsnäollessa .
Amiini-suojaryhmät voidaan liittää tavanomaisin mene-10 telmin, esim. reaktiolla sopivien happohalogenidien kuten karbobentsoksikloridin tai pivaloyylikloridin, tai happo-anhydridien, kuten etikkahapon anhydridin kanssa.
Tioli-suojaryhmät voidaan liittää reaktiolla sopivien S-eetteröimisaineiden, kuten p-metoksibentsyylikloridin tai 15 sulfoetyylibromidin kanssa.
Amiini- ja karboksyyli-suojaryhmien poistamiseksi on olemassa suuri joukko menetelmiä. Siten esimerkiksi amiini-suojaryhmä voidaan poistaa asidolyysillä, hydroge-nolyysillä, käsittelemällä laimealla ammoniumhydroksidilla, 20 käsittelemällä natriumilla, käsittelemällä natriumamidilla, käsittelemällä hydratsiinilla tai entsymaattisella hydrolyy-sillä, esimerkiksi leusiiniamino-peptidaasilla. Menetelmät, jotka ovat kiinnostavia, käsittävät myös käsittelyn vedettömällä bromivedyllä, esimerkiksi jääetikassa, käsit-25 telyn trifluorietikkahapolla, käsittelyn nestemäisellä fluorivedyllä ja katalyyttisen hydrauksen.
Karbobentsoksi- ja t-butoksikarbonyyliryhmät voidaan poistaa käyttäen esimerkiksi vedetöntä bromi-vetyä, sopivasti jääetikan läsnäollessa, tai käyttämällä 30 trifluorietikkahappoa. Asyyli-ryhmät voidaan poistaa esimerkiksi tavanomaisella hydrolyysillä hapon kanssa tai entsymaattisella hydrolyysillä kuten edellä selostettiin.
Karboksyyli-suojaryhmien poistaminen voidaan suorittaa esimerkiksi saippuoimalla, asidolyysillä, hydrogeno-35 lyysillä tai entsymaattisella hydrolyysillä. Siten, esimerkiksi, saippuoiminen voidaan toteuttaa alkalimetallihydrok- 10 77875 sidilla sopivasti veden, alkoholin ja/tai asetonin läsnäollessa. Asidolyysi voidaan toteuttaa esimerkiksi käyttämällä vedetöntä bromivetyä tai trifluorietikkahappoa ja hydrogenolyysi toteutetaan esimerkiksi katalyyttisellä 5 hydrauksella esim. käyttämällä palladium/hiiltä, sopivasti 10-%:sta palladium/hiiltä. Entsymaattinen hydrolyysi toteutetaan esimerkiksi käyttämällä leusiiniaminopepti-daasia. Bentsyyli- ja p-nitrobentsyyliryhmät voidaan poistaa esim. hydrogenolyysillä ja t-butyyliryhmät voidaan 10 poistaa esim. happohydrolyysillä.
Amiini-, hydroksyyli- ja karboksyylisuojarynmät voidaan poistaa esimerkiksi samanaikaisesti asidolyysillä, emäksisellä hydrolyysillä, hydrogenolyysillä, käsittelemällä natriumilla tai natriumamidilla tai entsymaattisella 15 hydrolyysillä. Tällaiset menetelmät käsittävät käsittelyn bromivedyllä, sopivasti jääetikan läsnäollessa, sekä käsittelyn alkoholilla, joka sopivasti sisältää liuotettuna kuivaa kloorivetyä.
Tioli-suojaryhmät, kuten p-metoksibentsyyliryhmät, 20 poistetaan käyttäen fluorivetyä alhaisessa lämpötilassa, esim. Q°C:ssa, edullisesti happoa poistavan aineen kuten merkaptoetanolin, kysteiinin tai metioniinin läsnäollessa. Tämä menetelmä pystyy poistamaan amino-, karboksyyli- ja tioli-suojaryhmät samanaikaisesti.
25 Eräs selektiivinen suojauksen purkumenetelmä on esimerkiksi katalyyttinen hydraus, sopivasti käyttäen esimerkiksi palladium/hiiltä katalyyttinä ja sopivasti liuottimen esim. veden, metanolin, dioksaanin, etikkahapon tai t-butanolin läsnäollessa. Tämä menetelmä poistaa, esi-30 merkiksi, karbobentsoksiryhmän, mutta jättää t-butoksikar-bonyyli- tai asyyliryhmän koskemattomaksi.
