DE69632751T2

DE69632751T2 - Farnesyltransferase hemmende 2-Chinolonderivate

Info

Publication number: DE69632751T2
Application number: DE69632751T
Authority: DE
Inventors: David William End; Marc Gaston Venet; Patrick Rene Angibaud; Gerard Charles Sanz
Original assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Current assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Priority date: 1995-10-31
Filing date: 1996-10-25
Publication date: 2005-08-04
Anticipated expiration: 2016-10-26
Also published as: CZ290954B6; CZ127298A3; ATE269322T1; WO1997016443A1; ES2171736T3; PL328230A1; EP1019395A1; CY2287B1; NO314037B1; KR100417620B1; PT1019395E; US5968952A; DK1019395T3; TR199800720T2; DE69618999D1; AR004699A1; ATE212627T1; AU7493396A; JPH11514635A; CN1101391C

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft neue 2-Chinolonderivate, ihre Herstellung, pharmazeutische Zusammensetzungen, die diese neuen Verbindungen enthalten, die Verwendung dieser Verbindungen als Arzneimittel, sowie Behandlungsmethoden, bei denen diese Verbindungen verabreicht werden.
Onkogene codieren häufig Proteinkomponenten von Signalleitungswegen, die zur Stimulation des Zellwachstums und der Mitogenese führen. Die Expression von Onkogenen in Zellkulturen führt zu einer Zelltransformation, die dadurch gekennzeichnet ist, daß die Zellen zum Wachstum in Weichagar befähigt sind und daß die Zellen in Form dichter Foci wachsen, denen die Kontaktinhibition, die nicht transformierte Zellen aufweisen, fehlt. Die Mutation bzw. Überexpression bestimmter Onkogene ist häufig mit Humankarzinom assoziiert. Eine bestimmte Gruppe von Onkogenen, die unter der Bezeichnung ras bekannt ist, wurde in Säugetieren, Vögeln, Insekten, Mollusken, Pflanzen, Pilzen und Hefen identifiziert. Die Familie der Säugetier-ras-Onkogene besteht aus drei Hauptmitgliedern („Isoformen"), nämlich den H-ras-, K-ras- und N-ras-Onkogenen. Diese ras-Onkogene codieren für Proteine mit einem starken Verwandschaftsgrad, die generisch unter der Bezeichnung p21^ras bekannt sind. Sobald sich die mutierten oder onkogenen Formen von p21^ras an die Plasmamembranen angeheftet haben, geben sie ein Signal zur Transformation und zum unkontrollierten Wachstum maligner Tumorzellen. Zur Erwerbung dieses Transformationspotentials muß die Vorstufe des p21^ras-Onkoproteins an dem in einem am Carboxy-terminus gelegenen Tetrapeptid befindlichen Cysteinrest enzymkatalysiert farnesyliert werden. Inhibitoren des Enzyms, das diese Modifikation katalysiert, nämlich Farnesylproteintransferase, verhindern das Anheften von p21^ras an die Membran und blockieren das aberrante Wachstum von mit ras transformierten Tumoren. Es ist daher fachlich allgemein akzeptiert, daß Farnesyltransferaseinhibitoren als Antikkrebsmittel bei Tumoren, bei denen ras an der Transformation beteiligt ist, sehr nützlich sein können.
Da mutierte onkogene Formen von ras häufig bei vielen Humankarzinomen, insbesondere bei über 50% aller Fälle von Dickdarm- und Bauchspeicheldrüsenkrebs, auftreten (Kohl et al., Science, Band 260, 1834 – 1837, 1993), wurde vorgeschlagen, daß Farnesyltransferaseinhibitoren gegen diese Arten von Karzinom äußerst nützlich sein können.
In EP-0,371,564 sind (1H-azol-1-ylmethyl)substituierte Chinolin- und Chinolinonderivate, die die Plasmaelimination von Retinsäuren supprimieren, beschrieben. Einige dieser Verbindungen sind auch zur Hemmung der Bildung von Androgenen aus Progestinen bzw. zur Hemmung der Wirkung des Aromatase-Enzymkomplexes befähigt.
Unerwarteterweise wurde gefunden, daß die vorliegenden neuen Verbindungen, die alle einen Phenylsubstituenten in 4-Stellung des 2-Chinolonrests aufweisen, eine farnesyltransferaseinhibierende Wirksamkeit aufweisen.
Die vorliegende Erfindung umfaßt Verbindungen der Formel (I)
und ihre pharmazeutisch unbedenklichen Säure- oder Basenadditionssalze und deren stereochemisch isomere Formen, wobei die Symbole folgendes bedeuten:
die gestrichelte Linie bedeutet gegebenenfalls eine Bindung,
X bedeutet Sauerstoff oder Schwefel,
R¹ bedeutet Wasserstoff, C_1-12Alkyl, Ar¹, Ar²C_1-6Alkyl, ChinolinylC_1-6alkyl, PyridylC_1-6alkyl, HydroxyC_1-6alkyl, C_1-6AlkyloxyC_1-6alkyl, Mono- oder Di(C_1-6alkyl)amino-C_1-6alkyl, AminoC_1-6alkyl,
oder einen Rest der Formel -Alk¹-C(=O)-R⁹, -Alk¹-S(O)-R⁹
oder -Alk¹-S(O)₂-R⁹,
wobei Alk¹ C_1-6Alkandiyl bedeutet,
R⁹ bedeutet Hydroxy, C_1-6Alkyl, C_1-6Alkyloxy, Amino, C_1-8Alkylamino oder durch C_1-6Alkyloxycarbonyl substituiertes C_1-8Alkylamino,
R² und R³ bedeuten jeweils unabhängig voneinander Wasserstoff, Hydroxy, Halogen, Cyan, C_1-6Alkyl, C_1-6Alkyloxy, HydroxyC_1-6alkyloxy, C_1-6Alkyloxy-C_1-6alkyloxy, AminoC_1-6alkyloxy, Mono- oder Di(C_1-6alkyl)-aminoC_1-6alkyloxy, Ar¹, Ar²C_1-6Alkyl, Ar²oxy, Ar²C_1-6alkyloxy, Hydroxycarbonyl, C_1-6Alkyloxycarbonyl, Trihalogenmethyl, Trihalogenmethoxy, C_2-6Alkenyl, oder
R² und R³ in benachbarter Stellung können gemeinsam einen zweiwertigen Rest der Formel

-O-CH₂-O (a-1)

-O-CH₂-CH₂-O (a-2)

-O-CH=CH (a-3)

-O-CH₂-CH₂ (a-4)

-O-CH₂-CH₂-CH₂ (a-5) oder

-CH=CH-CH=CH (a-6)

bilden,
R⁴ und R⁵ bedeuten jeweils unabhängig voneinander Wasserstoff, Ar¹, C_1-6Alkyl, C_1-6AlkyloxyC_1-6alkyl, C_1-6Alkyloxy, C_1-6Alkylthio, Amino, Hydroxycarbonyl, C_1-6Alkyloxycarbonyl, C_1-6AlkylS(O)C_1-6alkyl oder C_1-6AlkylS(O)₂C_1-6alkyl,
R⁶ und R⁷ bedeuten jeweils unabhängig voneinander Wasserstoff, Halogen, Cyan, C_1-6Alkyl, C_1-6Alkyloxy oder Ar²oxy,
R⁸ bedeutet Wasserstoff, C_1-6Alkyl, Cyan, Hydroxycarbonyl, C_1-6Alkyloxycarbonyl, C_1-6AlkylcarbonylC_1-6alkyl, CyanC_1-6alkyl, C_1-6AlkyloxycarbonylC_1-6alkyl, HydroxycarbonylC_1-6alkyl, HydroxyC_1-6alkyl, AminoC_1-6alkyl, Mono- oder Di(C_1-6alkyl)aminoC_1-6alkyl, HalogenC_1-6alkyl, C_1-6AlkyloxyC_1-6alkyl, AminocarbonylC_1-6alkyl, Ar¹, Ar²C_1-6AlkyloxyC_1-6alkyl, C_1-6AlkylthioC_1-6alkyl,
R¹⁰ bedeutet Wasserstoff , C_1-6Alkyl, C_1-6Alkyloxy oder Halogen,
R¹¹ bedeutet Wasserstoff oder C_1-6Alkyl,
Ar¹ bedeutet Phenyl oder durch C_1-6Alkyl, Hydroxy, Amino, C_1-6Alkyloxy oder Halogen substituiertes Phenyl, und
Ar² bedeutet Phenyl oder durch C_1-6Alkyl, Hydroxy, Amino,
C_1-6Alkyloxy oder Halogen substituiertes Phenyl.
In den genannten Definitionen und im folgenden Text bedeutet Halogen Fluor, Chlor, Brom und Iod; C_1-6Alkyl bedeutet gerad- und verzweigtkettige gesättigte Kohlenwasserstoffreste mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen wie z.B. Methyl, Ethyl, Propyl, Butyl, Pentyl, Hexyl und dergleichen; C_1-8Alkyl umfaßt die für C_1-6Alkyl definierten gerad- und verzweigtkettigen gesättigten Kohlenwasserstoffreste sowie deren höhere Homologe mit 7 oder 8 Kohlenstoffatomen wie z.B. Heptyl oder Octyl;
C_1-12Alkyl umfaßt wiederum C_1-8Alkyl und seine höheren Homologe mit 9 bis 12 Kohlenstoffatomen wie z.B. Nonyl, Decyl, Undecyl oder Dodecyl; C_2-6Alkenyl bedeutet gerad- und verzweigtkettige Kohlenwasserstoffreste mit einer Doppelbindung und 2 bis 6 Kohlenstoffatomen wie z.B. Ethenyl, 2-Propenyl, 3-Butenyl, 2-Pentenyl, 3-Pentenyl, 3-Methyl-2-butenyl und dergleichen; C_1-6Alkandiyl bedeutet divalente gerad- und verzweigtkettige gesättigte Kohlenwasserstoffreste mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen wie z.B. Methylen, 1,2-Ethandiyl, 1,3-Propandiyl, 1,4-Butandiyl, 1,5-Pentandiyl, 1,6-Hexandiyl sowie deren verzweigte Isomere. Der Ausdruck „C(=O)" bezieht sich auf eine Carbonylgruppe.
Der Ausdruck „S(O)" bezieht sich auf ein Sulfoxid und der Ausdruck „S(O)₂" auf ein Sulfon.
Die wie oben erwähnten pharmazeutisch unbedenklichen Säure- oder Basenadditionssalze sollen die therapeutisch wirksamen, nicht toxischen Säureadditionssalzformen und nicht toxischen Basenadditionssalzformen, die die Verbindungen der Formel (I) bilden können, umfassen. Die Verbindungen der Formel (I), die über basische Eigenschaften verfügen, lassen sich durch Behandeln dieser Basenform mit einer geeignete Säure in ihre pharmazeutisch unbedenklichen Säureadditionssalze überführen. Zu geeigneten Säuren zählen zum Beispiel anorganische Säuren wie Halogenwasserstoffsäuren, z.B. Chlorwasserstoff- oder Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Salpetersäure, Phosphorsäure und ähnliche Säuren, oder organische Säuren wie zum Beispiel Essigsäure, Propansäure, Hydroxyessigsäure, Milchsäure, Brenztraubensäure, Oxalsäure, Malonsäure, Bernsteinsäure (d.h. Butandisäure), Maleinsäure, Fumarsäure, Äpfelsäure, Weinsäure, Zitronensäure, Methansulfonsäure, Ethansulfonsäure, Benzolsulfonsäure, p-Toluol-sulfonsäure, Cyclaminsäure, Salicylsäure, p-Aminosalicylsäure, Pamoasäure und ähnliche Säuren.
Die Verbindungen der Formel (I), die Säureeigenschaften aufweisen, lassen sich durch Behandeln dieser Säureform mit einer geeigneten organischen oder anorganischen Base in ihre pharmazeutisch unbedenklichen Basenadditionssalze überführen. Zu geeigneten Basensalzformen zählen zum Beispiel die Ammoniumsalze, Alkali- und Erdalkalimetallsalze, z.B. Lithium-, Natrium-, Kalium-, Magnesium-, Calciumsalze und dergleichen, Salze mit organischen Basen, z.B. die Benzathin-, N-Methyl-D-glukamin- und Hydrabaminsalze, sowie Salze mit Aminosäuren wie zum Beispiel Arginin, Lysin und dergleichen.
Die Ausdrücke Säure- oder Basenadditionssalz umfassen auch die Hydrate und die Lösungsmitteladditionsformen, die die Verbindungen der Formel (I) bilden können. Beispiele solcher Formen sind z.B. Hydrate, Alkoholate und dergleichen.
Der wie oben verwendete Ausdruck stereochemisch isomere Formen von Verbindungen der Formel (I) bedeutet alle möglichen Verbindungen, die aus den gleichen Atomen bestehen, welche durch die gleiche Bindungsreihenfolge gebunden sind, jedoch unterschiedliche dreidimensionale Strukturen aufweisen, die nicht gegeneinander austauschbar sind, über die die Verbindungen der Formel (I) verfügen können. Falls nicht anders erwähnt oder angegeben, umfaßt die chemische Bezeichnung einer Verbindung das Gemisch aller möglichen stereochemisch isomeren Formen, über die diese Verbindung verfügen kann. Dieses Gemisch kann alle Diastereomere bzw. Enantiomere der molekularen Grundstruktur der Verbindung enthalten. Alle stereochemisch isomeren Formen der Verbindungen der Formel (I), sowohl in reiner Form als auch deren Mischungen miteinander, sollen unter den Schutzumfang der vorliegenden Erfindung fallen.
Manche Verbindungen der Formel (I) können auch in ihren tautomeren Formen vorliegen. Obwohl solche Formen nicht ausdrücklich in der obigen Formel angegeben sind, sollen sie unter den Schutzumfang der vorliegenden Erfindung fallen.
Der Ausdruck „Verbindungen der Formel (I)" soll im folgenden auch immer die pharmazeutisch unbedenklichen Säure- oder Basenadditionssalze und alle stereoisomeren Formen umfassen.

