ES2821971T3

ES2821971T3 - Derivados de la sibirilina sustituidos en N1 y N7 y su utilización como inhibidores de la necroptosis celular

Info

Publication number: ES2821971T3
Application number: ES16784435T
Authority: ES
Inventors: Marie-Thérèse Dimanche-Boitrel; Stéphane Bach; Claire Delehouze; Peter Goekjian; Arnaud Comte
Original assignee: Centre National de la Recherche Scientifique CNRS; Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale INSERM; Sorbonne Universite; Claude Bernard University Lyon 1
Current assignee: Centre National de la Recherche Scientifique CNRS; Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale INSERM; Sorbonne Universite; Claude Bernard University Lyon 1
Priority date: 2015-10-13
Filing date: 2016-10-13
Publication date: 2021-04-28
Anticipated expiration: 2036-10-13
Also published as: US10457678B2; PL3362450T3; EP3362450A1; EP3362450B1; US20180312502A1; WO2017064216A1; DK3362450T3

Abstract

Compuesto de la fórmula general (I) siguiente: **(Ver fórmula)** o una sal y/o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que: **(Ver fórmula)** · es **(Ver fórmula)** - cuando **(Ver fórmula)** es **(Ver fórmula)** X1 es un átomo de nitrógeno y -X2 es -N-Y, - cuando **(Ver fórmula)** es **(Ver fórmula)** -X1 es -N-Y y X2 es un átomo de nitrógeno, - Y es -C(O)NR10R11; -C(O)R12; -S(O)2R25; -C(O)OR29 o -SO2-NR30R31; - Z es un alquilo (C1-C6) y R1 es H, halo, alquilo (C1-C6), -OR51, CF3, -NR52R53,-OS(O)2NR54R55 o -CN; o Z y R1 forman juntos un heterocicloalquilo; - R2 a R4 son, independientemente entre sí, H, halo, alquilo (C1-C6), -OR51, -CF3,-NR52R53, -OS(O)2NR54R55 o -CN; - R5 es H, alquilo (C1-C6) u -O-alquilo (C1-C6); - R6 a R8 son, independientemente entre sí, H; halo; -OR56; -NR57R58;-C(O)NR59R60; -C(O)R61; -R62C(O)O63; -R64C(O)R65; -R66NR67R68; -R69OR70; -S(O)2R74; -OR75C(O)OR76; -OC(O)R77; -C(O)OR78; o un grupo seleccionado de entre alquilo (C1-C6), heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, -alquil (C1-C6)-arilo, -alquil (C1-C6)-heterocicloalquilo, estando dicho grupo opcionalmente sustituido con uno o varios grupos seleccionados de entre halo, -OR79, -NR80R81, -SR82, -S(O)R83, -SO2R84, -SO2NR85R86, -OCOR87, -NR88COR89, -NR90C(O)OR91, -CO2R92, -CONR93R94, -CO2R95, -OCONR96R97, -COR98, nitro (-NO2), ciano (-CN) y oxo (=O); y - R10 a R12, R25, R29 a R31 y R51 a R98 son, independientemente entre sí, H; halo; o un grupo seleccionado de entre alquilo (C1-C6), arilo, heteroarilo, heterocicloalquilo y -alquil (C1-C6)-arilo, estando dicho grupo opcionalmente sustituido con uno o varios grupos seleccionados de entre halo, alquilo (C1-C6), -C(O)Ralk, -C(O)ORalk, -SO2Ralk, -ORalk, -CORalkRalk', oxo (=O), y SO2-Ralk, en el que Ralk y Ralk' son, independientemente entre sí, alquilo (C1-C6); o R57-R58, R59-R60, R67-R68, R80-R81, R85-R86, R93-R94, y/o R96-R97, respectivamente, forman juntos un grupo heterocicloalquilo; con la condición de que: cuando **(Ver fórmula)** es **(Ver fórmula)** y Z es un metilo, Y no es -SO2-fenilo.

Description

DESCRIPCIÓN

Derivados de sibirilina sustituidos en N1 y N7 y su utilización como inhibidores de la necroptosis celular

La presente invención se refiere a nuevos derivados de sibirilina sustituidos en N1 y N7 así como a sus procedimientos de preparación y su utilización como inhibidor de la necroptosis celular. La presente invención asimismo se refiere a una composición farmacéutica que comprende dichos derivados de sibirilina sustituidos en N1 y N7, y su uso para inhibir la necroptosis celular, en particular para prevenir y/o tratar trastornos asociados con la necroptosis celular.

La muerte celular programada es un proceso natural para eliminar células no deseadas, tales como las cancerosas. La necroptosis es claramente distinta de la apoptosis, ya que no involucra reguladores clave de la apoptosis, tales como las caspasas, los miembros de la familia Bcl-2 o la liberación de citocromo c de las mitocondrias. La “necroptosis” es una ruta bioquímica especializada de necrosis programada que depende principalmente de la actividad de serina/treonina cinasa de RIPK1 (proteína cinasa 1 que interactúa con el receptor). Puede ser inhibida por necrostatina-1, un inhibidor de RIPK1 (patente US n° 8.143.300).

La necroptosis puede activarse tras la estimulación por TNF-a (factor de necrosis tumoral a), FasL (ligando de Fas) y TRAIL (ligando inductor de apoptosis relacionado con el factor de necrosis tumoral), y se basa en la actividad de dos serina-treonina cinasas, RIPK1 y RIPK3. El TNF a través de TNFR1 (receptor 1 del factor de necrosis tumoral) conduce a la formación de dos complejos de señalización secuenciales. El complejo receptor-proximal I induce señales de prosupervivencia mediante la activación de NF-kB (factor nuclear - kappa B) y MAPKs (proteína cinasas activadas por mitógenos), mientras que el segundo complejo citosólico II señala dos rutas de muerte celular: (a) apoptosis vía formación del complejo IIa que incluye FADd (dominio de muerte asociado a Fas) que recluta caspasa-8 y/o caspasa-10 para activar una cascada de caspasa; (b) necroptosis por activación de las cinasas RIPK1 y RIPK3 en un complejo denominado necrosoma. El TNF-a puede inducir necrosis en células Jurkat cuando se elimina FADD (Miao y Degterev, Methods Mol. Biol. 2009, 559, 79-93).

El hallazgo revolucionario de que la necroptosis es un proceso genéticamente controlado llevó a la hipótesis de que esta muerte celular programada es “tratable con fármacos”, un avance emergente que tiene el potencial de revolucionar la medicina clínica diaria (Linkermann y Green, N. Eng. J. Med. 2014, 370 (5), 455-465). De hecho, se ha demostrado de manera convincente que las dianas moleculares, incluyendo RIPK1, RIPK3 y MLKL (tipo dominio de cinasa de linaje mixto), contribuyen a múltiples trastornos en los que la necroptosis es de importancia fisiopatológica central, tal como: lesión por isquemia-reperfusión en el cerebro, corazón y riñón, enfermedades inflamatorias, sepsis, trastornos de la retina, enfermedades neurodegenerativas y trastornos infecciosos (Jouan-Lanhouet y col. Semin. Célula. Dev. Biol. 2014, 35, 2-13). Más recientemente, se ha demostrado que las células tumorales humanas y murinas inducen necroptosis de células endoteliales, lo que promueve la extravasación y metástasis de células tumorales (Strilic et al. Nature 2016, 536(7615), 215-218). De este modo, la necroptosis asimismo puede seleccionarse como diana del tratamiento de la metástasis humana, la principal causa de muerte relacionada con el cáncer en los seres humanos.

Únicamente se han desarrollado unos pocos inhibidores de RIPK1 (Degterev et al. Nat. Chem. Biol. 2005, 1(2), 112-119, y Nat Chem Biol. 2008, 4(5), 313-321). Entre ellos, la necrostatina-1 (Nec-1) se ha utilizado para inhibir específicamente varios procesos necróticos. Sin embargo, se ha señalado el efecto independiente de RIPK1 de Nec-1 (Cho et al. PLoS One. 2011, 6(8):e23209), y Nec-1 asimismo es un inhibidor de la indolamina 2,3-dioxigenasa (Takahashi et al. Cell Death Dis. 2012, 3:e437). Además, la estabilidad de Nec-1 in vivo es muy limitada. Se han dado a conocer varias necrostatinas estructuralmente distintas (Nec-3 ((Nec-3 (Jagtap et al. J. Med. Chem. 2007, 50(8), 1886-1895), Nec-4 (Teng et al. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2007, 17(24), 6836-6840), Nec-5 (Wang et al. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2007, 17(5), 1455-1465), Nec-7 (Zheng et al. Bioorg. Med. Chem. Lett.

2008, 18(18), 4932-4935)), y las modificaciones correspondientes. Recientemente, se informó de que Nec-21, otro potente análogo de Nec-1, muestra un perfil inespecífico mejorado (Wu et al. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2013, 23(17), 4903-4906). Uno de los mejores inhibidores estables de RIPK1 es Nec-1s (Nec-1 estable), que se demostró que interactúa con un bolsillo hidrófobo del dominio de cinasa, estabilizando por tanto RIPK1 en una conformación inactiva (Xie et al. Structure 2013, 21(3), 493-9).

Por lo tanto, existe la necesidad de nuevos inhibidores de RIPK1 con alta potencia, buena estabilidad y baja toxicidad.

De este modo, los inventores de la presente invención han descubierto nuevos derivados de sibirilina (derivados de sibirilina sustituidos en N1 y N7) que inhiben la muerte celular necroptótica. De este modo, estos compuestos parecen ser muy atractivos en terapia para prevenir y/o tratar trastornos asociados con la necroptosis celular. Además, dichos compuestos asimismo se pueden usar para la conservación y/o protección de materiales biológicos tales como células, tejidos, fluidos corporales y órganos, y de microorganismos, ventajosamente como dispositivo médico.

De este modo, la presente descripción se refiere a un compuesto de la siguiente fórmula general (I):

o una sal y/o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que:

es

• cuando

es

X¹es un átomo de nitrógeno y -X²es -N-Y,

• cuando

es

-X¹es -N-Y y X2 es un átomo de nitrógeno,

• Y es -OR⁹; -C(O)NR¹⁰Rn; -C(O)R¹²; -R13C(O)OR14; -R15C(O)R16; -R17NR18R19;-R20OR21; -R22OR23Si(R24)3; -S(O)2R25; -OR26C(O)OR27; -OC(O)R²⁸; -C(O)OR29; O-SO²-NR³⁰R³¹; -SO²-NR³⁰R³¹; o un grupo seleccionado de entre alquilo (C¹-C⁶), heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, -alquil (C¹-C⁶)-arilo, y -alquil (C¹-C⁶)-heterocicloalquilo, estando dicho grupo opcionalmente sustituido con uno o varios grupos seleccionados de entre halo, heterociclo, -OR³², -NR³³R³⁴, -SR³⁵, -S(O)R36, -SO2R37,-SO2NR38R39, -OCOR⁴⁰, -NR⁴¹COR⁴², -NR43C(O)OR44, -CO²R⁴⁵, -CONR⁴⁶R⁴⁷, -CO²R⁴⁸, -OCONR⁴⁹R⁵⁰, -COR⁴⁰, nitro (-NO²), ciano (-CN) y oxo (=O);

• Z es H o un alquilo (C¹-C⁶), y R¹es H, halo, alquilo (C¹-C⁶), -OR⁵¹, CF³, -NR⁵²R⁵³, -OS(O)2NR54R55 o -CN; o Z y R¹forman juntos un heterocicloalquilo;

• R²a R⁴son, independientemente entre sí, H, halo, alquilo (C¹-C⁶), -OR⁵¹, CF³, -NR⁵²R⁵³, -OS(O)2NR54R55 o -CN;

• R⁵es H o alquilo (C¹-C⁶); y

• R6 a R8 son, independientemente entre sí, H, halo, -OR⁵⁶, -NR⁵⁷R⁵⁸; -C(O)NR59P60; -C(O)R6i; -R62C(O)OR63; -R64C(O)R65; -R⁶⁶NR⁶⁷R⁶⁸; -P⁶⁹OP⁷⁰; -R71OR72Si(R73)3; -S(O)2R74; -OR75C(O)OR76; -OC(O)R77; -C(O)OR78; o un grupo seleccionado de entre alquilo (C¹-C⁶), heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, -alquil (C¹-C⁶)-arilo, -alquil (C¹-C6)-heterocicloalquilo, estando dicho grupo opcionalmente sustituido con uno o varios grupos seleccionados de entre halo, -OR⁷⁹, -NR⁸⁰R⁸¹, -SR⁸², -S(O)R83, -SO²R⁸⁴, -SO²NR⁸⁵R⁸⁶, -OCOR87, -NR88COR89, -NR90C(O)OR91, -CO2R92, -CONR93R94, -CO2R95, -OCONR96R97, -COR98, nitro (-NO²), ciano (-CN), oxo (=O); y • R9 a R98 son, independientemente entre sí, H, halo, o un grupo seleccionado de alquilo (C¹-C⁶), arilo, heteroarilo, heterocicloalquilo, -alquil (C¹-C⁶)-arilo; o R¹⁸-R¹⁹, R³³-R³⁴, R⁴⁶-R⁴⁷, R⁴⁹-R⁵⁰, R⁵⁷-R⁵⁸, R⁵⁹-R⁶⁰, R67-R68, R⁸⁰-R⁸¹, R85-R86, R⁹³-R⁹⁴, y/o R⁹⁶-R⁹⁷, respectivamente, forman juntos un grupo heterocicloalquilo; con la condición de que: cuando

sea

y Z es un metilo, Y no sea un grupo seleccionado de entre metilo o -S02-fenilo.

