ES2798110T3 - Anticuerpos monoclonales humanos neutralizantes de IL-beta - Google Patents
Anticuerpos monoclonales humanos neutralizantes de IL-beta Download PDFInfo
- Publication number
- ES2798110T3 ES2798110T3 ES13748708T ES13748708T ES2798110T3 ES 2798110 T3 ES2798110 T3 ES 2798110T3 ES 13748708 T ES13748708 T ES 13748708T ES 13748708 T ES13748708 T ES 13748708T ES 2798110 T3 ES2798110 T3 ES 2798110T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- binding protein
- antigen
- antibody
- isolated
- protein
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 title description 13
- 102000025171 antigen binding proteins Human genes 0.000 claims abstract description 56
- 108091000831 antigen binding proteins Proteins 0.000 claims abstract description 56
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 42
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 26
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 25
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 16
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 16
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 16
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 16
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 16
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 16
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 14
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 13
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 claims description 11
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 11
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 8
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 8
- 208000022993 cryopyrin-associated periodic syndrome Diseases 0.000 claims description 7
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 claims description 7
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 claims description 7
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims description 7
- 208000002874 Acne Vulgaris Diseases 0.000 claims description 6
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 claims description 6
- 201000005569 Gout Diseases 0.000 claims description 6
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 6
- 206010000496 acne Diseases 0.000 claims description 6
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 claims description 6
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 6
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 claims description 5
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims description 5
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims description 5
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 claims description 5
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 claims description 5
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 claims description 5
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 claims description 5
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 claims description 4
- 206010046851 Uveitis Diseases 0.000 claims description 4
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims description 4
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 239000012216 imaging agent Substances 0.000 claims description 4
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 claims description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 3
- 239000003053 toxin Substances 0.000 claims description 3
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 claims description 3
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 claims description 3
- 101100454807 Caenorhabditis elegans lgg-1 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 101100454808 Caenorhabditis elegans lgg-2 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 101100217502 Caenorhabditis elegans lgg-3 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 2
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 claims description 2
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000004037 angiogenesis inhibitor Substances 0.000 claims description 2
- 229940045799 anthracyclines and related substance Drugs 0.000 claims description 2
- 230000000340 anti-metabolite Effects 0.000 claims description 2
- 229940100197 antimetabolite Drugs 0.000 claims description 2
- 239000002256 antimetabolite Substances 0.000 claims description 2
- 239000003080 antimitotic agent Substances 0.000 claims description 2
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 claims description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 claims description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 claims description 2
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 claims description 2
- 102000023732 binding proteins Human genes 0.000 claims 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 34
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 28
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 23
- 102100024952 Protein CBFA2T1 Human genes 0.000 description 22
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 20
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 19
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 18
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 17
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 15
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 15
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 15
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 13
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 12
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 12
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 11
- 241000186427 Cutibacterium acnes Species 0.000 description 10
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 10
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 10
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 9
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 9
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 9
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 9
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 9
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 9
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 9
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 9
- 230000017306 interleukin-6 production Effects 0.000 description 8
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 7
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 7
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 7
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 6
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 6
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 6
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 6
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 210000001503 joint Anatomy 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 5
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 5
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 5
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 5
- HMLGSIZOMSVISS-ONJSNURVSA-N (7r)-7-[[(2z)-2-(2-amino-1,3-thiazol-4-yl)-2-(2,2-dimethylpropanoyloxymethoxyimino)acetyl]amino]-3-ethenyl-8-oxo-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid Chemical compound N([C@@H]1C(N2C(=C(C=C)CSC21)C(O)=O)=O)C(=O)\C(=N/OCOC(=O)C(C)(C)C)C1=CSC(N)=N1 HMLGSIZOMSVISS-ONJSNURVSA-N 0.000 description 4
- 102000008203 CTLA-4 Antigen Human genes 0.000 description 4
- 108010021064 CTLA-4 Antigen Proteins 0.000 description 4
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 4
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 4
- 102000051628 Interleukin-1 receptor antagonist Human genes 0.000 description 4
- 108700021006 Interleukin-1 receptor antagonist Proteins 0.000 description 4
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 4
- 229960004238 anakinra Drugs 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 4
- 230000036541 health Effects 0.000 description 4
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 4
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 4
- NAFSTSRULRIERK-UHFFFAOYSA-M monosodium urate Chemical class [Na+].N1C([O-])=NC(=O)C2=C1NC(=O)N2 NAFSTSRULRIERK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000016359 Fibronectins Human genes 0.000 description 3
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101001033249 Homo sapiens Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 3
- 102100039065 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 description 3
- 102000019298 Lipocalin Human genes 0.000 description 3
- 108050006654 Lipocalin Proteins 0.000 description 3
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 3
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 230000002917 arthritic effect Effects 0.000 description 3
- 229960001838 canakinumab Drugs 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 3
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 3
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 3
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 3
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 3
- 102000008102 Ankyrins Human genes 0.000 description 2
- 108010049777 Ankyrins Proteins 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 108090000342 C-Type Lectins Proteins 0.000 description 2
- 102000003930 C-Type Lectins Human genes 0.000 description 2
- 241000282836 Camelus dromedarius Species 0.000 description 2
- 102000016289 Cell Adhesion Molecules Human genes 0.000 description 2
- 108010067225 Cell Adhesion Molecules Proteins 0.000 description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 2
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- 108700022150 Designed Ankyrin Repeat Proteins Proteins 0.000 description 2
- YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N Fluorine atom Chemical compound [F] YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- 102000000470 PDZ domains Human genes 0.000 description 2
- 108050008994 PDZ domains Proteins 0.000 description 2
- 108010079855 Peptide Aptamers Proteins 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000006265 Renal cell carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 241000239226 Scorpiones Species 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 101000677856 Stenotrophomonas maltophilia (strain K279a) Actin-binding protein Smlt3054 Proteins 0.000 description 2
- 108090000848 Ubiquitin Proteins 0.000 description 2
- 102000044159 Ubiquitin Human genes 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 230000009824 affinity maturation Effects 0.000 description 2
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 2
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 2
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 230000003367 anti-collagen effect Effects 0.000 description 2
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 2
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 2
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N chlorobutanol Chemical compound CC(C)(O)C(Cl)(Cl)Cl OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- -1 coatings Substances 0.000 description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 2
- 229940042399 direct acting antivirals protease inhibitors Drugs 0.000 description 2
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 2
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 2
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 2
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 2
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 2
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 2
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 210000004303 peritoneum Anatomy 0.000 description 2
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 230000012846 protein folding Effects 0.000 description 2
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 2
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 2
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- SBUXRMKDJWEXRL-ZWKOTPCHSA-N trans-body Chemical compound O=C([C@@H]1N(C2=O)[C@H](C3=C(C4=CC=CC=C4N3)C1)CC)N2C1=CC=C(F)C=C1 SBUXRMKDJWEXRL-ZWKOTPCHSA-N 0.000 description 2
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 2
- 238000011870 unpaired t-test Methods 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- LOGFVTREOLYCPF-KXNHARMFSA-N (2s,3r)-2-[[(2r)-1-[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-hydroxybutanoic acid Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CCCCN LOGFVTREOLYCPF-KXNHARMFSA-N 0.000 description 1
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- IQFYYKKMVGJFEH-OFKYTIFKSA-N 1-[(2r,4s,5r)-4-hydroxy-5-(tritiooxymethyl)oxolan-2-yl]-5-methylpyrimidine-2,4-dione Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO[3H])O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(C)=C1 IQFYYKKMVGJFEH-OFKYTIFKSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- 102100024341 10 kDa heat shock protein, mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 235000002198 Annona diversifolia Nutrition 0.000 description 1
- 208000022715 Autoinflammatory syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102000000905 Cadherin Human genes 0.000 description 1
- 108050007957 Cadherin Proteins 0.000 description 1
- 101710167800 Capsid assembly scaffolding protein Proteins 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108010059013 Chaperonin 10 Proteins 0.000 description 1
- 206010064568 Chronic infantile neurological cutaneous and articular syndrome Diseases 0.000 description 1
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N Dehydro-luciferin Natural products OC(=O)C1=CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108050001049 Extracellular proteins Proteins 0.000 description 1
- BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N Fivefly Luciferin Natural products OC(=O)C1CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 241000251152 Ginglymostoma cirratum Species 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108010004889 Heat-Shock Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000002812 Heat-Shock Proteins Human genes 0.000 description 1
- 101000960954 Homo sapiens Interleukin-18 Proteins 0.000 description 1
- 101001055149 Homo sapiens Pro-interleukin-16 Proteins 0.000 description 1
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 description 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 1
- 102000016844 Immunoglobulin-like domains Human genes 0.000 description 1
- 108050006430 Immunoglobulin-like domains Proteins 0.000 description 1
- 102000003777 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 description 1
- 108090000193 Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 1
- 102000019223 Interleukin-1 receptor Human genes 0.000 description 1
- 108050006617 Interleukin-1 receptor Proteins 0.000 description 1
- 206010023203 Joint destruction Diseases 0.000 description 1
- 241000282842 Lama glama Species 0.000 description 1
- 241000282852 Lama guanicoe Species 0.000 description 1
- DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N Luciferin Natural products CCc1c(C)c(CC2NC(=O)C(=C2C=C)C)[nH]c1Cc3[nH]c4C(=C5/NC(CC(=O)O)C(C)C5CC(=O)O)CC(=O)c4c3C DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 201000002795 Muckle-Wells syndrome Diseases 0.000 description 1
- 101100340743 Mus musculus Il1b gene Proteins 0.000 description 1
- 101500025788 Mus musculus Interleukin-16 Proteins 0.000 description 1
- 101001076414 Mus musculus Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 102000003945 NF-kappa B Human genes 0.000 description 1
- 108010057466 NF-kappa B Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 101710130420 Probable capsid assembly scaffolding protein Proteins 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- KJTLSVCANCCWHF-UHFFFAOYSA-N Ruthenium Chemical compound [Ru] KJTLSVCANCCWHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710204410 Scaffold protein Proteins 0.000 description 1
- 102000003800 Selectins Human genes 0.000 description 1
- 108090000184 Selectins Proteins 0.000 description 1
- 101000582398 Staphylococcus aureus Replication initiation protein Proteins 0.000 description 1
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 102100024554 Tetranectin Human genes 0.000 description 1
- 102100036407 Thioredoxin Human genes 0.000 description 1
- 101710120037 Toxin CcdB Proteins 0.000 description 1
- 102000002070 Transferrins Human genes 0.000 description 1
- 108010015865 Transferrins Proteins 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N Tritium Chemical compound [3H] YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 1
- 241001416177 Vicugna pacos Species 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000001746 atrial effect Effects 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 150000004649 carbonic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 238000000423 cell based assay Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 229960004926 chlorobutanol Drugs 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 150000001860 citric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 108050003126 conotoxin Proteins 0.000 description 1
- 230000037011 constitutive activity Effects 0.000 description 1
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 210000004292 cytoskeleton Anatomy 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- UGMCXQCYOVCMTB-UHFFFAOYSA-K dihydroxy(stearato)aluminium Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[Al](O)O UGMCXQCYOVCMTB-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000002825 functional assay Methods 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 1
- 229950003717 gevokizumab Drugs 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 102000043959 human IL18 Human genes 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 1
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 1
- 102000014909 interleukin-1 receptor activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040006732 interleukin-1 receptor activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N luminol Chemical compound O=C1NNC(=O)C2=C1C(N)=CC=C2 HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 210000002500 microbody Anatomy 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 108091005763 multidomain proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 210000003200 peritoneal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 229960003742 phenol Drugs 0.000 description 1
- WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N phenyl(114C)methanol Chemical compound O[14CH2]C1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 229940055019 propionibacterium acne Drugs 0.000 description 1
- 108020001580 protein domains Proteins 0.000 description 1
- 239000002464 receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- 229940044551 receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 230000007115 recruitment Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 239000003340 retarding agent Substances 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001886 rilonacept Drugs 0.000 description 1
- 108010046141 rilonacept Proteins 0.000 description 1
- 229910052707 ruthenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 238000003118 sandwich ELISA Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 108010013645 tetranectin Proteins 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 description 1
- ANRHNWWPFJCPAZ-UHFFFAOYSA-M thionine Chemical compound [Cl-].C1=CC(N)=CC2=[S+]C3=CC(N)=CC=C3N=C21 ANRHNWWPFJCPAZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108060008226 thioredoxin Proteins 0.000 description 1
- 229940094937 thioredoxin Drugs 0.000 description 1
- 238000003146 transient transfection Methods 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- 229910052722 tritium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
- C07K16/244—Interleukins [IL]
- C07K16/245—IL-1
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/10—Anti-acne agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/06—Antigout agents, e.g. antihyperuricemic or uricosuric agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/55—Fab or Fab'
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Immunology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Obesity (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Ophthalmology & Optometry (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Hematology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Una proteína de unión a antígeno específica de IL-1β aislada que comprende las siguientes CDR: - una región variable de cadena pesada que incluye las CDR H1 = DYYWS, H2 = EIDHSGSTNYNPSLKS, H3 = ASPSSGWTLDY; y - una región variable de cadena ligera que incluye las CDR L1 = GDKLGDKFAF, L2 = LDNKRPS, L3 = YAWADTYEV.
