EA030542B1

EA030542B1 - Комбинированная фармацевтическая композиция и способ лечения заболеваний или состояний желудочно-кишечного тракта функциональной этиологии

Info

Publication number: EA030542B1
Application number: EA201300125A
Authority: EA
Inventors: Олег Ильич ЭПШТЕЙН
Original assignee: Олег Ильич ЭПШТЕЙН
Priority date: 2010-07-15
Filing date: 2011-07-15
Publication date: 2018-08-31
Also published as: US20130004574A1; CA2804964A1; EA201300125A1; EP2593138A2; KR101901465B1; GB2496794A; CL2013000097A1; ES2425004A2; AR082245A1; GB201302654D0; US8637030B2; ES2425004R1; DE112011102355T5; WO2012007839A2; FR2962651A1; PH12013500108A1; JP2016210787A; MY157564A; CN103096927A; AU2011278032A1

Abstract

Настоящее изобретение относится к комбинированной фармацевтической композиции для лечения заболеваний и состояний желудочно-кишечного тракта функциональной этиологии, содержащей активированную-потенцированную форму антитела к мозгоспецифическому белку S-100, активированную-потенцированную форму антитела к гистамину и активированную-потенцированную форму антитела к ФНО-α. Настоящее изобретение относится также к способу лечения заболевания или состояния желудочно-кишечного тракта функциональной этиологии. Указанный способ включает назначение пациенту комбинированной фармацевтической композиции, содержащей активированную-потенцированную форму антитела к гистамину, активированную-потенцированную форму антитела к мозгоспецифическому белку S-100 и активированную-потенцированную форму антитела к ФНО-α.

Description

изобретение относится к комбинированной фармацевтической композиции для лечения заболеваний и состояний желудочно-кишечного тракта функциональной этиологии, содержащей активированную-потенцированную форму антитела к мозгоспецифическому белку S-100, активированную-потенцированную форму антитела к гистамину и активированнуюпотенцированную форму антитела к ФНО-α. Настоящее изобретение относится также к способу лечения заболевания или состояния желудочно-кишечного тракта функциональной этиологии. Указанный способ включает назначение пациенту комбинированной фармацевтической композиции, содержащей активированную-потенцированную форму антитела к гистамину, активированную-потенцированную форму антитела к мозгоспецифическому белку S-100 и активированную-потенцированную форму антитела к ФНО-α.

030542

Область техники

Настоящее изобретение касается комбинированной фармацевтической композиции и способов лечения заболеваний или состояний желудочно-кишечного тракта функциональной этиологии.

Предшествующий уровень техники

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для лечения заболеваний и состояний желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) функциональной этиологии, включая синдром раздраженного кишечника и нарушения моторно-эвакуаторной функции ЖКТ, в том числе кишечника.

Лечение эрозивно-воспалительных заболеваний желудочно-кишечного тракта, основанное на сверхмалых дозах антител к гистамину, известно из области техники (RU 2197266 С1). Но данное лекарственное средство не может обеспечить достаточную терапевтическую эффективность для лечения функциональных расстройств кишечника.

Терапевтическое действие сверхразбавленной формы (или сверхмалой дозы) антител, потенцированных по гомеопатической технологии (активированная-потенцированная форма), было обнаружено автором настоящего изобретения, доктором О.И. Эпштейном. Например, патент США № 7582294 раскрывает лекарственное средство для лечения доброкачественной гиперплазии простаты или простатита путем введения гомеопатически активированных форм антител к простатоспецифическому антигену (ПСА). Как было показано, сверхмалые дозы антител к гамма-интерферону человека оказались эффективными для лечения и профилактики заболеваний вирусной этиологии, патент США № 7572441, который включен в настоящее изобретение в виде ссылки.

Белок S-100 - это цитоплазматический кислый кальцийсвязывающий белок, который встречается преимущественно в сером веществе головного мозга, в первую очередь, в глии и Шванновских клетках. Белок существует в нескольких гомо- или гетеродимерных изоформах, состоящих из двух иммунологически отличных субъединиц: альфа и бета. Предполагается использование белка S-100 в качестве вспомогательного средства при диагностике и оценке поражений головного мозга и неврологических повреждений по причине повреждения мозга, такого как удар, Yardan et al., Usefulness of S100B Protein in Neurological Disorders, J. Pak Med Assoc Vol. 61, No. 3, March 2011, который включен в данное изобретение в качестве ссылки.

Сверхмалые дозы антител к белку S-100 продемонстрировали анксиолитическое, антиастенический, противоагрессивное, стрессозащитное, антигипоксическое, антиишемическое, нейрозащитное и ноотропное действие, Castagne V. et al., Antibodies to S100 proteins have anxiolytic-like activity at ultra-low doses in the adult rat, J. Pharm Pharmacol. 2008, 60(3):309-16; Epstein O. I., Antibodies to calcium-binding S100B protein block the conditioning of long-term sensitization in the terrestrial snail, Pharmacol Biochem Behav., 2009, 94(1):37-42; Voronina T.A. et al., Chapter 8. Antibodies to S-100 protein in anxiety-depressive disorders in experimental and clinical conditions. In "Animal models in biological psychiatry", Ed. Kalueff A.V. N-Y, "Nova Science Publishers, Inc.", 2006, p. 137-152, которые включены в настоящую заявку в виде ссылки.

Настоящее изобретение относится к комбинированной фармацевтической композиции и способу лечения заболевания или состояния желудочно-кишечного тракта, в том числе синдрома раздраженного кишечника и нарушения моторно-эвакуаторной функции.

Решение существующей проблемы заключается в создании комбинированной фармацевтической композиции для лечения и профилактики заболеваний или состояний желудочно-кишечного тракта функциональной этиологии, которая включает активированную-потенцированную форму антитела к гистамину, активированную-потенцированную форму антитела к фактору некроза опухоли-альфа (ФНО-α) и активированную-потенцированную форму антитела к мозгоспецифическому белку S-100.

Раскрытие изобретения

В одном аспекте изобретение предоставляет собой комбинированную фармацевтическую композицию, содержащую а) активированную-потенцированную форму антитела к белку S-100, б) активированную-потенцированную форму антитела к гистамину, в) активированную-потенцированную форму антитела к ФНО-α. В одном варианте реализации, комбинированная фармацевтическая композиция включает твердый носитель, при этом указанную активированную-потенцированную форму антитела к белку S100, указанную активированную-потенцированную форму антитела к гистамину и активированнуюпотенцированную форму антитела к ФНО-α орошают на указанный твердый носитель. В одном варианте комбинированная фармацевтическая композиция предоставлена в таблетированной форме.

Преимущественно, сочетание активированной-потенцированной формы антитела к белку S-100 предоставляется в виде смеси гомеопатических разведений С12, C30 и С200. Специально предусмотрено орошение указанными смесями гомеопатических разведений С12, C30, С200 твердого носителя.

Преимущественно, комбинированная фармацевтическая композиция включает указанную активированную-потенцированную форму антитела к гистамину в виде смеси гомеопатических разведений С12, C30 и С200. Специально предусмотрено орошение указанными смесями гомеопатических разведений С12, C30, С200 твердого носителя.

Преимущественно, комбинированная фармацевтическая композиция включает указанную активированную-потенцированную форму антитела к ФНО-α в виде смеси гомеопатических разведений С12,

- 1 030542

C30 и С200. Специально предусмотрено орошение указанными смесями гомеопатических разведений С12, C30, С200 твердого носителя.

Активированная-потенцированная форма антитела к гистамину может быть моноклональным, поликлональным или естественным антителом. Предпочтительно активированная-потенцированная форма антитела к гистамину является поликлональным антителом. Активированная-потенцированная форма антитела к белку S-100 может быть моноклональным, поликлональным или естественным антителом. Предпочтительно активированная-потенцированная форма антитела к белку S-100 является поликлональным антителом. Активированная-потенцированная форма антитела к ФНО-α может быть моноклональным, поликлональным или естественным антителом. Предпочтительно активированнаяпотенцированная форма антитела к ФНО-α является поликлональным антителом. Изобретение включает активированные-потенцированные формы антител к антигену, включающему последовательность, описанную в настоящем изобретении и включенную в формулу изобретения.

В одном варианте комбинированная фармацевтическая композиция включает активированнуюпотенцированную форму антитела к гистамину, приготовленного путем последовательных многократных разведений, сопровождающихся встряхиванием каждого разведения.

В одном варианте комбинированная фармацевтическая композиция включает активированнуюпотенцированную форму антитела к белку S-100, приготовленного путем последовательных многократных разведений, сопровождающихся встряхиванием каждого разведения. В одном варианте комбинированная фармацевтическая композиция включает активированную-потенцированную форму антитела к ФНО -α, приготовленного путем последовательных многократных разведений, сочетающихся встряхиванием каждого разведения. Предпочтительным является вертикальное встряхивание.

В другом аспекте изобретение предоставляет собой способ лечения заболеваний или состояний желудочно-кишечного тракта функциональной этиологии. Указанный способ включает назначение при необходимости пациенту а) активированной-потенцированной формы антитела к гистамину, б) активированной-потенцированной формы антитела к белку S-100, в) активированной-потенцированной формы антитела к ФНО-α. В основном активированная-потенцированная форма антитела к гистамину, активированная-потенцированная форма антитела к белку S-100 и активированная-потенцированная форма антитела к ФНО-α назначается в виде комбинированной фармацевтической композиции.

Известно, что заболевание или состояние желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) функциональной этиологии является по своей природе психосоматическим. В основном заболевание или состояние желудочно-кишечного тракта функциональной этиологии является синдромом раздраженного кишечника. Указывается, что боли в области живота относятся к вышеупомянутому заболеванию или состоянию желудочно-кишечного тракта функциональной этиологии. Указывается, что вышеупомянутое заболевание или состояние желудочно-кишечного тракта функциональной этиологии является диареей. Указывается, что вышеупомянутое заболевание или состояние желудочно-кишечного тракта функциональной этиологии является констипацией. Указывается, что вышеупомянутое заболевание или состояние желудочнокишечного тракта функциональной этиологии является нарушениями моторно-эвакуаторной функции желудочно-кишечного тракта.

В одном варианте исполнения комбинированная фармацевтическая композиция назначается в виде твердой оральной лекарственной формы, которая состоит из фармацевтически приемлемого носителя и указанной активированной-потенцированной формы антитела к гистамину, импрегнированного на указанном носителе, указанной активированной-потенцированной формы антитела к белку S-100, импрегнированной на указанном носителе, активированной-потенцированной формы антитела к ФНО-α, импрегнированной на указанном носителе. В одном варианте указанная твердая оральная лекарственная форма является таблетированной. Варианты выполнения проиллюстрированы в примерах.

В соответствии со способом применения настоящего изобретения, комбинированная фармацевтическая композиция может назначаться в виде одной или двух единичных дозированных форм, при том что каждая лекарственная форма назначается от одного до четырех раз в день. В одном варианте, комбинированная фармацевтическая композиция назначается два раза в день, каждое назначение состоит из двух оральных лекарственных форм. В одном варианте, комбинированная фармацевтическая композиция назначается в виде одной или двух единичных дозированных форм, притом что каждая лекарственная форма назначается два раза в день. Все варианты выполнения, описанные в связи с аспектом состава изобретения, могут быть использованы с аспектом способа лечения по настоящему изобретению. Что касается аспекта метода изобретения, специально указано, что применение комбинации изобретения может сопровождаться статистически значимым снижением оценки HADS в репрезентативной популяции пациентов.

Специально предусмотрено одновременное применение комбинированной фармацевтической композиции с дополнительным активным ингредиентом. В одном варианте, дополнительный активный ингредиент одобрен для лечения синдрома раздраженного кишечника. В описании указаны варианты исполнения.

- 2 030542

Варианты осуществления изобретения

Изобретение определяется со ссылкой на прилагаемые пункты формулы изобретения. Относительно пунктов формулы изобретения в прилагаемом глоссарии приводятся соответствующие определения.

Термин "антитело" в настоящем документе означает иммуноглобулин, который специфически связывается с той или иной пространственной и полярной организации другой молекулы, и таким образом, определяется как комплементарный к. Антитела, которые перечислены в пунктах формулы изобретения, могут включать целый иммуноглобулин или его фрагмент, могут быть естественными, поликлональными и моноклональными, а также могут включать в себя различные классы и изотипы, как, например, IgA, IgD, IgE, IgG1, IgG2a, IgG2b и IgG3, IgM и т.д. Их фрагменты могут включать Fab, Fv и F(ab')2, Fab' и др. Под единственным числом термина "антитело" подразумевается также "антитела" во множественном числе.

Термин "активированная-потенцированная форма" или "потенцированная форма", соответственно, относительно перечисленных в данном документе антител, используется для обозначения продукта гомеопатического потенцирования любого исходного раствора антител. "Гомеопатическое потенцирование" обозначает использование методов гомеопатии для передачи гомеопатической потенции в первоначальный раствор соответствующего вещества.

