ES2227610T3 - Composicion farmaceutica contiendo un estimulador de activina. - Google Patents

Abstract

LA PRESENTE INVENCION SE REFIERE A ESTIMULADORES DE ACTIVINA Y/O INHIBINA PARA SU USO EN LA ESTIMULACION DE LA CURACION DE HERIDAS Y TRASTORNOS FIBROTICOS CON REDUCIDA CICATRIZACION, JUNTO CON MEDICAMENTOS Y METODOS PARA FAVORECER LA CURACION DE HERIDAS Y TRASTORNOS FIBROTICOS CON REDUCIDA CICATRIZACION.

Description

Composición farmacéutica conteniendo un estimulador de Activina.

La presente invención se refiere a preparaciones farmacéuticas para favorecer la curación de heridas o de trastornos fibróticos con una cicatrización reducida.

Por "heridas o trastornos fibróticos" se quiere significar cualquier estado que pueda dar lugar a la formación de tejido cicatrizado. En particular, esto incluye la curación de heridas de la piel, la reparación del daño en tendones, la curación de traumatismos por aplastamiento, la curación de heridas en los ojos, incluyendo heridas en la córnea, la curación de daños en el sistema nervioso central (SNC), estados que dan lugar a la formación de tejido cicatrizado en el SNC, formación de tejido cicatrizado resultante de golpes, y adhesión de tejido, por ejemplo, como resultado del daño o cirugía (esto puede tener aplicación a, por ejemplo, la curación de tendón y contracciones abdominales y adhesiones). Ejemplos de trastornos fibróticos incluyen fibrosis pulmonar, glomerulonefritis, cirrosis del hígado, esclerosis sistémica, escleroderma, vitreoretinopatía proliferativa, reparación después de un infarto de miocardio, incluyendo hibernación de miocardio.

En particular, existe una falta de composiciones para favorecer la cicatrización de heridas o trastornos fibróticos con cicatrización reducida. La formación de tejido cicatrizado, aunque proporciona fuerza mecánica a la herida curada, puede ser fea y puede empeorar el funcionamiento del tejido.

Este es particularmente el caso de heridas que dan lugar a la formación de tejido cicatrizado en el SNC, inhibiendo el tejido cicatrizado la reconexión de terminales nerviosos en estado grave o de nuevo crecimiento, afectando de este modo de forma significativa su funcionamiento.

También hay una falta de composiciones para uso en el tratamiento de las heridas crónicas, por ejemplo úlceras venosas, úlceras diabéticas y por estancia prolongada en cama (úlceras de decúbito), especialmente en los ancianos y en los pacientes heridos en silla de ruedas. Dichas composiciones pueden ser extremadamente útiles en pacientes en que la cicatrización de heridas es o bien lenta o en los que el proceso de curación aún no ha empezado. Dichas composiciones pueden ser utilizadas para la curación de heridas de "inicio rápido" y por ello pueden ser utilizadas en combinación con composiciones (por ejemplo, las de la patente PCT/GB93/00586) que favorecen la curación de heridas o trastornos fibróticos con cicatrización reducida. Por ello no sólo una herida crónica puede ser curada, sino que puede ser curada con una cicatrización reducida.

De acuerdo con la presente invención se proporciona el uso de un estimulador de Activina en una cantidad suficiente para unir los receptores de forma similar a los unidos por TGF\beta_{3} en la fabricación de un medicamento para favorecer la curación de heridas con una cicatrización reducida o para favorecer la curación de trastornos fibróticos con cicatrización reducida.

