DE69226962T2

DE69226962T2 - Waschmittelzusammensetzungen

Info

Publication number: DE69226962T2
Application number: DE69226962T
Authority: DE
Inventors: Dorrit Anita Dk-4000 Roskilde Aeslyng; Ture Dk-2100 Copenhagen Damhus; Egon Dk-2100 Copenhagen Nielsen
Original assignee: Novo Nordisk AS
Current assignee: Novo Nordisk AS
Priority date: 1991-12-20
Filing date: 1992-12-18
Publication date: 1999-05-12
Anticipated expiration: 2012-12-19
Also published as: DK0617734T3; DE69226962D1; WO1993013193A1; JPH07504694A; US5811382A; EP0617734A1; EP0617734B1; ATE170912T1; ES2124301T3

Description

TECHNISCHES GEBIET

Die vorliegende Erfindung betrifft die Verwendung von Proteasen, die von Mitgliedern der Gattung Nocardiopsis stammen, in Waschmitteladditiven oder Waschmittelzusammensetzungen oder in Waschflüssigkeiten/Deckflüssigkeiten, die spezifische Bleichsysteme umfassen.

STAND DER TECHNIK

Es ist vorgeschlagen worden, Bleichsysteme in Waschmittelzusammensetzungen aufzunehmen, um Bleichwirkungen bei eingefärbtem Textilgewebe zu erzielen oder um zu verhindern, daß ein Textilfarbstoff von einem gefärbten Textilgewebe während des Waschens oder Spülens auf ein anderes Textilgewebe übertragen wird.
Waschmittelzusammensetzungen oder Waschlösungen, die ein Bleichsystem umfassen, sind z. B. in den internationalen Patentveröffentlichungen WO 89/09813 und WO 91/05839 beschrieben worden. Die hierin beschriebenen Bleichsysteme umfassen Enzyme, die eine Peroxidaseaktivität aufweisen, und Wasserstoffperoxid oder einen Vorläufer davon, oder Enzyme, die eine geeignete Oxidaseaktivität aufweisen.
Ein Hauptnachteil bei der Anwendung derartiger Bleichsysteme bei Waschmittelzusammensetzungen ist, daß die Proteasen, die in derartigen Zusammenset zungen vorliegen, stark durch die Bleichsysteme beeinträchtigt werden können, was die Waschleistung der Waschmittelzusammensetzung behindert.
Es ist bekannt, daß einige Mitglieder der Gattung Nocardiopsis Proteasen erzeugen. In der internationalen Patentanmeldung WO 88/03947 sind Alkalische Proteasen, die von Protease erzeugenden Stämmen von Nocardiopsis erhältlich sind, für ihre Verwendung als Waschmitteladditive, insbesondere als Waschmitteladditive für das Waschen mit kaltem Wasser, beschrieben worden.

ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG

Wir haben nun überraschenderweise festgestellt, daß Proteasen, die von Mitgliedern der Gattung Nocardiopsis stammen, in Gegenwart der vorstehend erwähnten Bleichsysteme stabiler sind als andere Waschmittelproteasen.
Demzufolge stellt die vorliegende Erfindung eine Waschmittelzusammensetzung bereit, die eine Protease umfaßt, die von einem Mitglied der Gattung Nocardiopsis stammt, und: (a) ein Enzym, das Peroxidaseaktivität aufweist, und Wasserstoffperoxid oder einen Vorläufer davon, und/oder (b) ein Enzym, das eine geeignete Oxidaseaktivität aufweist.
Ein anderer Aspekt der vorliegenden Erfindung ist das Bereitstellen eines Waschmitteladditivs, das eine Protease umfaßt, die von einem Mitglied der Gattung Nocardiopsis stammt, und: (a) ein Enzym, das Peroxidaseaktivität aufweist, und Wasserstoffperoxid oder einen Vorläufer davon, und/oder (b) ein Enzym, das eine geeignete Oxidaseaktivität aufweist.

