DK163665B - Beta-methylen-furan-ethanaminer - Google Patents

Description

DK 163665 B

Den foreliggende opfindelse angår hidtil ukendte /3-methylen-furan-ethanaminer som udviser dopamin-/3-hydroxy-lase-inhiberende virkning og er anvendelige til behandling af hypertension.

5 Det er kendt, at β-methylen-phenylethanamin udviser dopamin-/3-hydroxylase-inhiberende (DBH-inhiberende) virkning, jf. S.W. May, P.W. Mueller, S.R. Padgette, H.H. Herman og R.S. Philips, Biochem. Biophys. Res. Commun. 110. 161 (1983).

Det har nu vist sig, at de tilsvarende furylforbin-10 delser udviser en overraskende forbedret DBH-inhiberende virkning i forhold til denne kendte forbindelse.

Opfindelsen angår således /3-methylen-furanethanaminer med formlen I

15 _ CH2 (1^ jj—c-ch2nh2 20 nemlig j8-methylen-2-furanethanamin og /3-methylen-3-furan-ethanamin, og de ugiftige farmaceutisk acceptable syreadditionssalte deraf.

25 Repræsentative salte er sådanne salte, som er dannet med ugiftige organiske eller uorganiske syrer, f.eks. salte dannet ud fra de følgende syrer: saltsyre, hydrogenbromid-syre, sulfonsyre, svovlsyre, phosphorsyre, salpetersyre, maleinsyre, fumarsyre, benzoesyre, ascorbinsyre, ravsyre, 30 methansulfonsyre, eddikesyre, propionsyre, vinsyre, citronsyre, mælkesyre, æblesyre, mandelsyre, kanelsyre, palmitin-syre, itaconsyre og benzensulfonsyre.

De her omhandlede forbindelser med formlen (I) kan let fremstilles ved en række reaktioner illustreret ved det 35 følgende reaktionsskema:

O

2

DK 163665 B

H

5

II III IV

. O-C-* OrCpJ — ·

V VI

I det væsentlige viser reaktionsskemaet ovenfor omdan-15 nelsen af 2- eller 3-acetyl-derivater af furan til de tilsvarende 2- eller 3-isopropyliden-derivater ved reaktioner med methylmagnesiumbromid med efterfølgende dehydrering ifølge standard-Grignard-reaktionsbetingelser. Isopropyliden-deriva-terne med formlen (IV) underkastes allyl-chlorering ifølge 20 standard-betingelser, og råprodukterne med formlen (V) omdannes (via phthalimid-derivater med foralen (VI)) ved den velkendte Gabriel-syntese til dannelse af de ønskede forbindelser med formlen I. De frie baser kan omdannes til syreadditions-saltene/ eller syreadditionssaltene kan omdannes til de frie 25 baser/ ved konventionel kemisk metodik.

Det ovennævnte reaktionsskema illustreres ved det følgende specifikke eksempel.

Eksempel 30 B-Methylen-2-furanethanamin-hydrochlorid

Trin A; 2-(1-Methyl)-ethenylfuran

En opløsning af 55/06 g (0,5 mol) 2-acetylfuran i 100 ml vandfri ether sættes dråbevis under i løbet af 1,5 35 timer til 211 ml 2,85 M methylmagnesiumbromid/ether (0,6 mol), medens reaktionsblandingen omrøres i et isbad. Temperaturen holdes under 30°C ved regulering af tilsætningshastig- 3

DK 163665 B

O

heden. Der dannes et gråt bundfald. Blandingen får lov til at opvarme til 25°C i 1 time, hvorpå den igen afkøles i et isbad, medens der forsigtigt tilsættes 100 ml mættet NaHCO^-ropløsning. Den fremkomne masse opløses i ca. 1 liter vand, 5 og den vandige fase ekstraheres to gange med ether. De kombinerede etheropløsninger ekstraheres med mættet NaCl-opløs-ning, tørres over l^CO^, filtreres og koncentreres ved atmosfærisk tryk til en gul olie. Til denne rå alkohol sættes 5,0 g KHSO4 og ca. 0,1 g 4-tert.butylcatechol (inhibitor), 10 og blandingen destilleres ved 1 atm. En blanding af det ønskede produkt og vand destillerer over ved ca. 90°C. Vandet fraskilles, og produktet tørres over I^CO^, hvorpå det filtreres til dannelse af 8,5 g farveløs olie. På lignende måde fremstilles 3-(1-methyl)-ethenylfuran.