Por "estimulador" se quiere significar cualquiera que pueda estimular la cantidad o eficacia de la Activina activa en el sitio. Este puede ser Activina en sí misma (o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma) o un fragmento o una forma parcialmente modificada de la misma. Una modificación parcial puede ser por ejemplo por vía de adición, eliminación o sustitución de los residuos de amino ácidos. Una vía de sustitución puede ser por ejemplo una sustitución conservada. Las moléculas parcialmente modificadas pueden tener, por ejemplo, una mayor vida media que su molécula de referencia, o pueden tener una diferente afinidad de unión a sus receptores. Un fragmento puede comprender al menos la parte de la Activina que se requiere para permitir que ésta estimule a sus receptores. De forma alternativa, un estimulador puede ser, por ejemplo un inhibidor del metabolismo de Activina, o puede ser un estimulador de la síntesis de Activina, o puede ser un bioprecursor de Activina. Por ejemplo, puede ser un análogo de un fragmento de Activina que está unido por una enzima degradativa, por ejemplo un mimotopo (H. M. Geysen, y col., 1987, Journal of Immunological Methods, 102: 259-274) preparado de un fragmento de Activina que se une por una enzima que lo degrada. Dicho mimotopo puede unirse al sitio del receptor de la enzima, inhibiendo de forma competitiva la unión de Activina a la enzima y por consiguiente inhibiendo su degradación.

La Activina es un miembro de la superfamilia del TGF \beta, y al igual que otros miembros de esta familia, las Activinas son proteínas diméricas, compuestas de disulfuro unido a subunidades bata A o beta B. Se han identificado tres diferentes formas de Activina in vivo: la Activina A (beta a, beta a), la Activina B (beta b, beta b) y la Activina AB (beta a, beta b). En la presente invención, por "Activina" se quiere significar todas las posibles formas de Activina.

La respuesta biológica a las Activinas es transducida por receptores que existen como complejos heteroméricos de los receptores de tipo I (llamadas quinasas del tipo del receptor de Activina (Alk) 2 y 4) y receptores de tipo 2 que son quinasas de treonina serina de transmembrana (L. S. Matthews y W. W. Vale, 1993, "Molecular and Functional Characterisation of Activin Receptors", Receptor Volumen 3, páginas 173-181). La Follistatina es una proteína que se une a la Activina que actúa como un antagonista de Activina in vitro, pero que in vivo puede presentar Activinas a sus receptores (U. Michael, y col., 1993, "Follistatins: more than follicle stimulating hormone suppressing proteins", Molecular and Cellular Endocrinology, Volumen 91, páginas 1-11).

La Activina incrementa el número de gonadotrofos en la pituitaria y causa diferenciación de las células granulosas del ovario (K. E. May, 1994, "Inhibin and Activin Molecular Aspects of Regulation and Function", TEM 5: 407-415). La Activina A también incrementa la diferenciación o las células neuronales (D. Schubert, y col., 1990, ``Activin A also enhances the differentiation or neuronal cells (Schubert, D. y col., 1990, "Activin is a nerve cell survival molecule", Nature, 344: 868-870), estimula la diferenciación de megacariocitos y de células critroideas (M. Nishimura, y col., 1991, "Effect of erythoid differentiation factor on megakaryocytic differentiation of L8057, a murine megakaryoblastic leukaemia cell line", Biochem Biophysics Research Communication, 181: 1042-1047) e induce la formación de mesodermo durante el desarrollo de Xenopus inicial (J. C. Smith y col., 1990, "Identification of a potent Xenopus mesoderm inducing factor as a homologue of Activin A" Nature, 345: 729-731).