AUSFÜHRLICHE OFFENBARUNG DER ERFINDUNG

Die vorliegende Erfindung betrifft Proteasen, die von Mitgliedern der Gattung Nocardiopsis stammen, wobei nachgewiesen wurde, daß die erfindungsgemäßen Proteasen in der Gegenwart von Bleichsystemen auf der Basis von Peroxidase stabil sind.
Genauer gesagt betrifft die Erfindung die Verwendung von Proteasen, die von Mitgliedern der Gattung Nocardiopsis stammen, in Reinigungsverfahren, z. B. Waschen im Haushalt, Waschen oder Reinigen im industriellen oder institutionellen Bereich, und Geschirrwaschen, oder Verfahren zur Reinigung von Textilgewebe, in welchen Verfahren Lösungen, die Enzyme, die Peroxidaseaktivität aufweisen, oder Enzyme, die eine geeignete Oxidaseaktivität aufweisen, für den Zweck verwendet werden, entweder Farbstoffe auf den Oberflächen, die in Kontakt mit diesen Lösungen sind, zu bleichen, oder die Übertragung eines Textilfarbstoffs von einem gefärbten Textilgewebe auf ein anderes Textilgewebe zu hemmen.
Die vorliegende Erfindung stellt Waschmittelzusammensetzungen bereit, die Proteasen umfassen, die von einem Mitglied der Gattung Nocardiopsis stammen, und Enzyme, die Peroxidaseaktivität aufweisen, zusammen mit Wasserstoffperoxid oder einem Vorläufer davon, oder, alternativ dazu, Enzyme, die eine geeignete Oxidaseaktivität aufweisen.
Die Erfindung stellt ebenfalls Waschmitteladditive bereit, die Proteasen umfassen, die von einem Stamm der Gattung Nocardiopsis stammen, und Enzyme, die eine Peroxidaseaktivität aufweisen, zusammen mit Wasserstoffperoxid oder einem Vorläufer davon, oder, alternativ dazu, Enzyme, die eine geeignete Oxidaseaktivität aufweisen.
Wahlweise enthält das Waschmitteladditiv oder die Waschmittelzusammensetzung auch Beschleuniger/Aktivatoren.