Description
DESCRIPCIÓN
Anticuerpos monoclonales humanos neutralizantes de IL-p
Campo técnico
Se proporcionan proteínas de unión a antígeno y en particular proteínas de unión a antígeno de IL-1p. Más específicamente, la presente invención se refiere a secuencias de las proteínas de unión y las cadenas pesadas y ligeras. También se proporcionan composiciones que comprenden las proteínas de unión a antígeno, el uso de las proteínas de unión a antígeno y métodos para la producción.
Antecedentes
La interleucina-1 beta (IL-1p) es un miembro de la familia de las citocinas lnterleucina-1 y es un mediador importante de la respuesta inflamatoria. Es una citocina proinflamatoria y participa en la proliferación, diferenciación y apoptosis de células.
La sobreexpresión de IL-1p se ha implicado en una serie de enfermedades inflamatorias y autoinmunitarias tales como síndromes periódicos asociados a la criopirina y trastornos relacionados, diabetes, enfermedad de Crohn, artritis reumatoide, carcinoma de células renales, gota y acné inflamatorio. Geiger et al. (Clin Exp Rheumatol. 11(5): 515-522, 1993) demuestra en un modelo murino para la artritis que el anticuerpo anti-IL-1p podría prevenir la destrucción de las articulaciones. El documento WO 2007/002261 desvela anticuerpos anti-IL-1p y el tratamiento de enfermedades inflamatorias, enfermedades autoinmunitarias, cánceres, etc. usando dichos anticuerpos. El documento WO02/16436 desvela ACZ885 (ahora denominado canakinumab), que se convirtió en el anticuerpo de referencia para su uso en la terapia de bloqueo de IL-1b, principalmente en la inflamación.
Es un objetivo de la presente divulgación proporcionar proteínas de unión a antígeno específicas para IL-1p que puedan neutralizar la actividad de IL-1p para prevenir o tratar enfermedades asociadas a una producción aumentada de IL-1p.
Hasta ahora, se han aprobado tres productos biológicos que se dirigen a la vía de señalización de IL-1 p para su uso clínico: anakinra (antagonista del receptor de anlL-1), rilonacept (una proteína de fusión que comprende el receptor 1 de IL-1) y canakinumab (un anticuerpo monoclonal).
Además de los tres bloqueantes de IL-1 aprobados mencionados anteriormente, el anticuerpo monoclonal humanizado XOMA-052 (gevokizumab) se encuentra actualmente en desarrollo clínico. Cada molécula presenta mecanismos únicos de acción y muestra diferente reactividad cruzada y perfil farmacológico.
Sumario de la invención
La invención se define en las reivindicaciones adjuntas y cualesquier otros aspectos o realizaciones que se exponen en el presente documento son solamente informativos. Específicamente, la invención se refiere a una proteína de unión a antígeno específica de IL-1B aislada, sus secuencias codificantes, vectores, células hospedadoras y método de producción como se define en las reivindicaciones adjuntas.
Definiciones
Las siguientes palabras y términos utilizados en el presente documento tendrán el significado indicado:
La expresión "proteína de unión a antígeno" como se usa en el presente documento se refiere a anticuerpos, fragmentos de anticuerpos y otras construcciones proteínicas, tales como dominios, que son capaces de unirse a IL-1p^
El término "anticuerpo" como se usa en el presente documento en el sentido más amplio para referirse a moléculas con un dominio similar a inmunoglobulina incluye anticuerpos monoclonales, recombinantes, policlonales, quiméricos, humanizados, biespecíficos, multiespecíficos y heteroconjugados; un dominio variable único, un anticuerpo de dominio, fragmentos de unión a antígeno, fragmentos inmunológicamente eficaces, Fv monocatenario, diacuerpos, Tandabs™, etc. (para un sumario de formatos alternativos de "anticuerpo", véase Holliger y Hudson, Nature Biotechnology, 2005, Vol. 23, N.° 9, 1126-1136).
La frase "dominio variable único" se refiere a un dominio variable de proteína de unión a antígeno (por ejemplo, VH, Vhh, Vl) que se une específicamente a un antígeno o epítopo independientemente de una región o dominio variable diferente.
Un "anticuerpo de dominio" o "dAb" puede considerarse lo mismo que un "dominio variable único" que es capaz de unirse a un antígeno. Un dominio variable único puede ser un dominio variable de anticuerpo humano, pero también incluye dominios variables de anticuerpo únicos de otras especies tales como roedores (por ejemplo, como se desvela
en el documento WO 00/29004), dAbs Vhh de tiburón nodriza y camélidos. Los Vhh de camélidos son polipéptidos de dominio variable único de inmunoglobulina que derivan de especies que incluyen camello, llama, alpaca, dromedario y guanaco, que producen anticuerpos de cadena pesada desprovistos de forma natural de cadenas ligeras. Dichos dominios Vhh pueden humanizarse de acuerdo con técnicas convencionales disponibles en la técnica y dichos dominios se consideran "anticuerpos de dominio". Como se usa en el presente documento, Vh incluye dominios Vhh de camélidos.
Como se usa en el presente documento, el término "dominio" se refiere a una estructura de proteína plegada que tiene una estructura terciaria independiente del resto de la proteína. En general, los dominios son responsables de las propiedades funcionales individuales de las proteínas y, en muchos casos, pueden añadirse, retirarse o transferirse a otras proteínas sin pérdida de función del resto de la proteína y/o del dominio. Un "dominio variable único" es un dominio de polipéptido plegado que comprende secuencias características de dominios variables de anticuerpo. Por tanto, incluye dominios variables de anticuerpo completos y dominios variables modificados, por ejemplo, en los que uno o más bucles han sido reemplazados por secuencias que no son características de los dominios variables de anticuerpo, o dominios variables de anticuerpo que se han truncado o comprenden extensiones N o C terminales, así como fragmentos plegados de dominios variables que conservan al menos la actividad de unión y la especificidad del dominio de longitud completa. Un dominio puede unirse a un antígeno o epítopo independientemente de una región o dominio variable diferente.
Puede proporcionarse un fragmento de unión a antígeno por medio de la disposición de una o más CDR en armazones de proteínas no de anticuerpo, tales como un dominio. El dominio puede ser un anticuerpo de dominio o puede ser un dominio que sea un derivado de un armazón seleccionado entre el grupo que consiste en CTLA-4 (Evibody); lipocalina; moléculas derivadas de la Proteína A tales como el dominio Z de la Proteína A (Affibody, SpA), dominio A (Avimer/Maxibody); proteínas de choque térmico tales como GroEl y GroES; transferrina (trans-cuerpo); proteína de repetición de anquirina (DARPin); aptámero peptídico; dominio de lectina de tipo C (Tetranectina); Y-cristalina humana y ubiquitina humana (afilinas); dominios PDZ; dominios de tipo toxinkunitz de escorpión de inhibidores de proteasa humana; y fibronectina (adnectina); que se ha sometido a ingeniería de proteínas con el fin de obtener la unión a un ligando que no sea su ligando natural.
CTLA-4 (antígeno 4 asociado a linfocitos T citotóxicos) es un receptor de la familia de CD28 expresado principalmente en linfocitos T CD4+. Su dominio extracelular tiene un plegamiento de Ig similar a un dominio variable. Los bucles que corresponden a las CDR de anticuerpos pueden sustituirse por secuencias heterólogas para conferir diferentes propiedades de unión. Las moléculas CTLA-4 diseñadas para tener diferentes especificidades de unión también se conocen como Evibodies. Para más detalles, véase Journal of Immunological Methods 248 (1-2), 31-45 (2001).
Las lipocalinas son una familia de proteínas extracelulares que transportan moléculas hidrófobas pequeñas, tales como esteroides, bilinas, retinoides y lípidos. Tienen una estructura de lámina p rígida con una serie de bucles en el extremo abierto de la estructura cónica que puede diseñarse para unirse a diferentes antígenos diana. Las anticalinas tienen un tamaño de entre 160-180 aminoácidos y derivan de las lipocalinas. Para detalles adicionales, véase Biochim Biophys Acta 1482: 337-350 (2000), documento US7250297B1 y documento US20070224633
Un affibody es un armazón derivado de proteína A de Staphylococcus aureus que puede diseñarse para unirse a un antígeno. El dominio consiste en un haz de tres hélices de aproximadamente 58 aminoácidos. Se han generado bibliotecas mediante aleatorización de restos superficiales. Para detalles adicionales, véase Protein Eng. Des. Sel. 17, 455-462 (2004) y el documento EP1641818A1.
Los avímeros son proteínas multidominio derivadas de la familia de armazón de dominio A. Los dominios nativos de aproximadamente 35 aminoácidos adoptan una estructura unida por disulfuro definida. Se genera diversidad mediante reordenamiento de la variación natural que presenta la familia de dominios A. Para detalles adicionales véase Nature Biotechnology 23(12), 1556 - 1561 (2005) y Expert Opinion on Investigational Drugs 16(6), 909-917 (junio de 2007)
Una transferrina es una glucoproteína monomérica de transporte en suero. Las transferrinas pueden diseñarse para unirse a diferentes antígenos diana mediante inserción de secuencias peptídicas en un bucle superficial permisivo. Los ejemplos de estructuras de transferrina diseñadas incluyen el Trans-body. Para detalles adicionales, véase J. Biol. Chem 274, 24066-24073 (1999).