Yleensä kaavan (I) yhdisteiden suojattuja johdannaisia voidaan valmistaa menetelmien avulla, jotka ovat sopivia peptidisynteesiä varten. Voidaan lähteä C-terminaalises-35 ta päästä lysiinin sopivasti suojatun johdannaisen reaktiolla li 77875 kysteiinin sopivasti suojatun johdannaisen kanssa, kun n = 1, yhdisteen NI^R^COOH, kanssa. Lysiinijohdannaisessa on vapaa d-aminoryhmä, kun taas toisessa reagoivassa aineessa on joko vapaa tai aktivoitu karboksyyliryhmä ja 5 suojattu aminoryhmä. Kytkemisen jälkeen välituote puhdistetaan, esimerkiksi kromatografisesti, ja puretaan sitten N-suojaus selektiivisesti sallimaan uuden aminohappotähteen liittäminen. Tämä menettely toistetaan kunnes haluttu aminohapposekvenssi on täydellinen. N-suojauksen purkaminen ta-10 pahtuu normaalisti lievällä asidolyysillä; happoylimäärä neutraloidaan normaalisti ennen seuraavaa kytkentävaihet-ta, esim. käyttäen emästä kuten trietyyliamiinia.
Vaihtoehtoisesti on mahdollista lähteä N-päästä ja saattaa sopivasti suojattu g.1 utamiini- tai pyroglutamii-15 nihappojohdannainen, jossa edullisesti on aktivoitu karboksyyliryhmä, reagoimaan sopivasti suojatun glutamiiniha-pon johdannaisen tai glutamiinin kanssa. Kytkemisen jälkeen tuote voidaan puhdistaa esim. kromatografiällä ja purkaa suojaus pääte--karboksyyliryhmästä ja jos halutaan 20 aktivoida ennen seuraavaa kytkemisvaihetta. Tämä vaihesar-ja toistetaan, kunnes haluttu peptidi on täydellinen.
Karboksyylihappoa aktivoivia substituentteja, joita voidaan käyttää, ovat esimerkiksi seka-anhydridit, atsidit tai aktivoidut esterit, kuten esimerkiksi p-nitrofenyy]i-25 esteri, 2,4,5-trikloorifenyyliesteri, N-hydroksibentsotri-atsoliesteri tai N-hydroksisukkiini-imidyyliesteri.
Yleensä on edullista toteuttaa kytkemisreaktiot alhaisissa lämpötiloissa, esimerkiksi lämpötiloissa -20°C:sta ympäristön lämpötilaan, edullisesti sopivassa liuotinjär-30 jestelmässä, esimerkiksi tetrahydrofuraanissa, dioksaanis-sa, dimetyyliformamidissa, metyleenikloridissa tai näiden liuottimien seoksessa.
Vapaan amino-ry liman ja karboksyyli-ryhmän kytkeminen voidaan toteuttaa käyttäen esimerkiksi disykloheksyyli-35 karbodi-imidiä (DCC). Toinen kytkentäaine, jota voidaan käyttää on esimerkiksi N-etoksikarbonyyli-2-etoksi-l,2-di-hydrokinoliini.
12 77875
Sopivampaa saattaa olla toteuttaa synteesi kiinto-faasi-hartsikantajalla. Kloorimetyloitu polystyreeni (silloitettu 1 %:lla divinyylibentseeniä) on eräs käyttökelpoinen kantajatyyppi; tässä tapayksessa synteesi 5 alkaa C-päästä kytkemällä N-suojattu lysiini kantajaan.
2
Kun X :n on oltava NH2, on edullista käyttää hartsikanta-jaa, jossa on bentshydryyliamiiniryhmiä; nämä kytketään aluksi ]ysiinikarboksyyliryhmään ja lopullinen lohkaisu, esim. HF:lla, antaa halutun amidin.
10 Seuraavat esimerkit annetaan pelkästään valaise maan keksintöä.
Liuottimet tislattiin uudelleen kaupallisesta aineksesta ja varastoitiin seuraavalla tavalla: dimetyyli-formamidi (DMF) molekyyliseulal1 a 4A, dikloorimetaani (DCM) 15 CaCl2:lla, trietyyliamiini (TEA) Na/-Pb-lejeeringillä (Baker) ja trifluorietikkahappo (TFA) molekyy1iseulalla 4A.
