ES2310886T3 - Nueva forma cristalina de azitromicina. - Google Patents

Abstract

Una forma cristalina de azitromicina que es solvato de hemi-n-propanol de azitromicina monohidrato, caracterizándose dicha forma porque tiene un espectro de RMN en estado sólido de 13 C que comprende una pluralidad de picos con desplazamientos químicos de 179,6 ñ 0,2 ppm; 178,4 ñ 0,2 ppm; 25,2 ñ 0,4 ppm; 11,5 ñ 0,4 ppm; 10,0 ñ 0,2 ppm; 9,3 ñ 0,2 ppm; 8,1 ñ 0,2 ppm; 6,8 ñ 0,3 ppm.

Description

Nueva forma cristalina de azitromicina.

Esta invención se refiere a una forma cristalina de azitromicina. La azitromicina se vende comercialmente y es un antibiótico eficaz en el tratamiento de una amplia variedad de infecciones bacterianas. La forma cristalina de esta invención es así mismo útil como un agente antibiótico en mamíferos, incluyendo seres humanos, así como en peces y aves.

La azitromicina tiene la siguiente fórmula estructural

1

La azitromicina se describe y se reivindica en las Patentes de Estados Unidos 4.517.359 y 4.474.768. También se conoce como 9-desoxo-9a-aza-9a-metil-9a-homoeritromicina A.

Otras patentes o solicitudes de patente que tratan sobre la azitromicina incluyen: el documento EP 298.650, que reivindica la azitromicina dihidrato; la Patente de Estados Unidos 4.963.531, que reivindica un procedimiento de tratamiento de una cepa de la especie Toxoplasma gondii; la Patente de Estados Unidos 5.633.006, que reivindica una composición farmacéutica de comprimido masticable o suspensión líquida que tiene un amargor reducido; la Patente de Estados Unidos 5.686.587, que reivindica un intermedio útil en la preparación de azitromicina; la Patente de Estados Unidos 6.605.889, que reivindica una forma farmacéutica oral que reduce el "efecto del alimento" asociado con la administración de azitromicina; la Patente de Estados Unidos 6.068.859, que reivindica una forma farmacéutica de liberación controlada que contiene azitromicina; la Patente de Estados Unidos 5.498.699, que reivindica una composición que contiene azitromicina en combinación con metales divalentes o trivalentes; el documento EP 925.789, que reivindica un procedimiento de tratamiento de infecciones oculares; la solicitud de patente china CN 1123279A, que se refiere a sales de azitromicina solubles en agua; la solicitud de patente china CN 1046945C, que se refiere a sales dobles de dihidrogenofosfato de sodio de azitromicina; las solicitudes de patente china CN 1114960A y CN 1093370A, que se refieren a cristales de azitromicina, la solicitud de patente china CN 1161971A, que se refiere a cristales de azitromicina; la solicitud de patente china CN 1205338A, que se refiere a un procedimiento de preparación de sales de azitromicina solubles en agua; la Publicación Internacional WO 00/32203, que se refiere a un etanolato de azitromicina; la solicitud de patente europea EP 984.020, que se refiere a un clatrato de isopropanol de azitromicina monohidrato; la solicitud de patente europea EP-A-1103558, que se refiere a procedimientos para la preparación de azitromicina dihidrato cristalina y de azitromicina no cristalina; y la Publicación Internacional WO 01/00640, que se refiere a azitromicina en la forma de un monohidrato estable.

Sumario de la invención

La presente invención se refiere a formas cristalinas de azitromicina. Como se usa en la presente memoria, los términos "forma o formas cristalinas" o "forma o formas", a menos que se indique otra cosa, se refieren a una o más formas cristalinas de azitromicina.

En particular, la presente invención se refiere a una forma cristalina de azitromicina siendo dicha forma cristalina una forma J, forma que es como se define en la presente memoria. Las formas F, G, H, J, M, N, O y P pertenecen a la azitromicina de la familia I y pertenecen a el grupo espacial P2_{1} monoclínico con dimensiones de celda de a = 16,3 \pm 0,3 \ring{A}, b = 16,2 \pm 0,3 \ring{A}, c = 18,4 \pm 0,3 \ring{A} y beta = 109 \pm 2º. Las formas C, D, E y R pertenecen a la azitromicina de la familia II y pertenecen a un grupo espacial P2_{1}2_{1}2_{1} ortorrómbico con dimensiones de celda de a = 8,9 \pm 0,4 \ring{A}, b = 12,3 \pm 0,5 \ring{A} y c = 45,8 + 0,5 \ring{A}. La forma Q es diferente de las familias I y II.

La azitromicina de forma J es de la fórmula C_{38}H_{72}N_{2}O_{12}\cdotH_{2}O\cdot0,5C_{3}H_{7}OH en la estructura cristalina sencilla, siendo un solvato de hemi-n-propanol de azitromicina monohidrato. La forma J se caracteriza además porque contiene 2-5% de agua y 1-5% de 1-propanol en peso en muestras de polvo y tiene picos 2\theta de difracción de rayos X de polvo como se definen en la Tabla 9. El espectro de RMNssC de la forma J tiene dos picos de desplazamiento químico a aproximadamente 179 \pm 1 ppm, siendo a 179,6 \pm 0,2 ppm y 178,4 \pm 0,2 ppm, un conjunto de cinco picos entre 6,6 y 11,7 ppm y un pico de n-propanol a 25,2 \pm 0,4 ppm. El pico de disolvente puede ser amplio y relativamente débil de intensidad.

La invención se refiere además a procedimientos de preparación de la forma J por tratamiento de azitromicina con n-propanol para completar la disolución a 25-55ºC y enfriamiento con adición de agua para efectuar la cristalización.

La azitromicina de forma F es de la fórmula C_{38}H_{72}N_{2}O_{12}\cdotH_{2}O\cdot0,5C_{2}H_{5}OH en la estructura cristalina sencilla, siendo un solvato de hemi-etanol de azitromicina monohidrato. La forma F se caracteriza además porque contiene 2-5% de agua y 1-4% de etanol en peso en muestras de polvo y tiene picos 2\theta de difracción de rayos X de polvo como se definen en la Tabla 9. El espectro de RMNss ^{13}C (resonancia magnética nuclear en estado sólido) de la forma F tiene dos picos de desplazamiento químico a aproximadamente 179 \pm 1 ppm, siendo a 179,5 \pm 0,2 ppm y 178,6 \pm 0,2 ppm, un conjunto de cinco picos entre 6,4 y 11,0 ppm y picos de etanol a 58,0 \pm 0,5 ppm y 17,2 \pm 0,5 ppm. Los picos de disolvente pueden ser amplios y relativamente débiles de intensidad.

La azitromicina de forma G es de la fórmula C_{38}H_{72}N_{2}O_{12}\cdot1,5H_{2}O en la estructura cristalina sencilla, siendo azitromicina sesquihidrato. La forma G se caracteriza además porque contiene 2,5-6% de agua y <1% de disolvente o disolventes orgánicos en peso en muestras de polvo y tiene picos 2\theta de difracción de rayos X de polvo como se definen en la Tabla 9. El espectro de RMNssC de la forma G tiene un pico de desplazamiento químico a aproximadamente 179 \pm 1 ppm, siendo un pico a 179,5 \pm 0,2 ppm (puede haber una división de <0,3 ppm) y un conjunto de cinco picos entre 6,3 y 11,0 ppm.

La azitromicina de forma H es de la fórmula C_{38}H_{72}N_{2}O_{12}\cdotH_{2}O\cdotC_{3}H_{6}O_{2}, siendo un solvato de hemi-1,2-propanodiol de azitromicina monohidrato.

La azitromicina de forma M es de la fórmula C_{38}H_{72}N_{2}O_{12}\cdotH_{2}O\cdot0,5C_{3}H_{7}OH, siendo un solvato de hemi-isopropanol de azitromicina monohidrato. La forma M se caracteriza además porque contiene 2-5% de agua y 1-4% de 2-propanol en peso en muestras de polvo y tiene picos 2\theta de difracción de rayos X de polvo como se definen en la Tabla 9. El espectro de RMNss ^{13}C de la forma M tiene un pico de desplazamiento químico a aproximadamente 179 \pm 1 ppm, siendo a 179,6 \pm 0,2 ppm, un pico a 41,9 \pm 0,2 ppm y un conjunto de seis picos entre 6,9 y 16,4 ppm y un repique de isopropanol a 26,0 \pm 0,4 ppm. El pico de disolvente puede ser amplio y relativamente débil de intensidad.

La azitromicina de forma N es una mezcla de isomorfos de la Familia I. La mezcla puede contener porcentajes variables de isomorfos F, G, H, J, M y otros y cantidades variables de agua y disolventes orgánicos, tales como etanol, isopropanol, N-propanol, propilenglicol, acetona, acetonitrilo, butanol, pentanol, etc. El porcentaje en peso de agua puede variar del 1-5% y el porcentaje en peso total de disolventes orgánicos puede ser del 2-5%, con cada contenido de disolvente del 0,5 al 4%. Las muestras de la forma N presentan todos los picos característicos de los miembros de la Familia I en diversas proporciones. La forma N puede caracterizarse como "cristales mixtos" o "soluciones sólidas cristalinas" de isomorfos de la Familia I.

La forma N presenta desplazamientos químicos como una combinación de isomorfos en la Familia I. Los picos pueden variar en ppm de desplazamiento químico dentro de \pm 0,2 ppm y en intensidades relativas y anchura debido a la mezcla de una proporción variable de los isomorfos contenidos en la solución sólida cristalina de forma N.

La azitromicina de forma P es de la fórmula C_{38}N_{72}N_{2}O_{12}\cdotH_{2}O\cdot0,5C_{5}H_{12}O, siendo un solvato de hemi-n-pentanol de azitromicina monohidrato.

La azitromicina de forma Q es de la fórmula C_{38}N_{72}N_{2}O_{12}\cdotH_{2}O\cdot0,5C_{4}H_{8}O, siendo un solvato de hemi-tetrahidrofurano de azitromicina monohidrato.