La presente invención se refiere a un compuesto de la fórmula general (I) anterior, o una sal y/o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que:

es

• cuando

es

X¹es un átomo de nitrógeno y -X²es -N-Y,

• cuando

es

-X¹es -N-Y y X²es un átomo de nitrógeno,

• Y es -C(O)NR¹⁰Rn; -C(O)R¹²; -S(O)2R25; -C(O)OR29 o -SO²-NR³⁰R³¹;

• Z es un alquilo (C¹-C⁶) y R¹es H, halo, alquilo (C¹-C⁶), -OR⁵¹, CF³, -NR⁵²R⁵³, -OS(O)2NR54R55 o -CN; o Z y R¹forman juntos un heterocicloalquilo;

• R²a R⁴son, independientemente entre sí, H, halo, alquilo (C¹-C⁶), -OR⁵¹, -CF3,-NR52R53, -OS(O)2NR54R55 o -CN;

• R⁵es H, alquilo (C¹-C⁶) u -O-alquilo (C¹-C⁶);

• R6 a R8 son, independientemente entre sí, H; halo; -OR⁵⁶; -NR⁵⁷R⁵⁸; -C(O)NR59R60; -C(O)R⁶¹; -R62C(O)OR63; -R64C(O)R65; -R⁶⁶NR⁶⁷R⁶⁸; -R69OR70;-S(O)2R74; -OR75C(O)OR76; -OC(O)R77; -C(O)OR78; o un grupo seleccionado de entre alquilo (C¹-C⁶), heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, -alquil (C¹-C⁶)-arilo, -alquil (C¹-C⁶)-heterocicloalquilo, estando dicho grupo opcionalmente sustituido con uno o varios grupos seleccionados de entre halo, -OR⁷⁹, -NR⁸⁰R⁸¹, -SR⁸², -S(O)R83, -SO²R⁸⁴, -SO²NR⁸⁵R⁸⁶, -OCOR87, -NR88COR89, -NR90C(O)OR91, -CO²R⁹², -CONR⁹³R⁹⁴, -CO²R⁹⁵, -OCONR⁹⁶R⁹⁷, -COR⁹⁸, nitro (-NO²), ciano (-CN) y oxo (=O); y

• R¹⁰a R¹², R²⁵, R²⁹a R³¹y R⁵¹a R⁹⁸son, independientemente entre sí, H; halo; o un grupo seleccionado de entre alquilo (C¹-C⁶), arilo, heteroarilo, heterocicloalquilo y -alquil (C¹-C⁶)-arilo, estando dicho grupo opcionalmente sustituido con uno o varios grupos seleccionados de entre halo, alquilo (C¹-C⁶), -C(O)Ralk, -C(O)ORalk, -SO²Ralk, -ORalk, -CORalkRalk, oxo (=O), y SO²-Ralk, en los que Ralk y Ralk' son, independientemente entre sí, alquilo (C¹-C⁶);

o R⁵⁷-R⁵⁸, R⁵⁹-R⁶⁰, R67-R68, R⁸⁰-R⁸¹, R85-R86, R⁹³-R⁹⁴, y/o R⁹⁶-R⁹⁷, respectivamente, forman juntos un grupo heterocicloalquilo;

con la condición de que: cuando

sea

y Z es un metilo, Y no sea -SOs-fenilo.

En el contexto de la invención, la expresión “farmacéuticamente aceptable” significa lo que es útil para la preparación de una composición farmacéutica, y lo que es generalmente seguro y no tóxico para un uso farmacéutico.

La expresión “sal o solvato farmacéuticamente aceptable” pretende significar, en el contexto de la presente invención, una sal o solvato de un compuesto que es farmacéuticamente aceptable, como se define anteriormente, y que posee la actividad farmacológica del compuesto correspondiente.

Las sales farmacéuticamente aceptables comprenden:

(1) sales de adición de ácido formadas con ácidos inorgánicos tales como ácido clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, nítrico y fosfórico, y similares; o formadas con ácidos orgánicos tales como ácido acético, bencenosulfónico, fumárico, glucoheptónico, glucónico, glutámico, glicólico, hidroxinaftoico, 2-hidroxietanosulfónico, láctico, maleico, málico, mandélico, metanosulfónico, mucónico, 2-naftalenosulfónico, propiónico, succínico, dibenzoil-L tartárico, tartárico, p-toluenosulfónico, trimetilacético, y trifluoroacético, y

(2) sales de adición de base formadas cuando un protón ácido presente en el compuesto se reemplaza por un ión metálico, tal como un ión de metal alcalino, un ión de metal alcalino-térreo o un ión de aluminio; o coordinado con una base orgánica o inorgánica. Las bases orgánicas aceptables comprenden dietanolamina, etanolamina, N-metilglucamina, trietanolamina y trometamina. Las bases inorgánicas aceptables comprenden hidróxido de aluminio, hidróxido de calcio, hidróxido de potasio, carbonato de sodio e hidróxido de sodio.

Los solvatos aceptables para el uso terapéutico de los compuestos de la presente invención incluyen solvatos convencionales tales como los formados durante la última etapa de la preparación de los compuestos de la invención debido a la presencia de disolventes. A título de ejemplo, se pueden citar los solvatos por presencia de agua (estos solvatos asimismo se denominan hidratos), o etanol.

La expresión “alquilo (C¹-C⁶)”, como se usa en la presente invención, se refiere a una cadena de hidrocarburo saturado lineal o ramificado que contiene de 1 a 6 átomos de carbono que incluyen, pero no se limitan a, metilo, etilo, n-propilo, iso-propilo, n-butilo, iso-butilo, sec-butilo, t-butilo, n-pentilo y n-hexilo.

El término “arilo”, como se usa en la presente invención, se refiere a un grupo hidrocarburo aromático que comprende preferentemente de 6 a 10 átomos de carbono, y que comprende uno o más, principalmente 1 o 2, anillos condensados, tales como, por ejemplo, un grupo fenilo o naftilo, ventajosamente un grupo fenilo.

El término “-alquil (C¹-C⁶)-arilo”, como se usa en la presente invención, se refiere a un grupo arilo como se define anteriormente unido a la molécula a través de un grupo alquilo (C¹-C⁶), como se define anteriormente. En particular, el grupo -alquil (C¹-C⁶)-arilo es un grupo bencilo.

El término “heterociclo” como se usa en la presente invención se refiere a un monociclo o policiclo de hidrocarburo saturado, insaturado o aromático (que comprende anillos condensados, en puente o espiro), tal como un biciclo, en el que uno o más, ventajosamente 1 a 4, y más ventajosamente 1 o 2, átomos de carbono se han reemplazado cada uno con un heteroátomo seleccionado de átomos de nitrógeno, oxígeno y azufre, y que es principalmente un átomo de nitrógeno. Ventajosamente, el heterociclo comprende 5 a 15, especialmente 5 a 10 átomos en el o los anillos. Cada anillo del heterociclo presenta ventajosamente 5 o 6 miembros.

Según una forma de realización particular, el heterociclo es un monociclo o biciclo de hidrocarburo saturado, insaturado o aromático (que comprende anillos condensados, en puente o espiro, en particular anillos condensados), teniendo cada ciclo 5 o 6 miembros, y reemplazándose 1 a 4, en particular 1 o 2, átomos de carbono cada uno por un átomo de nitrógeno u oxígeno, en particular un átomo de nitrógeno.

Un heterociclo puede ser principalmente tiofeno, furano, dioxano, dioxalano, pirrol, imidazol, pirazol, oxazol, isoxazol, tiazol, isotiazol, triazoles (1,2,3-triazol y 1,2,4-triazol), benzofurano, tetrahidrofurano, indol, benzotiofeno, bencimidazol, indazol, benzoxazol, bencisoxazol, benzotiazol, bencisotiazol, piridina, pirimidina, piridazina, pirazina, triazina, quinolina, isoquinolina, quinoxalina, quinazolina, piperidina, piperazina, triazinano, morfolina, pirolidina imidazolidina, dihidropiridinas, dihidropirimidinas, (en particular 1,2-dihidropirimidina), dihidropiridazinas, dihidropirazinas, dihidrotriazinas, tetrahidropiridinas, tetrahidropirimidinas, tetrahidropiridazinas, tetrahidropirazinas, y tetrahidrotriazinas.

El término “-alquil (C¹-C⁶)-heterociclo”, como se usa en la presente invención, se refiere a un grupo heterociclo como se define anteriormente unido a la molécula a través de un grupo alquilo (C¹-C⁶) como se define anteriormente. En particular, el grupo -alquil (C¹-C⁶)-heterociclo es un grupo metilmorfolinilo o metilpiperazinilo.

El término “heterocicloalquilo”, como se usa en la presente invención, se refiere a un heterociclo saturado como se define anteriormente.

Según una forma de realización particular de la presente invención, el término “heterocicloalquilo” se refiere a un anillo hidrocarbonado saturado que presenta 5 a 7 miembros, en el que uno o más, ventajosamente uno o dos, átomos de carbono se han reemplazado cada uno por un heteroátomo, tal como átomos de azufre, nitrógeno u oxígeno. En particular, puede ser un grupo 1,3-dioxolanilo, 1,4-dioxanilo, tetrahidrofuranilo, piperidinilo, piperazinilo, pirrolidinilo, imidazolidinilo o tetrahidropiranilo.

El término “heteroarilo”, como se usa en la presente invención, se refiere a un heterociclo aromático como se define anteriormente.

Según una forma de realización particular, el heteroarilo es un monociclo o biciclo de hidrocarburo aromático (es decir, que comprende dos anillos condensados), presentando cada ciclo 5 o 6 miembros, en particular 6 miembros, y reemplazándose 1 a 4, en particular 1 o 2, átomos de carbono cada uno por un átomo de nitrógeno u oxígeno, en particular un átomo de nitrógeno.

Un heteroarilo puede ser principalmente tiofeno, furano, pirrol, imidazol, pirazol, oxazol, isoxazol, tiazol, isotiazol, triazoles (1,2,3-triazol y 1,2,4-triazol), benzofurano, indol, benzotiofeno, bencimidazol, indazol, benzoxazol, bencisoxazol, benzotiazol, bencisotiazol, piridina, pirimidina, piridazina, pirazina, triazina, quinolina, isoquinolina, quinoxalina y quinazolina. En particular, el heteroarilo es tiofeno, imidazol, bencimidazol, pirazina o isoquinolina.

El término “halógeno”, como se usa en la presente invención, se refiere a un átomo de flúor, bromo, cloro o yodo.

Según una forma de realización particular de la presente invención, Z es alquilo (C¹-C³), preferentemente etilo.

Z asimismo puede formar junto con R¹un heterocicloalquilo, preferentemente un grupo 1,3-dioxolanilo o 1,4-dioxanilo.

En las definiciones anteriores de Z, el alquilo (C¹-C⁶) es preferentemente metilo, etilo o isopropilo, más preferentemente etilo.

Cuando Z es alquilo (Ci-Ca), Ri es H, halo, alquilo (Ci-Ca), -OR⁵¹, CF³, -NR52R53,-OS(O)2NR54R55 o -CN, en particular H, halo, alquilo (Ci-Ca) o -OR⁵¹, preferentemente H, halo, metilo o OMe, más preferentemente H; siendo R⁵¹a R⁵⁵como se define anteriormente.

En una forma de realización preferida, R²a R⁴representan, independientemente entre sí, H, halo, alquilo (C¹-Ca) o -OR⁵¹, preferentemente H, halo, metilo o OMe, más preferentemente H.

En una forma de realización preferida, R⁵es H o alquilo (C¹-Ca), más preferentemente H.

En una forma de realización preferida, Ra a Rs son, independientemente entre sí, H; halo; -OR5a; -NR⁵⁷R⁵⁸; o un grupo seleccionado de entre alquilo (C¹-Ca), heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, -alquil (C¹-Ca)-arilo y -alquil (C¹-Ca)-heterocicloalquilo, estando dicho grupo opcionalmente sustituido con uno o varios grupos seleccionados de entre halo, -OR⁷⁹, -NRs⁰Rs¹,-SRs², -S(O)Rs3, -SO²R⁸⁴, -SO2NRs5Rsa, -OCORs7, -NRssCORs9, -NRg⁰C(O)ORg¹, -CO²R⁹², -CONR⁹³R⁹⁴, -CO²R⁹⁵, -OCONR9aR97, -COR⁹⁸, nitro (-NO²), ciano (-CN), oxo (=O); preferentemente H, halo, -OR5a, -NR⁵⁷R⁵⁸; o un grupo seleccionado de entre alquilo (C¹-Ca), heterocicloalquilo, arilo y heteroarilo; siendo R5a a R⁹⁸como se define anteriormente.

En particular, Ra a R8 son, independientemente entre sí, H; halo; -OR5a; -NR⁵⁷R⁵⁸; o un grupo seleccionado de entre alquilo (C¹-Ca), heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, -alquil (C¹-Ca)-arilo y -alquil (C¹-Ca)-heterocicloalquilo, estando dicho grupo opcionalmente sustituido con uno o varios grupos seleccionados de halo, -OR⁷⁹; siendo R5a a R⁵⁸y R⁷⁹como se define anteriormente.

En particular, Ra a R8 son, independientemente entre sí, H, halo, -OR5a, -NR⁵⁷R⁵⁸; siendo R5a a R⁵⁸como se define anteriormente.

Más particularmente, Ra a R8 son, independientemente entre sí, H o halo.

En una forma de realización particular de la presente invención,

es

cuando

es

X¹es un átomo de nitrógeno y -X²es -N-Y, el compuesto obtenido está así sustituido en N1, mientras que, cuando

es

-X¹es -N-Y y X²es un átomo de nitrógeno, el compuesto obtenido está así sustituido en N7.

En las definiciones anteriores de

Y es -C(O)NRi⁰Rii; -C(O)Ri²; -S(O)2R25; -C(O)OR29 o -SO²-NR³⁰R³¹.