Однако, не ограничиваясь вышеуказанным, "гомеопатическое потенцирование" может включать, например, повторяемые последовательные разведения в сочетании с внешней обработкой, в частности, вертикальным (механическим) смешиванием на шюттель-аппарате. Т.е. первоначальный раствор антитела подвергается последовательному повторяемому разведению и многоразовому вертикальному смешиванию на шюттель-аппарате каждого полученного разведения в соответствии с гомеопатической технологией. Предпочитаемая концентрация исходного раствора антител в растворителе, предпочтительно воде или смеси вода-этиловый спирт, колеблется примерно от 0,5 до примерно 5,0 мг/мл. Предпочтительный порядок подготовки каждого компонента, т.е. раствора антител, включает использование смеси трех водных и водно-спиртовых растворов первичного матричного раствора (матричной настойки) антител разведенного 100 , 100 и 100 раз, соответственно, что эквивалентно стократному гомеопатическому разведению (С12, C30 и С200) или использование смеси из трех водных и водно-спиртовых растворов первичного матричного раствора антител, разведенных 100 , 100 и 100 раз, соответственно, что эквивалентно стократному гомеопатическому разведению (С12, C30 и С50). Примеры гомеопатического потенцирования описаны в патентах США № 7572441 и 7582294, которые включены в настоящее изобретение в виде ссылки, в полном объеме и согласно указанной цели. Так как термин "активированная-потенцированная форма" используется в пунктах формулы, термин "сверхмалые дозы" используется в примерах. Термин "сверхмалые дозы" стал специальным термином в специфической области, он был создан в результате исследования и использования гомеопатически разведенной и потенцированной формы вещества. Термин "сверхмалая доза" или "сверхмалые дозы" являются взаимозаменяемыми и прежде всего являются синонимичными термину "активированная-потенцированная" форма, использованному в пунктах формулы изобретения.

Т.е. антитело находится в "активированной-потенцированной" форме, если присутствуют три фактора. Во-первых, "активированная-потенцированная" форма антитела - это продукт процесса подготовки, общепринятой в гомеопатической технологии. Во-вторых, "активированная-потенцированная" форма антитела должна обладать биологической активностью, которая определена методами, общепринятыми в современной фармакологии. И в-третьих, биологическая активность, выявленная "активированнойпотенцированной" формой антитела, не может быть объяснена наличием молекулярной формы антитела в конечном продукте гомеопатического процесса подготовки.

Например, активированная-потенцированная форма антител может быть получена, подвергая исходное, изолированное антитело в молекулярной форме, последовательным многократным разведениям, совместно с внешним воздействием, таким как механическое смешивание на шюттель-аппарате. Внешняя обработка, в ходе уменьшения концентрации, также может быть достигнута, например, под воздействием ультразвуковых, электромагнитных или других физических факторов, В. Швабе "Homeopathic medicines", M., 1967, патенты США № 7229648 и 4311897, которые включены в этот документ в виде ссылки, в полном объеме и согласно указанной цели, описывают такие процессы, которые являются общепризнанными методами гомеопатического потенцирования в искусстве гомеопатии. Эта процедура дает начало равномерному уменьшению концентрации начальной молекулярной формы антитела. Эта процедура повторяется до получения желаемой гомеопатической потенции. Для отдельного антитела необходимая гомеопатическая потенция может быть определена путем выполнения промежуточных разбавлений биологического тестирования в необходимой фармакологической модели. Хотя не ограничиваясь вышеуказанным, "гомеопатическое потенцирование" может включать, например, повторяемые последовательные разведения в сочетании с внешней обработкой, в частности вертикальным (механическим) смешивании на шюттель-аппарате. Т.е. первоначальный раствор антитела подвергается последовательному повторяемому разведению и многократному вертикальному смешиванию на шюттель-аппарате каждого полученного раствора в соответствии с гомеопатической технологией. Предпочитаемая концентрация исходного раствора антител в растворителе, предпочтительно воде или смеси вода-этиловый

- 3 030542

спирт, колеблется примерно от 0,5 до приблизительно 5,0 мг/мл. Стандартным порядком подготовки каждого компонента, т.е. раствором антител, является использование смеси трех водных и водноспиртовых растворов первичного матричного раствора (матричной настойки) антител, разведенного 100 , 100 и 100 раз, соответственно, что эквивалентно сотенному гомеопатическому разведению

С12, C30 и С200 или смеси из трех водных и водно-спиртовых растворов первичного матричного раство12 30 50

ра антител (матричной настойки), разведенному 100 , 100 и 100 раз, соответственно, что эквивалентно сотенному гомеопатическому разведению С12, C30 и С50. Примеры того, как получить необходимую потенцию, также предоставляются, например, в патентах США № 7229648 и 4311897, которые включены в виде ссылки и согласно указанной цели. Процедура, применимая к "активированной-потенцированной" форме антител, описанная в данной заявке, также более подробно излагается ниже.

Наблюдалось значительное количество разногласий относительно гомеопатического лечения людей. Так как данное изобретение основывается на принятых гомеопатических процессах получения "активированной-потенцированной" формы антител, в то же время данное изобретение не основывается исключительно на гомеопатии для предоставления доказательств воздействия. Изобретателем по настоящей заявке было неожиданно обнаружено и продемонстрировано в достаточной степени в принятых фармакологических моделях, что растворитель, в конечном счете, полученный в результате последовательного многократного разведения начальной молекулярной формы антитела, обладает определенной активностью, не связанной с наличием следов молекулярной формы антител в целевом растворе. "Активированная-потенцированная" форма антитела, предоставленная здесь, проверена на биологическую активность в общепринятых фармакологических моделях действия, в соответствующих in vitro экспериментах, или соответствующих in vivo на моделях животных. Эксперименты, приведенные ниже, иллюстрируют проявление биологической активности в таких моделях. Человеческие клинические исследования свидетельствуют, что активность, наблюдаемая на моделях животных, является хорошо переносимой на человеческую терапию. Исследования людей также свидетельствуют о наличии "активированныхпотенцированных" форм, описанных в данном документе, для лечения определенных человеческих болезней или нарушений, общепринятых в качестве патологических состояний в медицинской науке.

Также, указанная "активированная-потенцированная" форма антитела распространяется только на те растворы или твердые препараты, биологическая активность которых не может быть объяснена наличием молекулярной формы антитела, остающегося от начального, стартового раствора. Т.е. поскольку рассматривается, что "активированная-потенцированная" форма антитела может содержать следы начальной молекулярной формы антитела, то специалист в данной области не сможет точно отнести наблюдаемую биологическую активность в принятых фармакологических моделях к оставшейся молекулярной форме антитела, из-за чрезвычайно низких концентраций молекулярной формы антитела, остающегося после последовательных разведений. Поскольку изобретение не ограничено никакой определенной теорией, биологическая активность "активированной-потенцированной" формы антител данного изобретения не относится к начальной молекулярной форме антитела. Предпочтительной является "активированная-потенцированная" форма антитела в жидкой или твердой форме, в которой концентрация молекулярной формы антитела находится ниже предела обнаружения относительно принятых аналитических методов, таких как капиллярный электрофорез и высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ).

В частности, предпочтительной является "активированная-потенцированная" форма антитела в жидкой или твердой форме, в которой концентрация молекулярной формы антитела находится ниже числа Авогадро. В фармакологии молекулярных форм терапевтических веществ, является распространенной практикой создание кривой доза-реакция, в которой уровень фармакологической реакции строится относительно концентрации активного лекарственного средства, назначаемого субъекту, или проверенного in vitro. Минимальный уровень препарата, который производит любую обнаруживаемую реакцию, известен как пороговая доза. Специально указано и является предпочтительным то, что "активированная-потенцированная" форма антител содержит молекулярные антитела, если таковые имеются, при концентрации ниже пороговой дозы для молекулярной формы антитела в данной биологической модели.

Термин "заболевание или состояние желудочно-кишечного тракта функциональной этиологии" или "функциональное расстройство кишечника" следует понимать как охватывающее такие заболевания или состояния желудочно-кишечного тракта, включая кишечник, то есть наличие нарушений функционирования желудочно-кишечного тракта, которые препятствуют жизнедеятельности пациента до любой заметной степени. Но, в частности, этот термин означает расстройства или состояние, которые наблюдали и переживали не в результате органических повреждений, но относительно нервного, психосоматического и/или гуморального нарушения регуляции деятельности желудочно-кишечного тракта (например, при органической повреждения кишечника или полностью отсутствует, или играет второстепенную роль в этиологии смерти и/или накопленных данных о пациенте). Функциональные расстройства кишечника характеризуется отсутствием морфологических изменений (с помощью которого было бы возможно объяснить клинические симптомы), а также их связью, во-первых, с повышенной возбудимостью, вовторых, с сенсорной гиперчувствительностью и, в-третьих, с несоответствующей реакцией внутренних органов на сигналы центральной нервной системы под влиянием психологических факторов.

- 4 030542

Функциональные расстройства кишечника являются наиболее частой формой функциональной патологии желудочно-кишечного тракта и наблюдаются у 40-70% больных гастроэнтерологического профиля. Принято считать, что развитие функциональных расстройств кишечника зависит от генетических факторов, факторов окружающей среды, психосоциальных факторов, висцеральной гиперчувствительности и инфекций.

Функциональные расстройства кишечника являются частью большой группы заболеваний желудочно-кишечного тракта, связанные с функциональной патологией и, в соответствии с классификацией функциональных расстройств кишечника (Римский консенсус, 1999), они включают в себя такие клинические состояния, как синдром раздраженного кишечника (СРК), функциональный метеоризм, функциональный запор, функциональная диарея и неспецифические функциональные расстройства кишечника.

В патогенезе этих заболеваний, нарушения моторной функции желудка и кишечника, как полагают, играют важную роль. Особенностью пациентов с функциональными расстройствами кишечника является увеличение моторной и сенсорной реакции, и появление болей в животе в ответ на стресс. Симптомы функциональных расстройств кишечника включает в себя жалобы на боли в животе (обычно уменьшение после дефекации), метеоризм, урчание, чувство неполного опорожнения кишечника, императивные позывы к дефекации, констипация, понос или их чередование и/или сочетание. Клинические признаки, характерные для всех функциональных расстройств желудочно-кишечного тракта включают длительное (обычно несколько лет) течение заболевания без заметной прогрессии; степень и разнообразие проявления клинической картины (сочетание болей в животе, диспепсических расстройств и нарушения кишечной функции с мигренеподобными головными болями, нарушениями сна, ощущением комка при глотании, дискомфортом при вдыхании, невозможностью спать на левом боку, более частым мочеиспусканием, различными спазматическими реакциями толстой кишки и другими вегетативными расстройствами); переменный характер жалоб; связь ухудшения здоровья с психо-эмоциональными факторами.

Синдром раздраженного кишечника (СРК) является одним из наиболее часто встречающихся функциональных расстройств кишечника, который обнаруживается, согласно последним наблюдениям, как в странах третьего мира, так и в развитых странах. Распространенность СРК в большинстве стран мира в среднем составляет 20%, варьируясь, по данным разных исследований, от 9 до 48%. Пиковая заболеваемость приходится на рабочий возраст 30-40 лет. Соотношение женщин и мужчин колеблется от 1:1 до 2:1. Среди мужчин после 50 лет, СРК также широко распространен, как и среди женщин. Средний возраст больных составляет 24-41 год. Синдром раздраженного кишечника (СРК) является одним из наиболее часто встречающихся функциональных расстройств современного человека.

Этиология и патогенез СРК являются сложными и не еще не до конца изученными. Большинство исследователей соглашаются с тем, что психоэмоциональный стресс играет важную роль в развитии СРК. В зависимости от преобладающих симптомов, можно выделить три возможных варианта СРК: с преобладанием болей в животе и метеоризмом, с преобладанием диареи, и с преобладанием констипации.

До 1988 г. СРК описывался под разными названиями, как например спастический колит, кишечная слизистая колика, диарея на нервной почве, раздражение толстой кишки, функциональный кишечный дистресс-синдром и т.д. Эти названия отражают различные симптомы заболевания и не отражают единое понимание проблемы. В 1988 году в Риме, Международная исследовательская группа по функциональным расстройствам желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) впервые официально утвердила выражение "синдром раздраженного кишечника", дала его определение и разработала критерии постановки диагноза, которые были впоследствии названы "Римскими критериями СРК". В 1999 г. критерии были дополнены и названы "Римские критерии II для СРК". В соответствии с "Римскими критериями II", СРК является определенным набором функциональных расстройств продолжительностью не менее 12 недель, в течение последних 12 месяцев, которые проявляются болью в животе и или дискомфортом, которые проходят после дефекации, сопровождаются изменениями частоты и консистенции стула и сопровождаются на протяжении 25% времени заболевания не менее чем двумя устойчивыми симптомами нарушения функции кишечника - изменениями частоты стула, консистенции кала, самого акта дефекации (императивные позывы, тенезмы, чувство неполного опорожнения кишечника, дополнительные усилия при дефекации), секрецией слизи с калом и метеоризмом.

При лечении этого синдрома, среди других активно используемых препаратов находятся регуляторы моторной деятельности кишечника и спазмолитические средства.