La ruptura objetivo de la cadena beta A de Activina da lugar a ratones con defectos craneofaciales que murieron a las 24 horas después del nacimiento (M. M. Matzuk, y col., 1995, "Functional analysis of activins during mammalian development", Nature, 274: 354-356). A estos ratones también les faltaban bigotes y tenían los folículos de los bigotes anormales. Se ha detectado la cadena de Activina beta A en el mesenquimo de los folículos de pelo en desarrollo y en la piel embriónica, pero no en la piel de un recién nacido messenger ribonucleic acids during rat embryogenesis'', Endocrinology 128: 3122-3129; V. J. Roberts y S. L. Barth, 1994, "Expression of messenger ribonucleic acids encoding the Inhibin/Activin system during mid and late gestation rat embryogenesis", Endocrinology, 134: 914-923), además de los receptores de Activina Alk2 y Alk4 (K. Verschueren, y col., 1995, "Expresión of type I and type IB receptors for activin in mid-gestation mouse embryos suggests distinct functions in organogenesis", Mechanisms of Development, 52: 109-123). La rotura de la proteína unida a Activina, la follistatina, en ratones transgénicos da lugar a un desarrollo del bigote anormal y a piel hiperqueratótica (M. M. Matzuk, y col., 1995, "Multiple defects and perinatal death in mice deficient in follistatin", Nature, 374: 360-363). La rotura del gen para la subunidad de Activina/beta Inhibina dio lugar a defectos sutiles para el desarrollo del párpado (A. Vassaiil, y col., 1994, "Activin/Inhibin beta b subunit chain disruption leads to defects in eyelid development and female reproduction", Genes and Development, 8, 414-427), mientras que la ruptura objetivo de la cadena de Inhibina alfa causa la formación de tumor en las gónadas (M. M. Matzuk, y col., 1992, "Inhibin is a tumour supresor gene with gonadal specificity in mice", Nature, 360: 313-319).

La patente WO 89/11862 describe que los antagonistas de Activina pueden ser utilizados como inhibidores del exceso de proliferación de tejido para el tratamiento de condiciones tales como los queloides mientras que la Activina puede ser utilizada para favorecer la regeneración de tejido en una herida.

Sin embargo, el presente inventor ha encontrado que la Activina de hecho juega un papel en la curación de heridas como un factor de crecimiento no fibrótico. Se han encontrado niveles altos de expresión de Activina y de receptores de Activina y de Inhibina después de las heridas y en los sitios de las heridas, de forma similar al TGF-\beta_{3} (ver PCT/GB93/00586). Esta observación es particularmente sorprendente a la luz de la creencia anterior de que la Activina es predominantemente un factor de inducción reproductivo/eritroideo/neurológico/del mesodermo.

Se ha encontrado que la Activina es estructuralmente similar al TGF- \beta_{3}, siendo la similaridad mayor que con TGF-\beta_{1} y TGF-\beta_{2}. Parece que la Activina puede, de hecho, unirse a receptores similares a los unidos por el TGF-\beta_{3} y de este modo mediar el control de la cicatrización vía dicha ruta.

También se ha encontrado que el receptor Act 2a, que está unido por la Activina y que se cree que está unido por el TGF-\beta_{3}, está sobre regulado en la curación de heridas, especialmente en el día 7 después de la herida. La Tabla 1 detalla además la unión de las isoformas de la familia del receptor del TGF-\beta.

Por eso, la Activina tiene propiedades anti-cicatrizantes similares a las del TGF-\beta_{3} y de este modo la Activina puede ser utilizada para un efecto similar (ver, por ejemplo, la patente PCT/GB93/00586).

El estimulador puede ser utilizado conjuntamente con un soporte, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable. Puede ser utilizado conjuntamente con un soporte, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable en la preparación de un medicamento para favorecer la curación de heridas y trastornos fibróticos con cicatrización reducida. De acuerdo con ello, la presente invención también proporciona el uso de un estimulador de Activina en la preparación de un medicamento para uso en favorecer la curación de heridas y trastornos fibróticos con cicatrización reducida.

De acuerdo con la presente invención pueden incluirse dos o más estimuladores en una única composición o medicamento o utilizados en un tratamiento único.

Los soportes, diluyentes y excipientes farmacéuticamente aceptables son bien conocidos - ver por ejemplo Remington's Pharmaceutical Sciences and US Pharmacopeia (1984) Mack Publishing Company, Easton, PA.

Los soportes farmacéuticamente aceptables pueden comprender por ejemplo una crema estéril neutra, gel o polvo para aplicación tópica, o una solución estéril para inyección, irrigación o inhalación o un aerosol, o puede comprender un apósito estéril para cubrir de forma tópica una herida o puede estar en la forma de un comprimido o cápsula para la administración enteral, o el soporte puede comprender un parche de biopolímero o un dispositivo de liberación lenta para implantación.

