DE60211905T2

DE60211905T2 - Benz-indol- und benzo-chinolin-derivate als prodrugs zur tumorbehandlung

Info

Publication number: DE60211905T2
Application number: DE60211905T
Authority: DE
Inventors: Mark School of Pharmacy Univers.of L SEARCEY; Laurence Hylton School of Pharmacy PATTERSON
Original assignee: University College London
Current assignee: University College London
Priority date: 2001-02-22
Filing date: 2002-02-22
Publication date: 2007-01-18
Anticipated expiration: 2022-02-23
Also published as: JP2004522779A; ATE327750T1; JP4862120B2; EP1408960A1; WO2002067930A1; DE60211905D1; EP1408960B1; US8017640B2; US7192977B2; US20070161669A1; US20040138246A1

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft durch aromatische Oxidation/Hydroxylierung aktivierte Prodrugs, insbesondere Antitumorprodrugs und solche, die spezifisch durch Oxidations/Hydroxylierungsaktivitäten der Cytochrom P450-Familie von Enzymen aktiviert werden.
Viele herkömmliche zytotoxische Arzneimittel sind bekannt, die für therapeutische Zwecke verwendet werden können. Sie leiden aber typischerweise an dem Problem, dass sie im allgemeinen zytotoxisch sind und daher andere Zellen als die, die zerstört werden müssen, beeinträchtigen. Dies kann in gewissem Umfang durch Verwendung von gezielten Arzneimittelverabreichungsystemen gelindert werden, z.B. direkte Injektion in eine Stelle von tumorösem Gewebe oder z.B. durch Anbinden des zytotoxischen Mittels an einen Antikörper, der spezifisch ein Antigen erkennt, das sich nur auf der Krebszellenoberfläche zeigt. Alternativ kann elektromagnetische Strahlung verwendet werden, um eine chemische Änderung in einem Mittel an der gewünschten Stelle zu bewirken, so dass es zytotoxisch wird. Alle diese Techniken haben aber mehr oder weniger bestimmte Beschränkungen und Nachteile.
Die Verbindung (+)-CC-1065 und die Duocarmycine sind natürlich vorkommende Vertreter einer Klasse von DNA-Alkylierungsmitteln. Diese natürlich vorkommenden Verbindungen bestehen aus einer DNA-Alkylierungseinheit auf Basis eines Pyrrolo[3,2-e]indol-Kerns mit einer oder zwei Untereinheiten, die DNA-Bindungsvermögen verleihen. CC-1065 und Duocarmycin A umfassen eine spirocyclische Cyclopropangruppe, die für die DNA-Alkylierungseigenschaften verantwortlich ist. Es wird angenommen, dass Duocarmycin B₂, C₂ und D₂ Vorstufen für Cyclopropanaktivitäten sind und eine (durch eine Abgangsgruppe) substituierte Methylgruppe an der Position 8 am Dihydropyrrolring umfassen. CC-1065 ist über verschiedene Routen synthetisiert worden, die von Boger et al. in Chem. Rev. 1997, 97, 787–828, zusammengefasst wurden.
In US-A-4413132 wurde die erste Synthese der linken Untereinheit von CC-1065 beschrieben. Die Synthese basiert auf einer Winstein Ar-3'-Alkylierung, bei der der Cyclopropanring eingeführt wird. In einem vorhergehenden Schritt wird der A-Ring (des Indolkerns) durch Reaktion eines Anilins mit einem α-Thiomethylester unter Verwendung von Chemie auf Basis von der Oxindolsynthese von Gassman eingeführt. Das Anilin weist eine geschützte phenolische Hydroxylgruppe in ortho-Stellung zur NH₂-Gruppe auf, von der angenommen wird, dass sie im Endprodukt für die DNA-Alkylierung entscheidend ist. CC-1065 besitzt eine breite Antitumorwirksamkeit, ist aber für normale Zelle zu toxisch, um klinisch von Nutzen zu sein.
Boger et al. (1997) a.a.O. beschreibt auch verschiedene tiefsitzende strukturelle Modifikationen der DNA-Alkylierungsuntereinheit, in der der Pyrrolring "A" durch andere aromatische Ringstrukturen ersetzt ist. In einer Klasse von Analoga ist der Ersatzring ein Benzolring.
Es sind Versuche durchgeführt worden, die Zuführung von CC-1065 und Analoga durch Konjugation des Arzneimittels über die DNA-Bindungsuntereinheit an Polymere oder über spezifische Bindungsmittel wie Antikörper oder Biotin gezielt durchzuführen, wie in US 5843937 beschrieben. Boger et al. in Synthesis 1999 SI, 1505–1509, beschrieben Prodrugs von 1,2,9,9a-Tetrahydrocyclopropa(c)benz[e]indol-4-on, in denen die Version der Verbindungen mit geöffnetem Cyclopropanring durch Reaktion der Phenolgruppe unter Bildung von Estern und Carbamaten derivatisiert wurde.
In Tet. Letts. (1998) 39, 2227–2230, beschreiben Boger et al. die Synthese einer Reihe von Vorstufen für die Alkylierungsuntereinheiten von Duocarmycin- und CC-1065-Analoga mit tief sitzenden strukturellen Modifikationen der Alkylierungsuntereinheit. Eine der synthetisierten Verbindungen ist ein Benzodihydroindol-Derivat:
In J. Org. Chem. (2000), 65/13, 4101–4111, wurde die entsprechende Indolinverbindung mit geschlossenem Ring (CBI-Derivat), die von diesem Benzodihydroindol-Derivat abgeleitet war, an die DNA-Bindungsuntereinheit von CC-1065 gekuppelt und es wurde gezeigt, dass sie DNA-Alkylierungsaktivität aufweist. Ana loga der Vorstufe der Alkylierungsuntereinheit, in denen die Benzeinheit durch Methoxy oder Cyano substituiert ist, wurden auch hergestellt. Ähnliche Verbindungen sind in WO-A-9745411 und WO-A-9732850 beschrieben. In '411 ist die Benzeinheit in Position 7 durch Cyano substituiert oder die Cyclopropangruppe kann Difluorsubstituiert sein. In '850 werden die 7-Methoxy-CBI-Verbindungen beschrieben.
In WO-A-9811101 ist die phenolische Hydroxylgruppe im B-Ring der CBI-Verbindungen durch Gruppen auf Amino-, Nitro- oder Thiolbasis ersetzt.
In J. Am. Chem. Soc. (1991), 113, 3980–3983, beschrieben Boger et al. eine Studie zur Identifizierung von Merkmalen von CC-1065-Analoga, die zur Selektivität der DNA-Alkylierung beitragen. Die in vitro getesteten Verbindungen hatten Alkylierungsuntereinheiten auf Basis von 2,3-Dihydroindol und beinhalteten die 6-Deshydroxyanaloga. Es wurde gezeigt, dass sie eine gewisse DNA-Alkylierungseigenschaft aufwiesen, aber bei 10⁴-fach höheren Konzentrationen als bei den 6-Hydroxyverbindungen.
Die vorliegenden Erfindung betrifft Vorstufen von Analoga von CC-1065, die keine Hydroxylgruppe im B-Ring der Alkylierungsuntereinheit aufweisen und daher selbst als DNA-Alkylierungsmittel im wesentlichen inaktiv sind.
Es ist berichtet worden (Murray, G.I., et al., 15. Juli 1997, Cancer Research, 57m 3026–3031 und WO-A-9712246), dass das Enzym CYP1B1, ein Mitglied der Cytochrom P450 (CYP)-Familie von xenobiotisch metabolisierenden Enzymen, mit großer Häufigkeit in einer Reihe von menschlichen Krebssorten, einschließlich Krebssorten von Brust, Dickdarm, Lunge, Speiseröhre, Haut, Lymphknoten, Gehirn und Testikel, exprimiert wird und dass es in normalem Gewebe nicht nachweisbar ist. Die führte zu der Schlussfolgerung, dass die Expression von Cytochrom P450-Isoformen in tumorösen Zellen ein molekulares Ziel für die Entwicklung von neuen Antitumorarzneimitteln liefert, die durch die CYP-Enzyme in Tumorzellen selektiv aktiviert werden könnten, obwohl keine Arzneimittelbeispiele angegeben wurden. Von einer Reihe von anderen CPY-Isoformen ist gezeigt worden, dass sie in verschiedenen Tumoren exprimiert werden. Viele der CYP, die in Tumoren exprimiert werden, sind in Patterson, LH et al. (1999) Anticancer Drug Des. 14(6), 473–486, aufgeführt.
In WO-A-99/40056 werden Prodrugs von Styrol- und Chalcon-Derivaten beschrieben. Die betreffenden hydroxylierten Formen der Prodrugs, die in situ gebildet werden, sind potente Tyrosinkinase (TK)-Inhibitoren. Die Inhibierung der TK-Aktivität trägt zur Tumorinhibierung und Zellzerstörung bei. Es wurde gezeigt, dass die Prodrugs durch mikrosomale Zubereitungen, die CYP1B1-Enzym exprimieren, aktiviert wurden und zytotoxische Aktivität gegen Zelllinien aufweisen, die das gleiche Enzym exprimieren, wobei sie eine sehr viel geringere zytotoxische Aktivität gegen Zelllinien aufweisen, die das Enzym nicht exprimieren.
Die vorliegende Erfindung ist auf eine neue Klasse von Prodrugs gerichtet, von denen erwartet wird, dass sie in situ durch CYP-Enzyme, insbesondere Enzyme, die in hohen Konzentrationen in Tumoren exprimiert werden, hydroxyliert werden. Es wird insbesondere angenommen, dass die Prodrugs durch CYP1B1-Enzym metabolisierbar sind. Einige dieser Verbindungen sind neu. Die vorliegende Erfindung betrifft die erste therapeutische Verwendung einer großen Reihe von Verbindungen und ihre Synthese ebenso wie Zwischenprodukte, die dabei verwendet werden.
