DK165749B - Grf-analoge peptider og farmaceutisk acceptable salte heraf samt farmaceutisk middel indeholdende disse - Google Patents
Grf-analoge peptider og farmaceutisk acceptable salte heraf samt farmaceutisk middel indeholdende disse Download PDFInfo
- Publication number
- DK165749B DK165749B DK433684A DK433684A DK165749B DK 165749 B DK165749 B DK 165749B DK 433684 A DK433684 A DK 433684A DK 433684 A DK433684 A DK 433684A DK 165749 B DK165749 B DK 165749B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- leu
- gln
- arg
- peptide
- ser
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims description 78
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims description 30
- 239000000126 substance Substances 0.000 title description 3
- ROHFNLRQFUQHCH-RXMQYKEDSA-N D-leucine Chemical compound CC(C)C[C@@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-RXMQYKEDSA-N 0.000 claims description 11
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 11
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 11
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 10
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 claims description 9
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 8
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 8
- WHUUTDBJXJRKMK-GSVOUGTGSA-N D-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-GSVOUGTGSA-N 0.000 claims description 7
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 claims description 6
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 claims description 6
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 4
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 4
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 claims description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 4
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 claims description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 4
- NVEASDQHBRZPSU-BQBZGAKWSA-N Gln-Gln-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O NVEASDQHBRZPSU-BQBZGAKWSA-N 0.000 claims description 3
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 2
- 125000003196 D-leucino group Chemical group [H]OC(=O)[C@]([H])(N([H])[*])C([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 claims 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 41
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 39
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 39
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 23
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- -1 p-chlorobenzyloxycarbonyl Chemical group 0.000 description 21
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 20
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 16
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 description 15
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 14
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 14
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 14
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 10
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 10
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical group C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 125000000325 methylidene group Chemical group [H]C([H])=* 0.000 description 9
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 8
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 7
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 6
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 5
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 5
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 5
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 5
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 5
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 5
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- DHBXNPKRAUYBTH-UHFFFAOYSA-N 1,1-ethanedithiol Chemical compound CC(S)S DHBXNPKRAUYBTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010062767 Hypophysitis Diseases 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 4
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 4
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 4
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 4
- 210000003635 pituitary gland Anatomy 0.000 description 4
- 108010036509 somatotropin releasing factor 40 Proteins 0.000 description 4
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 description 3
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 3
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 3
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 3
- 210000003016 hypothalamus Anatomy 0.000 description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N 2-aminopentanoic acid Chemical compound CCCC(N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N Ethyl urethane Chemical compound CCOC(N)=O JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 150000001805 chlorine compounds Chemical group 0.000 description 2
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 2
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N dopamine Chemical compound NCCC1=CC=C(O)C(O)=C1 VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 125000005519 fluorenylmethyloxycarbonyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000002795 guanidino group Chemical group C(N)(=N)N* 0.000 description 2
- 125000004029 hydroxymethyl group Chemical group [H]OC([H])([H])* 0.000 description 2
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 125000001412 tetrahydropyranyl group Chemical group 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 2
- WBIIPXYJAMICNU-AWEZNQCLSA-N (2s)-5-[amino-[(4-methylphenyl)sulfonylamino]methylidene]azaniumyl-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]pentanoate Chemical compound CC1=CC=C(S(=O)(=O)NC(N)=NCCC[C@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C(O)=O)C=C1 WBIIPXYJAMICNU-AWEZNQCLSA-N 0.000 description 1
- NXJOFTRBTBDSHB-UHFFFAOYSA-N (4-methyl-1,4-diazepane-1-carbothioyl)sulfanyl 4-methyl-1,4-diazepane-1-carbodithioate Chemical compound C1CN(C)CCCN1C(=S)SSC(=S)N1CCN(C)CCC1 NXJOFTRBTBDSHB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000252073 Anguilliformes Species 0.000 description 1
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 1
- 125000006847 BOC protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 241000270617 Cheloniidae Species 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N D-OH-Asp Natural products OC(=O)C(N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N D-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940122439 Hydroxylase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N L-2-aminopentanoic acid Chemical compound CCC[C@H](N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- SITWEMZOJNKJCH-UHFFFAOYSA-N L-alanine-L-arginine Natural products CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCNC(N)=N SITWEMZOJNKJCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FYYSQDHBALBGHX-YFKPBYRVSA-N N(alpha)-t-butoxycarbonyl-L-asparagine Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O FYYSQDHBALBGHX-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- SCIFESDRCALIIM-VIFPVBQESA-N N-methyl-L-phenylalanine Chemical compound C[NH2+][C@H](C([O-])=O)CC1=CC=CC=C1 SCIFESDRCALIIM-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- 241000286209 Phasianidae Species 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GELXFVQAWNTGPQ-UHFFFAOYSA-N [N].C1=CNC=N1 Chemical compound [N].C1=CNC=N1 GELXFVQAWNTGPQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 125000005076 adamantyloxycarbonyl group Chemical group C12(CC3CC(CC(C1)C3)C2)OC(=O)* 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001370 alpha-amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 description 1
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001195 anabolic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004873 anchoring Methods 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 229940072107 ascorbate Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 229920001222 biopolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 230000005587 bubbling Effects 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 1
- 125000004803 chlorobenzyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010612 desalination reaction Methods 0.000 description 1
- XYWDPYKBIRQXQS-UHFFFAOYSA-N di-isopropyl sulphide Natural products CC(C)SC(C)C XYWDPYKBIRQXQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UNXNGGMLCSMSLH-UHFFFAOYSA-N dihydrogen phosphate;triethylazanium Chemical compound OP(O)(O)=O.CCN(CC)CC UNXNGGMLCSMSLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 229960003638 dopamine Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007515 enzymatic degradation Effects 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 125000003754 ethoxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC)* 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 239000001307 helium Substances 0.000 description 1
- 229910052734 helium Inorganic materials 0.000 description 1
- SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N helium atom Chemical compound [He] SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000960 hypophysis hormone Substances 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000011261 inert gas Substances 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000005928 isopropyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(OC(*)=O)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000008141 laxative Substances 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Chemical class 0.000 description 1
- 239000002184 metal Chemical class 0.000 description 1
- MGJXBDMLVWIYOQ-UHFFFAOYSA-N methylazanide Chemical compound [NH-]C MGJXBDMLVWIYOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WXEHBUMAEPOYKP-UHFFFAOYSA-N methylsulfanylethane Chemical compound CCSC WXEHBUMAEPOYKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N naproxen Chemical group C1=C([C@H](C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000005897 peptide coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 230000001543 purgative effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000003488 releasing hormone Substances 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 238000011894 semi-preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N serine phosphoethanolamine Chemical compound [NH3+]CCOP([O-])(=O)OCC([NH3+])C([O-])=O UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- 238000011191 terminal modification Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/60—Growth hormone-releasing factor [GH-RF], i.e. somatoliberin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/10—Organic substances
- A23K20/142—Amino acids; Derivatives thereof
- A23K20/147—Polymeric derivatives, e.g. peptides or proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S930/00—Peptide or protein sequence
- Y10S930/01—Peptide or protein sequence
- Y10S930/12—Growth hormone, growth factor other than t-cell or b-cell growth factor, and growth hormone releasing factor; related peptides
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
i
DK 165749B
Den foreliggende opfindelse angår hidtil ukendte GRF-analoge peptider, som fremmer frigivelse af væksthormoner fra hypofysen, farmaceutisk acceptable salte heraf og et farmaceutisk middel indeholdende disse.
