ES2586740B1

ES2586740B1 - Boramidas cíclicas con actividad antifúngica, antibiótica, antiviral y antitumoral.

Info

Publication number: ES2586740B1
Application number: ES201530510A
Authority: ES
Inventors: Víctor TENA PÉREZ; Ángel RUMBERO SANCHEZ
Original assignee: Individual
Current assignee: VICTOR TENA PEREZ
Priority date: 2015-04-15
Filing date: 2015-04-15
Publication date: 2017-08-16
Anticipated expiration: 2035-04-15
Also published as: ES2586740A1; WO2016166319A1

Abstract

La invención consta de la aplicación de la boramida cíclica (Figura 1) como agente antitumoral y antimicrobiano (antifúngico, antiVIH y antibiótico). Se trata de una nueva estructura basada en el elemento boro (B) que consta de cuatro anillos de seis miembros fusionados. En éstas, el boro presenta una disposición tetraédrica y forma un enlace tipo amida.#La molécula se compone de los elementos hidrógeno (H), haluros (Cloro Cl-, Bromo -Br- y Flúor-F-) o del radical Metoxilo (-OMe) en las posiciones R3 y R'3 mientras que el resto de posiciones R se componen del elemento hidrógeno (H).

Description

DESCRIPCI6N

Boramidas ciclicas con actividad antifungica, antibiotica, antiviral y antitumoral,

SECTOR DE LATECNICA

5

Esta invencion pertenece al campo de la quimica medica, en concreto, esta centrada en el desarrollo de boramidas ciclicas con actividad antitumoral y antimicrobiana (antifungica, antibiotica y anti-VIH).

10 ANTECEDENTES DE LA INVENCION

En la actualidad, la resistencia y multirresistencia de microorganismos se considera un grave problema desde el punto de vista clinico, epidemiologico y de salud publica. Esta situacion tiende a empeorar por la desaparicion de las especies mas 15 sensibles a los antimicrobianos por un uso inapropiado de estos. De esta manera, solo sobreviven aquellas que son resistentes gracias a mutaciones espontaneas.

Por consiguiente, las infecciones causadas por estos microorganismos resistentes no responden al tratamiento ordinario, lo que da lugar a una enfermedad 20 prolongada, con mayor riesgo de defuncion y costes mas elevados para la sociedad. Todo ello agravado, porque, en los ultimos afios, han desarrollado nuevos mecanismos de resistencia, que hacen practicamente ineficaces a la ultima generation de medicamentos. (WHO. Antimicrobial Resistance. Global Report on Surveillance. 2014).

Por otro lado, el cancer provoca una mortandad estimada de 7 millones de personas anualmente que, segun se estima, ascendera hasta los 10 millones en 2020. Una vez mas, esta enfermedad ha mutado generando nuevas resistencias en las celulas tumorales lo que ha reducido la eficacia de tratamientos actuales.(Barot, K.P.; Nikolova, 5 I.S.; Ghate, M.D. Mini Rev. Med. Chem.2013, 13, 1239-55)

Si tenemos en cuenta esta situacion, surge la necesidad de buscar nuevas entidades quimicas que presenten mecanismos de accion novedosos y generen tratamientos clinicos mas efectivos.

10

Para perseguir este fin, el boro (B) presenta las caracteristicas adecuadas ya que, con una geometria unica, permite a los compuestos la capacidad de interactuar con dianas biologicas de manera novedosa. Ademas, la superior reactividad de dicho elemento frente al carbono (C) les permite actuar sobre dianas que no son posibles con

15 la quimica de este ultimo. El desarrollo de este tipo de medicamentos, se comenzo a partir del ano 2000 y, hasta el momento, se ha desarrollado un antifungico (Kerydin)(Baker, S.J.; Zhang, Y-K; Akama, T.; Lau, A.; Zhou, H.; Hernandez, V.; Sanders, V.; Plattner, J. J. Med. Chem. 2006, 49, 4447-50) y un antibiotico AN3365 que esta en estudio preclinico (Mendes, R. E.; Alley, M. R.; Sader, H. S.; Biedenbach, D. J.;

20 Jonesa, R. N.; Antimicrob. Agents. Chemother. 2013, 6, 2849-57). Ambas estructuras son acidos boronicos en las cuales el boro se encuentra en una geometria plana.