Gemäß dem ersten Aspekt der Erfindung wird die neue Verwendung einer Verbindung der allgemeinen Formel I oder IA oder eines Salzes davon bei der Herstellung einer Zusammensetzung zur Verwendung in einem Verfahren zur therapeutischen Behandlung eines Tieres bereitgestellt:
in welchen X H ist;
Y eine Abgangsgruppe ist;
R¹ -Ar, NH₂, OR⁷ oder R⁷ ist;
R², R³, R⁴, R⁵ und R⁶ jeweils unabhängig ausgewählt sind aus H, C_1-4-Alkyl, -OH, C_1-4-Alkoxy, -CN, Cl, Br, I, -NO₂, -NH₂, -NHR¹⁶, -NR¹⁶ ₂, -N⁺R¹⁶ ₃; -NHCOR⁸, -COOH, -CONHR⁹, -NHCOOR⁹ und -COOR⁹;
R⁷, R⁸ und R⁹ unabhängig ausgewählt sind aus C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, C_7-12-Aralkyl, gegebenenfalls substituiertem Heteroaryl und einem Liganden;
Ar ausgewählt ist aus
in welchen B N oder CR¹⁰ ist;
R¹⁰ ausgewählt ist aus OH, C_1-4-Alkoxy, C_1-4-Alkyl, -NO₂, -NH₂, -CN, Cl, Br, I, -NHCOR¹⁴, -COOH, -CONHR¹⁵, -NHCOOR¹⁵, -COOR¹⁵ und H;
Z O, S, -CH=CH- oder NH ist;
das oder jedes R¹¹ ausgewählt ist aus OH, C_1-4-Alkoxy, C_1-4-Alkyl, -NO₂, -NH₂, -NHR¹⁶, -NR¹⁶ ₂, -N⁺R¹⁶ ₃, -CN, Cl, Br, I, -NHCOR¹⁴, -COOH, -CONHR¹⁵, -NHCOOR¹⁵ und COOR¹⁵;
n eine ganze Zahl im Bereich von 0 bis 4 ist;
R¹² H, -COAr¹, -CONH₂, -COOH, -COOR¹⁵ oder -COR¹⁵ ist;
das oder jedes R¹³ ausgewählt ist aus OH, C_1-4-Alkoxy, C_1-4-Alkyl, -NO₂, -NH₂, -NHR¹⁶, -NR¹⁶ ₂, -N⁺R¹⁶ ₃, -CN, Cl, Br, I, -NHCOR¹⁴, -COOH, -CONHR¹⁵, -NHCOOR¹⁵ und -COOR¹⁵,
m 0, 1 oder 2 ist;
R¹⁴ ausgewählt ist aus C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, gegebenenfalls substituiertem Heteroaryl, C_7-12-Aralkyl, Ar¹ und Liganden;
R¹⁵ ausgewählt ist aus C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, C_7-12-Aralkyl und gegebenenfalls substituiertem Heteroaryl und Liganden;
das oder jedes R¹⁶ unabhängig ausgewählt ist aus C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, C_7-12-Aralkyl und gegebenenfalls substituiertem Heteroaryl; und
Ar¹ ausgewählt ist aus den gleichen Gruppen wie Ar;
mit der Maßgabe, dass nicht mehr als eine Gruppe R¹¹ oder R¹³ in irgendeinem Ring eine Gruppe Ar¹ beinhaltet.
Ar¹ ist bevorzugt
Das Tier, das behandelt wird, ist im allgemeinen ein Mensch, obwohl die Verbindungen auch eine veterinäre Verwendung aufweisen können. Die behandelte Indikation ist im allgemeinen Krebs, einschließlich Adenokarzinom, Leukämie, Lymphom, Melanom, Myelom, Sarkom, Teratokarzinom und insbesondere Krebsarten von Nebenniere, Blase, Knochen, Knochenmark, Gehirn, Brust, Cervix, Gallenblase, Ganglien, Magen-Darm-Trakt, Herz, Niere, Leber, Lunge, Muskel, Eierstöcke, Pankreas, Nebenschilddrüse, Penis, Prostata, Speicheldrüse, Haut, Milz, Testikel, Thymus, Schilddrüse und Uterus.
Der Tumor kann z.B. als Tumor, der hohe Konzentrationen an CYP1B1 exprimiert, definiert sein.
In der Erfindung ist die Abgangsgruppe Y z.B. in einer Gruppe, die für nucleophile Substitutionsreaktionen von Nutzen ist. Geeignete Beispiele der Abgangsgruppe sind -OCOOR¹⁷, -OCONHR¹⁸, Cl, Br, I oder -OSOOR¹⁹, wobei R¹⁷, R¹⁸ und R¹⁹ ausgewählt sind aus C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, C_7-12-Aralkyl und gegebenenfalls substituiertem Heteroaryl. Am meisten bevorzugt ist die Abgangsgruppe ein Halogenatom, vorzugsweise Chlor.
Optionale Substituenten für Phenyl-, Aralkyl- und Heteroarylgruppen sind z.B. C_1-4-Alkyl, Halogen, Hydroxyl, C_1-4-Alkoxy, -NH₂, -NHR¹⁶, -NR¹⁶ ₂, -N⁺R¹⁶ ₃, -NO₂, -CN, -COOH, -NHCOR¹⁴, -CONHR¹⁵, -NHCOOR¹⁵, -COOR¹⁵ usw.
In der vorliegenden Erfindung beinhaltet der Ausdruck Ligand eine Gruppe mit spezifischen Zielfindungseigenschaften, die sich z.B. in Antikörpern oder Gengerichteten Enzym-Prodrug-Umgebungen eignen. Bei dem Liganden kann es sich um ein Oligopeptid, Biotin, Avidin oder Streptavidin, eine polymere Gruppe, ein Oligonucleotid oder ein Protein handeln. Bevorzugt hat er spezifische Bindungseigenschaften, wie ein Antikörper oder ein Fragment, ein Antigen, ein Sense- oder Antisense-Oligonucleotid oder einer von Avidin, Streptavidin und Biotin, d.h. er ist eine Komponente eines spezifischen Bindungspaares. Alternativ kann es sich um eine Gruppe, die für die passive Zielfindung gestaltet ist, wie eine polymere Gruppe, oder eine Gruppe, die zur Verlängerung der Stabilität oder zur Reduzierung der Immunogenität gestaltet ist, wie eine hydrophile Gruppe, handeln. US-A-5843937 offenbart geeignete Liganden zur Konjugation an diese Typen von aktiven Stoffen und Verfahren zur Durchführung der Konjugation.
In einer pharmazeutisch wirksamen Verbindung ist R¹ von OR⁷ verschieden.
Im allgemeinen ist die Gruppe R¹ in einer Verbindung der allgemeinen Formel I für ein optimiertes DNA-Bindungsvermögen eine Gruppe Ar. Häufig kann die Verbindung zwei aromatische Gruppen beinhalten, die miteinander verknüpft sind. In solchen Verbindungen ist eine der Gruppen R¹¹ der Gruppe Ar oder je nach Fall die Gruppe R¹² eine Gruppe Ar¹. Während es für einige Verbindungen zweckmäßig sein kann, dass 3 oder mehr derartige aromatische Gruppen miteinander verknüpft sind, ist es bevorzugt, dass es eine Gruppe Ar und eine Gruppe Ar¹ gibt. So sollte in einer Gruppe Ar¹, die eine Gruppe vom Pyrrolodihydroindoltyp darstellt, die Gruppe R¹² von der Gruppe -COAr¹ verschieden sein. In einer Gruppe Ar¹, die eine der anderen Typen von Gruppe ist, sollten bevorzugt entweder keine Substituenten R¹¹ oder je nach Fall R¹³ vorhanden sein oder, wenn Substituenten vorhanden sind, sollte keiner dieser Substituenten eine Gruppe Ar¹ beinhalten.
Gemäß einer Ausführungsform der Erfindung ist der Substituent Ar eine Gruppe
In solchen Gruppen Ar ist B bevorzugt CR¹⁰. R¹⁰ ist bevorzugt H. Die Definition von Z ist bevorzugt NH, obwohl Furan (Z = O)- und Thiophen (Z = S)-Analoga zur Konjugation an DNA-Alkylierungseinheiten hergestellt worden sind und zweckmäßige DNA-Bindungseigenschaften aufweisen können. In ähnlicher Weise werden in einer Gruppe Ar¹ die Gruppen B und Z unter den gleichen bevorzugten Gruppen ausgewählt. Bevorzugt ist n mindestens 1 und eine der Gruppen R¹¹-NHCOAr¹. In dieser Ausführungsform ist Ar¹ bevorzugt eine Gruppe
in welcher B und Z gleich wie in Ar sind.
In einer anderen Ausführungsform ist der Substituent Ar eine Gruppe
R¹² in Ar ist bevorzugt von -COOR¹⁵ verschieden, bevorzugter ist es eine Gruppe -COAr¹, in der Ar¹ bevorzugt der gleiche Typ von Gruppe ist.
In beiden Gruppen Ar und Ar¹ ist m in der Gruppe vom Indolyltyp bevorzugt 0.
In Ar und Ar¹ kann es mehrere Substituenten R¹¹ geben. Am meisten bevorzugt werden diese Substituenten aus C_1-4-Alkoxygruppen ausgewählt.