X bedeutet vorzugsweise Sauerstoff.
R¹ bedeutet geeigneterweise Wasserstoff; C_1-6Alkyl, vorzugsweise Methyl, Ethyl oder Propyl; Ar¹ vorzugsweise Phenyl; Ar² C_1-6Alkyl, vorzugsweise Benzyl oder Methoxyphenylethyl; einen Rest der Formel -Alk-C(=O)-R⁹, in der Alk vorzugsweise Methylen bedeutet und R⁹ vorzugsweise Hydroxy bedeutet; C_1-6Alkyloxy, z.B. Ethoxy; C_1-8Alkylamino, das durch C_1-6Alkyloxycarbonyl substituiert ist.
R² und R³ bedeuten jeweils unabhängig geeigneterweise Wasserstoff; Halogen, vorzugsweise Fluor, Chlor oder Brom; C_1-6Alkyl, vorzugsweise Methyl; Trihalogenmethyl, vorzugsweise Trifluormethyl; C_1-6Alkyloxy, vorzugsweise Methoxy oder Ethoxy; Ar²-oxy, vorzugsweise Phenoxy; Ar²C_1-6Alkyloxy, vorzugsweise Benzyloxy; Trihalogenmethoxy, vorzugsweise Trifluormethoxy.
R⁴ und R⁵ bedeuten jeweils unabhängig geeigneterweise Wasserstoff; Ar¹, vorzugsweise Phenyl; C_1-6Alkyl, vorzugsweise Methyl; C_1-6Alkylthio, vorzugsweise Methylthio; Amino; C_1-6Alkyloxycarbonyl, vorzugsweise Methoxycarbonyl.
R⁶ und R⁷ bedeuten jeweils unabhängig geeigneterweise Wasserstoff; Halogen, vorzugsweise Chlor oder Fluor; C_1-6Alkyl, vorzugsweise Methyl; C_1-6Alkyloxy, vorzugsweise Methoxy.
R⁸ bedeutet geeigneterweise Wasserstoff; C_1-6Alkyl, vorzugsweise Methyl, Ethyl oder Propyl; Ar¹, vorzugsweise Chlorphenyl; C_1-6Alkyl, das substituiert ist durch Hydroxy (vorzugsweise Hydroxymethylen), C_1-6Alkyloxy (vorzugsweise Methoxymethylen), Amino, Mono- oder Di-C_1-6alkylamino (vorzugsweise N,N-Dimethylaminomethylen), Ar²-C_1-6Alkyloxy (vorzugsweise Chlorbenzyloxymethyl) oder C_1-6Alkylthio (Methylthiomethylen).
R¹⁰ und R¹¹ bedeuten Wasserstoff.