La azitromicina de forma R es de la fórmula C_{38}N_{72}N_{2}O_{12}\cdotH_{2}O\cdotC_{5}H_{12}O, siendo otro solvato de monometil terc-butilo de azitromicina monohidrato.

La azitromicina de forma D es de la fórmula C_{38}N_{72}N_{2}O_{12}\cdotH_{2}O\cdotC_{6}H_{12} en su estructura cristalina sencilla, siendo un solvato de monociclohexano de azitromicina monohidrato. La forma D se caracteriza además porque contiene 2-6% de agua y 3-12% de ciclohexano en peso en muestras de polvo y tiene picos 2\theta de difracción de rayos X de polvo representativos como se definen en la Tabla 9. El espectro de RMNss ^{13}C de la forma D presenta un pico de desplazamiento químico a aproximadamente 179 \pm 1 ppm, siendo a 178,1 \pm 0,2 ppm, y picos a 103,9 \pm 0,2 ppm, 95,1 \pm 0,2 ppm, 84,2 \pm 0,2 ppm y un conjunto de 3 picos entre 6,4 y 11 ppm.

La azitromicina de forma E es de la fórmula C_{38}H_{72}N_{2}O_{12}\cdotH_{2}O\cdotC_{4}H_{8}O, siendo un solvato de mono-tetrahidrofurano de azitromicina monohidrato.

El patrón de polvo de difracción de rayos X para la azitromicina amorfa no presenta picos 2\theta agudos, pero tiene dos picos amplios redondeados. El primer pico aparece entre 4º y 13º. El segundo pico aparece en 13º y 25º.

La invención también se refiere a una composición farmacéutica para el tratamiento de una infección bacteriana o una infección protozoaria en un mamífero, pez o ave, que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de azitromicina de forma J y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

La invención también se refiere al uso de azitromicina de forma J en la preparación de un medicamento para tratar una infección bacteriana o una infección protozoaria en un mamífero, pez o ave.

La presente invención también se refiere a procedimientos de preparación de formas cristalinas de azitromicina que comprenden la suspensión de azitromicina en un disolvente apropiado o la disolución de azitromicina en un disolvente orgánico calentado o solución de disolvente orgánico/agua y la precipitación de la azitromicina cristalina por enfriamiento de la solución con reducción del volumen de disolvente o por disolución de la azitromicina en un disolvente o mezcla de disolventes y precipitación de la azitromicina cristalina mediante la adición de agua a la solución. La azitromicina en estado amorfo se prepara por calentamiento de la azitromicina cristalina al
vacío.

El término "tratamiento", como se usa en la presente memoria, a menos que se indique otra cosa, se refiere al tratamiento o a la prevención de una infección bacteriana o infección protozoaria, como se proporciona en el procedimiento de la presente invención, incluyendo la curación, la reducción de los síntomas o la ralentización de la evolución de dicha infección. Los términos "tratar" y "que trata" se definen de acuerdo con el término anterior
"tratamiento".

El término "sustancialmente libre", cuando se refiere a una forma cristalina de azitromicina designada, significa que está presente menos del 20% (en peso) de la forma o formas cristalinas designadas, más preferiblemente, que está presente menos del 10% (en peso) de la forma o formas designadas, más preferiblemente, que está presente menos del 5% (en peso) de la forma o formas designadas y, más preferiblemente, que está presente menos del 1% (en peso) de la forma o formas cristalinas designadas. Por ejemplo, una azitromicina de forma F sustancialmente libre de azitromicina dihidrato se refiere a una forma F con el 20% (en peso) o menos de azitromicina dihidrato, más preferiblemente, el 10% (en peso) o menos de azitromicina dihidrato, más preferiblemente, el 1% (en peso) de azitromicina
dihidrato.

El término "sustancialmente pura", cuando se refiere a una forma cristalina de azitromicina designada, significa que la forma cristalina designada contiene menos del 20% (en peso) de componentes residuales tales como formas cristalinas polimórficas o isomórficas alternativas de azitromicina. Se prefiere que una forma sustancialmente pura de azitromicina contenga menos del 10% (en peso) de formas cristalinas polimórficas o isomórficas alternativas de azitromicina, se prefiere más que menos del 5% (en peso) de formas cristalinas polimórficas o isomórficas alternativas de azitromicina y, más preferiblemente, menos del 1% (en peso) de formas cristalinas polimórficas o isomórficas alternativas de azitromicina.

El término "sustancialmente en ausencia de azitromicina dihidrato", cuando se refiere a azitromicina cristalina a granel o a una composición que contiene azitromicina cristalina, significa que la azitromicina cristalina contiene menos de aproximadamente el 5% (en peso) de azitromicina dihidrato, más preferiblemente, menos de aproximadamente el 3% (en peso) de azitromicina dihidrato y, más preferiblemente, menos del 1% (en peso) de azitromicina
dihidrato.

Como se usan en la presente memoria, a menos que se indique otra cosa, los términos "infección o infecciones bacterianas" o "infección protozoaria" incluyen infecciones bacterianas e infecciones protozoarias y enfermedades causadas por tales infecciones que aparecen en mamíferos, peces y aves, así como trastornos relacionados con infecciones bacterianas e infecciones protozoarias que pueden tratarse o prevenirse mediante la administración de antibióticos, tales como el compuesto de la presente invención. Dichas infecciones bacterianas e infecciones protozoarias y trastornos relacionados con dichas infecciones incluyen, pero sin limitación, los siguientes: neumonía, otitis media, sinusitis, bronquitis, tonsilitis y mastoiditis relacionadas con infección por Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Moraxella catarrhalis, Staphylococcus aureus o Peptostreptococcus spp.; faringitis, fiebre reumática y glomerulonefritis relacionadas con infección por Streptococcus pyogenes, estreptococos de los Grupos C y G, Clostridium diptheriae o Actinobacillus haemolyticum; infecciones del tracto respiratorio relacionadas con infección por Mycoplasma pneumoniae, Legionella pneumophila, Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae o Chlamydia pneumoniae; infecciones no complicadas de la piel y de tejidos blandos, abscesos y osteomielitis y fiebre puerperal relacionada con infección por Staphylococcus aureus, estafilococos coagulasa positivos (es decir, S. epidermidis, S. hemolyticus, etc.), Streptococcus pyogenes, Streptococcus agalactiae, gruposestreptocócicos C-F (estreptococos de colonias diminutas), estreptococos viridans, Corynebacterium minutissimum, Clostridium spp. o Bartonella henselae; infecciones agudas no complicadas del tracto urinario relacionadas con infección por Staphylococcus saprophyticus o Enterococcus spp.; uretritis y cervicitis; y enfermedades de transmisión sexual relacionadas con infección por Chlamydia trachomatis, Haemophilus ducreyi, Treponema pallidum, Ureaplasma urealyticum o Neiserria gonorrheae; enfermedades por toxinas relacionadas con infección por S. aureus (intoxicación alimentaria y síndrome de choque tóxico) o estreptococos de los Grupos A, B, y C úlceras relacionadas con infección por Helicobacter pylori; síndromes febriles sistémicos relacionados con infección por Borrelia recurrentis; enfermedad de Lyme relacionada con infección por Borrelia burgdorferi; conjuntivitis, queratitis y dacrocistitis relacionadas con infección por Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, S. aureus, S. pneumoniae, S. pyogenes, H. influenzae o Listeria spp.; enfermedad del complejo de Mycobacterium avium (MAC) diseminado relacionada con infección por Mycobacterium avium o Mycobacterium intracellulare; gastroenteritis relacionada con infección por Campylobacter jejuni; protozoos intestinales relacionados con infección por Cryptosporidium spp.; infección odontogénica relacionada con infección por estreptococos viridans; tos persistente relacionada con infección por Bordetella pertussis; gangrena gaseosa relacionada con infección por Clostridium perfringens o Bacteroides spp.; y aterosclerosis relacionada con infección con Helicobacter pylori o Chlamydia pneumoniae. También se incluyen aterosclerosis y malaria. Las infecciones bacterianas e infecciones protozoarias y trastornos relacionados con dichas infecciones que pueden tratarse o prevenirse en animales incluyen, pero sin limitación, las siguientes: enfermedad respiratoria bovina relacionada con infección por P. haem., P. multocida, Mycoplasma bovis o Bordetella spp.; enfermedad entérica en vacas relacionada con infección por E. coli o protozoos (es decir, coccidios, criptosporidios, etc.); mastitis en vacas lecheras relacionadas con infección o por Staph. aureus, Strep. uberis, Strep. agalactiae, Strep. dysgalactiae, Klebsiella spp., Corynebacterium o Enterococcus spp.; enfermedad respiratoria en cerdos relacionada con infección por A. pleuro., P. multocida o Mycoplasma spp.; enfermedad entérica en cerdos relacionada con infección por E. coli, Lawsonia intracellularis, Salmonella o Serpulina hyodyisinteriae; podredumbre de las patas en vacas relacionada con infección por Fusobacterium spp.; metritis en vacas relacionada con infección por E. coli; verrugas peludas en vacas relacionadas con infección por Fusobacterium necrophorum o Bacteroides nodosus; ojo rosado en vacas relacionado con infección por Moraxella bovis; abortos prematuros en vacas relacionados con infección por protozoos (es decir, neosporium); infecciones del tracto urinario en perros y gatos relacionadas con infección por E. coli; infecciones de la piel y de tejidos blandos en perros y gatos relacionadas con infección por Staph. epidermidis, Staph. intermedius, estafilococos coagulasa negativoso P. multocida; e infecciones dentales o de la boca en perros y gatos relacionadas con infección por Alcaligenes spp., Bacteroides spp., Clostridium spp., Enterobacter spp., Eubacterium, Peptostreptococcus, Porphyromonas o Prevotella. Se hace referencia a otras infecciones bacterias e infecciones protozoarias y trastornos relacionados con dichas infecciones que pueden tratarse o prevenirse de acuerdo con el procedimiento de la presente invención en J. P. Sanford y col., "The Sanford Guide To Antimicrobial Therapy," 26ª Edición, (Antimicrobial Therapy, Inc.,
1996).

