DE69231215T2

DE69231215T2 - Reduktionsprodukte von Rapamycin als immunosuppressive, entzündungshemmende und antifungale Mittel

Info

Publication number: DE69231215T2
Application number: DE69231215T
Authority: DE
Inventors: Craig Eugene Caufield; Philip Floyd Hughes; John Henry Musser
Original assignee: American Home Products Corp
Current assignee: Wyeth LLC
Priority date: 1991-05-07
Filing date: 1992-04-30
Publication date: 2000-11-09
Anticipated expiration: 2012-05-01
Also published as: HU9201468D0; FI921893A0; EP0512754B1; AU647616B2; AU1600892A; ATE194352T1; FI97472B; DK0512754T3; MX9202031A; PT512754E; HUT62589A; PH30228A; FI97472C; KR100230877B1; EP0512754A1; HU217868B; NZ242616A; JPH05117279A; FI921893L; JP3108192B2

Description

Diese Erfindung betrifft von Rapamycin abgeleitete Reduktionsprodukte, wo die Keton-Funktionalität an Positionen 15, 33, 15 und 27, 15 und 33 oder 15, 27 und 33 durch eine Hydroxy- Gruppe ersetzt wird, welche bei der Behandlung von Transplantationsabstoßung, Autoimmunerkrankungen (z. B. Lupus, rheumatoide Arthritis, Diabetes Mellitus, Multiple Sklerose), Candida albicans-Infektionen und Entzündungserkrankungen brauchbar sind; ihre Herstellung und pharmazeutische Zusammensetzungen, die sie enthalten.
Rapamycin ist ein makrocyclisches Trien-Antibiotikum, hergestellt durch Streptomyces hygrosco icus, von dem gefunden wurde, daß es Antipilzwirksamkeit, insbesondere gegen Candida albicans, sowohl in vitro als auch in vivo aufweist [C. Vezina et al., J. Antibiot. 28, 721 (1975); S. N. Seghal et al., J. Antibiot. 28, 727 (1975); H. A. Baker et al., J. Antibiot. 31, 539 (1978); U. S. -Patent 3929992; und U. S. -Patent 3993749].
Es ist gezeigt worden, daß Rapamycin allein (U. S. -Patent 4885171) oder in Kombination mit Picibanil (U. S. -Patent 4401653) Antitumorwirksamkeit hat. R. Martel et. al. [Can. J. Physiol. Pharmacol. 55, 48 (1977)] offenbarten, daß Rapamycin in dem experimentellen allergischen Encephalomyelitismodell, einem Modell für Multiple Sklerose; im Adjuvans-Arthritismodell, einem Modell für rheumatoide Arthritis wirksam ist; und wirksam die Bildung von IgE-ähnlichen Antikörpern hemmte.
Die immunsuppressiven Wirkungen von Rapamycin sind in FASEB 3, 3411 (1989) offenbart worden. Es ist gezeigt worden, daß Rapamycin bei der Hemmung von Transplantabstoßung wirksam ist ,(U. S. -Patentanmeldung Ser. Nr. 362544, eingereicht 6. Juni 1989). Es ist gezeigt worden, daß Cyclosporin A und FK-506, andere makrocyclische Moleküle, auch als Immunsuppressivmittel wirksam und daher bei Verhinderung von Transplantabstoßung brauchbar sind [FASEB 3, 3411 (1989); FASEB 3, 5256 (1989); und R. Y. Calne et. al.; Lancet 1183 (1978)].
Es ist gezeigt worden, daß mono- und diacylierte Derivate von Rapamycin (verestert an den 28 und 43 Positionen) als Antipilzmittel brauchbar sind (U. S. -Patent 4316885) und zur Herstellung von wasserlöslichen Proarzneien von Rapamycin verwendet wurden (U. S. -Patent 4650803). Kürzlich ist die Nummerierungskonvention für Rapamycin geändert worden; daher wären die oben be schriebenen Ester gemäß der Chemical Abstracts-Nomenklatur an den 31- und 42-Positionen.
Diese Erfindung sieht Derivate von Rapamycin vor, welche als Immunsuppressiv-, Antientzündungs-, Antipilz- und Antitumormittel brauchbar sind. Die Verbindungen der Erfindung sind somit brauchbar bei der Behandlung von Transplantabstoßung, Autoimmunerkrankungen, Candida albicans-Infektionen und Entzündungserkrankungen.
Die Verbindungen dieser Erfindung werden durch die Formel I unten dargestellt, worin die Gruppen X, Y und Z an Positionen 15, 27 und 33 jeweils für -CO- oder -CHOH&supmin; stehen und mindestens eins von X oder Z für -CHOH stehen muß, und falls Y für CHOH steht dann steht X für CHOH:

Formel I

Formel I umfaßt ebenfalls die pharmazeutisch annehmbaren Salze, welche aus anorganischen Kationen wie Natrium, Kalium und ähnlichem gebildet werden können.
Diese Erfindung sieht ebenfalls Verfahren zum Herstellen der Verbindungen der Formel I vor. Entsprechend sieht diese Erfindung ein Verfahren zum Herstellen einer Verbindung der Formel I vor, welches umfaßt: Reduzieren von Rapamycin mit einer oder aufeinanderfolgend in jeder Reihenfolge mit zwei Reduktionsmitteln vor, wobei besagte Reduktionsmittel ausgewählt werden aus Diisobutylaluminiumhydrid (oder ähnlichen Standard-Ketonreagentien wie Bor- oder Aluminiumreagens der Formel R&sub2;MH, wo R einen Ligand darstellt und M für Al oder B steht) und ein β-Hydroxyketon-Reduktionsmittel wie Natriumtriacetoxyborhydrid oder anderes ähnliches Bor- oder Alumin-"at"-Reagens der Formel R&sub3;MHM'&spplus;, wo M'&spplus; ein Alkalimetall darstellt.
Im Detail werden die Verbindungen der Formel I durch Reduktion von Rapamycin mit einem geeigneten Reduktionsmittel hergestellt. Diisobutylaluminiumhydrid (DIBAL) oder ähnliches Reagens wird die Keton-Funktionalitäten von Rapamycin an Positionen 15 oder 15 und 27, in Abhängigkeit von den Reaktionsbedingungen, reduzieren. Die Keton-Funktionalität an Position 33 von Rapamycin wird selektiv mit Natriumtriadetoxyborhydrid reduziert, einem Reagens, von dem berichtet wird, daß es selektiv β- Hydroxyketone überwiegend auf eine Anti-Weise reduziert (Evans, D. A.; Chapman, K. T.; Carreira, E. M.; J Amer. Chem. Soc. 1988, 110, 3560-3568) oder durch Verwenden anderer Reagentien, die bekannt dafür sind, β-Hydroxyketone zu reduzieren. Falls die Hydroxy-Gruppen an Positionen 31 und 42 durch ein Hydroxy-Schutzmittel geschützt sind, z.B. als t-Butyldimethylsilylether, findet Reduktion unter Verwendung eines "at"-Reagens der Formel R&sub3;MH-M'&spplus;, z. B. Kaliumtriphenylborhydrid, an Position 15 statt. (Silylether von Rapamycin werden in EPA 92302843.5, eingereicht 31. März 1992 offenbart). Falls die Hydroxy-Gruppen nicht geschützt sind, kann Reduktion an Position 15 der Reduktion an Position 33 folgen. Somit erbringt Reduktion von Rapamycin mit Natriumtriacetoxyborhydrid in Tetrahydrofuran (THF) das 33- Hydroxyanalogon oder 33-Desoxo-33-hydroxyrapamycin, das als Verbindung II in Schema A gezeigt wird. Das überwiegende R-Isomer wurde durch chromatographische Trennung des Reaktionsprodukts erhalten. Weitere Reduktion ergibt das 15,33-Dihydroxy-Analogon.
Schema A: Reduktion von Rapamycin an Position 33.
Rapamycin 33-Desoxo-33-(R)-hydroxyrapamycin
Rapamycin kann zwischen den C-31 und C-32 Kohlenstoffen auf Grund von Base-Abbau, der einer umgekehrten Aldolreaktion zugeschrieben wird, gespalten werden. Reduktion der C-33 Keton- Funktionalität entfernt diesen Weg der Zersetzung.
Reduktion von Rapamycin mit DIBAL bei -78ºC in THF ergibt, daß die C-15 Ketongruppe wie in dem folgenden Reaktionsschema gezeigt reduziert wird.
Schema B: Reduktion von Rapamycin an Position 15.
Wenn das Reaktionsgemisch nach Zugabe von DIBAL bei -78ºC bei -20ºC fortschreiten darf, findet Reduktion der Keto-Gruppen an Positionen 15 und 27 statt, wobei das 15,27-Diol, wie in Schema C gezeigt, erhalten wird.
Schema C: Reduktion von Rapamycin an Positionen 15 und 27.
Die in Schema C erhaltenen Diastereomere werden durch chromatographische Verfahren getrennt, d. h. präparativer Hochdruck- Flüssigkeitschromatographie.
Reduktion der zwei Carbonylgruppen X und Z und drei Carbonylgruppen X, Y und Z von Rapamycin kann durch aufeinanderfolgende Reduktionsschritte erreicht werden. Noch andere Reduktionsmittel, die dem Fachmann bekannt sind, können verwendet werden, um selektive Reduktion an diesen Positionen zu bewirken, siehe zum Beispiel die oben zitierte Veröffentlichung durch Evans et. al.
Die folgenden Beispiele veranschaulichen die Herstellung der Verbindungen dieser Erfindung.