In Verbindungen der Formel I ist der Indolringkern der DNA-Alkylierungsuntereinheit bevorzugt im Benzolring unsubstituiert (R² ist Wasserstoff), während der Benzring unsubstituiert sein kann (R³, R⁴, R⁵ und R⁶ sind alle Wasserstoff) oder einer oder mehrere von R³ bis R⁶ eine Cyanogruppe, eine Alkoxygruppe, eine Gruppe -COOR¹⁰ oder eine C_1-4-Alkylgruppe (bevorzugt Methyl) darstellen.
In einer bevorzugten Ausführungsform ist R⁵ ein Alkoxy, bevorzugt Methoxy, und sind R², R³, R⁴ und R⁶ alle H.
In einer anderen Ausführungsform ist R⁵ Cyano und sind R², R³, R⁴ und R⁶ H.
In den Verbindungen der Formel I ist X H. Es wird angenommen, dass die Hydroxylierung der Verbindung in situ an dem Kohlenstoffatom stattfindet, an dem X gebunden ist, wodurch die Verbindung aktiviert wird, wodurch sie als DNA-Alkylierungsmittel wirken kann.
Es wird angenommen, dass viele der Verbindungen der allgemeinen Formel I und Salze davon neue Verbindungen sind. Gemäß einem weiteren Aspekt der Erfindung wird eine neue Verbindung der allgemeinen Formel II oder ein Salz davon bereitgestellt
in welchen R², R³, R⁵ und R⁶ wie vorstehend definiert sind;
X¹ H ist;
Y¹ eine Abgangsgruppe ist;
R²⁰ -R⁷, -OR⁷, -NH₂ oder Ar² ist;
R⁷ wie vorstehend definiert ist;
Ar² ausgewählt ist aus
in welchen B¹ N oder CR²² ist;
Z¹ O, S, -CH=CH- oder NR²¹ ist;
R²¹ eine Amin-Schutzgruppe ist;
das oder jedes R²² ausgewählt ist aus OH, C_1-4-Alkoxy, C_1-4-Alkyl, NO₂, -NHR²¹, -NHR²⁶, -NR²⁶ ₂, -N⁺R²⁶ ₃, -CN, Cl, Br, I, -NHCOR²⁵, -COOH, -CONHR⁷ und -COOR⁷;
p eine ganze Zahl im Bereich von 0 bis 4 ist;
R²³ H, COAr³, -CONH₂, -COOH, -CONHR⁷ oder -COR⁷ ist oder eine Amin-Schutzgruppe ist;
das oder jedes R²⁴ ausgewählt ist aus OH, C_1-4-Alkoxy, C_1-4-Alkyl, NO₂, -NHR²¹, -NHR²⁶, -NR²⁶ ₂, -N⁺R²⁶ ₃, -CN, Cl, Br, I, -NHCOR²⁵, -COOH, -CONHR⁷ und -COOR⁷;
q 0, 1 oder 2 ist;
R²⁵ ausgewählt ist aus C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, gegebenenfalls substituiertem Heteroalkyl, C_7-12-Aralkyl, Ar³ und einem Liganden;
R²⁶ ausgewählt ist aus C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, C_7-12-Aralkyl und gegebenenfalls substituiertem Heteroaryl; und
Ar³ ausgewählt ist aus den gleichen Gruppen wie Ar²,
mit der Maßgabe, dass nicht mehr als ein R²² oder R²⁴ in irgendeinem Ring eine Gruppe Ar³ beinhaltet.
Ar³ ist bevorzugt
Verbindungen der Formel II oder IIA, in welchen primäre oder sekundäre Aminstickstoffatome geschützt sind, werden im allgemeinen von der Schutzgruppe befreit bevor sie in pharmazeutischen Zusammensetzungen verwendet werden. Beispiele für Aminschutzgruppen R²¹ oder R²³ sind Benzyl, Benzyloxycarbonyl, tertiär-Butyloxycarbonyl (BOC), Fluorenyl-N-methoxycarbonyl (FMOC) und 2-[Biphenylyl-(4)]-propyl-2-oxycarbonyl. Wenn im Molekül mehr als eine Aminogruppe geschützt ist, können die Schutzgruppen gleich oder verschieden sein. In einer besonders brauchbaren Reihe von Verbindungen der allgemeinen Formel II und IIA ist R²⁰ OR⁷ und R⁷ eine Aminschutzgruppe, die von R¹CO verschieden ist. In einer anderen bevorzugten Reihe ist R²⁰ von OR⁷ verschieden.
In Verbindungen der allgemeinen Formel II und IIA ist R²⁰ bevorzugt Ar² und/oder wird Y¹ bevorzugt ausgewählt aus -OCOOR¹⁷, -OCONHR¹⁸, Cl, Br, I oder -OSOOR¹⁹, worin R¹⁷, R¹⁸ und R¹⁹ ausgewählt sind aus C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, C_7-12-Aralkyl und gegebenenfalls substituiertem Heteroaryl. Am meisten bevorzugt ist die Abgangsgruppe ein Halogenatom, bevorzugt Chlor.
Die vorliegende Erfindung stellt ferner pharmazeutische Zusammensetzungen bereit, die Verbindungen der Formel I oder IA und einen pharmazeutisch verträglichen Exzipienten umfassen. Die pharmazeutischen Zusammensetzungen können für die intramuskuläre, intraperitoneale, intrapulmonare, orale oder, am meisten bevorzugt, die intravenöse Verabreichung geeignet sein. Die Zusammensetzungen können geeignete Matrices enthalten, z.B. zur gesteuerten oder verzögerten Freigabe. Die Zusammensetzungen können in Form von Lösungen, Feststoffen, z.B. Pulvern, Tabletten oder Implantaten, vorliegen, und sie können die Verbindung der Formel I in fester oder gelöster Form umfassen. Die Verbindung kann in einem teilchenförmigen Arzneimittelzufuhrsystem, z.B. in einer flüssigen Formulierung, enthalten sein. Spezielle Beispiele für geeignete Exzipienten beinhalten Lactose, Sucrose, Mannit und Sorbit; Stärke von Mais, Weizen, Reis, Kartoffeln und anderen Pflanzen; Cellulose, wie Methylcellulose, Hydroxypropylmethylcellulose oder Natriumcarboxymethylcellulose; Gummen, einschließlich Gummiarabicum und Tragant; und Proteine, wie Gelatine und Kollagen. Falls gewünscht, können Zerfall- oder Solubilisierungsmittel zugegeben werden, wie vernetztes Polyvinylpyrrolidon, Agar-Agar und Alginsäure oder ein Salz davon, wie Natriumalginat. Feste Zusammensetzungen können die Form von Pulvern und Gelen haben, sind aber zweckmäßiger geformt, wie Tabletten, Cachets oder Kapseln (einschließlich Spansules). Alternativen sind speziellere Arten der Formulierung, einschließlich Liposomen, Nanosomen und Nanopartikeln.
Verbindungen der Formel I können unter Verwendung von Techniken hergestellt werden, die analog zu denen sind, die von Boger et al., 1997, a.a.O., zusammengefasst sind. Es ist zweckmäßig, die DNA-Alkylierungsuntereinheit in einer Reihe von Schritten zu bilden und dies über das Stickstoffatom des Dihydropyrrol- oder Tetrahydrochinolin (C)-Rings an das Molekül zu binden. Die DNA-Alkylierungsuntereinheit kann konjugiert sein an DNA-Bindungsuntereinheiten, die hergestellt sind wie in Boger et al., 1997, a.a.O., beschrieben, z.B. die in dieser Literaturstelle beschriebenen PDE-I- und PDE-II-Untereinheiten. Die DNA-Bindungsuntereinheiten sind jene, die die Gruppen Ar und Ar¹ beinhalten.
Nach einem weiteren Aspekt der Erfindung wird ein neues Syntheseverfahren bereitgestellt, in dem eine Verbindung der Formel III oder IIIA
worin R², R³, R⁴, R⁵ und R⁶ wie vorstehend definiert sind;
X² H ist; und
Y² eine Abgangsgruppe oder ein Hydroxyl oder eine geschützte Hydroxylgruppe ist;
umgesetzt wird mit einer Verbindung der allgemeinen Formel IV R²⁷COY³ IVworin R²⁷ ausgewählt ist aus C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, C_7-12-Aralkyl, gegebenenfalls substituiertem Heteroaryl und Ar⁴;
Ar⁴ ausgewählt ist aus
in denen B² N oder CR³² ist;
Z² O, S, -CH=CH- oder NR³³ ist;
das oder jedes R²⁸ ausgewählt ist aus C_1-4-Alkoxy, C_1-4-Alkyl, NO₂, CN, Cl, Br, I, -NHR³³, -NHR³⁵, -NR³⁵ ₂, -N⁺R³⁵ ₃, -NHCOR³⁴, -COOH, -CONHR³⁶ und -COOR³⁶;
r eine ganze Zahl im Bereich von 0 bis 4 ist;
R²⁹ eine Amin-Schutzgruppe ist;
R³⁰ eine Amin-Schutzgruppe, -CONH₂, -COOH, -COR³⁶ oder -COAr⁵ ist;
das oder jedes R³¹ ausgewählt ist aus C_1-4-Alkoxy, C_1-4-Alkyl, NO₂, CN, Cl, Br, I, -NHR³³, -NHR³⁵, -NR³⁵ ₂, -N⁺R³⁵ ₃, -NHCOR³⁴, -COOH, -CONHR³⁶ und -COOR³⁵;
s 0, 1 oder 2 ist;
R³² ausgewählt ist aus H, C_1-4-Alkoxy, C_1-4-Alkyl, NO₂, CN, Cl, Br, I, -NHR³³, -NHR³⁵, -NHR³⁵ ₂, -N⁺R³⁵ ₃, -NHCOR³⁴, -COOH, -CONHR³⁶ und -COOR³⁶;
R³³ eine Amin-Schutzgruppe ist;
R³⁴ ausgewählt ist aus Ar⁵, C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, C_7-12-Aralkyl, gegebenenfalls substituiertem Heteroaryl und einem Liganden;
R³⁵ ausgewählt ist aus C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, C_7-12-Aralkyl und gegebenenfalls substituiertem Heteroaryl;
R³⁶ ausgewählt ist aus C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, C_7-12-Aralkyl, gegebenenfalls substituiertem Heteroaryl und einem Liganden;
Ar⁵ ausgewählt ist aus den gleichen Gruppen wie Ar⁴; und
Y³ eine Abgangsgruppe ist;
mit der Maßgabe, dass nicht mehr als eine von R²⁸ oder R³¹ in irgendeinem Ring eine Gruppe Ar⁵ enthält.
