ES2945214T3

ES2945214T3 - Compuestos antiproliferativos y anticuerpo biespecífico contra BCMA y CD3 para uso combinado

Info

Publication number: ES2945214T3
Application number: ES19732494T
Authority: ES
Inventors: Daniel Pierce; Lilly Wong
Original assignee: Celgene Corp
Current assignee: Celgene Corp
Priority date: 2018-05-23
Filing date: 2019-05-22
Publication date: 2023-06-29
Anticipated expiration: 2039-05-22
Also published as: IL278853B1; PT3796912T; JP2023116613A; US20190381035A1; EP3796912A1; SG11202011545YA; AU2019274530A1; EA202092830A1; AU2019274530B2; CY1126060T1; SI3796912T1; HUE061792T2; CA3101050A1; CN112399848B; RS64189B1; EP4218762A3; LT3796912T; WO2019226761A1; CN113713095A; HRP20230449T1

Abstract

En este documento se proporcionan métodos para usar 4-(4-(4-(((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-il)oxi)metil)bencil)piperazin-1- yl)-3-fluorobenzonitrilo, o un enantiómero, una mezcla de enantiómeros, un tautómero o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de células B humanas (BCMA) y al CD3e humano (CD3) proporcionado en el presente documento, en el tratamiento, prevención o manejo del mieloma múltiple. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Compuestos antiproliferativos y anticuerpo biespecífico contra BCMA y CD3 para uso combinado

1. CAMPO

En el presente documento se proporciona 4-(4-(4-(((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-il)oxi)metil)bencil)piperazin-1 -il)-3-fluorobenzonitrilo, o un enantiómero, una mezcla de enantiómeros, un tautómero, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para el uso en combinación con un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano, para tratar, prevenir o abordar mieloma múltiple.

2. ANTECEDENTES

El mieloma múltiple (MM) es un cáncer de células plasmáticas en la médula ósea. Normalmente, las células plasmáticas producen anticuerpos y desempeñan una función clave en la función inmunitaria. Sin embargo, el crecimiento no controlado de estas células conduce a dolor y fracturas óseas, anemia, infecciones y otras complicaciones. El mieloma múltiple es el segundo tumor maligno hematológico más común, aunque las causas exactas del mieloma múltiple siguen siendo desconocidas. El mieloma múltiple causa altos niveles de proteínas en la sangre, orina y órganos, que incluyen, pero no se limitan a, proteína M y otras inmunoglobulinas (anticuerpos), albúmina y beta-2-microglobulina, excepto en algunos pacientes (estimado en del 1 % al 5 %) cuyas células de mieloma no secretan estas proteínas (denominado mieloma no secretor). La proteína M, abreviatura de proteína monoclonal, también conocida como paraproteína, es una proteína particularmente anormal producida por las células plasmáticas del mieloma y se puede encontrar en la sangre o la orina de casi todos los pacientes con mieloma múltiple, excepto de los pacientes que tienen mieloma no secretor o cuyas células de mieloma producen cadenas ligeras de la inmunoglobulina con cadena pesada.

Los síntomas esqueléticos, que incluyen dolor óseo, están entre los síntomas más clínicamente significativos del mieloma múltiple. Las células plasmáticas malignas liberan factores estimulantes de osteoclastos (que incluyen IL-1, IL-6 y TNF) que causan que el calcio sea lixiviado de los huesos, causando lesiones líticas; la hipercalcemia es otro síntoma. Los factores estimulantes de osteoclastos, también denominados citocinas, puede prevenir la apoptosis, o la muerte de las células del mieloma. El cincuenta por ciento de los pacientes tienen lesiones esqueléticas relacionadas con el mieloma detectables radiológicamente en el diagnóstico. Otros síntomas clínicos comunes del mieloma múltiple incluyen polineuropatía, anemia, hiperviscosidad, infecciones e insuficiencia renal.

La terapia actual para el mieloma múltiple puede implicar una o más de cirugías, trasplante de células madre, quimioterapia, inmunoterapia y/o radioterapia, para erradicar las células del mieloma múltiple en un paciente. Todos los enfoques de terapia actuales presentan inconvenientes significativos para el paciente.

En la última década, novedosos agentes terapéuticos, en particular fármacos inmunomoduladores, tales como lenalidomida y pomalidomida, aumentaron significativamente las tasas de respuesta y prolongaron la supervivencia sin progresión (SSP) y la supervivencia global (SG) en pacientes con mieloma múltiple. Sin embargo, niveles persistentes de enfermedad residual que están por debajo de la sensibilidad de la morfología de la médula ósea (MO), electroforesis de proteína con inmunofijación y cuantificación de cadenas ligeras existen en muchos pacientes con mieloma múltiple, incluso después de que estos pacientes hayan logrado la respuesta completa (RC), y con el tiempo provocarán la recaída de la enfermedad. La enfermedad mínima residual (EMR) en el mieloma es un factor pronóstico independiente de la supervivencia sin progresión (SSP) y se considera un criterio de valoración sustitutivo del ensayo para mejorar la identificación de tratamientos eficaces, particularmente para ensayos de primera línea, que ahora requieren de 5 a 10 años de seguimiento para identificar diferencias en la supervivencia. La monitorización de la enfermedad mínima residual (EMR) en pacientes con mieloma múltiple proporciona así un valor pronóstico en la predicción de SSP y SG y la toma de decisiones del tratamiento. La detección de la enfermedad mínima residual (EMR) en el mieloma puede usar un umbral del 0,01 % (10-4) después del tratamiento, es decir, tener 10^-4células o menos células de mieloma múltiple como una proporción de células mononucleares de médula ósea total se considera EMR-negativa, y tener 10^-4células o más EMR-positiva. El umbral de EMR de 10^-4se basó originalmente en la capacidad técnica, pero la detección cuantitativa de la EMR es ahora posible a 10^-5por citometría de flujo y 10^-6por secuenciación de gran rendimiento. (Rawstron et al., Blood 2015;125(12): 1932-1935). Los métodos de medición de la EMR incluyen secuenciación de ADN de VDJ, reacción en cadena de la polimerasa (PCR) (incluyendo PCR específica de alelos, PCR de ASO) y citometría de flujo multiparamétrica (CFM). Los ensayos de EMR, por ejemplo, basados en la medición del perfil de clonotipos, también se describen en la patente de EE. UU. N.° 8.628.927, de Faham et al.

Existe una necesidad significativa de compuestos seguros y eficaces y métodos de tratamiento, prevención y abordaje del mieloma múltiple, que incluyan a pacientes cuyo mieloma múltiple acaba de ser diagnosticado o es resistente a tratamientos convencionales, mientras se reducen o evitan las toxicidades y/o los efectos secundarios asociados a las terapias convencionales. Los documentos de patente WO 2018/083204 A1 y WO 2017/021450 A1 desvelan cada uno anticuerpos biespecíficos que comprenden una primera parte de unión que se une a BCMA y una segunda parte de unión que se une a CD3.

La cita o identificación de cualquier referencia en la Sección 2 de la presente solicitud no se debe interpretar como una admisión de que la referencia sea estado de la técnica para la presente solicitud.

En general, la enseñanza técnica de una realización proporcionada en el presente documento se puede combinar con la desvelada en cualquier otra realización proporcionada en el presente documento.

3. SUMARIO

En el presente documento se proporciona (4-(4-(((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-il)oxi)metil)bencil)piperazin-1-il)-3-fluorobenzonitrilo, o un enantiómero, una mezcla de enantiómeros, un tautómero, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para el uso en combinación con un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano, para tratar, prevenir o abordar el mieloma múltiple. En dicha realización, el compuesto para el uso en las composiciones y métodos proporcionados en el presente documento es 4-(4-(4-(((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-il)oxi)metil)bencil)piperazin-1-il)-3-fluorobenzonitrilo (Compuesto 1):

o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En otra realización, el compuesto para el uso en las composiciones y métodos proporcionados en el presente documento es (S)-4-(4-(4-(((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1 -oxoisoindolin-4-il)oxi)metil)bencil)piperazin-1 -il)-3-fluorobenzonitrilo (Compuesto 2):

La invención proporciona un compuesto para el uso en un método de tratamiento del mieloma múltiple, en donde el compuesto es un compuesto de la fórmula 1

o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

en donde el método comprende administrar a un paciente en necesidad del mismo una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto de la fórmula 1, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en combinación con un anticuerpo biespecífico que comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID nO:21 , una región CDr2h de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

La invención proporciona además un compuesto para el uso en un método de tratamiento del mieloma múltiple, en donde el compuesto es un compuesto de la fórmula 2

o un tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

en donde el método comprende administrar a un paciente en necesidad del mismo una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto de la fórmula 2, o un tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en combinación con un anticuerpo biespecífico que comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

o un tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En otra realización más, el compuesto para el uso en las composiciones y métodos proporcionados en el presente documento es (R)-4-(4-(4-(((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1 -oxoisoindolin-4-il)oxi)metil)bencil)piperazin-1 -il)-3-fluorobenzonitrilo (Compuesto 3):

o un tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Según la invención, el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID ⁿO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

También se proporciona para el uso en los métodos descritos en el presente documento composiciones farmacéuticas formuladas para administración por una vía y medio apropiados que contienen concentraciones eficaces de los compuestos proporcionados en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, y opcionalmente que comprenden al menos un vehículo farmacéutico. También se proporcionan para el uso en los métodos descritos en el presente documento composiciones farmacéuticas formuladas para administración por una vía y medio apropiados que contienen concentraciones eficaces de los anticuerpos proporcionados en el presente documento, un anticuerpo biespecífico que comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3^e(CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

En una realización, las composiciones farmacéuticas suministran cantidades eficaces para el tratamiento del mieloma múltiple. En una realización, las composiciones farmacéuticas suministran cantidades eficaces para la prevención de mieloma múltiple. En una realización, las composiciones farmacéuticas suministran cantidades eficaces para la mejora de mieloma múltiple.

En el presente documento también se proporcionan terapias de combinación usando los compuestos o composiciones proporcionados en el presente documento, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3e (CD3) humano proporcionado en el presente documento, en combinación con otra terapia, por ejemplo, otro agente farmacéutico con actividad contra mieloma múltiple o sus síntomas. Los ejemplos de terapias dentro del alcance de los métodos incluyen, pero no se limitan a, cirugía, quimioterapia, radioterapia, terapia biológica, trasplante de células madre, terapia celular y combinaciones de los mismos.

Los compuestos o composiciones proporcionados en el presente documento, o derivados farmacéuticamente aceptables de los mismos, se pueden administrar simultáneamente con, antes de o después de la administración entre sí y una o más de las terapias anteriores. También se proporcionan las composiciones farmacéuticas que contienen un compuesto proporcionado en el presente documento y una o más de las terapias anteriores.

En la práctica de los métodos, cantidades eficaces de los compuestos o composiciones que contienen concentraciones terapéuticamente eficaces de los compuestos se administran a un individuo que presenta los síntomas del mieloma múltiple que se va a tratar. Las cantidades son eficaces para mejorar o eliminar uno o más síntomas del mieloma múltiple.

Un envase o kit farmacéutico puede comprender uno o más recipientes llenos de uno o más de los ingredientes de las composiciones farmacéuticas. Opcionalmente, asociado a dichos recipiente(s) puede haber una nota en la forma prescrita por una agencia gubernamental que regula la fabricación, el uso o la venta de los productos farmacéuticos o productos biológicos, cuya nota refleja la autorización por la agencia de fabricación, uso o venta para administración humana. El envase o kit puede ser etiquetado con información referente al modo de administración, la secuencia de administración del fármaco (por ejemplo, por separado, uno detrás de otro o simultáneamente), o similares.

Estos y otros aspectos de la materia descrita en el presente documento serán evidentes tras la referencia a la siguiente descripción detallada.

4. DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN

A. Definiciones

A menos que se defina de otro modo, todos los términos técnicos y científicos usados en el presente documento tienen el mismo significado que comúnmente es entendido por un experto habitual en la técnica. En el supuesto caso de que exista una pluralidad de definiciones para un término en el presente documento, prevalecen aquellas en esta sección, a menos que se establezca de otro modo.

El uso de la palabra "un" o "una", cuando se usa junto con el término "que comprende" en las reivindicaciones y/o la descripción, puede significar "uno", pero también está de acuerdo con el significado de "uno o más", "al menos uno" y "uno o más de uno".

Como se usa en el presente documento, los términos "que comprende" y "que incluye" se pueden usar indistintamente. Los términos "que comprende" y "que incluye" se deben interpretar como que especifican la presencia de las características o componentes establecidos a los que se hace referencia, pero no excluye la presencia o adición de una o más características, o componentes, o grupos de los mismos. Además, los términos "que comprende" y "que incluye" pretenden incluir ejemplos englobados por el término "que consiste en". Por consiguiente, el término "que consiste en" se puede usar en lugar de los términos "que comprende" y "que incluye" para proporcionar realizaciones más específicas de la invención.

El término "que consiste en" significa que una materia tiene al menos 90 %, 95 %, 97 %, 98 % o 99 % de las características o componentes establecidos en los que consiste. En

en donde el método comprende administrar a un paciente en necesidad del mismo una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto de la fórmula 1, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en combinación con un anticuerpo biespecífico que comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDr2h de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

o un tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

En otra realización, el término "que consiste en" excluye del alcance de cualquier cita posterior cualquier otra característica o componente, exceptuando las que no son esenciales para lograr el efecto técnico.

Como se usa en el presente documento, el término "o" se debe interpretar como un "o" incluyente que significa uno cualquiera o cualquier combinación. Por lo tanto, "A, B o C" significa cualquiera de los siguientes: "A; B; C; A y B; A y C; B y C; A, B y C". Una excepción a esta definición ocurrirá solo cuando una combinación de elementos, funciones, etapas o actos sean de alguna forma inherentemente mutuamente excluyentes.

"CI⁵⁰" se refiere a una cantidad, concentración o dosis de un compuesto de prueba particular que logra una inhibición del 50 % de una respuesta máxima, tal como la unión a receptor, la actividad del receptor, el crecimiento o la proliferación celular, medido por cualquiera de los ensayos in vitro o basados en células descritos en el presente documento.

Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, sales de amina, tales como, pero no se limitan a, W,W-dibenciletilendiamina, cloroprocaína, colina, amoniaco, dietanolamina y otras hidroxialquilaminas, etilendiamina, A-metilglucamina, procaína, W-bencilfenetilamina, 1-para-clorobencil-2-pirrolidin-1'-ilmetil-bencimidazol, dietilamina y otras alquilaminas, piperazina y tris(hidroximetil)aminometano; sales de metales alcalinos, tales como, pero no se limitan a, litio, potasio y sodio; sales de metales alcalinotérreos, tales como, pero no se limitan a, bario, calcio y magnesio; sales de metales de transición, tales como, pero no se limitan a, cinc; y otras sales metálicas, tales como, pero no se limitan a, hidrógeno fosfato de sodio y difosfato de sodio; y que también incluyen, pero no se limitan a, sales de ácidos minerales, tales como, pero no se limitan a, clorhidratos y sulfatos; y sales de ácidos orgánicos, tales como, pero no se limitan a, acetatos, lactatos, malatos, tartratos, citratos, ascorbatos, succinatos, butiratos, valeratos, fumaratos y sulfonatos orgánicos.

A menos que se establezca específicamente de otro modo, donde un compuesto puede asumir formas tautómeras, regioisómeras y/o estereoisoméricas alternativas, todos los isómeros alternativos pretenden estar englobados dentro del alcance de la materia reivindicada. Por ejemplo, donde un compuesto pueda tener una de dos formas tautómeras, se pretende que ambos tautómeros estén englobados en el presente documento.

Por lo tanto, los compuestos proporcionados en el presente documento pueden ser enantioméricamente puros, o ser mezclas estereoisoméricas o diaestereoméricas. Como se usa en el presente documento y a menos que se indique lo contrario, el término "estereoméricamente puro" significa una composición que comprende un estereoisómero de un compuesto y está sustancialmente libre de otros estereoisómeros de ese compuesto. Por ejemplo, una composición estereoméricamente pura de un compuesto que tiene un centro quiral estará sustancialmente libre del enantiómero opuesto del compuesto. Una composición estereoméricamente pura de un compuesto que tiene dos centros quirales estará sustancialmente libre de otros diaestereómeros del compuesto. Un compuesto estereoméricamente puro típico comprende más de aproximadamente el 80 % en peso de un estereoisómero del compuesto y menos de aproximadamente el 20 % en peso de otros estereoisómeros del compuesto, en una realización más de aproximadamente el 90 % en peso de un estereoisómero del compuesto y menos de aproximadamente el 10 % en peso de los otros estereoisómeros del compuesto, en una realización más de aproximadamente el 95 % en peso de un estereoisómero del compuesto y menos de aproximadamente el 5 % en peso de los otros estereoisómeros del compuesto, y en una realización más de aproximadamente el 97 % en peso de un estereoisómero del compuesto y menos de aproximadamente el 3 % en peso de los otros estereoisómeros del compuesto. Un compuesto estereoméricamente puro, como se usa en el presente documento, comprende más de aproximadamente el 80 % en peso de un estereoisómero del compuesto, en una realización más de aproximadamente el 90 % en peso de un estereoisómero del compuesto, en una realización más de aproximadamente el 95 % en peso de un estereoisómero del compuesto, y en una realización más de aproximadamente el 97 % en peso de un estereoisómero del compuesto. Como se usa en el presente documento y a menos que se indique lo contrario, el término "estereoméricamente enriquecido" significa una composición que comprende más de aproximadamente el 60 % en peso de un estereoisómero de un compuesto, en una realización más de aproximadamente el 70 % en peso, y en una realización más de aproximadamente el 80 % en peso de un estereoisómero de un compuesto. Como se usa en el presente documento y a menos que se indique lo contrario, el término "enantioméricamente puro" significa una composición estereoméricamente pura de un compuesto que tiene un centro quiral. Similarmente, el término "estereoméricamente enriquecido" significa una composición estereoméricamente enriquecida de un compuesto que tiene un centro quiral. Como se usa en el presente documento, mezclas estereoisoméricas o diaestereoméricas significa una composición que comprende más de un estereoisómero de un compuesto. Una mezcla estereoisomérica típica de un compuesto comprende aproximadamente 50 % en peso de un estereoisómero del compuesto y aproximadamente 50 % en peso de los otros estereoisómeros del compuesto, o comprende más de aproximadamente el 50 % en peso de un estereoisómero del compuesto y menos de aproximadamente el 50 % en peso de otros estereoisómeros del compuesto, o comprende más de aproximadamente el 45 % en peso de un estereoisómero del compuesto y menos de aproximadamente el 55 % en peso de los otros estereoisómeros del compuesto, o comprende más de aproximadamente el 40 % en peso de un estereoisómero del compuesto y menos de aproximadamente el 60 % en peso de los otros estereoisómeros del compuesto, o comprende más de aproximadamente el 35 % en peso de un estereoisómero del compuesto y menos de aproximadamente el 65 % en peso de los otros estereoisómeros del compuesto.

Se debe entender que los compuestos proporcionados en el presente documento pueden contener centros quirales. Dichos centros quirales pueden ser o de la configuración (R) o (S), o pueden ser una mezcla de los mismos. Se debe entender que los centros quirales de los compuestos proporcionados en el presente documento pueden experimentar epimerización in vivo. Como tal, un experto en la técnica reconocerá que la administración de un compuesto en su forma (R) es equivalente, para los compuestos que experimentan epimerización in vivo, a la administración del compuesto en su forma (S).

Se pueden preparar isómeros ópticamente activos (+) y (-), (R) y (S), o (D) y (L), usando sintones quirales o reactivos quirales, o resolver usando técnicas convencionales, tales como cromatografía en una fase estacionaria quiral.

Como se usa en el presente documento, un "isotopólogo" es un compuesto isotópicamente enriquecido. El término "isotópicamente enriquecido" se refiere a un átomo que tiene una composición isotópica distinta de la composición isotópica natural de ese átomo. "Isotópicamente enriquecido" también se puede referir a un compuesto que contiene al menos un átomo que tiene una composición isotópica distinta de la composición isotópica natural de ese átomo. El término "composición isotópica" se refiere a la cantidad de cada isótopo presente para un átomo dado. Los compuestos radiomarcados e isotópicamente enriquecidos son útiles como agentes terapéuticos, por ejemplo, agentes terapéuticos para mieloma múltiple, reactivos de investigación, por ejemplo, reactivos de ensayos de unión, y agentes de diagnóstico, por ejemplo, agentes de obtención de imágenes in vivo. Todas las variaciones isotópicas de los compuestos, como se describen en el presente documento, tanto si son radiactivas como no, pretenden estar englobadas dentro del alcance de las realizaciones proporcionadas en el presente documento. En algunas realizaciones, se proporcionan isotopólogos de los compuestos, por ejemplo, los isotopólogos del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 son compuestos enriquecidos con deuterio, carbono-13 o nitrógeno-15. En algunas realizaciones, los isotopólogos proporcionados en el presente documento son compuestos enriquecidos con deuterio. En algunas realizaciones, los isotopólogos proporcionados en el presente documento son compuestos enriquecidos con deuterio, donde la deuteración ocurre en el centro quiral.

En la descripción en el presente documento, si hay cualquier discrepancia entre un nombre químico y la estructura química, controla la estructura.

Como se usa en el presente documento, "mieloma múltiple" se refiere a afecciones hematológicas caracterizadas por células plasmáticas malignas e incluye los siguientes trastornos: gammapatía monoclonal de significado incierto (GMSI); mieloma múltiple recidivante, insensible o resistente; mieloma múltiple de riesgo bajo, riesgo medio y riesgo alto; mieloma múltiple recién diagnosticado (incluyendo mieloma múltiple recién diagnosticado de riesgo bajo, riesgo medio y riesgo alto); mieloma múltiple que cumple los requisitos para trasplante y que no cumple los requisitos para trasplante; mieloma múltiple asintomático (indolente) (incluyendo mieloma múltiple asintomático de riesgo bajo, riesgo medio y riesgo alto); mieloma múltiple activo; plasmocitoma solitario; plasmocitoma extramedular; leucemia de células plasmáticas; mieloma múltiple del sistema nervioso central; mieloma de cadenas ligeras; mieloma no secretor; mieloma de inmunoglobulina D; y mieloma de inmunoglobulina E; y mieloma múltiple caracterizado por anomalías genéticas, tales como translocaciones de ciclina D (por ejemplo, t(11 ;14)(q13;q32); t(6;14)(p21 ;32); t(12;14)(p13;q32); o t(6;20);); translocaciones de MMSET (por ejemplo, t(4;14)(p16;q32)); translocalizaciones de MAF (por ejemplo, t(14;16)(q32;q32); t(20;22); t(16; 22)(q11;q13); o t(14;20)(q32;q11)); u otros factores cromosómicos (por ejemplo, deleción de 17p13, o cromosoma 13; del(17/17p), no hiperdiploidía, y ganancia de (1q)).

Como se usa en el presente documento y a menos que se indique lo contrario, los términos "tratan", "tratar" y "tratamiento" se refieren a aliviar o reducir la intensidad de un síntoma asociado a la enfermedad o afección que está tratándose, por ejemplo, mieloma múltiple.

El término "prevención" incluye la inhibición de un síntoma de la enfermedad o trastorno particular, por ejemplo, mieloma múltiple. En algunas realizaciones, los pacientes con antecedentes familiares de mieloma múltiple son candidatos a regímenes preventivos. En general, el término "prevenir" se refiere a la administración del fármaco antes de la aparición de los síntomas, particularmente a pacientes en riesgo de mieloma múltiple.

Como se usa en el presente documento y a menos que se indique lo contrario, el término "abordar" engloba prevenir la reaparición de la enfermedad o trastorno particular, tal como el mieloma múltiple, en un paciente que lo había padecido, prolongar el tiempo que un paciente que había padecido la enfermedad o el trastorno sigue en remisión, reducir las tasas de mortalidad de los pacientes y/o mantener una reducción en la intensidad o evitación de un síntoma asociado a la enfermedad o afección que se aborda.

Como se usa en el presente documento, "sujeto" o "paciente" es un animal, normalmente un mamífero, que incluye un humano, tal como un paciente humano.

El término "recidivante" se refiere a una situación donde pacientes que han tenido una remisión del mieloma múltiple después de la terapia tienen un regreso de células de mieloma y/o células normales reducidas en la médula ósea.

El término "insensible o resistente" se refiere a una circunstancia donde pacientes, incluso después de un tratamiento intensivo, tienen células de mieloma residuales y/o células normales reducidas en la médula ósea.

Como se usa en el presente documento, "terapia de inducción" se refiere al primer tratamiento dado para una enfermedad, o el primer tratamiento dado con la intención de inducir la remisión completa en una enfermedad, tal como el cáncer. Cuando se usa sola, la terapia de inducción es la aceptada como el mejor tratamiento disponible. Si se detecta cáncer residual, los pacientes se tratan con otra terapia, denominada reinducción. Si el paciente está en remisión completa después de la terapia de inducción, entonces se administra terapia adicional de consolidación y/o mantenimiento para prolongar la remisión o para posiblemente curar al paciente.

Como se usa en el presente documento, "terapia de consolidación" se refiere al tratamiento dado para una enfermedad después de que se haya logrado primero la remisión. Por ejemplo, la terapia de consolidación para el cáncer es el tratamiento dado después de que el cáncer haya desaparecido después de la terapia inicial. La terapia de consolidación pueden incluir radioterapia, trasplante de células madre o tratamiento con farmacoterapia para el cáncer. La terapia de consolidación también se denomina terapia de intensificación y terapia posremisión.

Como se usa en el presente documento, "terapia de mantenimiento" se refiere al tratamiento dado para una enfermedad después de que se logre la remisión o la mejor respuesta, para prevenir o retrasar la recaída. La terapia de mantenimiento puede incluir quimioterapia, terapia hormonal o terapia dirigida.

Como se usa en el presente documento, y a menos que se especifique de otro modo, los términos "cantidad terapéuticamente eficaz" y "cantidad eficaz" de un compuesto se refieren a una cantidad suficiente para proporcionar un beneficio terapéutico en el tratamiento, la prevención y/o el abordaje de una enfermedad, por ejemplo, mieloma múltiple, o para retardar o minimizar uno o más síntomas asociados a la enfermedad o trastorno que se va a tratar. Los términos "cantidad terapéuticamente eficaz" y "cantidad eficaz" pueden englobar una cantidad que mejora la terapia global, reduce o evita síntomas o causas de la enfermedad o trastorno, o potencia la eficacia terapéutica de otro agente terapéutico.

Los términos "coadministración" y "en combinación con" incluyen la administración de uno o más agentes terapéuticos (por ejemplo, un compuesto proporcionado en el presente documento y otro agente anti-mieloma múltiple, agente para el cáncer o agente para tratamiento de apoyo) ya sea simultáneamente, concurrentemente o secuencialmente uno detrás del otro sin límites de tiempo específicos. En una realización, los agentes están presentes en la célula o en el cuerpo del paciente al mismo tiempo o ejercen su efecto biológico o terapéutico al mismo tiempo. En una realización, los agentes terapéuticos están en la misma composición o forma farmacéutica unitaria. En otra realización, los agentes terapéuticos están en composiciones separadas o formas farmacéuticas unitarias.

El término "agente para tratamiento de apoyo" se refiere a cualquier sustancia que trata, previene o aborda un efecto adverso del tratamiento con el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero o una mezcla de enantiómeros, tautómeros, isotopólogo o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

El término "terapia biológica" se refiere a la administración de terapéuticos biológicos, tales como sangre del cordón, células madre, factores de crecimiento y similares.