Beispiel 1

15-Desoxo-15-hydroxyrapamycin

Zu einer Lösung aus 750 mg (821 umol) Rapamycin in 15 ml trockenem THF wurden tropfenweise bei -78ºC, 3,6 ml (3,6 mmol) einer 1,0 M Lösung aus DIBAL in Hexanen zugegeben. Nach 1 Std. wurde die Reaktion durch Zugeben von 1,0 N HCl, um die Aluminiumsalze zu lösen, aufgearbeitet. Die wässerige Lösung wurde dreimal mit Ethylacetat extrahiert, die kombinierten organischen Lösungen mit Kochsalzlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und in vacuo konzentriert, um einen farblosen transparenten Feststoff zu ergeben. Der Rückstand wurde aus Diisopropylether/hexan umkristallisiert, um nach Filtration 275 mg (37%) von 15-Desoxo-15-hydroxyrapamycin zu ergeben, Fp 118-122ºC.
Die Spektraldaten folgen: 1H NMR (CDCl3), 400 MHz) δ 4,42 (d, 1H, -OH), 4,17 (bs, 1H, anomeres OH), 3,40 (s, 3H, OCH&sub3;), 3,39 (s, 3H, OCH&sub3;), 3,14 (s, 3H, OCH&sub3;), 1, 75 (s, 3H, CH&sub3;C = C), 1,60 (s, 3H, CH&sub3;C = C); 13C NMR (CDCl&sub3;, 100 MHz) δ 216,0, 209,0, 174,5, 169,9; IR (KBr) 3440, 2940, 2860, 1740, 1720, 1630, 1450, 1380, 1195, 1090 cm&supmin;¹; MS (neg. Ion FAB) 914 (M-H), 592, 339, 184, 168 (100).
Analyse berechnet für C&sub5;&sub1;H&sub8;&sub1;NO&sub1;&sub3;: C, 66,86; H, 8,91; N, 1,53 gefunden: C, 66,46; H, 9,03; N, 1,36.