La presente invención también incluye compuestos isotópicamente marcados en los que uno o más átomos se reemplazan por un átomo que tiene una masa atómica o un número de masa atómica diferente de la masa o número de masa atómica que se encuentra habitualmente en la naturaleza. Los ejemplos de isótopos que pueden incorporarse en compuestos de la invención incluyen isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxígeno, fósforo, azufre, fluoro y cloro, tales como ^{2}H, ^{3}H, ^{13}C, ^{14}C, ^{15}N, ^{18}O y ^{17}O. Dichos compuestos radiomarcados y marcados isotópicamente estables son útiles como herramientas de diagnóstico o investigación.

Breve descripción de los dibujos

La figura 1 es un patrón de difracción de rayos X de polvo calculado de la forma A de azitromicina. La escala de la abscisa está en grados 2-theta (2 \theta). La ordenada es la intensidad en recuentos.

La figura 2 es un patrón de difracción de rayos X de polvo experimental de la forma A de azitromicina. La escala de la abscisa está en grados 2-theta (2 \theta). La ordenada es la intensidad en recuentos.

La figura 3 es una superposición de las Figuras 1 y 2 con los patrones de difracción calculada de la forma A de azitromicina (Figura 1) en la parte inferior y el patrón de difracción experimental de la forma A de azitromicina (Figura 2) en la parte superior. La escala de la abscisa está en grados 2-theta (2 \theta). La ordenada es la intensidad en recuentos.

La figura 4 es un patrón de difracción de rayos X de polvo calculado de la forma C de azitromicina. La escala de la abscisa está en grados 2-theta (2 \theta). La ordenada es la intensidad en recuentos.

La figura 5 es un patrón de difracción de rayos X de polvo calculado de la forma D de azitromicina. La escala de la abscisa está en grados 2-theta (2 \theta). La ordenada es la intensidad en recuentos.

La figura 6 es un patrón de difracción de rayos X de polvo experimental de la forma D de azitromicina. La escala de la abscisa está en grados 2-theta (2 \theta). La ordenada es la intensidad en recuentos.

La figura 7 es una superposición de las Figuras 5 y 6 con el patrón de difracción calculado de la forma D de azitromicina (Figura 5) en la parte inferior y el patrón de difracción experimental de la forma D (Figura 6) en la parte superior. La escala de la abscisa está en grados 2-theta (2 \theta). La ordenada es la intensidad en recuentos.

La figura 8 es un patrón de difracción de rayos X de polvo calculado de la forma E de azitromicina. La escala de la abscisa está en grados 2-theta (2 \theta). La ordenada es la intensidad en recuentos.

La figura 9 es un patrón de difracción de rayos X de polvo calculado de la forma F de azitromicina. La escala de la abscisa está en grados 2-theta (2 \theta). La ordenada es la intensidad en recuentos.

La figura 10 es un patrón de difracción de rayos X de polvo experimental de la forma F de azitromicina. La escala de la abscisa está en grados 2-theta (2 \theta). La ordenada es la intensidad en recuentos.

La figura 11 es una superposición de las Figuras 9 y 10 con el patrón de difracción calculado de la forma F de azitromicina (Figura 9) en la parte inferior y el patrón de difracción experimental de la forma F de azitromicina (Figura 10) en la parte superior. La escala de la abscisa está en grados 2-theta (2 \theta). La ordenada es la intensidad en
recuentos.

La figura 12 es un patrón de difracción de rayos X de polvo calculado de la forma G de azitromicina. La escala de la abscisa está en grados 2-theta (2 \theta). La ordenada es la intensidad en recuentos.

La figura 13 es un patrón de difracción de rayos X de polvo experimental de la forma G de azitromicina. La escala de la abscisa está en grados 2-theta (2 \theta). La ordenada es la intensidad en recuentos.

La figura 14 es una superposición de las Figuras 12 y 13 con el patrón de difracción calculado de la forma G de azitromicina (Figura 12) en la parte inferior y el patrón de difracción experimental de la forma G de azitromicina (Figura 13) en la parte superior. La escala de la abscisa está en grados 2-theta (2 \theta). La ordenada es la intensidad en recuentos.

La figura 15 es un patrón de difracción de rayos X de polvo calculado de la forma J de azitromicina. La escala de la abscisa está en grados 2-theta (2 \theta). La ordenada es la intensidad en recuentos.

La figura 16 es un patrón de difracción de rayos X de polvo experimental de la forma J de azitromicina. La escala de la abscisa está en grados 2-theta (2 \theta). La ordenada es la intensidad en recuentos.

La figura 17 es una superposición de las Figuras 15 y 16 con el patrón de difracción calculado de la forma J de azitromicina (Figura 15) en la parte inferior y el patrón de difracción experimental de la forma J de azitromicina (Figura 16) en la parte superior. La escala de la abscisa está en grados 2-theta (2 \theta). La ordenada es la intensidad en recuentos.

La figura 18 es un patrón de difracción de rayos X de polvo experimental de la forma M de azitromicina. La escala de la abscisa está en grados 2-theta (2 \theta). La ordenada es la intensidad en recuentos.

La figura 19 es un patrón de difracción de rayos X de polvo experimental de la forma N de azitromicina. La escala de la abscisa está en grados 2-theta (2 \theta). La ordenada es la intensidad en recuentos.

La figura 20 es un patrón de difracción de rayos X de polvo experimental de azitromicina amorfa. La escala de la abscisa está en grados 2-theta (2 \theta). La ordenada es la intensidad en recuentos.

La figura 21 es un espectro de RMN en estado sólido de ^{13}C de la forma A de azitromicina.

La figura 22 es un espectro de RMN en estado sólido de ^{13}C de la forma D de azitromicina.

La figura 23 es un espectro de RMN en estado sólido de ^{13}C de la forma F de azitromicina.

La figura 24 es un espectro de RMN en estado sólido de ^{13}C de la forma G de azitromicina.

La figura 25 es un espectro de RMN en estado sólido de ^{13}C de la forma J de azitromicina.

La figura 26 es un espectro de RMN en estado sólido de ^{13}C de la forma M de azitromicina.

La figura 27 es un espectro de RMN en estado sólido de ^{13}C de la forma N de azitromicina.

La figura 28 es un espectro de RMN en estado sólido de ^{13}C de azitromicina amorfa.

La figura 29 es un espectro de RMN en estado sólido de ^{13}C de un comprimido farmacéutico que contiene azitromicina de forma G.

La figura 30 es un patrón de difracción de rayos X de polvo experimental de la forma Q de azitromicina. La escala de la abscisa está en grados 2-theta (2 \theta). La ordenada es la intensidad en recuentos.

La figura 31 es un patrón de difracción de rayos X de polvo experimental de la forma R de azitromicina. La escala de la abscisa está en grados 2-theta (2 \theta). La ordenada es la intensidad en recuentos.

La figura 32 es un espectro de RMN en estado sólido de ^{13}C de la forma H de azitromicina.

La figura 33 es un espectro de RMN en estado sólido de ^{13}C de la forma R de azitromicina.

Descripción detallada de la invención

Se ha descubierto que la azitromicina existe en diferentes formas cristalinas. Una dihidrato, la forma A, y un hidrato no estequiométrico, la forma B, se describen en la Patente Europea EP 298 650 y en la Patente de Estados Unidos 4.512.359, respectivamente. Se han descubierto otras dieciséis formas, en concreto, las formas C, D, E, F, G, H, I, J, K, L, M, N, O, P, Q y R. Estas formas son hidratos o hidratos/solvatos de azitromicina en forma de base libre. Las formas L y K son las formas de hidrato inferior metaestables de A, detectadas a una temperatura elevada. Se han resuelto las estructuras cristalinas de las formas A, C, D, E, F, G, H, J y O. Los datos estructurales de estas formas cristalinas se proporcionan a continuación:

\vskip1.000000\baselineskip

TABLA 1 Datos cristalográficos de la forma A de azitromicina

2

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip1.000000\baselineskip

TABLA 2 Datos cristalográficos de la forma C de azitromicina

3

4

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip1.000000\baselineskip

TABLA 3 Datos cristalográficos de la forma D de azitromicina

5

\newpage

TABLA 4 Datos cristalográficos de la forma E de azitromicina

6

7

TABLA 5 Datos cristalográficos de la forma F de azitromicina

8

9

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip1.000000\baselineskip

TABLA 6 Datos cristalográficos de la forma G de azitromicina

10

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip1.000000\baselineskip

TABLA 7 Datos cristalográficos de la forma H de azitromicina

11

12

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip1.000000\baselineskip

TABLA 8 Datos cristalográficos de la forma J de azitromicina

13

TABLA 8A Datos cristalográficos de la forma O de azitromicina

14

\vskip1.000000\baselineskip

Entre estas dieciséis formas cristalinas, se identificaron dos familias isomórficas. La familia I incluye las formas F, G, H, J, M, N, O y P. La familia II incluye las formas C, D, E y R. La forma Q es diferente de las familias I y II. Las formas dentro de una familia son isomorfos que cristalizan en el mismo grupo espacial con una ligera variación de los parámetros de celda y comprenden estructuras químicamente relacionadas pero una composición elemental diferente. En este caso, la variación en la composición química entre los isomorfos surge de la incorporación de diferentes moléculas de agua/disolvente. Por consiguiente, los isomorfos presentan patrones de difracción de rayos X y espectros de RMN en estado sólido (RMNss) similares pero no idénticos. Otras técnicas tales como la espectroscopía de infrarrojo cercano (NIR), calorimetría diferencial de barrido (DSC), cromatografía de gases (GC), análisis termogravimétrico (TGA) o análisis termogravimétrico/espectroscopía de infrarrojo (TG-IR), análisis de humedad Karl Fischer (KF) y el modelado o la visualización molecular proporcionan datos para la identificación afirmativa de isomorfos. Se determinaron las temperaturas de deshidratación/desolvatación mediante DSC con una velocidad de calentamiento de 5ºC/min.