En el contexto de un cáncer, la inhibición se puede evaluar por inhibición de la progresión de la enfermedad, inhibición del crecimiento tumoral, reducción del tumor primario, alivio de síntomas relacionados con el tumor, inhibición de factores secretados por el tumor, aparición retardada de tumores primarios o secundarios, desarrollo ralentizado de tumores primarios o secundarios, disminución de la aparición de tumores primarios o secundarios, intensidad ralentizada o disminuida de los efectos secundarios de la enfermedad, parada del crecimiento tumoral y regresión de tumores, tiempo hasta la progresión (THP) elevado, elevada supervivencia sin progresión (SSP), elevada supervivencia global (SG), entre otros. La SG, como se usa en el presente documento, significa el tiempo desde el comienzo del tratamiento hasta la muerte de cualquier causa. El THP, como se usa en el presente documento, significa el tiempo desde el comienzo del tratamiento hasta la progresión tumoral; el THP no incluye muertes. En una realización, la SSP significa el tiempo desde el comienzo del tratamiento hasta la progresión tumoral o la muerte. En una realización, la SSP significa el tiempo desde la primera dosis del compuesto hasta la primera manifestación de la progresión de la enfermedad o la muerte de cualquier causa. En una realización, las tasas de SSP se calcularán usando las estimaciones de Kaplan-Meier. La supervivencia sin episodios (SSE) significa el tiempo desde el comienzo del tratamiento hasta el fracaso de cualquier tratamiento, que incluye la progresión de la enfermedad, la interrupción del tratamiento por cualquier motivo, o la muerte. En una realización, la tasa de respuesta global (TRG) significa el porcentaje de pacientes que logran una respuesta. En una realización, la TRG significa la suma del porcentaje de pacientes que logran respuestas completas y parciales. En una realización, la TRG significa el porcentaje de pacientes cuya mejor respuesta > respuesta parcial (RP), según los Criterios de Respuesta Uniforme de IMWG. En una realización, la duración de respuesta (DdR) es el tiempo desde que se logra una respuesta hasta la recaída o progresión de la enfermedad. En una realización, la DdR es el tiempo desde que se logra una respuesta > respuesta parcial (RP) hasta la recaída o progresión de la enfermedad. En una realización, la DdR es el tiempo desde la primera documentación de una respuesta hasta la primera documentación de enfermedad progresiva o muerte. En una realización, la DdR es el tiempo desde la primera documentación de una respuesta > respuesta parcial (RP) hasta la primera documentación de enfermedad progresiva o muerte. En una realización, el tiempo hasta la respuesta (TTR) significa el tiempo desde la primera dosis de compuesto hasta la primera documentación de una respuesta. En una realización, el TTR significa el tiempo desde la primera dosis de compuesto hasta la primera documentación de una respuesta > respuesta parcial (RP). En el extremo, la inhibición completa se denomina en el presente documento prevención o quimioprevención. En este contexto, el término "prevención" incluye o prevenir la aparición de cáncer clínicamente evidente en total o prevenir la aparición de un estadio preclínicamente evidente de un cáncer. También pretende estar englobada por esta definición la prevención de la transformación en células malignas o detener o invertir la progresión de células premalignas a células malignas. Esto incluye el tratamiento profiláctico de aquellos en riesgo de desarrollar un cáncer.

En el contexto del mieloma múltiple, la respuesta se puede evaluar usando los criterios consenso del Grupo de Trabajo Internacional del Mieloma (IMWG) para la evaluación de respuestas y enfermedad mínima residual (Rajkumar et al., Blood, 2011, 117(18):4691 -5; Kumar et al., Lancet Oncol., 2016,17(8):e328-e346). Los criterios se pueden resumir del siguiente modo con más detalles dis onibles en Lancet Oncol., 2016,178 :e328-e346.

En ciertas realizaciones, el tratamiento del mieloma múltiple también se puede evaluar por los Criterios Uniformes Internacionales de Respuesta (IURC) para mieloma múltiple (véase Durie BGM, Harousseau J-L, Miguel JS, et al. International uniform response criteria for multiple myeloma. Leukemia, 2006; (10) 10: 1-7), usando las definiciones de res uestas criterios de valoración mostrados a continuación:

Como se usa en el presente documento, el estado de ECOG se refiere al Estado Funcional del Grupo Oncológico Cooperativo de la Costa Este (ECOG) (Oken M, et al. Toxicity and response criteria of the Eastern Cooperative Oncology Grou . Am J Clin Oncol 1982;56 :649-655 , como se muestra a continuación:

El término "aproximadamente", como se usa en el presente documento, a menos que se indique lo contrario, cuando se usa a propósito de un valor numérico o un intervalo de valores, indica que el valor o intervalo de valores se puede desviar hasta un grado considerado razonable por un experto habitual en la técnica. En una realización, el término "aproximadamente" indica que el valor o intervalo numérico de valores puede variar dentro del 25 %, 20 %, 15 %, 10 %, 9 %, 8 %, 7 %, 6 %, 5 %, 4 %, 3 %, 2 %, 1,5 %, 1 %, 0,5 % o 0,25 % del valor citado o intervalo de valores. En una realización, el término "aproximadamente" se refiere a un valor que no es superior al 10 % por encima o por debajo del valor que se modifica por el término. Por ejemplo, el término "aproximadamente 10 mg/m2" significa un intervalo de desde 9 mg/m2 hasta 11 mg/m2.

El término "BCMA, el BCMA diana, BCMA humano", como se usa en el presente documento, se refiere a un antígeno de maduración de linfocitos B humanos, también conocido como BCMA; T r 17_HUMANO, TNFRSF17 (UniProt Q02223), que es un miembro de la superfamilia de receptores de necrosis tumoral que se expresa preferentemente en células plasmáticas diferenciadas. El dominio extracelular de BCMA consiste según UniProt en los aminoácidos 1 - 54 (o 5-51). El término "anticuerpo contra BCMA, anticuerpo anti-BCMA", como se usa en el presente documento, se refiere a un anticuerpo que se une específicamente al dominio extracelular de BCMA.

"Que se une específicamente al BCMA o que se une a BCMA" se refiere a un anticuerpo que es capaz de unirse al BCMA diana con afinidad suficiente de forma que el anticuerpo sea útil como un agente terapéutico en el direccionamiento de BCMA. En algunas realizaciones, el grado de unión de un anticuerpo anti-BCMA a una proteína no BCMA no relacionada es aproximadamente 10 veces, preferentemente >100 veces inferior a la unión del anticuerpo a BCMA como se mide, por ejemplo, por resonancia de plasmones superficiales (SPR) por ejemplo, Biacore®, enzimoinmunoanálisis de adsorción (ELISA) o citometría de flujo (FACS). En una realización, el anticuerpo que se une a BCMA tiene una constante de disociación (Kd) de 10^-8M o menos, en una realización desde 10^-8M hasta 10-13 M, en una realización desde 10^-9M hasta 10-13 M. En una realización, el anticuerpo anti-BCMA se une a un epítope de BCMA que se conserva entre BCMA de diferentes especies, en una realización entre humano y macaco cangrejero, y en una realización adicional a BCMA de ratón y rata. "Anticuerpo biespecífico que se une específicamente a CD3 y BCMA, anticuerpo biespecífico contra CD3 y BCMA" se refiere a una definición respectiva para la unión a ambas dianas. Un anticuerpo que se une específicamente al BCMA (o BCMA y CD3) no se une a otros antígenos humanos. Por lo tanto, en un ELISA, los valores de DO para dichas dianas no relacionadas serán iguales o inferiores a los del límite de detección del ensayo específico, en una realización > 0,3 ng/ml, o igual o inferior a valores de DO de muestras de control sin BCMA unido a placa o con células HEK₂93 no transfectadas.

El término "APRIL", como se usa en el presente documento, se refiere a APRIL murino truncado recombinante (aminoácidos 106-241; NP_076006). APRIL se puede producir como se describe en Ryan, 2007 (Mol Cancer Ther; 6 (11): 3009-18).

El término "BAFF", como se usa en el presente documento, se refiere a BAFF humano truncado recombinante (UniProt Q9Y275 (TN13B_Hu MANO)) que se puede producir como se describe en Gordon, 2003 (Biochemistry; 42 (20): 5977 5983). En una realización, se usa un BAFF marcado con His según la invención. En una realización, el BAFF marcado con His se produce clonando un fragmento de ADN que codifica los restos de BAFF 82-285 en un vector de expresión, creando una fusión con una marca de His aminoterminal, seguido de un sitio de escisión de trombina, que expresa dicho vector y que escinde la proteína recuperada con trombina.

El término "anticuerpo contra CD3, anticuerpo anti-CD3" se refiere a un anticuerpo que se une específicamente a CD3. En una realización, el anticuerpo se une específicamente a CD3s. El término "CD3s o CD3", como se usa en el presente documento, se refiere a CD3s humano descrito en UniProt P07766 (CD3E_HUMANO).

El término "anticuerpo", como se usa en el presente documento, se refiere a un anticuerpo monoclonal. Un anticuerpo consiste en dos pares de una "cadena ligera" (LC) y una "cadena pesada" (HC) (dichos pares de cadena ligera (LC)/cadena pesada se abrevian en el presente documento LC/HC). Las cadenas ligeras y las cadenas pesadas de dichos anticuerpos son polipéptidos que consisten en varios dominios. Cada cadena pesada comprende una región variable de la cadena pesada (abreviada en el presente documento HCVR o VH) y una región constante de la cadena pesada. La región constante de la cadena pesada comprende los dominios constantes de la cadena pesada CH1, CH₂y CH₃(clases de anticuerpos IgA, IgD e IgG) y opcionalmente el dominio constante de la cadena pesada CH4 (clases de anticuerpo IgE e IgM). Cada cadena ligera comprende un dominio variable de la cadena ligera VL y un dominio constante de la cadena ligera CL. Los dominios variables VH y VL se pueden subdividir además en regiones de hipervariabilidad, denominadas regiones determinantes de la complementariedad (CDR), intercaladas con regiones que están más conservadas, denominadas regiones estructurales (FR). Cada VH y VL está compuesta de tres CDR y cuatro FR, dispuestas desde el extremo amino hasta el extremo carboxi en el siguiente orden: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. Los "dominios constantes" de la cadena pesada y de la cadena ligera no participan directamente en la unión de un anticuerpo a una diana, sino que presentan diversas funciones efectoras. El término "anticuerpo", como se usa en el presente documento, también comprende la porción de un anticuerpo que se necesita al menos para la unión específica al antígeno CD3, resp. BCMA. Por lo tanto, dicho anticuerpo (o porción de anticuerpo) puede ser en una realización un fragmento Fab, si dicha porción de anticuerpo está comprendida en un anticuerpo biespecífico según la invención. El anticuerpo según la invención también puede ser un Fab', F(ab')₂, un scFv, un di-scFv, o un acoplador biespecífico de linfocitos T (BiTE®).

El término "anticuerpo" incluye, por ejemplo, anticuerpos de ratón, anticuerpos humanos, anticuerpos quiméricos, anticuerpos humanizados y anticuerpos genéticamente manipulados (anticuerpos de variante o mutantes), en tanto que se retengan sus propiedades características. En una realización, los anticuerpos son anticuerpos humanos o humanizados, especialmente como anticuerpos humanos o humanizados recombinantes. Realizaciones adicionales son heteroanticuerpos específicos (biespecíficos, triespecíficos, etc.) y otros conjugados, por ejemplo, con moléculas pequeñas citotóxicas.

Se conocen bien en el estado de la técnica los formatos de anticuerpos biespecíficos y también se describen, por ejemplo, en Kontermann RE, mAbs 4:2 1-16 (2012); Holliger P., Hudson Pj , Nature Biotech, 23 (2005) 1126-1136 y Chan AC, Carter PJ Nature Reviews Immunology 10, 301-316 (2010) y Cuesta AM et al., Trends Biotech 28 (2011) 355-362. El término "anticuerpo biespecífico", como se usa en el presente documento, se refiere en una realización a un anticuerpo en el que uno de los dos pares de cadena pesada y cadena ligera (HC/LC) se une específicamente al CD3 y el otro se une específicamente al BCMA. El término también se refiere a otros formatos de anticuerpos biespecíficos según el estado de la técnica. En una realización, el término "anticuerpo biespecífico" incluye anticuerpos monocatenarios biespecíficos, tales como anticuerpos en el formato BiTE®, anticuerpos DART, diacuerpos, scFv en tándem y miméticos de anticuerpos, tales como DARPin. En una realización, el anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano es uno de los descritos en la publicación de solicitud internacional N.2 WO 2018/083204.

El término "TCB", como se usa en el presente documento, se refiere a un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al BCMA y CD3. El término "83A10-TCBcv", como se usa en el presente documento, se refiere a un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al BCMA y CD3 como se especifica por su combinación de cadenas pesadas y ligeras de SEQ ID NO:45, SEQ ID NO:46, SEQ iD NO:47 (2x) y SEQ ID nO:48, y como se muestra en la Figura 2A y descrita en EP14179705. Los términos "21-TCBcv, 22-TCBcv, 42-TCBcv", como se usan en el presente documento, se refieren a los anticuerpos biespecíficos respectivos de Mab21, como se especifica por su combinación de cadenas pesadas y ligeras de SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:49, SEQ ID NO:50 y SEQ ID NO:51 (2x), Mab 22 como se especifica por sus combinaciones de cadenas pesadas y ligeras de SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:52, SEQ ID NO:53 y SEQ ID NO:54 (2x), y Mab42 como se especifica por su combinación de cadenas pesadas y ligeras de SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:55, SEQ ID NO:56, y SEQ ID NO:57-(2x).

B. Breve descripción de las figuras

Figura 1A y Figura 1B. Anticuerpos bivalentes biespecíficos que comprenden solo los fragmentos Fab (específicos para CD3 y BCMA) y la parte Fc como se especifica: (Figura 1A) Fab BCMA(RK/EE)-Fc-Fab CD3; (Figura 1B) Fab BCMA-Fc-Fab CD3(RK/EE). Las sustituciones de aminoácidos para RK/EE introducidas en CL-CH1 para reducir los apareamientos erróneos de LC/productos secundarios en la producción. El Fab CD3 incluye un híbrido VL-VH para reducir el apareamiento erróneo de LC y productos secundarios.

Figura 2A, Figura 2B, Figura 2C y Figura 2D. Anticuerpos trivalentes biespecíficos preferidos que comprenden solo los fragmentos Fab (específicos para CD3 y BCMA) y la parte Fc como se especifica: (Figura 2A) Fab BCMA(RK/EE)-Fc-Fab CD3-Fab BCMA(RK/EE); (Figura 2B) Fab BCMA-Fc-Fab CD3(RK/EE)-Fab BCMA; (Figura 2C) Fab BCMA(RK/EE)-Fc-Fab BCMA(RK/EE)-Fab CD3; (Figura 2D) Fab BCMA-Fc-Fab BCMA-Fab CD3(RK/EE). Se introdujeron sustituciones de aminoácidos para RK/EE en CL-CH1 para reducir el apareamiento erróneo de LC/productos secundarios en la producción. Preferentemente, el Fab CD3 incluye un híbrido VL-VH para reducir el apareamiento erróneo de LC y los productos secundarios. Preferentemente, Fab CD3 y Fab BCMA se unen entre sí con conectores flexibles.

Figura 3A, Figura 3B, Figura 3C y Figura 3D. Anticuerpos bivalentes biespecíficos que comprenden solo los fragmentos Fab (específicos para CD3 y BCMA) y la parte Fc como se especifica: (Figura 3A) Fc-Fab CD3-Fab BCMA(RK/EE); (Figura 3B) Fc-Fab CD3(RK/EE)-Fab BCMA; (Figura 3C) Fc-Fab BCMA(RK/EE)-Fab CD3; (Figura 3D) Fc-Fab BCMA-Fab CD3(RK/E^e). Preferentemente, los Fab ^cD3 incluyen un híbrido V^l-VH para reducir el apareamiento erróneo de ^lC y los productos secundarios. Fab CD3 y Fab BCMA se unen entre sí con conectores flexibles.

La Figura 4A, Figura 4B y Figura 4C ilustran que el pretratamiento de linfocitos T efectores de mieloma múltiple (MM) o células diana PCL con el Compuesto 2 mejora la potencia y en algunas estirpes celulares también mejora la máxima destrucción de células diana lograda con el anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento. Se pretrataron linfocitos T efectores (CD3+) con DMSO (control) o Compuesto 2 (1 nM) durante 16 horas, luego se lavaron y se usaron para cocultivos. Las estirpes celulares diana H929 (Figura 4A), L363 (Figura 4B) y OPM-2 (Figura 4C) se pretrataron con DMSO (control) o Compuesto 2 (1 nM) durante 72 horas, luego se lavaron y se usaron para cocultivos en relaciones entre linfocitos T efectores (E) y células diana (T) de 1:3, 1:1 y 1:5, respectivamente. Líneas "DMSO-DMSO": tanto células diana como efectoras pretratadas con DMSO (controles). Líneas "Compuesto 2-DMSO": células diana pretratadas con el Compuesto 2, células efectoras pretratadas con DMSO (control). Líneas "DMSO-Compuesto 2": células diana pretratadas con DMSO (control), células efectoras pretratadas con el Compuesto 2. Líneas "Compuesto 2-Compuesto 2": tanto células diana como efectoras pretratadas con el Compuesto 2. El eje y representa el porcentaje de células tumorales vivas normalizado al número de células vivas en ausencia de anticuerpo biespecífico; el eje x muestra el log[concentración] del anticuerpo biespecífico en μM.

La Figura 5 ilustra que el Compuesto 2 potencia la potencia y la máxima destrucción de células diana con anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento. Linfocitos T efectores (CD3+) de tres donantes diferentes se cocultivaron con la estirpe celular diana de MM H929 en relaciones fijas entre linfocitos T efectores (E) y células diana (T) de 1:3, en presencia de DMSO (control) o Compuesto 2 (1 nM) durante 72 horas. El eje y representa el porcentaje de células tumorales vivas normalizado al número de células vivas en ausencia de anticuerpo biespecífico; el eje x muestra el log[concentración] del anticuerpo biespecífico en μM.

La Figura 6 ilustra que el pretratamiento de células de mieloma múltiple resistentes a lenalidomida con el Compuesto 2, pero no con pomalidomida, mejora la potencia y la máxima destrucción de células diana lograda con anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento. La estirpe de células diana H929-1051 se pretrató con DMSO (control), pomalidomida (100 nM) o el Compuesto 2 (1 nM) durante 72 horas, luego se lavó y se usó para cocultivos a una relación entre linfocitos T efectores (E) y células diana (T) de 1:3. El eje y representa el porcentaje de células tumorales vivas normalizado al número de células vivas en ausencia de anticuerpo biespecífico; el eje x muestra el log[concentración] del anticuerpo biespecífico en μM.

C. Compuestos

Para el uso en los métodos en el presente documento se proporciona el compuesto 4-(4-(4-(((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1 -oxoisoindolin-4-il)oxi)metil)bencil)piperazin-1 -il)-3-fluorobenzonitrilo, denominado "Compuesto 1":

o un enantiómero o una mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

También para el uso en los métodos en el presente documento se proporciona el compuesto (S)-4-(4-(4-(((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1 -oxoisoindolin-4-il)oxi)metil)bencil)piperazin-1 -il)-3-fluorobenzonitrilo, denominado "Compuesto 2":

o un tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

También para el uso en los métodos en el presente documento se proporciona el compuesto (R)-4-(4-(4-(((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1 -oxoisoindolin-4-il)oxi)metil)bencil)piperazin-1 -il)-3-fluorobenzonitrilo, denominado "Compuesto 3":

o un tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

D. Preparación del Compuesto 1, Compuesto 2 y Compuesto 3

Los compuestos para el uso en los métodos de tratamiento del mieloma múltiple se pueden preparar por métodos conocidos para un experto en la técnica y siguiendo procedimientos similares a los descritos en la sección de ejemplos en el presente documento y modificaciones rutinarias de los mismos. Un Esquema de reacción a modo de ejemplo para la preparación de los compuestos se ilustra a continuación en el Esquema 1 para el Compuesto 1, Compuesto 2 y Compuesto 3, y Esquema 2 para el Compuesto 2.

Como se muestra en el Esquema 1, la protección del ácido 3-hidroxi-2-metilbenzoico (por, por ejemplo, formación de éster metílico y terc-butil(dimetil)silil éter) fue seguida de bromación, por ejemplo, usando N-bromosuccinimida y azobisisobutironitrilo. La reacción con metil-4,5-diamino-5-oxo-pentanoato, en presencia de una base (tal como DIEA), produjo la formación de isoindolina derivatizada, que fue seguida de desprotección de TBS usando una base, tal como carbonato de potasio. La reacción de la isoindolina derivatizada con 1,4-bis(bromometil)benceno en presencia de una base (tal como carbonato de potasio) fue seguida de la formación de glutarimida en presencia de terc-butóxido de potasio. Finalmente, la reacción con 3-fluoro-4-(piperazin-1-il)benzonitrilo proporcionó el Compuesto 1 diana. La separación quiral proporciona entonces el Compuesto 2 y el Compuesto 3.

Alternativamente, como se ejemplifica en el Esquema 2, la reacción del producto intermedio de 2-(bromometil)-3-[tercbutil(dimetil)silil]oxi-benzoato de metilo con el (4S)-4,5-diamino-5-oxo-pentanoato de terc-butilo quiral, en presencia de una base (tal como DIEA), produjo la formación de isoindolina derivatizada, que fue seguido de desprotección de TBS usando fluoruro de tetrabutilamonio. La reacción de la isoindolina derivatizada con 4-(4-(4-(clorometil)bencil)piperazin-1-il)-3-fluorobenzonitrilo en presencia de una base (tal como carbonato de potasio), seguido de desprotección y formación de glutarimida, proporcionó el Compuesto 2 diana.

Un experto en la técnica sabría cómo modificar los procedimientos expuestos en los esquemas y ejemplos ilustrativos para llegar a los productos deseados.

E. Anticuerpo biespecífico que se une específicamente al BCMA y a CD3

Para el uso en los métodos de tratamiento del mieloma múltiple se proporciona un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humanos y a CD3s (CD3) humano.

Según la invención, el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID n O: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

En una realización, el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID ⁿO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

a) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

b) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

En una realización, la primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20, una región CDR1L de SEQ ID NO:23 y una región CDR2L de SEQ ID NO:24.

En una realización, la primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDr2h de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20, una región CDR1L de SEQ ID NO:25 y una región CDR2L de SEQ ID NO:26.

En una realización, la primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDr2h de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20, una región CDR1L de SEQ ID NO:27 y una región CDR2L de SEQ ID NO:28.

En una realización, el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3^e(CD3) humano, caracterizado por que la primera parte de unión comprende una región VH de SEQ ID NO: 10 y una región VL de SEQ ID NO: 12, una región VH de SEQ ID NO: 10 y una región VL de SEQ ID NO: 13, o una región VH de SEQ ID NO: 10 y una región VL de SEQ ID NO:14.

En una realización, la primera parte de unión comprende una región VH de SEQ ID NO: 10 y una región VL de SEQ ID NO: 12.

En una realización, la primera parte de unión comprende una región VH de SEQ ID NO:10 y una región VL de SEQ ID NO: 13.

En una realización, la primera parte de unión comprende una región VH de SEQ ID NO: 10 y una región VL de SEQ ID NO: 14.

En una realización, la primera parte de unión se caracteriza por que comprende una región VL seleccionada del grupo que consiste en regiones VL de SEQ ID NO: 12, 13 y 14, en donde el aminoácido 49 se selecciona del grupo de aminoácidos tirosina (Y), ácido glutámico (E), serina (S) e histidina (H). En una realización, el aminoácido 49 es E dentro de SEQ ID NO: 12, S dentro de SEQ ID NO: 13 o H dentro de SEQ ID NO: 14.

En una realización, la primera parte de unión se caracteriza por que comprende una región VL seleccionada del grupo que consiste en regiones VL de SEQ ID NO: 12, 13 y 14, en donde el aminoácido 74 es treonina (T) o alanina (A). En una realización, el aminoácido 74 es A dentro de SEQ ID NO: 14.

En una realización, la primera parte de unión se caracteriza por que comprende como VH de BCMA una región VH de SEQ ID NO: 10.

En una realización, la primera parte de unión se caracteriza por que comprende una región VL seleccionada del grupo que consiste en regiones VL de SEQ ID NO: 12, 13 y 14, en donde el aminoácido 49 se selecciona del grupo de aminoácidos tirosina (Y), ácido glutámico (E), serina (S) e histidina (H). En una realización, el aminoácido 49 es E (SEQ ID NO: 12), S (SeQ ID NO: 13) o H (SeQ ID NO: 14). En una realización de la invención, la primera parte de unión se caracteriza por que comprende una región VL seleccionada del grupo que consiste en regiones VL de SEQ ID NO: 12, 13 y 14, en donde el aminoácido 74 es treonina (T) o alanina (A). En una realización, el aminoácido 74 es A dentro de SEQ ID NO: 14.

En una realización, la primera parte de unión se caracteriza por que comprende una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1H, CDR2H, CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de a) región CDR1H de SEQ ID NO:21 y región CDR2H de SEQ ID NO:22, región CDR1L de SEQ ID NO:23, y región CDR2L de SEQ ID NO:24, b) región CDR1H de SEQ ID NO:21 y región CDR2H de SEQ ID NO:22, región CDR1L de SEQ ID NO:25, y región c Dr2L de SEQ ID NO:26,c) región CDR1H de SEQ ID NO:21 y región CDR2H de SEQ ID NO:22, región CDR1L de SEQ ID NO:27, y región CDR2L de SEQ ID NO:28. La primera parte de unión puede comprender: d) región CDR1H de SEQ ID NO:29 y región CDR2H de SEQ ID NO:30, región CDR1L de SEQ ID nO:31, y región CDR2L de SEQ ID NO:32,e) región CDR1H de SEQ ID NO:34 y región CDR2H de SEQ ID NO:35, región CDR1L de SEQ ID NO:31, y región CDR2L de SEQ ID NO:32,y f) región CDR1H de SEQ ID NO:36 y región CDR2H de SEQ ID NO:37, región CDR1L de SEQ ID NO:31 y región CDR2L de SEQ ID NO:32.

La primera parte de unión se puede caracterizar en que comprende como región VH una región VH seleccionada del grupo que consiste en SEQ ID NO:38, 39 y 40. La primera parte de unión se puede caracterizar en que comprende como región VH una región VH de SEQ ID NO:38 y como región VL una región VL de SEQ ID NO:12. La primera parte de unión se puede caracterizar en que comprende como región VH una región VH de SEQ ID NO:39 y como región VL una región VL de SEQ ID NO:12. La primera parte de unión se puede caracterizar en que comprende como región VH una región VH de SEQ ID NO:40 y como región Vl una región VL de SEQ ID NO: 12.

La primera parte de unión se puede caracterizar en que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO: 15, una región CDR2H de SEQ ID NO: 16, una región CDR3H de SEQ ID NO: 17, una región CDR1L de SEQ ID NO: 18, una región CDR2L de SEQ ID NO: 19 y una región CDR3L de SEQ ID NO: 20.

La primera parte de unión puede comprender como regiones CDR3H y CDR3L las mismas regiones CDR que el anticuerpo 83A10 (para el anticuerpo 83A10 véase la Tabla 1A y B después en el texto).

La primera parte de unión se puede caracterizar en que comprende como región VH una región VH de SEQ ID NO:9 y como región VL una región VL de SEQ ID NO:11.

En una realización, el anticuerpo biespecífico comprende no más de un fragmento Fab de una porción de anticuerpo anti-CD3, no más de dos fragmentos Fab de una porción de anticuerpo anti-BCMA y no más de una parte Fc, en una realización una parte Fc humana. En una realización, no más de un fragmento Fab de la porción de anticuerpo anti-CD3 y no más de un fragmento Fab de la porción de anticuerpo anti-BCMA están unidas a la parte Fc y la unión se realiza por unión carboxiterminal del (de los) fragmento(s) Fab a la región bisagra. En una realización, un segundo fragmento Fab de la porción de anticuerpo anti-BCMA se une por su extremo C ya sea al extremo N del fragmento Fab de la porción de anticuerpo anti-CD3 o a la región bisagra de la parte Fc y, por lo tanto, entre la parte Fc y la porción de anticuerpo anti-CD3. Los anticuerpos biespecíficos preferidos se muestran en las Figuras 1A, 1B, 2A a 2D, y 3A a 3D.

