EA015189B1

EA015189B1 - Ингибиторы киназы

Info

Publication number: EA015189B1
Application number: EA200801199A
Authority: EA
Inventors: Джолие Анне Бастиан; Хесус Андрес Блас Де Блас; Альфонсо Де Дьес; Кевин Джон Худзиак; Течао Ли; Беатрис Лопес Де Уралде-Гармениа; Мэри Маргарет Мэйдер; Майкл Рэй Майерс; Марк Эндрю Побанс; Чуань Ших; Боюй Чжун
Original assignee: Эли Лилли Энд Компани
Priority date: 2005-10-28
Filing date: 2006-10-25
Publication date: 2011-06-30
Also published as: EP1943243A1; RS51949B; EP1943243B1; BRPI0616901A2; TW200800184A; CA2627673A1; TNSN08191A1; DK1943243T3; US20080269244A1; US7652015B2; WO2007053394A1; TWI325423B; ATE493403T1; AR056582A1; AU2006309044B2; PT1943243E; KR20080053394A; PL1943243T3; SI1943243T1; EA200801199A1

Abstract

Настоящее изобретение предлагает ингибиторы киназы формулы Iгде R, R, X и Z являются такими, как описано в данном изобретении, или их фармацевтически приемлемую соль.

Description

Предпосылки создания изобретения р38 киназа представляет собой активированную митогеном протеин (МАР) киназу, которая принадлежит к суперсемейству серин/треонин киназ. Эта киназа активируется внеклеточными факторами, такими как тепло, УФ-свет и осмотическое давление, а также воспалительными раздражителями, такими как липополисахарид. Будучи активированной, р38 киназа фосфорилирует внутриклеточные протеиновые субстраты, которые регулируют биосинтез провоспалительных цитокинов фактора некроза опухоли α (ΤΝΕα) и интерлейкина-ΐβ (ΙΕ-1β). Эти цитокины вовлечены в патологии многих хронических воспалительных расстройств (Ьее, с1 а1., Апп. Ν.Υ. Асаб. δα., 696, 149-170 (1993); МиНег-Ьабпег, Сигг. Θρίη. И11сита1о1.. 8, 210-220 (1996)), сердечно-сосудистых расстройств и расстройств центральной нервной системы (8а1йшо, е1 а1., Сиггеп! Меб1сша1 СйетщПу, 6, 807-823 (1999)) и аутоиммунных расстройств (РагдеШк, е1 а1., №11иге 81гис1ига1 Вю1оду, 9(4), 268-272 (2002)). Кроме того, фосфорилированная форма активированной митогеном протеин киназы - протеин киназы 2 (или рМАРКАРК2), также является киназой в р38 МАРК пути и непосредственно может быть активирована р38 МАРК. Исследования МАРКАРК2 у нокаутированных мышей показывают снижение продуцирования цитокинов, предполагая, что МАРКАРК2 может быть ключевым регулятором воспалительной реакции и также может быть потенциальной мишенью для противовоспалительной терапии (ХАО 2005120509).

Многие соединения мочевины (например, в XVО 9923091, XVО 01012188, XVО 04004720, XVО 04037789, АО 99/32111, И8 2004/0058961, ЕР 1609789, АО 03072569 и АО 0043384) были идентифицированы как ингибиторы р38 киназы или ингибиторы цитокинов. Ингибиторы р38 киназы или ингибиторы цитокинов могут быть дорогостоящими для производства и могут иметь проблемы, связанные с биодоступностью и абсорбцией, которые ограничивают эффекты ш νίνο и терапевтическое применение. Таким образом, существует потребность в новых лекарственных средствах на основе малых молекул, которые подавляют цитокины, то есть соединений, которые способны ингибировать р38 киназы с большей эффективностью и большей биодоступностью.

Настоящее изобретение предлагает новые ингибиторы р38 киназы, полезные для лечения состояний, которые являются результатом чрезмерного продуцирования цитокинов.

Краткое описание сущности изобретения

Настоящее изобретение предлагает соединения формулы I

где Ζ выбран из группы, которая включает

X выбран из группы, которая включает

(ί) (ίί) (Ш)

Я¹ представляет собой С₁-С₇алкил, необязательно замещенный от одного до шести заместителями, выбранными из группы, которая включает галоген и С₁-С₄алкилгалоген; Сз-С₆циклоалкил, необязательно замещенный одним или двумя заместителями, выбранными из группы, которая включает С₁-С₄алкил и трифторметил; или триметилсилил;

Я² представляет собой фенил, необязательно замещенный С₁-С₄алкилом, или пиридинил, необязательно замещенный С₁-С₄алкилом;

Υ представляет собой водород, С₁-С₄алкил, галоген или С₁-С₄алкилгалоген;

Я³ представляет собой С₁-С₇алкил, необязательно замещенный С₃-С₆циклоалкилом; С₁-С₄алкокси; С1-С4алкилгалоген; С3-С6циклоалкил, необязательно замещенный от одного до четырех заместителями, выбранными из группы, которая включает С1-С4алкил и трифторметил; или пиридил, фенил или тиенил, каждый из которых необязательно замещен первым заместителем, выбранным из группы, которая включает галоген, циано, С₁-С₄алкил, С₁-С₄алкилгалоген и С₁-С₄алкокси, и необязательно, кроме того, замещен вторым заместителем, выбранным из группы, которая включает С1-С4алкил и галоген; и

Я⁴ представляет собой водород или С1-С4алкил; или их фармацевтически приемлемую соль.

Настоящее изобретение также предлагает способ ингибирования р38 киназы у млекопитающего, включающий введение млекопитающему, который нуждается в таком лечении, эффективного количества

- 1 015189 соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли.

Настоящее изобретение также предлагает способ подавления продуцирования фактора некроза опухолей α (ΤΝΕα) у млекопитающего, включающий введение млекопитающему, который нуждается в таком лечении, эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли.

Настоящее изобретение также предлагает способ подавления продуцирования интерлейкина-ΐβ (1Ь1β) у млекопитающего, включающий введение млекопитающему, который нуждается в таком лечении, эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли.

Настоящее изобретение, кроме того, предлагает способ лечения состояний, которые являются результатом чрезмерного продуцирования цитокинов, у млекопитающего, включающий введение млекопитающему, который нуждается в таком лечении, соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли в количестве, которое подавляет цитокины.

Настоящее изобретение также предлагает способ ингибирования роста чувствительного новообразования у млекопитающего, включающий введение млекопитающему, который нуждается в таком лечении, соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли в количестве, которое ингибирует р38.

Настоящее изобретение также предлагает способ ингибирования метастаза у млекопитающего, включающий введение млекопитающему, который нуждается в таком лечении, соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли в количестве, которое ингибирует р38.

Настоящее изобретение также предлагает способ лечения ревматоидного артрита у млекопитающего, включающий введение млекопитающему, который нуждается в таком лечении, соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли в количестве, которое ингибирует р38.

Настоящее изобретение также предлагает фармацевтическую композицию, которая содержит соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль в комбинации с фармацевтически приемлемым наполнителем, носителем или разбавителем.

Настоящее изобретение также предлагает применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для ингибирования р38 киназы. Кроме того, настоящее изобретение предлагает соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль для применения при ингибировании р38 киназы у млекопитающих. Кроме того, настоящее изобретение предлагает фармацевтическую композицию, подходящую для ингибирования р38 киназы, которая содержит соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль в комбинации с одним или более фармацевтически приемлемыми наполнителями, носителями или разбавителями.

Настоящее изобретение также предлагает применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для подавления продуцирования фактора некроза опухолей α (ΤΝΕα) .

Дополнительно, настоящее изобретение предлагает соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль для применения при подавлении продуцирования фактора некроза опухолей α (ΤΝΕα) у млекопитающих. К тому же, настоящее изобретение предлагает фармацевтическую композицию, подходящую для подавления продуцирования фактора некроза опухолей α (ΤΝΕα), которая содержит соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль в комбинации с одним или более фармацевтически приемлемыми наполнителями, носителями или разбавителями.

Настоящее изобретение также предлагает применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для подавления продуцирования интерлейкина-ΐβ (ΓΕ-1β). Дополнительно, настоящее изобретение предлагает соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль для применения при подавлении продуцирования интерлейкина1β (ГС-1 β) у млекопитающего. К тому же, настоящее изобретение предлагает фармацевтическую композицию, подходящую для подавления продуцирования интерлейкина-^ ПЫ β), которая содержит соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль в комбинации с одним или более фармацевтически приемлемыми наполнителями, носителями или разбавителями.

Настоящее изобретение также предлагает применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения состояний, которые являются результатом чрезмерного продуцирования цитокинов. Дополнительно, настоящее изобретение предлагает соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль для применения при лечении состояний, которые являются результатом чрезмерного продуцирования цитокинов у млекопитающих. К тому же, настоящее изобретение предлагает фармацевтическую композицию, подходящую для лечения состояний, которые являются результатом чрезмерного продуцирования цитокинов, которая содержит соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль в комбинации с одним или более фармацевтически приемлемыми наполнителями, носителями или разбавителями.

Настоящее изобретение также предлагает применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для ингибирования роста чувствительного новообразования. Дополнительно, настоящее изобретение предлагает соединение формулы I

- 2 015189 или его фармацевтически приемлемую соль для применения при ингибировании роста чувствительного новообразования у млекопитающих. К тому же, настоящее изобретение предлагает фармацевтическую композицию, подходящую для ингибирования роста чувствительного новообразования, которая содержит соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль в комбинации с одним или более фармацевтически приемлемыми наполнителями, носителями или разбавителями.

Настоящее изобретение также предлагает применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для ингибирования метастаза. Дополнительно, настоящее изобретение предлагает соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль для применения при ингибировании метастаза у млекопитающих. К тому же, настоящее изобретение предлагает фармацевтическую композицию, подходящую для ингибирования метастаза, которая содержит соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль в комбинации с одним или более фармацевтически приемлемыми наполнителями, носителями или разбавителями.

Настоящее изобретение также предлагает применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения ревматоидного артрита. Дополнительно, настоящее изобретение предлагает соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль для применения при лечении ревматоидного артрита у млекопитающих. К тому же, настоящее изобретение предлагает фармацевтическую композицию, подходящую для лечения ревматоидного артрита, которая содержит соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую соль в комбинации с одним или более фармацевтически приемлемыми наполнителями, носителями или разбавителями.

Детальное описание изобретения

Термин р38 киназа обозначает изоформы р38а и/или р38в киназы.

Термин подавление продуцирования ΤΝΕα (ГС-1 β, цитокинов) обозначает снижение избыточных уровней ΤΝΕα, ТС-Ιβ или другого цитокина ίη νίνο у млекопитающего до нормальных или субнормальных уровней. Такой эффект может быть достигнут с помощью ингибирования высвобождения ίη νίνο ΤΝΕα, [И-!β или другого цитокина всеми клетками, включая макрофаги; с помощью понижающего регулирования, на геномном уровне, избыточных уровней ΤΝΕα, ТС-Ιβ или другого цитокина ίη νίνο у млекопитающего до нормальных или субнормальных уровней; с помощью ингибирования синтеза ΤΝΕα, ΣΕ1β или другого цитокина как посттрансляционного процесса; или с помощью понижающего регулирования ΤΝΕα, ^Ηβ или другого цитокина на трансляционном уровне.

Специалист в данной области техники примет во внимание, что определенные соединения формулы I имеют по меньшей мере один хиральный центр. Настоящее изобретение включает все индивидуальные энантиомеры или диастереомеры, а также смеси энантиомеров и диастереомеров указанных соединений, включая рацематы. Предпочтительно соединения формулы I, содержащие по меньшей мере один хиральный центр, существуют в форме индивидуальных энантиомеров или диастереомеров. Индивидуальные энантиомеры или диастереомеры могут быть получены исходя из хиральных реагентов, или с помощью стереоселективных или стереоспецифических способов синтеза. Альтернативно, индивидуальные энантиомеры или диастереомеры могут быть выделены из смесей с помощью стандартных способов хиральной хроматографии или кристаллизации.

Специалисту в данной области будет понятно, что соединения согласно настоящему изобретению способны образовывать кислотно-аддитивные соли. Во всех случаях фармацевтически приемлемые соли всех соединений включены в их название. Соединения согласно настоящему изобретению представляют собой амины и соответственно будут реагировать с любой из многочисленных неорганических и органических кислот с образованием фармацевтически приемлемых кислотно-аддитивных солей. Термин фармацевтически приемлемая соль, как используется в данной заявке, относится к солям соединений формулы I, которые не являются существенно токсичными для живых организмов. Типичные фармацевтически приемлемые соли включают соли, полученные с помощью реакции соединений согласно настоящему изобретению с фармацевтически приемлемыми органическими или неорганическими кислотами. Такие соли включают фармацевтически приемлемые соли, приведенные в 1оитпа1 οί Рйагтасеийса1 8с1епсе, 66,

2-19 (1977), который известен специалисту в данной области техники. Наиболее предпочтительными являются мезилатные соли соединений формулы I.

Соединения формулы I являются ингибиторами р38 киназы. Таким образом, настоящее изобретение также предлагает способ ингибирования р38 киназы у млекопитающего, включающий введение млекопитающему, который нуждается в таком лечении, соединения формулы I в количестве, которое ингибирует р38 киназу. Предпочтительно млекопитающим, которое лечат введением соединений формулы I, является человек.

Как ингибиторы р38 киназы соединения согласно настоящему изобретению полезны для подавления продуцирования провоспалительных цитокинов фактора некроза опухоли α (ΤΝΕα) и интерлейкина1β (ГС-1 β) и, таким образом, для лечения расстройств, которые являются результатом избыточного продуцирования цитокинов. Таким образом, считают, что настоящие соединения будут полезными при лечении воспалительных расстройств, включая экзему, атопический дерматит, ревматоидный артрит, ос

- 3 015189 теоартрит, воспалительное заболевание кишечника и синдром токсического шока. Также считают, что соединения согласно настоящему изобретению будут полезными при лечении сердечно-сосудистых расстройств, таких как острый инфаркт миокарда, хроническая сердечная недостаточность, атеросклероз, вирусный миокардит, отторжение сердечного аллотрансплантата и сердечная дисфункция, связанная с сепсисом. К тому же, также считают, что соединения согласно настоящему изобретению будут полезными при лечении расстройств центральной нервной системы, таких как менингококковый менингит, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона и рассеянный склероз. XV О 99/32111, XVО 9923091, XVО 04004720, νθ 03072569.

Увеличение массы твердых опухолей обусловлено пролиферацией злокачественных клеток и клеток стромы, включая эндотелиальные клетки. Для увеличения опухоли до размера больше 2-3 мм в диаметре она должна сформировать сосудистую сеть, этот процесс известен под названием ангиогенез. Было сообщено, что подавление вызванного опухолью ангиогенеза под воздействием ангиостатина и эндостатина приводит к противоопухолевому эффекту (О'КеШу, с1 а1., Се11, 88, 277-285 (1997)). Было показано, что селективный ингибитор р38 киназы 8В22025 ингибирует ангиогенез (ТВ. 1асквоп, е1 а1., 1. Рйатшасок Ехр. Тйегареийск, 284, 687 (1998)). Поскольку ангиогенез является решающим фактором при увеличении массы большинства твердых опухолей, разработка новых ингибиторов р38 киназы для ингибирования этого процесса является перспективным подходом к противоопухолевой терапии. Этот подход к противоопухолевой терапии может быть лишен токсичных побочных эффектов или развития резистентности к лекарственным средствам, имеющего место при традиционной химиотерапии (1ибай Бо1кшаи, Епбодепоив 1иЫЬйот8 о! Апдюдепев1в, Т1е Натуеу Ьесйшв, 8епев 92, радев 65-82, ^йеу-Ывв 1пс., (1998)).

Как ингибиторы р38 киназы соединения согласно настоящему изобретению, таким образом, также полезны при ингибировании роста чувствительных новообразований. 8с1и.111х. К. М. Ро1еи11а1 о! р38 МАР кшаве шЫЬйотв ίη 1ке 1геа1шеи1 о! сапсег. В: Е. 1искет (еб.), Ргодгевв ίη Эгид Вевеатсй, 60, 59-92, (2003). Чувствительное новообразование определено как новообразование, выживание, рост или метастаз которого зависят от р38 киназы. Чувствительные новообразования включают опухоли головного мозга, мочеполового тракта, лимфатической системы, желудка, гортани и легких (патент И8 5717100). Предпочтительно термин чувствительные новообразования, как используется в данной заявке, включает раки у людей, включая немелкоклеточный рак легких (А. СтеепЬетд, е1 а1., Ат. 1. Веври. Се11 Мо1. Вю1., 26, 558 (2002)), карциному молочной железы (1. Сйеп, е1 а1., 1. Вю1. С1ет., 276, 47901 (2001); В. 8а11, е1 а1., 1п1. 1. Сапсег, 98, 148 (2002); апб 8. Хюпд, е1 а1., Сапсег Вее., 61, 1727 (2001)), карциному желудка (Υ.Ό. 1ипд, е1 а1., Ргос. Ат. Аввос. Сапсег Вее., 43, 9 (2002)), колоректальные карциномы (8. Хюпд, е1 а1. , Сапсег Вее., 61, 1727 (2001)) и злокачественную меланому (С. Оепкегк е1 а1., С1ш. Ехр. Ме1ав1ав1в, 19, 79 (2002)).

Также было сообщено, что ингибирование ангиогенеза путем подавления ΤΝΕα является полезным при ингибировании или профилактике метастаза (патент И8 6414150; патент И8 6335336). К тому же, подавление ΤΝΕα предписано при лечении и профилактике кахексии, изнурительного синдрома, от которого страдает приблизительно половина всех больных раком (Т. Υоηеба, е1 а1., 1. С1ш. 1пуев1., 87, 977 (1991)).

К тому же, ингибирование р38 киназы может быть эффективно при лечении некоторых вирусных состояний, таких как грипп (К. Кирте, е1 а1. , 1. 1ттипо1оду., 164, 3222-3228 (2000)), риновирус (8. Обедо, е1 а1., 1. 1ттипо1оду, 165, 5211-5220 (2000)) и ВИЧ (Ь. 81ар1го, е1 а1., Ргос. №111. Асаб. 8с1. И8А, 95, 7422-7426, (1998)).

Как используется в данной заявке, термин С1-С₇алкил относится к линейной или разветвленной, моновалентной, насыщенной алифатической цепи, содержащей от одного до семи атомов углерода, и включает, но не ограничивается, метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, трет-бутил, пентил, гексил и гептил. Термин С1-С₇алкил включает в свое определение термин С1-С₄алкил.

Как используется в данной заявке, термин С1-С₄алкокси относится к прямой или разветвленной алкильной цепи, содержащей от одного до четырех атомов углерода, присоединенных к атому кислорода. Типичные С1-С₄алкоксигруппы включают метокси, этокси, пропокси, изопропокси, бутокси, третбутокси и подобные.

Как используется в данной заявке, термин галоген относится к атому хлора, брома, йода или фтора, если не указано другое.

Как используется в данной заявке, термин ''С₁-С₄алкилгалоген относится к С₁-С₄алкилу, замещенному до пяти атомами галогена. Типичные С₁-С₄алкилгалогенгруппы включают метилгалоген, трифторметил, этилгалоген, бисфторметилэтил, пропилгалоген, изопропилгалоген, бутилгалоген, третбутилгалоген и подобные.

Как используется в данной заявке, термин Сз-С₆циклоалкил обозначает полностью насыщенное кольцо, содержащее атомы углерода и водорода, и включает циклопропил и циклобутил.

Определенные классы соединений формулы I представляют собой предпочтительные ингибиторы р38 киназы. В следующих абзацах описаны такие предпочтительные классы:

- 4 015189

а) Ζ представляет собой

Ь) X представляет собой

с) К⁴ представляет собой водород;

ά) Υ представляет собой метил;

е) К¹ представляет собой С1-С₇алкил;

1) К¹ представляет собой трет-бутил;

д) К² представляет собой фенил или пиридинил, каждый из которых необязательно замещен мети лом;

11) К² представляет собой 4-толил;

ί) К³ представляет собой фенил или тиенил, каждый из которых необязательно замещен первым заместителем, выбранным из группы, которая включает галоген, циано, С₁-С₄алкил, С₁-С₄алкилгалоген и С₁-С₄алкокси, и необязательно, кроме того, замещен вторым заместителем, выбранным из группы, которая включает С₁-С₄алкил и галоген;

_)) К³ представляет собой фенил, замещенный первым заместителем, выбранным из группы, которая включает галоген, и дополнительно замещенный вторым заместителем, выбранным из группы, которая включает С₁-С₄алкил и галоген;

k) соединение формулы I является свободным основанием;

l) соединение формулы I является солью;

т) соединение формулы I является мезилатной солью.

Предпочтительные осуществления изобретения включают все комбинации абзацев а)-т). Другие предпочтительные соединения формулы I представляют собой соединения формулы I, в которых X является таким, как описано в абзаце Ь); К¹ является таким, как описано в абзаце е); К² является таким, как описано в абзаце д); и К⁴ является таким, как описано в абзаце с) .

Также предпочтительно, когда X является таким, как описано в абзаце Ь); К¹ является таким, как описано в абзаце 1); К² является таким, как описано в абзаце 1); К³ является таким, как описано в абзаце 1); и К⁴ является таким, как описано в абзаце с).

Особенно предпочтительно, когда X является таким, как описано в абзаце Ь); К² представляет собой фенил, замещенный в 4-положении С₁-С₄алкилом.

Наиболее предпочтительно, когда X является таким, как описано в абзаце Ь).

Следующее соединение является также особенно наиболее предпочтительным.

Соединения согласно настоящему изобретению могут быть получены с помощью ряда методик, некоторые из которых проиллюстрированы на схемах ниже. Для специалиста в данной области техники будет понятно, что для получения соединений формулы I отдельные стадии на приведенных ниже схемах могут быть изменены. Конкретный порядок стадий, необходимый для получения соединений формулы I, зависит от конкретного соединения, которое синтезируют, исходного соединения и относительной лабильности замещенных компонентов. Ради ясности некоторые заместители были исключены на приведенных ниже схемах, и это обстоятельство не ограничивает информацию, представленную на схемах.

Соединения формулы I и промежуточные соединения могут быть получены, как проиллюстрировано на следующей схеме, где К¹, К² и X являются такими, как определено выше:

- 5 015189

Схема 1

Формула I

Амин (а) подвергают взаимодействию с подходящим изоцианатом или карбаматом, таким как пиразолил-2,2,2-трихлорэтилкарбамат, с получением соединений формулы I. Например, нагревают раствор амина (1 экв.), трихлорэтил карбамата (1 экв.) и подходящего основания, такого как диизопропилэтиламин (2 экв.) или карбонат калия, в подходящем растворителе, таком как ацетонитрил или диметилсульфоксид (ДМСО). Желаемое соединение потом может быть выделено и, если необходимо и желательно, очищено, используя способы, хорошо известные из уровня техники, такие как хроматография, с получением соединения формулы I.

Необходимые амины получают, как проиллюстрировано ниже на схеме 2, где X является таким, как определено выше.

Схема 2

Ь ^а

Нитрокомпонент (Ь) восстанавливают в стандартных условиях восстановления, например водородом в присутствии катализатора на основе палладия или боргидридом натрия в присутствии гексагидрата хлорида никеля(11) в подходящем растворителе, таком как низшие алканолы или этилацетат, с получением соответствующего амина (а). Такие стадии восстановления хорошо известны и определены в данной области техники. См. Ьагоск, К., СотргсйсгМус Огдашс ТгапзЕогтайопб, 412, УСН РиЬйбйшд, 1пс., Νο\ν Уогк, 1989.