Настоящее изобретение предоставляет собой комбинированную фармацевтическую композицию, которая включает в себя активированные-потенцированные формы антител к гистамину, ФНО-α и мозгоспецифическому белку S-100, каждая из которых может быть подготовлена в соответствии с гомеопатической технологией потенцирования при повторном, соответствующем разведении и промежуточном внешнем встряхивании, что описано более подробно в настоящем изобретении ниже. Комбинированная фармацевтическая композиция по настоящему изобретению особенно эффективна при лечении функциональных расстройств кишечника.

Как показано в примерах, комбинированная фармацевтическая композиция по настоящему изобретению обладает неожиданным синергетическим терапевтическим эффектом, который проявляет, в част- 5 030542

ности, свою терапевтическую эффективность при лечении функциональных расстройств кишечника, синдрома раздраженного кишечника, нарушения моторно-эвакуаторной функции ЖКТ, включая кишечника, констипацию, диарею и другие расстройства подобной этиологии. Эффект комбинированной фармацевтической композиции, как показано в общепринятых и соответствующих экспериментальных моделях, проявляется, например, при нормализации нервной, психосоматической и гуморальной регуляции функции кишечника, снижении висцеральной гиперчувствительности к расширению рецепторов толстой кишки, что приводит к восстановлению нарушений опорно-двигательного аппарата кишечника, уменьшению ощущения вздутия брюшной полости и переполнения желудка, снижению проявления абдоминального болевого синдрома. Наряду с этим, происходит ослабление гладкой мускулатуры, снижение тонуса стенки желудочно-кишечного тракта (ЖКТ), снижение давления внутри диафрагмы, нормализации консистенции стула, его частоту и связанные с ним симптомы (сокращение императивных позывов, ложные позывы к дефекации, чувство неполного опорожнения кишечника, дополнительные усилия при дефекации и др.).

Специально указано то, что комбинированная фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может быть использована совместно с другими активными ингредиентами, особенно теми, которые используются для лечения заболеваний или состояний ЖКТ. Не ограничивающими примерами соответствующих дополнительных активных ингредиентов являются антагонисты 5-HT3, такие как Алосетрон, Цилансетрон, Рамосетрон, антагонисты 5-НТ4, такие как Тегасерод, смешанный антагонист 5НТ4/антагонистны 5-HT3, такие как Рензаприд и Мозаприд, опиоидной средства, такие как альвимопан и асимадолин, антагонисты рецептора КРГ (кортикотропин-рилизинг-гормона), активаторы хлорных каналов, такие как Любипростон, антагонисты ХЦК (холецистокинина), такие как Декслоксиглумид, антагонисты нейрокинина, антидепрессанты, включая трициклические антидепрессанты, такие как Амитриптилин, Кломипрамин, Демексиптилин, Имипрамин, Лофепрамин, Метапрамин, Нитроксазепин, Нортритилин, Пипофези, Пропизепин, Протриптилин и Хинупрамин, СИОЗС, такие как циталопрам, дапоксетин, эсциталопрам, флуоксетин, флувоксамин, пароксетин, сертралин, вилазодон, спазмолитики, антихолинергические/антимускариновые средства (например, гиосциамин, дицикломин, cimetropium), средства для расслабления прямой гладкой мышцы (например, мебеверин, пинаверин, октилониум бромид), противопоносные, например, лоперамид, бензодиазепины, например, бекстофизопам, и антибиотики, такие как линкозамиды, цефалоспорины, ансамицины, аминогликозиды, пенициллины, фторхинолоны, сульфаниламиды, тетрациклины, макролиды, линкозамиды, монобактамы и нитрофураны.

Комбинированная фармацевтическая композиция по настоящему изобретению расширяет арсенал препаратов для лечения и профилактики функциональных расстройств кишечника.

Поликлональные антитела к гистамину, которые являются биогенным амином (4-(2аминоэтил)имидазолом или бета-имидазолэтиламином с химической формулой C₅H₉N₃), могут быть получены с помощью адъювантного и промышленного производства дигидрохлорида гистамина в качестве иммуногена (антигена) для иммунизации кроликов.

Перед отбором крови, выполняется 1-3 внутривенных инъекций на протяжении 7-9 дней, с целью повышения уровня антител. В процессе иммунизации кроликов, небольшие образцы крови отбираются для оценки количества антител. Максимальный уровень иммунной реакции растворимого антигена достигается в течение 40-60 дней после первой инъекции антигена. После окончания первого цикла иммунизации кроликов, в течение 30 дней, разрешается дождаться восстановления здорового состояния и затем провести повторную иммунизацию, которая включает в себя 1-3 внутривенных инъекций. Для получения антисыворотки от иммунизированных кроликов, кровь собирают в центрифужную тестовую пробирку в объеме 50 мл. С помощью деревянного шпателя, образованные сгустки удаляются со стенок пробирки, и палочка помещается в сгусток, образованный в центре пробирки. Кровь помещают в холодильную камеру (с температурой 40°С) на ночь. На следующий день сгусток, прикрепленный к шпателю, удаляют, а оставшуюся жидкость центрифугируют при 13000g в течение 10 мин. Супернатант (надосадочная жидкость) является антисывороткой. Полученная антисыворотка должна обладать желтым окрасом. К антисыворотке добавляют 20% (концентрация по весу) NaN₃ до конечной концентрации 0,02%, которая хранится до использования в замороженном состоянии при температуре -20°С, или без NaN₃ при температуре -70°С. Для разделения антисыворотки антител гистамина абсорбцию твердой фазы проводят в следующей последовательности:

1) 10 мл антисыворотки кролика разбавляют 2Х с 0,15 М NaCl, добавляют 6,26 г Na₂SO₄, затем смешивают и инкубируют 12-16 ч при 4°С;

2) выпавший осадок удаляют путем центрифугирования, растворяют в 10 мл фосфатного буфера и затем диализируют на том же буфере в течение ночи при комнатной температуре;

3) после удаления осадков центрифугированием раствор наносят на колонку с ДЭАЭ-целлюлозой, уравновешивают фосфатным буфером;

4) фракция антител определяют путем измерения оптической плотности элюата при 280 нм.

После чего антитела очищают с помощью аффинной хроматографии путем крепления полученных

антител к гистамину, которые обнаруживают в нерастворенной матрице с последующим элюированием концентрированным соляными растворами.

- 6 030542

Буферный раствор поликлональных антител кролика к гистамину, полученным таким образом, очищают на антигене, при концентрации 0,5-5,0 мг/мл, предпочтительно 2,0-3,0 мг/мл, используют в виде матричного раствора (первичного) для последующей подготовки активированной-потенцированной формы.

Поликлональные антитела к фактору некроза опухолей альфа (ФНО-α) могут быть получены вышеупомянутым способом получения поликлональных антител гистамина, используя целую молекулу фактора некроза опухолей альфа следующей последовательности.

Последовательность № 1.

Met

Ser

Thr

Glu

Ser

Met

Ile

Arg

Asp

Val

Glu

Leu

Ala

Glu

1

5

10

15

Ala

Leu

Pro

Lys

Thr

Gly

Pro

Gln

Gly

Ser

Arg

Cys

16

20

25

30

Leu

Phe

Leu

Ser

Leu

Phe

Ser

Phe

Leu

Ile

Val

Ala

Gly

Ala

Thr

31

35

40

45

Thr

Leu

Phe

Cys

Leu

His

Phe

Gly

Val

Ile

Gly

Pro

Gln

Arg

46

50

55

60

Glu

Phe

Pro

Arg

Asp

Leu

Ser

Leu

lie

Ser

Pro

Leu

Ala

Gln

61

65

70

75

Ala

Val

Arg

Ser

Arg

Thr

Pro

Ser

Asp

Lys

Pro

Val

Ala

76

80

85

90

His

Val

Ala

Asn

Pro

Gln

Ala

Glu

Gly

Gln

Leu

Gln

Trp

Leu

91

95

100

105

Asn

Arg

Ala

Asn

Ala

Leu

Ala

Asn

Gly

Val

Glu

Leu

Arg

106

110

115

120

Asp

Asn

Gln

Leu

Val

Pro

Ser

Glu

Gly

Leu

Tyr

Leu

Ile

Tyr

121

125

130

135

Ser

Gln

Val

Leu

Phe

Lys

Gly

Gln

Gly

Cys

Pro

Ser

Thr

His

Val

136

140

145

150

Leu

Thr

His

Thr

Ile

Ser

Arg

Ile

Ala

Val

Ser

Tyr

Gln

Thr

151

155

160

165

Lys

Val

Asn

Leu

Ser

Ala

lie

Lys

Ser

Pro

Cys

Gln

Arg

Glu

166

no

175

180

Thr

Pro

Glu

Gly

Ala

Glu

Ala

Lys

Pro

Trp

Tyr

Glu

Pro

lie

Tyr

181

185

190

195

Leu

Gly

Val

Phe

Gln

Leu

Glu

Lys

Gly

Asp

Arg

Leu

Ser

Ala

196

200

205

210

Glu

lie

Asn

Arg

Pro

Asp

Tyr

Leu

Asp

Phe

Ala

Glu

Ser

Gly

Gln

211

215

220

225

Val

Tyr

Phe

Gly

Ile

lie

Ala

Leu

226

230

233

Для получения поликлональных антител к фактору некроза опухолей альфа (ФНО-α) также можно использовать полипептидный фрагмент фактора некроза опухолей, выбранный, например, из следующих последовательностей.

Последовательность № 2.

Pro Ser Asp Lys Pro 84 88

Последовательность № 3.

Val Ala Asn Pro Gln 93 97

Последовательность № 4.

Arg 65

Asp

Leu

Ser Leu

Ile 70

Ser

Pro

Leu

Ala

Gln 75

Ala

Val

Arg

Ser

Arg

Thr

Pro

Ser

Asp

Lys

Pro

Val

Ala

76

80

85

90

His

Val

val

Ala

Asn

Pro

Gln

Ala

Glu

Gly

Gln

Leu

Gln

Trp

Leu

91

95

100

105

Asn

Arg

Ala

Asn

Ala

Leu

Ala

Asn

Gly

Val

Glu

Leu

Arg

106

110

115

120

Asp

Asn

Gln

Leu

Val

Pro

Ser

Glu

Gly

Leu

Tyr

Leu

lie

Tyr

121

125

130

135

Ser

Gln

Val

Leu

Phe

Lys

Gly

Gln

Gly

Cys

Pro

Ser

Thr

His

Val

136

140

145

150

Leu

Thr

His

Thr

Ile

Ser

Arg

Ile

Ala

val

Ser

Tyr

Gln

Thr

151

155

160

165

Lys

Val

Asn

Leu

Ser

Ala

Ile

Lys

Ser

Pro

Cys

Gln

Arg

Glu

166

170

175

180

Thr

Pro

Glu

Gly

Ala

Glu

Ala

Lys

Pro

Trp

Tyr

Glu

Pro

Ile

Tyr

181

185

190

195

Leu

Gly

Val

196

199

- 7 030542

Последовательность № 5.

	Val	Arg Ser Ser Ser Arg	Thr Pro Ser Asp Lys	Pro Val Ala
	77	80	85	90
His	Val	Val
91		93

Последовательность № 6.

	Phe	Leu	Ser	Leu	Phe	Ser	Phe	Leu	Ile Val	Ala Gly Ala Thr
	32			35					40	45
Thr	Leu	Phe	Cys	Leu	Leu	His	Phe	Gly
46				50				54

Последовательность № 7. 56-73

			Ile	Gly	Pro	Gln Arg
			56			60
Glu	Glu Phe Pro Arg Asp Leu	Ser Leu Ile	Ser	Pro	Leu
61	65	70			73

Последовательность № 8.

123-

-160

Gln

Leu

Val

Pro

Ser

Glu

Gly

Leu

Tyr

Leu

Ile

Tyr

123

125

130

135

Ser

Gln

Val

Leu

Phe

Lys

Gly

Gln

Gly

Cys

Pro

Ser

Thr

His

Val

136

140

145

150

Leu

Thr

His

Thr

Ile

Ser

Arg

Ile

Ala

151

155

160

Последовательность № 9.

176-190

Pro Cys Gln Arg Glu 176 180

Thr Pro Glu Gly Ala Glu Ala Lys Pro Trp 181 185 190

Последовательность № 10.