Las moleculas desarrolladas en nuestra invention plantean un nuevo tipo de estructuras basadas en boro, formadas por cuatro anillos de seis miembros, fusionados. En estas, el atomo de boro presenta una disposition tetraedrica y forma un enlace tipo amida. (Perez, V.T.; Fuentes de Arriba, A.L.; Monleon, L.M.; Simon, L.; Rubio, O.H.;

5 Sanz, F.; Moran, J.R. Tetrahderon. 2014, 70, 8614-18). Dichas estructuras han presentado una novedosa y atipica actividad antitumoral y antimicrobiana (antifungica, antibiotica y anti-VIH), que no habia sido descrita con anterioridad.

EXPLICACION DE LA INVENCION

10

La presente invention se refiere a la aplicacion de la composition quimica de boramidas ciclicas con la estructura general mostrada en la figura 1:

imagen1

R'3

R'4

Donde todas las posiciones de R (R1, R'1, R2, R'2, R3, R'3, R4, R'4, R5 y R'5) se componen del elemento hidrogeno (H).

La presente invention, ademas, se refiere a la aplicacion de la composition qulmica de boramidas ciclicas con la misma estructura general mostrada en la anterior figura 1:

imagen2

R'3

R'4

5

Donde las siguientes posiciones R -R1, R'1, R2, R'2, R4, R'4, R5, R'5-se componen del elemento hidrogeno (H), mientras que tanto R3 como R'3 se componen del elemento bromo (Br) y, por otra parte;

de manera independiente, R3 y R'3 se componen una del elemento hidrogeno (H) y la 10 otra del bromo (Br).

Otro fin de la invention se refiere a la aplicacion de la composition quimica de boramidas ciclicas con la misma estructura general mostrada en la anterior figura 1:

imagen3

R‘3

R'4

15 Donde las siguientes posiciones R -R1, R'1, R2, R'2, R4, R'4, R5, R'5- se componen del elemento hidrogeno (H), mientras que tanto R3 como R'3 se componen del elemento cloro (Cl) y, por otro lado;

de manera independiente, R3 y R'3 se componen una del elemento hidrogeno (H) y la otra del cloro (Cl).

La presente invencion tambien se refiere a la aplicacion de la composicion qufmica de 5 boramidas ciclicas con la misma estructura general mostrada en la figura 1:

imagen4

R'3

R'4

Donde las siguientes posiciones R -R1, R'1, R2, R'2, R4, R'4, R5 y R'5-se componen 10 del elemento hidrogeno (H), mientras que tanto R3 como R'3 se componen del elemento fluor (F) y, por otra parte;

de manera independiente, R3 y R'3 se componen una del elemento hidrogeno (H) y la otra del fluor (F).

15

La presente invention tambien se refiere a la aplicacion de la composition quimica de boramidas ciclicas con la misma estructura general mostrada en la precedente figura 1:

imagen5

R'3

R'4

5

Donde las siguientes posiciones R -R1, R'1, R2, R'2, R4, R'4, R5, R'5- se componen del elemento hidrogeno (H), mientras que tanto R3 como R'3 se componen del radical metoxilo (-OMe) y, por otra parte;

de manera independiente, R3 y R'3 se componen una del elemento hidrogeno (H) y la io otra del radical metoxilo (-OMe).

15

REALIZACION PREFERENTE DE LA INVENCION

Para la obtencion de la Boramida Cfclica se puede seguir el siguiente esquema:

imagen6

imagen7

5 1. Las iminas (2) se sintetizan, saturando con NH3 durante un minuto una disolucion de

salicilaldehfdo (1) (1.00 mmol), en una mezcla 1:1 de MeOH:THF (1.0 mL).

2. La mezcla de reaccion obtenida se utiliza para la preparacion de las boramidas sin aislamiento de las iminas intermedias.

3. Se anade NaBFU (1.15 mmol) y el correspondiente salicilaldehfdo (1.00 mmol) a las 10 iminias del primer punto (2) (1.00 mmol), a temperatura ambiente.