Beispiel 2

15,27-Di (desoxo) -15,27-di (hydroxy) rapamycin

Zu einer Lösung aus 1,43 g (1,56 mmol) Rapamycin in 20 ml trockenem THF bei -78ºC wurden tropfenweise 6,87 ml (6,87 mmol) einer 1,0 M Lösung aus DIBAL in Toluol zugegeben. Die Reaktion wurde langsam auf -20ºC über einen 4 Std. Zeitraum erwärmt und dann durch Rühren über 1,0 N HCl für 20 Min. abgeschreckt. Das Reaktionsgemisch wurde dreimal mit Ethylacetat extrahiert, die organischen Schichten kombiniert, mit Kochsalzlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und in vacuo konzentriert, um einen schaumigen Feststoff zu ergeben. Der Rückstand wurde durch HPLC-Chromatographie gereinigt (2 in Dynamax Silica- Säule, 100% Ethylacetat, 35 ml/Min.), und ergab 90 mg (6%) von 15,27-Bis(desoxy)-15,27-bis(hydroxy)rapamycin. Die Spektraldaten folgen: 1H NMR (CDCl&sub3;, 400 MHz) δ 4,35 (m, 1H, -OH), 4,17 (bs, 1H, anomeres OH), 3,39 (s, 3H, OCH&sub3;)3,33 (s, 3H, OCH&sub3;), 3,12 (s, 3H, OCH&sub3;), 1,71 (s, 3H, CH&sub3;C = C), 1,58 (s, 3H, CH&sub3;C = C); IR (KBr) 3435; 2930, 2870, 1740, 1720, 1640, 1450, 1380, 1195, 1090 cm&supmin;¹; MS (neg. Ion FAB) 917 (M-).
Analyse berechnet für
C&sub5;&sub1;H&sub8;&sub3;NO&sub1;&sub3; · 2H&sub2;O: C, 64,11, 9,19; N, 1,47 gefunden: C, 64,07; H, 8,28; N, 1,62.

Beispiel 3

15,27-Di(desoxo)-15,27-di(hydroxy)rapamycin

Im obigen Verfahren wurde eine zweite Fraktion, 60 mg (4%) von 15,27-Bis(desoxo)-15,27-bis(hydroxy)rapamycin ebenfalls gesammelt.
Die Spektraldaten folgen: 1H NMR (CDCl&sub3;, 400 MHz) δ 4,39 (m, 1H, -OH), 4,21 (m, 1H, anomeres OH), 3,41 (s, 3H, OCH&sub3;), 3,40 (s, 3H, OCH&sub3;), 3,15 (s, 3H, OCH&sub3;), 1,73 (s, 3H, CH&sub3;C = C), 1,60 (s, 3H, CH&sub3;C = C); IR (KBr) 3440, 2930, 2880, 1740, 1720, 1640, 1450, 1380, 1190, 1090 cm&supmin;¹; MS (neg. Ion FAB) 917 (M-), 359, 168 (100).
Analyse berechnet für
C&sub5;&sub1;H&sub8;&sub3;NO&sub1;&sub3; · 1,5H&sub2;O: C, 64,80; H, 9,17; N, 1,48 gefunden: C, 64,69; H, 8,86; N, 1,59.

Beispiel 4

33-Desoxy-33-hydroxyrapamycin

Eine Lösung aus Rapamycin (1,05 g, 1,15 mmol) in Tetrahydrofuran (40 ml) wurde mit pulverisiertem Natriumtriacetoxyborhydrid (0,52 g, 2,46 mmol) behandelt und unter Stickstoff bei Raumtemperatur für 2 Std. gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde dann bei -20ºC für sieben Tage gelagert. TLC zeigte die Reaktion zu etwa 70% vollendet an, also wurde das Reaktionsgemisch zwischen Diethylether (50 ml) und 1 N HCl (50 ml) verteilt. Die organische Schicht wurde mit Kochsalzlösung (50 ml) gewaschen, getrocknet (MgSO&sub4;), konzentriert und auf Silica-Gel (3,9 · 15 cm, Ethylacetat) chromatographiert. Die Produktfraktionen, welche nicht umgesetztes Rapamycin enthielten, wurden kombiniert und durch Prep-HPLC (8 um Silica-Gel, 4,1 mm · 30 cm; 1/1:
THF/Hexan) chromatographiert. Die sauberen Fraktionen wurden kombiniert und in wässerigem Methanol gelöst. Das Gemisch wurde konzentriert, um Kristallisation zu bewirken, und das Pulver wurde abfiltriert, um 200 mg des R-Isomers zu ergeben. Spektraldaten folgen. IR (KBr) 1680, 1730, 2920, 3430 cm&supmin;¹, 1H-NMR (CDCl&sub3;) δ 1,28 (3H, t, J = 7,14 H&sub2;), 1,65 (3H, s), 1,74 (3H, s), 3,14 (3H, s), 3,34 (3H, s), 3,41 (3H, s), 4,20 (2H, q, J = 7,14 H&sub2;), 4,30 (2H, dd); Massenspektrum (neg. Ion FAB) m/z 999 (94%), 59.0 (15%), 407 (16%), 379 (4%), 253 (6%), 167 (100%).
Analyse berechnet für
C&sub5;&sub5;H&sub8;&sub5;NO&sub1;&sub5; · 0,5H&sub2;O: C, 65,45, H, 8,59, N, 1,39 gefunden: C, 65,29, H, 8,64, N, 1,60.

