EA013121B1 - Амилин и агонисты амилина для лечения психиатрических заболеваний и расстройств - Google Patents

Abstract

Раскрыты способы и композиции для лечения психиатрических заболеваний и расстройств. Способы по изобретению, в целом, включают введение индивидууму амилина или агониста амилина для лечения психиатрических заболеваний и расстройств, и состояний, связанных с психиатрическими заболеваниями и расстройствами.

Description

По настоящей заявке испрашивается приоритет предварительной заявки на патент США № 60/667335, поданной 31 марта 2005 г, предварительной заявки на патент США № 60/666681, поданной 31 марта 2005 г., предварительной заявки на патент США № 60/675441, поданной 28 апреля 2005 г., и предварительной заявки на патент США № 60/760583, поданной 20 января 2006 г., полное содержание каждой из которых включено сюда для всех назначений.

Область техники, к которой относится изобретение

Это описание относится к области медицины и, конкретно, к областям психологии и психиатрии, а также к здоровью, пищевому рациону и питанию.

Описание предшествующего уровня техники

Психиатрические . заболевания и расстройства (также именуемые психическими заболеваниями и расстройствами) описаны в таких источниках, как руководство Американской Психиатрической Ассоциации И1адпо8Йс апб §1аЙ5Йса1 Мапиа1 оГ Меп1а1 Ищотбега, или ΌδΜ-ΐν. Широкие категории психических расстройств включают без ограничения расстройства настроения, тревожные расстройства, шизофрению и другие психотические расстройства, расстройства, связанные с химическими веществами, расстройства сна, соматоформные расстройства и расстройства потребления пищи. Примеры расстройств настроения включают биполярные расстройства и депрессию. Другие состояния, подпадающие под более широкую категорию описанных выше расстройств, можно найти в ΌδΜ-ΐν, которое полностью включено сюда в качестве ссылки. Это инвалидизирующие заболевания, которые поражают миллионы людей и связаны с астрономическими затратами, с точки зрения лечения, потери производительности и эмоционального гнета.

В 2001 г. Национальный Институт Психического Здоровья опубликовал резюме статистических данных, описывающих распространенность психических расстройств в Америке. В этом отчете по оценкам 22,1% американцев в возрасте 18 лет и старше страдают от диагностируемого психического расстройства в текущем году (К.ефег е1 а1. (1993) АтсЫуек оГ Сепета1 Р5усЫа1ту 50:85-94). Применительно к Переписи США 1998 г., количество пораженных людей составило 44,3 млн.

Депрессивные расстройства могут охватывать, среди других заболеваний, большое депрессивное расстройство, дистимическое расстройство и биполярное расстройство. Примерно 9-9,5% населения США в возрасте 18 лет и старше имеют депрессивное состояние. Сообщалось, что прямые затраты, связанные с депрессивными расстройствами, составляют примерно 80 миллиардов долларов США, причем 2/3 из них несет бизнес. Непрямые затраты, связанные с депрессивными расстройствами, такие как снижение производительности труда, труднее подсчитать ввиду таких явлений, как «присутственность», описанная в виде людей, присутствующих на работе, но ограниченных в своей способности производить или участвовать в производственном процессе (Иигао, Етр1оуее ВепеГй Иете, Иес. 2004).

Другое психиатрическое состояние представляет собой тревожные расстройства. Эти расстройства могут включать паническое расстройство, обсессивно-компульсивное расстройство, посттравматическое стрессовое расстройство, генерализованное тревожное расстройство и фобии. Приблизительно 19,1 млн взрослых американцев в возрасте от 18 до 54 лет (примерно 13,3% людей в этой возрастной группе в текущий год) имеют тревожное расстройство.

Другое распространенное психиатрическое состояние представляет собой расстройства потребления пищи. Существуют 3 основных типа расстройств: невротическая анорексия, невротическая булимия и чрезмерное потребление пищи. Эти психиатрические состояния часто связаны с воспринимаемыми понятиями об имидже тела, и они обычно не зависят от действительной массы тела или индекса массы тела. По оценкам, смертность людей с анорексией составляла 0,56%/г, или приблизительно 5,6% за десятилетие, что примерно в 12 раз выше, чем годовая смертность вследствие всех причин смерти среди женщин в возрасте от 15 до 24 лет в общей популяции (8иШуап (1995) Атепсап 1оитпа1 оГ Р§усЫа1ту 152: 1073-1074). Следует отметить, что психиатрические заболевания обычно присутствуют с элементами других психиатрических расстройств.

Другое психиатрическое состояние представляет собой шизофрению. В текущий год более чем у 2 миллионов людей поставлен клинический диагноз шизофрении, и заболеваемость этим заболеванием в течение жизни имеется приблизительно у 1% популяции США. Шизофрения представляет собой хроническое, инвалидизирующее заболевание, которое, по оценкам, оставляет без полного выздоровления 75% лечившихся пациентов. Лечение шизофрении более новыми (атипичными) антипсихотическими медикаментозными средствами часто связано с побочным эффектом прибавки массы тела и вероятного развития диабета.

Примеры типов шизофрении включают параноидную шизофрению. Эти лица очень подозрительны к другим, и часто корни их поведения представляют собой большие схемы преследования. Галлюцинации, а чаще разные виды бреда, представляют собой наиболее выраженную и часто встречающуюся часть заболевания. У лиц с дезорганизованной шизофренией (гебефренической шизофренией) бессвязная речь, и у них могут быть типы настроения и эмоции, которые не соответствуют ситуации. При дезорганизованной шизофрении обычно не присутствуют галлюцинации. Кататоническая шизофрения представляет собой форму, при которой индивидуум страдает крайним аутизмом, негативизмом и изоляцией

- 1 013121 и имеет выраженные психомоторные нарушения. Остаточная шизофрения представляет собой форму, при которой индивидуум в настоящее время не страдает бредом, галлюцинациями или дезорганизованной речью и поведением, но не имеет мотивации и интереса к повседневной жизни.

Шизоаффективное расстройство представляет собой форму, при которой у индивидуума имеются симптомы шизофрении, а также расстройство настроения, такое как большая депрессия, биполярная мания или смешанная мания. Недифференцированная шизофрения представляет собой форму, при которой соблюдаются условия общих диагностических критериев шизофрении, но они не согласуются ни с одним из описанных выше подтипов, или имеются признаки более чем одного из подтипов без отчетливого преобладания определенного набора диагностических характеристик.

Психиатрические заболевания и расстройства можно обнаружить в любой возрастной группе. Соответственно, эти расстройства можно обнаружить у взрослых людей молодого и более старшего возраста (определяемых здесь как люди в возрасте 65 лет и менее), а также у младенцев, детей, подростков и пожилых лиц (определяемых здесь как люди в возрасте старше 65 лет) . В действительности, определенные сегменты популяции могут быть особенно склонны к наличию такого состояния, как расстройства приема пищи у подростков и взрослых молодого возраста. Лица пожилого возраста могут быть особенно восприимчивы к таким состояниям, как депрессия.

Современные способы лечения включают психосоциальную и поведенческую терапию, электросудорожную терапию и/или медикаментозное лечение. Обычной формой лечения по поводу психиатрических заболеваний или, по меньшей мере, компонентом лечения является введение лекарственных средств. В данной области имеется потребность в молекулах, которые (1) эффективно лечат тех пациентов, которые устойчивы к современным антидепрессантам (например, трициклическим средствам, ингибиторам моноамин-оксидазы, селективным ингибиторам обратного захвата серотонина), (2) эффективно лечат депрессию, тревогу, шизофрению или другие психиатрические заболевания или расстройства без нежелательных побочных эффектов современных фармацевтических средств, (3) имеют более быстрое начало терапевтического действия и/или (4) снижают частоту заболеваемости сопутствующими заболеваниями (например, диабета, болей, прибавки массы тела), которые часто присутствуют с психиатрическими заболеваниями и затрудняют лечение психиатрических заболеваний, таких как, наряду с многими другими, депрессия, тревога и шизофрения.

Все приведенные здесь ссылки полностью включены сюда в качестве ссылки.

Краткое изложение сущности изобретения

В одном общем аспекте предоставленные способы включают применение амилина и его агонистов, аналогов или производных в терапевтически эффективных количествах для лечения психиатрического расстройства. В некоторых вариантах осуществления психиатрическое расстройство представляет собой расстройство настроения, тревожное расстройство, шизофрению или другое психотическое расстройство, расстройство, связанное с химическими веществами, расстройство сна, соматоформное расстройство и/или расстройство потребления пищи. В некоторых вариантах осуществления психиатрическое расстройство представляет собой депрессию или биполярное расстройство, в других вариантах осуществления психиатрическое расстройство представляет собой обсессивно-компульсивное расстройство. В некоторых вариантах осуществления предоставленные способы могут не включать лечение расстройства потребления пищи. В определенных вариантах осуществления предоставленные способы могут не включать лечение анорексии. В некоторых вариантах осуществления предоставленные способы могут не включать соматоформное расстройство. В некоторых вариантах осуществления амилин и его агонисты, аналоги или производные применяются для лечения психиатрического состояния, лежащего в основе расстройства потребления пищи. В некоторых вариантах осуществления амилин и его агонисты, аналоги или производные применяются для лечения психиатрического состояния, лежащего в основе соматоформного расстройства. В некоторых вариантах осуществления агонисты амилина могут не включать кальцитонин и/или пептид, связанный с геном кальцитонина (СОКР). В других вариантах осуществления агонисты амилина могут не включать аналог калыдитонина и/или ССКР.

В еще одном аспекте способы по изобретению включают лечение психиатрического расстройства у желающего или нуждающегося в нем индивидуума, причем лечение включает введение индивидууму терапевтически эффективного количества амилина, его агонистов, аналогов или производных. В некоторых вариантах осуществления индивидуум имеет избыточную массу тела. В других вариантах осуществления индивидуум страдает ожирением. В других вариантах осуществления индивидуум худой, не имеет избыточной массы тела или ожирения. В других вариантах осуществления у индивидуума имеется метаболическое расстройство. В других вариантах осуществления у индивидуума имеется диабет, метаболический синдром, нарушенная устойчивость к глюкозе или резистентность к инсулину. В других вариантах осуществления амилин и его агонисты, аналоги или производные благоприятны в плане содействия индивидууму благодаря своей способности модифицировать пищевые предпочтения или тягу к пище.

В другом общем аспекте способы по изобретению включают введение терапевтически эффективного количества амилина или его агонистов, аналогов и производных в комбинации с обычным средством для лечения психиатрических расстройств. В некоторых вариантах осуществления комбинация включает проведение электросудорожной терапии (ЕСТ). В других вариантах осуществления комбинация включа

- 2 013121 ет проведение другого медикаментозного психиатрического лечения. В других вариантах осуществления медикаментозное психиатрическое лечение представляет собой применение одного или более трициклических антидепрессантов, ингибиторов моноамин-оксидазы (ΜΑΟΙ), селективных ингибиторов обратного захвата серотонина (88ΚΙ), ингибиторов обратного захвата серотонина и норадреналина (8ΝΚΙ), травяных антидепрессантов (например, 81. ΙοΗη'δ \Уог1 или Нурепсит) или антипсихотических лекарственных средств второго поколения (8ОА).

В другом общем аспекте способы по изобретению включают лечение нежелательного побочного эффекта другого психиатрического медикаментозного средства, включающее введение нуждающемуся в нем индивидууму терапевтически эффективного количества амилина или его агонистов, аналогов и производных. В некоторых вариантах осуществления другое психиатрическое лекарственное средство представляет собой антипсихотическое лекарственное средство второго поколения. В некоторых вариантах осуществления нежелательный побочный эффект другого психиатрического лекарственного средства представляет собой прибавку массы тела. В другом варианте осуществления нежелательный побочный эффект другого психиатрического лекарственного средства представляет собой диабет.

В другом общем аспекте способы по изобретению включают лечение психиатрического расстройства, включающее введение терапевтически эффективного количества соединения, которое модулирует поведенческие пути посредством его модулирующих видов действия на метаболические пути или функции, включая без ограничения метаболизм глюкозы, липидный метаболизм, белковый метаболизм и общий энергетический метаболизм. В некоторых вариантах осуществления поведенческий путь представляет собой путь кортикотропин-высвобождающего фактора (СКВ), который модулирует по меньшей мере один компонент гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой оси. В одном варианте осуществления поведенческий путь представляет собой путь допамина. В другом варианте осуществления поведенческий путь представляет собой путь 5НТ_1А или любой путь, включающий серотонинергическую систему. В некоторых вариантах осуществления метаболический или поведенческий путь представляет собой любой путь из глюкорегуляторных, реагирующих на глюкокортикоиды или реагирующих на стресс путей. В некоторых вариантах осуществления соединение представляет собой амилин или его агонист, аналог или производное.

В еще одном аспекте способы по изобретению включают лечение психиатрического расстройства введением терапевтически эффективного количества соединения, которое модулирует поведенческие пути посредством модулирующего действия на потребление пищи. В некоторых вариантах осуществления соединение представляет собой амилин или его агонист, аналог или производное.

В другом аспекте изобретение относится к применению амилина, его агонистов, аналогов или производных для изготовления лекарственного препарата, используемого для лечения описанных здесь психиатрических заболеваний и расстройств. В другом аспекте описание предоставляет применение амилина, его агонистов, аналогов или производных для изготовления лекарственного средства, используемого для лечения нежелательных побочных эффектов другой психиатрической медикаментозной терапии, например антипсихотических лекарственных средств второго поколения.

Краткое описание чертежей

Фиг. 1А и 1В представляют собой графики, изображающие воздействия амилина на вызванное стрессом потребление пищи. На этих графиках К указывает животных, подвергнутых стрессу иммобилизации, а С указывает контрольных животных, не подвергнутых стрессу иммобилизации.

Фиг. 2 представляют собой график, изображающий воздействие амилина и контрольных средств на вызванную стрессом гипертермию у мышей.

Фиг. 3 представляют собой график, изображающий воздействие амилина и контрольных средств на закапывание мрамора.

Фиг. 4 представляют собой график, изображающий воздействие амилина и контроля носителя на животных, подвергающихся тесту вынужденного плавания.

Фиг. 5 представляют собой график, изображающий воздействие амилина и контрольных средств на препульсационное ингибирование.

Фиг. 6 представляют собой график, изображающий воздействие амилина и контрольных средств на двигательную активность, вызванную фенциклидином (РСР).

Фиг. 7 А и 7В представляют собой графики, изображающие воздействия клозапина на массу тела. График на фиг. 7 А изображает воздействие на массу тела одного клозапина, а график на фиг. 7В изображает воздействие на массу тела комбинации клозапина и амилина.

Подробное описание

В настоящее время было обнаружено, что амилин, агонисты амилина, аналоги амилина, аналоги агонистов амилина, производные амилина или их комбинации могут быть способны модулировать стрессовые системы и/или виды действия СКВ и/или глюкокортикоидов (ОС), посредством этого представляя новые фармакотерапевтические варианты. Как продемонстрировано здесь, оказывается, что введение амилина уменьшает или защищает от стресса и его воздействий (например, тревоги, навязчивокомпульсивного поведения, изменений поведения, связанного с потреблением пищи). Авторы также показали здесь, что в специфических поведенческих тестах у животных введение амилина приводит к по

- 3 013121 веденческим эффектам, которые включают антистрессорное, анксиолитическое, антидепрессантное и антипсихотическое действие.

При исследовании новых способов медицинского лечения было отмечено, что ряд метаболических патологий (например, диабет, ожирение) связан с поведенческой дисфункцией (например, большая депрессия, шизофрения). Хотя, в целом, считают эти заболевания сопутствующими, имеется последнее доказательство, свидетельствующее о том, что поведенческие и метаболические изменения во многих случаях физиологически связаны (Ьаидего е! а1. (2001) Еийосгто1оду 142:2796-2804; Ьаидего е! а1. (2002) Еийосгшо1оду 143:4552-4562; Оа11таи е! а1. (2003) Ргос. ЫаЙ. Асай. 8сЬ И8Л 100:11696-11701; Ьаидего (2004) У1!ат1ик аий Ногтоиек, Уо1ите 68, Ьйтаск (ей.)). Общая связь между этими кажущимися в корне различными патологическими состояниями может представлять собой хронический стресс и связанные изменения в СКЕ мозга и стероидных гормонах коры надпочечников, ОС.

Молекулы СКЕ и ОС играют ключевую роль в модулировании поведенческой, нейроэндокринной, вегетативной и метаболической функции в нормальных и стрессовых условиях. Хронический стресс и индукция экспрессии и активности этих молекул тесно связаны с поведенческими заболеваниями, подобными тревоге и депрессии, а также с некоторыми видами ожирения и диабетом. Имеется доказательство, которое связывает аномалии СКЕ и коры надпочечников с метаболическим синдромом, аутоиммунными воспалительными расстройствами, острой и хронической нейродегенерацией, расстройствами сна, хронической болью, расстройствами потребления пищи, хроническим тревожным расстройством и большой депрессией (\Уопд е! а1. (2000) Ргос. ИаИ. Асай. 8сЬ И8Л 97:325-330; 8агиуа1 е! а1. (2001) Рйагтасо1. Кеу. 53:209-243; Непшсйк е! а1. (1999) ВаПНегек Век! Ргас!. Кек. С11и. Еийоспио1. Ме!ай. 13:541-554; Сйгоикок (2000) 1и!. 1. ОЬек. Ке1а!. Ме!аЬ. И1когй. 24:850-855; Реек е!а/ (1995) Аии. ΝΥ. Асай. 8сЬ 771:665676; Огатта!орои1ок е! а1' (1999) Ьаисе! 354:1546-1549; Иа11таи е! а1. (2003) Ргос. №И. Асай. 8сЬ И8А 100:11696-11701).

Как продемонстрировано здесь, амилин разделяет свойства анксиолитических, антидепрессантных и антипсихотических средств при поведенческом тестировании. Таким образом, в настоящее время было обнаружено, что амилин и агонисты амилина могут обладать удивительной способностью лечения психиатрических расстройств. Психиатрические расстройства, которые можно лечить, включают расстройства настроения, тревожные расстройства, шизофрению и другие психотические расстройства, расстройства, связанные с химическими веществами, расстройства сна, соматоформные расстройства и расстройства потребления пищи. Эти соединения могут быть особенно эффективными при лечении психиатрических расстройств, которые имеют элементы метаболических расстройств, например, расстройств потребления пищи, или при лечении пациентов с психиатрическим расстройством или пациентов с психиатрическим расстройством, и которые также страдают нарушением метаболизма.

Более конкретные типы указанных выше расстройств можно найти в И8М-1У. Ниже представлены лишь примеры расстройств, которые можно лечить описанными здесь способами. Примеры включают расстройства поведения, которые могут включать депрессивные расстройства и биполярные расстройства. Они могут дополнительно характеризоваться в виде больших депрессивных расстройств, дистимического расстройства, биполярного расстройства I, биполярного расстройства II, циклотимического расстройства, иначе неопределенного биполярного расстройства, расстройств настроения вследствие соматического заболевания, расстройства настроения, вызванного химическими веществами, или иначе неопределенного расстройства настроения. Тревожные расстройства могут включать паническое расстройство, специфическую фобию, социальную фобию, обсессивно-компульсивное расстройство, посттравматическое стрессовое расстройство, острое стрессовое расстройство, генерализованное тревожное расстройство, тревожное расстройство вследствие соматического заболевания, тревожное расстройство, вызванное химическими веществами, и иначе - неопределенное тревожное расстройство.