4. Despues de 30 minutos bajo agitacion, la mezcla de reaccion se adiciona sobre agua con hielo, dando lugar a la formation del producto deseado (3), en forma de un precipitado bianco.

5. El solido obtenido se filtra mediante suction.

15 6. Finalmente, el producto final se recristaliza en metanol.

EJEMPLOS

Para facilitar la comprension de las Tablas que acompanan los diferentes ejemplos, se anade una relacion de NOMBRES para la identification de cada una de las variaciones 5 de la molecula. En todas ellas se entiende que las posiciones R1, R'1, R2, R'2, R4, R'4, R5 y R'5, se componen del elemento hidrogeno (H):

- T-01: Cuando R3 y R'3 se compongan por el elemento hidrogeno (H), cada una.

- T-02: Cuando R3 y R'3 se compongan por el elemento bromo (Br), cada una.

10 - T-03: Cuando R3 y R'3, de manera independiente, se compongan una del elemento

bromo (Br) y otra de hidrogeno (H).

- T-04: Cuando R3 y R'3 se compongan por el elemento cloro (Cl), cada una.

- T-05: Cuando R3 y R'3, de manera independiente, se compongan una del elemento cloro (Cl) y otra de hidrogeno (H).

15 - T-06: Cuando R3 y R'3 se compongan por el elemento fluor (F), cada una.

- T-07: Cuando R3 y R'3, de manera independiente, se compongan una del elemento fluor (F) y otra de hidrogeno (FI).

- T-08: Cuando R3 y R'3 se compongan por el radical metoxilo (-OMe), cada una.

- T-09: Cuando R3 y R'3, de manera independiente, se compongan una del radical 20 metoxilo (-OMe) y otra de hidrogeno (H).

Ejempio 1

1) ACTIVIDAD ANTIFUNGICA

Material y metodos:

5 Se preparo suspension de celulas levaduriformes en agua destilada esteril desde un cultivo de 24 horas en medio Sabouraud. Cada suspension se ajusto a un tamano de inoculo fijo entre 1-5 x 106 CFU/ml con la ayuda de un espectrofotometro.

Los estudios de sensibilidad a las distintas moleculas fueron desarrollados siguiendo estrictamente la metodologia estandarizada detallada en el documento CLSI: M44-4: 10 Method for antifungal disk diffusion susceptibility testing of yeasts, que consiste en la difusion en disco en agar Muller-Hinton (suplementado con 2% de glucosa y 0,5 pg/ml de azul de metileno).

El ensayo se realizo en dos cepas de la especie Saccharomyces cerevisiae y dos cepas de la especie Candida iusitaniae, todas ellas de aislamiento clinico, cuyos perfiles 15 antifungicos se detallan en la Tabla 1, procedentes del Servicio de Microbiologia del Hospital La Princesa de Madrid.

Tabla 1. Perfiles de susceptibildad antifungica en las cepas ensayadas.

Ref.
Ref.: Amphotericina Ketoconaz Itraconazo Clotrimazo Fluconazo

Hospital: Valoralia B ol I I I

3309162: SC-001 S S I S R

3305385: SC-002 R S I S S

3303261: CL-081 S S R s S

3304085: CL-082 S S S s S

Resu/tados:

T-06 demuestra ser activa frente a ambas cepas clfnicas de la especie S.

C. lusitanae

5

Ejempio 2

2) ACTIVIDAD ANTIBIOTICA

Material y metodos:

10 Se preparo suspension de celulas bacterianas en solucion salina esteril desde un cultivo de 24-72 h, segun especie bacteriana, en medio de agar-sangre Muller-Hinton (con sangre de oveja desfibrinada en una concentracion al 5%). Cada suspension se ajusto a un tamano de inoculo fijo entre 1 -5 x 108 CFU/ml con la ayuda de un espectrofotometro (Ferraro, M.J. National Committee for Clinical Laboratory Standards. 2000).

15

El antibiograma por disco difusion que se basa en el trabajo de Bauer, Kirby y colaboradores, es uno de los principales metodos que el NCCLS recomienda para la determination de la sensibilidad bacteriana a los antibioticos y que se ha utilizado de en este estudio, con una unica modificacion:

20 En el metodo de suspension directa de colonias o Kirby-Bauer modificado se ha utilizado 1 ml de suero fisiologico esteril en un tubo de ensayo. Se ha tornado con un asa bacteriologica tres colonias morfologicamente similares y se han suspendido en el tubo hasta alcanzar una turbidez comparable a la solucion de Me Farland 0.5.