En todas las definiciones anteriores, R¹⁰a R¹², R²⁵, R²⁹a R³¹y R⁵¹a R⁹⁸son, independientemente entre sí, H; halo; o un grupo seleccionado de entre alquilo (C¹-C⁶), arilo, heteroarilo, heterocicloalquilo y -alquil (C¹-C⁶)-arilo, estando dicho grupo opcionalmente sustituido con uno o varios grupos seleccionados de entre halo, alquilo (C¹-C⁶), -C(O)Ralk,-C(O)ORalk, -SO²Ralk, -ORalk, -CORalkRalk, oxo (=O), y SO²-Ralk, en los que Ralk y Ralk son, independientemente entre sí, alquilo (C¹-C⁶);

Más particularmente, R¹⁰a R¹², R²⁵, R²⁹a R³¹y R⁵¹a R⁹⁸son, independientemente entre sí, H; halo; o un grupo seleccionado de entre alquilo (C¹-C⁶), fenilo, bencilo, heterocicloalquilo, estando dicho grupo opcionalmente sustituido con uno o varios grupos seleccionados de entre halo, alquilo (C¹-C⁶), -C(O)Ralk, -C(O)ORalk, -SO²Ralk, -ORalk, -CORalkRalk, oxo (=O), y SO²-Ralk, en los que Ralk y Ralk son, independientemente entre sí, alquilo (C¹-C⁶), preferentemente seleccionados de entre halo, metilo, oxo (=O), y SO²-CH³.

En una forma de realización particular, R¹⁰a R¹¹, R²⁵, R³⁰a R³¹y R⁵¹a R⁹⁸son, independientemente entre sí, H; halo; o un grupo seleccionado de entre alquilo (C¹-C⁶), arilo, heteroarilo, heterocicloalquilo y -alquil (C¹-C⁶)-arilo.

En otra forma de realización particular, R¹²y R²⁹son, independientemente entre sí, H; halo; o un grupo seleccionado de entre alquilo (C¹-C⁶), arilo, heteroarilo, heterocicloalquilo y -alquil (C¹-C⁶)-arilo, estando dicho grupo opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados de entre halo, alquilo (C¹-C⁶), -C(O)Ralk, -C(O)ORalk, -SO²Ralk, -ORalk, -CORalkRalk', oxo (=O), y SO²-Ralk, en los que Ralk y Ralk' son, independientemente entre sí, alquilo (C¹-C⁶), preferentemente seleccionados de entre halo, metilo, oxo (=O), y SO²-CH³.

Más particularmente, R¹²es H; halo; o un grupo seleccionado de entre alquilo (C¹-C⁶), heterocicloalquilo y -alquil (C¹-C⁶)-arilo, estando dicho grupo opcionalmente sustituido con uno o varios grupos seleccionados de halo, alquilo (C¹-C⁶), -C(O)Ralk, -C(O)ORalk, -SO²Ralk, -ORalk, -CORalkRalk, oxo (=O), y SO²-Ralk, en los que Ralk y Ralk' son, independientemente entre sí, alquilo (C¹-C⁶), preferentemente seleccionados de entre halo, metilo, oxo (=O), y SO²-CH³.

Según una forma de realización particular de la presente invención, en la formula general (I) siguiente o una sal y/o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo:

es

• cuando

es

X¹es un átomo de nitrógeno y -X²es -N-Y,

• cuando

es

-Xi es -N-Y y X²es un átomo de nitrógeno,

• Y es -C(O)NR¹⁰Rn; -C(O)R¹²; -S(O)2R25; -C(O)OR29 o -SO²-NR³⁰R³¹;

• R²a R⁴son, independientemente entre sí, H, halo, alquilo (C¹-C⁶), -OR⁵¹, -CF³, -NR⁵²R⁵³, -OS(O)2NR54R55 o -CN;

• R5 es H;

• R6 a R8 son, independientemente entre sí, H; halo; -OR⁵⁶; -NR⁵⁷R⁵⁸; -C(O)NR59P60; -C(O)R⁶¹; -R62C(O)OR63; -R64C(O)R65; -R⁶⁶NR⁶⁷R⁶⁸; -P⁶⁹OR⁷⁰; -S(O)2R74; -OR75C(O)OR76; -OC(O)R77; -C(O)OR78; o un grupo seleccionado de entre alquilo (C¹-C⁶), heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, -alquil (C¹-C⁶)-arilo, -alquil (C¹-C⁶)-heterocicloalquilo, estando dicho grupo opcionalmente sustituido con uno o varios grupos seleccionados de entre halo, -OR⁷⁹, -NR⁸⁰R⁸¹, -SR⁸², -S(O)R83, -SO²R⁸⁴, -SO²NR⁸⁵R⁸⁶, -OCOR87, -NR88COR89, -NR90C(O)OR91, -CO²R⁹², -CONR⁹³R⁹⁴, -CO²R⁹⁵, -OCONR⁹⁶R⁹⁷, -COR⁹⁸, nitro (-NO²), ciano (-CN), oxo (=O); y

• R¹⁰a R¹², R²⁵, R²⁹a R³¹y R⁵¹a R⁹⁸son, independientemente entre sí, H; halo; o un grupo seleccionado de entre alquilo (C¹-C⁶), arilo, heteroarilo, heterocicloalquilo, -alquil (C¹-C⁶)-arilo, estando dicho grupo opcionalmente sustituido con uno o más grupos seleccionados de entre halo, metilo, oxo (=O), y SO²-CH³;

con la condición de que: cuando

sea

y Z es un metilo, Y no sea -SO²-fenilo.

En otra forma de realización particular:

• Y es -C(O)NR¹⁰Rn; -C(O)R¹²; -S(O)2R25; -C(O)OR29 o -SO²-NR³⁰R³¹;

• Z es etilo y R¹es H, halo, metilo u OMe;

• R²a R⁴son, independientemente entre sí, H, halo, metilo u OMe;

• R⁵es H;

• R6 a R8 son, independientemente entre sí, H, halo, -OR⁵⁶, -NR⁵⁷R⁵⁸; y

• R¹⁰a R¹², R²⁵, R²⁹a R³¹y R⁵⁶a R⁵⁸son, independientemente entre sí, H; halo; o un grupo seleccionado de entre alquilo (C¹-C⁶), arilo, heteroarilo, heterocicloalquilo, -alquil (C¹-C⁶)-arilo, estando dicho grupo opcionalmente sustituido con uno o varios grupos seleccionados de entre halo, alquilo (C¹-C⁶), -C(O)Ralk, -C(O)ORalk, -SO²Ralk, -ORalk, -CORalkRalk, oxo (=O), y SO²-Ralk, en los que Ralk y Ralk' son, independientemente entre sí, alquilo (C¹-C⁶), preferentemente seleccionados de entre halo, metilo, oxo (=O), y SO²-CH³;

o R⁵⁷-R⁵⁸forman juntos un grupo heterocicloalquilo.

En particular, el compuesto de fórmula general (I) según la presente descripción se puede seleccionar de los compuestos 1 a 36 descritos en la parte experimental a continuación, y las sales y solvatos farmacéuticamente aceptables de los mismos.

Más particularmente, el compuesto de fórmula general (I) según la presente invención puede seleccionarse de los compuestos 7, 10, 17, 21, 26 y 32 a 36 descritos en la parte experimental a continuación, y las sales y solvatos farmacéuticamente aceptables de los mismos.

Según una forma de realización particular, la presente invención se refiere al compuesto de fórmula general (I) como se define anteriormente, para uso como fármaco.

Según una forma de realización particular, la presente invención se refiere al compuesto de fórmula general (I) como se define anteriormente, para uso como inhibidor de la necroptosis celular.

En particular, la presente invención se refiere al compuesto de fórmula general (I) como se define anteriormente, para uso para prevenir y/o tratar trastornos asociados con la necroptosis celular.

La presente invención asimismo se refiere a un método para inhibir la necroptosis celular, que comprende la administración a una persona que lo necesite de una dosis eficaz de un compuesto de fórmula (I) como se define anteriormente. En particular, la presente invención se refiere a un método para prevenir y/o tratar trastornos asociados con la necroptosis celular, que comprende la administración a una persona que lo necesite de una dosis eficaz de un compuesto de fórmula (I) como se define anteriormente.

La presente invención asimismo se refiere a la utilización de un compuesto de fórmula (I) como se define anteriormente, para la fabricación de un fármaco, en particular para inhibir la necroptosis celular. En particular, la presente invención asimismo se refiere a la utilización de un compuesto de fórmula (I) como se define anteriormente, para la fabricación de un fármaco para prevenir y/o tratar trastornos asociados con la necroptosis celular.

La necroptosis celular puede ser, en particular, una necroptosis de células endoteliales inducida por células tumorales.

Los trastornos asociados con la necroptosis celular pueden ser particularmente traumatismos, hepatitis, lesión por isquemia-reperfusión, tal como infarto de miocardio y apoplejía, pancreatitis aguda y necrosis tubular aguda.

Los trastornos asociados con la necroptosis celular asimismo pueden ser traumatismos en el cerebro, hepatitis, esteatohepatitis alcohólica y no alcohólica, pancreatitis aguda y necrosis tubular aguda, trasplante de corazón o riñón, aterosclerosis, insuficiencia medular ósea, infección viral, enfermedad de Crohn y colitis ulcerosa, ileítis terminal, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, o lesión por isquemia-reperfusión tal como infarto de miocardio o apoplejía.

Los trastornos asociados con la necroptosis de células endoteliales inducida por células tumorales pueden ser particularmente la extravasación o metástasis de células tumorales.

La presente invención asimismo se refiere a una composición farmacéutica que comprende por lo menos un compuesto de fórmula (I) como se define anteriormente, y por lo menos un excipiente farmacéuticamente aceptable.

Según una forma de realización particular, la presente invención se refiere a la composición farmacéutica como se define anteriormente, para uso para inhibir la necroptosis celular.

Según una forma de realización particular, la presente invención se refiere a la composición farmacéutica como se define anteriormente, para uso para prevenir y/o tratar trastornos asociados con la necroptosis celular.

La presente invención asimismo se refiere a un método para inhibir la necroptosis celular, que comprende la administración a una persona que lo necesite de una dosis eficaz de la composición farmacéutica como se define anteriormente. En particular, la presente invención se refiere a un método para prevenir y/o tratar trastornos asociados con la necroptosis celular, que comprende la administración a una persona que lo necesite de una dosis eficaz de la composición farmacéutica como se define anteriormente.

La presente invención asimismo se refiere a la utilización de la composición farmacéutica como se define anteriormente, para la fabricación de un fármaco, en particular para inhibir la necroptosis celular. En particular, la presente invención asimismo se refiere a la utilización de la composición farmacéutica como se define anteriormente, para la fabricación de un fármaco para prevenir y/o tratar trastornos asociados con la necroptosis celular.

Las composiciones farmacéuticas según la invención pueden formularse especialmente para administración oral o para inyección, en el que dichas composiciones están destinadas a mamíferos, incluyendo seres humanos.

La composición farmacéutica se puede administrar por vía oral mediante comprimidos y cápsulas de gelatina.

Cuando se prepara una composición sólida en forma de comprimidos, el principio activo principal se mezcla con un vehículo farmacéutico tal como gelatina, almidón, lactosa, estearato de magnesio, talco, goma arábiga, y similares. Los comprimidos se pueden recubrir con sacarosa o con otros materiales adecuados, o se pueden tratar de tal manera que presenten una actividad prolongada o retardada y liberen continuamente una cantidad predeterminada de principio activo.

Se obtiene una preparación en cápsulas de gelatina mezclando el principio activo con un diluyente y vertiendo la mezcla obtenida en cápsulas de gelatina blandas o duras.

Para la administración por inyección, se utilizan suspensiones acuosas, disoluciones salinas isotónicas o disoluciones estériles e inyectables que contienen agentes dispersantes y/o agentes humectantes farmacológicamente compatibles.

El principio activo puede administrarse en formas de administración de dosis unitarias, en mezcla con vehículos farmacéuticos estándar, a animales o seres humanos. Los compuestos de la invención como principios activos pueden usarse en dosis que oscilan entre 0.01 mg y 1000 mg por día, administrados en una sola dosis una vez al día o administrados en varias dosis a lo largo del día, por ejemplo dos veces al día en dosis iguales. La dosis administrada por vía está ventajosamente entre 5 mg y 500 mg, incluso más ventajosamente entre 10 mg y 200 mg. Puede ser necesario usar dosis fuera de estos intervalos según lo determine el experto en la materia.

Las composiciones farmacéuticas según la invención pueden comprender además por lo menos otro principio activo, tal como otro inhibidor de la necroptosis celular, o un inhibidor de la apoptosis, un inhibidor de la autofagia, un inhibidor de la ferroptosis, un inhibidor de la necrosis dependiente del poro de MPT (transición de la permeabilidad mitocondrial), un inhibidor de la ciclofilina, un inhibidor de la cinasa 5 dependiente de ciclina (CDK5), un inhibidor del parthanatos, un inhibidor de la trombina, un antioxidante (tal como glutationa o alopurinol) o un inhibidor de la inflamación.

La presente invención asimismo se refiere a una composición farmacéutica que comprende:

(i) por lo menos un compuesto de fórmula (I) o de fórmula (II) como se define anteriormente, y

(ii) por lo menos otro principio activo, tal como otro inhibidor de la necroptosis celular, o un inhibidor de la apoptosis, un inhibidor de la autofagia, un inhibidor de la ferroptosis, un inhibidor de la necrosis dependiente del poro de MPT (transición de la permeabilidad mitocondrial), un inhibidor de la ciclofilina, un inhibidor de la cinasa 5 dependiente de ciclina (CDK5), un inhibidor de parthanatos, un inhibidor de trombina, un antioxidante (tal como glutationa o alopurinol) o un inhibidor inflamatorio, como producto combinado para uso simultáneo, separado o secuencial.

La presente invención asimismo se refiere al uso ex vivo de un compuesto de fórmula general (I) como se define anteriormente; para la conservación y/o protección de materiales biológicos tales como células, tejidos, fluidos corporales, y órganos, y de microorganismos, ventajosamente como dispositivo médico.

En el contexto de la presente invención, un dispositivo médico se refiere a cualquier producto que se pone en contacto con órganos, tejidos, células o productos de origen del cuerpo humano o animal durante su conservación, su preparación, su transformación, su envasado o su transporte antes de su uso terapéutico en seres humanos. Un dispositivo médico según la presente invención asimismo puede ser cualquier producto que entre en contacto con embriones en el contexto de una actividad de procreación médicamente asistida. En particular, esta categoría de productos incluye los medios de conservación de injertos (tejidos, órganos), los medios utilizados en el contexto de la fertilización in vitro, o los medios utilizados durante la preparación de productos de terapia celular.