Esimerkki 1 L-pyroglutamyyli-L-glutamyyli-L-aspartyyli-L-kyste- inyyli-L-lysiini: yhdiste (1) 20 0 -bentsyylioksikarbonyyli-lysiini-bentsyyliesteri- hydrokloridia (406 mg) liuotetaan 3 ml:aan DMF ja TEA lisätään kunnes vapaata TEA voidaan havaita höyrytaasissa kostutetulla palasella pH-indikaattoripaperia. Tähän liuokseen lisätään t-Boc-(S-p-metoksibentsyvli)-L-kysteiini-25 N-hydroksisukkiini-imidiesteriä (491 mg) liuotettuna 3 ml: aan DMF. Sopivin aikavälien lisätään TEA:n annoksia liuoksen lievän alkalisuuden ylläpitämiseksi. Seoksen annetaan seistä yli yön huoneen lämpötilassa ja negatiivisen nin-hydriini-reaktion tarkistamisen jälkeen se pannaan suo-30 raan 2,5 x 75 cm:n Sephadex® LH-20-pylvääseen, joka on tasapainotettu DMF:11a ja kalibroitu standardireaktanteilla (esim. annetussa esimerkissä t-Boc- ('l^bentsyyli)-L-glu-tamiinihappo-p-nitrofenyyliesterillä ja p-nitrofenolilla). Kolonnivirtaus ylläpidetään painovoimavirtauksel]a ja pois-35 tovirtausta tarkkaillaan 280 nm:ssa ennen kokoamista noin i 13 77875 10 ml:n jakeissa. Tuote voidaan tunnistaa jokaisen jakeen ohutlevykromatografiällä, jolloin vastaavat jakeet yhdistetään ja haihdutetaan tyhjössä; saanto: 700 mg (100 %) öljymäistä tuotetta, homogeeninen ohutlevykromatografiällä 5 (kloroformi/asetoni (9/])), = 0,64.
b. t-Boc-(/S-bentsyyli)-L-aspartyyli-(S-p-metoksi-bentsyyli)-L-kysteinyyli-(£ -bentsyylioksikarbo-nyyli)-L-lysiini-bentsyyliesteri (II) 700 mg suljettua ja suojattua dipeptidiä (I) liuo-10 tetaan 25 ml:aan vedetöntä DCM ja lisätään 25 ml vedetöntä TFA. 30 minuutin kuluttua happo ja liuotin poistetaan tyhjössä. Jäännös liuotetaan DCM:ään ja haihdutetaan uudelleen. Jäännöksen liuokseen DMFrssa (3 ml), joka on tehty lievästi emäksiseksi TEA:11a, lisätään t-Boc-(^8 -bentsyyli)-L-15 asparagiinihappo-p-nitrofenyyliesterin (488 mg) liuosta 3 ml:ssa DMF. Emäksisyys tulisi tarkistaa usein ja ylläpitää lisäämällä pieniä määriä TEA. Senjälkeen kun ninhydrii-nireaktio oli muuttunut negatiiviseksi (noin 2 tunnin kuluttua) reaktioseos pannaan SephadesP^ LH-20-pylvääseen 20 (2,5 x 75 cm) ja puhdistetaan kuten edellä selostettiin.
Saanto haihduttamisen jälkeen tyhjössä; noin 900 mg (100 %) kiteistä tuotetta, homogeeninen ohutlevykromatografiällä (kloroformi/asetoni (9/1)), = 0,70.
c. t-Boc-( ^-bentsyyli)-L-glutamyyli-(/&-bentsyy- 25 li)-L-aspartyyli-(S-p-metoksibentsyyli)-L-kyste- inyyli-(S-bentsyylioksikarbonyyli)-L-lysiinibent-syyliesteri (III) 900 mg:sta suljettua tripeptidi-johdannaista II puretaan sulku TFA:11a kuten edellä selostettiin, liuotetaan 30 3 ml:aan DMF ja tehdään lievästi emäksiseksi TEA:11a. Tähän liuokseen lisätään 504 mg t-Boc-O^-bentsyyli)-L-glutamiini-happo-p-nitrofenyyliesteriä (3 ml:ssa DMF). Noin 2,5 tunnin kuluttua ninhydriini-reaktio on tullut negatiiviseksi ja (S) seos pannaan Sephadex^ LH-20-pylvääseen puhdistamista var- 1 ten kuten edellä selostettiin. Komponenttien erottaminen 14 77875 tästä reaktioseoksesta ja sen tarkkaileminen ohutlevy-kromatografiällä suoritetaan kuten edellä. Sopivat jakeet (tässä tapauksessa 9-15) yhdistetään, haihdutetaan ja kuivataan. Saanto: noin 1140 mg (100 %) vaaleankeller-5 tävää öljyä, homogeeninen onutlevykromatografiällä (kloroformi/asetoni (9/1)), = 0,53.