Forma C: Esta forma cristalina se identificó a partir de una estructura cristalina sencilla (Tabla 2) -un monohidrato de azitromicina. Tiene el grupo espacial de P2_{1}2_{1}2_{1} y parámetros de celda similares a los de las formas D y E; por lo tanto, pertenece a los isomorfos de la Familia II. Su patrón de polvo calculado es similar al de las formas D y E.

Forma D: La forma D se cristalizó a partir de ciclohexano. La estructura cristalina sencilla de la forma D muestra una estequiometría de un monohidrato/solvato de monociclohexano de azitromicina (Tabla 3). Se descubrió que las moléculas de ciclohexano estaban desordenadas en la red cristalina. A partir de los datos de un solo cristal, el contenido de agua y ciclohexano calculado de la forma D es del 2,1 y 9,9%, respectivamente. Tanto el patrón de polvo como el patrón de polvo calculado de la forma D son similares a los de las formas C y E. Las muestras de polvo de la forma D mostraron una endoterma de desolvatación/deshidratación con una temperatura de partida de aproximadamente 87ºC y una amplia endoterma entre 200-280ºC (descomposición) en el análisis de DSC a 5ºC/min de 30-300ºC.

La Forma D se prepara por suspensión de azitromicina en ciclohexano durante 2-4 días. La azitromicina de forma D sólida se recoge por filtración y se seca.

Forma E: La forma E se obtuvo como un solo cristal recogido en un medio de THF/agua. Es un monohidrato y un solvato de mono-THF por análisis de un solo cristal (Tabla 4). Por su estructura cristalina sencilla, el patrón de PXRD calculado es similar al de la forma C y al de la forma D, convirtiéndolo en un isomorfo de la Familia II.

La Forma E se prepara por disolución de azitromicina en THF (tetrahidrofurano). La difusión de vapor de agua sobre una solución de THF de azitromicina saturada a lo largo del tiempo produce cristales de Forma E.

Forma F: El monocristal de forma F cristalizó en un grupo espacial monoclínico, P2_{1}, conteniendo la unidad asimétrica dos azitromicinas, dos aguas y un etanol, como un monohidrato/hemi-etanolato (Tabla 5). Es isomórfica con respecto a las formas de todas las formas cristalinas de la azitromicina de la familia I. El patrón de PXRD calculado de esta forma es similar al de otros isomorfos de la familia I. El contenido teórico de agua y etanol es del 2,3 y del 2,9%, respectivamente. Las muestras de polvo muestran una endoterma de deshidratación/desolvatación a una temperatura de partida entre 110-125ºC. La forma F se prepara por disolución de azitromicina en etanol (1-3 volúmenes en peso) a una temperatura de aproximadamente 50-70ºC. Tras la disolución completa, la solución se enfría a una temperatura por debajo de la ambiental para provocar la precipitación. El volumen de etanol puede reducirse por destilación al vacío con agitación durante 1-2 horas para aumentar el rendimiento. Como alternativa, pueden añadirse aproximadamente 0,1-2 volúmenes de agua (opcionalmente enfriada a 0-20ºC), recogiendo los sólidos dentro de los 30 minutos posteriores a la adición de agua. El enfriamiento de la solución de etanol de azitromicina antes de la adición de agua por debajo de 20ºC, preferiblemente por debajo de 15ºC, más preferiblemente por debajo de 10 y más preferiblemente 5ºC, da como resultado una forma F de azitromicina sustancialmente pura. La azitromicina de forma F sólida se recoge por filtración y se seca.

Forma G: La estructura del monocristal de la forma G consiste en dos moléculas de azitromicina y tres moléculas de agua por unidad asimétrica (Tabla 6). Esto se corresponde con un sesquihidrato con un contenido teórico de agua del 3,5%. El contenido de agua de muestras de polvo de la forma G varía de aproximadamente el 2,5 a aproximadamente el 6%. El disolvente orgánico residual total es menor del 1% del disolvente correspondiente usado para la cristalización, que está por muy por debajo de las cantidades estequiométricas de solvato. Esta forma se deshidrata con una temperatura de partida de aproximadamente 110-120ºC.

La Forma G puede prepararse por adición de azitromicina a una mezcla de disolvente orgánico/agua premezclada (1/1 en volumen), en la que el disolvente orgánico puede ser metanol, acetona, acetonitrilo, etanol o isopropanol. La mezcla se agita y se calienta a una temperatura elevada, por ejemplo de 45-55ºC, durante 4-6 horas para provocar la disolución. La precipitación se produce durante el enfriamiento a temperatura ambiente. La azitromicina de forma G sólida se recoge por filtración y se seca.

Forma H: Esta forma cristalina es un monohidrato/solvato de hemi-propilenglicol de azitromicina en forma de base libre (Tabla 7). Se aisló a partir de una solución de formulación que contenía propilenglicol. La estructura cristalina de la forma H es isomórfica con respecto a las formas cristalinas de la Familia I.

La forma H de azitromicina se prepara por disolución de azitromicina dihidrato en 6 volúmenes de propilenglicol. A la solución de propilenglicol de azitromicina resultante se añaden 2 volúmenes de agua y se produce la precipitación. La suspensión se agita durante 24 horas y los sólidos se filtran y se secan al aire a temperatura ambiente para dar la Forma H cristalina.

Forma J: La forma J es un monohidrato/solvato de hemi-n-propanol (Tabla 8). El contenido de disolvente calculado es de aproximadamente el 3,8% de n-propanol y aproximadamente el 2,3% de agua. Los datos experimentales muestran un contenido de aproximadamente el 2,5 a aproximadamente el 4,0% de n-propanol y de aproximadamente el 2,5 a aproximadamente el 3% de agua para muestras de polvo. Su patrón de PXRD es muy similar al de sus isomorfos F, G, H, M y N. Como F y G, las muestras de polvo tienen una endoterma de deshidratación/desolvatación a
115-125ºC.

La Forma J se prepara por disolución de azitromicina en 4 volúmenes de n-propanol a una temperatura de aproximadamente 25-55ºC. Se añade agua, aproximadamente 6-7 volúmenes, a temperatura ambiente y la suspensión se agita de forma continua durante 0,5-2 horas. La azitromicina de forma J sólida se recoge por filtración y se seca.

Forma K: El patrón de PXRD de la forma K se descubrió en una mezcla de la forma A de azitromicina y cera microcristalina después del atemperamiento a 95ºC durante 3 horas. Es un hidrato inferior de la forma A y es una forma metaestable a una temperatura elevada.

Forma L: Esta forma sólo se ha observado tras el calentamiento del dihidrato; forma A. En experimentos de difracción de rayos X de polvo a temperatura variable (VT-PXRD), aparece un nuevo patrón de difracción de rayos X de polvo cuando la forma A se calienta hasta aproximadamente 90ºC. La nueva forma, designada forma L, es un hidrato inferior de la forma A porque la forma A pierde aproximadamente el 2,5% en peso a 90ºC mediante TGA, de modo que se corresponde con una conversión en un monohidrato. Cuando se enfría a temperatura ambiente, la forma L revierte rápidamente a forma A.

Forma M: Aislada a partir de una suspensión de isopropanol/agua, la forma M incorpora tanto agua como isopropanol. Su patrón de PXRD y espectro de RMNss son muy similares a los de los isomorfos de la Familia I, indicando que pertenece a la Familia I. Por analogía con las estructuras cristalinas conocidas de isomorfos de la Familia I, la estructura del monocristal de la forma M sería un monohidrato/hemi-isopropanolato. La temperatura de deshidratación/desolvatación de la forma M es de aproximadamente 115-125ºC.

La Forma M puede prepararse por disolución de azitromicina en 2-3 volúmenes de isopropanol (IPA) a 40-50ºC. La solución se enfría hasta por debajo de 15ºC, preferiblemente por debajo de 10ºC, más preferiblemente a aproximadamente 5ºC, y se añade 2-4 volúmenes de agua fría a aproximadamente 5ºC para efectuar la precipitación. Pueden añadirse semillas de cristales de forma M al comienzo de la cristalización. La suspensión se agita menos de aproximadamente 5 horas, preferiblemente menos de aproximadamente 3 horas, más preferiblemente menos de aproximadamente 1 hora y, más preferiblemente, aproximadamente 30 minutos o menos y los sólidos se recogen por filtración. Los sólidos pueden volver a suspenderse en isopropanol. Este procedimiento proporciona forma M sustancialmente en ausencia de azitromicina dihidrato.

Forma N: Aislada a partir de una suspensión de agua/etanol/isopropanol de la forma A, los cristales de forma N pueden contener cantidades variables de los disolventes de la cristalización y agua. Su contenido de agua varía de aproximadamente el 3,4 a aproximadamente el 5,3% en peso. El análisis mediante GC Headspace revela un contenido de disolvente variable de etanol e isopropanol. El contenido de disolvente total de muestras de forma N es habitualmente inferior a aproximadamente el 5%, dependiendo de las condiciones de preparación y secado. El patrón de PXRD de la forma N es similar al de las formas F, G, H, J y M de los isomorfos de la Familia I. La endoterma o endotermas de deshidratación/desolvatación de las muestras de la forma N pueden ser más amplias y pueden variar entre
110-130ºC.

Se pueden preparar azitromicina de forma N por recristalización de azitromicina a partir de una mezcla de una red cristalina de azitromicina que incorpora disolventes orgánicos y agua, tales como etanol, isopropanol, n-propanol, acetona, acetonitirilo, etc. La mezcla de disolvente se calienta hasta 45-60ºC y se añade azitromicina a la mezcla de disolvente caliente hasta un total de aproximadamente 4 volúmenes. Tras la disolución, se añaden 1-3 volúmenes de agua con agitación continua a 45-60ºC. La azitromicina de forma N precipita como un sólido blanco. La suspensión se deja enfriar a temperatura ambiente con agitación. La azitromicina de forma N sólida se aísla por filtración y se
seca.