Необходимые нитросоединения получают, как проиллюстрировано на схеме 3 ниже, где На1 представляет собой С1 или Е, и X' представляет собой С(О)К³ или подходящую защитную группу РО:

2-галоген-4-нитропиридин (е) в подходящем органическом растворителе, таком как ТНЕ, подвергают взаимодействию с подходящим 4-гидроксипиперидином и гидридом натрия или трифенилфосфином, с получением соответствующего замещенного пиперидина Ь(1). Альтернативно, 2-галоген-4нитропиридин (е) подвергают взаимодействию с подходящим пиперазином и основанием, таким как карбонат калия, трет-бутоксид натрия или триэтиламин, в полярном растворителе, таком как ацетонитрил, Ν,Ν-диметилформамид (ΌΜΡ) или бутанол, с получением соответствующего замещенного пиперазина Ь(п).

Амин формулы Ь(ш) получают с помощью реакции 2-галоген-4-нитропиридина (е) в подходящем растворителе, таком как этанол, с подходящим аминопиперидином, в присутствии подходящего основания, такого как карбонат натрия.

Специалисту в данной области техники понятно, что методики, описанные выше, могут быть использованы при получении пиридильных изомеров, предусмотренных в настоящем изобретении.

Необходимые пиразолилкарбаматы могут быть получены, как описано на следующей схеме, где К¹и К² являются такими, как определено выше.

- 6 015189

3-аминопиразолы (т) получают, используя условия, хорошо известные из уровня техники; Ьагоск, К., Сотргс11сп51ус Огдашс Тгапвкогтабопб, 79, УСН РиЫ1бЫпд, 1пс., Νο\ν Уогк, 1989. Например, αцианокетон (]) и подходящий гидразин или соль гидразина (к) в подходящем органическом растворителе, таком как этанол, подвергают взаимодействию при повышенной температуре. Полученный пиразол (т) может быть очищен, используя стандартные способы, такие как хроматография на колонке с силикагелем.

2,2,2-Трихлорэтил хлорформиат (п) подвергают взаимодействию с подходяще замещенным 3аминопиразолом (т) и основанием, например карбонатом натрия, карбонатом калия или пиридином, в подходящем растворителе, например ТНР или вода/этилацетат, с получением соответствующего 2,2,2трихлорэтил карбамата (о). Специалист в данной области техники примет во внимание, что соответствующий карбамат может быть получен с помощью реакции 3-аминопиразола с другими активными карбонатами.

Соединения формулы Ι(ί) могут быть получены, как продемонстрировано на схеме 5 ниже, где К¹, К², К³ и РС являются такими, как определено выше, Ζ представляет собой О, N или связь, и К⁵ представляет собой С или Ν.

Из соединения формулы (1) удаляют защитную группу в условиях, хорошо известных из уровня техники. Например, когда защитная группа представляет собой трет-бутокси карбонил, соединение формулы (1) растворяют в подходящем органическом растворителе или смеси растворителей, таком как дихлорметан, и обрабатывают кислотой, такой как соляная кислота в диоксане или трифторуксусная кислота. Снятием защитной группы с Ν-защищенной-пиперидин замещенной мочевины (1) получают замещенный пиперидин (д), который подвергают взаимодействию с замещенной карбоновой кислотой в стандартных условиях соединения для органических кислот и органических аминов в присутствии агента соединения, такого как гидрохлорид №(3-диметиламинопропил)-№-этилкарбодиимида (ЕЭС1) или дициклогексилкарбодиимид (ОСС), каталитическое количество 4-диметиламинопиридина (ΌΜΑΡ) и 1гидроксибензотриазола (НОВ!) или гексафторфосфата О-(7-азабензотриазол-1-ил)-ЦЦ№,№тетраметилурония (НАТИ), или триэтиламин, в подходящем растворителе, таком как метиленхлорид или ацетонитрил, с получением соединения формулы I (ί) . Специалисту в данной области техники понятно, что примеры формулы Ι(ί) могут быть получены исходя из других защищенных пиперидинов, включая различные Ν-защитные группы, такие как формил, для которых могут быть необходимы другие методики снятия защитных групп, с получением промежуточных соединений (д).

Если необходимо или желательно, может быть использована подходящая амино-защитная группа Рд, такая как трет-бутоксикарбонильный (ВОС) фрагмент. Способы введения этих групп хорошо известны специалисту в данной области техники. Специалисту в данной области техники понятно, что защитные группы могут быть удалены на любой подходящей стадии синтеза соединений согласно настоящему изобретению. Способы введения и удаления азот- и кислород-защитных групп хорошо известны из уровня техники; см., например, Сгеепе апб \УШ8. Рго!ес!1уе Сгоирз ш Огдашс 8уп!йе818, 3^гб Еб., 1о1ш \УПсу апб 8опз, №\ν Уогк, (1999) .

Специалисту в данной области техники также понятно, что не все заместители в соединениях формулы I будут толерантными в определенных условиях реакции, которые используются при синтезе соединений. Эти заместители могут быть введены на подходящей стадии синтеза или могут быть защищены, а потом защитная группа, при необходимости или желании, может быть удалена.

Сокращения, обозначения и условия, которые используются в примерах и исследованиях, имеют следующие значения: н-ВиОН = н-бутанол, ОСС = дициклогексилкарбодиимид, ΌΙΕΑ = Ν,Νдиизопропилэтиламин, ДМСО = диметилсульфоксид, ΌΜΕ = Ν,Ν-диметилформамид, ч = час(ы), НОВ! = 1-гидроксибензотриазол, ЬНА = диизопропиламид лития, ЕЭС1 = гидрохлорид 1-(3диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида, Е!ОАс = этилацетат, Е!ОН =этанол, Е!₂О = диэтиловый эфир, МеОН = метанол, NаВН(ОАс)з = триацетоксиборгидрид натрия, ТВАР = фторид тетрабутиламмо

- 7 015189 ния, Τί₂Ο = ангидрид трифторметансульфоновой кислоты и ТНР = тетрагидрофуран. Примеры получения

Пример получения 1. 2-Хлор-4-метил-5-нитропиридин

4- метил-5-нитропиридин-2-иламин (3,0 ммоль, 0,5 г) растворяют в 0,5 мл серной кислоты. Добавляют 7,6 мл воды и раствор охлаждают до 0°С. Добавляют нитрит натрия (4,5 ммоль, 0,3 г) и смесь перемешивают в течение 2 ч, потом оставляют нагреваться до комнатной температуры. Разбавляют водой и добавляют 10% водный раствор гидроксида натрия до основного рН. Экстрагируют в этилацетате и объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия. Сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая 4-метил-5нитропиридин-2-ол. МС (Е8): ш/х=155 [М+Н].

Оксихлорид фосфора (0,6 ммоль, 0,05 мл) и пентахлорид фосфора (0,6 ммоль, 0,12 г) добавляют к 4метил-5-нитропиридин-2-олу (1,9 ммоль, 0,3 г). Перемешивают при 120°С в течение 1,5 ч. Охлаждают, добавляют ледяную воду и экстрагируют в СН₂С1₂. Объединенные органические слои промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия. Сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая 2-хлор-4-метил-5-нитропиридин.

Пример получения 2. 2,3-Дихлор-5-нитропиридин

5- Нитропиридин-2-ол (20 г, 143 ммоль) помещают в концентрированную НС1 (100 мл) . Нагревают до 50°С и потом по каплям добавляют хлорат калия (6,13 г, 50 ммоль), растворенный в воде (100 мл). Перемешивают при 50°С в течение 30 мин. Реакционную смесь охлаждают на ледяной бане. Твердое вещество отфильтровывают и промывают водой. Тщательно сушат, получая 21,13 г (85%) 3-хлор-5нитропиридин-2-ола. МС (Е8) : ш/х=173 [М+Н].

Оксихлорид фосфора (11,28 мл, 121 ммоль) помещают в круглодонную колбу и охлаждают до 0°С. Добавляют хинолин (7,15 мл, 60,5 ммоль), потом частями добавляют 3-хлор-5-нитропиридин-2-ол (21,13 г, 121 ммоль). Реакционную смесь нагревают до 120°С в течение 2 ч. Реакционную смесь выливают на лед и растирают в порошок с водой. Твердое вещество отфильтровывают и промывают водой. Тщательно сушат, получая 19,95 г (86%) указанного в заглавии соединения: 'Н ЯМР δ _Н (400 МГц, ДМСО) 9,20 (с, 1Н) , 8,97 (с, 1Н).

Пример получения 3. трет-Бутиловый эфир 4-(5-амино-6-метилпиридин-2-ил)пиперазин-1карбоновой кислоты

Механически перемешивают смесь 6-хлор-2-метил-3-нитропиридина (Акушсйеш, 25,00 г, 144,9 ммоль), трет-бутил 1-пиперазинкарбоксилата (29,68 г, 159,4 ммоль) и триэтиламина (23,2 мл, 167 ммоль) в н-ВиОН (250 мл) при 50°С под азотом в течение 4 ч, при 65°С в течение 2 ч, потом при комнатной температуре в течение ночи. Добавляют дополнительный трет-бутил 1-пиперазинкарбоксилат (1,5 г) и реакционную смесь нагревают при 65°С в течение 4 ч. Полученную суспензию охлаждают до 30°С, потом добавляют гексаны (75 мл). Суспензию охлаждают до комнатной температуры в течение 1 часа, потом добавляют воду (150 мл). Суспензию выдерживают в течение 45 мин, потом фильтруют. Осадок на фильтре промывают водой (4x100 мл), потом гексанами (100 мл) и сушат на воздухе в течение ночи, получая трет-бутиловый эфир 4-(6-метил-5-нитропиридин-2-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты в виде блестящих желтых кристаллов (46,30 г, выход 99%. МС (Е8): ш/х=261 [М+Н-С₄Н₈] ).

Суспензию трет-бутилового эфира 4-(6-метил-5-нитропиридин-2-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты (46,00 г, 142,7 ммоль) в ТНР (750 мл) при комнатной температуре смешивают с Рб/С (5% А1бг1сН. 3,04 г, 1,43 ммоль), потом помещают в атмосферу водорода (встряхивающий аппарат Парра, 40-45 фунт/дюйм²) в течение 6 ч. Добавляют МеОН (250 мл) и суспензию выдерживают в атмосфере водорода в течение 4 ч при комнатной температуре. Добавляют дополнительный катализатор (3,04 г), потом помещают смесь в атмосферу водорода на 7 ч. Смесь фильтруют через прокладку из целита 521®, промывая ТНР и МеОН, потом концентрируют при пониженном давлении, получая указанное в заглавии соединение в виде бледно-розового твердого вещества. (41,58 г, выход 99%. МС (Е8+) : ш/х=293 [М+Н]) .

Следующие соединения получают с помощью способа, по существу аналогичного методикам, описанным выше.

- 8 015189

Пример получения	Соединение	МС (ЕЗ) : т/ζ [М+Н]
Пример получения 4	трет-Бутиловый эфир 4-(5- аминопиридин-2-ил)пипераэин1-карОоновой кислоты	293
Пример получения 5	трет-Бутиловый эфир 4-(5- амино-З-метилпиридин-2ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты	293, 2

Пример получения 6. трет-Бутиловый эфир 4-(5-аминопиридин-2-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты

2-хлор-5-нитропиридин (1,0 г, 6,31 ммоль), трет-бутиловый эфир пиперазин-1-карбоновой кислоты (1,76 г, 9,45 ммоль) и триэтиламин (1,76 мл, 12,6 ммоль) помещают в н-бутанол (20 мл). Нагревают до 12 0°С в течение 17 ч. Охлаждают до комнатной температуры и добавляют этилацетат и воду. Органический слой отделяют и промывают водой и насыщенным водным хлоридом натрия. Органический слой собирают, сушат над Мд₂ЗО₄, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя 20% Е1ОАе:гексан, получая 1,14 г (58%) трет-бутилового эфира 4-(5-нитропиридин-2-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты. МС (ЕЗ): ш/х=309 [М+Н].

трет-Бутиловый эфир 4-(5-нитропиридин-2-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты (1,14 г, 3,70 ммоль) помещают в 1:1 Е1ОАе:МеОН (20 мл). Добавляют 10% Рб на угле, используя ЕЮАс (5 мл) . Реакционную смесь очищают и потом добавляют водород. Цикл очищения/наполнения повторяют дважды и реакционную смесь помещают в атмосферу водорода (баллон) и перемешивают при комнатной температуре в течение 20 ч. Реакционную смесь фильтруют через прокладку из целита® и осадок на фильтре промывают ЕЮАс. Фильтрат собирают и концентрируют при пониженном давлении, получая 1,01 г (98%) указанного в заглавии соединения. МС (ЕЗ): ш/х=279 [М+Н].

Следующее соединение получают с помощью способа, по существу аналогичного методикам, описанным выше.

Пример получения	Соединение	МС (ЕЗ) : т/ζ [М+Н]
Пример получения 7	трет-Бутиловый эфир 4-(5-амино- З-метшширидин-2-ил)пиперазин-1карбоновой кислоты	293, 4

Пример получения 8. трет-Бутиловый эфир 4-(5-амино-3-хлорпиридин-2-ил)пиперазин-1карбоновой кислоты

2,3-Дихлор-5-нитропиридин (2,0 г, 10,36 ммоль), трет-бутиловый эфир пиперазин-1-карбоновой кислоты (2,12 г, 11,40 ммоль) и карбонат калия (1,72 г, 12,43 ммоль) помещают в ЭМБ (20 мл). Нагревают до 80°С в течение 2,5 дней. Охлаждают до комнатной температуры и добавляют этилацетат и воду. Органический слой отделяют и промывают водой и насыщенным водным хлоридом натрия. Органический слой собирают, сушат над Мд₂ЗО₄, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя 20% ЕЮАс:гексан, получая 3,29 г (93%) третбутилового эфира 4-(3-хлор-5-нитропиридин-2-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты.

МС (ЕЗ): 1П//341 [М+Н].

трет-Бутиловый эфир 4-(3-хлор-5-нитропиридин-2-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты (3,09 г, 9,01 ммоль) помещают в метанол (50 мл). Добавляют гексагидрат хлорида никеля(11) (10,7 г, 45,1 ммоль) и реакционную смесь охлаждают до 0°С. Частями добавляют боргидрид натрия (5,11 г, 135,15 ммоль) и перемешивают при 0°С в течение 2 ч. Добавляют СН₂С1₂ и фильтруют через прокладку из целита®. Осадок на фильтре промывают СН₂С1₂ и фильтрат собирают. К фильтрату добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия и органический слой отделяют. Водный слой экстрагируют СН₂С1₂ (2x30 мл).

Органические экстракты объединяют, сушат над Мд₂ЗО₄, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя 0-70% ЕЮАс:гексан, получая 1,77 г (63%) указанного в заглавии соединения. МС (ЕЗ): ш/х=311.2 [М-Н].

Пример получения 9. рац-[(транс)-4-(5-Амино-3-метилпиридин-2-ил)-2,5-диметилпиперазин-1ил]циклопропил-метанон

- 9 015189 транс-2,5-диметилпиперазин (500 мг, 4,37 ммоль, 1,0 экв.) растворяют в 15 мл безводного дихлорметана. Добавляют ди-трет-бутил дикарбонат (953 мг, 4,37 ммоль, 1,0 экв.), растворенный в 5 мл дихлорметана. Перемешивают при комнатной температуре в течение 20 ч. Белое твердое вещество фильтруют, получая 430 мг М-ВОС-транс-2,5-диметилпиперазина (выход 50%).

¹Н ЯМР (метанол-б₄) б м.д. 4,11 (м, 1Н); 3,55 (дд, 1=13,6, 1,7 Гц, 1Н) , 3,23 (дд, 1=13,6, 4,0 Гц, 1Н) , 3,12 (м, 1Н) , 3,00 (дд, 1=12,7, 2,9 Гц, 1Н) , 2,49 (м, 1Н) , 1,46 (с, 9Н) , 1,24 (д, 1=7,6, 3Н), 1,15 (д, 1=6,8 Гц, 3Н).

2-хлор-3-метил-5-нитропиридин (310 мг, 1,82 ммоль, 1,0 экв.) и Ν-ВОС-транс-2,5диметилпиперазин (397 мг, 2,0 ммоль, 1,1 экв.) растворяют в 5 мл безводного ΌΜΓ, добавляют карбонат калия (251 мг, 1,82 ммоль, 1,0 экв.) и смесь перемешивают в течение 20 ч при 80°С. Раствор выливают в смесь 1:1 об/об ЕЮАс и ледяной воды. Водную фазу экстрагируют ЕЮАс (2x20 мл) и объединенные органические слои промывают водой (3x20 мл) и насыщенным водным хлоридом натрия (30 мл). Органический раствор сушат над сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении, получая неочищенный трет-бутиловый эфир рац-(транс)-2,5-диметил-4-(3-метил-5-нитропиридин-2ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты. МС (Е8+): ш/х=251.2 (Μ+Η).

4М НС1 в диоксане (4,2 мл) добавляют к трет-бутиловому эфиру рац-(транс)-2,5-диметил-4-(3метил-5-нитропиридин-2-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты (0,15 г, 0,43 ммоль) при комнатной температуре и перемешивают. Через один час концентрируют при пониженном давлении, получая 0,138 г дигидрохлорида рац-(транс)-2,5-диметил-1-(3-метил-5-нитропиридин-2-ил)пиперазина в виде белого твердого вещества (количественный). МС (Е8): т/х=25Е2 [М+Н].

Циклопропил карбоновой кислоты (56 мкл, 0,7 ммоль) добавляют к раствору ЕОС'1 (0,147 г, 0,77 ммоль), НОВ! (0,10 г, 0,77 ммоль), дигидрохлорида рац-(транс)-2,5-диметил-1-(3-метил-5-нитропиридин2-ил)пиперазина (0,16 г, 0,64 ммоль) в СН₂С1₂ (5 мл), потом добавляют Э1ЕА (0,22 мл, 1,28 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере Ν2. Через один час смесь концентрируют, получая остаток. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя гексан: АсОЕ! 50-70%, получая 0,114 г рацциклопропил-[(транс)-2,5-диметил-4-(3-метил-5-нитропиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метанона (выход 56%). МС (Е8): т//=319,1 [М+Н].

NΗ₄СООΗ (0,23 г, 3,5 ммоль) добавляют к рац-циклопропил-[(транс)-2,5-диметил-4-(3-метил-5нитропиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метанону (0,114 г, 0,35 ммоль) и Рб/С 10% (0,043 г) в ЕЮН (5 мл) в атмосфере Ν₂ и нагревают при 80°С. Через 2 ч реакционную смесь охлаждают и фильтруют через целит®. Концентрируют при пониженном давлении, получая 0,1 г указанного в заглавии соединения (количественный).

МС (Е8): т//=289,3[М+Н].

Пример получения 10. 1-[4-(5-Амино-4-метилпиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]-2,2-диметилпропан-1-он

Раствор 2-хлор-4-метил-5-нитропиридина (0,85 ммоль, 0,15 г), гидрохлорида 2,2-диметил-1пиперазин-1-ил-пропан-1-она (0,94 ммоль, 0,16 г) и триэтиламина (2,12 ммоль, 0,3 мл) перемешивают в герметичной колбе при 80°С в течение ночи. Смесь охлаждают до комнатной температуры, добавляют СН2С12 и промывают насыщенным водным хлоридом натрия. Сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая 2,2-диметил-1-[4-(4-метил-5-нитропиридин-2ил)пиперазин-1-ил]пропан-1-он. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя гексаны/этилацетат с градиентом (от 30 до 60%). МС (Е8): т/х=307 [М+Н].

Формиат аммония (1,55 ммоль, 0,1 г) и палладий (уголь) 10% (0,031 ммоль) добавляют к раствору 2,2-диметил-1-[4-(4-метил-5-нитропиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]пропан-1-она (0,31 ммоль, 0,09 г) в 2 мл этанола. Раствор перемешивают в течение часа при 90°С. Охлаждают и фильтруют через прокладку из целита® и концентрируют при пониженном давлении. Остаток может быть использован без дополнительного очищения. МС (Е8): т/х=277 [М+Н].

Следующее соединение получают с помощью способа, по существу аналогичного второй методике, описанной выше.

Пример получения	Соединение	МС (Е5) : ш/ζ [М+Н]
Пример получения 11	[4-(5-Амино-4-метилпиридин- 2-ил)пиперазин-1-ил]-(1метилциклопропил)метанон	275

Пример получения 12. 1-[4-(5-Амино-4-хлорпиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]-2,2-диметилпропан-1-он

Стадия А.

Раствор 2,4-дихлорпиридина (6,7 ммоль, 1 г), Ν-Вос пиперазина (8,1 ммоль, 1,5 г), трет-бутоксида

- 10 015189 натрия (9,5 ммоль, 0,9 г), ацетата палладия (II) (0,7 ммоль, 0,15 г) и 2-(ди-трет-бутилфосфино)бифенила (0,7 ммоль, 0,2 г), растворенные в толуоле, перемешивают под азотом при 100°С в течение 4 ч. Охлаждают до комнатной температуры и добавляют воду. Экстрагируют в этилацетате, промывая органический слой водой и насыщенным водным хлоридом натрия. Органический слой сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая трет-бутиловый эфир 4-(4хлорпиридин-2-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты в виде остатка. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя гексаны/этилацетат с градиентом (от 10 до 50%). МС (Е8): ιη/ζ=298 [М+Н].

Стадия В.

Раствор трет-бутилового эфира 4-(4-хлорпиридин-2-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты (0,6 г, 1,9 ммоль) в СН₂С1₂ (4 мл) обрабатывают при комнатной температуре НС1 (4Н раствор в диоксане, 1,5 мл, 5,9 ммоль), в результате происходит незначительное выделение тепла. Смесь перемешивают в течение 3 ч, добавляют дополнительный НС1 (4Н раствор в диоксане, 1,5 мл, 5,9 ммоль) и перемешивают в течение ночи. Концентрируют при пониженном давлении, получая гидрохлорид 1-(4-хлорпиридин-2ил)пиперазина, который потом растирают в порошок с Е1₂О (0,43 г). ЖХМС Е8+ (т/ζ) 198 [М+Н]).

Стадия С.

Гидрохлорид 1-(4-хлорпиридин-2-ил)пиперазина (2,2 ммоль, 0,4 г), триэтиламин (7,6 ммоль, 1,1 мл) в 13 мл СН2С12 и пивалоилхлорид (2,2 ммоль, 0,3 мл) перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Добавляют СН2С12 и промывают насыщенным водным хлоридом натрия и водой. Сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая 1-[4-(4хлорпиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]-2,2-диметилпропан-1-он. МС (Е8): ιη/ζ=282 [М+Н].

Стадия Ό.

1-[4-(4-хлорпиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]-2,2-диметилпропан-1-он (1,6 ммоль, 0,4 г) растворяют в серной кислоте (2,3 мл) и раствор охлаждают до 0°С. Добавляют нитрат калия (1,6 ммоль, 0,2 г) и смесь перемешивают, разрешая нагреваться до комнатной температуры, в течение ночи. Смесь разбавляют водой и добавляют 10% гидроксид натрия до основного рН. Экстрагируют в этилацетате. Сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая остаток 1-[4-(4-хлор-5нитропиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]-2,2-диметил-пропан-1-она. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя смесью гексаны/этилацетат (от 30% до 60%) . МС (Е8): ιη/ζ=327 [М+Н].

Стадия Е.

Дитионит натрия (4,5 ммоль, 0,8 г) добавляют к 1-[4-(4-хлор-5-нитропиридин-2-ил)пиперазин-1ил]-2,2-диметилпропан-1-ону (0,9 ммоль, 0,3 г) в 22 мл смеси 1:1 тетрагидрофурана и воды и 4 мл аммиака. Раствор перемешивают в течение 2 часов при комнатной температуре. Концентрируют при пониженном давлении и остаток экстрагируют в этилацетате. Сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая остаток, который используют без дополнительного очищения.

МС (Е8): т^=297 [М+Н].

Следующее соединение получают, используя методики, по существу, аналогичные стадиям С-Е, описанным выше.