d. Bentsyylioksikarbonyyli-L-pyriglutamyyli-( Ϋ'-bentsyyli)-L-glutamyyli-(β -bentsyyli)-L-aspart-yyli-(S-p-metoksibentsyyli)-L-kysteinyyli-(£ - 10 bentsyyli-oksikarbonyyli)-L-lysiini-bentsyyli- esteri (IV) 1140 mg:sta tetrapeptidi-johdannaista III puretaan sulku TFA:11a DCM:ssä kuten I:lle kuvattiin ja liuotetaan 3 m):aan DMF. Liuos tehdään lievästi emäksiseksi TEA:11a 15 ja lisätään 423 mg bentsyylioksikarbonyyli-L-pyroglutamii-nihappo-p-nitrofenyyliesteriä liuoksena 3 ml:ssa DMF. Reaktioseoksen emäksisyys tulisi toistuvasti tarkistaa ja jos on tarpeen palauttaa ennalleen lisäämällä TEA. Noin 3 tunnin jälkeen ninhydriini-testi tulee negatiiviseksi 20 ja pentapeptidi-johdannainen IV voidaan puhdistaa kuten edellä selostettiin. Saanto noin 1230 mg (96 %), vaalean-kellertävä öljy, homogeeninen ohutlevykromatografiällä (kloroformi/asetoni (9/11)), R^ = 0,44 (muodostaen häntiä).
e. L-pyroglutamyyli-L-glutamyyli-L-aspartyyli-L- 25 kysteinyyli-L-lysiini 50 mg suojattua pentapeptidi-johdannaista IV liuotetaan 50 ml:aan nestemäistä fluorivetyä 0°C:ssa lisäten 500 mg metioniinia happoa poistavaksi aineeksi ja annetaan seistä yksi tunti. Fluorivety haihdutetaan sitten 30 tyhjössä kuiviin 0°C:ssa ja jäännöstä sekoitetaan etyyliasetaatin kanssa. Etyyliasetaatti-pesuneste dekantoidaan ja hylätään. Jäljelle jäänyt aines liuotetaan laimeaan etik-kahappoon ja lyofiloidaan.
Lyofiloitu aines (2 mg) voidaan puhdistaa käänteis-35 faasi-HPLC: .1 la käyttäen Cl8-py.lvästä .10 mm x 10 cm virtaus- 15 77875 nopeudella 2,8 ml/min käyttäen gradienttieluointia liuoksella A: 0,1 % vesipitoista trifluorietikkahappoa, ja liuoksella 3: 0,1 % trifluorietikkahappoa asetonitrii-lissä; jolloin 0,10 % liuosta B lisätään 30 minuutin ai-5 kana. Detektio suoritetaan käyttäen ultraviolettiab-sorptiota 214 nmrssä tai pyridiinidisulfidi-reagenssia (SH-ryhmiä varten) .
Samaa menetelmää voidaan käyttää edellä mainittujen yhdisteiden (2)-(5) valmistamiseksi. Synteesit on seu-10 raavassa esitetty kaavamaisessa muodossa ja tuotteiden tunnusluvut on annettu taulukossa. Käytetään seuraavia lyhennyksiä:
Boc = t-butoksikarbonyyli
Bz = bentsyyli 15 Z = bentsyylioksikarbonyyli (karbobentsoksi) pMB = p-metoksibentsyyli
Su = N-hydroksisukkinimyyli pNP = p-nitrofenyyli 16
Yhdiste 1 77875 pGlu Glu Asp Cys Lys
SpMB Z
Boc- OSu H— i-OBz
^SpMB Z
Boc— ^ UOBz
OBz ^SpMB Z
Boc — «^-OpNP h- --OBz
• OBz ^SpMB Z
Boc-— 4. —OBz
., OBz OBz .SpMB JL
Boc-^—-OpNP H — ^-^CBz
.· OBz OBZ ✓SpMB ,Z
Boc- — — " ·-—— ......... '—' —OBz
✓OBz .OBz SpMB .Z
Z--OpNB H*-----—OBz
✓ OBz -OBz SpMB -Z
Z--- —OBz H --:---Loh
Yhdiste 2 pGlu Glu Asp Cys Gly Lys I Lz
Boc--OH H - - OB z
>Z
Boc— ————— * OBz
SpMB Z
Boc-^OSu H— ^OBz
SpMB Z
BOC-·^ — - 1 ^OBz
OBz SpMB Z
Boc-^OpNP H ^- — - OBz
jOBz SpMB Z
Boc- —" -r .......... ............ — fcQBz
OBz OBz SpMB Z
Boc-^OpNP H— -—--.......— ^OB /.