Beispiel 5

15 27.33-Tri(desoxo)-15.27,33-tri(hydroxy)rapamvcin

Den Reduktionsverfahren von Beispiel 4 folgend wird die Titelverbindung aus 15,27-Di(desoxo-15,27-di(hydroxy)rapamycin, wie in Beispielen 2 und 3 hergestellt, erhalten.

Beispiel 6

15. 33-Di (desoxo) -15. 33-di (hydroxy) rapamycin

Den Reduktionsverfahren von Beispiel 4 folgend wird die Titelverbindung aus 15-Desoxo-15-hydroxyrapamycin, wie in Beispiel 1 hergestellt, erhalten.
Die immunsuppressive Wirksamkeit wurde in einem in vitro pharmakologischen Standardtestverfahren, um Lymphozyten-Proliferation (LAF) zu messen und in zwei in vivo pharmakologischen Standardtestverfahren bewertet. Das erste in vivo Verfahren war ein Kniekehlen-Lymphknoten (PLN) Testverfahren, welches die Wirkung von Verbindungen dieser Erfindung auf eine gemischte Lymphozytreaktion maß und das zweite in vivo Verfahren bewertete die Überlebenszeit eines Pinch-Hauttransplantats.
Das comitogen-induzierte Thymozyten-Proliferationsverfahren (LAF) wurde als ein in vitro. Maß der immunsuppressiven Wirkungen repräsentativer Verbindungen verwendet. Kurz gesagt werden Zellen vom Thymus normaler BALB/c-Mäuse für 72 Stunden mit PHA und IL-1 kultiviert und mit tritiummarkiertem Thymidin während der letzten sechs Stunden gepulst. Zellen werden mit und ohne verschiedenen Konzentrationen von Rapamycin, Cyclosporin A oder Testverbindung kultiviert. Zellen werden geerntet und inkorporiert; Radioaktivität wird bestimmt. Hemmung von Lymphoproliferation wird in Prozent Veränderung in Zählungen pro Minute gegenüber nicht mit Arznei behandelten Kontrollen veranschlagt. Die Ergebnisse werden durch den folgenden Quotienten oder als Prozent Hemmung von Lymphoproliferation von 1 uM ausgedrückt.
³H-Kontrollthymuszellen - H&sub3;-Rapamycin-behandelte Thymuszellen
³H-Kontrollthymuszellen - H³-Testverbindung-behandelte Zellen
Eine gemischte Lymphozytenreaktion (MLR) findet statt, wenn lymphoide Zellen von genetisch verschiedenen Tieren in Gewebekultur kombiniert werden. Jede stimuliert die andere zu einer Blast-Transformation, welche in erhöhter DNA-Synthese resultiert, die durch die Inkorporation von tritiummarkiertem Thymidin quantifiziert werden kann. Da Stimulieren einer MLR eine Funktion von Disparität an Haupt-Histokompatibilitäts-Antigenen ist, korreliert ein in vivo Kniekehlen-Lymphknoten (PLN) Testverfahren gut zu einer Wirt-gegen-Transplantat-Erkrankung. Kurz gesagt werden bestrahlte Milzzellen von BALB/c-Spendern in den rechten Hinterfußballen von empfangenden C3H-Mäusen injiziert. Die Arznei wird täglich verabreicht, p.o. von Tag 0 bis Tag 4. An Tag 3 und Tag 4 wird tritiummarkiertes Thymidin i.p., b.i.d. gegeben. An Tag 5 werden die Hinterkniekehlen-Lymphknoten entfernt und gelöst und Radioaktivität wird gezählt. Der entsprechende linke PLN dient als Kontrolle für den PLN aus dem injizierten Hinterfuß. Prozent-Suppression wird unter Verwendung der nicht mit Arznei behandelten Tiere als allogenische Kontrolle berechnet. Rapamycin bei einer Dosis von 6 mg/kg, p.o., ergab 86% Suppression, wohingegen Cyclosporin A bei der gleichen Dosis 43% Suppression ergab. Ergebnisse werden durch den folgenden Quotienten ausgedrückt:
³H-PLN-Zellen Korxtroll-C3H-Maus - YI-PLN-Zellen Rapairvom-behandelte C3H-Maus
³H-PLN-Zellen Kentroll-C3H-Maus - 3H-PIN-Zellen Testverbirdung-behantlte C3H-Maus