Пример получения	Соединение	МС (ЕЗ) : т/ζ [М+Н]
Пример получения 13	1- [4-(5-Амино-3трифторметил-пиридин-2ил)пиперазин-1-ил]-2,2диметил-пропан-1-он	331

Пример получения 14. [4-(5-Амино-6-метилпиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]-(2,6-дифторфенил)метанон

Уксусную кислоту (5 л) помещают в 22-л колбу. Реакционную смесь помещают на баню лед-вода. Частями добавляют пиперазин (355,00 г, 2,0 экв.; 4,06 моль) при перемешивании и температуру увеличивают до ~40°С. Добавляют еще 5 л уксусной кислоты. Смесь перемешивают, пока она не станет раствором. Температуру охлаждающей бани корректируют до ~13°С. По каплям добавляют 2,6-дифторбензоил хлорид (355,00 г, 1,00 экв.; 2,01 моль; 253,39 мл) в течение 2 ч, одновременно поддерживая температуру реакционной смеси приблизительно 13-15°С. Перемешивают в течение ночи. Концентрируют при пони

- 11 015189 женном давлении и остаток растворяют в 2 л ледяной воды. Колбу охлаждают на бане лед-вода. Добавляют 5Н ΝαΟΗ для корректировки рН до 7,5, одновременно поддерживая температуру реакционной смеси ниже 30°С. Фильтруют при ~10°С. Продукт экстрагируют из фильтрата дихлорметаном (4x2 л). Растворитель удаляют при пониженном давлении. Твердое вещество растворяют в 1,5 л метанола при комнатной температуре и фильтруют. Метанольный раствор концентрируют, потом растворитель заменяют на толуол 2,0 л, получая чистый продукт. Фильтруют, получая (2,6-дифторфенил)пиперазин-1илметанон. Фильтрат концентрируют и снова фильтруют, получая дополнительный продукт (в сумме 400 г) .

(2,6-дифторфенил)пиперазин-1-илметанон (1,07 экв., 1,55 моль, 350,00 г), метанол (37,06 моль, 1,50 л, 1,19 кг), триэтиламин (1,79 моль, 250,00 мл, 181,50 г), 6-хлор-2-метил-3-нитропиридин (1,00 экв., 1,45 моль, 250,00 г) помещали в 5-л колбу с верхней мешалкой. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 0,5 ч. Медленно нагревают до 60°С и перемешивание продолжают при 60°С в течение ночи. По каплям добавляют воду (750 мл), одновременно поддерживая температуру при 60°С. Смесь оставляют охлаждаться до комнатной температуры. Фильтруют и осадок на фильтре промывают смесью 2:1 метанол/вода 150 мл, потом дважды МТВЕ. Сушат при пониженном давлении при 45°С, получая (2,6-дифторфенил)-[4-(6-метил-5-нитропиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метанон в виде желтого твердого вещества (535 г).

(2,6-дифторфенил)-[4-(6-метил-5-нитропиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]метанон (1,00 экв., 1,44 моль, 520,00 г), метанол (197,66 моль, 8,00 л, 6,33 кг) и 5% палладий на угле, смоченный ΤΗΕ, (75,00 г) помещают в автоклав на три галлона. Реакционную смесь гидрогенизируют при 50 фунт/дюйм² при комнатной температуре, одновременно поддерживая температуру ниже 30°С. Через 0,5 ч охлаждают до 26°С и выдерживают в течение 2 ч. Фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Фильтруют, получая твердые вещества, промывают метанолом, потом гептанами. Дополнительно фильтруют, получая вторую порцию [4-(5-амино-6-метилпиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]-(2,6-дифторфенил)метанона. Сушат при пониженном давлении при 45°С (445 г).

Пример получения 15. [4-(5-Амино-3-метилпиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]-(2,6-дифторфенил)метанон

Суспензию 2-хлор-3-метил-5-нитропиридина (27,00 г, 0,156 моль) и трет-бутилового эфира пиперазин-1-карбоновой кислоты (32,03 г, 0,172 моль) в безводном ΌΜΕ (270 мл) обрабатывают К₂СО₃ (34,55 г, 0,250 моль), потом реакционную смесь нагревают при 80°С под Ν2 в течение ночи. Полученную реакционную смесь выливают в 1/1 ЕЮАс/Н₂О (3,000 мл), слои разделяют, потом водный слой экстрагируют ЕЮАс (1,000 мл). Объединенные органические слои промывают насыщенным водным хлоридом натрия (3x1,000 мл, каждого), сушат над Мд8О₄, фильтруют, потом концентрируют при пониженном давлении, получая желтое твердое вещество. Желтое твердое вещество суспендируют в гексанах/ЕЮАс, потом полученное твердое вещество восстанавливают с помощью вакуумного фильтрования. Промывают гексанами и вакуумно фильтруют, получая (42,84 г) трет-бутиловый эфир 4-(3-метил-5-нитропиридин-2ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты в виде желтого твердого вещества. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении, получая желтое твердое вещество. Желтое твердое вещество суспендируют в гексанах, потом полученное твердое вещество восстанавливают с помощью вакуумного фильтрования, промывают гексанами и сушат с помощью вакуумного фильтрования, получая дополнительный (5,38 г) трет-бутиловый эфир 4-(3-метил-5-нитропиридин-2-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты в виде желтого твердого вещества (48,22 г, выход 95,9%).

¹Н ЯМР (400 МГц, С1)С1_;) δ 8,96 (д, 1Н), 8,14 (д, 1Н), 3,57 (м, 4Н), 3,41 (м, 4Н), 2,36 (с, 3Н), 1,48 (с, 9Н); ΤΟΕ-Μ8 [Е8+, М+Н]. Набл. т/ζ 323,1723. Рассчитано: т/ζ 323,1719; Анал. рассчитано для С₁₅Н₂₂^О₄: С 55,88; Н 6,87; N 17,37. Найдено С 55,94; Н 6,87; N 17,14.

Раствор 4М НС1 в диоксане (4 экв.) добавляют к раствору трет-бутилового эфира 4-(3-метил-5нитропиридин-2-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты (7,77 г, 24,13 ммоль) в ЭСМ (73 мл). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Добавляют еще 2 экв. раствора НС1 в диоксане. После того, как исходное вещество не было выявлено с помощью ЖХМС, твердое вещество фильтруют и сушат при пониженном давлении, получая 6,91 г гидрохлорида 1-(3-метил-5-нитропиридин-2ил)пиперазина в виде желтоватого твердого вещества (выход 97%). Е8+(тА): 259 [М+1] .

Триэтиламин (3 экв.) по каплям добавляют к суспензии гидрохлорида 1-(3-метил-5-нитропиридин2-ил)пиперазина (6,91 г, 24,13 ммоль) в ЭСМ (120 мл). Добавляют 2,6-дифторбензоилхлорид (1 экв.). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Добавляют дополнительный 2,6дифторбензоилхлорид (1,6 мл) и триэтиламин (1,5 экв.) для завершения реакции. Реакционную смесь выдерживают в течение ночи. Разбавляют ЭСМ и экстрагируют несколько раз водой. Органический слой сушат над №₂8₂О₄, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. Твердое вещество несколько раз промывают гексаном, получая 8,08 г (2,6-дифторфенил)-[4-(3-метил-5-нитропиридин-2ил)пиперазин-1-ил] метанон (выход 93%). Е8+(тА): 363 [М+1].

№₂8₂О₄ (10 экв.) и водный аммиак (3 мл/ммоль, 32%) добавляют к раствору (2,6-дифторфенил)-[4(3-метил-5-нитропиридин-2-ил)пиперазин-1-ил] метанона (3 г, 8,29 ммоль) в ЮТ/НЮ (166 мл, 1:1). Пе

- 12 015189 ремешивают в течение 30 мин, потом слои разделяют. Водный слой экстрагируют ЭСМ. ЕЮЛс и изопропиловым спиртом/ЕЮЛс. Органические слои объединяют и сушат над Ν₂8Ο₄, фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. Неочищенное вещество очищают на колонке Уапап™ 8СХ и колонку промывают МеОН и потом продукт вымывают 2М ΝΗ₃ в МеОН, получая 1,2 г [4-(5-амино-3метилпиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]-(2,6-дифторфенил)метанона (выход 44%).

Ε8+(ι/ζ): 333 [М+1].

Пример получения 16. трет-Бутиловый эфир 4-(5-амино-6-метилпиридин-2-илокси)пиперидин-1карбоновой кислоты

Диизопропил азодикарбоксилат (3,0 мл, 15,5 ммоль) по каплям добавляют к охлажденной смеси 6метил-5-нитропиридин-2-ола (1,54 г, 10,0 ммоль), трет-бутилового эфира 4-гидроксипиперидин-1карбоновой кислоты (2,05 г, 10,0 ммоль) и трифенилфосфина (4,02 г, 15,3 ммоль) в ТНБ (25 мл) при 0°С. После окончания добавления охлаждающую баню удаляют и реакционную смесь перемешивают при 22°С в течение ночи. Концентрируют при пониженном давлении. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя гексанами и этилацетатом, получая трет-бутиловый эфир 4-(6-метил-5нитропиридин-2-илокси)пиперидин-1-карбоновой кислоты в виде бесцветного масла (2,69 г, выход 80%). МС(Е8): ι/ζ=338,2 [М+Н].

Смесь трет-бутилового эфира 4-(6-метил-5-нитропиридин-2-илокси)пиперидин-1-карбоновой кислоты (2,69 г, 8,0 ммоль) и 10% палладия на угле (1,0 г) в этаноле (60 мл) перемешивают при 22°С в атмосфере водорода в течение 2 ч. Палладиевый катализатор отфильтровывают. Фильтрат концентрируют, получая бесцветное масло. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя гексанами и этилацетатом, получая указанное в заглавии соединение (2,19 г, выход 89%). МС (Е8): 111//=308,2 [М+Н].

Следующее соединение получают, используя методику, по существу, аналогичную методике, описанной выше.

Пример получения

Соединение

МС (ЕЗ): ш/ζ [М+Н-ВОС]

Пример	трет-Бутиловый эфир 4-(5-
получения 17	амин о~3-метилпиридин- 2-
	илокси}пиперидин-1-
	карбоновой кислоты	208,2

Пример получения 18. трет-Бутиловый эфир 4-(5-аминопиридин-2-илокси)пиперидин-1-карбоновой кислоты

Суспензию предварительно промытого NаΗ (0,1 г, 2,48 ммоль, 60% дисперсия в минеральном масле) в ТНБ (2 мл) добавляют к ледяному раствору трет-бутилового эфира 4-гидроксипиперидин-1карбоновой кислоты (0,5 г, 2,48 ммоль) в сухом ТНБ (3 мл). Смесь оставляют перемешиваться в течение 20 мин, потом частями добавляют 2-хлор-5-нитропиридин (0,36 г, 2,26 ммоль). После окончания добавления охлаждающую баню удаляют и реакционную смесь перемешивают при 22°С в течение ночи. Реакционную смесь охлаждают на ледяной бане и добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (5 мл). Реакционную смесь разделяют между этилацетатом (25 мл) и дистиллированной водой (25 мл). Водную фазу выделяют и экстрагируют этилацетатом (3x35 мл). Объединенные органические фазы сушат над сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя гексанами и этилацетатом, получая трет-бутиловый эфир 4-(5нитропиридин-2-илокси)пиперидин-1-карбоновой кислоты в виде белого твердого вещества (0,55 г, выход 75%). МС (Е8): ι/ζ=324,2 [М+Н].

Смесь трет-бутилового эфира 4-(5-нитропиридин-2-илокси)пиперидин-1-карбоновой кислоты (2,7 г, 8,35 ммоль) и 10% палладия на угле (0,5 г) в этаноле (100 мл) перемешивают при комнатной температуре в атмосфере водорода в течение 4 ч. Фильтруют, чтобы удалить палладиевый катализатор. Фильтрат концентрируют и полученное бесцветное масло подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя гексанами и этилацетатом, получая указанное в заглавии соединение в виде белого твердого вещества (2,11 г, 86% (Ε8+(ι/ζ) 194,2 [М+Н-ВОС]).

Пример получения 19. [4-(5-Амино-3-метилпиридин-2-илокси)пиперидин-1-ил]-(2-фторфенил)метанон

Суспензию предварительно промытого NаΗ (1,27 г, 31,87 ммоль, 60% дисперсия в минеральном

- 13 015189 масле) в ТНЕ (20 мл) добавляют к ледяному раствору трет-бутилового эфира 4-гидроксипиперидин-1карбоновой кислоты (6,41 г, 31,87 ммоль) в сухом ТНЕ (80 мл). Смесь оставляют перемешиваться в течение 20 минут, потом частями добавляют 2-хлор-3-метил-5-нитропиридин (5 г, 28,97 ммоль). После окончания добавления охлаждающую баню удаляют и реакционную смесь перемешивают при 22°С в течение ночи. Реакционную смесь охлаждают на ледяной бане и добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (50 мл). Реакционную смесь разделяют между этилацетатом (350 мл) и дистиллированной водой (150 мл). Водную фазу выделяют и экстрагируют этилацетатом (1x100 мл). Органические слои объединяют и промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия (2x150 мл). Объединенные органические фазы сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя гексанами и этилацетатом, получая трет-бутиловый эфир 4-(3-метил-5нитропиридин-2-илокси)пиперидин-1-карбоновой кислоты в виде белого твердого вещества (6,5 г, выход 67%). МС (Е8): т^=360,3 [М+Ыа].

Трифторуксусную кислоту (150 мл) добавляют к охлажденному раствору трет-бутилового эфира 4(3-метил-5-нитропиридин-2-илокси)пиперидин-1-карбоновой кислоты (10,12 г, 30 ммоль) в дихлорметане (450 мл). Реакционную смесь перемешивают при 22°С в течение 60 мин. После удаления растворителя остаток обрабатывают 1Н гидроксидом натрия (150 мл) и экстрагируют дихлорметаном и этилацетатом. Объединенные органические фазы сушат над сульфатом натрия. Растворитель удаляют, получая 3метил-5-нитро-2-(пиперидин-4-илокси)пиридин в виде желтого твердого вещества (6,9 г, выход 97%). МС (Е8): т^=238,2 [М+Н].

2-Фторбензоилхлорид (1,74 г, 11,0 ммоль) по каплям добавляют к раствору 3-метил-5-нитро-2(пиперидин-4-илокси)пиридина в дихлорметане (50 мл) и триэтиламине (1,21 г, 12 ммоль) и перемешивают под Ν₂ при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь промывают дистиллированной водой (3x20 мл), потом насыщенным водным раствором хлорида натрия (1x20 мл). Органическую фазу сушат над сульфатом натрия и концентрируют, получая (2-фторфенил)-[4-(3-метил-5нитропиридин-2-илокси)пиперидин-1-ил]метанон в виде желтого твердого вещества.

Смесь (2-фторфенил)-[4-(3-метил-5-нитропиридин-2-илокси)пиперидин-1-ил]метанона (3,58 г, 10 ммоль) и 10% палладия на угле (358 мг) в этаноле (100 мл) перемешивают при 22°С в атмосфере водорода в течение ночи. Фильтруют, чтобы удалить катализатор. Фильтрат концентрируют, получая бесцветное масло. Масло подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя гексанами и этилацетатом (1:1), потом 70% этилацетата/гексаны, получая желтое твердое вещество (2,27 г, выход 50%). МС (Е8): т^=330,2 [М+Н].

Пример получения 20. трет-Бутиловый эфир 4-(4-аминопиридин-2-илокси)пиперидин-1-карбоновой кислоты

100 мл толуола добавляют к очищенной азотом смеси 2-хлор-4-нитропиридина (4,32 г, 27,2 ммоль), трет-бутил 4-гидроксипиперидин карбоксилата (11,0 г, 54,5 ммоль), карбоната цезия (13,3 г, 40,8 ммоль), ацетата палладия (122 мг, 0,544 ммоль) и 2-(ди-трет-бутилфосфино)-1,1'-бинафтила (271 мг, 0,68 ммоль). Полученную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре, потом разделяют между водой и этилацетатом. Водный слой экстрагируют дополнительным этилацетатом и объединенный органический слой сушат над сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя градиентом от 0 до 20% этилацетата в гексанах, получая трет-бутиловый эфир 4-(4-нитропиридин-2-илокси)пиперидин-1-карбоновой кислоты в виде белого воскоподобного твердого вещества (5,37 г, 61%; ЖХМС Е8+ (т/ζ) 268 [М-1Вц]⁺).

Суспензию трет-бутилового эфира 4-(4-нитропиридин-2-илокси)пиперидин-1-карбоновой кислоты (3,0 г, 9,28 ммоль) и 5% Рб/С (151 мг) в ЕЮАс (150 мл) помещают в атмосферу водорода при 60 фунт/дюйм² (встряхивающий аппарат Парра) в течение ночи при температуре окружающей среды. Реакционную смесь фильтруют через прокладку из целита® и концентрируют при пониженном давлении, получая указанное в заглавии соединение в виде белого твердого вещества (2,6 г, выход 95%). ЖХМС Е8+ (т/ζ) 294 [М+Н].

Пример получения 21. [4-(4-Аминопиридин-2-илокси)пиперидин-1-ил]-(2,6-дифторфенил)метанон

2-Хлор-4-нитропиридин, 3 г (18,9 ммоль), трет-бутиловый эфир 4-гидроксипиперидин-1карбоновой кислоты, 7,6 г (37,8 ммоль), [1,1']бинафталенил-2-ил-ди-трет-бутил-фосфан, 188 мг (0,47 ммоль), ацетат палладия, 85 мг (0,38 ммоль) и карбонат цезия, 9,2 г (28,4 ммоль), помещают в 500-мл колбу и очищают Ν₂ в течение 10 мин. Потом добавляют сухой толуол (500 мл) и перемешивают при комнатной температуре в атмосфере Ν₂ в течение ночи. Реакционную смесь разделяют между водой и ЕЮАс (500 мл каждого). Органический слой отделяют. Сушат над Мд8О₄, фильтруют и растворители выпаривают. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя смесью ЕЮАс:гексаны с градиентом от 5 до 20% ЕЮАс в 10 объемах колонки, получая 1,2 г (выход 34%) трет-бутилового эфира 4(4-нитропиридин-2-илокси)пиперидин-1-карбоновой кислоты, указанного в заглавии соединения, в виде белого твердого вещества (Е8+(тУ)=324 [М+Н]) .

мл 4М раствора НС1 в Е1₂О добавляют к 1,2 г трет-бутилового эфира 4-(4-нитропиридин-2илокси)пиперидин-1-карбоновой кислоты и суспензию перемешивают в течение 4 часов. Растворитель

- 14 015189 выпаривают и оставшееся твердое вещество растирают в порошок с ЕьО. получая 1,1 г дигидрохлорида 4-нитро-2-(пиперидин-4-илокси)пиридина в виде бледно-желтого твердого вещества (выход 100%) (Е8+(тЯ)=224 [М+Н]).

Триэтиламин (2.57 мл. 18,5 ммоль) добавляют к суспензии 1.1 г (3.7 ммоль) дигидрохлорида 4нитро-2-(пиперидин-4-илокси)пиридина в сухом дихлорметане (50 мл). Потом добавляют хлорид 2.6дифторбензоила. 0,512 мл (4.07 ммоль). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Добавляют воду (50 мл) и органический слой отделяют. Сушат Мд§О₄ и фильтруют. Растворители выпаривают. получая 1.22 г (выход 91%) (2.6-дифторфенил)-[4-(4-нитропиридин-2-илокси)пиперидин-1ил]метанона в виде желтого твердого вещества (Е8+(т/х)=364 [М+Н]).

Порошок железа (419 мг. 7.5 ммоль) добавляют к раствору 1.1 г (3.0 ммоль) (2.6-дифторфенил)-[4(4-нитропиридин-2-илокси)пиперидин-1-ил]метанона в ледяной уксусной кислоте (10 мл) и перемешивают при 80°С. Через 15 мин смесь оставляют охлаждаться до комнатной температуры и фильтруют через целит®. Прокладку из целита® промывают Е1₂О и ЕЮАс. Полученный органический слой промывают водой. насыщенным водным раствором ЫаНСО₃ и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой отделяют. сушат над Мд§О₄ и растворители выпаривают. получая 831 мг (выход 83%) указанного в заглавии соединения в виде белого твердого вещества. (Е8+(ш/х)=334 [М+Н]).

Пример получения 22. трет-Бутиловый эфир 4-(5-аминопиридин-2-иламино)пиперидин-1карбоновой кислоты

Ы-Вос-4-аминопиперидин (0.9 г. 4.8 ммоль) растворяют в сухом этаноле и добавляют твердый карбонат натрия (0.8 г. 7.9 ммоль) при 0°С. потом добавляют 2-хлор-5-нитропиридин (0.6 г. 3.9 ммоль). Раствор перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. потом раствор нагревают при 9°С в течение 6 ч. Перемешивают при комнатной температуре в течение ночи.

Растворитель выпаривают при пониженном давлении и неочищенную смесь разделяют между Е1ОН и водой. Экстрагируют ЕЮАс и органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органические слои объединяют и сушат над Мд§О₄. Фильтруют и растворитель выпаривают. получая трет-бутиловый эфир 4-(5-нитропиридин-2-иламино)пиперидин-1-карбоновой кислоты.

8пС1₂-Н₂О (11.8 ммоль. 2.7 г) добавляют к раствору трет-бутилового эфира 4-(5-нитропиридин-2иламино)пиперидин-1-карбоновой кислоты (2.4 ммоль. 0.8 г) в 20 мл этилацетата. Раствор перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Добавляют водный раствор №1НСО₃. пока рН раствора не станет основным. и экстрагируют этилацетатом. Суспензию фильтруют через прокладку из целита®. Органические слои объединяют и промывают насыщенным водным хлоридом натрия. сушат над сульфатом натрия. фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. получая указанное в заглавии соединение. МС (Е8): т/х=293 [М+Н].

Пример получения 23. Метил 1-метилциклогексан карбоксилат

Раствор 1-метилциклогексан карбоновой кислоты (7.11 г. 50.0 ммоль) в МеОН (10 мл) и Е1₂О (40 мл) по каплям обрабатывают триметилсилилдиазометаном (2.0 М/гексаны; 26 мл. 52 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. потом концентрируют при пониженном давлении. получая указанное в заглавии соединение в виде прозрачного бледно-желтого масла (7.811 г. 50 ммоль; 100%). МС (Е8): тЯ=156 [М+Н].

Пример получения 24. Бензиловый эфир 3-гидрокси-2.2-диметилпропионовой кислоты

НО'

Гидроксид калия (486.7 ммоль. 32.1 г) добавляют к раствору 2.3-дигидрокси-2-метилпропионовой кислоты (423.2 ммоль. 50 г) в 300 мл ЭМЕ. Раствор перемешивают в течение 1 ч при 100°С. потом добавляют бензилбромид. Раствор перемешивают в течение ночи. Смесь охлаждают и разбавляют этилацетатом. Органический слой промывают водой. Водный слой несколько раз промывают этилацетатом. Органические слои объединяют и сушат над сульфатом натрия. фильтруют и концентрируют при пониженном давлении.

Ή ЯМР (СЭС1₃. 300 МГц): δ м.д.: 7.36-7.32 (м. 5Н). 5.1 (с. 2Н). 3.5 (с. 2Н). 1.21 (с. 6Н). Пример получения 25. Этиловый эфир 1-фторметилциклопропанкарбоновой кислоты

Г

АдЕ (4.5 экв.. 4.56 г) добавляют к раствору этилового эфира 1-фтор-циклобутанкарбоновой кислоты

- 15 015189 (1,6 г, 8 ммоль) в ацетонитриле (22 мл) и воде (274 мл). Смесь нагревают при 80°С в герметичной колбе в течение 20 ч с энергичным перемешиванием. Смесь оставляют охлаждаться и фильтруют через целит®. Растворитель удаляют при пониженном давлении, получая указанное в заглавии соединение в виде масла (0,81 г, выход 61%), которое используют без какого-либо дополнительного очищения. МС (Е8): ш^=147,1 [М+Н].