OBz OBz SpMB Z
Boc — .................... .......- — t-OBz
.OBz OBz SpMB Z
Z OpNP H- -^-—- ----------—- -OB7.
OBz OBz SpMB Z
z__--^^--Crn-r.
H ---- ' OH
17 )
Yhdiste 3 77875 pGlu Gin Asp Cys Lys f
s SpMB Z
BOC— OSU H--OBz
SpMB Z
Boc — — —OB?.
OBz SpMB Z
Boc—^OpNP H - ^ i^OBz
OBz SpMB Z
Boc — ^-·· ...... << ^OBz
OBz SpMB Z
Boc— — OpNP H- ‘ 03z
OBz SpMB Z
BOC- -............ ^....... — r ^OBZ
OBz SpMB Z
Z--OpNP H·* —............— ^........... ..... ^OBz
- OBz SpMB Z
Z- - ............... ......... ii. ^..... ........ 1^··,.—^OBz
H—li n .1-....1 I ,.-.-.,,..,.1,. . . ...... I. OH
Yhdiste 4 pGlu Glu Asp Cys D-Ala Lys V7 BOC--OH H-^OBz
Boc— ——i ^OB z
SpMB Z
BOC- ^OSu H.............— * OBz
SpMB Z
Boc - f i — OBz
OBz SpMB Z
Boc-^OpNP H— .................... ............— ^OBz OBz SpMB .1
Boc- ^-S ---------— ' - OBz
OBz OBZ SpMB Z
Boc-^ OpNP H-^'...................f ............ m . £ OBz
OBz OBz SpMB Z
Boc- <m x................ ^ ► OBz OBz OBz SpMB 7> Z--OpNP H- .— rfT................................................. ............—OBz
OBZ OBZ SpMB Z
Z--£-ii-- ----, έOB z n· ,1 ..... ......—......-1.-. . ....... ....... .........L— o; i
Yhdiste 5 18
V
77875 pGlu Glu Asp Cys Lys
SpMB Z
Boc— " OSu H- - NH2
SpMB Z
Boc- ......— ^NH2
OBz SpMB Z
Boc — ^pNP H — ’ ..........'^NH2
OBz SpMB Z
Boc Y ....... Y . - Ynh2
OBz OBz SpMB Z
Boc-^OpNP —— ^ ' ' ' »NH2
OBz OBz SpMB Z
Boc - S' - -r — — —NH2
.OBz OBz SpMB Z
Z — OpNP H- -----------S ...............- ^NH2
OBz OBz SpMB Z
Z— ...... ............... ......... Γ*** ........ faNHp H—». .......... JL ...........i. — M i-tflL' 77875 19 m ^ o r-~ oo o o
^ --H M O 00 00 O
• · I · · I · . o
Q) OO *H *H O *H i-H
4J II II
CO U-l U-l r.
^ os k « (Noo <-h o n· σ\ σν m oio o o σ\ oo o · · · · · · l · · co
OO ιΗ H Μ O ,Η rH
(U » Il +> VW Ph
CO oi « CP
3 rq moo o Γ' o oo oo *“I O O 00 (Ti o · 0) · * I · · I · · 00 P o O r—I <—I o o
w II II
3 VW U-l Ph
2 Ä « S
o 00 OrHooocn p- -ho o σ\ o en o O) · l..... vo
U OO »H i—I O O »H rH
w II II
O VW UH Ph
g « « S
Ή l~* O 00 CO ^3* p~ 1-1 (NO o o o o . 2
m · · l · · l m U
n OO rH rH OH M O
07 ' Il II CC
£) Ή Ή Ph O
21 « « S dP
Si
CM
S’ ^ ··
f ST I
h 1 i I s, :s
8 § » f I
§ y ä δ
& ^ -h s «n e »S
S s S % e ^ $ 5 •P C M H -3 ro ij e-HPEcQOoo h -h " ·· :d ·· Q E *3· ε m <#> cno M S Q *] 'ri ,Λ ‘3 rH CO rH rH >, >, r-n K1 N ·· 2 # £ Ώ Jg C < U O U O «U .. 5 E o P J ^ h (Vvn Π oo n O m oo Joooo r-. — ArHCJrH«»*«r£,Hn P £ K O Q &< < CQ <j
Claims (2)
1. Menetelmä kaavan (I) mukaisten terapeuttisesti käyttökelpoisten peptidien ja niiden fysiologisesti hyväk- 5 syttävien suolojen valmistamiseksi, HN-CH-CONH-CH-CONH-CH-CONH-CH-CO(NH-R^CO)nNHCH-COX2 0<«fH2>2 | 2 ™2 <Ϊη2) 4 COX1 COOH SH NHp 10 (I) jossa NH-R1-CO on glysiini tai D-alaniini ja kaikki muut 1 7 aminohappotähteet ovat L-muodossa, X ja X , jotka voivat olla samanlaisia tai erilaisia, ovat OH- tai NH2~ 15 ryhmiä ja n on 0 tai 1, tunnettu siitä, että kaavan (II) mukaisesta suojatusta yhdisteestä, r2N—CH-CONH-CH-CONH-CH-CONH-CH-CO (NH-R1-CO) -NH--CH-COR7 Il 1 I I v (ch2)2 ch2 ch2 (ch2)4