Das zweite in vivo Testverfahren ist vorgesehen, um die Überlebenszeit von Pinch-Hauttransplantat von männlichen DBA/2- Spendern, transplantiert auf männliche BALB/c-Empfänger zu bestimmen. Das Verfahren ist von Billingham R. E. und Medawar P. B., J. Exp. Bioh. 28 : 385-402, (1951) adaptiert. Kurz: ein Pinch- Hauttransplantat von dem Spender wird auf das Dorsum des Empfängers als Homotransplantat transplantiert und ein Autotransplantat wird als Kontrolle in der gleichen Region verwendet. Die Empfänger werden mit entweder variierenden Konzentrationen von Cyclosporin A als Testkontrolle oder der Testverbindung intraperitoneal behandelt. Unbehandelte Empfänger dienen als Absto ßungskontrolle. Das Transplantat wird täglich überwacht und Beobachtungen werden aufgezeichnet, bis das Transplantat trocken wird und einen geschwärzten Schorf bildet. Dies wird als Abstoßungstag angesehen. Die mittlere Transplantat-Überlebenszeit (Anzahl an Tagen ± S. D.) der mit Arznei behandelten Gruppe wird mit der Kontrollgruppe verglichen.
Die folgenden Tabelle faßt die Ergebnisse der Verbindungen dieser Erfindung in diesen drei Standardtestverfahren zusammen. Tabelle 1
¹IC&sub5;&sub0; (nM)
² Wirksamkeit relativ zu Rapamycin
³ Mittlere Überlebenstage
Die Ergebnisse dieser pharmakologischen Standardtestverfahren zeigen Immunsuppressive Wirksamkeit sowohl in vitro, als auch in vivo für die Verbindungen dieser Erfindung. Positive Verhältniswerte in den LAF- und PLN-Testverfahren bezeichnen Suppression von T-Zellen-Proliferation. Da transplantierte Pinch-Hauttransplantate typischerweise mit 6-7 Tagen ohne Verwenden eines immunsuppressiven Mittels abgestoßen werden, zeigt die erhöhte Überlebenszeit des Hauttransplantats, wenn mit den Verbindungen dieser Erfindung behandelt, ferner ihre Brauchbarkeit als immunsuppressive Mittel.
Antipilzwirksamkeit der Verbindungen dieser Erfindung wurden gegen 5 Stämme von Candida albicans unter Verwendung eines Plattentestverfahrens zum Messen der Hemmung gemessen. Das Folgende schildert des typische verwendete Verfahren. Die zu testende Verbindung wurde auf sterile getrocknete 1/4" Plattenscheiben plaziert und durfte trocknen. Agar-Platten wurden mit Pilzen besät und durften sich verfestigen. Die imprägnierten Scheiben wurden auf die besäte Agar-Oberfläche plaziert und für die für die spezielle Kultur benötigte Zeit inkubiert. Ergebnisse werden in MIC (ug/ml), um Wachstum zu hemmen, ausgedrückt. Die Ergebnisse dieses Testverfahrens zeigten, daß die Verbindun gen dieser Erfindung Antipilzwirksamkeit haben.
Die Verbindungen von Beispielen 1 und 4 hatten die folgende minimalen hemmenden Konzentrationen (50%) gegen 5 Stämme von Candida albicans. Tabelle II Anti-Candida-Wirksamkeit (ug/ml)*
*Minimale hemmende Konzentration (50%), Rapamycin läuft als Standard gegen Testverbindung.
Basierend auf den Ergebnissen dieser pharmakologischen Standardtestverfahren sind die Verbindungen brauchbar bei der Behandlung von Transplantationsabstoßung, wie Herz-, Nieren-, Leber-, Knochenmark- und Hauttransplantaten; Autoimmunerkrankungen, wie Lupus, rheumatoider Arthritis, Diabetes Mellitus, Myastenia Gravis und Multiple Sklerose; und Entzündungserkrankungen, wie Psoriasis, Dermatitis, Ekzem, Seborrhö, entzündlicher Darmerkrankung; und Pilzinfektionen.
Die Verbindungen können rein oder mit einem pharmazeutischen Träger an einen sie benötigenden Säuger verabreicht werden. Der pharmazeutische Träger kann fest oder flüssig sein und die wirksame Verbindung soll eine therapeutisch wirksame Menge sein.