Ar⁵ ist bevorzugt
Y³ wird z.B. ausgewählt aus den bevorzugten Abgangsgruppen, die oben für Y aufgeführt sind. Am zweckmäßigsten ist die Definition von Y³ Cl. Alternativ kann es sich bei der Gruppe Y³ um OH handeln. In diesem Fall kann es notwendig sein, ein Kopplungsmittel zuzugeben, um die Kupplungsreaktion zu unterstützen.
Die Reaktion zwischen der Verbindung der allgemeinen Formel III oder IIIA und der Carbonsäure oder dem Derivat der allgemeinen Formel IV wird unter Bedingungen durchgeführt, die eine solche Kupplung ermöglichen. Solche Bedingungen sind ähnlich mit jenen, die allgemein zur Bildung von Peptidbindungen verwendet werden, z.B. wie bei Peptidsyntheseverfahren verwendet.
Y² ist Hydroxy oder eine geschützte Hydroxygruppe oder eine Abgangsgruppe, die gleich wie Y sein kann oder in einem nachfolgenden Schritt in Y überführt werden kann.
Nach dem Kupplungsverfahren kann es zweckmäßig sein, eine oder mehrere der geschützten Amingruppen von der Schutzgruppe zu befreien. Wenn eine weitere Reaktion, z.B. mit anderen Derivatisierungsmitteln, wie Glycosylverbindungen, Peptiden, Polymeren usw., über eine dieser Amingruppen gewünscht ist, kann es zweckmäßig sein, nur jene von der Schutzgruppe zu befreien, an denen die nachfolgende Reaktion stattfindet, während die anderen Amingruppen in der geschützten Form bleiben. Die Auswahl von geeigneten Aminschutzgruppen und Schutz- und Deblockierungsprotokollen kann mit den üblicherweise in der Peptidchemie eingesetzten Techniken ausgeführt werden.
Es wird angenommen, dass einige der Zwischenprodukte der allgemeinen Formel III oder IIIA neue Verbindungen sein können. Eine neue Verbindung kann die allgemeine Formel V oder VA aufweisen
worin R³⁸, R³⁹, R⁴⁰, R⁴¹ und R⁴² ausgewählt sind aus H, C_1-4-Alkyl, -OH, C_1-4-Alkoxy, -CN, Cl, Br, I, NO₂, NHR⁴³, -NHCOR⁴⁴, -NR⁴⁵ ₂, -N⁺R⁴⁵ ₃, -COOH, -CONHR⁴⁶ und -COOR⁴⁶,
X² H ist;
Y² eine Abgangsgruppe oder eine Hydroxyl- oder geschützte Hydroxylgruppe ist;
R³⁷ H oder eine Aminschutzgruppe ist;
R⁴³ ausgewählt ist auf H, C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, C_7-12-Aralkyl, und gegebenenfalls substituiertem Heteroaryl, einer Aminschutzgruppe;
R⁴⁴ ausgewählt ist aus C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, C_7-12-Aralkyl, gegebenenfalls substituiertem Heteroaryl und einem Liganden;
R⁴⁵ jeweils ausgewählt ist aus C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, C_7-12-Aralkyl und gegebenenfalls substituiertem Heteroaryl; und
R⁴⁶ ausgewählt ist aus C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, C_7-12-Aralkyl, gegebenenfalls substituiertem Heteroaryl und einem Liganden.
In den Verbindungen der allgemeinen Formel III, in der Verbindung, die für eine Reaktion mit einem Carbonsäurederivat bereit ist, z.B. der allgemeinen Formel IV, ist R²⁴ H. Vorstufen derartiger Verbindungen weisen das Ringstickstoffatom in geschützter Form auf, d.h., worin R³⁷ eine Schutzgruppe darstellt.
In Verbindungen der Formel V kann die Gruppe Y² ausgewählt sein unter denjenigen, die oben für die Abgangsgruppe Y definiert sind. Die Art der Gruppe Y² sollte unter Berücksichtigung der Art des Reagenz, mit dem die Verbindung der Formel III/V in einem anschließenden Schritt umgesetzt werden soll, z.B. mit einer Verbindung der allgemeinen Formel IV, ausgewählt werden, so dass die Gruppe Y² nicht deaktiviert ist und kein Dimer von Verbindungen der Formel III oder V bildet. Geeignete Beispiele für Abgangsgruppen Y² sind Cl und Br.
Die Verbindung der Formel III oder IIIA und V oder VA kann in einem vorbereitendem Schritt hergestellt werden, einschließlich eines Cyclisierungsschritts in Anwesenheit eines Katalysators unter Verwendung einer Anilinverbindung als Ausgangsmaterial mit einem Abgangsgruppensubstituenten Y⁴ am Kohlenstoffatom in ortho-Position zum Amingruppensubstituenten und einem N-Substituenten, der eine Gruppe -CH₂CH=CHY⁵ darstellt, worin das Anilinderivat unter Cyclisierungsbedingungen unter Bildung eines Dihydropyrrol- oder eines Di- oder Tetrahydrochinolinrings umgesetzt wird. Die Ausgangsverbindung für eine derartige Reaktion kann durch die allgemeine Formel VI dargestellt sein
in der R³⁸ bis R⁴² und X² gleich sind wie in der Verbindung der Formel IV;
R⁴⁷ eine Aminschutzgruppe ist,
eine von Z¹ und Z² Y⁵ ist und die andere H ist;
Y⁵ eine Abgangsgruppe ist, die sich von Y² unterscheidet oder gleich ist; und
Y⁴ eine radikalische Abgangsgruppe ist.
Zur Cyclisierung unter Bildung eines Dihydropyrolrings ist die Gruppe Z¹ Y⁵ und Y⁵ ist entweder H oder eine Abgangsgruppe, bevorzugt die gleiche Gruppe wie Y², worin die Gruppe Y⁵ in diesem Schritt der Synthese nicht als Abgangsgruppe wirksam ist. Die Reaktion wird in Anwesenheit eines geeigneten Katalysators, gegebenenfalls in Anwesenheit einer Radikalfalle durchgeführt. Die Gruppe Y⁴ sollte eine Radikalabgangsgruppe, wie Halogen, bevorzugt Br oder I, sein. Geeignete Radikale zur Durchführung der Cyclisierungsreaktion unter Verwendung einer Verbindung VI, worin Y⁵ H ist, sind Nitroxyverbindungen, wie 2,2,6,6-Tetramethylpiperidinyloxy (TEMPO). Wenn Y⁵ eine Abgangsgruppe ist, kann die Cyclisierung in Anwesenheit eines von Azoisobutyronitril (AIBN) stammenden Radikals durchgeführt werden. Geeignete Katalysatoren für einen derartigen radikalischen Cyclisierungsschritt sind Zinnhydridverbindungen, wie Tributylzinnhydrid. Eine derartige Syntheseroute ist in den Beispielen 1 und 3 veranschaulicht.
Zur Cyclisierung unter Bildung eines 6-gliedrigen Rings ist es bevorzugt, eine Verbindung VI, worin Z² Y⁵ ist und Y⁵ eine Abgangsgruppe ist, bevorzugt eine Trialkylstannylgruppe, zu verwenden und die Reaktion in Anwesenheit eines geeigneten Palladium-Katalysatorkomplexes durchzuführen, wie Tetrakis(triphenylphosphin)palladium(0), Bis(triphenylphosphin)palladium(II)chlorid oder Palladium(II)acetat. Das Dihydrochinolin-Zwischenprodukt wird oxidiert, um ein weiteres Zwischenprodukt zu bilden, das ein Epoxid ist, z.B. unter Verwendung eines Peroxidreagenzes. Das Epoxid-Zwischenprodukt wird mit einem geeigneten selektiven Reduktionsmittel, wie Dialkylaluminiumhydrid, reduziert, um den entsprechenden Tetrahydrochinolinalkohol zu bilden, der anschließend halogeniert wird, z.B. mit Tetrachlorkohlenstoff/Triphenylphosphin. Diese Reaktion wird in Beispiel 2 veranschaulicht.
Die Verbindung der allgemeinen Formel VI kann durch Alkylierung des Natriumsalzes des entsprechenden Anilinderivats mit einer 1,3-Dihalogenpropen-Verbindung hergestellt werden.
Das Carbonsäurederivat der allgemeinen Formel V kann mit Verfahren hergestellt werden, die allgemein in Boger et al., 1997, a.a.O., beschrieben werden, z.B. können PDE-I und PDE-II mit der Umezawa-Synthese, der Rees-Moody-Synthese, der Magnus-Synthese, der Cava-Rawal-Synthese, der Boger-Coleman-Synthese, der Sundberg-Synthese, der Martin-Synthese, der Tojo-Synthese hergestellt werden. Indol-2-carbonsäure ist im Handel verfügbar. Andere Analoga der DNA-Bindungsuntereinheiten der Duocarmycine und reaktive Carbonsäurederivate davon werden von Boger et al., a.a.O., und in US-A-5843937 beschrieben.
