DK159267B

DK159267B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af taurinderivater eller homotaurinderivater eller fysiologisk acceptable salte deraf

Info

Publication number: DK159267B
Application number: DK443077A
Authority: DK
Inventors: Laszlo Feuer; Arpad Furka; Ferenc Sebestyen; Jolan Hercsel; Erzsebet Bendefy
Original assignee: Chinoin Gyogyszer Es Vegyeszet
Priority date: 1974-04-29
Filing date: 1977-10-06
Publication date: 1990-09-24
Also published as: DK182875A; CA1051802A; ES453306A1; ATA624777A; DK442577A; DK442477A; FR2279388A1; ES453304A1; DK442377A; ATA624877A; CH624098A5; DK245783A; DE2559989C3; ATA323079A; ATA323179A; NO146430B; DE2559989B1; AR218221A1; NL7505075A; SU747419A3

Description

DK 159267 B

Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte taurinderivater eller homotaurinderivater med værdifulde biologiske og farmaceutiske virkninger.

De ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede 5 forbindelser har den almene formel R1-NH-CH-COA1 i

(CH,)n I

I i n CO-N-(CH0).-SO,H i /ti

10 R

hvor 1 1 A , R, R , n og t har de i kravets indledning angivne betydninger eller er fysiologisk acceptable salte eller optisk aktive antipoder deraf.

15 De omhandlede forbindelser har værdifulde biologiske eller farmakologiske virkninger. Alle de ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser er hidtil ukendte.

Blandt de ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser skal på grund af dens biologiske virkning navnlig fremhæves γ-L-20 glutamyltaurin, der svarer til formlen

H0 N-CH-COOH

2 i

?H

I ά XXIV

CH0 25 I 2 co-nh-ch2-ch2-so2oh og som har et bredt terapeutisk og præventivt virkningsspektrum over for sygelige forandringer der.

30 kan føres tilbage til beskadigelser af "AGAS" (det aerobiosfæri-ske genetiske adaptionssystem). #

Til belysning af begrebet "AGAS" opregnes i det følgende de vigtigste væv og organer der danner dette system.

a) Alle biologiske grænseflader der står i berøring med 35 den ydre luft som biosfæren (hud og huddannelser, øjets hornhinde og Conjunktiva, mund- og svælghulrum, luftveje og lunge); b) skelet og led (rørknogler og svampeagtige knogler, kugleled, synoviale membraner, skeletmuskulatur); 2

DK 159267 B

c) de til reguleringen af ionhusholdningen deltagende organer (transepiteliske transportsystem: tarmtrævler og nyrekanal) ; d) det til findeling af næringen nødvendige tekodonte 5 (i tandaveolerne med rødder fastgjorte) tandsæt; e) høre-, lugte- og stemmeorganer.

De omhandlede forbindelser udøver således en gunstig biologisk eller terapeutisk virkning på de her opregnede organer eller væv af AGAS-systemet.

10 De ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser virker desuden på følgende funktioner der står i sammenhæng med AGAS-systemet: strålingsbeskyttelse, begunstigelse af sårheling, almindelig aktiverende virkning på mesenkym, beskyttelse mod den stadigt voksende infektions- og tilsmudsnings-15 fare hos hud og slimhinder (den fugtige slimhindes lysozymproduk-tion, aktivering af fimreepiteler i luftvejene osv.), forøget beskyttelse mod de af vira og svampe forårsagede infektioner.

De ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser er virksomme mod de stadigt og i høj grad stigende 20 stress-virkninger der er knyttet til livet på fastlandet (fx meteorologisk indflydelse, store forskelle mellem dag- og nattemperatur, forhøjet fare for kvæstelser), idet de stabiliserer adaptionssyndromet og samtidigt afværger glukokortikoidernes perifere vævsskader (som fx skader i bindevævet, kvæstelser af 25 knoglematrixbestanddele osv.). Udvikling af immunhomøostase (stigende erkendelsesevne hos legemet om hvilke celler der er kropsegne og hvilke der ikke er).

De ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser udøver deres virkning dels umiddelbart, dels over 30 reguleringen af vitamin A metabolismen, ved produktion af vitamin A metaboliter med stærkere polær karakter. Denne virkning kan sammenlignes med parathormonets virkning på 25-hydroxycholecalciferol-Ια-hydroxylase-enzymet i nyrekanalen. Virkningsretningerne af forbindelserne er følgende: 35 A) Virkninger med vitamin A-karakter: a) Farmakologiske og biokemiske virkninger:

DK 159267B

3 forøgende virkning på kondroitinsulfatsyntese; gunstig virkning på sårhelingen eller på den ved indgift af kortison eksperimentelt forringede sårheling hos rotter og hunde; poten-tierende virkning på vitamin A's virkning hos rotter og høns ved 5 eksperimentelt fremkaldte hypo- eller hypervitaminoser; dæmpende virkninger på de ulcerations-betingede stress-virkninger hos rotter; begunstigende virkning på degranulationen af mastocyter; forøgende virkning på produktionen af lysozym; virkning på sporstofhusholdningen (silicium, zink, kobber, mangan, fluor); frem-10 mende virkning på epiteldannelsen; fremmende virkning på den alkaliske fosfataseaktivitet; virkningen på den ved lokal indvirkning af vitamin A fremkaldte granulomposedannelse (Granulomsack-bilding); det yderst flade forløb af dosis-virkningskurven eller ændringen af virkningens fortegn ved store doser; aktiverende 15 virkning på Golgi-apparatet; begunstigende virkning på dannelsen af slim- eller bægerceller; forøgende virkning på koncentrationen af vitamin A.

b) Klinisk-terapeutislce virkninger: keratokonjunktivis sicca; Sjogrens syndrom; rhino-laryngo-pharingitis sicca; ozæna; 20 kronisk bronchitis; sinobronchitis; mucoviscidose; konstitutionelle lungesygdomme hos småbørn; paradentose; hudens og slimhindernes smittetilbøjelighed for vira og svampe; kortison-antagonistisk virkning; gunstig virkning på helingen ved operationssår og slimhindesår; erosio colli; pruritusagtige lidelser; nedsættelse af 25 lugte- og smagssansen.

B) Virkninger uden vitamin A-karakter a) Farmakologiske og biokemiske virkninger: virkning på 30 blodsukkerniveauet med hensyn til en forbigående sænkning; forøgende virkning på fosfaturi, sænkende virkning på fosfatniveauet i serum; strålingsbeskyttende virkning; formindskende virkning på den nødvendige tid der går med at nå målet ved labyrintforsøg hos inaktiverede dyr; formindskende virkning på eksperimentelt frem-35 kaldte fluor- og kadmiumtoxikoser; forøgende virkning på den cykliske adenosinmonofosfat-udtømning af nyrerne; dæmpende virkning på symptomerne ved eksperimentelt fremkaldt lathyrismus; formindskelse af histaminfølsomheden; forøgende virkning på aktiviteten af leverenzymet tyrosinaminotransferase.

4

DK 159267 B

b) Terapeutiske virkninger: svage bestrålingsskader; vitiligo; muskelhypotoni; psykoenergetiserende virkning; gunstig virkning på involutionelle og gerontologiske tilstande samt på de mnestiske funktioner; keloide tilbøjeligheder; spondylosis 5 ankylopoetica; sygdomme hos bevægelsesorganerne på grund af slid; sclerotisk fundus; amyloidose; morphæa; fibrocytisk mastopati.

I veterinærmedicinen har de ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser lignende anvendelsesområder som i humanmedicinen, dvs. fx hudskader (afskalning), sårheling og knoglebrud.

10 Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er ejendommelig ved det i patentkravets kendetegnende del angivne.