Der Substituent R¹⁰ befindet sich vorzugsweise in 5- oder 7-Stellung des Chinolinonrests und, wenn R¹⁰ in 7-Stellung ist, so befindet sich der Substituent R¹¹ in 8-Stellung.
Eine interessante Verbindungsgruppe sind diejenigen Verbindungen der Formel (I), bei denen R¹ Wasserstoff, C_1-12Alkyl oder C_1-6AlkyloxyC_1-6alkyl bedeutet.
Eine weitere Gruppe interessanter Verbindungen sind diejenigen Verbindungen, bei denen R³ Wasserstoff bedeutet und R² Halogen, vorzugsweise Chlor, insbesondere 3-Chlor, bedeutet.
Eine weitere Gruppe interessanter Verbindungen sind außerdem diejenigen Verbindungen, bei denen R² und R³ in benachbarter Stellung vorliegen und einen divalenten Rest der Formel (a-1) bilden.
Eine weitere Gruppe interessanter Verbindungen sind diejenigen Verbindungen, bei denen R⁵ Wasserstoff bedeutet und R⁴ Wasserstoff, C_1-6Alkyl oder Ar¹, vorzugsweise Phenyl, bedeutet.
Eine weitere Gruppe interessanter Verbindungen sind außerdem diejenigen Verbindungen der Formel (I), bei denen R⁷ Wasserstoff bedeutet und R⁶ Halogen, vorzugsweise Chlor, insbesondere 4-Chlor, bedeutet.
Besondere Verbindungen sind diejenigen Verbindungen der Formel (I), bei denen R⁸ Wasserstoff, C_1-6Alkyl oder HydroxyC_1-6alkyl bedeutet.
Interessantere Verbindungen sind diejenigen interessanten Verbindungen der Formel (I), bei denen R¹ Methyl bedeutet, R² 3-Chlor bedeutet, R⁴ Wasserstoff oder 5-Methyl bedeutet, R⁵ Wasserstoff bedeutet, R⁶ 4-Chlor bedeutet und R⁸ Wasserstoff, C_1-6Alkyl oder HydroxyC_1-6alkyl bedeutet.
Bevorzugte Verbindungen sind:
4-(3-Chlorphenyl)-6-[(4-chlorphenyl)-1H-imidazol-1-yl-methyl]-1-methyl-2(1H)-chinolinon,
4-(3-Chlorphenyl)-6-[(4-chlorphenyl)-1H-imidazol-1-yl-methyl]-2(1H)-chinolinon,
6-[1-(4-Chlorphenyl)-2-hydroxy-1-(1H-imidazol-1-yl)-ethyl]-1-methyl-4-phenyl-2(1H)-chinolinon,
4-(3-Chlorphenyl)-6-[1-(4-chlorphenyl)-1-(1H-imidazol- 1-yl)ethyl]-1-methyl-2(1H)-chinolinon,
4-(3-Chlorphenyl)-6-[1-(4-chlorphenyl)-1-(5-methyl-1H-imidazol-1-yl)ethyl]-1-methyl-2(1H)-chinolinon,
4-(3-Chlorphenyl)-6-[1-(4-chlorphenyl)-2-hydroxy-1-(1H-imidazol-1-yl)ethyl]-1-methyl-2(1H)-chinolinon,
4-(3-Chlorphenyl)-6-[(4-chlorphenyl)(1H-imidazol-1-yl)-methyl]-1-(2-methoxyethyl)-2(1H)-chinolinonethandioat-(2:3)monohydrat,
6-[(4-Chlorphenyl)(1H-imidazol-1-yl)methyl]-4-(1,3-benzodioxol-5-yl)-1-methyl-2(1H)-chinolinonethandioat-(1:1), ihre stereoisomeren Formen und deren pharmazeutisch unbedenkliche Säure- oder Basenadditionssalze.
Die Verbindungen der Formel (I) lassen sich dadurch herstellen, daß man ein Imidazol der Formel (II) oder eines seiner Alkalimetallsalze mit einem Derivat der Formel (III) N-alkyliert.
In Formel (III) bedeutet W eine geeignete reaktionsfähige Abgangsgruppe wie zum Beispiel Halogen, z.B. Fluor, Chlor, Brom oder Iod, oder eine Sulfonyloxygruppe, z.B. 4-Methylbenzolsulfonyloxy, Benzolsulfonyloxy, 2-Naphthalinsulfonyloxy, Methansulfonyloxy, Trifluormethansulfonyloxy und ähnliche reaktionsfähige Abgangsgruppen.
Die oben beschriebene N-Alkylierung wird bequem dadurch durchgeführt, daß man die Reaktionspartner in Gegenwart eines geeigneten Lösungsmittels wie zum Beispiel einem polaren aprotischen Lösungsmittel, z.B. N,N-Dimethylformamid, N,N-Dimethylacetamid, Dimethylsulfoxid oder Acetonitril, vorzugsweise in Gegenwart einer geeigneten Base wie zum Beispiel Kaliumcarbonat oder einer organischen Base wie zum Beispiel N,N-Dimethyl-4-pyridinamin, Pyridin oder N,N-Diethylethanamin rührt. In manchen Fällen kann es vorteilhaft sein, das Imidazol (II) im Überschuß zu verwenden oder das Imidazol zuerst durch Umsetzen von (II) mit einer geeigneten Base wie oben definiert in eine geeignete seiner Salzformen wie zum Beispiel ein Alkali- oder Erdalkalimetallsalz zu überführen und anschließend diese Salzform in der Umsetzung mit dem Alkylierungsmittel der Formel (III) zu verwenden.
Die Verbindungen der Formel (I) lassen sich auch dadurch herstellen, daß man ein Zwischenprodukt der Formel (IV) mit einem Reaktionspartner der Formel (V), wobei Y entweder Kohlenstoff oder Schwefel bedeutet, wie zum Beispiel einem 1,1'-Carbonyl-bis[1H-imidazol], umsetzt.
Diese Reaktion läßt sich bequem in einem geeigneten Lösungsmittel wie zum Beispiel einem Ether, z.B. Tetrahydrofuran, gegebenenfalls in Gegenwart einer Base wie Natriumhydrid durchführen.
Bei allen oben- und untengenannten Herstellungsweisen lassen sich die Reaktionsprodukte aus dem Reaktionsansatz isolieren und nach allgemein fachbekannten Vorgangsweisen wie zum Beispiel Extraktion, Distillation, Kristallisation, Verreiben und Chromatographie gegebenenfalls weiter reinigen.
Die Verbindungen der Formel (I), bei denen die gestrichelte Linie eine Bindung darstellt, wobei diese Verbindungen als Verbindungen der Formel (I-a) definiert werden, lassen sich auch dadurch erhalten, daß man ein Zwischenprodukt der Formel (VI) zyklisiert.
Die Zyklisierung von (VI) kann nach fachbekannten Zyklisierungsverfahren wie zum Beispiel in Synthesis, 739 (1975) beschrieben, durchgeführt werden. Die Reaktion wird vorzugsweise in Gegenwart einer geeigneten Lewis-Säure, z.B. Aluminiumchlorid, entweder als solchem oder in einem geeigneten Lösungsmittel wie zum Beispiel einem aromatischen Kohlenwasserstoff, z.B. Chlorbenzol, durchgeführt. Etwas erhöhte Temperaturen können die Reaktionsgeschwindigkeit erhöhen. Je nach der Art der Substituenten R²/R³ können sich diese Substituenten an einem Phenylrest von den Substituenten R²/R³ am anderen Phenylrest unterscheiden, wie dies bei Natarajan M. et al., Indian Journal of Chemistry, 23B:720 – 727 (1984) beschrieben ist.
Verbindungen der Formel (I-a-1), worin R¹ Wasserstoff bedeutet, X Sauerstoff bedeutet und die gestrichelte Linie eine Bindung bedeutet, lassen sich dadurch herstellen, daß man Zwischenprodukte der Formel (XXVI), wobei R C_1-6Alkyl bedeutet, nach fachbekannten Verfahren wie Rühren des Zwischenprodukts (XXVI) in einer wäßrigen Säurelösung hydrolysiert. Eine geeignete Säure ist zum Beispiel Salzsäure. Die Verbindungen der Formel (I-a-1) lassen sich anschließend durch fachbekannte N-Alkylierungsverfahren in Verbindungen der Formel (I-a) überführen.
Eine Verbindung der Formel (I-b), die als Verbindung der Formel (I), wobei R⁸ Hydroxymethylen bedeutet, definiert ist, läßt sich dadurch herstellen, daß man ein Epoxid der Formel (VII) mit einem Imidazol der Formel (II) öffnet.
Verbindungen der Formel (I), wobei R¹ Wasserstoff bedeutet und X Sauerstoff bedeutet und wobei diese Verbindungen als Verbindungen der Formel (I-f-1) definiert werden, lassen sich dadurch herstellen, daß man ein Nitron der Formel (XV) mit dem Anhydrid einer Carbonsäure wie zum Beispiel Essigsäureanhydrid umsetzt und so den entsprechenden Ester in 2-Stellung des Chinolinrests bildet. Dieser Chinolinester läßt sich mit einer Base wie zum Beispiel Kaliumcarbonat in-situ zu dem entsprechenden Chinolinon hydrolysieren.
Verbindungen der Formel (I-f-1) lassen sich jedoch auch dadurch herstellen, daß man ein Nitron der Formel (XV) mit einem sulfonylhaltigen elektrophilen Reaktionspartner wie zum Beispiel p-Toluolsulfonylchlorid in Gegenwart einer Base wie zum Beispiel Kaliumcarbonatlösung umsetzt. Die Reaktion umfaßt zuerst die Bildung eines 2-Hydroxychinolinderivats, das anschließend zu dem gewünschten Chinolinonderivat tautomerisiert wird. Durch Anwendung fachbekannter Bedingungen der Phasentransferkatalyse läßt sich die Reaktionsgeschwindigkeit erhöhen.
Verbindungen der Formel (I-f-1) lassen sich auch durch eine intramolekuläre photochemische Umlagerung von Verbindungen der Formel (XV) herstellen. Diese Umlagerung läßt sich durch Lösen der Reaktionspartner in einem gegenüber der Reaktion inerten Lösungsmittel und Bestrahlen der Lösung bei einer Wellenlänge von 366 nm durchführen. Es ist vorteilhaft, entgaste Lösungen zu verwenden und die Reaktion in einer inerten Atmosphäre wie zum Beispiel sauerstoffreiem Argon- oder Stickstoffgas durchzuführen, um unerwünschte Nebenreaktionen oder eine Verringerung der Quantenausbeute zu minimieren.
Verbindungen der Formel der Formel (I), wobei R¹ Wasserstoff bedeutet und wobei diese Verbindungen als Verbindungen der Formel (I-c-1) definiert sind, lassen sich in Verbindungen der Formel (I-c-2), wobei R^1b wie für R¹ definiert ist, jedoch mit Ausnahme von Wasserstoff, überführen. Zum Beispiel können Verbindungen der Formel (I-c-1) mit R^1b-W¹, wobei W¹ eine reaktionsfähige Abgangsgruppe wie zum Beispiel eine Halogen- oder Sulfonyloxygruppe bedeutet, in Gegenwart einer Base wie zum Beispiel Natriumhydrid N-alkyliert werden.
Diese Reaktion läßt sich bequem durch Vermischen der Reaktionspartner in einem gegenüber der Reaktion inerten Lösungsmittel wie zum Beispiel N,N-Dimethylformamid durchführen. Es kann empfehlenswert sein, die Reaktion bei etwas verringerten Temperaturen durchzuführen. Weiterhin kann es vorteilhaft sein, die N-Alkylierung unter Intertatmosphäre wie zum Beispiel Argon- oder Stickstoffgas durchzuführen. Die Reaktion läßt sich auch unter Verwendung fachbekannter Phasentransferkatalyse (Phase Transfer Catalysis (PTC))- Bedingungen, wie zum Beispiel Rühren der Reaktionspartner in einer Mischung aus einer konzentrierten wäßrigen Natronlauge und einem organischen Lösungsmittel wie Tetrahydrofuran in Gegenwart eines Phasentransferkatalysators wie Benzyltriethylammoniumchlorid (BTEAC) durchführen.
Ist R^1b Aryl, so läßt sich die N-Alkylierung dadurch durchführen, daß man eine Verbindung der Formel (I-c-1) mit einem Reaktionspartner wie Diphenyliodoniumchlorid in Gegenwart von Kupfer(I)-chlorid (CuCl) in einem geeigneten Lösungsmittel, z.B. Methanol, in Gegenwart einer Base wie Natriummethanolat umsetzt.
Verbindungen der Formel der Formel (I), worin R¹ R^1b bedeutet und R⁸ Wasserstoff bedeutet, wobei diese Verbindungen als Verbindungen der Formel (I-d-1) definiert sind, lassen sich auch in Verbindungen der Formel (I-d-2), worin R^8a HydroxyC_1-6alkyl, C_1-6Alkyl, C_1-6AlkyloxyC_1-6alkyl, AminoC_1-6alkyl, Mono- oder Di-C_1-6alkylaminoC_1-6alkyl bedeutet, überführen. Zum Beispiel lassen sich Verbindungen der Formel (I-d-1) mit einem Reaktionspartner der Formel R^8a-W¹, in der W¹ eine reaktionsfähige Abgangsgruppe wie zum Beispiel Halogen oder eine Sulfonyloxygruppe bedeutet, sowie in Gegenwart einer Base wie zum Beispiel Natriumhydrid alkylieren.
Diese Alkylierung läßt sich bequem dadurch durchführen, daß man die Reaktionspartner in einem gegenüber der Reaktion inerten Lösungsmittel wie zum Beispiel Tetrahydrofuran oder N,N-Dimethylformamid in Gegenwart einer Base wie Kalium-tert.-Butanolat vermischt. Außerdem kann es vorteilhaft sein, die Alkylierung unter Inertatmosphäre wie zum Beispiel Argon- oder Stickstoffgas durchzuführen.
Eine Verbindung der Formel (I-e), die als Verbindung der Formel (I), in der X Schwefel bedeutet, definiert ist, läßt sich dadurch herstellen, daß man die entsprechende Verbindung der Formel (I-f), die als Verbindung der Formel (I), in der X Sauerstoff bedeutet, definiert ist, mit einem Reaktionsmittel wie Phosphorpentasulfid oder Lawesson-Reagens (C₁₄H₁₄O₂P₂S₄) umsetzt.
Diese Reaktion läßt sich dadurch durchführen, daß man eine Verbindung der Formel (I-f) in Gegenwart von Phosphorpentasulfid (P₄S₁₀) oder Lawesson-Reagens in einem geeigneten Lösungsmittel wie zum Beispiel Pyridin rührt und gegebenenfalls erhitzt.
Die Verbindungen der Formel (I) lassen sich auch dadurch herstellen, daß man den Imidazolring als letzten Schritt aufbaut. Solche Ringschlußreaktionen sind in den Beispielen Nr. 19 und 21 beispielhaft dargestellt.
Die Verbindungen der Formel (I) lassen sich auch mittels fachbekannter Reaktionen oder Umwandlungen funktioneller Gruppen ineinander überführen. Mehrere dieser Transformationen sind bereits oben beschrieben. Weitere Beispiele sind die Hydrolyse von Carbonsäureestern zu der entsprechenden Carbonsäure bzw. dem entsprechenden Alkohol; die Hydrolyse von Amiden zu den entsprechenden Carbonsäuren oder Aminen; Aminogruppen am Imidazol oder Phenyl lassen sich durch einen Wasserstoff nach fachbekannten Diazotierungen und anschließendes Ersetzen der Diazogruppe durch Wasserstoff ersetzen; Alkohole lassen sich in Ester und Ether überführen; primäre Amine lassen sich in sekundäre oder tertiäre Amine überführen; Doppelbindungen lassen sich zu der entsprechenden Einzelbindung hydrieren.
Die obenbeschriebenen Zwischenprodukte lassen sich nach fachbekannten Verfahren herstellen. Einige dieser Verfahren werden im folgenden gezeigt.
Zwischenprodukte der Formel (IV) lassen sich dadurch herstellen, daß man ein substituiertes 4-Phenyl-2-chinolonderivat der Formel (VIII) mit einer Carbonsäure der Formel (IX) oder einem ihrer funktionellen Derivate, z.B. einem Säurechlorid, umsetzt, wodurch man zu einem Keton der Formel (X) gelangt. Diese Reaktion wird durch Rühren der Reaktionspartner in einem geeigneten Lösungsmittel in Gegenwart einer Säure wie einer Polyphosphorsäure durchgeführt. Anschließend kann das Keton reduziert werden, wodurch man zu Zwischenprodukten gelangt, in denen R⁸ Wasserstoff bedeutet, oder mit einem geeigneten Additionsreagens umgesetzt werden.
Zwischenprodukte der Formel (III) lassen sich ausgehend von Zwischenprodukten der Formel (IV) dadurch herstellen, daß man ein Zwischenprodukt der Formel (IV) mit einem geeigneten Reaktionsmittel umsetzt, um die Hydroxygruppe in eine reaktionsfähige Abgangsgruppe überzuführen. Geeignete Überführungsreagenzien sind zum Beispiel Thionylchlorid, mit dem man zu Zwischenprodukten der Formel (III), in der W für Chlor oder Chlorsulfit steht, gelangt, oder p-Toluolsulfonylchlorid, mit dem man zu Zwischenprodukten der Formel (III), in der W die p-Toluolsulfonylgruppe bedeutet, gelangt.
Zwischenprodukte der Formel (VII) lassen sich dadurch herstellen, daß man ein Keton der Formel (X) mit einem Schwefelylid, z.B. Dimethyloxosulfoniummethylid, unter geeigneten Bedingungen umsetzt.
Schema I
Die Zwischenprodukte der Formel (VI) lassen sich wie unten in Schema II gezeigt herstellen. Ein Nitrophenylderivat der Formel (XI) wird mit einem Imidazol der Formel (II) unter fachbekannten Bedingungen umgesetzt, wodurch man zu einem Zwischenprodukt der Formel (XII) gelangt. Dieses Nitrophenylderivat wird anschließend reduziert, wodurch man zu einem Anilinderivat der Formel (XIII) gelangt, das dann mit einem Säurederivat der Formel (XIV) umgesetzt wird, wodurch man zu einem Zwischenprodukt der Formel (VI) gelangt.
Schema II
Die Nitron-Zwischenprodukte der Formel (XV) lassen sich dadurch herstellen, daß man Chinolinderivate der Formel (XVI) mit einem geeigneten Oxidationsmittel wie zum Beispiel m-Chlorperoxybenzoesäure in einem geeigneten Lösungsmittel wie zum Beispiel Dichlormethan N-oxidiert. Chinoline der Formel (XVI) lassen sich analog zur Überführung der Zwischenprodukte der Formel (X) in Zwischenprodukte der Formel (III) und anschließende N-Alkylierung mit Zwischenprodukten der Formel (II), jedoch ausgehend von nach fachbekannten Verfahren, z.B. wie in J. Kenner et al., J. Chem. Soc. 299 (1935) beschrieben, hergestellten Chinolinderivaten, herstellen. Die N-Oxidation läßt sich auch mit einer Vorstufe eines Chinolins der Formel (XVI) durchführen.
Die Zwischenprodukte der Formel (XVI) werden anscheinend zu Verbindungen der Formel (I) verstoffwechselt. Zwischenprodukte der Formel (XVI) können daher als „Prodrugs" von Verbindungen der Formel (I) dienen.
Die Zwischenprodukte der Formel (X-a), bei denen es sich um Zwischenprodukte der Formel (X), wobei die gestrichelte Linie eine Bindung bedeutet, handelt, lassen sich nach Schema III darstellen.
Schema III
In Schema III werden Zwischenprodukte der Formel (XVII) mit Zwischenprodukten der Formel (XVIII), wobei Z eine entsprechend geschützte Oxo-Gruppe, wie z.B. 1,3-Dioxolan bedeutet, umgesetzt, wodurch man zu Zwischenprodukten der Formel (XIX) gelangt, die anschließend unter katalytischen Hydrierungsbedingungen, z.B. mit Wasserstoffgas und Palladium-auf-Kohle in einem gegenüber der Reaktion inerten Lösungsmittel wie zum Beispiel Tetrahydrofuran in Zwischenprodukte der Formel (XX) überführt werden. Zwischenprodukte der Formel (XX) werden dadurch in Zwischenprodukte der Formel (XXI) überführt, daß man Zwischenprodukte (XX) z.B. durch Behandeln mit dem Anhydrid einer Carbonsäure, z.B. Essigsäureanhydrid, in einem gegenüber der Reaktion inerten Lösungsmittel, z.B. Toluol, gegebenenfalls in Gegenwart einer Base zum Einfangen der während der Reaktion freigesetzten Säure, acetyliert und anschließend mit einer Base wie z.B. Kalium-tert.-butylat in einem gegenüber der Reaktion inerten Lösungsmittel, z.B. 1,2-Dimethoxyethan, behandelt. Zwischenprodukte der Formel (X-a-1), bei denen es sich um Zwischenprodukte der Formel (X-a), wobei R¹ Wasserstoff bedeutet, handelt, lassen sich durch Entfernen der Schutzgruppe Z von Zwischenprodukten der Formel (XXI) unter fachbekannten Reaktionsbedingungen, z.B. im Sauren, erhalten. Zwischenprodukte der Formel (X-a-1) lassen sich mit fachbekannten N-Alkylierungsreaktionen in Zwischenprodukte der Formel (X-a) überführen.
Zwischenprodukte der Formel (X-a-1) lassen sich auch dadurch erhalten, daß man Zwischenprodukte der Formel (XIX) mit TiCl₃ in Gegenwart von Wasser in einem gegenüber der Reaktion inerten Lösungsmittel wie z.B. Tetrahydrofuran behandelt, oder durch katalytische Hydrierung, wodurch man zu Zwischenprodukten der Formel (XXII) gelangt, die man anschließend mit den gleichen Reaktionen wie oben für die Überführung von Zwischenprodukten (XX) in Zwischenprodukte (XXI) beschrieben in Zwischenprodukte (X-1) überführt.
Schema IV umreißt die Synthese von Zwischenprodukten der Formel (XXVI-a), wobei es sich bei R^8b um einen aus der Gruppe R⁸ so ausgewählten Substituenten handelt, daß sich dieser für die Additionsreaktion des Organolithiumderivats des Zwischenprodukts (XXIII) mit der Oxogruppe des Zwischenprodukts (XXIV) eignet. Zum Beispiel bedeutet R^8b Wasserstoff, C_1-6Alkyl, C_1-6Alkyloxycarbonyl und dergleichen.
Schema IV
In Schema IV wird ein Zwischenprodukt der Formel (XXIII), wobei W² Halogen bedeutet, mit einem Organolithium-Reaktionspartner wie z.B. n-Butyllithium in einem gegenüber der Reaktion inerten Lösungsmittel, z.B. Tetrahydrofuran, behandelt und anschließend mit einem Zwischenprodukt der Formel (XXIV) umgesetzt, wodurch man zu einem Zwischenprodukt der Formel (XXV) gelangt, welches anschließend durch Behandlung mit einem Zwischenprodukt der Formel (V) in ein Zwischenprodukt der Formel (XXVI) überführt wird.
Die Verbindungen der Formel (I) und manche Zwischenprodukte weisen in ihrer Struktur mindestens ein stereogenes Zentrum auf. Dieses stereogene Zentrum kann in R- oder S-Konfiguration vorliegen.
Bei den wie in den oben beschriebenen Verfahren dargestellten Verbindungen der Formel (I) handelt es sich im allgemeinen um racemische Mischungen von Enantiomeren, die sich voneinander nach fachbekannten Trennverfahren trennen lassen. Die racemischen Verbindungen der Formel (I) lassen sich durch Umsetzen mit einer geeigneten chiralen Säure in die entsprechenden diastereoisomeren Salzformen überführen. Diese diastereoisomeren Salzformen werden anschließend zum Beispiel durch selektive oder fraktionierte Kristallisation getrennt und die Enantiomere werden daraus mittels Alkali freigesetzt. Bei einer weiteren Art der Trennung der enantiomeren Formen der Verbindungen der Formel (I) bedient man sich der Flüssigkeitschromatographie mit einer chiralen stationären Phase. Diese stereochemisch reinen isomeren Formen lassen sich auch aus den entsprechenden stereochemisch reinen isomeren Formen der entsprechenden Ausgangsmaterialien ableiten, vorausgesetzt, daß eine stereospezifische Reaktion stattfindet. Ist ein spezifisches Stereoisomer erwünscht, so wird die Verbindung vorzugsweise mittels stereospezifischer Herstellungmethoden hergestellt. Bei diesen Verfahren verwendet man vorteilhafterweise enantiomerenreine Ausgangsmaterialien.
Die vorliegende Erfindung stellt ein Verfahren zur Hemmung des abnormalen Wachstums von Zellen, darunter auch transformierten Zellen, durch Verabreichung einer wirksamen Menge einer erfindungsgemäßen Verbindung bereit. Abnormales Wachstum von Zellen bezieht sich auf Zellwachstum, das von normalen Regulationsmechanismen unabhängig ist (z.B. Verlust der Kontaktinhibition). Dazu zählt das abnormale Wachstum von: (1) Tumorzellen (Tumoren), die ein aktiviertes ras-Onkogen exprimieren; (2) Tumorzellen, in denen das ras-Protein aufgrund einer onkogenen Mutation eines anderen Gens aktiviert ist, (3) gutartigen und bösartigen Zellen anderer proliferativer Krankheiten, bei denen eine aberrante ras-Aktivierung stattfindet. Weiterhin wurde in der Literatur vorgeschlagen, daß ras-Oncogene nicht nur zum in-vivo-Tumorwachstum aufgrund einer direkten Auswirkung auf das Tumorzellwachstum, sondern auch indirekt, nämlich durch Erleichterung einer tumorinduzierten Angiogenese, beitragen (Rak. J. et al, Cancer Research, 55, 4575–4580, 1995). Ein pharmakologischer Angriff auf mutierte ras-Oncogene könnte daher möglicherweise das Wachstum von festen Tumoren in vivo teilweise dadurch supprimieren, daß die tumorinduzierte Angiogenese gehemmt wird.
Die vorliegende Erfindung stellt auch ein Verfahren zur Hemmung des Tumorwachstums durch Verabreichen einer wirksamen Menge einer erfindungsgemäßen Verbindung an einen Patienten, z.B. ein Säugetier (und insbesondere einen Menschen), das bzw. der solch einer Behandlung bedarf, bereit. Insbesondere stellt die vorliegende Erfindung ein Verfahren zur Hemmung des Wachstums von Tumoren, die ein aktiviertes ras-Oncogen exprimieren, durch Verabreichung einer wirksamen Menge der erfindungsgemäßen Verbindungen bereit. Zu Tumoren, die gehemmt werden können, zählen Lungenkrebs (z.B. Adenokarzinom), Bauchspeicheldrüsenkrebs (z.B. Bauchspeicheldrüsenkarzinom wie zum Beispiel exokrines Bauchspeicheldrüsenkarzinom), Dickdarmkrebs (z.B. Kolorektalkarzinome, wie zum Beispiel Colon-Adenokarzinom und Colonadenom), Hämopoetische Tumore der Lymphwege (z.B. akute lymphatische Leukämie, B-Zellen-Lymphom, Burkitt-Lymphom), myeloische Leukämien (zum Beispiel akute myeloische Leukämie (AML)), Schilddrüsenfollikelkrebs, Myelodysplasie-Syndrom (MDS), Tumore mesenchymalen Ursprungs (z.B. Fibrosarkome sowie Rhabdomyosarkome), Melanome, Teratokarzinome, Neuroblastome, Gliome, gutartige Hauttumore (z.B. Keratoakanthome), Brustkrebs, Nierenkrebs, Ovarialkarzinom, Blasenkrebs sowie Epidermiskrebs, was jedoch keine Einschränkung darstellen soll.
Die vorliegende Erfindung kann auch ein Verfahren zur Hemmung proliferativer Krankheiten, und zwar gutartiger als auch bösartiger proliferativer Krankheiten, bei denen ras-Proteine aufgrund einer oncogenen Mutation in Genen aberrant aktiviert werden, d.h. das ras-Gen selbst wird nicht durch Mutation in eine oncogene Mutation zu einer oncogenen Form aktiviert, bereitstellen, wobei diese Inhibition dadurch erzielt wird, daß man einem Patienten, der solch einer Behandlung bedarf, eine wirksame Menge der im vorliegenden Text beschriebenen Verbindungen verabreicht. Zum Beispiel können die gutartige proliferative Erkrankung Neurofibromatose oder Tumore, bei denen ras aufgrund einer Mutation oder Überexpression von Tyrosinkinase-Oncogenen aktiviert wird, durch die erfindungsgemäßen Verbindungen gehemmt werden.
Die vorliegende Erfindung betrifft auch Verbindungen der Formel (I) wie oben definiert zur Verwendung als Arzneimittel.
In Anbetracht ihrer nützlichen pharmakologischen Eigenschaften lassen sich die vorliegenden Verbindungen als verschiedene pharmazeutische Darreichungsformen formulieren. Zur Herstellung der erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zusammensetzungen wird eine wirksame Menge einer bestimmten Verbindung in Basen- oder Säureadditionssalzform als Wirkstoff innig mit einem pharmazeutisch unbedenklichen Träger abgemischt, wobei dieser Träger je nach der erwünschten Darreichungsform verschiedenste Formen annehmen kann. Diese pharmazeutischen Zusammensetzungen liegen erwünschterweise in einer Einzeldosisform vor, die sich vorzugsweise für die orale, rektale oder perkutane Verabreichung oder für die Verabreichung durch parenterale Injektion eignet. Zum Beispiel können bei der Herstellung von Zusammensetzungen in Oraldosisform beliebige der üblichen pharmazeutischen Medien wie zum Beispiel Wasser, Glykole, Öle, Alkohole und dergleichen bei flüssigen Oralpräparaten wie Suspensionen, Sirupen, Elixieren und Lösungen, oder feste Träger wie Stärken, Zucker, Kaolin, Gleitmittel, Bindemittel, Sprengmittel und dergleichen bei Pulvern, Pillen, Kapseln und Tabletten verwendet werden. Aufgrund ihrer leichten Verabreichbarkeit stellen Tabletten und Kapseln die vorteilhafteste Einzeldosisform zur oralen Verabreichung dar, wobei natürlich feste pharmazeutische Träger verwendet werden. Für Parenteralia umfaßt der Träger üblicherweise größtenteils steriles Wasser, obwohl auch andere Bestandteile aufgenommen werden können, zum Beispiel um die Löslichkeit zu unterstützen. So lassen sich zum Beispiel Injektionslösungen herstellen, bei denen der Träger Kochsalzlösung, Glukoselösung oder eine Mischung aus Kochsalz- und Glukoselösung umfaßt. Auch lassen sich Injektionssuspensionen herstellen, bei denen geeignete flüssige Träger, Suspendiermittel und dergleichen verwendet werden können. Bei den Zusammensetzungen, die sich für die perkutane Verabreichung eignen, umfaßt der Träger gewünschtenfalls ein Penetriermittel bzw. ein geeignetes Netzmittel, gewünschtenfalls in Kombination mit kleinen Mengen an beliebigen Zusatzstoffen, die keine wesentliche Schadwirkung auf die Haut ausüben. Diese Zusatzstoffe können die Verabreichung an die Haut erleichtern bzw. bei der Herstellung der gewünschten Zusammensetzungen nützlich sein. Diese Zusammensetzungen lassen sich auf unterschiedliche Weise verabreichen, z.B. als Transdermalpflaster, als Aufgießmittel oder als Salbe. Besonders vorteilhaft ist es, die genannten pharmazeutischen Zusammensetzungen zur leichten Verabreichung und Gleichmäßigkeit der Dosierung in Einzeldosisform zu formulieren. Der Ausdruck Einzeldosisform bedeutet im Zusammenhang mit der vorliegenden Beschreibung bzw. den vorliegenden Ansprüchen physikalisch getrennte Einheiten, die sich als Einheitsdosen eignen, wobei jede Dosis eine vorbestimmte Menge Wirkstoff enthält, die so berechnet ist, daß gemeinsam mit dem erforderlichen pharmazeutischen Träger die gewünschte therapeutische Wirkung eintritt. Solche Einzeldosisformen sind zum Beispiel Tabletten (inklusive Tabletten mit Bruchkerbe oder Filmtabletten), Kapseln, Pillen, Pulverbriefchen, Oblatenkapseln, Injektionslösungen oder -suspensionen, Teelöffel, Eßlöffel und dergleichen, sowie deren abgeteilte Mehrfache.
Die wirksame Menge könnte vom Fachmann leicht aufgrund der im folgenden dargestellten Testergebnisse bestimmt werden. Im allgemeinen wird angenommen, daß eine wirksame Menge im Bereich von 0,01 mg/kg bis 100 mg/kg Körpergewicht, insbesondere von 0,05 mg/kg bis 10 mg/kg Körpergewicht liegt. Es kann günstig sein, die erforderliche Dosis in Form von zwei, drei, vier oder mehr Teildosen in geeigneten über den Tag verteilten Zeitabständen zu verabreichen. Diese Teildosen können als Einzeldosisformen formuliert sein, die zum Beispiel 0,5 bis 500 mg, insbesondere 1 mg bis 200 mg, Wirkstoff pro Einzeldosisform enthalten.
Versuchsteil
Im folgenden Text bedeutet „THF" Tetrahydrofuran, „DIPE" Diisopropylether, „DCM" Dichlormethan, „DMF" N,N-Dimethylformamid und „ACN" Acetonitril. Bei manchen Verbindungen der Formel (I) wurde die absolute stereochemische Konfiguration nicht experimentell bestimmt. Bei diesen Fällen wird die stereochemisch isomere Form, die zuerst isoliert wurde, mit „A" und die zweite mit „B" bezeichnet, und zwar ohne weitere Angabe der tatsächlichen stereochemischen Konfiguration.
A. Herstellung der Zwischenprodukte
Beispiel 1