Despues de prepararse el inoculo bacteriano con la cepa en estudio si se han seguido los siguientes pasos descritos en el protocolo descrito. Transcurridas de 18 a 72 horas de incubacion a 37°C, con o sin CO2, en condiciones aerobias o anaerobias, segun la 5 especie bacteriana, se han obtenido y evaluado halos de inhibition del crecimiento que indicarian actividad antimicrobiana.

El Centro Nacional de Microbiologfa del Instituto de Salud Carlos III, proporciono una cepa de cada especie, procedentes de aislamientos de origen cllnico, y cuyos perfiles 10 de susceptibilidad antimicrobiana aparecen reflejados en la Tabla 2.

Tabla 2. Perfiles de susceptibilidad antimicrobiana de las cepas ensayadas.

Especies: IMP CTX A/C LIN AMK SxT CIP ERI

N. cyriacigeorgica: S S R S S S R R

N. Carnea: S S S S S R S R

T. Pulmonis: S S S S S S S S

: IMP GEN SxT PEN CIP ERI

M. Chelonae: R S S R S R

: PEN VAN RIF TET ERI CLI

B. Cereus: S S S R R R

: MER CEF IMP TOB AMK CIP

A. Baumannii: R R R S R R

: CIP TET ERI CLI GEN LIN VAN

S. Aureus: R S R R R S S

S. Epidermis: R S R R R R R

: AMP A/C CTX IMP GEN CIP AMK

K.: R S S S S S S

Pneumoniae

E. Coli: R R R S S S S

E. Cloacae: R R R S R R R

5 IMP=lmipenem; CTX=Cefotaxima; A/C=Amoxcilina/Clavulanico; Lin=Linezolid; AMK=Amikacina; SxT=Cotrimoxazol; CIP=Ciprofloxacina; ERI=Eritromicina; GEN=Gentamicina; PEN=Penicilina; VAN=Vancomicina; RIF=Rifampicina; TET=Tetraciclina; CLI=Clindamicina; MER=Meropenem; CEF=Ceftriazona; TOB=Tobramicina; AMP=Ampicilina;

Resultados:

La lectura se realizo a traves de la medicion de los halos de inhibition. Se especifican en la Tabla 3 las distintas actividades detectadas con cada una de las moleculas y las especies bacterianas en las que se ensayaron.

Tabla 3. Bioactividades detectadas con las moleculas.

Especies bacterianas: T-1 T-2 T-3 T-4 T-5 T-6 T-7 T-8 T-9

Actinomicetos: Nocardia Cyriacigeorgica A A A A A A

Nocardia Carnea: A A A A A A

Tsukamurella Pulmonis: A A A A A A

Mycobacterium Cheionae: A A A A A

Gram positivas: Staphylococcus Aureus A A

Staphylococcus Epidermis: A

Bacillus Cereus: A A A A A A A

Gram negativas: Kleibsiella Pneumoniae A A A A A

Enterobacter Cloacae: A A A A A

Acinetobacter baumanii: A A A

Escherichia Coii: A A A A A

A=actividad inhibitoria detecta da

Ejempio 3

2) ACTIVIDAD ANTI-VI H:

5 Material y metodos:

El estudio se realizo mediante un ensayo antiviral basado en virus recombinantes e los que el gen nefde\ VIH-1 ha sido reemplazado por un gen indicador, permitiendonos cuantificar la replicacion viral directamente.

Plan de trabajo

10

- Obtencion de virus recombinantes

Se ha utilizado el metodo de transfeccion con fosfato calcico. Para ello, 5-106 celulas 293t se siembran en un flask T75 el dla anterior. Antes de la transfeccion se cambia el medio DMEM completo por medio fresco. A las 4 horas se preparan diluciones del 15 plasmido a transfectar (40 pg de pNL4.3-Ren), 0.75 ml. de CaCh 250 mM y 0.75 ml. de HBS (50 mM HEPES, 1.5 mM Na2HPC>4 y 140 mM NaCI. pH 7.05). Se incuba la mezcla un minuto y se anade al cultivo de celulas 293t. Al dia siguiente se elimina el medio de transfeccion y se anade medio DMEM completo fresco y un dfa despues se recogen los sobrenadantes virales. Se almacenan en alfcuotas de 1 ml. a -80°C hasta su utilizacion.