Nocardiopsis-Proteasen

Mikroorganismen, die zu dem Actinomyceten Nocardiopsis gehören, sind in der Literatur wohlbekannt. Einige Beispiele für Species und Stämme, die beschrieben wurden, sind N. dassonvillei, Type Stamm ATCC 23218; N. dassonvillei M58-1 (NRRL 18133), Patentveröffentlichung WO 88/03947; N. dassonvillei ZIMET 43647, Patentveröffentlichung DD 200,432; N. dassonvillei subsp. prasina, Agric. Biol. Chem. (54, 8, 2177-79) (1990); N. sp. OPC 120, Patentanmeldung JP 2,255,081; und N. sp. 10R (NRRL 18262), Patentveröffentlichung WO 88/03947.
Proteasen, die von Mitgliedern des Actinomyceten Nocardiopsis stammen, sind z. B. in der internationalen Patentanmeldung WO 88/03947 und dem GDR-Patent Nr. DD 200,432 offenbart. Von Nocardiopsis erhältliche Proteasen sind alkalische Proteasen.
Vorzugsweise stammen die Proteasen von einem eine Protease erzeugenden Stamm von N. dassonvillei, vorzugsweise dem Stamm ZIMET 43647, stärker bevorzugt dem Stamm N. dassonvillei M58-1 (NRRL 18133), oder von einem eine Protease erzeugenden Stamm der durch den Stamm 10R definierten Species, oder stärker bevorzugt dem Stamm Nocardiopsis sp. 10R (NRRL 18262).
Die Stämme N. dassonvillei M58-1 und Nocardiopsis sp. 10R sind in der zuvor erwähnten internationalen Patentanmeldung WO 88/03947 beschrieben, und sind demzufolge gemäß den Bestimmungen des Budapester Vertrags bei der Agricultural Research Culture Collection (NRRL), Peoria, US, hinterlegt worden (NRRL 18133 wurde am 13.11.1986 hinterlegt; NRRL 18262 wurde am 10.11.1987 hinterlegt).
Der Stamm ZIMET 43647 ist in dem zuvor erwähnten DD-Patent Nr. 200,432 beschrieben.
In einer stärker bevorzugten Ausführungsform stammen die Proteasen von einem eine Protease erzeugenden Stamm von Nocardiopsis, der dadurch gekennzeichnet ist, daß einen optimalen pH für das Wachstum bei etwa pH 9 besitzt, daß er im wesentlichen kein Wachstum unter pH 8 zeigt, eine optimale Temperatur für das Wachstum bei 20-30ºC besitzt, im wesentlichen kein Wachstum über 35ºC zeigt, und zu N. dassonvillei gehört, vorzugsweise zu N. dassonvillei M58-1 (NRRL 18133), oder dem Stamm ZIMET 43647, oder der durch den Stamm 10R definierten Species, vorzugsweise Nocardiopsis sp. 10R (NRRL 18262).
In einer anderen Ausführungsform ist die Protease eine Alkalische Protease- Zubereitung, die von Nocardiopsis stammt, vorzugsweise einem Stamm von N. dassonvillei, stärker bevorzugt dem Stamm N. dassonvillei M58-1 (NRRL 18133), oder die durch den Stamm 10R definierte Species, vorzugsweise Nocardiopsis sp. 10R (NRRL 18262), dadurch gekennzeichnet, daß sie mindestens 60% ihrer maximalen Aktivität in dem pH-Bereich von pH 7 bis 11 besitzt, gemessen mit Casein als Substrat.
Geeignete Protease-Dosierungen können in dem Bereich von 0,0001 bis 10 mg Enzym-Protein pro Liter Waschlösung sein, vorzugsweise 0,001 bis 1 mg Enzym-Protein pro Liter Waschlösung. In Waschmittelzusammensetzungen können geeignete Protease-Dosierungen in dem Bereich von 0,005 ug bis 30 mg Enzym-Protein pro g Waschmittelzusammensetzung sein, vorzugsweise 0,05 ug bis 3 mg Enzym-Protein pro g Waschmittelzusammensetzung, stärker bevorzugt 0,1 ug bis 100 ug Enzym-Protein pro g Waschmittelzusammensetzung.

Enzym, das eine Peroxidaseaktivität aufweist

Unter Enzymen, die Peroxidaseaktivität aufweisen, versteht man Enzyme mit einer Wirkungsweise, die der einer Peroxidase (EC 1.11.1.7; gemäß den "Recommendations of the Nomenclature Committee of the International Union of Biochemistry") ähnlich ist, und sie werden mit dieser synonym verwendet werden.
Peroxidasen, die für eine Aufnahme in die erfindungsgemäßen Waschmitteladditive oder Waschmittelzusammensetzungen geeignet sind, sind z. B. in den zuvor erwähnten internationalen Patentanmeldungen Nr. WO 89/09813 und WO 91/05839 beschrieben worden.
Die für den vorliegenden Zweck einzusetzenden Peroxidasen können isoliert werden aus und sind herstellbar durch Pflanzen (z. B. Meerettich-Peroxidase) oder Mikroorganismen, insbesondere Bakterien oder Pilze, z. B. Actinomyceten oder Basidiomyceten, vorzugsweise solche, die von einem Stamm von Coprinus, vorzugsweise C. cinereus, stammen.
Andere nützliche Peroxidasen sind Halo-Peroxidasen wie Chlor- oder Brom- Peroxidasen.
Die Peroxidasen können ebenfalls durch Verfahren herstellbar sein, die die Züchtung einer Wirtszelle, die mit einem rekominanten DNA-Vektor, der eine DNA-Sequenz trägt, die das Enzym kodiert, sowie DNA-Sequenzen, die Funktionen kodieren, die die Expression des Enzyms erlauben, in einem Kulturmedium unter Bedingungen, die die Expression des Enzyms und das Rückgewinnen des Enzyms aus der Kultur erlauben, umfassen.
Vorzugsweise ist die Peroxidase in dem pH-Bereich von 6,5 bis 12, stärker bevorzugt pH 6,5 bis 10,5, und am stärksten bevorzugt pH 7,5 bis 10,5, aktiv.
Geeignete Peroxidase-Dosierungen können in dem Bereich von 0,01 bis 100 mg/l Waschflüssigkeit liegen, stärker bevorzugt von 0,1 bis 10 mg/l, am stärksten bevorzugt von 0,1 bis 1 mg/l. In Waschmittelzusammensetzungen können geeignete Peroxidase-Dosierungen in dem Bereich von 0,5 ug bis 300 mg Enzym-Protein pro g Waschmittelzusammensetzung liegen, vorzugsweise von 5 ug bis 30 mg Enzym-Protein pro g Waschmittelzusammensetzung, stärker bevorzugt von 50 ug bis 3 mg Enzyme-Protein pro g Waschmittelzusammensetzung.