Las proteínas de repetición de anquirina diseñadas (DARPin) derivan de la anquirina, que es una familia de proteínas que median la unión de proteínas integrales de membrana al citoesqueleto. Una repetición de anquirina única es un motivo de 33 restos que consiste en dos hélices a y una vuelta p. Pueden diseñarse para unirse a diferentes antígenos diana aleatorizando restos la primera hélice a y una vuelta p de cada repetición. Su interfaz de unión puede aumentarse aumentando el número de módulos (un método de maduración de afinidad). Para detalles adicionales, véase J. Mol. Biol. 332, 489-503 (2003), PNAS 100(4), 1700-1705 (2003) y J. Mol. Biol. 369, 1015-1028 (2007) y el documento US20040132028A1.
La fibronectina es un armazón que puede diseñarse para unirse a un antígeno. Las adnectinas consisten en una estructura de la secuencia natural de aminoácidos del 10° dominio de las 15 unidades de repetición de fibronectina
humana de tipo III (FN3). Pueden diseñarse tres bucles en un extremo del sándwich p para permitir que una adnectina reconozca específicamente una diana terapéutica de interés. Para detalles adicionales, véase Protein Eng. Des. Sel.
18, 435-444 (2005), documento US20080139791, documento W02005056764 y documento US6818418B1.
Los aptámeros peptídicos son moléculas de reconocimiento combinatorias que consisten en una proteína de armazón constante, normalmente tiorredoxina (TrxA) que contiene un bucle peptídico variable comprimido insertado en el sitio activo. Para detalles adicionales, véase Expert Opin. Biol. Ther. 5, 783-797 (2005).
Los microbodies derivan de microproteínas de origen natural de 25-50 aminoácidos de longitud que contienen 3-4 puentes de cisteína; los ejemplos de microproteínas incluyen KalataBI y conotoxina y knotinas. Las microproteínas tienen un bucle que puede diseñarse para incluir hasta 25 aminoácidos sin afectar al plegamiento global de la microproteína. Para detalles adicionales de dominios de knotina diseñados, véase el documento W02008098796.
Otros dominios de unión incluyen proteínas que se han utilizado como armazón para diseñar diferentes propiedades de unión a antígeno diana que incluyen Y-cristalina humana y ubiquitina humana (afilinas), dominios de tipo kunitz de inhibidores de proteasa humana, dominios PDZ de la proteína de unión a Ras AF-6, toxinas de escorpión (caribdotoxina), dominio de lectina de tipo C (tetranectinas) que se revisan en el Capítulo 7 - Non-Antibody Scaffolds del Handbook of Therapeutic Antibodies (2007, editado por Stefan Dubel) y Protein Science 15: 14-27 (2006). Los dominios de unión de la presente divulgación podrían derivar de cualquiera de estos dominios proteínicos alternativos.
Un fragmento de unión a antígeno o un fragmento inmunológicamente eficaz puede comprender secuencias variables de cadenas pesadas o ligeras parciales. Los fragmentos tienen al menos 5, 6, 8 o 10 aminoácidos de longitud. Como alternativa, los fragmentos tienen al menos 15, al menos 20, al menos 50, al menos 75 o al menos 100 aminoácidos de longitud.
El término "neutraliza" como se usa en toda la presente memoria descriptiva significa que la actividad biológica de IL-1p se reduce en presencia de una proteína de unión a antígeno como se describe en el presente documento en comparación con la actividad de iL-1 p en ausencia de la proteína de unión a antígeno, in vitro o in vivo. La neutralización puede deberse a uno o más de entre el bloqueo de la unión de IL-1 p a su receptor, la evitación de que IL-1p active su receptor, la regulación negativa de IL-1p o su receptor o la afectación de la funcionalidad efectora.
La reducción o inhibición de la actividad biológica puede ser parcial o total. Una proteína de unión a antígeno neutralizante puede neutralizar la actividad de IL-1p en al menos un 20 %, 30 %, 40 %, 50 %, 55 %, 60 %, 65 %, 70 %, 75 %, 80 %, 82 %, 84 %, 86 %, 88 %, 90 %, 92 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, 99 % o 100 % con respecto a la actividad de IL-1p en ausencia de la proteína de unión a antígeno.
La neutralización puede determinarse o medirse usando uno o más ensayos conocidos por el experto o que se describen en el presente documento. Por ejemplo, la unión de la proteína de unión a antígeno a IL-1 p puede evaluarse en un ELISA sandwich, mediante BIAcore™, FMAT, FORTEbio o ensayos in vitro similares, pero también en ensayos funcionales basados en células.
Las "CDR" se definen como las secuencias de aminoácidos de la región determinante de complementariedad de una proteína de unión a antígeno. Estas son las regiones hipervariables de las cadenas pesadas y ligeras de inmunoglobulina. Hay tres CDR (o regiones CDR) de cadena pesada y tres CDR (o regiones CDR) de cadena ligera en la porción variable de una inmunoglobulina. Por tanto, "CDR", como se usa en el presente documento, se refiere a las tres CDR de cadena pesada, las tres CDR de cadena ligera, todas las CDR de cadena pesada y ligera, o al menos dos CDR.
En toda la presente memoria descriptiva, los restos de aminoácidos en secuencias de dominio variable y secuencias de anticuerpo de longitud completa se numeran de acuerdo con la convención de numeración de Kabat. De forma similar, los términos "CDR", "CDRL1", "CDRL2", "CDRL3", "CDRH1", "CDRH2", "CDRH3" utilizados en los Ejemplos siguen la convención de numeración de Kabat. Para información adicional, véase Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 4a Ed., Departamento de Salud y Servicios Sociales de los Estados Unidos, Institutos Nacionales de Salud (1987).
Será evidente para los expertos en la materia que existen convenciones de numeración alternativas para restos de aminoácidos en secuencias de dominio variable y secuencias de anticuerpo de longitud completa. También existen convenciones de numeración alternativas para secuencias de CDR, por ejemplo, las que se exponen en Chothia et al. (1989) Nature 342: 877-883. La estructura y el plegamiento de proteína del anticuerpo pueden significar que otros restos se consideran parte de la secuencia de c Dr y así lo comprendería un experto.
Otras convenciones de numeración para secuencias de CDR disponibles para un experto incluyen los métodos "AbM" (University of Bath) y "contacto" (University College London). La región de solapamiento mínima que usa al menos dos de los métodos Kabat, Chothia, AbM y contacto puede determinarse para proporcionar la "unidad de unión mínima". La unidad de unión mínima puede ser una sub-porción de una CDR.
La tabla a continuación representa una definición usando cada convención de numeración para cada CDR o unidad de unión. El esquema de numeración de Kabat se usa en la Tabla 1 para numerar la secuencia de aminoácidos del dominio variable. Cabe señalar que algunas de las definiciones de CDR pueden variar dependiendo de la publicación individual utilizada.
Para las secuencias de nucleótidos y aminoácidos, la expresión "idéntica" o "identidad de secuencia" indica el grado de identidad entre dos secuencias de ácido nucleico o dos secuencias de aminoácidos cuando se alinean de forma óptima y se comparan con inserciones o supresiones adecuadas.
El porcentaje de identidad entre dos secuencias es una función del número de posiciones idénticas compartidas por las secuencias (es decir, % de identidad = número de posiciones idénticas/número total de posiciones multiplicado por 100), teniendo en cuenta el número de huecos y la longitud de cada hueco, que es necesario introducir para una alineación óptima de las dos secuencias. La comparación de secuencias y la determinación del porcentaje de identidad entre dos secuencias pueden conseguirse usando un algoritmo matemático, como se describe a continuación.
El porcentaje de identidad entre dos secuencias de nucleótidos puede determinarse usando el programa GAP en el paquete de software GCG, usando una matriz NWSgapdna.CMP y una ponderación de hueco de 40, 50, 60, 70 u 80 y una ponderación de longitud de 1, 2, 3, 4, 5 o 6. El porcentaje de identidad entre dos secuencias de nucleótidos o aminoácidos también puede determinarse usando el algoritmo de E. Meyers y W. Miller (Comput. Appl. Biosci., 4: 11 17 (1988)) que se ha incorporado en el programa ALIGN (versión 2.0), usando una tabla de restos ponderados PAM120, una penalización por longitud de hueco de 12 y una penalización por hueco de 4. Además, el porcentaje de identidad entre dos secuencias de aminoácidos puede determinarse usando el algoritmo de Needleman y Wunsch (J. Mol. Biol. 48: 444-453 (1970)) que se ha incorporado en el programa GAP en el paquete de software GCG, usando una matriz Blossum 62 o una matriz PAM250 y una ponderación por hueco de 16, 14, 12, 10, 8, 6 o 4 y una ponderación por longitud de 1, 2, 3, 4, 5 o 6.
A modo de ejemplo, una secuencia polinucleotídica puede ser idéntica a una secuencia polinucleotídica de referencia como se describe en el presente documento (véase, por ejemplo, la SEQ ID NO: X), que es idéntica al 100 % o puede incluir hasta un determinado número entero de alteraciones de nucleótidos en comparación con la secuencia de referencia, tal como al menos un 50, 60, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 98 o 99 % idéntica. Dichas alteraciones se seleccionan entre al menos una supresión, sustitución, de nucleótidos, incluyendo transición y transversión o inserción, y en donde dichas alteraciones pueden producirse en las posiciones terminales 5' o 3' de la secuencia nucleotídica de referencia o en cualquier lugar entre esas posiciones terminales, intercaladas ya sea individualmente entre los nucleótidos en la secuencia de referencia o en uno o más grupos contiguos dentro de la secuencia de referencia. El número de alteraciones de nucleótidos se determina multiplicando el número total de nucleótidos en una secuencia polinucleotídica de referencia, por el porcentaje numérico del porcentaje de identidad respectivo (dividido por 100) y restando ese producto de dicho número total de nucleótidos en la secuencia polinucleotídica de referencia como se indica a continuación:
nn á Xn -(Xn • y),
en donde nn es el número de alteraciones de nucleótidos, Xn es el número total de nucleótidos en la secuencia polinucleotídica de referencia e y es 0,50 para el 50 %, 0,60 para el 60 %, 0,70 para el 70 %, 0,75 para el 75 %, 0,80 para el 80 %, 0,85 para el 85 %, 0,90 para el 90 %, 0,95 para el 95 %, 0,98 para el 98 %, 0,99 para el 99 % o 1,00 para el 100 %, • es el símbolo para el operador de multiplicación, y en donde cualquier producto no entero de Xn e y se redondea hacia abajo al número entero más cercano antes de restarlo de Xn.
De forma similar, una secuencia polipeptídica puede ser idéntica a una secuencia polipeptídica de referencia, que es un 100 % idéntica, o puede incluir hasta un determinado número entero de alteraciones de aminoácidos en comparación con la secuencia de referencia de manera que el % de identidad sea inferior al 100 %, tal como al menos un 50, 60, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 98 o 99 % idéntica. Dichas alteraciones se seleccionan entre el grupo que consiste en al menos una supresión, sustitución, de aminoácidos, incluyendo una sustitución conservadora o no conservadora,
o inserción, y en donde dichas alteraciones pueden producirse en las posiciones amino o carboxi terminales de la secuencia polipeptídica de referencia o en cualquier lugar entre esas posiciones terminales, intercaladas ya sea individualmente entre los aminoácidos en la secuencia de referencia o en uno o más grupos contiguos dentro de la secuencia de referencia. El número de alteraciones de aminoácidos para un % de identidad determinado se determina multiplicando el número total de aminoácidos en la secuencia polipeptídica codificada por la secuencia polipeptídica de referencia por el porcentaje numérico del porcentaje de identidad respectivo (dividido por 100) y después restando ese producto de dicho número total de aminoácidos en la secuencia polipeptídica de referencia como se indica a continuación:
na< xa -(xa • y),
en donde na es el número de alteraciones de aminoácidos, xa es el número total de aminoácidos en la secuencia polipeptídica de referencia e y es, 0,50 para el 50 %, 0,60 para el 60 %, 0,70 para el 70 %, 0,75 para el 75 %, 0,80 para el 80 %, 0,85 para el 85 %, 0,90 para el 90 %, 0,95 para el 95 %, 0,98 para el 98 %, 0,99 para el 99 % o 1,00 para el 100 %, • es el símbolo para el operador de multiplicación, y en donde cualquier producto no entero de xa e y se redondea hacia abajo al número entero más cercano antes de restarlo de xa. El % de identidad puede determinarse a lo largo de longitud de la secuencia.