20

- Titulacion de /os stock virales

La titulacion de los stocks virales previamente obtenidos se realizo en funcion de las unidades de luminiscencia o RLU obtenidas tras la replicacion de los virus recombinantes. Para ello, sembramos en placas de 96 pocillos 100.000 celulas diana 5 (MT-2) por pocillo y se infecta con diluciones seriadas del sobrenadante viral hasta un

volumen final de 200 pl/pocillo. Se incuba el cultivo a 37°C, en atmosfera de 5% de CO2, durante 24 o 48 horas. Pasado este tiempo se recogen las celulas y se lisan con 100 pi de solucion comercial "iuciferase system assay with reporter //sis buffet1’ o “Renilla assay systenf (Promega). La actividad luciferasa o RLUs en los lisados se mide mediante la 10 adicion del sustrato luciferasa o renilla en un luminometro de placa Sirius (Berthold Detection Systems) durante 20 segundos. De esta manera obtenemos un valor de RLUs por cada pL de sobrenadante viral.

- Ensayo de virus recombinantes

15 El ensayo de virus recombinantes se realizo infectando celulas MT-2 con los

sobrenadantes virales previamente obtenidos. Para ello, se afiaden en una placa de 96 pocillos con fondo en U los extractos a la mayor concentration evaluada (200 pg/ml) y realizamos diluciones seriadas en base 5 (habitualmente 6 para el screening inicial). Utilizamos el vehiculo como control positivo de infeccion (100%). Posteriormente, se

20 siembran 106 celulas MT-2/pocillo en placas de 96. Despues de media hora de

incubation, se infecta el cultivo con el virus recombinante portador del gen renilla luciferasa a un titulo de infeccion que nos proporciona 105 unidades de luminiscencia/pocillo (RLU/pocillo). El volumen final de cada pocillo es de 200 pL. La

actividad anti VIH es determinada a las 48 horas midiendo la actividad renilla luciferasa igual que en el apartado anterior. Las RLUs o actividad renilla luciferasa son directamente proporcionales al grado de replicacion viral.

5 - Viabilidad

Todos los ensayos de evaluation de la actividad anti-VIH se realizan en paralelo para determinar la viabilidad celular del cultivo en presencia o no de las diferentes concentraciones de la muestra. Para ello se sigue exactamente la misma metodologia que en el ensayo anti-VIH excepto que no se anade sobrenadante viral sino medio

10 DMEM completo en la misma proportion y la deteccion de la viabilidad se Neva a cabo con el kit de deteccion de viabilidad CellTiter Glo (Promega) siguiendo las instrucciones del fabricante. La viabilidad sera directamente proporcional a la actividad de luciferasa o RLUs obtenidas. Todos los datos se expresan en porcentaje respecto a un control con vehiculo en la misma concentration. A una viabilidad alta tendremos una toxicidad baja.

15 Resu/tados:

Se han realizado un screening previo a (50 pg/ml) de la actividad antiviral y un posterior analisis de los activos mediante la realization de curvas de actividad antiviral y de toxicidad con los extractos a diferentes concentraciones. Se especifican en la Tabla 4 las distintas actividades detectadas con cada una de las moleculas.

20

Tabla 4. Actividad anti-VIH y toxicidad de las moleculas.

: T-01 T-02 T-04 T-06 T-08

HIV pg/ml (%): 10 9 6 5 30

Viabilidad (%): 115 138 140 124 126

Ejemplo 4

5 Para el analisis de actividad antitumoral de los compuestos realizamos un ensayo MTT con la linea celular tumoral colorrectal HT29y linea celular de cancer de mama MCF7, de rapida proliferation y con una alta susceptibilidad a otros tratamientos. Con este ensayo podemos observar si existen celulas metabolicamente activas lo que nos indica supervivencia celular. Tras la incubation con los compuestos anadimos a las celulas el 10 reactivo Bromuro de 3-(4,5-dimetilthiazol-2-yl)-2,5-difeniltetrazolio. Aquellas celulas que se mantengan activas convertiran este reactivo mediante la enzima SDH (Succinato deshidrogenasa) en formazan. Este compuesto presenta una tonalidad morada. Cuantas mas celulas activas haya en el medio mas formazan aparecera y mas color obtendremos. Con la posterior lectura de absorbencia somos capaces de comparar los 15 cultivos entre los diferentes tiempos mediante un sencillo analisis estadistico.