Die vorliegende Erfindung betrifft die Bildung einer Reihe von Prodrugs, die in ihrem normalen Zustand eine geringe oder keine zytotoxische Wirkung aufweisen, aber hochzytotoxisch sind (d.h. eine substantiell erhöhte Zytotoxizität aufweisen), wenn sie durch Oxidation oder Hydroxylierung durch CYP-Enzyme aktiviert werden. Dies liefert ein eigenständig das Ziel findendes Arzneimittelzufuhrsystem, in dem eine nicht zytotoxische (oder vernachlässigbar zytotoxische) Verbindung einem Patienten verabreicht werden kann, z.B. in systemischer Weise, die Verbindung dann an der Stelle der Tumorzellen aktiviert wird (intratumorale Aktivierung), um eine hochzytotoxische Verbindung zu bilden, welche die Tumorzellen abtötet. Die Tatsache, dass die CYP-Isoformen nicht durch normale Zellen exprimiert werden, bedeutet, dass die Aktivierung der Verbindung nur an der Stelle der Tumorzellen stattfindet und daher nur Tumorzellen beeinträchtigt werden, wodurch ein eigenständig das Ziel findendes System bereitgestellt wird.
Die Prodrugs der vorliegenden Erfindung haben den markanten Vorteil, dass sie bei der Behandlung von Tumoren an jeder Stelle im Körper nützlich sind, was bedeutet, dass sogar Tumoren, die Metastasen eingegangen sind (die normalerweise einer ortsspezifischen Therapie nicht zugänglich sind), behandelt werden können.
Bei dem Prodrug kann es sich um ein Antitumor-Prodrug handeln. Beispiele für Tumoren beinhalten Krebsarten (maligne Neoplasmen) ebenso wie andere Neoplasmen, z.B. gutartige Tumore. Das Prodrug kann durch Hydroxylierung durch Isoformen von Cytochrom P450 aktiviert werden.
Bei einer Variante des normalen Verfahrens, das auf der CYP-Expression in Tumorzellen zur selektiven Hydroxylierung und damit Aktivierung der Prodrugs beruht, kann die Selektivität zwischen Tumorgewebe und normalem Gewebe in einem zweistufigen Verfahren verbessert werden. Das heißt (a) Infektion von Tumorzellen mit einem viralen Vektor, der ein Cytochrom P450-Gen und ein Cytochrom P450-Reduktase-Gen trägt, wobei die Expression von Cytochrom P450-Gen und Cytochrom P450-Reduktase-Gen durch Tumorzellen die enzymatische Umwandlung eines chemotherapeutischen Mittels in die zytotoxische Form im Tumor ermöglicht, wodurch die Tumorzellen selektiv für das chemotherapeutische Prodrug- Mittel sensibilisiert werden, (b) Kontaktieren von Tumorzellen mit dem chemotherapeutischen Prodrug-Mittel, wodurch Tumorzellen selektiv abgetötet werden.
Diese Prodrugs sind Benz(e)dihydroindol- oder Benztetrahydrochinolin-Derivate. Ihre spezifische Verwendung als Antitumor-Prodrugs ist vorher weder vorgeschlagen oder offenbart worden, noch gab es eine Annahme, dass sie Prodrugs mit einer aktivierten hydroxylierten Form sind. Wenn Verbindungen der Formel (I) vorher identifiziert und hergestellt worden sind, sind sie aufgrund ihrer schlechten (oder vernachlässigbaren) Zytotoxizität nicht als Antitumormittel erkannt worden. So liefert die intratumorale Hydroxylierung der Prodrugs der vorliegenden Erfindung ihnen eine überraschende und unerwartete Wirksamkeit.
Die hydroxylierten Formen der Prodrugs sind potente DNA-Alkylierungsmittel, die in der kleinen Furche der DNA binden und die Purinbasen an der Position N3 binden. Als solche sind sie potente zytotoxische Mittel, deren genauer biologischer Wirkmechanismus unbekannt ist, aber die Zerstörung der Templatfunktion und anderer Funktionen der DNA beinhaltet. Die allgemeine Inhibierung der Templatfunktion von DNA beeinträchtigt alle sich teilenden Zellen im Körper und ist im allgemeinen für sie zytotoxisch und führt zu nicht akzeptablen Nebeneffekten in einer therapeutischen Sitzung. Die zielgerichtete Produktion von hydroxylierten Formen nur in Tumorzellen, die bestimmte Isoformen von Cytochrom P450 überexprimieren, führt aber zu einer spezifischen zytotoxischen Wirkung nur in diesen Zellen. Die nicht hydroxylierten Formen sind für alle Zellen im wesentlichen ungiftig.
Die folgenden Beispiele erläutern die Erfindung.
BEISPIEL 1
1.1 N-(tert.Butyloxycarbonyl)naphthylamin
Eine Lösung von 2-Naphtoesäure (100 mg, 0,581 mmol) in tert.-BuOH (33 ml) wurde mit Et₃N (96 μl, 0,7 mmol) und Molekularsieben von 4 Å (1 g) behandelt. Diphenylphosphorylazid (0,15 ml, 0,7 mmol) wurde zugegeben und die Reaktionsmischung wurde unter Rückfluss 14 h erwärmt. Die Mischung wurde auf 25°C abgekühlt und das Lösungsmittel im Vakuum entfernt. Der Rückstand wurde in EtOAc (10 ml) gelöst und die organische Phase mit 10% wässrigem HCl (3 × 15 ml) gewaschen, getrocknet (MgSO₄) und konzentriert. Reinigung durch Flash-Chromatographie (SiO₂, 10% EtOAc in Hexanmischung) lieferte 2 (0,108 mg, 77%) als hellgelben Feststoff. FABMS (NBA/Nal) 243 ([M + H]⁺ erwartet 243), 269 ([M + Na]⁺ erwartet 269).
1.2 2-Naphthylamin
Die Verbindung 1.1 (1,5 g, 6,17 mmol) wurde in EtOAc (10 ml) gelöst, wozu 2,5 M HCl in EtOAc gegeben wurde. Die Reaktionsmischung wurde 30 min gerührt.
Die sich ergebende Lösung wurde dann mit gesättigter wässriger NaHCO₃ (50 ml) verdünnt und mit EtOAc (2 × 25 ml) extrahiert. Die vereinten organischen Schichten wurden getrocknet (MgSO₄) und konzentriert. Der Rückstand wurde aus 20% EtOAc in Hexan umkristallisiert, um 3.3 (0,74 g, 84%) als hellbraune Kristalle zu ergeben: ¹H-NMR (250 MHz, CDCl₃) δ ppm 7,12–7,32 (m, 3H), 6,96 (t, 1H), 6,80 (t, 1H), 6,56 (s, 1H), 6,52 (dd, 1H), 3,46 (br s, 2H); FAB MS (NBA/Nal) 143 ([M + H]⁺ erwartet 143), 165 ([M + Na]⁺ erwartet 165).
1.3 1-Brom-2-naphthylamin
Eine Lösung von 1.2 (100 mg, 0,7 mmol), TsOH (48 mg, 0,28 mmol) in THF (6 ml) wurde gerührt und auf 0°C gekühlt. Zu der sich ergebenden Mischung wurden NIS (125 mg, 0,56 mmol) und THF (6 ml) gegeben und man ließ die Lösung auf 25°C aufwärmen. Nach 3 h wurde zusätzlich NIS (31 mg, 0,14 mmol) zugegeben. Nach 1 h wurde die Mischung mit 10% wässrigem NaHCO₃ (10 ml) verdünnt und mit CHCl₃ (3 × 10 ml) extrahiert. Die organischen Schichten wurden vereint, getrocknet (MgSO₄) und konzentriert. Der Rückstand wurde durch Flash-Chromatographie (SiO₂, 30% EtOAc in Hexan) gereinigt, um 1.3 (110 mg, 59%) als hellbraunes Öl zu ergeben: ¹H-NMR (250 MHz, CDCl₃) δ ppm 8,04 (d, 1H), 7,68 (d, 1H), 7,62 (d, 1H), 7,50 (t, 1H), 7,28 (t, 1H), 7,00 (d, 1H), 4,40 (br s, 2H); FABMS (NBA/Nal): 221 ([M + H]⁺ erwartet 221), 243 ([M + Na]⁺ erwartet 243).
1.4 N-Di(tert.-butyloxycarbonyl)-1-brom-2-naphthylamin
Eine Lösung von 1.3 (100 mg, 0,37 mmol) in CH₂Cl₂ (5 ml) wurde mit Boc-Dicarbonat (219 mg, 1,0 mmol), Et₃N (62 μl, 0,45 mmol) und DMAP (4,5 mg, 0,037 mmol) behandelt. Die Reaktion wurde 24 h bei 50°C unter Rückfluss gehalten. Die sich ergebende Mischung wurde mit H₂O (2 × 10 ml), 5% HCl (10 ml) und schließlich wiederum H₂O (10 ml) gewaschen. Die organischen Schichten wurden vereint, getrocknet (MgSO₄) und konzentriert. Die Reaktion wurde durch Flash-Chromatographie (SiO₂, CH₂Cl₂/Hexan 1:1) gereinigt, um 1.4 (125 mg, 72%) als farblosen Feststoff zu liefern. ¹H-NMR (250 MHz, CDCl₃) δ ppm 8,32 (d, 1H), 7,86 (d, 1H), 7,80 (d, 1H), 7,52–7,68 (m, 2H), 7,32 (d, 1H), 1,50 (s, 18H); FABMS (NBA/NaL) 442 ([M + H]⁺ erwartet 422), 446 ([M + Na]⁺ erwartet 446).