a) Eine Mischung aus 1-(Chlorphenylmethyl)-4-nitrobenzol (88,7 g) in ACN (1000 ml) wurde mit Imidazol (121,8 g) versetzt und der Ansatz wurde 24 Stunden gerührt und am Rückfluß erhitzt. Das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand wurde in Toluol gelöst, mit einer 10%igen K₂CO₃-Lösung gewaschen, getrocknet (MgSO₄), filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie an Silikagel gereinigt (Eluens : CH₂Cl₂/CH₃OH 98/2). Die reinen Fraktionen wurden aufgefangen und das Lösungsmittel wurde abgedampft, wodurch man 53 g (53%) 1-[(4- Nitrophenyl)phenylmethyl]-H-imidazol erhielt (Zwischenprodukt 1-a).
b) Eine Mischung aus Zwischenprodukt (1-a) (39 g) in Ethanol (300 ml) wurde mit Raney-Nickel (20 g) als Katalysator hydriert (3,9 10⁵ Pa H₂). Nach der Wasserstoffaufnahme (3 Äquivalente) wurde vom Katalysator abfiltriert und das Filtrat wurde eingeengt, wodurch man 34,6 g (±)-4-[(1H-Imidazol-1-yl)phenylmethyl]benzolamin erhielt (Zwischenprodukt 1-b).
c) Eine Mischung aus Zwischenprodukt (1-b) (8,92 g) und 1-Chlor-3,3-diphenyl-2-propen-1-on (10,42 g) in DCM (100 ml) wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Die Mischung wurde in eine 10%ige NaHCO₃-Lösung gegossen. Diese Mischung wurde mit DCM extrahiert und getrennt. Die organische Schicht wurde getrocknet (MgSO₄), abfiltriert und eingeengt, wodurch man 22,85 g (100%) (±)-N-[4-[(1H-Imidazol-1-yl)phenylmethyl]-phenyl]-3,3-diphenyl-2-propenamid erhielt (Zwischenprodukt 1-c). Das Produkt wurde ohne weitere Reinigung verwendet.

Beispiel 2

a) 4-Chlorbenzoesäure (21,23 g) und 3,4-Dihydro-4-phenyl-2(1H)-chinolinon (15 g) wurden 24 Stunden lang bei 140°C in Polyphosphorsäure (150 g) erhitzt. Die Mischung wurde auf Eiswasser gegossen und abfiltriert. Der Niederschlag wurde in DCM aufgenommen. Die organische Schicht wurde mit NaHCO₃ (10%) und Wasser gewaschen, getrocket (MgSO₄) und eingeengt. Der Rückstand wurde aus 2-Propanon kristallisiert, wodurch man 12, 34 g (50%) (±)-6-(4-Chlorbenzoyl)-3,4-dihydro-4-phenyl-2(1H)-chinolinon vom Smp. 204°C erhielt (Zwischenprodukt 2-a).
b) Eine Lösung von Zwischenprodukt (2-a) (20 g) in Methanol (200 ml) und THF (5 ml) wurde portionsweise bei 0°C mit Natriumborhydrid (12,5 g) versetzt und die Mischung wurde 2 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Es wurde mit Wasser gequencht und eingeengt.

Der Rückstand wurde in DCM aufgenommen und mit K₂CO₃ (10%) gewaschen. Die organische Schicht wurde getrocknet (MgSO₄), abfiltriert und eingeengt. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie an Silikagel gereinigt (Eluens : CH₂Cl₂/CH₃OH 96/4). Die reinen Fraktionen wurden aufgefangen und eingeengt, wodurch man 2,8 g (14%) (±)-6-[(4-Chlorphenyl)hydroxymethyl]-3,4-dihydro-4-phenyl-2(1H)-chinolinon erhielt (Zwischenprodukt 2-b).
Beispiel 3
Eine Mischung aus (±)-6-[Hydroxy(3-fluorphenyl)methyl]-4-phenyl-2(1H)-chinolinon (11 g) in Thionylchlorid (11 ml) und DCM (120 ml) wurde 12 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das Lösungsmittel wurde zur Trockne abgedampft und ohne weitere Reinigung verwendet, wodurch man 11,6 g (±)-6-[Chlor-(3-fluorphenyl)methyl]-4-phenyl-2(1H)-chinolinon erhielt (100%) (Zwischenprodukt 3).
Beispiel 4
Eine Mischung aus Natriumhydrid (1,75 g) in THF (30 ml) wurde 5 Minuten lang gerührt. Das Tetrahydrofuran wurde abgedampft. Man versetzte mit Dimethylsulfoxid (120 ml) und dann mit Trimethylsulfoxoniumiodid (12,1 g) und rührte die entstandene Mischung 30 Minuten bei Raumtemperatur im N₂-Strom. Man versetzte portionsweise mit 6-(4-Chlorbenzoyl)-1-methyl-4-phenyl-2(1H)-chinolinon (17 g) und rührte 2 Stunden bei Raumtemperatur. Man versetzte mit Essigester und Wasser. Die organische Schicht wurde abgetrennt, zweimal mit Wasser gewaschen, getrocknet (MgSO₄) und abfiltriert, und das Lösungsmittel wurde abgedampft. Das Rohprodukt wurde in dem nächsten Reaktionsschritt ohne weitere Reinigung verwendet, wodurch man 17,6 g (100%) (±)-6-[2-(4-Chlorphenyl)-2-oxiranyl]-1-methyl-4-phenyl-2(1H)-chinolinon erhielt (Zwischenprodukt 4).
Beispiel 5

a) Eine Mischung aus 6-(4-Chlorbenzoyl)-1-methyl-4-phenyl-2(1H)-chinolinon (24 g) in Formamid (130 ml) und Ameisensäure (100 ml) wurde 12 Stunden lang bei 160°C unter Rühren erhitzt. Die Mischung wurde auf Eiswasser gegossen und mit DCM extrahiert. Die organische Schicht wurde getrocknet (MgSO₄), abfiltriert und zur Trockne eingeengt. Das Produkt wurde ohne weitere Reinigung verwendet, wodurch man 24,2 g (93%) (±)-N-[(4-Chlorphenyl-(1,2-dihydro-1-methyl-2-oxo-4-phenyl-6-chinolinyl)methyl]formamid erhielt (Zwischenprodukt 5-a).
b) Eine Mischung aus Zwischenprodukt (5-a) (21,2 g) in Salzsäure (3 N) (150 ml) und 2-Propanol (150 ml) wurde über Nacht unter Rühren am Rückfluß erhitzt. Die Mischung wurde auf Eis gegossen, mit NH₄OH basisch gestellt und mit DCM extrahiert. Die organische Schicht wurde getrocknet (MgSO₄), abfiltriert und zur Trockne eingeengt. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie an Silikagel gereinigt (Eluens: CH₂Cl₂/CH₃OH/NH₄OH 98/2/0,1)). Die reinen Fraktionen wurden aufgefangen und eingeengt, wodurch man 11,6 g (59%) (±)-6-[Amino-(4-chlorphenyl)methyl]-1-methyl-4-phenyl-2(1H)-chinolinon erhielt (Zwischenprodukt 5-b).
c) Eine Lösung von Zwischenprodukt (5-b) (10,6 g) in Ethanol (90 ml) wurde bei Raumtemperatur tropfenweise mit N-Cyanmethanimidsäureethylester (3,6 g) versetzt, und die Mischung wurde 48 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Man versetzte mit Wasser und Essigester, und die organische Schicht wurde abdekantiert, mit Wasser gewaschen, getrocknet (MgSO₄), abfiltriert und zur Trockne eingeengt. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie an Silikagel gereinigt (Eluens: CH₂Cl₂/CH₃OH/NH₄OH 97/3/0,1). Die reinen Fraktionen wurden aufgefangen und eingeengt, wodurch man 10, 5 g (88%) (±)-N-[[[(4-Chlorphenyl)(1,2-dihydro-1-methyl-2-oxo-4-phenyl-6-chinolinyl)methyl]-amino]methylen]cyanamid erhielt (Zwischenprodukt 5-c).
d) Eine Lösung von Zwischenprodukt (5-c) (9 g) und 2-Methyl-2-propanol-Kaliumsalz (2,37 g) in Dimethylsulfoxid (100 ml) wurde bei 5°C tropfenweise mit 2-Bromessigsäureethylester (2,45 ml) versetzt und die Mischung wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Man versetzte mit Wasser und Essigester, und die organische Schicht wurde abdekantiert, getrocknet (MgSO₄), abfiltriert und zur Trockne eingeengt. Das Produkt wurde ohne weitere Reinigung verwendet, wodurch man (±)-Ethyl-N-[(4-chlorphenyl)(2,3-dihydro-1-methyl-2-oxo-4-phenyl-6-chinolinyl)methyl]-N-[(cyanimino)methyl]glycin erhielt (Zwischenprodukt 5-d).