Se prefieren especialmente anticuerpos biespecíficos que comprenden solo los fragmentos Fab y la parte Fc como se especifica, con o sin "sustitución de aminoácidos": Fab BCMA-Fc-Fab CD3 (formato biespecífico Figura 1A o Figura 1B), Fab BCMA-Fc-Fab CD3-Fab BCMA (formato biespecífico Figura 2A o Figura 2B), Fab BCMA-Fc-Fab BCMA-Fab CD3 (formato biespecífico Figura 2C o Figura 2D), Fc-Fab CD3-Fab BCMA (formato biespecífico Figura 3A o Figura 3B), Fc-Fab BCMA-Fab CD3 (formato biespecífico Figura 3C o Figura 3D).

Como se muestra en las Figuras 1A, 1B, 2A a 2D, y 3A a 3D, "Fab BCMA-Fc, "Fab BCMA-Fc-Fab CD3" y "Fab BCMA-Fc-Fab CD3" significa que el (los) fragmento(s) Fab se une(n) por su(s) extremo(s) C al extremo N del fragmento Fc. "Fab CD3-Fab BCMA" significa que el fragmento Fab CD3 se une con su extremo N al extremo C del fragmento Fab BCMA. "Fab BCMA - Fab CD3" significa que el fragmento Fab BCMA se une con su extremo N al extremo C del fragmento Fab CD3.

En una realización, el anticuerpo biespecífico comprende un segundo fragmento Fab de dicho anticuerpo anti-BCMA unido con su extremo C al extremo N de la porción CD3 de anticuerpo de dicho anticuerpo biespecífico. En una realización, un dominio VL de dicha primera porción de anticuerpo anti-CD3 se une a un dominio CH1 o CL de dicho segundo anticuerpo anti-BCMA.

En una realización, el anticuerpo biespecífico comprende un segundo fragmento Fab de dicho anticuerpo anti-BCMA unido con su extremo C a la parte Fc (como el primer fragmento Fab de dicho anticuerpo anti-BCMA) y unido con su extremo N al extremo C de la porción de anticuerpo CD3. En una realización, un dominio CH1 de dicha porción de anticuerpo anti-CD3 se une al dominio VH de dicha segunda porción de anticuerpo anti-BCMA.

En una realización, el anticuerpo biespecífico comprende una parte Fc unida con su extremo N al extremo C de dicho fragmento Fab de anticuerpo CD3. En una realización, el anticuerpo biespecífico comprende una parte Fc unida con su primer extremo N al extremo C de dicho fragmento Fab de anticuerpo CD3 y un segundo fragmento Fab de dicho anticuerpo anti-BCMA unido con su extremo C al segundo extremo N de la parte Fc. En una realización, el dominio CL del fragmento Fab de anticuerpo CD3 se une a la región bisagra de la parte Fc. En una realización, el dominio CH1 del fragmento Fab de anticuerpo BCMA se une a la región bisagra de la parte Fc.

Los fragmentos Fab se unen juntos usando un conector apropiado según el estado de la técnica. En una realización, se usa un conector (Gly4-Ser1)₃(Desplancq DK et al., Protein Eng. agosto 1994;7(8): 1027-33 y Mack M. et al., PNAS, 18 de julio de 1995 vol. 92 no. 157021 -7025). Como el conector es un conector peptídico, dicha unión covalente se realiza normalmente por medios recombinantes bioquímicos, usando un ácido nucleico que codifica los dominios VL y/o VH de los fragmentos Fab respectivos, el conector y, si procede, la cadena de parte Fc.

En una realización, el anticuerpo anti-CD3s comprende un dominio variable VH que comprende las CDR de cadena pesada de SEQ ID NO: 1, 2 y 3 como, respectivamente, CDR1H, CDR2H y CDR3H de cadena pesada y un dominio variable VL que comprende las CDR de cadena ligera de SEQ ID NO: 4, 5 y 6 como, respectivamente, CDR1L, CDR2L y CDR3L de cadena ligera. En una realización, el anticuerpo comprende los dominios variables de SEQ ID NO:7 (VH) y SEQ ID NO:8 (VL).

En una realización, el anticuerpo biespecífico se caracteriza por que los dominios variables de la porción de anticuerpo anti-CD3 son de SEQ ID NO:7 y 8.

En una realización de la invención, el anticuerpo biespecífico se caracteriza por que la porción de anticuerpo anti-CD3 (la segunda parte de unión del anticuerpo biespecífico) se une en su extremo N al extremo C de una porción de anticuerpo anti-BCMA (la primera parte de unión del anticuerpo biespecífico) y los dominios variables VL y VH de la porción de anticuerpo anti-CD3 o los dominios constantes CL y CH1 están sustituidos entre sí.

En una realización, el dominio VH de dicha porción de anticuerpo anti-CD3 se une a un dominio CH1 o CL de dicha porción de anticuerpo anti-BCMA. En una realización, un dominio VL de dicha porción de anticuerpo anti-CD3 se une a un dominio CH1 o CL de dicha porción de anticuerpo anti-BCMA.

Dicha porción de anticuerpo es en una realización un fragmento Fab del anticuerpo respectivo.

El anticuerpo biespecífico contra BCMA y CD3 se caracteriza por una realización en que comprende

a) una cadena ligera y cadena pesada de un anticuerpo que se une específicamente a una de dichas dianas CD3 y BCMA; y

b) una cadena ligera y cadena pesada de un anticuerpo que se une específicamente a la otra de dichas dianas, en donde los dominios variables VL y VH o los dominios constantes CL y CH1 se sustituyen entre sí.

En una realización, un dominio VH de dicha porción de anticuerpo anti-CD3 se une a un dominio CH1 o CL de dicha porción de anticuerpo anti-BCMA. En una realización, un dominio VL de dicha porción de anticuerpo anti-CD3 se une a un dominio CH1 o CL de dicha porción de anticuerpo anti-BCMA.

En una realización adicional, el anticuerpo biespecífico, en donde los dominios variables VL y VH en la cadena ligera y la cadena pesada respectiva de la porción de anticuerpo anti-CD3 o la porción de anticuerpo anti-BCMA están sustituidos entre sí, se caracteriza por que comprende un dominio constante CL de la porción de anticuerpo anti-CD3 o la porción de anticuerpo anti-BCMA, en donde el aminoácido en la posición 124 está sustituido independientemente por lisina (K), arginina (R) o histidina (H) (numeración según Kabat), y en el dominio constante CH1 respectivo el aminoácido en la posición 147 y el aminoácido en la posición 213 están sustituidos independientemente por ácido glutámico (E), o ácido aspártico (D). En una realización, el anticuerpo es monovalente para la unión de CD3. En una realización, además de la sustitución de aminoácidos en la posición 124 en el dominio constante CL, el aminoácido en la posición 123 está sustituido independientemente por lisina (K), arginina (R) o histidina (H) (denominado adicionalmente "intercambio de variante de carga"). En una realización, el anticuerpo es monovalente para la unión de CD3 y el aminoácido 124 es K, el aminoácido 147 es E, el aminoácido 213 es E y el aminoácido 123 es R. En una realización, el anticuerpo biespecífico comprende además la misma porción de unión anti-BCMA una vez más (en una realización un fragmento Fab). Esto significa, por tanto, que si la primera porción de unión anti-BCMA comprende el intercambio de variante de carga, entonces la segunda porción de unión anti-BCMA comprende el mismo intercambio de variante de carga. (Toda la numeración de aminoácidos es según Kabat).

En una realización, el anticuerpo biespecífico se caracteriza por que comprende

a) la primera cadena ligera y la primera cadena pesada de un primer anticuerpo que se une específicamente a BCMA;

y

b) la segunda cadena ligera y la segunda cadena pesada de un segundo anticuerpo que se une específicamente a CD3, y en donde los dominios variables VL y VH en la segunda cadena ligera y segunda cadena pesada del segundo anticuerpo están sustituidos entre sí; y

c) en donde en el dominio constante CL de la primera cadena ligera en a) el aminoácido en la posición 124 está sustituido independientemente por lisina (K), arginina (R) o histidina (H) (numeración según Kabat), y en donde en el dominio constante CH1 de la primera cadena pesada en a) el aminoácido en la posición 147 y el aminoácido en la posición 213 están sustituidos independientemente por ácido glutámico (E), o ácido aspártico (D) (numeración según Kabat) (véanse, por ejemplo, las Figuras 1A, 2A, 2C, 3A, 3C).

En una realización, dicho anticuerpo biespecífico descrito en el último párrafo precedente se caracteriza además por que dicho anticuerpo biespecífico comprende además un fragmento Fab de dicho primer anticuerpo (denominado adicionalmente también "BCMA-Fab") y en el dominio constante CL dicho BCMA-Fab el aminoácido en la posición 124 está sustituido independientemente por lisina (K), arginina (R) o histidina (H) (numeración según Kabat), y en donde en el dominio constante CH1 de dicho BCMA-Fab el aminoácido en las posiciones 147 y el aminoácido en la posición 213 está sustituido independientemente por ácido glutámico (E), o ácido aspártico (D) (numeración según Kabat) (véanse, por ejemplo, las Figuras 2A, 2C).

En una realización de la invención, el anticuerpo biespecífico consiste en un CD3-Fab, y un BCMA-Fab y una parte Fc, en donde CD3-Fab y BCMA-Fab se unen por sus extremos C a la región bisagra de dicha parte Fc y un segundo BCMA-Fab, que se une con su extremo C al extremo N de CD3-Fab. CD3-Fab comprende híbrido y o CD3-Fab o ambos BCMA-Fab comprenden sustitución de aminoácidos (Figuras 2A y 2B). Especialmente se prefiere un anticuerpo biespecífico que comprende BCMA-Fab-Fc-CD3-Fab-BCMA-Fab, en donde ambos BCMA-Fab comprenden sustitución de aminoácidos y CD3-Fab comprende el híbrido VLNH (Figura 2A). Especialmente se prefiere un anticuerpo biespecífico que consiste en BCMA-Fab-Fc-CD3-Fab-BCMA-Fab, en donde ambos BCMA-Fab comprenden la sustitución de aminoácidos Q124K, E123R, K147E y K₂13E y CD3-Fab comprende el híbrido VLNH. Especialmente se prefiere que ambos BCMA-Fab comprendan como CDR las CDR de anticuerpo 21,22 o 42, o como VHNL la VHNL de anticuerpo 21, 22 o 42 (para los anticuerpos 21,22 y 42 véase la Tabla 1A y B después en el texto).

El primer y un segundo fragmento Fab de un anticuerpo que se une específicamente al BCMA derivan en una realización del mismo anticuerpo y en una realización son idénticos en las secuencias de CDR, secuencias del dominio variable VH y VL y/o secuencias del dominio constante CH1 y CL. En una realización, las secuencias de aminoácidos del primer y un segundo fragmento Fab de un anticuerpo que se une específicamente al BCMA son idénticas. En una realización, el anticuerpo contra BCMA es un anticuerpo que comprende las secuencias de CDR de anticuerpo 21,22 o 42, un anticuerpo que comprende las secuencias VH y VL de anticuerpo 21, 22 o 42, o un anticuerpo que comprende las secuencias VH, Vl , CH1 y CL de anticuerpo 21,22 o 42.

y

b) la segunda cadena ligera y la segunda cadena pesada de un segundo anticuerpo que se une específicamente a CD3, y en donde los dominios variables VL y VH en la segunda cadena ligera y segunda cadena pesada del segundo anticuerpo están sustituidos entre sí; y en donde

c) en el dominio constante CL de la segunda cadena ligera en b) el aminoácido en la posición 124 está sustituido independientemente por lisina (K), arginina (R) o histidina (H) (numeración según Kabat), y en donde en el dominio constante CH1 de la segunda cadena pesada en b) el aminoácido en las posiciones 147 y el aminoácido en la posición 213 están sustituidos independientemente por ácido glutámico (E), o ácido aspártico (D) (numeración según Kabat).

En una realización, además de la sustitución de aminoácido en la posición 124 en el dominio constante CL de la primera o segunda cadena ligera, el aminoácido en la posición 123 está sustituido independientemente por lisina (K), arginina (R) o histidina (H).

En una realización en el dominio constante CL, el aminoácido en la posición 124 está sustituido por lisina (K), en el dominio constante CH1 el aminoácido en la posición 147 y el aminoácido en la posición 213 están sustituidos por ácido glutámico (E). En una realización además en el dominio constante CL en el aminoácido en la posición 123 está sustituido por arginina (R).

En una realización, el anticuerpo biespecífico consiste en dos BCMA-Fab y una parte Fc, en donde un BCMA-Fab y el CD3 Fab se unen por sus extremos C a la región bisagra de dicha parte Fc y la segunda BCMA-Fab se une con su extremo C al extremo N de CD3-Fab. CD3-Fab comprende híbrido y o CD3-Fab o ambos BCMA-Fab comprenden sustitución de aminoácidos (Figuras 2A y 2B).

En una realización, el anticuerpo biespecífico se caracteriza por que el dominio CH₃de una cadena pesada y el dominio CH₃de la otra cadena pesada se encuentran cada uno en una interfase que comprende una interfase original entre los dominios CH₃de anticuerpo; en donde dicha interfase se altera para promover la formación del anticuerpo biespecífico, en donde la alteración se caracteriza por que:

a) se altera el dominio CH₃de una cadena pesada, de manera que, dentro de la interfase original el dominio CH₃de una cadena pesada que se encuentra con la interfase original del dominio CH₃de la otra cadena pesada dentro del anticuerpo biespecífico, un resto de aminoácido se sustituya por un resto de aminoácido que tiene un volumen de cadena lateral mayor, generando así una protuberancia dentro de la interfase del dominio CH₃de una cadena pesada que es posicionable en una cavidad dentro de la interfase del dominio CH₃de la otra cadena pesada y

b) se altera el dominio CH₃de la otra cadena pesada, de manera que, dentro de la interfase original del segundo dominio CH₃que se encuentra con la interfase original del primer dominio CH₃dentro del anticuerpo biespecífico, un resto de aminoácido se sustituya por un resto de aminoácido que tiene un volumen de cadena lateral más pequeño, generando así una cavidad dentro de la interfase del segundo dominio CH₃dentro del cual es posicionable una protuberancia dentro de la interfase del primer dominio CH₃.

En una realización, el anticuerpo biespecífico se caracteriza por que dicho resto de aminoácido que tiene un volumen de cadena lateral más grande se selecciona del grupo que consiste en arginina (R), fenilalanina (F), tirosina (Y), triptófano (W).

En una realización, el anticuerpo biespecífico se caracteriza por que dicho resto de aminoácido que tiene un volumen de cadena lateral más pequeño se selecciona del grupo que consiste en alanina (A), serina (S), treonina (T), valina (V).

En una realización, dicho anticuerpo biespecífico se caracteriza por que ambos dominios CH₃se alteran adicionalmente por la introducción de cisteína (C) como aminoácido en las posiciones correspondientes de cada dominio CH₃.

En una realización, dicho anticuerpo biespecífico se caracteriza por que uno de los dominios CH₃de la cadena pesada constante de ambas cadenas pesadas está sustituido por un dominio CH1 de la cadena pesada constante; y el otro dominio CH₃de la cadena pesada constante está sustituido por un dominio CL de la cadena ligera constante.

En una realización, el anticuerpo biespecífico comprende una parte Fc modificada que induce la muerte celular del 20 % 0 más células de un preparado de BCMA que expresa células después de 24 horas a una concentración de dicho anticuerpo de 100 nM por ADCC con respecto a un control en condiciones idénticas usando el mismo anticuerpo que la parte Fc parental como control. Dicho anticuerpo es en una realización un anticuerpo desnudo.

En una realización, el anticuerpo biespecífico es un anticuerpo con una cantidad de fucosa del 60 % o menos de la cantidad total de oligosacáridos (azúcares) en Asn297 (véase, por ejemplo, el documento de patente US20120315268)

En una realización, la parte Fc comprende las sustituciones de aminoácidos que se introducen en una parte Fc humana y se desvelan en SEQ ID NO:55 y 56.

El anticuerpo anti-BCMA puede ser Mab21, Mab22, Mab42, Mab27, Mab33 y Mab39 (para los anticuerpos Mab 21, 22, 42, 27, 33, 39, véanse las Tablas 1A y B después en el texto) como se describe en el presente documento por sus secuencias de CDR, y/o secuencias de VHNL junto con las secuencias de CL y CH1 descritas. En una realización, el anticuerpo biespecífico comprende una parte Fc o no, especialmente el formato 2+1, y las cadenas pesadas y ligeras del anticuerpo biespecífico son especialmente como se describe en la Tabla 1A.

El anticuerpo anti-BCMA reduce, en el formato biespecífico, especialmente en el formato 2+1, las células plasmáticas malignas humanas en aspirados de médula ósea de MM hasta al menos 80 % después de un tratamiento de 48 horas en una concentración de entre 10 nM y 1 fM, ambos incluidos. Los anticuerpos anti-BCMA se han caracterizado por inmunopurificación de una biblioteca de presentación en fagos de cadenas pesadas variables (VH) y una de cadenas ligeras variables (VL) del anticuerpo 83A10 (biblioteca VH, biblioteca VL) con BCMA de macaco cangrejero 1 - 50 nM en 1 -3 rondas y seleccionando una cadena ligera variable y una cadena pesada variable que tiene dichas propiedades como dicho ligante de linfocitos T biespecífico. Preferentemente, la inmunopurificación se realiza en 3 rondas, usando BCMA de cangrejero 50 nM para la ronda 1, BCMA de cangrejero 25 nM para la ronda 2 y BCMA de cangrejero 10 nM para la ronda 3. Preferentemente, las bibliotecas se aleatorizan en o CDR1 y CDR2 de cadena ligera o CDR1 y CDR2 de cadena pesada. Preferentemente, se identifican una cadena ligera y pesada que se une cada una como fragmento Fab, que comprende además VH o VL correspondientes del anticuerpo 83A10, a huBCMA con una Kd de 50 μM a 5 nM y a BCMA de cangrejero con una Kd de 0,1 nM a 20 nM. Preferentemente, el formato biespecífico es el formato de la Figura 2A, que comprende los dominios constantes VL y VH respectivos de la sustitución de Fab CD3 entre sí y dentro de ambos Fab BCMA los intercambios de aminoácido K₂13E y K147E en el dominio CH1 y los intercambios de aminoácido E123R y Q124K en el dominio CL.

El anticuerpo biespecífico como se mencionó en el presente documento se puede preparar por las etapas de transformación de una célula hospedadora con vectores que comprenden moléculas del ácido nucleico que codifica la cadena ligera y cadena pesada de dicha molécula de anticuerpo, cultivo de la célula hospedadora en condiciones que permitan la síntesis de dicha molécula de anticuerpo; y recuperación de dicha molécula de anticuerpo de dicho cultivo.

El anticuerpo biespecífico como se mencionó en el presente documento se puede preparar por las etapas de transformación de una célula hospedadora con vectores que comprenden moléculas del ácido nucleico que codifican la cadena ligera y cadena pesada de un anticuerpo que se une específicamente a los primeros vectores diana que comprenden moléculas del ácido nucleico que codifican la cadena ligera y cadena pesada de un anticuerpo que se une específicamente a la segunda diana, en donde los dominios variables VL y VH o los dominios constantes CL y CH1 están sustituidos entre sí; cultivo de la célula hospedadora en condiciones que permiten la síntesis de dicha molécula de anticuerpo; y recuperación de dicha molécula de anticuerpo de dicho cultivo.

En una realización, el anticuerpo biespecífico se une específicamente al dominio extracelular de BCMA humano y a CD3s humano, caracterizado por que comprende un conjunto de cadena pesada y ligera seleccionado del grupo que consiste en polipéptidos

i) SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:49, SEQ ID NO:50 y SEQ ID NO:51 (2x) (conjunto 1 TCB de anticuerpo 21),

ii) SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:52, SEQ ID NO:53 y SEQ ID NO:54 (2x) (conjunto 2 TCB de anticuerpo 22), y

iii) SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:55, SEQ ID NO:56 y SEQ ID NO:57 (2x) (conjunto 3 TCB de anticuerpo 42).

En una realización, el anticuerpo biespecífico se une específicamente al dominio extracelular de BCMA humano y a CD3s humano, caracterizado por que comprende un conjunto de cadena pesada y ligera seleccionado del grupo que consiste en los polipéptidos S^eQ ID NO:48, S^eQ ID NO:49, SEQ ID NO:50 y SEQ ID NO:51(2x) (conjunto 1 TCB de anticuerpo 21).

En una realización, el anticuerpo biespecífico se une específicamente al dominio extracelular de BCMA humano y a CD3s humano, caracterizado por que comprende un conjunto de cadena pesada y ligera seleccionado del grupo que consiste en los polipéptidos S^eQ ID NO 48, S^eQ ID NO:52, SEQ ID NO:53 y SEQ ID NO:54 (2x) (conjunto 2 TCB de anticuerpo 22).

En una realización, el anticuerpo biespecífico se une específicamente al dominio extracelular de BCMA humano y a CD3s humano, caracterizado por que comprende un conjunto de cadena pesada y ligera seleccionado del grupo que consiste en los polipéptidos S^eQ ID NO 48, SEQ ID NO:55, SEQ ID NO:56 y SEQ ID NO:57(2x) (conjunto 3 TCB de anticuerpo 42).

Tabla 1A: Secuencias de anticuer os

Tabla 1B: Secuencias de anticuer os lista corta

Tabla 2A: Construcciones adicionales

Tabla 2B: Construcciones adicionales

Para realizar los siguientes TCB anti-BCMNanti-CD3 que contienen Fc (2+1), se usaron las construcciones/ID de secuencia respectivas mencionadas en la Tabla 2B anterior:

83A10-TCBcv: 45, 46, 47 (x2), 48 (Figura 2A)

21- TCBcv: 48, 49, 50, 51 (x2) (Figura 2A)

22- TCBcv: 48, 52, 53, 54 (x2) (Figura 2A)

42-TCBcv: 48, 55, 56, 57 (x2) (Figura 2A)

F. Métodos de tratamiento y prevención y compuestos para el uso en dichos métodos

Los Compuestos 1, 2 y 3 y sus enantiómeros, mezclas de enantiómeros, tautómeros, isotopólogos, o sales farmacéuticamente aceptables, como se proporcionan en el presente documento, en combinación con el anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento, se pueden usar en todos los métodos de tratamiento que se proporcionan en el presente documento.

Un método de tratamiento del mieloma múltiple comprende administrar a un paciente el Compuesto 1, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento, en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

En el presente documento se proporciona un compuesto para el uso en un método de tratamiento del mieloma múltiple, en donde el compuesto es el Compuesto 1, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde el método comprende administrar a un paciente el Compuesto 1, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3^s(CD3) humano proporcionado en el presente documento, en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

Además, un método de tratamiento del mieloma múltiple comprende administrar a un paciente el Compuesto 2, o un tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento, en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región ^cD^r1H de SEQ ID NO:21, una región ^cD^r2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

En el presente documento se proporciona un compuesto para el uso en un método de tratamiento del mieloma múltiple, en donde el compuesto es el Compuesto 2, o tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde el método comprende administrar a un paciente el Compuesto 2, o un tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento, en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

Además, un método de tratamiento del mieloma múltiple, comprende administrar a un paciente el Compuesto 3, o un tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento, en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región c Dr 1H de SEQ ID NO:21, una región c Dr 2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

En el presente documento se proporciona un compuesto para el uso en un método de tratamiento del mieloma múltiple, en donde el compuesto es el Compuesto 3, o tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde el método comprende administrar a un paciente el Compuesto 3, o un tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento, en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

Además, un método de prevención de mieloma múltiple, que comprende administrar a un paciente un compuesto proporcionado en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento, en donde el anticuerpo biespecífico se caracteriza por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

En el presente documento se proporciona un compuesto para el uso en un método de prevención de mieloma múltiple, en donde el compuesto es un compuesto proporcionado en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde el método comprende administrar a un paciente un compuesto proporcionado en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento, en donde el anticuerpo biespecífico se caracteriza por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

Un método de abordaje del mieloma múltiple comprende administrar a un paciente un compuesto proporcionado en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento, en donde el anticuerpo biespecífico se caracteriza por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

En el presente documento se proporciona un compuesto para el uso en un método de abordaje de mieloma múltiple, en donde el compuesto es un compuesto proporcionado en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde el método comprende administrar a un paciente un compuesto proporcionado en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento, en donde el anticuerpo biespecífico se caracteriza por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

Los métodos de inducción de una respuesta terapéutica evaluada por los Criterios Uniformes Internacionales de Respuesta para Mieloma múltiple (IURC) (véase Durie BGM, Harousseau J-L, Miguel JS, et al International uniform response criteria for multiple myeloma. Leukemia, 2006; (10) 10: 1-7) de un paciente comprenden administrar una cantidad eficaz de un compuesto descrito en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento, a un paciente que tiene mieloma múltiple, opcionalmente en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

Los métodos de inducción de una respuesta terapéutica evaluada con los criterios consenso del Grupo de Trabajo Internacional (IMWG) para la evaluación de respuesta y enfermedad mínima residual (Rajkumar et al., Blood, 2011, 117(18):4691 -5; Kumar et al., Lancet Oncol., 2016,17(8):e328-e346) de un paciente comprenden administrar una cantidad eficaz de un compuesto descrito en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3e (CD3) humano proporcionado en el presente documento, a un paciente que tiene mieloma múltiple, opcionalmente en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3e (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

En el presente documento se proporciona un compuesto para el uso en métodos de inducción de una respuesta terapéutica evaluada en los Criterios Uniformes Internacionales de Respuesta para Mieloma múltiple (IURC) (véase Durie BGM, Harousseau J-L, Miguel JS, et al. International uniform response criteria for multiple myeloma. Leukemia, 2006; (10) 10: 1-7) de un paciente, en donde el compuesto es un compuesto proporcionado en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde los métodos comprenden administrar una cantidad eficaz de un compuesto descrito en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3e (CD3) humano proporcionado en el presente documento, a un paciente que tiene mieloma múltiple, en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3^e(CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de s Eq ID n O: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

En el presente documento se proporciona un compuesto para el uso en métodos de inducción de una respuesta terapéutica evaluada con los criterios consenso del Grupo de Trabajo Internacional de Mieloma (IMWG) para la evaluación de la respuesta y enfermedad mínima residual (Rajkumar et al., Blood, 2011, 117(18):4691 -5; Kumar et al., Lancet Oncol., 2016,17(8):e328-e346) de un paciente, en donde el compuesto es un compuesto proporcionado en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde los métodos comprenden administrar una cantidad eficaz de un compuesto descrito en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3e (CD3) humano proporcionado en el presente documento, a un paciente que tiene mieloma múltiple, en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3e (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de ^sE^qID NO:17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

Los métodos de logro de una respuesta completa rigurosa, respuesta completa o respuesta parcial muy buena, como se ha determinado por los Criterios Uniformes Internacionales para Mieloma múltiple (IURC) en un paciente, comprenden administrar una cantidad eficaz de un compuesto descrito en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento a un paciente que tiene mieloma múltiple, opcionalmente en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

Los métodos de logro de una negatividad de EMR sostenida, negatividad de EMR por flujo, negatividad de EMR por secuenciación, obtención de imágenes más negatividad de EMR, respuesta completa rigurosa, respuesta completa, o respuesta parcial muy buena, como se ha determinado por los criterios consenso del Grupo Internacional de Trabajo del Mieloma (IMWG) para la evaluación de la respuesta y enfermedad mínima residual en un paciente, comprenden administrar una cantidad eficaz de un compuesto descrito en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento a un paciente que tiene mieloma múltiple, opcionalmente en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