Los estimuladores de Activina y los medicamentos fabricados o preparados de acuerdo con la presente invención pueden estar en la forma de una composición para la administración tópica como una crema, gel, polvo o apósito; en una solución para inyección, irrigación o inhalación o aerosol, o en la forma de un comprimido o cápsula para la administración enteral. También puede comprender un polímero biodegradable que forme un parche, o un dispositivo de liberación controlada implantable, útil en las operaciones quirúrgicas que tienen una liberación inicial larga seguida por una liberación más lenta a continuación. Se apreciará que esta lista no es exhaustiva, siendo posibles otros muchos otros tipos de composiciones, tales como las que pueden fácilmente producir un experto en la materia.

Otras formas de la presente invención en las que está incluido un estimulador de Activina también incluyen vendajes; vehículos de liberación biocompatibles, biodegradables, no inflamatorios tales como ácido hialurónico; implantes; inyecciones intradérmicas; terapia sistémica por ej. fibrosis o trauma severo o quemaduras, por ejemplo por administración intraperitoneal, intravenosa o oral; gotas oculares para heridas de la córnea o cicatrización; películas y barreras para tratar adhesiones.

La aplicación para composiciones y agentes para favorecer la curación de heridas y trastornos fibróticos con cicatrización reducida son bien conocidos (ver por ejemplo las patentes PCT/GB93/00586, PCT/GB92/00570 y US 5.520.926 y la presente invención las incorpora de acuerdo con su contenido.

El estimulador puede ser utilizado conjuntamente con una composición para favorecer la curación de heridas o de trastornos fibróticos con cicatrización reducida.

El estimulador puede ser utilizado conjuntamente con una composición para favorecer la curación de heridas crónicas.

La estimulación puede ser conseguida por administración en un sitio de Activina en sí misma o de un estimulador de Activina. Por "sitio" se quiere significar un sitio de curación o trastorno fibrótico. El estimulador puede ser un estimulador de acuerdo con la presente invención.

La Activina puede ser estimulada inmediatamente antes de la curación. Puede ser preferiblemente estimulada inmediatamente después de la curación. Puede ser estimulada a los 14 días de la curación, preferiblemente en los 7 días de la curación, más preferiblemente en los 3 días de la curación.

La invención será además aparente a partir de la siguiente descripción que muestra, sólo por vía del ejemplo, formas de favorecer la curación de heridas y trastornos fibróticos con cicatrización reducida.

Experimental

Se llevaron a cabo estudios iniciales para determinar el perfil de expresión de la Activina en tejido herido, en relación con el tejido control. Esto llevó a la conclusión de que la adición exógena de Activina podía tener actividad anti-cicatrización. Las conclusiones de los experimentos fueron que la Activina tiene un efecto anti-cicatrización.

Experimento 1

Herida

Se anestesiaron ratones CD1 adultos machos utilizando halotano, óxido nitroso y oxígeno. Se hicieron cuatro heridas en cada animal, aproximadamente a un centímetro de la línea del medio, 20 y 40 centímetros de la base del cráneo respectivamente. Las heridas fueron de 1 centímetro de longitud por debajo y a lo largo del panículo carnoso. Los animales fueron sacrificados y las heridas se recuperaron en los días 1, 3, 7, 14, 28, 60 y 80, después de la herida. Se analizaron al menos 4 heridas de 4 animales separados para cada experimento. Las heridas fueron extirpadas, fijadas en paraformaldehído, deshidratadas y fijadas en cera en preparación para la hibridación in situ (bajo condiciones libres de RNAasa), o congeladas en OCT (Miles Scientific), crioseccionadas y utilizadas para inmunocitoquímica.

Para la hibridación in situ, se construyeron ribosondas antisentido contra el receptor Act 2a, Act R1 (Alk 2) y Act RIB (Alk 4).

Para la inmunocitoquímica, se utilizó y detectó un anticuerpo primario que reconocía la Activina utilizando amplificación con estreptavadin biotina utilizando un anticuerpo secundario marcado (isotiocianato de fluoresceína).