Beispiel 6

a) Ein Lösung von (±)-6-[Amino(4-chlorphenyl)methyl]-4-phenyl-2(1H)-chinolinon (11 g) in Methanol (100 ml) wurde langsam mit 2-Isothiocyanato-1,1-dimethoxy-ethan (5,3 g) versetzt und die Mischung wurde 5 Stunden lang unter Rühren auf 80°C erhitzt. Es wurde zur Trockne eingeengt und das Produkt wurde ohne weitere Reinigung verwendet, wodurch man 15,4 g (100%) (±)-N-[(4-Chlorphenyl)(1,2-dihydro-2-oxo-4-phenyl-6-chinolinyl)methyl]-N'-(2,2-dimethoxyethyl)thioharnstoff erhielt (Zwischenprodukt 6-a).
b) Eine Mischung aus Zwischenprodukt (6-a) (15,3 g) Iodmethan (2,27 ml) und Kaliumcarbonat (5 g) in 2-Propanon (50 ml) wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Es wurde eingeengt und der Rückstand wurde in DCM aufgenommen und mit K₂CO₃ (10%) gewaschen. Die organische Schicht wurde getrocknet (MgSO₄), abfiltriert und eingeengt, wodurch man 17,8 g (100%) (±)-Methyl-N-[(4-Chlorphenyl)(1,2-dihydro-2-oxo-4-phenyl-6-chinolinyl)-methyl]-N'-(2,2-dimethoxyethyl)carbamimidothioat (Zwischenprodukt 6-b) erhielt, das ohne weitere Reinigung eingesetzt wurde.

Beispiel 7

a) Toluol (1900 ml) wurde am Wasserabscheider in einem Rundkolben (5 1) gerührt. Man versetzte portionsweise mit (4-Chlorphenyl) (4-nitrophenyl)methanon (250 g). Man versetzte portionsweise mit p-Toluolsulfonsäure (54,5 g). Man goß Ethylenglykol (237,5 g) in die Mischung. Man erhitzte 48 Stunden lang unter Rühren zum Rückfluß. Das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand wurde in Essigester (5 l) gelöst und zweimal mit einer 10%igen K₂CO₃-Lösung gewaschen. Die organische Schicht wurde abgetrennt, getrocknet (MgSO₄) und filtriert, und das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand wurde in DIPE gerührt, abfiltriert und getrocknet (Vakuum, 40°C, 24 Stunden), wodurch man 265 g (91%) 2-(4-Chlorphenyl)-2-(4-nitrophenyl)-1,3-dioxolan erhielt (Zwischenprodukt 7-a).
b) Ein Lösung von Zwischenprodukt (7-a) (25 g) in Methanol (100 ml) wurde bei Raumtemperatur mit Natriumhydroxyid (16,4 g) und (3-Methoxyphenyl)acetonitril (20,6 ml) versetzt und es wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Man versetzte mit Wasser, und der Niederschlag wurde abfiltriert, mit kaltem Methanol gewaschen und getrocknet. Das Produkt wurde ohne weitere Reinigung verwendet, wodurch man 30 g (90%) 5-[2-(4-Chlorphenyl)-1,3-dioxolan-2-yl]-3-(3-methoxyphenyl)-2,1-benzisoxazol erhielt (Zwischenprodukt 7-b).
c) Zwischenprodukt (7-b) (30 g) in THF (250 ml) wurde 12 Stunden bei Raumtemperatur unter einem Druck von 2,6 10⁵ Pa in einem Parr-Apparat mit Palladium auf Kohle (3 g) als Katalysator hydriert. Nach der H₂-Aufnahme (1 Äquivalent) wurde vom Katalysator durch Celite abfiltriert und das Filtrat wurde zur Trockne eingeengt. Das Produkt wurde ohne weitere Reinigung verwendet, wodurch man 31,2 g (100%) (3-Methoxyphenyl)[2-amino-5-[2-(4-chlorphenyl)-1,3-dioxolan-2-yl]phenyl]methanon erhielt (Zwischenprodukt 7-c).
d) Eine Lösung von Zwischenprodukt (7-c) (31,2 g) in Toluol (300 ml) wurde mit Essigsäureanhydrid (13,9 ml) versetzt und es wurde 2 Stunden lang am Rückfluß gerührt. Es wurde zur Trockne eingeengt und das Produkt wurde ohne weitere Reinigung verwendet, wodurch man 36, 4 g (100%) N-[2-(3-Methoxybenzoyl)-4-[2-(4-chlorphenyl)-1,3-dioxolan-2-yl]phenyl]acetamid erhielt (Zwischenprodukt 7-d).
e) Eine Lösung von Zwischenprodukt (7-d) (36,4 g) in 1,2-Dimethoxyethan (350 ml) wurde portionsweise mit Kalium-tert.-butylat (33 g) versetzt und es wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Die Mischung wurde hydrolysiert und mit DCM extrahiert. Die organische Schicht wurde getrocknet (MgSO₄), abfiltriert und zur Trockne eingeengt. Das Produkt wurde ohne weitere Reinigung verwendet, wodurch man 43 g (100%) 6-[2-(4-Chlorphenyl)-1,3-dioxolan-2-yl]-4-(3-methoxyphenyl)-2(1H)-chinolinon erhielt (Zwischenprodukt 7-e).
f) Eine Mischung aus Zwischenprodukt (7-e) (43 g) in HCl (3N, 400 ml) und Methanol (150 ml) wurde über Nacht am Rückfluß gerührt. Die Mischung wurde abgekühlt und filtriert. Der Niederschlag wurde mit Wasser und Diethylether gewaschen und getrocknet. Das Produkt wurde ohne weitere Reinigung verwendet, wodurch man 27 g (94%) 6-(4-Chlorbenzoyl)-4-(3-methoxyphenyl)-2(1H)-chinolinon erhielt (Zwischenprodukt 7-f).
g) Ein Lösung von Zwischenprodukt (7-f) (7,6 g) und Benzyltriethylammoniumchlorid (BTEAC) (2,23 g) in THF (80 ml) und Natriumhydroxid (40%, 80 ml) wurde mit Methyliodid (1,58 ml) versetzt. Es wurde 2 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Man versetzte mit Wasser und extrahierte mit Essigester. Die organische Schicht wurde getrocknet (MgSO₄) und filtriert, und das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand wurde durch Flash-Säulenchromatographie an Silikagel gereinigt (Eluens: DCM 100%). Die gewünschten Fraktionen wurden aufgefangen und das Lösungsmittel abgedampft, wodurch man 7,1 g (90%) 6-(4-Chlorbenzoyl)-4-(3-methoxyphenyl)-1-methyl-2(1H)-chinolinon erhielt (Zwischenprodukt 7-g).
h) DCM (210 ml) wurde mit Zwischenprodukt (7-g) (6,8 g) versetzt und es wurde bei 0°C gerührt. Man versetzte tropfenweise mit Tribromboran (67,3 ml) und rührte 15 Minuten lang bei 0°C. Es wurde auf Raumtemperatur kommen gelassen, 30 Minuten lang bei Raumtemperatur gerührt, und mit K₂CO₃ (10%) versetzt. Die organische Schicht wurde abgetrennt, getrocknet (MgSO₄) und filtriert, und das Lösungsmittel wurde abgedampft, wodurch man 6,6 g 6-(4-Chlorbenzoyl)-4-(3-hydroxyphenyl)-1-methyl-2(1H)-chinolinon erhielt (Zwischenprodukt 7-h) (quantitative Ausbeute; wurde im nächsten Reaktionsschritt ohne weitere Reinigung verwendet).
i) Eine Mischung aus Zwischenprodukt (7-h) (9,5 g), Propyliodid (5,9 ml) und K₂CO₃ (10,1 g) wurde 4 Stunden lang am Rückfluß gerührt. Man versetzte mit Wasser und extrahierte mit DCM. Die organische Schicht wurde abgetrennt, getrocknet (MgSO₄) und filtriert, und das Lösungsmittel wurde abgedampft, wodurch man 10,4 g (100%) 6-(4-Chlorbenzoyl)-1-methyl-4-(3-propoxyphenyl)-2(1H)-chinolinon erhielt (Zwischenprodukt 7-i).
j) Eine Lösung von Zwischenprodukt (7-i) (3,55 g) in Methanol (20 ml) und THF (20 ml) wurde abgekühlt. Man versetzte portionsweise mit Natriumborhydrid (0,37 g). Die Mischung wurde 30 Minuten lang bei Raumtemperatur gerührt, hydrolysiert und mit DCM extrahiert. Die organische Schicht wurde abgetrennt, getrocknet (MgSO₄) und filtriert, und das Lösungsmittel wurde zur Trockne abgedampft, wodurch man 3,5 g (100%) (±)-6-[(4-Chlorphenyl)hydroxymethyl]-1-methyl-4-(3-propoxyphenyl)-2(1H)-chinolinon erhielt (Zwischenprodukt 7-j).
k) Eine Lösung von Zwischenprodukt (8-a) (3,5 g) in Thionylchlorid (30 ml) wurde über Nacht am Rückfluß gerührt. Das Lösungsmittel wurde zur Trockne abgedampft und das Produkt wurde ohne weitere Reinigung verwendet, wodurch man 3, 7 g (100%) (±)-6-[Chlor(4-chlorphenyl)methyl]-1-methyl-4-(3-propoxyphenyl)-2(1H)-chinolinon erhielt (Zwischenprodukt 7-k).

Beispiel 8

a) Eine Lösung von 4-Amino-4'-chlorbenzophenon (35 g) in Ethanol (250 ml) wurde bei Raumtemperatur mit HCl/Diethylether (30,8 ml) versetzt, und es wurde 15 Minuten lang gerührt. Man versetzte portionsweise mit FeCl₃.6H₂O (69,4 g) und anschließend mit ZnCl₂ (2,05 g) und rührte 30 Minuten lang bei 65°C. Man versetzte mit 3-Chlor-1-phenyl-1-propanon (25,46 g) und rührte über Nacht am Rückfluß. Es wurde auf Eis gegossen und mit DCM extrahiert. Die organische Schicht wurde mit K₂CO₃ (10%) gewaschen, getrocknet (MgSO₄), abfiltriert und eingeengt. Der Rückstand wurde aus ACN kristallisiert. Die Ausgangsschichten wurden durch Säulenchromatographie an Silikagel gereinigt (Eluens: CH₂Cl₂/CH₃OH 99/1). Die reinen Fraktionen wurden aufgefangen und eingeengt, wodurch man 19,4 g (37%) (4-Chlorphenyl)(4-phenyl-6-chinolinyl)methanon erhielt (Zwischenprodukt 8-a).
b) Nach der in Beispiel 7j beschriebenen Vorgehensweise wurde Zwischenprodukt (8-a) in (±)-α-(4-Chlorphenyl)-4-phenyl-6-chinolinmethanol überführt (Zwischenprodukt (8-b)).
c) Nach der in Beispiel 7k beschriebenen Vorgehensweise wurde Zwischenprodukt (8-b) in (±)-6-[Chlor-(4-chlorphenyl)methyl]-4-phenylchinolin-hydrochlorid überführt (Zwischenprodukt 8-c).
d) Eine Mischung aus Zwischenprodukt (8-c) (12,6 g) und 1H-Imidazol (11,8 g) in ACN (300 ml) wurde 16 Stunden lang unter Rückfluß gerührt. Es wurde zur Trockne eingeengt und der Rückstand wurde in DCM aufgenommen. Die organische Schicht wurde mit K₂CO₃ (10%) gewaschen, getrocknet (MgSO₄), abfiltriert und eingeengt. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie an Silikagel gereinigt (Eluens : CH₂Cl₂/CH₃OH/NH₄OH 97,5/2,5/0,1). Die reinen Fraktionen wurden aufgefangen und eingeengt. Der Rückstand wurde in das Salz der Salpetersäure überführt (1:2) und aus CH₃OH/2-Propanol/Diethylether kristallisiert, wodurch man 4,28 g (28%) (±)-6-[(4-Chlorphenyl)-1H-imidazol-1-yl-methyl]-4-phenylchinolindinitrat-monohydrat erhielt (Zwischenprodukt 8-d, Smp. 152°C).

Beispiel 9

a) Eine Mischung aus Natriumhydroxid (32,8 g) in Methanol (100 ml) wurde mit Zwischenprodukt (7-a) (50 g) und dann (3-Chlorphenyl)acetonitril (34,8 ml) versetzt. Es wurde am Rückfluß bis zum vollständigen Auflösen gerührt. Die Reaktion wurde zweimal mit den gleichen Mengen durchgeführt. Die Ansätze wurde vereinigt. Man versetzte mit Eis und dann Ethanol. Man ließ auskristallisieren, und der Niederschlag wurde abfiltriert, mit Ethanol gewaschen und getrocknet, wodurch man 58 g (86%) 3-(3-Chlorphenyl)-5-[2-(4-chlorphenyl)-1,3-dioxolan-2-yl]-2,1-benzisoxazol erhielt (Zwischenprodukt 9-a).
b) Eine Mischung aus Zwischenprodukt (9-a) (51 g) in THF (308 ml) wurde bei Raumtemperatur mit TiCl₃/15% H₂O (308 ml) versetzt. Es wurde zwei Tage lang bei Raumtemperatur gerührt. Man versetzte mit Wasser und extrahierte mit DCM. Die organische Schicht wurde abgetrennt, mit K₂CO₃ (10%) gewaschen, getrocknet (MgSO₄) und filtriert, und das Lösungsmittel wurde abgedampft. Ein Teil dieser Fraktion (5,9 g) wurde aus 2-Propanon/CH₃OH/Diethylether umkristallisiert. Der Niederschlag wurde abfiltriert und getrocknet, wodurch man 1,92 g (41%) 1-Amino-2,4-phenylen-(3-chlorphenyl)(4-chlorphenyl)dimethanon erhielt (Zwischenprodukt 9-b).
c) Nach der in Beispiel 7d beschriebenen Vorgehensweise wurde Zwischenprodukt (9-b) in N-[2-(3-Chlorbenzoyl)-4-(4-chlorbenzoyl)phenyl]acetamid überführt (Zwischenprodukt 9-c).
d) Nach der in Beispiel 7e beschriebenen Vorgehensweise wurde Zwischenprodukt (9-c) in 6-(4-Chlorbenzoyl)-4-(3-chlorphenyl)-2(1H)-chinolinon überführt (Zwischenprodukt 9-d).
e) Eine Lösung von Zwischenprodukt (9-d) (15 g) in Dimethylsulfoxid (200 ml) wurde portionsweise im N₂-Strom mit Natriumhydrid (601 g) versetzt. Es wurde 30 Minuten bei Raumtemperatur gerührt. Es wurde mit 2-Chlorethylmethylether (25,2 ml) versetzt. Es wurde 72 Stunden bei 50°C gerührt, auf Eis gegossen und mit Essigester extrahiert. Die organische Schicht wurde abgetrennt, mit Wasser gewaschen, getrocknet (MgSO₄) und filtriert, und das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie an Silikagel gereinigt, (Eluens: Cyclohexan/Essigester 70/30). Die reinen Fraktionen wurden aufgefangen und das Lösungsmittel wurde abgedampft, wodurch man 6, 2 g (36%) 6-(4-Chlorbenzoyl)-4-(3-chlorphenyl)-1-(2-methoxyethyl)-2(1H)-chinolinon erhielt (Zwischenprodukt 9-e).
f) Nach der in Beispiel 7j beschriebenen Vorgehensweise wurde Zwischenprodukt (9-e) in (±)-4-(3-Chlorphenyl)-6-[(4-chlorphenyl)hydroxymethyl]-1-(2-methoxyethyl)-2(1H)-chinolinon überführt (Zwischenprodukt 9-f).
g) Nach der in Beispiel 7k beschriebenen Vorgehensweise wurde Zwischenprodukt (9-f) in (±)-6-[Chlor(4-chlorphenyl)methyl]-4-(3-chlorphenyl)-1-(2-methoxyethyl)-2(1H)-chinolinon überführt (Zwischenprodukt 9-g).