15

Trin B; N-2-(2-Furanyl)-propenylphthalimid

Til en opløsning af 8,35 g (0,077 mol) af olefinen i trin A i 310 ml DMF sættes 12,37 g (0,093 mol) N-chlorsucci-nimid og 1,46 g (0,0047 mol) diphenyldiselenid. Efter 3 timer 20 ved stuetemperatur fordeles blandingen mellem 500 ml hexan og 1000 ml 5%'s ^2820^. Hexanet afdestilleres ved atmosfærisk tryk, og remanensen opløses i 200 ml DMF, der tilsættes 9,49 g (0,051 mol) kaliumphthalimid, og blandingen opvarmes til 90°C under Efter 45 minutter hældes den afkølede reak-25 tionsblanding i vand, og det udfældede produkt frafiltreres og omkrystalliseres fra ethylacetat/2-propanol, hvilket giver 3,57 g farveløse krystaller med smp. 136-137°C.

Analyse for C15H11N02S: C% H% N% 30 Beregnet: 66,90 4,12 5,20

Fundet: 66,82 4,30 4,97 På lignende måde fremstilles N-2-(3-furanyl)-propenylphthalimid.

35

O

4

DK 163665 B

Trin C? 6-Methylen-2-furanethanamin-HCl

Til en magnetisk omrørt suspension af 3,50 g (13,83 mmol) af phthalimidet fremstillet i trin B sættes 1,34 g (27,64 mmol) hydrazinhydrat og 400 ml ethanol, og blandingen 5 tilbagesvales under Nj i 1 time, og i løbet af denne tid dannes et tykt bundfald. Den afkølede blanding destilleres med 1 Μ KOH til opløsning af bundfaldet, hvorpå den ekstraheres med ether. Etherlaget vaskes med 1 M KOH og ekstraheres derpå med 1 M HCl. Det sure lag gøres basisk med 5 N NaOH, hvorpå 10 det mættes med NaCl og ekstraheres med ether. Etherfasen tørres over K2C03 °9 koncentreres til en gul olie. Destillation giver 1,23 g farveløs væske med kp. 40°C ved 0,5 mm Hg. Aminen optages i ether og afkøles i et isbad, og en mættet opløsning af vandfrit HCl i ether tilsættes dråbevis, indtil der ikke 15 dannes mere bundfald. De flygtige bestanddele fjernes under vakuum, og remanensen omkrystalliseres fra ethano1/ethylace-tat til dannelse af 1,2 g farveløse krystaller med smp. 150-151°C.

Analyse for C^HgNO*HCl: 20 C% H% N%

Beregnet: 52,68 6,31 8,78

Fundet: 52,48 6,43 8,61

De her omhandlede allylaminer er dopamin-β-hydroxylase-25 (DBH) -inhibitorer på en mekanisme-baseret måde; idet inaktiveringen er tids- og koncentrations-afhængig. Forbindelserne. med formlen I forventes derfor at være værdifulde terapeutiske midler, som er nyttige ved behandling af hypertension.

De dopamin-p-hydroxylase-inhiberende egenskaber af de 3Q her omhandlede forbindelser kan let bestemmes ved velkendte standard-procedurer, f.eks. procedurerne beskrevet i US patentskrift nr. 4.415.591. F.eks. eksemplificeres bestemmelse af, hvorvidt DBH-inhiberingen tillader tidsafhængig kinetik, ved en procedure, ved hvilken enzymatisk oxygenering med DBH be-35 stemmes i vandig opløsning i nærværelse af molekylært oxygen, en elektrondonor, såsom ascorbat, og de nødvendige co-fak-torer for enzymet ved en pH-værdi på 5 og en temperatur på

O

DK 163665 B

5 20-40°C, fortrinsvis 37°C. Forsøgsforbindelsen tilsættes i den ønskede koncentration, og systemet inkuberes. Portioner tages ved forskellige tidsintervaller, og DBH-aktiviteten måles ved anvendelse af tyramin som substrat, og reaktionen 5 følges ved måling af oxygenoptagelsen ved anvendelse af en polarografisk elektrode og en oxygen-monitor ved metoden i-følge S. May et a., J. Biol. Chem. 256, 2258 (1981). Inhi-beringskonstanterne for inaktiveringen af DBH med hver forbindelse bestemmes ved konventionelle procedurer, såsom me-10 toden ifølge Kitz og Wilson, J. Biol. Chem. 237, 3245 (1962) .

Når forbindelsen vist i tabel I testes ifølge den ovenfor beskrevne procedure, forøges den DBH-inhiberende aktivitet som en funktion af inkubationstiden. Begyndelseshastigheden af aktivitetsnedsættelsen forøges med stigende koncentration 15 af inhibitor. Resultaterne i tabel I viser, at B-methylen-2--furanethanamin er aktivt som illustreret ved den hurtige inaktiveringshastighed (K. = . ) og lave inhiberingskonstant lliaCL · (κχ).