Forma O: Esta forma cristalina es un solvato de hemi-n-butanol hemihidrato de azitromicina en forma de base libre, por los datos estructurales de un solo cristal (Tabla 8A). Se aisló a partir de una solución de n-butanol de azitromicina con difusión de antidisolvente. La estructura cristalina de la forma O es isomórfica con respecto a las formas cristalinas de la Familia I.

La azitromicina está completamente disuelta en el n-butanol. La adición de un antidisolvente, tal como hexano, agua, IPE u otro no disolvente por difusión da como resultado la precipitación de la Forma O.

Forma P: Ésta es una forma cristalina propuesta, que es un solvato de hemi-n-pentanol hemihidrato de azitromicina en forma de base libre. Puede aislarse a partir de una solución de n-pentanol de azitromicina con difusión de un antidisolvente. La estructura cristalina de la forma P es isomórfica con respecto a las formas cristalinas de la Familia I.

La forma P de azitromicina puede prepararse de la forma siguiente: la azitromicina se disuelve completamente en n-pentanol; la adición de un antidisolvente, tal como hexano, agua, éter isopropílico (IPE) u otro no disolvente por difusión da como resultado la precipitación de la Forma P.

Forma Q: La forma cristalina de Q presenta un patrón de difracción de rayos X de polvo único. Contiene aproximadamente el 4% de agua y aproximadamente el 4,5% de THF, siendo un solvato de hemi-THF hidrato. La temperatura de deshidratación/desolvatación principal es de aproximadamente 80 a aproximadamente 110ºC.

La azitromicina dihidrato se disuelve en 6 volúmenes de THF y se añaden 2 volúmenes de agua. Se deja que la solución se evapore hasta la sequedad en condiciones ambientales para dar la Forma Q cristalina.

Forma R: Esta forma cristalina se prepara por adición de azitromicina amorfa a 2,5 volúmenes de éter terc-butilmetílico (MTBE). La suspensión blanca espesa resultante se agitó 3 días en condiciones ambientales. Se recogen los sólidos por filtración al vacío y se secan al aire. La forma R de azitromicina a granel resultante tiene un contenido teórico de agua del 2,1% en peso y un contenido teórico de éter metil-terc-butílico del 10,3% en peso.

Debido a la similitud de sus estructuras, los isomorfos tienden a formar una mezcla de las formas dentro de una familia, a veces denominada como "cristales mixtos" o "solución sólida cristalina". La forma N es una solución cristalina sólida de este tipo y se descubrió que era una mezcla de isomorfos de la Familia I por la composición de disolvente y los datos de RMN en estado sólido.

Tanto los isomorfos de la Familia I como de la Familia II son hidratos y/o solvatos de azitromicina. Las moléculas de disolvente en las cavidades tienen tendencia a intercambiarse entre el disolvente y el agua en condiciones específicas. Por lo tanto, el contenido de disolvente/agua de los isomorfos puede variar en cierto grado.

Las formas cristalinas de la Familia I isomórfica son más estables que la forma A cuando se someten a calentamiento. Las formas F, G, H, J, M y N demostraron temperaturas de deshidratación de partida superiores a 110-125ºC que las de la Forma A, con una temperatura de comienzo de la deshidratación a de aproximadamente 90 a aproximadamente 110ºC, y una conversión en estado sólido simultánea en forma L a aproximadamente 90ºC.

Azitromicina amorfa: Todas las formas cristalinas de azitromicina contienen agua o un disolvente o disolventes, o tanto agua como disolventes. Cuando el agua y el disolvente o disolventes se eliminan de los sólidos cristalinos, la azitromicina se vuelve amorfa. Los sólidos amorfos tienen la ventaja de velocidades de disolución iniciales elevadas.

El material de partida para la síntesis de las diversas formas cristalinas en los ejemplos a continuación era azitromicina dihidrato, a menos que se indique otra cosa. Pueden usarse otras formas de azitromicina, tales como azitromicina amorfa u otras formas cristalinas no dihidrato de azitromicina.

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplos

Ejemplo 1

Preparación de la Forma D

La Forma D se preparó por suspensión de azitromicina dihidrato en ciclohexano durante 2-4 días a una temperatura elevada, por ejemplo, de 25-50ºC. Los sólidos cristalinos de la forma D se recogieron por filtración y se secaron.

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplo 2

Preparación de la Forma F

2A: Se añadió lentamente azitromicina dihidrato a un volumen de etanol caliente, a aproximadamente 70ºC, y se agitó hasta una disolución completa a de 65 a 70ºC. Pueden introducirse semillas de la Forma F al 1-2% en peso para facilitar la cristalización. La solución se dejó enfriar gradualmente hasta 2-5ºC y se añadió un volumen de agua fría. Los sólidos cristalinos se recogieron en seguida (preferiblemente, en menos de 30 minutos) después de la adición de agua por filtración al vacío.

2B: Se añade lentamente azitromicina dihidrato a un volumen de etanol caliente, a aproximadamente 70ºC, y se agita hasta una disolución completa a de 65 a 70ºC. Pueden introducirse semillas de la Forma F al 1-2% en peso para facilitar la cristalización. La solución se deja enfriar gradualmente hasta 2-5ºC y el volumen de etanol puede reducirse por destilación al vacío. Después de agitar hasta 2 horas, los sólidos cristalinos se recogen por filtración al vacío. El aislamiento de los cristales produce azitromicina de forma F sustancialmente pura, azitromicina de forma F sustancialmente libre de azitromicina de forma G y azitromicina de forma F sustancialmente libre de azitromicina dihidrato.

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplo 3

Preparación de la Forma G

Se cargó un recipiente de reacción con azitromicina de forma A. En un recipiente separado, se mezclaron 1,5 volúmenes de metanol y 1,5 volúmenes de agua. La mezcla de disolvente se añadió al recipiente de reacción que contenía la azitromicina de forma A. La suspensión se agitó con calentamiento a 50ºC durante aproximadamente 5 horas. Se interrumpió el calentamiento y la suspensión se dejó enfriar con agitación a temperatura ambiente. La azitromicina de forma G se recogió por filtración y se dejó secar al aire durante aproximadamente 30 minutos. La azitromicina de forma G recogida se secó adicionalmente en un horno al vacío a 45ºC. Este procedimiento produce azitromicina de forma G sustancialmente pura y azitromicina de forma G sustancialmente libre de azitromicina
dihidrato.

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplo 4

Preparación de la Forma J

Se preparó la forma J por disolución de azitromicina en 4 volúmenes de n-propanol a una temperatura de aproximadamente 25ºC. Se añadió agua (6,7 volúmenes) y la suspensión se agitó de forma continua durante 1 hora, seguida de enfriamiento hasta aproximadamente 0ºC. La azitromicina de forma J sólida se recogió por filtración y se
secó.

\newpage

Ejemplo 5

Preparación de Forma M Sustancialmente en Ausencia de Azitromicina Dihidrato

5A: Se disuelve completamente azitromicina dihidrato en 2 volúmenes de isopropanol caliente a 40-50ºC. Opcionalmente pueden introducirse semillas de Forma M para facilitar la cristalización. La solución se enfría después hasta 0-5ºC y se añaden 4 volúmenes de agua fría como antidisolvente y los sólidos se recogen por filtración al vacío. Los sólidos se vuelven a suspender en 1 volumen de isopropanol durante 3-5 horas a 40-45ºC y después se enfrían hasta 0-5ºC. Los sólidos cristalinos se recogen en seguida (en aproximadamente 15 minutos) después de la adición de agua por filtración al vacío. Los sólidos se vuelven a suspender en de 0,5 a 1 volumen de isopropanol a 25-40ºC y se enfrían hasta aproximadamente 5ºC, seguido de filtración para recoger los sólidos de la forma M.

5B: Se disolvió completamente azitromicina dihidrato (1940 gramos) en 2 volúmenes de isopropanol caliente (45ºC). La solución transparente resultante se filtró a través de un filtro de 0,2 \mum en línea en un matraz limpio. La temperatura se mantuvo a 45ºC y la solución se sembró con cristales de forma M. Se añadieron 7,8 l de agua fría en 8 minutos. La solución se enfrió a 5ºC y se observó una suspensión espesa. Los sólidos se aislaron por filtración al vacío y se transfirieron a un matraz limpio. La azitromicina cristalina se suspendió en 1 volumen de alcohol isopropanólico con calentamiento a 35ºC. La suspensión se enfrió después a 5ºC durante 30 minutos y el material cristalino sólido se extrajo por filtración.

Estos procedimientos produjeron azitromicina de forma M sustancialmente pura, azitromicina de forma M sustancialmente libre de azitromicina de forma G y azitromicina de forma M sustancialmente libre de azitromicina
dihidrato.

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplo 6

Preparación de la Forma N

Se añadieron dos volúmenes de etanol y 2 volúmenes de isopropanol a un recipiente de reacción y se calentaron a 50ºC. Se añadió forma A de azitromicina con agitación a la mezcla de etanol/isopropanol calentada para producir una solución transparente. El recipiente de reacción se cargó con 2 volúmenes de agua destilada (temperatura ambiente). Se continuó con la agitación a 50ºC y la azitromicina de forma N sólida precipitó después de aproximadamente 1 hora. Se interrumpió el calentamiento 5 horas después de la adición del agua. La suspensión se dejó enfriar a temperatura ambiente. La azitromicina de forma N precipitada se recogió por filtración y se secó durante 4 horas en un horno al vacío a 45ºC.

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplo 7

Preparación de azitromicina amorfa

Se calentó azitromicina de forma A cristalina hasta 110-120ºC en un horno durante una noche al vacío. Los sólidos amorfos se recogieron y se conservaron con desecante según fuera necesario.

