ES2692619T3 - Bioconjugados antitumorales de ácido hialurónico o sus derivados obtenidos por conjugación química indirecta - Google Patents

Abstract

Conjugados químicos farmacéuticos de ácido hialurónico y/o sus derivados obtenidos a través de una unión indirecta entre el polisacárido y un fármaco con una acción antitumoral, a través de un espaciador molecular que forma un enlace éster con el grupo carboxílico del HA y/o su derivado, con la condición que dicho espaciador no sea una hidracida o un polipéptido, el fármaco es doxorrubicina; dichos derivados de ácido hialurónico se seleccionan de HA salificado con bases orgánicas y/o inorgánicas que tienen un peso molecular de 50-730 KDa o un alto peso molecular de 750-1 230 KDa y el espaciador se selecciona de ácido bromopropiónico o ácido bromobutírico.

Description

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DESCRIPCION

Bioconjugados antitumorales de acido hialuronico o sus derivados obtenidos por conjugacion qmmica indirecta

El desarrollo de un tumor, su crecimieno y progresion hacia metastasis primaria y secundaria son procesos biologicos altamente complejos que requieren una organizacion secuencial de eventos celulares (organo-selectivos) coordinados entre sf

La diseminacion de celulas tumorales que conduce a la formacion de una metastasis se produce como resultado de su desprendimiento del sitio de crecimiento primario seguido por su penetracion al torrente circulatorio y/o al sistema linfatico.

En los ultimos anos, el progresivo conocimiento de los procesos vitales que causan el inicio, desarrollo, diseminacion e implantacion de un tumor y su metastasis, no solo ofrece a los investigadores la posibilidad de estudiar, sintetizar y/o experimentar nuevas moleculas qmmicas como nuevos agentes antitumorales si no tambien facilita el estudio y perfeccionamiento de nuevas terapias de tratamiento que superan los problemas que se vinculan a la toxicidad de los farmacos antineoplasicos y, sobre todo, un entendimiento de los mecanismos qrnmicos-biologicos que causan resistencia al farmaco anterior.

Uno de los problemas principales que se vincula al tratamiento de tumores es de hecho la posible "resistencia" del tumor al tratamiento farmacologico despues de una respuesta positiva inicial.

Estas "resistencias" se asocian con variaciones biologicas/bioqrnmicas en el funcionamiento de la celula tumoral, como, por ejemplo:

• alteraciones en la transportacion celular del farmaco;

• cambios en la afinidad con respecto a este por parte de un posible inhibidor metabolico;

• aumento sustancial en la capacidad de la propia celula de inactivar el farmaco.

Los experimentos cientfficos recientemente publicados (Misra y otros, The Journal of Biological Chemistry, 2003, 278(28):25285-25288) demuestran como el pre/co-tratamiento in vitro de celulas tumorales resistentes a algun farmaco quimioterapeutico con oligomeros de acido hialuronico que tienen un peso molecular muy bajo, reestablecieron la sensibilidad inicial de la celula al farmaco. Sin embargo, los datos experimentales obtenidos hasta el momento, no aclaran completamente como/por que la sensibilidad a la quimioterapia se reestablece, aunque se ha observado que estos oligomeros son capaces de interferir con varios eventos moleculares dentro de la celula responsables de la adquisicion de resistencia al farmaco y portanto del crecimiento y difusion del tumor.

La accion farmacologica del oligomero anterior se hace posible porque, como se une al receptor CD-44 (espedficamente de acido hialuronico), logra interferir negativamente con el enlace receptor-HA nativo, una interaccion que es responsable de la coordinacion de numerosas funciones celulares y, sobre todo, de la celula tumoral.

A traves de su union (y subsecuente internalizacion) con su receptor presente en la membrana celular, el HA participa de hecho en la activacion de muchos eventos que son de importancia fundamental para la vida celular como, por ejemplo, la regulacion de la adhesion/los procesos de crecimiento y migracion celular, este entra al mecanismo quimiotactico durante los procesos inflamatorios, desempena un papel principal en los procesos de cicatrizacion y, como se menciono anteriormente, en la migracion de las celulas tumorales para la formacion de metastasis.