La expresión "se une específicamente" como se usa a lo largo de la presente memoria descriptiva con respecto a proteínas de unión a antígeno significa que la proteína de unión a antígeno se une a un epítopo diana en IL-1p con una afinidad superior a la que se obtiene cuando se une a un epítopo no diana. En determinadas realizaciones, la unión específica se refiere a la unión a una diana con una afinidad que es al menos 10, 50, 100, 250, 500 o 1000 veces superior a la afinidad por un epítopo no diana. Por ejemplo, la afinidad de unión puede medirse mediante métodos habituales, por ejemplo, mediante ELISA competitivo o mediante la medición de Kd con BIACORE™, KINEXA™ o PROTEON™.
El término "CI50", como se usa en el presente documento, significa la concentración molar de una sustancia (antagonista) que reduce la eficacia de un agonista de referencia o la actividad constitutiva de una diana biológica en un 50 % de una curva antagonista (Parte superior-Parte inferior) para una sustancia de ensayo particular.
El término "CE50", como se usa en el presente documento, significa la concentración molar de una sustancia (agonista) que induce una respuesta del 50 % del efecto máximo de una curva de dosis-respuesta.
En toda la presente memoria descriptiva, los restos de aminoácidos en secuencias de dominio variable y secuencias de anticuerpo de longitud completa se numeran de acuerdo con la convención de numeración de Kabat. Para información adicional, véase Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 4a Ed., Departamento de Salud y Servicios Sociales de los Estados Unidos, Institutos Nacionales de Salud (1987).
Será evidente para los expertos en la materia que existen convenciones de numeración alternativas para restos de aminoácidos en secuencias de dominio variable y secuencias de anticuerpo de longitud completa. También existen convenciones de numeración alternativas para secuencias de CDR, por ejemplo, las que se exponen en Chothia et al. (1989) Nature 342: 877-883. La estructura y el plegamiento de proteína del anticuerpo pueden significar que otros restos se consideran parte de la secuencia de c Dr y así lo comprendería un experto.
Otras convenciones de numeración para secuencias de CDR disponibles para un experto incluyen los métodos "AbM" (University of Bath) y "contacto" (University College London). La región de solapamiento mínima que usa al menos dos de los métodos Kabat, Chothia, AbM y contacto puede determinarse para proporcionar la "unidad de unión mínima". La unidad de unión mínima puede ser una sub-porción de una CDR.
La expresión "vehículo farmacéuticamente aceptable" tiene por objeto incluir disolventes, medios de dispersión, recubrimientos, agentes antibacterianos y antifúngicos, agentes retardantes de la absorción e isotónicos, y similares. Se conoce bien en la técnica el uso de dichos medios y agentes para sustancias farmacéuticamente activas. Excepto en la medida en que cualquier medio o agente convencional sea incompatible con compuesto, se contempla el uso del mismo en las composiciones terapéuticas y los métodos de tratamiento y profilaxis. También pueden incorporarse compuestos activos complementarios en las presentes composiciones. Es especialmente ventajoso formular las composiciones parenterales en forma de dosificación unitaria para facilitar la administración y la uniformidad de la dosis.
El ácido nucleico, como se usa en el presente documento, significa cualquier molécula de ARN o ADN monocatenaria o bicatenaria, tal como ARNm, ADNc y ADN genómico.
Como se usa en el presente documento, el término "aproximadamente", en el contexto de concentraciones de componentes de las formulaciones, normalmente significa /- el 5 % del valor establecido, más normalmente /- el 4 % del valor establecido, más normalmente /- el 3 % del valor establecido, más normalmente, /- el 2 % del valor establecido, aún más normalmente /- el 1 % del valor establecido e incluso más normalmente /- el 0,5 % del valor establecido.
A lo largo de la presente divulgación, determinadas realizaciones pueden desvelarse en un formato de intervalo. Ha de comprenderse que la descripción en formato de intervalo es meramente por conveniencia y brevedad y no debe interpretarse como una limitación inflexible del alcance de los intervalos desvelados. En consecuencia, debe considerarse que la descripción de un intervalo ha desvelado específicamente todos los subintervalos posibles, así como los valores numéricos individuales dentro de ese intervalo. Por ejemplo, debe considerarse que la descripción de un intervalo tal como de 1 a 6 ha desvelado específicamente subintervalos tales como de 1 a 3, de 1 a 4, de 1 a 5, de 2 a 4, de 2 a 6, de 3 a 6, etc., así como números individuales dentro de ese intervalo, por ejemplo, 1, 2, 3, 4, 5 y 6. Esto se aplica independientemente de la amplitud del intervalo.
Perspectivas de desarrollo adicional
Además de la invención, se proporcionan los siguientes aspectos con el fin de facilitar desarrollos adicionales de proteínas de unión a antígeno específicas para IL-1b. Estos aspectos se excluyen explícitamente del alcance de la invención.
El primero de dichos aspectos prevé una proteína de unión a antígeno específica de IL-1p aislada que comprende una o más unidades de unión seleccionadas entre el grupo que consiste en las siguientes unidades de unión:
(i) una unidad de unión L1 que comprende los restos Kabat 23-35 de la SEQ ID NO: 3 o los restos Kabat 24-33 de la SEQ ID NO: 4, 15 o 16, o una variante de la misma que contenga al menos una sustitución, inserción o supresión de aminoácidos en la unidad de unión L1;
(ii) una unidad de unión L2 que comprende los restos Kabat 51-57 de la SEQ ID NO: 3 o los restos Kabat 49-55 de la SEQ ID NO: 4, 15 o 16, o una variante de la misma que contenga al menos una sustitución, inserción o supresión de aminoácidos en la unidad de unión L2;
(iii) una unidad de unión L3 que comprende los restos Kabat 92-102 de la SEQ ID NO: 3 o los restos Kabat 88-96 de la SEQ ID NO: 4, 15 o 16, o una variante de la misma que contenga al menos una sustitución, inserción o supresión de aminoácidos en la unidad de unión L3;
(iv) una unidad de unión H1 que comprende los restos Kabat 31-35 de la SEQ ID NO: 1 o los restos Kabat 31-35 de la SEQ ID NO: 2 o 14, o una variante de la misma que contenga al menos una sustitución, inserción o supresión de aminoácidos en la unidad de unión H1;
(v) una unidad de unión H2 que comprende los restos Kabat 50-66 de la SEQ ID NO: 1 o los restos Kabat 50-65 de la SEQ ID NO: 2 o 14, o una variante de la misma que contenga al menos una sustitución, inserción o supresión de aminoácidos en la unidad de unión H2; y
(vi) una unidad de unión H3 que comprende los restos Kabat 99-114 de la SEQ ID NO: 1 o los restos Kabat 98 108 de la SEQ ID NO: 2 o 14, o una variante de la misma que contenga al menos una sustitución, inserción o supresión de aminoácidos en la unidad de unión
Como alternativa, la proteína de unión a antígeno específica de IL-1b aislada comprende una cadena pesada y/o una cadena ligera en la que la cadena pesada comprende o consiste en una secuencia de aminoácidos seleccionada entre la SEQ ID NO: 1 o la SEQ ID NO: 2 o 14; y en la que la cadena ligera comprende o consiste en una secuencia de aminoácidos codificada por la secuencia nucleotídica seleccionada entre la SEQ ID NO: 3 o la SEQ ID NO: 4, 15 o 16.
Preferentemente, la proteína de unión a antígeno comprende o consiste en:
(i) una cadena pesada de la SEQ ID NO: 1 y una cadena ligera de la SEQ ID NO: 3; o
(ii) una cadena pesada de la SEQ ID NO: 2 o 14 y una cadena ligera de la SEQ ID NO: 4, 15 o 16.
Pueden seleccionarse los restos Kabat 88-96 de la SEQ ID NO: 4, 15 o 16 entre restos que consisten en el grupo seleccionado entre los aminoácidos 1-9 de la SEQ ID NO: 9, la SEQ ID NO: 10, la SEQ ID No : 11, la SEQ ID NO: 12 o la SEQ ID NO: 13.
Por último, en una alternativa adicional, la proteína de unión a antígeno aislada o fragmento de la misma comprende o consiste en una secuencia de aminoácidos que tiene una identidad desde al menos el 50 %, al menos el 60 % al menos el 70 %, al menos el 80 % o al menos el 90 % con la SEQ ID NO: 1,2, 14, 3, 4, 15 o 16.
El segundo de dichos aspectos proporciona una proteína de unión a antígeno específica de IL-1p aislada que neutraliza IL-1 p en un ensayo de estimulación celular a un valor de CI50 de menos de 20 nM, menos de 15 nM, menos de 10 nM, menos de 5 nM, menos de 3 nM, menos de 1 nM, menos de 0,5 nM o menos de 0,2 nM, o menos de aproximadamente 100 pM, menos de 50 pM, menos de 10 pM, menos de 5 pM o aproximadamente 1 pM.
El tercero de dichos aspectos prevé una proteína de unión a antígeno específica de IL-1p aislada que inhibe la producción de IL-6 inducida por IL-1p en un ensayo de inhibición celular a un valor de CI50 de menos de 20 nM, menos de 15 nM, menos de 10 nM, menos de 5 nM, menos de 4 nM, menos de 3 nM, menos de 1 nM, menos de 0,5 nM o menos de 0,4 nM; o menos de aproximadamente 300 pM, menos de aproximadamente 200 pM, menos de
aproximadamente 100 pM, menos de aproximadamente 50 pM, menos de aproximadamente 10 pM o menos de aproximadamente 5 pM.
El cuarto de dichos aspectos prevé una proteína de unión a antígeno específica de IL-1p aislada que se une a IL-1p con un valor KD de menos de 10 nM, menos de 5 nM, menos de 2 nM, menos de 1 nM, menos de 0,5 nM o menos de 0,1 nM.
En algunos casos, dicha proteína de unión a antígeno se une a la IL-1b humana y reacciona de forma cruzada con la IL-1b murina o de simio.
Por tanto, el quinto de dichos aspectos prevé una proteína de unión a antígeno específica de IL-1 p aislada que neutraliza la IL-1p humana a un valor CI50 de 1 pM a 100 pM; o de 1 pM a 5 nM.
El sexto de estos aspectos prevé una proteína de unión a antígeno específica de IL-1 p aislada que neutraliza la IL-1 p murina a un valor CI50 de 100 pM a 1000 pM o de 100 pM a 15 nM.
El séptimo de dichos aspectos prevé una proteína de unión a antígeno específica de IL-1p aislada en donde dicha proteína de unión tiene una afinidad (KD) con la IL-1p humana de 1 pM a 100 pM.
El octavo de dichos aspectos prevé una proteína de unión a antígeno específica de IL-1p aislada en donde dicha proteína de unión tiene una afinidad (KD) con la IL-1p murina de 5 pM a 200 pM.