En particular, la presente invención se refiere al uso de un compuesto de fórmula general (I) como se define anteriormente, para uso en un medio para preservar órganos, tejido biológico, o células vivas, preferentemente para preservar órganos tales como por ejemplo hígado o riñón.

De este modo, el compuesto de la invención se puede utilizar en el caso de un injerto como producto terapéutico complementario para la conservación de células, tejidos u órganos entre la toma de muestras de un donante y el injerto en un receptor.

Los inventores de la presente invención han desarrollado un procedimiento para preparar los compuestos según la invención. De este modo, la presente invención asimismo se refiere a un procedimiento para preparar un compuesto de fórmula (I) como se define anteriormente, en el que Z es alquilo (C¹-C⁶), preferentemente etilo, que comprende las siguientes etapas:

i) hacer reaccionar una 3-picolina con un 4-etoxibenzonitrilo para proporcionar un compuesto de la siguiente fórmula (II):

ii) después, hacer reaccionar el compuesto de fórmula (II) con un compuesto de fórmula Y-W, en la que Y es como se define anteriormente y W es halo, en particular Cl, Br o I.

iii) opcionalmente salificar y/o solvatar el compuesto de fórmula (I) obtenido en la etapa ii) para proporcionar una sal y/o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo.

Etapa i.:

Una reacción de este tipo se puede llevar a cabo en condiciones bien conocidas por el experto en la materia, en particular en presencia de una base fuerte tal como LDA. El disolvente de esta reacción puede ser tetrahidrofurano (THF).

Etapa ii):

Tal reacción se puede llevar a cabo en condiciones bien conocidas por el experto en la materia, en particular mediante la adición directa sobre un anillo de nitrógeno de azaindol.

En particular, la etapa ii) se puede llevar a cabo en un disolvente tal como diclorometano, dimetilformamida (DMF), dimetilsulfóxido (DMSO), N-metilpirrolidona (NMP), THF, anhídrido acético o tolueno anhidro, o una mezcla de los mismos.

La reacción de la etapa ii) se realiza ventajosamente en presencia de una base, en particular una base fuerte, tal como trietilamina (EfeN), diisopropiletilamina (DIPEA), 1,4-diazabiciclo[2.2.2]octano (DABCO), hidruro de sodio (NaH), diisopropilamiduro de litio (LDA), hexametildisilazano de litio (LiHMDS), nbutil-litio, cloruro de isopropilmagnesio (iPrMgCl), tercbutóxido de potasio (KOtBu), carbonato de potasio (K²CO³), hidróxido de potasio (KOH), hidróxido de sodio (NaOH), carbonato de cesio (Cs2CO3) o fosfato tripotásico (K³PO⁴).

La etapa ii) asimismo se puede llevar a cabo en presencia de un catalizador, tal como yoduro de cobre (CuI), yoduro de tetra-n-butilamonio (nBu4NI), dimetilaminopiridina (DMAP) o N,N'-dimetiletildiamina.

Etapa iii):

La etapa de salificación o solvatación se puede llevar a cabo mediante métodos bien conocidos por los expertos en la materia, en particular mediante la reacción del compuesto de fórmula (I) obtenido en la etapa ii. con un ácido orgánico o inorgánico, una base orgánica o inorgánica, o un disolvente, como se define anteriormente.

El disolvente puede ser en particular el disolvente utilizado en la última etapa de la preparación del Compuesto según la invención, en particular el disolvente utilizado en la etapa ii.

De este modo, las etapas i) a iii) se pueden llevar a cabo en una sola etapa, sin aislar compuestos intermedios.

Al final de la etapa ii), se obtienen en el medio de reacción compuestos sustituidos tanto en N1 como en N7. A continuación, estos compuestos pueden separarse del medio de reacción mediante métodos bien conocidos por el experto en la materia, tales como por extracción, evaporación del disolvente o por precipitación o cristalización (seguida de filtración).

En el procedimiento descrito anteriormente se pueden llevar a cabo otras etapas de protección/desprotección o etapas de funcionalización, siendo bien conocidas por los expertos en la materia tales etapas y sus condiciones de reacción.

El compuesto obtenido puede separarse del medio de reacción mediante métodos bien conocidos por el experto en la materia, tal como por extracción, evaporación del disolvente o por precipitación o cristalización (seguida de filtración).

El compuesto asimismo se puede purificar si es necesario mediante métodos bien conocidos por el experto en la materia, tales como recristalización, destilación, cromatografía en columna de gel de sílice o cromatografía de líquidos de altas prestaciones (HPLC).

Según otra forma de realización de la presente invención, los compuestos sustituidos en N1 de fórmula general (I) asimismo se pueden preparar según el siguiente procedimiento:

(i') hacer reaccionar una 5-bromo-3-yodopiridin-2-amina con un 1-etoxi-4-etinilbenceno para proporcionar un compuesto de la siguiente fórmula (III):

( i i ) después, hacer reaccionar el compuesto de fórmula (III) con un compuesto de fórmula Y-W, en la que Y es como se define anteriormente y W es halo, en particular Cl, Br o I, para obtener un compuesto de fórmula (IV):

(iii') después, disolver el compuesto de fórmula (IV) en DMF anhidra y hacer reaccionar la disolución obtenida con CuI;

(iv') opcionalmente salificar y/o solvatar el compuesto de fórmula (I) obtenido en la etapa iii') para proporcionar una sal y/o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo.

Etapa (¡’):

Tal reacción se puede llevar a cabo en condiciones bien conocidas por el experto en la materia, en particular en presencia de un catalizador tal como yoduro de cobre (CuI) o dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio(II) (PdCl2(PPh3)2). El disolvente de esta reacción puede ser tetrahidrofurano (THF), tolueno, dioxano o trietilamina (Et3N).

Etapa (ii’):

En particular, la etapa (ii') se puede llevar a cabo en un disolvente tal como diclorometano, dimetilformamida (DMF), dimetilsulfóxido (DMSO), THF, anhídrido acético o tolueno anhidro, o una mezcla de los mismos.

La reacción de la etapa (ii') se realiza ventajosamente en presencia de una base, en particular una base fuerte, tal como trietilamina (Et3N), piridina, diisopropiletilamina (DIpEA), 1,4-diazabiciclo[2.2.2]octano (DABCO), hidruro de sodio (NaH), tercbutilato de potasio (KOtBu), n-butil-litio (nBuLi), diisopropilamidruro de litio (LDA), hexametildisilazano de litio (LiHMDS), carbonato de potasio (K²CO³), hidróxido de potasio (KOH), hidróxido de sodio (NaOH), carbonato de cesio (Cs2CO3) o fosfato tripotásico (K3PO4).

Etapa (¡¡¡'):

Tal reacción se puede llevar a cabo en condiciones bien conocidas por el experto en la materia, en particular en un reactor de microondas y en presencia de un catalizador tal como yoduro de cobre (Cul), fluoruro de tetra-nbutilamonio (TBAF), carbonato de cesio (Cs2CO3) o dicloruro de paladio(ll) (PdCb). El disolvente de esta reacción puede ser dimetilformamida (DMF), dimetilsulfóxido (DMSO) o N-metilpirrolidona (NMP).

Etapa (iv'):

La etapa de salificación o solvatación se puede llevar a cabo mediante métodos bien conocidos por los expertos en la materia, en particular mediante la reacción del compuesto de fórmula (I) obtenido en la etapa (iii') con un ácido orgánico o inorgánico, una base orgánica o inorgánica, o un disolvente, como se define anteriormente. El disolvente puede ser, en particular, el disolvente utilizado en la última etapa de la preparación del compuesto según la invención, en particular el disolvente utilizado en la etapa (ii').

De este modo, las etapas (i') a (iv') se pueden llevar a cabo en una sola etapa, sin aislar compuestos intermedios. En el procedimiento descrito anteriormente se pueden llevar a cabo otras etapas de protección/desprotección o etapas de funcionalización, siendo bien conocidas por los expertos en la materia tales etapas y sus condiciones de reacción.

El compuesto obtenido puede separarse del medio de reacción mediante métodos bien conocidos por el experto en la materia, tales como por extracción, evaporación del disolvente o por precipitación o cristalización (seguida de filtración).

Los ejemplos siguientes ilustran la invención sin limitar su alcance de ninguna manera.

Breve sumario de las figuras

La figura 1 representa la inhibición dependiente de la dosis por el compuesto 7 de la necroptosis inducida por TNF-a en linfocitos T humanos (estirpe celular Jurkat deficiente en FADD);

La figura 2 representa la inhibición dependiente de la dosis por el compuesto 10 de la necroptosis inducida por TNF-a en linfocitos T humanos (estirpe celular Jurkat deficiente en FADD);

La figura 3 representa la inhibición dependiente de la dosis por el compuesto 17 de la necroptosis inducida por TNF-a en linfocitos T humanos (estirpe celular Jurkat deficiente en FADD);

La figura 4 representa la inhibición dependiente de la dosis por el compuesto 26 de la necroptosis inducida por TNF-a en linfocitos T humanos (estirpe celular Jurkat deficiente en FADD);

La figura 5 representa la inhibición dependiente de la dosis de la autofosforilación de RIPK1 por el compuesto 10.

La figura 6 representa la inhibición dependiente de la dosis por el compuesto 21 de la necroptosis inducida por TNF-a en linfocitos T humanos (estirpe celular Jurkat deficiente en FADD);

La figura 7 representa la inhibición dependiente de la dosis por el compuesto 32 de la necroptosis inducida por TNF-a en linfocitos T humanos (estirpe celular Jurkat deficiente en FADD);

La figura 8 representa la inhibición dependiente de la dosis por el compuesto 33 de la necroptosis inducida por TNF-a en linfocitos T humanos (estirpe celular Jurkat deficiente en FADD);

La figura 9 representa la inhibición dependiente de la dosis por el compuesto 34 de la necroptosis inducida por TNF-a en linfocitos T humanos (estirpe celular Jurkat deficiente en FADD);

La figura 10 representa la inhibición dependiente de la dosis por el compuesto 35 de la necroptosis inducida por TNF-a en linfocitos T humanos (estirpe celular Jurkat deficiente en FADD);

La figura 11 representa la inhibición dependiente de la dosis por el compuesto 36 de la necroptosis inducida por TNF-a en linfocitos T humanos (estirpe celular Jurkat deficiente en FADD);

Ejemplos

Se han utilizado las siguientes abreviaturas en los siguientes ejemplos: I.

BnBr: Bromuro de bencilo

BOC: ferc-butoxicarbonilo

Boc2Ü: Dicarbonato de di-terc-butilo

BSA: Seroalbúmina bovina

d: doblete

DMAP: Dimetilaminopiridina

DMF: Dimetilformamida

DMSO: Dimetilsulfóxido

TDT: Ditiotreitol

EC⁵⁰: Concentración eficaz máxima media

EDTA: Ácido etilendiaminotetraacético

EGTA: Ácido etilenglicol-bis(p-aminoetil éter) -N,N,N',N'-tetraacético

EOMCl: Etoximetoxicloruro

eq: equivalente

Et: Etilo (CH²CH³)

EtOAc: Acetato de etilo

h: hora

1H-: Protio

Hz: Hercios

IC⁵⁰: Concentración inhibidora máxima media

J: Constante de acoplamiento

kg: kilogramo

LDA: Diisopropilamiduro de litio

LiHMDS: Hexametildisilazida de litio

m: multiplete

M: Molar

mCPBA: Ácido metacloroperoxibenzoico

Me: Metilo (CH3)

mg: miligramo

MHz: Megahercios

min: minuto(s)

ml: mililitro

mM: Milimolar

mmol: milimol

MOPS: ácido 3-(W-morfolino)propanosulfónico

MsCl: Cloruro de metanosulfonilo

nBuLi: n-butillitio

ND: No determinado

RMN: Resonancia magnética nuclear

PMBCl: Cloruro de p-metoxibencilo

q: Cuadruplete

r.t: Temperatura ambiente

s: Singlete

SEMCl: Cloruro de 2-(trimetilsilil)etoximetilo

Sib: Sibirilina

t: Triplete

THF: Tetrahidrofurano

Mg: microgramo

pl: Microlitro

MM: Micromolar

I. Síntesis de los compuestos según la invención

Ejemplo 1: Síntesis de Sibs sustituidas en N1 y N7

Síntesis selectiva de derivados sustituidos en N1 (primer método)

Síntesis de 5-bromo-3-((4-etoxifenil)etinil)piridin-2-amina:

5-bromo-3-yodopiridin-2-amina (5 g, 16.7 mmol) se colocó bajo argón y se disolvió en THF anhidro (50 ml). Se añadieron Et3N (11.5 ml, 5 eq, 83 mmol) y 1-etoxi-4-etinilbenceno (2.93 g, 1.2 eq, 20 mmol), seguido de CuI (80 mg, 0.025 eq, 0.42 mmol) y PdCb(PPh3)2 (290 mg, 0.025 eq, 0.42 mmol). La mezcla de color marrón oscuro se agitó a r.t. durante 3h, antes de que se añadieran agua (150 ml) y CH²Cl²(150 ml). La capa acuosa se extrajo con CH²Cl², y los extractos orgánicos se lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron. El producto bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (gradiente de PE:EtOAc de 90:10 a 75:25) para producir el compuesto deseado (4.6 g, 87%).

RMN 1H (300 MHz, CDCb): 1.43 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 4.06 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 5.12 (bs, 2H), 6.84 - 7.03 (m, 2H), 7.38 - 7.53 (m, 2H), 7.68 (s, 1H), 8.17 (s, 1H).

