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ES2665556T3 - Bacillus, enzima de ácido hialurónico y usos de los mismos - Google Patents

Bacillus, enzima de ácido hialurónico y usos de los mismos Download PDF

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ES2665556T3
ES2665556T3 ES12869142.5T ES12869142T ES2665556T3 ES 2665556 T3 ES2665556 T3 ES 2665556T3 ES 12869142 T ES12869142 T ES 12869142T ES 2665556 T3 ES2665556 T3 ES 2665556T3
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Yanli SHI
Liping QIAO
Ning FENG
Guanfeng WANG
Haina LI
Wei Xue
Haiying Wang
Yihong LUAN
Aihua Liu
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BLOOMAGE FREDA BIOPHARM Co Ltd
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Abstract

Especie bacillus que tiene un número de acceso de depósito de CGMCC NO. 5744, fecha del depósito del 8 de febrero de 2012, y el nombre de la institución depositaria de China General Microbiological Culture Collection Center (CGMCC).

Description

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Tabla 5: Grados de reacción de citotoxicidad (según la Farmacopea de Estados Unidos)
Grado
0 1 2 3 4
RGR(%)
≥100 80-99 50-79 30-49 0-29
Tabla 6: Resultados experimentales de citotoxicidad de hialuronato de sodio oligomérico
Muestra
Concentración de muestra (% p/v) DO570 (X ± SD) RGR (%) Grado de citotoxicidad
Ejemplo comparativo 1
0,25 0,762 ± 0,062 84,36 1
0,5
0,681 ± 0,092 74,43 2
1,0
0,629 ± 0,057 68,14 2
2,0
0,452 ± 0,052 46,61 3
3,0
0,357 ± 0,023 35,14 3
4,0
0,193 ± 0,024 15,21 4
Ejemplo 13
0,25 0,985 ± 0,063 110,94 0
0,5
1,147 ± 0,059 130,43 0
1,0
1,075 ± 0,041 121,74 0
2,0
0,929 ± 0,095 104,21 0
3,0
0,646 ± 0,038 70,20 2
4,0
0,471 ± 0,039 49,19 3
Ejemplo 14
0,25 1,012 ± 0,057 113,58 0
0,5
1,107 ± 0,044 124,24 0
1,0
0,998 ± 0,045 112,01 0
2,0
0,935 ± 0,026 104,94 0
3,0
0,742 ± 0,030 83,28 1
4,0
0,520 ± 0,030 58,36 2
Ejemplo 15
0,25 0,898 ± 0,060 100,79 0
0,5
0,997 ± 0,045 111,90 0
1,0
0,925 ± 0,038 103,82 0
2,0
0,832 ± 0,041 93,38 1
3,0
0,605 ± 0,058 67,90 2
4,0
0,450 ± 0,049 50,51 2
Ejemplo 16
0,25 1,015 ± 0,029 113,92 0
0,5
1,090 ± 0,035 122,33 0
1,0
0,985 ± 0,038 110,55 0
2,0
0,886 ± 0,055 99,44 1
3,0
0,721 ± 0,032 80,92 1
4,0
0,489 ± 0,033 54,88 2
Ejemplo 17
0,25 0,932 ± 0,054 104,60 0
0,5
1,005 ± 0,067 112,79 0
1,0
0,974 ± 0,051 109,32 0
2,0
0,889 ± 0,055 99,78 1
3,0
0,719 ± 0,042 80,70 1
4,0
0,530 ± 0,039 59,48 2
Ejemplo 18
0,25 1,033 ± 0,055 115,94 0
0,5
1,213 ± 0,048 136,14 0
1,0
1,098 ± 0,029 123,23 0
2,0
0,980 ± 0,028 109,99 0
3,0
0,726 ± 0,030 81,48 1
4,0
0,501 ± 0,037 56,23 2
control negativo
0,891 ± 0,030 100,00 0
control positivo
0,071 ± 0,43 0,43 4
[0186] Los resultados muestran que el hialuronato de sodio oligomérico preparado por el procedimiento de degradación química no es citotóxico cuando su concentración no es mayor que 1,0%; mientras que el hialuronato de sodio oligomérico 10 preparado por el procedimiento de digestión enzimática no es citotóxico cuando su concentración no es mayor que
32
imagen31
imagen32
adición de hialuronato oligomérico al 0,5% (preparada en cualquiera de los Ejemplos 13-18), a continuación, adición con 25% de azúcar comestible o miel de abeja, y disolución con agua purificada. Después de completar la disolución, la esterilización se llevó a cabo mediante el uso de un dispositivo de ultrafiltración, a continuación, se vertió en botellas de 10 ml para solución oral (esterilizadas con alta temperatura o de ozono ultravioleta), se taparon y se sellaron, y todas las
5 operaciones anteriores se llevaron a en una zona limpia. A continuación, el producto se sometió a la prueba de calidad para obtener la solución oral de hialuronato oligomérico. Los sujetos tenían una edad de 30-65, se dividieron en 6 grupos, 30 personas en cada grupo, y cada persona fue administrada con 10-20 ml de solución oral de hialuronato oligomérico por día, durante un mes consecutivo, y los efectos se muestran en la Tabla 7. Otras 30 personas se utilizaron como grupo de control, a las que se les administró con una solución de azúcar comestible o miel por día.
10
Tabla 7: Efectos de la administración de solución oral de hialuronato oligomérico
Muestra
Punto de evaluación Cambio significativo Cambio ligero Sin cambio
Ejemplo 13
1. piel es lisa, húmeda y elástica 24 5 1
2. mejillas rosadas, reducción de arrugas, juvenil
17 8 5
3. mayor resistencia, no fácil enfermar
23 4 3
4. relación corporal y sano, no fácil fatigarse
12 13 5
5Ejemplo 14
1. piel es lisa, húmeda y elástica 25 4 1