Расстройства, вызванные химическими веществами, включают зависимость от веществ, привыкание к употреблению веществ, тревожное расстройство, вызванное веществами, и расстройство настроения, вызванное веществами. Зависимость от веществ и привыкание к употреблению веществ могут возникнуть в отношении разнообразных веществ, включая без ограничения алкоголь, никотин, кокаин, опиоиды, наркотические средства, галлюциногены, амфетамины, фенциклидины, вещества, подобные фенциклидину, и седативные средства. Тревожное расстройство, вызванное веществами, может возникнуть в ответ на вещества, которые включают без ограничения кофеин, коноплю (гашиш), кокаин, галлюциногены, амфетамины, фенциклидины, вещества, подобные фенциклидину, и ингаляционные вещества. Расстройство настроения, вызванное химическими веществами, может возникнуть в ответ на вещества, которые включают без ограничения кокаин, галлюциногены, опиоиды, амфетамины, фенциклидины, вещества, подобные фенциклидину, и ингаляционные вещества. Расстройства, вызванные химическими веществами, могут возникнуть в ответ на одно вещество или на комбинацию веществ, такое как расстройство, связанное с множеством веществ.

В некоторых вариантах осуществления способы по изобретению включают лечение вызванных медикаментозной терапией психиатрических расстройств или психиатрических расстройств, которые возникают в результате лечения заболевания. Например, гедонистическая, гомеостатическая разрегуляция представляет собой нейропсихологическое поведенческое расстройство, распознаваемое у пациентов с

- 4 013121 болезнью Паркинсона, подвергающихся допаминовой заместительной терапии.

Представляется, что допаминовая заместительная терапия у этих пациентов стимулирует центральные допаминергические пути и ведет к поведенческому расстройству с некоторыми аналогиями с расстройством, связанным с пристрастием к стимулирующим веществам (Сюуаппош с1 а1. (2000) 1. №иго1. №иго8игд. РкуеЫайу 68:423-428).

Расстройства потребления пищи могут включать невротическую анорексию, невротическую булимию и иначе - неопределенные расстройства потребления пищи. Эти расстройства потребления пищи могут включать чрезмерное потребление пищи. В некоторых вариантах осуществления способы по изобретению направлены на лечение психиатрического заболевания, связанного с расстройством потребления пищи. В других вариантах осуществления способы по изобретению не включают лечение расстройств потребления пищи. В некоторых вариантах осуществления способы по изобретению не включают лечение анорексии. В других вариантах осуществления способы по изобретению можно использовать для лечения психиатрического заболевания, связанного у пациентов с анорексией. В некоторых вариантах осуществления способы по изобретению не включают лечение чрезмерного потребления пищи.

В некоторых вариантах осуществления способы по изобретению можно использовать для лечения индивидуумов, проявляющих виды поведения в виде перемежающихся чрезмерных действий (ΙΕΒ). ΙΕΒ характеризуют разнообразные расстройства, включающие чрезмерное потребление пищи, наркоманию, алкоголизм, аберрантное сексуальное поведение и компульсивный азарт. ΙΕΒ возникают, когда изредка возникающий избыток нормального поведения трансформируется в избыток повторяющегося, перемежающегося, неадаптированного поведения (Сог\уш (2006) АррсШс 46:11-15).

В некоторых вариантах осуществления способы по изобретению могут не включать лечение соматоформных расстройств. В некоторых вариантах осуществления способы по изобретению могут включать лечение соматоформных расстройств, но не включать лечение физической боли. В других вариантах осуществления способы по изобретению могут включать лечение психиатрического заболевания, связанного с болью.

В одном общем аспекте предусматривается, что соединения, которые уменьшают или смягчают стресс, или регулируют стрессовый путь, можно использовать в виде фармакотерапевтических средств. В другом общем аспекте предусматривается, что соединения, которые могут воздействовать или регулировать метаболические расстройства, а также психиатрические или поведенческие процессы, можно было бы использовать в качестве фармакотерапевтических средств. В другом общем аспекте предусматривается, что соединения, которые могут ослаблять или устранять метаболические нарушения, были бы полезны в качестве средств для фармакотерапевтического лечения психиатрических заболеваний или расстройств.

Предусматривается, что соединения, которые можно использовать в способах по изобретению, могут представлять собой амилин, агонисты амилина, аналоги амилина и производные амилина. В других вариантах осуществления агонисты амилина могут не включать кальцитонин и/или ССРР.

Теоретически считается, что лекарственные средства, которые не только лечат психиатрические заболевания, но также облегчают физические сопутствующие заболевания, как следовало бы ожидать, вызовут повышенную частоту реакции на лечение и успеха исхода у пациентов с психиатрическим заболеванием. Физические сопутствующие заболевания, подобные диабету, обостряют заболевания, которые развиваются при психиатрическом заболевании, и ведут к снижению реакции на лечение. Амилин и его агонисты можно, в частности, применять в описанных здесь способах ввиду его эффектов против диабета, против ожирения и подавления аппетита. Амилин и его агонисты могут, кроме того, оказывать благоприятный эффект в виде содействия индивидуумам в их способности модифицировать предпочтения в пище, что описано в являющейся общей собственностью заявке на патент США № 60/666681, поданной 31 марта 2005 г., и в приложении № 0113-РСТ-0 патентного поверенного к заявке РСТ, поданной 31 марта 2006 г., содержание каждой из которых полностью включено в качестве ссылки. Эти эффекты могут увеличить частоту реакции на лечение и успешный исход в определенных популяциях пациентов, которые страдают психиатрическим заболеванием и у которых проявляются ожирение, связанные с ожирением заболевания или расстройства потребления пищи (например, диабет, метаболический синдром, ожирение, синдром Кушинга, болезнь Кушинга, атипичная большая депрессия, шизофрения, сезонное эффективное расстройство, синдром поликистозных яичников, посттравматическое стрессовое расстройство, синдром ночного потребления пищи, невротическая булимия, расстройство в виде чрезмерного потребления пищи и синдром хронической усталости). В некоторых вариантах осуществления способы не включают лечение анорексии. В других вариантах осуществления способы включают лечение психиатрического заболевания, связанного с анорексией.

Еще один общий аспект включает применение природного и периферически секретируемого пептида амилина или агониста, аналога или производного амилина для лечения психиатрических расстройств. В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к способам лечения психиатрических расстройств у индивидуума, включающим введение пациенту амилина или агониста, аналога или производного амилина в количестве, эффективном для лечения психиатрического расстройства. В некоторых случаях психиатрические расстройства имеют естественную или неидентифицированную этиоло

- 5 013121 гию. В некоторых случаях психиатрическое расстройство может возникать в результате медикаментозной терапии по поводу другого заболевания или лечения его. Соответственно, в некоторых вариантах осуществления изобретение относится к способам лечения вызванных медикаментозной терапией психиатрических расстройств или психиатрических расстройств, которые возникают в результате лечения заболевания у индивидуума, причем способ включает введение индивидууму амилина или агониста, аналога или производного амилина в количестве, эффективном для лечения психиатрического расстройства. Ввиду того, что пептид амилин представляет собой естественно секретируемый гормон, он может уменьшить профиль побочных эффектов, обычно имеющийся у пациентов, получающих назначаемое в настоящее время лечение и фармацевтические средства по поводу психиатрических расстройств. Другой общий аспект включает применение соединений, которые могут лечить и психиатрические заболевания, и метаболические нарушения, имеющиеся у индивидуума.

Амилин, агонисты амилина, аналоги амилина или производные амилина могут также превосходить некоторые другие антидепрессантные, анксиолитические и/или антипсихотические средства, т.к. он не содействует прибавке массы тела и, в действительности, может вызывать потерю массы тела. Это свойство амилина может привести к большему соблюдению назначаемого лечения среди пациентов, получающих лечение по поводу психиатрических заболеваний.

Кроме того, предусматривается, что амилин, агонисты, аналоги или производные амилина можно применять в сочетании с другими психиатрическими лекарственными препаратами, такими как средства и методы, обычно применяемые для лечения психиатрических заболеваний, такие как трициклические антидепрессанты и ингибиторы моноамин-оксидазы ΜΑΟΙ), селективные ингибиторы обратного захвата серотонина (88ΚΙ), ингибиторы обратного захвата серотонина и норадреналина (8ΝΚΙ), травяные антидепрессанты (например, 8ΐ. Φοίιη'δ \¥ог1 или Нурепсит), или антипсихотические лекарственные средства второго поколения (8ΟΑ), психоанализ, познавательно-поведенческая терапия и межличностная терапия. При использовании в сочетании с другими психиатрическими лекарственными препаратами или способами лечения введение амилина или агониста амилина может происходить одновременно или последовательно с другими психиатрическими лекарственными препаратами или способами лечения. Например, амилин или агонист амилина можно вводить в течение того же периода времени, что и другие психиатрические лекарственные средства, в течение перекрывающего периода времени, относительно введения других психиатрических лекарственных средств, или в период времени, который не перекрывает период введения других психиатрических лекарственных средств. В качестве комбинированной или дополнительной терапии благоприятные качества амилина или агониста амилина могут противодействовать или смягчить один или более из нежелательных побочных эффектов имеющихся в настоящее время лекарственных препаратов, например, прибавку массы тела, диабет.

Например, 8ΌΑ представляют собой эффективные терапевтические средства для лечения симптомов, связанных с шизофренией, и родственными психотическими состояниями. Несмотря на эти достижения в лечении психиатрических состояний, накапливающиеся клинические данные выявили связь между применением 8ΟΑ и прибавкой массы тела, диабетом и дислипидемией (Атепсап Э1аЬе1е5 Л55ос1аΐίοη е! а1. (2004) Э|аЬе1е5 Саге 27: 596-601). Прибавка массы тела может представлять собой один фактор, вносящий вклад в невыполнение пациентом предписанного медикаментозного лечения. Поэтому так же, как любое медикаментозное средство, оно не обеспечивает никакой выгоды для пациента, который не принимает его или не принимает его правильно. Некоторые 8ΟΑ, такие как клозапин и оланзапин, были идентифицированы как, вероятно, вызывающие прибавку массы тела; кроме того, эти 2 8ΟΑ были также связаны с повышенным риском и диабета, и дислипидемии. Способность амилина эффективно уменьшать прибавку массы тела, вызванную лечением клозапином, продемонстрирована здесь в примере 3. Кроме того, амилин и аналоги амилина также способны лечить или содействовать лечению диабета и дислипедемии. Агонист амилина, прамлинид, был утвержден ΡΌΑ (Администрацией пищевых продуктов и лекарственных средств США) в качестве дополнительной терапии к инсулину при лечении диабета (типа 1 и типа 2). Соответственно, при использовании с другими психиатрическими лекарственными препаратами, амилин и агонисты амилина могут не только обеспечить дополнительное лечение психиатрического состояния, но также быть способными противодействовать по меньшей мере отрицательному побочному эффекту других психиатрических лекарственных препаратов.

Используемый здесь термин «индивидуум» может включать любое млекопитающее, включая людей. Термин «индивидуум» может также включать домашних животных (например, собак, кошек, лошадей), а также других животных. У индивидуумов может быть по меньшей мере одно из описанных здесь психиатрических расстройств. Индивидуумы, на которые могут оказать благоприятное воздействие описанные здесь способы, могут иметь избыточную массу тела или страдать ожирением; однако они могут также быть худыми. У них может быть метаболическое расстройство или состояние в дополнение к психиатрическому расстройству. Примеры метаболических расстройств включают диабет, метаболический синдром, резистентность к инсулину и дислипидемию. Индивидуумы могут быть любого возраста. Соответственно, эти расстройства можно обнаружить у взрослых людей молодого и более старшего возраста (определяемые здесь как лица в возрасте до 65 лет включительно), а также младенцев, детей, подростков и пожилых людей (определяемых здесь как лица старше 65 лет). В действительности, определенные сег

- 6 013121 менты популяции могут быть особенно склонны к наличию определенного состояния, такого как расстройства потребления пищи у подростков и молодых взрослых людей. Лица пожилого возраста могут быть особенно восприимчивы к таким состояниям, как депрессия.

Используемый здесь и хорошо понятный в данной области термин «лечение» представляет собой подход для получения благоприятных или желательных результатов, включая клинические результаты. «Лечение» или «паллиативное лечение» заболевания, расстройства или состояния означает, что степень, нежелательные клинические проявления состояния или оба эти явления расстройства или заболевания уменьшаются, и/или динамика прогрессирования замедляется или удлиняется, по сравнению с ситуацией без лечения расстройства. В отношении описанных здесь способов, благоприятные или желательные клинические результаты включают без ограничения ослабление или облегчение одного или более симптомов, уменьшение степени расстройства, стабилизированное (т.е. отсутствие ухудшения) состояние или расстройство, задержка или замедление прогрессирования расстройства, облегчение или паллиативное лечение расстройства и ремиссию (частичную или полную), выявляемую или невыявляемую. «Лечение» может также означать продление выживания по сравнению с ожидаемым выживанием без получения лечения. Кроме того, лечение необязательно происходит введением одной дозы, но часто происходит после введения серии доз. Так, терапевтически эффективное количество, количество, достаточное для паллиативного лечения, или количество, достаточное для лечения заболевания, расстройства или состояния, можно вводить в виде одного или более введений.

Если не указано иное, или ясно по контексту, используемая здесь форма единственного числа «некий», «некая» и «данный(ая)» включает соответствующую форму множественного числа. Например, как будет очевидно из контекста, «некий» агонист амилина может включать один или более агонистов амилина.

Без ограничения теорией, амилин может оказывать свои психиатрические/поведенческие эффекты модулированием участков, реагирующих на ОС (таких как мозг) и воздействовать на функции, которые обычно модулируются ОС (например, СЕЯ) экспрессией и активностью, поведение, активность вегетативной нервной системы, нейроэндокринную функцию и метаболизм). Без ограничения теорией, амилин, его антагонисты, аналоги или производные могут блокировать или уменьшать поведенческие (например, тревогу, депрессию) и метаболические (например, связанные с питанием и вызывающие ожирение) эффекты ОС, СНЕ мозга или хронический стресс. Кроме того, амилин может обладать некоторыми антидепрессантными, анксиолитическими и/или антипсихотическими видами активности, которые не направлены относительно его видов активности против диабета или против ожирения. И снова, без ограничения теорией, амилин может частично функционировать путем модулирования или иным образом воздействуя на стрессовые пути и/или регулирующие виды действия СНЕ и/или ОС на опосредованные стрессом поведенческие, вегетативные, нейроэндокринные и метаболические реакции.

Представляется, что стресс ОС и СНЕ имеет запутанную и сложную связь в физиологической и метаболической функции. Стресс оказывает глубокие воздействия на нейроэндокринную (например, гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковую (НРА) ось), вегетативную, поведенческую (например, тревога, депрессия, наркомания, потребление пищи) и метаболическую (например, отложение жира, утилизация энергии) функцию у человека и животных (Όαΐΐιηαη е! а1. (2002) Ногтопез, Вташ, апб Вейауют рр. 571631, Баи О|едо. СА ИБА: Асабет1с Ргезз.). Все эти эффекты модулируются ОС. Нейропептид СНЕ опосредует многие из вызванных стрессом реакций, включая острое ингибирование потребления пищи и тревоги (Ктайп е! а1. (1986) Вташ Кезеатсй Ви11еби 17:285-289; Бипп е! а1. (1990) Вташ Кез. ВташКез. Неу. 15:71-100; Бтади е! а1 (1999)Ат. БРйузю1. 276:Я1461-1468; КооЬ (1999) Вю1. РзусЫайу 46:1 167-1 180). Активность ОС и СНЕ отчетливо независима, и вместе она составляет функциональную и хорошо описанную физиологическую систему, которая регулирует поведенческую, вегетативную, нейроэндокринную и метаболическую функцию (Ба11тап е! а1. (2003) Ргос. №111. Асаб. Бе! ИБА 100:11696-11701). Прерывания связи между ОС и СНЕ, такие как те, которые вызваны стрессом, могут оказывать глубокие воздействия на здоровье. Посредством видов центрального действия хронически повышенных уровней глюкокортикоидных гормонов (кортизола у человека, кортикостерона у грызунов) хронический стресс способствует потреблению имеющей приятный вкус пищи (например, простого сахара, жира). При наличии имеющей приятный вкус пищи, которая в изобилии имеется в современных обществах, хронический стресс увеличивает пропорцию потребляемых с пищей калорий (Ресогаго е! а1. (2004) Епбостто1о§у 145:3754-3762; Баидето (2004) Уйатшз апб Ногтопез, Уо1ите 68. Еб. Оега1б Бйтеаск; Баидего е! а1. (2002) Епбосгто1о§у 143:4552-4562). Значение этой реакции на фоне повышенных уровней ОС представляет собой увеличенное отложение жира в области живота или туловища (Оа11тап е! а1. (2003) Ргос. №111. Асаб. БсБ ИБА 100:1.1696-1 1701), что является независимым фактором риска развития сердечнососудистых заболеваний (В_)огп!огр (1993) ОЬезйу Кезеагсй 1:206; Сагг е! а1. (2004) П1аЬе!ез 53:2087-2094). Действительно, подъем уровня эндогенного ОС, как это происходит у пациентов с болезнью Кушинга, или при экзогенном введении, как у пациентов с волчанкой, вызывает метаболический синдром (ожирение туловища, резистентность к инсулину, гипертонию, гипертриглицеридемию) (Б!етеай (2003) Тйе Абгепа1 Сойех, ХУбйатз Тех!Ьоок о! Епбосппо1оду, 10^4Ь ебйюп, Баипбегз РиЬНзЫпд, и.Б.), кроме того, ожирение туловища характеризуется повышенной активностью глюкокортикоидов, и высказывалась гипоте

- 7 013121 за, что посредством активации синтеза гормонов коры надпочечников и секреции ОС хронический стресс играет значительную роль в развитии ожирения туловища и метаболического синдрома (Е>)огп1огр (2001) ОЬея. Веу. 2:73-86; Воятопб е! а1. (2000) ОЬея. Вея. 8:445-450; В_)от!огр (1997)М.11п1юп 13:795-803; ОаПтап е! а1. (2002) Ногтопея, Вгат, апб Вейауюг рр 571-631, 8ап О|едо. САИ8А: Асабет1с Ргеяя.; ОаПтап е! а1. (2003) Ргос. ЫаЙ. Асаб. 8οΐ. И8А 100:11696-11701).

Гипер- и гипокортизолемия представляют собой также хорошо документированные признаки психиатрических заболеваний, и у пациентов, страдающих метаболическим синдромом, проявляются признаки аномальной секреции кортизола, и у них более вероятно проявление психиатрического заболевания, такого как большая депрессия. Считается, что хронический стресс и связанное с ним увеличение активности центрального СВР играют решающую роль в развитии клинической депрессии, тревожных расстройств, наркомании, расстройств потребления пищи и метаболического синдрома (Сйгоияоя е!а1 (2000) 1п!. 1. ОЬея. Ве1а!. Ме!аЬ. Э|яогб. 24:850-855; КооЬ (1999) Вю1. РяусЫайу 46:1167-1 180). Действительно, маломолекулярные антагонисты СВР в настоящее время исследуются для выявления их терапевтического действия у пациентов с большой депрессией, общим тревожным расстройством, расстройствами потребления пищи и другими патологическими состояниями, связанными со стрессом.

Амилин представляет собой гормон, который совместно секретируется с инсулином из панкреатических β-клеток и который оказывает многочисленные метаболические эффекты, включая глюкорегуляторные виды действия. Глюкорегуляторные виды действия амилина могут быть связаны с его воздействиями на опорожнение желудка, подавление неадекватно повышенной секреции глюкагона после приема пищи и ингибирование потребления пищи (Уоипд (1997) Сигг. Ορίη. Ιη Епбосгто1оду апб Э|аЬе1ея 4:282290). Аналог агониста амилина, прамлинтид, разрабатывается для лечения диабета 1 и 2 типа (Вагоп е! а1. (2002) Сшт. Эгид Тагде!я 1ттипе Епбосг. Ме!аЬо1. Э1яогб. 2:63-82) и недавно был утвержден РОА для такого применения. Ввиду его антидиабетических эффектов амилин также является хорошим кандидатом в качестве средства для лечения метаболического синдрома. Кроме того, амилин является кандидатом в качестве лекарственного средства против ожирения для людей вследствие его воздействий на массу тела у животных (Маск е! а1. (2003) Э|аЬе1ея 52 (8ирр1. 1) А389).