5-45

Ser

Met

Ile

Arg

Asp

Val

Glu

Leu

Ala

Glu

5

10

15

Ala

Leu

Pro

Lys

Thr

Gly

Pro

Gln

Gly

Ser

Arg

Cys

16

20

25

30

Leu

Phe

Leu

Ser

Leu

Phe

Ser

Phe

Leu

Ile

Val

Ala

Gly

Ala

Thr

31

35

40

45

Последовательность № 11. 150-184

val

150

Leu

Thr

His

Thr

Ile

Ser

Arg

Ile

Ala

Val

Ser

Tyr

Gln

Thr

151

155

160

165

Lys

Val

Asn

Leu

Ser

Ala

lie

Lys

Ser

Pro

Cys

Gln

Arg

Glu

166

170

175

180

Thr

Pro

Glu

Gly

181

184

Последовательность № 12. 77-233

Val 77

Arg

Ser

Ser 80

Ser

Arg

Thr

Pro

Ser 85

Asp

Lys

Pro

Val

Ala 90

His

val

Val

Ala

Asn

Pro

Gln

Ala

Glu

Gly

Gln

Leu

Gln

Trp

Leu

91

95

100

105

Asn

Arg

Ala

Asn

Ala

Leu

Ala

Asn

Gly

Val

Glu

Leu

Arg

106

110

115

120

Asp

Asn

Gln

Leu

Val

Pro

Ser

Glu

Gly

Leu

Tyr

Leu

Ile

Tyr

121

125

130

135

Ser

Gln

Val

Leu

Phe

Lys

Gly

Gln

Gly

Cys

Pro

Ser

Thr

His

Val

136

140

145

150

Leu

Thr

His

Thr

Ile

Ser

Arg

Ile

Ala

Val

Ser

Tyr

Gln

Thr

151

155

160

165

Lys

Val

Asn

Leu

Ser

Ala

Ile

Lys

Ser

Pro

Cys

Gln

Arg

Glu

166

170

175

180

Thr

Pro

Glu

Gly

Ala

Glu

Ala

Lys

Pro

Trp

Tyr

Glu

Pro

Ile

Tyr

181

185

190

195

Leu

Gly

Val

Phe

Gln

Leu

Glu

Lys

Gly

Asp

Arg

Leu

Ser

Ala

196

200

205

210

Glu

ile

Asn

Arg

Pro

Asp

Tyr

Leu

Asp

Phe

Ala

Glu

Ser

Gly

Gln

211

215

220

225

Val

Tyr

Phe

Gly

Ile

Ala

Leu

226

230

233

Мозгоспецифический белок S100, экспрессированный нейронами и глиальными клетками (астроцитами и олигодендроцитами), непосредственно или посредством взаимодействия с другими белками выполняет в ЦНС целый ряд функций, направленных на поддержание нормального функционирования

- 8 030542

мозга, в том числе, процессов затрагивающих обучение и память, рост и жизнеспособность нейронов, регулирование метаболических процессов в нейронных тканях и т.д. Для приготовления активированной-потенцированной формы антител, антисыворотка к мозгоспецифическому белку S-100 может быть получена из мозговой ткани быка и обработана следующим образом:

мозговые ткани быка, замороженные в жидком азоте, преобразуются в порошок с помощью специализированного измельчителя;

белки выделяются в соотношении 1:3 (вес/объем), используя буфер извлечения с помощью гомогенизации;

гомогенат нагревают в течение 10 мин при 60°С, а затем охлаждают до 4°С в ледяной ванной; термолабильные белки удаляются путем центрифугирования;

фракционирование сульфатом аммония осуществляют в несколько этапов, с последующим удалением осажденных белков;

фракцию, содержащую белок S-100, осаждают с помощью 100% насыщенным сульфатом аммония, выполненный путем снижения рН до 4,0; нужную фракцию собирают центрифугированием;

осадок растворяют в минимальном объеме буфера, содержащего ЭДТК и меркаптоэтанол; осадок диализируют деионизированной водой и лиофилизируют;

фракционирование кислых белков выполняется при помощи хроматографии в ионообменной среде, ДЭАЭ-целлюлозе DE-52, а затем ДЭАЭ-сефадексе А-50;

собранные и диализированные фракции, которые содержат протеин S-100, подразделяются в зависимости от молекулярного веса с помощью гель-фильтрации на сефадексе G-100;

очищенный белок S-100 диализуют и лиофилизируют.

Молекулярная масса очищенного мозгоспецифического белка S-100 составляет 21000 Д. Поликлональные антитела к белку S-100 могут быть также получены при помощи аналогичного метода, описанного для гистамина антител с использованием адъюванта.

Вся молекула белка S-100 может быть использована в качестве иммуногена (антигена) для иммунизации кроликов.

Бычий S100B (последовательность № 13).

Met

Ser

Glu

Leu

Glu

Lys

Ala

Val

Ala

Leu

He

Asp

Val

Phe

1

5

10

15

His

Gln

Tyr

Ser

Gly

Arg

Glu

Gly

Asp

Lys

His

Lys

Leu

Lys

16

20

25

30

Ser

Glu

Leu

Lys

Glu

Leu

Ile

Asn

Glu

Leu

Ser

His

Phe

Leu

31

35

40

45

Glu

lie

Lys

Glu

Gln

Glu

Val

Asp

Lys

Val

Met

Glu

Thr

46

50

55

60

Leu

Asp

Ser

Asp

Gly

Asp

Gly

Glu

Cys

Asp

Phe

Gln

Glu

Phe

Met

61

65

70

75

Ala

Phe

val

Ala

Met

Ile

Thr

Ala

Cys

His

Glu

Phe

Glu

76

80

85

90

His Glu 91 92

Человеческий S100B (последовательность № 14).

Met 1

Ser Glu Leu Glu Lys Ala Met Val Ala

Leu

Ile

Asp

Val

Phe 15

5

10

His

Gln

Tyr

Ser

Gly

Arg

Glu

Gly

Asp

Lys

His

Lys

Leu

Lys

16

20

25

30

Ser

Glu

Leu

Lys

Glu

Leu

Ile

Asn

Glu

Leu

Ser

His

Phe

Leu

31

35

40

45

Glu

Ile

Lys

Glu

Gln

Glu

Val

Asp

Lys

Val

Met

Glu

Thr

46

50

55

60

Leu

Asp

Asn

Asp

Gly

Asp

Gly

Glu

Cys

Asp

Phe

Gln

Glu

Phe

Met

61

65

70

75

Ala

Phe

Val

Ala

Met

Val

Thr

Ala

Cys

His

Glu

Phe

Glu

76

80

85

90

His Glu 91 92

Человеческий S100A1 (последовательность № 15).

Met

Gly

Ser

Glu

Leu

Glu

Thr

Ala

Met

Glu

Thr

Leu

lie

Asn

Val

1

5

10

15

Phe

His

Ala

His

Ser

Gly

Lys

Glu

Gly

Asp

Lys

Tyr

Lys

Leu

Ser

16

20

25

30

Lys

Glu

Leu

Lys

Glu

Leu

Gln

Thr

Glu

Leu

Ser

Gly

Phe

31

35

40

45

Leu

Asp

Ala

Gln

Lys

Asp

Val

Asp

Ala

Val

Asp

Lys

Val

Met

Lys

- 9 030542

46

50

55

60

Glu

Leu

Asp

Glu

Asn

Gly Asp

Gly

Glu

Val

Asp

Phe

Gln

Glu

Tyr

61

65

70

75

Val

Leu

Val

Ala

Ala Leu

Thr

Val

Ala

Cys

Asn

Phe

76

80

85

90

Trp

Glu

Asn

Ser

91

94

Бычий S100A1 (последовательность № 16).

Met

Gly

Ser

Glu

Leu

Glu

Thr

Ala

Met

Glu

Thr

Leu

lie

Asn

Val

1

5

10

15

Phe

His

Ala

His

Ser

Gly

Lys

Glu

Gly

Asp

Lys

Tyr

Lys

Leu

Ser

16

20

25

30

Lys

Glu

Leu

Lys

Glu

Leu

Gln

Thr

Glu

Leu

Ser

Gly

Phe

31

35

40

45

Leu

Asp

Ala

Gln

Lys

Asp

Ala

Asp

Ala

Val

Asp

Lys

Val

Met

Lys

46

50

55

60

Glu

Leu

Asp

Glu

Asn

Gly

Asp

Gly

Glu

Val

Asp

Phe

Gln

Glu

Tyr

61

65

70

75

Val

Leu

Val

Ala

Leu

Thr

Val

Ala

Cys

Asn

Phe

76

80

85

90

Trp

Glu

Asn

Ser

91

94

Для получения мозгоспецифической антисыворотки к выделенному мозгоспецифическому белку S100, смесь очищенного белка S-100 (антигена) может быть получена в комплексе с метилированным бычьим сывороточным альбумином в качестве носителя с использованием адъюванта Фрейнда, который вводится подкожно лабораторным животным, кроликам, в область позвоночника в количестве 1-2 мл. Антисыворотка может обладать титром 1:500-1:1000.

Для приготовления компонентов комбинированной фармацевтической композиции желательно использовать поликлональные антитела к гистамину, ФНО-α и мозгоспецифического белка S-100, используя первоначальный, матричный (первичный) раствор с концентрацией 0,5+5,0 мг/мл (предпочтительно, 2,0+3,0 мг/мл). Впоследствии, матричный раствор разводят, согласно далее предоставленному описанию, чтобы подготовить активированную-потенцированную форму компонента.

Комбинированная фармацевтическая композиция может быть в жидкой или твердой форме. Каждая из активированной-потенцированной формы антител, которые включены в лекарственный препарат, готовится из первоначальной молекулярной формы антитела посредством процесса, принятого в гомеопатической практике. Стартовые антитела могут быть моноклональными или поликлональными антителами, подготовленными в соответствии с известными процессами, например, как описано в Immunotechniques, G. Frimel, M., "Meditsyna", 1987, p. 9-33; "Hum. Antibodies. Monoclonal and recombinant antibodies, 30 years after" by Laffly E., Sodoyer R. - 2005 - Vol. 14. - N 1-2. P. 33-55, которые включены в данный документ в виде ссылок.

Моноклональные антитела могут быть получены, например, посредством метода гибридом. Начальная стадия процесса включает в себя иммунизацию на основе принципов, которые уже разработаны в ходе подготовки поликлональной антисыворотки. Дальнейшие этапы работы включают производство гибридных клеток, которые вырабатывают клоны антител с идентичной специфичностью. Их отдельное выделение производится с использованием тех же методов, что и в случае с подготовкой поликлональной антисыворотки.

Поликлональные антитела могут быть получены с помощью активной иммунизации животных. Для этой цели, например, соответствующие животные (например, кролики) получают серию инъекций соответствующего антигена. Иммунная система животных вырабатывает соответствующие антитела, которые известным способом собираются у животных. Эта процедура позволяет подготовить сыворотку насыщенную моноспецифическими антителами.

Если необходимо, то сыворотка, содержащая антитела, может быть очищена, например, с помощью аффинной хроматографии, солевого фракционирования или ионообменной хроматографии. Полученная очищенная, насыщенная антителами сыворотка может быть использована в качестве исходного материала для подготовки активированной-потенцированной формы антител.

Предпочитаемые концентрации полученного начального раствора антитела в растворителе, предпочтительно воды или смеси воды-этилового спирта, колеблются приблизительно от 0,5 до приблизительно 5,0 мг/мл.

Предпочтительная процедура подготовки каждого компонента комбинированной фармацевтической композиции, согласно настоящему изобретению, включает использование смеси трех водных и водно-спиртовых растворов первичного матричного раствора антител, разведенных 100¹², 100³⁰ и 100⁵⁰раз, соответственно, что эквивалентно сотенному гомеопатическому разведению С12, C30 и С50 или разведению 100¹², 100³⁰ и 100²⁰⁰ раз, соответственно, что эквивалентно сотенному гомеопатическому разведению С12, C30 и С200. Для подготовки твердой лекарственной формы, твердый носитель обрабатывается необходимым раствором, полученным при помощи гомеопатического процесса. Для получения

- 10 030542

твердой единичной дозированной формы комбинированной фармацевтической композиции по настоящему изобретению, масса носителя орошается каждым из растворов. Специально указан любой порядок орошения твердого носителя для подготовки нужной комбинации твердой лекарственной формы, включая последовательную пропитку носителя в любой последовательности с необходимым конечным разведением или смеси растворов, а также орошением носителя с жидкой смесью всех компонентов.

В предпочитаемом варианте выполнения, стартовый материал для подготовки активированнойпотенцированной формы, которая включает в себя комбинацию по настоящему изобретению, является поликлональным, полученным от животного, антителом к соответствующему антигену.

Типовой порядок подготовки стартовых поликлональных антител может быть описан следующим образом. Через 7-9 дней до отбора крови, 1-3 внутривенных инъекций необходимого антигена выполняется кроликам для повышения уровня поликлональных антител в кровотоке кроликов. После иммунизации, образцы крови отбираются для проверки уровня антител. Как правило, максимальный уровень иммунной реакции достигается в течение 40 - 60 дней после первой инъекции антигена. После завершения первого цикла иммунизации, для кроликов выдерживают 30-дневный реабилитационный период, после которого выполняется реиммунизация, при помощи 1-3 внутривенных инъекций.

Для получения антисыворотки, содержащей необходимые антитела, иммунизированную кровь кроликов собирают от кроликов и помещают в 50 мл центрифужную пробирку.

Сгустки продукта, сформированные на стенках пробирки, снимаются при помощи деревянного шпателя, а палочку помещают в сгусток, в центр пробирки. Затем кровь помещают в холодильник на одну ночь при температуре около 40°С. На следующий день сгусток на шпателе удаляют, а оставшуюся жидкость центрифугируют в течение 10 мин при 13 тыс. об/мин. Надосадочная жидкость является целевой антисывороткой. Полученная антисыворотка обычно обладает желтой окраской. 20% NaN₃ (концентрацию по весу) добавляют в антисыворотку к конечной концентрации от 0,02% и хранят до использования в замороженном состоянии при температуре -20°С, или без NaN3 при температуре -70°С.