Beispiel 10

a) Eine Mischung aus 6-Brom-4-(3-chlorphenyl)-2-methoxychinolin (20 g) in THF (150 ml) wurde langsam bei –20°C im N₂-Strom mit n-Butyllithium (37,7 ml) versetzt. Die Mischung wurde 30 Minuten bei –20°C gerührt und dann langsam bei –20°C im N₂-Strom zu einer Mischung aus 4-Chlor-α-oxobenzolessigsäureethylester (12,2 g) in THF (80 ml) gegeben. Es wurde auf Raumtemperatur kommen gelassen und 1 Stunde lang bei Raumtemperatur gerührt. Man versetzte mit Wasser und extrahierte mit Essigester. Die organische Schicht wurde abgetrennt, getrocknet (MgSO)₄) und filtriert, und das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand (26,3 g) wurde durch Säulenchromatographie an Silikagel gereinigt (Eluens: CH₂Cl₂/Cyclohexan 90/10). Die reinen Fraktionen wurden aufgefangen und das Lösungsmittel wurde abgedampft, wodurch man 9,3 g (33,5%) (±)-Ethyl-4-(3-chlorphenyl)-α-(4-chlorphenyl)-α-hydroxy-2-methoxy-6-chinolinacetat erhielt (Zwischenprodukt 10- a).
b) Zwischenprodukt (10-a) (9,3 g) und 1,1'-Carbonylbis-1H-imidazol (22 g) wurden 1 Stunde auf 120°C erhitzt. Es wurde abgekühlt. Man versetzte langsam mit Eis und extrahierte mit DCM. Die organische Schicht wurde abgetrennt, getrocknet (MgSO₄) und filtriert, und das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand (10,6 g) wurde durch Säulenchromatographie an Silikagel gereinigt (Eluens: CH₂Cl₂/2-Propanol/NH₄OH 95/5/0,5), wodurch man 7,15 9 (±)-Ethyl-4-(3-chlorphenyl)-α-(4-chlorphenyl)-α-(1H-imidazol-1-yl)-2-methoxy-6-chinolinacetat erhielt (Zwischenprodukt 10-b).