De hecho, muchos tumores solidos muestran altas cantidades de HA que consecuentemente puede facilitar la invasion de otros tejidos y organos por parte de las celulas tumorales.

Las formas tumorales como, por ejemplo, carcinomas, melanomas, linfomas, tumores de mama, tumores de pulmon y de colon-recto, sobreexpresanel recptor transmembrana CD-44: en estas lmeas celulares, los experimentos hechos con anticuerpos anti-receptor (que en consecuencia "bloquean" el receptor impiden su union al Ha nativo) muestran la capacidad efectiva de inhibir el crecimiento y la metastasis tumoral, esto demuestra como la "interferencia" de la union hA con su receptor causa una alteracion de numerosos eventos de importancia fundamental para la vida celular y muestran, en consecuencia, la participacion real del HA en el desarrollo de la masa tumoral.

Se conoce que algunos farmacos antitumorales que se han usado durante anos en el campo oncologico con resultados clmicos satisfactorios se han modificado qmmicamente para:

• superar el problema de su toxicidad intrinseca con el objetivo de efectuar una nueva estrategia de tratamiento que consiste en conducir directamente el farmaco antineoplasico a la celula tumoral uniendolo al HA ya que, como se describe completamente arriba, muchos fenotipos tumorales sobreexpresan el receptor espedfico CD-44 para HA en sus superficies celulares (esto es un mecanismo de direccionamiento activo que incrementa la eficacia celular del farmaco al reducir su toxicidad sistemica). La union e internalizacion del polfmero tambien portan el farmaco al interior de la celula tumoral lo que aumenta su eficacia;

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• aumenta su solubilidad (se ha demostrado que la union de farmacos liposolubles a moleculas fuertemente hidrofflicas tal como, por ejemplo, HA, aumenta considerablemente la solubilidad del propio farmaco en el sistema circulatorio).

La solubilidad de los farmacos quimioterapeuticos en el torrente circulatorio representa, de hecho, la condicion esencial para su eficacia farmacologica, algunos farmacos, sin embargo, que muestran ser extremedamente activos en diversos tipos de tumores como, por ejemplo, camptotecinas y sus derivados irinotecan y topotecan, paclitaxel y alcaloides, los derivados de Vinca, como un resultado de su alta insolubilidad tienen problemas relacionados con la administracion intravenosa (y, para hormonas y anti-hormonas tambien intramuscular) lo que puede limitar y restringir su aplicacion clmica.

Por las razones anteriores (solubilidad y toxicidad) se han sintetizados nuevos farmacos quimioterapeuticos, que se crearon de la union qmmica (directa o indirecta por medio de un espaciador que consite en aminoacidos o peptidos con una cadena aminoaddica corta) o simple asociacion de algun farmaco antineoplasico que contiene un anillo lactonico (como, por ejemplo, doxorrubicina, paclitaxel, vincristina, vinblastina y derivados de camptotecinas) con acido hialuronico (HA) (patente de Estados Unidos num. 6,291,671).

Otros conjugados comprenden farmacos antineoplasicos como paclitaxel y camptotecinas unidos a un polfmero que consiste en acido poliglutamico que se asocia posiblemente con HA (patente de Estados Unidos num. 5,977,163).

Tambien se conocen otros nuevos tipos de farmacos quimioterapeuticos representados por la doxorrubicina antitumoral que se enlaza covalentemente tanto al HA (que se modifica qmmicamente con dihidracida) como a un vehmulo como el polfmero hidroxi-propilmetacrilamida (solicitud de patente internacional num. WO 02/090390).

Tambien se conocen nuevos farmacos vehmulos que consisten en polisacaridos que se conjugan qmmicamene a cadenas de aminoacidos que a su vez se enlazan covalentemente a farmacos antineoplasicos como la doxorrubicina (patente de Estados Unidos num. 5,688,931). Ademas, por la misma razon, se han perfeccionado otros sistemas de liberacion, que consisten, por ejemplo, en la encapsulacion de la doxorrubicina en liposomas que contienen derivados lipfdicos de HA (Peer D. y otros, Neoplasia, 2004, 6(4) :343-353; Eliaz R.E. y otros, Cancer Research, 2001, 61:2592-2601).

