FI59415C - Foerfarande foer framstaellning av cefalexin - Google Patents

Description

F5Br*l M /id^UULUTUSJULKÄISU ςο WA IJ UTLÄGGNI NGSSKRIFT 0^415 C (45) Patentti myönn? tty JO 03 1031 ^ T ^ (51) Kv.ik.3/Int.ci.3 C 07 D 501/22, 501/10 SUOMI—FINLAND £1) Patanttlhakumut — Patantanseknlng 792793 (22) HakamUptlvl — Anaeknlngadag 07*09.79 (23) Alkuptlvi—Glltlghaadag 13.07.71 (41) Tullut julklttkil — Bllvlt offantllg 07.09.79 '“•"“-j* r«ki«t«Hhallttu. M NfcMWr». 1.1-M—« r».-

Patent· och r*fl>t«rftyr«laan 7 Anaökan utlagd och utl.akrlften publfcerad 30.0U. Si (32)(33)(31) Pretty atuoikaua—Bagird prlorlt« 05.10.70 USA(US) 78165 (71) Bristol-Nfyers Company, 3^5 Park Avenue, New York, N.Y., USA(US) (72) William Joseph Gottstein, Fayetteville, New York, Lee Cannon Cheney, Fayetteville, New York, USA(US) (7M 0y Kolster Ah (5M Menetelmä kefaleksiinin valmistamiseksi - Förfarande för framställning av cefalexin (62) Jakamalla erotettu hakemuksesta 1993/71 (patentti 5Ö133) -Avdelad frän ansökan 1993/71 (patent 58133)

Keksinnön kohteena on uusi menetelmä kefaleksiinin valmistamiseksi, jonka kaava on

Γ\ ? -S

y-CH - C - NH-f ^ I

— NH2 o J-CH3

COOH

tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan valmistamiseksi.

Keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnusomaista, että A) kaavan III mukaisen yhdisteen 2 59415 rv 11 \_/ ?" ~~ cx = /CV m --- I /"-j-f ] Cfl3

11 ~H J·--W--COOH

I CH3 ° cn3 3-iminoryhmä suojataan nitrosoimalla tai formyloimalla välituotteen muodostamiseksi, jonka kaava on / 0 \ / CH -C CH,

\- / I \ . / 3 IV

I > —f— V—ci|3 Z-N - C 1

|\ /-N - COOH

I CH 0 CH3 jossa Z on nitroso tai formyyli, B) mainittu välituote tai sen suola hapetetaan natrium-metaperjodaatilla pH-arvossa alle 5, jolloin muodostuu sulfoksidi, jonka kaava on

(J x)- CII-C | / 3 V

\=T-/ | N- z-N-c' I ·

I ^ CU j---N-— COOH

I J o/

CU

tai sen suola, C) saatua sulfoksidi-välituotetta kuumennetaan etikkahappo- 3 59415 anhydridissä tai tetrametyyliureassa happokatalyytin läsnäollessa, jona on p-tolueenisulfonihappo tai etikkahappoanhydridi, lämpötilassa noin 120-140°C noin 30-120 minuutin ajan kefalosporiini-välituotteen saamiseksi, jonka kaava on (r\ | VI1 Z-N -Ct , ^ ,-C„3 ^

COOH

jossa Z merkitsee samaa kuin edellä ja D) lohkaistaan imino-suojaryhmä hydrolyysillä tuotteen muodostamiseksi, jolla on kaava _ “V / 0^—' ^ c

ch3 ch3 COOH

ja E) hydrolysoidaan saatu kaavan II mukainen hetakefaleksiini kefaleksiiniksi, jonka kaava on «H — C — MH —T--Y" >

^ -----CH3 X

COOH

4 59415 tai sen ei-myrkyllisen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan muodostamiseksi .

Lopputuote, kefaleksiini, eli 7- (O/ -aminofenyyliasetamido)- 3- metyyli-3-kefeemi-4-karboksyylihappo, on tunnettu antibakteerinen aine. Se voidaan myös valmistaa 7-desasetoksikefalosporaanihaposta (7-ADCA), ja se on kuvattu esimerkiksi julkaisussa J. Med. Chem., 12, 310-313 (1969), GB-patentissa 1 174 335, ZA-patentissa 67/1260 (Farmdoc 28,654), JA-patentissa 16871/66 (Farmdoc 23231), BE-paten-tissa 696 026 (Farmdoc 29494) .