Man går således ud fra ^-substitueret glutamin eller as-paragin eller substituerede derivater af disse. I dette tilfælde substitueres et af de syreamidhydrogenatomer, der har sur karak-15 ter, ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fx med metallisk natrium og den på denne måde vundne forbindelse omdannes ved omsætning med fx 2-bromætansulfonsyre-natriumsalt til en forbindelse med den almene formel I.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen belyses nærmere i 20 det følgende ved hjælp af et eksempel.

5

DK 159267 B

Eksempel 3,02 g (10 mmol) karbobenzyloxy-L-glutamin-natriumsalt (Liebigs Annalen 640, 145, 1961) opløses i 50 ml dimetylformamid.

Til opløsningen sættes en oliesuspension der indeholder 12 mmol natriumhydroxyd og derpå opvarmes der i to timer under udelukkelse af luftfugtigheden. Derpå sættes der dråbevis 2,11 g (10 mmol) brom-5 ætansulfonsur natrium i 50 ml dimetylformamid til Opløsningen og blandingen opvarmes i yderligere to timer. Derpå inddampes der under vakuum og remanensen ekstraheres med æter og tørres. Den tørre forbindelse opløses i vand, anbringes på en kolonne med MDowex" 50 og elueres med vand. Eluatet inddampes under vakuum og remanensen 10 tørres over kaliumhydroxyd. Der vindes råt karbobenzyloxy- γ-L-glutamyltaurin som renses ved papirelektroforese gennemført ved pH 6,5. Den relative bevægelighed i forhold til cysteinsyre * udgør 1,05.· R„ (n-Butanol/pyridin/iseddike/vand 15:10:3:12) = 0,57.

t r X

De ved fremgangsmaden ifølge opfindelsen fremstillede forbindelsers biologiske virkning skal i det følgende belyses i to biologiske forsøgsrapporter, A og B. I disse forsøgsrapporter vises den biologiske virkning for forskellige typer af for bindelser med den almene formel I. De undersøgte forbindelser 20 har alle ubeskyttede N-terminale og C-terminale grupper, dvs.

R^ er hydrogen og er hydroxy. Forbindelser med den almene formel I, hvor er forskellig fra hydrogen og/eller hvor A^ er forskellig fra hydroxy har den samme biologiske virkning som de tilsvarende ubeskyttede aminosyrederivater, idet man må for- 25 vente at beskyttelsesgrupperne fraspaltes i organismen.

6

DK 159267 B

Biologisk forsøgsrapport A.

Undersøgelse af γ-L-glutamyltaurin som i nærværende rapport betegnes litoralon.

5 I de efterfølgende tabeller 1-6 er forsøgsresultaterne vist som middelværdier + standardafvigelse med antallet af bestemmelser i parantes. Bestemmelse af om der er signifikant forskel mellem kontrolforsøg og forsøg med behandlede dyr blev foretaget med Students t-test.

10

Tabel 1

Litoralons virkning på vitamin A-koncentrationen i serum.

Gruppe litoralon vitamin A-koncentration i serum 15 _ng/dag_ I. Kontrol - 28,3 +0,7 (20) II. 0,1 41,9 + 1,0X (20) III. 0,3 32,9 + 1,1“ (20) IV. 1,0 27,4 + 0,6 (20) 20 : x P < 0,001 xx P < 0,01 20 Sprague Dawley rotter (10 hanner og 10 hunner) véjende 25 180-200 g behandledes oralt med de i tabel 1 angivne daglige do ser litoralon i form af en vandig opløsning i en periode på 8 dage. På den 9. forsøgsdag aflivedes dyrene ved dekapitering og blodet opsamledes. Vitamin A-koncentrationen i serumet bestemtes ved Neeld og Pearsons metode.