Wasserstoffperoxid oder Vorläufer

Wenn das in dem Bleichsystem verwendete Enzym eine Peroxidase ist, wird typischerweise Wasserstoffperoxid oder ein Vorläufer von Wasserstoffperoxid, vorzugsweise Perborat oder Percarbonat zugesetzt werden. Es kann jedoch wünschenswert sein, ein enzymatisches Verfahren für die Bildung von Wasserstoffperoxid anzuwenden.
Eine derartige Kategorie von Wasserstoffperoxid bildenden Systemen umfaßt Enzyme, die molekularen Sauerstoff und ein organisches oder anorganisches Substrat in Wasserstoffperoxid bzw. das oxidierte Substrat umsetzen können.
Bevorzugte Wasserstoffperoxid-bildende Enzyme sind solche, die auf billige und leicht erhältliche Substrate wirken, die üblicherweise in Waschmitteladditiven oder Waschmittelzusammensetzungen aufgenommen werden können. Ein Beispiel eines derartigen Substrates ist Glukose, die zur Wasserstoffperoxid- Bildung mit Hilfe der Glukose-Oxidase eingesetzt werden kann. Andere geeignete Oxidasen sind Uratoxidase, Galaktoseoxidase, Alkoholoxidasen, Aminoxidasen, Aminosäureoxidase und Cholesterinoxidase.
Optimale Wasserstoffperoxid-Konzentrationen in Waschlösungen sind innerhalb des Bereichs von 1 uM bis 20 mM, vorzugsweise von 1 uM bis 1 mM. Wenn Coprinus-Peroxidase verwendet wird, sind 0,01 bis 0,25 mM Wasserstoffperoxid bevorzugt.

Enzyme, die eine Oxidaseaktivität aufweisen

Im Rahmen dieser Erfindung versteht man unter Enzymen, die eine Oxidaseaktivität aufweisen, Enzyme, die eine Wirkungsweise besitzen, die der einer Oxidase ähnlich ist, und die mit dieser im nachfolgenden als synonym verstanden werden.
Beispiele für Enzyme, die eine geeignete Oxidaseaktivität aufweisen, sind Oxidasen, die auf aromatische Verbindungen, insbesondere phenolische, z. B. polyphenolische Verbindungen, wirken, wie Catechinoxidase (EC 1.10.3.1) oder Laccase (EC 1.10.3.2).