En el presente documento se proporciona un compuesto para el uso en métodos de logro de una respuesta completa rigurosa, respuesta completa, o respuesta parcial muy buena, como se ha determinado por los Criterios Uniformes Internacionales para Mieloma múltiple (IURC) en un paciente, en donde el compuesto es un compuesto proporcionado en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde los métodos comprenden administrar una cantidad eficaz de un compuesto descrito en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento a un paciente que tiene mieloma múltiple, en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de ^sE^qID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

En el presente documento se proporciona un compuesto para el uso en métodos de logro de una negatividad de EMR sostenida, negatividad de EMR por flujo, negatividad de EMR por secuenciación, obtención de imágenes más negatividad de EMR, respuesta completa rigurosa, respuesta completa, o respuesta parcial muy buena, como se ha determinado por los criterios consenso del Grupo de Trabajo Internacional del Mieloma (IMWG) para la evaluación de la respuesta y enfermedad mínima residual en un paciente, en donde el compuesto es un compuesto proporcionado en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde los métodos comprenden administrar una cantidad eficaz de un compuesto descrito en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento a un paciente que tiene mieloma múltiple, en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

Los métodos de logro de un aumento en la supervivencia global, supervivencia sin progresión, supervivencia sin episodios, tiempo hasta la progresión o supervivencia sin enfermedad en un paciente, comprenden administrar una cantidad eficaz de un compuesto descrito en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3^s(CD3) humano proporcionado en el presente documento a un paciente que tiene mieloma múltiple, opcionalmente en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

En otro aspecto, en el presente documento se proporciona un compuesto para el uso en métodos de logro de un aumento en la supervivencia global, supervivencia sin progresión, supervivencia sin episodios, tiempo hasta la progresión, o supervivencia sin enfermedad en un paciente, en donde el compuesto es un compuesto proporcionado en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde los métodos comprenden administrar una cantidad eficaz de un compuesto descrito en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento a un paciente que tiene mieloma múltiple, en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

Los métodos de logro de un aumento en supervivencia global en un paciente comprenden administrar una cantidad eficaz de un compuesto descrito en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento a un paciente que tiene mieloma múltiple, opcionalmente en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

En otro aspecto, en el presente documento se proporciona un compuesto para el uso en métodos de logro de un aumento en la supervivencia global en un paciente, en donde el compuesto es un compuesto proporcionado en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde los métodos comprenden administrar una cantidad eficaz de un compuesto descrito en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento a un paciente que tiene mieloma múltiple, en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

Los métodos de logro de un aumento en supervivencia sin progresión en un paciente, que comprende administrar una cantidad eficaz de un compuesto descrito en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento a un paciente que tiene mieloma múltiple, opcionalmente en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID n O: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

En otro aspecto, en el presente documento se proporciona un compuesto para el uso en métodos de logro de un aumento en la supervivencia sin progresión en un paciente, en donde el compuesto es un compuesto proporcionado en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde los métodos comprenden administrar una cantidad eficaz de un compuesto descrito en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento a un paciente que tiene mieloma múltiple, en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

Los métodos de logro de un aumento en supervivencia sin episodios en un paciente comprenden administrar una cantidad eficaz de un compuesto descrito en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento a un paciente que tiene mieloma múltiple, opcionalmente en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

En otro aspecto, en el presente documento se proporciona un compuesto para el uso en métodos de logro de un aumento en la supervivencia sin episodios en un paciente, en donde el compuesto es un compuesto proporcionado en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde los métodos comprenden administrar una cantidad eficaz de un compuesto descrito en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento a un paciente que tiene mieloma múltiple, en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

Los métodos de logro de un aumento en el tiempo hasta la progresión en un paciente, comprenden administrar una cantidad eficaz de un compuesto descrito en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento a un paciente que tiene mieloma múltiple, opcionalmente en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID n O: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

En otro aspecto, en el presente documento se proporciona un compuesto para el uso en métodos de logro de un aumento en el tiempo hasta la progresión en un paciente, en donde el compuesto es un compuesto proporcionado en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde los métodos comprenden administrar una cantidad eficaz de un compuesto descrito en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3e (CD3) humano proporcionado en el presente documento a un paciente que tiene mieloma múltiple, en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3e (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

Los métodos de logro de un aumento en la supervivencia sin enfermedad en un paciente, comprenden administrar una cantidad eficaz de un compuesto descrito en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3^e(CD3) humano proporcionado en el presente documento a un paciente que tiene mieloma múltiple, opcionalmente en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3^e(CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID ⁿO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

En otro aspecto, en el presente documento se proporciona un compuesto para el uso en métodos de logro de un aumento en la supervivencia sin enfermedad en un paciente, en donde el compuesto es un compuesto proporcionado en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde los métodos comprenden administrar una cantidad eficaz de un compuesto descrito en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3^e(CD3) humano proporcionado en el presente documento a un paciente que tiene mieloma múltiple, en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3e (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

En algunas realizaciones, los pacientes han sido tratados previamente para el mieloma múltiple, pero no son sensibles a las terapias habituales, o no han sido previamente tratados. En algunas realizaciones, los pacientes se han sometido a cirugía en un intento por tratar el mieloma múltiple, o no se han sometido. En algunas realizaciones, los pacientes se han sometido previamente a una terapia de trasplante, o no se han sometido. En el presente documento también se proporciona un compuesto para el uso en métodos de tratamiento de pacientes que han sido tratados previamente para el mieloma múltiple, pero no son sensibles a terapias habituales, así como aquellos que no han sido tratados previamente. Se engloba además un compuesto para el uso en los métodos de tratamiento de pacientes que se han sometido a cirugía en un intento por tratar el mieloma múltiple, así como aquellos que no se han sometido. En el presente documento también se proporciona un compuesto para el uso en métodos de tratamiento de pacientes que se han sometido previamente a terapia de trasplante, así como los que no se han sometido.

Los métodos incluyen tratamiento del mieloma múltiple que es recidivante, insensible o resistente. Los métodos incluyen la prevención del mieloma múltiple que es recidivante, insensible o resistente. Los métodos incluyen el abordaje del mieloma múltiple que es recidivante, insensible o resistente. En algunas de dichas realizaciones, el mieloma es mieloma múltiple de recaída primaria, secundaria, terciaria, cuádruple o quíntuple. Los métodos incluyen el tratamiento del mieloma múltiple que es mieloma múltiple recién diagnosticado (incluyendo mieloma múltiple recién diagnosticado de riesgo bajo, riesgo medio y riesgo alto). Los métodos incluyen la prevención del mieloma múltiple que es mieloma múltiple recién diagnosticado (incluyendo mieloma múltiple recién diagnosticado de riesgo bajo, riesgo medio y riesgo alto). Los métodos incluyen el abordaje del mieloma múltiple que es mieloma múltiple recién diagnosticado (incluyendo mieloma múltiple recién diagnosticado de riesgo bajo, riesgo medio y riesgo alto). En una realización, los métodos reducen, mantienen o eliminan la enfermedad mínima residual (EMR). En una realización, los métodos engloban tratar, prevenir o abordar diversos tipos de mieloma múltiple, tales como gammapatía monoclonal de significado incierto (GMSI), mieloma múltiple de riesgo bajo, riesgo medio y riesgo alto, mieloma múltiple que cumple los requisitos para trasplante y que no cumple los requisitos para trasplante, mieloma múltiple asintomático (indolente) (incluyendo mieloma múltiple asintomático de riesgo bajo, riesgo medio y riesgo alto), mieloma múltiple activo, plasmocitoma solitario, plasmocitoma extramedular, leucemia de células plasmáticas, mieloma múltiple del sistema nervioso central, mieloma de cadenas ligeras, mieloma no secretor; mieloma de inmunoglobulina D y mieloma de inmunoglobulina E, administrando una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto descrito en el presente documento. En una realización, el mieloma múltiple es leucemia de células plasmáticas. En otra realización, los métodos engloban tratar, prevenir o abordar el mieloma múltiple, caracterizado por anomalías genéticas, tales como translocaciones de ciclina D (por ejemplo, t(11 ;14)(q13;q32); t(6;14)(p21;32); t(12;14)(p13;q32); o t(6;20);); translocaciones de MMSET (por ejemplo, t(4;14)(p16;q32)); translocaciones de Ma F (por ejemplo, t(14;16)(q32;q32); t(20;22); t(16; 22)(q11;q13); o t(14;20)(q32;q11)); u otros factores cromosómicos (por ejemplo, deleción de 17p13, o cromosoma 13; del(17/17p), no hiperdiploidía, y ganancia de (1q)), administrando una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto descrito en el presente documento. En un aspecto, los métodos comprenden administrar una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento, en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región ^cD^r1H de S^eQ ID NO:21, una región ^cD^r2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO:17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

En otro aspecto, los métodos comprenden administrar una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 2, o un tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento, en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región c Dr 1H de SeQ ID NO:21, una región c Dr 2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO:17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

En otro aspecto, los métodos comprenden administrar una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 3, o un tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento, en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región c Dr 1H de SeQ ID NO:21, una región c Dr 2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO:17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

En una realización, el mieloma múltiple de riesgo alto es mieloma múltiple que ha recaído en los 12 meses desde el primer tratamiento. En otra realización más, el mieloma múltiple de riesgo alto es mieloma múltiple que se caracteriza por anomalías genéticas, por ejemplo, una o más de del(17/17p) y t(14;16)(q32;q32).

En algunas de dichas realizaciones, el mieloma múltiple es mieloma múltiple recién diagnosticado que cumple los requisitos para trasplante. En otra realización, el mieloma múltiple es mieloma múltiple recién diagnosticado que no cumple los requisitos para trasplante. En aún otras realizaciones, el mieloma múltiple se caracteriza por progresión temprana (por ejemplo, inferior a 12 meses) tras el tratamiento inicial. En otras realizaciones más, el mieloma múltiple se caracteriza por progresión temprana (por ejemplo, inferior a 12 meses) tras el trasplante de células madre autólogas. En otra realización, el mieloma múltiple es insensible o resistente a lenalidomida. En otra realización, el mieloma múltiple es insensible a lenalidomida. En otra realización, el mieloma múltiple es resistente a lenalidomida. En otra realización, el mieloma múltiple es insensible o resistente a pomalidomida. En otra realización, el mieloma múltiple es insensible a pomalidomida. En otra realización, el mieloma múltiple es resistente a pomalidomida. En algunas de dichas realizaciones, se predice que el mieloma múltiple es insensible a pomalidomida (por ejemplo, por caracterización molecular). En otra realización, el mieloma múltiple es recidivante o insensible a 3 o más tratamientos y se expuso a un inhibidor del proteasoma (por ejemplo, bortezomib, carfilzomib, ixazomib, oprozomib o marizomib) y un compuesto inmunomodulador (por ejemplo, talidomida, lenalidomida, pomalidomida, CC122 o CC₂20), o doblemente insensible a un inhibidor del proteasoma y un compuesto inmunomodulador. En otras realizaciones más, el mieloma múltiple es recidivante o insensible a 3 o más terapias previas, que incluyen, por ejemplo, un anticuerpo monoclonal CD38 (mAb CD38, por ejemplo, daratumumab o isatuximab), un inhibidor del proteasoma (por ejemplo, bortezomib, carfilzomib, ixazomib o marizomib) y un compuesto inmunomodulador (por ejemplo, talidomida, lenalidomida, pomalidomida, CC122 o CC₂20) o doblemente insensible a un inhibidor del proteasoma o compuesto inmunomodulador y un mAb CD38. En otras realizaciones más, el mieloma múltiple es triplemente insensible, por ejemplo, el mieloma múltiple es insensible a un inhibidor del proteasoma (por ejemplo, bortezomib, carfilzomib, ixazomib, oprozomib o marizomib), un compuesto inmunomodulador (por ejemplo, talidomida, lenalidomida, pomalidomida, CC122 o CC₂20), y otro agente activo, como se describe en el presente documento.

Los métodos de tratamiento, prevención y/o abordaje del mieloma múltiple, que incluyen mieloma múltiple recidivante/insensible en pacientes con alteración de la función renal o un síntoma de la misma, comprenden administrar una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento, a un paciente que tiene mieloma múltiple recidivante/insensible con alteración de la función renal, opcionalmente en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región c Dr 1H de SEQ ID NO:21, una región c Dr 2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

En ciertos aspectos, en el presente documento se proporciona un compuesto para el uso en métodos de tratamiento, prevención y/o abordaje del mieloma múltiple, que incluye mieloma múltiple recidivante/insensible en pacientes con alteración de la función renal o un síntoma de la misma, en donde el compuesto es un compuesto proporcionado en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde los métodos comprenden administrar una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento, a un paciente que tiene mieloma múltiple recidivante/insensible con alteración de la función renal, en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región c Dr 1H de SeQ ID NO:21, una región c Dr 2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

Los métodos de tratamiento, prevención y/o abordaje del mieloma múltiple, que incluye mieloma múltiple recidivante o insensible en pacientes debilitados o un síntoma del mismo, comprenden administrar una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento a un paciente debilitado que tiene mieloma múltiple, opcionalmente en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

En ciertos aspectos, en el presente documento se proporciona un compuesto para el uso en métodos de tratamiento, prevención y/o abordaje del mieloma múltiple, que incluye mieloma múltiple recidivante o insensible en pacientes debilitados o un síntoma del mismo, en donde el compuesto es un compuesto proporcionado en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde los métodos comprenden administrar una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento a un paciente debilitado que tiene mieloma múltiple, en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SeQ ID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

En algunas de dichas realizaciones, el paciente debilitado se caracteriza por no cumplir los criterios para terapia de inducción, o intolerancia al tratamiento con dexametasona. En algunas de dichas realizaciones, el paciente debilitado es un anciano, por ejemplo, mayor de 65 años.

En ciertas realizaciones, el paciente que se va a tratar no ha sido tratado con terapia para el mieloma múltiple antes de la administración del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 proporcionado en el presente documento, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3e (CD3) humano proporcionado en el presente documento. En ciertas realizaciones, el paciente que se va a tratar ha sido tratado con terapia para el mieloma múltiple antes de la administración del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 proporcionado en el presente documento o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento.

En ciertas realizaciones, el paciente que se va a tratar ha desarrollado resistencia farmacológica a la terapia anti-mieloma múltiple. En algunas de dichas realizaciones, el paciente ha desarrollado resistencia a una, dos, tres, cuatro, cinco o más terapias anti-mieloma múltiple. En una realización, las terapias se seleccionan de un anticuerpo monoclonal CD38 (mAb CD38, por ejemplo, daratumumab o isatuximab), un inhibidor del proteasoma (por ejemplo, bortezomib, carfilzomib, ixazomib o marizomib) y un compuesto inmunomodulador (por ejemplo, talidomida, lenalidomida, pomalidomida, CC122 o CC₂20). En una realización, las terapias comprenden uno o más de un anticuerpo monoclonal CD38 (mAb CD38, por ejemplo, daratumumab o isatuximab), un inhibidor del proteasoma (por ejemplo, bortezomib, carfilzomib, ixazomib o marizomib) y un compuesto inmunomodulador (por ejemplo, talidomida, lenalidomida, pomalidomida, CC122 o CC₂20). En una realización, las terapias comprenden uno o más de agentes alquilantes (por ejemplo, melfalán, ciclofosfamida, bendamustina), inhibidores de la histona desacetilasa (por ejemplo, panobinostat), otros anticuerpos monoclonales (por ejemplo, anticuerpo anti-SLAMF7, por ejemplo, elotuzumab), glucocorticoides (por ejemplo, dexametasona, prednisona), otras terapias anti-mieloma múltiple (por ejemplo, cisplatino, etopósido, doxorubicina) y terapias celulares (por ejemplo, CAR-T).

Los métodos engloban tratar un paciente independientemente de la edad del paciente. En algunas realizaciones, el sujeto tiene 18 años o más. En otras realizaciones, el sujeto tiene más de 18, 25, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65 o 70 años. En otras realizaciones, el sujeto tiene menos de 65 años. En otras realizaciones, el sujeto tiene más de 65 años. En una realización, el sujeto es un sujeto anciano con mieloma múltiple, tal como un sujeto mayor de 65 años. En una realización, el sujeto es un sujeto anciano con mieloma múltiple, tal como un sujeto mayor de 75 años.

G. Dosis del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3

En ciertas realizaciones, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto es desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 25 mg por día, desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 10 mg por día, desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 5 mg por día, desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 2 mg por día, desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 1 mg por día, desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 0,5 mg por día, desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 0,25 mg por día, desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 25 mg por día, desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 10 mg por día, desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 5 mg por día, desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 2 mg por día, desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 1 mg por día, desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 0,5 mg por día, desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 0,25 mg por día, desde aproximadamente 0,5 hasta aproximadamente 25 mg por día, desde aproximadamente 0,5 hasta aproximadamente 10 mg por día, desde aproximadamente 0,5 hasta aproximadamente 5 mg por día, desde aproximadamente 0,5 hasta aproximadamente 2 mg por día, desde aproximadamente 0,5 hasta aproximadamente 1 mg por día, desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 25 mg por día, desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 10 mg por día, desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 5 mg por día, desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 2,5 mg por día, o desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 2 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto es desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 25 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto es desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 10 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto es desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 5 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto es desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 2 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto es desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 1 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto es desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 0,5 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto es desde aproximadamente 0,01 hasta aproximadamente 0,25 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto es desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 25 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto es desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 10 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto es desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 5 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto es desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 2 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto es desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 1 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto es desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 0,5 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto es desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 0,25 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto es desde aproximadamente 0,5 hasta aproximadamente 25 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto es desde aproximadamente 0,5 hasta aproximadamente 10 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto es desde aproximadamente 0,5 hasta aproximadamente 5 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto es desde aproximadamente 0,5 hasta aproximadamente 2 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto es desde aproximadamente 0,5 hasta aproximadamente 1 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto es desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 25 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto es desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 10 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto es desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 5 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto es desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 2,5 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del compuesto es desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 2 mg por día. En una realización, una cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 es desde aproximadamente 0,1 mg por día hasta aproximadamente 0,4 mg por día.

En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es aproximadamente 0,1, aproximadamente 0,2, aproximadamente 0,3, aproximadamente 0,4, aproximadamente 0,5, aproximadamente 0,6, aproximadamente 0,7, aproximadamente 0,8, aproximadamente 0,9, aproximadamente 1, aproximadamente 2, aproximadamente 3, aproximadamente 4, aproximadamente 5, aproximadamente 6, aproximadamente 7, aproximadamente 8, aproximadamente 9, aproximadamente 10, aproximadamente 15, aproximadamente 20, o aproximadamente 25 mg por día. En algunas de dichas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es aproximadamente 0,1, aproximadamente 0,2, aproximadamente 0,3, aproximadamente 0,4, aproximadamente

0,5, aproximadamente 0,6 o aproximadamente 0,7 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es aproximadamente 0,1 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticament profilácticamente eficaz es aproximadamente 0,2 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticament o profilácticamente eficaz es aproximadamente 0,3 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticament o profilácticamente eficaz es aproximadamente 0,4 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente profilácticamente eficaz es aproximadamente 0,5 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente profilácticamente eficaz es aproximadamente 0,6 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticament o profilácticamente eficaz es aproximadamente 0,7 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente profilácticamente eficaz es aproximadamente 0,8 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente profilácticamente eficaz es aproximadamente 0,9 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente profilácticamente eficaz es aproximadamente 1 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es aproximadamente 2 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es aproximadamente 3 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es aproximadamente 4 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticament o profilácticamente eficaz es aproximadamente 5 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es aproximadamente 6 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es aproximadamente 7 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es aproximadamente 8 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es aproximadamente 9 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es aproximadamente 10 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente profilácticamente eficaz es aproximadamente 15 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticament profilácticamente eficaz es aproximadamente 20 mg por día. En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente profilácticamente eficaz es aproximadamente 25 mg por día.

En una realización, el intervalo de dosis diaria recomendada del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para las afecciones descritas en el presente documento se encuentra dentro del intervalo de desde aproximadamente 0,1 mg hasta aproximadamente 25 mg por día, en una realización dada como una dosis unitaria una vez al día, o en dosis divididas durante todo un día. En otras realizaciones, la dosis varía desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 10 mg por día. Dosis específicas por día incluyen 0,1,0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18,

19, 20, 21,22, 23, 24 o 25 mg por día. Dosis más específicas por día incluyen 0,1,0,2, 0,3, 0,4 o 0,5 mg por día. En una realización, la dosis específica por día es 0,1 mg por día. En una realización, la dosis específica por día es 0,2 mg por día.

En una realización, la dosis específica por día es 0,3 mg por día. En una realización, la dosis específica por día es 0,4 mg por día. En una realización, la dosis específica por día es 0,5 mg por día. En una realización, la dosis específica por día es 1 mg por día. En una realización, la dosis específica por día es 2 mg por día. En una realización, la dosis específica por día es 3 mg por día. En una realización, la dosis específica por día es 4 mg por día. En una realización, la dosis específica por día es 5 mg por día. En una realización, la dosis específica por día es 6 mg por día. En una realización, la dosis específica por día es 7 mg por día. En una realización, la dosis específica por día es 8 mg por día. En una realización, la dosis específica por día es 9 mg por día. En una realización, la dosis específica por día es 10 mg por día. En una realización, la dosis específica por día es 11 mg por día. En una realización, la dosis específica por día es 12 mg por día.

En una realización, la dosis específica por día es 13 mg por día. En una realización, la dosis específica por día es 14 mg por día. En una realización, la dosis específica por día es 15 mg por día. En una realización, la dosis específica por día es 16 mg por día. En una realización, la dosis específica por día es 17 mg por día. En una realización, la dosis específica por día es 18 mg por día. En una realización, la dosis específica por día es 19 mg por día. En una realización, la dosis específica por día es 20 mg por día. En una realización, la dosis específica por día es 21 mg por día. En una realización, la dosis específica por día es 22 mg por día. En una realización, la dosis específica por día es 23 mg por día. En una realización, la dosis específica por día es 24 mg por día. En una realización, la dosis específica por día es 25 mg por día.

En una realización específica, la dosis inicial recomendada puede ser 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 1, 2, 3, 4, 5, 10, 15, 20 o 25 mg por día. En otra realización, la dosis inicial recomendada puede ser 0,1, 0,2, 0,3, 0,4 o 0,5 mg por día. La dosis puede ser aumentada escalonadamente hasta 1, 2, 3, 4 o 5 mg por día.

En ciertas realizaciones, la cantidad terapéuticamente o profilácticamente eficaz es desde aproximadamente 0,001 hasta aproximadamente 5 mg/kg/día, desde aproximadamente 0,001 hasta aproximadamente 4 mg/kg/día, desde aproximadamente 0,001 hasta aproximadamente 3 mg/kg/día, desde aproximadamente 0,001 hasta aproximadamente 2 mg/kg/día, desde aproximadamente 0,001 hasta aproximadamente 1 mg/kg/día, desde aproximadamente 0,001 hasta aproximadamente 0,05 mg/kg/día, desde aproximadamente 0,001 hasta aproximadamente 0,04 mg/kg/día, desde aproximadamente 0,001 hasta aproximadamente 0,03 mg/kg/día, desde aproximadamente 0,001 hasta aproximadamente 0,02 mg/kg/día, desde aproximadamente 0,001 hasta aproximadamente 0,01 mg/kg/día, o desde aproximadamente 0,001 hasta aproximadamente 0,005 mg/kg/día.

La dosis administrada también se puede expresar en unidades distintas de mg/kg/día. Por ejemplo, las dosis para administración parenteral se pueden expresar como mg/m2/día. Un experto habitual en la técnica sabría fácilmente cómo convertir las dosis de mg/kg/día a mg/m2/día dada o la altura o el peso de un sujeto, o ambos (véase www.fda.gov/cder/cancer/animalframe.htm). Por ejemplo, una dosis de 1 mg/kg/día para un ser humano de 65 kg es aproximadamente igual a 38 mg/m2/día.

Dependiendo del estado de la enfermedad que se va a tratar y la afección del sujeto, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se pueden administrar por vías de administración oral, parenteral (por ejemplo, inyección o infusión intramuscular, intraperitoneal, intravenosa, CIV, intracisternal, inyección subcutánea, o implante), inhalación, nasal, vaginal, rectal, sublingual, o tópica (por ejemplo, transdérmica o local). El Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede formular, solo o junto, en unidad de dosis adecuada con excipientes, soportes, adyuvantes y vehículos farmacéuticamente aceptables, apropiados para cada vía de administración.

En una realización, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se administra por vía oral. En otra realización, el compuesto del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 , o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se administra por vía parenteral. En otra realización más, el compuesto del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se administra por vía intravenosa.

El Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 proporcionado en el presente documento, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede administrar como una dosis única tal como, por ejemplo, una única inyección en embolada, o comprimidos o píldoras orales; o con el tiempo, tal como, por ejemplo, infusión continua con el tiempo o dosis en embolada divididas con el tiempo. Los compuestos como se describen en el presente documento se pueden administrar repetidamente si fuera necesario, por ejemplo, hasta que el paciente experimente enfermedad estable o regresión, o hasta que el paciente experimente progresión de la enfermedad o toxicidad inaceptable. La enfermedad estable o ausencia de la misma se determina por métodos conocidos en la técnica, tales como evaluación de síntomas del paciente, exploración física, evaluaciones de laboratorio, visualización del tumor del que se han obtenido imágenes usando rayos X, TAC, TEP o IRM y otras modalidades de evaluación comúnmente aceptadas.

En una realización, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se administra antes de un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano. En una realización, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se administra simultáneamente con un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano. En una realización, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se administra posterior a un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano.

El Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede administrar una vez al día (QD), o dividido en múltiples dosis diarias, tal como dos veces al día (BID), tres veces al día (TID) y cuatro veces al día (QID). Además, la administración puede ser continua (es decir, diaria durante días consecutivos o cada día), intermitente, por ejemplo, en ciclos (es decir, que incluye días, semanas, o meses de descanso sin fármaco). Como se usa en el presente documento, el término "diariamente" pretende significar que un compuesto terapéutico, tal como el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se administra una vez o más de una vez cada día, por ejemplo, durante un periodo de tiempo. El término "continuo" pretende significar que un compuesto terapéutico, tal como el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se administra diariamente durante un periodo ininterrumpido de al menos 7 días a 52 semanas. El término "intermitente" o "intermitentemente", como se usa en el presente documento, pretende significar parar y empezar en intervalos regulares o irregulares. Por ejemplo, la administración intermitente del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, es la administración durante uno a seis días por semana, la administración en ciclos (por ejemplo, administración diaria durante dos a ocho semanas consecutivas, luego un periodo de descanso sin administración durante hasta una semana), o administración en días alternos. El término "cíclico", como se usa en el presente documento, pretende significar que un compuesto terapéutico, tal como el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se administra diariamente o continuamente, pero con un periodo de descanso. En algunas de dichas realizaciones, la administración es una vez al día durante dos a seis días, entonces un periodo de descanso sin administración durante cinco a siete días.

En algunas realizaciones, la frecuencia de administración está en el intervalo de aproximadamente una dosis diaria a aproximadamente una dosis mensual. En ciertas realizaciones, la administración es una vez al día, dos veces al día, tres veces al día, cuatro veces al día, una vez cada dos días, dos veces por semana, una vez cada semana, una vez cada dos semanas, una vez cada tres semanas, o una vez cada cuatro semanas. En una realización, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se administra una vez al día. En otra realización, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se administra dos veces al día. En otra realización más, Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 en el presente documento, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se administra tres veces al día. En otra realización adicional, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se administra cuatro veces al día.

En una realización, una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 se administra en un ciclo de tratamiento que incluye un periodo de administración de hasta 20 días, seguido de un periodo de descanso. En una realización, una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 se administra en un ciclo de tratamiento que incluye un periodo de administración de hasta 15 días, seguido de un periodo de descanso. En una realización, una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 se administra en un ciclo de tratamiento que incluye un periodo de administración de hasta 10 días, seguido de un periodo de descanso. En una realización, una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 se administra en un ciclo de tratamiento que incluye un periodo de administración de hasta 7 días, seguido de un periodo de descanso. En una realización, una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 se administra en un ciclo de tratamiento que incluye un periodo de administración de hasta 5 días, seguido de un periodo de descanso. En una realización, una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 se administra en un ciclo de tratamiento que incluye un periodo de administración de hasta 4 días, seguido de un periodo de descanso. En una realización, una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 se administra en un ciclo de tratamiento que incluye un periodo de administración de hasta 3 días, seguido de un periodo de descanso.