Välituote hetakefaleksiini eli 7-(2,2-dimetyyli-5-okso- 4- fenyyli-l-imidatsolidinyyli)-3-metyyli-3-kefeemi-4-karboksyyli-happo on uusi yhdiste.

Hetakefaleksiinin fysikaaliset ominaisuudet on esitetty esimerkissä 3.

Penisilliinisulfoksidiesterin muuttaminen (kuumentamalla voimakkaan hapon läsnäollessa) 7-ADCA:n vastaavasti N-asyloidun johdannaisen vastaavaksi esteriksi on kuvattu USA-patentissa 3 275 626 ja julkaisuissa J. Amer. Chem. Soc., 85, 1896 (1963) ja 91(6), 1401-1407 (1969). Muunnelmia tästä menetelmästä on esitetty NL-patentti-julkaisuissa 68/06532 (Farmdoc 34,685) ja 68/06533 (Farmdoc 34,686). Sellaisissa patenteissa sivuketju on tavallisesti käymiskykyisen penisilliinin, kuten penisilliinin G tai V sivuketju (katso saraketta 7 US-patentissa 3 275 626), ja tuote on esteri, joka on lohkaistava esim. hydrauksella 7-ADCA:n lopullisen johdannaisen aktiivisen vapaan hapon muodostamiseksi. GB-patentin 1 174 335 esimerkki 3 kuvaa tämän "sulfoksidi-uudelleenryhmittämisen" soveltamista ampi-silliinisulfoksidin esteriin, jossa ©C-amino-ryhmä on myös suojattu, so. 6-/N- (2,2,2-trikloorietyylikarbonyyli-D- -amino- P^-fenyy-liasetamido/-penisillaanihapposulfoksidi-2,2,2-trikloorietyylieste-riin kuumentamalla ja sen jälkeen käyttämällä sinkkiä ja etikka-happoa kahden suojaryhmän poistamiseksi ja kefaleksiinin muodostamiseksi .

Tekniikan taso käsittää lukuisia muita penisilliinisulfoksi-dien ja niiden valmistuksien kuvauksia , kuten esimerkiksi on kuvattu julkaisuissa Chow et ai., J. Org. Chem, 27, 1381 (1962), Gud-dal et ai.. Tetrahedron Letters No. 9, 381 (1962), Essery et ai., J. Org. Chem., 30, 4388 (1965), joihin myös sisältyy ampisilliini- 5 59415 sulfoksidi, ja US-patentissa 3 197 466.

Asetonin reaktiotuote kefaloglysiinin, mutta ei kefaleksii-nin kanssa on kuvattu US-patentissa 3 303 193. Tiettyjen rengas-substituoitujen kefaleksiinien reaktio asetonin kanssa on kuvattu yleisenä US-patenteissa 3 489 750, 3 489 751 ja 3 489 752.

Myrkyttömät farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat käsittävät esimerkiksi (1) happamen karboksyylihapporyhmän farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat, kuten natrium-, kalium-, kalsium-, aluminium- ja ammoniumsuolat ja ei-myrkylliset substituoidut ammonium-suolat amiinien, kuten tri(alempi)-alkyyliamiinien, prokaiinin, di-bentsyyliamiinin, N-bentsyyli-beta-fenyyliamiinin, 1-efeeniamiinin, N,N'-dibentsyylietyleenidiamiinin, dehydroabietyyliamiinin, N,N'-bis-dehydroabietyylietyleenidiamiinin, N-(alempi)alkyylipiperidii-nien, kuten N-etyylipiperidiinin ja muiden amiinien kanssa, joita käytetään bentsyylipenisilliinien suolojen muodostamiseksi; ja (2) ei-myrkylliset farmaseuttisesti hyväksyttävät happoadditiosuo-lat (esim. emäksisen typen suolat) kuten (a) mineraalihappoadditio-suolat, kuten hydrokloridi-, hydrobromidi-, hydrojodidi-, sulfaatti-, sulfamaatti, sulfonaatti-, fosfaatti- jne. suolat ja (b) orgaanisen hapon additiosuolat, kuten maleaatti-, sitraatti-, tartraat-ti-, oksalaatti-, sukkinaatti-, bentsoaatti-, fumaraatti-, malaat-ti-, mandelaatti-, askorbaatti-, /0 -naftaleenisulfonaatti-, p-to- lueenisulfonaatti- ja sen kaltaiset suolat. Kefaleksiini voi myös esiintyä vapaana happona, joka luonnollisesti esiintyy amfoteeri-sena ionina.