Агонисты амилина включают аналоги агонистов амилина, примеры которых описаны в патенте США № 5686411, патенте США № 6610824; патенте США № 5998367; патенте США № 6087334; предварительной заявке на патент США № 60/617468, поданной 10 августа 2004 г.; и заявке РСТ № РСТ/И82005/004631, которые все включены сюда в качестве ссылки. В некоторых вариантах осуществления способы по изобретению могут не включать применение кальцитонина. В некоторых вариантах осуществления кальцитонин представляет собой лососевый кальцитонин. В других вариантах осуществления способы по изобретению могут не включать применение СОВР. В других вариантах осуществления способы по изобретению могут не включать применение аналогов СОВР или кальцитонина. Соответственно, предусматривается, что способы по изобретению могут включать условие, которое исключает СОВР, кальцитонин или их аналоги.

Под термином «амилин» подразумевается человеческий пептидный гормон, именуемый амилином и секретируемый из бета клеток поджелудочной железы, и его видовые варианты, примеры которых описаны в патенте США № 5234906, содержание которого включено сюда в качестве ссылки. Конкретнее, амилин представляет собой полипептидный гормон из 37 аминокислот, совместно секретируемый в нормальных условиях бета клетками поджелудочной железы в ответ на потребление питательного вещества (см., например, Коба е! а1. (1992) Ьапсе! 339:1179-1180). В этом смысле термины «амилин», «амилин дикого типа» и «нативный амилин», т.е. немодифицированный амилин, используются взаимозаменяемо. Амилин также иногда именуется как КАРР.

Под термином «агонист» подразумевается соединение, которое вызывает биологическую активность амилина, например, имеющее силу действия, большую чем амилин, или в пределах пяти порядков величины (плюс или минус) сравнительно с силой действия амилина, например, на 4, 3, 2 или 1 порядок величины при оценке известными в данной области мерами, такими как, например, исследования связывания/конкуренции на рецепторах, как описано здесь.

В одном варианте осуществления термин «агонист» относится к соединению, которое вызывает биологический эффект, аналогичный эффекту нативного амилина, например соединение (1), обладающее активностью при анализе потребления пищи, опорожнения желудка, панкреатической секреции или потери массы тела (заявка РСТ № РСТ/И82005/004631, поданная 11 февраля 2005 г. и включенная в качестве ссылки), аналогичный нативному человеческому эталонному пептиду, и/или (2) которое специфически связывается при эталонном рецепторном анализе или в анализе конкурентного связывания с амилином. В одном варианте осуществления агонисты будут связываться в таких анализах с аффинитетом лучше, чем 1 мкМ, а в другом варианите осуществления с аффинитетом лучше, чем 1-5 нМ. Такие агонисты могут включать полипептид, включающий активный фрагмент амилина, или небольшую химическую молекулу. В некоторых вариантах осуществления агонист представляет собой пептид, а не небольшую химическую молекулу. Однако предусматривается, что в некоторых вариантах осуществления лососевый кальцитонин, кальцитонин, СОВР и/или их соответствующие аналоги могут быть исключены из объема агонистов амилина с указанием ограничивающего условия. В некоторых вариантах осуществле

- 8 013121 ния агонист амилина не представляет собой небольшую химическую молекулу, и небольшую химическую молекулу можно исключить из объема агонистов амилина с указанием ограничивающего условия.

Агонисты включают аналоги амилина и производные амилина.

Под термином «аналог» подразумевается пептид, последовательность которого получена из последовательности амилина, включая вставки, замены, удлинения и/или делеции, имеющие, по меньшей мере, аминокислотную идентичность с амилином или областью пептида амилина. Аналоги могут иметь идентичность аминокислотной последовательности с нативным амилином по меньшей мере 50 или 55%, или идентичность аминокислотной последовательности с нативным амилином по меньшей мере 70, 80, 90 или 95%. В одном варианте осуществления такие аналоги могут включать консервативные или неконсервативные аминокислотные замены (включая ненатуральные аминокислоты и Ь и Ό формы). Аналоги агонистов амилина представляют собой аналоги, как описано здесь, и они функционируют в качестве агониста амилина.

Термин «производное» определяется как молекула, имеющая аминокислотную последовательность нативного амилина или аналога, но дополнительно имеющая химическую модификацию одной или более из его аминокислотных боковых цепей, α-атомов углерода, концевой аминогруппы или концевой группы карбоновой кислоты. Химическая модификация включает без ограничения добавление химических частей, создание новых связей и удаление химических частей. Модификации аминокислотных боковых групп включают без ограничения ацилирование ε-аминогрупп лизина, Ν-алкилирование аргинина, гистидина или лизина, алкилирование групп карбоновых кислот глутамина или аспарагина, и деамидирование глутамина или аспарагина. Модификации концевой аминогруппы включают без ограничения модификации дезамино, Ν-низших алкилов, Ν-ди-низших алкилов, ограниченных алкилов (например, разветвленных, циклических, конденсированных, адамантиловых) и Ν-ацилов. Модификации концевой карбоксильной группы включают без ограничения модификации амидов, низших алкиламидов, ограниченных алкилов (например, разветвленных, циклических, конденсированных, адамантиловых), диалкиламидов и сложных низших алкиловых эфиров. Низший алкил представляет собой С1-С4 алкил. Кроме того, одна или более боковых групп или терминальных групп могут быть замещены защитными группами, известными средним специалистам в области синтетической химии, α-углерод аминокислоты может быть моно- или диметилированным.

Человеческий амилин (й-Амилин или й-амилин) имеет следующую аминокислотную последовательность: Туз-Суз-Азп-Тйг-А1а-Тйг-Суз-А1а-Тйг-О1пАгд-Ееи-А1а-Азп-Рйе-Ееи-Уа1-Н1з-8ег-8ег-Азп-АзпРйе-О1у-А1а-11е-Ееи-8ег-8ег-Тйг-Азп-Уа1-О1у-8ег-Азп-Тйг-Туг (8ΕΟ ΙΌ N0:1). Крысиный амилин (гАмилин) имеет следующую последовательность: 1<СХТАТС.АТОВЕАХЕЕУВ88ХХЕСРУЕРР1Т8ГУΟ8ΝΊΎ (8Е0 ΙΌ N0:2). Предусматривается применение амилинов от любых видов.

Агонисты амилины, применение которых предусмотрено в описанных здесь способах, включают те, которые описаны в патентах США №№ 5686411, 6114304 и 6410511 и в патентной заявке РСТ № \¥0 93/10146, содержания которых полностью включены сюда в качестве ссылки. Такие соединения включают те, которые имеют формулу (I): ¹А1-Х-А8п-ТйТ-⁵А1а-ТйТ-¥-А1а-ТйТ-¹⁰О1п-АТд-Ееи-В1-А8п-¹⁵РйВЬеи-С1 -Όί-Εί-²⁰Ρ1 -О1-А8п-Н1-О1у-²⁵11 -1₁Ьеи-К1-Ы-³⁰ТйТ-М1-Уа1-О1у-8еТ-³⁵А8п-ТйТ-ТуТ (8ΕΟ ΙΌ Ν0:3)

Βι представляет собой А1а, 8ет или Тйг;

С1 представляет собой Уа1, Ьеи или Не;

Όί представляет собой Н1з или Агд;

Εί представляет собой 8ет или Тйг;

Ρί представляет собой 8ет, Тйг, О1п или Азп;

Οί представляет собой Азп, О1п или Н1з;

Н1 представляет собой Рйе, Ьеи или Туг;

Ιί представляет собой А1а или Рго;

Л представляет собой Не, УАЬ, А1а или Ьеи;

К1 представляет собой 8ет, Рго, Ьеи, Не или Тйг;

Ь1 представляет собой 8ет, Рго или Тйг;

М1 представляет собой Азп, Азр или О1п;

X и Υ независимо представляют собой выбранные аминоксилотные остатки, имеющие боковые цепи, которые химически связаны друг с другом для образования внутримолекулярной связи.

С-концевая часть может представлять собой амино, алкиламино, диалкиламино, циклоалкиламино, ариламино, аралкиламино, алкилокси, арилокси, аралкилокси или карбоксил.

Подходящие боковые цепи для X и Υ включают группы, полученные из алкилсульфгидридов, которые могут образовывать дисульфидные связи; алкилкислоты и алкиламины, которые могут образовывать циклические лактамы; алкилальдегиды или алкилгалиды и алкиламины, которые могут конденсироваться и восстанавливаться для образования алкиламиновой мостиковой связи; или боковые цепи, которые могут быть соединены для образования алкильной, алкенильной, алкинильной, простой эфирной или тиоэфирной связи. Предпочтительные алкильные цепи включают низшие алкильные группы, имеющие от примерно 1 до примерно 6 атомов углерода.

- 9 013121

Дополнительный аспект, композиции и способы применения согласно изобретению направлены на аналоги агонистов 8Е0 ΙΌ N0:3, которые не имеют мостиковой связи, и где X и Υ независимо выбраны из А1а, 8ег, Суз, Уа1, Ьеи и Не сложных и простых алкиловых, ариловых или аралкиловых эфиров 8ег или Суз.

Иллюстративные соединения включают без ограничения без^лЬуз-й-амилин (8Е0 ΙΌ N0:4), ²⁸Рго-йамилин (8Е0 ΙΌ N0:5), ²⁵'²⁸'²⁹Рго-й-амилин (8Е0 ΙΌ N0:6), ¹⁸Агд²⁵-²⁸Рго-й-амилин (8Е0 ΙΌ N0:7), и без Ьуз Агд ^- Рго-й-амилин (8Е0 ΙΌ N0:8), которые все проявляют активность амилина ίη у1уо у получавших лечение тестируемых животных (например, провоцируя выраженную гиперкальцемию с последующей гипергликемией). В дополнение к наличию видов активности, характерных для амилина, было также обнаружено, что определенные из предоставленных здесь соединений обладают характеристиками более желательной растворимости и устойчивости при сравнении с человеческим амилином. Примеры этих соединений включают ²⁵Рго²⁶Уа1²⁸'²⁹Рго-й-амилин (8Е0 ΙΌ N0:9), ²⁵'²⁸'²⁹Рго-й-амилин и ¹⁸Агд ²⁵'²⁸Ргой-амилин.

Другие соединения включают ¹⁸Агд²⁵'²⁸'²⁹Рго-й-амилин (8Е0 ΙΌ N0:10), без-¹Ьуз¹⁸Агд²⁵'²⁸'²⁹Рго-йамилин (8ЕЕ) ΙΌ N0:1 1), без-¹ Ьуз²⁵'²⁸'²⁹Рго-й-амилин (8ЕЕ/ ΙΌ N0: 12), ²⁵Рго²⁶УаГ'²⁹Рго-й-амилин (8ЕЕ/ ΙΌ N0: 13), ²³Ьеи²⁵Рго²⁶Уа1²⁸'²⁹Рго-й-амилин (8ЕЕ) ΙΌ N0: 14), ²³Ьеи²⁵Рго²⁶Уа1²⁸Рго-й-амилин (8ЕЕ/ ΙΌ N0: 15), без-¹Ьуз²³Ьеи²⁵Рго²⁶Уа1²⁸Рго-й-амилин (8Е0 ΙΌ N0:16), ¹⁸Агд²³Ьеи²⁵Рго²⁶Уа1²⁸Рго-й-амилин (8Е0 ΙΌ N0:17), ¹⁸Агд²³Ьеи²⁵'^28,29Рго-й-амилин (8ЕО ΙΌ N0: 18), ¹⁸Агд²³Ьеи²⁵'²⁸Рго-й-амилин (8ЕЕ) ΙΌ N0: 19), ^ППе²³Ьеи²⁵'²⁸'²⁹] ” ......

¹⁷Пе²³Ьеи²⁵'²⁸'²⁹Рго-й -амилин ¹⁷Пе¹⁸Агд²³Ьеи²⁶Уа1²⁹Рго-й-амилин (8 ЕЕ) ΙΌ N0:24), N0:25), ¹³Тйг²¹Шз23Ьеи²⁶А1а²⁸Ьеи²⁹Рго³¹Азр-й-амилин (8 ЕЕ) ΙΌ N0:26), ¹³Тйг²¹Н1з²³Ьеи²⁶А1а²⁹Рго³¹Азр-йамилин (8ЕО ΙΌ N0:27), аез-¹Ьуз¹³Тйг²¹Н1з²³Ьеи²⁶А1а²⁸Рго³¹Азр-й-амилин (8ЕО ΙΌ N0:28), ¹³Тйг¹⁸Агд²¹Н1з²³Ьеи²⁶А1а²⁹Рго³¹Азр-й-амилин (8Е0 ΙΌ N0:29), ¹³Тйг¹⁸Агд²¹Н1з²³Ьеи²⁸>²⁹Рго³¹Азр-й-амилин (8ЕО ΙΌ N0:30) и ¹³Тйг¹⁸Агд²¹Н1з²³Ьеи²⁵Рго²⁶А1а²⁸'²⁹Рго³¹'Азр-й-амилин (81 Ε) ΙΌ N0:31).

Агонисты амилина, предусмотренные для применения в раскрытых здесь способах, включают аналоги полипептида-6 семейства амилина (АВР-6), как описано в предварительной заявке на патент США № 60/617468 и заявке РСТ № РСТ/И805/036456, которые полностью включены сюда в качестве ссылки. Зрелый пептид АВР-6, также известный как интермедии, имеет следующую аминокислотную последова 'Рго-й-амилин (8ЕО ΙΌ N0:20), ¹⁷Пе²⁵'²⁸'²⁹Рго-й-амилин (8ЕО ΙΌ N0:21), без-¹ЬузN0:23), 11е¹⁸Агд²³Ьеи²⁵Рго²⁶Уа1^28>29Рго-й-амилин (8ЕО ΙΌ (8ЕО ΙΌ N0:22), ¹⁷Пе¹⁸Агд²³Ьеи-й-амилин

17- · (8 ЕЕ) ΙΌ тельность

Т^А^^^КVΟСV^ΟТС^V^N^8НК^№^^ΜΟРАΟК.^^8АРV^Р88РН8Υ (8ЕЕ/ ΙΌ N0:32).

АВР-6 и аналоги АВР-6 могут быть или не быть амидированы на С-конце. Такие аналоги АВР-6 включают те, которые имеют формулу ΙΙ: Х₁-Х₂-Хз-Х₄-Х₅-Х₆-Х₇-Х₈-рурХЬ8НКЬ^рЬ-Х₂₁, -Х₂₂-Х₂₃-Х₂₄X25-X26-X27-X28 - 8АРV-Xзз-Р88РН8Υ (8ЕЕ) ΙΌ N0:33), где Х1 отсутствует, ТС)ЛС)ЕЕКСС, (8ЕО ΙΌ N0:34), любую из одной или более последовательных аминокислот 8Е0 ΙΌ N0:34, №арил, №ацил с заместителем, выбранным из С₁С₁₈алкила, замещенный алкил или гетероарильная часть;

Х₂ представляет собой М, 8, С, замещенный Ь, К, Ό или Е, где боковая цепь может быть связана через амидную связь или любую аминокислоту, которая может образовывать связь с Х₈, например, дисульфидную или амидную связь;

Х₃ представляет собой V, Ό, Ь, О, И, А или 8;

Х₄ представляет собой V, Ό, Ь, Ο, N А, 8 или Т;

Х₅ представляет собой V, Ό, Ь, Ο, N А или 8;

Х₆ представляет собой V, Ό, Ь, О, N А, 8 или отсутствует;

Х₇ представляет собой Т, 8, Нзе (гомосерин), Айй ((8)-2-аминогидрокси-3-метилбутаноеваую кислоту) или (Айр) (2К.,3К.)-2-амино-3-гидрокси-4-метилпентаноевую кислоту;

Х₈ представляет собой М, 8, С, замещенный Ь, К, Ό или Е, или любую аминокислоту, которая может образовать связь с Х2, например, дисульфидную или амидную связь;

Х₂₁ представляет собой М, О, Р, А или отсутствует;

Х₂₂ представляет собой М, О, Р, А или отсутствует;

Х₂₃ представляет собой М, О, Р, А или отсутствует;

Х₂₄ представляет собой М, О, Р, А или отсутствует;

Х₂₅ представляет собой М, О, Р, А или отсутствует;

Х₂₆ представляет собой К или отсутствует, где, когда Х₂₆ отсутствует, Х₂₇ отсутствует;

Х₂₇ представляет собой О или отсутствует, где, когда Х₂₇ отсутствует, Х₂₆ отсутствует;

Х₂₈ представляет собой Ό или Е;

Х₃₃ представляет собой Ό или Е и его биологически активные фрагменты.

В других вариантах осуществления аналоги АВР-6 включают или активная область состоит из соединений, имеющих аминокислотную последовательность формулы (ΙΙΙ): Х1-Х₂-рХЬ8НКЬ^рЬ-Х1₃-Х1₄X^₅-X^₆-X^₇-X^₈-X^₉-X₂₀-8АРV-X₂₅-Р88РН8Υ (8Е0 ΙΌ N0:35), где Х1 представляет собой О или отсутству ет;

- 10 013121

Х₂ представляет собой V или отсутствует;

Х1₃ представляет собой М, О, Р, А, или отсутствует;

Х1₄ представляет собой М, О, Р, А или отсутствует;

Х1₅ представляет собой М, О, Р, А или отсутствует;

Х1₆ представляет собой М, О, Р, А или отсутствует;

Х1₇ представляет собой М, О, Р, А или отсутствует;

Х1₈ представляет собой К или отсутствует, где, когда Х1₈ отсутствует, Х₁₉ отсутствует;

Х1₉ представляет собой О или отсутствует, где, когда Х₁₉ отсутствует, Х1₈ отсутствует; Х₂₀ представляет собой Ό или Е;

Х₂₅ представляет собой Ό или Е и его биологически активные фрагменты.