7

DK 159267 B

Tabel 2

Virkningen af litoralon og vitamin A på granulomdannelse frem-kaldt af implanterede vatkugler_

Gruppe Dosis Tør vægt af 5 Vitamin Ax litoralon granulom lokal lokal oral mg yg yg/dag I. Kontrol - - 52 + 1,0 (24) II. Kontrol +

Opløsnings- 10 middel - - - 54 + 3,1 (8) III. 2 - - 64+2,5 (8) IV. 2 0,1 65 + 2,7 (8) V. - 0,1 73 + 2,9 (8) VI. 2 - 0,1 90 + 4,1 (8) 15 x Hoffmann La Roche

Forskellen er signifikant: mellem gruppe II og III ved P < 0,05, mellem II og V ved P < 0,001, og mellem V og VI ved 20 P < 0,01. Granulomdannelsen bestemtes ifølge Lee et al med

Sprague-Dawley hanrotter vejende 110-120 g. Tamponerne fjernedes fra de dorsolaterale subkutane implantationer efter 10 dage og vejedes efter tørring til konstant vægt ved 65°C.

25 8

DK 159267 B

^ * I

ΓΜ CN CN ω ! I

Η H Η Ό Ό ® ^ $) — —- w d) Η P ι< Λ S O d U1 CM Γ- 00

ko cn ^ ov ^ w G ra ^ o' O

Dj o o oo o ok o <U(D O _ U - - - - P >C tn P &1 h o oo oo P ηιβ-ΡΟ + 1 +1 +1 S- «(0 w ® „ H Dj ro Η d i< rø - d ω ω d »π o ω λ o tu c o oo O) tø + H C - oo oo r- o p- σν do -p d Η rii HO CN HH d) Ό Z Η H Cd 01 v » n ^ ^ ^ tn ft O λ

O (MO HO CN O O. d) < P °1 -P

« +i +i +i « d m ·2 „ 0

Pi nj d m ω o p tn o 'Η •p ti o g λ: > a;

D CO CO

vo η σ» · -P o - >d d

ρή CN CN in ΗΊ· H&lHDtHH

00 O VO O 00 O OH Q O' oqcli » — ·. » — — * H 6> ' (C ®

o o o o o o o t n O cd d M

+< +ι +ι V s -ϋ s o <-» H t n Λ O' <J Cd Η Η ο en cd «l

. p-cnvoOPDCD P

(1) CN M* CO vo O ro d) Ό d -p H

c nj in o co o m o > O · Pj tn λ uj U ------ g 0 d) ffl Dj •Η HOHOHO d) U Ό >

A ______ § S g « *d H

Tj --- M P d) S »cd Λ

id H >1 Λ > H

H <P Q U · P

m CN H <D d (¾ rH r- cn vo cn m cn d · cd tn d) (*) (5 Dj ro o cn o ro o tn tn g d Ό · 11 ø ^ ^ ^ — h tntJ k r-\ c OOOOOO CO Ο Η cy

d) ω +1 +1 +1 , ^ ω o cd dJ

og pH vo tn

(β Η ω I PH

£ 2 o -p h d s. ·

^ m H ^ cd d) Ή H

q. HH Pi dP OH cd

* r— h cd oo O

o rij CN H vo o fO P g .cn P d P

οι ovo r» o σι o tn tn d Dj dj d)

ίο HU - - - «· - - oWHoid^O

id oooooo > i Pj g O d α +1 +1 +1 η ω η o P d β M h g h -o β Φ « ω ο ω p 52 . £ ^

tn (UtnPÆPP

do o. β h d ω -o -p

•Η H CN -Ν’ Oj H d d) > d) H

h z p» cn m co m h d O P h > p KJ Q. k i» s v »v ^ Vj *0 *H & •h v; vo o m o vo o tn d) Dj d d tø ·

> +1 +1 +1 > o d) cd <u U

3 3 P Dj Ό P S *P

^ Hd)0d)d)d)cd «(d h p d g -P ,

Qj -N« *3* VO VO CN O d) P Η Λ ® P

•»cn *»cn -co g O g Pj dJ d) tn (d Tf ·» cn - 'i' - P d E-ι CJ Λ > c u Ho HO HO d) d I H w . d)

h +1 +1 + d cd ca ι-i cd P

c _ 1 -_L 0) Λ ^ ^ d U M

o· + H H CO

ti tntn h >i z d d) · d) H g g d) d) Dl σ -p A4 Λ

> Otn^H^H OM

o Hd-tn^DicdPPS m ,—i f—i P Cd M Dj P O

c; o 2 n oQtnOOPcn § p z S-faie-pp H p^So d) H *0 p n « o» d < m g, o h c ^ ω P Dj o CQ * ^ H j S 13 ΐ- Ο η. *g· id ii X O g H O .HH pcnoiPd)