Se conoce, por ejemplo, que para superar los problemas de los derivados de camptotecinas, alternar su perfil farmacocineticoy reducir su toxicidad, aumentando su eficacia terapeutica, se ha conjugado irinotecan con el polfmero/vehnculo carboxi-metil-dextrano por medio de un espaciador que se representa por un peptido triglicina (Satoshi Okuno y otros, Cancer Research, 2000, 60:2988-2995; patente de Estados Unidos num. 5,892,043).

El profarmaco resultante ha demostrado ser activo en su eficacia terapeutica, ya que permanece en la circulacion durante un penodo prolongado detiempo, lo que aumenta su acumulacion en la masa tumoral, lo que reduce al mismotiempo su toxicidad sistemica; para muchos de los conjugados que se describieron anteriormente, sin embargo, todavfa no se dispone de datos experimentales definitivos, que documenten su eficacia con respecto al farmaco no conjugado.

Ademas, CERA C. y otros en el artmulo "Anthracycline antibiotics supported on water-soluble polysaccharides: synthesis and physicochemical characterization" (INT. JOURN.OF BIOL. MACROMOLECULES, ELSEVIER BV, NL, vol. 10, no. 2, (19880401), paginas 66 - 74,) describe conjugados de acido hialuronico con antibioticos antitumorales a traves de un enlace amida con el grupo carboxflico del Ha. Ademas el documento num.EP0506976 describe conjugados de acido hialuronico a doxorrubicina a traves del espaciador acido £-aminocaproico, que forma un enlace amida con el grupo carboxflico de HA.

Tambien se conoce el derivado de paclitaxel covalentemente unido al HA que se deriva previamente con hidracida ( patente de Estados Unidos num. 5,874,417), o unido directamente al HA o indirectamente mediante un espaciador de naturaleza variable capaz de formar diferentes tipos de enlaces qmmicos que aumentan la solubilidad y en consecuencia la eficacia del farmaco (solicitud de patente num. EP 1560854).

La presente invencion describe y reivindica nuevos conjugados de HA que se obtienen a partir de la union indirecta entre el polisacarido y los farmacos quimioterapeuticos solubles o parcialmente solubles como la doxorrubicina, para superar los problemas que se vinculan con su solubilidad (si la presenta), su toxicidad y, sobre todo, para reestablecer y aumentar la eficacia terapeutica del farmaco en las celulas tumorales que adquieren resistencia farmacologica al propio farmaco. El estado de la tecnica representado por los derivados que se describieron anteriormente se supera en consecuencia en la presente descripcion, ya que el solicitante es capaz de demostrar la superioridad farmacologica de los nuevos conjugados, objetos de la presente invencion, gracias a la capacidad citotoxica extremadamente alta de estos derivados hacia las celulas neoplasicas.

Esta nueva eficacia farmacologica permite la aplicacion en farmacologfa clmica de terapias quimioterapeuticas innovadoras, para el tratamiento de tumores primarios y/o secundarios que ya no responden a ningun tratamiento medico despues de la formacion de Resistencia a Multiples Farmacos (MDR) que generalmente arriesga la posibilidad de un tratamiento efectivo para el paciente y en consecuencia, en ultimo analisis, reduce drasticamente su esperanza de vida.

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Al resolver/superar la MDR, los nuevos derivados, objetos de la presente invencion, cambian el pronostico final del paciente, en consecuencia permite la solucion/reduccion de la patolog^a tumoral.

Descripcion detallada de la invencion

La presente invencion describe y reividica un nuevo grupo de conjugados/derivados y su proceso de preparacion, que consiste en acido hialuronico (HA) (y/o sus derivados) y farmacos antitumorales, que se conjugan indirectamente por medio de un puente molecular que se llama "espaciador".