Aspectos generales de la divulgación
La siguiente sección proporciona detalles relevantes para reducir la invención a la práctica. La misma información puede usarse con respecto a las vías de desarrollo adicional analizadas en la sección anterior.
A menos que se haga referencia explícita a la materia objeto reivindicada, los elementos de la siguiente divulgación no han de considerarse parte de la invención.
Cuando la proteína de unión a antígeno específica de IL-1b aislada que se describe en el presente documento comprende una cadena pesada y/o una cadena ligera, la cadena pesada puede seleccionarse entre el grupo que consiste en cadenas pesadas a, 6, £, y y m. Preferentemente la cadena pesada es y.
La cadena ligera se selecciona preferentemente entre las cadenas ligeras A o k. Preferentemente la cadena ligera es A.
Preferentemente, la proteína de unión a antígeno aislada que se desvela en el presente documento es un anticuerpo. Más preferentemente, el anticuerpo que se desvela es monoclonal, policlonal, biespecífico o heteroconjugado.
Preferentemente, el anticuerpo puede ser totalmente humano.
Preferentemente, la proteína de unión a antígeno aislada que se desvela en el presente documento es un anticuerpo seleccionado entre el subtipo lgG1, lgG2, lgG4 o lgG3.
Preferentemente, la proteína de unión a antígeno aislada que se desvela en el presente documento es un dominio variable único, un anticuerpo de dominio, un fragmento de unión a antígeno, un fragmento inmunológicamente eficaz, un Fv monocatenario, un diacuerpo o un anticuerpo biespecífico tetravalente (Tandab). Más preferentemente, el fragmento de unión a antígeno puede comprender una disposición de una o más CDR en armazones de proteínas no de anticuerpo, tales como un dominio.
Preferentemente, la proteína de unión a antígeno aislada que se desvela en el presente documento es recombinante. Preferentemente, la proteína de unión a antígeno aislada que se desvela en el presente documento comprende un agente seleccionado entre el grupo que consiste en una molécula de inmunoadhesión, un agente de formación de imágenes, un agente terapéutico y un agente citotóxico.
Las moléculas de inmunoadhesión pueden comprender una o más de entre la superfamilia de inmunoglobulina (lg) de moléculas de adhesión celular (CAM), integrinas, cadherinas y selectinas.
En concreto, el agente de formación de imágenes que se desvela en el presente documento puede seleccionarse entre el grupo que consiste en un radiomarcador, una enzima, un marcador fluorescente, un marcador luminiscente, un marcador bioluminiscente, un marcador magnético y biotina.
Los ejemplos adecuados de radiomarcadores incluyen, pero sin limitación, 32-fósforo o tritio en forma de timidina tritiada.
Los ejemplos de marcadores fluorescentes adecuados incluyen cianina, fluoresceína, rodamina, flúor Alexa, flúor Dylight, Colorantes ATTO y Colorantes BODIPY.
Los ejemplos de marcadores luminiscentes adecuados incluyen marcadores quimioluminiscentes que incluyen, pero sin limitación, luminol y sondas de rutenio, y marcadores bioluminiscentes que incluyen, pero sin limitación, luciferina.
Preferentemente, el agente es un agente terapéutico o citotóxico. El agente terapéutico o citotóxico puede seleccionarse entre el grupo que consiste en un antimetabolito, un agente alquilante, un antibiótico, un factor de crecimiento, una citocina, un agente antiangiogénico, un agente antimitótico, una antraciclina, toxina y un agente apoptótico.
En el presente documento se proporciona la proteína de unión a antígeno aislada desvelada anteriormente para su uso en el tratamiento del cáncer, una enfermedad inflamatoria o una enfermedad autoinmunitaria seleccionada entre el grupo que consiste en artritis, enfermedad inflamatoria intestinal, enfermedad de Crohn, artritis reumatoide, gota, diabetes, uveítis, síndromes periódicos asociados a criopirina y acné inflamatorio.
En el presente documento también se proporciona la proteína de unión a antígeno aislada desvelada anteriormente para su uso en la preparación de un medicamento para el tratamiento del cáncer, una enfermedad inflamatoria o una enfermedad autoinmunitaria seleccionada entre el grupo que consiste en artritis, enfermedad inflamatoria intestinal, enfermedad de Crohn, artritis reumatoide, gota, diabetes, uveítis, síndromes periódicos asociados a criopirina y acné inflamatorio.
Los síndromes periódicos asociados a la criopirina pueden seleccionarse entre el síndrome autoinflamatorio familiar por frío (AAFF), el síndrome de Muckle-Wells (SMW) y la enfermedad inflamatoria multisistémica de inicio neonatal (EIMIN, también denominada síndrome neurológico cutáneo y articular infantil crónico o NCAIC).
Además, se proporciona una composición que comprende la proteína de unión a antígeno como se describe en el presente documento y un vehículo farmacéuticamente aceptable.
La proteína de unión a antígeno que se desvela en el presente documento puede administrarse mediante inyección. En el caso de soluciones inyectables, el vehículo puede ser un disolvente o medio de dispersión que contenga, por ejemplo, agua, etanol, poliol (por ejemplo, glicerol, propilenglicol y polietilenglicol líquido y similares), mezclas adecuadas de los mismos y aceites vegetales. La fluidez adecuada puede mantenerse, por ejemplo, mediante el uso de un recubrimiento tal como lecitina, mediante el mantenimiento del tamaño de partícula necesario en el caso de una dispersión y mediante el uso de tensioactivos. Puede conseguirse la prevención de la acción de microorganismos mediante la inclusión de diversos agentes antibacterianos y/o antifúngicos. Los agentes adecuados son bien conocidos por los expertos en la materia e incluyen, por ejemplo, parabenos, clorobutanol, fenol, alcohol bencílico, ácido ascórbico, timerosal y similares. En muchos casos, puede ser preferible incluir agentes isotónicos, por ejemplo, azúcares, polialcoholes tales como manitol, sorbitol y cloruro de sodio en la composición. Puede lograrse la absorción prolongada de las composiciones inyectables incluyendo en la composición un agente que retrase la absorción, por ejemplo, monoestearato de aluminio y gelatina.
Pueden prepararse soluciones inyectables estériles mediante la incorporación del análogo en la cantidad necesaria en un disolvente adecuado con uno o una combinación de ingredientes enumerados anteriormente, según sea necesario, seguida de esterilización por filtración. En general, se preparan dispersiones mediante la incorporación del análogo en un vehículo estéril que contiene un medio de dispersión básico y los otros ingredientes necesarios de entre los enumerados anteriormente.
Preferentemente, la composición farmacéutica puede incluir adicionalmente un tampón adecuado para minimizar la hidrólisis de ácido. Los agentes tamponantes adecuados son bien conocidos por los expertos en la materia e incluyen, pero sin limitación, fosfatos, citratos, carbonatos y mezclas de los mismos.
Pueden realizarse administraciones únicas o múltiples de las presentes composiciones farmacéuticas. Un experto en la materia podría, mediante experimentación habitual, determinar niveles de dosis eficaces y atóxicos del presente compuesto y/o composición y un patrón de administración que sería adecuado para tratar las enfermedades y/o infecciones a las que los compuestos y las composiciones son aplicables.
Además, será evidente para un experto en la materia que el curso óptimo de tratamiento, tal como el número de dosis del presente compuesto o composición administrado por día durante un número definido de días, puede determinarse usando el curso convencional de ensayos de determinación de tratamiento.
En general, una dosis eficaz cada 24 horas puede estar en el intervalo de aproximadamente 0,0001 mg a aproximadamente 1000 mg por kg de peso corporal; adecuadamente, de aproximadamente 0,001 mg a aproximadamente 750 mg por kg de peso corporal; de aproximadamente 0,01 mg a aproximadamente 500 mg por kg de peso corporal; de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 500 mg por kg de peso corporal; de
aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 250 mg por kg de peso corporal; o de aproximadamente 1,0 mg a aproximadamente 250 mg por kg de peso corporal. Más adecuadamente, una dosis eficaz cada 24 horas puede estar en el intervalo de aproximadamente 1,0 mg a aproximadamente 200 mg por kg de peso corporal; de aproximadamente 1,0 mg a aproximadamente 100 mg por kg de peso corporal; de aproximadamente 1,0 mg a aproximadamente 50 mg por kg de peso corporal; de aproximadamente 1,0 mg a aproximadamente 25 mg por kg de peso corporal; de aproximadamente 5,0 mg a aproximadamente 50 mg por kg de peso corporal; de aproximadamente 5,0 mg a aproximadamente 20 mg por kg de peso corporal; o de aproximadamente 5,0 mg a aproximadamente 15 mg por kg de peso corporal.
Como alternativa, una dosis eficaz puede ser de hasta aproximadamente 500 mg/m2 Por ejemplo, en general, se espera que una dosis eficaz esté en el intervalo de aproximadamente 25 a aproximadamente 500 mg/m2, de aproximadamente 25 a aproximadamente 350 mg/m2, de aproximadamente 25 a aproximadamente 300 mg/m2, de aproximadamente 25 a aproximadamente 250 mg/m2, de aproximadamente 50 a aproximadamente 250 mg/m2 y de aproximadamente 75 a aproximadamente 150 mg/m2.
La composición que se desvela en el presente documento puede comprender adicionalmente uno o más agentes terapéuticos como se describen en el presente documento.
También se proporciona una estirpe celular aislada que es capaz de producir la proteína de unión a antígeno como se describe en el presente documento.
Los ejemplos de estirpes celulares capaces de producir la proteína de unión a antígeno incluyen HEK293 y CHO. También se proporciona una molécula de ácido nucleico aislada que comprende o que consiste en secuencias que codifican proteínas de unión a antígeno que se desvelan en el presente documento, y fragmentos de las mismas, así como un vector que comprende dicho ácido nucleico.
El vector puede ser un plásmido o un virus. El experto en la materia apreciará que existen muchos vectores adecuados y están incluidos en el alcance de la presente divulgación.
Preferentemente, el vector comprende una secuencia de control de expresión unida operativamente a dicha molécula de ácido nucleico.
La secuencia de control de la expresión puede ser un fragmento de ácido nucleico que promueve, potencia o reprime la expresión de un gen o proteína de interés.
También se proporciona una célula hospedadora que comprende la molécula de ácido nucleico como se ha definido anteriormente.
La célula hospedadora puede ser una estirpe celular cultivada o una célula ex vivo. Preferentemente, la célula hospedadora comprende el vector como se describe en el presente documento.
También se proporciona un método para producir una proteína de unión a antígeno como se describe en el presente documento que comprende cultivar la célula hospedadora como se describe en el presente documento en condiciones adecuadas y recuperar dicha proteína a partir de la misma.
Se proporcionan usos médicos de la proteína de unión a antígeno aislada como se describe en el presente documento: son para su uso en un método de tratamiento del cáncer, una enfermedad inflamatoria o una enfermedad autoinmunitaria seleccionada entre el grupo que consiste en artritis, enfermedad inflamatoria intestinal, enfermedad de Crohn, artritis reumatoide, gota, diabetes, uveítis, síndromes periódicos asociados a criopirina y acné inflamatorio. Breve descripción de los dibujos
La Figura 1 muestra la neutralización de IL-1p mediante clones de Fab 1H y 2H. Se midió la neutralización de IL-1p basándose en la densidad óptica (DO) leída a 655 nm y la concentración de Fab. Los resultados muestran que los clones 1H y 2H bloquean la activación de IL-1p con una CI50 de 1,31 y 0,21, respectivamente.