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplo 8

Preparación de la Forma H

Se disolvió azitromicina dihidrato u otras formas cristalinas en 6 volúmenes de propilenglicol. A la solución de propilenglicol de azitromicina resultante se añadieron 2 volúmenes de agua y se produjo la precipitación. La suspensión se agitó durante 24 horas y los sólidos se filtraron y se secaron al aire a temperatura ambiente para dar la Forma H cristalina.

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplo 9

Preparación de la Forma Q

El polvo cristalino se preparó por disolución de 500 mg de Forma A de azitromicina en 2 ml de THF. A la solución transparente incolora a temperatura ambiente se añadió 1 ml de agua. Cuando la solución se volvió turbia se añadió 1 ml adicional de THF para disolver la azitromicina completamente y la solución se agitó a temperatura ambiente. Se dejó que se evaporara el disolvente durante 7 días, después de los cuales se recogieron los sólidos secos y se caracterizaron.

\newpage

Ejemplo 10

Análisis de difracción de rayos X de polvo

Se recogieron los patrones de polvo usando un difractómetro Bruker D5000 (Madison, Wisconsin) equipado con radiación de cobre y rendijas fijas (1,0, 1,0, 0,6 mm) y un detector de estado sólido Kevex. Se recogieron datos de 3,0 a 40,0 grados en 2-theta usando un tamaño de etapa de 0,04 grados y un tiempo de etapa de 1,0 segundos. Los resultados se resumen en la Tabla 9.

El patrón de difracción de PXRD experimental de la forma A de azitromicina se proporciona en la figura 2.

El patrón de difracción de PXRD experimental de la forma D de azitromicina se proporciona en la figura 6.

El patrón de difracción de PXRD experimental de la forma F de azitromicina se proporciona en la figura 10.

El patrón de difracción de PXRD experimental de la forma G de azitromicina se proporciona en la figura 13.

El patrón de difracción de PXRD experimental de la forma J de azitromicina se proporciona en la figura 16.

El patrón de difracción de PXRD experimental de la forma M de azitromicina se proporciona en la figura 18.

El patrón de difracción de PXRD experimental de la forma N de azitromicina se proporciona en la figura 19.

El patrón de difracción de PXRD experimental de la azitromicina amorfa se proporciona en la figura 20.

El patrón de difracción de PXRD experimental de la forma Q de azitromicina se proporciona en la figura 30.

El patrón de difracción de PXRD experimental de la forma R de azitromicina se proporciona en la figura 31.

La variabilidad experimental de una muestra a otra es de aproximadamente \pm 0,2º en 2-theta y se observaron las mismas variaciones entre el polvo calculado de la estructura de un solo cristal y los datos experimentales. El análisis detallado demostró que los isomorfos de la Familia I pueden diferenciarse por el PXRD, proporcionándose conjuntos de picos característicos en la Tabla 9.

\vskip1.000000\baselineskip

TABLA 9 Picos de Difracción de Rayos X de Polvo de Azitromicina en 2-theta \pm 0,2º

15

16

17

\vskip1.000000\baselineskip

Los picos subrayados son los picos característicos entre las formas A, D, la Familia I y Q.

Los picos en cursiva y subrayados son los conjuntos de picos que son característicos dentro de los isomorfos de la Familia I.

Los isomorfos de la Familia I tienen las siguientes características comunes: los picos de difracción a 6,2, 11,2, 21,0 \pm 0,1 y 22,5 \pm 0,1 grados en 2-theta. Cada isomorfo presenta conjuntos de picos de difracción representativos que se proporcionan a continuación, y cada conjunto tienen un espaciamiento característico entre los picos.

Las posiciones de los picos de difracción descritas son precisas dentro de \pm 0,2 grados de 2-theta.

Un patrón de PXRD representativo de la forma A se muestra en la figura 2. La Forma A presenta picos a 9,3, 13,0 y 18,7 grados de 2-theta.

Un patrón de PXRD representativo de la forma D se muestra en la figura 6. La Forma D presenta picos a 3,9, 10,1, 10,6 y 21,4 grados de 2-theta.

Un patrón de PXRD representativo de la Forma F se muestra en la figura 10. La Forma F presenta los picos característicos de la Familia I y tres conjuntos de picos, siendo el conjunto 1 a 2-theta de 11,2 y 11,5; el conjunto 2 a 2-theta de 13,9, 14,3, 14,7 y 14,8; el conjunto 3 a 2-theta de 16,2, 16,6, 17,1, 17,2 y 17,7.

Un patrón de PXRD representativo de la Forma G se muestra en la figura 13. La Forma G presenta los picos característicos de la Familia I y tres conjuntos de picos, siendo el conjunto 1 a 2-theta de 11,2 y 11,6; el conjunto 2 a 2-theta de 14,0, 14,4, 14,6 y 14,9; el conjunto 3 a 2-theta de 16,3, 16,6, 17,2, 17,4 y 17,8.

Un patrón de PXRD representativo de la Forma J se muestra en la figura 16. La Forma J presenta los picos característicos de la Familia I y tres conjuntos de picos, siendo el conjunto 1 a 2-theta de 11,2 y 11,4; el conjunto 2 a 2-theta de 13,9, 14,2 y 14,6; el conjunto 3 a 2-theta de 16,0, 16,6, 17,0, 17,2 y 17,5.

Un patrón de PXRD representativo de la Forma M se muestra en la figura 18. La Forma M presenta los picos característicos de la Familia I y tres conjuntos de picos, siendo el conjunto 1 a 2-theta de 11,2; el conjunto 2 a 2-theta de 14,0 y 14,6; el conjunto 3 a 2-theta de 15,9, 16,6, 17,1 y 17,5.

Un patrón de PXRD representativo de la Forma N se muestra en la figura 10. La Forma N presenta los picos característicos de la Familia I. Los conjuntos de picos de la forma N son similares a los de las formas F, G, J y M, siendo el conjunto 1 a 2-theta de 11,2 a 11,6; el conjunto 2 a 2-theta de 13,9 a 15,0; y el conjunto 3 a 2-theta de 15,9 a 17,9, pudiendo variar los picos ligeramente en posición, intensidad y anchura debido a la mezcla de una proporción variable de isomorfos de la Familia I.

Un patrón de PXRD representativo de la Forma Q se muestra en la figura 30. La Forma Q presenta picos a 2-theta de 6,8, 8,4 y 20,2 grados.

Un patrón de PXRD representativo de la Forma R se muestra en la figura 31.

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplo 11

Análisis de rayos X de monocristal

Se recogieron datos a temperatura ambiente usando difractómetros de rayos X Broker equipados con radiación de cobre y monocromadores de grafito. Las estructuras se resolvieron usando procedimientos directos. La biblioteca informática SHELXTL proporcionada por Bruker AXS, Inc facilitaba todos los cálculos cristalográficos necesarios y visualizaciones moleculares (SHELXTL^{TM} Reference Manual, Versión 5.1, Bruker AXS, Madison, Wisconsin, Estados Unidos (1997)).

\newpage

Ejemplo 12

Cálculo del patrón de PXRD a partir de datos de monocristal

Para comparar los resultados entre un solo cristal y una muestra de polvo, puede obtenerse un patrón de polvo calculado a partir de los resultados de monocristal. Los programas informáticos XFOG y XPOW que se proporcionan como parte de la biblioteca informática SHELXTL se usaron para realizar este cálculo. La comparación del patrón de polvo calculado con el patrón de polvo experimental confirma si una muestra de polvo se corresponde con una estructura de monocristal asignada (Tabla 9A). Este procedimiento se realizó sobre las formas cristalinas de azitromicina A, D, F, G y J.

El patrón de difracción de PXRD calculado de la forma A de azitromicina se proporciona en la figura 1.

El patrón de difracción de PXRD calculado de la forma D de azitromicina se proporciona en la figura 5.

El patrón de difracción de PXRD calculado de la forma F de azitromicina se proporciona en la figura 9.

El patrón de difracción de PXRD calculado de la forma G de azitromicina se proporciona en la figura 12.

El patrón de difracción de PXRD calculado de la forma J de azitromicina se proporciona en la figura 15.

Los resultados se presentan en los patrones de difracción de rayos X de polvo superpuestos para las formas A, D, F, G y J en las figuras 3, 7, 11, 14 y 17, respectivamente. El patrón inferior se corresponde con el patrón de polvo calculado (a partir de los resultados de monocristal) y el patrón superior se corresponde con un patrón de polvo experimental representativo. Una coincidencia entre los dos patrones indicaba la concordancia entre la muestra de polvo y la estructura cristalina sencilla correspondiente.

\vskip1.000000\baselineskip

TABLA 9A Picos de PXRD Calculados y Experimentales de Isomorfos de la Familia I

18

19

20

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplo 13

Análisis de RMN en Estado Sólido

Todos los espectros de RMN en estado sólido de ^{13}C se registraron en un espectrómetro 11.75 T (Bruker Biospin, Inc., Billerica, MA), que se corresponde con una frecuencia de ^{13}C de 125 MHz. Los espectros se registraron usando una sonda de polarización cruzada de rotación sobre el ángulo mágico (CPMAS) que funciona a temperatura y presión ambientales. Dependiendo de la cantidad de muestra analizada, se emplearon las sondas Bruker BL de 7 mm o BL de 4 mm, proporcionando 300 mg y 75 mg de muestra con velocidades máximas de 7 kHz y 15 kHz, respectivamente. Los datos se procesaron con una función de ensanchamiento de línea exponencial de 5,0 Hz. Se usó la escisión de protones de 65 kHz y 100 kHz con las sondas de 7 mm y 4 mm, respectivamente. Se calculó la media de un número suficiente de capturas para obtener proporciones adecuadas de señal con respecto a interferencias para todos los picos. Típicamente, se capturaron 600 exploraciones con un retraso de reciclado de 3,0 s, que se corresponde aproximadamente a un tiempo de captura total de 30 minutos. El ángulo mágico se ajustó usando polvo de KBr de acuerdo con las prácticas convencionales del proveedor de RMN. Se hizo referencia a los espectros con respecto a la resonancia metilo de hexametilbenceno (HMB) a 17,3 ppm o a la resonancia de alto campo de adamantano (ADM) a 29,5 ppm. Los espectros referidos a HMB muestran desplazamientos químicos de todos los picos desplazados campo abajo en 0,08 ppm con respecto a los mismos espectros referidos a ADM. La ventana espectral incluía como mínimo la región de espectro de 190 a 0 ppm. Los resultados se resumen en la Tabla 10. Los espectros de RMN-ss para las formas M, H y R se refirieron a ADM. Los espectros de RMN-ss para las formas A, D, G, F, J y N se refirieron a HMB. Las Formas H y R se centrifugaron a una velocidad de 15 kHz.