10 мл антисыворотки кроликов, двукратно растворенной при помощи 0,15 М NaCl, после которой 6,26 г Na₄SO₄ добавляют, смешивают и инкубируют на протяжении 12-16 ч при 4°С. Осадок удаляют центрифугированием, разбавляют в 10 мл фосфатного буфера и диализируют на том же буфере на протяжении одной ночи при комнатной температуре. После снятия осадка раствор применяют к колонке с ДЭАЭ-целлюлозой, уравновешенной фосфатным буфером. Фракцию антитела определяют путем измерения оптической плотности элюата при 280 нм.

Изолированные необработанные антитела могут быть очищены с помощью метода аффинной хроматографии, путем приложения полученных антител к нерастворимой матрице хроматографической среды, с последующим элюированием концентрированными водными солевыми растворами.

Образованный буферный раствор используют в качестве исходного раствора для процесса гомеопатического разбавления, используемого для подготовки активированных-потенцированных форм антител.

Активированная-потенцированная форма каждого компонента комбинированной фармацевтической композиции может быть приготовлена из исходного раствора путем гомеопатического потенцирования, предпочтительно с использованием метода пропорционального снижения концентрации, путем последовательного разведения 1 части каждого предыдущего раствора (начиная с исходного раствора) в 9 частях (для десятичного разведения), или в 99 частях (для сотенного разведения), или в 999 частях (для тысячного разведения) нейтрального растворителя, начиная с концентрации начального раствора антитела в растворителе, предпочтительно, воды или водно-спиртовой смеси, в диапазоне от приблизительно 0,5 до приблизительно 5,0 мг/мл, в сочетании с внешним воздействием. Предпочтительно, внешнее воздействие состоит из многократного вертикального встряхивания (динамизации) каждого раствора.

Предпочтительно отдельные контейнеры используют для каждого последующего разведения до необходимого уровня потенции или до коэффициента разведения. Данный метод является общепринятым в искусстве гомеопатии. См., например, V. Schwabe "Homeopathic medicines", M., 1967, p. 14-29, включенные в данный документ в виде ссылки для указанной цели.

Например, для приготовления 12-сотенного разведения (обозначаемый С12), одну часть исходного матричного раствора антител к гистамину с концентрацией 3,0 мг/мл разводят в 99 частях нейтрального водного и водно-спиртового растворителя (предпочтительно, 15% этиловый спирт), а затем вертикально встряхивают многократно (10 и более раз), чтобы создать 1-е сотенное разведение (обозначается как С1). 2-е сотенное разведение (С2) готовят из 1-го сотенного разведения С1. Эту процедуру повторяют 11 раз, чтобы приготовить 12-е сотенное разведение С12. Таким образом, 12-е сотенное разведение С12 представляет собой раствор, полученный путем 12 последовательных разведений одной части исходного матричного раствора антител с концентрацией 3,0 мг/мл в 99 частях нейтрального растворителя в различных контейнерах, что эквивалентно сотенному гомеопатическому разведению С12. Аналогичные процедуры с соответствующим коэффициентом разведения выполняют для получения необходимых растворов. Промежуточные растворы могут быть проверены в необходимой биологической модели для проверки активности. Предпочитаемыми активированными-потенцированными формами для антител, включенных в настоящее изобретение, являются разведения С12, C30 и С200 для каждой активированнойпотенцированной формы. При использовании смеси различных гомеопатических разведений (в первую

- 11 030542

очередь сотенных) активного вещества в качестве биологически активных жидких компонентов, каждый компонент состава (например, С12, C30, С50 и С200) готовят отдельно, в соответствии с описанной выше процедурой до получения предпоследнего раствора (например, до C11, С29 и С199 соответственно), и затем одну часть каждого компонента добавляют в один контейнер, согласно составу смеси и смешивают с необходимым количеством растворителя (например, с 97 частями для сотенного разведения).

Можно использовать активное вещество в качестве смеси различных гомеопатических разведений, например, десятичных и/или сотенных (D20, C30, С100 или С12, C30, С50 или С12, C30, С200 и т.д.), эффективность которого определяют экспериментально, путем тестирования раствора в соответствующей биологической модели, например, в модели, описанной в примерах данного документа.

В ходе потенцирования и снижения концентрации, вертикальное встряхивание может быть заменено на внешнее воздействие в ультразвуковом, электромагнитном поле или любое аналогичное внешнее воздействие, принятое в искусстве гомеопатии.

Твердая единичная дозированная форма комбинированной фармацевтической композиции по настоящему изобретению может быть приготовлена с помощью орошения твердого, фармацевтически приемлемого носителя, при помощи смеси активированной-потенцированной формы водных и водноспиртовых растворов активных компонентов, которые смешивают, в первую очередь, в соотношении 1:1, и затем используют в жидкой дозированной форме. Или, носитель может быть орошен последовательно с каждым соответствующим разбавлением.

Преимущественно, комбинированная фармацевтическая композиция в твердой единичной дозированной форме готовятся из гранул фармацевтически приемлемого носителя, предварительно насыщенного водными или водно-спиртовыми растворами активированной-потенцированной формы антител. Твердая лекарственная форма может быть представлена в любой форме, известной в фармацевтике, включая таблетки, капсулах, леденцах и другой форме. В качестве неактивных фармацевтических ингредиентов могут быть использовать глюкоза, сахароза, мальтоза, крахмал, изомальтоза, изомальт и другие моно-, олиго- и полисахариды, используемые в производстве фармацевтических препаратов, а также технологических смесей вышеупомянутых неактивных фармацевтических ингредиентов с другими фармацевтически приемлемыми наполнителями, например, изомальтом, кросповидоном, цикламатом натрия, сахарином натрия, безводной лимонной кислотой и др., в том числе скользящими веществами, разрыхлителями, связующими и красящими веществами. Предпочтительными носителями являются лактоза и изомальт. Фармацевтические композиции могут в дальнейшем включать стандартные фармацевтические наполнители, например микрокристаллическую целлюлозу, стеарат магния.

Пример получения твердой единичной дозированной формы дан ниже. Для подготовки твердой пероральной формы, 100-300 мкм гранулы лактозы орошают водными или водно-спиртовым растворами активированной-потенцированной формой антител к гистамину, активированной-потенцированной формой антител к ФНО-α и активированной-потенцированной формой антител к белку S-100, в соотношении 1 кг раствора антител к 5 или 10 кг лактозы (от 1:5 до 1:10). Для получения эффекта импрегнации (орошения), гранулы лактозы подвергаются насыщенному промыванию в слое псевдоожиженного материала на установке кипящего слоя (например "Huttlin Pilotlab" компании Huttlin GmbH) с последующей сушкой под потоком теплого воздуха при температуре ниже 40°С.

Ожидаемое количество высушенных гранул (от 10 до 34 мас.ч.), насыщенных активированнойпотенцированной формой антител помещают в смеситель и смешивают с 25-45 вес.ч. "ненасыщенной" беспримесной лактозой (используемой с целью снижения затрат и упрощения, ускорения технологического процесса без снижения эффективности обработки), вместе с 0,1-1 мас.ч. стеарата магния и 3-10 мас.ч. микрокристаллической целлюлозы. Полученную массу таблетки равномерно перемешивают, и таблетируют путем прямого сухого прессования (например, на таблеточном прессе Korsch - XL 400), который формирует круглые таблетки 150-500 мг, преимущественно, 300 мг. После таблетирования, получают 300 мг драже, которые насыщают водно-спиртовым раствором (3,0-6,0 мг/драже), состоящий из активированной-потенцированной формы антител. Каждый компонент состава, используемый для орошения (импрегнации) носителя, предоставлен в виде смеси сотенных гомеопатических разведений, предпочтительно, С12, C30 и С200.

Поскольку изобретение не ограничивается какой-либо конкретной теорией, считается, что активированная-потенцированная форма антител, описанная в настоящем документе, не содержит молекулярной формы антитела в количестве, достаточном, для биологической активности, относимой к такой молекулярной форме. Биологическая активность состава комплексного препарата (сочетания лекарственного препарата) изобретения достаточно наглядно продемонстрирована в прилагаемых примерах.

Предпочтительно, с целью лечения, сочетание изобретения вводят от одного до четырех раз в день, желательно, два раза в день, каждое применение включает одну или две комбинации единичной дозированной формы.

Данное изобретение проиллюстрировано прилагаемыми примерами, не имеющими ограничительного характера.

- 12 030542

Примеры

Пример 1.

Три экспериментальных исследования изучали влияние i) сверхмалых доз антител (СМД AT) к гистамину, аффинно очищенному на антигене, полученному при многократном разбавлении исходного матричного раствора (смесь разбавления 10012, 10030, 100200 (С12, C30 и С200), и ii) комбинации а) сверхмалых доз антител к гистамину (СМД AT Г), аффинно очищенных на антигене, полученных путем мно12 30 200

гократного разбавления исходного матричного раствора (смесь разбавления 100 , 100 , 100 (С12, C30

и С200) с б) сверхнизкими дозами антител к белку S-100 (СМД AT S-100), афинно очищенными на антегене, полученными путем многократного разбавления начального матричного раствора (смесь разбавле12 30 200

ния 100 , 100 , 100 (С12, C30 и С200)) и в) сверхмалых доз антител к фактору некроза опухолей альфа

(СМД AT ФНО-α), аффинно очищенные на антигене, полученными путем многократного разбавления исходного матричного раствора (смесь разбавления 100¹², 100³⁰, 100²⁰⁰ (С12, C30 и С200)) (СМД AT S100 + СМД AT ФНО-α + СМД AT Г).

Исследование 1. Влияние на моторно-эвакуаторную функцию желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) мышей.

31 беспородным мышам-самцам (массой 17,5-26,3 г, возраст 1,5-2 месяцев) внутрижелудочно вводили или дистиллированную воду (контроль, 15 мл/кг), или СМД AT Г (15 мл/кг), или СМД AT S100 + СМД AT ФНО-α + СМД AT Г (15 мл/кг) в течение 5 дней.

Указанная моторно-эвакуаторная функция желудка и кишечника изучалась по методу "маркеров" [Coopman, G.P., Kennis, Н.М., Two Methods to Assess the gastrointestinal transit-time in mice//Z. Vershuchstierk, Vol. 19, No. 5, p. 298-303, 1977, который включен в данный документ в виде ссылки]. Через 1 ч после последней инъекции, 10% суспензии активированного угля, подготовленного на 2% жидком картофельном крахмале, в объеме 0,5 мл/мышь вводили в пищеварительный тракт мышей, в качестве "маркера". В течение 10 мин введения "маркера", желудок и кишечник извлекали и помещали на стеклянную пластину. Измеряли общую длину кишечника, заполненную маркером (а именно, отношение длины заполненной части кишечника активированным углем к общей длине, выраженное в процентах).

Было установлено, что введение комбинации СМД AT S100 + СМД AT ФНО-α + СМД AT Г, дозой 15 мл/кг привело к статистически значимому увеличению общей длины активированного угля в кишечнике в 1,3 и 1,2 раза по отношению к соответствующим значениям СМД AT Г и (контрольных) групп дистиллированной воды соответственно (табл. 1). Для комбинации СМД AT S100 + СМД AT ФНО-α + СМД AT Г, отношение длины части заполненной активированным углем к общей длине кишечника также превысили аналогичные показатели в группе СМД AT Г (р<0,05) и в контрольной группе (р<0,05).

Таким образом, было показано, что комбинация СМД AT S100 + СМД AT ФНО-α + СМД AT Г усиливает моторно-эвакуаторную деятельность желудочно-кишечного тракта мышей с эффективностью превышающей такой же показатель у СМД AT Г.

Таблица 1

Влияние испытуемых препаратов на моторно-эвакуаторную деятельность ЖКТ беспородных мышей-самцов

Экспериментальная группа	Длина	Соотношение
(кол-во животных)	заполненной части	длины части заполненной
	кишечника	углем к общей длине
	активированным углем на мышь (М±м), см	кишечника (М±м), %
Диет, вода (п=10)	25,4±1,49	44,1 ±2,77
СМД АТГ(п=11)	24,1 ±1,92	44,9±3,65
СМД ATS 100 +СМД АТ ФНО-α + СМД АТ Г (п=10)	31,1±2,09*#	54,4±3,24*#

* Различия являются статистически значимыми по сравнению с контрольной группой, р<0,05.

# Различия являются статистически значимыми по сравнению с контрольной группой СМД AT Г, р<0,05.

Исследование 2. Влияние на секреторную функцию ЖКТ мышей.