5
Fysiologer har længe vidst, at hypothalamus styrer adenohypo-fysens sekretoriske funktioner, ved at hypothalamus producerer specielle stoffer, som stimulerer eller hæmmer sekretionen af hvert enkelt hyposefysehormon. I 1982 blev humane pan-10 kreatiske (tumor) frigørende faktorer (hpGRF) isoleret fra ekstrakter af humane pankreas-tumorer, renset, karakteriseret, syntetiseret og testet, og de viste sig at stimulere frigivelse af GH fra hypofysen. En tilsvarende rotte hypothalamus GH frigørelsesfaktor (rGRF) og en tilsvarende svine 15 hypothalamus GH frigørelsesfaktor (pGRF) er ligeledes blevet karakteriseret og syntetiseret.
Der er blevet syntetiseret og undersøgt syntetiske polypepti-der, som frigiver GH fra hypofysecellekulturer, og som i det 20 mindste delvis kan modstå enzymatisk nedbrydning i legemet. Disse peptider opfylder i det mindste et af følgende krite-rier: (a) leddet i 1-stillingen har enten en NaMe- eller en
CaMe-subst i tut i on, (b) D-Leu er til stede i 17- og/eller 23-sti liingen, og/eller (c) D-Glu eller D-Asp er til stede i 25 25-sti 11 i ngen. Peptiderne kan opfylde mere end et eller endda alle de forudgående kriterier. Leddet i 1-stillingen kan være Phe, pCl-Phe eller His (hvilket led kan have methylsubsti tutionen, enten på α-carbonatomet eller i α-aminogruppen). Peptiderne har også fortrinsvis Nle i stedet for Met i 27-stil-30 lingen.
Farmaceutiske midler ifølge opfindelsen er kendetegnet ved at indeholde et peptid ifølge krav 1 eller et ikke-toksisk salt af et af disse dispergeret i en farmaceutisk eller veterinært 35 acceptabel væske eller fast bærer. Sådanne farmaceutiske mid-
DK 165749B
2 ler kan anvendes i klinisk medicin, både humant og veterinært, til administration med terapeutiske formål, og også diagnostisk. Ydermere kan de anvendes til at stimulere væksten af varmblodede dyr, herunder fugle, og i vandige kultu-5 rer til koldblodede dyr, f.eks. fisk, herunder ål, etc.
Nomenklaturen, der er anvendt til at definere peptiderne, er som beskrevet af Schroder & Lubke, "The Peptides", Academic Press (1965), hvori i overensstemmelse med konventionel re-10 præsentation aminogruppen ved N-terminalen optræder til venstre, og carboxylgruppen på C-terminalen til højre. Ved naturlige aminosyrer forstås almindelige, i proteiner naturligt forekommende aminosyrer omfattende Gly, Ala, Val, Leu, Ile,
Ser, Thr, Lys, Arg, Asp, Asn, Glu, Gin, Cys, Met, Phe, Tyr, 15 Pro, Trp og His. Med Nle menes norleucin, og med Nva menes norvalin. Hvor aminosyreresten har isomere former, er det L-formen af aminosyren, som repræsenteres, medmindre andet udtrykkeligt anføres.
20 Opfindelsen angår syntetiske GRF-analoge peptider med følgende formel:
Rl-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Rg-Ser-Tyr-Arg-R^-Rig-Leu-Gly-
Gln-Ri7-Ri8~Ala~Ar9-Lys_Leu*'R23~R24“R25~I1e~R27_R28"Ar9_Gln" 25 Gin-Gly-Y, hvor Y er OR, R, NRR* eller NH-NHR, eller hele peptidets C-terminal er CH2OR, og R og R' er hydrogen, lavere alkyl eller fluor-lavere alkyl, hvori Rj er Phe, pCl-Phe eller His, og som har enten en CaMe 30 eller NaMe substitution eller er usubstitueret; Rg er Ser eller Asn, R^2 er Arg eller Lys; R13 er Ile eller Val; R^7 er Leu eller D-Leu; R^g er Tyr eller Ser; R23 er Leu eller D-Leu; R24 er His eller Gin; R25 er Glu, Asp eller D-Glu; R27 er Met eller Nle og R38 er Asn eller Ser; forudsat dog, at 35 enten (a) R^ har en CaMe eller en NaMe-substitution, eller (b) R17 og/eller R23 er D-Leu, eller (c) R25 er D-Glu, og forudsat også, at Gln-Gln-Gly kan være udeladt ved C-termi-
DK 165749 B
3 nalen. Resten ved C-termina 1 en foreligger fortrinsvis i form af det simple amid; ækvivalente C-terminale modifikationer kan imidlertid være foretaget.
5 Peptiderne syntetiseres ved hjælp af en anvendelig metode, som f.eks. udelukkende ved fastfaseteknikker, ved delvis fastfaseteknikker, ved fragmentkondensation eller ved klassiske opløsningskoblinger. De i den senere tid udviklede re-kombinant DNA-teknikker kan anvendes til at fremstille en del 10 af en analog, som udelukkende indeholder naturlige aminosyre-resten. For eksempel er teknikkerne med udelukkende fastfase-syntese angivet i lærebogen "Solid-Phase Peptide Synthesis", Stewart & Young, Freeman & Co., San Francisco, 1969, og de er eksemplificeret ved indholdet i US patentskrift nr.
15 4.105.603, udstedt 8. august 1978 i navnet Vale et al. Klas sisk opløsningssyntese er beskrevet i detaljer i afhandlingen "Methoden der Organischen Chemie (Houben-Weyl): "Synthese von Peptiden", E. Wunsch (redaktør) (1974) Georg Thieme Verlag, Stuttgart, Vesttyskland, Syntesemetoden fragmentkondensation 20 er eksemplificeret i US patentskrift nr. 3.972.859 (3. august 1976). Andre tilgængelige synteser er eksemplificeret i US patentskrift nr. 3.842.067 (15. oktober 1974) og US patentskrift nr. 3.862.925 (28. januar 1975).
25 Fælles for sådanne synteser er beskyttelsen af de labile sidekædegrupper på de forskellige aminosyrerester med egnede beskyttelsesgrupper, som vil forhindre en kemisk reaktion i at ske på dette sted, indtil gruppen til slut fjernes. Et fælles træk er desuden sædvanligvis beskyttelsen af en a-30 aminogruppe på en aminosyre eller et fragment, medens denne enhed reagerer ved carboxylgruppen, efterfulgt af den selektive fjernelse af α-amino-beskyttelsesgruppen for derved at muliggøre, at en efterfølgende reaktion kan foregå på dette sted. Som følge heraf er det almindeligt, at der i et syn-35 tesetrin produceres et mellemprodukt, som inkluderer hver af aminosyreresterne, anbragt i den ønskede rækkefølge i peptid-
DK 165749 B
4 kæden med sidekædebeskyttelsesgrupper koblet til de behørige rester.