Los conjugados de la presente invencion son conjugados qmmico-farmaceuticos de acido hialuronico y/o sus derivados que se obtienen a traves de la union indirecta entre el polisacarido y un farmaco con accion antitumoral, mediante un espaciador molecular que forma un enlace ester con el grupo carboxflico del HA y/o su derivado, con la condicion de que dicho espaciador no sea una hidracida o un polipeptido, siendo el farmaco doxorrubicina; dichos derivados de acido hialuronico se seleccionan de HA salificado con bases organicas y/o inorganicas que tienen peso molecular de 50-730 KDa o un alto peso molecular de 750-1 230 KDa y el espaciador se selecciona de acido bromoproponico o acido bromobutmco.

El HA (y/o uno de sus derivados) y el farmaco se conjugan por tanto indirectamente mediante uno o mas enlaces covalentes de tipo ester que involucra parcial o totalmente los grupos carboxflicos del polisacarido y una funcion qmmica (por ejemplo un grupo hidroxilo, un carboxilo, un amino, etc.) que pertenece al espaciador que a su vez se enlaza al farmaco antitumoral que se selecciono, como se describe en detalle a continuacion.

Los derivados que pueden obtenerse de acuerdo con la presente invencion tienen diferentes propiedades ffsico-qmmicas que pueden modularse a traves de la seleccion del tipo de enlace y el grado de sustiticion, a fin de mejorar las caractensticas del farmaco quimioterapeutico inicial, como:

• solubilidad,

• caractensticas mecanicas y reologicas,

• resistencia a degradacion hidrolttica,

lo que hace al nuevo conjugado mas eficiente en su accion citotoxica, un derivado que tendra un nuevo mecanismo de accion que supera asf la resistencia farmacologica adquirida al propio farmaco por la celula tumoral (como se describio anteriormente).

Como se conoce, muchos farmacos quimioterapeuticos antitumorales tienen una solubilidad limitada, si no inexistente, en agua o soluciones salinas; esto significa que para su administracion, se debe recurrir a solventes organicos y aceites que, a pesar de llevar el famaco a la solucion, tienen una toxicidad intnnseca con efectos secundarios que requiere intervenciones con medicamentos antes de la administracion del producto.

En algunos casos, para el farmaco quimioterapeutico Irinotecan, la forma activa (SN38) se modifica incluso qmmicamente (profarmaco) para hacerlo soluble y promover la liberacion de su metabolito que es activo despues de la administracion intravenosa. Esto sin embargo causa una baja disponibilidad del metabolito SN38 en el sitio diana por tanto se requiere la administracion de dosis citotoxicas altas con la amplificacion consiguiente de los efectos secundarios no deseados.

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La literatura internacional (Mathijssen RH y otros, Clin Cancer Res, 2001,7 :2182-2194) indica que la actividad antitumoral de SN38 es de 100 a 1 000 veces mayor con respecto a su profarmaco comercial; en consecuencia la posibilidad de conjugar SN38 con acido hialuronico o uno de sus derivados permite obtener compuestos con una eficacia incrementada y, gracias a la necesidad de dosis de administracion mas bajas, menores efectos secundarios que se vinculan con la dispersion del farmaco en areas no afectadas por la neoplasia. La conjugacion de los farmacos quimioterapeuticos antitumorales con HA tambien permite que el principio activo se "direccione" hacia su diana, y en consecuencia hacia el tejido neoplasico. Portanto se hace enfasis en un mecanismo de direccionamiento activo entre el conjugado y la celula neoplasica que aumenta la concentracion local del farmaco cerca del area neoplasica y en consecuencia la eficacia. De esta forma, ademas, reduce la distribucion del derivado en tejidos sanos, se garantiza una mayor tolerabilidad al producto con respecto al farmaco libre.