La Figura 2 muestra los resultados de secuenciación de las cadenas pesadas y ligeras de los clones de Fab 1H y 2H.
La Figura 3 muestra la neutralización de IL-1p humana mediante 1H y 2H de lgG1. Se midió la neutralización de IL-1p basándose en la densidad óptica (DO) leída a 655 nm y la concentración de IgG. Los resultados muestran que los clones 1H y 2H neutralizan la IL-1p humana con una potencia (CE50) de 2,6 nM y 0,17 nM, respectivamente.
La Figura 4 muestra la neutralización de IL-1 p de ratón mediante 1H y 2H de lgG1. Se midió la neutralización de
IL-1p basándose en la densidad óptica (DO) leída a 655 nm y la concentración de IgG. Los resultados muestran que los clones 1H y 2H neutralizaron la IL-1p de ratón con una potencia (CE50) de 11,5 nM y 1,5 nM, respectivamente.
La Figura 5 muestra que 1H y 2H de IgG inhiben la producción de IL-6 inducida por IL-1p humana en células MRC5. La potencia neutralizante de IL-1p humana se determinó midiendo el nivel de IL-6 producida en presencia de 1H y 2H IgG. Se estimularon células MRC5 mediante 4 pM de IL-1p junto con diversas concentraciones de 1H y 2H de IgG. Los resultados muestran que 1H y 2H de IgG tienen una potencia de inhibición (CE50) de 3,92 nM y 0,35 nM, respectivamente.
La Figura 6 muestra que 2H de IgG inhibe la producción de IL-6 inducida por IL-1p humana in vivo en ratones Balb/c. La potencia neutralizante de 2H de IgG se evaluó inyectando ratones por vía intraperitoneal con 4 o 20 mg/kg de 2H o 400 ml de PBS e IL-1p humana o PBS al día siguiente. Se recogió la sangre y se midió la IL-6 mediante ELISA. Los resultados muestran que 2H de IgG fue capaz de inhibir la producción de IL-6 inducida por IL-1p humana en ratones de una manera dependiente de la dosis.
La Figura 7 muestra que 2H de IgG es específica para la IL-1p y no reconoce la IL-1 a. La especificidad de unión de 2H de IgG se determinó basándose en la densidad óptica (DO) a 460 nm y la concentración de 2H de IgG. Los resultados muestran que aunque la 2H de IgG se unió a la IL-1p tanto humana como de ratón de una manera dependiente de la dosis, no pudo unirse a la IL-1a humana o de ratón.
Las Figuras 8 y 9 muestran la potencia de neutralización de 5 clones de IgG obtenidos a partir de maduración de la afinidad de 2H de IgG. La potencia de neutralización se determinó basándose en la concentración de IL-6 secretada frente a la concentración de cada uno de los clones de IgG. Los resultados muestran que todos los clones de IgG maduros presentaron una potencia de neutralización alta para IL-1p tanto de ratón como humana. Los resultados también muestran que los clones maduros fueron de 2 a 8 veces más eficaces para neutralizar IL-1p de ratón (Figura 8) y de 3 a 23 veces más eficaces para neutralizar IL-1p humana (Figura 9) que la 2H de IgG no madura.
La Figura 10 muestra la secuencia de P2D7KK. P2D7KK derivó de P2D7 cambiando un resto arginina y un resto serina por restos lisina (en negrita y subrayados) en las posiciones 75 y 81 de la región variable de la cadena pesada.
La Figura 11 muestra puntuaciones artríticas en ratones DBA después de la inducción de artritis con anticuerpos anti-colágeno. Se inyectó a los ratones isotipo 5 mg/kg, P2D7KK 5 mg/kg o P2D7KK 15 mg/kg. Los resultados muestran que los ratones tratados con P2D7KK tuvieron puntuaciones artríticas mucho más bajas que los ratones a los que se les inyectó el control de isotipo.
La Figura 12 muestra una hinchazón representativa de la pata delantera (parte superior) y trasera (parte inferior) después de la inducción de artritis y la administración de control de isotipo (izquierda), P2D7KK 5 mg/kg (centro) o P2D7KK 15 mg/kg (derecha). Los resultados muestran que P2D7KK contenía claramente inflamación ya que los ratones tratados con P2D7KK no experimentaron hinchazón de las patas en comparación con los ratones a los que se les inyectó el control de isotipo.
La Figura 13 muestra un análisis histológico representativo de articulaciones de las patas delanteras (parte superior) y traseras (parte inferior) de ratones a los que se les inyectó el anticuerpo de isotipo (izquierda) o tratados con 5 mg/kg (centro) o 15 mg/kg (derecha) de P2D7KK. Los resultados muestran que en ratones tratados con P2D7KK, las articulaciones permanecen virtualmente libres de infiltración de células inmunitarias, mientras que las articulaciones de ratones a los que se les inyectó isotipo fueron el sitio de una reacción altamente inflamatoria.
La Figura 14 muestra la infiltración de células inmunitarias en la cavidad peritoneal después de la inyección de PBS (1) o cristales de urato monosódico seguida de la administración de PBS (2), Anakinra 30 mg/kg (3), anticuerpo humano de isotipo 15 mg/kg (4), P2D7KK 5 mg/kg (5) o P2D7KK 15 mg/kg (6). Se muestran media p e.t.m. Ensayo t no apareado: * p <0,05; ** p <0,01; *** p <0,001; n.s. no significativo.
La Figura 15 muestra el crecimiento tumoral entre los días 7 y 17 después de la inoculación de células de carcinoma en ratones tratados con P2D7KK o con el control de isotipo. Se muestran las medias © DT, ensayo ANOVA de 2 vías (comparación múltiple de Turkey) * = p <0,05.
La Figura 16 muestra números absolutos de células en ganglios linfáticos con drenaje auricular de ratón. El gráfico 1 representa ratones no infectados con P. acnes; el gráfico 4 representa ratones infectados con P. acnes y a los que se les inyectó PBS; el gráfico 3 representa ratones infectados con P. acnes y a los que se les inyectó control de isotipo; el gráfico 2 representa ratones infectados con P. acnes y tratados con P2D7KK.
La Figura 17 muestra el número de linfocitos en la epidermis de ratones no infectados con P. acnes (primera barra desde la izquierda de cada grupo), infectados con P. acnes y a los que se les inyectó PBS (segunda barra desde
la izquierda de cada grupo), infectados con P. acnes y a los que se les inyectó control de isotipo (tercera barra desde la izquierda de cada grupo) o infectados con P. acnes y tratados con P2D7KK (cuarta barra desde la izquierda de cada grupo), los valores p se refieren a un ensayo t no apareado.
Ejemplos
Ejemplo 1 - Aislamiento de los anticuerpos anti-IL-1p humana y caracterización de la capacidad de neutralización de IL-ip en ensayos basados en células
Se aislaron anticuerpos anti-IL-lp de una biblioteca de presentación de fagos de anticuerpos humanos (biblioteca Humanyx HX-02) a través de selección in vitro. Se identificaron inicialmente anticuerpos monoclonales específicos de IL-1p en el formato de Fab mediante ELISA. Estos Fab positivos para ELISA se añadieron a células IL-1p HEK-Blue™ (InvivoGen, EE.UU.), que es una estirpe celular HEK293 diseñada que sobreexpresa el receptor de IL-1 humano recombinante.
La unión de IL-1 p a su receptor IL-1R en la superficie de las células IL-1p HEK-Blue™ desencadena una cascada de señalización que conduce a la activación de NF-kB y la producción posterior de fosfatasa alcalina secretada (SEAP). La detección de SEAP en el sobrenadante de células IL-1p HEK-Blue™ puede evaluarse fácilmente usando QUANTI-Blue™, un sustrato de SEAP colorimétrico. Las células HEK-Blue son sensibles a la IL-1B tanto humana como de ratón, pero son insensibles a la IL-1a o el TNF-a humanos.
De los 22 Fab positivos para ELISA se descubrió que dos clones, 1H y 2H, bloquean la activación de las células HEK-Blue IL-1 p mediante estimulación de IL-1p con CI50 (concentración que inhibe el 50 % de la actividad de IL-1p) de 1,31 y 0,21 nM, respectivamente (Fig. 1). Los resultados de secuenciación revelaron que ambos clones poseían cadena ligera A. Se muestran secuencias de las cadenas pesadas y ligeras de clones 1H y 2H en la Fig. 2.
Ejemplo 2 - Neutralización de IL-1p por 1H y 2H de lgG1 en el ensayo de células HEK-Blue
Los dos clones de Fab 1H y 2H se convirtieron en IgG de longitud completa amplificando las cadenas pesadas y ligeras de cada clon por separado mediante PCR y clonando en el vector de expresión de células de mamífero. Los plásmidos resultantes, con el subtipo de lgG1 humana, se usaron posteriormente para la expresión de anticuerpos de longitud completa mediante transfección transitoria en células de mamífero. Los anticuerpos se purificaron mediante columna de proteína G.
IL-18 humana
La potencia neutralizante del clon de IgG 1H y 2H sobre IL-1p humana se sometió a ensayo usando células HEK-Blue como se ha descrito anteriormente. Las células se estimularon con IL-1B humana 4 pM junto con diversas concentraciones del anticuerpo. La curva dosis-respuesta se ajustó mediante la ecuación de regresión no lineal sigmoidea (pendiente variable) a partir de la cual se calcula la CE50 (la concentración eficaz semimáxima). En este ensayo, los clones 1H y 2H neutralizaron la IL-1p humana con una potencia (CE50) de 2,6 nM y 0,17 nM, respectivamente (Fig. 3).
IL-1 p de ratón
La potencia neutralizante del clon de IgG 1H y 2H sobre IL-1p de ratón se examinó usando células HEK-Blue como se ha descrito anteriormente. Sin embargo, las células se estimularon con IL-1p de ratón junto con diversas concentraciones del anticuerpo. En este ensayo, los clones 1H y 2H neutralizaron la IL-1 p de ratón con una potencia (CE50) de 11,5 nM y 1,5 nM, respectivamente (Fig. 4).
Ejemplo 3 - Inhibición de la producción de IL-6 inducida por IL-1p humana por 1H y 2H de IgG
In vitro
La inhibición de la producción de IL-6 inducida por IL-1p humana por 1H y 2H de IgG se examinó in vitro usando la estirpe celular de fibroblastos humanos, MRC5. La estimulación de la célula de fibroblastos de pulmón humano, MRC5, por IL-1p da como resultado la producción de IL-6.
La potencia neutralizante de IL-1p humana de 1H y 2H de IgG se examinó midiendo el nivel de IL-6 producida en presencia de los anticuerpos. Las células se estimularon con IL-1p humana junto con diversas concentraciones de los anticuerpos, y la IL-6 se cuantificó mediante ELISA. En este ensayo, 1H y 2H de IgG mostraron una potencia de inhibición (CE50) de 3,92 y 0,35 nM, respectivamente (Fig. 5).
In vivo
La inhibición de la producción de IL-6 inducida por IL-1p humana por 1H y 2H de IgG se examinó in vivo en ratones
Balb/C. A la administración de IL-1p humana en ratones Balb/c le sigue una secreción rápida de IL-6 de ratón que es detectable en el suero mediante ELISA.