20 COR3 COR4 SR5 NHR6 (II) 7 fi jossa R ja R” ovat amiiniryhmien suojaryhmiä tai vetyatomeja, R3, R4 ja R7 ovat N!I2-ryhmiä, suojattuja aminoryh-23 miä tai karboksyylisuojaryhmiä tai ΟΗ-ryhmiä ja R^ on tioliryhmän suojaryhmä, poistetaan suojaryhmät, edullisesti happohydrolyysillä, ja tuote muutetaan haluttaessa fysiologisesti hyväksyttäväksi suolaksi.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, t u n-30 n e t t u siitä, että valmistetaan kaavan (I) mukainen yh- 2 diste, jossa X ja X ovat ΟΗ-ryhmiä ja n on 0 ja joka on L-pyroglutamyyli-L-glutamyyli-L-aspartyyli-L-kysteinyyli-L-lysiini.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB8233837 | 1982-11-26 | ||
| GB8233837 | 1982-11-26 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI834320A0 FI834320A0 (fi) | 1983-11-24 |
| FI834320L FI834320L (fi) | 1984-05-27 |
| FI77875B FI77875B (fi) | 1989-01-31 |
| FI77875C true FI77875C (fi) | 1989-05-10 |
Family
ID=10534566
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI834320A FI77875C (fi) | 1982-11-26 | 1983-11-24 | Foerfarande foer framstaellning av nya terapeutiskt anvaendbara peptider. |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4499081A (fi) |
| EP (1) | EP0112656B1 (fi) |
| JP (1) | JPS59112953A (fi) |
| AT (1) | ATE50693T1 (fi) |
| AU (1) | AU559914B2 (fi) |
| CA (1) | CA1236786A (fi) |
| DE (1) | DE3381282D1 (fi) |
| DK (1) | DK166392C (fi) |
| ES (1) | ES8602034A1 (fi) |
| FI (1) | FI77875C (fi) |
| IE (1) | IE56362B1 (fi) |
| NO (1) | NO157935C (fi) |
| NZ (1) | NZ206401A (fi) |
| ZA (1) | ZA838780B (fi) |
Families Citing this family (26)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4575495A (en) * | 1983-05-12 | 1986-03-11 | New York Blood Center, Inc. | Synthetic antigenic peptide derived from Hepatitis B surface antigen |
| US4578217A (en) * | 1983-05-12 | 1986-03-25 | New York Blood Center, Inc. | Synthetic antigenic peptide derived from hepatitis B surface antigen |
| IT1164225B (it) * | 1983-05-13 | 1987-04-08 | Anic Spa | Analoghi retro-invertiti del pentapeptide potenziante la bradichina bpp5a e metodi per la loro preparazione |
| FR2551088B1 (fi) * | 1983-08-29 | 1985-12-06 | Pasteur Institut | |
| NO860752L (no) * | 1985-06-26 | 1986-12-29 | Bio Tech As | Pentapeptider med cellevekstregulerende virkning og fremgangsmaate for fremstilling derav. |
| GB8626539D0 (en) * | 1986-11-06 | 1986-12-10 | Nycomed As | Peptide compounds |
| GB8821785D0 (en) * | 1988-09-16 | 1988-10-19 | Nycomed As | Peptide compounds |
| US5620957A (en) * | 1989-07-14 | 1997-04-15 | Smithkline Beecham Corporation | Hemoregulatory peptides |
| HU206374B (en) * | 1990-09-03 | 1992-10-28 | Richter Gedeon Vegyeszet | Process for producing pentapeptide and its salts specifically inhibiting proliferation of epidermic cells, as well as pharmaceutical compositions comprising same as active ingredient |
| TW222280B (fi) * | 1991-11-26 | 1994-04-11 | Smithkline Beecham Corp | |
| IL104323A0 (en) * | 1992-01-10 | 1993-05-13 | Smithkline Beecham Corp | Hemoregulatory peptides |
| GB9211677D0 (en) | 1992-06-02 | 1992-07-15 | Nycomed Bioreg As | Peptide compounds |
| GB9211674D0 (en) | 1992-06-02 | 1992-07-15 | Nycomed Bioreg As | Peptide compounds |
| GB9211668D0 (en) | 1992-06-02 | 1992-07-15 | Nycomed Bioreg As | Peptide compounds |
| GR1001502B (el) * | 1992-11-26 | 1994-02-28 | Smithkline Beecham Corp | Αιμορυ?μιστικά πεπτίδια. |
| CN1034735C (zh) * | 1993-01-02 | 1997-04-30 | 史密丝克莱恩比彻姆公司 | 血调节肽 |