Una segunda ventaja fundamental que se deriva de la presente invencion es la posibilidad, principalmente gracias a la presencia del HA modificado qmmicamente, de transformar tecnologicamente el conjugado en un biomaterial tridimensional (para aplicarse localmente) que se procese de diversas formas como, por ejemplo, hidrogel, nano- o microesferas o fibras a su vez hiladas como productos tejidos o no tejidos; en este caso la matriz de polisacarido que se modifica qmmicamente esta en contacto cercano con la masa tumoral, actua como un sistema de liberacion controlada del farmaco en el sitio de aplicacion y por tanto favorece una mayor eficacia por parte del propio farmaco. Una vez que se ejerce la accion antineoplasica, el derivado se degrada de forma natural y segura por el organismo, liberando completamente el principio activo antitumoral y el acido hialuronico. Los productos que se generan por la invencion, ya sean en forma de composiciones farmaceuticas clasicas o biomateriales degradables, se caracterizan por lo tanto por una mayor tolerabilidad con respecto al principio activo no modificado y una mayor actividad farmacologica, en algunos casos incluso por varios ordenes de magnitud con respecto al que expresa el principio activo que los forma; ambos efectos pueden atribuirse a la afinidad espedfica del acido hialuronico hacia los receptores como CD44 presentes en las celulas tumorales. Estos efectos se resaltan cuando el farmaco conjugado se administra en forma de un material tridimensional, en contacto directo con la neoplosia. La combinacion de estas caractenstcas es tal que los derivados/conjugados de la presente invencion superan distintivamente lo que esta disponible en el estado de la tecnica en la terapia local o sistemica de varios tipos de neoplasia y de diferentes ongenes, que tambien se convierten resitentes a las terapias quimioterapeuticas tradicionales.

El acido hialuronico que se usa en la presente invencion tiene un peso molecular que vana de 400 a 3 000 000 Da, preferentemente de 5 000 a 1 000 000 Da, y aun con mayor preferencia de 30 000 a 500 000 Da; puede ser de un origen extractivo, fermentativo o biosintetico. El enlace covalente con el espaciador involucra el grupo carboxflico del acido D- glucuronico de la unidad repetitiva del poffmero, en un porcentaje que vana de 1 a 100% (grado de sustitucion), lo que forma un enlace ester o amida con el grupo funcional de la molecula espaciadora que se selecciono la cual en consecuencua actua como una conexion entre el acido hialuronico y el farmaco quimioterapeutico.

El agente espaciador se selecciona de acido bromopropionico y acido bromobuffrico. El grado de sustitucion vana preferentemente desde 1 a 50% y aun con mas preferencia desde 1 a 25%; para la conjugacion con doxorrubicina una sustitucion de 3 a 15% es preferible.

Los derivados de HA que pueden usarse en los nuevos conjugados, objetos de la presente invencion, se enumeran a continuacion:

1. El HA salificado con bases organicas y/o inorganicas que tienen un peso peso molecular de 50-730KDa (EP0138572 B1) o un alto peso molecular de 750-1 230 KDa, (EP 535200 B1).

Los farmacos que se usan en la reaccion de conjugacion con HA pertenecen a la categona siguiente:

• antibioticos: espedficamente doxorrubicina.

El farmaco y el acido hialuronico (y/o uno de sus derivados) se enlazan indirectamente por medio de un espaciador a traves de la formacion de enlaces esteres con los procedimientos siguientes:

1. un grupo funcional del espaciador adecuadamente seleccionado (como, por ejemplo, un grupo carboxilo, un grupo amina, un haluro, etc.), que tambien contiene un segundo grupo (llamado "grupo saliente") capaz de reaccionar con la funcion carboxilo del HA (por ejemplo, un haluro: bromo, yodo o cloro) reacciona con un grupo funcional que pertenece a la molecula antitumoral representado, por ejemplo, por un hidroxilo, una amina, un carboxilo o un mercaptano.

La reaccion puede requerir posiblemente la activacion de una de las funciones involucradas por medio de un agente activador (por ejemplo, la activacion de un grupo carboxilo por medio de carbodiimidas). En una segunda fase, por contacto directo con una sal de tetraalquilamonio (preferentemente tetrabutilamonio) de HA en un ambiente anhidro, el compuesto que consiste en el farmaco modificado reacciona dando lugar a una sustitucion nucleofflica del grupo saliente (por ejemplo, bromuro) en el carboxilo del HA, lo que causa la formacion de un enlace ester entre el HA y el espaciador;

2. el grupo carboxilo del acido hialuronico o uno de sus derivados se enlaza por la union nucleofflica a un espaciador adecuado que se enlaza subsecuentemente a una funcion de la molecula antitumoral (en todas las formas conocidas para un experto en el campo);

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3. el grupo carboxilo del HA o uno de sus derivados se activa con un agente activador, por ejemplo una carbodiimida, y se hace reaccionar con una funcion hidroxilo del espaciador adecuadamente seleccionado, previa o subsecuentemente enlazado al farmaco (en todas las formas conocidas para un experto en el campo).