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip1.000000\baselineskip

(Tabla pasa a página siguiente)

TABLA 10 Desplazamientos químicos de RMN-es ^{13}C de Azitromicina (\pm 0,2 ppm)

21

22

23

Los desplazamientos químicos subrayados son los picos o conjuntos de picos representativos de cada forma. Los desplazamientos químicos marcados en cursiva son los picos de disolvente que pueden ser amplios y variables (\pm 0,4 ppm). Los desplazamientos químicos marcados con un solo asterisco pueden mostrar una división de <0,3 ppm. Los desplazamientos químicos marcados con asteriscos dobles pueden mostrar una variación de \pm0,3 ppm.

Los desplazamientos químicos descritos son precisos dentro de \pm0,2 ppm, a menos que se indique otra cosa.

Un espectro de RMNss ^{13}C representativo de la forma A se muestra en la figura 21. La forma A presenta un pico a 178,1 ppm y picos a 104,1, 98,4, 84,6, 28,8, 13,2, 11,3 y 7,2 ppm.

Un espectro de RMNss ^{13}C representativo de la forma D se muestra en la figura 22. La forma D presenta el pico de desplazamiento químico más elevado de 178,1 ppm y presenta picos en los desplazamientos químicos de 103,9, 95,1, 84,2, 10,8, 9,0 y 8,6 ppm.

Un espectro de RMNss ^{13}C representativo de la forma F se muestra en la figura 23. La forma F tiene dos picos de desplazamiento químico a aproximadamente 179,1 \pm 2 ppm, siendo a 179,5 ppm y 178,6 ppm, y un conjunto de 5 picos a 10,1, 9,8, 9,3, 7,9, y 6,6 ppm y picos de etanol a 58,0 \pm 0,5 ppm y 17,2 \pm 0,5 ppm. Los picos de disolvente pueden ser amplios y relativamente débiles en intensidad.

Un espectro de RMNss ^{13}C representativo de la forma G se muestra en la figura 24. La Forma G tiene el pico de desplazamiento químico más elevado de 179,5 ppm, siendo un solo pico con una posible división de <0,3 ppm, y un conjunto de 5 picos a 10,4, 9,9, 9,3, 7,6, 6,5 ppm.

Un espectro de RMNss ^{13}C representativo de la forma J se muestra en la figura 25. La Forma J tiene dos picos de desplazamiento químico a aproximadamente 179,1 \pm 2 ppm, siendo a 179,6 ppm y 178,4 ppm, un conjunto de 4 picos a 10,0, 9,3, 8,1 y 6,8 ppm y picos de n-propanol a 11,5 \pm 0,5 ppm y 25,2 \pm 0,5 ppm. El pico de disolvente puede ser amplio y relativamente débil en intensidad.

Un espectro de RMNss ^{13}C representativo de la forma M se muestra en la figura 26. La Forma M tiene un pico de desplazamiento químico a 179 \pm 1 ppm, siendo a 179,6 ppm, picos a 41,9, y 16,3 ppm, un conjunto de 5 picos a 10,3, 9,6, 9,3, 7,7 y 7,1 ppm y un pico de isopropanol a 26,0 \pm 0,5 ppm. El pico de disolvente puede ser amplio y relativamente débil en intensidad.

Un espectro de RMNss ^{13}C representativo de la forma N se muestra en la figura 27. La Forma N presenta desplazamientos químicos como una combinación de isomorfos de la Familia I. Los picos pueden variar en el desplazamiento químico y en intensidades relativas y anchura debido a la mezcla de una proporción variable de isomorfos contenidos en la solución sólida cristalina de forma N.

Un espectro de RMNss ^{13}C representativo de la forma amorfa se muestra en la figura 28. La azitromicina amorfa presenta amplios desplazamientos químicos. Los desplazamientos químicos característicos tienen las posiciones de picos a 179 y 11 \pm 0,5 ppm.

Se proporciona un resumen de los picos de RMNss observados para la azitromicina de formas A, D, F, G, H, J, M, N y R en la Tabla 10.

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplo 14

Análisis de RMN de una Forma farmacéutica

Para demostrar la capacidad de la RMNss ^{13}C para identificar la forma de azitromicina contenida en una forma farmacéutica, se prepararon contenidos de azitromicina recubiertos que contenían azitromicina de forma G y se analizaron mediante RMNss ^{13}C. Los comprimidos se granularon en húmedo y se conformaron en comprimidos en un F-Press (Manesty, Liverpool, Reino Unido) usando herramientas de 6,65 mm x 13,49 mm (0,262'' x 0,531''). Los comprimidos se formularon y se conformaron en comprimidos para que contuvieran 250 mg de azitromicina de forma G con un peso de comprimido total de 450 mg, usando la fórmula que se proporciona a continuación. Los comprimidos se recubrieron uniformemente con Opadry II® rosa (mezcla de lactosa monohidrato, hidroxipropilmetilcelulosa, dióxido de titanio, Drug & Cosmetic red nº 30 y triacetina) (Colorcon, West Point, PA).

24

Se trituró suavemente un comprimido recubierto y la muestra en polvo se envasó con una herramienta de envasado en un rotor de estado sólido que no contenía fondo de ^{13}C. El análisis de la muestra se realizó en las condiciones expuestas en el Ejemplo 13.

Un espectro de RMNss ^{13}C representativo del comprimido que contiene azitromicina de forma G se proporciona en la Figura 29.

\vskip1.000000\baselineskip

Ejemplo 15

Actividad antimicrobiana

La actividad de las formas cristalinas de la presente invención frente a patógenos bacterianos y protozoarios se demuestra por la capacidad del compuesto para inhibir el crecimiento de cepas definidas de patógenos humanos (Ensayo I) o animales (Ensayos II y III).

\vskip1.000000\baselineskip

Ensayo I

El Ensayo I, que se describe a continuación, emplea una metodología y criterios de interpretación convencionales y está diseñado para proporcionar una orientación para modificaciones químicas que puedan conducir a compuestos que eviten mecanismos definidos de resistencia a macrólidos. En el Ensayo I, se monta un panel de cepas bacterianas para incluir una diversidad de especies patógenas diana, incluyendo representantes de mecanismos de resistencia a macrólidos que se han caracterizado. El uso de este panel permite determinar la relación entre la estructura química y la actividad con respecto a la potencia, espectro de actividad y elementos estructurales y modificaciones que pueden ser necesarias para evitar los mecanismos de resistencia. Los patógenos bacterianos que comprenden el panel de exploración se muestran en la tabla a continuación. En muchos casos, tanto la cepa parental susceptible a macrólidos como la cepa resistente a macrólidos procedente de la misma están disponibles para proporcionar una evaluación más precisa de la capacidad del compuesto para evitar el mecanismo de resistencia. Las cepas que contienen el gen con la denominación de ermA/ermB/ermC son resistentes a antibióticos macrólidos, lincosamidas y estreptogramina B debido a modificaciones (metilación) de las moléculas de ARNr 23S por una metilasa Erm, por lo tanto, generalmente impiden la unión de las tres clases estructurales. Se han descrito dos tipos de evacuación de macrólidos; el msrA codifica un componente de un sistema de evacuación en estafilococos que impide la entrada de macrólidos y estreptograminas, mientras que mefA/E codifica una proteína transmembrana que parece evacuar sólo macrólidos. Puede producirse la inactivación de antibióticos macrólidos y puede estar mediada por una fosforilación del 2'-hidroxilo (mph) o por escisión de la lactona macrocíclica (esterasa). Las cepas pueden caracterizarse usando la tecnología de reacción en cadena de la polimerasa convencional (PCR) y/o por secuenciación del determinante de resistencia. El uso de la tecnología de PCR en esta solicitud se describe en J. Sutcliffe y col., "Detection Of Erythromycin-Resistant Determinants By PCR", Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 40 (11), 2562-2566 (1996). El ensayo se realiza en bandejas de microtitulación y se interpreta de acuerdo con Performance Standards for Antimicrobial Disk Susceptibility Tests -Sexta Edición; Approved Standard, publicado por The National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS) guidelines; se usa la concentración mínima inhibitoria (MIC) para comparar cepas. El compuesto cristalino se disuelve inicialmente en dimetilsulfóxido (DMSO) como una solución madre de 40 mg/ml.

25

El Ensayo II se utiliza para ensayar la actividad contra Pasteurella multocida y el Ensayo III se utiliza para ensayar la actividad frente a Pasteurella haemolytica.

\vskip1.000000\baselineskip

Ensayo II

Este ensayo se basa en el procedimiento de dilución líquida en formato de microlitros. Una sola colonia de P. multocida (cepa 59A067) se inocula en 5 ml de caldo de infusión de cerebro-corazón (BHI). El compuesto de ensayo se prepara por solubilización de 1 mg del compuesto en 125 \mul de dimetilsulfóxido (DMSO). Se preparan diluciones del compuesto de ensayo usando caldo BHI no inoculado. Las concentraciones del compuesto de ensayo usadas varían de 200 \mug/ml a 0,098 \mug/ml por diluciones seriadas por un factor de dos. El BHI inoculado con P. multocida se diluye con caldo BHI no inoculado para preparar una suspensión celular 10^{4} por 200 \mul. Las suspensiones celulares en BHI se mezclan con las diluciones seriadas respectivas del compuesto de ensayo y se incubaron a 37ºC durante 18 horas. La concentración mínima inhibitoria (CMI) es igual a la concentración del compuesto que presenta una inhibición del 100% del crecimiento de P. multocida, como se determina por la comparación con un control no
inoculado.