Beschleuniger/Aktivatoren

Es ist festgestellt worden, daß die Zugabe bestimmter oxidierbarer Substanzen zu Beginn oder während des Wasch- und/oder Spülverfahrens die Farbstoff- Übertragungs-Hemmungs-Wirkung des eingesetzten Peroxidasesystems verstärken kann. Derartige Substanzen werden Verstärker oder Beschleuniger- /Aktivatoren genannt, da sie im allgemeinen die anfängliche Geschwindigkeit der Reaktion zwischen Peroxidase/Wasserstoffperoxid und den Textilgewebe- Farbstoffen erhöhen.
Beispiele für potentielle Beschleuniger sind Metallionen, z. B. Mn&spplus;&spplus; Halogenionen, z. B. Chlor- oder Bromionen, oder organische Verbindungen wie Phenole, z. B. p.Hydroxybenzoesäure, p-Hydroxyphenylpropensäure, 2,4- Dichlorphenol, p-Hydroxybenzolsulfonsäure, 7-Hydroxycoumann, oder Vanillin oder die in M. Kato und S. Shimizu, Plant Cell Physiol. 26(7), 1985, S. 1291-1301 (siehe insbesondere Tabelle 1) oder in B. C. Saunders et al., op. cit., S. 141 ff., beschriebenen.
Die optimale Beschleuniger-Konzentration in Waschlösungen liegt in dem Bereich von 1 uM bis 1 mM, vorzugsweise von 5 bis 100 uM.

Waschmitteladditive und Waschmittelzusammensetzungen

Die erfindungsgemäße Waschmittelzusammensetzung kann eine oder mehrere oberflächenaktive Mittel umfassen, die vom anionischen, nichtionischen, kationischen, amphoteren oder zwitterionischen Typ sein können, oder ein Gemisch von diesen. Typische Beispiele für anionische oberflächenaktive Mittel sind lineare Alkylbenzolsulfonate (LAS); Alkylsulfate (AS); Alpha- Olefinsulfonate (AOS); Alkoholethoxysulfate (AES) und Alkalimetallsalze von natürlichen Fettsäuren. Beispiele für nichtionische oberflächenaktive Mittel sind Alkylpolyethylenglycolether; Nonylphenolpolyethylenglycolether; Fettsäureester von Sukrose oder Glukose; und Ester von polyethoxylierten Alkylglukosiden.
Die erfindungsgemäße Waschmittelzusammensetzung kann auch andere Waschmittelbestandteile, die im Stand der Technik bekannt sind, enthalten wie Builder, Antikorrosionsmittel, Maskierungsmittel, Mittel gegen die Wiederablagerung von Schmutz, Parfüme, Stabilisatoren für die Enzyme und Bleichmittel, Formulierungshilfen, optische Aufheller, Schaumverstärker, komplexbildende Mittel, Füllstoffe, Textilgewebeweichmacher, usw. Die erfindungsgemäße Waschmittelzusammensetzung kann im wesentlichen wie in Falbe, J.; Surfactants in Consumer Products. Theory, Technology and Application; Springer Verlag 1987, vide, insbesondere dem Abschnitt mit dem Titel "Frame formulations for liquid/powder heavy-duty detergents", beschrieben formuliert werden.
Die erfindungsgemäßen Waschmittelzusammensetzungen können in jeder beliebigen zweckmäßigen Form, wie ein Pulver, eine Flüssigkeit, usw., formuliert werden. Im allgemeinen werden Waschmittelzusammensetzungen in Dosierungen in dem Bereich von 0,3 bis 15 g Waschmittel pro Liter Waschflüssigkeit eingesetzt werden.
Die erfindungsgemäßen Waschmittelzusammensetzungen können vorteilhafterweise ein oder mehrere andere Enzyme, z. B. Lipasen, Amylasen, Cellulasen, einschließen, die üblicherweise in Waschmittelzusammensetzungen enthalten sind, sowie Proteasen anderer Herkunft.
Die erfindungsgemäßen Enzyme können in eine Waschmittelzusammensetzung aufgenommen werden durch Zugabe getrennter Additive, die ein oder mehrere Enzyme enthalten, oder durch Zugabe eines kombinierten Additivs, das alle diese Enzyme umfaßt. Die Additive der Erfindung, ob als getrenntes Additiv oder als ein kombiniertes Additiv, können z. B. als Granulate, Flüssigkeiten, Aufschlemmungen, usw. formuliert werden. Bevorzugte Waschmitteladditiv-Formulierungen sind nichtstaubende Granulate, Flüssigkeiten, insbesondere stabilisierte Flüssigkeiten, Aufschlemmungen oder geschützte Enzyme. Staubfrei Granulate können z. B. gemäß GB-Patent Nr. 1,362,365 oder US-Patent Nr. 4,106,991 hergestellt werden, und können wahlweise durch im Stand der Technik bekannte Verfahren beschichtet werden. Die Enzyme können vor oder nach der Granulierung gemischt werden. Flüssige Enzymzubereitungen können z. B. stabilisiert werden, indem ein Polyol wie Propylenglykol; ein Zucker oder ein Zuckeralkohol; Milchsäure oder Borsäure gemäß eingeführten und anerkannten Verfahren zugesetzt wird. Andere Enzymstabilisatoren sind im Stand der Technik wohlbekannt. Geschützte Enzyme können gemäß dem in der europäischen Patentanmeldung Nr. 238 216 offenbarten Verfahren hergestellt werden.
Das folgende Beispiel veranschaulicht die vorliegende Erfindung, und es ist nicht beabsichtigt, daß es auf irgendeine Weise den Schutzbereich der beanspruchten Erfindung einschränkt.