Ein fester Träger kann ein oder mehrere Substanzen einschließen, welche auch als Geschmacksmittel, Schmiermittel, Aufschlußmittel, Suspensionsmittel, Füllstoffe, Gleitmittel, Kompressionshilfen, Bindemittel oder Tabletten-Aufschlußmittel fungieren können; es kann auch ein Einkapselungsmaterial sein. In Pulvern ist der Träger ein fein verteilter Feststoff, welcher sich in Mischung mit dem fein zerteilten Wirkstoff befindet. In Tabletten wird der Wirkstoff mit einem Träger mit den notwendigen Kompressionseigenschaften in geeigneten Anteilen gemischt und in die gewünschte Form und Größe komprimiert. Die Pulver und Tabletten enthalten vorzugsweise bis zu 99% des Wirkstoffs. Ge eignete feste Träger schließen zum Beispiel Calciumphosphat, Magnesiumstearat, Talk, Zucker, Lactose, Dextrin, Stärke, Gelatine, Cellulose, Methylcellulose, Natriumcarboxymethylcellulose, Polyvinylpyrrolidin, leicht schmelzbare Wachse und Ionenaustauschharze ein.
Flüssige Träger werden bei der Herstellung von Lösungen, Suspensionen, Emulsionen, Sirupen, Elixieren und unter Druck stehenden Zusammensetzungen verwendet. Der Wirkstoff kann in einem pharmazeutisch annehmbaren flüssigen Träger wie Wasser, einem organischen Lösungsmittel, einem Gemisch aus beidem oder pharmazeutisch annehmbaren Ölen oder Fetten gelöst oder suspendiert werden. Der flüssige Träger kann andere geeignete pharmazeutisch Zusätze, wie Aufschlußmittel, Emulgatoren, Puffer, Konservierungsstoffe, Süßstoffe, Geschmacksmittel, Suspensionsmittel, Verdickungsmittel, Farbstoffe, Viskositätsregulatoren, Stabilisatoren oder Osmo-Regulatoren enthalten. Geeignete Beispiele für flüssige Träger zur oralen und parenteralen Verabreichung schließen Wasser (teilweise Zusätze wie oben enthaltend, z. B. Cellulosederivate, vorzugsweise Natriumcarboxymethylcelluloselösung), Alkohole (einschließlich einwertige Alkohole und mehrwertige Alkohole, z. B. Glykole) und ihre Derivate, und Öle (z. B. fraktioniertes Kokosöl und Arachisöl) ein. Zur parenteralen Verabreichung kann der Träger auch ein öliger Ester, wie Ethyloleat und Isopropylmyristat sein. Sterile flüssige Träger sind in Zusammensetzungen mit steriler flüssige Form zur parenteralen Verabreichung brauchbar. Der flüssige Träger für unter Druck stehende Zusammensetzungen kann halogenierter Kohlenwasserstoff oder ein anderes pharmazeutisch annehmbares Treibmittel sein. Flüssige pharmazeutische Zusammensetzungen, welche sterile Lösungen oder Suspensionen sind, können durch zum Beispiel intramuskuläre, intraperitoneale oder subkutane Injektion verwendet werden. Sterile Lösungen können auch intravenös verabreicht werden. Die Verbindung kann auch oral, entweder in flüssiger oder fester Zusammensetzungsform verabreicht werden.
Vorzugsweise ist die pharmazeutische Zusammensetzung in einer Einheitsdosierungsform, z. B. als Tabletten oder Kapseln. In solch einer Form wird die Zusammensetzung in Einheitsdosis unterteilt, die angemessene Mengen des Wirkstoffs enthält; die Einheitsdosierungsformen können verpackte Zusammensetzungen, zum Beispiel abgepackte Pulver, Vialen, Ampullen, vorgefüllte Sprit zen oder Sachets, die Flüssigkeit enthalten, sein. Die Einheitsdosierungsform kann zum Beispiel eine Kapsel oder Tablette selbst sein, oder sie kann eine angemessene Anzahl an jeder solcher Zusammensetzungen in Verpackungsform sein. Die bei der Behandlung zu verwendende Dosierung muß subjektiv durch den behandelnden Arzt bestimmt werden.
Zusätzlich können die Verbindungen dieser Erfindung als Lösung, Creme oder Lotion durch Formulierung mit pharmazeutisch annehmbaren Vehikeln, enthaltend 0,1-0,5 Prozent, vorzugsweise 2% an Wirkstoff, verwendet werden, welche an einen mit Pilz befallenen Bereich verabreicht werden kann.
Entsprechend sieht diese Erfindung ebenfalls eine pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend eine Verbindung der Formel I oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon und einen pharmazeutisch annehmbaren Träger vor.