Como controles, se utilizó piel de adulto no herido y fetal E16 (día embriónico 16).

Resultados

En los días 3 y 7 después de la herida, se detectó la tinción incrementada por Activina en el sitio de la herida, predominantemente en fibroblastos del margen de la herida y del tejido de granulación. La tinción volvió a niveles próximos a los normales a los 14 días después de la herida. Ya que anticuerpo reconoce de forma predominante la cadena de beta A Activina, se asume que ésta es la isoforma predominante en el tejido de granulación.

El RNA mensajero para el receptor Act 2a fue sobre regulado en el margen de la herida y del tejido de granulación en los siete días después de la herida. El receptor de Alk 2 (Act R1) fue expresado en el mesenquimo de la piel normal, pero no se detectó elevación significativa en el borde de la herida o en el tejido de granulación. Por el contrario, el receptor de Act R1B (Alk 4) estuvo presente a un nivel mucho menor en la dermis de la piel normal pero fue sobre regulado en el margen de la herida termal y en el tejido de granulación de las heridas, particularmente en los días 7 y 14, después de la herida.

En la piel del ratón adulto normal, el Alk2 y el Alk4 se expresaron de forma predominante en la dermis y la epidermis, respectivamente, La tinción para la Activina en la piel de adulto normal estuvo a un marcado nivel bajo en la dermis. Sin embargo, la piel fetal de ratones embriónicos en el día 16 mostraron una marcada tinción para la Activina, particularmente en la dermis fetal.

Estos modelos de tinción sugieren que la Activina y sus receptores están presentes en la piel fetal y son reinducidos durante la curación de la herida en la piel de adulto. Ya que las heridas fetales curan sin cicatrización en el día embriónico 16 (D. J. Whitby y M. W. J. Ferguson, "The extracellular matrix of lip wounds in fetal, neonatal and adult mice", Development, 112: 651-668, 1991) y con niveles reducidos de inflamación, y por lo tanto TGF\beta1 y TGF\beta2, pero con niveles termales endógenos de TGF\beta3 incrementados (D. J. Whitby y M. W. J. Ferguson, 1991, "Immunohistochemical localisation of growth factors and fetal wound healing", Developmental Biology, 147: 207-215), puede ser asumido de forma razonable que la Activina juega un papel en esta curación de la herida fetal con menos cicatrización. Por tanto, la adición exógena de Activina, puede tener actividad anti-cicatrización.

Con el fin de analizar esto, se llevó a cabo el siguiente experimento:

Experimento 2

Materiales y métodos

Se obtuvo Activina A de bovino recombinante (4 \mug) de Innogenetics, Bélgica (Cat. No. CY-035). Se preparó la Activina A por la reconstitución inicial del polvo liofilizado en solución salina tamponada de fosfato estéril (PBS) conteniendo un 0,1% de albúmina de suero bovino (BSA) y diluyendo a continuación con PBS/BSA para dar tres dosis: 100 ng/ml; 50 ng/ml; y 25 ng/ml.

Se anestesiaron doce ratas macho Sprague-Dawley, de edades y pesos equiparables (220 g - 250 g), se anestesiaron utilizando una mezcla a partes iguales de halotano, óxido nitroso y oxígeno. Se afeitaron las superficies dorsales y se lavaron con alcohol del 70%. Se hicieron cuatro incisiones de 1 cm de espesor total lineal (hacia abajo e incluyendo el panículo carnosos) a posiciones anatómicas definidas de 5 cm y 8 cm a partir de la base del cráneo, y a 1 cm a cada lado de la línea del medio.

De las cuatro heridas por animal, dos fueron tratadas con una dosis de 100 \mul de Activina A, una con 100 \mul de PBS, y el otra permaneció sin manipular. Todas las inyecciones fueron intradérmicas, introduciendo aproximadamente 50 \mul a cada lado de la incisión tan cerca como fue posible de la herida sin romperla, y se administraron una vez al día durante tres días, comenzando inmediatamente antes de la herida (Día 0).