Síntesis de 3-(5-bromo-3-((4-etoxifenil)etinil)piridin-2-il)-1,1 -dietilurea:

Se disolvió 5-bromo-3-((4-etoxifenil)etinil)piridin-2-amina (100 mg, 31 mmol) en THF anhidro (5 ml), se añadió NaH (63 mg, 5 eq, 1.55 mmol), y se la mezcla se agitó durante 10 min antes de la adición de cloruro de N,N-dietilcarbamoílo (46 pl, 1.2 eq, 0.37 mmol). La reacción se agitó a r.t. durante 16 h, se paralizó con agua, y se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró. El producto bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (60:40 PE:EtOAc) para proporcionar un sólido blanquecino (72 mg, 55%).

RMN 1H (300 MHz, CDCla) : 1.24 (t, J = 7.1 Hz, 6H), 1.45 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 3.43 (q, J = 7.1 Hz, 4H), 4.08 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 6.84 - 6.93 (m, 2H), 7.38 (bs, 1H), 7.39 - 7.48 (m, 2H), 7.86 (s, 1H), 8.34 (s, 1H).

Síntesis de 5-bromo-2-(4-etoxifenil)-NN-dietil-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-1-carboxamida (compuesto 1):

Se colocó 3-(5-bromo-3-((4-etoxifenil)etinil)piridin-2-il)-1,1 -dietilurea (70 mg, 0.17 mmol) en un vial de microondas de 2.5 ml bajo argón, y se disolvió en DMF anhidra (1 ml). Se añadió CuI (64 mg, 2 eq, 0.34 mmol), y la mezcla se agitó a 160°C durante 30 min en un reactor de microondas Biotage Initiator. Después de enfriar, la reacción se filtró, se concentró hasta sequedad, y el producto bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (CH²Cb:MeOH 95:5) para producir el compuesto deseado (44 mg, 64%).

RMN 1H (300 MHz, CDCb): 0.88 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.19 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.44 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 2.82 - 3.05 (m, 2H), 3.33 (dq, J = 14.1, 7.1 Hz, 1H), 3.84 (dq, J = 14.1, 7.1 Hz, 1H), 4.07 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 6.52 (s, 1H), 6.94 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.53 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.99 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.33 (d, J = 2.1 Hz, 1H).

Síntesis selectiva de derivados sustituidos en N1 (segundo método)

Síntesis de 2-cloro-3-((4-etoxifenil)etinil)piridina

2-cloro-3-yodopiridina (500 mg, 2,09 mmol) se colocó bajo argón y se disolvió en THF anhidro (10 ml). Se añadieron Et3N (1.44 ml, 5 eq, 10 mmol) y 1-etoxi-4-etinilbenceno (365 mg, 1.2 eq, 2.5 mmol), seguido de Cul (10 mg, 0.025 eq, 0.05 mmol) y PdCh(PPh3)2 (37 mg, 0.025 eq, 0.05 mmol). La mezcla de color marrón oscuro se agitó a r.t. durante 3h, antes de que se añadiesen agua (20 ml) y CH²Cl²(20 ml). La capa acuosa se extrajo con CH²Cl², y los extractos orgánicos se lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre MgSÜ4 y se concentraron. El producto bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (PE:EtOAc 85:15) para producir el compuesto deseado (440 mg, 82%). RMN 1H (300 MHz, CDCla): 1.43 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 4.06 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 6.87 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.22 (dd, J = 7.7, 4.8 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.82 (dd, J = 7.7, 1.9 Hz, 1H), 8.31 (dd, J = 4.8, 1.9 Hz, 1H).

Procedimiento general para la síntesis de compuestos de Nl-heteroarilo a partir de 2-cloro-3-((4-etoxifenil)etinil)piridina:

Se cargó 2-cloro-3-((4-etoxifenil)etinil)piridina (50 mg, 0.19 mmol) en un vial con Pd2dba3 (18 mg, 0.1 eq, 0.019 mmol), XantPhos (22 mg, 0.2 eq, 0.036 mmol), Cs2CO3 (189 mg, 3 eq, 0.58 mmol) y la amina heterocíclica correspondiente (1.3 eq, 0.25 mmol). El vial se colocó bajo argón, y se añadió dioxano anhidro antes de agitar durante 16 h a 100°C. Después de enfriar, la reacción se diluyó con EtOAc, se filtró sobre una almohadilla de Celite®, y se concentró. El producto bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida para producir el compuesto deseado.

Síntesis de 2-(4-etoxifenil)-1-(pirazin-2-il)-1H-pirrolo[2,3-b]piridina (compuesto 2):

Siguiendo el procedimiento general con 2-aminopirazina (33 mg, 54%). RMN 1H (300 MHz, CDCl3): 1.40 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 4.02 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 6.70 (s, 1H), 6.79 - 6.84 (m, 2H), 7.12 - 7.21 (m, 3H), 7.95 (dd, J = 7.8, 1.6 Hz, 1H), 8.31 (dd, J = 4.8, 1.6 Hz, 1H), 8.51 - 8.53 (m, 2H), 8.82 (d, J = 0.8 Hz, 1H).

Síntesis de 2-(4-etoxifenil)-1-(pirimidin-2-il)-1H-pirrolo[2,3-b]piridina (compuesto 3):

Siguiendo el procedimiento general con 2-aminopirimidina (36 mg, 60%). RMN 1H (300 MHz, CDCb): 1.40 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 4.02 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 6.68 (s, 1H), 6.79 - 6.83 (m, 2H), 7.12 - 7.19 (m, 3H), 7.38 (bs, 1H), 7.95 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.84 (s, 2H).

Síntesis de 2-(2-(4-etoxifenil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-1-il)-1,3,4-tiadiazol (compuesto 4):

Siguiendo el procedimiento general con 2-amino-1,3,4-tiadiazol (37 mg, 59%). RMN 1H (300 MHz, CDCb): 1.42 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 4.05 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 6.69 (s, 1H), 6.85 - 6.95 (m, 2H), 7.23 (dd, J = 7.8, 4.8 Hz, 1H), 7.30 - 7.37 (m, 2H), 7.94 (dd, J = 7.8, 1.3 Hz, 1H), 8.37 (dd, J = 4.8, 1.3 Hz, 1H), 9.09 (s, 1H).

Síntesis de 2-(4-etoxifenil)-1-(5-nitropiridin-2-il)-1H-pirrolo[2,3-b]piridina (compuesto 5):

Siguiendo el procedimiento general con 2-amino-5-nitropiridina (17 mg, 24%). RMN 1H (300 MHz, CDCb): 1.45 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 4.06 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 6.74 (s, 1H), 6.81 - 6.90 (m, 2H), 7.15 - 7.28 (m, 3H), 7.95 - 8.02 (m, 2H), 8.34 (d, J = 4.1 Hz, 1H), 8.63 (dd, J = 8.9, 2.8 Hz, 1H), 9.27 (d, J = 2.4 Hz, 1H).

Síntesis de 4-(6-(2-(4-etoxifenil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-1-il)pirimidin-4-il)morfolina (compuesto 6):

Siguiendo el procedimiento general con 6-morfolinopirimidin-4-amina (18 mg, 22%). RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 1.75 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 3.95 - 4.01 (m, 4H), 4.08 - 4.15 (m, 4H), 4.36 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 7.01 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 7.11- 7.22 (m, 2H), 7.48 - 7.59 (m, 1H), 7.58 - 7.63 (m, 2H), 8.30 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 8.68 (d, J = 3.9 Hz, 1H), 8.85 (s, 1H).

Síntesis de derivados sustituidos en N1 y N7 por adición directa en un anillo de nitrógeno de azaindol Síntesis de 2-(4-etoxifenil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridina:

LDA se preparó recientemente añadiendo gota a gota una disolución de nBuLi en hexanos (54 ml, 2.5 M, 135 mmol) bajo argón a una disolución de diisopropilamina (19 ml, 135 mmol) en THF anhidro (150 ml) a -5°C, y agitando durante 20 minutos. A continuación, se añadió gota a gota una disolución de 3-picolina (7 g, 75 mmol, 1 eq) en THF anhidro (100 ml) a 0°C, y la mezcla naranja se agitó durante 20 min antes de añadir gota a gota una disolución de 4-etoxibenzonitrilo. (11.1 g, 75 mmol, 1 eq) en THF anhidro (100 ml). Después de 1 h a 0°C, se añadió gota a gota más disolución de LDA en THF (150 ml) (135 mmol, preparada a partir de 54 ml de nBuLi y 19 ml de diisopropilamina), y la reacción se calentó lentamente a r.t. durante 1 h antes de calentarla a reflujo en un baño de agua durante 2 h. Después de enfriar, la disolución amarilla se paralizó cuidadosamente con NH4Cl saturado (100 ml), y se añadió agua (250 ml). El precipitado se filtró, se lavó con éter dietílico y agua, se secó a vacío para proporcionar un sólido de color amarillo claro (11 g, 61%).

RMN 1H (300 MHz, DMSO-da): 1.35 (t, J= 7.1 Hz, 3H), 4.07 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 6.78 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.00-7.05 (m, 3H), 7.85-7.89 (m, 3H), 8.15 (dd, J = 4.7, 1.6 Hz, 1H), 12.0 (bs, 1H).

Síntesis de 2-(4-etoxifenil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-7-óxido:

Se suspendió 2-(4-etoxifenil)-1 H-pirrolo[2,3-b]piridina (2 g, 8.4 mmol) en una mezcla de EtOAc (10 ml) y hexano (40 ml) bajo argón, y se enfrió hasta 0°C. Se añadió en porciones mCPBA (2.7 g, 12.6 mmol, 1.5 eq), la reacción se calentó lentamente hasta r.t., y se agitó durante 12 h. El disolvente se eliminó a vacío, y el residuo se suspendió en disolución saturada de K²CO³(50 ml), se agitó vigorosamente durante 30 min, se filtró y se lavó con agua para obtener un sólido amarillo que se secó a vacío (1.5 g, 70%).

RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 1.35 (t, J= 7.1 Hz, 3H), 4.08 (q, J= 7.1 Hz, 2H), 6.92 (s, 1H), 6.99-7.09 (m, 3H), 7.56 (d, J= 7.1 Hz, 1H), 7.96 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 8.08 (d, J= 6.3 Hz, 1H), 12.7 (bs, 1H).

Síntesis de 4-cloro-2-(4-etoxifenil)-1H-pirrolo[2, 3-b]piridina:

Se disolvió 2-(4-etoxifenil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-7-óxido (1 g, 4.1 mmol) en DMF anhidra (10 ml) bajo argón, y se añadió gota a gota MsCl (487 pl, 6.15 mmol), 1.5 eq). La reacción se calentó hasta 80°C, y se agitó durante 6 h antes de enfriar con un baño de hielo para producir un precipitado. Se añadió agua (40 ml), y el sólido amarillo se filtró, se lavó con más agua, y se secó a vacío (696 mg, 65%).

RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 1.35 (t, J= 7.0 Hz, 3H), 4.09 (q, J= 7.0 Hz, 2H), 6.85 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 7.02 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 7.17 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 7.92 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 8.12 (d, J= 5.2 Hz, 1H), 12.39 (bs, 1H).

Síntesis de 2-(4-etoxifenil)-N,N-dietil-7H-pirrolo[2,3-b]piridin-7-carboxamida (compuesto 7):

Se disolvió 2-(4-etoxifenil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridina (50 mg, 0.21 mmol) en DMF anhidra (2 ml) bajo argón, y se trató con NaH (42 mg, 5 eq, 1.05 mmol) y se agitó a r.t. durante 15 min antes de añadir cloruro de N,N-dietilcarbamoílo (32 pl, 1.2 eq, 0.25 mmol). La mezcla se agitó 12 h a r.t., se paralizó con agua, y se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró, y se concentró. El producto bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (60:40 PE:EtOAc) para producir un sólido marrón (30 mg, 45%).

RMN 1H (300 MHz, CDCla): 1.08 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 1.40 - 1.52 (m, 6H), 3.10-3.21 (m, 2H), 3.65-3.86 (m, 2H), 4.08 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 6.83 (dd, J = 7.3, 6.4 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 6.94 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 7.58 (dd, J = 6.4, 1.1 Hz, 1H), 7.95 (dd, J = 7.3, 1.1 Hz, 1H), 8.00 - 8.08 (m, 2H).

Síntesis de 2-(4-etoxifenil)-7-(4-metoxibencil)-7H-pirrolo[2,3-b]piridina y 2-(4-etoxifenil)-1-(4-metoxibencil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridina (compuestos 8 y 9):

Se disolvió 2-(4-etoxifenil)-1 H-pirrolo[2,3-b]piridina (50 mg, 0.21 mmol) en DMF anhidra (2 ml) bajo argón, se añadió nBu4NI (8 mg, 0.1 eq, 0.021 mmol), y la reacción se trató con NaH (42 mg, 5 eq, 1.05 mmol) y se agitó a r.t. durante 15 min antes de añadir PMBCl (36 mg, 1.1 eq, 0.23 mmol). La mezcla se agitó 12 h a r.t., se paralizó con agua, y se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró, y se concentró. El producto bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (80:20 PE:EtOAc) para producir el regioisómero N1 como un aceite amarillo (15 mg, 19%). Se continuó la elución (60:40 PE:EtOAc) para obtener el regioisómero N7 como un aceite amarillo (16 mg, 20%).

RMN 1H (300 MHz, CDCb) para el compuesto sustituido en N1: 1.44 (t, J= 7.0 Hz, 3H), 3.73 (s, 3H), 4.07 (q, J= 7.0 Hz, 2H), 5.48 (s, 2H), 6.48 (s, 1H), 6.65 - 6.79 (m, 2H), 6.83 - 6.97 (m, 4H), 7.09 (dd, J= 7.8, 4.8 Hz, 1H), 7.20 - 7.39 (m, 2H), 7.90 (dd, J= 7.8, 1.6 Hz, 1H), 8.33 (dd, J= 4.7, 1.6 Hz, 1H).