Пример получения 26. Метиловый эфир 1-трифторметилциклопропанкарбоновой кислоты

2М раствор диазометана в гексанах (14,2 мл, 28,45 ммоль) добавляют к раствору 1трифторметилциклопропан-1-карбоновой кислоты (3,65 г, 23,7 ммоль) в метаноле-гексанах (2,5 мл-22,5 мл). Концентрируют при пониженном давлении и остаток перегоняют, получая указанное в заглавии соединение в виде желтого масла (2,93 г, выход 73%). МС (Е8): ιη/ζ=169,1 [М+Н].

Пример получения 27. 3-Оксо-3-(1-трифторметилциклопропил)пропионитрил

2М раствор ЕЭЛ в ТНЕ (19,15 мл, 38,3 ммоль) добавляют к охлажденному сухим льдом-ацетоном раствору метилового эфира 1-трифторметил-циклопропан-1-карбоновой кислоты (2,93 г, 17,4 ммоль) и ацетонитрила (1,43 г мл, 34,8 ммоль) в ТНЕ (30 мл). Реакционную смесь перемешивают при -70°С в течение 1,5 ч и потом оставляют нагреваться до 22°С в течение 2 ч. Концентрируют, добавляют гексаны и фильтруют, получая желтое твердое вещество. Промывают гексанами и обрабатывают диэтиловым эфиром (250 мл), потом 2Н НС1 (150 мл). Водный слой экстрагируют диэтиловым эфиром (4x100 мл). Объединенные органические фазы сушат над сульфатом натрия. Растворитель удаляют, получая 3-оксо-3-(1трифторметилциклопропил)пропионитрил (2,99 г, выход 97%). МС (Е8-): ш^=176,1 [М+Н].

Следующие соединения получают, используя методику, по существу, аналогичную методике, описанной выше.

Пример получения 30. 5-(1-Метилциклопропил)-2-(6-метилпиридин-3-ил)-2Н-пиразол-3-иламин

Смесь 3-оксо-3-(1-трифторметилциклопропил)пропионитрила (2,66 г, 15,0 ммоль), Νбензгидрилиден-Ы'-(6-метилпиридин-3-ил) гидразина (ТЬ, 2002, 43, 2171-2173) (4,31 г, 15,0 ммоль) и птолилсульфоновой кислоты (14,29 г, 75,0 ммоль) в этаноле (85 мл) нагревают при 90°С в герметичной колбе в течение 18 ч.

После удаления растворителя остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя 0-5% метанола в дихлорметане, получая коричневое твердое вещество (2,29 г, выход 54%). МС (Е8+): ш^=283,2 [М+Н].

Пример получения 31. 5-Пентафторэтил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-иламин

Смесь 4,4,5,5,5-пентафтор-3-оксопентаннитрила (4,0 г, 21,4 ммоль) и п-толил-гидразина (10 г, 64,1 ммоль) в этаноле (20 мл) нагревают до 95°С в герметичной колбе в течение 15 ч. После охлаждения до комнатной температуры растворитель удаляют при пониженном давлении, получая желтое твердое вещество. Твердое вещество разделяют между дихлорметаном (250 мл), дистиллированной водой (150 мл) и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (50 мл). Водную фазу выделяют и экстрагируют дихлорметаном (100 мл). Объединенные органические фазы сушат над сульфатом натрия и концентрируют, получая темно-золотое масло. Масло подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя этилацетатом и гексанами, получая светло-коричневое твердое вещество (3,24 г, выход 52%). МС (Е8+): 1119=292,1 [М+Н].

Следующие соединения получают, используя методику, по существу, аналогичную методике, опи- 16 015189 санной выше.

Пример получения	Соединение	МС (ЕЗ+): т/ζ [М+Н]
Пример получения 32	2-пара-Толил-5-(1-трифторметил- циклопропил)-2Я-пиразол-3-иламин	282/3
Пример получения 33	2-пара-Толил-5-(2<2_г2-трифтор-1- метил-1-трифторметил-этил)-2Нпиразол-3-иламин	338,3

Пример получения 34. 2,2,2-трихлорэтиловый эфир [5-(1-метилциклопропил)-2-(6-метилпиридин-3ил)-2Н-пиразол-3 -ил] карбаминовой кислоты

Раствор 2,2,2-трихлорэтилхлорформиата (1,80 г, 8,5 ммоль) в ΤΗΕ (10 мл) по каплям добавляют к охлажденному смесью льда с водой раствору 5-(1-трифторметилциклопропил)-2-пара-толил-2Н-пиразол3-иламина (2,29 г, 8,1 ммоль) и пиридина (0,9 мл, 11 ммоль) в ΤΗΕ (30 мл) при -15°С. Перемешивают при -15°С в течение 0,5 ч и потом при 22°С в течение 1 ч, потом реакционную смесь разделяют между дихлорметаном (50 мл) и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (50 мл). Водную фазу выделяют и дважды экстрагируют дихлорметаном (25 мл каждого). Объединенные органические фазы сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя гексанами и этилацетатом, получая белое твердое вещество (2,46 г, выход 66%). МС (Е8+): т/х=457.2 [М+Н].

Пример получения	Соединение	МС (ЕБ) : га/ζ [М+Н]
Пример получения 35	2,2,2-трихлорэтиловый эфир (5пентафторэтил-2-пара-толил-2 Япиразол-3-ил)карбаминовой кислоты	466,1 [М+Н]
Пример получения 36	2,2,2-трихлорэтиловый эфир [2пара-толил-5-(1-трифторметилциклопропил)-2Я-пираэол-3- ил]карбаминовой кислоты	458,2 [М+Н]
Пример получения 37	2,2,2-трихлорэтиловый эфир [2пара-толил-5-(2,2,2-трифтор-1метил-1-трифторметилэтил)-2Япиразол-3-ил]карбаминовой кислоты	512,2 [М+Н]

Пример получения 38. 2,2,2-Трихлорэтиловый эфир (5-трет-бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил) карбаминовой кислоты

Насыщенный раствор №ьСО₃ (2,4 л) добавляют к раствору 5-трет-бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол3-иламина (400 г, 1,74 моль) в ΤΗΕ (8л) и смесь охлаждают до 0°С. Потом по каплям добавляют 2,2,2трихлорэтилхлорформиат (406,77 г, 1,92 моль) и смесь перемешивают при 0°С в течение 2 ч. Реакционную смесь экстрагируют этилацетатом (3x6,5 л), сушат над безводным сульфатом магния и концентрируют. Твердое вещество растворяют в минимальном количестве этилацетата и добавляют избыток гексанов для осаждения. Твердое вещество собирают фильтрованием и сушат, получая указанное в заглавии соединение в виде не совсем белого твердого вещества (586 г, выход 83%).

¹Н ЯМР (400 МГц, С1)С1_;) δ 7,34 (д, 2Н), 7,29 (д, 2Н), 6,78 (ушир.с, 1Н), 6,41 (ушир.с, 1Н), 4,81 (с, 2Н), 2,41 (с, ЗН), 1,34 (с, 9Н). МС (Е8+): т//=406,1 [М+Н].

Пример получения 39. 2,2,2-Трихлорэтиловый эфир [5-(1-метилциклопропил)-2-пара-толил-2Нпиразол-3-ил]карбаминовой кислоты

- 17 015189

Диизопропиламид лития (ЬЭЛ, 2,0 М/гептаны; А1бпск 2,2 экв., 88 ммоль, 44 мл) объединяют с ТНЕ (1,5 мл/ммоль; 60 мл) и охлаждают до -78°С. Метил 1-метилциклопропанкарбоксилат (ТС1 И8; 4,56 г, 40 ммоль) и СН₃СИ (4,20 мл, 80 ммоль) объединяют в ТНЕ (10 мл) и медленно добавляют при перемешивании. Смесь перемешивают при от -65 до -78°С в течение 1 ч, потом баню удаляют и смесь нагревают до комнатной температуры. Реакционную смесь концентрируют до суспензии при пониженном давлении. Добавляют гексаны (150 мл), из суспензии образуется осадок. Твердое вещество собирают вакуумным фильтрованием и промывают гексанами (2x50 мл). Используемую колбу заменяют на чистую и твердое вещество растворяют на фритте в 50 мл 2,5М НС1 и собирают в колбе. Промывают 20 мл 2,5М НС1, потом 200 мл ЕьО. Слои разделяют в фильтрате и кислую фазу экстрагируют ЕеО (150 мл). ЕеО органические фазы объединяют, сушат Мд8О₄, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая 3-(1-метилциклопропил)-3оксопропионитрил в виде прозрачного янтарного масла (3,58 г, 29,1 ммоль, 73%). Масло используют без очищения в реакции с гидрохлоридом толилгидразина (5,23 г, 33,0 ммоль) и этанолом (2 мл/ммоль) при кипячении с обратным холодильником в течение 20 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и концентрируют при пониженном давлении. Остаток разбавляют этилацетатом (250 мл) и промывают водой (2x60 мл), насыщенным водным №1НСЮ₃ (60 мл) и насыщенным водным хлоридом натрия (60 мл). Органическую фазу сушат Мд8О₄, фильтруют и концентрируют с помощью ротационного выпаривания. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя градиентом этилацетата и гексана, получая 5-(1метилциклопропил)-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-иламин (4,2238 г, 18,5 ммоль, 46%). ЖХМС (Е8+): ш/х=228.2 [М+Н].

Охлажденный (0°С) раствор 5-(1-метилциклопропил)-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-иламина (5,68 г, 25 ммоль) и пиридина (2,2 мл, 27,5 ммоль) в ТНЕ (3 мл/ммоль) обрабатывают 2,2,2-трихлорэтил хлорформиатом (3,7 мл, 27,5 ммоль). Температуру реакционной смеси поддерживают при 0°С и через 2 ч добавляют небольшими порциями хлорформиат (0,3 мл) и пиридин (0,2 мл). Через один час реакционную смесь разбавляют водой (150 мл) и экстрагируют ЕЮАс (3x100 мл). Объединенные органические фазы промывают водой (100 мл), насыщенным водным ИаНСО₃ (50 мл) и насыщенным водным хлоридом натрия (50 мл). Неочищенный сироп перекристаллизовывают из этилацетата/гексанов, получая указанное в заглавии соединение в виде белого твердого вещества (8,18 г, 20,3 ммоль; 81%). ЖХМС (Е8+): 111//4( >2.2/404.2 [М+Н].

Альтернативно, 2,2,2-трихлорэтилхлорформиат (3,0 мл, 23 ммоль) по каплям добавляют к раствору 5-(1-метилциклопропил)-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-иламина (4,75 г, 21 ммоль) в тетрагидрофуране (105 мл) и насыщенном водном карбонате натрия (32 мл) при 0°С. Перемешивают при этой температуре в течение 2 ч. Смесь выливают в воду и фазы разделяют. Водную фазу экстрагируют этилацетатом.

Обработка А.

Органические слои объединяют и промывают водным хлоридом натрия, сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая желтое твердое вещество. Твердое вещество растворяют в минимальном количестве этилацетата и добавляют гексаны до помутнения при перемешивании. Указанное в заглавии соединение кристаллизуют и фильтруют в виде белого твердого вещества.

'|| ЯМР (ДМСО): 9,89 (ушир.с, 1Н), 7,31 (д, 1=8 Гц, 2Н), 7,23 (д, 1=8 Гц, 2Н), 6,12 (с, 1Н), 4,82 (с, 2Н), 2,31 (с, 3Н), 1,37 (с, 3Н), 0,89 (кв, 1=4 Гц, 2Н), 0,71 (кв, 1=4 Гц, 2Н).

Обработка В.

Растворитель этилацетат заменяют на изопропиловый спирт (91,56 моль). Суспензию перемешивают при <0°С в течение 2 ч, фильтруют, промывают охлажденным изопропиловым спиртом (13,08 моль) и сушат при 40°С при пониженном давлении в течение ночи, получая указанное в заглавии соединение в виде белого кристаллического твердого вещества.

Следующее соединение получают, используя методики, по существу, аналогичные методикам, описанным выше.

Пример получения	Соединение	МС (ЕЗ+): ш/ζ [М+Н])
Пример	2,2_г2-трихлорэтиловый эфир [5-	442,2/444,2
получения 40	{1-метилциклогексил)-2-пара- толил-2Я-пиразол-3- ил]карбаминовой кислоты

- 18 015189

Пример получения 41. 2,2,2-Трихлорэтиловый эфир [5-(1-фторметилциклопропил)-2-пара-толил2Н-пиразол-3 -ил] карбаминовой кислоты

Раствор БЭЛ получают из диизопропиламина (1,7 мл, 2,2 экв., 12,1 ммоль) и н-ВиЫ (1,6М в гексанах, 7,5 мл, 2,2 экв., 12,1 ммоль) в ТНЕ 12 мл при -78°С в течение 30 мин под Ν₂. Добавляют раствор этилового эфира 1-фторметилциклопропанкарбоновой кислоты (0,81 г, 5,5 ммоль) в 7 мл ТНЕ. Смесь перемешивают и оставляют нагреваться от -78°С до комнатной температуры и перемешивание продолжают при комнатной температуре в течение 5 ч. Добавляют 10 мл насыщенного водного раствора ΝΗ.·|ί.Ί. Добавляют АсОЕ1 и органический слой отделяют, промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия. Сушат над №ь8О₄ и растворители удаляют, получая коричневое масло (0,42 г, выход 54%). Масло растворяют в 10 мл Е1ОН и добавляют п-толилгидрозин (0,47 г, 1 экв., 3 ммоль). Смесь нагревают в герметичной колбе при 90°С в течение ночи. Смесь оставляют охлаждаться и растворитель удаляют при пониженном давлении, получая остаток. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя гексан/АсОЕ1 15-80%, получая 0,336 г 5-(1-фторметилциклопропил)-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-иламина в виде масла. МС (Е8+): ιη/ζ=246,1 [М+Н].

С1СО₂СН₂СС1₃ (1,00 экв.; 717,49 мкмоль; 152,01 мг) медленно добавляют к раствору 5-(1фторметилциклопропил)-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-иламина (176 мг, 0,71 ммоль) и пиридина в 4 мл ТНЕ под азотом при 0°С. Смесь перемешивают при температуре от 0°С до комнатной температуры в течение 5 ч. Нерастворимые вещества отфильтровывают и растворитель из фильтрата удаляют при пониженном давлении, получая масло. Масло подвергают хроматографии (гексан/АсОЕ1 20-80%), получая 110 мг указанного в заглавии соединения в виде желтого масла. МС (Е8+): т//=420,0 [М+Н].

Пример получения 42. 2,2,2-Трихлорэтиловый эфир (2-пара-толил-5-триметилсиланил-2Н-пиразол3-ил)карбаминовой кислоты

Триметилсилил-диазометан (2М в ТНЕ) (25 мл, 50 ммоль) помещают в ТНЕ (50 мл). Реакционную смесь охлаждают до -78°С и добавляют диизопропиламид лития (2М в ТНЕ) (25 мл, 50 ммоль) в течение 30 мин. Добавляют метилпропиолат (4,45 мл, 50 ммоль) и перемешивают при -78°С в течение 2 ч. Нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 18 ч. Добавляют этилацетат, воду и 1Н НС1. Органический слой отделяют и водный слой экстрагируют этилацетатом (2x25 мл). Органические экстракты объединяют, сушат над Мд₂8О₄, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя 0-60% Е1ОАс:гексан, получая 3,59 г (36%) метилового эфира 5-триметилсиланил-2Н-пиразол-3-карбоновой кислоты.

Метиловый эфир 5-триметилсиланил-2Н-пиразол-3-карбоновой кислоты (1,60 г, 8,07 ммоль) и 4метилфенил-1-бороновую кислоту (1,64 г, 12,1 ммоль) помещают в СН₂С1₂ (30 мл). Добавляют 4А молекулярные сита (1,50 г), потом добавляют ацетат меди(11) (1,61 г, 8,88 ммоль). Потом добавляют триэтиламин (8 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 2,5 дней. Реакционную смесь фильтруют через прокладку из целита® и промывают СН₂С1₂. Фильтрат собирают и добавляют насыщенный водный хлорид аммония. Органический слой отделяют и водный слой экстрагируют СН2С12 (2x20 мл). Органические экстракты объединяют, сушат над Мд₂8О₄, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя 0-30% ЕЮАс: гексан, получая 655 мг (29%) метилового эфира 2-пара-толил-5-триметилсиланил-2Н-пиразол-3-карбоновой кислоты. МС (Е8+): ι/ζ=289,3 [М+Н].

Метиловый эфир 2-пара-толил-5-триметилсиланил-2Н-пиразол-3-карбоновой кислоты (665 мг, 2,30 ммоль) помещают в метанол (25 мл). Добавляют 1Н №1ОН (10 мл, 10 ммоль) и нагревают до 50°С в течение 4 ч. Охлаждают до комнатной температуры и концентрируют при пониженном давлении. Добавляют насыщенный водный раствор бикарбоната натрия и СН2С12. Органический слой отделяют и водный слой экстрагируют СН₂С1₂ (2x25 мл). Органические экстракты объединяют, сушат над Мд₂8О₄, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая 620 мг (98%) 2-пара-толил-5-триметилсиланил-2Нпиразол-3-карбоновой кислоты. МС (Е8+): ι/ζ=275,3 [М+Н].

2-Пара-толил-5-триметилсиланил-2Н-пиразол-3-карбоновую кислоту (620 мг, 2,26 ммоль) помещают в трет-бутанол (5 мл) и толуол (5 мл). Добавляют триэтиламин (0,378 мл, 2,71 ммоль), потом добавляют дифенил фосфорилазид (0,586 мл, 2,71 ммоль) и нагревают до 60°С в течение 1 ч. Потом нагревают до 100°С в течение 19 ч. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя 0-30% Е1ОАс:гексан, получая 504 мг (65%) третбутилового эфира (2-пара-толил-5-триметилсиланил-2Н-пиразол-3-ил)карбаминовой кислоты. МС (Е8+): ι/ζ=346,4 [М+Н].

трет-Бутиловый эфир (2-пара-толил-5-триметилсиланил-2Н-пиразол-3-ил)карбаминовой кислоты (504 мг, 1,46 ммоль) помещают в ТНЕ (10 мл). Добавляют 4М НС1 в диоксане (4 мл, 16 ммоль) и нагревают до 60°С в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и загружают на колонку Уапап™ 8СХ. Колонку промывают МеОН и потом продукт вымывают 2М ΝΉ₃ в МеОН. Фильтрат собирают и концентрируют при пониженном давлении, получая 175 мг (49%) 2-пара-толил-5триметилсиланил-2Н-пиразол-3-иламина.

2-пара-толил-5-триметилсиланил-2Н-пиразол-3-иламин (170 мг, 0,693 ммоль) помещают в этилаце

- 19 015189 тат (10 мл). Добавляют карбонат калия (191 мг, 1,38 ммоль) и воду (2 мл). Реакционную смесь перемешивают и добавляют трихлорэтилхлорформиат (0,114 мл, 0,831 ммоль). Перемешивают при комнатной температуре в течение 18 ч. Добавляют воду и этилацетат. Органический слой отделяют и промывают насыщенным водным хлоридом натрия. Органический слой собирают, сушат над Мд₂8О₄, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя 0-30% ЕЮАс:гексан, получая 280 мг (96%) указанного в заглавии соединения. МС (Е8+): т/х=420.2 [М+Н].

Пример получения 43. 2,2,2-Трихлорэтиловый эфир [5-(2-фтор-1-фторметил-1-метилэтил)-2-паратолил-2Н-пиразол-3-ил]карбаминовой кислоты

Н₂8О₄ (4,5 г) добавляют к суспензии 3-гидрокси-2-гидроксиметил-2-метилпропионовой кислоты (100 г) в МеОН (1 л, градиентный растворитель ВЭЖХ) и перемешивают при комнатной температуре в течение выходных (приблизительно 70 ч). Растворитель удаляют и остаток разделяют между ЕЮАс (1 л) и Н₂О (100 мл). Водный слой повторно экстрагируют ЕЮАс и объединенные органические слои сушат над Мд8О₄. Фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая метиловый эфир 3гидрокси-2-гидроксиметил-2-метилпропионовой кислоты.

^!Н ЯМР (СОС1₃, 300 МГц): δ м.д. 3,9 (д, 2Н, 1=11,1 Гц), 3,76 (с, 3Н), 3,71 (д, 2Н, 1=11,1 Гц), 2,8 (ушир.с, 2Н), 1,1 (с, 3Н).

Τί₂Ο (80 мл) по каплям добавляют к охлажденному (-78°С) раствору метилового эфира 3-гидрокси2-гидроксиметил-2-метилпропионовой кислоты (32,5 г) в СН₂С1₂ (400 мл) и 2,6-лутидине (80 мл). Реакционную смесь оставляют нагреваться до комнатной температуры и перемешивают, пока при анализе ТСХ не будет выявлено только пятно продукта (приблизительно 2 ч). Разбавляют СН2С12 (400 мл) и промывают НС1 (3%-водный раствор). Органический слой сушат над Мд8О₄, фильтруют и концентрируют. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя гексанами/этилацетатом 5%, получая метиловый эфир 2-метил-2,3-бис-трифторметансульфонилоксипропионовой кислоты в виде бесцветного масла.

^!Н ЯМР (СПС1₃, 300 МГц): δ м.д. 4,7 (д, 2Н, 1=10,3 Гц), 4,5 (б, 2Н, 1=10,3 Гц), 3,8 (с, 3Н), 1,4 (с, 3Н).

ТВАР 1М (132 ммоль, 132 мл) добавляют к раствору метилового эфира 2-метил-2,3-бистрифторметансульфонилокси-пропионовой кислоты (65,9 ммоль, 26,3 г) в 500 мл безводного ТНР, охлажденного до 0°С. Перемешивают в течение ночи.

Концентрируют при пониженном давлении и добавляют СН₂С1₂. Органический слой промывают насыщенным водным хлоридом натрия. Органические слои объединяют и сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая метиловый эфир 3-фтор-2-фторметил2-метилпропионовой кислоты.

^!Н ЯМР (СПС1₃, 300 МГц): δ м.д.: 4,7-4,4 (м, 4Н), 3,5 (с, 3Н), 0,98 (т, 3Н, 1=1,7 Гц).

К раствору метилового эфира 3-фтор-2-фторметил-2-метилпропионовой кислоты (28,2 ммоль, 4,3 г) в 100 мл безводного ТНР, охлажденного до -78°С, добавляют БЭЛ 2,0М (62,0 ммоль, 31 мл), потом добавляют безводный ацетонитрил (56,4 ммоль, 2,9 мл). Перемешивают в течение 2 ч при -78°С и раствор оставляют нагреваться до комнатной температуры в течение ночи. Концентрируют при пониженном давлении и добавляют СН2С12. Органический слой промывают насыщенным водным хлоридом натрия и водной 10% НС1. Органические слои объединяют и сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая остаток. Гидрохлорид п-толилгидразина (15,5 ммоль, 2,5 г) и полученный остаток (15,5 ммоль, 2,5 г) перемешивают в 31 мл этанола при 90°С в течение ночи. Концентрируют и остаток растворяют в воде. Добавляют 10% раствор гидроксида натрия и экстрагируют в этилацетате. Органические слои объединяют и сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая 5-(2-фтор-1-фторметил-1-метилэтил)-2-пара-толил-2Н-пиразол-3иламин. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя гексанами/этилацетатом (от 15% до 50%). МС (Е8+): т// 266 [М+Н].

2,2,2-Трихлорэтилхлорформиат (8,1 ммоль, 1,1 мл) и водный раствор карбоната натрия (4,8 мл) добавляют к раствору 5-(2-фтор-1-фторметил-1-метилэтил)-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-иламина (7,3 ммоль, 1,9 г) в 37 мл ТНР. Перемешивают в течение 24 ч. Раствор выливают в воду и экстрагируют в этилацетате. Органические слои объединяют и промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия. Сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая указанное в заглавии соединение. МС (Е8+): т/х=440 [М+Н].