Аминокислотные последовательности иллюстративных аналогов АЕР-6 для применения в раскрытых способах включают

КУОСУЕОТСрУр^ЗНКЕХУрЕМОРАОКрОЗАРУОРЗЗРНЗУ (ЗЕр Π)ΝΟ:36) ССУЕСТСрУр^ЗНРЕУ/рЕМОРАСЖрОЗАРУОРЗЗРНЗУ (ЗЕр ГО N0:37) С УЕСТСр νρΝ ЕЗНКЕ УУрЕМОРАСКрОЗ АР УОРЗЗРПЗУ (ЗЕр ГО N0:3 8) ρνρΝΕδΗΚΕΑρΕΜΟΡΑΡΚρΟδΑΡνΟΡδδΡΗδΥ (ЗЕр ГО N0:39) УрМЕЗНЯЕАрЕМРРАбКрОЗАРУОРЗЗРНЗУ (5Ер ГО N0:40) νρΝΕδΗΚΕ-ΡΕΜαΡΑΟΚρΟδΑΡνΟΡδδΡΙΙδΥ (ЗЕр ГО N0:41) ТрАРЕЕКУССУЕаТСрУрЖЗНКЬΑρΕΡρΟδΑΡνΟΡδδΡΗδΥ (ЗЕР ГО N0:42) ΤΡΑρΕΕΚνΟΟνΕΟΤΟρνρΝΕδΗΒΕΥΖΡΕΟδΑΡνΟΡδδΡΗδΥ (8ЕС> ΙΟΝΟ:43) УССУЕОТСрУр^ЗНЯЕУ/рЕЯрОЗАРУОРЗЗРНЗУ (ЗЕр ГО N0:44) ΟνΕΟΤΟρνρΝΕδΗΚΕΑΡΕΚρΕδΑΡνΕΡδδΡΗδΥ (ЗЕр ГО N0:45)

ТрАрЕЕРУОСЗЫЕЗТСр УрЖЗНШАУрЕМбРАОЯрОЗАРУОРЗЗРНЗУ (8Ер ГО N0:46) ΤΡΑρίΕΚ.ν6€ΝΤΑΤθρνρΝΕ8ΗΚΕΑΡΕΜ6ΡΑΟΚρϋδΑΡνθΡ88ΡΗ8Υ (8Ер ГО N0:47) ΚνΟΟΟΝΕδΤΟρνρΝΕδΗΚΕАрЬМОРАСЯООЗАРУОРЗЗРНЕУ (8Е0 ГО N0:48) ΤρΑρΕΕΚνΟΟΟΤΑΤΟρνρΝΕδΗΚΕΑρΕΜΟΡΑΟΡρΟδΑΡνΟΡδδΡΗδΥ (ЗЕр ГО N0:49) 1Ч)АрЕЕКУ0С0Ж8ТСрУрЖЗНКЕ\УрЕМ6РА0К.рО8АРУОР38РН8У (ЗЕр ГО N0:50) ТрАрЬЕКν6ΜνΕΟΤΜρνρΝΕ8ΗΚΕΑΡΕΜΟΡΑΟΒ.ρθ8ΑΡνθΡ8δΡΗδΥ (ЗЕр ГО N0:51) ОМУЕОТМрУрНЕЗНЯЕАрЬМСРАСКрОЗАРУОРЗЗРНЗУ (8Ер ГО N0:52) У6МУЕСТМрУрЖ8НКЕ\УрЕКр08АРУОР88РН8У (8Ер ГО N0:53) ΚνθθαΝΕ8ΤΡρνρΝΕ3ΗΡΕΑρΕΜαΡΑΟΚρΡ8ΑΡνθΡ88ΡΗ3Υ (ЗЕр ГО N0:54) ν006ΝΕ8Τ0ρνρΝΕ8ΗΚΕΨρΕΚρθ8ΑΡνϋΡ88ΡΗ8Υ (ЗЕр ГО N0:55) У-СХТА-ТСрУрМ^НКЕ\УрЕЯрО8АРУОР88РН8У (8Ер 1р N0:56) 0ΡΝΤΑΤΡρνρΝΕ5ΗΚΕΑρΕΚρΐ)8ΑΡν0Ρδ8ΡΗδΥ (ЗЕр ГО N0:57)

ТрАрЕЬРУбСУЕОТСрУрЖЗНКЕАрЕМОРАОКрЕ8АРУЕР88РНЗУ (8Е(2 ГО N0:58) ΤΟΑρΕΕΚναθνΕΟΤθρνρΝΕ8ΗΚΙ.ν/ρΕΜΟΡΑΟΚρθδΑΡνΕΡ88ΡΗ8Υ (8Ер ГО N0:59) СТМрУрЖЗНКЕУгрЕЯрОЗАРУЕРЗЗРНЗУ (8Ер ГО N0:60) УССУЬ6ТСрУрЖ81ПШХУрЕМОРА6КрО8АРУЕР85РН8У (8Ер ГО N0:61) УОСУЕОТСрУрКЕЗНЯЕХУрЕЯрОЗАРУЕРЗЗРНЗУ (ЗЕр 10 N0:62) 6С^АТСрУрЖ811КЕУ'рЕКрО8АРУЕР8 ЗРНЗ Υ (ЗЕр ГО N0:63) СС8КЕ8ТСрУрХЕ8НКЕ9/рЕКрО8АРУЕР88РН8¥ (ЗЕр ГО N0:64)

СССЫЕЗТСрУрЖЗНКЕУ/рЕКрОЗАРУЕРЗЗРНЗУ (8Ер ГО N0:65) 60νΕΟΤ0ρνρΝΕ8ΗΚ1'νρΕΚρΕ8ΑΡνΕΡ88ΡΗ3Υ (ЗЕр ГО N0:66).

Агонисты амилина, предусмотренные для применения в раскрытых здесь способах, включают аналоги, идентифицированные в патенте США № 6087334, содержание которого включено сюда в качестве ссылки. Такие полезные агонисты амилина включают аналоги формулы IV: Х1-Хаа₁-Х₂-Хаа₂-Х₃-Хаа₃-Х₄Хаа4-Х₅-Хаа₅-Х6 (8Ер ГО N0:67), где

Х₁ представляет собой Ьуз, Агд или отсутствует;

Х₂ представляет собой Хаа₆Хаа₇Хаа₈Хаа₉ (8Ер. ГО. N0.68) или 2-Хаа1₀8егТйг, при условии, что если Х₂ представляет собой 2-Хаа1₀8егТйг, то и Х₁, и Хаа1 отсутствуют;

Х₃ представляет собой А1аТйг, А1а8ег, О1иТйг или СаГГЬг;

- 11 013121

Х₄ представляет собой АгдЬеиА1а. Н1кЬеиА1а. АгдИеА1а. ЕукНеА1а. АгдМе!А1а. ΗίδΜοίΛΙα. ЬукМе1А1а Агд1еиТйг;

Х₅ представляет собой РйеЬеи. РйеПе. РЬеМе!. ТугЬеи. Туг11е. ТугМе!. Тгр11е или ТгрМе!;

Х₆ представляет собой Агд8ег8егО1уТуг (8Е0 ΙΌ N0:69). Ьук8ег8егО1уТуг (8Е0 ΙΌ N0:70). Н1к8ег8егО1уТуг (8ЕО ΙΌ N0:71). Рго8ег8егО1уТуг (8ЕО ΙΌ N0:72). Агд8егАгдО1уТуг (8ЕО ΙΌ N0:73). АгдТЬг8егО1уТуг (8ЕО ΙΌ N0:74). АгдА1а8егО1уТуг (8ЕО ΙΌ N0:75). А1а8ег8егО1уТуг (8ЕО ΙΌ N0:76). Агд8егА1аО1уТуг (8ЕО ΙΌ N0:77). Н1к8егА1аО1уТуг (8ЕО ΙΌ N0:78). Агд8егО1уТуг (8ЕО ΙΌ N0:79). Агд8ег. Ьук8ег. Н1к8ег. АгдТйг. Рго8ег или Агд;

Хаа₁ представляет собой Сук или отсутствует;

Хаа₂ представляет собой Сук или А1а;

Хаа₃ представляет собой 01и. А1а или Акп;

Хаа₄ представляет собой Акп. А1а или 01п;

Хаа₅ представляет собой Уа1. А1а. Не. Ме!. Ьеи. пентил-С1у или т-бутил-С1у;

Хаа₆ представляет собой Акп. 01п или Акр;

Хаа₇ представляет собой ТЬг. 8ег. Ме!. Уа1. Ьеи или Не;

Хаа₈ представляет собой А1а или Уа1;

Хаа₉ представляет собой ТЬг или 8ег;

Хаа₁₀ представляет собой Ьеи. Уа1. Ме! или Не;

Ζ представляет собой алканоильную группу из примерно от 1 до примерно 8 атомов углерода или отсутствует;

и его фармацевтически приемлемые соли.

Следует отметить. что в заявке альтернативы написаны в группах Маркиша. например. каждое аминокислотное положение. которое содержит более чем одну возможную аминокислоту. Конкретно предусматривается. что каждый член группы Маркиша должен рассматриваться отдельно. включая посредством этого другой вариант осуществления. и группу Маркиша не следует читать как один элемент.

Агонисты амилина. предусмотренные для применения в раскрытых здесь способах. включают пептиды семейства амилина и аналоги. описанные в заявке РСТ № РСТ/и82005/004631. которая полностью включена сюда в качестве ссылки. Такие полезные агонисты амилина могут включать аналоги. включающие аминокислотную последовательность формулы V: Хаа₁ X Хаа₃ Ха0₄ Хаа₅ Хаа₆ Υ Хаа₈ Хаа₉ Хаа₁₀ Хаап Хаа₁₂ Хаа₁₃ Хаа₁₄ Хаа₁₅ Хаа₁₆ Хаап Хаа1₈ Хаа1₉ Хаа₂₀ Хаа₂₁ Хаа₂₂ Хаа₂₃ Хаа₂₄ Хаа₂₅ Хаа₂₆ Хаа₂₇ Хаа₂₈ Хаа₂₉ Хаа₃₀ Хаа₃₁ Хаа₃₂ (8Е0 ΙΌ N0: 80). где

Хаа₁ представляет собой А. С. ЬС (гомо-Сук). Ό. Е. Ε. Ι. Ь. К. ЬК (гомо-Ьук). К. ЬК (гомо-Агд). 8. Нке (гомо-8ег). Т. О. О. N. М. Υ. ^. Р. Нур (гидрокси-Рго). Н. V или отсутствует;

Хаа₃ представляет собой А. Ό. Е. N. О. Ο. V. К. К. ЬК. ЬК. Н. Ι. Ь. М или отсутствует;

Хаа₄ представляет собой А. Ι. Ь. 8. Нке. Т. V. М или отсутствует;

Хаа₅ представляет собой А. 8. Т. Нке. Υ. V. Ι. Ь или М;

Хаав представляет собой Т. А. 8. Нке. Υ. V. Ι. Ь или М;

Хаа₈ представляет собой А. V. Ι. Ь. Ε или М;

Хаа₉ представляет собой Ь. Т. 8. Нке. V. Ι или М;

Хаа₁₀ представляет собой О. Н. О. К. К. N. ЬК или ЬК;

Хаа₁₁ представляет собой К. К. О. N. ЬК. ЬК или Н;

Хаа₁₂ представляет собой Ь. Ι. V. Ε. М. или Υ;

Хаа₁₃ представляет собой А. Ε. Υ. N. О. 8. Нке или Т;

Хаа₁₄ представляет собой А. Ό. Е. О. N. К. О. К. Н. ЬК или ЬК;

Хаа₁₅ представляет собой А. Ό. Е. Ε. Ь. 8. Υ. Ι. V или М;

Хаа₁₆ представляет собой Ь. Ε. М. V. Υ или Ι;

Хаа₁₇ представляет собой Н. О. N. 8. Нке. Т или V;

Хаа₁₈ представляет собой К. ЬК. К. ЬК. Н. и(Сй) или п(0гп);

Хаа₁₉ представляет собой Ε. Ь. 8. Нке. V. Ι. Т или отсутствует;

Хаа₂₀ представляет собой Н. К. К. ЬК. ЬК. N. О или отсутствует;

Хаа₂₁ представляет собой Т. 8. Нке. V. Ι. Ь. О. N или отсутствует;

Хаа₂₂ представляет собой Ε. Ь. М. V. Υ или Ι;

Хаа23 представляет собой Р или Нур;

Хаа24 представляет собой Р. Нур. К. К. ЬК. ЬК или Н;

Хаа₂₅ представляет собой Т. 8. Нке. V. Ι. Ь. Ε или У;

Хаа₂₆ представляет собой N. О. Ό или Е;

Хаа₂₇ представляет собой Т. V. 8. Ε. Ι или Ь;

Хаа28 представляет собой О или А;

Хаа₂₉ представляет собой 8. Нке. Т. V. Ι. Ь или Υ;

Хаа₃₀ представляет собой Е. О. К. N. Ό. К. ЬК. ЬК. Н или О;

Хаа₃₁ представляет собой А. Т. 8. Нке. V. Ι. Ь. Ε или Υ и

Хаа32 представляет собой Ε. Р. Υ. Нке. 8. Т или Нур;

- 12 013121 где X и Υ способны создать связь и представляют собой независимо выбранные остатки, имеющие боковые цепи, которые химически связаны друг с другом, для образования внутримолекулярной связи, такой как дисульфидные связи; амидная связь; алкиловые кислоты и алкиламины, которые могут образовывать циклические лактамы; алкилальдегиды или алкилгалиды и алкиламины, которые могут быть конденсированы и быть восстановлены для образования алкиламина или иминовой мостиковой связи; или боковые цепи, которые могут быть соединены для образования алкильной, алкенильной, алкинильной, эфирной или тиоэфирной связи.

Алкильные цепи могут включать группы низшего алкила, имеющие от примерно 1 до примерно 6 атомов углерода. В определенных вариантах осуществления внутримолекулярная связь может представлять собой дисульфидную, амидную, иминовую, аминовую, алкильную или алкеновую связь. В определенных вариантах осуществления X и Υ независимо выбраны из 8ег, Акр, С1и. Ьук, От или Сук. В определенных вариантах осуществления X и Υ представляют собой Сук и Сук. В других вариантах осуществления X и Υ представляют собой 8ег и 8ег. В еще одних вариантах осуществления X и Υ представляют собой Акр и Ьук или Ьук и Акр.

Полезные агонисты амилина могут также включать аналоги, включающие аминокислотную последовательность формулы VI: Xаа₁ Хаа₂ Хаа₃ Хаа₄ Xаа5 Хаа₆ Хаа₇ Хаа₈ Хаа₉ Xаа₁ο Хаа₁₁ Xаа₁₂ Xаа₁з Xаа₁4 Xаа15 Xаа16 Xаа17 Xаа1₈ Xаа19 Xаа2ο Xаа21 Xаа22 Р Xаа24 Т N Xаа27 О 8 Xаазο Xааз1 Xааз2 (8ЕО Ιϋ N0: 81), где

Xаа₁ представляет собой А, С, Ό, Р, I, К, 8, Т или отсутствует;

Xаа₂ представляет собой С, Ό, 8 или отсутствует;

Хаа₃ представляет собой А, Ό, N или отсутствует;

Хаа₄ представляет собой А, Ь, Т или отсутствует;

Xаа5 представляет собой А или 8;

Хаа₆ представляет собой Т, А, 8 или V;

Хаа₇ представляет собой С, К или А;

Xаа₈ представляет собой А, V, Ь или М;

Хаа₉ представляет собой Ь или Т;

Xаа₁ο представляет собой О, Н или О;

Хаа₁₁ представляет собой К, К, О или 11Ащ;

Xаа₁₂ представляет собой Ь, или Υ;

Xаа₁₃ представляет собой А, Р, Ν, О, 8 или Т;

Xаа₁4 представляет собой А, Ό, Е, Ο, Ν, К, О или К;

Xаа₁5 представляет собой А, Ό, Е, Р, Ь, 8 или Υ;

Xаа₁₆ представляет собой Ь или Р;

Xаа₁₇ представляет собой Н, О, 8 или V;

Xаа₁₈ представляет собой представляет собой К, К, ЬАгд, и (Сй), или η (Огп);

Xаа₁₉ представляет собой Р, Ь, 8 или отсутствует;

Хаа₂₀ представляет собой Н, О или отсутствует;

Xаа₂₁ представляет собой Т, N или отсутствует;

Хаа₂₂ представляет собой Р, Ь, М, V или Υ;

Хаа₂₄ представляет собой Р или К;

Хаа₂₇ представляет собой Т или V;

Хаа₃₀ представляет собой Е, О, К или N

Xаа₃₁ представляет собой А или Т и

Хаа32 представляет собой Р, Р или Υ.

Полезные агонисты амилина 'могут также включать аналоги, включающие аминокислотную последовательность формулы VII: Xаа₁ Хаа₂ Хаа₃ Хаа₄ Хаа₅ Т Хаа₇ Хаа₈ Хаа₉ Xаа₁₀ Хаа₁₁ Ь Xаа₁₃ Xаа₁₄ Xаа₁5 Ь Xаа₁₇ Xаа₁₈ Xаа₁₉ Xаа₂₀ Xаа₂₁ Xаа₂₂ Р Xаа₂₄ Т N Xаа₂₇ О 8 Xаа₃₀ Xаа₃^ Xаа₃₂, (8Е0 Ю N0:82), где

Xаа₁ представляет собой А, С, Р, I, К, 8 или отсутствие;

Xаа₂ представляет собой С, Ό или 8;

Хаа₃ представляет собой А, Ό или N

Хаа₄ представляет собой А, Ь или Т;

Xаа₅ представляет собой А или 8,

Xаа₇ представляет собой С или К;

Хаа₈ представляет собой А или V;

Хаа₉ представляет собой Ь или Т;

Xаа₁₀ представляет собой О, Н или О;

Хаа₁₁ представляет собой К, К или йАгд;

Xаа₁₃ представляет собой А, Р, N 8 или Т;

Xаа₁₄ представляет собой А, Ό, Е, О, N О, или К;

Xаа₁₅ представляет собой А,Е,Р,Ь, 8, или Υ;

Xаа₁₇ представляет собой Н, 8, или V;

- 13 013121

Хаа₁₈ представляет собой К, К, кЛгд, и (Сй), или η (Огп);

Хаа₁₉ представляет собой Е, Ь или 8;

Хаа₂₀ представляет собой Н или О;

Хаа₂₁ представляет собой Т или Ν;

Хаа₂₂ представляет собой Е, Ь, М, V или Υ;

Хаа₂₄ представляет собой Р или К;

Хаа₂₇ представляет собой Т или V;

Хаа₃₀ представляет собой Е, 6, К или Ν;

Хаа₃₁ представляет собой А, или Т и

Хаа32 представляет собой Е, Р или Υ.

Полезные агонисты амилина могут также включать аналоги, включающие аминокислотную последовательность формулы VIII: Хаа₁ Хаа₂ Хаа₃ Хаа₄ Хаа₅ Хаа₆ Хаа₇ Хаа₈ Хаа₉ Хаа₁₀ Хаа₁₁ Хаа₁₂ Хаа₁₃ Хаа₁₄ Хаа15 Хаа1б Хаа17 Хаа1₈ Хаа19 Хаа20 Хаа21 Хаа22 Р Хаа24 Т N Хаа27 О 8 Хаазо Хааз1 Хааз2 (8Е0 ГО N0: 83), где

Хаа₁ представляет собой А, С, Ό, Е, К, Т или отсутствие;

Хаа₂ представляет собой А, С, Ό, 8 или отсутствие;

Хаа₃ представляет собой Α, Ό, N или отсутствие;

Хаа₄. представляет собой Α, Ь, Т или отсутствие;

Хаа₅ представляет собой А или 8,

Хаа₆ представляет собой Α, 8, Т или V;

Хаа7 представляет собой А, С или К;

Хаа₈ представляет собой Α, Ь, М или V;

Хаа₉ представляет собой Ь или Т;

Хаа₁₀ представляет собой 6, Н или О;

Хаа₁₁ представляет собой К, О или К;

Хаа₁₂ представляет собой Ь, или Υ;

Хаа₁₃ представляет собой Α, Ν, О, 8 или Т;

Хаа₁₄ представляет собой Α, Ό, Е, 6, К, Ν, О или К;

Хаа₁₅ представляет собой Α, Ό, Е, Е, Ь, 8 или У;

Хаа₁₆ представляет собой Е или Ь;

Хаа₁₇ представляет собой Н, О, 8 или V;

Хаа18 представляет собой К или К;

Хаа₁₉ представляет собой Е, Ь, 8 или отсутствие;

Хаа₂₀ представляет собой Н, К, О или отсутствие;

Хаа₂₁ представляет собой О, Т или отсутствие;

Хаа₂₂ представляет собой Е, Ь или У;

Хаа24 представляет собой Р или К;

Хаа₂₇ представляет собой Т или V;

Хаа₃₀ представляет собой Е, К или Ν;

Хаа31 представляет собой А или Т и

Хаа32 представляет собой Е, Υ или отсутствие.