Claims

1. Verbindung der Formel:.

worin X, Y und Z für -CO oder -CHOH&supmin; stehen und wobei mindestens eines von X oder Z für -CHOH&supmin;' stehen muß, vorausgesetzt daß falls Y für CHOH steht, X für CHOH steht, oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon.

2. Verbindung gemäß Anspruch 1, welche 15-Desoxo-15- hydroxyrapamycin oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon ist.

3. Verbindung gemäß Anspruch 1, welche 15,27-Bis(desoxo)- 15,27-bis(hydroxy)rapamycin oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon ist.

4. Verbindung gemäß Anspruch 1, welche 33-Desoxy-33- hydroxyrapamycin oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon ist.

5. Verbindung gemäß Anspruch 1, welche 33-Desoxy-33-(R)- hydroxyrapamycin oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon ist.

6. Verbindung gemäß Anspruch 1, welche 15,33-Bis(desoxy)- 15, 33-bis(hydroxy)rapamycin oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon ist.

7. Verbindung gemäß Anspruch 1, welche 15,27,33-Tri(desoxy)- 15, 27, 33-tri(hydroxy)rapamycin oder ein pharmazeutisch annehmba res Salz davon ist.

8. Verfahren zum Herstellen einer Verbindung mit der Formel I, wie in Anspruch 1 definiert, worin X, Y und Z für -CO- oder -CHOH&supmin; stehen und wo mindestens eines von X oder Z für -CHORstehen muß, oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon, welches umfaßt: Reduzieren von Rapamycin oder einem 31,42-OH geschützten Derivat davon unter Verwendung eines Reduktionsmittels oder zweier Reduktionsmittel, aufeinanderfolgend in jeder Reihenfolge, ausgewählt aus Diisobutylaluminiumhydrid oder ähnlichem Standard-Keton-Reduktionsmittel und einem β-Hydroxyketon- Reduktionsmittel, und Entfernen jeder anwesenden Schutzgruppen, um eine Verbindung der Formel I zu ergeben, falls gewünscht Isolieren als ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon.

9. Pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend einen pharmazeutischen Träger und eine Verbindung der Formel I, wie in Anspruch I definiert.

10. Verbindung der Formel I, wie in einem der Ansprüche 1 bis 7 beansprucht, zur Verwendung als Pharmazeutikum.

11. Verwendung einer Verbindung der Formel I, wie in Anspruch 1 beansprucht, bei der Herstellung eines Medikaments zur Verwendung als ein Immunsuppressiv-, Antientzündungs - oder Antipilzmittel.