B. Herstellung der Zielverbindungen
Beispiel 11
Eine Mischung aus Zwischenprodukt (1-c) (22,85 g) und Aluminiumchlorid (48 g) in Chlorbenzol (200 ml) wurde über Nacht bei 95°C erhitzt. Es wurde abgekühlt, in Eiswasser gegossen, mit NH₄OH basisch gestellt und zur Trockne eingeengt. Der Rückstand wurde in DCM und Ethanol aufgenommen. Der Rückstand wurde filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde in DCM aufgenommen und über Nacht mit 3N HCl gerührt. Es wurde extrahiert, die wäßrige Schicht wurde mit Essigester gewaschen, mit NH₄OAc basisch gestellt und dann mit Essigester extrahiert und die organische Schicht wurde getrocknet (MgSO₄) und eingeengt. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie an Silikagel gereinigt (Eluens: CH₂Cl₂/CH₃OH/NH₄OH 95/5/0, 05) (35–70 μm). Die reinen Fraktionen wurden aufgefangen und eingeengt, wodurch man 2,13 g (16%) (±)-6-[(1H-Imidazol-1-yl)phenylmethyl]-4-phenyl-2(1H)-chinolinon vom Smp. 253,0°C erhielt (Verbindung 1).
Beispiel 12
In THF (30 ml) gelöstes Zwischenprodukt (2-b) (2,8 g) wurde portionsweise bei Raumtemperatur mit Natriumhydrid (0,002 g) und dann mit 1,1'-Carbonylbis-1H-imidazol (2,5 g) versetzt, und es wurde 1 Stunde lang unter Rühren auf 60°C erhitzt. Es wurde mit Wasser hydrolysiert und eingeengt. Der Rückstand wurde in DCM aufgenommen und mit Wasser gewaschen. Die organische Schicht wurde getrocknet (MgSO₄), abfiltriert und eingeengt. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie an Silikagel gereinigt (Eluens: Toluol/2-Propanol/NH₄OH 90/10/0,5). Die reinen Fraktionen wurden aufgefangen und eingeengt. Der Rückstand (2,1 g) wurde aus 2-Propanon kristallisiert, wodurch man 1,55 g (48%) (±)-6-[(4-Chlorphenyl)-1H-imidazol-1-ylmethyl]-3,4-dihydro-4-phenyl-2(1H)-chinolinon vom Smp. 225,0°C erhielt (Verbindung 57).
Beispiel 13
Eine Mischung aus Zwischenprodukt (3) (11,6 g), Imidazol (6,5 g) und Kaliumcarbonat (13,8 g) in ACN (150 ml) wurde 12 Stunden lang am Rückfluß erhitzt. Es wurde zur Trockne eingeengt, und der Rückstand wurde in Wasser aufgenommen und mit Dichlormethan extrahiert. Die organische Schicht wurde getrocknet (MgSO₄) und der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie an Silikagel gereinigt (Eluens: CH₂Cl₂/CH₃OH 95/5) (70–200 μm). Die reinen Fraktionen wurden aufgefangen und eingeengt, wodurch man 9 g (71%) (±)-6-[(3-Fluorphenyl)(1H-imidazol-1-yl)methyl]-4-phenyl-2(1H)-chinolinon erhielt (Verbindung 5).
Beispiel 14
Eine Mischung von Verbindung (2) (10 g) in DMF (100 ml) wurde bei 10°C im N₂-Strom portionsweise mit Natriumhyrid (1,15 g) versetzt, und es wurde 30 Minuten lang bei Raumtemperatur gerührt. Man versetzte tropfenweise bei 15°C mit Iodmethan (1,5 ml) und rührte 1 Stunde lang bei Raumtemperatur. Man goß auf Eiswasser und filtrierte ab. Der Niederschlag wurde in einer Mischung aus DCM und Methanol aufgenommen. Die organische Schicht wurde getrocknet (MgSO₄), abfiltriert und eingeengt. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie an Silikagel gereinigt (Eluens: Essigester/CH₃OH 95/5). Die reinen Fraktionen wurden aufgefangen und eingeengt. Der Rückstand (3,3 g) wurde aus CH₃CN/DIPE umkristallisiert, wodurch man 1,9 g (19%) (±)-6-[(4-Chlorphenyl)-1H-imidazol-1-ylmethyl]-1-methyl-4-phenyl-2(1H)-chinolinon vom Smp. 154,7°C erhielt (Verbindung 8).
Beispiel 15
Eine Mischung aus Verbindung (2) (6 g) und Diphenyliodoniumchlorid (6,9 g) in Methanol (400 ml) wurde tropfenweise mit einer Lösung von Natriummethanolat in Methanol (2,8 ml) versetzt. Man versetzte mit Kupfer(I)-chlorid (1,72 g) und erhitzte 12 Stunden lang unter Rühren auf 60°C. Es wurde über Celite filtriert und das Filtrat wurde eingeengt. Der Rückstand wurde in DCM und NH₄OH (10%) aufgenommen. Die wäßrige Schicht wurde mit DCM extrahiert. Die vereinigten organischen Schichten wurden mit Wasser gewaschen, getrocknet (MgSO₄), abfiltriert und im Vakuum zur Trockne eingeengt. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie an Silikagel gereinigt (Eluens: CH₂Cl₂/CH₃OH/NH₄OH 98/2/0,1). Die reinen Fraktionen wurden aufgefangen und eingeengt. Der Rückstand (1,1 g) wurde in CH₃OH gelöst und in das Salz der Salpetersäure (1 : 1) in CH₃OH überführt, wodurch man 0,9 g (11,2 %) (±)-6-[(4-Chlorphenyl)-1H-imidazol-1-ylmethyl]-1,4-diphenyl-2(1H)-chinolinon-mononitrat vom Smp. 212,4°C erhielt (Verbindung 19).
Beispiel 16
Eine Mischung von Verbindung (15) (2,8 g) und Iodmethan (1,9 ml) in Tetrahydrofuran (85 ml) wurde portionsweise bei 0°C unter Stickstoff mit 2-Methyl-2-propanol-Kaliumsalz (1,35 g) versetzt und es wurde 5 Minuten lang bei Raumtemperatur gerührt. Es wurde auf Eiswasser gegossen und mit Essigester extrahiert. Die organische Schicht wurde getrocknet (MgSO₄), abfiltriert und eingeengt. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie an Silikagel gereinigt (Eluens: CH₂Cl₂/CH₃OH/NH₄OH 97,5/2,5/0,1). Die reinen Fraktionen wurden aufgefangen und eingeengt. Der Rückstand (2,3 g) wurde aus CH₃OH und Diethylether umkristallisiert, wodurch man 1, 7 g (60%) (±)-4-(3-Chlorphenyl)-6-[1-(4-chlorphenyl)-1-(1H-imidazol-1-yl)ethyl]-1-methyl-2(1H)-chinolinon vom Smp. 120,2°C erhielt (Verbindung 62).
Beispiel 17
Eine Mischung aus Zwischenprodukt (4) (17,6 g) und Imidazol (9,3 g) in ACN (250 ml) wurde über Nacht unter Rühren am Rückfluß erhitzt und dann auf Raumtemperatur abgekühlt. Der Niederschlag wurde abfiltriert, mit 10% wäßriger K₂CO₃-Lösung und Diethylether gewaschen und anschließend an der Luft getrocknet, wodurch man 11,2 g (55%) Produkt erhielt. Eine Probe (3 g) wurde aus THF, Methanol und Diethylether umkristallisiert. Der Niederschlag wurde abfiltriert und getrocknet, wodurch man 2 g (37%) (±)-6-[1-(4-Chlorphenyl)-2-hydroxy-1-(1H-imidazol-1-yl)ethyl]-1-methyl-4-phenyl-2(1H)-chinolinon-monohydrat vom Smp. 180°C erhielt (Verbindung 59).
Beispiel 18
Eine Lösung der Verbindung (59) (7 g) und Benzyltriethylammoniumchlorid (1,75 g) in Natriumhydroxid (40%) (100 ml) und THF (100 ml) wurde mit 1-Chlor-4-chlormethylbenzol (3,2 g) versetzt, und man rührte über Nacht bei Raumtemperatur. Man versetzte mit Wasser und Essigester. Die organische Schicht wurde abdekantiert, mit Wasser gewaschen, getrocknet (MgSO₄), abfiltriert und zur Trockne eingeengt. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie an Silikagel gereinigt (Eluens: CH₂Cl₂/CH₃OH/NH₄OH 98,5/1,5/0,1). Die reinen Fraktionen wurden aufgefangen und eingeengt. Der Rückstand (3,7 g) wurde aus 2-Propanon/(C₂H₅)₂O umkristallisiert, wodurch man 2,1 g (24%) (±)-6-[1-(4-Chlorphenyl)-2-[(4-chlorphenyl)methoxy]-1-(1H-imidazol-1-yl)ethyl]-1-methyl-4-phenyl-2(1Hi)-chinolinon vom Smp. 176,8°C erhielt (Verbindung 61).
Beispiel 19
Eine Lösung von Zwischenprodukt (5-d) in Methanol (100 ml) wurde bei Raumtemperatur mit Natriummethanolat (0,8 ml) versetzt, und man rührte über Nacht bei Raumtemperatur und erhitzte anschließend unter Rühren 2 Stunden lang am Rückfluß. Man versetzte mit Wasser und extrahierte mit DCM. Die organische Schicht wurde getrocknet (MgSO₄), abfiltriert und zur Trockne eingeengt. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie an Silikagel gereinigt (Eluens: CH₂Cl₂/CH₃OH/NH₄OH 98/2/0,1). Die reinen Fraktionen wurden aufgefangen und eingeengt, wodurch man 8,3 g (79%) Produkt erhielt. Eine Probe (2,3 g) wurde in das Ethandisäure-Salz (2:3) überführt und aus 2-Propanon umkristallisiert, wodurch man 2,35 g (63%) (±)-Methyl-4-amino-1-[(4-chlorphenyl)(1,2-dihydro-1-methyl-2-oxo-4-phenyl-6-chinolinyl)methyl]-1H-imidazol-5-carboxylatethandioat (2:3) vom Smp. 168,7°C erhielt (Verbindung 70).
Beispiel 20
Eine Lösung von Verbindung (70) (4,6 g) in Phosphorsäure (45 ml) wurde bei 0°C mit Salpetersäure (30 ml) und anschließend mit Natriumnitrit (0,64 g) versetzt und es wurde 45 Minuten lang bei 0°C gerührt. Man versetzte vorsichtig portionsweise mit unterphosphoriger Säure (30 ml) und rührte 1 Stunde lang bei Raumtemperatur. Es wurde auf Eis gegossen, mit NH₄OH basisch gestellt und mit Essigester extrahiert. Die organische Schicht wurde getrocknet (MgSO₄), abfiltriert und zur Trockne eingeengt. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie an Silikagel gereinigt (Eluens: CH₂Cl₂/CH₃OH/NH₄OH 98,5/1,5/0,1). Die reinen Fraktionen wurden aufgefangen und eingeengt. Der Rückstand (1,5 g) wurde in das Ethandisäure-Salz (2:3) überführt und aus 2-Propanon und DIPE umkristallisiert, wodurch man 1,14 g (20%) (±)-Methyl-1-[(4-chlorphenyl)(1,2-dihydro-1-methyl-2-oxo-4-phenyl-6-chinolinyl)methyl]-1H-imidazol-5-carboxylat-ethandioat (2:3) vom Smp. 140,8°C erhielt (Verbindung 54).
Beispiel 21
Auf 0°C gekühlte Schwefelsäure (120 ml) wurde mit Zwischenprodukt (6-b) (15,66 g) versetzt, und es wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Eine auf 0°C abgekühlte Lösung aus Eis und konzentriertem NH₄OH wurde vorsichtig mit dieser Mischung versetzt. Die basische wäßrige Schicht wurde mit DCM extrahiert. Die organische Schicht wurde getrocknet (MgSO₄), abfiltriert und zur Tockne eingeengt. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie an Silikagel gereinigt (Eluens: CH₂Cl₂/CH₃OH/NH₄OH 97,5/2,5/0,2). Die reinen Fraktionen wurden aufgefangen und eingeengt, wodurch man 7,4 g (52%) Produkt erhielt. Eine Probe wurde aus 2-Propanon kristallisiert, wodurch man 2 g (±)-6-[(4-Chlorphenyl)[2-(methylthio)-1H-imidazol-1-yl]methyl]4-phenyl-2(1H)-chinolinon-monohydrat vom Smp. 205,6°C erhielt (Verbindung 51).
Beispiel 22
Eine Lösung von Verbindung (17) (12,7 g) in Natriumhydroxid (3 N) (130 ml) wurde über Nacht bei 120°C gerührt. Es wurde auf Raumtemperatur abgekühlt und mit NH₄OH auf pH 5,2 gebracht. Der Niederschlag wurde abfiltriert, mit Wasser gewaschen und an der Luft getrocknet, wodurch man 12 g (±)-6-[(4-Chlorphenyl)-1H-imidazol-1-ylmethyl]-2-oxo-4-phenyl-1(2H)-chinolin-1-essigsäure erhielt (Verbindung 38).
Beispiel 23
Eine Mischung aus Verbindung (38) (12,4 g) und 2-Amino-4-methylpentansäuremethylester (6 g) in THF (120 ml) und 1-Hydroxybenzotriazol-hydrat wurde tropfenweise bei Raumtemperatur mit N,N'-Methantetraylbiscyclohexanamin (5,3 g) in DCM versetzt und es wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Der Ansatz wurde in Wasser gegossen und mit Esssigester extrahiert. Die organische Schicht wurde getrocknet (MgSO₄), abfiltriert und eingeengt. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie an Silikagel gereinigt (Eluens: CH₂Cl₂/CH₃OH/NH₄OH 97/3/0,1). Die reinen Fraktionen wurden aufgefangen und eingeengt, wodurch man 6,8 g (43%) Produkt erhielt. Eine Probe wurde aus DIPE kristallisiert, wodurch man 1 g (±)-Methyl-2-[[2-[6-[(4-chlorphenyl)-1H-imidazol-1-ylmethyl]-1,2-dihydro-2-oxo-4-phenyl-1-chinolinyl]-2-oxoethyl]amino]-4-methylpentanoat vom Smp. 117,9°C erhielt (Verbindung 39).
Beispiel 24
Verbindung (2) (1 g) wurde in n-Hexan (81 ml) und Ethanol (54 ml) gelöst. Diese Lösung wurde durch Säulenchromatographie über eine Chiralcel AD-Säule (250 g, 20 μm, Daicel; Eluens: n-Hexan/Ethanol 60/40 Vol.-%) aufgetrennt und gereinigt. Zwei gewünschte Fraktionsgruppen wurden aufgefangen. Die Fraktionen, die dem ersten chromatographischen Peak entsprachen, wurden eingeengt. Der Rückstand wurde in kleinen Mengen DCM gelöst. Man versetzte mit Diethylether bis zur Fällung. Der Niederschlag wurde über ein Millipore-Filter (10 μm) abfiltriert und dann getrocknet (Vakuumtrocknung bei 40°C, 2 Stunden), wodurch man 0,430 g erhielt (43%). Diese Fraktion wurde in 2-Propanon gelöst und mit DIPE gefällt. Der Niederschlag wurde abfiltriert und und getrocknet, wodurch man 0, 25 g (25%) (+)-(A)-6-[(4-Chlorphenyl)-1H-imidazol-1-ylmethyl]-4-phenyl-2(1H)-chinolinon vom Smp. 190,0°C erhielt; [α] 20 / D = + 13,10° (c=0,1% in Methanol)
(Verbindung 6). Die reinen Fraktionen, die dem zweiten chromatographischen Peak entsprachen, wurden eingeengt. Der Rückstand wurde in kleinen Mengen DCM gelöst. Man versetzte mit Diethylether bis zur Fällung. Der Niederschlag wurde über ein Millipore 10 μm-Filter abfiltriert und dann getrocknet (Vakuumtrocknung bei 40°C, 2 Stunden), wodurch man 0,410 g erhielt (41%). Diese Fraktion wurde in 2-Propanon gelöst und mit DIPE gefällt. Der Niederschlag wurde abfiltriert und getrocknet, wodurch man 0,20 g (20%) (-)-(B)-6-[(4-Chlorphenyl)-1H-imidazol-1-ylmethyl]-4-phenyl-2(1H)-chinolinon vom Smp. 155,8°C erhielt; [α] 20 / D = –6,32° (c=0,1% in Methanol) (Verbindung 7).
Beispiel 25
Ein Lösung von (±)(-4-(3-Chlorphenyl)-6-[(4-chlorphenyl)-1H-imidazol-1-ylmethyl]-2(1H)-chinolinon (4,5 g) in Pyridin (54 ml) wurde portionsweise bei Raumtemperatur mit Phosphorigsäurepentasulfid (4,45 g) versetzt und es wurde 4 Stunden unter Rühren am Rückfluß erhitzt. Man engte zur Trockne ein und nahm den Rückstand in Essigester auf. Die organische Schicht wurde mit HCl und Wasser gewaschen, getrocknet (MgSO₄), abfiltriert und zur Tockne eingeengt. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie an Silikagel gereinigt (Eluens : CH₂Cl₂/CH₃OH 97/3). Die reinen Fraktionen wurden aufgefangen und eingeengt. Der Rückstand (2,7 g) wurde aus DMF kristallisiert, wodurch man 1,6 g (33%) (±)-4-(3-Chlorphenyl)-6-[(4-chlorphenyl)-1H-imidazol-1-ylmethyl]-2(1H)-chinolinthion-monohydrat vom Smp. 263,5°C erhielt (Verbindung 72).
Beispiel 26
Ein Lösung von Zwischenprodukt (8-b) (3,7 g) in ACN (50 ml) wurde mit Imidazol (3,34 g) versetzt. Es wurde 4 Stunden unter Rühren am Rückfluß erhitzt. Man versetzte mit Wasser und extrahierte mit DCM. Die organische Schicht wurde abgetrennt, getrocknet (MgSO₄) und filtriert, und das Lösungsmittel wurde zur Trockne abgedampft. Der Rückstand (3,8 g) wurde durch Säulenchromatographie an Silikagel gereinigt (Eluens: CH₂Cl₂/CH₃OH 98/2). Die reinen Fraktionen wurden aufgefangen und das Lösungsmittel wurde abgedampft. Der Rückstand wurde aus 2-Propanon/DIPE kristallisiert, abfiltriert und getrocknet, wodurch man 1,8 g (45%) (±)-6-[(4-Chlorphenyl)-1H-imidazol-1-ylmethyl]-1-methyl-4-(3-propoxyphenyl)-2(1H)-chinolinon-ethandioat(2:3).sesquihydrat erhielt (Verbindung 74).
Beispiel 27
Eine Mischung aus Zwischenprodukt (10-b) (7,1 g) in THF (25 ml) und 3N HCl (190 ml) wurde 2 Stunden lang bei 120°C gerührt. Es wurde auf Eis gegossen, mit K₂CO₃ basisch gestellt und mit DCM extrahiert. Die organische Schicht wurde abgetrennt, getrocknet (MgSO₄) und filtriert, und das Lösungsmittel wurde abgedampft, wodurch man 6,2 g (90%)(±)-Ethyl-4-(3-chlorphenyl)-α-(4-chlorphenyl)-1,2-dihydro-α-(1H-imidazol-1-yl)-2-oxo-6-chinolinacetat erhielt (Verbindung 87).
Tabelle 1:
Tabelle 2:
Tabelle 3:
Tabelle 4
Tabelle 5:
Tabelle 6:
C. Pharmakologisches Beispiel
Beispiel 28: In-vitro-Assay der Farnesylproteintransferase-Hemmung
Human-Farnesylproteintransferase wurde im wesentlichen wie beschrieben (Y. Reiss et al., Methods: A Companion to Methods in Enzymology Band 1, 241–245, 1990) hergestellt. Mit Kirsten-Virus transformierte Humanosteosarkom(KHOS)-Zellen (American Type Culture Collection, Rockkville, MD, USA), die als feste Tumore in Nacktmäusen oder als Einzelzellrasenkulturen gezüchtet wurden, wurden als Ausgangsmaterial für das menschliche Enzym verwendet. Kurzgesagt wurden die Zellen oder Tumore im Puffer, der 50 mM Tris, 1 mM EDTA, 1 mM EGTA und 0,2 mM Phenylmethylsulfonylfluorid (pH 7,5) enthielt, homogenisiert. Die Homogenisate wurden 60 Minuten lang bei 28.000 × g zentrifugiert und die Überstände gewonnen. Es wurde eine 30–50% Ammoniumsulfatfraktion hergestellt, und der entstandene Niederschlag wurde in einer kleinen Menge (10 bis 20 ml) Dialysepuffer, der 20 mM Tris, 1 mM Dithiothreitol und 20 μM ZnCl₂ enthielt, resuspendiert. Die Ammoniumsulfatfraktion wurde über Nacht gegen den gleichen Puffer, der zweimal ausgetauscht wurde, dialysiert. Das Dialysat wurde auf eine 10 × 1 cm Q Fast Flow Sepharose (Phamacia LKB Biotechnology Inc., Piscataway, NJ, USA), die mit 100 ml Dialysepuffer mit einem Zusatz von 0,05 M NaCl voräquilibriert worden war, aufgetragen. Die Säule wurde noch mit 50 ml Dialysepuffer plus 0,05 M NaCl und anschließend mit einem Gradienten von 0,05 M bis 0,25 M NaCl im Dialysepuffer gewaschen. Die Enzymaktivität wurde mit einem linearen Gradienten von 0,25 bis 1,0 M NaCl im Dialysepuffer eluiert: Fraktionen mit 4 bis 5 ml Volumina Säuleneluat wurden aufgefangen und auf Farnesylproteintransferaseaktivität untersucht. Die Fraktionen mit Enzymaktivität wurden gepoolt und 100 μM ZnCl₂ wurden zugegeben. Die Enzymproben wurden bei –70°C tiefgefroren aufbewahrt. Die Farnesylproteintransferaseaktivität wurde mit dem Farnesyl Transferase [³H] Scintillation Proximity Assay (Amersham International plc., England) unter den vom Hersteller angegebenen Bedingungen gemessen. In dem Assay auf Enzymhemmstoffe wurden 0,20 μCi des [³H]-Farnesylpyrophosphat-Substrats und des biotinmarkierten Lamin-B-Peptidsubstrats (Biotin-YRASNRSCAIM) mit den Testverbindungen in einem aus 50 mM HEPES, 30 mM MgCl₂, 20 mM KCl, 5 mM Dithiothreitol, 0,01% Triton X-100 bestehenden Reaktionspuffer vermischt. Die Testverbindungen wurden in eine Menge von 10 μl Dimethylsulfoxid (DMSO) gegeben, um zu Konzentrationen von 1 und 10 μg/ml in einem Endvolumen von 100 μl zu gelangen. Es wurde auf 37°C erwärmt. Die Enzymreaktion wurde durch Zugabe von 20 μl verdünnter Human-Farnesylproteintransferase gestartet. Es wurde soviel Enzympräparat zugegeben, daß man während der 60minütigen Inkubation der Reaktionsmischung bei 37°C zu 4000 bis 15000 cpm Reaktionsprodukt gelangte. Die Reaktionen wurden durch Zugabe von STOP/Scintillation Proximity Bead Reagent (Amersham) gestoppt. Das Reaktionsprodukt [³H]-Farnesyl-(Cys)-Biotin-Lamin-B-Peptid wurde auf dem streptavidinkonjugierten Scintillation Proximity Bead eingefangen. Die Menge an [³H]-Farnesyl-(Cys)-Biotin-Lamin-B-Peptid, die in Gegenwart bzw. Abwesenheit der Testverbindungen synthetisiert wurde, wurde durch Zählen mit einem Wallac-Microbeta-Flüssigkeitsscintillationszähler Modell 1480 als cpm quantitativ ausgewertet. Die cpm des Produkts wurden als Farnesylproteintransferaseaktivität angesehen. Die in Gegenwart der Testverbindung beobachtete Proteinfarnesyltransferaseaktivität wurde in bezug auf Farnesyltransferaseaktiviät in Gegenwart von 10% DMSO normalisiert und als Prozent Hemmung ausgedrückt. In gesonderten Untersuchungen wurden manche der Testverbindungen, die eine Farnesylproteintransferaseaktivitätshemmung von 50% oder mehr aufwiesen, auf konzentrationsabhängige Enzymaktivitätshemmung ausgewertet. Die Wirkungen der Testverbindungen in diesen Untersuchungen wurden mittels des LGIC50-Computerprogramms von der Science Information Division des R. W. Johnson Pharmaceutical Research Institute (Spring House, PA, USA) auf einem VAX-Computer als IC₅₀ (Konzentration der Testverbindung, die zu einer 50%igen Hemmung der Enzymaktivität führt) berechnet.
Tabelle 7:
Beispiel 29 „Phänotyp-Reversionsassay von mit ras transformierten Zellen"
Die Insertion aktivierter Onkogene wie des mutierten ras-Gens in Maus-NIH 3T3-Zellen wandelt die Zellen in einen transformierten Phänotyp um. Die Zellen werden tumorigen, weisen nichtadhärentes Wachstum in halbfestem Medium auf und verlieren ihre Kontakthemmung. Der Verlust der Kontakthemmung führt zu Zellkulturen, die keine einheitlichen Einzelzellrasen mehr bilden. Statt dessen aggregieren die Zellen zu mehrzelligen Knötchen und wachsen in Kunststoff-Gewebekulturschalen zu sehr hoher Sättigungsdichte. Agenzien wie Proteinfarnesyltransferaseinhibitoren, die den mit ras transformierten Phänotyp revertieren, stellen bei Zellkulturen das einheitliche Einzelzellrasen-Wachstumsmuster wieder her. Diese Reversion wird leicht dadurch verfolgt, daß man die Anzahl Zellen in Gewebekulturplatten zählt. Bei transformierten Zellen gelangt man zu höheren Zellzahlen als bei Zellen, die zu einem nicht transformierten Phänotyp revertiert haben. Verbindungen, die den transformierten Phänotyp revertieren, müßten bei Tumoren, die ras-Genmutationen enthalten, Antitumorwirkungen zeigen.
Verfahren:
Die Verbindungen werden in Gewebekultur in mit dem T24-aktivierten Human-H-ras-Gen transformierten NIH 3T3-Zellen gescreent. Die Zellen werden mit einer Anfangsdichte von 200.000 Zellen pro Näpfchen (Oberfläche 9,6 m²) in Sechs-Well-Cluster-Gewebekulturplatten eingesetzt. Die Testverbindungen werden sofort zu 3,0 ml Zellwachstumsmedium in einem DMSO-Volumen von 3,0 μl gegeben, wobei die DMSO-Endkonzentration im Zellwachstumsmedium 0,1% betrug. Die Testverbindungen werden gemeinsam mit einer DMSO-behandelten Konstituenskontrolle in Konzentrationen von 5, 10, 50, 100 und 500 nM geprüft (wird bei 5 nM eine hohe Aktivität beobachtet, so wird die Testverbindung bei noch niedrigeren Konzentrationen geprüft). Die Zellen werden 72 Stunden lang proliferieren gelassen. Dann werden die Zellen in 1,0 ml Trypsin-EDTA-Zelldissoziationsmedium abgelöst und mit einem Coulter-Partikelzählgerät gezählt.
Messungen:
Die als Zellen pro Näpfchen ausgedrückten Zellzahlen werden mit einem Coulter-Partikelzählgerät bestimmt.
Alle Zellzahlen wurden durch Abziehen von 200.000 um die Dichte der zu Beginn eingesetzten Zellen korrigiert. Kontrollzellzahlen = [Zellzahlen der mit DMSO-Konstituens inkubierten Zellen – 200.000] Testverbindungszellzahlen = [Zellzahlen der mit der Testverbindung inkubierten Zellen – 200.000]
Liegen genügend Daten vor, so wird der in Tabelle 8 zusammengefaßte IC₅₀-Wert (d.h. diejenige Konzentration an Testverbindung, die für eine 50%ige Hemmung der Enzymaktivität erforderlich ist) berechnet.
Tabelle 8:
D. Beispiele für Zusammensetzungen
Die folgenden Formulierungen stellen Beispiele typischer pharmazeutischer Zusammensetzungen in Einzeldosisform dar, die sich gemäß der vorliegenden Erfindung zur systemischen oder topischen Verabreichung an Warmblüter eignen.
Der Ausdruck „Aktivsubstanz" (AS), der in all diesen Beispielen verwendet wird, bedeutet eine Verbindung der Formel (I), eines ihrer pharmazeutisch unbedenklichen Säure- oder Basenadditionssalze oder eine ihrer stereochemisch isomeren Formen.
Beispiel 30: Orallösungen
9 g 4-Hydroxybenzoesäuremethylester und 1 g 4-Hydroxybenzoesäurepropylester werden in 4 l kochendem gereinigtem Wasser gelöst. In 3 l dieser Lösung werden zuerst 10 g 2,3-Dihydroxybutandisäure und anschließend 20 g der AS gelöst. Diese Lösung wird mit dem Rest der ersten Lösung vereinigt, und man versetzt mit 12 l 1,2,3-Propantriol und 3 leiner 70%igen Sorbitlösung. 40 g Saccharin-Natrium werden in 0,5 l Wasser gelöst, und man versetzt mit 2 ml Himbeeressenz und 2 ml Stachelbeeressenz. Diese Lösung wird mit der obigen Lösung vereinigt, man versetzt mit Wasser q.s. auf ein Volumen von 20 l und erhält so eine Orallösung mit 5 mg AS pro Teelöffel (5 ml). Die erhaltene Lösung wird in geeignete Behältnisse abgefüllt.
Beispiel 31: Kapseln
20 g AS, 6 g Natriumlaurylsulfat, 56 g Stärke, 56 g Lactose, 0,8 g kolloidale Silika und 1,2 g Magnesiumstearat werden kräftig miteinander verrührt. Die erhaltene Mischung wird anschließend in 1000 geeignete Gelatine-Steckkapseln gefüllt, die jeweils 20 mg AS enthalten.
Beispiel 32: Filmtabletten
Herstellung des Tablettenkerns
Eine Mischung aus 100 g AS, 570 g Lactose und 200 g Stärke wird gut vermischt und anschließend mit einer Lösung von 5 g Natriumdodecylsulfat und 10 g Polyvinylpyrrolidon in ungefähr 200 ml Wasser befeuchtet. Die nasse Pulvermischung wird gesiebt, getrocknet und nochmals gesiebt. Dann versetzt man mit 100 g mikrokristalliner Cellulose und 15 g hydriertem Pflanzenöl. Das Ganze wird gut vermischt und zu Tabletten verpreßt, wodurch man 10.000 Tabletten zu je 10 mg Wirkstoff erhält.
Überziehen
Eine Lösung von 10 g Methylcellulose in 75 ml denaturiertem Ethanol wird mit einer Lösung von 5 g Ethylcellulose in 150 ml Dichlormethan versetzt. Dann versetzt man mit 75 ml Dichlormethan und 2,5 ml 1,2,3-Propantriol. Man schmilzt 10 g Polyethylenglykol und löst in 75 ml Dichlormethan. Diese Lösung wird zu der obengenannten Lösung zugegeben, wonach man mit 2,5 g Magnesiumoctadecanoat, 5 g Polyvinylpyrrolidon und 30 ml konzentrierter Farbsuspension versetzt und das Ganze homogenisiert. Die Tablettenkerne werden in einem Dragierapparat mit der so erhaltenen Mischung überzogen.
Beispiel 33: Injektionslösung
1,8 g 4-Hydroxybenzoesäuremethylester und 0,2 g 4-Hydroxybenzoesäurepropylester werden in ungefähr 0,5 l kochendem Wasser für Injektionszwecke gelöst. Nach dem Abkühlen auf ungefähr 50°C versetzt man unter Rühren mit 4 g Milchsäure, 0,05 g Propylenglykol und 4 g AS. Die Lösung wurde auf Raumtemperatur abgekühlt und mit Wasser für Injektionszwecke q.s. auf ein Volumen von 1 l aufgefüllt, wodurch man eine Lösung von 4 mg/ml AS erhält. Die Lösung wurde sterilfiltriert und in sterile Behältnisse abgefüllt.
Beispiel 34: Zäpfchen
3 Gramm AS wurden in einer Lösung von 3 Gramm 2,3-Dihydroxybutandisäure in 25 ml Polyethylenglykol 400 gelöst. 12 Gramm Tensid und 300 Gramm Triglyceride wurden zusammengeschmolzen. Diese Mischung wurde gut mit der obengenannten Mischung vermischt. Die so erhaltene Mischung wurde bei einer Temperatur von 37–38°C in Formen gegossen, wodurch man 100 Zäpfchen zu je 30 mg/ml AS erhielt.