Se dividieron los doce animales en tres grupos de acuerdo con la dosis administrada. Cuatro animales recibieron inyecciones diarias de 100 \mul de 100 ng/ml de Activina A (es decir inyecciones de 10 ng/100 \mul), cuatro recibieron 50 ng/ml (es decir, inyecciones de 5 ng/100 \mul) y los cuatro restantes fueron tratados con 25 ng/ml (es decir inyecciones de 2,5 ng/100 \mul). Las heridas estuvieron descubiertas y sin sutura. Se sacrificaron seis animales, dos de cada grupo de tratamiento, 7 días pw (después de la herida) y los seis restantes se sacrificaron a los 80 días después de la herida, todos por sobredosis de cloroformo seguido por dislocación del cuello. Se utilizó un sistema de captura de imagen basado en PC para guardar las imágenes macroscópicas de la piel intacta, afeitada. Se separó la piel dorsal y se hicieron las heridas en todo su espesor por escisión con un margen de aproximadamente 0,5 cm de piel normal alrededor de la herida. Se fijó la mitad del tejido en solución salina formal y se procesaron por histología en cera de rutina y la otra mitad se sumergió en un medio fijado en OCT y congelado instantáneo sobre nitrógeno líquido para el análisis de immunocitoquímico.

Histología en cera

Se cortaron secciones de 7 \mum en un microtomo estándar y se tiñeron las secciones con Haematoxylin & Eosin para examinar la celularidad y la angiogénesis, y con tinción de Masson's Trichrome para la organización del colágeno.

Resultados Macroscópicos

Se ideó un sistema de puntuación análogo visual que oscilaba entre 0 como representante de normal, piel sin herida, hasta 10 como representante de cicatrización hipertrófica. Se dibujó una línea no marcada de 10 cm sobre una pieza de papel en blanco y se puntuaron las cuatro cicatrices en la superficie dorsal de cada rata recién sacrificada colocando una marca a lo largo de la línea entre 0 y 10, con una línea separada para cada cicatriz. Sólo se puntuaron las cicatrices a los 80 días (es decir 6 ratas).

Las apariencias macroscópicas de las heridas tratadas con Activina A fueron muy buenas. Las cicatrices fueron bastante variables pero las dosis menores produjeron las cicatrices de mejor cualidad macroscópica cuando se compararon con los controles.

Microscópicos Inyección de 10 ng/100 \mul

A los 7 días pw, se re-epitelizaron las heridas y el epitelio se aplastó de un modo similar al epitelio no herido. Una observación consistente a los 7 días después de la herida (pW) fue la de que no había muchas células inflamatorias en la parte superior de la herida, pero bastantes en la base. Las heridas control (no manipuladas y tratados con PBS) también fueron epitelizadas de nuevo paro tuvieron más células inflamatorias distribuidas a lo largo de la herida.

A los 80 días pw, la apariencia al microscopio de las cicatrices fue muy buena. Se utilizó otro sistema de puntuación análogo visual, oscilando entre 0 como representante de la piel normal hasta 10 representando la cicatrización hipertrófica. Las puntuaciones promedio se muestran en la Tabla 2. La puntuación promedio para las heridas tratadas fue de 2,65, las tratadas con PBS de 3,3, y las no manipuladas de 3,65. La orientación del colágeno en las heridas tratadas fue más similar a la de la piel normal, estando los bultos de colágeno menos densamente empaquetados, más largos y teniendo una mayor apariencia de tejido de cesta (la dermis no herida tuvo bultos de colágeno ordenados en una arquitectura de tejido de cesta), particularmente hacia la epidermis.

Inyección de 5 ng/100 \mul

A los 7 días pw, todas las heridas fueron epitelizadas de nuevo y completamente bastante celulares y las heridas tratadas aparecieron similares a las heridas control. Hubo alguna variación en las heridas tratadas, siendo algunas de ellas muy celulares, y otras no conteniendo tantas células inflamatorias.