Mellemprodukter ved syntesen kan have formlen: 5 χΙ-F*! (X eller x2)-Ala-Asp(x3)-Ala-Ile-Phe-Thr(XA)-R8(XA eller X5)-Ser(X*)-Tyr(X2)-Arg(xS)-R12(x6 eller X7)-R13-Leu-Gly-
Gln(X5)-Ri7-Ri8(x2)"Ala_Ar9(x6)“Lys(x7)“Leu“R23"R24(x eller 10 X5)-R25(X3)-ne-R27-R28(x4 eller X5)-Arg(x6)-Gln(X5)-Gln(X5)-
Gly-X9, hvori χΐ er enten hydrogen eller en α-aminobeskyttelsesgrup-15 pe. Som α-aminobeskyttelsesgrupperne χΐ tænkes på disse, som er velkendte for deres anvendelighed ved trinvis syntese af polypeptider. Til klasserne af a-aminobeskyttelsesgrupperne, som kan anvendes som χΐ, hører aromatiske urethantypebeskyt-telsesgrupper, såsom fluorenylmethyloxycarbonyl (FMOC), 20 benzyloxycarbonyl (Z) og substitueret Z, som f.eks. p-chlor-benzyloxycarbonyl, p-nitrobenzyloxycarbonyl, p-brombenzyloxy-carbonyl og p-methoxybenzyloxycarbonyl; (2) alifatiske urethanbeskyttelsesgrupper, som f.eks. t-butyloxycarbonyl (BOC), diisopropylmethyloxycarbonyl, isopropyloxycarbonyl, 25 ethoxycarbonyl, allyloxycarbonyl; og (3) beskyttelsesgrupper af cykloalkylurethan-typen, som f.eks. cyklopentyloxycarbo-nyl, adamantyloxycarbonyl og cyklohexyloxycarbony1. Den foretrukne α-aminobeskyttelsesgruppe er BOC, endog når en NaMe-substitueret rest er anvendt i 1-sti11 ingen.
30 X er hydrogen eller en beskyttelsesgruppe for imidazolnitro-genet i His, såsom Tos.
35 2
DK 165749 B
5 X kan være en anvendelig beskyttelsesgruppe for phenolhy- droxylgruppen i Tyr, som f.eks. tetrahydropyranyl, tert.-butyl, trityl, Bzl, CBZ, 4Br-CBZ og 2,6-dichlorbenzyl(DCB). Den fore- 2 trukne beskyttelsesgruppe er 2,6-dichlorbenzyl. X kan være 5 hydrogen, hvilket betyder, at der ikke er nogen sidekædebe-skyttelsesgruppe på aminosyreleddet i denne stilling.
3 X er hydrogen eller en anvendelig esterdannende beskyttelsesgruppe for carboxylgruppen i Asp eller Glu, som f.eks. benzyl (OBzl), 2,6-dichlorbenzyl, methyl og ethyl.
10 x4 kan være en anvendelig beskyttelsesgruppe for hydroxylgrup-pen i Thr eller Ser, som f.eks. acetyl, benzoyl, tert.-butyl, trityl, tetrahydropyranyl, Bzl, 2,6-dichlorbenzyl og CBZ.
4 pen foretrukne beskyttelsesgruppe er Bzl. X kan være hydrogen, hvilket betyder, at der ikke er nogen beskyttelsesgruppe 15 på hydroxylgruppen.
5 X er hydrogen eller en anvendelig beskyttelsesgruppe for sidekædeamidogruppen på Asn eller Gin. Det er fortrinsvis xanthyl (Xan).
X^ er enten en anvendelig beskyttelsesgruppe for guanidino-20 gruppen i Arg, som f.eks. nitro. Tos, CBZ, adamantyloxycar= bonyl og BOC, eller hydrogen.
X7 er hydrogen eller en egnet beskyttelsesgruppe for side-kædeaminogruppen i Lys. Eksempler på anvendelige sidekæde-aminobeskyttelsesgrupper er 2-chlorbenzyloxycarbonyl(2-C1-Z), 25 Tos, t-amyloxycarbonyl og BOC.
Met kan lejlighedsvis beskyttes af oxygen, men er fortrinsvis ubeskyttet.
Valget af en sidekædeaminobeskyttelsesgruppe er ikke afgørende, men der vælges almindeligvis én, som ikke fjernes under af-
DK 165749 B
6 beskyttelse af a-aminogrupperne under syntesen. For nogle aminosyrer, f.eks. His, gælder dog, at beskyttelse ikke generelt er nødvendig efter endt kobling, og beskyttelsesgrupperne kan være de samme.
5 X9 er en anvendelig beskyttelsesgruppe for den C-terminale carboxylgruppe, f.eks. den esterdannende gruppe X3, eller er en til fastfasesyntese benyttet forankringsbinding til forankring til en fast harpiksbærer, eller er des-X9, i hvilket 10 tilfælde resten ved C-terminalen har en carboxyldel. Når en sådan fast harpiksbærer anvendes, betragtes den generelt som værende en beskyttelsesgruppe og kan være en hvilken som helst af de kendte, som f.eks. -0-CH2-kolonnemateriale, -NH-benzhydrylamin (BHA) harpiksbærer eller -NH-paramethy1benz-15 hydrylamin (MBHA) harpiksbærer. Når det usubstituerede amid er ønsket, er anvendelse af BHA eller MBHA-harpiks foretrukket, fordi spaltning direkte giver amidet. I det tilfælde, at N-methylamidet er ønsket, kan det dannes ud fra en N-methyl-BHA-harpiks. Såfremt der ønskes andre substituerede amider 20 eller ønskes andre grupper end den frie syre som C-terminal, kan det være fordelagtigt at syntetisere peptidet under anvendelse af klassiske metoder, som angivet i Houben-Weyl-teksten.
25 I formlen for mellemproduktet er mindst én af X-grupperne en beskyttelsesgruppe, eller X9 inkluderer harpiksbærer. Et peptid ifølge opfindelsen kan fremstilles ved (a) dannelse af et peptidmellemprodukt med mindst én beskyttelsesgruppe og formlen (II): 30 χΙ-RjiX eller X2)-Ala-Asp{X3)-Ala-Ile-Phe-Thr(X*)-R8(X4 eller χ5)-Ser(X^)-Tyr(X2)-Arg(X6)-R12(X6 eller X7)-R13-Leu-Gly-Gln-(X5)-R17-R18(X2)-Ala-Arg(x6}-Lys(X7)-Leu-R23-R24(X eller X9)-R25(X3)-Ile-R27-R28(X4 eller X5)-Arg(X6)-Gln(X5)-Gln(X5)-61y-35 X9, hvori X, χΐ, X2, X3, X4, χ5, χ6 0g χ7 hver især er enten hydrogen eller en beskyttelsesgruppe, og X9 er enten en beskyttelsesgruppe eller en forankringsbinding til harpiksbæreren DK 165749 Β 9 7 eller des-X , i hvilket tilfælde det C-terminale led har en carboxyldel; (b) fraspaltning af beskyttelsesgruppen eller -grupperne eller forankringsbindingen fra det nævnte peptid med formlen (II); og (c) om ønsket omdannelse af.et resulte-5 rende peptid til et ikke-toksisk salt deraf.
Ved at vælge en bestemt sidekædebeskyttelsesgruppe til anvendelse ved syntesen af peptiderne, følges følgende generelle regler (a) beskyttelsesgruppen bevarer fortrinsvis dens beskyttende egenskaber og spaltes ikke fra under koblingsbe-10 tingeiserne, (b) beskyttelsesgruppen bør være stabil med hensyn til reagenset og er med undtagelse af Xan fortrinsvis stabil under de valgte reaktionsbetingelser for fjernelse af α-aminobeskyttelsesgruppen i hvert trin af syntesen, og (c) sidekædebeskyttelsesgruppen skal kunne fjernes efter fuld-15 byrdeisen af syntesen indeholdende den ønskede aminosyrese= kvens, under reaktionsbetingelser, som ikke uhensigtsmæssigt ændrer peptidkæden.