Reaktiovaiheessa (A) hetasilliini-lähtöaineen 3-iminoryhmä suojataan suorittamalla nitrosoiminen tai formyloiminen.

Edullinen nitrosoimismenetelmä käsittää hetasilliinin vesisuspension tekemisen happameksi pH-arvoon noin 2 kloorivetyhapolla tai laimealla fosforihapolla siihen saakka kunnes muodostuu liuos, jäähdyttämällä liuos noin 10°C:seen ja sen jälkeen lisäämällä natrium-nitriittiä pienissä erissä samalla sekoittaen N-nitroso-hetasillii-nin muodostamiseksi. N-formyylihetasilliini voidaan valmistaa esim. antamalla muurahaishapon ja hetasilliinin reagoida keskenään.

Imino-suojattu hetasilliini tai sen suola hapetetaan tunnetulla menetelmällä, esim. käyttäen menetelmää, jonka Chow, Hall ja Hoover julkaisussa J. Org. Chem., 27, 1381 (1962) 6 59415 vastaavan sulfoksidin V:n muodostamiseksi. Hetasilliinin annetaan reagoida hapetusaineen kanssa sellaisessa määrässä että ainakin yksi aktiivisen hapen atomi on läsnä yhtä atomia kohti tiatsolidiini-rikkiä. Sopiva hapetusaine on natriummetaperjodaatti. Parhaat tulokset saadaan käytettäessä natriummetaperjodaattia hapetusaineena pH-arvossa alle 5. Reaktioseosta pidetään pH-arvossa alle 5, jotta estettäisiin tai tehtäisiin mahdollisimman pieneksi C-6-epimerisoi-tuminen.

Vaiheessa (B) saatu sulfoksidi-välituote muutetaan vastaavaksi kefaloksiporiini-välituotteeksi kuumentamalla korotettuun lämpötilaan happokatalyytin läsnäollessa. Käytettyjä happokatalyyt-tejä ovat p-tolueenisulfonihappo ja etikkahappoanhydridi.

Mitä tahansa orgaanista nestettä voidaan käyttää reaktiovä-liaineena uudelleenryhmittämistä varten edellytettynä että se on olennaisesti inerti muihin reaktiokomponentteihin nähden käytetyissä olosuhteissa. Edullisia liuottimia ovat etikkahappoanhydridi ja tetrametyyliurea ja kaikkein edullisin on tetrametyyliurea. Reak-tiolämpötilan on oltava alueella noin 100-140°C, edullisesti noin 120-140°C. Reaktioaika pidetään niin lyhyenä kuin mahdollista ei-haluttujen sivutuotteiden muodostumisen estämiseksi. Parhaat tulokset saadaan silloin kun reaktio suoritetaan 30 minuutista noin 120 minuuttiin välisenä aikana.

Nitroso- tai formyyli-suojaryhmä poistetaan sen jälkeen happa-mella hydrolyysillä, esim. käyttäen kuivaa HC1 dioksaanissa, katalyyttisellä hydrauksella, esim. käyttäen ja Raney-nikkeliä tai pelkistämällä sinkki etikkahapolla hetakefaleksiinin (II) saamiseksi. Hetakefaleksiini muutetaan kefaleksiiniksi joko happamella tai emäksisellä hydrolyysillä. Haluttaessa saada hetakefaleksiini on kaikkein edullisin lohkaisumenetelmä kuivan HCl:n käyttäminen, esim. käyttäen HC1 dioksaanissa, jotta voitaisiin saada hydrolyysi kefaleksiiniksi mahdollisimman pieneksi.

Edellä on kuvattu parannettu menetelmä arvokkaan tunnetun antibakteerisen aineen kefaleksiinin valmistamiseksi. Kuvattu menetelmä on taloudellisesti hyvin käyttökelpoinen menetelmä kefaleksiinin valmistamiseksi ja siinä vältetään useat tunnettujen menetelmien probleemat.