1.5 N-(tert.-Butyloxycarbonyl)-1-brom-2-naphthylamin
Die Verbindung 1.4 (50 mg, 0,107 mmol) wurde mit einer Lösung von TFA (10 μl, 0,213 mmol) in CH₂Cl₂ (2 ml) behandelt und 45 min gerührt. Die Mischung wurde konzentriert und aus Hexan umkristalliert, um 1.5 (13 mg, 34%) als weiße Kristalle zu ergeben. FABMS (NBA/Nal) 323 ([M + H]⁺ erwartet 323), 346 ([M + Na]⁺ erwartet 346).
1.6 N-(tert.-Butyloxycarbonyl)-N-(3-chlor-2-propen-1-yl)-1-brom-2-naphthylamin
Eine Lösung von 1.5 (50 mg, 0,14 mmol) und DMF (5 ml) wurde auf 0°C gekühlt und NaH (9,8 mg, 0,408 mmol) wurde zugegeben. Die sich ergebende Mischung wurde 15 min gerührt und 1,3-Dichlorpropen (38 μl, 0,41 mmol) wurde zugegeben. Man ließ die Lösung auf 25°C aufwärmen und rührte 90 min. Die Mischung wurde konzentriert und der Rückstand wurde durch Flash-Chromatographie (SiO₂, 10% EtOAc in Hexan) gereinigt, um 1.6 (56 mg, 93%) als klaren Film zu liefern. FABMS (NBA/Nal) 396 [M + H]⁺ erwartet 396), 418 ([M + Na]⁺ erwartet 418).
1.7 3-(tert.-Butyloxycarbonyl)-2-(chlormethyl)-1,2-dihydro-3N-benz[e]indol
Eine Lösung von 1.6 (55 mg, 0,12 mmol) und AIBN (8 mg, 0,05 mmol) in wasserfreiem Toluol (5 ml) wurde 15 min mit N₂ entgast und dann auf 90°C erwärmt. Bu₃SnH (65 μl, 0,25 mmol) wurde in vier Portionen über 1 h zugegeben und die sich ergebende Mischung wurde 1 h gerührt. Die Lösung wurde dann konzentriert und durch Flash-Chromatographie (SiO₂, 10% EtOAc in Hexan) gereinigt, um unreines 3.8 zu erhalten. Der Feststoff wurde dann in EtOAc (2 ml), zu dem 1 M KF-Lösung (1 ml) in EtOAc (1 ml) zugegeben worden war, gelöst. Die Lösung wurde 45 min gerührt, wonach der unlösliche Niederschlag filtriert wurde und die verbleibende Lösung konzentriert wurde, um reines 1.7 (34 mg, 87%) als hellgelben, öligen Film zu ergeben. FABMS (NBA/Nal) 317 (M + H]⁺ erwartet 317).
1.8 1-(Chlormethyl)-3-[(5-methoxyindol-2-yl)carbonyl]-1,2-dihydro-3H-benz[e]indol
Verbindung 1.7 (10 mg, 0,03 mmol) wurde mit 2,5 M HCl in EtOAc (100 μl) behandelt und die Lösung wurde 30 min gerührt. Das Lösungsmittel wurde unter einem Stickstoffstrom entfernt und der graue Rückstand wurde in DMF (1 ml) gelöst.
5-Methoxyindol-2-carbonsäure (17 mg, 0,09 mmol) und EDC (17 mg, 0,09 mmol) wurden zugegeben und die Mischung wurde 16 h gerührt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt und der Rückstand einer Flash-Chromatographie (SiO₂, EtOAc/Hexanmischung 1:1) unterworfen, um das Produkt als rotes Öl (11 mg, 94%) zu ergeben. FABMS (NBA/Nal) 391 (M + H⁺ erwartet 391).
BEISPIEL 2
2.1 2-[N-(3-(Tributylstannyl)-2-propen-1-yl)-N-((tent.-butyloxy)carbonyl)]amino-1-naphthalin
1-Benzoyl-5-(tert.-butoxycarbonyl)amino-4-iodindol (100 mg, 0,22 mmol) wurde in DMF (1 ml) gerührt und Natriumhydrid (26 mg, 0,66 mmol, 60% Dispersion in Öl, 3 Äquivalente) wurde zugegeben. Nach 15 min wurde die Suspension mit E/Z-1-Tributylstannyl-3-brompropen (270 mg, 0,66 mmol, 3 Äquivalente) behandelt und die sich ergebende Lösung wurde bei RT 16 h gerührt. Die Lösung wurde konzentriert und Wasser (10 ml) wurde zugegeben. Die wässrige Lösung wurde mit Ethylacetat (3 × 10 ml) extrahiert, die organischen Schichten vereint, getrocknet und konzentriert. Flash-Chromatographie (SiO₂, 10% Ethylacetat/Hexanmischung) ergab das Produkt (120 mg, 78%) als gelben Feststoff. FABMS (NBA/Nal): 699 (M + H⁺ erwartet 699).
2.2 1,2-Dihydro-1-((tert.-butyloxy)carbonyl)-5,6-benzochinolin
1-Benzoyl-5-[N-(3-(tributylstannyl)-2-propen-1-yl)-N-((tert.-butyloxy)carbonyl)]amino-4-iodindol (100 mg, 0,14 mmol) und Tetrakis(triphenylphosphin)palladium(0) (32 mg, 0,2 Äquivalente) wurden in Toluol (2 ml) bei 50°C unter N₂ für 4 h gerührt. Das Lösungsmittel wurde dann im Vakuum entfernt. Chromatographie (SiO₂, 10% Ethylacetat/Hexanmischung) ergab das Produkt als rotes Öl (38 mg, 99%). FABMS (NBA/Nal): 282 (M + H⁺ erwartet 282).
2.3 3,4-Epoxy-1-((tert.-butyloxy)carbonyl)-1,2,3,4-tetrahydro-5,6-benzochinolin
1,2-Dihydro-1-((tert.-butyloxy)carbonyl)-5,6-benzochinolin (100 mg, 036 mmol) und MCPBA (91 mg, 0,54 mmol, 1,5 Äquivalente) wurden in CH₂Cl₂ (2 ml) bei –30°C unter N₂ für 6 h gerührt. Das Lösungsmittel wurde dann im Vakuum entfernt. Chromatographie (SiO₂, 10% Ethylacetat/Hexanmischung) ergab das Produkt (101 mg, 95%). FABMS (NBA/Nal): 298 (M + H⁺ erwartet 298).
2.4 4-Hydroxy-1-((tert.-butyloxy)carbonyl)-1,2,3,4-tetrahydro-5,6-benzochinolin
3,4-Epoxy-1-((tert.-butyloxy)carbonyl)-1,2,3,4-tetrahydro-5,6-benzochinolin (100 mg, 0,34 mmol) wurde mit Dibal-N (91 mg, 0,54 mmol, 1,5 Äquivalente) in THF (2 ml) bei –78°C bis –30°C unter N₂ behandelt. Nach 1 h wurde die Reaktion durch Zugabe von Wasser (2 ml) gequencht und die sich ergebende Lösung wurde mit Ethylacetat (3 × 10 ml) extrahiert, die organischen Schichten vereint, getrocknet und konzentriert. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum entfernt. Chromatographie (SiO₂, 10% Ethylacetat/Hexanmischung) ergab das Produkt (55 mg, 54%) als farblosen Feststoff. FABMS (NBA/Nal): 300 (M + H⁺ erwartet 300), 322 (M + Na⁺ erwartet 322).
2.5 4-Chlor-1-((tert.-butyloxy)carbonyl)-1,2,3,4-tetrahydro-5,6-benzochinolin
4-Hydroxy-1-((tert.-butyloxy)carbonyl)-1,2,3,4-tetrahydro-5,6-benzochinolin (100 mg, 0,33 mmol) in CH₂Cl₂ (2 ml) wurde mit einer hergestellten Lösung von PPh₃ (175 mg, 0,66 mmol, 2 Äquivalente) und CCl₄ (200 μl) in CH₂Cl₂ (2 ml) bei RT behandelt. Nach 4 h wurde das Lösungsmittel im Vakuum entfernt. Chromatographie (Silicagel, 2 × 15 cm, 10% Ethylacetat/Hexanmischung) ergab das Chlorid als Öl (65 mg, 63%). FABMS (NBA/Nal): 318 (M + H⁺ erwartet 318), 340 (M + Na⁺ erwartet 340). Das Produkt kann im Anschluss von Schutzgruppen befreit werden und an eine DNA-Bindungsuntereinheit, wie 5-Methoxyindol-2-carbonsäure, durch Verfahrensschritte, die analog zu Beispiel 1.8 sind, konjugiert werden.
BEISPIEL 3 Biologische Prüfung der Verbindung 1.8
Materialien und Verfahren
3.1 Inkubationsmischungen von Testverbindung und Mikrosomen
Die Aktivierung der Testverbindung durch CYP-Enzyme erfolgte durch NADPH ergänzte Rattenlebermikrosomen. Die Inkubationsmischungen umfassten mikrosomales Protein (1 mg/ml), reduziertes Nikotinamidadenindinukleotidphosphat (NADPH, 10 mM) und Phosphatpuffer (pH 7,4, 100 mM). Die Testverbindung (0,01 bis 100 μm Endkonzentration) in DMSO (20 μl) wurde zu den mikrosomalen Inkubationsmischungen (0,5 ml) gegeben und 60 min bei 37°C inkubiert. Kontrollinkubate enthielten die Testverbindung und die mikrosomale Inkubationsmischungen wurden bei der Zeit 0 abgebrochen. Alle Inkubationen wurden durch Zugabe eines gleichen Volumens eiskaltem Acetonitril abgebrochen und 3 min mit einer Mikrofuge zentrifugiert. Aliquoten der überstehenden Lösung wurden zu Zellen in einer Kultur gegeben und die Zytotoxizität wie nachstehend beschrieben bestimmt.