Para evaluar la potencia neutralizante de 2H de IgG, a los ratones se les inyectó por vía intraperitoneal 4 o 20 mg/kg de 2H o con 400 ml de PBS. Al día siguiente, los ratones recibieron IL-1p humana o PBS (control negativo). Dos horas después de la inyección de IL-1p, se recogió sangre y se midió la IL-6 en el suero mediante ELISA.
Los resultados mostraron que 2H era capaz de inhibir la producción de IL-6 inducida por IL-1B humana en ratones de una manera dependiente de la dosis (Fig. 6).
Ejemplo 4 - Especificidad de 2H de IgG
La especificidad de unión de 2H de IgG se examinó frente a los dos subtipos de IL-1, a y p, mediante ELISA directo. Los resultados muestran que aunque la 2H de IgG se unió a la IL-1p tanto humana como de ratón de una manera dependiente de la dosis, no pudo unirse a la IL-1a humana o de ratón en el intervalo de concentración sometido a ensayo (Fig. 7). Por tanto, 2H de IgG mostró una fuerte selectividad para IL-1p sobre IL-1 a. En consecuencia, 2H de IgG es específica para IL-1 p y no reconoce IL-1a.
Ejemplo 5 - Maduración de la afinidad de 2H de IgG
Se maduró la afinidad de 2H de IgG usando el método de presentación en fagos y se seleccionaron 5 clones maduros con mutaciones en la región CDR3 de la cadena ligera después del ensayo de neutralización de IL-1p en células MRC5.
Todos los clones de IgG maduros presentaron una alta potencia de neutralización para la IL-1p tanto de ratón como humana en este ensayo. Los clones maduros fueron de 2 a 8 veces más eficaces para neutralizar IL-1p de ratón y de 3 a 23 veces más eficaces para neutralizar IL-1p humana que la 2H de IgG inicial, con una potencia que varía entre CE50 de 158,4 a 623,2 pM para la citocina de ratón (Fig. 8) y CE50 de 6,5 a 45,3 pM para su homólogo humano (Fig. 9)
Los clones maduros (excepto P1E8) se sometieron a ensayo para determinar su afinidad hacia IL-1p de ratón y humana usando el bioanalizador ProteOn (BioRad, Hercules, EE.UU.).
Los resultados mostraron que las afinidades por IL-1p de ratón fueron de 3 a 13 veces mayores para los clones maduros en comparación con 2H de IgG y de 8 a 25 veces mayores con respecto a la IL-1p humana (Tabla 1).
Tabla 1: Afinidades de clones maduros hacia IL-16 humana y de ratón en comparación con 2H de IgG.
Secuencias de clones con afinidad madura
Los clones maduros se secuenciaron y las secuencias de aminoácidos de su región CDR3 de la cadena ligera se presentan en la Tabla 2.
Tabla 2: Secuencias de aminoácidos de la región CD3 de la cadena ligera de cada uno de los clones maduros. Las secuencias de nucleótidos correspondientes de las regiones CDR3 de la cadena ligera después de la traducción inversa se presentan a continuación:
>2H
(secuencia 2H original) (secuencias que codifican los mismos aminoácidos)
>P2D8
GAAGCTTGGGCTGATACTTATGAAGTT G C C C C C G C A A A A G G G G
Ejemplo 6 - Eficacia in vivo de P2D7KK
Derivación de P2D7KK
De los 5 clones con afinidad madura, se seleccionó P2D7 y se diseñado para que fuera un anticuerpo similar a la estirpe germinal, denominada P2D7KK. P2D7KK derivó de P2D7 cambiando un resto una arginina y un resto serina por restos lisina en las posiciones 75 y 81 de la región variable de la cadena pesada (Fig. 10).
Después, se sometió a ensayo la eficacia in vivo preliminar de P2D7KK en 4 modelos animales diferentes de enfermedad (1) AIAC: artritis inducida por anticuerpos de colágeno, un modelo de artritis reumatoide, (2) UMS: inflamación inducida por cristales de urato monosódico, un modelo que simula la gota, (3) CCR: crecimiento de carcinoma de células renales, para evaluar el uso de anticuerpo contra IL-1p en el microentorno tumoral para inhibir el crecimiento tumoral y (4) P. acnes: un modelo de acné inflamatorio usando Propionibacterium acnes.
AIAC - artritis inducida por anticuerpos de colágeno
Se indujo artritis en ratones Balb/c mediante inyección intraperitoneal de 1,5 mg/ratón de cóctel de anticuerpos anti colágeno el día 0, seguido de inyección de 25 mg de lipopolisacárido (LPS) el día 3.
Un grupo de 8 ratones recibieron 5 mg/kg de P2D7KK por vía intraperitoneal los días 2, 5 y 9. Otro grupo recibió 15 mg/kg de P2D7KK y un grupo de control recibió 5 mg/kg del control de isotipo siguiendo el mismo esquema. Los resultados mostraron que los ratones tratados con P2D7KK tienen puntuaciones artríticas mucho más bajas que los ratones a los que se les inyectó el control de isotipo (Fig. 11). En consecuencia, la administración de P2D7KK inhibió el desarrollo de artritis.
Los resultados también mostraron que P2D7KK contenía claramente inflamación ya que los ratones tratados con P2D7KK no experimentaron hinchazón de las patas a diferencia de los ratones a los que se les inyectó un anticuerpo de isotipo (Fig. 12).
Los análisis histológicos de las patas traseras mostraron que, en ratones tratados con P2D7KK, las articulaciones permanecen virtualmente libres de infiltración de células inmunitarias, mientras que las articulaciones de ratones a los que se les inyectó isotipo fueron el sitio de una reacción altamente inflamatoria (Fig. 13).
UMS - inflamación activada por cristales de urato monosódico
A seis grupos de ratones C57/BL6 por vía intraperitoneal se les inyectaron 3 mg de urato monosódico en 200 ml de PBS, o PBS solo para el grupo de control. Después, a los ratones se les inyectó:
• P2D7KK 5 mg/kg en 300 ml de PBS (n = 5)
• P2D7KK 15 mg/kg en 300 ml de PBS (n = 4)
• Anticuerpo de isotipo 15 mg/kg en 300 ml de PBS (n = 5)
• Anakinra 30 mg/kg en 300 ml de PBS (n = 5)
• 300 ml de PBS (n = 3, grupo de control de vehículo)
• 300 ml de PBS (n = 5, sin grupo de control de UMS)
Seis horas después de la administración de anticuerpos, se sacrificaron los ratones y se lavó el peritoneo con 5 ml de medio completo frío. Se contaron los neutrófilos y los monocitos en el fluido de lavado mediante citometría de flujo. Los resultados mostraron que la inyección de UMS en el peritoneo induce el reclutamiento de neutrófilos y monocitos. Al igual que Anakinra, P2D7KK fue capaz de reducir significativamente la infiltración de neutrófilos (tanto a 15 como
Claims (12)
1. Una proteína de unión a antígeno específica de IL-1p aislada que comprende las siguientes CDR:
- una región variable de cadena pesada que incluye las CDR H1 = DYYWS, H2 = EIDHSGSTNYNPSLKS, H3 = ASPSSGWTLDY; y
- una región variable de cadena ligera que incluye las CDR L1 = GDKLGDKFAF, L2 = LDNKRPS, L3 = YAWADTYEV.
2. La proteína de unión a antígeno aislada de la reivindicación 1, que comprende una cadena pesada y/o una cadena ligera, en donde la cadena pesada comprende QVQLQQWGAGLLKPSETLSLTCAVYGGSFSDYYWSWIRQPPGKGLEWIGEIDHSGSTNYNPSL KSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARASPSSGWTLDYWGQGTL, y la cadena ligera comprende
QSVLTQPP5VSVSPGQTASITC5GDKLGDKFAFWYQQKPGQSPVLVIYLDNKRPSGIPERFSGSN
SGNTATLTISGTQALDEADYYCYAWADTYEVFGGGTK.
3. La proteína de unión a antígeno aislada de una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde dicha proteína es un anticuerpo; opcionalmente en donde dicho anticuerpo es monoclonal, policlonal, biespecífico, multiespecífico o heteroconjugado; opcionalmente en donde dicho anticuerpo es totalmente humano; opcionalmente en donde dicho anticuerpo es del subtipo lgG1, del subtipo lgG2, del subtipo lgG4 o del subtipo lgG3; opcionalmente en donde dicha proteína es un dominio variable único, un anticuerpo de dominio, un fragmento de unión a antígeno, un fragmento inmunológicamente eficaz, un Fv monocatenario, un diacuerpo o un anticuerpo biespecífico tetravalente (Tandab); opcionalmente
en donde dicho fragmento comprende una cadena pesada que comprende la secuencia QVQLQQWGAGLLKPSETLSLTCAVYGGSFSDYYWSWIRQPPGKGLEWIGEIDHSGSTNYNPSL KSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARASPSSGWTLDYWGQGTL y una cadena ligera que comprende la secuencia
QSVLTQPPSVSVSPGQTASITCSGDKLGDKFAFWYQQKPGQSPVLVIYLDNKRPSGIPERF5G5N
SGNTATLTISGTQALDEADYYCYAWADTYEVFGGGTK.
4. La proteína de unión a antígeno aislada de cualquier reivindicación anterior, en donde la proteína es recombinante; opcionalmente
en donde dicha proteína de unión comprende adicionalmente un agente seleccionado entre el grupo que consiste en una molécula de inmunoadhesión, un agente de formación de imágenes, un agente terapéutico y un agente citotóxico; opcionalmente
en donde dicho agente es un agente de formación de imágenes seleccionado entre el grupo que consiste en un radiomarcador, una enzima, un marcador fluorescente, un marcador luminiscente, un marcador bioluminiscente, un marcador magnético y biotina; opcionalmente
en donde dicho agente es un agente terapéutico o citotóxico seleccionado entre el grupo que consiste en un antimetabolito, un agente alquilante, un antibiótico, un factor de crecimiento, una citocina, un agente antiangiogénico, un agente antimitótico, una antraciclina, toxina y un agente apoptótico.
5. La proteína de unión a antígeno aislada de una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, para su uso en el tratamiento del cáncer, una enfermedad inflamatoria o una enfermedad autoinmunitaria seleccionada entre el grupo que consiste en artritis, enfermedad inflamatoria intestinal, enfermedad de Crohn, artritis reumatoide, gota, diabetes, uveítis, síndromes periódicos asociados a criopirina y acné inflamatorio.
6. Una composición que comprende la proteína de unión a antígeno aislada de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 y un vehículo farmacéuticamente aceptable.
7. La composición de la reivindicación 6, que comprende adicionalmente uno o más agentes terapéuticos.
8. Un ácido nucleico aislado que codifica la proteína de unión a antígeno aislada de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en donde el ácido nucleico comprende una primera secuencia que codifica la región variable de la cadena pesada y una segunda secuencia que codifica la región variable de la cadena ligera de dicha proteína de unión a antígeno.
9. Un conjunto de dos ácidos nucleicos aislados que codifican juntos la proteína de unión a antígeno aislada de la reivindicación 1, en donde:
- el primer ácido nucleico comprende una secuencia que codifica la región variable de la cadena pesada de dicha proteína de unión a antígeno, y
- el segundo ácido nucleico comprende una secuencia que codifica la región variable de la cadena ligera de dicha proteína de unión a antígeno.
10. Un vector que comprende el ácido nucleico aislado de la reivindicación 8 o el conjunto de ácidos nucleicos de la reivindicación 9.