- 20 015189

Пример получения	Соединение	МС (Е5+) : λ/ζ [М+Н])
Пример получения 44	2,2,2-трихлорэтиловый эфир [5-(2-фтор-1,1-диметилэтил)- 2-пара-толил-2 Н-пиразол-З- ил]карбаминовой кислоты	424

Пример получения 45. трет-Бутиловый эфир 4-(5-{3-[5-(1-метилциклопропил)-2-пара-толил-2Нпиразол-3-ил]уреидо }пиридин-2-ил)пиперазин-1 -карбоновой кислоты

Раствор трет-бутилового эфира 4-(5-аминопиридин-2-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты (пример получения 4, 1,05 экв. , 0,5845 г), 2,2,2-трихлорэтилового эфира [5-(1-метилциклопропил)-2-пара-толил2Н-пиразол-3-ил] карбаминовой кислоты (пример получения 39, 1,0 экв., 0,8054 г) и диизопропилэтиламина (2 экв., 0,7 мл) в ДМСО (0,25М, 8 мл) нагревают до 60°С в течение 6 ч. Полученную смесь охлаждают до температуры окружающей среды и добавляют воду (20 мл). Экстрагируют Е!ОАс (2x25 мл), потом объединенные органические фазы промывают водой (10 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (10 мл). Сушат над Мд8О₄, потом остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя градиентом 2М аммиак-метанол в дихлорметане. ЖХМС (Е8+): 111//=532,3 [М+Н].

Пример получения	Соединение	МС (ЕЗ+) : т/ζ [М+Н])
Пример получения 46	трет-Бутиловый эфир 4-(3-метил~ 5- (3~ [5- (1-'метилциклопропил) -2пара-толил-2Я-пиразол-3- ил]уреидо}пиридин-2- ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты	546
Пример получения 47	трет-Бутиловый эфир 4-(6—метил- 5-{3- [5- (1-метилциклопропил)-2пара-толил-2Я-пиразол-3- ил]уреидо}пиридин-2- ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты	546
Пример получения 48	трет-Бутиловый эфир 4-(3-метил- 5-{3-[5- (1-метилциклогексил)-2пара-толид-2 Я- пиразол-3- ил]уреидо}лиридин-2- ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты	588,3

Пример получения 49. трет-Бутиловый эфир 4-{5-[3-(5-трет-бутил-2-пара-толил-2Н-диразол-3ил)уреидо]-6-метилпиридин-2-ил}пиперазин-1-карбоновой кислоты

Раствор трет-бутилового эфира 4-(5-амино-6-метилпиридин-2-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты (пример получения 3, 41,20 г, 140,9 ммоль), 2,2,2-трихлорэтилового эфира (5-трет-бутил-2-пара-толил2Н-пиразол-3-ил)карбаминовой кислоты (пример получения 38, 57,03 г, 140,9 ммоль) и Э1ЕА (36,8 мл, 211,4 ммоль) в ДМСО (500 мл) нагревают при 60-65°С в течение 2,5 ч. В течение последних 30 мин к густой суспензии добавляют дополнительный ДМСО (100 мл). Суспензию охлаждают до комнатной температуры и выдерживают в течение ночи. Добавляют диэтиловый эфир (600 мл) и суспензию перемешивают в течение 1 ч при комнатной температуре. Фильтруют и промывают диэтиловым эфиром (5x300 мл), потом сушат на воздухе, получая белое твердое вещество (68,70 г, выход 89% без учета поправки для ДМСО содержит приблизительно 85 мол.% ДМСО. ЖХМС (Е8+): т//=548 [М+Н].

- 21 015189

Пример получения 50. 1-[5-(1-Метилциклопропил)-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил]-3-(2-метил-6-

Газообразную соляную кислоту барботируют через раствор трет-бутилового эфира 4-(6-метил-5-{3[5-( 1-метилциклопропил)-2-пара-толил-2Н-пиразол-3 -ил]уреидо }пиридин-2-ил)пиперазин-1 -карбоновой кислоты (предполагают 2,74 ммоль) в 1:1 этилацетат :дихлорметан (200 мл) в течение 3 мин, чтобы обеспечить насыщение. Смесь выдерживают в течение 30 мин, потом концентрируют при пониженном давлении до белого твердого вещества. Твердое вещество растворяют в МеОН и загружают на колонку 20 г Уапаи 8СХ, промывают дополнительным МеОН. Свободное основание элюируют 1:1 2М аммиаком в МеОН:дихлорметан. Раствор концентрируют при пониженном давлении, получая белое твердое вещество (1,21 г, 99% за 2 стадии). ЖХМС (Е8+): ш9=446 [М+Н].

Пример получения	Соединение	МС (ЕЗ+): ш/ζ [М+Н])
Пример получения 51	1-[5-(1-Метилциклопропил)-2пара-толил-2Я-пиразол-3-ил]-3(5-метил-6-пиперазин-1илпиридин-3-ил)мочевина	446

Пример получения 52. 1-(5-трет-бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-(6-пиперазин-1-илпиридин-3-ил)мочевина трет-Бутиловый эфир 4-(5-аминопиридин-2-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты (200 мг, 0,718 ммоль), диизопропилэтиламин (0,125 мл, 0,718 ммоль) и 2,2,2-трихлорэтиловый эфир {5-трет-бутил-2пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)карбаминовой кислоты (пример получения 38, 291 мг, 0,718 ммоль) помещают в ДМСО (5 мл) и нагревают до 75°С в течение 17 ч. Охлаждают до комнатной температуры и добавляют ЕЮАс и воду. Органический слой отделяют и промывают насыщенным водным хлоридом натрия (2x20 мл). Органический слой собирают, сушат над Мд₂8О₄, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя 0-70% ЕЮАс:гексан, получая 328 мг (85%) трет-бутилового эфира 4-{5-[3-(5-трет-бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3ил)уреидо]пиридин-2-ил}пиперазин-1-карбоновой кислоты. МС (Е8+): 1119=534,4 [М+Н]).

трет-Бутиловый эфир 4-{5-[3-(5-трет-бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)уреидо]пиридин-2ил}пиперазин-1-карбоновой кислоты (565 мг, 1,06 ммоль) помещают в ТНЕ (10 мл). Добавляют 4М НС1 в диоксане (2,65 мл, 10,6 ммоль) и нагревают до 60°С в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и загружают на колонку Уапаи™ 8СХ. Колонку промывают МеОН и потом продукт вымывают 2М Ν^ в МеОН. Фильтрат собирают и концентрируют при пониженном давлении, получая 411 мг (89%) указанного в заглавии соединения. МС (Е8+): 1119=434,2 [М+Н]).

Следующие соединения получают, используя методики, по существу аналогичные методикам, описанным выше.

Пример получения	Соединение	МС (ЕЗ+): т/ζ [М+Н])
Пример получения 53	1-(5-трет-Бутил-2-пара-тслил2Н-пиразол-3-ил)-3-(5-метил-6пипера эин-1-илпиридин-3- ил)мочевина	448,5

- 22 015189

Пример получения 54	Гидрохлорид 1 —(5-трет-бутил-2лара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3- (5-хлор-б-пиперазин-1илпиридин-3-ил)мочевины (не очищали)	468,4
Пример получения 55	1-(6-пиперазин-1-илпиридин-3- ил)-3-(2-пара-толил-5триметилсиланил-2Н-пиразол-3ил)мочевина	450, 4

Пример получения 56. 1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-(2-метил-6-пиперазин-1ил-пиридин-3-ил)мочевина

Раствор трет-бутилового эфира 4-{5-[3-(5-трет-бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)уреидо]-6метилпиридин-2-ил}пиперазин-1-карбоновой кислоты (пример получения 49; 63,20 г, 115,4 ммоль) в МеОН (600 мл) обрабатывают НС1 (4Н раствор в диоксане, 300 мл, 1200 ммоль) при 22°С. Смесь перемешивают в течение 4 ч, потом концентрируют при пониженном давлении (комнатная температура, приблизительно 10 торр, 3 дня), получая дигидрохлорид 1-(5-трет-бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3(2-метил-6-пиперазин-1-илпиридин-3-ил)мочевины в виде не совсем белого порошка (62,2 г - содержит приблизительно 45 мол.% диоксана). ЖХМС (Е8+): т/х=448 [М+Н].

Раствор дигидрохлорида 1-(5-трет-бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-(2-метил-6-пиперазин-1илпиридин-3-ил)мочевины (10 г, 19,2 ммоль) в МеОН загружают на колонку 70 г Уапап 8СХ, промывают МеОН (приблизительно 300 мл). Свободное основание элюируют 1:1 2М аммиака в

МеОН:дихлорметан (150 мл) . Концентрируют при пониженном давлении, получая белое твердое вещество (6,24 г). ЖХМС (Е8+): 111//448 [М+Н].

Пример получения	Соединение	МС (Е8+): т/ζ [М+Н])
Пример получения 57	1-[5-(1-Метилциклопропил)-2пара-толил-2Н-пиразол-3-ил]-3- (6-пиперазин-1-ил-пиридин-3- ил)мочевина	432,2
Пример получения 58	1“[5-(1-Мегилциклогексил)-2пара-толил-2Я-пиразол-3-ил]-3(5-ме тил—6—пиперазин—1илпиридин-3-ил)мочевина	488,5

Пример получения 59. 1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-[2-метил-6-(пиперидин-4илокси)пиридин-3-ил]мочевина

Газообразный азот барботируют через раствор 2,2,2-трихлорэтилового эфира 1-5-трет-бутил-2пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)карбаминовой кислоты (пример получения 38, 608 мг, 1,5 ммоль) и третбутилового эфира 4-(5-амино-6-метилпиридин-2-илокси)пиперидин-1-карбоновой кислоты (453 мг, 1,5 ммоль) в ДМСО (3 мл) в течение 5 мин. Потом добавляют Ν,Ν-диизопропилэтиламин (500 мкл, 3,0 ммоль). Перемешивают при 60°С в течение ночи, потом реакционную смесь разделяют между этилацетатом (25 мл) и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (50 мл). Водную фазу выделяют и дважды экстрагируют этилацетатом (25 мл каждого). Объединенные органические фазы сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя гексанами и этилацетатом, получая трет-бутиловый эфир 4-{5-[3-(5-трет-бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3ил)уреидо]-6-метилпиридин-2-илокси}пиперидин-1-карбоновой кислоты в виде коричневого твердого вещества (746 мг, выход 88%). МС (Е8+): 111//=563,3 [М+Н].

Трифторуксусную кислоту (10 мл) добавляют к охлажденному раствору трет-бутилового эфира 4

- 23 015189 {5-[3-(5-трет-бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)уреидо]-6-метилпиридин-2-илокси}пиперидин-1карбоновой кислоты (746 мг, 1,33 ммоль) в дихлорметане (20 мл). Реакционную смесь перемешивают при 22°С в течение 25 мин. После удаления растворителя остаток обрабатывают 1Н гидроксидом натрия (20 мл) и три раза экстрагируют дихлорметаном (20 мл каждого). Объединенные органические фазы сушат над сульфатом натрия. Растворитель удаляют, получая белое твердое вещество (605 мг, выход 98%). МС (Е8+): ι/ζ=463,2 [М+Н].

Пример получения	Соединение	МС (ЕЗ+) : т/ζ [М+Н])
Пример получения 60	1-(5-трет-Бутил-2-метил-2Я- пиразол-3-ил)-3-[6-(пиперидин-4илокси)пиридин-3-ил]мочевина	373, 3
Пример получения 61	1-[5-трет-Бутил-2-(6метилпиридин-3-ил)-2Я-пиразол-3ил]-3-(2-метил-6-пиперазин-1илпиридин-3-ил)мочевина	449, 2
Пример получения 62	1- (2-Метил-6-пиперазин-1илпиридин-3-ил)-3-[2-(6метилпиридин-3-ил)-5-(1трифторметилциклопропил)-2Нпиразол-3-ил]мочевина	501,3
Пример получения 63	1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Япиразол-3-ил)-3-[б-(пиперидин-4илокси)пиридин-3-ил]мочевина	449,2
Пример получения 64	1-(5-грет-Бутил-2-пара-толил-2Нпиразол-3-ил)-3-[5-метил-6(пиперидин-4-илокси)пиридин-3ил]мочевина	463,2
Пример получения 65	1- (5-“Трет-Бутил-2-пара-толил-2нпиразол-3-ил)-3-[5-хлор-6(пиперидин-4-илокси)пиридин-3ил]мочевина	483, 3
Пример получения 66	1-(2-Метил-6-пиперазин-1илпиридин-3-ил)-3-(5пентафторэтил-2-пара-толил-2Нпиразол-3-ил)мочевина	510, 4
Пример получения 67	1-(2-Метил-б-пиперазин-1илпиридин-3-ил)-3-[2-пара-толил- 5-(1-трифторметилциклопропил)- 2Я-пиразол-3-ил]мочевина	510, 4

Пример получения 68. Гидрохлорид 1-[5-(2-фтор-1-фторметил-1-метилэтил)-2-пара-толил-2Нпиразол-3-ил]-3-(2-метил-6-пиперазин-1 -илпиридин-3-ил)мочевины

2,2,2-трихлорэтиловый эфир [5-(2-фтор-1-фторметил-1-метилэтил)-2-пара-толил-2Н-пиразол-3ил]карбаминовой кислоты (2,7 ммоль, 1,2 г) и ΌΙΕΆ (2,9 ммоль, 0,5 мл) добавляют к раствору третбутилового эфира 4-(5-амино-6-метилпиридин-2-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты (2,9 ммоль, 0,9 г) в 4 мл ДМСО и перемешивают при 85°С в течение ночи. Охлаждают, добавляют воду и экстрагируют СН2С12. Органические слои объединяют и промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия. Сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая третбутиловый эфир 4-(5-{ 3-[5-(2-фтор-1-фторметил-1 -метилэтил)-2-пара-толил-2Н-пиразол-3 -ил]уреидо }-6метилпиридин-2-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя гексанами/этилацетатом с градиентом (от 10 до 50%). МС (Е8+): ιη/ζ=584 [М+Н]).

трет-Бутиловый эфир 4-(5-{ 3 -[5-(2-фтор-1 -фторметил-1-метилэтил)-2-пара-толил-2Н-пиразол-3 ил]уреидо}-6-метилпиридин-2-ил)пиперазин-1-карбоновой кислоты (1,5 ммоль, 0,9 г), растворенный в 5 мл СН₂С1₂, и 4,0 М хлорид водорода в диоксане (7,35 ммоль, 1,8 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Концентрируют, потом полученное белое твердое вещество растирают в порошок с диэтиловым эфиром. МС (Е8+): ιη/ζ=484 [М+Н] ).

- 24 015189

Пример получения	Соединение	МС (Е5+) : т/ζ [М+Н]
Пример получения 69	Гидрохлорид 1-[5-(2-фтор-1,1- диметилэтил)-2-пара-толил-2Лпиразол-3-ил]-3-(2-метил-бпиперазин-1-илпиридин-З- ип)мочевина	466

Пример получения 70. 1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-[6-(пиперидин-4иламино)пиридин-3-ил] мочевина

2,2,2-трихлорэтиловый эфир (5-трет-бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)карбаминовой кислоты (пример получения 38, 2,0 ммоль, 0,8 г) добавляют к раствору трет-бутилового эфира 4-(5аминопиридин-2-иламино)пиперидин-1-карбоновой кислоты (2,0 ммоль, 0,6 г) и карбоната калия (2,20 ммоль, 0,3 г) в ацетонитриле (25 мл). Раствор перемешивают в течение 12 ч при комнатной температуре. Добавляют воду и экстрагируют СН₂С1₂. Органические слои объединяют и промывают насыщенным водным хлоридом натрия, сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая остаток. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя СН₂С1₂:МеОН с градиентом (от 0,5 до 20%), получая трет-бутиловый эфир 4-{5-[3-(5-трет-бутил-2-пара-толил-2Нпиразол-3-ил)уреидо]пиридин-2-иламино}пиперидин-1-карбоновой кислоты. МС (Е8+): ш/х=548 [М+Н]).

Раствор трет-бутилового эфира 4-{5-[3-(5-трет-бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)уреидо]пиридин-2-иламино}пиперидин-1-карбоновой кислоты (1,1 ммоль, 0,6 г) в Е1₂О (5 мл) обрабатывают НС1 (2,0М раствор в диэтиловом эфире, 5 мл, 10 ммоль) при 22°С. Раствор перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Концентрируют при пониженном давлении, получая остаток, потом остаток помещают на картридж 8СХ, элюируя аммиаком 2,0 Н в метаноле. Указанное в заглавии соединение получают в форме свободного основания. МС (Е8): ш/х=488 [М+Н].

Пример получения 71. 1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-[2-(пиперидин-4-илокси) пиридин-4 -ил] мочевина

Раствор трет-бутилового эфира 4-(4-аминопиридин-2-илокси)пиперидин-1-карбоновой кислоты (пример получения 20, 1 г, 3,41 ммоль), 2,2,2-трихлорэтилового эфира (5-трет-бутил-2-пара-толил-2Нпиразол-3-ил)карбаминовой кислоты (пример получения 38, 1,38 г, 3,41 ммоль) и диизопропилэтиламина (1,2 мл, 6,82 ммоль) в ДМСО (15 мл) нагревают при 60°С в течение 5 дней. Полученную смесь охлаждают до комнатной температуры и разделяют между водой и этилацетатом, используя насыщенный водный раствор хлорида натрия, чтобы способствовать разделению фаз. Водный слой экстрагируют этилацетатом, объединенные органические слои дважды промывают водой, сушат над сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя градиентом этилацетат в дихлорметане, получая 877 мг (выход 43%) трет-бутилового эфира 4-{4-[3-(5-третбутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)уреидо]пиридин-2-илокси}пиперидин-1-карбоновой кислоты.

ЖХМС Е8+ (т/ζ) 549 [М+Н].

Раствор трет-бутилового эфира 4-{4-[3-(5-трет-бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)уреидо]пиридин-2-илокси}пиперидин-1-карбоновой кислоты (877 мг, 1,6 ммоль) в 1:1 Е1ОЛс:ЭСМ (100 мл) обрабатывают барботирующим потоком НС1 (г) в течение 3 мин. Полученную смесь выдерживают в течение 30 мин, потом концентрируют при пониженном давлении. Остаток растворяют в МеОН и загружают на колонку 20 г Уайап 8СХ, хорошо промывая МеОН. Свободное основание элюируют 1:1 ЭСМ:2М аммиак в МеОН. Раствор концентрируют при пониженном давлении, получая указанное в заглавии соединение с количественным выходом. ЖХМС Е8+ (т/ζ) 449 [М+Н].

Следующее соединение получают, используя методику, по существу аналогичную методике, описанной выше.

- 25 015189

Пример получения	Соединение	МС (ЕЗ+): т/ζ [М+Н]
Пример получения 72	1-[5-(1-Метилциклопропил)-2-паратолил-2Я-пираэол-3-ил]-3-[2(пиперидин-4-илокси)пиридин-4ил]мочевина	447

Пример 1. 1-{6-[4-(2,2-Диметилпентаноил)пиперазин-1-ил]пиридин-3-ил}-3-[5-(1-метилциклопропил)-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил]мочевина

Раствор или суспензию 1-[5-(1-метилциклопропил)-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил]-3-(6-пиперазин1-илпиридин-3-ил)мочевины (пример получения 5, 1 экв., 0,1510 г), 2,2-диметилпентановой кислоты (1,15 экв., 0,0521 г) и каталитического ОМАР (приблизительно 0,1 экв., 0,049 г) в дихлорметане (приблизительно 0,1М, 5 мл) обрабатывают гидрохлоридом Ы-(3-диметиламинопропил)-Ы'-этилкарбодиимида (ЕЭС1. 1,15 экв., 0,0767 г) . Полученную смесь встряхивают при температуре окружающей среды в течение 48 часов, потом промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Органический слой сушат над сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Очищение А: очищают на силикагеле, используя градиент 2М аммиак-метанол в дихлорметане, градиент - этилацетат в дихлорметане или гексаны. Очищение В: очищают с помощью обратной фазы на колонке ХЮгга 30x75 мм 5 микрон М8 С18, используя градиент 10 мМ водный бикарбонат аммония в ацетонитриле, получая указанное в заглавии соединение. ЖХМС (Е8+): т^=544 [М+Н].

Следующие соединения получают, используя методики, по существу, аналогичные методикам, описанным выше.

Пример	Соединение	мс (ЕЗ+) : (ш/ζ) [М+Н]
2	1-{б-[4-(1- Метилциклогексанкарбонил)пиперазин- 1-ил]пиридин-3-ил)-3-[5-(1метилциклопропил)-2-пара-толил-2Япиразол-3-ил]мочевина	556
3	1-{6-[4-(2,6-Дифтор- бензоил)пиперазин-1-ил]пиридин-3- ил)-3-[5-(1-метилциклопропил)-2- пара-толил-2Н-пираэол-3-ил]мочевина	572

Пример 4. Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-{6-[4-(2,2-диметилпропионил)пиперазин-1 -ил]-2-метилпиридин-3-ил }мочевины

Смесь 1-(5-трет-бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3 -ил)-3 -(2-метил-6-пиперазин-1 -илпиридин-3 -ил) мочевины (пример получения 56, 157 мг, 0,35 ммоль), триметилуксусной кислоты (54 мг, 0,53 ммоль) и каталитического ОМАР (4 мг) в дихлорметане (3,5 мл) обрабатывают гидрохлоридом N-(3диметиламинопропил)-Ы'-этилкарбодиимида (ЕЭС1; 101 мг, 0,53 ммоль). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи, потом промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Органический слой сушат над сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя градиентом 2М аммиак-метанол в дихлорметане, получая указанное в заглавии соединение в форме свободного основания. ЖХМС (Е8+):

- 26 015189 т/х=532 [М+Н].

Раствор или суспензию свободного амина в дихлорметане (5 мл) обрабатывают 2М метансульфоновой кислотой в дихлорметане (1 экв.; 0,155 мл). Полученную смесь перемешивают, концентрируют под потоком азота и сушат при пониженном давлении, получая соль.