Når peptider ikke fremstilles under anvendelse af rekombinant DNA teknologi, fremstilles de fortrinsvis under anvendelse 20 af fast-fase-syntese, som f.eks. den, der generelt er beskrevet af Merrifield, J. Am. Chem. Soc., 85, side 2149 (1963), skønt andre tilsvarende, kendte kemiske synteser også kan anvendes som tidligere nævnt. Fast-fase-syntese påbegyndes fra pep-tidets C-terminale ende ved at koble en beskyttet a-aminosyre 25 til en anvendelig harpiks. Et sådant udgangsmateriale kan fremstilles ved at hæfte en α-aminobeskyttet aminosyre ved en esterbinding til en chlormethyleret harpiks eller en hydroxy= methylharpiks, eller ved en amidbinding til en BHA-harpiks eller MBHA-harpiks. Fremstillingen af hydroxymethylharpiksen 30 er beskrevet af Bodansky et al., Chem. Ind. (London) 38, 1597-98 (1966). Chlormethylerede harpikser er kommercielt tilgængelige fra Bio Rad Laboratories, Richmond, Californien og fra Lab. Systems, Inc.. Fremstillingen af en sådan harpiks er beskrevet af Stewart et al., "Solid Phase Peptide Synthesis"
DK 165749 B
8 (Freeman & Co., San Francisco 1969), kapitel 1, side 1-6.
BHA- og MBHA-harpiksbærere er kommercielt tilgængeligt og anvendes generelt kun, når det ønskede polypeptid, som syntetiseres, har et usubstitueret amid ved C-terminalen.
5 Den C-terminale aminosyre kan kobles først til den chlor-methylerede harpiks ifølge metoden, der er angivet i Chemistry Letters, K. Horiki et al. 165-168 (1978), under anvendelse af KF i DMF ved ca. 60°C under omrøring i 24 timer, når peptidet med 32 aminosyrerester skal syn- 10 tetiseres. Efter koblingen af den BOC-beskyttede aminosyre til harpiksbæreren, fjernes den α-aminobeskyttede gruppe, f.eks. ved anvendelse af trifluoreddikesyre (TFA) i methylen= chlorid eller udelukkende TFA. Afbeskyttelsen foregår ved en temperatur mellem ca. 0°C og stuetemperatur. Andre standard-15 spaltningsreagenser, som f.eks. HC1 i dioxan, og betingelser for fjernelse af specifikke α-aminobeskyttelsesgrupper kan anvendes som beskrevet i Schroder & Lubke, "The Peptides", 1, side 72-75 (Academic Press 1965).
Efter fjernelse af den α-aminobeskyttende gruppe kobles de 20 tilbageblevne α-amino- og sidekædebeskyttede aminosyrer trinvis i den ønskede rækkefølge.med henblik på at opnå det tidligere definerede mellemprodukt, eller som et alternativ til at tilføje hver enkelt aminosyre separat i syntesen, kan nogle af disse kobles til hinanden før de føres til fast-fase-reak-25 toren. Valget af et anvendeligt koblingsreagens følger gængs tradition. Specielt anvendeligt som koblingsreagens er N,N'-dicyklohexy1carbodiimid (DCCI).
De aktiverende reagenser, som anvendes ved fast-fase-syntesen af peptiderne er velkendte i peptidkemien. Eksempler på an-30 vendelige aktiverende reagenser er carbodiimider, som f.eks. Ν,Ν'-diisopropylcarbodiimid og-N-ethyl-N'-O-dimethylamino-propyl)carbodiimid. Andre aktiverende reagenser og deres an- 9
UK10D/4-3B
vendelse ved peptidkoblinger er beskrevet af Schroder & Lubke supra, i kapitel III og af Kapoor, J. Phar. Sci., 59, side 1-27 (1970).
Hver beskyttet aminosyre eller aminosyresekvens føres til 5 fast-fase-reaktoren i et ca. diredobbelt overskud eller mere, og koblingen kan finde sted i et medium af dimethylformamid (DMF): CH2C12 (1:1) eller i udelukkende DMF eller CHjC^· I tilfælde hvor ufuldstændig kobling forekommer, gentages koblingsproceduren før fjernelse af den a-aminobeskyttende 10 gruppe og forud for koblingen af den næste aminosyre. Successen af koblingsreaktionen på hvert trin af syntesen måles fortrinsvis - såfremt det udføres manuelt - ved ninhydrinreaktionen som beskrevet af E. Kaiser et al., Anal. Biochem. 34, 595 (1970). Koblingsreaktionerne kan udføres automatisk, f.eks.
15 på en Beckman 990 automatisk syntetisator, ved anvendelse af et program, som det i Rivier et al. Biopolymers, 1978, 17, side 1927-1938 beskrevne.
Efter fuldendelsen af den ønskede aminosyresekvens, kan den intermediære peptid fjernes fra harpiksbæreren ved behandling 20 med et reagens, såsom flydende hydrogenfluorid, der ikke blot frigør peptidet fra harpiksen, men også afspalter alle resterende sidekædebeskyttelsesgrupper X, X^, X^, X^, X5, X^ 7 9 og X og forankringsbindingen X og også den a-aminobeskyttende gruppe X^, såfremt en sådan anvendes til opnåelse 25 af peptidet i form af den frie syre. Såfremt Met er til stede i sekvensen, fjernes BOC-beskyttelsesgruppen, fortrinsvis først ved anvendelse af trifluoreddikesyre.
(TFA)/ethandithiol forud for afspaltning af peptidet fra harpiksen med HF for at eliminere potentiel S-alkylering. Når 30 hydrogenfluorid anvendes til spaltning, inkluderes anisol og methylethyl som skyllemidler i reaktionsbeholderen.
Følgende eksempel angiver en foretrukken fremgangsmåde til syntese af peptider ved anvendelse af fast-fase-teknikken.
DK 165749 B
10
Eksempel 1.
Syntesen af peptidet [NaMeHis^']-rhGRF(l-43)-OH med formlen:
NaMeHis-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Ser-Ser-Tyr-Arg-Arg-Ile-Leu-Gly-Gln-Leu-Tyr-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-His-Glu-Ile-Met-Asn-Arg-5 Gln-Gln-Gly-Glu-Arg-Asn-Gln-Glu-Gln-Arg-Ser-Arg-Phe-Asn-OH
udføres trinvis under anvendelse af en Beckman 990 peptide synthesizer på en chlormethyleret harpiks med et substitutionsinterval fra ca. 0,1 til 0,5 mmol/g harpiks. Kobling af OC-Asn(Xan) til harpiksen udføres ifølge den generelle 10 fremgangsmåde, der er angivet i Chemistry Letters, supr, under anvendelse af KF i DMF ved ca. 60°C i 24 timer under omrøring, og det resulterer i substitutionen af ca. 0,35 mmol Asn pr. g harpiks.
Efter afblokering og neutralisation opbygges peptidkaeden trin 15 for trin på harpiksen. Afblokering, neutralisering og til sætning af hver aminosyre udføres generelt i overensstemmelse med den i detaljer i Rivier, J, J. Amer. Chem. Soc., 96, 2986-2992 (1974) beskrevne metode. Alle opløsningsmidler, som anvendes, afgasses omhyggeligt under gennembobling med en inert 20 gas, f.eks. helium eller nitrogen, med henblik på at sikre imod tilstedeværelsen af oxygen, hvilket ellers utilsigtet kunne oxidere Met-leddets svovlatom.
Afblokering udføres fortrinsvis i overensstemmelse med skema A, som følger:
DK 165749 B
11
Skema A.
Reagens Blandingstid (min.) 1. 60% TFA/2% ethandithiol 10 2. 60% TFA/2% ethandithiol 15 5 3. IPA/1% ethandithiol 0,5 4. Et3N (10%) i CH2C12 0,5 5. MeOH 0,5 6. Et3N (10%) i CH2C12 0,5 7. MeOH (to gange) 0,5 10 8. CH2C12 (to gange) 0,5
Koblingerne udføres fortrinsvis som beskrevet i skema B, som følger;
Skema B.
Reagens Blandingstid (min.)