| WO1994028013A1 (en) * | 1993-05-20 | 1994-12-08 | Research Corporation Technologies, Inc. | Peptides for suppression of myeloid progenitor cell proliferation and treatment of septic shock |
| EP0725651B1 (en) * | 1993-10-29 | 1999-08-11 | Smithkline Beecham Corporation | Hemoregulatory peptides |
| EP0861255A4 (en) * | 1995-11-03 | 2000-06-28 | Smithkline Beecham Corp | HEMOREGULATORY CONNECTIONS |
| DE69619123D1 (de) * | 1995-11-13 | 2002-03-21 | Smithkline Beecham Corp | Hämoregulatorische verbindungen |
| JP2000501385A (ja) * | 1995-11-13 | 2000-02-08 | スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション | 血液調節化合物 |
| US6054465A (en) * | 1995-11-13 | 2000-04-25 | Smithkline Beecham Corporation | Hemoregulatory compounds |
| EP0861254A4 (en) * | 1995-11-13 | 2000-06-28 | Smithkline Beecham Corp | HEMATOREGULATORS |
| WO1997017985A1 (en) * | 1995-11-13 | 1997-05-22 | Smithkline Beecham Corporation | Hemoregulatory compounds |
| WO1997017958A1 (en) * | 1995-11-13 | 1997-05-22 | Smithkline Beecham Corporation | Hemoregulatory compounds |
| CA2406532A1 (en) * | 2000-04-19 | 2001-11-01 | Schering Corporation | Macrocyclic ns-3 serine protease inhibitors of hepatitis c virus compri sing alkyl and aryl alanine p2 moieties |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3792032A (en) * | 1970-07-31 | 1974-02-12 | Farmaceutical Soc | Polypeptides related to the c-terminal heptapeptide of bombesin and alytesin |
| US4411890A (en) * | 1981-04-14 | 1983-10-25 | Beckman Instruments, Inc. | Synthetic peptides having pituitary growth hormone releasing activity |
| US3928306A (en) * | 1973-10-23 | 1975-12-23 | Eisai Co Ltd | Peptides having xenopsin-like pharmacological activity |
| US4235772A (en) * | 1978-06-21 | 1980-11-25 | Ab Kabi | Novel peptides having growth promoting activity |
| FR2465486A1 (fr) * | 1979-09-21 | 1981-03-27 | Roussel Uclaf | Nouvelle application utilisant la lh-rh ou des agonistes |
| FR2491922A1 (fr) * | 1980-10-14 | 1982-04-16 | Roussel Uclaf | Nouveaux hexapeptides, procede pour leur preparation et application comme medicaments |
-
1983
- 1983-11-24 ZA ZA838780A patent/ZA838780B/xx unknown
- 1983-11-24 FI FI834320A patent/FI77875C/fi not_active IP Right Cessation
- 1983-11-25 NO NO834340A patent/NO157935C/no unknown
- 1983-11-25 EP EP83307210A patent/EP0112656B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1983-11-25 ES ES527542A patent/ES8602034A1/es not_active Expired
- 1983-11-25 JP JP58220820A patent/JPS59112953A/ja active Granted
- 1983-11-25 DE DE8383307210T patent/DE3381282D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1983-11-25 AU AU21697/83A patent/AU559914B2/en not_active Ceased
- 1983-11-25 DK DK539483A patent/DK166392C/da not_active IP Right Cessation
- 1983-11-25 IE IE2764/83A patent/IE56362B1/en not_active IP Right Cessation
- 1983-11-25 NZ NZ206401A patent/NZ206401A/en unknown
- 1983-11-25 AT AT83307210T patent/ATE50693T1/de active
- 1983-11-28 US US06/555,840 patent/US4499081A/en not_active Expired - Lifetime
- 1983-11-28 CA CA000442085A patent/CA1236786A/en not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| IE56362B1 (en) | 1991-07-03 |
| AU559914B2 (en) | 1987-03-26 |
| US4499081A (en) | 1985-02-12 |
| NO834340L (no) | 1984-05-28 |
| AU2169783A (en) | 1984-05-31 |
| DK166392B (da) | 1993-05-10 |