En una realización, el ciclo de tratamiento incluye un periodo de administración de hasta 14 días, seguido de un periodo de descanso. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye un periodo de administración de hasta 10 días, seguido de un periodo de descanso. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye un periodo de administración de hasta 7 días, seguido de un periodo de descanso. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye un periodo de administración de hasta 5 días, seguido de un periodo de descanso. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye un periodo de administración de hasta 4 días, seguido de un periodo de descanso. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye un periodo de administración de hasta 3 días, seguido de un periodo de descanso.

En una realización, el periodo de descanso es desde aproximadamente 2 días hasta aproximadamente 11 días. En una realización, el periodo de descanso es desde aproximadamente 2 días hasta aproximadamente 10 días. En una realización, el periodo de descanso es aproximadamente 2 días. En una realización, el periodo de descanso es aproximadamente 3 días. En una realización, el periodo de descanso es aproximadamente 4 días. En una realización, el periodo de descanso es aproximadamente 5 días. En una realización, el periodo de descanso es aproximadamente 6 días. En otra realización, el periodo de descanso es aproximadamente 7 días. En otra realización, el periodo de descanso es aproximadamente 8 días. En otra realización, el periodo de descanso es aproximadamente 9 días. En otra realización, el periodo de descanso es aproximadamente 10 días. En otra realización, el periodo de descanso es aproximadamente 11 días.

En una realización, el ciclo de tratamiento incluye un periodo de administración de hasta 15 días, seguido de un periodo de descanso desde aproximadamente 2 días hasta aproximadamente 10 días. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye un periodo de administración de hasta 10 días, seguido de un periodo de descanso desde aproximadamente 2 días hasta aproximadamente 10 días. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye un periodo de administración de hasta 7 días, seguido de un periodo de descanso desde aproximadamente 2 días hasta aproximadamente 10 días. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye un periodo de administración de hasta 5 días, seguido de un periodo de descanso desde aproximadamente 2 días hasta aproximadamente 10 días. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye un periodo de administración de hasta 3 días, seguido de un periodo de descanso desde aproximadamente 10 días hasta aproximadamente 15 días. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye un periodo de administración de hasta 3 días, seguido de un periodo de descanso desde aproximadamente 3 días hasta aproximadamente 15 días.

En una realización, el ciclo de tratamiento incluye un periodo de administración de hasta 15 días, seguido de un periodo de descanso de 7 días. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye un periodo de administración de hasta 10 días, seguido de un periodo de descanso de 5 días. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye un periodo de administración de hasta 10 días, seguido de un periodo de descanso de 4 días. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye un periodo de administración de hasta 10 días, seguido de un periodo de descanso de 3 días. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye un periodo de administración de hasta 10 días, seguido de un periodo de descanso de 2 días. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye un periodo de administración de hasta 7 días, seguido de un periodo de descanso de 7 días. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye un periodo de administración de hasta 5 días, seguido de un periodo de descanso de 5 días. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye un periodo de administración de hasta 3 días, seguido de un periodo de descanso de 11 días. En otra realización, el ciclo de tratamiento incluye un periodo de administración de hasta 5 días, seguido de un periodo de descanso de 9 días. En otra realización, el ciclo de tratamiento incluye un periodo de administración de hasta 5 días, seguido de un periodo de descanso de 2 días. En otra realización, el ciclo de tratamiento incluye un periodo de administración de hasta 3 días, seguido de un periodo de descanso de 4 días.

En una realización, el ciclo de tratamiento incluye una administración de una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 en los días 1 a 5 de un ciclo de 28 días. En otra realización, el ciclo de tratamiento incluye una administración del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 en los días 1 a 10 de un ciclo de 28 días. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye una administración de una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 en los días 1 a 21 de un ciclo de 28 días. En otra realización, el ciclo de tratamiento incluye una administración de una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 en los días 1 a 5 de un ciclo de 7 días. En otra realización, el ciclo de tratamiento incluye una administración de una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 en los días 1 a 7 de un ciclo de 7 días. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye una administración de una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 en los días 1 a 10 y días 15 a 24 de un ciclo de 28 días. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye una administración de una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 en los días 1 a 3 y días 15 a 18 de un ciclo de 28 días. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye una administración de una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 en los días 1 a 7 y días 15 a 21 de un ciclo de 28 días. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye una administración de una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 en los días 1 a 5 y días 15 a 19 de un ciclo de 28 días. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye una administración de una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 en los días 1 a 3 y días 15 a 17 de un ciclo de 28 días.

En una realización, el ciclo de tratamiento incluye una administración de una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 en los días 1 a 14 de un ciclo de 21 días. En otra realización, el ciclo de tratamiento incluye una administración del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 en los días 1 a 4 y 8 a 11 de un ciclo de 21 días. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye una administración de una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 en los días 1 a 5 y 8 a 12 de un ciclo de 21 días. En otra realización, el ciclo de tratamiento incluye una administración de una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 en los días 1 a 5 y 11 a 15 de un ciclo de 21 días. En otra realización, el ciclo de tratamiento incluye una administración de una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 en los días 1 a 5, 8 a 12 y 15 a 19 de un ciclo de 21 días. En otra realización, el ciclo de tratamiento incluye una administración de una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 en los días 1 a 4, 8 a 11 y 15 a 18 de un ciclo de 21 días. En otra realización, el ciclo de tratamiento incluye una administración de una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 en los días 1 a 4, 8 a 10 y 15 a 17 de un ciclo de 21 días. En otra realización, el ciclo de tratamiento incluye una administración de una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 en los días 1 a 3, y 8 a 11 de un ciclo de 21 días. En otra realización, el ciclo de tratamiento incluye una administración de una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 en los días 1 a 3 y 11 a 13 de un ciclo de 21 días.

Cualquier ciclo de tratamiento descrito en el presente documento se puede repetir durante al menos 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 o más ciclos. En ciertos casos, el ciclo de tratamiento como se describe en el presente documento incluye desde 1 hasta aproximadamente 24 ciclos, desde aproximadamente 2 hasta aproximadamente 16 ciclos, o desde aproximadamente 2 hasta aproximadamente 4 ciclos. En ciertos casos, un ciclo de tratamiento como se describe en el presente documento incluye desde 1 hasta aproximadamente 4 ciclos. En ciertas realizaciones, el ciclo 1 a 4 son todos ciclos de 28 días. En algunas realizaciones, una cantidad terapéuticamente eficaz del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 se administra durante 1 a 13 ciclos de 28 días (por ejemplo, aproximadamente 1 año). En ciertos casos, la terapia cíclica no se limita al número de ciclos, y la terapia continúa hasta la progresión de la enfermedad. Los ciclos pueden en ciertos casos incluir variar la duración de los periodos de administración y/o los periodos de descanso descritos en el presente documento.

En una realización, el ciclo de tratamiento incluye administrar el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 en una cantidad de dosis de aproximadamente 0,1 mg/día, 0,2 mg/día, 0,3 mg/día, 0,4 mg/día, 0,5 mg/día, 0,6 mg/día, 0,7 mg/día, 0,8 mg/día, 0,9 mg/día, 1,0 mg/día, 5,0 mg/día, o 10 mg/día, administrada una vez al día. En una realización, el ciclo de tratamiento incluye administrar el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 en una cantidad de dosis de aproximadamente 0,1 mg/día, 0,2 mg/día, 0,3 mg/día, 0,4 mg/día, 0,5 mg/día, 0,6 mg/día, 0,7 mg/día o 0,8 mg/día, administrada una vez al día. En algunas de dichas realizaciones, el ciclo de tratamiento incluye administrar el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 una vez al día en una cantidad de dosis de aproximadamente 0,1 mg, 0,2 mg, 0,3 mg, 0,4 mg, o 0,5 mg en los días 1 a 10 de un ciclo de 28 días. En algunas de dichas realizaciones, el ciclo de tratamiento incluye administrar el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 una vez al día en una cantidad de dosis de aproximadamente 0,1 mg, 0,2 mg, 0,3 mg, 0,4 mg o 0,5 mg en los días 1 a 10 y 15 a 24 de un ciclo de 28 días. En algunas de dichas realizaciones, el ciclo de tratamiento incluye administrar el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 una vez al día en una cantidad de dosis de aproximadamente 0,1 mg en los días 1 a 10 y 15 a 24 de un ciclo de 28 días. En otras realizaciones, el ciclo de tratamiento incluye administrar el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 dos veces al día en una cantidad de dosis de aproximadamente 0,1 mg, 0,2 mg, 0,3 mg, 0,4 mg o 0,5 mg en los días 1 a 3 de un ciclo de 28 días. En otras realizaciones, el ciclo de tratamiento incluye administrar el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 dos veces al día en una cantidad de dosis de aproximadamente

0. 1 mg, 0,2 mg, 0,3 mg, 0,4 mg, o 0,5 mg en los días 1 a 3 y 15 a 19 de un ciclo de 28 días. En otras realizaciones, el ciclo de tratamiento incluye administrar el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 dos veces al día en una cantidad de dosis de aproximadamente 0,1 mg, 0,2 mg, 0,3 mg, 0,4 mg o 0,5 mg en los días 1 a 3 y 15 a 17 de un ciclo de 28 días. En otras realizaciones, el ciclo de tratamiento incluye administrar el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 dos veces al día en una cantidad de dosis de aproximadamente 0,2 mg en los días 1 a 3 y 15 a 17 de un ciclo de 28 días. En una de dichas realizaciones, el compuesto se administra en los días 1 a 3 (mañana y noche), día 14 (solo noche), días 15 y 16 (mañana y noche) y día 17 (solo mañana) en el ciclo 1.

H. Administración de anticuerpo biespecífico que se une específicamente al BCMA y a CD3

En una realización, el anticuerpo biespecífico se administra una vez o dos veces a la semana en una realización por administración subcutánea (por ejemplo, en una realización en el intervalo de dosis de 0,1 a 25, en una realización hasta 25 mg/m2/semana, en una realización hasta 250 mg/m2/semana). Debido a actividades de citotoxicidad superiores del anticuerpo biespecífico, se puede administrar al menos a la misma magnitud del intervalo de dosis clínica (o incluso menor) en comparación con anticuerpos monoespecíficos convencionales o anticuerpos biespecíficos convencionales que no son biespecíficos de linfocitos T (es decir, no se unen a CD3 en un brazo). Se prevé que para un anticuerpo biespecífico se prefiera la administración subcutánea en la práctica clínica (por ejemplo, en el intervalo de dosis de 0,1 -250 mg/m2/semana). Además, en pacientes con altos niveles de APRIL y BAFF en suero (por ejemplo, paciente con mieloma múltiple), puede que no sea necesario aumentar la dosis para el anticuerpo biespecífico, ya que puede no ser afectado por la competición por ligando. A diferencia, las dosis para otros anticuerpos anti-BCMA bloqueantes/competidores por ligando pueden necesitar ser aumentadas en aquellos pacientes. Otra ventaja del anticuerpo biespecífico es una semivida de eliminación de aproximadamente 4 a 12 días que permite la administración de al menos una vez o dos veces/semana.

En una realización, el anticuerpo biespecífico es un anticuerpo con propiedades que permiten el tratamiento de una vez/dos veces a la semana por la vía intravenosa, pero en una realización por administración subcutánea (por ejemplo, una dosis en el intervalo de 200-2000 mg/m2/semana durante 4 semanas). Se prevé que para el anticuerpo biespecífico la administración subcutánea sea posible y preferida en la práctica clínica (por ejemplo, en el intervalo de dosis de 200 2000 mg/m2/semana, dependiendo de las indicaciones de la enfermedad). Además, en pacientes con altos niveles de APRIL y BAFF en suero (por ejemplo, pacientes con mieloma múltiple), puede que no sea necesario aumentar la dosis para el anticuerpo biespecífico (por ejemplo, anticuerpo no bloqueante/competidor por ligando) ya que puede no ser afectado por la competición por ligando. A diferencia, se puede necesitar aumentar las dosis para otros anticuerpos anti-BCMA bloqueantes/competidores por ligando en los pacientes, lo que hace que la administración subcutánea sea técnicamente más exigente (por ejemplo, farmacéutica). Otra ventaja del anticuerpo biespecífico se basa en la inclusión de una porción Fc, que está asociada con una semivida de eliminación de 4 a 12 días y permite una administración de al menos una vez o dos veces/semana.

1. Terapia de combinación con agente activo adicional

El tratamiento con el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano, también se pueden combinar o usar junto con (por ejemplo antes, durante o después) de una terapia convencional que incluye, pero no se limita a, cirugía, terapia biológica (que incluye inmunoterapia, por ejemplo, con inhibidores del punto de control), radioterapia, quimioterapia, trasplante de células madre, terapia celular u otra terapia no basada en fármacos actualmente usada para tratar, prevenir o abordar el mieloma múltiple. El uso combinado del compuesto y la terapia convencional puede proporcionar una pauta de tratamiento única que es inesperadamente eficaz en ciertos pacientes. Sin estar limitado por teoría, se cree que el tratamiento con el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano puede proporcionar efectos aditivos o sinérgicos cuando se administran simultáneamente con terapia convencional.

Como se trata en cualquier parte en el presente documento, en el presente documento se engloba un método de reducción, tratamiento y/o prevención de efectos adversos o no deseados asociados a terapia convencional que incluye, pero no se limita a, cirugía, quimioterapia, radioterapia, terapia biológica e inmunoterapia. Un compuesto, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano, y un principio activo adicional se puede administrar a un paciente antes, durante o después de la aparición del efecto adverso asociado a la terapia convencional.

El Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano, también se puede combinar o usar en combinación con agentes terapéuticos adicionales útiles en el tratamiento y/o la prevención de mieloma múltiple descritos en el presente documento.

En una realización, un método de tratamiento del mieloma múltiple comprende administrar a un paciente el Compuesto 1, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano, en combinación con un agente activo adicional. En una realización, un método de prevención del mieloma múltiple comprende administrar a un paciente el Compuesto 1, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano, en combinación con un agente activo adicional. En una realización, un método de abordaje del mieloma múltiple comprende administrar a un paciente el Compuesto 1, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano, en combinación con un agente activo adicional. En una realización, un método de tratamiento del mieloma múltiple comprende administrar a un paciente el Compuesto 2, o un tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano, en combinación con un agente activo adicional. En una realización, un método de prevención de mieloma múltiple, comprende administrar a un paciente el Compuesto 2, o un tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano, en combinación con un agente activo adicional. En una realización, un método de abordar mieloma múltiple comprende administrar a un paciente el Compuesto 2, o un tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano, en combinación con un agente activo adicional. En una realización, un método de tratamiento del mieloma múltiple comprende administrar a un paciente el Compuesto 3, o un tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano, en combinación con un agente activo adicional. En una realización, un método de prevención de mieloma múltiple, comprende administrar a un paciente el Compuesto 3, o un tautómero, isotopólogo, 0 sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano, en combinación con un agente activo adicional. En una realización, un método de abordaje del mieloma múltiple comprende administrar a un paciente el Compuesto 3, o un tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano, en combinación con un agente activo adicional.

En una realización, un método de tratamiento, prevención o abordaje de mieloma múltiple comprende administrar a un paciente el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano, en combinación con uno o más agentes activos adicionales, y opcionalmente en combinación con radioterapia, transfusiones de sangre o cirugía.

Como se usa en el presente documento, el término "en combinación" incluye el uso de más de una terapia (por ejemplo, uno o más agentes profilácticos y/o terapéuticos). Sin embargo, el uso del término "en combinación" no restringe el orden en el que las terapias (por ejemplo, agentes profilácticos y/o terapéuticos) se administran a un paciente con una enfermedad o trastorno. Una primera terapia (por ejemplo, un agente profiláctico o terapéutico, tal como un compuesto proporcionado en el presente documento, por ejemplo, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano se puede administrar antes de (por ejemplo, 5 minutos, 15 minutos, 30 minutos, 45 minutos, 1 hora, 2 horas, 4 horas, 6 horas, 12 horas, 24 horas, 48 horas, 72 horas, 96 horas, 1 semana, 2 semanas, 3 semanas, 4 semanas, 5 semanas, 6 semanas, 8 semanas o 12 semanas antes), concomitantemente con, o posterior a (por ejemplo, 5 minutos, 15 minutos, 30 minutos, 45 minutos, 1 hora, 2 horas, 4 horas, 6 horas, 12 horas, 24 horas, 48 horas, 72 horas, 96 horas, 1 semana, 2 semanas, 3 semanas, 4 semanas, 5 semanas, 6 semanas, 8 semanas o 12 semanas después) de la administración de una terapia adicional (por ejemplo, un agente profiláctico o terapéutico) al sujeto. También se contempla terapia cuádruple en el presente documento, así como terapia quíntuple. En una realización, la tercera terapia es dexametasona.

La administración del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano, y uno o más agentes activos adicionales a un paciente, puede ocurrir simultáneamente o uno detrás del otro por la misma vía de administración o diferente. La idoneidad de una vía de administración particular empleada para un agente activo particular dependerá del agente activo en sí (por ejemplo, si se puede administrar por vía oral sin descomposición antes de la entrada en la corriente sanguínea).

La vía de administración del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano, es independiente de la vía de administración de una terapia adicional. En una realización, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se administra por vía oral y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3^s(CD3) humano se administra por vía intravenosa, pero en una realización por administración subcutánea. En otra realización, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 se administra por vía intravenosa y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano se administra por vía intravenosa, pero en una realización por administración subcutánea. Por lo tanto, según estas realizaciones, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se administra por vía oral o por vía intravenosa, un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano se administra por vía intravenosa, pero en una realización por administración subcutánea, y la terapia adicional se puede administrar por vía oral, por vía parenteral, por vía intraperitoneal, por vía intravenosa, por vía intrarterial, por vía transdérmica, por vía sublingual, por vía intramuscular, por vía rectal, por vía transyugal, por vía intranasal, por vía liposomal, por inhalación, por vía vaginal, por vía intraocular, por administración local por catéter o prótesis endovascular, por vía subcutánea, por vía intradiposa, por vía intrarticular, por vía intratecal, o en una forma farmacéutica de liberación lenta. En una realización, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y la terapia adicional se administran por el mismo modo de administración, por vía oral o por IV y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano se administra por vía intravenosa, pero en una realización por administración subcutánea. En otra realización, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se administra por un modo de administración, por ejemplo, por IV, mientras que el agente adicional (un agente anti-mieloma múltiple) se administra por otro modo de administración, por ejemplo, por vía oral y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano se administra por vía intravenosa, pero en una realización por administración subcutánea.

En una realización, el agente activo adicional se administra por vía intravenosa o por vía subcutánea y una vez o dos veces al día en una cantidad de desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 1000 mg, desde aproximadamente 5 hasta aproximadamente 500 mg, desde aproximadamente 10 hasta aproximadamente 350 mg, o desde aproximadamente 50 hasta aproximadamente 200 mg. La cantidad específica del agente activo adicional dependerá del agente específico usado, el tipo de mieloma múltiple que está tratándose o abordándose, la intensidad y el estadio de enfermedad, y la cantidad de Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano, y cualquier agente activo adicional opcional administrado simultáneamente al paciente.

Se pueden usar uno o más principios activos o agentes adicionales junto con el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano en los métodos y composiciones. Los agentes activos adicionales pueden ser moléculas grandes (por ejemplo, proteínas), moléculas pequeñas (por ejemplo, moléculas inorgánicas sintéticas, organometálicas u orgánicas) o terapias celulares (por ejemplo, células CAR).

Ejemplos de agentes activos adicionales que se pueden usar en los métodos y composiciones descritos en el presente documento incluyen uno o más de melfalán, vincristina, ciclofosfamida, etopósido, doxorubicina, bendamustina, un inhibidor del proteasoma (por ejemplo, bortezomib, carfilzomib, ixazomib, oprozomib o marizomib), un inhibidor de la histona desacetilasa (por ejemplo, panobinostat, ACY241), un inhibidor de BET (por ejemplo, GSK525762A, OTX015, BMS-986158, TEN-010, CPI-0610 , INCB54329, BAY1238097, FT-1101, C90010, ABBV-075, BI 894999, GS-5829, GSK1210151A (I-BET-151), CPI-203, RVX-208, XD46, MS436, PFI-1, RVX2135, ZEN3365, XD14, ARV-771, MZ-1, PLX5117, EP11313 y EP11336), un inhibidor de BCL2 (por ejemplo, venetoclax o navitoclax), un inhibidor de Mc L-1 (por ejemplo, AZD5991, AMG176, MIK665, S64315 o S63845), un corticosteroide (por ejemplo, prednisona), dexametasona; un anticuerpo (por ejemplo, un anticuerpo contra CS1, tal como elotuzumab; un anticuerpo contra CD38, tal como daratumumab isatuximab; o un anticuerpo contra BCMA o conjugado de anticuerpo, tal como GSK₂857916 o BI 836909), un inhibidor del punto de control (como se describe en el presente documento), o células CAR (como se describe en el presente documento).

En una realización, el agente activo adicional usado junto con el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3^s(CD3) humano, en los métodos y composiciones descritos en el presente documento es dexametasona.

En algunas realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 4 mg en los días 1 y 8 de un ciclo de 21 días. En algunas otras realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 4 mg en los días 1, 4, 8 y 11 de un ciclo de 21 días. En algunas realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 4 mg en los días 1, 8 y 15 de un ciclo de 28 días. En algunas otras realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 4 mg en los días 1,4, 8, 11, 15 y 18 de un ciclo de 28 días. En algunas realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 4 mg en los días 1,8, 15 y 22 de un ciclo de 28 días. En una de dichas realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 4 mg en los días 1, 10, 15 y 22 del ciclo 1. En algunas realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 4 mg en los días 1, 3, 15 y 17 de un ciclo de 28 días. En una de dichas realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 4 mg en los días 1,3, 14 y 17 del ciclo 1. En algunas otras realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 4 mg en los días 1, 2, 4, 5, 8, 9, 11 y 12 de un ciclo de 21 días (en una realización, los ciclos 1 a 8). En algunas otras realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 4 mg en los días 1,2, 8 y 9 de un ciclo de 21 días (en una realización, los ciclos > 9). En algunas otras realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 4 mg en los días 1,2, 8, 9, 15, 16, 22 y 23 de un ciclo de 28 días.

En algunas otras realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 8 mg en los días 1 y 8 de un ciclo de 21 días. En algunas otras realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 8 mg en los días 1,4, 8 y 11 de un ciclo de 21 días. En algunas realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 8 mg en los días 1, 8 y 15 de un ciclo de 28 días. En algunas otras realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 8 mg en los días 1, 4, 8, 11, 15 y 18 de un ciclo de 28 días. En algunas realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 8 mg en los días 1, 8, 15 y 22 de un ciclo de 28 días. En una de dichas realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 8 mg en los días 1, 10, 15 y 22 del ciclo 1. En algunas realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 8 mg en los días 1,3, 15 y 17 de un ciclo de 28 días. En una de dichas realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 8 mg en los días 1, 3, 14 y 17 del ciclo 1. En algunas otras realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 8 mg en los días 1, 2, 4, 5, 8, 9, 11 y 12 de un ciclo de 21 días (en una realización, los ciclos 1 a 8). En algunas otras realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 8 mg en los días 1, 2, 8 y 9 de un ciclo de 21 días (en una realización, los ciclos > 9). En algunas otras realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 8 mg en los días 1,2, 8, 9, 15, 16, 22 y 23 de un ciclo de 28 días.

En algunas realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 10 mg en los días 1 y 8 de un ciclo de 21 días. En algunas otras realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 10 mg en los días 1,4, 8 y 11 de un ciclo de 21 días. En algunas realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 10 mg en los días 1,8 y 15 de un ciclo de 28 días. En algunas otras realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 10 mg en los días 1,4, 8, 11, 15 y 18 de un ciclo de 28 días. En algunas realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 10 mg en los días 1,8, 15 y 22 de un ciclo de 28 días. En una de dichas realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 10 mg en los días 1, 10, 15 y 22 del ciclo 1. En algunas realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 10 mg en los días 1, 3, 15 y 17 de un ciclo de 28 días. En una de dichas realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 10 mg en los días 1, 3, 14 y 17 del ciclo 1. En algunas otras realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 10 mg en los días 1, 2, 4, 5, 8, 9, 11 y 12 de un ciclo de 21 días (en una realización, los ciclos 1 a 8). En algunas otras realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 10 mg en los días 1, 2, 8 y 9 de un ciclo de 21 días (en una realización, los ciclos > 9). En algunas otras realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 10 mg en los días 1,2, 8, 9, 15, 16, 22 y 23 de un ciclo de 28 días.

En algunas realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 20 mg en los días 1 y 8 de un ciclo de 21 días. En algunas otras realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 20 mg en los días 1,4, 8 y 11 de un ciclo de 21 días. En algunas realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 20 mg en los días 1,8 y 15 de un ciclo de 28 días. En algunas otras realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 20 mg en los días 1,4, 8, 11, 15 y 18 de un ciclo de 28 días. En algunas realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 20 mg en los días 1,8, 15 y 22 de un ciclo de 28 días. En una de dichas realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 20 mg en los días 1, 10, 15 y 22 del ciclo 1. En algunas realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 20 mg en los días 1, 3, 15 y 17 de un ciclo de 28 días. En una de dichas realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 20 mg en los días 1, 3, 14 y 17 del ciclo 1. En algunas otras realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 20 mg en los días 1, 2, 4, 5, 8, 9, 11 y 12 de un ciclo de 21 días (en una realización, los ciclos 1 a 8). En algunas otras realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 20 mg en los días 1, 2, 8 y 9 de un ciclo de 21 días (en una realización, los ciclos > 9). En algunas otras realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 20 mg en los días 1,2, 8, 9, 15, 16, 22 y 23 de un ciclo de 28 días.

En algunas realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 40 mg en los días 1 y 8 de un ciclo de 21 días. En algunas otras realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 40 mg en los días 1,4, 8 y 11 de un ciclo de 21 días. En algunas realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 40 mg en los días 1,8 y 15 de un ciclo de 28 días. En una de dichas realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 40 mg en los días 1, 10, 15 y 22 del ciclo 1. En algunas otras realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 40 mg en los días 1, 4, 8, 11, 15 y 18 de un ciclo de 28 días. En otras dichas realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 40 mg en los días 1,8, 15 y 22 de un ciclo de 28 días. En otras dichas realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 40 mg en los días 1,3, 15 y 17 de un ciclo de 28 días. En una de dichas realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 40 mg en los días 1,3, 14 y 17 del ciclo 1. En algunas otras realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 40 mg en los días 1, 2, 4, 5, 8, 9, 11 y 12 de un ciclo de 21 días (en una realización, los ciclos 1 a 8). En algunas otras realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 40 mg en los días 1,2, 8 y 9 de un ciclo de 21 días (en una realización, los ciclos > 9). En algunas otras realizaciones, la dexametasona se administra en una dosis de 40 mg en los días 1,2, 8, 9, 15, 16, 22 y 23 de un ciclo de 28 días.

En otra realización, el agente activo adicional usado junto con el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano, en los métodos y composiciones descritos en el presente documento es bortezomib. En otra realización más, el agente activo adicional usado junto con el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano, en los métodos y composiciones descritos en el presente documento es daratumumab. En algunas de dichas realizaciones, los métodos comprenden además la administración de dexametasona. En algunas realizaciones, los métodos comprenden la administración del Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3^s(CD3) humano, con un inhibidor del proteasoma como se describe en el presente documento, un anticuerpo contra CD38 como se describe en el presente documento y un corticosteroide como se describe en el presente documento.