Пример	Соединение	ЖХМС (ЕЗ+): ш/и [М+Н]
5	Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2- пара-толил-27/-пиразол-3-ил) -3-{6[4- (2,6-дифторбензоил)липеразин-1ил]-2-метилпиридин-3-ил[мочевины	588

6	Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2- пара-толил-2Я-пиразол~3-ил)~3-{2метил-6-[4- (1 метилциклопропанкарбонил)пиперазин- 1-ил]пиридин-3-ил}мочевины	530
7	Метансульфонат 1- (5^трет-“бутил-2- пара-толил-2Я-пиразол-3-ил)-3-{6[4-{2,5-дифторбензоил)-пиперазин-1ил]-2-метил-пиридин-З-ил}мочевины	588
8	Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2- пара-толил-2Я-пиразол-3-ил)-3-{б[4-(2,4-дифторбензоил)пиперазин-1ил]-2~метиллиридин-3-ил}мочевины	588
9	Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2- пара-толил-2я-пиразол-3-ил)-3-{6[4-(2,3-дифторбензоил)пиперазин-1ил]-2-метилпиридин-З-ил}мочевины	588
10	Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2- пара-толил-2Я-пиразол-3-ил)-3-{б[4-(3,4-дифторбензоил)пиперазин-1ил]-2-ме тилпиридин-3-ил}мочевины	588
11	Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2- пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)—3 — ί 6— [4-(3,5-дифторбензоил)пиперазин-1ил]-2-метилпиридин-3-ил(мочевины	588
12	Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2- пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-{6[4-(2,6-диметилбензоил)пиперазин-1ил]-2-метилпиридин-3-ил)мочевины	580
13	Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2- пара-толил-277-пиразол-З-ил) -3- {6[4- (2-фтор-6- метоксибензоил)пиперазин-1-ил]-2метилпиридин-3-ил[мочевины	600

- 27 015189

14	Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2- пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-{6[4-(2-хлор-6-фторбензоил)пиперазин1-ил]-2-метилпиридин-3-ил}мочевины	604
15	Метансульфонат 1-[6-(4-бензоил- пипераэин-1-ил) -З-мотилпиридил-?:ил] -3- (5-трет-бутил-2-пара-толил2Я-пиразол-3-ил)мочевины	552
16	Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2- пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-{6[4-(2-фторбензоил)пипераэин-1-ил]- 2 -метилпиридин-3 -ил} мочевины	570
17	Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2- пара-толил-2Я-пиразол-3-ил(-3-{6[4-(2-метилбензоил)пиперазин-1-ил]2-метилпиридин-З-ил(мочевины	566
18	Метансульфонат 1-(5-трет-5утил-2- пара-толил-2Я-пиразол-3-ил)-3-{6[4- (2-цианобензоил)пиперазин-1-ил]2-метилпиридин-3-ил}мочевины	577
19	Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2- пара-толил-2Я-пиразол-3-ил)-3-{6[4-(2-метоксибензоил)пиперазин-1ил]-2-метилпиридин-3-ил)мочевины	582
20	Метансульфонат 1-(5-трет~бутил-2~ пара-толил-2Я-пиразол-3-ил)-3-(6[4-(2-хлорбензоил)пиперазин-1-ил]2-метилпиридин-З-ил]мочевины	586
21	Метансульфонат 1- (5-трет”-бутил-2- пара-толил-2Я-пиразол-3-ил)-3-{6[4- (2- трифторметилбензоил}пиперазин-1- ил]-2-метилпиридин-З-ил}мочевины	620

- 28 015189

22	Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2- пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-{6[4-(3-фторбензоил)пиперазин-1-ил]- 2-метилпиридин-3-ил)мочевины	570
23	Метансульфонат 1-<5-трет-бутил-2- пара-толил-2Я-пиразол-3-ил)-3-{6[4-(3-метилбензоил)пиперазин-1-ил]2-метилпиридин-3-ил}мочевины	566
24	Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2- пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-{6[4-(3-цианобензоил)пиперазин-!-ил]2-метилпиридин-З-ил}мочевины	577
25	Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2- пара-толил-2Я-пиразсл-3-ил)-3-{6[4-(3-метоксибензоил)пиперазин-1ил]-2-метилпиридин-З-ил)мочевины	582
26	Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2- пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-{6[4-(3-хлорбензоил)пиперазин-1-ил]2-метилпиридин-З-ил}мочевины	586
27	Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2- пара-толил-217-пиразол-З-ил)-3-{6[4-(3- трифторметилбензоил)пиперазин-1- ил]-2-метилпиридин-З-ил}мочевины	620
28	Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2- пара-толил-2#-пиразол-3-ил)-3-{б[4-(4-фторбензоил)пиперазин-1-ил]2-метилпиридин-З-ил)мочевины	570
29	Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2- лара-толил-2#-пиразол-3-ил)-3-{6[4-(4-метилбенэоил)пилеразин-1-ил]2-метилпиридин-З-ил)мочевины	566

- 29 015189

30	Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2- пара-толил-2Я-пиразол-3-ил) -3- {6[4- (4-метоксибензоил) пилеразин-1ил]-2-метилпиридин-3-ил}мочевины	582
31	Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2- пара-толил-2Я-пиразол-3-ил)-3-{2метил-б-[4-(тиофен-3- карбонил)пиперазин-1-ил]пиридин-3ил}мочевины	558
32	Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2- пара-толил-2Я-пиразол-3-ил)-3-{2метил-б-[4-(тиофен-2- карбонил)пиперазин-1-ил]лиридин-3ил}мочевины	558
33	Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2- пара-толил-2я-пиразол-3-ил)-3-{2метил-6-[4-(З-метилтиофен-2карбонил)пиперазин-1-ил]пиридин-3ил]мочевины	572
34	Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2- пара-толил-2Я-пиразол-3-ил)-3-{2метил-б-[4-(пиридин-2- карбонил)пиперазин-1-ил]пиридин-3ил}мочевины	553
35	Метансульфонат 1-(6-14-(2- фторбензоил)пиперазин-1-ил]-2метилпиридин-3-ил}-3-[5-(1метилциклопропил)-2-пара-толил-2Япиразол-3-ил]мочевины	568
36	Метансульфонат 1-{б-[4-(2,6- дифторбензоил)пиперазин-1-ил]-2метилпиридин-3-ил}-3-[5-(1метилциклопропил}-2-пара-толид-2Нпиразол-3-ил]мочевины	586

- 30 015189

37	Метансульфонат 1“[5- (1- метилциклопропил)-2-пара-толил-2Япиразол-З-ил ] -3 - { 2-метил-6- [4-(3метилтиофен-2-карбонил)пиперазин-1ил]пиридин-3-ил}мочевины	570
38	Метансульфонат 1-{6-[4-(2,2- диметилпропионил)пиперазин-1-ил]-5метилпиридин-3-ил}-3-[5-(1метилциклопропил)-2-пара-толил-2Нпиразол-3-ил]мочевины	530
39	Метансульфонат 1-{6-[4-(2,6- дифторбенэоил}пиперазин~1-ил]-5метилпиридин-3-ил}-3-[5-(1метилциклопропил)-2-пара-толил-2И“ пиразол-3-ил]мочевины	586
40	Метансульфонат 1-{6-[4 - (2- фторбензоил}пиперазин-1-ил]-5метилпиридин-3-ил 1-3-[5-(1мегилциклопропил)-2-пара-толил-2 Нпиразол-3-ил]мочевины	568
41	Метансульфонат 1—[5—ίί- ые тилциклопропил)-2-пара-толил-2 Нпиразол-3-ил]-3-(5-метил-6-[4-(1метилциклопропанкарбонил)пиперазин1-ил] пиридин-3-ил)мочевиньг	528
42	Метансульфонат 1-(5-(1- метилциклопропил)-2-пара-толил-2Япиразол-3-ил]-3-(5-метил-б-[4-(3метилтиофен-2-карбонил) пип.еразин-1ил]пиридин-З-ил}мочевины	570
43	Метансульфонат 1-{6-[4-(2,2- диметилпропионил)пиперазин-1-ил]-5метилпиридин-3-ил}-3-[5-(1метилциклогексил)-2-пара-толил-2Ипиразол-3-ил]мочевины	572

44	Метансульфонат 1-{6-[4-(2,6- дифторбензоил)пиперазин-1-ил]-5метилпиридин-3-ил}-3-[5-(1метилциклогексил)-2-пара-толил-2Япиразол-3-ил]мочевины	628
45	Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2- пара-толил-2Я-пиразол~3-ил)-3-{6[4-(2,6-дихлорбензоил)пиперазин-1ил]-2-метилпиридин-З-ил}мочевины (г*п время = 5 дней, НОВЪ (0,59 ммоль} вместо ϋΜΑΡ)	620

Пример 46. 1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-{6-[4-(2,6-дифторбензоил)пиперазин1-ил] пиридин-3 -ил}мочевина

1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3 -ил)-3-(6-пиперазин-1 -илпиридин-3-ил)мочевину (48 мг, 0,111 ммоль), 2,6-дифторбензойную кислоту (21 мг, 0,133 ммоль) и 4-^№диметиламинопиридин (3 мг, 0,022 ммоль) помещают в ацетонитрил (5 мл). Добавляют гексафторфосфат О-(7-азабензотриазол-1-ил)Ν,Ν,Ν',Ν'-тетраметилурония (НАТО) (50 мг, 0,133 ммоль) и нагревают до 70°С в течение 19 ч. Охлажда

- 31 015189 ют до комнатной температуры и добавляют СН2С12 и воду. Органический слой отделяют и водный слой экстрагируют СН₂С1₂ (2x25 мл). Органические фазы объединяют, сушат над Мд₂8О₄, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя 060% ЕЮАс:гексан, получая указанное в заглавии соединение. ЖХМС (Е8): ιη/ζ=574,2 [М+Н].

Пример	Соединение	МС (ЕЗ+) т/г [М+Н]
47	1- (5-трет~Бутил-2-пара-толил- 2Я-пиразол-3-ил) -3- {6- [4- (2, 6дихлорбензоил)пиперазин-1- ил]пиридин-3-ил}мочевина	608
48	1- (5-!грет-Бутил-2-пара-толил- 2 77-пира зол-3-ил) -3-[6- (4циклопропанкарбонилпиперазин- 1-ил)пиридин-3-ил]мочевина	502,2
49	1- (З-т’рет-Бутил-Я-пара-толил- 227-пиразол-З-ил) -3-{ 6- [4- (3метилтиофен-2- карбонил)пиперазин-1- ил]пиридин-3-ил]мочевина	558,3

Пример 50. 1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-{6-[4-(2,2-диметилпропионил)пиперазин-1-ил]пиридин-3-ил}мочевина

1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-(6-пиперазин-1-илпиридин-3-ил)мочевину (200 мг, 0,461 ммоль), триэтиламин (0,071 мл, 0,507 ммоль) и 4-Ы,Х-диметиламинопиридин (6 мг, 0,051 ммоль) помещают в СН2С12 (10 мл). Добавляют 2,2-диметилпропионилхлорид (0,062 мл, 0,507 ммоль) и перемешивают при комнатной температуре в течение 17 ч. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя 0-100% ЕЮАс:гексан, получая 175 мг (73%) указанного в заглавии соединения. МС (Е8+): ι/ζ=518,2 [М+Н].

Пример	Соединение	МС (Е5+) :ш/г [М+Н]
51	1- (5-трет-Бутил-2-пара-толил-2.Нпиразол-3-ил)-3-{6-[4-(2,2диметилпропионил)пиперазин-1- ил]-5-метилпиридин-З-ил}мочевина	532,3

1- (5-фрез>-Бутил-2-пара-толил-2Нпиразол-3-ил)-3-{5-хлор-6-[4(2,2-диметилпропионил)пиперазин1-ил]пиридин-3-ил}мочевина

Пример 53. 1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-{6-[4-(3-метилпентаноил)пиперазин1-ил] пиридин-3 -ил}мочевина

1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3 -ил)-3-(6-пиперазин-1 -илпиридин-3-ил)мочевину (0,20 г, 0,46 ммоль) подвергают взаимодействию с 3-метилпентановой кислотой (0,059 г, 0,51 ммоль), 1гидроксибензотриазолгидратом (0,06 г, 0,46 ммоль) и карбодиимидом на полимерной подложке (0,83 г, 1,0 ммоль), суспендированным в смеси СН₂С1₂/ЭМР (18/1, мл). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи и потом фильтруют и смолу промывают СН2С12. Концентрируют и остаток очищают с помощью картриджа 8СХ, элюируя ЫН₄ОН/СН₃ОН 2Н, получая 135 мг (55%) указанного в заглавии соединения в виде бледно-розового твердого вещества. МС (Е8+): ιη/ζ=532 [М+Н].

- 32 015189

Пример	Соединение	МС (ЕЗ+) : т/ζ [М+Н]
54	1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол- 3-ил)-3-{6-[4-(2- циклопентилаце^ил)пиперазин-1- ил]пиридин-3-ил}мочевина	544
55	1- (5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Я-пиразол- 3-ил)-3-{6-[4-(2,2,3,3- тетраметилциклопропанкарбонил)пиперазин- 1-ил]пиридин-3-ил}мочевина	558
56	1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Я-пиразол- 3-ил)-3-{б-[4-(1- метилциклопропанкарбонил)пиперазин-1- ил]пиридин-3-ил}мочевина	516
57	1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Я-пираэол- 3-ил)-3-[6-(4- циклобутанкарбонилпиперазин-1- ил)пиридин-3-ил]мочевина	516
58	1- (5-трет-Бутил-2-пара-толил-2И'-пиразол- 3-ил)-3-(6-[4-(1- метилциклогексанкарбонил)пиперазин-1- ил]пиридин-3-ил}мочевина	558
59	1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол- 3-ил)—3-{6-[4-(2,2- диметилпентаноил)пиперазин-1-ил]пиридин- 3-ил}мочевина	546
60	1-(5-трет-Бутил-г-пара-толил-2 Н- пиразол- 3-ил)-3-{6-[4-(2- метилциклопропанкарбонил)пиперазин-1- ил]пиридин-3-ил)мочевина	516

Пример 61. 1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-{6-[4-(2,6-дифторбензоил)пиперазин1-ил]-5-метилпиридин-3 -ил}мочевина

1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3 -ил)-3-(5-метил-6-пиперазин-1-илпиридин-3-ил)мочевину (300 мг, 0,670 ммоль), гидрохлорид №(3-диметиламинопропил)-№-этилкарбодиимида (154 мг, 0,804 ммоль), 2,6-дифторбензойную кислоту (127 мг, 0,804 ммоль) и 4-^№диметиламинопиридин (15 мг, 0,134 ммоль) помещают в ацетонитрил (10 мл). Реакционную смесь нагревают до 60°С в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и добавляют СН2С12 и воду. Органический слой отделяют и водный слой экстрагируют СН₂С1₂ (2x20 мл). Органические слои объединяют, сушат над Мд₂8О₄, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя 10-70% Е1ОАс:гексан, получая указанное в заглавии соединение. МС (Е8+): ι/ζ=588,3 [М+Н].

- 33 015189

Пример	Название	МС (ЕЗ+): т/ζ [М+Н]
62	1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Япиразол-3-ил)-3-[6-(4циклопропанкарбонилпиперазин-1ил)-5-метилпиридин-3-ил]мочевина	516,3
63	1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2 Нпиразол-3-ил]-3-{5-метил-6-[4- (3-метилтиофен-2- карбонил)пиперазин-1-ил]пиридин- 3-ил]мочевина	572,3
64	1- (5-трет-Бутш1-2-пара-толил-2йпираэол-3-ил) -3- {5-хлор-б- [4(2,6-дифторбензоил) пиперазин-1ил]пиридин-3-ил}мочевина	608,0
65	1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Япиразол-3-ил)-3-[5-хлор-б-(4циклопропанкарбонилпиперазин-1- ил)пиридин-3-ил]мочевина	536,2
66	1-(5-трет-Бутил~2-пара-толил-2Япиразол-3-ил)-3-{5-хлор-б-[4-(3метилтиофен-2- карбонил}пиперазин-1-ил)пиридин- 3-ил}мочевина	592,0
67	1-{б-[4-(2,6-Дифтор- бензоил)пиперазин-1-ил]пиридин3-ил}-3-<2-пара-толил-5триметилсиланил-2Я-пиразол-3ил)мочевина	590, 2

Пример 68. Монометансульфонат 1-(5-трет-бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-{6-[4-(2,6дифторбензоил)пиперазин-1 -ил]-2-метилпиридин-3 -ил}мочевины

[4-(5-амино-6-метилпиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]-(2,6-дифторфенил)метанон (1,00 экв., 601,77 ммоль, 200,00 г), 2,2,2-трихлорэтиловый эфир 5-трет-бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)карбаминовой кислоты (1,00 экв., 602,88 ммоль, 244,00 г), Ν,Ν-диметиламинопиридин (60,47 ммоль, 7,50 г), диизопропилэтиламин (229,36 ммоль, 40,00 мл, 29,64 г), ДМСО (1,00 л) помещают в 5-л трехгорлую колбу с верхней мешалкой. Медленно нагревают и температуру поддерживают при 60-65°С. ДМСО (250 мл) добавляют и перемешивание продолжают при ~65°С в течение 1 ч. Добавляют МТВЕ, потом температуру поддерживают при ~60°С в течение 0,5 ч. Охлаждают до комнатной температуры. Твердые вещества собирают фильтрованием и объединяют. Осадок промывают МТВЕ и оставляют сушиться при пониженном давлении в течение ночи. Вещество растворяют в 9 л метанола, потом обрабатывают активированным углем (65 г) при кипячении с обратным холодильником в течение 1 ч. Смесь фильтруют через целит®. Фильтрат концентрируют, потом растворитель заменяют на этилацетат. Фильтруют, промывают этилацетатом, гептанами и сушат при 40°С при пониженном давлении, получая 1-(5-трет-бутил-2-пара-толил2Н-пиразол-3 -ил)-3-{6-[4-(2,6-дифторбензоил)пиперазин-1-ил]-2-метилпиридин-3-ил}мочевину (490 г).

1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3 -ил)-3-{6-[4-(2,6-дифторбензоил)пиперазин-1 -ил]-2метилпиридин-3-ил}мочевину (1,00 экв., 600,67 ммоль, 353,00 г) и метанол (3,50 л) помещают в 5-л колбу. Смесь нагревают до 50-60°С. По каплям добавляют метансульфоновую кислоту (1,00 экв., 603,49 ммоль, 39,56 мл, 58,00 г) в 250 мл этилацетата. Раствор перемешивают в течение 0,5 ч при ~50°С, потом

- 34 015189 источник нагревания удаляют. Перемешивают в течение 5 ч, потом фильтруют. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Добавляют этилацетат (300 мл) и концентрируют при пониженном давлении. Добавляют дополнительных 300 мл этилацетата и концентрируют при пониженном давлении. Добавляют 2 л диэтилового эфира, потом перемешивают в течение 15 мин. Выдерживают в течение ночи. Перемешивают в течение 3 ч, потом фильтруют. Промывают диэтиловым эфиром и гептаном, потом сушат при пониженном давлении при ~40°С, получая указанное в заглавии соединение (391,4 г).

Пример 69. 1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-[6-((транс)-4-циклопропанкарбонил2,5-диметилпиперазин-1 -ил)-5-метилпиридин-3-ил] мочевина

рац-[(транс)-4-(5-Амино-3-метилпиридин-2-ил)-2,5-диметилпиперазин-1-ил]циклопропилметанон (пример получения 9, 0,1 г, 0,35 ммоль) и 2,2,2-трихлорэтиловый эфир 5-трет-бутил-2-пара-толил-2Нпиразол-3-ил)карбаминовой кислоты (0,283 г, 0,7 ммоль) растворяют в ДМСО (3 мл) и ЭША (0,12 мл, 0,7 ммоль).

Нагревают в герметичной колбе при 80°С в течение 15 ч. Оставляют охлаждаться и выливают в ледяную воду. Несколько раз экстрагируют АсОЕ1. Органические вещества объединяют и промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над №₂8О₄, получая остаток. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя АсОЕ1 в гексане 50-90%, получая 0,09 г рац-1-(5-трет-бутил-2пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-[6-((транс)-4-циклопропанкарбонил-2,5-диметилпиперазин-1-ил)-5-метилпиридин-3-ил]мочевины (выход 47%) в виде твердого вещества. МС (Е8+): 111//=544,5 [М+Н].

Неочищенное вещество подвергают хиральной хроматографии, используя колонку СЫгараск А8, элюируя гексан-ЭМЕА 0,2%:Е1ОН 25%. 1=3,78 мин. МС (Е8+): ιη/ζ=544,5 [М+Н].

Пример 70. 1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-{6-[4-(2,2-диметилпропионил)пиперазин-1-ил]-4-метилпиридин-3-ил}мочевина

2,2,2-трихлорэтиловый эфир (5-трет-бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)карбаминовой кислоты (пример получения 38, 0,32 ммоль, 0,1 г) добавляют к раствору 1-[4-(5-амино-4-метилпиридин-2ил)пиперазин-1-ил]-2,2-диметилпропан-1-она (0,3 ммоль, 0,08 г) и карбоната калия (0,3 ммоль, 0,05 г) в ацетонитриле (3 мл) и раствор перемешивают в течение 4 ч при 80°С. Добавляют воду и экстрагируют СН2С12. Органические слои объединяют и промывают насыщенным водным хлоридом натрия. Сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая остаток. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя гексанами/этилацетатом с градиентом (от 20 до 80%). МС (Е8+): ι/ζ=532 [М+Н].

Следующие соединения получают, используя методику, по существу аналогичную методике, описанной выше.

МС (ЕЗ+) : т/г [М+Н]

диметилпропионил)пиперазин-1-ил]-5трифторметилпиридин-3-ил}мочевина

1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Ипиразол-3-ил)-3-{4-метил-6-[4-(1тилциклопропанкарбонил)пиперазинил]пиридин-3-ил}мочевина

1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Нпиразол-3-ил)-3-(4-хлор-б-[4-(2,2диметилпропионил)пиперазин-1ил]пиридин-3-ил)мочевина

1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2НПример 74. 1 -(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3 -ил)-3-{5-хлор-6-[4-(1 -метилциклопропанкарбонил)пиперазин-1 -ил] пиридин-3 -ил}мочевина

К раствору гидрохлорида 1-(5-трет-бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-(5-хлор-6-пиперазин-1илпиридин-3-ил)мочевины (1,6 ммоль, 0,7 г) в 5 мл СН₂С1₂ добавляют 1-метилциклопропанкарбоновую кислоту (1,6 ммоль, 0,2 г), 1-гидрокси-1Н-бензотриазол гидрат (1,8 ммоль, 0,2 г), гидрохлорид Ν-этил-Ы'(3-диметиламинопропил)карбодиимида (1,8 ммоль, 0,3 г) и триэтиламин (4,8 ммоль, 0,7 мл). Раствор перемешивают в течение 24 ч при комнатной температуре. Добавляют воду и экстрагируют СН2С12. Орга

- 35 015189 нические слои объединяют и промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении, получая остаток. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя гексанами/этилацетатом с градиентом (от 20 до 80%). МС (Е8+): ™/ζ=550 [М+Н].

Пример	Название	ЖХМС ЕЗ+ <ш/г) [М+Н]
75	1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2’Т пиразол-3-ил)-3-{5-метил-6-[4-(1метилциклопропанкарбонил)пиперазин1-ил]пиридин-3-ил)мочевина	530

Пример 76. 1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-{6-[4-(2,6-дифторбензоил)пиперидин-

11-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-[6-(пиперидин-4-иламино)пиридин-3ил]мочевину (0,22 ммоль, 0,1 г), 2,6-дифторбензоилхлорид (0,2 ммоль, 0,03 мл) и триэтиламин (0,2 ммоль, 0,03 мл) в 3 мл ацетонитрила перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Добавляют СН2С12 и промывают насыщенным водным хлоридом натрия и водой. Сушат над сульфатом натрия, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя СН₂С1₂:МеОН с градиентом (от 0,5 до 10%). МС (Е8+): ιη/ζ=588 [М+Н].

Пример 77. 1 -(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3 -ил)-3-{2-метил-6-[1-(1 -метилциклопропанкарбонил)пиперидин-4-илокси]пиридин-3-ил}мочевина

Реакционную смесь 4-{5-[3-(5-трет-бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)уреидо]-6-метилпиридин2-илокси} пиперидина (93 мг, 0,2 ммоль), 1-метил циклопропил-1-карбоновой кислоты (40 мг, 0,4 ммоль), НОВ! (30 мг, 0,25 ммоль) и ОСС (80 мг, 0,4 ммоль) в дихлорметане (2 мл) перемешивают при 22°С в течение 18 ч. Фильтруют, потом подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя гексанами и этилацетатом, получая белое твердое вещество (111 мг, выход 100%). МС (Е8+): т9=545,3[М+Н].