\vskip1.000000\baselineskip

Ensayo III

Este ensayo se basa en el procedimiento de dilución en agar usando un Steers Replicator. De dos a cinco colonias aisladas de una placa de agar se inoculan en caldo BHI y se incuban durante una noche a 37ºC con agitación (200 rpm). A la mañana siguiente, se inoculan 300 \mul del precultivo de P. haemolytica completamente crecido en 3 ml de caldo BHI recién preparado y se incuban a 37ºC con agitación (200 rpm). Las cantidades apropiadas de los compuestos de ensayo se disuelven en etanol y se prepara una serie de diluciones seriadas por un factor de dos. Se mezclan 2 ml de la dilución seriada respectiva con 18 ml de agar BHI fundido y se solidifica. Cuando los cultivos inoculados con P. haemolytica alcanzan una densidad patrón de 0,5 McFarland, se inoculan aproximadamente 5 \mul del cultivo de P. haemolytica en placas de agar BHI que contienen las diversas concentraciones del compuesto de ensayo usando un Steers Replicator y se incuban durante 18 horas a 37ºC. Las concentraciones iniciales del compuesto de ensayo varían de 100-200 \mug/ml. La MIC es igual a la concentración del compuesto de ensayo que presenta una inhibición del 100% del crecimiento de P. haemolytica, como se determina por comparación con un control no inoculado.

La actividad in vivo de las formas cristalinas de la presente invención puede determinarse mediante estudios de protección en animales convencionales bien conocidos por los especialistas en la técnica, y habitualmente llevados a cabo en ratones.

Se distribuyeron ratones en jaulas (10 por jaula) a su llegada y se dejó que se aclimataran durante un mínimo de 48 horas antes de usarlos. Los animales se inocularon con 0,5 ml de una suspensión bacteriana de 3 x 10^{3} UFC/ml (cepa 59A006 de P. multocida) por vía intraperitoneal. Cada experimento tenía al menos 3 grupos de control no medicados incluyendo uno infectado con una dosis de exposición 0,1X y dos infectados con una dosis de exposición 1X; también puede usarse un grupo de datos de exposición 10X. Generalmente, todos los ratones en un estudio dado pueden inocularse en 30-90 minutos, especialmente si se usa una jeringa de repetición (tal como un jeringa Cornwall®) para administrar la dosis de exposición. Treinta minutos después de que haya comenzado la exposición, se administra el primer tratamiento de compuesto. Puede ser necesario que una segunda persona comience con la dosificación del compuesto si no se han inoculado todos los animales al final de los 30 minutos. Las vías de administración son dosis subcutáneas u orales. Las dosis subcutáneas se administran en la piel flácida del lomo o del cuello mientras que las dosis orales se administran por medio de una aguja de alimentación. En ambos casos se usa un volumen de 0,2 ml por ratón. Los compuestos se administran a los 30 minutos, 4 horas y 24 horas después de la exposición. Se incluye en cada ensayo un compuesto de control de eficacia conocida administrado por la misma vía. Los animales se observan a diario y se registra el número de supervivientes en cada grupo. El control del modelo de P. multocida continúa durante 96 horas (cuatro días) después de la exposición.

La DP_{50} es una dosis calculada a la que el compuesto ensayado protege al 50% de un grupo de ratones de la mortalidad debida a la infección bacteriana, que sería letal en ausencia de tratamiento farmacológico.

Las formas cristalinas de la presente invención (en lo sucesivo "el compuesto o compuestos activos"), pueden administrarse por las vías oral, parenteral, tópica o rectal en el tratamiento o la prevención de infecciones bacterianas o protozoarias. En general, el compuesto activo se administra más idealmente en dosificaciones que varían de aproximadamente 0,2 mg por kg de peso corporal por día (mg/kg/día) a aproximadamente 200 mg/kg/día en dosis únicas o divididas (es decir, de 1 a 4 dosis al día), aunque se producirán necesariamente variaciones dependiendo de la especie, el peso y la afección del sujeto que se trate y de la vía de administración particular elegida. Sin embargo, se emplea más idealmente un nivel de dosificación que está en el intervalo de aproximadamente 2 mg/kg/día a aproximadamente 50 mg/kg/día. No obstante, pueden producirse variaciones dependiendo de la especie de mamífero, pez o ave que se trate y de su respuesta individual a dicho medicamento, así como del tipo de formulación farmacéutica elegida y del periodo de tiempo e intervalo al que se realice dicha administración. En algunos casos, pueden ser más que adecuados niveles de dosificación por debajo del límite inferior del intervalo mencionado anteriormente, mientras que en otros casos pueden emplearse dosis aún mayores sin causar ningún efecto secundario perjudicial, con tal de que dichas dosis mayores se dividan primero en varias dosis pequeñas para la administración a lo largo del
día.

El compuesto activo puede administrarse solo o en combinación con vehículos o diluyentes farmacéuticamente aceptables por las vías indicadas anteriormente y dicha administración puede llevarse a cabo en dosis únicas o múltiples. Más particularmente, el compuesto activo puede administrarse en una gran diversidad de formas de dosificación diferentes, es decir, pueden combinarse con diversos vehículos inertes farmacéuticamente aceptables en la forma de comprimidos, cápsulas, pastillas para chupar, trociscos, caramelos duros, polvos, pulverizadores, cremas, bálsamos, supositorios, gelatinas, geles, pastas, lociones, pomadas, sobrecitos, polvos para suspensión oral, suspensiones acuosas, soluciones inyectables, elixires, jarabes y similares. Dichos vehículos incluyen diluyentes o cargas sólidas, medios acuosos estériles y diversos disolventes orgánicos no tóxicos, etc. Además, las composiciones farmacéuticas orales pueden edulcorarse y/o aromatizarse convenientemente. En general, el compuesto activo está presente en dichas formas de dosificación a niveles de concentración que varían de aproximadamente el 1,0% a aproximadamente el 70% en peso.

Para la administración por vía oral, pueden emplearse comprimidos que contienen diversos excipientes tales como celulosa microcristalina, citrato sódico, carbonato cálcico, fosfato dicálcico y glicina junto con diversos disgregantes tales como almidón (y preferiblemente almidón de maíz, patata o tapioca), ácido algínico y ciertos silicatos complejos, junto con aglutinantes de granulación como polivinilpirrolidona, sacarosa, gelatina y goma arábiga. Además, con frecuencia son muy útiles agentes lubricantes tales como estearato de magnesio, lauril sulfato sódico y talco los fines de la conformación en comprimidos. También pueden emplearse composiciones sólidas de un tipo similar como cargas en cápsulas de gelatina; los materiales preferidos a este respecto también incluyen lactosa o azúcar de la leche, así como polietilenglicoles de alto peso molecular. Cuando se deseen suspensiones acuosas y/o elixires para la administración oral, el compuesto activo puede combinarse con diversos agentes edulcorantes o aromatizantes, sustancias colorantes o tintes y, si se desea, también agentes emulsionantes y/o de suspensión, junto con tales diluyentes como agua, etanol, propilenglicol, glicerina y diversas combinaciones similares de los mismos.

Para la administración por vía parenteral pueden emplearse soluciones del compuesto activo en aceite de sésamo o de cacahuete o en propilenglicol acuoso. Las soluciones acuosas deben tamponarse convenientemente (preferiblemente a un pH superior a 8) si es necesario y el diluyente líquido hacerse primero isotónico. Estas soluciones acuosas son adecuadas para los fines de la inyección intravenosa. Las soluciones oleosas son adecuadas para los fines de la inyección intraarticular, intramuscular y subcutánea. La preparación de todas estas soluciones en condiciones estériles se consigue fácilmente mediante técnicas farmacéuticas convencionales conocidas por los especialistas en la técnica.

Además, también es posible administrar el compuesto activo por vía tópica y esto puede realizarse por medio de cremas, gelatinas, geles, pastas, parches, pomadas y similares, de acuerdo con la práctica farmacéutica convencional.

Para la administración a animales distintos de seres humanos, tales como ganado bovino o animales domésticos, los compuestos activos pueden administrarse en el pienso de los animales o por vía oral como una composición en brebaje.

El compuesto activo también puede administrarse en la forma de sistemas de administración de liposomas, tales como vesículas unilaminares pequeñas, vesículas unilaminares grandes y vesículas multilaminares. Pueden formarse liposomas a partir de una diversidad de fosfolípidos, tales como colesterol, estearilamina o fosfatidilcolinas.

Claims (5)

1. Una forma cristalina de azitromicina que es solvato de hemi-n-propanol de azitromicina monohidrato, caracterizándose dicha forma porque tiene un espectro de RMN en estado sólido de ^{13}C que comprende una pluralidad de picos con desplazamientos químicos de 179,6 \pm 0,2 ppm; 178,4 \pm 0,2 ppm; 25,2 \pm 0,4 ppm; 11,5 \pm 0,4 ppm; 10,0 \pm 0,2 ppm; 9,3 \pm 0,2 ppm; 8,1 \pm 0,2 ppm; 6,8 \pm 0,3 ppm.

2. Una forma cristalina de azitromicina de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizándose dicha forma porque contiene 2-5% de agua y 1-5% de n-propanol en peso en una muestra de polvo.

3. Una forma cristalina de azitromicina de acuerdo con la reivindicación 2, caracterizándose dicha forma porque contiene 2,5-3% de agua y 2,5-4% de n-propanol en peso en una muestra de polvo.

4. Una composición farmacéutica que comprende una forma cristalina de azitromicina de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

5. Uso de una forma cristalina de azitromicina de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 en la preparación de un medicamento para el tratamiento de una infección bacteriana o una infección protozoaria en un mamífero, pez o ave.