7 59415

Seuraavat esimerkit kuvaavat esillä olevaa keksintöä. Kaikki lämpötilat on ilmoitettu Celsiusasteina. "Skellysolve B" on petroolieetterifraktio, jonka kiehumapiste on 60-68°C ja joka sisältää olennaisesti n-heksaania.

Esimerkki 1 6-(D-2,2-dimetyyli-3-nitroso-5-okso-4-fenyyli-l-imidatso-lidinyyli)-penisillaanihappo (N-nitrosohetasilliini) Suspensioon, jossa on 7,1 g (0,02 moolia) hetasilliiniä 350 mlrssa vettä, lisätään huoneen lämpötilassa 6N kloorivetyhappoa pisaroittain siihen saakka kunnes kaikki hetasilliini on liuennut. Liuos jäähdytetään jäähauteella 10°C:ssa ja päälle kaadetaan 100 ml etyyliasetaattia. Lisätään pienissä erissä 5 minuutin aikana kaikkiaan 1,4 g (0,02 moolia) natriumnitriittiä liuotettuna 25 irlraan vettä. Liuosta sekoitetaan 20 minuuttia 10°C:ssa ja etyyliasetaat-tikerros erotetaan, pestään vedellä ja haihdutetaan 5°C:ssa vähennetyssä paineessa (15 mm), jolloin saadaan keltaista öljyä, joka kiteytyy sekoitettaessa eetterin kanssa. Tuote kiteytetään uudelleen metanoli/vedestä, jolloin saadaan 4,5 g kiteistä (54 %:n saalis); sp. 195°C (hajoaa). Analyysi: Laskettu yhdisteelle ci9H24N4°5S: C, 54,54; H, 5,30; N, 13,39. Löydetty: C, 54,55; H, 5,58; N, 13,33.

O Ir (KBr) 2800-3600 cm (kärboksi OH) , 1803 ja 1790 (//-laktaa-mi C-N), 1750 ja 1730 (kärboksi ja imidatsolidinoni N), 700 (CgH5-); nmr (DMSO dg) , 7,30 ppm cj(S,5, CgH5-), 5,64 (S,l,^-SH-N), 5,60 (d,l, J=4 cps, NCHCO), 5,45 (d,l, J=4 cps, NCHS), 435 (S,l, NCHCO), 2,00 (S,6, CH3CH3CN), 1,48 (S,6, ch3ch3cs).

Esimerkki 2 6-(D-2,2-dimetyyli-3-nitroso-5-okso-4-fenyyli-l-imidatsoli-dinyyli)-penisillaanihappo-sulfoksidi (N-nitrosohetasillii-ni-sulfoksidi)

Kaikkiaan 10 g (0,024 moolia) 6-(D-2,2-dimetyyli-3-nitroso- 5-okso-4-fenyyli-l-imidatsolidinyyli)-penisiHaanihappoa liuotetaan 100 ml:aan vettä pH-arvossa 8 lisäämällä pisaroittain 10 %:sta s 59415 natriumhydroksidia. Sen jälkeen kun on jäähdytetty 0°C:seen lisätään liuos, jossa on 6 g (0,025 moolia) natriummetaperjodaattia 100 ml:ssa vettä, ja sekoittamista jatketaan 3 tuntia. Liuoksen pH lasketaan arvoon 2 käyttäen 1:1 fosforihappoa. Tuote uutetaan etyyliasetaattiin, pestään vedellä ja liuos haihdutetaan aseo-trooppisesti öljyksi, joka sekoitettaessa eetterin kanssa kiteytyy» jolloin saadaan 6,5 g valkoisia kiteitä; sp. ^ 160°C (hajoaa hitaasti). Analyyttinen näyte kiteytetään uudelleen dimetyyli/ foramidista ja vedestä.

Analyysi yhdisteelle cigH22N4^6S:

Laskettu: C, 52,52; H, 5,11; N, 12,92 Löydetty: C, 52,66; H, 5,37; N, 13,45.