В общем аспекте последовательность формулы V, VI, VII или VIII, кроме того, включает 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 или более модификаций замен, вставок, делеций, удлинений и/или дериватизаций. В некоторых вариантах осуществления последовательность формулы V, VII или VIII включает делецию в положении 24. В некоторых вариантах осуществления последовательность формулы V, VI или VII включает Vа1, вставленный между аминокислотами в положениях 22 и 23. В других вариантах осуществления последовательность формулы V, VI или VII включает 61п, вставленный между положениями 22 и 23. В еще одних вариантах осуществления последовательность формулы V, VI или VII включает последовательность С1п-Т11г-Туг между положениями 22 и 23. В других вариантах осуществления последовательность формулы V, VI, или VII включает последовательность Ьеи-ОШ-ТИг-Туг (8Е0 ГО Ν0:84) между положениями 22 и 23. В другом общем аспекте модификации формулы V, VI или VII могут находиться на Ν-конце. В некоторых вариантах осуществления Ν-концевая часть формулы V, VI или VII имеет добавочный октиглицин. В других вариантах осуществления Ν-концевая часть формулы V, VI или VII имеет добавочный «изоколпачок». Другие варианты осуществления описаны в заявке РСТ № РСТ/и82005/004 631 и включены в качестве ссылки.

Примеры соединений, описанных со ссылкой на человеческий амилин (8Е0 ГО Ν0:1; ΙιΛηκΙίπ). крысиный амилин (8Е0 ГО Ν0:2; ιΑ^Ιίη) и лососевый кальцитонин (кСТ)

С8N^8ТСV^6Κ^8^Е^ΗΚ^^ТΥРКТNТ686ТР (8Е0 ГО Ν0:85) с модификациями в указанном положении (положениях), включают (1-7 1^111^1111) (¹⁸Αγ§ 8-27 кСТ) (33-37 йΑту1^η) (8Е0 ГО Ν0:86);

(1-7 1^11^1111) (^11>18Α㧲^π 8-27кСТ) (33-37 йΑту1^η) (8Е0 ГО Ν0:87);

(1-7 1^11^1111) (¹¹,¹⁸Α㧲⁴Ργο 8-27 кСТ) (33-37 йΑту1^η) (8Е0 ГО Ν0:88);

- 14 013121 (1-7 ЬАтуНп) (^1и8 Агд 8-24 §СТ) (30-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:89);

(1-7 ЬАтуНп) (^1и8 Агд 8-21 §СТ) (27-37 гАту1т) (8ЕО ГО N0:90);

(⁸Уа⁹Ье1¹⁰О1у 1-15 ЬАтуНп) (¹⁸Агд 16-27 §СТ) (31-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:91);

(¹А1а 1-7 ЬАту1т) (^1и8 Агд 8-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:92);

(³А1а 1-7 ЬАтуНпХ ^{1и 8}Агд 8-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:93);

(⁴А1а 1-7 ЬАтуНпХ ^1Ы8Агд 8-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:94);

(⁶А1а 1-7 ЬАтуНп) (^1и8 Агд 8-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:95);

(²А1а^1и8Агд 1-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:96);

(1§₀СаР-⁷А1а^1и8Агд 5-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО\0:97);

(⁴А1а^1и8Агд 1-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:98);

(⁵А1а¹¹'¹⁸ _Агд 1-27 §СТ)(33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:99);

(⁶А1а¹¹>¹⁸ _Агд 1-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:100);

(1-7 ЬАтуНп) (пАгд 8-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:101);

(¹³8ег¹⁴О1п¹⁵О1и 1-16 ЬАтуНп) (¹⁷Агд³⁰А§п³²Туг 17-32 §СТ) (8ЕО ГО N0:102); (³А1а^П'¹⁸Агд 1-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:103);

(Асе1у1-²'⁷Аду^п'¹⁸Агд 1-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:104);

(Асе1у1-²>⁷Аду 1-7 ЬАтуНп) (^П>¹⁸Агд 8-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0: 105); (18Осар-⁷А1а¹⁰А1Ь¹¹Ьу8 ( Рог) ¹⁷А1Ь¹⁸Ьу5 (Рог) 5-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:106); (15Осар-⁷А1а¹⁰А1Ь^пЕу5(Рог)¹⁷А1Ы⁸Еу5 (Рог) 5-24§СТ) (30-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:107); (1§осар-⁷А1а¹⁰А1Ь^п Ьу§(Рог) А1Ь ¹⁸Ьу§(Рог) 5-22 §СТ) (²⁸'²⁹Рго 28-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0: 108); (18осар-⁷А1а¹⁰А1Ь'^сЕу8(Рог)¹⁷А1Ь¹⁵Еу8(Рог) 5-21 §СТ) (^28>29Рго 27-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0: 109);

(1-7 ЬАтуНп) (ЕЕООА'ОКЕЕОКЕКО (8ЕО ГО N0:110)) (²⁸Рго²⁹Агд³²ТЬг 27-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0: 111);

(1-7 ЬАтуНп) (ЕЕООРОКЕЕОКЕКОУ (8ЕО ГО N0:112)) (²⁸Рго²⁹Агд³²ТЬг 28-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0: 113);

(⁶8ег 1-7 ЬАтуНп) (^1и8 Агд 8-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0: 114);

(⁶Уа1 1-7ЬАтуНп) (^п'¹⁸Агд 8-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:115);

(1-7 ЬАтуНп) (^П'¹⁸АТд8-18 §СТ) (²⁸Рго²⁹Агд³²ТЬг 27-37ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:116);

(1-7 Ату1т ( Агд 8-17 §СТ) (²⁸Рго²⁹Агд³²ТЬг 27-37ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:117);

(1-7 ЬАтуНп) (^ПАгд 8-16 §СТ) (²⁷Туг²⁸Рго²⁹Агд³²ТЬг 27-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:118);

(1-7 ЬАтуНп) (^ПАгд 8-15§СТ) (²⁷Туг²⁸Рго²⁹Агд³²ТЬг 27-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:119);

(1-7 ЬАтуНпХ) (^пАгд 8-14 §СТ) (²⁷Туг²⁸Рго²⁹Агд³²ТЬг 27-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:120);

(1-7 ЬАтуНп) (¹¹>¹⁸Ьу§ (Рог) 8-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:121);

(⁶О-ТЬТ 1-7 ЬАтуНп) (^1и8Агд 8-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0: 122);

(Асе1у1-1-7 ЬАтуНп) (^п'¹⁸Ьу§ ( РЕ65000) 8-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0: 123); (Асе1у1'А1а 1-7 ЬАтуНп) (1л8 (РЕ08000) ¹⁸АТд 8-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0: 124); (Асе1у1'А1а 1-7 ЬАтуНп) (¹¹ АТд¹⁸Ьу8 (РЕ08000) 8-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:125);

(1-7 ЬАтуНп) (^П'¹⁸Агд 8-21 §СТ) (19-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:126);

(1-7 ЬАтуНп) (^п'¹⁸Агд 8-21 §СТ) (¹⁸Ьеи 18-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:127);

(1-7 ЬАтуНп) (8-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:128);

(⁵8ег 1-7 ЬАтуНп) (^п'¹⁸Агд 8-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:129);

(1-12 ЬАтуНп) (¹⁸Агд 13-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:130);

(1-12 ЬАтуНп) (¹⁸Агд 13-24 §СТ) (30-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0: 131); (⁵8еТ¹⁵О1и¹⁸АТд1-18ЬААту1т) (19-24 §СТ) (30-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО\0:132);

(⁶Н§е 1-7 ЬАтуНп) ⁽¹¹'¹⁸Агд 8-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕрГОК0: 133); (⁶АЬЬ 1-7 ЬАтуНп) (^П'¹⁸Ахд 8-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:134);

(⁶А1а 1-7 ЬАтуНп) (^1и8Агд 8-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:135);

⁶ТЬТ(0Р0₃Н2) 1-7 ЬАтуНп) (^1и8 Агд 8-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО П)\0:1.36);

(⁷А1а ^П>¹⁸Агд 5-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0: 137);

(1-7 ЬАтуНп) (^1и8 0т 8-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:138);

(1-7 ЬАтуНп) (^1и8 СИ 8-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:139);

(1-7 ЬАтуНп) (¹¹>¹⁸ЬотоЬу5 8-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:140); (Ь-Октилглицин-1-7ЬАту1т) (^П>¹⁸Агд 8-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8Е0 ГОХ0:141); (N-3, 6-диоксаоктаноил-1-7-ЬАту1т) (^П'¹⁸Агд 8-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8Е0 ГО N0:142); (сус1о(1-7)-¹А5р⁷Ьу5¹¹'¹⁸Агд 1-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:143);

(сус1о(2-7)-²А8р⁷Ьу8 1-7 ЬАтуНп) (п¹⁸Агд 8-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0:144); (сус1о (2-7) ЬАтуНп) (^и'¹⁸Агд 8-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0: 145);

(1-7 ЬАтуНп) (^1и8Агд 8-27 §СТ) (33-37 ЬАту1т-9Апс) (8ЕО ГО N0:146);

(1-7 ЬАтуНп) (^1и8 Агд 8-27 §СТ) (33-37 ЬАту1т-Ь-ос1у1д1усте) (8ЕО ГО N0:147); (М18осаргоу1-1-7-ЬАту1т) (^п,18Агд 8-27§СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8Е0 ГО N0: 148);

(1-7 ЬАтуНп) (^П'¹⁸ЬотоАгд 8-27 §СТ) (33-37 ЬАтуНп) (8ЕО ГО N0: 14 9);

- 15 013121 (¹Р11е 1-7 ЬАтуИп) (^1и8Аг§ 8-27 §СТ) (33-37 ЬАту1ш) (81Т) ΙΌ ΝΟ: 150);

(1-7 ЬАту1т) (^11>18Аг§ 8-24 §СТ) (³²Тйг 30-37 ЬАтуПп) (81Т) ГО N0:151);

(1-7 ЬАту1т) (^1и8Аг§ 8-27 ₈С) (33-37 ЬАтуПп) (81Т) ГО N0:152);

(¹⁵61и¹⁸Аг§ 1-18 ЪАту1т) (19-24 §СТ) (30-37 ЬАту1т) (81Т) ГО N0: 153);

(¹³А1а¹⁴А8р¹⁵Рйе 1-18 ЬАту1т) (19-23 §СТ) (30-37 ЬАту1т) (81Т) ГО N0:154) и (2-18 11Ату1т) (19-23 §СТ) (30-36 ЬАту1т) (81Т) ГО N0:155).

Пептиды, которые можно использовать в композициях и способах по изобретению, подобных описанным выше, могут быть в форме кислоты или амида.

Примеры пептидов, также предназначенных для использования в композициях и способах по изобретению, включают:

- 16 013121

КСМТАТСУЬСКЪЗОЕЕНКЬОТУРКТЫТСЗМТУ	(ЗЕО ю N0: 156)
КСЫТАТСУЬСКЬ30ЕЬНВ.Ь0ТЬРКТЫТазМТ¥	(ЗЕО 30 N0: 157)
ΚϋΝΤΑΤθνΐι<3ΚΕ50ΕΙ>ΗΚΕ0ΤΥΡΡΤΝΤ(38ΝΤΥ	(ЗЕО ГО N0: 158)
Κ0ΝΤΑΤθνΕΘΚΙι30Ε1>ΗΚ.Ε0ΤΥΡΚΤΝνθ3ΝΤΥ ”	(ЗЕО ГО N0: 159)
КСЫТАТСУЕСЕЬЗОЕЬНКЬОТЕРРТ№7СЗКТУ	(ЗЕО ГО N0: 160)
ΚΟΝΤΑΤΟνΕΟΚΕΆΝΕΕΗΚΕΟΤΥΡΚΤΝΤΟδΝΤΥ	(ЗЕО ГО N0:161)
АатгАтсуьакЕЗОЕЪнкъотурктагтозмту	(ЗЕО ГО N0: 162)
КСЫААТСУЬОКЬЗОЕЬНКЬОТУРКТМТСЗМТУ	(ЗЕО ГО N0: 163)

КСИТААСУЪОКЬЗрЕЬЮШфТУРКТОТСЗКТУ (8Еф ГО ΝΟ: 164)

ΟΑΝΕδΤΟνΕΟΚΕδΟΕΕΗΚΕΟΤΥΡΚΤΝΤΟδΝΤΥ (8Еф Ιϋ ΝΟ: 165) ^зосаргоуЕЗТАУЬОКЕЗрЕЬНКЬОТУРКтаТСЗКГУ (ЗЕО ГО ΝΟ: 166)

ΟδΝΑδΤΟνΕΟΚΕδΟΕΕΗΚΕΟΤΥΡΚΤΝΤΟδΝΤΥ (8Е0 ГО N0:167)

Ο8ΝΕΑΤθνΕΟΚΕδ0ΕΕΗΚΕ0ΤΥΡΚ.ΤΝΤΟδΝΤΥ (ЗЕф ГО ΝΟ: 168)

СЗЪ1ЬЗΑΟνΕΟΚΕδφΕΕΗΚΕΌΤΥΡΚΤΝΤΟδΝΤΥ (ЗЕО ΠΟΝΟ: 169)

ΚΟΝΤΑΤΟνΕΟΚΕδΟΕΕΗΚΕΟΤΥΡΚΤΝΤΟδΝΤΥ (ЗЕф ГО N0:170)

КСНТАТСУЕОКЬЗфЕЬННЬрТУРКТЫТОЗОТР (ЗЕО ΙϋΝ0:171) σδΑΕδΤσνΕΟΚΕδφΕΕΗΚΕφΤΥΡΕΤΝΤΟδΝΤΥ (δΕφ ГО N0: 172)

Ас-(А8у)8НЬ8Т(Аву)νΕΟΚΕδΟΕΕΗΚΕΟΤΥΡΚΤΝΤΟδΝΤΥ (ЗЕф ГО N0:173) Ас-К(А§у)ЫТАТ(А§у) νΕΟΚ130ΕΕΗΡΕ0ΤΥΡΡΤΝΤΟ3ΝΤΥ (8Εφ ГО ΝΟ: 174) 1зосаргоу1-ЗТАУЕ(А1Ь)КЕ80ЕЕКЕОТУРКТНТОЗОТР (3Ε0 ΙϋΝΟ: 175)

ГзосаргоуЬЗТАУЬС [К(Рог)]Е80ЕШ[К(Рог)]ЕСТУРКТЫТО8ОТР (ЗЕО ГО ΝΟ: 176)

180саргоу1-8ТАУЕ(А1Ь)[К(Гог)]Е80ЕЬ(А1Ь)[К(Рог)]ЕрТ¥РКТМТ08ШУ (ЗЕО ГО N0:177) 1зосаргоуЕ8ТЛУЕ(А1Ь)[К(Рот)]Е80ЕЕ(А1Ь)рС(Гог)]Е0ТУРКТКУО8КТУ (8Εφ ГО N0: 178) ΚΟΝΤΑΤΟΕΕΟΟΕΟΚΕΕΟΚΕΚΟΥΡΚΤΝΤΟδΝΤΥ (δΕφ ГО N0:179)

ΚΟΝΤΑδΟνΕΟΕΕδΟΕΕΗΚΕφΤΥΡΚ,ΤΝΤΟδΝΤΥ (ЗЕф ГО ΝΟ: 180)

ΚΟΝΤΑνονΕΟ^δφΕΕΗί^φΊΎΡΚΤΝΤΟδΝΊΎ (ЗЕфГО N0:181)

ΚΟΝΤΑΤΟνΕΟΚΕδφΕΕΗΚΥΡΚΤΝΤΟδΝΤΥ (ЗЕф ГО ΝΟ: 182)

ΚΟΝΤΑΤθνΕΟ[Κ(ΡθΓ)]Ε80ΕΕΗ[Κ(ΡθΓ)Ε]0ΤΥΡΚΤΝΤΟ8ΝΤΥ (ЗЕф ГО N0:183)

ΚΟΝΤΑ(ά-Τ1ΐΓ)θνΕΟΚΕ8φΕΕΗΚΕ0ΓΥΡΕΤΝΤΟ8ΝΊΎ (3Ε<2 ГО ΝΟ: 184)

ΚΟΝΤА(<1АЬ)СνΕ0ΚΕ8φΕΕΗΚΙΧ)ΤΥΡΚ·ΤΝΤ08ΝΤΥ (8Ε0 ГО ΝΟ: 185)

Αο-ΑΟΝΤΑΤθνΕΟΚΕ80ΕΕΗΚ(ΡΕ05000)ΕΟΤΥΡΚ.ΤΝΤΟδΝΤΥ (ЗЕф ГО N0:186)

ΚΟΝΤΑΤΟνΕΟΚΕδΟΕΕΗΚΕΟΤΕΟΤΥΡΚΤΝΤΟδΝΤΥ (8Εζ) ГО ΝΟ: 187) ΚΟΝΤΑΤΟΥΕΟΚΕδΟΕΕΗΚΕΟΤΕΕΟΤΥΡΚΤΝΤΟδΝΊΎ (ЗЕО ГО ΝΟ: 188)

ΚΟΝΤΑΤΟνΕΟΚΕδςΕΕΗΚΕςΤΥΡΚΤΝΤΟδΝΤΥ (ЗЕф ГО N0: 189) ΚΟΝΤδΤΟνΕΟΚΕδΟΕΕΗΚΕΟΤΥΡΚ-ΤΝΤΟδΝΤΥ (δΕφ ГО ΝΟ: 190) ΚΟΝΤΑ ΤΟΑΤ0ΗΕ50ΕΕΗΗΕ0ΤΥΡΚΤΝΤΟ3ΝΤΎ (8Εφ ГО N0:191)

ΚΟΝΤΑΤΟΑΤΟΚΕδΟΕΕΗΚΕΟΊΎΡΚΤΝνΟδΝΊΎ (8Εφ ГО ΝΟ: 192)

ΚΟΝΤδΤΟΑΤΟΚΕΑΝΕΕνΚΕφΤΥΡΚΤΝνΟδΝΤΥ (8Εφ ГО ΝΟ: 193)

Κ0ΝΤΑ(Ηδβ)0νΕ0ΐα8φΕΕΗΙ^φΤΥΡΚΤΝΤ08ΝΤΥ (8Ε0 ГО N0:194) Κ0ΝΤΑ(ΑΕ6)θνΕ6ΚΕ80ΕΕΗΚΕ0ΤΥΡΚ.ΤΝΤΟ8ΝΤΥ (ЗЕф ГО N0: 195) Κ0ΝΤΑ(Α1ιρ)θνΕΟΚΕ80ΕΕΗΚΕ0ΤΥΡΚΤΝΤΟ8ΝΤΥ (8Ε<3 ГО ΝΟ: 196) ΚΟΝΤΑΤ(ΟΡΟ ₃Η₂)ενΕΟΚΕ50ΕΕΗΚΕρτΥΡΚΤΝΤα8ΝΤΥ (ЗЕО ГО N0:197)

ΚΟΝΤΑΤθνΕΟ(Οτη)Ε80ΕΕΗ(Οπι)Ε0ΤΥΡΚΤΝΤα8ΝΤΥ (8Ε<2 ГО N0:198)

- 17 013121

Κ0ΝΤΑΤ0νΕΟ(0ΐΐ)Ε8ρΕΕΗ(Οΐί)ΕΡΊΎΡΚΤΝΤΟ8ΝΤΥ (ЗЕр ГО ΝΟ: 199)

Κ0ΝΤΑΤ0νΕΟ(ΗΚ)Ε8ρΕΕΗ(1ιΚ)ΕρΤΥΡΚΤΝΤΟ8ΝΤΥ (ЗЕр ГО N0:200)

Ε-ΟισΗΓΠΠ4ΜΗΚ0ΝΤΑΤ0νΕ(3ΚΕ8ρΕΕΗΚΕρΤΥΡΚΊΝΤΟ8ΝΊΎ (ЗЕр ГО N0:201)