BEISPIEL

Waschleistung

Dieses Beispiel veranschaulicht die Proteasewaschleistung in Anwesenheit eines beschleunigten Peroxidasesystems im Vergleich mit der Waschleistung in Abwesenheit dieses Peroxidasesystems.
Die Waschleistungs-Tests wurden an mit durch Grassaft verschmutzter Baumwolle bei 35ºC auf isothermische Weise für 15 Minuten durchgeführt.
Es wurde 1 g/l eines handelsüblichen auf Phosphat basierenden Pulverwaschmittels ohne Bleichmittel vom amerikanischen Typ verwendet. Das Waschmittel wurde in etwa 6º dH (deutsche Härte) Wasser gelöst. Der pH in der Waschflüssigkeit betrug 8,5. Das Verhältnis von Textilgewebe zu Waschflüssigkeit betrug etwa 3,5 g Textilgewebe (2,3 g verschmutztes und 1,2 g sauberes Textilgewebe) pro Liter Waschmittellösung.
Die Proteasen wurden auf 0,0, 0,3 und 0,5 mg Enzym-Protein pro Liter dosiert. Die Proteasezubereitung wurde von Nocardiopsis sp. 10R gemäß der internationalen Patentanmeldung WO 88/03947 erhalten.
In einer Testreihe wurden 0,4 mg/l Peroxidase, 50 uM Natrium-p-Hydroxybenzolsulfonat (als Beschleuniger), und 0,2 mM H&sub2;O&sub2; (in den nachfolgenden Tabellen zusammen als das POD-System bezeichnet), und Protease vor der Zugabe des verschmutzten Textilgewebes zu der Waschmittellösung gegeben. Die verwendete Peroxidase stammte von Coprinus cinereus.
In einer anderen Testreihe wurde nur die Protease vor der Zugabe der verschmutzten Textilgewebes zu der Waschmittellösung gegeben.
Anschließend an das Waschen wurde das Textilgewebe unter Leitungswasser gespült und luftgetrocknet. Die Proteaseleistung wurde durch die Änderung (ΔR) der Remission (% R) bei 460 nm, gemessen auf einem Datacolor Elrephometer 2000, bestimmt, wobei ΔR die Remission nach dem Waschen bei zugesetzter Protease abzüglich der Remission nach dem Waschen ohne zugesetzte Protease ist.
Die Ergebnisse dieser Vergleichsversuche sind in den nachfolgenden Tabellen 1 und 2 wiedergegeben. Tabelle 1 Waschleitung (ΔR) in Anwesenheit und Abwesenheit des POD-Systems.
1) AlcalaseTM, SavinaseTM und DurazymTM sind Marken von handelsüblichen Waschmittelproteasen, die von Novo Nordisk A/S, Dänemark geliefert werden. Alle diese Proteasen sind Alkalische Proteasen von Bacillus.
Aus Tabelle I ist ersichtlich, daß die Nocardiopsis-Protease bedeutend weniger durch die Anwesenheit des Bleichsystems beeinträchtigt ist als die Bacillus-Protease.
Diese Ergebnisse werden auch durch die nachfolgende Tabelle 2 veranschaulicht. In dieser Tabelle wird die Stabilität der Nocardiopsis-Proteasen als die Waschleistung der Proteasen in Gegenwart des Bleichsystems im Verhältnis zu der entsprechenden Leistung in Abwesenheit dieses Systems wiedergegeben. Tabelle 2 Waschleistung in Gegenwart des POD-Systems im Verhältnis zu der Waschleistung in Abwesenheit des POD-Systems.
Aus Tabelle 2 ist ersichtlich, daß die Nocardiopsis-Protease in Gegenwart des Bleichsystems etwa 3/4 oder mehr ihrer Waschleistung in Abwesenheit dieses Bleichsystems behält, während die Bacillus-Proteasen das Meiste ihrer Waschleistung in Anwesenheit des Bleichsystems verlieren.