En ciertas realizaciones, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano, se administra en combinación con inhibidores del punto de control. En una realización, se usa un inhibidor del punto de control en combinación con el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano. En otra realización, se usan dos inhibidores del punto de control en combinación con el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano. En otra realización más, se usan tres o más inhibidores del punto de control en combinación con el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano.

Como se usa en el presente documento, el término "inhibidor del punto de control inmunitario'' o "inhibidor del punto de control" se refiere a moléculas que reducen, inhiben, interfieren con o modulan total o parcialmente una o más proteínas del punto de control. Sin estar limitado por teoría particular, las proteínas del punto de control regulan la activación o función de linfocitos T. Se conocen numerosas proteínas del punto de control, tales como CTLA-4 y sus ligandos CD80 y CD86; y PD-1 con sus ligandos PD-L1 y PD-L2 (Pardoll, Nature Reviews Cáncer, 2012, 12, 252-264). Estas proteínas parecen responsables de interacciones coestimulantes o inhibidoras de respuestas de linfocitos T. Las proteínas del punto de control inmunitario parecen regular y mantener la autotolerancia y la duración y amplitud de respuestas inmunitarias fisiológicas. Los inhibidores del punto de control inmunitario incluyen anticuerpos o derivan de anticuerpos.

En una realización, el inhibidor del punto de control es un inhibidor de CTLA-4. En una realización, el inhibidor de CTLA-4 es un anticuerpo anti-CTLA-4. Los ejemplos de anticuerpos anti-CTLA-4 incluyen, pero no se limitan a, los descritos en las patentes de EE. UU. N.2: 5.811.097; 5.811.097; 5.855.887; 6.051.227; 6.207.157; 6.682.736; 6.984.720; y 7.605.238. En una realización, el anticuerpo anti-CTLA-4 es tremelimumab (también conocido como ticilimumab o CP-675,206). En otra realización, el anticuerpo anti-CTLA-4 es ipilimumab (también conocido como MDX-010 o MDX-101). Ipilimumab es un anticuerpo IgG monoclonal completamente humano que se une a CTLA-4. Ipilimumab se comercializa con el nombre comercial Yervoy™.

En una realización, el inhibidor del punto de control es un inhibidor de PD-1/PD-L1. Los ejemplos de inhibidores de PD-1/PD-L1 incluyen, pero no se limitan a, los descritos en las patentes de EE. UU. N.° 7.488.802; 7.943.743; 8.008.449; 8.168.757; 8.217.149 y las publicaciones de solicitud de patente N.2 WO2003042402, WO2008156712, WO2010089411, WO2010036959, WO2011066342, WO2011159877, WO2011082400 y WO201116169.

En una realización, el inhibidor del punto de control es un inhibidor de PD-1. En una realización, el inhibidor de PD-1 es un anticuerpo anti-PD-1. En una realización, el anticuerpo anti-PD-1 es BGB-A317, nivolumab (también conocido como ONO-4538, BMS-936558 o MDX1106) o pembrolizumab (también conocido como MK-3475, SCH 900475 o lambrolizumab). En una realización, el anticuerpo anti-PD-1 es nivolumab. Nivolumab es un anticuerpo monoclonal anti-PD-1 IgG4 humana, y se comercializa con el nombre comercial Opdivo™. En otra realización, el anticuerpo anti-PD-1 es pembrolizumab. Pembrolizumab es un anticuerpo IgG4 monoclonal humanizado y se comercializa con el nombre comercial Keytruda™. En otra realización más, el anticuerpo anti-PD-1 es CT-011, un anticuerpo humanizado. CT-011 administrado solo ha dejado de mostrar respuesta en el tratamiento de la leucemia mieloide aguda (LMA) en la recaída. En otra realización más, el anticuerpo anti-PD-1 es AMP-224, una proteína de fusión. En otra realización, el anticuerpo contra PD-1 es BGB-A317. BGB-A317 es un anticuerpo monoclonal en el que la capacidad para unirse al receptor I de Fc gamma está específicamente diseñado, y que tiene un distintivo de unión único con PD-1 con alta afinidad y especificidad por diana superior.

En una realización, el inhibidor del punto de control es un inhibidor de PD-L1. En una realización, el inhibidor de PD-L1 es un anticuerpo anti-PD-L1. En una realización, el anticuerpo anti-PD-L1 es MEDI4736 (durvalumab). En otra realización, el anticuerpo anti-PD-L1 es BMS-936559 (también conocido como MDX-1105-01). En otra realización más, el inhibidor de PD-L1 es atezolizumab (también conocido como MPDL3280A, y Tecentriq®).

En una realización, el inhibidor del punto de control es un inhibidor de PD-L2. En una realización, el inhibidor de PD-L2 es un anticuerpo anti-PD-L2. En una realización, el anticuerpo anti-PD-L2 es rHIgM12B7A.

En una realización, el inhibidor del punto de control es un inhibidor del gen-3 de activación de linfocitos (LAG-3). En una realización, el inhibidor de LAG-3 es IMP321, una proteína de fusión de Ig soluble (Brignone et al., J. Immunol., 2007, 179, 4202-4211). En otra realización, el inhibidor de LAG-3 es BMS-986016.

En una realización, los inhibidores del punto de control es un inhibidor de B7. En una realización, el inhibidor de B7 es un inhibidor de B7-H3 o un inhibidor de B7-H4. En una realización, el inhibidor de B7-H3 es MGA271, un anticuerpo anti-B7-H3 (Loo et al., Clin. Cancer Res., 2012, 3834).

En una realización, el inhibidor del punto de control es un inhibidor de TIM3 (dominio de inmunoglobulina de linfocitos T y dominio 3 de mucina) (Fourcade et al., J. Exp. Med., 2010, 207, 2175-86; Sakuishi et al., J. Exp. Med., 2010, 207, 2187 94).

En una realización, el inhibidor del punto de control es un agonista de OX40 (CD134). En una realización, el inhibidor del punto de control es un anticuerpo anti-OX40. En una realización, el anticuerpo anti-OX40 es anti-OX-40. En otra realización, el anticuerpo anti-OX40 es MEDI6469.

En una realización, el inhibidor del punto de control es un agonista de GITR. En una realización, el inhibidor del punto de control es un anticuerpo anti-GITR. En una realización, el anticuerpo anti-GITR es TRX518.

En una realización, el inhibidor del punto de control es un agonista de CD137. En una realización, el inhibidor del punto de control es un anticuerpo anti-CD137. En una realización, el anticuerpo anti-CD137 es urelumab. En otra realización, el anticuerpo anti-CD137 es PF-05082566.

En una realización, el inhibidor del punto de control es un agonista de CD40. En una realización, el inhibidor del punto de control es un anticuerpo anti-CD40. En una realización, el anticuerpo anti-CD40 es CF-870,893.

En una realización, el inhibidor del punto de control es interleucina-15 humana recombinante (rhIL-15).

En una realización, el inhibidor del punto de control es un inhibidor de IDO. En una realización, el inhibidor de IDO es INCB024360. En otra realización, el inhibidor de IDO es indoximod.

En ciertas realizaciones, las terapias de combinación incluyen dos o más de los inhibidores del punto de control descritos en el presente documento (incluyendo inhibidores del punto de control de la misma clase o diferentes). Además, las terapias de combinación descritas en el presente documento se pueden usar en combinación con uno o más segundos agentes activos, como se describe en el presente documento, cuando corresponda, para tratar enfermedades descritas en el presente documento y entendidas en la técnica.

En ciertas realizaciones, el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3e (CD3) humano se puede usar en combinación con una o más células inmunitarias que expresan uno o más receptores quiméricos para el antígeno (CAR) sobre su superficie (por ejemplo, una célula inmunitaria modificada). En general, los CAR comprenden un dominio extracelular de una primera proteína (por ejemplo, una proteína de unión al antígeno), un dominio transmembranario y un dominio de señalización intracelular. En ciertas realizaciones, una vez el dominio extracelular se une a una proteína diana, tal como un antígeno asociado a tumor (TAA) o antígeno específico de tumor (TSA), se genera una señal por el dominio de señalización intracelular que activa la célula inmunitaria, por ejemplo, para dirigir y destruir una célula que expresa la proteína diana.

Dominios extracelulares: Los dominios extracelulares de los CAR se unen a un antígeno de interés. En ciertas realizaciones, el dominio extracelular del CAR comprende un receptor, o una porción de un receptor, que se une a dicho antígeno. En ciertas realizaciones, el dominio extracelular comprende, o es, un anticuerpo o una porción de unión al antígeno del mismo. En realizaciones específicas, el dominio extracelular comprende, o es, un dominio Fv monocatenario (scFv). El dominio Fv monocatenario puede comprender, por ejemplo, un V ^lunido a V ^hpor un conector flexible, en donde dicho V^ly V^hson de un anticuerpo que se une dicho antígeno.

En ciertas realizaciones, el antígeno reconocido por el dominio extracelular de un polipéptido descrito en el presente documento es un antígeno asociado a tumor (TAA) o un antígeno específico de tumor (TSA). En diversas realizaciones específicas, el antígeno asociado a tumor o antígeno específico de tumor es, sin limitación, Her2, antígeno de células madre prostáticas (PSCA), alfa-fetoproteína (AFP), antígeno carcinoembrionario (CEA), antígeno-125 del cáncer (CA-125), CA19-9, calrretinina, MUC-1, antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA), proteína de la membrana epitelial (E^mA), antígeno de tumor epitelial (ETA), tirosinasa, antígeno asociado al melanoma-24 (MAGE), CD19, CD22, CD27, CD30, CD34, CD45, CD70, CD99, CD117, EGFRvIII (variante III del factor de crecimiento epidérmico), mesotelina, PAP (fosfatasa ácida prostática), prosteína, TARP (proteína del marco de lectura alterno del receptor gamma de linfocitos T), Trp-p8, STEAPI (antígeno epitelial de seis transmembranas de la próstata 1), cromogranina, citoqueratina, desmina, proteína ácida fibrilar de la glía (GFAP), proteína del líquido de la enfermedad quística macroscópica (GCDFP-15), antígeno de HMB-45, proteína melan-A (antígeno de melanoma reconocido por linfocitos T; MART-I), mio-D1, actina específica de músculo (MSA), neurofilamento, enolasa específica de neurona (NSE), fosfatasa alcalina placentaria, sinaptofisina, tiroglobulina, factor-1 de transcripción de la tiroides, la forma dimérica de la isoenzima piruvato cinasa de tipo M2 (M2-PK de tumor), una proteína ras anormal o una proteína p53 anormal. En ciertas otras realizaciones, el TAA o TSA reconocido por el dominio extracelular de un CAR es integrina avp3 (CD61), galactina o Ral-B.

En ciertas realizaciones, el TAA o TSA reconocido por el dominio extracelular de un CAR es un antígeno de cáncer/testículo (CT), por ejemplo, BAGE, CAGE, CTAGE, FATE, GAGE, HCA661, HOM-TES-85, MAGEA, MAGEB, MAGEC, NA88, NY-ES0-1, NY-SAR-35, OY-TES-1, SPANXBI, SPA17, SSX, SYCPI o TPTE.

En ciertas otras realizaciones, el TAA o TSA reconocido por el dominio extracelular de un CAR es un hidrato de carbono o gangliósido, por ejemplo, fuc-GMI, GM2 (antígeno oncofetal inmunogénico-1; OFA-I-1); GD2 (OFA-I-2), GM3, GD3 y similares.

En ciertas otras realizaciones, el TAA o TSA reconocido por el dominio extracelular de un CAR es alfa-actinina-4, Bage-1, BCR-ABL, proteína de fusión Bcr-Abl, beta-catenina, CA 125, CA 15-3 (CA 27.29\BCAA), CA 195, CA 242, CA-50, CAM43, Casp-8, cdc27, cdk4, cdkn2a, CEA, coa-1, proteína de fusión dek-can, EBNA, EF2, antígenos del virus de Epstein Barr, proteína de fusión ETV6-AMI.1, HLA-A2, HLA-All, hsp70-2, KIAA0205, Mart2, Mum-1,2 y 3, neo-PAP, miosina clase I, OS-9, proteína de fusión μml-RARa, PTPRK, K-ras, N-ras, triosefosfato isomerasa, Gage 3,4,5,6,7, GnTV, Herv-K-mel, Lage-1, NA-88, NY-Eso-1/Lage-2, SP17, SSX-2, TRP2-Int2, gp100 (Pmel17), tirosinasa, TRP-1, TRP-2, Ma Ge -1, MAGE-3, RAGE, GAGE-1, GAGE-2, p15(58), RAGE, SCP-1, Hom/Mel-40, PRAME, p53, HRas, HER-2/neu, E2A-PRL, H4-RET, IGH-IGK, MYL-RAR, antígenos del virus del papiloma humano (VPH) E6 y E7, TSP-180, MAGE-4, MAGE-5, MAGE-6, p185erbB2, p180erbB-3, c-met, nm-23H1, Ps A, TAG-72-4, CA 19-9, CA 72-4, CAM 17.1, NuMa, K-ras, 13-catenina, Mum-1, p16, TAGE, PSMA, CT7, telomerasa, 43-9F, 5T4, 791Tgp72, 13HCG, BCA225, BTAA, CD68\KP1, C0-029, FGF-5, G250, Ga733 (EpCAM), HTgp-175, M344, MA-50, MG7-Ag, MOV18, NB\70K, NY-C0-1, RCAS1, SDCCAG16, TA-90, TAAL6, TAG72, TLP o TPS.

En diversas realizaciones específicas, el antígeno asociados a tumor o antígeno específico de tumor es un antígeno de tumor relacionado con LMA, como se describe en S. Anguille et al., Leukemia (2012), 26, 2186-2196.

Otros antígenos asociados a tumor y específicos de tumor son conocidos por los expertos en la técnica.

Se conocen en la técnica receptores, anticuerpos y scFv que se unen a TSA y TAA, útiles en la construcción de receptores quiméricos para el antígeno, ya que son secuencias de nucleótidos que los codifican.

En ciertas realizaciones específicas, el antígeno reconocido por el dominio extracelular de un receptor quimérico para el antígeno es un antígeno que no se considera, en general, que sea un TSA o a TAA, pero que está, sin embargo, asociado a células tumorales, o a daño provocado por un tumor. En ciertas realizaciones, por ejemplo, el antígeno es, por ejemplo, un factor de crecimiento, citocina o interleucina, por ejemplo, un factor de crecimiento, citocina o interleucina asociada a angiogénesis o vasculogénesis. Dichos factores de crecimiento, citocinas o interleucinas pueden incluir, por ejemplo, factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF), factor de crecimiento de fibroblastos básico (bFGF), factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF), factor de crecimiento de hepatocitos (HGF), factor de crecimiento similar a la insulina (IGF) o interleucina-8 (IL-8). Los tumores también pueden crear un entorno local hipóxico para el tumor. Como tal, en otras realizaciones específicas, el antígeno es un factor asociado a hipoxia, por ejemplo, HIF-1a, HIF-1 p, HIF-2a, HIF-2p, HIF-3a o HIF-3p. Los tumores también pueden causar daño localizado al tejido normal, causando la liberación de moléculas conocidas como moléculas de patrones moleculares asociadas al daño (DAMP; también conocidas como alarminas). En ciertas otras realizaciones específicas, por lo tanto, el antígeno es un DAMP, por ejemplo, una proteína de choque térmico, proteína asociada a cromatina de la caja 1 del grupo de alta movilidad (HMGb 1), S100A8 (MRP8, calgranulina A), S100A9 (MRP14, calgranulina B), amiloide A del suero (SAA), o puede ser un ácido desoxirribonucleico, adenosina trifosfato, ácido úrico o sulfato de heparina.

Dominio transmembranario: En ciertas realizaciones, el dominio extracelular del CAR se une al dominio transmembranario del polipéptido por un secuencia de polipéptidos conectora, espaciadora o de bisagra, por ejemplo, una secuencia de CD28 o una secuencia de CTLA4. El dominio transmembranario se puede obtener o derivar del dominio transmembranario de cualquier proteína transmembranaria, y puede incluir toda o una porción de dicho dominio transmembranario. En realizaciones específicas, el dominio transmembranario se puede obtener o derivar de, por ejemplo, CD8, CD16, un receptor de citocina y receptor de interleucina, o un factor de crecimiento receptor, o similares.

Dominios de señalización intracelular: En ciertas realizaciones, el dominio intracelular de un CAR es o comprende un dominio intracelular o motivo de una proteína que se expresa sobre la superficie de linfocitos T y desencadena la activación y/o proliferación de dichos linfocitos T. Dicho dominio o motivo es capaz de transmitir una señal primaria de unión al antígeno que es necesaria para la activación de un linfocito T en respuesta a la unión del antígeno a la porción extracelular del CAR. Normalmente, este dominio o motivo comprende, o es, un ITAM (motivo de activación del inmunorreceptor basado en tirosina). Los polipéptidos que contienen ITAM adecuados para CAR incluyen, por ejemplo, la cadena zeta de CD3 (CD3Z) o porciones que contienen ITAM de la misma. En una realización específica, el dominio intracelular es un dominio de señalización intracelular de CD3Z. En otras realizaciones específicas, el dominio intracelular es de una cadena de receptores de linfocitos, una proteína compleja TCR/CD3, una subunidad de receptor de Fe o una subunidad de receptor de IL-2. En ciertas realizaciones, el CAR comprende adicionalmente uno o más dominios o motivos coestimulantes, por ejemplo, como parte del dominio intracelular del polipéptido. El uno o más dominios o motivos coestimulantes pueden ser, o pueden comprender, uno o más de una secuencia de polipéptidos de CD27 coestimulante, una secuencia de polipéptidos de CD28 coestimulante, una secuencia de polipéptidos de OX40 (CD134) coestimulante, una secuencia de polipéptidos de 4-1BB (CD137) coestimulante, o una secuencia de polipéptidos coestimulante de linfocitos T inducibles coestimulantes (ICOS), u otro dominio o motivo coestimulante, o cualquier combinación de los mismos.

El CAR también puede comprender un motivo de supervivencia de linfocitos T. El motivo de supervivencia de linfocitos T puede ser cualquier secuencia de polipéptidos o motivo que facilite la supervivencia del linfocito T después de la estimulación por un antígeno. En ciertas realizaciones, el motivo de supervivencia de linfocitos T es, o deriva de, CD3, CD28, un dominio de señalización intracelular del receptor de IL-7 (IL-7R), un dominio de señalización intracelular del receptor de IL-12, un dominio de señalización intracelular del receptor de IL-15, un dominio de señalización intracelular del receptor de IL-21, o un dominio de señalización intracelular del receptor del factor de crecimiento transformante p (TGFP).

Las células inmunitarias modificadas que expresan los CAR pueden ser, por ejemplo, linfocitos T (linfocitos T, por ejemplo, linfocitos T CD4+ o linfocitos T CD8+), linfocitos citotóxicos (CTL) o células citolíticas naturales (NK). Los linfocitos T usados en las composiciones y métodos proporcionados en el presente documento pueden ser linfocitos T intactos o linfocitos T restringidos a MHC. En ciertas realizaciones, los linfocitos T son linfocitos infiltrantes de tumor (TIL). En ciertas realizaciones, los linfocitos T han sido aislados de una biopsia de tumor, o se han expandido de linfocitos T aislados de una biopsia de tumor. En ciertas otras realizaciones, los linfocitos T han sido aislados de, o se expanden de linfocitos T aislados de, sangre periférica, sangre del cordón o linfa. Las células inmunitarias que se van a usar para generar células inmunitarias modificadas que expresan un CAR se pueden aislar usando métodos rutinarios aceptados en la técnica, por ejemplo, extracción de sangre seguido de aféresis y opcionalmente aislamiento o clasificación de células mediada por anticuerpos.

Las células inmunitarias modificadas son preferentemente autólogas de un individuo al que se van a administrar las células inmunitarias modificadas. En ciertas otras realizaciones, las células inmunitarias modificadas son alógenas de un individuo al que se van a administrar las células inmunitarias modificadas. Donde se usan linfocitos T o células NK alógenos para preparar linfocitos T modificados, es preferible seleccionar linfocitos T o células NK que reducirán la posibilidad de enfermedad injerto contra huésped (GVHD) en el individuo. Por ejemplo, en ciertas realizaciones, los linfocitos T específicos de virus se seleccionan para la preparación de linfocitos T modificados; cabrá esperar que dichos linfocitos tengan una capacidad nativa enormemente reducida para unirse a, y así llegar a ser activados por, cualquier antígeno de receptor. En ciertas realizaciones, el rechazo mediado por receptor de linfocitos T alógenos se puede reducir por coadministración al hospedador de uno o más agentes inmunosupresores, por ejemplo, ciclosporina, tacrolimus, sirolimus, ciclofosfamida o similares.

Los linfocitos T, por ejemplo, linfocitos T sin modificar o linfocitos T que expresan CD3 y CD28, o que comprenden un polipéptido que comprende un dominio de señalización de CD3Z y un dominio coestimulante de CD28, se pueden expandir usando anticuerpos contra CD3 y CD28, por ejemplo, anticuerpos unidos a perlas; véanse, por ejemplo, las patentes de EE. UU. N.25.948.893; 6.534.055; 6.352.694; 6.692.964; 6.887.466; y 6.905.681.

Las células inmunitarias modificadas, por ejemplo, los linfocitos T modificados, pueden comprender opcionalmente un "gen suicida" o "cambio de seguridad" que permite la destrucción de sustancialmente todas las células inmunitarias modificadas cuando se desee. Por ejemplo, los linfocitos T modificados, en ciertas realizaciones, pueden comprender un gen de timidina cinasa del VHS (HSV-TK), que provoca la muerte de los linfocitos T modificados tras el contacto con ganciclovir. En otra realización, los linfocitos T modificados comprenden una caspasa inducible, por ejemplo, una caspasa 9 inducible (caspasa9i), por ejemplo, una proteína de fusión entre la caspasa 9 y la proteína de unión de FK506 humana que permite la dimerización usando una molécula farmacéutica específica pequeña. Véase Straathof et al., Blood 1 05(11 ):4247-4254 (2005).

J. Composiciones farmacéuticas

Las composiciones farmacéuticas proporcionadas en el presente documento contienen cantidades terapéuticamente eficaces de uno o más de los compuestos proporcionados en el presente documento y opcionalmente un vehículo, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable.

En una realización adicional, en el presente documento se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto proporcionado en el presente documento y un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento, y un excipiente farmacéuticamente aceptable, en donde el anticuerpo biespecífico comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de ^sE^qID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ ID NO:17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28. Según la invención la composición es para uso combinado en el tratamiento del mieloma múltiple.

En una realización adicional, en el presente documento se proporciona una composición farmacéutica que comprende el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un anticuerpo biespecífico que comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento, en donde el anticuerpo biespecífico se caracteriza por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SEQ iD NO:17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28, y un excipiente farmacéuticamente aceptable.

Según la invención, la composición es para uso combinado en el tratamiento del mieloma múltiple.

Los compuestos se pueden formular en preparados farmacéuticos adecuados, tales como disoluciones, suspensiones, comprimidos, comprimidos dispersables, píldoras, cápsulas, polvos, formulaciones de liberación sostenida o elixires, para administración por vía oral o en disoluciones o suspensiones estériles para administración oftálmica o parenteral, así como preparado de parche transdérmico e inhaladores de polvo seco. Normalmente, los compuestos descritos anteriormente se formulan en composiciones farmacéuticas usando técnicas y procedimientos bien conocidos en la técnica (véase, por ejemplo, Ansel Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms, séptima edición, 1999).

En las composiciones, concentraciones eficaces de uno o más compuestos o sales farmacéuticamente aceptables se mezclan con un soporte o vehículo farmacéutico adecuado. En ciertas realizaciones, las concentraciones de los compuestos en las composiciones son eficaces para la administración de una cantidad, tras la administración, que trata, previene o mejora uno o más de los síntomas y/o la progresión del mieloma múltiple.

Normalmente, las composiciones se formulan para administración de dosis individuales. Para formular una composición, la fracción en peso del compuesto se disuelve, suspende, dispersa o mezcla de otro modo en un vehículo seleccionado a una concentración eficaz de forma que la afección tratada se alivie o mejore. Los soportes o vehículos farmacéuticos adecuados para administración de los compuestos proporcionados en el presente documento incluyen cualquiera de dichos soportes conocidos por los expertos en la técnica por ser adecuados para el modo de administración particular.

Además, los compuestos se pueden formular como el único principio farmacéuticamente activo en la composición o se pueden combinar con otros principios activos. Las suspensiones liposómicas, que incluyen liposomas dirigidos al tejido, tales como liposomas dirigidos al tumor, también pueden ser adecuadas como soportes farmacéuticamente aceptables.

Éstas se pueden preparar según métodos conocidos por los expertos en la técnica. Por ejemplo, se pueden preparar formulaciones de liposomas como se conoce en la técnica. Brevemente, los liposomas, tales como vesículas multilaminares (MLV), se pueden formar secando fosfatidil colina de huevo y fosfatidil serina de cerebro (relación molar 7 :3) en el interior de un matraz. Se añade una disolución de un compuesto en solución salina tamponada con fosfato que carece de cationes divalentes (PBS) y el matraz se agita hasta que se disperse la película de lípido. Las vesículas resultantes se lavan para retirar el compuesto no encapsulado, se sedimenta por centrifugación y luego se resuspende en PBS.

El compuesto activo se incluye en el vehículo farmacéuticamente aceptable en una cantidad suficiente para ejercer un efecto terapéuticamente útil en ausencia de efectos secundarios no deseables en el paciente tratado. La concentración terapéuticamente eficaz se puede determinar empíricamente probando los compuestos en sistemas in vitro e in vivo descritos en el presente documento y luego se extrapola de los mismos para las dosis para seres humanos.

La concentración de compuesto activo en la composición farmacéutica dependerá de la absorción, distribución tisular, inactivación, metabolismo y tasas de eliminación del compuesto activo, las características fisicoquímicas del compuesto, el programa de administración y la cantidad administrada, así como otros factores conocidos por los expertos en la técnica. Por ejemplo, la cantidad que se administra es suficiente para mejorar uno o más de los síntomas del cáncer, incluyendo tumores sólidos y tumores de transmisión hemática.

Las disoluciones o suspensiones usadas para administración parenteral, intradérmica, subcutánea o tópica pueden incluir cualquiera de los siguientes componentes: un diluyente estéril, tal como agua para inyectables, solución salina, aceite fijo, polietilenglicol, glicerina, propilenglicol, dimetilacetamida u otro disolvente sintético; agentes antimicrobianos, tales como alcohol bencílico y metilparabenos; antioxidantes, tales como ácido ascórbico y bisulfito de sodio; agentes quelantes, tales como ácido etilendiaminatetraacético (EDTA); tampones, tales como acetatos, citratos y fosfatos; y agentes para el ajuste de la tonicidad, tales como cloruro sódico o dextrosa. Las preparaciones parenterales se pueden encerrar en ampollas, plumas, jeringas desechables o viales de dosis única o de múltiples dosis fabricados de vidrio, plástico u otro material adecuado.

En casos en los que los compuestos presenten solubilidad insuficiente, se pueden usar métodos de solubilización de compuestos. Dichos métodos son conocidos por aquellos expertos en esta técnica, e incluyen, pero no se limitan a, el uso de codisolventes, tales como sulfóxido de dimetilo (DMSO), el uso de tensioactivos, tales como TWEEN®, o disolución en bicarbonato sódico acuoso.

Tras la mezcla o adición del (de los) compuesto(s), la mezcla resultante puede ser una disolución, suspensión, emulsión o similares. La forma de la mezcla resultante depende de varios factores, que incluyen el modo previsto de administración y la solubilidad del compuesto en el soporte o vehículo seleccionado. La concentración eficaz es suficiente para mejorar los síntomas de la enfermedad, trastorno o afección tratada y puede ser empíricamente determinada.