IR (KBr) 3540 cm ^ (hydraatti OH), 2400-3400 (karboksi OH), 1804 (/?-laktaami _ N) . 1720-1750 (imidatsolidinoni

.0 L

C^-- N ja karboksyyli c^°) , 1050 (S—>0) , 705 (C^-) ; nmr (DMSO d6) , 7,32 ppm <f(S,5, CgH^) , 5,77 (S,l,^>---CH-N) , 5,72 (d,1, J=4,5 cps NCHCO), 4,83 (d,1, J=4,5 cps, NCHS), 4,30 (S,1, NCHCO), 2,12 ja 2,05 (S,S,6 CH3CH3CN), 1,47 ja 1,20 (S,S,3,3, CH3CH3CS).

9 5941 5

Esimerkki 3

$ O

\ . // o CH--C n I I /CH- ΤίίΛ (H *) ON-K' N---------r—7 ------> /K LI____I CH; imi C\\ζ XC11, O* X C02H a y,,y

cion2sW

(tl O

\ ^ CH-C · I I s

OH-H N--T-Γ O

<\CH, O^Y'-CH,

CO a.H

c)9h£0'"iV

H Cl dioksinji i N/ . o f /° Il s # C/-Hr -CII-C--NH-!--^ CH—C 6 5 ( | 1 1 ' >S^ v. K112 hh H -----r l 1 -h7ö^ 0κ 1

>v _]T J * CO„H

ci.j c"; ch2

COgH

ci?H21N;V

7- (D-2,2-dimetyyli-3-nitroso-5-okso-4-fenyyli-l-imidatsoli-dinyyll)-3-metyyli-3-kefeemi-4-karboksyylihappo Liuosta, jossa on 21 g (0,0487 moolia) 7-(D-2,2-dimetyyli- 3-nitroso-5-okso-4-fenyyli-l-imidatsolidinyyli)-penisillaanihappo-sulfoksidia ja 5 g p-tolueeni-sulfonihappoa (vedetön) (TSA) 500 ml: ssa tetrametyyliureaa (TMU) kuumennetaan lämpötilassa 135°C 2 tun- 10 5 941 5 tia samalla sekoittaen. Liuotin poistetaan lämpötilassa 40°C/0,1 mm, jolloin saadaan öljy, joka liuotetaan 250 ml:aan etyyliasetaattia. Etyyliasetaatti pestään kahdesti 100 ml:n erillä vettä ja uutetaan laimealla natriumbikarbonaattiliuoksella. Lopullinen pH-arvo on 6,7. Vesikerros erotetaan ja sekoitetaan 100 ml:n kanssa etyyliasetaattia. pH säädetään arvoon 2 käyttäen 1:1 H3P04 ja vesiliuos uutetaan kahdesti etyyliasetaatilla. Etyyliasetaatti pestään vedellä ja tislataan aseotrooppisesti öljyksi lämpötilassa 35°C/15 mm. Jäännös sekoitetaan "Skellysolfe B” kanssa ja saadaan amorfinen jauhe, joka painaa 10,0 g. Se suspendoidaan 150 ml:aan vettä ja lisätään kyllästettyä natriumbikarbonaattiliuosta siihen saakka kunnes kaikki aine on liuennut (lopullinen pH-arvo 7,5). Lisätään liuos, jossa on 4 g (0,011 moolia) dibentsyylietyleenidiamiinidiasetaattia 75 ml:ssa vettä ja seosta sekoitetaan 150 ml:n kanssa 4-metyyli-2-pentanonia kaksi-faasijärjestelmässä. Seosta sekoitetaan 1/2 tuntia huoneenlämpötilassa ja kiteinen suola otetaan talteen, pestään vedellä ja lopuksi asetonilla ja kuivataan ilmassa, jolloin saadaan 7,1 g; sp. 150-152°C samalla hajoten.

Analyysi yhdisteelle C54H60N10°10S2*3H2O:

Laskettu: C, 57,53; H, 5,90; N, 12,43 Löydetty: C, 57,54; H, 6,21; N, 12,71.

57,40 6,38

IR (KBr) 3200-3600 cm”1 (NRH2+); OH (vesi); 1760-1770 0 O

( /3 -laktaami-C-N); 1600 (C-0-); 755, 700 CgH5.