Las aplicaciones oncologicas que se relacionan con el uso de los conjugados que consisten en el acido hialuronico (y/o uno de sus derivados) y el principio activo antitumoral se relacionan estrechamente con la respuesta de la neoplasia al farmaco conjugado. De acuerdo con los usos previstos, los bioconjugados pueden por lotanto administrate por via oral, intravenosa, intraarterial, intratecal, intramuscular, subcutanea, intraperitoneal, intraarticular, topica, transdermica, loco- regional, o en una combinacion de estas (se reivindican por tanto ambos procedimientos de administracion local y sistemico). Las neoplasias involucradas en el tratamiento pueden ser, por ejemplo, tumores del pancreas, mama, cololon- recto, pulmon y sistema respiratorio en su totalidad, cabeza-cuello, tngado, estomago, testfculos, ovario, endometrio, prostata, vejiga, cerebro, leucemia, linfomas, melanoma, sarcoma de Kaposi, osteosarcoma, neuroblastoma y cancer de piel.

A continuacion, se proporcionan algunos ejemplos de preparacion de bioconjugados entre acido hialuronico y/o sus derivados y farmacos quimioterapeuticos con una actividad antitumoral.

Ejemplo 1: Preparacion de un derivado ester de acido hialuronico con un peso molecular de 200 kDa y doxorrubicina con un grado de sustitucion en el carboxilo de aproximadamente 10%

325 mg de clorhidrato de doxorrubicina se disuelven en 50 ml de NMP, despues de anadir 0,3 ml de Et3N, 420 mg de 1- (3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (EDC) y 280 mg de acido 4-bromobutmco se anaden subsecuentemente a la solucion. El desarrollo de la solucion se monitorea por medio de cromatograffa TLC (fase estacionaria de sflice con indicador de fluorescencia y eluyente de diclorometano-metanol 80:20). El producto se purifica por cromotograffa en una columna usando cloroformo: metanol 99:1 como eluyente.

El producto intermedio asf obtenido se seca a temperatura ambiente bajo alto vado. Se disuelven 0,75 g de sal de tetrabutilamonio del acido hialuronico (HATBA) en 40 ml de N-metil-2-pirrolidona (NMP) a temperatura ambiente. Se anade el producto intermedio a la solucion y se deja reaccionar toda la mezcla a temperatura ambiente. Despues de 7 dfas de reaccion la solucion se diluye con 5 ml de agua y 5 ml de cloruro de sodio saturado. Toda la mezcla se deja en agitacion durante 1 hora para permitir el intercambio del sodio con el ion TBA. El etanol se anade subsecuentemente gota a gota y el producto filamentoso obtenido se disuleve en agua, se dializa y, al final, se liofiliza.