15 9. DCCI
10. Boc-Aminosyre 50-90 11. MeOH (to gange) 0,5 12. CH2C12 (to gange) 0,5 13. Ac20 (3M) i CH2C12 15,0 20 14. CH2C12 0,5 15. MeOH 0,5 16. CH2C12 (to gange) 0,5
Der anvendes kort sagt en til to mmol BOC-beskyttet aminosyre i methylenchlorid anvendes pr. gram harpiks plus én ækvivalent 2 5 1/0 molær DCCI i methylenchlorid i to timer. Når BOC-Arg(TOS) er blevet koblet, anvendes en blanding af 50% DMF og methylen= chlorid. Bzl-ether anvendes som hydroxylsidekædebeskyttelses-gruppe for Ser og Thr. Amidogruppen i Asn eller Gin beskyttes af Xan, når DCCkobling anvendes, som det foretrækkes. P-ni= 30 trophenylester(ONp) kan også anvendes til at aktivere car= boxylenden af Asn eller Gin, og f.eks. kan BOC-Asn(ONp) kobles
DK 165749B
12 natten over under anvendelse af én ækvivalent HOBt i en 50% blanding af DMF og methylenchlorid, i hvilket tilfælde DCC ikke tilsættes. 2-chlor-benzyloxycarbonyl(2C1-Z) anvendes som beskyttelsesgruppe for Lys-sidekæden. Tos anvendes til 5 beskyttelse af guanidinogruppen i Arg og imidazolnitrogenet i His, og Glu- eller Asp-sidekædecarboxylgruppen beskyttes med OBzl. Phenolhydroxylgruppen i Tyr beskyttes med 2,6-di= chlorbenzyl(DCB). Efter syntesen er følgende sammensætning opnået: 10 BOC-NaMeHis(X)-Ala-Asp(X3)-Ala-11e-Phe-Thr(X4)-Ser(X4)-Ser(X4)-
Tyr(X2)-Arg(X6)-Arg(X6)-Ile-Leu-Gly-Gln(X5)-Leu-Tyr(X2)-Ala-Arg(X6)-Lys (X7)-Leu-Leu-His(X)-Glu(X3)-Ile-Met-Asn(X5)-Arg(X6)-Gin(X5)-Gin(X5)-Gly-Glu(X3)-Arg(X6)-Asn(X5)-Gin(X5)-Glu(X3)-Gln(X^)Arg(X®)-Ser(X4)-Arg(X^)-Phe-Asn(X^)-X^, hvor X er Tos, 15 X2 er DCB, X3 er OBzl, X4 er Bzl, X5 er Xan, X6 er Tos, X7 er 9 2C1-Z og X er -O-C^-harpiksbærer. Xan kan være delvis eller totalt fjernet af TFA-behandlingen, der anvendes til at fjerne den α-aminobeskyttende gruppe.
For at afspalte og afbeskytte den beskyttede peptid-harpiks, 20 behandles den med 1,5 ml anisol, 0,5 ml methylethylsulfid og 15 ml hydrogenfluorid (HF) pr. gram peptid-harpiks ved -20°C i 1/2 time og ved 0°C i 1/2 time. Efter fjernelse af HF under kraftigt vakuum vaskes den harpikspeptidrest skiftevis med tør diethylether og chloroform, og peptidet ekstra-25 heres derpå med afgasset 2N vandig eddikesyre og skilles fra harpiksen ved filtrering.
Det afspaltede og afbeskyttede peptid opløses dernæst i 0-5% eddikesyre og udsættes for oprensning, hvilket eventuelt kan inkludere Sephadex G-50 fin gelfiltrering.
30 Peptidet oprenses dernæst yderligere ved præparativ eller semi-præparativ HPLC som beskrevet i Rivier et al., Peptides: Structure and Biological Function (1979), side 125-128 og
DK 165749 B
13
Marki et al. J. Am. Chem. Soc. 103, 3178 (1981). Patroner som passer til Waters Associates Prep LC-500 pakkes med 15-20 Clg Silica fra Vydac (300A). En gradient af CH3CN i TEAP dannes ved hjælp af en lavtryks Eldex gradient frembringer, 5 som beskrevet i Rivier, J., J. Liq. Chromatography 1, 343-367 (1978). De kromatografiske fraktioner overvåges omhyggeligt med HPLC, og kun de fraktioner, som er i alt væsentligt rene, opsamles . Afsaltning af de oprensede fraktioner, som hver for sig er undersøgt for renhed, opnås under anvendelsen 10 af en gradient af CH^CN i 0,1% TPA. Den midterste fraktion frysetørres dernæst til opnåelse af det eftertragtede peptid med en renhedsgrad, som kan være større end 98%.
Syntesen gentages under anvendelse af en MBHA-harpiks for ‘ at fremstille det samme peptid med en amideret C-terminus 15 under anvendelse af en begyndelsesprocedure, som generelt beskrevet i Vale et al. US patentskrift nr. 4.292.313 for at koble Asn til MBHA-harpiksen.
Eksempel 2.
Syntesen af et 4O-leddet amideret peptid med formlen: H-C^eHis-20 Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Ser-Ser-Tyr-Arg-Arg-Ile-Leu-Gly-Gln-Leu-Tyr-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-His-Glu-Ile-Met-Asn-Arg-Gln-Gln-Gly-Glu-Arg-Asn-Gln-Glu-Gln-Arg-Ser-NH2 udføres trinvis under anvendelsen af en Beckman 990 Peptide Synthesizer på en MBHA-harpiks, som generelt beskrevet i Vale et al. US patentskrift 25 nr. 4.292.313. Peptidet bedømmes ved anvendelse af TLC og HPLC at være i alt væsentligt rent.
Eksempel 3.
Syntesen af et hpGRF-analogt fragment, f.eks. [CaMePhe(4Cl)^]-hpGRF(1-32)-NH2 med formlen: H-CaMePhe(4C1)-Ala-Asp-Ala-Ile-30 Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-NH2 udføres
DK 165749 B
14 trinvis ved anvendelse af en Beckman 990 Peptide Synthesizer på en MBHA-harpiks som i eksempel 2. Denne analog bedømmes ved anvendelse af TLC og HPLC at være i alt væsentligt ren.
Syntesen gentages for at fremstille C^MePhe1]-hpGRF(l-32)-NH2.
5 Eksempel 4.
Syntesen af et hpGRF-fragment, dvs. [NctMePhe^']-rhGRF(l-29)-NH2 med formlen: N^ePhe-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Ser-Ser-Tyr-Ar g-Arg-1 le-Leu-Gl y-Gl n-Leu-Tyr-Al a-Arg-Ly s -Leu-Leu-Hi s -GI u-Ile-Met-Asn-Arg-NH2 udføres trinvis ved anvendelse af en Beckman 10 990 peptide Synthesizer på en MBHA harpiks som i eksempel 2. Peptidet bedømmes ved anvendelse af TLC og HPLC at være i alt væsentligt rent.
Eksempel 5.
a 1
Syntesen af et rhGRF-analogt fragment, dvs. [C MePhe(4Cl) ]-15 rhGRF(l-29)-NH2 med formlen: H-C^ePheMCl J-Ala-Asp-Ala-Ile-
Phe-Thr-Ser-Ser-Tyr-Arg-Arg-Ile-Leu-Gly-Gln-Leu-Tyr-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-His-Glu-Ile-Met-Asn-Arg-NH2, udføres trinvis ved anvendelse af en Beckman 990 Peptide Synthesizer på en MBHA-harpiks som i eksempel 2. Peptidet bedømmes ved anvendelse 20 af TLC og HPLC at være i alt væsentligt rent.