| EP0112656B1 (en) | 1990-03-07 |
| DK166392C (da) | 1993-09-27 |
| NO157935C (no) | 1988-06-15 |
| FI834320A0 (fi) | 1983-11-24 |
| DK539483D0 (da) | 1983-11-25 |
| ES527542A0 (es) | 1985-11-01 |
| ES8602034A1 (es) | 1985-11-01 |
| IE832764L (en) | 1984-05-26 |
| NO157935B (no) | 1988-03-07 |
| EP0112656A3 (en) | 1985-08-21 |
| EP0112656A2 (en) | 1984-07-04 |
| NZ206401A (en) | 1986-11-12 |
| ATE50693T1 (de) | 1990-03-15 |
| DE3381282D1 (de) | 1990-04-12 |
| DK539483A (da) | 1984-05-27 |
| FI834320L (fi) | 1984-05-27 |
| FI77875B (fi) | 1989-01-31 |
| CA1236786A (en) | 1988-05-17 |
| JPH0364514B2 (fi) | 1991-10-07 |
| JPS59112953A (ja) | 1984-06-29 |
| ZA838780B (en) | 1985-01-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI77875B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av nya terapeutiskt anvaendbara peptider. | |
| US4261886A (en) | Peptides having thymopoietin-like activity | |
| PT93245B (pt) | Processo para a preparacao de novos derivados de glicina e de composicoes farmaceuticas que os contem | |
| RU2079509C1 (ru) | Производные пептидов, обладающие способностью регулировать пролиферацию клеток, и способы ингибирования клеточной пролиферации человека и животного (варианты) | |
| FI92209B (fi) | Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten peptidiyhdisteiden valmistamiseksi | |
| US4438029A (en) | Synthetic peptides | |
| US4371466A (en) | Mammalian collagenase inhibitors | |
| US3856770A (en) | Psychopharmacologically active tetra-, penta-, hexa-, and heptapeptides | |
| HU199879B (en) | Process for producing hexapeptides and pharmaceutical compositions comprising same as active ingredient | |
| IE49755B1 (en) | Peptides having thymopoietin-like activity,therapeutic compositions containing them,and process for their preparation | |
| AU721261B2 (en) | Peptide inhibitors of hematopoietic cell proliferation | |
| Thierry et al. | Synthesis and activity of NAcSerAspLysPro analogs on cellular interactions between T-cell and erythrocytes in rosette formation | |
| JPH0390098A (ja) | 薬理学的活性ペプチドおよびそれを含有する製薬的製剤 | |
| US3883498A (en) | {8 Ile{hu 3{b , Leu{hu 4{b {9 -vasopressin analogs | |
| Wakamiya et al. | Design and Synthesis of Peptides Passing through the Blood-Brain Barrier. | |
| JPS6365680B2 (fi) | ||
| US4271152A (en) | Psycho-pharmacological peptides | |
| YAJIMA et al. | Studies on peptides. LXVIII. Synthesis of the tritriacontapeptide amide corresponding to the entire amino acid sequence of the desulfated form of porcine cholecystokinin-pancreozymin (CCK-PZ) | |
| US3793304A (en) | Cyclic decapeptides comprising an l-tyrosine radical | |
| SK136596A3 (en) | New opioid peptide analogs with mixed mu agonist/delta antagonist properties | |
| DK144563B (da) | Analogifremgangsmaade til fremstilling af do eller tritriacontapeptider eller -peptidderiveter eller syreadditionssalte eller zinkcomplexer deraf | |
| FEHRENTZ et al. | Solution synthesis of antigenic and inhibiting peptides of the human renin prosegment‐1: [Tyr 47, Nle 53] preprorenin‐(47–60) peptide methyl ester | |
| Hsieh | The role of the aromatic residues in angiotensin II | |
| GB1568195A (en) | Synthetc peptides | |
| JPH02157229A (ja) | 免疫抑制剤 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: NYEGAARD & CO A/S |