7,1 g N,N-dibentsyylietyleenidiammonium-7-(D-2,2-dimetyyli- 3-nitroso-5-okso-4-fenyyli-l-imidatsolidinyyli)-3-metyyli-3-kefee-mi-karboksylaattia suspendoidaan 50 ml:aan 1:1 fosforihappoa ja 150 ml:aan vettä. Seos peitetään 150 ml:11a etyyliasetaattia ja ravistellaan voimakkaasti siihen saakka kunnes kaikki suola on liuennut. Etyyliasetaatti poistetaan, pestään vedellä ja haihdutetaan 40°C: ssa (15 mm) kiteiseksi aineeksi, joka painaa 3,1 g, sp. 175-180°C samalla hajoten. IR- ja NMR-spektrit ovat identtiset autenttisen N-nitrosohetakefaleksiinin spektrien kanssa.

5941 5 7-(D-2,2-dimetyyli-5-okso-4-fenyyli-l-imidatsolidinyyli)-3-metyyli-3-kefeemi-4-karboksyylihappo (hetakefaleksiini) 1 g:aan (0,0025 moolia) 7-(D-2,2-dimetyyli-3-nitroso-5-okso-4-fenyyli-1-imidatsolidinyyli)-3-metyyli-3-kefeemi-4-karboni-happoa 50 ml:ssa dioksaania (puhdistamalla antamalla juosta alu-miinioksidikolonnin lävitse), lisätään kuivaa kloorivetyä 5 minuutin ajan huoneenlämpötilassa. Liuos haihdutetaan 30°C:ssa (15 mm) kuitumaiseksi aineeksi, joka lietetään etyyliasetaatin kanssa ja otetaan talteen. Sitten aine liuotetaan veteen (50 ml) ja tehdään emäksiseksi vesipitoisella natriumbikarbonaattiliuoksella pH-arvoon 4,8 saakka. Seos suodatetaan ja suodos haihdutetaan 30°C:ssa (15 mm) lasimaiseksi aineeksi, joka kuivataan atseotrooppisella tislauksella etyyliasetaatin kanssa. Natriumsuolan saalis on 600 mg; tuote määrätään ja se on 7-(D-2,2-dimetyyli-5-okso-4-fenyyli-l-imi-datsolidinyyli)-3-metyyli-3-kefeemi-4-karboksyylihapon (hetakefaleksiini) natriumsuola; sp. 205°C samalla hajoten.

Analyysi yhdisteelle Ci9H20N3O4SNa*H2^:

Laskettu: C, 53,39; H, 5,19; N, 9,83 Löydetty: C, 53,63; H, 5,00; N, 9,76 H20, 4,30 (Karl Fischer) IR (KBr); 3600-2600 cm-1 (H20, NH, CH2, CH3 ja CH'S) 1760 cm ^ ( /6-laktaami-karbonyyli), 1690 cm ^ (amidi-karbonyyli), 1590 cm *" (karboksylaattikarbonyyli ja C=C) , 710 cm ^ mono-substituoitu fenyyli.

NMR (100 MHz) 20 mg näyte 0,4 ml:ssa D20, jossa on 2 pisaraa 0,1 NHCl; kemialliset siirtymät ppmrssa TSP:stä; 7,52 (S,5H's monosubstituoitu fenyyli), 5,71 (IS, 1H, CH-N ), 5,28 (AB, 2H's /3-laktaami CH'S), 3,48 (AB, 2H's, S-CH2~C=), 2,26 (S, 3H'S=C-CH3), 1,88 ja 1,80 (kaksi S's, 6H's C(CH3)).

Tämä yhdiste estää D.pneumoniae (+5 % seerumia) väkevyytenä 0,3 mcg/ml, Str.pyogenes (+5 % seerumia) väkevyytenä 0,3 mcg/ml, S.aureus Smith väkevyytenä 0,6 mcg/ml, Sai.enteritidis väkevyytenä 4 mcg/ml ja Pr.mirabilis väkevyytenä 8 mcg/ml.