Ν-3.ό4ΐΜθΚ030ΐσ3Η0Ππ-ΟΝΤΑΤ0νΕ6ΚΕ8ρΕΕΗΚΕρΊνΡΚΊΝΤΟ8ΝΊΎ (ЗЕр ГО N0:202)

ΚΟΝΤΑΤΟΜΕΟΚΥΤρΟΓΗΚΕρΊΎΡΚΤΝΤΟδΝΤΥ (ЗЕр ГО N0:203)

Ο8ΝΕ8ΤΚνΕΟΚΕ8ρΕΕΗΚΕρΊΎΡΚΊΝΤΟ8ΝΤΥ (ЗЕр ГО N0:204)

ΚΟΝΤΑΤΚνΕΟΚΕδρΕΕΗΚΕρΤΥΡΚΊΝΤΟδΝΊΎ (ЗЕр ГО N0:205) σΝΓΑΤΟνΕΟΚΕδρΕΕΗΚΕρΊΎΡΚΊΝΤΟδΝΤΥ (ЗЕр ГО N0:206)

ΚΟΝΤΑΤθνΕΟΚΕ8ρΕΕΗΚΕρΤΥΡΚΤΝΤΟδΝΤΥ(9Αηο) (ЗЕр №N0:207)

ΚΟΝΤΑΤθνΕΟΚΕ3ρΕΕΗΚΕρΤΥΡΕΤΝΤ08ΝΤΥ(Ε-οοίγ1§1γοίηε) (ЗЕр №N0:208)

Ν-ί8θ03ρΓογ1-Κ0ΝΤΑΤ0νΕΟΚΕ8ρΕΕΗΚΕΡΊΎΡΚΤΝΤΟ8ΝΊΎ (ЗЕр №N0:209)

ΚΟΝΤΑΤ0νΕΟ(ΗΚ)Ε8ΡΕΕΗ(1ιΚ)ΕρΤΥΡΚΤΝΤΟ8ΝΊΎ (ЗЕр ГО N0:210)

ΡΟΝΤΑΤΟνΕΟΚΕδρΕΕΗΚΕρΊΎΡΚΤΝΤΟδΝΤΥ (ЗЕр ГО N0:21 1)

Κ0ΝΤΑΤ0νΕΟΚΕ8ρΕΕΗ(0ΐί)ΕρΊΎΡΚΤΝΤΟ8ΝΊΎ (ЗЕр ГО N0:212)

КСШАТСУЬС1Ш8рЕЕН(0т)Ер1УРЯтаТР8ЦТУ (ЗЕр №N0:213)

ΙΟΝΤΑΤΟνΕΟΚΕδρΕΕΗΚΕρίΎΡΚΊΝΤΟδΝΊΎ (ЗЕр ГО N0:214)

-Октиглицин -ΟΝΤΑΤθνΕΟΚΕ8ρΕΕΗΚΕρΤΥΡΚΤΝΤΟ8ΝΤΥ (ЗЕр ГО N0:215) ΐ8003ρΓογ1-ΟΝΤΑΤ0νΕΟΙ№δρΕΕΗΙ№ρΊΎΡΚΤΝΤ68ΝΤΥ

ΚΟΝΤΑΤ0νΕΟ(Οίί)Ε8ρΕΕΗΚΕρΤΥΡΚΤΝΤΟ8ΝΊΎ (ЗЕр ГО N0:217)

ΚΟΝΤΑΤθνΕΟΙ№8ρΕΕΗ]№ρΊΎΡΚΤΝΤΟδΝΤΥ(4ΑΒυ) (ЗЕр218)

Еосаргоу! -ΚΟΝΤΑΤΟ νΕΟΚΣ5ΡΕΕΗΚΕρΤΥΡΚΤΝΤΟ3ΝΤΥ(4ΑΒυ) (ЗЕр №N0:219)

ΚΟΝΤδΤΟΑΤρΚΕΑΝΕΕνΚΕΡΊΎΡΚΊΝνΟδΕΑΡ220)

КСКГАТСУЬОКЬЗрЕЕНКЕрТУРТЫУОЗЕАГ

Κ0ΝΤΑΤ0νΕΟΚΕ8Κ8ΕΗΚΕρΊΎΡΚΤΝΤΟ8ΝΤΥ

ΚΟΝΤΑΤΟνΤΗΚΕδρΕΕΗΚΕΡΊΎΡΚΤΝΤΟδΝΤΥ

ΚΟΝΤΑΤΟνΕΟΚΕΑΟΡΕΗΚΕΡΊΎΡΚΤΝΤΟδΝΊΎ

СЫТАТСУЪОКЬЗРЕЕНКЬрТУРКТЫТОЗКТ

ΚΟΝΤΑΤΟνΕΟΚΕδρΕΕΗΚΕΡΝΓνΡΚΤΝΤσδΝΤΥ

224)

225)

ΚΟΝΤΑΤθνΕΟΚΕ8ρΕΕΗΚΕρΤΥΡΚΤΝΤ68ΕΊΤ (ЗЕр №N0:227)

ΑΟϋΤΑΤΟνΕΟΚΕδρΕΕΗΚΕρΊΎΡΚΤΝΤΟδΝΊΎ (ЗЕр № N0:228) Κ0ΝΤΑΤ0νΕΟΙ№8ρΕΕΗΙ№ρΤΥΡΚΊΝΤ68ΚΑΓ (ЗЕр № N0:229)

ΚΟϋΤΑΤΟνΤΗΚΕΑσΕΕδΚδρΊΎΡΚΊΝίΤΟδΝΤΥ (ЗЕр ГО N0:230) ΚΟΝΤΑΤΟνΕΟΚΕΑϋΑΕΗΚΕρΊΎΡΚΤΝΤΟδΝΤΥ (ЗЕр ГО N0:231) ΚΟΝΤΑΤΟνΕΟΚΕΑΑΓΕΗΕΕρΤΥΡΚΤΝΤΟδΝΤΥ (ЗЕр ГО N0:232) 80ΝΤΑΤ0νΕΟΚΕΑΟΡΕΗΚΕρΤΥΡΚΊΝΤΟ5ΝΤΥ (ЗЕр ГО N0:233)

ΚΟΝΤΑΤ0νΕΟΚΕ8()ΕΕΗΚΕρΤΜΡΚΤΝΤΟ8ΝΤΥ (8Ε0 Ш N0:234) Κ0ΝΤΑΤ0νΕ6Κ£89ΕΕΗΚΕ0ΤνΡΚΤΝΤΟ8ΝΤΥ (δΕζ) ΙΟ N0:235) ΚΟΝΤΑΤΟνΕΟΚΕΝΕΥΕΙΙΚΕρΤΥΡΚΤΝΤΟδΝΤΥ (8Εζ) Ю N0:236) δΟΝΤΑΤΟνΕΟΚΕδρΕΕΗΚΕρΊΎΡΚΤΝΤΟδΝΤΥ (8Ε0 ГО N0:237) ΚΟΝΤΑΤΟνΕΟΚΕΤΕΓΕΙΙΚΕρΤΥΡΚΤΝΤΟδΝΤΎ (8Ер ГО N0:238) ΚΟΝΤΑΤ0\ΤΟΚΕΑΕΓΕΠΚΕ0ΤΥΡΚΤΝΤΟ8ΝΤΥ (8ЕС) ΙΟ N0:239) Κ0ΝΤΛΤ0νΕ(3ΚΕΤΏΥΕΗΚΕρΤΥΡΚ.ΤΝΤ0·8ΝΤΥ (8Εζ? ΙΌ N0:240) ΚΟΝΤΑΤΟνΕΟΚΕΑρΕΕΗΚΕρΤΥΡΚΤΝΤΟδΝΤΥ (8Е<Э ГО N0:241) ΚΟΝΤΛΤΟνΕΟΚΕΑϋΓΕΗΚΓρΤΡΡΚΤΝΤΟδΝΤΥ (8Ε() ГО N0:242) ΚΟΝΤΑΤΟνΕΟΚΕΑΟΡΈΙΙΡΓΗΤΕΡΚΤΝΤσδΝΤΥ (8Ε(? Π)ΝΟ:243) ΚΟΝΤΑΤΟνΕΟΚΕΑΟΕΕΗΚΡΟΊΤΡΚΤΝΤΟδΟΤΡ (8Ε0 ГО N0:244) ΟΝΤΑΤΟνΕΟΚΕΑΟΓΕΗΚΕρΤΥΡΚΤΝΤΟδΝΤΥ (8Ε() Ш N0:245) ΚΟΟΤΑΤΟνΕϋΙΗ^ΕΧΗ^ΤΥΡΚΤΝΤΟδΝΤΥ (8Ε() ГО N0:246) ΚΟΝΤΑΤΟνΕΟΚΕΓΟΓΕΗΚΕΟΤΥΡΚΤΝΤΟδΝΤΥ (8Ε<2 ϊϋΝΟ:247) Κ0ΝΤΑΤ0νΕΟΚ.ΕΑΑΑΕΙ1ΚΕρΤΥΡΚ.ΤΝΤ68ΝΤΥ (δΕζ) ГО N0:248) Τ0ΟΤΑΤ0νΕΟΚΕ8ζ>ΕΕΗΚΕζ)ΤΥΡΚΤΝΤΟ8ΝΤΥ (8Ε<3 ГО N0:249) ΟδΝΕδΤΟΑΤΟΚΕΑΝΕΕνΚΕςΤΥΡΚΤΝνΟδΝΤΥ (8Ε0 ГО N0:250) ΚΟΝΤΑΤΟΑΤρΚΕΑΝΕΕνΚΕρΤΥΡΚΤΝνΟδΝΤΥ (8Ер ΙϋΝΟ:251) ΟδΝΕδΤΟνΕΟΗΕδςΕΕΓΙΚΕρΤ^ΚΓΝΤΟδΝΤΥ (8Ер ГО N0:252) ΚΟΝΤΑΤ0νΕΟΚΕ89ΕΕΗΚΕ0ΤΥΡΚΤΝΤΟ8ΝΤΥ (8Ες ГО N0:253).

В некоторых вариантах осуществления особое применение в раскрытых способах находят соединения, включающие аминокислотную последовательность

КСЫТАТСУЬОКЬЗрЕЬНКЬрТУРВТЫТОЖГУ (8Ер ΙΌ N0:253).

В способы по изобретению также включены производные агонистов и аналогов, в которых стереохимия отдельных аминокислот может быть инвертирована из (Ь)/8 в (Ό)/Β в одном или более специфических сайтах. Также включены в способы по изобретению агонисты и аналоги, модифицированные гликозилированием остатков Азп, 8ег и/или ТНг. Соединения, которые можно использовать в способах по изобретению, могут также представлять собой биологически активные фрагменты описанных здесь пептидов (нативных, агонистов, аналогов и производных).

В способы по изобретению включены агонисты и аналоги амилина, которые имеют менее пептидный характер. Такие пептидные миметики могут включать, например, одно или более из следующих замещений на амидные связи -СО-ΝΗ-: депсипептиды (-С0-0-), иминометилены (-СН₂-ЫН-), транс-алканы (-СН=СН-), бета-енаминонитрилы (^(=€Η^Ν)-ΝΗ-), транс-алкены (--СН=СН-), бета-енаминонитрилы (-^=ΟΗ-ΟΝ)-ΝΗ-), тиоамиды (--СЗ-ΝΗ-), тиометилены (-8-СН₂- или -СН₂-8-), метилены (-СН₂-С₂-) и ретроамиды (-ЫН-СО-).

Соединения для использования в способах по изобретению образуют соли с различными неорганическими кислотами и органическими кислотами и основаниями. Такие соли включают соли, полученные с органическими и неорганическими кислотами, например НС1, НВг, Н₂80₄, Н₃РО₄, трифторуксусная кислота, уксусная кислота, муравьиная кислота, метансульфоновая кислота, толуолсульфоновая кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота и камфорсульфоновая кислота. Соли, полученные с основаниями, включают, например, соли аммония, соли щелочных металлов (такие как соли натрия и калия) и соли щелочноземельных металлов (такие как соли кальция и магния). В некоторых вариантах осуществления соединения образуют ацетаты, гидрохлориды и трифторацетаты.

Агонисты амилина, которые можно использовать в композициях и способах по изобретению, могут также включать фрагменты амилина и его аналоги, как описано выше, а так же, как те, которые описаны в ЕР 289287, содержание которых включено сюда в качестве ссылки. Агонисты и аналоги амилина могут также представлять собой соединения, имеющие по меньшей мере 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95 или 99% идентичность последовательности с ВЕС) ΙΌ Ν0:1, или любой из аналогов амилина, конкретно описанный здесь, имеющий активность амилина. Агонисты амилина также включают мелкие химические молекулы и непептидные молекулы, например молекулы на основе мелкомолекулярной химии. В некоторых вариантах осуществления агонисты амилина не представляют собой мелкие химические молекулы.

Используемый здесь термин «активность амилина» может включать по меньшей мере один из видов активности, известный в данной области, как описано выше. Активность амилина может также включать способность амилина модулировать стрессовую реакцию, воздействовать на активность ОС и/или СЕВ в организме. Желательные агонисты амилина или аналоги амилина могут иметь по меньшей мере одно свойство, разделяемое антипсихотическими, антидепрессантными и анксиолитическими средствами, используемыми здесь в примерах 2 и 3. Агонисты и аналоги амилина также включают вставки, делеции, удлинения, усечения и/или замещены по меньшей мере в одном или более положениях амино

- 19 013121 кислот 8ЕО ΙΌ ΝΟ:1, или любые из аналогов амилина, конкретно описанные здесь. Количество аминокислотных вставок, делеций или замен может составлять по меньшей мере 5, 10, 15, 20 или 25 аминокислотных вставок, делеций или замен. Количество аминокислотных вставок, делеций или замен может составлять не более чем 5, 10, 15, 20, 25 или 30 аминокислотных вставок, делеций или замен. Вставки, удлинения или замены могут осуществляться другими натуральными аминокислотами, синтетическими аминокислотами, пептидомиметиками или другими химическими соединениями. Предусмотрено, что в некоторых вариантах осуществления агонисты амилина, которые можно использовать в определенных вариантах осуществления, могут не включать кальцитонины и/или ССКР. Например, в некоторых вариантах осуществления кальцитонины и/или ССКР могут быть исключены из объема агонистов амилина при лечении расстройств настроения, тревожных расстройств или расстройств, связанных с химическими веществами. Однако кальцитонины и/или ССКР могут быть включены в объем агонистов амилина по поводу других состояний, подобных расстройств сна или потребления пищи. Аналогичным образом, в некоторых вариантах осуществления агонисты амилины, которые можно использовать в способах по изобретению, могут не включать аналоги кальцитонина и/или ССКР.

В целом, агонисты амилина или аналоги агонистов амилина рассматриваются как относящиеся к соединениям, которые путем прямого или непрямого взаимодействия или связывания с одним или более рецепторами, имитируют действие амилина. Их можно также именовать амилиномиметиками.

Активность в качестве агонистов и/или аналогов амилина можно подтвердить и количественно определить выполнением различных скрининговых анализов, включая анализ связывания с пис1еик асситЬепк, анализ подошвенной мышцы, анализ опорожнения желудка или по способности вызывать гипокальцемию или уменьшить гипергликемию после приема пищи у млекопитающих. Способы тестирования соединения для выявления амилиновой активности известны в данной области. Примеры методов скрининга и анализов для тестирования агонистов амилина описаны в патентах США №№ 5264372 и 5686411, которые включены сюда в качестве ссылки.

Анализ связывания с рецепторами, конкурентный анализ, который измеряет способность соединений специфически связываться со связанными с мембранами рецепторами амилина. Предпочтительный источник мембранных препаратов, используемых в анализе, представляет собой базальный передний мозг, который включает мембраны из пис1еик асситЬепк и окружающих областей. Подвергаемые анализу соединения конкурируют за связывание с этими рецепторными препаратами с крысиным амилином ¹²⁵Ι ВоНоп Нип!ег. Конкурентные кривые, отражающие зависимость связанного количества (В) от логарифма концентрации лиганда, анализируют компьютером, используя анализы нелинейной регрессии до 4параметрического логистического уравнения (программа ЮТЬОТ, программное обеспечение Ο^ρ^ΡΑΏ, 8ап О|едо. СΑ), или программа ИеЬеап е! а1. (ΑΕΕΙΡΤ, версия 2.7 (ΝΙΗ, ВеШекФа, МФ. 20892)). Мапкоп е! а1. (1980) Α^1. Вюсйет. 107:220-239.

Анализы биологической активности агонистов/аналогов амилина в подошвенной мышце можно выполнять с использованием ранее описанных способов (ЪещЫоп е! а1. (1988) №11иге 335:632-635; Соорег е! а1. (1988) Ргос. №!1. ΑсаΦ. 8сЬ υδΑ 85:7763-77 66), в которых активность агонистов амилина можно оценить измерением ингибирования стимулированного инсулином синтеза гликогена. Вкратце, иллюстративный способ включает полоски подошвенной мышцы, полученные у самцов крыс ^1к!аг, голодавших 12 ч. Сухожилия мышц перевязывают перед прикреплением к скобкам из нержавеющей стали. Мышечные полоски предварительно инкубируют в колбах Ег1ептеуег, содержащих 3,5 мл бикарбонатного буфера Кребса-Рингера, 7 мМ №2-гидроксиэтилпиперазин-№-2-этансульфоновую кислоту, рН 7,4 и 5,5 мМ пирувата. Колбы герметизируют и постоянно газируют О₂ и СО₂ в соотношении 19:1 (об./об.). После предварительной инкубации мышц в этой среде в течение 30 мин при 37°С на осциллирующей водяной бане мышечные полоски переносят в аналогичные флаконы, содержащие идентичную среду (за исключением пирувата) с добавленной [и-¹⁴С] глюкозой (0,5 мкКи/мл) и инсулином (100 мкЕд/мл). Колбы герметизируют и повторно газируют в течение первоначальных 15 мин при 1-часовой инкубации. В конце периода инкубации мышцу подвергают блоттингу и быстро замораживают в жидком Ν₂. Концентрацию лактата в инкубационной среде можно определить спектрофотометрически с измеренным включением [и-¹⁴С] глюкозы в гликоген.

Способы измерения скорости опорожнения желудка описаны, например, в публикации Уоипд е! а1. (1995) О|аЬеЮ1од1а 38:642-648. В методе фенола красного находящиеся в сознании крысы получают внутрь бескалорийный гель, содержащий метилцеллюлозу и индикатор фенол красный. Через 20 мин после введения животных наркотизируют, используя галотан, желудок выделяют и накладывают зажимы у пилорического и нижнего пищеводного сфинктеров, желудок удаляют и вскрывают, помещая в щелочной раствор. Содержимое желудка можно вывести по интенсивности окрашивания щелочного раствора фенолом красным, измерить спектральной поглощательной способностью при длине волн 560 нм. В тритиевом глюкозном способе находящимся в сознании крысам внутрь вводят тритиевую глюкозу в воде. Крыс осторожно иммобилизуют за хвост, кончик которого анестезируется с использованием лидокаина. Тритий в плазме, отделенной от крови, взятой из хвоста, собирают в различные моменты времени и выявляют в бета счетчике. Тестируемые соединения обычно вводятся примерно за 1 мин до введения

- 20 013121 внутрь.

Соединения агонистов амилина могут проявлять активность в анализе связывания с рецепторами на порядок меньше, чем примерно 1-5 нМ, в некоторых вариантах осуществления менее чем примерно 1 нМ, и в некоторых вариантах осуществления менее чем примерно 50 пкМ. В анализе подошвенной мышцы соединения агонистов амилина могут проявлять величины ЕС₅₀ на порядок меньше, чем примерно 1-10 мкМ. В анализах опорожнения желудка соединения агонистов амилина могут проявлять величины ЕС50 на порядок меньше, чем 100 мкг/крысу.