RMN 1H (300 MHz, CDCb) para el compuesto sustituido en N7: 1.45 (t, J= 7.0 Hz, 3H), 3.81 (s, 3H), 4.10 (q, J= 7.0 Hz, 2H), 5.85 (s, 2H), 6.72 (dd, J= 7.4, 6.3 Hz, 1H), 6.83 - 6.90 (m, 2H), 6.91 (s, 1H), 6.97 (d, J= 8.9 Hz, 2H), 7.39 (dd, J= 6.3, 1.1 Hz, 1H), 7.44 (d, J= 8.7 Hz, 2H), 7.90 (dd, J= 7.4, 1.1 Hz, 1H), 8.11 (d, J= 8.9 Hz, 2H).

Síntesis de 1-(2-(4-etoxifenil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-1-il)etan-1-ona (compuesto 10):

Se suspendió 2-(4-etoxifenil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridina (50 mg, 0.21 mmol) en anhídrido acético (0.5 ml) bajo argón, se añadió DMAP (5 mg), seguido de Et3N (45 pl, 1.5 eq, 0.31 mmol), y la mezcla se agitó a 70°C durante 72 h antes de inactivar con NaHCO3 saturado. La reacción se repartió entre EtOAc y agua, y la capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró, y se concentró. El producto bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (90:10 PE:EtOAc) para producir un sólido blanco (18 mg, 31%).

RMN 1H (300 MHz, CDCla): 1.44 (t, J= 7.0 Hz, 3H), 3.06 (s, 3H), 4.08 (q, J= 7.0 Hz, 2H), 6.52 (s, 1H), 6.92 - 6.95 (m, 2H), 7.19 (dd, J= 7.8, 4.8 Hz, 1H), 7.32 - 7.38 (m, 2H), 7.84 (dd, J= 7.8, 1.7 Hz, 1H), 8.35 (dd, J= 4.8, 1.7 Hz, 1H).

Síntesis de 4-(2-(2-(4-etoxifenil)-7H-pirrolo[2,3-b]piridin-7-il)etil)morfolina y 4-(2-(2-(4-etoxifenil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-1-il)etil)morfolina (compuestos 11 y 12):

Se disolvió 2-(4-etoxifenil)-1 H-pirrolo[2,3-b]piridina (50 mg, 0.21 mmol) en DMF anhidro (2 ml) bajo argón, se trató con K²CO³(145 mg, 5 eq, 1.05 mmol) y se agitó a r.t. durante 15 min antes de añadir hidrocloruro de 4-(2-cloroetil)morfolina (58 mg, 1.5 eq, 0.32 mmol). La mezcla se agitó 18 h a 70°C, se concentró a vacío, y el residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (98:2 CH²Cb:MeOH) para producir el regioisómero N1 como un aceite amarillo (19 mg, 26%). Se continuó la elución (92:8 CH²Cb:MeOH) para obtener el regioisómero N7 como un aceite amarillo (27 mg, 36%).

RMN 1H (300 MHz, CDCb) para el compuesto sustituido en N1: 1.46 (t, J= 7.0 Hz, 3H), 2.23 - 2.39 (m, 4H), 2.63 (t, J= 6.9 Hz, 2H), 3.46 - 3.62 (m, 4H), 4.10 (q, J= 7.0 Hz, 2H), 4.46 (t, J= 6.9 Hz, 2H), 6.41 (s, 1H), 6.95 - 7.03 (m, 2H), 7.06 (dd, J= 7.8, 4.8 Hz, 1H), 7.44 - 7.51 (m, 2H), 7.87 (dd, J= 7.8, 1.6 Hz, 1H), 8.30 (dd, J= 4.8, 1.6 Hz, 1H).

RMN 1H (300 MHz, CDCb) para el compuesto sustituido con N7: 1,44 (t, J= 7,0 Hz, 3 H), 2,53 - 2,62 (m, 4 H), 3,03 (t, J= 6,3 Hz, 2 H), 3,64 - 3,72 (m, 4 H), 4,04 - 4,15 (q, J = 7,0 Hz, 2 H), 4,84 (t, J= 6,3 Hz, 2 H), 6,76 - 6,83 (m, 1 H), 6,87 (s, 1 H), 6,92 - 7,00 (m, 2 H), 7,57 (dd, J = 7,4, 1,0 Hz, 1 H), 7,95 (dd, J= 7,4, 1,0 Hz, 1 H), 8,03 - 8,10 (m, 2 H).

Síntesis de 1-bencil-2-(4-etoxifenil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridina y 7-bencil-2-(4-etoxifenil)-7H-pirrolo[2,3-b]piridina (compuestos 13 y 14):

Se disolvió 2-(4-etoxifenil)-1 H-pirrolo[2,3-b]piridina (50 mg, 0.21 mmol) en DMF anhidra (2 ml) bajo argón, se trató con KOH en polvo (35 mg, 3 eq, 0.63 mmol) y se agitó a r.t. durante 15 min antes de añadir BnBr (30 pl, 1.2 eq, 0.25 mmol). La mezcla se agitó 12 h a r.t., se paralizó con NH4Cl saturado, y se extrajo con CH²Cl²(2x10 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró, y se concentró. El producto bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (90:10 PE:EtOAc) para producir el regioisómero N1 en forma de un aceite amarillo (25 mg, 36%). Se continuó la elución (60:40 PE:EtoAc) para obtener el regioisómero N7 como un sólido amarillo (26 mg, 38%).

RMN 1H (300 MHz, CDCb) para el compuesto sustituido en N1: 1.44 (t, J= 7.0 Hz, 3H), 4.06 (q, J= 7.0 Hz, 2H), 5.55 (s, 2H), 6.50 (s, 1H), 6.85 - 6.91 (m, 2H), 6.96 - 6.98 (m, 2H), 7.14 (dd, J= 7.4, 5.0 Hz, 1H), 7.14 - 7.22 (m, 3H), 7.28 - 7.33 (m, 2H), 7.92 (dd, J= 7.8, 1.6 Hz, 1H), 8.32 (dd, J= 4.7, 1.6 Hz, 1H).

RMN 1H (300 MHz, CDCla) para el compuesto sustituido en N7: 1.45 (t, J= 7.0 Hz, 3H), 4.10 (q, J= 7.0 Hz, 2H), 5.92 (s, 2H), 6.72 (dd, J= 7.4, 6.3 Hz, 1H), 6.93 (s, 1H), 6.95 - 7.03 (m, 2H), 7.31 - 7.51 (m, 6H), 7.91 (dd, J= 7.4, 1.1 Hz, 1H), 8.07 - 8.18 (m, 2H).

Síntesis de 2-(4-etoxifenil)-1-(2-(pirrolidin-1-il)etil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridina y 2-(4-etoxifenil)-7-(2-(pirrolidin-1-il)etil)-7H-pirrolo[2,3-b]piridina (compuestos 15 y 16):

Se disolvió 2-(4-etoxifenil)-1 H-pirrolo[2,3-b]piridina (50 mg, 0.21 mmol) en DMF anhidra (2 ml) bajo argón, se trató con Cs2CO3 (342 mg, 5 eq, 1.05 mmol), y se agitó a r.t. durante 15 min antes de añadir hidrocloruro de 1-(2-cloroetil)pirrolidina (54 mg, 1.5 eq, 0.32 mmol). La mezcla se agitó 18 h a 70°C, se concentró a vacío, y el residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (90:10 CH²Cb:MeOH) para producir el regioisómero N1 como un aceite amarillo (13 mg, 19%). Se continuó la elución (88:10:2 CH²Cb:MeOH:AcOH) para obtener el regioisómero N7 como un aceite amarillo (7 mg, 10%).

RMN 1H (300 MHz, CDCb) para el compuesto sustituido en N1: 1.46 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 1.78 (bm, 4H), 2.65 (bm, 4H), 2.94 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 4.10 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 4.46 - 4.71 (m, 2H), 6.41 (s, 1H), 6.96 - 7.05 (m, 2H), 7.07 (dd, J = 7.8, 4.8 Hz, 1H), 7.37 - 7.50 (m, 2H), 7.86 (dd, J = 7.8, 1.6 Hz, 1H), 8.30 (dd, J = 4.8, 1.6 Hz, 1H).

RMN 1H (300 MHz, CDCb) para el compuesto sustituido en N7: 1.43 (t, J = 7.0, 3H), 1.81 (bm, 4H), 2.67 (bm, 4H), 3.21 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 4.09 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 4.87 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 6.73 - 6.82 (m, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.95 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.62 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 8.8 Hz, 2H).

Síntesis de 2-(4-etoxifenil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-1-carboxilato de terc-butilo (compuesto 17):

Se suspendió 2-(4-etoxifenil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridina (100 mg, 0.42 mmol) en CH²Cl²anhidro (5 ml) bajo argón, se añadió DMAP (5 mg), seguido de Et3N (64 pl, 1.1 eq, 0.46 mmol) y Boc²O (100 mg, 1.1 eq, 0.46 mmol), y la mezcla se agitó a r.t. durante 4 h antes de añadir agua. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró, y se concentró. El producto bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (85:15 PE:EtOAc) para proporcionar un sólido blanco (92 mg, 65%).

RMN 1H (300 MHz, CDCls): 1.31 (s, 9H), 1.44 (t, J= 7.0 Hz, 3H), 4.08 (q, J= 7.0 Hz, 2H), 6.43 (s, 1H), 6.86-7.01 (m, 2H), 7.17 (dd, J= 7.8, 4.8 Hz, 1H), 7.31-7.41 (m, 2H), 7.84 (dd, J= 7.8, 1.6 Hz, 1H), 8.48 (dd, J= 4.8, 1.6 Hz, 1H).

Síntesis de 2-(2-(4-etoxifenil)-1 H-pirrolo[2,3-b]piridin-1 -il)acetato de etilo y 2-(2-(4-etoxifenil)-7H-pirrolo[2,3-b]piridin-7-il)acetato de etilo (compuestos 18 y 19):

Se disolvió 2-(4-etoxifenil)-1 H-pirrolo[2,3-b]piridina (50 mg, 0.21 mmol) en DMF anhidra (2 ml) bajo argón, se trató con KOH en polvo (35 mg, 3 eq, 0.63 mmol), y se agitó a r.t. durante 15 min antes de añadir bromoacetato de etilo (28 pl, 1.2 eq, 0.25 mmol). La mezcla se agitó 18 h a r.t., se concentró a vacío, y el residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (CH²CD para producir el regioisómero N1 como un sólido marrón (10 mg, 15%). Se continuó la elución (98:2 CH²CL:MeOH) para obtener el regioisómero N7 como un sólido amarillo (18 mg, 26%).

RMN 1H (300 MHz, CDCla) para el compuesto sustituido en N1: 1.21 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.45 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 4.09 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 4.17 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 5.00 (s, 2H), 6.49 (s, 1H), 6.94- 7.01 (m, 2H), 7.11 (dd, J = 7.8, 4.8 Hz, 1H), 7.35 - 7.42 (m, 2H), 7.91 (dd, J = 7.8, 1.5 Hz, 1H), 8.31 (dd, J = 4.8, 1.5 Hz, 1H).

RMN 1H (300 MHz, CDCla) para el compuesto sustituido en N7: 1.31 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.40 (t, J = 6.9 Hz, 3H), 4.08 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 4.29 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 5.75 (s, 2H), 6.87 (s, 1H), 6.91 - 7.02 (m, 3H), 7.59 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 8.01 - 8.06 (m, 3H).

Síntesis de 1-(etoximetil) -2-(4-etoxifenil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridina (compuesto 20):

Se disolvió 2-(4-etoxifenil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridina (100 mg, 0.42 mmol) en THF anhidro (5 ml) bajo argón, y se trató con NaH (84 mg, 5 eq, 2.1 mmol), y se agitó a r.t. durante 15 min antes de añadir EOMCl (46 pl, 1.2 eq, 0.50 mmol). La mezcla se agitó 12 h a r.t., se paralizó con agua, y se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró, y se concentró. El producto bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (80:20 PE:EtOAc) para producir un sólido blanco (47 mg, 38%).

RMN 1H (300 MHz, CDCla): 1.31 - 1.16 (t J= 7.0 Hz, 3H), 1.46 (t, J= 7.0 Hz, 3H), 3.71 (q, J= 7.0 Hz, 2H), 4.10 (q, J= 7.0 Hz, 2H), 5.69 (s, 2H), 6.53 (s, 1H), 6.94 - 7.06 (m, 2H), 7.14 (dd, J= 7.8, 4.9 Hz, 1H), 7.63 - 7.77 (m, 2H), 7.92 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 8.33 (dd, J= 4.9, 1.5 Hz, 1H).

Síntesis de 2-(4-etoxifenil)-7H-pirrolo[2,3-b]piridin-7-carboxilato de bencilo (compuesto 21):

Se disolvió 2-(4-etoxifenil)-1 H-pirrolo[2,3-b]piridina (50 mg, 0.21 mmol) en DMF anhidra (2 ml) bajo argón, se trató con KOH en polvo (35 mg, 3 eq, 0.63 mmol), y se agitó a r.t. durante 15 min antes de añadir cloroformiato de bencilo (36 pl, 1.2 eq, 0.25 mmol). La mezcla se agitó 18 h a r.t., se concentró a vacío, y el residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (CH²CD para producir un sólido marrón (13 mg, 17%).

RMN 1H (300 MHz, CDCI³): 1.44 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 4.10 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 5.93 (s, 2H), 6.74 (dd, J = 7.3, 6.4 Hz, 1H), 6.92 (s, 1H), 6.97 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 7.31 - 7.50 (m, 6H), 7.92 (dd, J = 7.4, 1.0 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 8.9 Hz, 2H).

Síntesis de 2-(2-(4-etoxifenil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-1-il)-NN-dimetiletan-1-amina (compuesto 22):

Se disolvió 2-(4-etoxifenil)-1 H-pirrolo[2,3-b]piridina (100 mg, 0.42 mmol) en DMF anhidra (5 ml) bajo argón, se trató con NaH (84 mg, 5 eq, 2.1 mmol), y se agitó a r.t. durante 15 min antes de añadir hidrocloruro de 2-cloro-N,N-dimetiletilamina (120 mg, 2 eq, 0.84 mmol). La mezcla se agitó 12 h a 80°C, se paralizó con agua, y se extrajo con EtOAc (4 x 10 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSCM, se filtró, y se concentró. El producto bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (EtOAc:MeOH 90:10) para proporcionar un sólido blanco (33 mg, 25%).

RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 1.37 (t, J= 6.9 Hz, 3H), 2.00 (s, 6H), 2.43 (t, J= 7.0 Hz, 2H), 4.09 (q, J= 6.9 Hz, 2H), 4.39 (t, J= 7.0 Hz, 2H), 6.47 (s, 1H), 7.04 - 7.17 (m, 3H), 7.49 - 7.59 (m, 2H), 7.93 (dd, J= 7.8, 1.6 Hz, 1H), 8.26 (dd, J= 4.7, 1.6 Hz, 1H).

Síntesis de 2-(4-etoxifenil)-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridina (compuesto 23):

Se disolvió 2-(4-etoxifenil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridina (150 mg, 0,63 mmol) en THF anhidro (5 ml) bajo argón, y se trató con NaH 126 mg, 5 eq, 3.2 mmol), y se agitó a r.t. durante 15 min antes de añadir SEMCl (127 pl, 1.2 eq, 0.76 mmol). La mezcla se agitó 12 h a r.t., se paralizó con agua, y se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró, y se concentró. El producto crudo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (90:10 PE:EtOAc) para producir un aceite transparente (166 mg, 72%).

RMN 1H (300 MHz, CDCla): -0.04 (s, 9H), 0.93 - 1.01 (m, 2H), 1.46 (t, J = 7.0 Hz, 4H), 3.65 - 3.85 (m, 2H), 4.10 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 5.66 (s, 2H), 6.51 (s, 1H), 7.00 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 7.10 (dd, J = 7.8, 4.8 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 7.87 (dd, J = 7.8, 1.6 Hz, 1H), 8.32 (dd, J = 4.8, 1.6 Hz, 1H).

Síntesis de 2-(4-etoxifenil)-1 -metil-1 H-pirrolo[2,3-b]piridina (compuesto 24):

Se disolvió 2-(4-etoxifenil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridina (100 mg, 0.42 mmol) en DMF anhidra (5 ml) bajo argón, se trató con NaH (50 mg, 3 eq, 1.26 mmol), y se agitó a r.t. durante 15 min antes de añadir Mel (53 pl, 2 eq, 0.84 mmol). La mezcla se agitó durante 12 h, se paralizó con agua, y se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró, y se concentró. El producto bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (85:15 PE:EtOAc) para proporcionar un sólido blanco (55 mg, 50%).

RMN 1H (300 MHz, CDCla): 1.46 (t, J= 7.0 Hz, 3H), 3.87 (s, 3H), 4.10 (q, J= 7.0 Hz, 2H), 6.46 (s, 1H), 6.94 -7.04 (m, 2H), 7.08 (dd, J= 7.8, 4.8 Hz, 1H), 7.41 - 7.51 (m, 2H), 7.89 (dd, J= 7.8, 1.6 Hz, 1H), 8.33 (dd, J= 4.8, 1.6 Hz, 1H).

Síntesis de 2-(4-etoxifenil)-7-metil-7H-pirrolo[2,3-b]piridina (compuesto 25):

Se disolvió 2-(4-etoxifenil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridina (50 mg, 0,21 mmol) en THF anhidro (2 ml) bajo argón, se trató con MeI (0,5 ml, 40 eq, 80 mmol), y se agitó a reflujo durante 1 h. Después de enfriar, la disolución se concentró a vacío para proporcionar la sal de hidroyoduro como un polvo amarillo que se disolvió en CH²Cl². Se añadió amoniaco acuoso (10 ml), y la mezcla bifásica se agitó durante 30 min antes de la separación de la capa orgánica y la extracción con CH²Cl²(2x10 ml). Los extractos orgánicos se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron, y se concentraron. El producto bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (90:10 CH²Cl²:MeOH) para producir un sólido amarillo (27 mg, 51%). RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6): 1.35 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 4.07 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 4.25 (s, 3H), 6.84 - 6.92 (m, 2H), 6.92 - 7.00 (m, 2H), 7.96 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.02 -8.05 (m, 3H).

Síntesis de 4-cloro-2-(4-etoxifenil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-1-carboxilato de terc-butilo (compuesto 26):

Se suspendió 4-cloro-2-(4-etoxifenil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridina (50 mg, 0.18 mmol) en CH²Cl²anhidro (5 ml) bajo argón, se añadió DMAP (5 mg), seguido de EtsN (28 pl, 1.1 eq, 0.20 mmol) y Boc²O (43 mg, 1.1 eq, 0.20 mmol), y la mezcla se agitó a r.t. durante 4 h antes de añadir agua. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró, y se concentró. El producto bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (90:10 PE:EtOAc) para producir un sólido blanco (45 mg, 71%).

RMN 1H (300 MHz, CDCb): 1.32 (s, 9H), 1.45 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 4.09 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 6.56 (s, 1H), 6.96 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.21 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 8.36 (d, J = 5.3 Hz, 1H).

Síntesis de 2-(4-etoxifenil)-1-(tiofen-2-il)-1H-pirrolo[2,3-b]piridina (compuesto 27):

Se cargó 2-(4-etoxifenil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridina (50 mg, 0.21 mmol) en un tubo de presión con Cul (4 mg, 0.1 eq, 0.02 mmol), N,N'-dimetiletilendiamina (5 pl, 0.2 eq, 0.04 mmol) y K³PO⁴(94 mg, 2.1 eq, 0.44 mmol). El tubo se colocó bajo argón, se añadió tolueno anhidro (1 ml) seguido de 2-yodotiofeno (27 pl, 1.2 eq, 0.25 mmol), y la mezcla se agitó a 120°C durante 2 días. La disolución resultante se enfrió hasta r.t., se diluyó con agua, y se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró, y se concentró. El producto bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (70:30 PE:EtOAc) para producir un sólido marrón (5 mg, 7%).

RMN 1H (300 MHz, CDCls): 1.41 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 4.03 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 6.64 (s, 1H), 6.79 - 6.89 (m, 2H), 6.95 (dd, J = 3.7, 1.4 Hz, 1H), 7.00 (dd, J = 5.5, 3.7 Hz, 1H), 7.14 (dd, J = 7.8, 4.8 Hz, 1H), 7.25 (dd, J = 5.5; 1.4 Hz, 1H), 7.28 - 7.34 (m, 2H), 7.91 (dd, J = 7.8, 1.6 Hz, 1H), 8.34 (dd, J = 4.8, 1.6 Hz, 1H).

Síntesis de 2-(4-etoxifenil)-1-(piridin-2-il)-1H-pirrolo[2,3-b]piridina (compuesto 28):

Se cargó 2-(4-etoxifenil)-1 H-pirrolo[2,3-b]piridina (50 mg, 0.21 mmol) en un tubo de presión con Cul (4 mg, 0.1 eq, 0.02 mmol), N,N'-dimetiletilendiamina (5 pl, 0.2 eq, 0.04 mmol) y K³PO⁴(94 mg, 2.1 eq, 0.44 mmol). El tubo se colocó bajo argón, se añadió tolueno anhidro (1 ml) seguido de 2-yodopiridina (27 pl, 1.2 eq, 0.25 mmol), y la mezcla se agitó a 120°C durante 2 días. La disolución resultante se enfrió hasta r.t., se diluyó con agua, y se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró, y se concentró. El producto bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (98:2 ChhCbMeOH) para producir un aceite amarillo (40 mg, 61%).

RMN 1H (300 MHz, CDCb): 1.40 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 4.01 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 6.67 (s, 1H), 6.75 - 6.85 (m, 2H), 7.13 (dd, J = 7.8, 4.8 Hz, 1H), 7.16 - 7.20 (m, 1H), 7.24 - 7.30 (m, 1H), 7.47 (dt, J = 8.0, 0.8 Hz, 1H), 7.79 (dt, J = 1.9, 7.6 Hz, 1H), 7.93 (dd, J = 7.8, 1.6 Hz, 1H), 8.31 (dd, J = 4.8, 1.6 Hz, 1H), 8.56 (ddd, J = 4.9, 1.9, 0.8 Hz, 1H).

Síntesis de 2-(4-etoxifenil)-7H-pirrolo[2,3-b]piridin-7-carboxilato de metilo (compuesto 29):

Se suspendió 2-(4-etoxifenil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridina (50 mg, 0.21 mmol) en bromoacetato de metilo (2 ml) bajo argón, y se agitó a 150°C en un baño de aceite precalentado durante 15 min antes de enfriar y filtrar el precipitado. El sólido marrón resultante se suspendió en una disolución saturada de K²CO³, y se agitó durante 30 min antes de la filtración. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (CH²Cb:MeOH 98:2) para producir un sólido amarillo (20 mg, 32%).

RMN 1H (300 MHz, CDCb): 1.43 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 3.81 (s, 3H), 4.08 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 5.64 (s, 2H), 6.86 - 6.88 (m, 2H), 6.95 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.50 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 7.99 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 8.7 Hz, 2H).

Síntesis de los compuestos 30 y 31:

Los siguientes compuestos pueden prepararse según los mismos procedimientos como se describen anteriormente para la síntesis de los compuestos 1 a 29.

Se disolvió 2-(4-etoxifenil)-1 H-pirrolo[2,3-b]piridina (100 mg, 0.42 mmol) en THF anhidro (5 ml) bajo argón, se trató con LiHMDS (1 M en tolueno, 503 pl, 1.2 eq., 0.50 mmol), y se agitó a 0°C durante 15 min antes de añadir cloroformiato de 2,2,2-tricloroetilo (70 pl, 1.2 eq, 0.50 mmol). La mezcla se agitó 24 h a r.t., y se añadió más electrófilo (140 pl, 2.4 eq, 100 mmol). Después de 24 h de agitación a r.t., la reacción se paralizó con agua, y se extrajo con EtOAc (4 x 10 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró, y se concentró. El producto crudo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (80:20 PE:EtOAc) para producir un aceite amarillo (27 mg, 15%).

RMN 1H (300 MHz, CDCb): 1.36 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 4.00 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 4.82 (s, 2H), 6.47 (s, 1H), 6.86 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.19 (dd, J = 7.8, 5.0 Hz, 2H), 7.31 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.82 (dd, J = 7.8, 1.6 Hz, 1H), 8.43 (dd, J = 5.0, 1.6 Hz, 1H).

Síntesis de 1-(2-(4-etoxifenil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-1-carbonil)-3-(metilsulfonil)imidazolidin-2-ona (compuesto 33):

Se disolvió 2-(4-etoxifenil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridina (100 mg, 0,42 mmol) en DMF anhidra (5 ml) bajo argón, se trató con NaH (20 mg, 1.2 eq, 0.50 mmol), y se agitó a r.t. durante 15 min antes de añadir cloruro de (metilsulfonil)-2-oxoimidazolidin-1-carbonilo (209 mg, 2.2 eq, 0.92 mmol). La mezcla se agitó 6 días a r.t., se paralizó con agua, y se extrajo con EtOAc (4 x 10 ml). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró, y se concentró. El producto bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida (50:50 PE:EtOAc) para producir un aceite que se redisolvió en CH²Cl²y se concentró a alto vacío para obtener un sólido blanco (41 mg, 23%).

RMN 1H (300 MHz, CDCla): 1.44 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 3.17 (s, 3H), 3.88 - 3.94 (m, 4H), 4.07 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 6.60 (s, 1H), 6.95 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.17 (dd, J = 7.8, 4.8 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.88 (dd, J = 7.8, 1.5 Hz, 1H), 8.23 (dd, J = 4.8, 1.5 Hz, 1H).

Síntesis de 2-(4-etoxifenil)-N,N-diisopropil-7H-pirrolo[2,3-b]piridin-7-carboxamida (compuesto 34):

Siguiendo el mismo procedimiento que la síntesis de 2-(4-etoxifenil)-N,N-dietil-7H-pirrolo[2,3-b]piridin-7-carboxamida, usando cloruro de diisopropilcarbamoílo, para obtener el producto deseado (8 mg, 5%).

RMN 1H (300 MHz, CDCla): 1.08 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.29 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.43 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 1.63 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.77 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 3.25 - 3.39 (m, 1H), 3.66 - 3.78 (m, 1H), 4.08 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 6.81 (dd, J = 7.3, 6.4 Hz, 1H), 6.89 (s, 1H), 6.93 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 7.51 (dd, J = 6.4, 1.1 Hz, 1H), 7.93 (dd, J = 7.3, 1.1 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 8.9 Hz, 2H).

Síntesis de (2-(4-etoxifenil)-7H-pirrolo[2,3-b]piridin-7-il)(pirrolidin-1-il)metanona (compuesto 35):

Siguiendo el mismo procedimiento que la síntesis de 2-(4-etoxifenil)-N,N-dietil-7H-pirrolo[2,3-b]piridin-7-carboxamida, usando cloruro de pirrolidin-1-carbonilo, para obtener el producto deseado (54 mg, 38%).

RMN 1H (300 MHz, CDCb): 1.43 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 1.83 - 1.96 (m, 2H), 1.99 - 2.11 (m, 2H), 3.36 - 3.49 (m, 2H), 3.85 - 3.90 (m, 2H), 4.08 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 6.84 (dd, J = 7.3, 6.5 Hz, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.95 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 7.70 (dd, J = 6.5, 1.1 Hz, 1H), 7.96 (dd, J = 7.3, 1.0 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 8.9 Hz, 2H).

Síntesis de (2-(4-etoxifenil)-7H-pirrolo[2,3-b]piridin-7-il)(4-metilpiperazin-1-il)metanona (compuesto 36): Siguiendo el mismo procedimiento que la síntesis de 2-(4-etoxifenil)-N,N-dietil-7H-pirrolo[2,3-b]piridin-7-carboxamida, utilizando cloruro de 4-metilpiperazin-1-carbonilo, para obtener el producto deseado (7 mg, 2%).