Las composiciones farmacéuticas se proporcionan para administración a seres humanos y animales en formas farmacéuticas unitarias, tales como comprimidos, cápsulas, píldoras, polvos, gránulos, disoluciones o suspensiones parenterales estériles, y disoluciones o suspensiones orales, y emulsiones de aceite en agua que contienen cantidades adecuadas de los compuestos o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. Los compuestos farmacéuticamente terapéuticamente activos y sales de los mismos se formulan y administran en formas farmacéuticas unitarias o formas farmacéuticas múltiples. Formas de dosis unitaria, como se usa en el presente documento, se refiere a unidades físicamente discretas adecuadas para sujetos humanos y animales y envasadas individualmente como se conoce en la técnica. Cada dosis unitaria contiene una cantidad predeterminada del compuesto terapéuticamente activo suficiente para producir el efecto terapéutico deseado, en asociación con el vehículo, soporte o diluyente farmacéutico requerido. Los ejemplos de formas de dosis unitaria incluyen ampollas y jeringas y comprimidos o cápsulas individualmente envasados. Las formas de dosis unitaria se pueden administrar en fracciones o múltiplos de las mismas. Una forma de dosis múltiple es una pluralidad de formas farmacéuticas unitarias idénticas envasadas en un único recipiente a administrar en forma de dosis unitaria segregada. Los ejemplos de formas de dosis múltiple incluyen viales, frascos de comprimidos o cápsulas o botellas de pintas o galones. Por tanto, la forma de dosis múltiple es un múltiplo de dosis unitarias que no están segregadas en el envase.

Se pueden preparar formas farmacéuticas o composiciones que contienen principio activo en el intervalo del 0,005 % al 100 % estando constituido el resto por soporte no tóxico. Para administración por vía oral, una composición no tóxica farmacéuticamente aceptable se forma por la incorporación de cualquiera de los excipientes normalmente empleados, tales como, por ejemplo calidades farmacéuticas de manitol, lactosa, almidón, estearato de magnesio, talco, derivados de celulosa, croscarmelosa sódica, glucosa, sacarosa, carbonato de magnesio o sacarina sódica. Dichas composiciones incluyen disoluciones, suspensiones, comprimidos, cápsulas, polvos y formulaciones de liberación sostenida, tales como, pero no se limitan a, implantes y sistemas de administración microencapsulada, y polímeros biodegradables y biocompatibles, tales como colágeno, etileno-acetato de vinilo, polianhídridos, ácido poliglicólico, poliortoésteres, ácido poliláctico y otros. Los métodos de preparación de estas composiciones son conocidos por los expertos en la técnica.

Los compuestos activos o las sales farmacéuticamente aceptables se pueden preparar con vehículos que protegen el compuesto contra la rápida eliminación del cuerpo, tales como formulaciones o recubrimientos de liberación con el tiempo.

Las composiciones pueden incluir otros compuestos activos para obtener combinaciones deseadas de propiedades. Los compuestos proporcionados en el presente documento, o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, como se describe en el presente documento, también pueden ser administrados ventajosamente para fines terapéuticos o profilácticos, junto con otro agente farmacológico conocido en la técnica general por ser de valor en el tratamiento de una o más de las enfermedades o afecciones médicas denominadas anteriormente en este documento, tales como enfermedades relacionadas con el estrés oxidativo. Se debe entender que dicha terapia de combinación constituye un aspecto adicional de las composiciones y métodos de tratamiento.

K. Evaluación de la actividad y propiedades de la combinación

Están disponibles procedimientos fisiológicos, farmacológicos y bioquímicos convencionales para probar los compuestos para identificar aquellos que poseen las propiedades deseadas, que incluyen actividad proliferativa anti-mieloma múltiple y perfil de seguridad adecuado. Dichos ensayos incluyen, por ejemplo, ensayos bioquímicos, tales como ensayos de unión, ensayos de incorporación de radiactividad, así como una variedad de ensayos basados en células.

5. EJEMPLOS

Ciertas realizaciones de la invención se ilustran por los siguientes ejemplos no limitantes.

Abreviaturas:

AIBN:

Azobisisobutironitrilo

Boc

ferc-Butiloxicarbonilo

Boc₂O

Dicarbonato de di-ferc-butilo

tBuOK

ferc-Butóxido de potasio

DIEA

Diisopropiletilamina

DMF

N,N'-Dimetilformamida

EtOAc

Acetato de etilo

MeOH

Metanol

MM

Mieloma múltiple

NBS:

N-bromosuccinimida

RMN

Resonancia magnética nuclear

i-PrOAc:

Acetato de isopropilo

TBSCI

Dimetilsililcloruro de terc-butilo

THF

Tetrahidrofurano

CCF

Cromatografía en capa fina

TMSCl

Cloruro de trimetilsililo

Ejemplo 1: Síntesis de 4-(4-(4-(((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-il)oxi)metil)bencil)piperazin-1-il)-3-fluorobenzonitrilo (Compuesto 1 ).

Ácido 2-amino-5-metoxi-5-oxopentanoico. A una suspensión de ácido 2-aminopentanodioico (250 g, 1,70 moles) en metanol seco (2,5 l) bajo nitrógeno se añadió cloruro de trimetilsililo (277 g, 2,55 moles) durante 30 min. La disolución transparente resultante se agitó a temperatura ambiente (20 °C) durante 30 min. La RMN 1H mostró que el material de partida se consumió completamente. La mezcla de reacción se usó en la siguiente etapa sin procesamiento adicional. RMN 1H: 400 MHz CD3OD 5: 4,17-4,15 (m, 1H), 3,71 (s, 3H), 2,70-2,60 (m, 2H), 2,33-2,25 (m, 2H).

Ácido 2-((terc-butoxicarbonil)amino)-5-metoxi-5-oxopentanoico. A la disolución anterior se añadió trietilamina (275 g, 2,72 moles) y dicarbonato de di-terc-butilo (447,35 g, 2,05 moles). La mezcla de reacción se agitó a 25 °C durante 2 h. La disolución se concentró a sequedad, luego se añadió agua (2,5 l) para disolver el residuo. La fase acuosa resultante se lavó con acetato de etilo (200 ml), luego se acidificó hasta pH = 3 por HCl (1 N) y se extrajo con acetato de etilo (1 l x 3). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (800 ml), se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron para ofrecer ácido 2-(terc-butoxicarbonilamino)-5-metoxi-5-oxo-pentanoico (250 g, 56 % de rendimiento, dos etapas) como un sólido blanco. RMN 1H: 400 MHz CD3OD 5: 4,18-4,11 (m, 1H), 3,69 (s, 3H), 2,48-2,43 (m, 2H), 2,21 -2,15 (m, 1 H), 1,95-1,91 (m, 1H), 1,46 (s, 9H).

5-Amino-4-(terc-butoxicarbonilamino)-5-oxo-pentanoato de metilo. A una disolución de ácido 2-(tercbutoxicarbonilamino)-5-metoxi-5-oxo-pentanoico (200 g, 765 mmoles) en 1,4-dioxano (1,5 l) se añadieron dicarbonato de di-terc-butilo (267 g, 1,22 moles) y piridina (121 g, 1,53 moles). Después de que la mezcla de reacción se agitara a 25 °C durante 30 min, se añadió carbonato de amonio (182 g, 2,30 moles) a la mezcla y se agitó durante 16 h adicionales a 25 °C. El disolvente orgánico se retiró por evaporación rotatoria, el residuo se acidificó por HCl (6 M) hasta pH = 3 y luego se extrajo con acetato de etilo (800 ml x 3). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera (800 ml), se secó sobre sulfato de sodio y se filtró. Los extractos orgánicos volátiles se retiraron a presión reducida ofreciendo 5-amino-4-(tercbutoxicarbonil amino)-5-oxo-pentanoato de metilo (180 g, 90 % de rendimiento) como un sólido blanco. RMN 1H: 400 MHz CDCl35: 6,51 (s, 1H), 5,94 (s, 1H), 5,43 (s, 1 H), 4,21 (s, 1H), 3,63 (s, 3H), 2,59-2,40 (m, 2H), 2,15-2,11 (m, 1H), 1,94-1,90 (m, 1 H), 1,42 (s, 9H).

Clorhidrato de 4,5-diamino-5-oxo-pentanoato de metilo. Se agitó una mezcla de 5-amino-4-(terc-butoxicarbonilamino)-5-oxo-pentanoato de metilo (180 g, 692 mmoles) y HCl/acetato de etilo (300 ml, 4 M) a 25 °C durante 12 h. El sólido precipitado se recogió por filtración a vacío y se lavó con acetato de etilo (500 ml) dando clorhidrato de 4,5-diamino-5-oxo-pentanoato de metilo (130 g, 95 % de rendimiento) como un sólido blanco. r Mn 1H: 400 MHz CD3OD 5: 4,00-3,96 (m, 1 H), 3,70 (s, 3H), 2,59-2,52 (m, 2H), 2,22-2,13 (m, 2H).

3-Hidroxi-2-metil-benzoato de metilo. Se realizaron cuatro lotes (200 g cada uno) en paralelo. A una disolución de ácido 3-hidroxi-2-metil-benzoico (200 g, 1,31 moles) en metanol (4,0 l) se añadió ácido sulfúrico concentrado (47,7 g, 486 mmoles). La mezcla de reacción se agitó a 60 °C durante 17 h. La mezcla de reacción se concentró hasta 800 ml. La mezcla resultante se enfrió hasta 20 °C y se vertió lentamente en agua (400 ml) durante 30 min. Se añadió agua (1200 ml) a 20 °C durante 3 h y la mezcla resultante se agitó a 20 °C durante 1 h. El sólido precipitado se recogió por filtración a vacío (cuatro lotes combinados) y se lavó tres veces con agua/metanol (1000 ml, 9:1) hasta que el pH > 3. El sólido se secó a vacío a 45 °C dando 3-hidroxi-2-metilbenzoato de metilo (700 g, 80,4 % de rendimiento) como un sólido gris. RMN 1H: 400 MHz DMSO-a65: 9,70 (s, 1H), 7,18 (t, J = 6,8 Hz, 1H), 7,09 (t, J= 7,6 Hz, 1H), 7,00 (t, J= 6,8 Hz, 1H), 3,81 (s, 3H), 2,29 (s, 3H).

3-[terc-Butil(dimetil)silil]oxi-2-metil-benzoato de metilo. Se realizaron dos lotes (240 g cada uno) en paralelo. A una disolución de 3-hidroxi-2-metilbenzoato de metilo (240 g, 1,44 moles) en N,N-dimetilformamida (1,40 l) se añadió imidazol (246 g, 3,61 moles) y cloruro de terc-butil-dimetilsililo (238 g, 1,58 moles) a 5 °C. Después de la adición, la mezcla se calentó hasta 20 °C y se agitó durante 6 h. Se añadió acetato de isopropilo (1700 ml), y entonces se añadió lentamente agua (2000 ml) mientras que la temperatura se mantuvo por debajo de 30 °C. La mezcla resultante se agitó y la fase orgánica se separó. La fase orgánica combinada (dos lotes combinados) se lavó con agua (1700 ml x 3) y se concentró a -1500 ml (KF<0,05 %). El producto se almacenó como una disolución de acetato de isopropilo que se usó en la siguiente etapa sin más purificación.

2-(Bromometil)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oxi-benzoato de metilo. Se realizaron dos lotes (~375 g cada uno) en paralelo. A la disolución en acetato de isopropilo de 3-[terc-butil(dimetil)silil]oxi-2-metil-benzoato de metilo (~375 g, 1,34 moles) se añadió N-bromosuccinimida (274 g, 1,54 moles) y azobisisobutironitrilo (4,40 g, 26,8 mmoles). La mezcla de reacción se calentó hasta 70 °C durante al menos 1 h y se agitó a 70 °C durante 4 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta 20 °C y se mantuvo a 20 °C durante al menos 1 h. Los dos lotes de sólido (succinimida) se retiraron por filtración y se lavaron con acetato de isopropilo (700 ml). El filtrado se lavó con disolución de sulfito de sodio (700 g) en agua (6000 ml), seguido de agua (1500 ml). La fase orgánica se destiló a vacío a 45 °C a sequedad dando 2-(bromometil)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oxibenzoato de metilo (920 g, 95,5 % de rendimiento) como un aceite naranja oscuro. RMN 1H: 400 MHz DMSO-afe 5: 7,45 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,36 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,13 (t, J= 7,2 Hz, 1H), 4,95 (s, 2H), 1,02 (s, 9H), 0,29 (s, 6H).

5-Amino-4-[4-[terc-butil(dimetil)silil]oxi-1-oxo-isoindolin-2-il]-5-oxo-pentanoato de metilo. A una disolución con agitación de clorhidrato de 4,5-diamino-5-oxo-pentanoato de metilo (74,5 g, 379 mmoles) en acetonitrilo (2,50 l) se añadió 2- (bromometil)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oxi-benzoato de metilo (125 g, 348 mmoles). A la suspensión se añadió diisopropiletilamina (89,9 g, 696 mmoles) a través de un embudo de adición durante 10 min y entonces la mezcla se agitó a 60 °C durante 16 h. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo (1,0 l), se lavó con HCl (1 N, 1,0 l), bicarbonato sódico (sat., 1,0 l) y salmuera (1,0 L) sucesivamente. La fase orgánica se concentró dando el 5-amino-4-[4-[tercbutil(dimetil)silil]oxi-1 -oxo-isoindolin-2-il]-5-oxo-pentanoato de metilo en bruto (108 g, bruto) como un sólido amarillo claro. CLEM: m/z 407,3 [M+1]+.

S-amino-4-(4-hidroxi-1-oxo-isoindolin-2-il)-5-oxo-pentanoato de metilo. A una disolución fría con agitación de 5-amino-4-[4-[terc-butil(dimetil)silil]oxi-1-oxo-isoindolin-2-il]-5-oxo-pentanoato de metilo (108 g, 266 mmoles) en N,N-dimetilformamida (350 ml) se añadió carbonato de potasio (14,7 g, 106 mmoles) en agua (40 ml) en porciones durante 5 min. La mezcla de reacción resultante se agitó a 15 °C durante 15 h. La mezcla de reacción se enfrió en un baño de hielo, y se añadió lentamente HCl (12 M, 15 ml) a 0-5 °C. Se añadió acetonitrilo (200 ml) a la mezcla y se formó un sólido precipitado. La suspensión se agitó a temperatura ambiente durante 10 min y se filtró. La torta de filtración se lavó con acetato de etilo (200 ml x 5) dando el producto (55 g). El filtrado se concentró a alto vacío dando un producto en bruto (100 g) que se disolvió en diclorometano (1,0 l) y se dejó que reposara a 15 °C durante 16 horas. Se formó un sólido blanco que se filtró dando 5 g de producto. Los sólidos se combinaron dando 5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxo-isoindolin-2-il)-5-oxo-pentanoato de metilo (60 g, 77 % de rendimiento) como un sólido blanco. RMN 1H: 400 MHz DMSO-afe 5: 7,58 (s, 1H), 7,31 (t, J= 8,0 Hz, 1H), 7,19--7,14 (m, 2H), 7,01 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,75-4,71 (m, 1H), 4,50 (d, J= 17,6 Hz, 1H), 4,32 (d, J= 17,6 Hz, 1H), 3,51 (s, 3H), 2,29-2,18 (m, 3H), 2,09-1,99 (m, 1H).

5-Amino-4-[4-[[4-(bromometil)fenil]metoxi]-1-oxo-isoindolin-2-il]-5-oxo-pentanoato de metilo. Se realizaron dos reacciones (25 g, 85,5 mmoles) en paralelo. Se agitó una mezcla de 1,4-bis(bromometil)benceno (67,7 g, 257 mmoles), carbonato de potasio (11,8 g, 85,5 mmoles) y 5-amino-4-(4-hidroxi-1 -oxo-isoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de metilo (25 g, 85.5 mmoles) en acetonitrilo (1 l) a 60 °C durante 16 h. Los dos lotes se combinaron y la mezcla se enfrió hasta 15 °C y se filtró. El filtrado se concentró y se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice (eluido por 50 % de éter de petróleo en acetato de etilo hasta 100 % de acetato de etilo) proporcionando 5-amino-4-[4-[[4-(bromometil)fenil]metoxi]-1-oxo-isoindolin-2-il]-5-oxo-pentanoato de metilo (52 g, 63 % de rendimiento) como un sólido blanco. RMN 1H: 400 MHz DMSO-afe 5: 7,59 (s, 1H), 7,50-7,44 (m, 5H), 7,32-7,28 (m, 2H), 7,19 (s, 1H), 5,26 (s, 2H), 4,79-4,71 (m, 3H), 4,55 (d, J= 17.6 Hz, 1H), 4,43 (d, J= 17,6 Hz, 1H), 3,52 (s, 3H), 2,30-2,19 (m, 3H), 2,10-2,08 (m, 1H).

3- [4-[[4-(bromometil)fenil]metoxi]-1-oxo-isoindolin-2-il]piperidina-2,6-diona. Se realizaron dos reacciones (28,5 g, 60,0 mmoles) en paralelo. Se disolvió 5-amino-4-[4-[[4-(bromometil)fenil]metoxi]-1 -oxo-isoindolin-2-il]-5-oxopentanoato de metilo (28,5 g, 60,0 mmoles) en tetrahidrofurano (720 ml) y la disolución se enfrió en baño de nieve carbónica/acetona hasta -70 °C. Mientras se agitaba, se añadió terc-butóxido de potasio (7,4 g, 66,0 mmoles) en una porción a la disolución transparente. La mezcla de reacción viró a amarillo pálido y la agitación continuó durante 2 h adicionales a -70 °C. Se transfirió rápidamente una disolución enfriada de HCl (1 N, 260 ml) a la mezcla de reacción mientras se mantenía la temperatura a -70 °C. La mezcla viró inmediatamente a blanco lechoso y se retiró el baño de nieve carbónica/acetona. La mezcla se concentró para retirar la mayoría del tetrahidrofurano. Tras la concentración de la mezcla de reacción, se formó un sólido precipitado blanco. La suspensión blanca se diluyó con agua (500 ml) y luego se filtró. La torta de filtración se lavó con agua (500 ml) y se secó en estufa de vacío a 40 °C durante 12 h, luego se lavó con acetato de etilo (500 ml). Los lotes se combinaron dando 3-[4-[[4-(bromometil)fenil]metoxi]-1-oxo-isoindolin-2-il]piperidina-2,6-diona (49,85 g, 93 %) como un sólido amarillo claro. R^mN 1H: 400 MHz DMSo-de ^ó: 10,95 (s, 1H), 7,51-7,41 (m., 5H), 7,35-7,28 (m, 2H), 5,23 (s, 2H), 5,12-5,07 (m, 1H), 4,70 (s, 2H), 4,41 (d, J= 17,6 Hz, 1H), 4,25 (d, J= 17,6 Hz, 1H), 2,90-2,84 (m, 1H), 2,58-2,53 (m, 1 H), 2,44-2,41 (m, 1H), 1,98-1,95 (m, 1 H).

4-(4-(4-(((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-il)oxi)metil)bencil)piperazin-1-il)-3-fluorobenzonitrilo. Se dispuso 3-(4-((4-(bromometil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)piperidina-2,6-diona (5,0 g, 11,28 mmoles) en un matraz con 3-fluoro-4-(piperazin-1-il)benzonitrilo (2,315 g, 11,28 mmoles), diisopropiletilamina (5,91 ml, 33,8 mmoles) y acetonitrilo (100 ml). La mezcla de reacción se agitó a 40 °C durante 18 h. Se retiraron los extractos orgánicos volátiles a presión reducida y la purificación por métodos convencionales proporcionó 4-(4-(4-(((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-il)oxi)metil)bencil)piperazin-1-il)-3-fluorobenzonitrilo. ^rMⁿ1H (400 MHz, DMSO-de) ^ó10,97 (s, 1H), 7,68 (dd, J=1,96, 13,45 Hz, 1H), 7,56 (dd, J=1,77, 8,38 Hz, 1H), 7,43-7,52 (m, 3H), 7,30-7,38 (m, 4H), 7,11 (t, J=8,80 Hz, 1H), 5,24 (s, 2H), 5,11 (dd, J=5,14, 13,33 Hz, 1 H), 4,37-4,46 (m, 1 H), 4,22-4,30 (m, 1H), 3,54 (s, 2H), 3,12-3,23 (m, 4H), 2,84-2,98 (m, 1H), 2,52 2,62 (m, 5H), 2,36-2,48 (m, 1H), 1,92-2,04 (m, 1H). EM (ESI) m/z 568,2 [M+1]+. Anal. calcd para C₃2H30FN5O₄: C, 67,71; H, 5,33; N, 12,34. Hallado: C, 67,50; H, 5,44; N 12,34.

Ejemplo 2: Síntesis de (S)-4-(4-(4-(((2-(2,6-dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-il)oxi)metil)bencil)piperazin-1-il)-3-fluorobenzonitrilo (Compuesto 2)

(4S)-5-Amino-4-(benciloxicarbonilamino)-5-oxopentanoato de terc-butilo. A una disolución de ácido (2S)-2-(benciloxicarbonilamino)-5-terc-butoxi-5-oxo-pentanoico (150 g, 445 mmoles) en 1,4-dioxano (1,50 L) se añadió dicarbonato de di-terc-butilo (155 g, 711 mmoles), piridina (70,3 g, 889 mmoles) y bicarbonato de amonio (105 g, 1,33 moles). La mezcla de reacción se agitó a 18 °C durante 16 h y luego se concentró. El residuo se disolvió en acetato de etilo (5,0 l) y agua (5,0 l), la fase orgánica se separó y se lavó con HCl (3,0 ml, 1 N), bicarbonato sódico saturado (3,0 l), salmuera (3,0 l), se secó sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró dando el (4S)-5-amino-4-(benciloxicarbonilamino)-5-oxopentanoato de terc-butilo en bruto (450 g, bruto) como un sólido blanco, que se usó en la siguiente etapa sin más purificación. RMN 1H 400 MHz DMSO-ofe ó: 7,35-7,30 (m, 5H), 7,02 (s, 1H), 5,01 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 3,93-3,90 (m, 1H), 220 (t, J= 8,0 Hz, 2H), 1,88-1,84 (m, 1 H), 1,72-1,69 (m, 1H), 1,35 (s, 9H).

(4S)-4,5-Diamino-5-oxo-pentanoato de terc-butilo. A una disolución de (4S)-5-amino-4-(benciloxicarbonilamino)-5-oxopentanoato de terc-butilo (112 g, 333 mmoles) en metanol (1,0 l) se añadió 10 % de paladio sobre carbono (15 g) bajo nitrógeno. La suspensión se desgasificó a vacío y se purgó con hidrógeno varias veces. La mezcla se agitó bajo gas hidrógeno (276 KPa (40 psi)) a 30 °C durante 16 h. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró dando el (4S)-4,5-diamino-5-oxo-pentanoato de terc-butilo en bruto como un aceite incoloro. R^mN 1H 400 MHz DMSO-ofe ^ó: 7,30 (s, 1H), 6,95 (s, 1H), 3,10-3,07 (m, 1H), 2,27-2,23 (m, 2H), 1,69-1,78 (m, 1H), 1,59-1,55 (m, 1H), 1,38 (s, 9H).

3-Hidroxi-2-metil-benzoato de metilo. Se realizaron cuatro lotes (200 g cada uno) en paralelo. A una disolución de ácido 3-hidroxi-2-metil-benzoico (200 g, 1,31 moles) en metanol (4,0 l) se añadió ácido sulfúrico concentrado (47,7 g, 486 mmoles). La mezcla de reacción se agitó a 60 °C durante 17 h. La mezcla de reacción se concentró hasta 800 ml. La mezcla resultante se enfrió hasta 20 °C y se vertió lentamente en agua (400 ml) durante 30 min. Se añadió agua (1200 ml) a 20 °C durante 3 h y la mezcla resultante se agitó a 20 °C durante 1 h. El sólido precipitado se recogió por filtración a vacío (cuatro lotes combinados) y se lavó tres veces con agua/metanol (1000 ml, 9:1) hasta que el pH > 3. El sólido se secó a vacío a 45 °C dando 3-hidroxi-2-metilbenzoato de metilo (700 g, 80,4 % de rendimiento) como un sólido gris. RMN 1H: 400 MHz DMSO-de ^ó: 9,70 (s, 1H), 7,18 (t, J = 6,8 Hz, 1H), 7,09 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,00 (t, J = 6,8 Hz, 1H), 3,81 (s, 3H), 2,29 (s, 3H).

3-[terc-Butil(dimetil)silil]oxi-2-metil-benzoato de metilo. Se realizaron dos lotes (240 g cada uno) en paralelo. A una disolución de 3-hidroxi-2-metilbenzoato de metilo (240 g, 1,44 moles) en N,N-dimetilformamida (1,40 L) se añadieron imidazol (246 g, 3,61 moles) y cloruro de terc-butil-dimetilsililo (238 g, 1,58 moles) a 5 °C. Después de la adición, la mezcla se calentó hasta 20 °C y se agitó durante 6 h. Se añadió acetato de isopropilo (1700 ml), y entonces se añadió lentamente agua (2000 ml) mientras que la temperatura se mantuvo por debajo de 30 °C. La mezcla resultante se agitó, seguido de separación de la fase orgánica. Los extractos orgánicos combinados (dos lotes combinados) se lavaron con agua (1700 ml x 3) y se concentraron hasta -1500 ml (KF<0,05 %). El producto se almacenó como una disolución de acetato de isopropilo que se usó en la siguiente etapa sin más purificación.

2-(Bromometil)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oxi-benzoato de metilo. Se realizaron dos lotes (~375 g cada uno) en paralelo. A la disolución de acetato de isopropilo de 3-[terc-butil(dimetil)silil]oxi-2-metil-benzoato de metilo (~375 g, 1,34 moles) se añadió N-bromosuccinimida (274 g, 1,54 moles) y azobisisobutironitrilo (4,40 g, 26,8 mmoles). La mezcla de reacción se calentó hasta 70 °C durante al menos 1 h y se agitó a 70 °C durante 4 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta 20 °C y se mantuvo a 20 °C durante al menos 1 h. Los dos lotes de sólido (succinimida) se retiraron por filtración y se lavaron con acetato de isopropilo (700 ml). El filtrado se lavó con disolución de sulfito de sodio (700 g) en agua (6000 ml), seguido de agua (1500 ml). La fase orgánica se destiló a vacío a 45 °C a sequedad dando 2-(bromometil)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oxibenzoato de metilo (920 g, 95,5 % de rendimiento) como un aceite naranja oscuro. RMN 1H: 400 MHz DMSO-afe 5: 7,45 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,36 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,13 (t, J= 7,2 Hz, 1H), 4,95 (s, 2H), 1,02 (s, 9H), 0,29 (s, 6H).

(4S)-5-Amino-4-[4-[terc-butil(dimetil)silil]oxi-1-oxo-isoindolin-2-il]-5-oxo-pentanoato de terc-butilo. A una disolución de (4S)-4,5-diamino-5-oxopentanoato de terc-butilo (130 g, 643 mmoles) en acetonitrilo (4,0 L) se añadió 2-(bromometil)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oxi-benzoato de metilo (210 g, 584 mmoles) y diisopropiletilamina (113 g, 877 mmoles). La mezcla de reacción se agitó a 50 °C durante 16 h. La mezcla de reacción se concentró para retirar la mayoría del acetonitrilo, el residuo se disolvió en metil terc-butil éter (2,0 l) y agua (1,5 l), la fase orgánica se lavó con monofosfato de potasio saturado (1,0 l x 2), salmuera (1,0 l), se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró dando (4S)-5-amino-4-[4-[terc-butil(dimetil)silil]oxi-1-oxo-isoindolin-2-il]-5-oxo-pentanoato de terc-butilo en bruto (524 g), que se usó en la siguiente etapa sin más purificación.