В одном примере способа получения соединений соединения по изобретению могут быть получены с использованием стандартной методики твердофазного пептидного синтеза, например, с использованием автоматизированного или полуавтоматизированного пептидного синтезатора. Обычно при использовании таких методик, защищенная α-Ν-карбамоилом аминокислота и аминокислота, прикрепленная к растущей пептидной цепи, на смоле соединяются при комнатной температуре в инертном растворителе, таком как диметилформамид, Ν-метилпирролидон или метиленхлорид, в присутствии связывающих агентов, таких как дициклогексилкарбодиимид и 1-гидроксибензотриазол, в присутствии основания, такого как диизопропилэтиламин. α-Ν-карбамоил защитную группу удаляют из полученного пептидасмолы с использованием реагента, такого как трифторуксусная кислота или пиперидин, и реакцию соединения повторяют со следующей желательной Ν-защищенной аминокислотой, которую предстоит добавить к пептидной цепи. Подходящие Ν-защитные группы хорошо известны в данной области, причем предпочтительными здесь являются т-бутилоксикарбонил (!Вос) и фторэнилметоксикарбонил (Етос). Другие способы синтеза или экспрессии амилина и агонистов амилина и их очистки известны специалисту в данной области.

Составление/введение/дозировка

Амилин, агонисты амилина, аналоги амилина и производные амилина (именуемые в этом разделе «соединениями») можно вводить отдельно или в комбинации с фармацевтически приемлемыми носителями или эксципиентами, в одной или множественных дозах. Эти фармацевтические соединения могут быть составлены с фармацевтически приемлемыми носителями или разбавителями, а также любыми другими известными адъювантами и эксципиентами в соответствии с обычными методиками, такими как методики, описанные в руководстве Кеттд!ои'к РЕагтасеи!1са1 8с1еисек Ьу Е/Ψ. Магйи. См. также ^аид е! а1. (1988) 1оита1 о£ Рагеи!ега1 8с1еисе аий Тесйио1оду Тес11шса1 Керой №. 10, 8ирр1. 42:28.

В целом, соединения можно составлять в стабильную, безопасную фармацевтическую композицию для введения пациенту. Фармацевтические препаративные формы, предусмотренные для применения в описанных здесь способах, могут включать приблизительно от 0,01 до 6,0% (мас./об.) или от 0,05 до 1,0% соединения; приблизительно от 0,02 до 0,5% (мас./об.) ацетатного, фосфатного, цитратного или глутаматного буфера, обеспечивающего возможность поддержания рН конечной композиции на уровне от примерно 3,0 до примерно 7,0; приблизительно от 1,0 до 10% (мас./об.) агента тоничности в виде углеводорода или многоатомного спирта и, необязательно, приблизительно от 0,005 до 1,0% (мас./об.) консерванта, выбранного из группы, состоящей из м-крезола, бензилового спирта, метил-, этил-, пропил- и бутилпарабенов и фенола. Такой консервант в целом включается, если включенный в состав пептид предстоит включить в продукт множественного применения.

В некотором варианте осуществления фармацевтическая препаративная форма может содержать диапазон концентраций соединения, например, от примерно 0,01% до примерно 98% (мас./об) или от примерно 1 до примерно 98% (мас./об.), или от 80 до 90% (мас./об.), или от примерно 0,01 до примерно 50% (мас./об.), или от примерно 1,0 до примерно 25% (мас./об.) в этом варианте осуществления. Для получения желательной концентрации раствора можно использовать достаточное количество воды для инъекций.

При желании, могут также присутствовать дополнительные агенты, придающие тоничность, такие как хлорид натрия, а также другие известные эксципиенты. В некоторых случаях такие эксципиенты можно использовать при поддержании общей тоничности препаративной формы. Эксципиент может быть включен в описанные здесь препаративные формы в различных концентрациях. Например, эксципиент может быть включен в диапазоне концентрации от примерно 0,02 до примерно 20% (мас./мас.), от примерно 0,02 до 0,5% (мас./мас.), от примерно 0,02 до примерно 10% (мас./мас.), или от примерно 1 до примерно 20% (мас./мас.).

Кроме того, аналогично самим настоящим препаративным формам, эксципиент может быть включен в твердой (включая порошкообразную), жидкой, полутвердой или гелевой форме.

Как описано здесь, для использования в пептидных препаративных формах по изобретению подходят разнообразные жидкие носители, например вода или смесь, или суспензия водного/органического растворителей. Фармацевтические препаративные формы могут быть составлены в различных видах, например, твердом, полутвердом или жидком.

Используемый здесь термин «твердая» предназначен для охвата всех обычных видов применения этого термина, включая, например, порошки и лиофилизированные препаративные формы. Описанные здесь препаративные формы могут быть лиофилизированными.

- 21 013121

Термины «буфер, буферный раствор и забуференный раствор» при использовании со ссылкой на концентрацию иона водорода или рН, относятся к способности системы, в частности, водного раствора, противодействовать изменению рН после добавления кислоты или щелочи, или разбавления растворителем. Для забуференных растворов, которые подвергаются небольшим изменениям рН после добавления кислоты или основания, характерно присутствие или слабой кислоты и соли слабой кислоты, или слабого основания и соли слабого основания. Примером указанной первой системы является уксусная кислота и ацетат натрия. Изменение рН незначительно, пока количество добавленного иона гидроксония или гидроксильного иона не превышает емкость буферной системы для ее нейтрализации.

Стабильность пептидной препаративной формы повышается поддержанием рН препаративной формы в диапазоне от примерно 3,0 до примерно 7,0 при жидкой форме. В одном варианте осуществления рН препаративной формы поддерживается в диапазоне от примерно 3,5 до примерно 5,0 или от примерно 3,5 до примерно 6,5, или от примерно 3,7 до примерно 4,3, или от примерно 3,8 до примерно 4,2. Определенный рН может составлять примерно 4,0. Не желая быть связанными с данной теорией, в настоящее время считают, что в некоторых вариантах осуществления, когда рН фармацевтической препаративной формы превышает 5,5, химическое разрушение пептида можно ускорить, так что период хранения составит менее чем примерно 2 года.

В некоторых вариантах осуществления буфер, используемый в практике способов по изобретению, представляет собой ацетатный буфер (обычно при конечной концентрации в препаративной форме примерно от 1 до 5 мМ, например, от 1,5 мМ до примерно 60 мМ) , фосфатный буфер (обычно при конечной концентрации в препаративной форме примерно от 1 до 5 мМ, например, от 1,5 мМ до примерно 30 мМ), или глутаматный буфер (обычно при конечной концентрации в препаративной форме примерно от 1 до 5 мМ, например от 1,5 до примерно 60 мМ) . В одном варианте осуществления буфер представляет собой ацетат в конечной концентрации в препаративной форме от примерно 5 до примерно 30 мМ.

В препаративную форму по изобретению может быть включен стабилизатор, и важно, что в нем нет необходимости. Однако, при включении, стабилизатор, который можно использовать при получении препаративной формы по изобретению, представляет собой углеводород или многоатомный спирт. Подходящий стабилизатор, который можно использовать при осуществлении способов по изобретению, представляет собой приблизительно от 1,0 до 10% (мас./об.) углеводорода или многоатомного спирта. Многоатомные спирты и углеводороды разделяют одни и те же признаки в своей основной цепи, т.е. СНОН-СНОН-, который ответственен за стабилизацию белков. Многоатомные спирты включают такие соединения, как сорбит, маннит, глицерин и полиэтиленгликоли (РЕО). Эти соединения представляют собой прямоцепочечные молекулы. С другой стороны, углеводороды, такие как манноза, рибоза, сахароза, фруктоза, трегалоза, мальтоза, инозит, представляют собой циклические молекулы, которые могут содержать кето или альдегидную группу. Было продемонстрировано, что эти 2 класса соединений эффективны при стабилизации белка против денатурации, вызванной повышенной температурой и замораживанием-оттаиванием, или процессом лиофилизации. В вариантах осуществления, при которых у индивидуумов имеется диабет, подходящие углеводороды включают галактозу, арабинозу, лактозу или любой другой углеводород, который не оказывает побочных эффектов на пациента с диабетом, т.е. углеводород не метаболизируется с получением неприемлемо больших концентраций глюкозы в крови. Такие углеводороды хорошо известны в данной области как подходящие для больных диабетом. Сахароза или фруктоза подходят для использования с соединением у индивидуумов, не страдающих диабетом.

В некоторых вариантах осуществления, если включен стабилизатор, то соединение стабилизируется многоатомным спиртом, таким как сорбит, маннит, инозит, глицерин, ксилит и сополимер полипропилена/этиленгликоля, а также различными РЕО с молекулярными массами 200, 400, 1450, 3350, 4000, 6000 и 8000). Маннит представляет собой пример конкретного многоатомного спирта. Другим полезным признаком описанных здесь лиофилизированных препаративных форм является поддержание тоничности лиофилизированных препаративных форм тех же компонентов препаративных форм, которые служат для поддержания их стабильности. Маннит представляет собой конкретный многоатомный спирт, используемый для этой цели.

В Фармакопее США (И8Р) указано, что к препаратам, содержащимся в контейнерах множественных доз, должны добавляться противомикробные средства в бактериостатических или фунгостатических концентрациях. Они должны присутствовать в адекватной концентрации во время применения для предотвращения размножения микроорганизмов, неизбежно вводимых в препарат при удалении части содержимого иглой для подкожных инъекций и шприцем, или с использованием другого инвазивного средства для доставки, такого как инжектор. Следует провести оценку противомикробных средств для того, чтобы удостовериться в их совместимости со всеми другими компонентами состава, и их активность следует оценить в общем составе для того, чтобы удостовериться в том, что конкретный агент, который эффективен в одной препаративной форме, не является неэффективным в другой препаративной форме. Нередко обнаруживается, что конкретное противомикробное средство эффективно в одной препаративной форме, но неэффективно в другой препаративной форме.

Консервант в обычном фармацевтическом смысле представляет собой вещество, которое предотвращает или ингибирует микробный рост и может добавляться к фармацевтическим препаративным

- 22 013121 формам с этой целью во избежание последующей порчи препаративной формы микроорганизмами. Хотя количество консерванта невелико, оно тем не менее может воздействовать на общую устойчивость пептида.

Хотя количество консерванта для использования в фармацевтических композициях может находиться в диапазоне от 0,005 до 1,0% (мас./об.), обычный диапазон для каждого консерванта, отдельно или в комбинации с другими, составляет: бензиловый спирт (0,1-1,0%), орм-крезол (0,1-0,6%) или фенол (0,1-0,8%) или комбинацию метил (0,05-0,25%) и этил- или пропил-, или бутил- (0,005-0,03%) парабенов. Парабены представляют собой сложные эфиры низших алкилов пара-гидроксибензойной кислоты. Подробное описание каждого консерванта представлено в документах Кешшдоп'к РБагтасеийса1 8с1епсек, а также Рйагтасеи1юа1 Эокаде Рогтк: Рагеп!ега1 Мейюайопк, ^1. 1, 2пй ей., Ау1к е1 а1. Ей., Мегсе1 Эеккег, \е\\ Уогк, ΚΥ. (1992).

Прамлинтид, ²⁵>²⁸'²⁹Про-й -амилин, не имеет тенденции адсорбироваться на стекле в стеклянных контейнерах при присутствии в жидкой форме, поэтому поверхностно-активного вещества не требуется для дополнительной стабилизации фармацевтической препаративной формы. Однако в отношении соединений, которые имеют такую тенденцию при присутствии в жидкой форме, в их препаративной форме следует использовать поверхностно-активное вещество. Эти препаративные формы можно затем лиофилизировать. Поверхностно-активные вещества часто вызывают денатурацию белка и вследствие гидрофобного разрыва, и путем разделения солевых мостиковых связей. Относительно низкие концентрации поверхностно-активного вещества могут обладать сильной денатурирующей активностью ввиду сильных взаимодействий между частями поверхностно-активного вещества и реактивными сайтами белков. Однако целесообразное использование этого взаимодействия может стабилизировать белки против межповерхностной или поверхностной денатурации. Поверхностно-активные вещества, которые могут дополнительно стабилизировать пептид, могут необязательно присутствовать в диапазоне примерно от 0,001 до 0,3% (мас./об.) всей препаративной формы и включают полисорбат 80 (т.е. полиоксиэтилен(20)сорбитанмоноолеат), СНАР8® (т.е. 3-[(холамидопропил)диметиламмонио]-1-пропансульфонат), ВКП® (т.е. Вп) 35, который представляет собой (простой лауриловый эфир полиоксиэтилена (23)), полоксамер или другое неионное поверхностно-активное вещество.

Может также быть желательным добавление хлорида натрия или другой соли для регулирования тоничности фармацевтической препаративной формы, в зависимости от выбранного регулятора тоничности. Однако это необязательно и зависит от конкретной выбранной препаративной формы. Парентеральные препаративные формы обычно могут быть изотоничными или по существу изотоничными.

Подходящим носителем для парентеральных продуктов является вода. Воду подходящего качества для парентерального введения можно получить или дистилляцией, или обратным осмосом. Вода для инъекций представляет собой предпочтительный водный носитель для использования в фармацевтических инъецируемых препаративных формах.

Возможно присутствие других ингредиентов в фармацевтических препаративных формах. Такие дополнительные ингредиенты могут включать, например, смачивающие агенты, эмульгаторы, масла, антиоксиданты, наполнители, модификаторы тоничности, хелатообразующие агенты, ионы металлов, маслянистые носители, белки (например, человеческий сывороточный альбумин, желатин или белки) и цвиттерион (например, аминокислота, такая как бетаин, таурин, аргинин, глицин, лизин и гистидин). Кроме того, растворы полимеров или смеси с полимерами обеспечивают возможность контролируемого высвобождения пептида. Конечно, такие дополнительные ингредиенты не должны неблагоприятно воздействовать на общую стабильность предоставленной здесь фармацевтической препаративной формы.

Контейнеры также представляют собой неотъемлемую часть инъекционной препаративной формы и могут считаться компонентом, потому что нет контейнера, который является полностью инертным или каким-то образом не воздействует на содержащуюся в нем жидкость, особенно, если жидкость водная. Поэтому выбор контейнера для определенного инъекционного раствора должен основываться на учете состава материала контейнера, а также раствора и обработки, которой она будет подвергнута. Адсорбцию пептида на стеклянную поверхность флакона также при необходимости можно минимизировать использованием борсиликатного стекла, например, борсиликатного стекла \У11еаЮп Туре I #33 (\У11е(оп Туре 1-33) или его эквивалента (\У11еЮп О1акк Со.). Другие продавцы флаконов и кассет из аналогичного борсиликатного стекла, приемлемых для изготовления, включают К1тЬе1 О1акк Со., \Уек1 Со., Випйег О1акк ОМВН и Рогта Уйгит. Биологические и химические свойства соединения можно стабилизировать составлением и лиофилизацией в сывороточном флаконе из борсиликата \У11еЮп Туре 1-33 до конечной концентрации 0,1 мг/мл и 10 мг/мл соединения в присутствии 5% маннита и 0,02% Тетееп 80.

Для обеспечения возможности введения иглы от шприца для подкожных инъекций во многодозовый флакон и обеспечения его повторной герметизации, как только удалена игла, открытый конец каждого флакона обычно закупоривают крышкой в виде резиновой пробки, удерживаемой на месте алюминиевой лентой. В качестве крышки для инъекционного лекарственного средства можно использовать пробки для стеклянных флаконов, таких как \Уек1 4416/50, 4416/50 (с тефлоновым покрытием) и 4406/40, АЬЬоН 5139, или любую эквивалентную пробку. Эти пробки совместимы с пептидом, а также другими

- 23 013121 компонентами препаративной формы. Эти пробки проходят испытание целостности при испытании с использованием видов применения пациентами, например, пробка может выдержать по меньшей мере примерно 100 инъекций. Альтернативно, пептид может быть лиофилизирован во флаконах, шприцах или кассетах для последующего растворения. Жидкими препаративными формами по изобретению можно заполнить одно- или двухкамерные кассеты, или одно- или двухкамерные шприцы.

Каждый из компонентов описанной выше фармацевтической композиции известен в данной области и описан в документе Рагеп!ега1 Мебюа!юпя, Уо1. 1, 2пб еб., Ау1я е! а1. Еб., Мегсе1 Эеккег, Ыете Уогк, Ν.Υ. 1992, который полностью включен сюда в качестве ссылки.

Способ изготовления указанных выше жидких препаративных форм в целом включает стадии компаундирования, стерилизационной фильтрации и заполнения. Процедура компаундирования включает растворение ингредиентов в определенном порядке (например, консерванта с последующим растворением стабилизаторов/агентов, регулирующих тоничность, буферов и пептида) или растворением в одно и то же время.

Альтернативные препаративные формы, например непарентеральные, могут не требовать стерилизации. Однако, если стерилизация желательна или необходима, то можно использовать любой подходящий способ стерилизации при разработке предоставленной здесь пептидной фармацевтической препаративной формы. Обычные способы стерилизации включают фильтрацию, обработку паром (влажным жаром), обработку сухим жаром, газами (например, этиленоксидом, формальдегидом, диоксидом хлора, пропиленоксидом, бета-пропиолактоном, озоном, хлорпикрином, перуксусной кислотой, метилбромидом и им подобными), воздействием источником излучения и асептической обработкой. Фильтрация представляет собой пример способа стерилизации для описанных здесь жидких препаративных форм. Стерилизационная фильтрация включает фильтрацию через фильтры с размером пор 0,45 и 0,22 мкм (1 или 2), которые могут быть соединены в серию. После фильтрации раствором заполняют соответствующие флаконы или контейнеры.

В одном варианте осуществления жидкие препаративные формы предназначены для парентерального введения. Подходящие пути введения включают внутримышечное, внутривенное, подкожное, внутрикожное, внутрисуставное, подоболочечное и им подобные. Подкожный путь введения представляет собой один конкретный путь. Также особенно подходит доставка через слизистые оболочки. Эти пути введения через слизистую оболочку включают без ограничения пероральный, интраназальный, сублингвальный, легочный и буккальный пути, которые могут включать введение пептида в жидкой, полутвердой или твердой форме. Введение этими путями требует существенно больше пептида для получения желательных биологических эффектов вследствие сниженной биологической доступности по сравнению с парентеральной доставкой. Кроме того, парентеральную доставку с контролируемым высвобождением можно достичь образованием полимерных микрокапсул, матриц, растворов, имплантатов и устройств и введением их парентерально или хирургическим средством. Примеры препаративных форм контролируемого высвобождения описаны в патентах США №№ 6368630, 6379704 и 5766627, которые включены сюда в качестве ссылки. Эти лекарственные формы могут иметь более низкую биологическую доступность вследствие захвата некоторой части пептида в полимерной матрице или устройстве. См., например, патенты США №№ 6379704, 6379703 и 6296842.

Соединения могут находиться в стандартной лекарственной форме, содержащей некоторое количество соединения, которое будет эффективно в одной или множественных дозах для лечения или содействия лечению психиатрических заболеваний и/или нежелательных побочных эффектов психиатрического лечения/лекарственных средств. Как будет хорошо понятно специалистам в данной области, эффективное количество терапевтического средства будет варьировать в зависимости от многих факторов, включая возраст и массу тела пациента, физического состояния пациента, подлежащего лечению состояния и других факторов.