Adskillige af de syntetiske peptider, der er fremstillet i eksemplerne, er blevet sammenlignet med syntetisk hpGRF(l-40)-OH ved in vitro analyser, og alle viste sig at have generelt større indvirkning på sekretionen af GH og lig-25 nende naturlige aktiviteter.
DK 165749 B
15
For at bestemme effektiviteten af adskillige af de syntetiske peptider med hensyn til at fremme frigivelsen af væksthor-. mon, er in vitro analyser blevet udført under anvendelse af syntetisk hpGRF(1-40)-OH som en standard i ved sideløbende 5 sammenligning med ækvimolære koncentrationer af de forskellige andre analoger og syntetiserede fragmenter. Der er anvendt kulturer, som inkluderer celler fra rottehypofysekirtler, der er udtaget fra tre til fem dage tidligere. Kulturer, som antages at være optimale for sekretion af væksthormon, anvendes 10 til sammenligningsanalysen i henhold til den generelle metode, der er beskrevet i Vale et al. Endocrinology, 91, 562-572 (1972), og som er mere detaljeret beskrevet i Vale et al. Endocrinology, (1983), in press. Inkubation med stoffet, som skal afprøves, finder sted i 3 til 4 timer, og prøver fra 15 næringssubstratet fjernes og behandles for at måle deres indhold i immunoreaktiv GH(ir GH) ved en velkarakteriseret radioim-munoanalyse.
Resultaterne fra denne sammenligningsundersøgelse af ækvimolære koncentrationer er vist i tabel I.
20 Tabel I.
Peptid Sammenligning %
hpGRF(1-40)-OH
(standard for denne test) 100 [D-Glu25, Nle27]-rGRF(1-29)-NH2 125 25 [D-Leu1, Nle27]-rGRF(1-29)-NH2 160 [D-Leu17, Nle27]-rGRF(l-29-NH2 138 [N<XMePhe1]-hpGRF(l-32)-NH2 12 [C0iMePhe1(4Cl) ]-hpGRF(l-32)-NH2 4,7
In vitro-undersøgelse af disse syntetiske peptider viser, 30 at de hver især har hpGRF(1-40)-OH's fulde naturlige biologiske virkning. Den maksimale effektive koncentration af [D-Leu1, Nle27]-hpGRF(1-29)-NH2 er ca. 1 nanomolær.
DK 165749 B
16 I tilgift til in vitroundersøgelse for sekretion af væksthormon, udføres in vivo forsøg med injektion af de syntetiske peptider igennem et indlagt kateter i frit omkringløbende normale hanrotter efter forudgående behandling med FLA-63, en dopamin= 5 hydroxylaseinhibitor, som undertrykker spontan GH-sekretion uden at påvirke reaktionen på exogen GRF. Blodprøver udtages igennem det samme kateter umiddelbart forud for, samt 5 og 20 minutter efter injektioner. GH-koncentrationer i blod, 23 målt ved radioimmunoanalyse, viser at syntetisk [D-Leu , 10 Nle^]rGRF(l-29)-NH2r andre D-Leu^ og D-Glu^-analoger af rGRF og de oven over beskrevne NaMe- og CaMe-analoger af hpGRF(l-32)-NH2 er kraftigt virkende stimulatorer af sekretionen af hypofyse og har betydelig længere virkningstid end henholdsvis rGRF(1-29)-NH2 og hpGRF(1-32)-NH2· Andre kendte GRF 15 in vivo undersøgelse, som vides at være effektive med henblik på at påvist sekretion af GH, er blevet anvendt for at bekræfte disse resultater. Doser på mellem ca. 100 nanogram og ca.
50 mikrogram af disse peptider pr. kg legemsvægt betragtes som værende effektive med hensyn til at forårsage GH-sekretion. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 Sådanne syntetiske hpGRF-analoger og muligvis rGRF- og pGRF- 2 analoger kan være nyttige til humane anvendelser, hvor· en 3 læge ønsker at øge GH-produktion. Stimulering af GH-sekretion 4 med sådanne analoger er af interesse hos patienter med komplet 5 eller relativ GH-mangel, der. er forårsaget af utilstrækkelig 6 produktion af endogent GRF. Desuden er det sandsynligt, at 7 øget GH-sekretion og den deraf følgende øgede vækst kan opnås 8 i mennesker eller dyr med normale GH-niveauer. Endvidere vil 9 indgift kunne ændre legemets fedtindhold og modificere andre 10 GH-afhængige metaboliske, immunologe og udviklingsmæssige 11 processer. F.eks. kan disse analoger være anvendelige som 12 en måde at stimulere anaboliske processer i mennesker under 13 omstændigheder som f.eks. følge af forbrændinger. Som et andet 14 eksempel kan disse analoger indgives til varmblodede dyr der 15 opdrættes, som f.eks. høns, kalkuner, svin, geder, kvæg og 16 får, og de kan desuden anvendes i vandkulturer til opdræt af fisk og andre koldblodede marinedyr, som f.eks. havskild-padder og ål, amfibier, for at fremme væksten og Øge for-
DK 165749 B
17 holdet imellem protein og fedt, der opnås ved fodring med effektive mængder af peptiderne.
Til indgift til mennesker bør disse syntetiske peptider have en renhedsgrad på mindst ca. 93% og helst mindst 98%.Renhed 5 refererer har til det tilsigtede peptid, der udgør den til det tilsigtede peptid, der udgør den anførte vægt% af alle tilstedeværende peptider og peptidfragmenter. Til indgift af sådanne syntetiske peptidder til opdrættede og andre dyr med det formål at øge væksten og reducerer fedtindhold, kan 10 en renhed så lav som ca. 5%, eller endog så lav som 0,01%, være acceptabel.
Disse syntetiske peptider eller deres ikke-toksiske salte, som kombineret med en farmaceutisk eller veterinær acceptabel bærer udgør en farmaceutisk sammensætning, kan administreres 15 til dyr inklusive mennesker enten intravenøst, subkutant, intramuskulært, perkutant f.eks. intranasalt eller endog oralt. Indgiften kan udføres af en læge for at stimulere frigivelsen af GH, hvor den behandlede har brug for en sådan terapeutisk behandling. Den påkrævede dosis vil variere alt efter den 20 særlige lidelse, der behandles, lidelsens alvorlighed og varigheden af den ønskede behandling.
Sådanne peptider indgives ofte i form af ikke-toksiske salte, som f.eks. syreadditionssalte eller metalkomplekser, f.eks. med zink, jern eller lignende (som betragtes som salte i denne 25 sammenhæng). Eksempler på sådanne syreadditionssalte er hy= drochlorid, hydrobromid, sulfat, phosphat, maleat, acetat, citrat, benzoat, succinat, maleat, ascorbat, tartrat og lignende. Hvis den aktive bestanddel indgives oralt i tabletform, kan tabletten indeholde et bindemiddel som f.eks. tra= 30 gant, majsstivelse eller gelatine, et disintegrerende middel, som f.eks. algininsyre, og et smøremiddel, som f.eks. mag-nesiumstearat. I tilfælde af indgift i flydende form kan anvendes sødemiddel og/eller smagsstof, og intravenøs indgift i isotonisk saltvand, phosphatpufferopløsninger eller lig-35 nende kan gennemføres.