A los 80 días pw, la arquitectura termal fue buena, con una puntuación promedio de 3,13, en comparación con las heridas control tratadas con PBS y las no manipuladas que tuvieron un promedio de 5,5 y 4,1 respectivamente. El colágeno fue más abierto y hubo bultos más espesos, de nuevo y de forma particular en la parte superior del sitio de la herida cerca de la epidermis.

Inyección de 2,5 ng/100 \mul

A los 7 días pw, las heridas tratadas se parecían a las heridas control.

A los 80 días pw, las heridas tratadas tuvieron una arquitectura de colágeno razonable, y una puntuación promedio de 5,25, en comparación con las heridas control tratadas con PBS y las no manipuladas que tuvieron una puntuación de 5,45 y respectivamente.

Conclusiones

Estos experimentos muestran que el miembro de la familia de TGF-\beta Activina A tiene un efecto anti-cicatrización.

Tanto los regimenes de tratamiento con inyección de 5 ng/ 100 \mul como de 10 ng/100 \mul mostraron una mejoría considerable en la cicatrización en relación con las heridas control. Es interesante que la mayor dosis parece reducir el influjo de las células inflamatorias en la herida - un efecto similar al conseguido con el TGF-\beta_{3}. La apariencia al microscopio de heridas a los 80 días pw que habían sido tratadas con una inyección de 10 ng/100 \mul de Activina A fue mejor que los controles, y una inyección de 5 ng/100 \mul fue también mejor que los controles. La comparación entre los tratamientos con inyección de 10 ng/100 \mul y con inyección de 5 ng/ 100 \mul mostró que el tratamiento con inyección de 10 ng/100 \mul fue superior pero que las heridas control en estos animales también fue mejor, posiblemente el resultado de los efectos sistémicos de la mayor dosis de Activina A. La dosis menor (2,5 ng/100 \mul) también mejoró ligeramente la cicatrización aunque los resultados microscópicos fueron más próximos a las heridas control.

La apariencia macroscópica de las heridas fue bastante variable aunque las heridas tratadas con las dosis media (inyección de 5 ng/100 \mul) y más pequeña (inyección de 2,5 ng/ 100 \mul) pareció ser mejor que sus controles respectivos. Las heridas tratadas con la dosis mayor (inyección de 10 ng/100 \mul) fue microscópicamente bastante variable, pero un efecto obvio puede haber sido invalidado por la calidad de las heridas control que estuvieron en el mismo animal y por consiguiente quizás mejoró por los efectos sistémicos de la mayor dosis de Activina A.

TABLA 1 La familia del receptor de TGF-\beta y sus afinidades conocidas para los TGF-\beta_{1,2 y 3}, Activina, BMP 2,4 y MIS

1

TABLA 2 Puntuaciones histológicas promedio (80 días después de la herida) en heridas de ratas tratadas con Activina A

3

Claims (6)

1. El uso de un estimulador de Activina en una cantidad suficiente para unir receptores de forma similar a los unidos por TGF-\beta3 en la fabricación de un medicamento para favorecer la curación de heridas con cicatrización reducida o favorecer la curación de trastornos fibróticos de cicatrización reducida.

2. El uso de un estimulador de Activina de acuerdo con la reivindicación 1 en donde, el estimulador está seleccionado entre cualquiera del grupo de Activina, un fragmento de Activina, una forma parcialmente modificada de Activina, un inhibidor del metabolismo de Activina, y un estimulador de la síntesis de Activina.

3. El uso de un estimulador de Activina de acuerdo con la reivindicación 2 en donde, el estimulador comprende una forma parcialmente modificada de Activina que tiene una vida media más larga que su molécula de referencia.

4. El uso de un estimulador de Activina de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 conjuntamente con un soporte, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable.

5. El uso de un estimulador de Activina de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 conjuntamente con una composición para favorecer la curación de heridas o trastornos fibróticos con cicatrización reducida.

6. El uso de un estimulador de Activina de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 conjuntamente con una composición para favorecer la curación de heridas crónicas.