33 беспородным мышам-самцам (массой 17,5-26,3 г, возрастом 1,5-2 месяца) четыре раза внутрижелудочно вводили или дистиллированную воду (контроль, 15 мл/кг), или СМД AT Г (15 мл/кг), или СМД AT S100 + СМД AT ФНО-α + СМД AT Г (15 мл/кг). Состояния секреторной функции кишечника изучали по методу Г.В. Оболенцевой (Г.В. Оболенцева, Я.И. Хаджай, Фармакологические исследования план- 13 030542

таглюцида. Фармакология и токсикология (на русском языке) № 4, с. 469-472, 1996, включенный в этот документ в виде ссылки). Каждый испытуемый препарат вводили вместе с активированным углем в дозе 10 мг/кг. Кал, окрашенный углем в черный цвет, считался положительным результатом. Измерения проводились 3, 6 и 24 ч от начала эксперимента. Величина и/или характер влияния на каждого животного были обозначены следующим образом: "+" - внешне хорошо сформированный темный кал; "++" - внешне мягкий темный кал; "+++" - жидкий темный кал. Слабительное действие оценивалось по сумме баллов в определенной группе, в соответствии с процентом животных с положительной реакцией.

Таблица 2

Влияние испытуемых препаратов на желудочную секреторную функцию беспородных мышей-самцов

Группа наблюдения (кол-во животных)	Величина эффекта (баллы/% животных с реакцией)
Зч	6 ч	24 ч
Четырехразовая инъекция препаратов
Контроль (п=11)	22/100	18/100	7/55
СМД АТ Г (п=11)	18/100	18/100	6/55
СМД АТ SIOO + СМДАТ ФНО-α + СМД АТГ(п=11)	25/100	24/100	6/55

Наблюдалось некоторое усиление перистальтики в первые 3 часа после инъекции СМД AT S100 + СМД AT ФНО-α + СМД AT Г следующим образом: 25 баллов за комбинацию по сравнению с 18 баллами в группе СМД AT Г и 22 балла в контрольной группе (табл. 2). Эффект сохранялся для группы СМД AT S100 + СМД AT ФНО-α + СМД AT Г в течение 6 ч наблюдения: 24 балла за комбинацию против 18 баллов для группы СМД AT Г и контрольной группы. В течение 24 ч было отмечено сокращение экскреторной деятельности во всех трех экспериментальных группах, включая отсутствие дефекации в 45% животных.

Таким образом, было показано, что комбинация СМД AT S100 + СМД AT ФНО-α + СМД AT Г обладает слабительным воздействием, который превосходит эффект СМД AT Г.

Исследование 3. Спазмолитическая деятельность.

30 беспородным мышам-самцам (массой 17,5-26,3 г, возрастом 1,5-2 месяца) внутрижелудочно вводили на протяжении 5 дней или дистиллированную воду (контроль, 15 мл/кг), или СМД AT Г (15 мл/кг), или СМД AT S100 + СМД AT ФНО-α + СМД AT Г (15 мл/кг). Спазмолитическая деятельность препаратов оценивали по методу Дж. Сентикар (1959) [Senticar J., Da Re P., 3-methyl-6-(N-diethyl-amino-methyl)Flavone-a new smooth muscle relaxant//Arzneimittel-Forsch, No. 9, p. 653-697, 1959)), включенный в этот документ в виде ссылки]. Через 1 ч после последней инъекции, мышам внутрибрюшинно вводили 0,2 мл раствора 0,1% BaCl₂ и внутрижелудочно 0,5 мл 10%-й суспензии активированного угля, приготовленного на 2% жидком картофельном крахмале. Через 10 мин животных умерщвляли. После чего определяли соотношение между общей длиной кишечника и заполненной углем частью.

Соотношение выражалось в процентах и считалось основным экспериментальным результатом.

В группе, которая получала комбинацию СМД AT S100 + СМД AT ФНО-α + СМД AT Г, максимальное расстояние, на которое уголь продвинулся по кишечнику, было в 1,3 раза больше относительно СМД AT Г и контрольной группы (табл. 3). Спазм ЖКТ, вызванный введением BaCl₂, который дает снижение скорости продвижения активированного угля по кишечнику, был наименее выражен в группе СМД AT S100 + СМД AT ФНО-α + СМД AT Г.

- 14 030542

Таблица 3

Оценка спазмолитического действия испытуемых препаратов по методу "угольных маркеров" (при помощи BaCl₂)

Группа наблюдения (колво животных)	Длина заполненной части кишечника активированным углем на мышь (М±м), см	Соотношение длины части заполненной углем к общей длине кишечника (М±м), %
Контроль, (п=10)	23,3±2,20	42,4±3,49
СМД АТ Г, (п=10)	22,3±2,09	40,1±3,81
СМД AT S100 + СМД АТ ФНО-α + СМД АТ Г, (п=10)	30,0±2,42*#	56,4±4,50*#

* Различия являются статистически значимыми по сравнению с контрольной

группой (р<0,05).

# Различия являются статистически значимыми по сравнению с группой СМД AT Г (р<0,05).

Таким образом, было показано, что комбинация СМД AT S100 + СМД AT ФНО-α + СМД AT Г обладает спазмолитическим действием, который превосходит эффект СМД AT Г.

Пример 2.

300 мг таблеток были подготовлены путем орошения носителя лактозы водно-спиртовыми растворами (6 мг/таб) сверхмалые дозы аффинно очищенных поликлональных антител кролика к человеческому фактору некроза опухолей альфа (СМД AT ФНО-α), мозгоспецифического белка S-100 (СМД AT S100) и гистамина (СМД AT Г). Каждый из компонентов, используемых для орошения, был получен путем многократного разведения исходного матричного раствора с концентрацией 2,5 мг/мл 100¹², 100³⁰, 100²⁰⁰ раз (смесь гомеопатических сотенных разведений С12, C30, С200). Для группы сравнения, были использованы 300 мг других таблеток, насыщенных водно-спиртовым раствором (3 мг/таб) сверхмалых доз поликлональных кроличьих антител к гистамину, очищенному на антигене (СМД AT Г), полученные путем многократного разведения исходного матричного раствора с концентрацией 2,5 мг/мл, 100¹², 100³⁰, 100²⁰⁰ раз (смесь сотенных гомеопатических разведений С12, C30, С200).

У 52 пациентов, участвующих в исследовании, провели проверку диагноза синдрома раздраженного кишечника (СРК) в соответствии с Римскими критериями III (2006). Пациенты, включенные в исследование, участвовали в амбулаторном наблюдении и лечении на протяжении 12 недель. 24 участников исследования были включены в группу подготовки теста (СМД AT S100 + СМД AT ФНО-α + СМД AT Г, 2 таблетки, 2 раза в день). 28 участников исследования были включены в группу подготовки теста (СМД AT Г, 2 таблетки, 2 раза в день). Обе группы пациентов были сопоставимы по соответствующим начальным демографическим, антропометрическим и клиническим лабораторным показателям. 18 пациентов с СРК, проявляемым констипацией (твердый или комковатый стул составлял более 25%, а жидкий стул менее 25% всех случаев опорожнение кишечника); 14 пациентов с СРК в виде диареи (пастообразный или жидкий стул, составляли более 25%, и твердый стул - менее 25% всех случаев опорожнение кишечника); и 20 пациентов со смешанным вариантом СРК (как комковатый таки и жидкий стул составил более 25% всех случаев опорожнение кишечника). В качестве критериев эффективности терапии учитывались следующие параметры: снижение интенсивности боли/дискомфорта (среднее значение за неделю от 0 до 10 баллов) по сравнению с исходным состоянием, динамика других диспептических симптомов по шкале ВАШ-СРК (визуальная аналоговая шкала - синдром раздраженного кишечника): Промышленное руководство Синдром раздраженного кишечника - клиническая оценка препаратов для лечения. США Министерство здравоохранения и социального обеспечения, Управление по контролю за продуктами и лекарствами, Центр по оценке и исследованию лекарственных средств (CDER) - март 2010 г.; MullerLissner, S., Koch, G., Talley, N.J., et al., 2004, Subject's Global Assessment of Relief: An Appropriate Method to Assess the Impact of Treatment on IBS-Related Symptoms in Clinical Trials, J. Clin. Epidemiol, 56:310-316; CPMP/EWP/785/97, 2003, Points to Consider on the Evaluation of Medicinal Products for 483 the Treatment of Irritable Bowel Syndrome, London, Available at: 484

http://www.emea.europa.eu/pdfs/human/ewp/078597en.pdf); change in the visceral sensitivity index (worst - 15, best - 90) on the VSI scale (Visceral Sensitivity Index (VSI): Labus, S. Jennifer, et al. The Central Role of Gastrointestinal- Specific Anxiety in Irritable Bowel Syndrome: Further Validation of the Visceral Sensitivity Index. Psychomotor Medicine, 2007; 69:89-98.), and evaluation on the HADS scale (Hospital Anxiety and Depression Scale (HADS): Snaith, R. Philip. The Hospital Anxiety and Depression Scale. Health and Quality of Life Outcomes 2003, 1:1-4, http://www.hqlo.eom/content/l/l/29). У пациентов с СРК, с преобладанием диареи, часть пациентов с изменением типа стула оценивались по Бристольской шкале формы кала (Бристольская шкала формы кала: Промышленное руководство Синдром раздраженного кишечника - клиническая

- 15 030542

оценка препаратов для лечения. США Министерство здравоохранения и социального обеспечения, Управление по контролю за продуктами и лекарствами, Центр по оценке и исследованию лекарственных средств (CDER) - март 2010 г.) до 5 (но не ниже <2 в среднем за неделю); у пациентов в подгруппе СРК с преобладанием запоров, процент пациентов с увеличением числа актов дефекации в среднем 1 раз в неделю по сравнению с исходным состоянием пациентов.

В клинической картине заболевания в обеих группах, абдоминальный болевой синдром был преобладающим (в среднем 7,56±0,26 баллов для группы комбинированного применения и 7,21 ±0,24 для групп сравнения по шкале ВАШ-СРК) (см. таблицу). Этот симптом встречается у 100% пациентов на первом осмотре. Среди диспептических проявлений, одинаково часто наблюдались диарея (у 54% пациентов в группе активного препарата и у 57% пациентов в группе сравнения) и констипация (62 и 57% соответственно), вздутие желудка и метеоризм (у 46 и 36% соответственно), чьи проявления были примерно одинаковыми в обеих группах (см. таблицу). Тошнота и рвота встречались реже (30 и 32% соответственно). Средние значения показателя висцеральной чувствительности (ПВЧ) и шкалы HADS были одинаковыми для обеих групп (см. таблицу), что указывает на значительное влияние нарушения центральной нервной системы в развитии СРК. Пациентам обеих групп было разрешено принимать слабительное Гутталакс® и антидиарейный препарат Смекта® для лечения констипации или диареи соответственно. Также было разрешено принимать препарат Но-шпа® для уменьшения проявления спастических болей в желудке. Эти препараты пациенты принимали по мере необходимости. Все пациенты из исследуемых групп прошли лечение в сроки, установленные протоколом исследования, без преждевременного выхода из этого исследования.

Таблица 4

Динамика основных показателей в зависимости от вида терапии

Период	СМД AT S100 + СМД АТ ФНОα + СМД АТ Г (n=24; M±SE)	СМД АТ Г (n=28; M±SE)
	ВАШ-СРК: боль/дискомфорт, баллы
Начальные	7,56±0,26	7,21 ±0,24
12 недель	3,32±0,13* **	5,64±0,24 **
	ВАШ-СРК: диарея, баллы
Начальные	5,52=1=0,18	5,73±0,34
12 недель	3,34±0,22*	4,86±0,22
	ВАШ-СРК: констипации, баллы
Начальные	5,79±0,26	4,98±0,34
12 недель	4,41±0,33 **	4,25±0,26
	ВАШ-СРК: вздутие живота и метеоризм, баллы
Начальные	4,98±0,34	4,57±0,31
12 недель	3,84±0,24 **	4,04±0,31
	ВАШ-СРК: рвота и тошнота, баллы
Начальные	3,94±0,31	3,56±0,24
12 недель	2,87±0,12*	3,03±0,27
	Показатель висцеральной чувствительности (ПВЧ-СРК), баллы
Начальные	22,3±1,6	25,4±1,8
12 недель	68,7±2,4* **	33,9±1,7
	Госпитальная шкала тревоги и депрессии (HADS), баллы
Начальные	19,3±1,4	18,9±1,5
12 недель	12,8±0,6* **	14,4±1,3

* Разница между группами СМД AT S100 + СМД AT ФНО-α + СМД AT Г и СМД AT Г являются статистически значимыми при р<0,05.

** Разница с первоначальным показателем является статистически значимой при р<0,05.

Анализ данных показал, что на протяжении 12-недельной терапии выражение основных клинических проявлений СРК, абдоминальный болевой синдром, было снижено у больных группы с сочетанием СМД AT S100 + СМД AT ФНО-α + СМД AT Г более чем на 50% в сравнении с исходным состоянием пациентов (3,32±0,13 балла). Такое снижение значительно отличалось по сравнению с результатами лечения, полученными после применения только СМД AT Г, что также способствовало уменьшению про- 16 030542

явлений боли/дискомфорта, но в значительно меньшей степени (менее 30%).

Испытуемое сочетание благоприятно сказалось на других диспепсических расстройствах у пациентов, в том числе диареи (уменьшение от начального значения от 5,52±0,18 баллов до 3,34±0,22 баллов в конце терапии), констипации (5,79±0,26 и 4,41±0,33 баллов соответственно), вздутии желудка и метеоризме (4,98±0,34 и 3,84±0,24 балла соответственно). Кроме того, эффективность относительно двух последних симптомов было статистически значимой, как по сравнению с начальным состоянием пациентов, таки и эффективностью отдельного применения СМД AT Г.