Η P · Η H ti & Η H in Η P

,4 ø Η Η H + 01 > P O X W

9

DK 159267 B

O' w ~ ~ ~ ra dj IO KO lO +1

^ ^ ^ S

• a) o p σ' X x m “ <« X * r. JJ n Γθσ»ΗΗηιη^ β Ρ Λ ^ H ro Η m Η ft) O' • ho no no 'owe

o ***** H κ P

sr ο ο ο ο ο ο ta w ·η + 1+ + P 6 ϋ TI TI m 0) ·Η O' Η ο <1) Η

ίΐ Η W

^ χχ g ^ · to XX » ^ ί -d ιο σι η <ν m η +J SJ « g Ο) Ο Ο rH VO rH HjSJJfl) • ho no no +* , 2 « O v ·. s » v ·. Η Μ O ft)

γίοοοοοο P 0) T3 M

+ 1+ + W β S.

T1 1 φ -H ft)

k β O' M

id Ή ID

O' ιΧ Η β

tn 0 β O' <D

rt XX . «0 <0 P

rfl [Ή NU ΗΛ Η Π Ό PH

HH 00 O OH Ο ·0 . HO HO 0)0 - ft) a) .

^ (Y) s «. »· Ik S S Ο Ό C

<d H OO OO OO ft> > P

0 +| +1 +1 v £ -g, *" n Pi β β Ρ Λ -d <α α> ^ 'S -η ϊ g tn > «ια η ίσ •— ta 'S'in h^j* Hvo (D ft Dj 3 Ό Η Η in ο h O Ρ Ρ ., g HO HO HO 5215¾ HI'' OO OO OO 'X P _, ^ a5 3 -S +1 +1 +1 £ & 'H u Λ Λ η « P ® 0« la <u -Η c ^ ^ $ E* > “ 5 3 -H 5 C « ft) Λ

g d> X β P

d taOO^CNOO jj ® d -Η τα en o tn H r~~ o ft) O' (ο π ο Ο Ο HO HO & J) <rj ·<««»««% O' w 0 m h m oo oo oo to g

. +1+ + *d 0 P <U

m +1 +1 τι Φ H

01 · > HH

tn Π · -H

jj Η H O' Ό m Ο Ό β Η β Ο β o a) <u *. -η n H g H Ό o +»

η H cn n m id n r* ho StS

** ρ ο ο σι ο ο o oo id v ID Λ ora HO Ο O HO * * ,n A ^ 2 η. . «... v v «... ο o m (¾ Λ β Ο Ο Ο Ο Ο Ο Ο ►η +| + + ν ν Ο) Ό β S' +1 τι ΤΙ β 0) 0 ft) .Η Pi CU β > Η θ' 2 a> ta μ δ ·. .. +» ft) U -Θ.

•π β wwta+io+i Η β Ο β β Ρ β Ρ ·Η s, ο ρ to ta η ta ·η ? Hta ,Χ ,Χ β ,Χ J β tn Η ta Η θ' τ| ·Η W Ή 0) 2 ο U Οβ-ΡΡΦΡ'Ό ο S 0 O' Ρ Η Η « Η θ' Ο Η Ρ Ρϊ ·ΗΟ ββ Ε Μ m ό tu s -η *^Η ? ? 5* _ g J. η. ο Η ιη ·Η·Η ·Η η g οβιΧί * W C0 °ιι Η d · η «η Ό Ηβ .HH X u - ft) HO Η Η Η XX 0) CM >