Claims

1. Waschmittelzusammensetzung, umfassend eine Protease, die von einem Mitglied der Gattung Nocardiopsis stammt, und

(a) ein Enzym, das Peroxidaseaktivität aufweist, und Wasserstoffperoxid oder einen Vorläufer davon, und/oder

(b) ein Enzym, das eine geeignete Oxidaseaktivität aufweist.

2. Waschmittelzusammensetzung nach Anspruch 1, umfassend eine Protease, die von einem eine Protease erzeugenden Stamm von N. dassonvillei stammt, oder von einem eine Protease erzeugenden Stamm der durch den Stamm 10R definierten Spezies.

3. Waschmittelzusammensetzung nach Anspruch 2, in der die Protease von einem eine Protease erzeugenden Stamm von N. dassonvillei stammt, der weiterhin dadurch gekennzeichnet ist, daß er einen optimalen pH für das Wachstum bei etwa pH 9 besitzt, daß er im wesentlichen kein Wachstum unter pH 8 zeigt, eine optimale Temperatur für das Wachstum bei 20-30ºC besitzt, im wesentlichen kein Wachstum über 35ºC zeigt.

4. Waschmittelzusammensetzung nach einem der Ansprüche 2-3, wobei die Protease von dem Stamm N. dassonvillei M58-1 (NRRL 18133) oder von dem Stamm Nocardiopsis sp. 10R (NRRL 18262), oder einer Mutante oder einer Variante davon stammt.

5. Waschmittelzusammensetzung nach Anspruch 4, wobei die Protease weiterhin dadurch gekennzeichnet ist, daß sie mindestens 60% ihrer maximalen Aktivität in dem pH-Bereich von pH 7 bis 11 besitzt, gemessen mit Casein als Substrat.

6. Waschmittelzusammensetzung nach einem der Ansprüche 2-3, wobei die Protease von dem Stamm ZIMET 43647 oder einer Mutante oder einer Variante davon stammt.

7. Waschmitteladditiv, umfassend eine Protease, die von einem Mitglied der Gattung Nocardiopsis stammt, und

(b) ein Enzym, das eine geeignete Oxidaseaktivität aufweist.

8. Waschmitteladditiv nach Anspruch 7, umfassend eine Protease, die von einem eine Protease erzeugenden Stamm von N. dassonvillei stammt, oder von einem eine Protease erzeugenden Stamm der durch den Stamm 10R definierten Spezies.

9. Waschmitteladditiv nach Anspruch 8, in dem die Protease von einem eine Protease erzeugenden Stamm von N. dassonvillei stammt, der weiterhin dadurch gekennzeichnet ist, daß er einen optimalen pH für das Wachstum bei etwa pH 9 besitzt, im wesentlichen kein Wachstum unter pH 8 zeigt, eine optimale Temperatur für das Wachstum bei 20- 30ºC besitzt, und im wesentlichen kein Wachstum über 35ºC zeigt.

10. Waschmitteladditiv nach einem der Ansprüche 8-9, wobei die Protease von dem Stamm N. dassonvillei M58-1 (NRRL 18133) stammt, oder von dem Stamm Nocardiopsis sp. 10R (NRRL 18262), oder einer Mutante oder Variante davon.