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   Reivindicaciones

   1. Conjugados qmmicos farmaceuticos de acido hialuronico y/o sus derivados obtenidos a traves de una union indirecta entre el polisacarido y un farmaco con una accion antitumoral, a traves de un espaciador molecular que forma un enlace ester con el grupo carboxflico del HA y/o su derivado, con la condicion que dicho espaciador no sea una hidracida o un polipeptido, el farmaco es doxorrubicina; dichos derivados de acido hialuronico se seleccionan de HA salificado con bases organicas y/o inorganicas que tienen un peso molecular de 50-730 KDa o un alto peso molecular de 750-1 230 KDa y el espaciador se selecciona de acido bromopropionico o acido bromobuffrico.
2. 2. Los conjugados qmmico-farmaceuticos de acuerdo con la reivindicacion 1, en donde el grado de sustitucion en el carboxilo del acido hialuronico y/o uno de sus derivados vana de 1 a 100%.
3. 3. Los conjugados qmmico-farmaceuticos de acuerdo con la reivindicacion 1, en donde el grado de sustitucion en el carboxilo del acido hialuronico del espaciador enlazado a la doxorrubicina vana de 1 a 20%.
4. 4. Los conjugados qmmico-farmaceuticos de acuerdo con la reivindicacion 1, en donde el acido hialuronico tiene un peso molecular que vana de 400 a 3x106 Da.
5. 5. Los compuestos qmmico-farmaceuticos de acuerdo con la reivindicacion 4, en donde el acido hialuronico preferentemente tiene un peso molecular que vana de 5 000 a 1x106 Da.
6. 6. Los compuestos qmmico-farmaceuticos de acuerdo con la reivindicacion 5, en donde el acido hialuronico preferentemente tiene un peso molecular que vana de 30 000 a 0,5x106 Da.
7. 7. Composiciones farmaceuticas que tienen uno o mas de los conjugados qmmico-farmaceuticos de acuerdo con las reivindicaciones anteriores, como principio activo.
8. 8. Las composiciones farmaceuticas de acuerdo con la reivindicacion 7 para administracion oral, intravenosa, intraarterial, intratecal, intramuscular, subcutanea, intraperitoneal, intraarticular, topica, transdermica o para administracion directa en el sitio de la neoplasia.
9. 9. Conjugado qmmico farmaceutico de acuerdo con la reivindicacion 1 que se transforma en un biomaterial tridimensional procesado en forma de hidrogeles, nano- y microesferas, fibras hiladas tejidas o no tejidas.
10. 10. Uso de los conjugados qmmico-farmaceuticos de acuerdo con las reivindicaciones 1-6 para la preparacion de composiciones farmaceuticas para usar en el campo oncologico para el tratamiento de tumores primarios y/o secundarios que ya no responden a ningun tratamiento medico despues de la formacion de Resistencia a Multiple farmacos (MDR).
11. 11. Uso de acuerdo con la reivindicacion 10 para el tratamiento sistemico o local de tumores del pancreas, mama, colon-recto, pulmon y sistema respiratorio en su totalidad, cabeza-cuello, tffgado, tesffculos, ovario, endometrio, prostata, vejiga, cerebro, leucemia, linfomas, melanoma, sarcoma de Kaposi, osteosarcoma, neuroblastoma y cancer de piel.
12. 12. Un proceso para la preparacion de los conjugados qmmico-farmaceuticos de acuerdo con las reivindicaciones 1-6 por la conjugacion indirecta de acido hialuronico o uno de sus derivados y un farmaco que tiene una actividad antitumoral por medio de un espaciador que forma un enlace ester con el grupo carboxilo del acido hialuronico de acuerdo con los siguientes procedimientos alternativos a), b) o c):

    - I a) un grupo funcional del espaciador seleccionado adecuadamente que tambien contiene un segundo grupo saliente capaz de reaccionar con la funcion carboxilo del HA, reacciona con un grupo funcional que pertenece a la molecula antitumoral seleccionada;

    - II a) la reaccion puede requerir posiblemente la activacion de una de las funciones involucradas por medio de un agente activador como carbodiimidas;

    - III a) en una segunda fase, por contacto directo con una sal de tetraalquilamonio (preferentemente tetrabutil amonio) de HA en un en un ambiente anhidro, el compuesto que consiste en el farmaco modificado reacciona dando lugar a una sustitucion nucleofflica del grupo saliente en el carboxilo del HA, lo que causa la formacion de un enlace ester entre el HA y el espaciador;

    - I b) el grupo carboxilo del acido hialuronico se enlaza por union nucleofflica a un espaciador adecuado que se enlaza subsecuentemente con una funcion de la molecula antitumoral;

    - I c) el grupo carboxilo del HA se activa con un agente activador y se hace reaccionar con una funcion hidroxilo del espaciador seleccionado adecuadamente, previa o subsecuentemente enlazado al farmaco.