DK 159267B

' 10 Tabel 5

Litoralons virkning på Rana dalmatina's metamorfose

Gruppe Kropslængde Halelængde _mm_mm_

Kontrol 45,9 + 0,2 31,4 + 0,2 (60) 5 Behandlede dyr 40,2 + 0,2X 26,7 + 0,2X (60) x Signifikans: P < 0,001

Forsøget udførtes med larver af Rana dalmatia med en alder på 30 dage, en kropslængde på 20-25 mm, og med allerede 10 synlige fremspireride bagben. I løbet af en periode på 30 dage blev forsøgsdyrene anbragt i postevand indeholdende 0,5 yg/ml litoralon i to timer hver dag. Kontrolgruppen blev anbragt i postevand uden tilsætning af litoralon. Haletudserne måltes på den 30. dag.

15

Tabel 6

Litoralons virkning på blodsukkerniveauet

Gruppe I. Undersøgelse II. Undersøgelse _mg %._mg %_ 20 Kontrol 94 + 3,6 (10) 94 + 4,09 (10)

Behandlede dyr 82,4 +3,8 (10) . 81 + 1,32 (10)

Signifikans ved I. undersøgelse: P < 0,05 Signifikans ved II. undersøgelse: P < 0,01

Hvide CGY-hanrotter med legemsvægt 160-180 g anvendtes til forsøget. Dyrene holdtes på en standard diæt. Der blev taget blodprøver på den 5. forsøgsdag efter 18 timers faste. Blodsukkerbestemmelserne udførtes efter metoden ifølge E. Hultman. Litoralon blev indgivet oralt i daglige doser på 1 ug/kg.

30 11

DK 159267 B

Biologisk forsøgsrapport B.

Undersøgelse af syntetisk γ-aspartyltaurin og derivater deraf.

1. β-aspartyl-N-metyltaurin 5 a) Virkning på blodsukkerniveauet Kontrol 107 mg %

Behandlede dyr 93 mg %

Signifikans: P < 0,05

Til prøverne anvendtes 20-20 rotter. Målingerne gennem-10 førtes efter 18 timers faste. Den anvendte dosis var 1 yg/kg legemsvægt i 4 dage i form af en opløsning ved oral indgift.

b) Virkning til forøgelse af vitamin A-niveauet i serum

Oral dosis Fremkaldt vitamin A yg% 15 yg/200 g legemsvægt 0 (kontrol) 8,5 5 11,0 1 11,5 0,3 12,5 20 0,1 16,1 0,05 14,8 0,01 12,5 0,005 10,5

Signifikans: P < 0,01 25 Til forsøgene anvendtes 20-20 Wistar hanrotter med le gemsvægt 200-220 g.

Forsøgsperiode: 6 dage.

c) Virkning på blodets siliciumniveau: on

Silicium (mg/g blod) __0 timer_20 dage_40 dage

Kontrolgruppe 0,110+0,004 0,120+0,010 0,154+0,015

Behandlingsgruppe I 5 yg/dag 0,100+0,005 0,315+0,014XX 0,345+0,015 35 Behandlingsgruppe II 10 yg/dag 0,107+0,009 0,370+0,119 0,360+0,017 xx Signifikans: P < 0,001 12

DK 159267 B

Resultaterne er signifikante fra den 13. dag ved signifikansniveauet P < 0,01 og fra den 20. dag ved niveauet P < 0,001. Forsøgene udførtes på indavlede hankaniner med legemsvægt 2,5-3 kg. Den aktive bestanddel blev indgivetoralt i de i tabellen viste 5 daglige doser. Bestemmelsen af silicium udførtes ifølge Gaubatz's metode (Gaubatz E., Klin. Wschrft. 14, 1753, 1935) i 5 ml blodprøver, som blev taget fra dyrenes ørevene.

d) Virkningen af β-aspartyl-N-metyl-taurin og vitamin A på den 10 granulomfremkaldende virkning forårsaget af implantation af vat;

Gruppe Dosis Vægt af tør-

Vitamin Ax g-aspartyl-N- rf 9ranulom metyltaurin lokal lokal oral mg ug u g/dag 15 ---:--