Claims

Verbindung der Formel (I)
oder eine ihrer stereoisomeren Formen oder eines ihrer pharmazeutisch unbedenklichen Säure- oder Basenadditionssalze, wobei die Symbole folgendes bedeuten: die gestrichelte Linie bedeutet gegebenenfalls eine Bindung, X bedeutet Sauerstoff oder Schwefel, R¹ bedeutet Wasserstoff, C_1-12Alkyl, Ar¹, Ar²C_1-6Alkyl, ChinolinylC_1-6alkyl, PyridylC_1-6alkyl, HydroxyC_1-6alkyl, C_1-6AlkyloxyC_1-6alkyl, Mono- oder Di(C_1-6alkyl)aminoC_1-6Alkyl, AminoC_1-6alkyl, oder einen Rest der Formel -Alk¹-C(=O)-R⁹, -Alk¹-S(O)-R⁹ oder -Alk¹-S(O)₂-R⁹, wobei Alk¹ C_1-6Alkandiyl bedeutet, R⁹ bedeutet Hydroxy, C_1-6Alkyl, C_1-6Alkyloxy, Amino, C_1-8Alkylamino oder durch C_1-6Alkyloxycarbonyl substituiertes C_1-8Alkylamino, R² und R³ bedeuten jeweils unabhängig voneinander Wasserstoff, Hydroxy, Halogen, Cyan, C_1-6Alkyl, C_1-6Alkyloxy, HydroxyC_1-6alkyloxy, C_1-6Alkyloxy-C_1-6alkyloxy, AminoC_1-6alkyloxy, Mono- oder Di(C_1-6alkyl)aminoC_1-6alkyloxy, Ar¹, Ar²C_1-6Alkyl, Ar²oxy, Ar²C_1-6alkyloxy, Hydroxycarbonyl, C_1-6Alkyloxycarbonyl, Trihalogenmethyl, Trihalogenmethoxy, C_2-6Alkenyl, oder R² und R³ in benachbarter Stellung können gemeinsam einen zweiwertigen Rest der Formel -O-CH₂-O (a-1) -O-CH₂-CH₂-O (a-2) -O-CH=CH (a-3) -O-CH₂-CH₂ (a-4) -O-CH₂-CH₂-CH₂ (a-5) oder -CH=CH-CH=CH (a-6)

bilden, R⁴ und R⁵ bedeuten jeweils unabhängig voneinander Wasserstoff, Ar¹, C_1-6Alkyl, C_1-6AlkyloxyC_1-6alkyl, C_1-6Alkyloxy, C_1-6Alkylthio, Amino, Hydroxycarbonyl, C_1-6Alkyloxycarbonyl, C_1-6AlkylS(O)C_1-6alkyl oder C_1-6AlkylS(O)₂C_1-6alkyl, R⁶ und R⁷ bedeuten jeweils unabhängig voneinander Wasserstoff, Halogen, Cyan, C_1-6Alkyl, C_1-6Alkyloxy oder, Ar²oxy, R⁸ bedeutet Wasserstoff, C_1-6Alkyl, Cyan, Hydroxycarbonyl, C_1-6AlkyloxycarbonylC_1-6alkylcarbonylC_1-6alkyl, CyanC_1-6alkyl, C_1-6AlkyloxycarbonylC_1-6alkyl, HydroxycarbonylC_1-6alkyl, HydroxyC_1-6alkyl, AminoC_1-6alkyl, Mono- oder Di(C_1-6alkyl)aminoC_1-6alkyl, HalogenC_1-6alkyl, C_1-6AlkyloxyC_1-6alkyl, AminocarbonylC_1-6alkyl, Ar¹, Ar²C_1-6AlkyloxyC_1-6alkyl, C_1-6AlkylthioC_1-6alkyl, R¹⁰ bedeutet Wasserstoff, C_1-6Alkyl, C_1-6Alkyloxy oder Halogen, R¹¹ bedeutet Wasserstoff oder C_1-6Alkyl, Ar¹ bedeutet Phenyl oder durch C_1-6Alkyl, Hydroxy, Amino, C_1-6Alkyloxy oder Halogen substituiertes Phenyl, und Ar² bedeutet Phenyl oder durch C_1-6Alkyl, Hydroxy, Amino, C_1-6Alkyloxy oder Halogen substituiertes Phenyl.
Verbindung nach Anspruch 1, wobei X Sauerstoff bedeutet.
Verbindung nach Anspruch 1, wobei R¹ Wasserstoff, C_1-6Alkyl oder C_1-6AlkyloxyC_1-6alkyl bedeutet.
Verbindung nach Anspruch 1, wobei R⁶ Wasserstoff und R⁷ Halogen bedeutet.
Verbindung nach Anspruch 1, wobei R⁸ Wasserstoff, C_1-6Alkyl oder Hydroxy-C_1-6alkyl bedeutet.
Verbindung nach Anspruch 1, wobei es sich bei der Verbindung um 4-(3-Chlorphenyl)-6-[(4-chlorphenyl)-1H-imidazol-1-ylmethyl]-1-methyl-2(1H)-chinolinon, 4-(3-Chlorphenyl)-6-[(4-chlorphenyl)-1H-imidazol-1-ylmethyl]-2(1H)-chinolinon, 6-[1-(4-Chlorphenyl)-2-hydroxy-1-(1H-imidazol-1-yl)ethyl]-1-methyl-4-phenyl-2(1H)-chinolinon, 4-(3-Chlorphenyl)-6-[1-(4-chlorphenyl)-1-(1H-imidazol-1-yl)ethyl]-1-methyl-2(1H)-chinolinon, 4-(3-Chlorphenyl)-6-[1-(4-chlorphenyl)-1-(5-methyl-1H-imidazol-1-yl)ethyl]-1-methyl-2(1H)-chinolinon, 4-(3-Chlorphenyl)-6-[1-(4-chlorphenyl)-2-hydroxy-1-(1H-imidazol-1-yl)ethyl]-1-methyl-2(1H)-chinolinon, 4-(3-Chlorphenyl)-6-[(4-chlorphenyl)(1H-imidazol-1-yl)methyl]-1-(2-methoxyethyl)-2(1H)-chinolinonethandioat(2:3)monohydrat, 6-[(4-Chlorphenyl)(1H-imidazol-1-yl)methyl]-4-(1,3-benzodioxol-5-yl)-1-methyl-2(1H)-chinolinonethandioat(1:1), eine ihrer stereoisomeren Formen oder eines ihrer pharmazeutisch unbedenklichen Säure- oder Basenadditionssalze handelt.
Pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend pharmazeutisch unbedenkliche Träger sowie als Wirkstoff eine therapeutisch wirksame Menge einer Verbindung nach Anspruch 1 bis 6.
Verfahren zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung nach Anspruch 7, bei dem man die pharmazeutisch unbedenklichen Träger und eine Verbindung nach Anspruch 1 bis 6 innig vermischt.
Verbindung der Formel (XVI), bei der die Reste R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R¹⁰ und R¹¹ wie in Anspruch 1 definiert sind, oder eines ihrer pharmazeutisch unbedenklichen Säureadditionssalze.
Verbindung der Formel (XV) , bei der die Reste R², R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R¹⁰ und R¹¹ wie in Anspruch 1 definiert sind, oder eines ihrer pharmazeutisch unbedenklichen Säureadditionssalze.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 6 als Arzneimittel.
Verfahren zur Herstellung einer Verbindung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man a) ein Imidazol der Formel (II) oder eines seiner Alkalisalze mit einem Derivat der Formel (III) N-alkyliert,
b) ein Zwischenprodukt der Formel (IV) mit einem Reaktionspartner der Formel (V), wobei Y entweder Kohlenstoff oder Schwefel bedeutet, wie zum Beispiel ein 1,1'-Carbonylbis[1H-imidazol], umsetzt,
c) durch Zyklisierung eines Zwischenprodukts der Formel (VI), wodurch man zu Verbindungen der Formel (I-a), die als Verbindung der Formel (I) definiert sind, bei denen die gebrochene Linie eine Bindung darstellt, gelangt,
(d) ein Zwischenprodukt der Formel (XXVI), wobei R C_1-6Alkyl bedeutet, in einer wäßrigen Säurelösung hydrolisiert, wodurch man zu einer Verbindung der Formel (I-a-1), die als Verbindung der Formel (I-a), bei der R¹ Wasserstoff bedeutet, definiert ist, gelangt,
e) ein Epoxid der Formel (VII) mit einem Imidazol der Formel (II) öffnet, wodurch man zu einer Verbindung der Formel (I-b), die als Verbindung der Formel (I), bei der R⁸ Hydroxymethylen darstellt, definiert ist, gelangt,
f) Nitron-Zwischenprodukte der Formel (XV), die durch N-Oxidation von Chinolinderivaten der Formel (XVI) hergestellt wurden, entweder durch Esterbildung und anschließende Hydrolyse oder durch intramolekuläre photochemische Umlagerung umwandelt, Verbindungen der Formel (I-f-1) erhält,
oder gewünschtenfalls eine Verbindung der Formel (I) in ein pharmazeutisch unbedenkliches Säureadditionssalz umwandelt oder umgekehrt ein Säureadditionssalz mit Alkali in eine freie Basenform umwandelt bzw. stereochemisch isomere Formen davon herstellt.
3-(3-Chlorphenyl)-5-[2-(4-chlorphenyl)-1,3-dioxolan-2-yl]-2,1-benzisoxazol.
1-Amino-2,4-phenylen-(3-chlorphenyl)(4-chlorphenyl)dimethanon.