Однако типичные дозы могут содержать от нижнего предела примерно 1, 5, 10, 50 до 100 мкг до верхнего предела примерно 100, 500 мкг, 1, 5, 10, 50 или 100 мг фармацевтического соединения в сутки. Предусмотрены также другие диапазоны доз, такие как от 0,1 мкг до 1 мг соединения на дозу. Таким образом, иллюстративные дозы могут составлять 30, 60, 120, 240 или 360 мкг соединения на дозу. Дозы в сутки могут быть доставлены дискретными стандартными дозами или подаваться непрерывно в течение 24-часового периода, или любой части этого 24-часового периода. Количество доз в сутки может составлять от 1 до примерно 4 доз в сутки, хотя оно может быть больше. Непрерывная доставка может происходить в форме непрерывных вливаний. Иллюстративные дозы и скорости вливания включают от 0,005 нмоль/кг до примерно 20 ммоль/кг на дискретную дозу или от примерно 0,01 до примерно 10 пкмоль/кг/мин при непрерывном вливании. Эти дозы и вливания могут доставляться внутривенным введением (в/в) или подкожным введением (п/к). Иллюстративная общая доза/доставка фармацевтической композиции, вводимой в/в, может составлять от примерно 2 мкг до примерно 8 мг/сут, тогда как общая доза/доставка фармацевтической композиции, вводимой п/к, может составлять от примерно 6 мкг до примерно 16 или 24 мг/сут.

Следующие примеры предоставлены для иллюстрации, а не ограничения изобретения.

- 24 013121

Примеры

Пример 1.

Самцов крыс Бргадитее-Оате1еу® держали на бессахарном рационе и наблюдали воздействия стресса на потребление сахара. Вкратце, крысам имплантировали осмотические насосы ΛΕΖΕΤ®, содержащие носитель или крысиный амилин (300 мкг/кг/д). Всем крысам был предоставлен неограниченный доступ к стандартному корму для грызунов, воде и питьевому раствору 30% сахарозы. В последующем, питьевой раствор сахарозы удаляли, и половину крыс ежедневно подвергали легкому иммобилизационному стрессу на 3 ч в течение 3 последовательных дней. Через 3 дня крысам предоставляли сахарозу и измеряли ее суточное среднее потребление в течение 4 дней. Потребление корма также измеряли в течение 3 дней удаления сахарозы и стресса и в течение следующих 4 дней, когда возобновляли подачу сахарозы. В течение 4 дней возобновления подачи сахарозы иммобилизацию не проводили. Результаты этого анализа показаны на фиг. 1, где *обозначает Р<0,05 при АЫОУА (вариационном анализе) и анализами критерия ПзНег ББЭ (минимальной значимой разницы) до и после воздействия.

На этой модели хронический стресс стимулирует долю общего количества калорий, потребляемых в виде сахара. Как показано на фиг. 1А, стресс, вызванный иммобилизацией, значительно увеличивал соотношение между средним потреблением сахарозы и корма (в % относительно исходного уровня) (солевой раствор, Я), в сравнении с контрольным потреблением без вызванного стресса (солевой раствор, С). На фиг. 1А также показано, что введение амилина предотвращает увеличение соотношения между средним потреблением сахарозы и корма, ожидаемое в результате стресса, вызванного иммобилизацией. Сравните отношение сахарозы к корму (выраженное в процентной доле исходного уровня) у крыс с вызванным стрессом, которым вводили амилин (амилин, Я), и у контрольных крыс без стресса, которым вводили амилин (амилин, С). Сравните также отношение сахарозы к корму у крыс с вызванным стрессом, которым вводили амилин (амилин, Я) , и у крыс с вызванным стрессом, которым вводили контрольный носитель (солевой раствор) (солевой раствор, Я). Как показано, введение амилина уменьшает вызванную стрессом реакцию. Соответственно, представляется, что введение амилина снижает или защищает от стресса и его воздействий.

На фиг. 1В изображены те же результаты анализа воздействий иммобилизационного стресса с точки зрения другого аспекта, потребления корма. Считают, что хотя стресс увеличивает потребление приятной на вкус пищи (например, простых сахаров), стресс уменьшает потребление менее приятной на вкус пищи (например, стандартного корма), что является типичной реакцией на стресс. Согласуясь с этим представлением, стресс без введения амилина значительно снизил потребление корма у животных, подвергнутых стрессу иммобилизации. Сравните, например, потребление корма у животных, получавших солевой раствор, иммобилизованных животных и получавших солевой раствор контрольных животных на фиг. 1В. Введение амилина также защищает от этой поведенческой реакции на стресс, на что указывают данные потребления корма на фиг. 1В.

Как описано ранее, острое воздействие стресса на потребление пищи опосредуется центральным путем СЕЯ (Бтадш е! а1. (1999) Ат. 1. Р11узю1. 276:Я1461-1468). Этот результат может иметь поведенческие последствия, поскольку СЯЕ, введенный в мозг животных, вызывает тревогу (Όιιΐ'ΐπ е! а1. (1990) Вташ Яез. Вташ Яез. Яеу. 15:71-100), и считают, что хронический стресс и связанное с ним увеличение центральной активности СЯЕ играет решающую роль в развитии клинической депрессии и тревожных расстройств (СЬтоизоз (2000) 1п!. 1. ОЬез. Яе1а!. Ме!аЬ. Эйогб. 24:Б50-Б55; КооЬ (1999) Вю1. РзусЫабу 46:1167-1180). Следовательно, представляется, что амилин воздействует на центральный путь развития стресса, который, как известно, опосредует поведенческие состояния, подобные депрессии и тревоге, и может использоваться в качестве терапевтического средства для их лечения.

Пример 2.

Для подтверждения интерпретации данных, полученных в примере 1, выполняли разнообразные анализы поведения животных для испытания анксиолитических, антидепрессантных и антипсихотических эффектов введения амилина. В выполненных поведенческих анализах используются принятые в данной области экспериментальные модели, которые демонстрируют свойства, характерные для соответствующего клинического состояния (например, тревога, депрессия, шизофрения, обсессивнокомпульсивное расстройство), и, следовательно, проявляют полную обоснованность. Известно, что эти специфические поведенческие тесты чувствительны к анксиолитическим, антидепрессантным или антипсихотическим лекарственным препаратам. Для этих анализов крысиный амилин вводили мышам в дозах в диапазоне от 0,1 до 10 мг/кг внутрибрюшинно или посредством подкожно имплантированного осмотического насоса (ΛΕ-ΖΕΤ®), содержащего носитель или крысиный амилин, и оценивали их функцию.

Вызванная стрессом гипертермия

Температура тела и эмоциональное состояние тесно связаны у людей, и считается, что вызванная стрессом гипертермия (Б1Н) у мышей имеет прогностическую достоверность для определенных тревожных/стрессовых расстройств у людей. Анализ Б1Н оценивает воздействие анксиолитиков или испытуемых средств на вызванную стрессом гипертермию и измеряет эндогенные эффекты этих препаратов на сердцевинную температуру тела. См., например, Ζеι1юΓ е! а1. (1994) Рйузю1. ВеНау. 55:109-115. Анксио

- 25 013121 литики притупляют повышение температуры тела, или гипертермическую реакцию, после воздействия стресса. Животным за 60 мин до анализа вводили крысиный амилин (0,1, 1,0 или 10 мг/кг) или контрольные средства (носитель или 10 мг/кг хлордиазэпоксида). Мышей подвергали двум последовательным ректальным измерениям температуры с интервалом 10 мин. Стресс от первого измерения вызывает гипертермию, которую измеряли вторым измерением температуры. Разность между двумя величинами температуры (Α^ представляла собой вызванную стрессом гипертермию. Результаты этого анализа показаны на фиг. 2, где * обозначает Р<0,05. Как показано на фиг. 2, введение амилина как введение анксиолитического положительного контроля, хлордиазоэпоксида (СОР), притупляло реакцию в виде 8Ш. Результаты теста 8Ш демонстрируют анксиолитическую активность введения амилина. Амилин также вводили хронически в дозе 300 мкг/кг/сут. посредством подкожноимплантированными насосами, и животных подвергали тесту 8Ш. И через 1 неделю, и через 4 недели введения хроническое вливание амилина значительно притупляло реакцию в виде 8Ш, как и хронически вливаемый СОР в дозе 10 мг/кг/сут.

Закапывание шариков

Закапывание шариков используется в качестве модели и для тревожных, и обсессивнокомпульсивных расстройств. См., например, ΟιηΚί е! а1. (2003) 1. Рйагтасо1. Ехр. Тйег. 304:818-826. Анкиолитики подавляют активность в виде закапывания шариков. Мышам инъецировали испытуемое средство (крысиный амилин в дозе 0,1, 1,0 или 10 мг/кг, 20 мг/кг буспирона, или носитель) за 15-30 мин до испытания. Затем мышей помещали отдельно в чистые клетки, содержащие твердую деревянную подстилку толщиной 5 см и 20 шариков, равномерно расположенных с промежутками рядами по пять штук в каждом. Регистрировали количество шариков, закопанных через 30 мин. Результаты этого анализа показаны на фиг. 3, где * обозначает Р<0,05. Как показано на фиг. 3, введение амилина, как и введение анксиолитического положительного контроля буспирона, уменьшало количество закопанных шариков. Уменьшение закапывания шариков при введении амилина в дозе 10 мг/кг и буспирона в дозе 2 0 мг/кг было статистически значимым. Буспирон представляет собой частичный агонист 5-НТ1А и известное анксиолитическое средство. Результаты анализа закапывания шариков демонстрируют анксиолитическую активность и активность против навязчиво-компульсивного расстройства введения амилина.

Тест принудительного плавания

Тест принудительного плавания (Е8Т) представляет собой обычно используемый вид испытания для оценки антидепрессантной активности лекарственных препаратов. Этот тест основан на измерении времени плавания животных в резервуаре, заполненном водой. Когда крысы или мыши вынуждены плавать в глубоком цилиндре с прохладной водой, они становятся почти неподвижными и прекращают попытки избегания. Считают, что эта характерная неподвижная поза отражает подобное депрессивному состояние, и на него легко влияет широкое разнообразие антидепрессантов. См., например, Некой е! а1. (2001) Рйагтасо1, Вюсйеш. Векам. 70:65-76, Сйак1 е! а1. (2003) 1. Рйагтасо1. Ехр. Тйег. 304:818-826, и Рогко1! е!.а1 (1977) №11иге 266:730-732. Антидепрессанты уменьшают время неподвижности в Е8Т. Крысиный амилин или носитель непрерывно в течение 2 недель вводили мышам подкожно имплантированными осмотическими насосами перед Е8Т. В 1-й день мышей помещали в резервуар с водой на 15 мин перед сеансом плавания. На 2-й день мышей помещали назад в резервуар с водой для оценки карапкания, плавания и неподвижности в течение сеанса испытания длительностью 5 мин. Результаты Е8Т показаны на фиг. 4, где * обозначает Р<0,05. Как показано на фиг. 4, введение крысиного амилина значительно уменьшало время, проведенное в неподвижном состоянии. Соответственно, результаты Е8Т демонстрируют антидепрессантную активность введения амилина.

Препульсовое ингибирование

Тест препульсового ингибирования (РРД измеряет рефлекторную реакцию на внешне подаваемую слуховую стимуляцию (реакцию испуга, вызванную акустической стимуляцией) и связан с недостаточностью сенсорно-двигательной пропускной способностью, наблюдаемой при шизофрении. Рефлекс испуга, вызванный акустической стимуляцией, представляет собой базовую реакцию на сильные экстероцептивные стимулы и широко используется для оценки сенсорно-двигательной реактивности у животных и людей. Слабый аудиторный стимул (препульс, 74-82 дБ), подаваемый перед сильным акустическим стимулом (120 дБ), притупляет реакцию испуга. Притупление реакции испуга именуется ингибированием препульсом. См., например, СопБ е! а1. (2005) Вейауюга1 №игокаепсе 119:1052-1060. Антипсихотические средства увеличивают способность препульсового стимула притуплять реакцию испуга на сильный стимул. Некоторые психотомиметические средства, такие как фенциклидин (РСР) и кетамин, могут действительно снизить процентное препульсовое ингибирование и стимулировать состояние, подобное психотическому, у животных, которому могут противодействовать антипсихотические средства.

Мышам инъецировали испытуемое средство (крысиный амилин в дозе 0,1, 1,0 или 10 мг/кг или носитель) за 15 мин до испытания или галоперидол в дозе 1 мг/кг за 30 мин до испытания. Мышей помещали в держалку для животных и держалку помещали на платформу преобразователя в акустической камере. Слабый аудиторный стимул (препульс) 74, 78 и 82 дБ подавали перед сильным акустическим стимулом (120 дБ). Регистрировали величину «реакции» животного на сильный стимул. Результаты анализа РРI показаны на фиг. 5, где * указывает на Р<0,05. Как показано на фиг. 5, введение амилина в дозе 10

- 26 013121 мг/кг, как и введение антипсихотического положительного контроля галоперидола, значительно увеличивало процент препульсового ингибирования на всех испытанных препульсовых уровнях (74, 78 и 82 дБ). Галоперидол представляет собой антагонист допаминовых рецепторов и антипсихотическое средство первого поколения. Результаты теста РР1 демонстрируют антипсихотические эффекты введения амилина.

Двигательная активность, вызванная фенциклидином (РСР)

Тест двигательной активности, вызванной РСР, используется с камерами для изучения открытой полевой активности и измеряет двигательную активность, количество подъемов на задние лапы и стереотипической активности в условиях, вызванных введением амфетамина/РСР. Этот тест имеет прогностическую обоснованность для некоторых антипсихотических препаратов, которые нормализуют гиперактивность и стереотипическое поведение, наблюдаемое при введении амфетамина и РСР. См., например, ^ЛЛатз е1 а1. (2006) Ргод. №иторйагтасо1 Βίο1. РзусЫаЛу 30:239-243. Мышам инъецировали испытуемое средство (крысиный амилин в дозе 0,1, 1,0 или 10 мг/кг, 3 мг/кг клозапина (С2Р) или носитель) за 15-30 мин перед инъекцией 5 мг/кг РСР. Затем животных помещали в центр открытого поля и активность регистрировали в течение 60 мин. Результаты этого анализа показаны на фиг. 6, где * обозначает Р<0,05. Как показано на фиг. 6, введение амилина, подобно антипсихотическому положительному контролю СХР. значительно уменьшало общее расстояние, пройденное по всем оценивавшимся типам (общему, центральному и периферическому) в тесте двигательной активности, вызванной РСР. Амилин, подобно С2Р, снижал активность в виде подъема на задние лапы, и спонтанную, и вызванную РСР. СХР представляет собой атипичный, антипсихотический препарат второго поколения и имеет смешанный рецепторный профиль, включая допаминовые рецепторы. СХР имеет превосходящую антипсихотическую активность при меньшем количестве двигательных побочных эффектов. Результаты теста двигательной активности, вызванной РСР, демонстрируют антипсихотическую активность введения амилина.

Пример 3.

Исследовали воздействие введения амилина на прибавку массы тела, вызванную антипсихотическим средством второго поколения клозапином. Взрослым самцам крыс 8ргадие-Иате1еу® (рацион = 58% ккал от жира) имплантировали подкожно в межлопаточную область осмотические насосы, которые непрерывно подавали носитель или препарат в течение 4 недель. В одном эксперименте крыс лечили носителем или клозапином (0,025 и 0,25 мг/кг/сут.). Во втором эксперименте крыс лечили клозапином (0,25 мг/кг/сут.) или клозапином (0,25 мг/кг/сут.) в сочетании с крысиным амилином (10 мг/кг/сут.). На фиг. 7А показана прибавка массы тела крыс, получавших клозапин, в сравнении с крысами, получавшими носитель. На фиг. 7В показано, что, когда амилин совместно вводили с клозапином, амилин предотвращал прибавку массы тела, наблюдавшуюся у крыс, получавших один клозапин.

Хотя представленное выше описание раскрывает настоящее изобретение примерами, представленными с целью иллюстрации, следует понимать, что осуществление настоящего изобретения охватывает все обычные вариации, адаптации или модификации как находящиеся в пределах объема заявляемого изобретения. Поэтому описания и примеры не следует рассматривать как ограничивающие объем изобретения, который определяется прилагаемой формулой изобретения.

Claims (18)

1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

   1. Способ лечения расстройства настроения, тревожного расстройства или шизофрении у пациента, включающий введение пациенту терапевтически эффективного количества амилина, агониста амилина, аналога амилина или производного амилина для лечения расстройства настроения, тревожного расстройства или шизофрении; причем агонист амилина не является пептидом, родственным гену кальцитонина.
2. 2. Способ по п.1, где амилин, агонист амилина, аналог амилина или производное амилина включает аминокислотную последовательность согласно 8ΕΟ ΙΌ Ν0: 3, 33, 35, 67, 80 или 83.
3. 3. Способ по п.1, где амилин, агонист амилина, аналог амилина или производное амилина включает аминокислотную последовательность согласно одной из последовательностей 8ΕΟ Ю Ν0: 4-31 или 36-66.
4. 4. Способ по п.1, где амилин, агонист амилина, аналог амилина или производное амилина включает аминокислотную последовательность согласно одной из последовательностей 8ΕΟ ΙΌ Ν0: 91, 93, 95, 97, 102, 104, 108, 109, 111, 116-120, 123, 124, 126, 127, 137, 146, 147 и 151-253.
5. 5. Способ по п.1, где амилин, агонист амилина, аналог амилина или производное амилина включает аминокислотную последовательность согласно 8ΕΟ ΙΌ Ν0: 159.
6. 6. Способ по одному из пп.1-5, где амилин, агонист амилина, аналог амилина или производное амилина находятся в форме фармацевтически приемлемой соли.
7. 7. Способ по п.1, предназначенный для лечения расстройства настроения.
8. 8. Способ по п.7, где расстройство настроения представляет собой депрессию или биполярное расстройство.
9. 9. Способ по п.7, где расстройство настроения представляет собой большое депрессивное расстройство, дистимическое расстройство, биполярное расстройство Ι типа, биполярное расстройство ΙΙ типа или циклотимическое расстройство.

   - 27 013121
10. 10. Способ по п.1, предназначенный для лечения тревожного расстройства.
11. 11. Способ по п.10, где тревожное расстройство представляет собой обсессивно-компульсивное расстройство, паническое расстройство, фобию, расстройство, связанное с посттравматическим стрессом, расстройство, связанное с острым стрессом, или генерализованное тревожное расстройство.
12. 12. Способ по п.1, предназначенный для лечения шизофрении.
13. 13. Способ по п.1, дополнительно включающий введение пациенту по меньшей мере одного другого психиатрического лекарственного средства.
14. 14. Способ по п.1, дополнительно включающий введение пациенту (1) трициклического антидепрессанта; (ΐΐ) ингибитора моноаминоксидазы; (ίίί) селективного ингибитора обратного захвата серотонина; (ΐν) ингибитора обратного захвата серотонина и норадреналина; (ν) антипсихотического лекарственного средства второго поколения или (νΐ) комбинации двух или более из них.
15. 15. Способ лечения расстройства, связанного с зависимостью от вещества, у пациента, включающий введение пациенту терапевтически эффективного количества амилина, агониста амилина, аналога амилина или производного амилина для лечения расстройства, связанного с зависимостью от вещества; причем агонист амилина не является пептидом, родственным гену кальцитонина.
16. 16. Способ по п.15, где амилин, агонист амилина, аналог амилина или производное амилина включает аминокислотную последовательность согласно 81X) ΙΌ N0: 3, 33, 35, 67, 80 или 83.
17. 17. Способ по п.15, где амилин, агонист амилина, аналог амилина или производное амилина включает аминокислотную последовательность согласно одной из последовательностей 8ЕО ГО N0: 4-31, 3666 и 91, 93, 95, 97, 102, 104, 108, 109, 111, 116-120, 123, 124, 126, 127, 137, 146, 147 и 151-253.
18. 18. Способ по пп.15, 16 или 17, где амилин, агонист амилина, аналог амилина или производное амилина находятся в форме фармацевтически приемлемой соли.