Kontrol I. . - - - 54 + 1,7

Kontrol II. + opløsningsmiddel - - - 55+3,4

Behandlingsgruppe III. 2 - - 66+12,5

Behandlingsgruppe IV. 2 0,1 - 67+2,6 20 Behandlingsgruppe V. - - 0,1 79+2,8

Behandlingsgruppe VI. 2 - 0,1 96+4,4 x Hoffmann la Roche

Forskellene er signifikante som følger: 25 Mellem gruppe II og III P < 0,05, mellem gruppe II og V P < 0,001 og mellem gruppe V og VI P < 0,01.

Bestemmelsen af granulom udførtes på Sprague-Dawley hanrotter med legemsvægt 110-120 g ved metoden ifølge Lee et al (Lee K.H., Fu Ch.Ch., Spencer M.R. Tong T.G. og Poon R.J., Pharm.

30 Sci., 62, 895, 1973). De dorsolateralt subkutant implanterede tamponer fjernedes efter 10 dage og måltes efter tørring ved 65°C til konstant vægt. 1 P- Aspar tyl -homotaurin·.

35 a) Virkning på blodsukkerniveauet

Kontrolgruppe 105 mg%

Behandlet gruppe 94 mg%

Signifikans, antal forsøgsdyr og forsøgsmetode var som angivet under pkt. 1 a) ovenfor.

13

DK 159267 B

b) Forøgende virkning på vitamin A-niveauet i serum

Oral dosis . Fremkaldt vitamin A

ug/200 g legemsvægt ug%_ 0 (kontrol) 8>6 5 5 12,0 1 13,5 0,3 14,0 0,1 15,8 0,05 15,0 10 0,01 12,0 0,005_10,0_

Signifikans, antal forsøgsdyr og forsøgsmetode var som angivet ovenfor under pkt. Ib).

15 c) Virkning på blodets siliciumniveau:

Silicium (mg/g blod) _0 timer _20 dage_40 dage_

Kontrolgruppe 0,104+0,009 0,134+0,015 0,157+0,020

Behandlingsgruppe

20 I. 5pg/dag 0,094+0,007 0,309+0,014XX 0,340+0,014XX

Behand 1 incrscnr uppe

II. 10 ug/dag 0,109+0,010 0,372+0,120XX 0,363+0,018XX

Signifikans, antal forsøgsdyr, arrangement og bestemmelsesmetode som angivet ovenfor under pkt. 1 c).

25 d) Virkningen af β-aspartyl-homotaurin og vitamin A på den granu-lomfremkaldende virkning af implantation af vat;_

Dosis Vægt af tørret

Vitamin Ax β-aspartyl- granulom 30 lokal homotaurin g mg lokal oral _ ' _μ g ug/dag_

Kontrolgruppe I - - 52+1,5

Kontrolgruppe II - - - 53+3,2 + opløsningsmiddel 35 Behandlingsgruppe III. 2 - - 64+12,3

Behandlingsgruppe IV. 2 0,1 - 65+2,4

Behandlingsgruppe V. - - 0,1 77+2,6

Behandlingsgruppe VI._2_ 0,1_94 + 4,2_ 14

DK 159267 B

x Hoffmann la Roche

Signifikans, antal forsøgsdyr, arrangement og bestemmelsesmetode var som angivet ovenfor under punkt 1 d).

Claims

20 I .R CO-N^ X Me 1 1 hvor A , R, R og n har de ovenfor angivne betydninger og Me er et alkalimetal, alkyleres med et alkalimetal-m-halogen-C2_3al-25 kylsulfonat, hvorefter den således vundne forbindelse om ønsket omdannes til et fysiologisk acceptabelt salt eller frigøres fra et salt og/eller om ønsket fremstilles i optisk aktiv form ved opsplitning af det vundne racemiske produkt. For: Chinoin Gyogyszer és Vegyészeti Termékek Gyåra RT. fENERET