Claims (9)
1. Syntetisk GRF-analogt peptid, kendetegnet ved formlen: Ri-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Rg-Ser-Tyr-Arg-Ri2~Ri3~ Leu-Gly-Gln-Ri7-Rig-Ala-Arg-Lys-Leu-R23-R24-R25-1^e-R27_R28~ Arg-Gln-Gln-Gly-Y, hvor Y er OR, R, NRR’ eller NH-NHR, eller 15 hele peptidets C-terminal er CH2OR, og R og R* er hydrogen, lavere alkyl eller fluor-lavere alkyl, hvor R^ er Phe, pCl-Phe eller His, som har enten en CaMe eller NaMe-substitution eller er usubstitueret; Rg er Ser eller Asn, R^2 er Arg eller Lys; Rl3 er Ile eller Val; Rj7 er Leu eller D-Leu; R^g er Tyr eller 20 Ser; R23 er Leu eller D-Leu; R24 er His eller Gin; R25 er Glu, Asp eller D-Glu; R27 er Met eller Nle og R28 er Asn eller Ser; forudsat imidlertid, at enten (a) R^ har en CaMe eller en NaMe-substitution, eller (b) R-^η og/eller R23 er D-Leu eller (c) R25 er D-Glu og forudsat også, at Gln-Gln-Gly kan være 25 udeladt ved C-terminalen; eller et ikke-toksisk salt deraf.
2. Peptid ifølge krav 1, kendetegnet ved, at R25 er D-Glu.
3. Peptid ifølge krav 1 eller 2, kendetegnet ved, at R23 er D-Leu.
4. Peptid ifølge ethvert af kravene 1, 2 eller 3, k e n -detegnet ved, at R17 er D-Leu. 35
5. Peptid ifølge ethvert af kravene 1-4, kendetegnet ved, at R27 er Nle. DK 165749B
6. Peptid ifølge krav 1, kendetegnet ved, at Rj7 er Leu, R23 er D-Leu, R25 er Glu, R27 er Nle, og Gln-Gln-Gly mangler.
7. Peptid ifølge krav 6, kendetegnet ved, at Rj er His, Rg er Ser, R^2 er Arg, r13 Ile, R^g er Tyr, R24 er His, og R28 er Asn.
8. Peptid ifølge ethvert af kravene 1-5, kendeteg-10 net ved, at R^ har en CaMe- eller NaMe-substitution.
9. Farmaceutisk middel til at stimulere frigivelsen af GH i et dyr, kendetegnet ved, at det omfatter peptiderne ifølge ethvert af kravene 1-8 eller et ikke-toksisk salt 15 deraf, og en farmaceutisk eller veterinært acceptabel, flydende eller fast bærer for disse. 20 25 1 35
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US53217083A | 1983-09-13 | 1983-09-13 | |
| US53217083 | 1983-09-13 | ||
| US54509483 | 1983-10-25 | ||
| US06/545,094 US4518586A (en) | 1983-01-13 | 1983-10-25 | GRF Analogs III |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK433684D0 DK433684D0 (da) | 1984-09-11 |
| DK433684A DK433684A (da) | 1985-03-14 |
| DK165749B true DK165749B (da) | 1993-01-11 |
| DK165749C DK165749C (da) | 1993-06-14 |
Family
ID=27063766
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK433684A DK165749C (da) | 1983-09-13 | 1984-09-11 | Grf-analoge peptider og farmaceutisk acceptable salte heraf samt farmaceutisk middel indeholdende disse |
Country Status (21)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4518586A (da) |
| EP (1) | EP0146210B1 (da) |
| JP (1) | JPH0689035B2 (da) |
| AU (1) | AU577057B2 (da) |
| CA (1) | CA1271599A (da) |
| DE (1) | DE3462603D1 (da) |
| DK (1) | DK165749C (da) |
| ES (1) | ES8600217A1 (da) |
| FI (1) | FI88402C (da) |
| GR (1) | GR80335B (da) |
| HU (1) | HU200192B (da) |
| IE (1) | IE57774B1 (da) |
| IL (1) | IL72799A (da) |
| IN (1) | IN160247B (da) |
| MX (1) | MX161018A (da) |
| NO (1) | NO166944C (da) |
| NZ (1) | NZ209515A (da) |
| PH (1) | PH22310A (da) |
| PT (1) | PT79189B (da) |
| SU (1) | SU1435157A3 (da) |
| YU (1) | YU45968B (da) |
Families Citing this family (43)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4728726A (en) * | 1982-10-04 | 1988-03-01 | The Salk Institute For Biological Studies | GRF analogs IIIb |
| AU575843B2 (en) * | 1983-08-10 | 1988-08-11 | The Administrators Of The Tulane Eductional Fund | Growth hormone releasing peptides |
| US4626523A (en) * | 1983-09-13 | 1986-12-02 | The Salk Institute For Biological Studies | GRF analogs II |
| US4617149A (en) * | 1983-09-21 | 1986-10-14 | Eli Lilly And Company | Growth hormone release factor analogs |
| US4528190A (en) * | 1983-10-25 | 1985-07-09 | The Salk Institute For Biological Studies | GRF Analogs IV |
| US4649131A (en) * | 1984-09-24 | 1987-03-10 | Hoffmann-La Roche Inc. | Growth hormone releasing factor analogs |
| CA1271600A (en) * | 1985-01-07 | 1990-07-10 | David Howard Coy | Growth hormone-releasing peptides and method of treating mammals therewith |
| EP0193910A3 (en) * | 1985-03-06 | 1988-11-23 | Sumitomo Pharmaceuticals Company, Limited | Synthesis of a derivative of grf and intermediate peptides |
| US4734399A (en) * | 1985-08-06 | 1988-03-29 | Hoffmann-La Roche Inc. | Growth hormone releasing factor analogs |
| DK382886A (da) * | 1985-08-12 | 1987-02-13 | Syntex Inc | Fremgangsmaade til fremstilling af hormonfaktorderivater |
| US4689318A (en) * | 1985-08-29 | 1987-08-25 | The Salk Institute For Biological Studies | GRF analogs |
| US4870054A (en) * | 1985-09-27 | 1989-09-26 | Recker Robert R | Treatment for osteoporosis using GRF or a biologically active analog thereof |
| US4880778A (en) * | 1986-05-12 | 1989-11-14 | Eastman Kodak Company | Combinations having synergistic growth hormone releasing activity and methods for use thereof |
| IL84758A (en) * | 1987-01-13 | 1992-03-29 | Salk Inst For Biological Studi | Peptides stimulating the release of pituitary growth hormone in fish and amphibians,and pharmaceutical compositions containing them |
| IL86102A (en) * | 1987-05-11 | 1994-04-12 | Univ Tulane | Alkylated peptides that release growth hormone and their use |
| US5002931A (en) * | 1987-05-22 | 1991-03-26 | The Salk Institute For Biological Studies | GRF analogs VII |
| US4839344A (en) * | 1987-06-12 | 1989-06-13 | Eastman Kodak Company | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity |
| USRE33699E (en) * | 1987-07-09 | 1991-09-24 | International Minerals & Chemical Corp. | Growth hormone-releasing factor analogs |
| US4801456A (en) * | 1987-07-09 | 1989-01-31 | International Minerals & Chemical Corp. | Growth hormone-releasing factor analogs |
| US4880777A (en) * | 1987-09-01 | 1989-11-14 | Eastman Kodak Company | Synthetic peptides having growth hormone releasing activity |
| EP0400051B1 (en) * | 1988-01-28 | 1995-05-10 | Polygen Holding Corporation | Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity |
| US5043322A (en) * | 1988-07-22 | 1991-08-27 | The Salk Institute For Biological Studies | Cyclic GRF analogs |
| US5023322A (en) * | 1988-08-31 | 1991-06-11 | Mta Kutatas-Es Szervezetelemzo Intezete | Analogs of growth hormone releasing factor (GRF) and a method for the preparation thereof |
| US5756458A (en) * | 1989-06-16 | 1998-05-26 | Pharmacia & Upjohn Company | Stabilized potent GRF analogs |
| EP0544706A4 (en) * | 1990-06-29 | 1993-10-13 | Hoffmann-La Roche Inc. | Histidine substituted growth hormone releasing factor analogs |
| ATE119916T1 (de) * | 1990-12-10 | 1995-04-15 | Hoffmann La Roche | Verfahren zur enzymatischen herstellung von grf(1-44)nh2. |
| JPH05507939A (ja) * | 1991-04-09 | 1993-11-11 | エフ・ホフマン―ラ ロシユ アーゲー | 成長ホルモン放出因子の類似体 |
| US5246920A (en) * | 1992-06-15 | 1993-09-21 | University Of South Florida | Treatment of hyperprolactinemia |
| US5811074A (en) * | 1992-06-29 | 1998-09-22 | University Of South Florida | Method of diagnosing pituitary dependent growth hormone deficiency |
| US5550212A (en) * | 1993-12-17 | 1996-08-27 | The Administrators Of The Tulane Educational Fund | Analogues of hGH-RH(1-29)NH2 having antagonistic activity |
| JP2004520395A (ja) * | 2001-02-02 | 2004-07-08 | コンジュケム，インコーポレーテッド | 長期持続性成長ホルモン放出因子誘導体 |
| MXPA05002991A (es) * | 2002-09-18 | 2005-10-05 | Univ Montreal Ct Hospitalier Chum | Analogos de ghrh. |
| JP5649825B2 (ja) | 2007-01-31 | 2015-01-07 | デイナ ファーバー キャンサー インスティチュート，インコーポレイテッド | 安定化させたｐ５３ペプチドおよびその使用法 |
| CA2682174C (en) | 2007-03-28 | 2021-04-06 | President And Fellows Of Harvard College | Stitched polypeptides |
| WO2009009727A2 (en) * | 2007-07-12 | 2009-01-15 | Akela Pharma Srl | Ghrh analogs and therapeutic uses thereof |
| PL2603600T3 (pl) | 2010-08-13 | 2019-06-28 | Aileron Therapeutics, Inc. | Makrocykle peptidomometyczne |
| WO2012142706A1 (en) | 2011-04-21 | 2012-10-26 | Theratechnologies Inc. | Growth hormone releasing factor (grf) analogs and uses thereof |
| AR088392A1 (es) | 2011-10-18 | 2014-05-28 | Aileron Therapeutics Inc | Macrociclos peptidomimeticos |
| CN104144695A (zh) | 2012-02-15 | 2014-11-12 | 爱勒让治疗公司 | 三唑交联的和硫醚交联的拟肽大环化合物 |
| RU2017145921A (ru) | 2012-02-15 | 2019-02-21 | Эйлерон Терапьютикс, Инк. | Пептидомиметические макроциклы |
| KR20150082307A (ko) | 2012-11-01 | 2015-07-15 | 에일러론 테라퓨틱스 인코포레이티드 | 이치환 아미노산 및 이의 제조 및 사용 방법 |
| SG10201902594QA (en) | 2014-09-24 | 2019-04-29 | Aileron Therapeutics Inc | Peptidomimetic macrocycles and uses thereof |
| KR20170129879A (ko) | 2015-03-20 | 2017-11-27 | 에일러론 테라퓨틱스 인코포레이티드 | 펩티드모방 거대고리 및 이의 용도 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NZ204456A (en) * | 1982-06-16 | 1987-05-29 | Salk Inst For Biological Studi | Synthetic pancreatic growth-hormone releasing factor |
| IL70530A (en) * | 1983-01-13 | 1986-09-30 | Salk Inst For Biological Studi | Synthetic peptides having growth hormone releasing factor activity and compositions containing them |
| ZA841638B (en) * | 1983-03-07 | 1984-10-31 | Hoffmann La Roche | Polypeptides |
| AU575843B2 (en) * | 1983-08-10 | 1988-08-11 | The Administrators Of The Tulane Eductional Fund | Growth hormone releasing peptides |
| PT79094B (en) * | 1983-08-29 | 1986-08-14 | Salk Inst For Biological Studi | Grf analogs |
-
1983
- 1983-10-25 US US06/545,094 patent/US4518586A/en not_active Expired - Lifetime
-
1984
- 1984-08-29 IL IL72799A patent/IL72799A/xx not_active IP Right Cessation
- 1984-08-31 AU AU32594/84A patent/AU577057B2/en not_active Expired
- 1984-09-06 IN IN682/MAS/84A patent/IN160247B/en unknown
- 1984-09-11 GR GR80335A patent/GR80335B/el unknown
- 1984-09-11 DK DK433684A patent/DK165749C/da not_active IP Right Cessation
- 1984-09-11 MX MX202665A patent/MX161018A/es unknown
- 1984-09-11 PT PT79189A patent/PT79189B/pt unknown
- 1984-09-11 NO NO843592A patent/NO166944C/no not_active IP Right Cessation
- 1984-09-12 YU YU157984A patent/YU45968B/sh unknown
- 1984-09-12 NZ NZ209515A patent/NZ209515A/xx unknown
- 1984-09-12 HU HU843447A patent/HU200192B/hu unknown
- 1984-09-12 SU SU843791983A patent/SU1435157A3/ru active
- 1984-09-12 DE DE8484306234T patent/DE3462603D1/de not_active Expired
- 1984-09-12 FI FI843579A patent/FI88402C/fi not_active IP Right Cessation
- 1984-09-12 ES ES535846A patent/ES8600217A1/es not_active Expired
- 1984-09-12 EP EP84306234A patent/EP0146210B1/en not_active Expired
- 1984-09-12 IE IE2324/84A patent/IE57774B1/en not_active IP Right Cessation
- 1984-09-13 CA CA000463107A patent/CA1271599A/en not_active Expired - Lifetime
- 1984-09-13 PH PH31207A patent/PH22310A/en unknown
- 1984-09-13 JP JP59192420A patent/JPH0689035B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DK165749B (da) | Grf-analoge peptider og farmaceutisk acceptable salte heraf samt farmaceutisk middel indeholdende disse | |
| FI92210B (fi) | Menetelmä farmaseuttisesti käyttökelpoisten GRF-analogien valmistamiseksi | |
| US4563352A (en) | Human pancreatic GRF | |
| US4529595A (en) | GRF Analogs | |
| US4626523A (en) | GRF analogs II | |
| US4610976A (en) | Porcine GRF | |
| US4585756A (en) | Bovine GRF | |
| DK162649B (da) | Analogifremgangsmaade til fremstilling af pgrf eller pgrf-analoge peptider, farmaceutisk acceptable additionssalte heraf samt mellemprodukt til brug ved fremgangsmaaden | |
| US4595676A (en) | Rat hypothalamic GRF | |
| EP0117034B1 (en) | Grf analogs | |
| JP2739910B2 (ja) | 環状ｇｒｆ類似体 | |
| US4628043A (en) | Hypothalamic GRF agonists | |
| US4728726A (en) | GRF analogs IIIb | |
| US4784987A (en) | GRF analogs VI | |
| JP2758901B2 (ja) | Ｇｒｆ類似体▲ｖｉｉ▼ | |
| US5098995A (en) | GRF Analogs VIIA | |
| EP0107890B1 (en) | Mammalian pgrf | |
| US4843064A (en) | GRF analogs V | |
| US4703035A (en) | Human pancreatic GRF amidated fragments | |
| CZ3004U1 (cs) | Peptidy a farmaceutické prostředky s jejich obsahem | |
| CS276972B6 (en) | Peptides, process of their preparation and pharmaceutical containing thereof |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PUP | Patent expired |