(4S)-5-Amino-4-(4-hidroxi-1-oxo-isoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de terc-butilo. A una disolución de (4S)-5-amino-4-[4-[terc-butil(dimetil)silil]oxi-1-oxo-isoindolin-2-il]-5-oxo-pentanoato de terc-butilo (275 g, 613 mmoles) en metanol (2,0 l) se añadió fluoruro de tetrabutilamonio trihidratado (38,7 g, 123 mmoles). La mezcla se agitó a 18 °C durante 16 h. La mezcla de reacción se concentró para retirar la mayoría del metanol, el residuo se disolvió en diclorometano/agua (3 l/2 l), la fase orgánica se lavó con salmuera (1,0 l), se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró dando el producto en bruto que se purificó por columna de gel de sílice dando el producto (260 g). El producto se añadió en acetonitrilo (750 ml) y la mezcla se agitó a 60 °C durante 2 h, se enfrió hasta 18 °C y se agitó durante otras 2 h. El sólido se filtró y la torta se secó dando (4S)-5-amino-4-(4-hidroxi-1-oxo-isoindolin-2-il)-5-oxo-pentanoato de terc-butilo (248 g, 60,5 % de rendimiento) como un sólido gris. RMN 1H 400 MHz DMSO-afe 5: 10,00 (s, 1H), 7,54 (s, 1H), 7,29 (t, J= 7,6 Hz, 1H), 7,14 (d, J= 4,8 Hz, 2H), 4,72 - 4,68 (m, 1H), 4,49-4,28 (m, 2H), 2,17-1,97 (m, 4H), 1,31 (s, 9H).

4- (4-(4-(Clorometil)bencil)piperazin-1-il)-3-fluorobenzonitrilo. Se dispuso 1,4-bis(clorometil)benceno (51,2 g, 292 mmoles) en un matraz con acetonitrilo (195 ml) y N,N-dimetilformamida (195 ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente hasta que se disolvieron todos los sólidos. Entonces se añadió diisopropilamina (51,1 ml, 292 mmoles) junto con 3-fluoro-4-(piperazin-1-il)benzonitrilo (20 g, 97 mmoles). La reacción se calentó hasta 60 °C durante 1 h. El acetonitrilo se retiró a presión reducida. La mezcla restante se repartió entre acetato de etilo (1,0 l), agua (700 ml) y salmuera (300 ml). La fase orgánica se separó y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo dos veces. Se combinaron los extractos orgánicos volátiles y se retiraron a presión reducida. El sólido se disolvió en diclorometano mínimo y se purificó sobre columna de gel de sílice (0-100 % de acetato de etilo en hexanos en 3 l). Se combinaron las fracciones que contenían el producto deseado y los extractos orgánicos volátiles se retiraron a presión reducida. El residuo se disolvió en diclorometano mínimo y se purificó una segunda vez sobre columna de gel de sílice (10 % de acetato de etilo isocrático en hexanos en 800 ml, seguido de 20-80 % de acetato de etilo en hexanos en 4 l). Se combinaron las fracciones que contenían el producto deseado y se retiraron los extractos orgánicos volátiles a presión reducida proporcionando 4-(4-(4-(clorometil)bencil)piperazin-1-il)-3-fluorobenzonitrilo (22,7 g, 66,0 mmoles, 67,7 % de rendimiento) como un sólido blanquecino. RMN 1H (400 MHz, CDCla) 5 ppm 7,33 - 7,39 (m, 5 H) 7,29 (d, J=1,96 Hz, 1 H) 7,25 (d, J=1,96 Hz, 1 H) 6,91 (t, J=8,56 Hz, 1 H) 4,60 (s, 2 H) 3,58 (s, 2 H) 3,19 - 3,27 (m, 4 H) 2,58 - 2,66 (m, 4 H). EM (ESI) m/z 344,2 [M+1]+.

5- Amino-4-(4-((4-((4-(4-ciano-2-fluorofenil)piperazin-1-il)metil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de (S)-terc-butilo. Se dispuso 5-amino-4-(4-hidroxi-1 -oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de (S)-terc-butilo (22,05 g, 65,9 mmoles) en un matraz con 4-(4-(4-(clorometil)bencil)piperazin-1-il)-3-fluorobenzonitrilo (22,67 g, 65,9 mmoles), carbonato de potasio (18,23 g, 132 mmoles) y N,N-dimetilformamida (330 ml). La mezcla de reacción se calentó hasta 45 °C durante 16 h. La reacción se diluyó con acetato de etilo (50 ml) y se filtró. El filtrado se repartió con acetato de etilo (900 ml) y agua (600 ml) y salmuera (200 ml). La fase orgánica se aisló y se repartió con agua (600 ml). Se aisló la fase orgánica y todas las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio y los volátiles se retiraron a presión reducida. El residuo se trató con 20 % de acetato de etilo en hexanos y los volátiles se retiraron a presión reducida proporcionando 5-amino-4-(4-((4-((4-(4-ciano-2-fluorofenil)piperazin-1 -il)metil)bencil)oxi)-1 -oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de (S)-terc-butilo (44,02 g, 68,6 mmoles, 104 % de rendimiento) como un sólido blanquecino. El rendimiento estuvo ligeramente por encima del cuantitativo ya que quedó algo de N,N-dimetilformamida. RMN 1H (400 MHz, CDCl3) 5 ppm 7,43 - 7,49 (m, 2 H) 7,40 (s, 4 H) 7,36 (dd, J=8,38, 1,28 Hz, 1 H) 7,29 (d, J=1,96 Hz, 1 H) 7,26 (d, J=1,83 Hz, 1 H) 7,11 (dd, J=7,64, 1,16 Hz, 1 H) 6,92 (t, J=8,50 Hz, 1 H) 6,23 (s a, 1 H), 5,24 - 5,32 (m, 1 H) 5,15 (s, 2 H) 4,86 - 4,94 (m, 1 H) 4,38 - 4,55 (m, 2 H) 3,61 (s, 2 H) 3,18 - 3,32 (m, 4 H) 2,58 - 2,70 (m, 4 H) 2,09 - 2,47 (m, 4 H) 1,43 (s, 8 H). EM (ESI) m/z 642,4 [M+1]+.

(S)-4-(4-(4-(((2-(2,6-Dioxopiperidin-3-il)-1-oxoisoindolin-4-il)oxi)metil)bencil)piperazin-1-il)-3-fluorobenzonitrilo. Se dispuso 5-amino-4-(4-((4-((4-(4-ciano-2-fluorofenil)piperazin-1-il)metil)bencil)oxi)-1-oxoisoindolin-2-il)-5-oxopentanoato de (S)-terc-butilo (12,1 g, 18,86 mmoles) en un vial con acetonitrilo (189 ml) y ácido bencenosulfónico (3,96 g, 24,51 mmoles). La mezcla de reacción se puso a vacío y se purgó con nitrógeno. Esto se repitió una vez más y la mezcla se calentó entonces hasta 85 °C durante la noche bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se vertió en caliente directamente en 2 embudos de decantación que contenían diclorometano (1000 ml) y acetato de etilo (300 ml). A esta mezcla se añadió una disolución saturada de bicarbonato sódico (900 ml), agua (100 ml) y salmuera (450 ml). La fase orgánica se aisló y la fase acuosa se extrajo con diclorometano (800 ml) y acetato de etilo (200 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro y se concentraron. La purificación por métodos convencionales proporcionó el compuesto del título. RMN 1H (400 MHz, DMSO-afe) 5 ppm 10,96 (s, 1 H) 7,68 (dd, J=13,45, 1,83 Hz, 1 H) 7,56 (dd, J=8,44, 1,83 Hz, 1 H) 7,43 - 7,52 (m, 3 H) 7,29 - 7,39 (m, 4 H) 7,11 (t, J=8,80 Hz, 1 H) 5,24 (s, 2 H) 5,11 (dd, J=1 3,20, 5,14 Hz, 1 H) 4,22 - 4,46 (m, 2 H) 3,54 (s, 2 H) 3,12 - 3,22 (m, 4 H) 2,85 - 2,97 (m, 1 H) 2,53 - 2,62 (m, 2 H) 2,38 - 2,48 (m, 2 H) 1,93 - 2,03 (m, 1 H). EM (ESI) m/z 568,2 [M+1]+,

Ejemplo 3: Anticuerpos anti-CD3

Preferentemente, el anticuerpo anti-CD3 comprende un dominio variable VH que comprende las CDR de cadena pesada de SEQ ID NO: 1, 2 y 3, así como, respectivamente, CDR1, CDR2 y CDR3 de cadena pesada y un dominio variable VL que comprende las CDR de cadena ligera de SEQ ID NO: 4, 5 y 6, así como, respectivamente, CDR1, CDR2 y CDR3 de cadena ligera. Preferentemente, el anticuerpo comprende los dominios variables de SEQ ID NO:7 (VH) y SEQ ID NO:8 (VL). El anticuerpo anti-CD3 como se ha descrito anteriormente se usó para generar anticuerpos biespecíficos de linfocitos T según el siguiente ejemplo.

Ejemplo 4: Generación de anticuerpos biespecíficos de linfocitos T anti-BCMNanti-CD3 del formato 2+1 que contiene Fc

Se usaron ADNc que codificaban las cadenas pesadas y ligeras completas de los anticuerpos IgG1 anti-BCMA correspondientes, así como los ADNc de VH y VL anti-CD3 como materiales de partida. Para cada anticuerpo biespecífico, estuvieron implicadas cuatro cadenas de proteína que comprendían las cadenas pesadas y ligeras del anticuerpo anti-BCMA correspondiente y las cadenas pesadas y ligeras del anticuerpo anti-CD3 descritos anteriormente, respectivamente. Para minimizar la formación de productos secundarios con cadenas pesadas erróneamente apareadas, por ejemplo con dos cadenas pesadas del anticuerpo anti-CD3, se usa una región Fc heterodimérica mutada que lleva "mutaciones de botón en ojal" y un enlace disulfuro manipulado, como se describe en la solicitud de patente WO2009080251 y en la solicitud de patente WO2009080252. Para minimizar la formación de productos secundarios con cadenas ligeras erróneamente apareadas, por ejemplo con dos cadenas ligeras del anticuerpo anti-BCMA, se aplica un híbrido CH1 x kappa constante a las cadenas pesadas y ligeras del anticuerpo anti-CD3 usando la metodología descrita en los documentos de patente WO2009080251 y en WO2009080252.

a) Un anticuerpo biespecífico de linfocitos T anti-BCMNanti-CD3 con un formato 2+1, es decir, anticuerpo biespecífico (Fab)₂x (Fab) que es bivalente para BCMA y monovalente para CD3, tendría ventajas sobre la potencia, predictibilidad de la eficacia y seguridad debido a que se uniría preferentemente al BCMA diana del tumor y evitaría la reducción del anticuerpo CD3, por lo tanto, mayor probabilidad de exposición al fármaco centrado en el tumor.

Se produjeron anticuerpos biespecíficos de linfocitos T anti-BCMNanti-CD3 del formato 2+1 (es decir, anticuerpo (Fab)₂x (Fab) biespecífico bivalente para BCMA y monovalente para CD3 con Fc para los anticuerpos contra BCM^ahumanos previamente seleccionados. Los ADNc que codifican los Fab completos (dominios VH y CH1 de cadena pesada más dominios VL y CL de cadena ligera) de los anticuerpos IgG1 anti-BCMA correspondientes, así como los ADNc de VH y VL de anti-CD3, se usaron como materiales de partida. Para cada anticuerpo biespecífico, participaron cuatro cadenas de proteína, que comprendían las cadenas pesadas y ligeras del anticuerpo anti-BCMA correspondiente y las cadenas pesadas y ligeras del anticuerpo anti-CD3 descrito anteriormente, respectivamente, con regiones Fc.

Brevemente, cada anticuerpo biespecífico se produce por cotransfección simultánea de cuatro vectores de expresión de mamífero que codifican, respectivamente: a) el ADNc de cadena ligera completa del anticuerpo BCMA correspondiente, b) un ADNc de fusión generado por métodos convencionales de biología molecular, tales como PCR de extensión por solapamiento con corte y empalme, que codifica una proteína de fusión hecha de (en orden de amino- a carboxiterminal) secuencia conductora secretora, Fab (VH seguido por dominios CH1) del anticuerpo anti-BCMA correspondiente descrito anteriormente, un conector flexible de glicina(Gly)-serina(Ser) con la secuencia Gly-Gly-Gly-Gly-Ser-Gly-Gly-Gly-Gly-Ser, Fab (VH seguido por dominios CH1) del anticuerpo anti-BCMA correspondiente descrito anteriormente, un conector flexible de glicina(Gly)-serina(Ser) con la secuencia Gly-Gly-Gly-Gly-Ser-Gly-Gly-Gly-Gly-Ser, VH del anticuerpo anti-CD3 descrito anteriormente y el dominio kappa constante de un ADNc de cadena ligera humana, c) una fusión ADNc generada por métodos convencionales de biología molecular, tales como PC de extensión por solapamiento con corte y empalme, que codifica una proteína de fusión hecha de (en orden de amino- a carboxiterminal) secuencia conductora secretora, VL del anticuerpo anti-CD3 descrito anteriormente, dominio CH1 constante de un ADNc de IgG1 humana. La cotransfección de células de mamífero y la producción y purificación de anticuerpos usando los métodos descritos anteriormente para la producción de anticuerpos IgG1 humanos o humanizados, con una modificación: para la purificación de anticuerpos, la primera etapa de captura no se hace usando proteína A, sino que en su lugar se hace usando una columna de cromatografía de afinidad rellena de una resina que se une a la región constante de la cadena ligera kappa humana, tal como KappaSelect (GE Healthcare Life Sciences). Además, se puede incluir un disulfuro para aumentar la estabilidad y los rendimientos, así como restos adicionales que forman puentes iónicos y que aumentan los rendimientos de heterodimerización (documento de patente EP 1870459A1).

Para la generación de vectores de anticuerpo biespecífico BCMA x CD3, las moléculas biespecíficas derivadas de IgG1 consisten en al menos dos restos de unión al antígeno capaces de unirse específicamente a dos determinantes antigénicos distintos, CD3 y BCMA. Los restos de unión al antígeno fueron fragmentos Fab compuestos de una cadena pesada y una cadena ligera, cada una de las cuales comprende una región variable y una constante. Al menos uno de los fragmentos Fab era un fragmento "FabHíbrido", en donde se intercambiaron los dominios constantes de la cadena pesada y ligera de Fab. El intercambio de dominios constantes de la cadena pesada y ligera dentro del fragmento Fab asegura que los fragmentos Fab de diferente especificidad no tengan disposiciones de dominio idénticas y, por consiguiente, no intercambien cadenas ligeras. El diseño de moléculas biespecíficas era monovalente para CD3 y bivalente para BCMA, donde un fragmento Fab está fusionado con el extremo N del FabHíbrido interior (2+1). La molécula biespecífica contuvo una parte Fc para tener una semivida más larga. Una representación esquemática de las construcciones se da en las Figuras 1A, 1B, 2A a 2D, y 3A a 3D; las secuencias de las construcciones preferidas se muestran en la Tabla 2A. Las moléculas se produjeron por cotransfección de células HEK₂93 EBNA que crecen en suspensión con los vectores de expresión de mamífero usando disolución basada en polímero. Para la preparación de construcciones 2+1 FabHíbrido-IgG, las células se transfectaron con los vectores de expresión correspondientes en una relación 1:2:1:1 ("vector Fc(botón)" : "vector cadena ligera" : "vector cadena ligera FabHíbrido" : "vector cadena pesada-FabHíbrido").

Ejemplo 5: Uso combinado de anticuerpo biespecífico de linfocitos T anti-BCMNanti-CD3 con un compuesto

Activación de linfocitos T y liberación de citocinas. Se descongelan linfocitos T purificados en medio RPMI 1640 que contenía 10 % de FBS y 1 ng/ml de IL-7 humana. Las células se cuentan en un contador de células Vi-CELL y se diluyen con el medio celular hasta 2x106 células/ml. Los linfocitos T se dejan recuperar en una estufa de incubación a 37 °C, 5 % de CO₂, durante la noche. Los linfocitos T se tratan con un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento o el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 como único agente solo o en combinación durante 24, 48 y 72 horas. Las células se recogen en cada momento y se obtienen perfiles por análisis de FACS para marcadores de activación de linfocitos T (CD25, CD69 y HLA-DR) en subconjuntos CD3+CD4+ y CD3+CD8+. Los medios de cultivo también se recogen en cada momento y se analizan para citocinas por plataformas MesoScale Discovery o Luminex.

Cocultivos de linfocitos T efectores (E) y células tumorales (T). Se cocultivan linfocitos T pretratados y/o células tumorales con un anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento o el Compuesto 1, Compuesto 2 o Compuesto 3 como único agente o en combinación junto con diferentes relaciones E:T a 37 °C, 5 % de CO₂y se evalúan a las 24, 48 o 72 horas para la destrucción de tumores inducidos por linfocitos T por ensayos de FACS. Las células tumorales se marcan con CFSE (éster N-hidroxisuccinimidílico de 5(6)-carboxifluoresceína) según las instrucciones del fabricante justo antes del comienzo del ensayo de cocultivo. Además, los marcadores de activación de linfocitos T (CD25, CD69, HLA-DR) se monitorizan por FACS en los subconjuntos CD3+CD4+ y CD3+CD8+.

En una realización, el tratamiento de combinación mostrará una profundidad potenciada de la respuesta en células resistentes a lenalidomida y/o pomalidomida en comparación con cualquier agente único solo. En otra realización, el tratamiento de combinación mostrará actividad de destrucción celular sinérgica y/o aditiva en células de mieloma con expresión de BCMA de baja a ninguna. Además, el tratamiento de combinación mostrará un aumento en la activación de linfocitos T y la producción de citocinas (tal como IL-2, IFN-gamma y TNF-alfa) en comparación con cualquier agente único solo.

Ejemplo 6: Uso combinado de anticuerpo biespecífico de linfocitos T anti-BCMNanti-CD3 con un compuesto

Cocultivos de linfocitos T efectores (E) y células diana (T) después del pretratamiento con compuestos. Se aislaron linfocitos T CD3+ de fracciones de células mononucleares de sangre periférica de donantes sanos usando clasificación de células activadas magnéticamente. Las células se descongelaron en medio de cultivo RPMI 1640 complementado con 10 % (v/v) de suero bovino fetal (FBS), aminoácidos no esenciales y piruvato de sodio. Todos los cultivos celulares y los tratamientos celulares se realizaron en una estufa de incubación a 37 °C, 5 % de CO₂, durante periodos de tiempo como se indica. Entonces se marcaron los linfocitos T con CFSE (éster succinimidílico de carboxifluoresceína) según las instrucciones del fabricante, y se dejó que se recuperaran durante la noche en presencia de 1 ng/ml de IL-7 humana. Los linfocitos T se trataron con DMSO (control) o el Compuesto 2 como único agente durante 16 horas antes del cocultivo. Las estirpes celulares de mieloma múltiple H929 y OPM-2 o la estirpe celular de leucemia de células plasmáticas (PCL) L363 se marcaron con CellTrace™ Violet, luego se pretrataron con DMSO (control) o el Compuesto 2 como un único agente durante 72 horas. Los linfocitos T y las células diana se lavaron entonces para retirar los compuestos y se cocultivaron en presencia de concentraciones crecientes de un anticuerpo biespecífico que se unía específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano como se proporcionan en el presente documento, durante 72 horas, a diferentes relaciones entre linfocitos T efectores (E) y células diana (T). Las células se recogieron al final del cocultivo para el análisis de la apoptosis y la necrosis de células diana por citometría de flujo usando el kit de detección de la apoptosis APC Annexin V con 7-AAD, siguiendo las indicaciones del fabricante (BioLegend). Los resultados demostraron que el pretratamiento de células diana por el Compuesto 2 aumentó significativamente la potencia del anticuerpo biespecífico (para tanto células H929 como L363), así como la máxima destrucción de células diana (para células H929) inducida por el anticuerpo biespecífico como se probó (Figuras 4A y 4B). En ensayos de citotoxicidad con células OPM-2, los resultados mostraron que el tratamiento de cualquiera de los linfocitos T efectores o células diana solas por el Compuesto 2 aumentó la potencia y la eficacia de la destrucción de células diana por el anticuerpo biespecífico como se probó (Figura 4C). Para los ensayos de citotoxicidad de OPM-2, la combinación de pretratamiento de linfocitos T efectores y pretratamiento de células diana con el Compuesto 2 produjo la mayor potenciación y aumento en la eficacia del anticuerpo biespecífico como se probó (Figura 4C).

Cocultivos de linfocitos T efectores (E) y células diana (T) con tratamientos con compuesto simultáneo. Se aislaron linfocitos T CD3+ de fracciones de células mononucleares de sangre periférica de tres donantes sanos diferentes (donantes A, B y C) usando clasificación de células activadas magnéticamente. Las células se descongelaron en medio de cultivo RPMI 1640 complementado con 10 % (v/v) de FBS, aminoácidos no esenciales, piruvato de sodio y penicilina/estreptomicina. Todos los cultivos y tratamientos celulares se realizaron en una estufa de incubación a 37 °C, 5 % de CO₂, durante periodos de tiempo como se indica. Entonces se marcaron los linfocitos T con CFSE (éster succinimidílico de carboxifluoresceína) según las instrucciones del fabricante, y se dejó que se recuperaran durante la noche en presencia de 1 ng/ml de IL-7 humana. Se marcó la estirpe celular H929 de mieloma múltiple con CellTrace™ Violet, y se dejó que se recuperara durante la noche. Entonces se lavaron los linfocitos T y las células diana y se cocultivaron en presencia de concentraciones crecientes de anticuerpo biespecífico que se unía específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano proporcionado en el presente documento, durante 72 horas, en una relación fija entre linfocitos T efectores (E) y células diana (T) de 1:3. Los cocultivos en presencia de anticuerpo biespecífico se realizaron en presencia de DMSO (control) o el Compuesto 2. Las células se recogieron al final del cocultivo para el análisis de la apoptosis y la necrosis de células diana por citometría de flujo usando el kit de detección de la apoptosis APC Annexin V con 7-AAD. Los resultados demostraron que para todos los donantes probados, la exposición simultánea de células al Compuesto 2 aumentó significativamente la potencia del anticuerpo biespecífico como se probó, y también mejoró la máxima eficacia de destrucción de células diana mediada por el anticuerpo biespecífico (Figura 5).

Ejemplo 7: Uso combinado del anticuerpo biespecífico de linfocitos T anti-BCMNanti-CD3 con un compuesto en mieloma múltiple resistente a lenalidomida

Cocultivos de linfocitos T efectores (E) y células diana (T) de mieloma múltiple resistentes a lenalidomida después del pretratamiento con compuestos. Los linfocitos T CD3+ se aislaron de fracciones de células mononucleares de sangre periférica de tres donantes sanos diferentes (donantes D, E y F) usando clasificación de células activadas magnéticamente. Las células se descongelaron en medio de cultivo RPMI 1640 complementado con 10 % (v/v) de suero bovino fetal (FBS), aminoácidos no esenciales, piruvato de sodio y penicilina/estreptomicina. Todos los cultivos celulares y los tratamientos celulares se realizaron en una estufa de incubación a 37 °C, 5 % de CO₂, durante periodos de tiempo como se indica. Entonces se marcaron los linfocitos T con CFSE (éster succinimidílico de carboxifluoresceína) según las instrucciones del fabricante, y se dejó que se recuperaran durante la noche en presencia de 1 ng/ml de IL-7 humana. La estirpe celular de mieloma múltiple H929-1051 resistente a lenalidomida se generó por cultivo a largo plazo en presencia de concentraciones crecientes de lenalidomida, como se describe previamente (Ghandi et al. Br. J. Haematol. 2014 Jan; 164(2):233-44) usando métodos descritos (Lopez-Girona et al. Leukemia. 2012 Nov;26(11):2326-35). Las células H929-1051 se marcaron con CellTrace™ Violet, luego se pretrataron con DMSO (control), pomalidomida o el Compuesto 2 como un agente único durante 72 horas. Los linfocitos T y las células diana se lavaron entonces para retirar los compuestos y se cocultivaron en presencia de concentraciones crecientes del anticuerpo biespecífico que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y a CD3s (CD3) humano como se proporciona en el presente documento, durante 72 horas, en una relación fija entre linfocitos T efectores (E) y células diana (T) de 1:3. Las células se recogieron al final del cocultivo para el análisis de la apoptosis y la necrosis de células diana por citometría de flujo usando el kit de detección de la apoptosis APC Annexin V con 7-AAD, siguiendo las indicaciones del fabricante (BioLegend). Los resultados demostraron que el pretratamiento de células diana H929-1051 resistentes a lenalidomida por el Compuesto 2, pero no por el pretratamiento con pomalidomida, aumentó la potencia y la máxima destrucción de células diana inducida por el anticuerpo biespecífico como se probó (Figura 6). Los datos sugieren que la estirpe celular también es resistente a pomalidomida.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto para el uso en un método de tratamiento del mieloma múltiple, en donde el compuesto es un compuesto de la fórmula 1

o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en donde el método comprende administrar a un paciente en necesidad del mismo una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto de la fórmula 1, o un enantiómero, mezcla de enantiómeros, tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en combinación con un anticuerpo biespecífico que comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región ^cD^r1 H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de S^eQ ID NO:22 y una región CDR3H de ^sE^qID NO: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

2. Un compuesto para el uso en un método de tratamiento del mieloma múltiple, en donde el compuesto es un compuesto de la fórmula 2

o un tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo,

en donde el método comprende administrar a un paciente en necesidad del mismo una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto de la fórmula 2, o un tautómero, isotopólogo, o sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en combinación con un anticuerpo biespecífico que comprende una primera parte de unión que se une específicamente al antígeno de maduración de linfocitos B (BCMA) humano y una segunda parte de unión que se une específicamente a CD3s (CD3) humano, caracterizado por que dicha primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de s Eq ID n O: 17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20 y una combinación de regiones CDR1L y CDR2L seleccionada del grupo de

i) región CDR1L de SEQ ID NO:23 y región CDR2L de SEQ ID NO:24,

ii) región CDR1L de SEQ ID NO:25 y región CDR2L de SEQ ID NO:26, o

iii) región CDR1L de SEQ ID NO:27 y región CDR2L de SEQ ID NO:28.

3. El compuesto para el uso de la reivindicación 1 o 2, en donde el mieloma múltiple es recidivante, insensible o resistente.

4. El compuesto para el uso de la reivindicación 3, en donde el mieloma múltiple es insensible o resistente a lenalidomida.

5. El compuesto para el uso de la reivindicación 3, en donde el mieloma múltiple es insensible o resistente a pomalidomida.

6. El compuesto para el uso de la reivindicación 1 o 2, en donde el mieloma múltiple es mieloma múltiple recién diagnosticado.

7. El compuesto para el uso de la reivindicación 1 o 2, en donde el mieloma múltiple es leucemia de células plasmáticas.

8. El compuesto para el uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en donde el compuesto se administra antes del anticuerpo biespecífico.

9. El compuesto para el uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en donde el compuesto se administra simultáneamente con el anticuerpo biespecífico.

10. El compuesto para el uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en donde el compuesto se administra después del anticuerpo biespecífico.

11. El compuesto para el uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, en donde el método comprende adicionalmente administrar un agente activo adicional.

12. El compuesto para el uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, en donde la primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de S^eQ ID NO:17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20, una región CDR1L de SEQ ID NO:23 y una región CDR2L de SEQ ID NO:24.

13. El compuesto para el uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, en donde la primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SeQ ID NO:17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20, una región CDR1L de SEQ ID NO:25 y una región CDR2L de SEQ ID NO:26.

14. El compuesto para el uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, en donde la primera parte de unión comprende una región VH que comprende una región CDR1H de SEQ ID NO:21, una región CDR2H de SEQ ID NO:22 y una región CDR3H de SeQ ID NO:17 y una región VL que comprende una región CDR3L de SEQ ID NO:20, una región CDR1L de SEQ ID NO:27 y una región CDR2L de SEQ ID NO:28.

15. El compuesto para el uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, en donde el compuesto es un compuesto de la fórmula 2