7-(D-Q^-aminofenyyliasetamido)-3-metyyli-3-kefeemi-4-karbok-syylihappo (kefaleksiini)

Noin 200 mg natriumhetakefaleksiinia liuotetaan mahdollisen pieneen määrään vettä (noin 1 ml), tehdään happameksi pH-arvoon 4-5 12 5941 5 etikkahapolla ja annetaan seistä 5°C:ssa yli yön. Kiteinen aine otetaan talteen, pestään vedellä ja lopuksi asetonilla, jolloin saadaan kuivaamisen jälkeen huoneenlämpötilassa (15 minuuttia) käyttäen ?2°5 kiteistä kefaleksiiniä, sp. 195°C samalla hajoten, NMR- ja IR-spektrit ovat identtiset autenttisen kefaleksii-nin kanssa.

Esimerkki 4 7- (D-Of-aminofenyyliasetamido) -3-metyyli-3-kefeemi-4-karbo-nihappo pelkistämällä N-nitrosohetakefaleksiini sinkillä ja etikkahapolla 500 mg:aan 7-(D-2,2-dimetyyli-3-nitroso-5-okso-4-fenyyli-1-imidatsolidinyyli)-3-metyyli-3-kefeemi-4-karbonihappoa liuotettuna 20 ml:aan 90-% etikkahappoa, lisätään 500 mg sinkkipölyä.

Seosta sekoitetaan 5°C:ssa jäähauteella 3 tuntia. Sinkki otetaan talteen suodattamalla ja suodos haihdutetaan paineessa 0,1 mm öljyksi, joka sekoitetaan eetterin kanssa, jolloin saadaan 420 mg kiinteätä ainetta. IR-spektri osoittaa /6-laktaamin kohdassa 1755 cm \ amidikarbonyylin kohdalla 1695 cm 1 ja voimakkaan karboksy-laatin kohdassa 1580 cm Tämän aineen bioautogrammi (B.subtilis-siemennettyä agar-levyä vastaan) paperiliuskalla Miat. No 1 järjestelmässä n-butanoli, etanoli ja vesi (4:1:5) osoittaa biologisesti aktiivista täplää vastaten R^-arvoa, joka on identtinen autenttisen 7-(D-(Y-aminofenyyliasetamido)-3-metyyli-3-kefeemi-4-karbonihapon (kefaleksiini) arvon kanssa. Puhdistetaan edelleen 420 mg ainetta liuottamalla se 7 ml:aan vettä pH-arvossa 8 lisäämällä NaSH. Sinkkisulfidi otetaan talteen ja suodos haihdutetaan öljyksi, joka jähmettyy, jolloin saadaan 31 mg ainetta. Infrapuna-spektri on identtinen autenttisen kefaleksiinin spektrin kanssa. Esimerkki 5 7- (D-2,2-dimetyyli-3-nitroso-5-ok.so-4-fenyyli-l-imidatso- lidinyyll)-3-metyyli-3-kefeemi-4-k.arbonihapon hydrogenolyysl

Raney-nikkelin avulla kefaleksiinln saamiseksi

Suspensiota, jossa on 1 g (0,0024 moolia) 7-(D-2,2-dimetyy- li-3-nitroso-5-okso-4-fenyyli-l-imidatsolidinyyli-3-metyyli-3-ke- feemi-4-karbonihappoa ja 1 g märkää Raney-nikkeliä No 28, ravis- 2 teilaan 2 päivää vetypaineessa 3,5 kg/cm 1 päivän kuluttua lisä- 13 5941 5 tään vielä 2 g katalyyttiä 25 mlrssa vettä. Sen jälkeen kun 2,5 ekvivalenttia vetyä on kulunut poistetaan nikkeli suodattamalla ja liuos säädetään pH-arvoon 2 käyttäen 2-n kloorivetyhappoa. Seos suodatetaan ja suodos säädetään pH-arvoon 4,7 käyttäen 10-% natrium-hydroksidia ja haihdutetaan lämpötilassa 35°C/0,1 mm, jolloin kefa-leksiini saadaan valkoisena aineena, joka painaa 0,6 g. Tämän aineen paperikromatogrammi (B.subtilissiemennettyä agar-levyä vastaan; What No 1) kehitettynä n-butanolilla, etanolilla ja vedellä 4:1:5 osoittaa estovyöhykettä, joka vastaa tarkalleen autenttisen kefaleksiinin estovyöhykkeen R^-arvoa.