RMN 1H (300 MHz, CDCla): 1.42 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 2.37 (s, 3H), 2.55 - 2.87 (m, 4H), 3.06 - 3.13 (m, 2H), 3.38 -3.45 (m, 1H), 3.89 - 4.01 (m, 1H), 4.09 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 6.84 (dd, J = 7.5, 6.8 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 6.94 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 7.64 (dd, J = 6.8, 1.1 Hz, 2H), 7.96 (dd, J = 7.5, 1.1 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 8.9 Hz, 2H).

II. Ensayos biológicos de los compuestos según la invención

Ejemplo 2: Cribado celular de bibliotecas químicas para la caracterización de inhibidores de necroptosis

El TNF-a puede inducir necroptosis en células Jurkat (linfocitos T humanos) cuando se eliminó FADD. Este modelo se utilizó para seleccionar varias bibliotecas de compuestos químicos para la caracterización de nuevos inhibidores de la necroptosis celular. Los detalles sobre este ensayo basado en células se pueden encontrar en Miao y Degterev (Methods Mol. Biol.2009, 559, 79-93). La estirpe celular Jurkat I 2.1 deficiente en FADD usada se adquirió de ATCC y se mantuvo en medio RPMI 1640 (Gibco) que contenía Glutamax y suero de ternera fetal al 15% (Life Technology). La necroptosis se indujo mediante la adición de 10 ng/ml de TNF-a recombinante humano (Life Technology). Se usó necrostatina-1 (Nec-1, Enzo Life Sciences) como inhibidor de necroptosis modelo. Las células se mantuvieron en matraces de 75 cm.2, y se hicieron pasar cada 2 o 3 días. Las colecciones químicas analizadas se formatearon en placas de 96 pocillos con 80 moléculas por placa a 10 mM en DMSO al 100%. Para cada placa de colección, se sembraron 2 placas de células (una inducida por necroptosis con TNF-a y la otra sin TNF-a). Las células se sembraron a 20000 células/pocillo, en 40 pl de medio, en una placa de fondo plano transparente de 96 pocillos (CytoOne, Starlab) antes del tratamiento. Después, se añadieron 40 pl de medio con o sin TNF-a a 25 ng/ml a todos los pocillos en la placa correspondiente. Inmediatamente después de la adición de TNF-a, se añadieron a las placas 20 pl de compuesto diluido a 50 pM. La concentración final de cada compuesto químico fue 10 pM a 0,1% de DMSO. Se utilizaron cuatro controles positivos (Nec-1 a 10 pM final) y cuatro controles negativos (DMSO) en cada placa para validar el ensayo. Las células se incubaron a 37°C, 5% de CO²durante 24 horas antes de realizar el ensayo de viabilidad de MTS, que se describe a continuación. Los compuestos se diluyeron antes para tratar las células. La manipulación de líquidos se realizó utilizando el manipulador de líquidos Nimbus Microlab (Hamilton Robotics) bajo un banco de trabajo de seguridad microbiológica. Los compuestos 10 mM se diluyeron a 50 pM directamente en medio celular.

Los resultados de estos ensayos obtenidos con los compuestos de la invención se indican a continuación y en las figuras 1 a 11:

Además, la EC⁵⁰del compuesto 7, compuesto 10 y necrostatina-1 (Nec-1) se determinaron en modelos celulares de ratón o humanos de necroptosis inducida por FasL zVAD-fmk (un inhibidor de pan-caspasa), TRAIL zVAD-fmk Bp (Birinapant, un mimético de Smac) o TNF, y mediante el uso de dos ensayos citotóxicos (ensayo de proliferación celular MTS o nivel de ATP intracelular). Como se muestra en la tabla siguiente, el compuesto 10 inhibe la necroptosis inducida por TNF, TRAIL o FasL, al igual que Nec-1, mientras que el compuesto 7 únicamente inhibe la necroptosis inducida por TNF o FasL (tabla 1).

Tabla 1: efecto antinecroptótico de los compuestos 7, 10 y Nec-1

Ejemplo 3: ensayo de autofosforilación de RIPK1

Ensayo de autofosforilación de RIPK1: Se expresó baculoviralmente RIPK1 humana etiquetada con GST de longitud completa en células Sf9 según las instrucciones del fabricante (sistema de expresión Bac-to-Bac, Invitrogen) y se purificó usando perlas de glutationa-sefarosa (GE Healthcare). La elución se realizó en amortiguador de Tris-HCl 50 mM, pH 8.0, suplementado con glutationa reducida 30 mM (Sigma). El protocolo utilizado para detectar la actividad enzimática está adaptado de Miao y Degterev (Methods Mol. Biol. 2009, 559, 79-93). La reacción de cinasa se inició mezclando 5 pl de RIPK1 eluida, 5 pl de amortiguador de reacción de cinasa 3X (MOPS 5 mM pH 7.2, p-glicerofosfato 2.5 mM, MgCb 4 mM, MnCb 2.5 mM, EGTA 1 mM, EDTA 0.4 mM, BSA 50 pg/ml, DTT 0.05 mM), 2 pl de H²O y 3 pl de la molécula ensayada. La mezcla se mantuvo en hielo durante 10 minutos. Durante la incubación, la disolución de ATP se preparó mezclando 5 pl de amortiguador de reacción de cinasa 3X, 4 pl de H²O, 6 pl de ATP frío a 150 pM, y 2 pCi de [y-32P] ATP. Se añade la disolución de ATP y el inhibidor ensayado a la cinasa, y se incuba durante 30 minutos a 30°C. Para detener la reacción enzimática, se añadieron 5 pl de amortiguador de carga, y la disolución se calentó durante 3 minutos a 95°C. Se cargaron 25 pl de cada reacción por pocillo en gel NuPage 12% Bis-Tris prefabricado (Life Technology). La banda de RIPK1 autofosforilada se visualizó en una película radiográfica después de una exposición de 6 h a -80°C.

Los resultados de este ensayo obtenidos con el compuesto 10 de la invención se indican en la figura 5. La disminución de la cantidad de RIPK1 marcada radiactivamente indica que el compuesto 10 (derivado de N1-Sibirilina) inhibe, de manera dependiente de la dosis, la autofosforilación de RIPK1. Como la fosforilación de RIPK1 requiere su actividad de cinasa, RIPK1 es así una diana genuina del compuesto 10 para impulsar la inhibición de la necroptosis inducida por TNF-a como se muestra en la figura 5.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Compuesto de la fórmula general (I) siguiente:

o una sal y/o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo,

en el que:

es

• cuando

es

X¹es un átomo de nitrógeno y -X²es -N-Y,

• cuando

es

-X¹es -N-Y y X²es un átomo de nitrógeno,

• Y es -C(O)NR¹⁰Rn; -C(O)R¹²; -S(O)2R25; -C(O)OR29 o -SO²-NR³⁰R³¹;

• Z es un alquilo (C¹-C⁶) y R¹es H, halo, alquilo (C¹-C⁶), -OR⁵¹, CF³, -NR52R53,-OS(O)2NR54R55 o -CN; o Z y R¹forman juntos un heterocicloalquilo;

• R²a R⁴son, independientemente entre sí, H, halo, alquilo (C¹-C⁶), -OR⁵¹, -CF3,-NR52R53, -OS(O)2NR54R55 o -CN; •

• R⁵es H, alquilo (C¹-C⁶) u -O-alquilo (C¹-C⁶);

• R6 a R8 son, independientemente entre sí, H; halo; -OR⁵⁶; -NR57R58;-C(O)NR59R60; -C(O)R6i; -R62C(O)O63; -R64C(O)R65; -R⁶⁶NR⁶⁷R⁶⁸; -R⁶⁹OR⁷⁰; -S(O)2R74; -OR75C(O)OR76; -OC(O)R77; -C(O)OR78; o un grupo seleccionado de entre alquilo (C¹-C⁶), heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, -alquil (C¹-C⁶)-arilo, -alquil (C¹-C⁶)-heterocicloalquilo, estando dicho grupo opcionalmente sustituido con uno o varios grupos seleccionados de entre halo, -OR⁷⁹, -NR⁸⁰R⁸¹, -SR⁸², -S(O)R83, -SO²R⁸⁴, -SO²NR⁸⁵R⁸⁶, -OCOR87, -NR88COR89, -NR90C(O)OR91, -CO²R⁹², -CONR⁹³R⁹⁴, -CO²R⁹⁵, -OCONR⁹⁶R⁹⁷, -COR⁹⁸, nitro (-NO²), ciano (-CN) y oxo (=O); y

• R¹⁰a R¹², R²⁵, R²⁹a R³¹y R⁵¹a R⁹⁸son, independientemente entre sí, H; halo; o un grupo seleccionado de entre alquilo (C¹-C⁶), arilo, heteroarilo, heterocicloalquilo y -alquil (C¹-C⁶)-arilo, estando dicho grupo opcionalmente sustituido con uno o varios grupos seleccionados de entre halo, alquilo (C¹-C⁶), -C(O)Ralk, -C(O)ORalk, -SO²Ralk, -ORalk, -CORalkRalk', oxo (=O), y SO²-Ralk, en el que Ralk y Ralk' son, independientemente entre sí, alquilo (C¹-C⁶);

con la condición de que: cuando

es

y Z es un metilo, Y no es -SOs-fenilo.

2. Compuesto según la reivindicación 1, en el que Z es alquilo (C¹-C³), preferentemente etilo.

3. Compuesto según la reivindicación 1 o 2, en el que R¹a R⁴son, independientemente entre sí, H, halo, alquilo (C¹-C⁶) u -OR⁵¹, preferentemente H, halo, metilo u OMe.

4. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que R⁵es H.

5. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que R6 a R8 son, independientemente entre sí, H; halo; -OR⁵⁶; -NR⁵⁷R⁵⁸; o un grupo seleccionado de entre alquilo (C¹-C⁶), heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, -alquil (C¹-C⁶)-arilo y -alquil (C¹-C⁶)-heterocicloalquilo, estando dicho grupo opcionalmente sustituido con uno o varios grupos seleccionados de entre halo, -OR⁷⁹, -NR⁸⁰R⁸¹, -SR⁸², -S(O)R83, -SO²R⁸⁴, -SO²NR⁸⁵R⁸⁶, -OCOR87, -NR88COR89, -NR90C(O)OR91, -CO²R⁹², -CONR⁹³R⁹⁴, -CO²R⁹⁵, -OCONR⁹⁶R⁹⁷, -COR⁹⁸, nitro (-NO²), ciano (-CN) y oxo (=O); preferentemente H, halo, -OR⁵⁶, -NR⁵⁷R⁵⁸; o un grupo seleccionado de entre alquilo (C¹-C⁶), heterocicloalquilo, arilo y heteroarilo.

6. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que R¹⁰a R¹², R²⁵, R²⁹a R³¹y R⁵¹a R⁹⁸son, independientemente entre sí, preferentemente H; halo; o un grupo seleccionado de entre alquilo (C¹-C⁶), fenilo, bencilo, heterocicloalquilo, estando dicho grupo opcionalmente sustituido con uno o varios grupos seleccionados de entre halo, alquilo (C¹-C⁶), -C(O)Ralk, -C(O)ORalk, -SO²Ralk, -ORalk, -CORalkRalk', oxo (=O), y SO²-Ralk, en el que Ralk y Ralk' son, independientemente entre sí, alquilo (C¹-C⁶), preferentemente seleccionados de entre halo, metilo, oxo (=O) y SO²-CH³.

7. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que se selecciona de entre los compuestos siguientes:

y las sales y los solvatos farmacéuticamente aceptables de los mismos.

8. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, para una utilización como un fármaco.

9. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, para una utilización como un inhibidor de la necroptosis celular, ventajosamente para prevenir y/o tratar trastornos asociados con la necroptosis celular.

10. Compuesto para una utilización según la reivindicación 9, en el que dichos trastornos asociados con la necroptosis celular son traumatismo en el cerebro, hepatitis, esteatohepatitis alcohólica y no alcohólica, pancreatitis aguda y necrosis tubular aguda, trasplante de corazón o riñón, aterosclerosis, insuficiencia medular ósea, infección viral, enfermedad de Crohn y colitis ulcerosa, ileítis terminal, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, o lesión por isquemia-reperfusión, tal como infarto de miocardio o apoplejía.

11. Compuesto para una utilización según la reivindicación 9, en el que dicha necroptosis celular es la necroptosis de células endoteliales inducida por células tumorales, y dichos trastornos asociados con la misma son extravasación o metástasis de células tumorales.

12. Composición farmacéutica que comprende por lo menos un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7 y por lo menos un excipiente farmacéuticamente aceptable.

13. Utilización ex vivo de un compuesto según se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, para la conservación y/o protección de materiales biológicos tales como células, tejidos, fluidos corporales y órganos, y de microorganismos, ventajosamente como dispositivo médico.

14. Procedimiento para preparar un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el que Z es alquilo (C¹-C⁶), preferentemente etilo, que comprende las etapas siguientes:

i) hacer reaccionar una 3-picolina con un 4-etoxibenzonitrilo para proporcionar un compuesto de la fórmula (II) siguiente:

ii) a continuación, hacer reaccionar el compuesto de fórmula (II) con un compuesto de fórmula Y-W, en el que Y es como se define en la reivindicación 1 y W es halo, en particular Cl, Br o I,

15. Procedimiento para preparar un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, o una sal y/o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo,

en el que

es

siendo X¹un átomo de nitrógeno, siendo -X²-N-Y, siendo Y como se define en la reivindicación 1, y Z es alquilo (C¹-C⁶), preferentemente etilo,

comprendiendo dicho procedimiento las etapas siguientes:

(i') hacer reaccionar una 5-bromo-3-yodopiridin-2-amina con un 1-etoxi-4-etinilbenceno para proporcionar un compuesto de la fórmula (III) siguiente:

(ii') a continuación, hacer reaccionar el compuesto de fórmula (III) con un compuesto de fórmula Y-W, en el que Y es como se define en la reivindicación 1 y W es halo, en particular Cl, Br o I, para obtener un compuesto de fórmula (IV):

(iii') a continuación, disolver el compuesto de fórmula (IV) en DMF anhidra y hacer reaccionar la disolución obtenida con CuI;