2. mejillas rosadas, reducción de arrugas, juvenil
21 6 3
3. mayor resistencia, no fácil enfermar
22 5 3
4. relación corporal y sano, no fácil fatigarse
14 11 5
Ejemplo 15
1. piel es lisa, húmeda y elástica 22 5 3
2. mejillas rosadas, reducción de arrugas, juvenil
19 7 4
3. mayor resistencia, no fácil enfermar
21 5 4
4. relación corporal y sano, no fácil fatigarse
13 12 5
fatiga
Ejemplo 16
1. piel es lisa, húmeda y elástica 23 5 2
2. mejillas rosadas, reducción de arrugas, juvenil
17 9 4
3. mayor resistencia, no fácil enfermar
22 5 3
4. relación corporal y sano, no fácil fatigarse
14 11 5
Ejemplo 17
1. piel es lisa, húmeda y elástica 24 4 2
2. mejillas rosadas, reducción de arrugas, juvenil
18 8 4
3. mayor resistencia,
23 5 2
35
no fácil enfermar
4. relación corporal y sano, no fácil fatigarse
13 13 4
Ejemplo 18
1. piel es lisa, húmeda y elástica 21 7 2
2. mejillas rosadas, reducción de arrugas, juvenil
19 6 5
3. mayor resistencia, no fácil enfermar
20 7 3
4. relación corporal y sano, no fácil fatigarse
12 12 6
Grupo de control
1. piel es lisa, húmeda y elástica 1 7 22
2. mejillas rosadas, reducción de arrugas, juvenil
0 7 23
3. mayor resistencia, no fácil enfermar
0 3 27
4. relación corporal y sano, no fácil fatigarse
1 6 23
[0201] Se puede ver en la Tabla 7 que el hialuronato de sodio oligomérico se podía comer directamente como un alimento para el cuidado de la salud, muy fácil para la absorción, y tenía muchas funciones, tales como la mejora de la inmunidad, retraso de la senescencia, restauración del brillo y elasticidad de la piel. Los hialuronatos oligoméricos de la presente 5 invención tienen un peso molecular pequeño, pueden ser absorbidos por el intestino de los seres humanos, a fin de aumentar el contenido de ácido hialurónico en los tejidos del cuerpo, suministrar a la piel ácido hialurónico que puede disminuir debido al envejecimiento. Además, el ácido hialurónico de peso molecular pequeño absorbido por la administración oral puede generar el ácido hialurónico de alto peso molecular en el cuerpo de modo que la piel se convertiría en tierna y suave, las articulaciones se vuelven flexibles, se evitaría la formación de arrugas, y por lo tanto
10 pueden ser utilizados en el campo de los alimentos.
2. Estudio de las funciones de hialuronatos de bajo peso molecular en alimentos para el cuidado de la salud
[0202] Por ejemplo, en una solución oral para el cuidado de la salud con hialuronato de bajo peso molecular como
15 componente funcional principal, la cantidad de hialuronato de bajo peso molecular añadido fue de 0,05-2%. La formulación de la solución oral fue de: adición de hialuronato de bajo peso molecular al 1,0% (preparado en cualquiera de los Ejemplos 19-26), a continuación, añadición de azúcar comestible al 25% o miel de abeja. Procedimiento de formulación: realización de la formulación en una habitación limpia, toma y agitación de agua purificada a temperatura ambiente, adición en proporción de hialuronato de bajo peso molecular, a continuación, adición con el azúcar comestible o miel de abeja bajo
20 agitación hasta la disolución completa, adición de agua hasta 100 %. Después de la disolución completa, la esterilización se realizó por esterilización con calor húmedo, a continuación se vertió en botellas de 10 ml de solución oral (esterilizadas con alta temperatura u ozono ultravioleta), se taparon y se sellaron, y todas las operaciones anteriores se llevaron en una zona limpia. A continuación, el producto se sometió a la prueba de calidad para obtener la solución oral de hialuronato de bajo peso molecular. Los sujetos tenían una edad de 22-55, se dividieron en 8 grupos, de 32 personas en cada grupo, y a
25 cada persona se le administraron 20 ml de solución oral de hialuronato de bajo peso molecular por día, durante un mes consecutivo. Otras 30 personas se utilizaron como grupo de control, a los que se les administró una solución de azúcar comestible o miel de abeja por día.
[0203] El contenido de humedad de la piel y la cantidad de pérdida de agua de los sujetos se midieron con un medidor de
30 humedad de la piel por personas designadas antes y después de la administración, en las que los sitios de medición y la temperatura ambiente y la humedad se mantuvieron constantes antes y después de la medición. Los resultados de la medición del contenido de humedad de la piel humana se muestran en la Tabla 8.
Tabla 8: Resultados de la medición del contenido de humedad de la piel
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