3.2 Zytozoxizitätsmessung auf Basis einer Zellkultur
Zellen aus Eierstöcken von Chinahamster (Chinese Hamster Ovary (CHO)) ließ man in MEM wachsen, das mit 10% dialysiertem FBS und G418 (400 μg/ml) ergänzt war. Alle Zellen wurden mit einer ursprünglichen Dichte von 1.000 Zellen/Mulde in 96-Mulden-Platten geimpft und 24 h bei 37°C inkubiert. Aliquoten (0,1 ml) der überstehenden Lösung von Testverbindung/mikrosomal/Acetonitril wurde dann zu den CHO-Zellen gegeben. Die Zellen wurden 24 h bei 37°C, 5% CO₂, inkubiert. Nach diesem Zeitraum wurde MTT (50 μl; 2 mg/ml Stammlösung) zu jeder Mulde gegeben und die Zellen wurden weitere 4 h inkubiert. Während dieses Zeitraums wird MTT, ein Wasserstoffakzeptor-Tetrazoliumsalz durch mitochondriale Dehydrogenase von lebensfähigen Zellen in Formazan-Farbstoff reduziert. Das Medium wurde von den Zellen abgesaugt und DMSO (100 μl/Mulde) wurde zugegeben, um den gefärbten Formazan-Farbstoff zu solubilisieren. Die Extinktion des Formazan-Farbstoffs in den 96-Mulden-Platten wurde dann bei 550 nm bestimmt. Die Wirkung der mikrosomalen Aktivierung durch die Testverbindung auf die Hinderung des CHO-Zellenwachstums konnte durch Vergleich von IC₅₀ (Konzentration, welche das Zellwachstum um 50% inhibierte) mit und ohne mikrosomaler Inkubation bestimmt werden. Ergebnisse
Die Wirkung der Verbindung 3.9 und ihres Metabolismus (Aktivierungs)-Produkts auf das Überleben von Eierstockzellen des Chinahamsters in Kultur. Die Zellen wurden 24 h mit überstehenden Lösungen aus den Reaktionsmischungen von Verbindung 3.9 mit Rattenlebermikrosomen angereichert mit NADPH inkubiert. IC₅₀ stellt die Konzentration des Arzneimittels dar, die zur Inhibierung des Zellwachstums um 50% erforderlich ist. Die Werte werden als Mittel plus Standardabweichung für drei Versuche ausgedrückt. Siehe Verfahren für vollständige Einzelheiten des Metabolismus. AF = Aktivitätsfaktor, d.h. das Verhältnis von IC₅₀-Zytotoxizitätswerten erhalten für + Aktivierung mit Verbindung 1.8.

* stellt Signifikanz bei p > 0,05 dar.

Claims

Verwendung einer Verbindung der allgemeinen Formel I oder IA oder eines Salzes davon bei der Herstellung einer Zusammensetzung zur Verwendung in einem Verfahren zur therapeutischen Behandlung eines Tieres:
in welchen X H ist; Y eine Abgangsgruppe ist; R¹ -Ar, NH₂, R⁷ oder -OR⁷ ist; R², R³, R⁴, R⁵ und R⁶ jeweils unabhängig ausgewählt sind aus H, C_1-4-Alkyl, -OH, C_1-4-Alkoxy, -CN, Cl, Br, I, -NO₂, -NH₂, -NHR¹⁶, -NR¹⁶ ₂, -N⁺R¹⁶ ₃; -NHCOR⁸, -COOH, -CONHR⁹, -NHCOOR⁹ und -COOR⁹; R⁷, R⁸ und R⁹ unabhängig ausgewählt sind aus C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, C_7-12-Aralkyl, gegebenenfalls substituiertem Heteroaryl und einem Liganden; Ar ausgewählt ist aus
in welchen B N oder CR¹⁰ ist; R¹⁰ ausgewählt ist aus OH, C_1-4-Alkoxy, C_1-4-Alkyl, -NO₂, -NH₂, -CN, Cl, Br, I, -NHCOR¹⁴, -COOH, -CONHR¹⁵, -NHCOOR¹⁵, -COOR¹⁵ und H; Z O, S, -CH=CH- oder NH ist; das oder jedes R¹¹ ausgewählt ist aus OH, C_1-4-Alkoxy, C_1-4-Alkyl, -NO₂, -NH₂, -NHR¹⁶, -NR¹⁶ ₂, -N⁺R¹⁶ ₃, -CN, Cl, Br, I, -NHCOR¹⁴, -COOH, -CONHR¹⁵, -NHCOOR¹⁵ und COOR¹⁵; n eine ganze Zahl im Bereich von 0 bis 4 ist; R¹² H, -COAr¹, -CONH₂, -COOH, -COR¹⁵ oder -COOR¹⁵ ist; das oder jedes R¹³ ausgewählt ist aus OH, C_1-4-Alkoxy, C_1-4-Alkyl, -NO₂, -NH₂, -NHR¹⁶, -NR¹⁶ ₂, -N⁺R¹⁶ ₃, -CN, Cl, Br, I, -NNCOR¹⁴, -COOH, -CONHR¹⁵, -NHCOOR¹⁵ und -COOR¹⁵, m 0, 1 oder 2 ist; R¹⁴ ausgewählt ist aus C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, gegebenenfalls substituiertem Heteroaryl, C_7-12-Aralkyl, Ar¹ und einem Liganden; R¹⁵ ausgewählt ist aus C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, C_7-12-Aralkyl und gegebenenfalls substituiertem Heteroaryl und einem Liganden; das oder jedes R¹⁶ unabhängig ausgewählt ist aus C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, C_7-12-Aralkyl und gegebenenfalls substituiertem Heteroaryl; und Ar¹ ausgewählt ist aus den gleichen Gruppen wie Ar; mit der Maßgabe, dass nicht mehr als eine Gruppe R¹¹ oder R¹³ in irgendeinem Ring eine Gruppe Ar¹ beinhaltet.
Verwendung nach Anspruch 1, in welcher das Tier ein Mensch ist.
Verwendung nach Anspruch 1 oder Anspruch 2, wobei es sich um eine Tumorbehandlung handelt.
Verwendung nach irgendeinem vorhergehenden Anspruch, bei der Y ausgewählt ist aus -OCOOR¹⁷, -OCONHR¹⁸, Cl, Br, I und -OSOOR¹⁹, wobei R¹⁷, R¹⁸ und R¹⁹ ausgewählt sind aus C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, C_7-12-Aralkyl und gegebenenfalls substituiertem Heteroaryl; vorzugsweise Cl.
Verwendung nach irgendeinem vorhergehenden Anspruch, bei der Ar¹
ist.
Verwendung nach irgendeinem vorhergehenden Anspruch, bei der R¹ Ar ist.
Verwendung nach Anspruch 6, bei der Ar eine Gruppe
ist.
Verwendung nach Anspruch 7, bei der n mindestens 1 ist und eine der Gruppen R¹¹ der Gruppen Ar -NHCOAr¹ ist.
Verwendung nach Anspruch 8, bei der Ar¹ eine Gruppe
ist.
Verwendung nach Anspruch 9, bei der in Ar¹ n mindestens 1 ist und R¹¹ von -NHCOAr¹ verschieden ist oder n 0 ist.
Verwendung nach Anspruch 6, bei der Ar eine Gruppe
ist.
Verwendung nach Anspruch 11, wobei R¹² -COAr¹ ist.
Verwendung nach Anspruch 12, bei der Ar¹ eine Gruppe
ist.
Verwendung nach Anspruch 13, bei der in Ar¹ R¹² verschieden von -COAr¹ ist.
Verwendung nach irgendeinem vorhergehenden Anspruch, bei der R² H ist.
Verwendung nach irgendeinem vorhergehenden Anspruch, bei der R³ H ist.
Verwendung nach irgendeinem vorhergehenden Anspruch, bei der R⁴ H ist.
Verwendung nach irgendeinem vorhergehenden Anspruch, bei der R⁵ H, C_1-4-Alkoxy oder -CN, vorzugsweise MeO- oder H, ist.
Verwendung nach irgendeinem vorhergehenden Anspruch, bei der R⁶ H ist.
Verbindung der allgemeinen Formel 1 wie in irgendeinem der Ansprüche 1 und 4 bis 19 definiert zur Verwendung bei der therapeutischen Behandlung eines Tieres.
Pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend eine Verbindung der allgemeinen Formel 1 wie in irgendeinem der Ansprüche 1 und 4 bis 19 definiert und einen pharmazeutisch verträglichen Exzipienten.
Verbindung der allgemeinen Formel II oder IIA oder ein Salz davon
in welchen R², R³, R⁵ und R⁶ wie vorstehend definiert sind; X¹ H ist; Y¹ eine Abgangsgruppe ist; R²⁰ R⁷, OR⁷, -NH₂ oder Ar² ist; R⁷ ausgewählt ist aus C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, C_7-12-Aralkyl, gegebenenfalls substituiertem Heteroaryl und einem Liganden; Ar² ausgewählt ist aus
in welchen B¹ N oder CR²² ist; Z¹ O, S, -CH=CH- oder NR²¹ ist; R²¹ eine Amin-Schutzgruppe ist; das oder jedes R²² ausgewählt ist aus OH, C_1-4-Alkoxy, C_1-4-Alkyl, NO₂, -NHR²¹, -NHR²⁶, -NR²⁶ ₂, -N⁺R²⁶ ₃, -CN, Cl, Br, I, -NHCOR²⁵, -COOH, -CONHR⁷ und -COOR⁷; p eine ganze Zahl im Bereich von 0 bis 4 R²³ H, COAr³, -CONH₂, -COOH oder -COR⁷ ist oder eine Amin-Schutzgruppe ist; das oder jedes R²⁴ ausgewählt ist aus OH, C_1-4-Alkoxy, C_1-4-Alkyl, NO₂, -NHR²¹, -NHR²⁶, -NR²⁶ ₂, -N⁺R²⁶ ₃, -CN, Cl, Br, I, -NHCOR²⁵, -COOH, -CONHR⁷ und -COOR⁷; q 0, 1 oder 2 ist; R²⁵ ausgewählt ist aus C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, gegebenenfalls substituiertem Heteroalkyl, C_7-12-Aralkyl, Ar³ und einem Liganden; R²⁶ ausgewählt ist aus C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, C_7-12-Aralkyl und gegebenenfalls substituiertem Heteroaryl; und Ar³ ausgewählt ist aus den gleichen Gruppen wie Ar², mit der Maßgabe, dass nicht mehr als eine von R²² oder R²⁴ in irgendeinem Ring eine Gruppe Ar³ beinhaltet.