- 36 015189

Пример	Соединение	МС (ЕЗ+): т/ζ [М+Н]
78	1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Нпиразол-3-ил) -3--( 6- [1- (2фторбензоил)пиперидин-4-илокси]-2метилпиридин-3-ил (-мочевина	585,3
79	1- (5-фрет-Бутил-2-пара-толил-2Япиразол-3-ил)-3-(6-(1-(2, 6дифторбензоил)пиперидин-4-илокси]-2метилпиридин-3-ил}мочевина	603,3
80	1- (5-трет-Бутил ~2-.пара--толил-2Япиразол-3-ил)-3-(6-[1-(2,4дифторбензоил)пиперидин-4-илокси]-2- метиллиридин-3-ил(мочевина	603,3
81	1-[5-трет-Бутил-2-(6-метиллиридин-Зил)-2Я-пиразол-3-ил]-3-{2-метил-6-[4- (3-метилтиофен-2-карбонил)липеразин-1- ил]пиридин-3-ил}мочевина	573, 3
82	1-[5-трет-Бутил-2-(6-метилпиридин-З- ил)-2Н-пиразол-3-ил]-3-{6-[4-(2хлорбензоил)пиперазин-1-ил]-2метилпиридин-3-ил}мочевина	587,3
83	1-[5-трет-Бутил-2-(6-метилпиридин-Зил)-2Я-пиразол-3-ил]-3-(6-(4-(2фторбензоил)липеразин-1-ил]-2метиллиридин-3-ил)мочевина	571,2

84	1-{2-Метил-6-[4-(З-метилтиофен-2карбонил)пиперазин-1-ил]пиридин-3-ил)- 3-[2-(6-метилпиридин-З-ил)-5-(1трифторметилциклопропил)-2Я-пиразол-3ил]мочевина	625,3
85	1-(6-(4-(2-Хлорбензоил)пиперазин-1- ил]-2-ме тилпиридин-3-ил(-3-(2-(6метилпиридин-3-ил)-5-(1трифторметилциклопропил)-2 Я-пиразол-3ил]мочевина	639,3
86	1-(6-(4-(2-Фторбензоил)пиперазин-1- ил]-2-метилпиридин-З-ил(-3-(2-(6метилпиридин-3-ил)-5-(1трифторметилциклопропшт)-2Я~пиразол-3ил]мочевина	623,3
87	1- (6-[4-(2_г 6-Дифторбензоил)пилеразин- 1-ил]-2-метилпиридин-3-ил}-3-[2-(6метилпиридин-3-ил)-5-(1- трифторметилииклопропил)-2 Н- пиразол-3ил]мочевина	641,3
88	1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Япиразол-3-ил)-3-(6-(1-(2фторбензоил)пиперидин-4- илокси]пиридин-3-ил)мочевина	571,3
89	1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Япиразол-3-ил)-3-{6-[1-(2,6дифторбензоил)пиперидин-4илокси]пиридин-3-ил)мочевина	589,3
90	1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Япиразол-3-ил)-3-(6-(1-(2,4дифторбензоил)пилеридин-4илокси]пиридин-3-ил)мочевина	589, 3

- 37 015189

91	1- (5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Бпиразол-3-ил)-3-(6-(1-(3-метилтиофен- 2- карбонил)пиперидин-4-илокси]пиридин- 3- ил}мочевина	573, 3
92	1- (5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Нпиразол-3-ил)-3-(6-(1-(5-хлортиофен-2карбонил)пиперидин-4-илокси]пиридин-3ил]мочевина	593,0
93	1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Нпиразол-3-ил)-3-(6-(1- циклопропанкарбонилпиперидин-4илокси)-5-метилпиридин-З-ил]мочевина	531, 2
94	1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Япиразол-3-ил)-3-(6-[1-(2,4дифторбензоил)пиперидин-4-илокси]-5метилпиридин-3-ил(мочевина	603, 3
95	1-(5-трет-Бутил-2-лара-толил-2#пиразол-3-ил)-3-(5-метил-6-[1-(3метилтиофен-2-карбонил)пилеридин-4илокси]пиридин-3-ил}мочевина	587,3
96	1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Япиразол-3-ил)-3-{б-[1-(5-хлортиофен-2карбонил)пиперидин-4-илокси]-5метилпиридин-3-ил}мочевина	607,0
97	1- (5-трет-Бутил-2-пара-толш1-2£Лпиразол-3-ил)-3-(6-(1-(2,5дихлортиофен-3-карбонил)пиперидин-4илокси]-5-метилпиридин-З-ил(мочевина	641, 0
98	1-(5-трет-Бутил-2-пара-толил-2Нпиразол-3-ил)-3-(6-(4-(2,4дифторбензоил)пиперазин-1-ил]пиридин- 3-ил)мочевина	574,0

Пример 99. Мезилат 1-(5-трет-бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-{5-хлор-6-[1-(2-фторбензоил)пиперидин-4-илокси]пиридин-3-ил}мочевины

Свободное основание получают, используя методику, по существу аналогичную методике, описанной выше. Превращают в соль мезилат с помощью обработки раствора или суспензии свободного амина в дихлорметане (1 мл) и МеОН (5 мл) метансульфоновой кислотой (1 экв., 17,66 мг, 0,183 мл). Полученную смесь встряхивают, концентрируют и сушат при пониженном давлении, получая соль. МС (Е8+): ιη/ζ=605.0 [М+Н] (в виде свободного основания).

Следующие мезилаты получают, используя методику, по существу, аналогичную методике, описанной выше.

Пример	Название	МС (ЕЗ+>: ш/г {М+Н]
100	Мезилат 1-(5-трет-бутил-2-паратолил-2Я-пиразол-3-ил)-3-{5хлор-6-[1-(З-метилтиофен-2карбонил)пиперидин-4- илокси]пиридин-3-ил(мочевины	607,0
101	Мезилат 1-(5-трет-бутил-2-паратолил-2Н-пираэол-3-ил)-3-[5хлор-6-(1— циклопропанкарбонилпиперидин-4илокси)пиридин-3-ил]мочевины	551,2
102	Мезилат 1-(6-(4-(2,6- дифторбензоил)пиперазин-1-ил]-2метилпиридин-3-ил}-3-(5пентафторэтил-2-пара-толил-2Нпиразол-3-ил)мочевины	650,0

- 38 015189

103	Мезилат 1-{6-[4-(2- фторбензоил)пиперазин-1-ил]-2метиллиридин-3-ил}-3-[2-паратолил-5-(1 — трифторметилциклопропил)-2Нпиразол-3-ил]мочевины	622,2
104	Мезилат 1-{6-[4-(2,6- дифторбензоил) пилеразин-1-ил] -2метилпиридин-3-ил}-3-[2-паратолил-5-{1 — трифторметилциклопропил)-2Нпира зол-3-ил]мочевины	640, 0
105	Мезилат 1-{6-[1-{2- фторбензоил)пиперидин-4-илокси] 5-метилпиридин-3-ил}-3-[2-паратолил- 5- (2,2 _г2-трифтор-1-метил1-трифторметилэтил)-2Я-пиразол- 3-ил]мочевины	693,0
106	Мезилат 1-[5-трет-бутил-2-(6метилпиридим'-З-ил) -2Л-пиразол3“ ил]-3-{6-[4-(2,6дифторбензоил)пиперазин-1-ил]-2метилпиридин-3-ил}мочевины	589, 3
107	Мезилат 1-(5-трет-бутил~2-пара· толил-2Н-лиразол-3-ил)-3-{6-[1(2-фторбензоил)пиперидин-4- илокси]-2-метилпиридин-З- ил]мочевины	585, 3
108	Мезилат 1-(5-трет-бутил-2-паратолил-2Я-пиразол-3-ил)-3-{6-[1{2,б-дифторбензоид)пиперидин-4илокси]-2-метилпиридин-Зил}мочевины	603,3

- 39 015189

109	Мезилат 1-(5-трет-бутил-2-паратолил-2Я-пиразол-3-ил) -3-{ 6- [1(2,4-дифторбензоил)липеридин-4илокси]-2-метиллиридин-Зил}мочевины	603,3'
110	Мезилат 1-[5-трет-бутил-2-(6метилпиридин-3-ил)-2Я-пиразол-3ил]-3-(2-метил-6-[4-(3- метилтиофен-2- карбонил)пиперазин-1-ил]- пиридин-3-ил}мочевины	573, 3
111	Мезилат 1-[5-трет-бутил-2-(6метилпиридин-3-ил)-2Я-пираэол-3ил]-3-(6-[4-(2- хлорбензоил)пиперазин-1-ил]-2метиллиридин-3-ил]мочевины	587,3
112	Мезилат 1-[5-трет-бутил-2-(6метилпиридин-3-ил)-2Я-пиразол-3ил]-3-(6-[4-(2- фторбензоил)пиперазин-1-ил]-2ме тиллиридин-3-ил}мочевины	571,2
113	Мезилат 1-(2-метил-6-[4-(3метилтиофен-2- карбонил)пиперазин-1-ил]пиридин- 3-ил}-3-[2-(6-метиллиридин-З- ил)-5-(1трифторметилциклопропил)-2Нлиразол-3-ил]мочевины	625, 3
114	Мезилат 1-(6-[4-(2хлорбензоил)пиперазин-1-ил]-2метилпиридин-3-ил]-3-[2-(6метилпиридин-3-ил}-5- (1трифторметилциклопропил)-2Нпиразол-3-ил]мочевины	639, 3
115	Мезилат 1-{6-(4-(2фторбензоил)липеразин-1-ил]-2метиллиридин-3-ил}-3-[2-(6метилпиридин-3-ил)-5-(1трифторметилциклолропил)-2Нгхиразол- 3-ил] мочевины	623,3
116	Мезилат 1-{6-[4-(2,6дифторбензоил)пиперазин-1-ил}-2метилпиридин-3-ил}-3-[2-(6метилпиридин-3-ил)-5-(1трифторметилциклопропил)-2Нпиразол-3-ил]мочевины	641, 3

Пример 117. 1-{6-[1-(2-Фторбензоил)пиперидин-4-илокси]-5-метилпиридин-3-ил}-3-[2-пара-толил5-(2,2,2-трифтор-1 -метил-1 -трифторметилэтил)-2Н-пиразол-3 -ил]мочевина р Г

Газообразный азот барботируют через раствор 2,2,2-трихлорэтилового эфира [2-пара-толил-5(2,2,2-трифтор-1-метил-1-трифторметилэтил)-2Н-пиразол-3-ил]карбаминовой кислоты (пример получе- 40 015189 ния 37, 95 мг, 0,185 ммоль) и [4-(5-амино-3-метилпиридин-2-илокси)пиперидин-1-ил]-(2фторфенил)метанона (пример получения 19, 61 мг, 0,185 ммоль) в ЭМСО (3 мл) в течение 5 мин. Потом добавляют Ν,Ν-диизопропилэтиламин (0,08 мл, 0,463 ммоль). Перемешивают при 70°С в течение ночи, потом выливают в СН₂С1₂ (75 мл) и промывают через колонку 10 г 8СХ МедаВоиб Е1и!е. Колонку промывают СН₂С1₂ (3x35 мл), МеОН (2x50 мл) и 2М ΝΉ₃ в МеОН (3x50 мл). Нужные фракции объединяют и концентрируют. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя СН2С12 и раствором 10% МеОН 90% СН2С12, получая указанное в заглавии соединение в виде белого твердого вещества (69 мг, выход 54%). МС (Е8+): ™/ζ=693,5 [М+Н].

Пример 118. 1-{6-[4-(2,6-Дифторбензоил)пиперазин-1-ил]-2-метилпиридин-3-ил}-3-[5-(2-фтор-1фторметил-1-метилэтил)-2-пара-толил-2Н-пиразол-3 -ил] мочевина

Г идрохлорид 1 -[5-(2-фтор-1 -фторметил-1 -метилэтил)-2-пара-толил-2Н-пиразол-3 -ил]-3 -(2-метил-6пиперазин-1-илпиридин-3-ил)мочевины (0,85 ммоль, 0,5 г), 2,6-дифторбензоилхлорид (0,85 ммоль, 0,1 мл) и триэтиламин (2,6 ммоль, 0,4 мл) в 5 мл СН₂С1₂ перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Добавляют воду и экстрагируют в СН2С12. Органический слой промывают насыщенным водным раствором хлорида натрия. Сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют при пониженном давлении. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя гексанами/этилацетатом (20-70%). МС (Е8): ™/ζ=624 [М+Н].

Пример	Соединение	МС (Е5+) : ιπ/ζ [М+Н]
119	1- [5- (2-Фюр-1-фторметил-1метилэтил)-2-пара-тслил^2Япиразол-3-ил] -З-^З-метил-б- [4(2-метилбензоил)пиперазин-1- ил]пиридин-3-ил}мочевина	602
120	1-{б-[4-(2,6- Дифторбензоил)пиперазин-1-ил]-2метилпиридин-3-ил}-3-[5-(2-фтор1,1-диметилэтил)-2-пара-толил- 2 Я-пиразол-3-ил]мочевина	606

Пример 121. Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-{6-[4-(2-циклопентилацетил)пиперазин-1 -ил]пиридин-3-ил}мочевины

0,10 мл 1Н раствора метансульфоновой кислоты в СН₂С1₂/МеОН (95/5) добавляют к перемешиваемому раствору 1-(5-трет-бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-{6-[4-(2-циклопентилацетил)пиперазин1-ил]пиридин-3-ил}мочевины в 2 мл СН₂С1₂/МеОН (95/5). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 20 мин и потом растворители выпаривают, продувая Ν₂. Соль растирают в порошок с Е!₂О, фильтруют и сушат, получая указанное в заглавии соединение. МС (Е8+): ιη/ζ=544 [М+Н].

- 41 015189

Пример	Соединение	МС т/ζ	(ЕЗ+) : [М+Н]
122	Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2пара-толил-2й-пиразол-3-ил)-3-[6-(4циклобутанкарбонилпиперазин-1- ил)пиридин-3-ил]мочевины	516
123	Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2пара-толил“2Я-пиразол-3“Ил)-3-{6-[4{3-метилпентаноил)пиперазин-1- ил]пиридин-3-ил}мочевины	532
124	Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2- пара-толил-2Я-пиразол-3-ил)-3-{6-[4ΐΐметилциклогексанкарбонил)пиперазин- 1-ил]пиридин-3-ил}мо че вины	558
125	Мезилат 1-(5-трет-бутил-2-паратолил-2Я-пиразол-3-ил)-3-(6-(4-(2,2диметилпентаноил)пиперазин-1- ил]пиридин-3-ил}мочевины	546
126	Мезилат 1-(5-трет-бутил-2-пара- толил-2 Н— пиразол-3-ил)-3-(6-(4-(2,2диметилпролионил)пилеразин-1-ил]-5трифторметилпиридин-3-ил}мочевины	586
127	Мезилат 1-(5-трет-бутил-2-паратолил-2Я-пиразол-3-ил)-3-(6-(4-(2, 2диметилпропионил)липеразин-1-ил]-4метилпиридин-3-ил}мочевины	532
128	Мезилат 1-(5-трет-бутил-2-лара- толил-2Я-пиразол-3-ил)-3-(4-метил-6[4-(1- метилциклопропанкарбонил)пиперазин- 1-ил]пиридин-3-ил}мочевины	530
129	Соль мезилат 1-(5-трет-бутил-2-паратолил-2Я-пиразол-3-ил)-3-{4-хлор-6[4-(2 _г2-диметиппропионил)пилеразин1-ил]пиридин-3-ил}мочевины	552
130	Мезилат 1-(5-трет-бутил~2-паратолил-2Я-пиразол-3-ил)-3-(5-хлор-6[4- (1метилциклопропанкарбонил)пиперазин1-ил]пиридин-3-ил}моче вины	550
131	Мезилат 1-(5-трет-бутил-2-паратолил-2Я-пиразол-3-ил)-3-{5-метил-6[4-(1- метилциклопропанкарбонил)пипера зин- 1-ил]пиридин-3-ил}мочевины	530

- 42 015189

132	Мезилат 1-{5-трет~бутил-2-пара- толил-2Л-пиразол-3-ил)-3-{5-метил-6[4-(1- метилциклопропанкарбонил}пиперазин- 1-ил]пиридин-3-ил}мочевины	624
133	1-{б-[4-(2,6- Дифторбензоил)пиперазин-1-ил]-2метилпиридин-3-ил}-3-[5 - (2-фтор-1_г 1диметилэтил)-2-пара-толил-2йпиразол-3-ил]мочевина	606

Пример 134. Метансульфонат 1-(5-трет-бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-{2-[1-(2,6дифторбензоил)пиперидин-4-илокси]пиридин-4-ил}мочевины

Раствор 1-(5-трет-бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил)-3-[2-(пиперидин-4-илокси)пиридин-4ил]мочевины (пример получения 71; 179 мг, 400 ммоль), 2,6-дифторбензойной кислоты (76 мг, 0,48 ммоль) и каталитического ОМАР (5 мг) в дихлорметане (4 мл) обрабатывают ЕЭС! (92 мг, 0,48 ммоль). Полученную смесь перемешивают в течение ночи при температуре окружающей среды, потом промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Органический слой сушат над сульфатом натрия и концентрируют под потоком азота. Остаток растирают в порошок с несколькими миллилитрами ЭСМ. После обработки ультразвуком белое твердое вещество фильтруют и сушат при пониженном давлении, получая 162 мг указанного в заглавии соединения в форме свободного основания (выход 69%).

Суспензию свободного амина в 3:2 ЭСМ:МеОН (5 мл) обрабатывают 2М метансульфоновой кислотой в дихлорметане (1 экв.; 0,138 мл). Полученную смесь перемешивают, пока раствор не станет прозрачным, потом концентрируют под потоком азота и сушат при пониженном давлении, получая указанную в заглавии соль. (ЖХМС Е8+ (т/ζ) 589 [М+Н]).

Пример	Соединение	МС ш/ζ	(ЕЗ+) : [М+Н]
135	Метансульфонат 1-(2-(1-(2,6дифторбензоил)пиперидин-4илокси]пиридин-4-ил}-3-[5-(1метилциклопропил)-2-пара-толил2Н-пиразол-3-ил]мочевины	587

Пример 136. 1-{2-[1-(2,6-Дифторбензоил)пиперидин-4-илокси]пиридин-4-ил}-3-[5-(2-фтор-1-фторметил-1-метилэтил)-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил]мочевина

Раствор [4-(4-аминопиридин-2-илокси)пиперидин-1-ил]-(2,6-дифторфенил)метанона (265 мг, 0,80 ммоль), 2,2,2-трихлорэтилового эфира 5-(1-фторметилциклопропил)-2-пара-толил-2Н-пиразол-3ил]карбаминовой кислоты (350 мг, 0,80 ммоль) и диизопропилэтиламина (700 мл) в 4 мл ДМСО нагревают при 60°С в течение 16 ч. Полученную смесь охлаждают до температуры окружающей среды и добавляют воду. Осадок фильтруют, промывают водой, потом пентаном и сушат в вакуумной печи при 60°С. Остаток подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя градиентом 2М аммиак-метанол в дихлорметане (от 0 до 2%), получая 85 мг продукта.

- 43 015189

Пример	Соединение	МС	(Е5+):
		ш/ζ	[М+Н]

137	1-{2-[1-(2,6- Дифторбензоил)пиперидин-4илокси]пиридин-4-шт]-3-[5-(2-фтор1,1-диыетилэтил)-2-пара-толил-2//пиразол-3-ил]мочевина	607
138	1-{2-[1-(2,6- Дифторбензоил)пиперидин-4илокси]пиридин-4-ил}-3-[5-(1фторметилциклопропил)-2-пара-толил2Н-пиразол-3-ил]мочевина	605

Пример 139. Мезилат 1-{2-[1-(2,6-дифторбензоил)пиперидин-4-илокси]пиридин-4-ил}-3-[5-(2-фтор1-фторметил-1-метилэтил)-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил]мочевины

0,114 мл (0,114 ммоль) свежеприготовленного 1М раствора Ме8О₃Н в ЭСМ/МеОН (95:5) добавляют к раствору 71 мг (0,114 ммоль) 1-{2-[1-(2,6-дифторбензоил)пиперидин-4-илокси]пиридин-4-ил}-3-[5(2-фтор-1-фторметил-1-метилэтил)-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил]мочевины в 2 мл смеси 95:5 ЭСМ/МеОН. Смесь перемешивают в течение 20 мин при комнатной температуре, потом растворители выпаривают под потоком Ν₂. Остаток растирают в порошок с Е[₂О, получая указанное в заглавии соединение (76 мг, выход 93%) (чистота 100%). Ε8+(ιη/ζ)=625 [М+Н].

Пример	Соединение	МС (Е5+): ίη/ζ [М+Н]
140	Мезилат 1-(2-[1-<2,6- лифторбенэоил)пиперидин-4илокси]пиридин-4-ил}-3-[5-(2фтор-1,1-диметилэтил)-2-паратолил-2Н-пиразол-3-ил]мочевины	607

Пример 141. Метансульфонат 1-{6-[4-(2,6-дифторбензоил)пиперазин-1-ил]-5-метилпиридин-3-ил}3-[5-(2-фтор-1,1 -диметилэтил)-2-пара-толил-2Н-пиразол-3 -ил]мочевины

ΌΙΕΆ (2 экв.) добавляют к раствору [4-(5-амино-3-метилпиридин-2-ил)пиперазин-1-ил]-(2,6дифторфенил)метанона (400 мг, 1,205 ммоль) и 2,2,2-трихлорэтилового эфира [5-(2-фтор-1,1диметилэтил)-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил]карбаминовой кислоты (1 экв.) в ацетонитриле (12 мл). Смесь перемешивают при 80°С в герметичной колбе. Через 4 дня растворитель удаляют. Неочищенный остаток разбавляют ЭСМ, экстрагируют водой и сушат над №ь8О₄. Фильтруют и растворитель удаляют при пониженном давлении. Твердое вещество подвергают хроматографии на силикагеле, элюируя гексаном/ацетоном 3:1, получая 352 мг 1-{6-[4-(2,6-дифторбензоил)пиперазин-1-ил]-5-метилпиридин-3-ил}-3[5-(2-фтор-1,1-диметилэтил)-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил]мочевины в виде белого твердого вещества (выход 48%). Ε8·(ιιι/ζ): 606 [М+1].

мг (0,083 ммоль) свободного основания 1-{6-[4-(2,6-дифторбензоил)пиперазин-1-ил]-5метилпиридин-З-ил}-3-[5-(2-фтор-1,1-диметилэтил)-2-пара-толил-2Н-пиразол-3-ил]мочевины растворяют в ЭСМ (0,5 мл). Добавляют 1 экв. трифторметансульфоновой кислоты в ЭСМ (1Н). Через 30 мин растворитель удаляют, получая белое твердое вещество. После нескольких промываний эфиром/ОСМ твердое вещество сушат при пониженном давлении, получая 55 мг указанного в заглавии соединения (выход 95%). Ε8·(ιιι/ζ): 606 [М+1].

- 44 015189

Ингибирование р38 киназы Приготовление стандартных растворов

Буферный раствор киназы получают с помощью смешивания 2,5 мл 1М ТП5-НС1 (рН 7,5), 0,1 мл 1М дитиотреитола, 1,0 мл 1М хлорида магния и 300 мкл 1% Тритона Х-100 и разбавления до 100 мл водой. 84 мл этого буферного раствора киназы смешивают с 16 мл ДМСО, получая 16% раствор ДМСО.

200 мкМ раствор АТФ получают с помощью добавления 102,6 мкл 10 мМ водного АТФ, 25 мкл ³³РАТФ и 163,5 мкл 4 мМ водного раствора пептида 661-681 эпидермального фактора роста (Вюто1, № кат. Р-121) в 5 мл буферного раствора киназы.

Раствор фермента р38 киназы получают с помощью растворения 9,5 мкл концентрированного раствора фермента (250 нг р38 фермента/мкл буферного раствора киназы) в 1536 мкл буферного раствора киназы.

Подготовка проб мкМ раствор каждого тестируемого соединения и контрольного соединения получают с помощью растворения 2 мкл 10мМ исходного раствора соответствующих соединений в диметилсульфоксиде в 248 мкл 16% раствора ДМСО в 96-луночном микротитровальном планшете СоЧаг. Планшет помещают на автоматизированный манипулятор для жидкостей Тесап Сепеык для последовательных разведений 1:3.

Исследование мкл последовательно разведенного соединения помещают в 96-луночный исследовательский планшет автоматизированного манипулятора для жидкостей Весктаи МиШтек. Добавляют 20 мкл 200 мкМ раствора АТФ с помощью 8-канального манипулятора для жидкости Т11ег1ек МиШбгор. 10 мкл раствора фермента р38 киназы помещают в исследовательский планшет, используя МиШтек. Смесь оставляют для взаимодействия на 40 мин при 30°С и потом реакцию останавливают путем добавления 60 мкл свежеприготовленного 5% раствора ледяной АсОН с помощью МиШбгор. 80 мкл этого раствора переносят в планшет МАРН, используя МиШтек. Планшеты выдерживают в течение 30 мин при комнатной температуре, после чего промывают/отсасывают на экстракторе Тйейек МАР свежеприготовленным 0,5% раствором ледяной АсОН (1x300 мкл, 2x200 мкл). Планшеты промокают фильтровальной бумагой и добавляют 100 мкл сцинтилляционной жидкости Мюго8ст1-20 (Раскагб Вюктеисе) с помощью Ми1йбгор. Планшеты выдерживают в течение 30 мин и радиоактивность подсчитывают на сцинтилляционном счетчике РЕЛ¥а11ас МюгоЬеШ ТпШ.х для изотопа ³³Р.