В подгруппе пациентов с СРК с преобладанием диареи (n=14), у части пациентов, у которых наблюдались изменения вида стула по Бристольской шкале формы кала составили до 5 или менее баллов, т.е. 57% для комбинированной группы, в подгруппе СРК с преобладанием констипации (n=18), процент больных с увеличением числа актов дефекации в среднем 1 раз в неделю достиг 94%, а среди пациентов со смешанным типом СРК (n=20), аналогичные показатели составили 45% и 75% соответственно. Среди пациентов из группы сравнения, изученные показатели нельзя отнести к значительным.

Эффективность лечения при использовании комбинация препарата проявлялось в виде положительного эффекта на висцеральную гиперчувствительность, которая была значительно снижена в течение 12 недель, при увеличении показателя ПВЧ от 22,3±1,6 до 68,7±2,4 (против 25,4±1,8 и 33,9 ±1,7 соответственно, в группе сравнения). Положительные изменения, наблюдаемые при комбинированном препарате, также проявились в виде снижения общего балла по шкале HADS (с 19,3±1,4 до 12,8±0,6), что свидетельствовало об уменьшении начальной субклинической выраженной тревоги и депрессии.

Оценка безопасности терапии, выполненная на основании протокола побочных эффектов в период лечения и амбулаторного исследования лабораторных показателей, которые показали хорошую переносимость препаратов. Анализ безопасности включал данные всех пациентов, которые принимали участие в исследовании (n=52). В течение 12-недельного курса лечения у пациентов всех групп, не наблюдались какие-либо побочные эффекты, которые имели "возможную" или "очевидную" связь с приемом препарата. Лабораторные исследования, включая общий и биохимический анализы крови, и общий анализ мочи, также не зафиксировали патологических отклонений в ходе терапии.

Таким образом, исследование показало эффективность и безопасность комбинированного применения сверхнизких доз СМД AT S100 + СМД AT ФНО-α + СМД AT Г при лечении пациентов с СРК. Было показано, что 12-недельный комбинированный прием способствовал сокращению абдоминального болевого синдрома, а также значительному снижению экспрессии диспепсических проявлений у пациентов с СРК. Эффект лечения был подтвержден высоким процентом пациентов, у которых улучшились показатели опорожнения кишечника. Кроме положительной динамики основных симптомов со стороны желудочно-кишечного тракта, было отмечено природная нормализация соматического и психического состояния пациента, которое выражалось в положительных изменениях висцеральной чувствительности и стабилизации симптомов тревоги и депрессии. Эффект терапии в сочетании с сверхнизкими дозами СМД AT S100 + СМД AT ФНО-α + СМД AT Г обладало существенными различиями в сравнении с исходным состоянием пациента и применения только препарата СМД AT Г.

- 17 030542

Перечень последовательностей

<110> Эпштейн, Олег Ильич

<120> КОМБИНИРОВАННАЯ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ И СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЯ ИЛИ СОСТОЯНИЯ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ ЭТИОЛОГИИ <140> ЕА2О13ОО125

<141> 2013-02-14

<150> RU2010129293

<151> 2010-07-15

<150> RU2011124809

<151> 2011-06-20

<160> 16

<170> BiSSAP 1.0

<210> 1

<211> 233

<212> PRT

<213> Homo sapiens

<220>

<221> ИСТОЧНИК

<222> 1..233

<223> /мол_тип="белок"

/организм="ното sapiens"

<400> 1

Met

Ser

Thr

Glu

Ser

Met

lie

Arg

Asp

val

Glu

Leu

Ala

Glu

Ala

1

5

10

15

Leu

Pro

Lys

Thr

Gly

Pro

Gln

Gly

Ser

Arg

cys

Leu

Phe

20

25

30

Leu

Ser

Leu

Phe

Ser

Phe

Leu

lie

val

Ala

Gly

Ala

Thr

Leu

Phe

35

40

45

cys

Leu СЛ

Leu

His

Phe

Gly

val cc

lie

Gly

Pro

Gln

^A6§

Glu

Phe

pro

Arg

JU Asp

Leu

Ser

Leu

lie

J J ser

Pro

Leu

Ala

Gln

Ala

val

Arg

ser

Ser

65

70

75

80

ser

Arg

Thr

Pro

Ser oc

Asp

Lys

pro

val

Ala qa

His

val

Ala

Asn qc

Pro

Gln

Ala

Glu

Gly

O J Gln

Leu

Gln

Trp

Leu

ASn

Arg

Ala

ASH

Ϊ7 J Ala

Leu

100

105

110

Leu

Ala

Asn

Gly

val

Glu

Leu

Arq

ASP

Asn

Gln

Leu

val

pro

Ser

115

120

125

Glu

Gly

Leu

Tyr

Leu

ile

туг

Ser

Gln

val

Leu

Phe

Lys

Gly

Gln

Gly

130

135

140

cys

pro

Ser

Thr

His

val

Leu

Thr

His

Thr

lie

Ser

Arg

Ile

Ala

145

150

155

160

Val

ser

Tyr

Gln

Thr

Lys

val

Asn

Leu

Ser

Ala

lie

Lys

Ser

Pro

165 170 175

Cys Gln Arg Glu Thr Pro Glu Gly Ala Glu Ala Lys Pro Trp Tyr Glu 180 185 190

Pro ile Tyr Leu Gly Gly val Phe Gln Leu Glu Lys Gly Asp Arg Leu 195 200 205

ser Ala Glu lie Asn Arg Pro Asp Tyr Leu Asp Phe Ala Glu Ser Gly 210 215 220

Gln val Tyr Phe Gly Ile lie Ala Leu 225 230

<210> 2

- 18 030542

<211> 5

<212> PRT

<213> Homo sapiens

<220>

<221> ИСТОЧНИК

<222> 1..5

<223> /мол_тип="белок"

/организм="ното sapiens"

<400> 2

Pro Ser Asp Lys Pro

1 5

<210> 3

<211> 5

<212> PRT

<213> Homo sapiens

<220>

<221> ИСТОЧНИК

<222> 1..5

<223> /мол_тип="белок"

/организм="ното sapiens"

<400> 3

Val Ala Asn Pro Gln

1 5

<210> 4

<211> 135

<212> PRT

<213> Homo sapiens

<220>

<221> ИСТОЧНИК

<222> 1..135

<223> /мол_тип="белок"

/организм="ното sapiens"

<400> 4

Arg

Asp

Leu

Ser

Leu c

Ile

Ser

Pro

Leu

Ala 1Л

Gln

Ala

val

Arg

Ser 1 S

Ser

1 Ser

Arg

Thr

Pro

Ser

Asp

Lys

Pro

Val

XU Ala

His

val

Ala on

ij Asn

pro

Gln

Ala

Glu

ZU Gly

Gln

Leu

Gln

Trp

Z Э Leu

ASH

Arg

Ala

JU Asn

Ala

Leu

35

40

45

Leu

Ala

Asn

Gly

val

Glu

Leu

Arg

Asp

ASn

Gln

Leu

val

Val

Pro

Ser

- 19 030542

50

55

60

Glu

Gly

Leu

Tyr

Leu

Ile

Tyr

Ser

Gln

val

Leu

Phe

Lys

Gly

Gln

Gly

65

70

75

80

cys

Pro

Ser

Thr

His oc

val

Leu

Thr

His on

Thr

lie

Ser

Arg

lie

Ala

val

Ser

Tyr

Gln

O J Thr

Lys

val

Asn

Leu

Ser

Ala

He

Lys

у J Ser

Pro

100

105

110

cys

Gln

Arg 115

Glu

Thr

Pro

Glu

^G12Q^A''^Η

Glu

Ala

Lys

Pro 125

Trp

Tyr

Glu

Pro

lie

Tyr

Leu

Gly

val

130

135

<210> 5

<211> 17

<212> PRT

<213> Homo sapiens

<220>

<221> ИСТОЧНИК

<222> 1..17

<223> /мол_тип=''белок''

/организм="Ното sapiens"

<400> 5

Val Arg ser Ser ser Arg Thr pro Ser Asp Lys Pro val Ala His val 15 10 15

val

<210> 6

<211> 23

<212> PRT

<213> Homo sapiens

<22O>

<221> ИСТОЧНИК

<222> 1..23

<223> /мол_тип="белок"

/организм="Ното sapiens"

<400> 6

Phe Leu Ser Leu Phe Ser Phe Leu Ile val Ala Gly Ala Thr Thr Leu 15 10 15

Phe cys Leu Leu His Phe Gly

20

<210> 7

<211> 18

<212> PRT

- 20 030542

<213> Homo sapiens

<220>

<221> ИСТОЧНИК

<222> 1..18

<223> /мол_тип="белок"

/организм="ното sapiens"

<400> 7

ile Gly Pro Gln Arg Glu Glu Phe Pro Arg Asp Leu Ser Leu lie Ser 15 10 15

Pro Leu

<210> 8

<211> 38

<212> PRT

<213> Homo sapiens

<220>

<221> ИСТОЧНИК

<222> 1..38

<223> /мол_тип="белок"

/организм="ното sapiens"

<400> 8

Gln

Leu

val

Val

Pro

Ser

Gl u

Gly

Leu

Tyr

Leu

lie

туг

Ser

Gln

Val

1

5

10

15

Leu

Phe

Lys

Gly

Gln

Gly

Cys

Pro

Ser

Thr

Hl'S

val

Leu

Thr

His

20

25

30

Thr

lie

ser

Arg

lie

Ala

35

<210> 9

<211> 15

<212> PRT

<213> Homo sapiens

<220>

<221> ИСТОЧНИК

<222> 1..15

<223> /мол_тип="белок"

/организм="Ното sapiens"

<400> 9

Pro Cys Gln Arg Glu Thr Pro Glu Gly Ala Glu Ala Lys Pro Trp 15 10 15

<210> 10

- 21 030542

<211> 41

<212> PRT

<213> Homo sapiens

<220>

<221> ИСТОЧНИК

<222> 1..41

<223> /мол_тип="белок"

/организм="ното sapiens"

<400> 10

Ser

Met

lie

Arg

ASp

val

Glu

Leu

Ala

Glu

Ala

Leu Pro

Lys

1

5

10

15

Thr

Gly

Pro ?n

Gln

Gly

ser

Arg

^A2?

cys

Leu

Phe

Leu Ser

Leu

Phe

Ser

Phe

Leu

lie

Val

Ala

Gly

Ala

Thr

jv

35

40

<210> 11

<211> 35

<212> PRT

<213> Homo sapiens

<220>

<221> ИСТОЧНИК

<222> 1..35

<223> /мол_тип="белок"

/организм="Ното sapiens"

<400> 11

val

Leu

Thr

His

Thr

lie

Ser

Arg

ile

Ala

val

ser

Tyr

Gln

Thr

1

5

10

15

Lys

Val

Asn

Leu

ser

Ala

Ile

ser

Pro

cys

Gln

^A3§

Glu

Thr

Pro

Glu

Gly

ZU

35

<210> 12

<211> 157

<212> PRT

<213> Homo sapiens

<220>

<221> ИСТОЧНИК

<222> 1..157

<223> /мол_тип="6елок"

/организм="ното sapiens"

- 22 030542

<400> 12

val 1

Arg Ser Ser Ser Arg Thr 5

Pro ser Asp Lys Pro val Ala His

val

10

15

val

Ala

Asn

Pro

Gln

Ala

Glu

Gly

Gln

Leu

Gln

Trp

Leu

Asn

Arg

20

25

30

Ala

Asn

Ala

Leu

Ala

Asn

Gly

val

Glu

Leu

Arg

Asp

Asn

Gln

Leu

35

40

45

val

Val

Pro

ser

Glu

Gly

Leu

Tyr

Leu

lie

Tyr

ser

Gln

val

Leu

Phe

50

55

60

Lys

Gly

Gln

Gly

Cys

pro

Ser

Thr

His

val

Leu

Thr

His

Thr

lie

65

70

75

80

Ser

Arg

ile

Ala

val

Ser

туг

Gln

Thr

Lys

val

Asn

Leu

Ser

Ala

85

90

95

Ile

Lys

Ser

Pro

Cys

Gln

Arg

Glu

Thr

Pro

Glu

Gly

Ala

Glu

Ala

Lys

100

105

110

pro

Trp

туг

Glu

Pro

ile

туг

Leu

Gly Gly

val

Phe

Gln

Leu

Glu

Lys

115

120

125

Gly

Asp 130 Glu

Arg

Leu

ser

Ala

Glu lie 135 Tyr Phe

Asn

Arg

Pro

Asp 140 Ala

Tyr

Leu

Asp

Phe

Ala

Ser

Gly

Gln

val

Gly

Ile

lie

Leu

145 150 155

<210> 13

<211> 92

<212> PRT

<213> Bos taurus

<220>

<221> ИСТОЧНИК

<222> 1.