11. Una célula hospedadora que comprende el ácido nucleico aislado de la reivindicación 8 o el conjunto de ácidos nucleicos de la reivindicación 9, o el vector de la reivindicación 10.
12. Un método para producir la proteína de unión a antígeno aislada de una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, que comprende cultivar la célula hospedadora de acuerdo con la reivindicación 11 en condiciones adecuadas y recuperar dicha proteína de la misma.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SG2012010070 | 2012-02-13 | ||
| PCT/SG2013/000057 WO2013122544A2 (en) | 2012-02-13 | 2013-02-13 | IL-1β NEUTRALIZING HUMAN MONOCLONAL ANTIBODIES |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2798110T3 true ES2798110T3 (es) | 2020-12-09 |
Family
ID=54261183
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES13748708T Active ES2798110T3 (es) | 2012-02-13 | 2013-02-13 | Anticuerpos monoclonales humanos neutralizantes de IL-beta |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| US (5) | US10167335B2 (es) |
| EP (2) | EP3736289A1 (es) |
| JP (1) | JP6383665B2 (es) |
| CN (1) | CN105431452B (es) |
| CY (1) | CY1123519T1 (es) |
| DK (1) | DK2814843T3 (es) |
| ES (1) | ES2798110T3 (es) |
| HR (1) | HRP20200964T1 (es) |
| HU (1) | HUE049860T2 (es) |
| LT (1) | LT2814843T (es) |
| PL (1) | PL2814843T3 (es) |
| PT (1) | PT2814843T (es) |
| RS (1) | RS60583B1 (es) |
| SG (2) | SG11201404850SA (es) |
| SI (1) | SI2814843T1 (es) |
| SM (1) | SMT202000321T1 (es) |
| WO (1) | WO2013122544A2 (es) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| PL2814843T3 (pl) | 2012-02-13 | 2020-11-16 | Agency For Science, Technology And Research | Ludzkie przeciwciała monoklonalne neutralizujące IL-β |
| CN106928354B (zh) * | 2017-04-25 | 2020-07-17 | 长春金赛药业有限责任公司 | 抗IL-1β单克隆抗体及其应用 |
| JP2020524694A (ja) * | 2017-06-22 | 2020-08-20 | ノバルティス アーゲー | がんの処置における使用のためのＩＬ−１β結合性抗体 |
| CN115028723B (zh) * | 2019-03-07 | 2023-08-29 | 瑞阳(苏州)生物科技有限公司 | 人IL-1β蛋白结合分子及其编码基因和应用 |
| KR102087743B1 (ko) * | 2019-06-10 | 2020-03-12 | 을지대학교 산학협력단 | IL-1beta에 특이적으로 결합하는 항체 및 그의 용도 |
| UY40097A (es) * | 2022-01-07 | 2023-07-14 | Johnson & Johnson Entpr Innovation Inc | Materiales y métodos de proteínas de unión a il-1b |
| WO2025006936A2 (en) * | 2023-06-29 | 2025-01-02 | University Of Maine System Board Of Trustees | Methods and compositions for fire-fighting |
| WO2025147459A1 (en) | 2024-01-04 | 2025-07-10 | Nano Precision Medical, Inc. | Stabilization of peptides and proteins in implantable devices and formulations |
Family Cites Families (30)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5859205A (en) * | 1989-12-21 | 1999-01-12 | Celltech Limited | Humanised antibodies |
| DK0769054T3 (da) | 1994-07-05 | 2000-11-13 | Steeno Res Group As | Immunmodulatorer |
| DE19742706B4 (de) | 1997-09-26 | 2013-07-25 | Pieris Proteolab Ag | Lipocalinmuteine |
| IL127127A0 (en) | 1998-11-18 | 1999-09-22 | Peptor Ltd | Small functional units of antibody heavy chain variable regions |
| US6818418B1 (en) | 1998-12-10 | 2004-11-16 | Compound Therapeutics, Inc. | Protein scaffolds for antibody mimics and other binding proteins |
| US7115396B2 (en) | 1998-12-10 | 2006-10-03 | Compound Therapeutics, Inc. | Protein scaffolds for antibody mimics and other binding proteins |
| US20030007972A1 (en) | 1999-02-24 | 2003-01-09 | Edward Tobinick | Cytokine antagonists and other biologics for the treatment of bone metastases |
| GB0001448D0 (en) | 2000-01-21 | 2000-03-08 | Novartis Ag | Organic compounds |
| GB0020685D0 (en) * | 2000-08-22 | 2000-10-11 | Novartis Ag | Organic compounds |
| EP1332209B1 (en) | 2000-09-08 | 2009-11-11 | Universität Zürich | Collections of repeat proteins comprising repeat modules |
| MXPA05007853A (es) | 2003-01-24 | 2006-02-10 | Applied Molecular Evolution | Antagonistas de il-1 beta humana. |
| GB0303337D0 (en) | 2003-02-13 | 2003-03-19 | Celltech R&D Ltd | Biological products |
| ES2319426T3 (es) | 2003-07-04 | 2009-05-07 | Affibody Ab | Polipeptidos que presentan afinidad de union por her-2. |
| AU2003275958A1 (en) | 2003-08-25 | 2005-03-10 | Pieris Proteolab Ag | Muteins of tear lipocalin |
| AU2004296376B2 (en) | 2003-12-05 | 2010-03-04 | Bristol-Myers Squibb Company | Inhibitors of type 2 vascular endothelial growth factor receptors |
| EP2361933A3 (en) * | 2005-01-26 | 2012-05-02 | Amgen Fremont Inc. | Antibodies against interleukin-1 beta |
| ES2439709T3 (es) * | 2005-06-21 | 2014-01-24 | Xoma (Us) Llc | Anticuerpos y fragmentos de los mismos que se unen a la IL-1beta |
| TWI395754B (zh) * | 2006-04-24 | 2013-05-11 | Amgen Inc | 人類化之ｃ-ｋｉｔ抗體 |
| EP1958957A1 (en) | 2007-02-16 | 2008-08-20 | NascaCell Technologies AG | Polypeptide comprising a knottin protein moiety |
| AU2010306681A1 (en) | 2009-10-15 | 2012-04-19 | Abbvie Inc. | IL-1 binding proteins |
| WO2012121679A1 (en) | 2011-03-09 | 2012-09-13 | Agency For Science, Technology And Research | Method of modulating phenotype of a renal cell cancer-associated monocyte or macrophage |
| TWI622597B (zh) | 2011-03-28 | 2018-05-01 | 賽諾菲公司 | 具有交叉結合區定向之雙重可變區類抗體結合蛋白 |
| PL2814843T3 (pl) | 2012-02-13 | 2020-11-16 | Agency For Science, Technology And Research | Ludzkie przeciwciała monoklonalne neutralizujące IL-β |
| WO2016008851A1 (en) | 2014-07-14 | 2016-01-21 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Anti-il-1b antibodies |
| US10517933B2 (en) | 2015-05-12 | 2019-12-31 | Drexel University | Method of treating androgen receptor negative prostate tumors and their metastases |
| EP4378957A3 (en) | 2015-07-29 | 2024-08-07 | Novartis AG | Combination therapies comprising antibody molecules to pd-1 |
| US10397741B2 (en) | 2016-11-11 | 2019-08-27 | Shoreline Tracking Systems, LLC | System and method for service tracking |
| WO2018235056A1 (en) | 2017-06-22 | 2018-12-27 | Novartis Ag | Il-1beta binding antibodies for use in treating cancer |
| JP2020524694A (ja) | 2017-06-22 | 2020-08-20 | ノバルティス アーゲー | がんの処置における使用のためのＩＬ−１β結合性抗体 |
| WO2020039401A1 (en) | 2018-08-24 | 2020-02-27 | Novartis Ag | Treatment comprising il-1βeta binding antibodies and combinations thereof |
-
2013
- 2013-02-13 PL PL13748708T patent/PL2814843T3/pl unknown
- 2013-02-13 EP EP20163420.1A patent/EP3736289A1/en not_active Withdrawn
- 2013-02-13 SG SG11201404850SA patent/SG11201404850SA/en unknown
- 2013-02-13 SG SG10201708562VA patent/SG10201708562VA/en unknown
- 2013-02-13 SI SI201331741T patent/SI2814843T1/sl unknown
- 2013-02-13 PT PT137487088T patent/PT2814843T/pt unknown
- 2013-02-13 LT LTEP13748708.8T patent/LT2814843T/lt unknown
- 2013-02-13 RS RS20200680A patent/RS60583B1/sr unknown
- 2013-02-13 DK DK13748708.8T patent/DK2814843T3/da active
- 2013-02-13 SM SM20200321T patent/SMT202000321T1/it unknown
- 2013-02-13 EP EP13748708.8A patent/EP2814843B1/en active Active
- 2013-02-13 CN CN201380019370.3A patent/CN105431452B/zh active Active
- 2013-02-13 US US14/378,442 patent/US10167335B2/en active Active
- 2013-02-13 WO PCT/SG2013/000057 patent/WO2013122544A2/en not_active Ceased
- 2013-02-13 HU HUE13748708A patent/HUE049860T2/hu unknown
- 2013-02-13 HR HRP20200964TT patent/HRP20200964T1/hr unknown
- 2013-02-13 JP JP2014557603A patent/JP6383665B2/ja active Active
- 2013-02-13 ES ES13748708T patent/ES2798110T3/es active Active
-
2018
- 2018-11-15 US US16/192,537 patent/US10919962B2/en active Active
-
2020
- 2020-06-18 CY CY20201100562T patent/CY1123519T1/el unknown
- 2020-10-01 US US17/061,194 patent/US11780913B2/en active Active
-
2021
- 2021-01-15 US US17/150,691 patent/US11702471B2/en active Active
- 2021-01-15 US US17/150,689 patent/US11912761B2/en active Active
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2798110T3 (es) | Anticuerpos monoclonales humanos neutralizantes de IL-beta | |
| ES2881602T3 (es) | Conjugados de anticuerpo-fynómero | |
| ES2566602T3 (es) | Anticuerpos anti-ErbB3 | |
| ES2813432T3 (es) | Proteínas y péptidos modificados | |
| ES2894852T3 (es) | Anticuerpos anti-NGF caninizados y métodos de los mismos | |
| ES2903412T3 (es) | Anticuerpos anti-IL-22R | |
| ES2923909T3 (es) | Proteínas específicas para BAFF y B7RP1 y usos de las mismas | |
| EP3145544B1 (en) | Ang2 antibodies | |
| AU2020407853A1 (en) | Antibodies to canine interleukin-4 receptor alpha | |
| US20250340661A1 (en) | Anti cd40 antibody, antigen binding fragment and medical use thereof | |
| IT201800000534A1 (it) | Procedimenti per la promozione della crescita cellulare degli isolotti pancreatici. | |
| EP4393506A1 (en) | Pharmaceutical composition of anti-il4r antibody and use thereof | |
| KR20130133274A (ko) | Tgf-알파 및 에피레굴린에 결합하는 항체 | |
| KR20240049304A (ko) | 융합 단백질을 함유하는 약학적 조성물 | |
| HK40041071A (en) | Il-beta neutralizing human monoclonal antibodies | |
| ES2887850T3 (es) | Composición farmacéutica para tratar la enfermedad de Crohn | |
| CN114591428B (zh) | 抗Dsg1抗体及其应用 | |
| IT201800000535A1 (it) | Procedimenti per la cura del cancro. | |
| CN111787980B (zh) | 非酒精性脂肪性肝炎的抗huTNFR1疗法 |