20 Tabel I

DBH-inhiberende aktivitet - in vitro

Forbindelse K^. (mM) iSinact tøfl*1"'*') 25 3-Methylen-2-furanethanamin 8 0,004

Tabel II

Antihypertensiv virkning - in vivo

Dosis Maksimumsændring i % af 30 Forbindelse mg/kg gennemsnitsblodtryk B-Methylen-2-furanethan- amin 10 (ip) 18 30 (ip) 32 35

DK 163665 B

6

De her omhandlede forbindelsers evne til at sænke blod-; trykket kan bestemmes in vivo ved anvendelse af hypertensive rotter ifølge velkendte standard-procedurer. Forsøgsforbindelsen indgives intraperitonealt (ip) eller oralt (po) til 5 rotter/ og blodtrykket måles uafbrudt. Da DBH er et hovedenzym ved syntesevejen for catecholaminer, forventes det/ at nærværelsen af en inhibitor vil formindske mængden af fremstillede catecholaminer og derved have en antihypertensiv virkning. Resultaterne af testningen af denne antihyperten- 10 sive virkning er vist i tabel II.

Ved en anden test som beskrevet af Barger et al. (Communications to the Editor/ J. Med. Chem. 29., 315-317 (1986)) undersøges β-methylen-2-furanethanamin og /3-methy-len-3-furanethanamin og sammenlignes med /3-methylen-phenyl- 15 ethanamin in vitro for deres dopamin-jø-hydroxylase-inhibe-rende egenskaber med følgende resultater:

TABEL III

20 Kinetiske konstanter for dopamin-fi-hvdroxylase-inhibitorer.

Forbindelse3 KIf/iM kcat/ min"1 kcat/Kx, M"1 min"1 25 I 410 0,130 317 II 230 0,077 334 III 13000 0,04 3 30 a) Forbindelse I - j3-Methylen-2- fur anethanamin II - /3-Methylen-3-furanethanamin III - /3-Methylen-phenylethanamin 35 Man kan af tabel ill konkludere ud fra beregningerne

DK 163665 B

7 af kcat/KI' som nærmer sig DBH-inhiberingsraten ved koncentrationer af inhibitor meget mindre end Kj, at /9-methy-len-2-furanethanamin og β-methylen-3-furanethanamin hver især er over 100 gange mere virksomme som inhibitorer af 5 dopamin-/3-hydroxylase in vitro end /3-methylen-phenylethan-axnin.

Baseret på disse og andre standard-laboratoriemetoder/ som kendes til bedømmelse af dopamin-B-hydroxylase-inhibito-rer ved standard-toksicitetsforsøg og ved standard-farmakolo-10 giforsøg til bestemmelse af antihypertensiv virkning hos pattedyr og ved sammenligning af disse resultater med resultaterne med kendte antihypertensive midler, kan den effektive antihypertensive dosis af de her omhandlede forbindelser således let bestemmes. Sædvanligvis kan effektive antihyper-15 tensive resultater opnås ved en dosis på ca. 5 til ca. 100 mg pr. kg legemsvægt pr. dag. Naturligvis vil den specifikke begyndelses- og fortsatte dosis for hver patient variere i-følge naturen og alvoren af hypertensionen, som bestemt af den pågældende diagnostiker.

20 I deres funktion som terapeutisk anvendelige forbindel ser er det fordelagtigt at indgive forbindelserne til værtsdyret i blanding med en acceptabel farmaceutisk bærer, som egner sig til enterisk eller parenteral indgivelse, idet den nævnte bærer udgør en større del af blandingen. Sådanne præ-25 parater kan være i form af f.eks. tabletter, kapsler og suppositorier, eller i flydende former, f.eks. eliksirer, emulsioner, sprøjtevæsker og injektionsopløsninger. Ved formuleringen af farmaceutiske præparater kan der anvendes sådanne stoffer, som ikke reagerer med aktivt stof, f.eks. vand, 30 gelatine, lactose, stivelse, magnesiumstearat, talkum, vegetabilske olier, benzylalkoholer, gummier, polyalkylenglycoler, vaseline og lignende. Den aktive bestanddel af sådanne farmaceutiske præparater er fortrinsvis til stede i præparatet i sådanne vægtforhold, at vægtforholdet af den aktive bestand-del, som skal indgives, ligger mellem 0,1 og 50%.

Claims (2)

1. 2. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den er j8-methylen-2-furanethanamin.
2. 3. Forbindelse ifølge krav 1,kendetegnet ved, at den er /3-methylen-3-furanethanamin. 20 25 30 35