. .92

<223> /мол_тип='

'белок"

/организм=

="Bos taurus'

<400> 13

Met

Ser

Glu

Leu

Glu

Lys

Ala

val

Ala

Leu

lie

Asp

val

Phe

His

1

5

10

15

Gln

Tyr

Ser

Gly

Arg

Glu

Gly

Asp

Lys

His

Lys

Leu

Lys

ser

Glu

20

25

30

Leu

Lys

Glu

Leu

ile

Asn

Glu

Leu

Ser

His

Phe

Leu

Glu

Ile

35

40

45

Lys

Glu

Gln

Glu

val

Asp

Lys

val

Met

Glu

Thr

Leu

Asp

ser

Asp

50

55

60

Gly

Asp

Gly

Glu

Cys

Asp

Phe

Gln

Glu

Phe

Met

Ala

Phe

val

Ala

Met

65

70

75

80

Ile

Thr

Ala

cys

His

Glu

Phe

Glu

His

Glu

85

90

<210> 14

<211> 92

<212> PRT

<213> Homo sapiens

<220>

<221> ИСТОЧНИК

<222> 1..92

- 23 030542

<223> /мол_тип="белок"

/организм="ното sapiens"

<400> 14

Met

Ser

Glu

Leu

Glu

Lys

Ala

Met

val

Ala

Leu

lie

Asp

val

Phe

His

1

5

10

15

Gln

Tyr

Ser

Gly 20

Arg

Glu

Gly

Asp

Lys 25

His

Lys

Leu

Lys

Ser

Glu

Leu

Lys

Glu

Leu

lie

Asn

Glu

Leu

Ser

His

Phe

Leu

Glu

lie

35

40

45

Lys

Glu

Gln

Glu

val

Asp

Lys

val

Met

Glu

Thr

Leu

Asp

Asn

Asp

50

55

60

Gly

Asp

Gly

Glu

cys

Asp

Phe

Gl П

Glu

Phe

Met

Ala

Phe

val

Ala

Met

65

70

75

80

Val

Thr

Ala

cys

His

Glu

Phe

Glu

His

Glu

85

90

<210> 15

<211> 94

<212> PRT

<213> Homo sapiens

<220>

<221> ИСТОЧНИК

<222> 1..94

<223> /мол_тип="белок"

/организм="ното sapiens"

<400> 15

Met

Gly

Ser

Glu

Leu

Glu

Thr

Ala

Met

Glu

Thr

Leu

lie

Asn

val

Phe

1

5

10

15

His

Ala

His

Ser

Gly

Lys

Glu

Gly

Asp

Lys

Tyr

Lys

Leu

ser

Lys

Glu

Leu

Lys

4.U Glu

Leu

Gln

Thr

L J Glu

Leu

ser

Gly

Phe

jU Leu

Asp

Ala

35

40

45

Gln

Lys

Asp

val

Asp

Ala

val

Asp

Lys

val

Met

Lys

Glu

Leu

ASP

Glu

50

55

60

Asn

Gly

Asp

Gly

Glu

val

Asp

Phe

Gln

Glu

туг

val

Leu

val

Ala

65

70

75

80

Ala

Leu

Thr

Val

Ala

cys

Asn

Phe

Trp

Glu

Asn

ser

85

90

<210> 16

<211> 94

<212> PRT

<213> Bos taurus

<220>

<221> ИСТОЧНИК

<222> 1..94

<223> /мол_тип="белок"

/opraHH3M="Bos taurus"

<400> 16

Met

Gly

Ser

Glu

Leu

Glu

Thr

Ala

Met

Glu

Thr

Leu

ile

Asn

val

Phe

1

5

10

15

His

Ala

His

Ser

Gly

Lys

Glu

Gly

Asp

Lys

Tyr

Lys

Leu

Ser

Lys

20

25

30

Glu

Leu

Lys

Glu

Leu

Gln

Thr

Glu

Leu

Ser

Gly

Phe

Leu

ASP

Ala

35

40

45

Gln

Lys

Asp

Ala

Asp

Ala

val

Asp

LYS

val

Met

LYS

Glu

Leu

ASP

Glu

50

55

60

Asn cr

Gly

ASP

Gly

Glu

val 7Π

Asp

Phe

Gln

Glu

val

Leu

Val

Ala QA

ОЭ Ala

Leu

Thr

val

Ala

/ U Cys

Asn

Phe

Trp

Glu

Asn

ser

ou

85

90

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Комбинированная фармацевтическая композиция для лечения заболеваний и состояний желудочно-кишечного тракта функциональной этиологии, содержащая активированную-потенцированную форму антитела к мозгоспецифическому белку S-100, активированную-потенцированную форму антитела к гистамину и активированную-потенцированную форму антитела к фактору некроза опухоли-альфа, причем каждая из указанных активированных-потенцированных форм антител получена путем последовательного многократного разведения исходного раствора антитела со встряхиванием каждого разведения.
2. Комбинированная фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что дополнительно содержит фармацевтически приемлемый твердый носитель, на который нанесена указанная активированная-потенцированная форма антитела к белку S-100, указанная активированная-потенцированная форма антитела к гистамину и указанная активированная-потенцированная форма антитела к фактору некроза опухоли-альфа.

- 24 030542
3. Комбинированная фармацевтическая композиция по п.2, отличающаяся тем, что выполнена в форме таблетки.
4. Комбинированная фармацевтическая композиция по п.2, отличающаяся тем, что содержит активированную-потенцированную форму антитела к белку S-100 в виде смеси гомеопатических разведений С12, C30 и С200.
5. Комбинированная фармацевтическая композиция по п.2, отличающаяся тем, что содержит активированную-потенцированную форму антитела к гистамину в виде смеси гомеопатических разведений С12, C30 и С200.
6. Комбинированная фармацевтическая композиция по п.2, отличающаяся тем, что содержит активированную-потенцированную форму антитела к фактору некроза опухоли-альфа в виде смеси гомеопатических разведений С12, C30 и С200.
7. Комбинированная фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что антитело к гистамину является моноклональным, поликлональным или природным антителом.
8. Комбинированная фармацевтическая композиция по п.7, отличающаяся тем, что антитело к гистамину является поликлональным антителом.
9. Комбинированная фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что антитело к белку S-100 является моноклональным, поликлональным или природным антителом.
10. Комбинированная фармацевтическая композиция по п.9, отличающаяся тем, что антитело к белку S-100 является поликлональным антителом.
11. Комбинированная фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что антитело к фактору некроза опухоли-альфа является моноклональным, поликлональным или природным антителом.
12. Комбинированная фармацевтическая композиция по п.11, отличающаяся тем, что антитело к фактору некроза опухоли-альфа является поликлональным антителом.
13. Комбинированная фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что фактор некроза опухоли-альфа представляет собой полноразмерную молекулу, имеющую последовательность SEQ ID NO. 1.
14. Комбинированная фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что фактор некроза опухоли-альфа представляет собой фрагмент полноразмерной молекулы, имеющий последовательность, выбранную из группы, включающей SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 и SEQ ID NO: 12.
15. Комбинированная фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что мозгоспецифический белок S-100 представляет собой полноразмерную молекулу бычьего белка S-100.
16. Комбинированная фармацевтическая композиция по п.15, отличающаяся тем, что мозгоспецифический белок S-100 имеет последовательность SEQ ID NO: 13.
17. Комбинированная фармацевтическая композиция по п.15, отличающаяся тем, что мозгоспецифический белок S-100 имеет последовательность SEQ ID NO: 16.
18. Способ лечения заболевания или состояния желудочно-кишечного тракта функциональной этиологии, включающий введение нуждающемуся в этом пациенту комбинированной фармацевтической композиции по п.1.
19. Способ по п.18, отличающийся тем, что указанное заболевание или состояние желудочнокишечного тракта функциональной этиологии имеет психосоматическую природу.
20. Способ по п.18, отличающийся тем, что указанным заболеванием или состоянием желудочнокишечного тракта функциональной этиологии является синдром раздраженного кишечника.
21. Способ по п.18, отличающийся тем, что указанным заболеванием или состоянием желудочнокишечного тракта функциональной этиологии является абдоминальная боль.
22. Способ по п.18, отличающийся тем, что указанным заболеванием или состоянием желудочнокишечного тракта функциональной этиологии является диарея.
23. Способ по п.18, отличающийся тем, что указанным заболеванием или состоянием желудочнокишечного тракта функциональной этиологии является запор.
24. Способ по п.18, отличающийся тем, что указанным заболеванием или состоянием желудочнокишечного тракта функциональной этиологии является нарушение моторно-эвакуаторной функции желудочно-кишечного тракта.
25. Способ по п.18, отличающийся тем, что комбинированную фармацевтическую композицию вводят в виде твердой пероральной формы, содержащей фармацевтически приемлемый носитель, на который нанесена указанная активированная-потенцированная форма антитела к белку S-100, указанная активированная-потенцированная форма антитела к гистамину и указанная активированнаяпотенцированная форма антитела к фактору некроза опухоли-альфа.
26. Способ по п.25, отличающийся тем, что указанной твердой пероральной формой является таблетка.
27. Способ по п.25, отличающийся тем, что указанным носителем является лактоза или изомальт.
28. Способ по п.26, отличающийся тем, что осуществляют введение от одной до двух дозированных форм указанной композиции, при этом каждую из дозированных форм вводят от одного до четырех раз в

- 25 030542

день.
29. Способ по п.28, отличающийся тем, что вводят дважды в день по две дозированные формы указанной композиции.
30. Способ по п.28, отличающийся тем, что вводят от одной до двух дозированных форм указанной композиции, при этом каждую из дозированных форм вводят два раза в день.
31. Способ по п.18 или 25, отличающийся тем, что активированная-потенцированная форма антитела к белку S-100 представляет собой смесь гомеопатических разведений С12, C30 и С200.
32. Способ по п.18 или 25, отличающийся тем, что активированная-потенцированная форма антитела к гистамину представляет собой смесь гомеопатических разведений С12, C30 и С200.
33. Способ по п.18 или 25, отличающийся тем, что активированная-потенцированная форма антитела к фактору некроза опухоли-альфа представляет собой смесь гомеопатических разведений С12, C30 и С200.
34. Способ по п.18 или 25, отличающийся тем, что каждое из указанных антител представляет собой моноклональное, поликлональное или природное антитело.
35. Способ по п.34, отличающийся тем, что каждое из указанных антител является поликлональным антителом.
36. Способ по п.18, отличающийся тем, что фактор некроза опухоли-альфа представляет собой полноразмерную молекулу, имеющую последовательность SEQ ID NO: 1.
37. Способ по п.18, отличающийся тем, что фактор некроза опухоли-альфа представляет собой фрагмент полноразмерной молекулы фактора некроза опухоли-альфа, имеющий последовательность, выбранную из группы, включающей SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 9, SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 и SEQ ID NO: 12.
38. Способ по п.18, отличающийся тем, что мозгоспецифический белок S-100 представляет собой полноразмерную молекулу бычьего белка S-100.
39. Способ по п.38, отличающийся тем, что мозгоспецифический белок S-имеет последовательность SEQ ID NO: 13.
40. Способ по п.38, отличающийся тем, что мозгоспецифический белок S-100 имеет последовательность SEQ ID NO: 16.
41. Способ по пп.18-23 или 24, отличающийся тем, что указанное введение сопровождается статистически достоверным уменьшением показателя Госпитальной шкалы тревоги и депрессии (HADS) в репрезентативной популяции указанных пациентов.
42. Способ по п.18, отличающийся тем, что одновременно с фармацевтической композицией дополнительно вводят лекарственное средство, подходящее для лечения заболеваний или состояний желудочно-кишечного тракта функциональной этиологии.
43. Способ по п.42, отличающийся тем, что указанное дополнительное средство предназначено для лечения синдрома раздраженного кишечника.
44. Способ по п.42, отличающийся тем, что указанное дополнительное средство выбрано из группы, содержащей противодиарейные средства, бензодиазепины, ингибиторы протонной помпы и антибиотики.
45. Способ по п.20, отличающийся тем, что указанный синдром раздраженного кишечника характеризуется преимущественно абдоминальной болью, метеоризмом и вздутием живота.
46. Способ по п.20, отличающийся тем, что указанный синдром раздраженного кишечника характеризуется преимущественно диареей.
47. Способ по п.20, отличающийся тем, что указанный синдром раздраженного кишечника характеризуется преимущественно запором.
48. Применение комбинированной фармацевтической композиции по п.1 для лечения заболевания или состояния желудочно-кишечного тракта функциональной этиологии.
49. Применение по п.48, отличающееся тем, что заболеванием или состоянием желудочнокишечного тракта функциональной этиологии является синдром раздраженного кишечника.
50. Применение по п.49, отличающееся тем, что синдром раздраженного кишечника характеризуется преимущественно абдоминальной болью, метеоризмом и вздутием живота.
51. Применение по п.49, отличающееся тем, что синдром раздраженного кишечника характеризуется преимущественно диареей.
52. Применение по п.49, отличающееся тем, что синдром раздраженного кишечника характеризуется преимущественно запором.
53. Применение по п.48, отличающееся тем, что каждая активированная-потенцированная форма антитела в составе композиции представляет собой смесь гомеопатических разведений С12, C30 и С200.