Соединение, описанное в примере 5, изначально исследовали при 10 концентрациях (20 мкМ-1 нМ, используя последовательные разведения 1:3) . Соединения со значениями 1С₅₀ меньше 25 нМ повторно исследовали при начальной концентрации от 2 мкМ до 0,1 нМ (последовательные разведения 1:3). Значения 1С₅₀ рассчитывали (программное обеспечение ШВ8 АсЙУЙуВаке) для каждого соединения, используя нелинейную регрессию. Соединение, описанное в примере 5, исследовали, по существу, как описано выше, и было найдено, что оно ингибирует фермент р38 киназы при 1С₅₀ 22 нМ.

Ингибирование р-МАРКАРК2 ΐη νϊίΐΌ

Клетки К А XV 264.7 (линия моноцитов/макрофагов АТСС мышей) сеют с плотностью 50000 клеток/лунка в 96-луночные планшеты со средой КРМ1-1640, дополненной 10% эмбриональной бычьей сывороткой (РВ8), и оставляют осаждаться и прилипать ко дну лунки на 48 ч. После достижения слияния клетки обрабатывают в течение 2 ч 10 последовательными разведениями разных соединений. Всегда включают контрольное соединение. Через 2 ч добавляют анизомицин (100 мкг/мл) и клетки инкубируют в течение 30 мин при 37°С в атмосфере 5% СО₂. Потом клетки фиксируют и обрабатывают пероксидом водорода, чтобы удалить эндогенную пероксидазу. В заключение, планшеты блокируют РВ8, промывают и проводят исследование ЕЫ8А, используя антифосфо-МАРКАРК2 антитело (ТШ 334, Се11 81дпа1йпд, № кат. 3041) и айР-конъюгированное вторичное антитело. Эту реакцию определяют, используя РЕМТО (Р1егсе), который представляет собой усиленный хемолюминесцентный субстрат айР, который вызывает быструю кинетическую светоотдачу и высокую сигнальную интенсивность.

Соединения, описанные в примерах, исследовали, по существу, как описано выше, и было найдено, что они имеют значения 1С₅₀, которые меньше чем или равняются 300 нМ.

Соединения, полученные в примерах 111, 113, 114, 115, 119, исследовали в присутствии 100% сыворотки, по существу, как описано выше, и было найдено, что они имеют значения 1С₅₀, которые меньше чем или равняются 500 нМ. Следующие соединения были исследованы, по существу, как описано выше, и было найдено, что они имеют такую активность:

Пример	1С₅₀ (нМ)
45	6,7
5	4,5
92	16
77	176
128	286

- 45 015189

Ингибирование ΤΝΕα ΐη νϊίΐ'ο Мышиные брюшинные макрофаги мл тиогликолевого бульона (5,0 г экстракта дрожжей, 15,0 г казитона или триптиказы, 5,0 г декстрозы, 2,5 г хлорида натрия, 0,75 г Ь-цистина, 0,5 тиогликолята натрия, 1,0 мг резазурина и 0,75 г агара в 1,0 л дистиллированной воды) впрыскивают в брюшинную впадину самок мышей Ва1Ь/С. На 4 или 5 день после инъекции мышей умертвляют и затем впрыскивают внутрибрюшинно 4 мл среды ΚРМI-1640 (Вю^Ыйакег), и брюшинные макрофаги отбирают с помощью шприца.

Продуцирование цитокинов

Мышиные брюшинные макрофаги подсчитывают с помощью гемоцитометра и их концентрацию доводят до 5х10⁵ клеток/лунка в 96-луночных планшетах в среде ΚРМI-1640 с помощью 10% эмбриональной бычьей сыворотки. 200 мкл/лунка высеивают в 96-луночные планшеты и клетки оставляют осаждаться и прилипать ко дну лунки как минимум на 3 часа. Исследуемое соединение или стандартный ингибитор р38 киназы предварительно обрабатывают, используя серии 8 концентраций, в течение 1 ч при 37°С (20 мкл/лунка). Клетки обрабатывают смесью 50 нг/мл липополисахарида (ЬР8) и 10 Ед/мл интерферона-γ в течение 18 ч при 37°С (20 мкл/лунка). Кондиционированную среду собирают и исследуют на продуцирование ΤΝΕα, используя методику выявления Ьиттех.

Исследование ΤΝΕα с использованием Ьиттех (набор Βΐο-Кай Βΐθ-ΡΙβχ - № кат. 171-С12221)

Лиофилизированный предварительно смешанный стандарт ΤΝΕα (1 стандартная ампула/два 96луночные планшета) восстанавливают в 50 мкл стерильной воды (500000 пг/мл). Образцы взбалтывают в течение 5 с, инкубируют на льду в течение 30 мин и взбалтывают в течение 5 с перед использованием. Набор с двенадцатью пробирками объемом 1,5 мл нумеруют от № 1 до № 12 и потом в соответствующие пробирки добавляют указанные ниже клеточные среды (стандартные концентрации являются такими, как указано ниже: 50000; 25000; 12500; 6250; 3125; 1562,5; 781,3; 390,6; 195,3; 97,7; 48,8 и 24,4 пг/мл). Предварительно смешанные гранулы, связанные с антицитокином, энергично взбалтывают (25Х) в течение 30 с. Гранулы, связанные с антицитокином, разбавляют до 1Х концентрации, используя 1Х буфер исследования Вю-Р1ех. Для каждого планшета 240 мкл предварительно смешанных гранул добавляют к 5760 мкл буфера исследования Вю-Р1ех. 96-луночный фильтровальный планшет М^11^рο^е блокируют добавлением 100 мкл/лунка блокирующего буфера. Блокирующий буфер фильтруют через лунки, используя систему фильтрования М^11^рο^е, и потом вытирают тканью насухо. Проводят два промывания на фильтровальном планшете, используя 100 мкл/лунка буфера исследования Вю-Р1ех, и вытирают тканью насухо. 1Х гранул, связанных с анти-цитокином, взбалтывают в течение 15 с и добавляют в каждую лунку по 50 мкл. Фильтруют и вытирают тканью насухо. Проводят два промывания на планшетах, используя 100 мкл/лунка буфера промывания Вю-Р1ех. Снова фильтруют и вытирают тканью насухо. 50 мкл образца или стандарта добавляют в каждую лунку. Пробы инкубируют в течение 60 с при комнатной температуре на встряхивающем аппарате, защищенном от света, при положении регулятора 6 и потом в течение 30 мин при положении регулятора 3, и потом помещают на ночь в холодильник. Проводят 3 промывания буфером промывания Вю-Р1ех. Фильтруют и вытирают тканью насухо. Приготавливают антитело для выявления цитокина (за ~10 мин до использования) для каждого планшета и 60 мкл предварительно смешанного исходного раствора антитела для выявления цитокина добавляют к 5940 мкл разбавителя для выявления антитела Вю-Р1ех.

Добавляют 50 мкл антитела для выявления цитокина и инкубируют в течение 60 с при комнатной температуре на встряхивающем аппарате, защищенном от света, при положении регулятора 6 и потом в течение 30 мин при положении регулятора 3. Проводят 3 промывания буфером промывания Вю-Р1ех. Фильтруют и вытирают тканью насухо. Приготавливают стрептавидин-РЕ (за ~10 мин до использования) для каждого планшета и добавляют 60 мкл к 5940 мкл буфера исследования Вю-Р1ех. В каждую лунку добавляют 50 мкл стрептавидина-РЕ и инкубируют в течение 60 с при комнатной температуре на встряхивающем аппарате, защищенном от света, при положении регулятора 6 и потом в течение 10 мин при положении регулятора 3. Проводят 3 промывания буфером промывания Вю-Р1ех. Фильтруют. Гранулы повторно суспендируют в 100 мкл/лунка буфера исследования Вю-Р1ех. Стандарты и пробы считывают на устройстве Ьиттех. Считанные значения интенсивности потом переводят в единицы пикограмм/миллилитр, используя 12-точечную стандартную кривую, полученную по данным двух параллельных исследований с применением способа четырех-параметровой логистической регрессии (Вю-Р1ех Мападег 2.0, Вю-Вай), и рассчитывают значения Κ.’₅₀.

Соединение, описанное в примере 5, исследовали, по существу, как описано выше, и выявили подавление ΤΝΕα ίη νίΐΓο при Κ.’₅₀ 18 нМ.

Ингибирование ΤΝΕα ΐη νίνο

Соединения вводят перорально (30, 10, 3 и 1 мг/кг) самкам мышей Ва1Ь/с (6 мышей/доза). Через 1 ч после введения соединения в 4 дозах (перорально в объеме 0,1 мл/мышь; основа: 1% №СМС/0,25% Τ^ееη-80 в воде) мышам делают внутрибрюшинную инъекцию ЬР8 с дозой 400 мкг/кг. Через 1,5 ч после стимулирования ЬР8 мышей анестезируют изофлураном и обескровливают с помощью сердечной пункции. ΤΝΕα-уровни в плазме определяют, используя набор ЕЫ8А от систем Β&Ό, и определяют зависи

- 46 015189 мое от дозы ЕЭ₅₀.

Соединение, описанное в примере 5, исследовали, по существу, как описано выше, и выявили подавление ΤΝΕα ίη νίνο при ТМЕЭ50 2,24 мг/кг. Действующая минимальная доза (ТМЕЭ) 50 представляет собой дозу, при которой достигается ингибирование, большее, чем или равное 50%, и которое является статистически отличимым от контроля/плацебо.

Влияние перорального введения

Соединения исследуют для определения влияния перорального введения на самцах крыс ЕХсНсг 344. Животные голодают в течение ночи и им вводят исследуемые соединения в виде суспензий в карбоксиметилцеллюлозе натрия (1% мас./об), которая содержит Тетееп 80 (0,25% об/об) и антивспениватель (0,1% мас./об). Дозы суспензий получают с концентрацией 1 мг/мл и вводят в дозе 1 мл/кг с помощью кормления через желудочный зонд. Образцы крови берут в промежутке от 0,5 до 7 ч после введения дозы и плазму получают с помощью центрифугирования. Образцы плазмы анализируют, используя онлайновую твердофазную экстракцию и ЖХ/МС/МС.

Соединение, описанное в примере 5, исследуют, по существу, как описано выше, и С_тах составляет 9390 нг/мл с АИС (0-7 ч) 36800 нг-ч/мл.

Влияние на ΤΝΕα, вызванное внутрисуставным введением ЬР8

Внутрисуставная инъекция ЬР8 в голеностопные суставы крыс вызывает синтез ΤΝΕα, который может быть количественно определен в синовиальной промывной жидкости. Высокие уровни ΤΝΕα могут быть обнаружены в пределах 2 ч. Так как сустав является местом развития артрита, эта модель дает возможность быстро определить присутствие или отсутствие влияния введенного перорально соединения на воспалительную реакцию в синовиальной оболочке.

Каждая исследуемая группа состояла из шести самок крыс ЬеЮк (150-200 г). Животным перорально вводили основу (1% натрийкарбоксиметилцеллюлозы-0,25% Тетееп 80) или исследуемое соединение (1 мг/кг, 3 мг/кг, 10 мг/кг и 30 мг/кг). Через один час 10 мкл ЬР8 (10 мкг) вводили внутрисуставно в правый голеностопный сустав каждой крысы, в то время как в левый голеностопный сустав вводили 10 мкл солевого раствора. Через два часа каждый голеностопный сустав промывали 100 мкл солевого раствора. Промывание собирали и сохраняли при -80°С.

Группа № 1: Основа (1% №СМС-0,25% Т\гееп 80, 1 мл, ПО)

Группа № 2: Исследуемое соединение (1 мг/кг, 1 мл, ПО)

Группа № 3: Исследуемое соединение (3 мг/кг, 1 мл, ПО)

Группа № 4: Исследуемое соединение (10 мг/кг, 1 мл, ПО) Группа № 5: Исследуемое соединение (30 мг/кг, 1 мл, ПО)

ТИЕа количественно определяли с помощью коммерчески доступного набора ЕЫ8А (Κ&Ό, КТА00). Введение соединения, описанного в примере 5, вызывает зависимое от дозы ингибирование синтеза ΊΝΕα, как количественно определено в синовиальной промывной жидкости при ТМЕИ50=3,57 мг/кг.

Исследование фосфо-МАРКАРК2 ингибирования ех-νίνο у мышей, стимулированного анизомицином с помощью проточной цитометрии

Самки мышей Ва1Ь/с в возрасте 8-10 недель были куплены у Тасошс 1пс. и им перорально вводили дозу с объемом 0,2 мл соединений с концентрациями 30, 10, 3, 1 мг/кг. Через 2 ч или через другие указанные периоды времени мышей обескровливали с помощью сердечной пункции и кровь собирали в пробирки, содержащие ЕЭТА. 100 мкл крови инкубировали при 37°С в течение 10 мин. Цельную кровь потом смешивали с Е1ТС-связанным крысиным тАЬ против Ьу-6С мыши (1:250) и АРС-связанным крысиным тАЬ против СИ11Ь мыши (1:100) и стимулировали 10 мкг/мл анизомицина. Окрашивание клеточной поверхности антигена и стимулирование анизомицином проводили при 37°С в течение 15 мин и добавляли буфер Ьу8е/Е1х (ВИ Вюкшепсек, № кат. 558049) в течение 10 мин при комнатной температуре. Лизированные образцы крови центрифугировали при 600хд в течение 8 мин при комнатной температуре с дополнительным одноразовым промыванием 4 мл РВ8. 200 мкл разведенного анти-фосфо-МАРКАРК-2 (Тйг334) антитела (разведение 1:100) (Се11 81дпа1шд, № кат. 3041) и мышиного ВИ Ес В1оск (разведение 1:100) (ВИ Вюкаепсек, 553141) в проницаемой среде В (Са1!ад, № кат. 6А80028-5) добавляли в клетки крови и инкубировали при комнатной температуре в течение 30 мин. После инкубации добавляли 3 мл буфера окрашивания/промывания и клетки центрифугировали, как описано выше, с дополнительным промыванием 3 мл буфера окрашивания/промывания. Клетки потом подвергали исследованию с помощью проточной цитометрии, используя Весктап Сои1!ег Е500. Значение флуоресценции окрашивания фосфоно-МарКар-К2 измеряли на управляемых СИ 11Ь+Ьу6С-клетках. Анализ данных выполняли с помощью программы 1МР. Введение соединения, описанного в примере 5, вызывает зависимое от дозы ингибирование синтеза п-МАРКАРК2 при ТМЕЭ50=2,28 мг/кг.

Модель эффективности при артрите крыс, вызванном коллагеном

Самок крыс ЬеЮк (Ш90 г, С11аг1е5 Кщег ЬаЬ§) иммунизируют бычьим коллагеном типа II (2 мг/мл), эмульгированным с равным объемом вспомогательного вещества (гидроксид алюминия). Крыс иммунизируют внутрикожным введением приблизительно 0,3 мг эмульсии в спину возле основы хвоста. Всех

- 47 015189 животных повторно иммунизируют через 7 дней в соответствии с такой же методикой. У крыс начинает развиваться артрит (характеризуется отеком или покраснением одного или обоих голеностопных суставов) через 12-14 дней после первой иммунизации. Крыс распределяют равномерно в пять исследуемых групп при первых признаках артрита и начинают лечение путем введения каждой крысе лекарственного средства дважды в день в течение 14 дней.

Исследуемые группы:

Группа 1: Основа (1% натрийкарбоксиметилцеллюлозы + 0,25% Тетееп 80) 1 мл, ПО, дважды в день в течение 14 дней

Группа 2: Исследуемое соединение, 5 мг/кг, 1 мл, ПО, дважды в день в течение 14 дней

Группа 3: Исследуемое соединение, 15 мг/кг, 1 мл, ПО, дважды в день в течение 14 дней Группа 4: Исследуемое соединение, 30 мг/кг, 1 мл, ПО, дважды в день в течение 14 дней Группа 5: Преднизолон 10 мг/кг, 1 мл, ПО, ежедневно в течение 14 дней

Диаметр голеностопного сустава измеряют с помощью кронциркулей 5 дней в неделю и записывают. Данные выражают как область под кривой (АИС), построенной на основе результата комплекса явлений воспаления и проведенного статистического анализа. Соединение, описанное в примере 5, проявляет гистологию ТМЕИ 50=5 мг/кг (дважды в день).

Предпочтительным является пероральное введение соединения согласно настоящему изобретению. Однако пероральное введение не является единственным путем введения или даже единственным предпочтительным путем. Например, для пациентов, которые забывают принимать лекарства перорально или испытывают трудности при таком введении, может быть очень желательным трансдермальное введение, и с точки зрения удобства или для избежания потенциальных осложнений, связанных с пероральным введением, предпочтительным может быть внутривенное введение. Соединения формулы I также в определенных условиях могут быть введены подкожным, внутримышечным, интраназальным или ректальным путями. Путь введения может быть изменен любым образом, ограниченным физическими свойствами лекарственных средств, удобством пациента и медика и других релевантных условий (Кет1пд1оп'5 Р11агтасеиНса1 Заепсек, 18(11 ЕбШоп, Маск РиЫЫнпд Со. (1990)).

Фармацевтические композиции получают способами, хорошо известными в фармацевтической области. Носитель или наполнитель может быть твердым, полутвердым или жидким веществом, которое может служить в качестве основы или среды для активного ингредиента. Подходящие носители или наполнители хорошо известны из уровня техники. Фармацевтическая композиция может быть приспособлена для перорального, ингаляционного, парентерального или местного использование и может быть введена пациенту в форме таблеток, капсул, аэрозолей, средств для ингаляции, суппозиториев, растворов, суспензий или подобных.

Соединение согласно настоящему изобретению может быть введено перорально, например, с инертным разбавителем или в виде капсул или может быть спрессовано в таблетки. Для перорального терапевтического введения соединения могут быть введены в наполнители и могут использоваться в форме таблеток, пастилок, капсул, эликсиров, суспензий, сиропов, облаток, жевательных резинок и т.п. Эти препараты должны содержать как активный ингредиент по меньшей мере 4% соединения согласно настоящему изобретению, но его количество может изменяться, в зависимости от конкретной формы, и обычно может составлять от 4 до приблизительно 70% единичной формы. Количество соединения в композициях должно обеспечивать соответствующую дозировку. Предпочтительные композиции и препараты согласно настоящему изобретению могут быть определены с помощью способов, хорошо известных специалисту в данной области техники.

Таблетки, пилюли, капсулы, пастилки и подобные формы также могут содержать одно или больше таких вспомогательных веществ: связующие вещества, такие как повидон, гидроксипропилцеллюлоза, микрокристаллическая целлюлоза или желатин; наполнители или разбавители, такие как крахмал, лактоза, микрокристаллическая целлюлоза или фосфат дикальция; агенты дезинтеграции, такие как кроскармеллоза, кросповидон, натрия крахмала гликолат, кукурузный крахмал и подобные; смазывающие вещества, такие как стеарат магния, стеариновая кислота, тальк или гидрогенизированное растительное масло; вещества, способствующие скольжению, такие как коллоидный диоксид кремния; смачивающие вещества, такие как лаурилсульфат натрия и полисорбат 80; и могут быть добавлены подслащивающие вещества, такие как сахароза, аспартам или сахарин, или ароматизаторы, такие как перечная мята, метилсалицилат или ароматизатор с запахом апельсина. В тех случаях, когда форма единичного дозирования представляет собой капсулу, она может содержать, дополнительно к веществам, упомянутого выше типа, жидкий носитель, такой как полиэтиленгликоль или жирное масло. Другие формы единичного дозирования могут содержать другие различные вещества, которые изменяют физическую форму единичного дозирования, например, в качестве оболочек. Таким образом, таблетки или пилюли могут быть покрыты сахаром, гидроксипропилметилцеллюлозой, полиметакрилатами или другими глазировочными средствами. Сиропы могут содержать дополнительно к настоящим соединениям сахарозу в качестве подслащивающего вещества и определенные консерванты, красители и красящие вещества, и ароматизаторы. Вещества, которые используются при получении этих различных композиций, должны быть фармацевтически чистыми и нетоксичными в используемых количествах. Предпочтительный препарат получают при добав

- 48 015189 лении 1% натрийкарбоксиметилцеллюлозы - 0,25% Т\уссп к желаемой дозе соединения формулы I.

Соединения формулы I, как правило, эффективны в широком диапазоне доз. Например, суточные дозы обычно находятся в диапазоне от приблизительно 0,0001 до приблизительно 30 мг/кг массы тела. В некоторых случаях полностью адекватными могут быть уровни дозирования, которые меньше нижней границы указанного диапазона, тогда как в других случаях могут применяться еще большие дозы без возникновения какого-либо опасного побочного эффекта, и, таким образом, имеется в виду, что упомянутый выше диапазон дозирования не ограничивает объем изобретения каким-либо образом. Имеется в виду, что количество реально введенного соединения будет определено врачом, с учетом соответствующих обстоятельств, включая состояние, которое лечат, выбранный путь введения, фактическое введенное соединение или соединения, возраст, вес и реакцию конкретного пациента, и серьезность симптомов пациента.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединение формулы I где Ζ выбран из группы, которая включает

X выбран из группы, которая включает

Я¹ представляет собой С1-С7алкил, необязательно замещенный от одного до шести заместителями, выбранными из группы, которая включает галоген и С1-С4алкилгалоген; С3-С6циклоалкил, необязательно замещенный одним или двумя заместителями, выбранными из группы, которая включает С1-С₄алкил и трифторметил; или триметилсилил;

Я² представляет собой фенил, необязательно замещенный С1-С₄алкилом, или пиридинил, необязательно замещенный С₁-С₄алкилом;

Υ представляет собой водород, С1-С₄алкил, галоген или С1-С₄алкилгалоген;

Я³ представляет собой С1-С₇алкил, необязательно замещенный С₃-С₆циклоалкилом; С1-С₄алкокси; С1-С4алкилгалоген; С3-С6циклоалкил, необязательно замещенный от одного до четырех заместителями, выбранными из группы, которая включает С1-С4алкил и трифторметил; или пиридил, фенил или тиенил, каждый из которых необязательно замещен первым заместителем, выбранным из группы, которая включает галоген, циано, С1-С₄алкил, С1-С₄алкилгалоген и С1-С₄алкокси, и необязательно, кроме того, замещен вторым заместителем, выбранным из группы, которая включает С1-С4алкил и галоген;

Я⁴ представляет собой водород или С1-С₄алкил;

или его фармацевтически приемлемая соль.
2. Соединение по п.1, где X представляет собой £ А νγ к*
3. Соединение по п.1, где Я⁴ представляет собой водород.
4. Соединение по любому из пп.1 и 2, где Я² представляет собой 4-толил.
5. Соединение по любому из пп.1-3, где Я¹ представляет собой С₁-С₇алкил.
6. Соединение по любому из пп.1-3, где Я¹ представляет собой трет-бутил.
7. Соединение по любому из пп.1-4, где Я³ представляет собой 2,6-дифторбензил.
8. Соединение формулы I

- 49 015189

1-(5-трет-бутил-2-пара-толил-2Н-пиразол-3 -ил)-3-{6-[4-(2,6-дифторбензоил)пиперазин-1-ил]-2метилпиридин-3-ил}мочевина или его фармацевтически приемлемая соль.
9. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение по любому из пп.1-8 в комбинации с фармацевтически приемлемым наполнителем, носителем или разбавителем.
10. Применение соединения по любому из пп.1-8 или его фармацевтически приемлемой соли для лечения рака.
11. Применение соединения по любому из пп.1-8 или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения рака.

Евразийская патентная организация, ЕАПВ

Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2