Partimos de una cantidad de 10000 celulas por pocillo que dejaremos unas primeras 24 horas que se adhieran a la placa antes del tratamiento. Hay que considerar que todas las pruebas van siempre por triplicado. Tratamos dicha linea celular a un gradiente de 20 concentraciones desde 50nM, 100nM, 250nM, 500nM, 750nM, 2,5pM y 5pM de cada

uno de los compuestos durante 24, 48 y 72 horas utilizando como control negativo de referenda la misma linea sin tratar a la que llamamos TO.

Resultados

5 Se especifica de la Tabla 5 que los compuestos T-03, T-05y T-07 presentan actividad sobre la linea de cancer colorrectal HT29. En la Tabla 6 se aclara que el compuesto T- 03 presenta actividad sobre la linea de cancer de mama MCF7.

Tabla 5. Perfiles de actividad antitumoral sobre la linea de cancer colorrectal HT29.

: 750nM 2,5pM 5pM 10pM 20pM 50|jM

T-03: A A A A A A

T-05: A A

T-07: A A A

10 A = Actividad inhibitoria mostrada

15 Tabla 6. Perfiles de actividad antitumoral sobre la linea de cancer de mama MCF7.

: 750nM 1jjM 2,5/jM

T-03: A A A

A = Actividad inhibitoria mostrada

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un uso de la composicion quimica de la boramida ciclica cuya estructura general se conforma segun la figura 1:

imagen1

R'3

R'4

Donde todas las posiciones R y R' se componen del elemento Hidrogeno (H), para su aplicacion como agente antibacteriano frente a:

- Especies de la Familia de actinomicetales: Nocardia cyriacigeorgica, Nocardia carnea, 10 Tsukamurella pulmonis y Mycobacterium cheionae.

- Especie GRAM positiva: Bacillus cereus.

-Especies GRAM negativa: Klebsiella pneumoniae, Enterobacter cloacae, Acinetobacter baumannii y Escherichia coli.
2. Un uso de la composicion quimica de la boramida ciclica como la recogida en la reivindicacion (1) para su aplicacion como agente antiviral contra el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH).

imagen2

5 Donde las dos posiciones R3 y R'3 se componen del elemento bromo (Br) y el resto de posiciones R y R' de hidrogeno (H), para su aplicacion como agente antibacteriano frente a:

- Especies de la Familia de actinomicetales: Nocardia cyriacigeorgica, Nocardia carnea, Tsukamurella pulmonis y Mycobacterium cheionae.

10
4. Un uso de la composicion quimica de la boramida ciclica como la recogida en la reivindicacion (3) para su aplicacion como agente antiviral contra el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH).

15

imagen3

R'3

R'4

5 Donde las posiciones de R3 y R'3, de manera independiente, se componen una del elemento bromo (Br) y la otra del elemento hidrogeno (H), mientras el resto de posiciones R y R' se componen del elemento hidrogeno (H), para su aplicacion como agente antibacteriano frente a:

10 - Especies de la Familia de actinomicetales: Nocardia cyriacigeorgica, Nocardia carnea,

Tsukamurella pulmonis y Mycobacterium cheionae.

- Especie GRAM positiva: bacillus cereus.

- Especies GRAM negativa: Klebsiella pneumoniae, Enterobacter cloacaey Escherichia co!i.