Esimerkki 6 7-(D-(X -aminofenyyliasetamido)-3-metyyli-3-kefeemi-4-karboksyylihappo lohkaisemalla kloorivedyllä N-nitro-sohetakefaleksiini

Liuokseen, jossa on 2 g (0,05 moolia) 7-(D-2,2-dimetyyli-3-nitroso-5-okso-4-fenyyli-l-imidatsolidinyyli)-3-metyyli-3-kefeemi- 4-karbonihappoa liuotettuna 50 ml:aan dioksaania, annetaan kuplia kuivaa kloorivetykaasua 5 minuutin ajan. Liuosta sekoitetaan 5 minuuttia ja liuotin poistetaan lämpötilassa 30°C/15 mm. Jäännöstä sekoitetaan etyyliasetaatin kanssa ja saadaan 1,9 g raakatuotetta. Aine liuotetaan laimeaan kloorivetyhappoon pH-arvossa 2,5 ja käsitellään hiilellä (Darko KB) 5 minuutin ajan ja suodos säädetään pH-arvoon 4 käyttäen 10-% natriumhydroksidia. Vesi haihdutetaan lämpötilassa 40°C/15 mm, jolloin saadaan 1,1 g vapaata aminohappoa.

Infrapunaspektri on yhdenmukainen autenttisen kefaleksiinispektrin kanssa. Jäännös-NaCl on 38,34 %. Bioanalyysi on 350 K/mg. Kemiallinen analyysi on 365 f/mg.

Claims (3)

1“ 5941 5 Patenttivaatimus: Menetelmä kefaleksiinin valmistamiseksi,' jonka kaava on _ 0 /\\ " — CU — C-NR---------S S \ ! NH2 ^----------N \ ^ CH3

0 I COOH tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan valmistamiseksi, tunnettu siitä, että A) kaavan III mukaisen yhdisteen //~V_ 11 N' /'N Γ^Η3 III H-fl -c J 111 |VC1I " C00H Cil3 3 3-iminoryhmä suojataan nitrosoimalla tai formyloimalla välituotteen muodostamiseksi, jonka kaava on c / \_α,-1-, /»j W I N---fS^C"3 "'a I^CH, -N--00011 CH3 j jossa Z on nitroso tai formyyli B) mainittu välituote tai sen suola hapetetaan natrium-metaperjodaatilla pH-arvossa alle 5, jolloin muodostuu sulfoksidi, jonka kaava on 15 5941 5 Γ~\ « \ )— CU-C τ CU. \=/ ι ___^ 3 Ζ-,Ι_Γ ~α,3 i\iL ^ CU i tai sen suola C) saatua sulfoksidi-välituotetta kuumennetaan etikkahappoan-hydridissä tai tetrametyyliureassa happokatalyytin läsnäollessa, jona on p-tolueenisulfonihappo tai etikkahappoanhydridi, lämpötilassa noin 120-140°C noin 30-120 minuutin ajan kefalosporiini-väli-tuotteen saamiseksi, jonka kaava on Co .v 11 ch:-c N --T ''"'I / I L 11 ' CH /,-CI13 VII CH 0 ' I COOH jossa Z merkitsee samaa kuin edellä, D) iminosuojaryhmä lohkaistaan hydrolyysillä tuotteen muodostamiseksi, jolla on kaava II, CV™ ___-e··· J-------CHi 11 /\ ' I CW3 CK3 COOH ja E) saatu kaavan II mukainen hetakefaleksiini hydrolysoidaan kaavan I mukaiseksi kefaleksiiniksi. 16 5941 5 Förfarande för framställning av cefalexin.med formeln 0 ' \\ ” y— CU— C— NII------I ~ NH .......J <^· — CH,

0 I COOH eller ett farmaceutiskt godtagbart sait därav, känneteck-n a t därav, att A) 3-iminogruppen i en förening med formeln //"\ Ϊ \ ' f-ll -Cv „ .CH, v- 7 .n Γ r—-jcii, γιγ ] 1 —N -I 3 111 |V™ </ -C00H CH3 3 skyddas genom nitrosering eller formytering för bildande av en mellanprodukt med formeln c / \.__ [. CH \ 7 ;H c\ / 3 iv \——/ N-1-CIU X f I 3 |VCI1 S-N--coo,‘ Cll 3 υ väri Z är nitroso eller formyl, B) nämnda mellanprodukt eller ett sait därav oxideras med