15
6. Un uso de la composicion quimica de la boramida ciclica como la recogida en la reivindicacion (5) para su aplicacion como agente antitumoral, frente a la linea celular tumoral colorrectal HT29y linea celular de cancer de mama MCF7.

imagen4

R'3

R'4

5 Donde las dos posiciones R3 y R'3 se componen del elemento cloro (Cl) y el resto de posiciones R y R' de Hidrogeno (H), para su aplicacion como agente antibacteriano frente a:

- Especies de la Familia de actinomicetales: Nocardia carnea, Tsukamurella pulmonis y 10 Mycobacterium che/onae.
8. Un uso de la composicion quimica de la boramida ciclica como la recogida en la 15 reivindicacion (7) para su aplicacion como agente antiviral contra el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH).

imagen5

R'3

R'4

5 Donde las posiciones de R3 y R'3, de manera independiente, se componen una del elemento cloro (Cl) y la otra del elemento hidrogeno (H), mientras que el resto de posiciones R y R' se componen del elemento hidrogeno (H), para su aplicacion como agente antibacteriano frente a:

to - Especies de la Familia de actinomicetales: Nocardia cyriacigeorgica, Nocardia carnea, Tsukamurella pulmonis y Mycobacterium cheionae.

- Especie GRAM positiva: bacillus cereus.

- Especies GRAM negativa: Klebsiella pneumoniae, Enterobacter cloacae,

Acinetobacter baumannii y Escherichiacoli 15
10. Un uso de la composicion quimica de la boramida ciclica como la recogida en el reivindicacion (9) para su aplicacion como agente antitumoral frente a la linea celular tumoral colorrectal HT29.

imagen6

R'3

R'4

Donde las posiciones R3 y R'3 se componen del elemento fluor (F), mientras que el 5 resto de posiciones R y R' se componen del elemento hidrogeno (H), para su aplicacion como agente antibacteriano frente a:

- Especies de la Familia de actinomicetales: Nocardia Nocardia carnea

y Tsukamurella pulmonis.

10 - Especie GRAM positiva: bacillus cereus.
12. Un uso de la composicion quimica de la boramida ciclica como la recogida en la reivindicacion (11) para su aplicacion como agente antiviral frente al virus de la inmunodeficiencia humana (VIH).

15
13. Un uso de la composicion quimica de la boramida ciclica como la recogida en la reivindicacion (11) para su aplicacion como agente antifungico, frente a la especie Saccharomyces cerevisiae y la especie Candida lusitaniae.

imagen7

R'3

R'4

Donde las posiciones de R3 y R'3, de manera independiente, se componen una del 5 elemento fluor (F) y la otra del elemento hidrogeno (H), mientras que el resto de posiciones R y R' se componen del elemento hidrogeno (H), para su aplicacion como agente antibacteriano frente a:

- Especies GRAM positiva: Staphylococcus aureusy 10 - Especies GRAM negativa: Klebsiella pneumoniae, Enterobacter cloacaey Escherichia

coii.
15. Un uso de la composicion quimica de la Boramida ciclica como la recogida en la reivindicacion (14) para su aplicacion como agente antitumoral frente a la linea celular 15 tumoral colorrectal HT29.
16. Un uso de la composicion quimica de la boramida ciclica cuya estructura general se conforma segun la figura 1:

imagen8

R'3

R'4

Figura 1

Donde las posiciones R3 y R'3 se componen del radical metoxilo (-OMe), mientras que el resto de posiciones R y R' se componen del elemento Hidrogeno (H), para su 5 aplicacion como agente antibacteriano frente a:

- Especie GRAM positiva: Bacillus cereus
17. Un uso de la composicion quimica de la Boramida ciclica como la recogida en la 10 reivindicacion (16) para su aplicacion como agente antiviral frente al virus de la inmunodeficiencia humana (VIH).
18. Un uso de la composicion quimica de la Boramida ciclica cuya estructura general se conforma segun la figura 1:

imagen9

R'3

R'4

donde las posiciones de R3 y R'3, de manera independiente, se componen una del radical metoxilo (-OMe) y la otra del elemento hidrogeno (H), mientras que el resto de posiciones R y R' se componen del elemento hidrogeno (H), para su aplicacion como agente antibacteriano frente a:

5

- Especie de la Familia de actinomicetales: Nocardia cyriacigeorgica.

- Especies GRAM positiva: Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermis y Bacillus cereus.

- Especies GRAM negativa: Klebsiella pneumoniae, Enterobacter cloacae,

10 A cinetobacter baumannii y Escherichia coii

15