Verbindung nach Anspruch 22, in der Y¹ ausgewählt ist aus -OCOOR¹⁷, -OCONHR¹⁸, Cl, Br, I und -OSOOR¹⁹, worin R¹⁷, R¹⁸ und R¹⁹ ausgewählt sind aus C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, C_7-12-Aralkyl und gegebenenfalls substituiertem Heteroaryl, vorzugsweise Cl.
Verbindung nach Anspruch 22 oder Anspruch 23, in der Ar³
ist.
Verbindung nach irgendeinem der Ansprüche 22 bis 23, in der R²⁰ Ar² ist.
Verbindung nach Anspruch 25, in der Ar² eine Gruppe
ist.
Verbindung nach Anspruch 26, in der p mindestens 1 ist und eine der Gruppen R²² der Gruppe R²⁰ eine Gruppe -NHCOAr³ ist.
Verbindung nach Anspruch 27, in der Ar³
ist.
Verbindung nach Anspruch 28, in der in Ar³ p mindestens 1 ist und R²² von -NHCOAr³ verschieden ist oder p 0 ist.
Verbindung nach Anspruch 25, in der Ar² eine Gruppe
ist.
Verbindung nach Anspruch 30, in der R²³ COAr³ ist.
Verbindung nach Anspruch 31, in der Ar²
ist.
Verbindung nach Anspruch 32, in der in Ar³ R²³ von -COAr³ verschieden ist.
Verbindung nach Anspruch 22 oder Anspruch 23, in der R²⁰ von Ar² verschieden ist.
Verbindung nach irgendeinem der Ansprüche 22 bis 34, in der R¹ H ist.
Verbindung nach irgendeinem der Ansprüche 22 bis 35, in der R³ H ist.
Verbindung nach irgendeinem der Ansprüche 22 bis 36, in der R⁴ H ist.
Verbindung nach irgendeinem der Ansprüche 22 bis 37, in der R⁵ ausgewählt ist aus H, C_1-4-Alkoxy und -CN, vorzugsweise MeO-.
Verbindung nach irgendeinem der Ansprüche 22 bis 37, in der R⁶ H ist.
Verbindung nach Anspruch 22, ausgewählt aus: 3-(tert.-Butyloxycarbonyl)-1-(chlormethyl)-1,2-dihydro-3H-benz[e]indol; 1-(Chlormethyl)-3-[(5-methoxyindol-2-yl)carbonyl]-1,2-dihydro-3N-benz[e]indol; 4-Chlor-1-((tert.-butyloxy)carbonyl)-1,2,3,4-tetrahydro-5,6-benzochinolin; und 4-Chlor-1-((5-methoxyindol-2-yl)carbonyl)-1,2,3,4-tetrahydro-5,6-benzochinolin.
Verbindung nach irgendeinem der Ansprüche 22 bis 40 zur Verwendung in der therapeutischen Behandlung eines Tieres.
Pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend eine Verbindung nach irgendeinem der Ansprüche 22 bis 40 und einen pharmazeutisch verträglichen Exzipienten.
Syntheseverfahren, bei dem eine Verbindung der Formel III oder IIIA
worin R², R³, R⁴, R⁵ und R⁶ wie in Anspruch 1 definiert sind; X² H ist; und Y² eine Abgangsgruppe oder ein Hydroxyl oder eine geschützte Hydroxylgruppe ist; umgesetzt wird mit einer Verbindung der allgemeinen Formel V R²⁷COY³ IVworin R²⁷ ausgewählt ist aus C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, C_7-12-Aralkyl, gegebenenfalls substituiertem Heteroaryl und Ar⁴; Ar⁴ ausgewählt ist aus
in denen B² N oder CR³² ist; Z² O, S, -CH=CH- oder NR³³ ist; das oder jedes R²⁸ ausgewählt ist aus C_1-4-Alkoxy, C_1-4-Alkyl, NO₂, CN, Cl, Br, -NHR³³, -NHR³⁵, -NR³⁵ ₂, -N⁺R³⁵ ₃, -NHCOR³⁴, -COOH, -CONHR³⁶ und -COOR³⁶; r eine ganze Zahl im Bereich von 0 bis 4 ist; R²⁹ eine Amin-Schutzgruppe ist; R³⁰ eine Amin-Schutzgruppe, -CONH₂, -COOH, -COR³⁶ oder -COAr⁵ ist; das oder jedes R³¹ ausgewählt ist aus C_1-4-Alkoxy, C_1-4-Alkyl, NO₂, CN, Cl, Br, -NHR³³, -NHR³⁵, -NR³⁵ ₂, -N⁺R³⁵ ₃, I, -NHCOR³⁴, -COOH, -CONHR³⁶ und -COOR³⁵; S 0, 1 oder 2 ist; R³² ausgewählt ist aus H, C_1-4-Alkoxy, C_1-4-Alkyl, NO₂, CN, Cl, Br, I, -NHR³³, -NHR³⁵, -NR³⁵ ₂, -N⁺R³⁵ ₃, -NHCOR³⁴, -COOH, -CONHR³⁶ und -COOR³⁶; R³³ eine Amin-Schutzgruppe ist; R³⁴ ausgewählt ist aus Ar⁵, C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, C_7-12-Aralkyl, gegebenenfalls substituiertem Heteroaryl und einem Liganden; R³⁵ ausgewählt ist aus C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, C_7-12-Aralkyl und gegebenenfalls substituiertem Heteroaryl; R³⁶ ausgewählt ist aus C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, C_7-12-Aralkyl, gegebenenfalls substituiertem Heteroaryl und einem Liganden; Ar⁵ ausgewählt ist aus den gleichen Gruppen wie Ar⁴; und Y³ eine Abgangsgruppe ist; mit der Maßgabe, dass nicht mehr als eine von R²⁸ oder R³¹ in irgendeinem Ring NHCOAr⁵ ist.
Verfahren nach Anspruch 43, welches in Anwesenheit eines Amid-Kupplungsreagenzes durchgeführt wird.
Verfahren nach Anspruch 43 oder 44, in welchem das Produkt anschließend einem Amin-Schutzgruppenabspaltungs-Schritt unterworfen wird, in dem irgendwelche oder alle Gruppen R²⁹ (falls vorhanden) und/oder irgendwelche oder alle Gruppen R³³ (falls vorhanden) durch H ersetzt werden.
Verfahren nach irgendeinem der Ansprüche 43 bis 45, in welchem Y² ausgewählt ist aus -OCOOR¹⁷, -OCONHR¹⁸, Cl, Br, I und -OSOOR¹⁹, worin R¹⁷, R¹⁸ und R¹⁹ ausgewählt sind aus C_1-4-Alkyl, gegebenenfalls substituiertem Phenyl, C_7-12-Aralkyl und gegebenenfalls substituiertem Heteroaryl; bevorzugt Cl.
Verfahren nach irgendeinem der Ansprüche 43 bis 46, in welchem Ar⁵ ausgewählt ist aus
Verfahren nach irgendeinem der Ansprüche 43 bis 47, in welchem R²⁷ Ar⁴ ist.
Verfahren nach Anspruch 48, in welchem Ar⁴ eine Gruppe
ist.
Verfahren nach Anspruch 49, in welchem in R²⁷ r mindestens 1 ist und eine der Gruppen R²⁸ -NHCOAr⁵ ist.
Verfahren nach Anspruch 50, in welchem Ar⁵
Verfahren nach Anspruch 48, in welchem Ar⁴ eine Gruppe
ist.
Verfahren nach Anspruch 52, in welchem R³⁰ -COAr⁵ ist.
Verfahren nach Anspruch 53, in welchem in R²⁷ Ar⁵ eine Gruppe
ist.
Verfahren nach irgendeinem der Ansprüche 43 bis 54, in welchem die Verbindung der Formel III oder IIIA in einer Reihe von Vorschritten hergestellt wird, die einen Cyclisierungsschritt umfasst, in welchem eine Verbindung der allgemeinen Formel VI
worin R³⁸ bis R⁴², X² und Y² gleich sind wie in der Verbindung der Formel III; R⁴⁷ eine Amin-Schutzgruppe ist; eines von Z¹ und Z² Y⁵ ist und das andere H ist; Y⁵ eine Abgangsgruppe ist, die gleich mit Y² ist oder davon verschieden ist; und Y⁴ eine Radikal-Abgangsgruppe ist; über einen Arylradikal-Alken-Cyclisierungsschritt in Anwesenheit eines Katalysators cyclisiert wird.
Verfahren nach Anspruch 55, in welchem Z¹ Y² ist und worin der Cyclisierungsschritt in Anwesenheit eines Radikals unter Bildung eines Dihydropyrolrings durchgeführt wird.
Verfahren nach Anspruch 55, in dem das Radikal aus Azoisobutyronitril erzeugt wird oder ein 2,2,6,6-Tetramethylpiperidinyloxy-Radikal ist.
Verfahren nach Anspruch 56 oder 57, in welchem der Katalysator Tributylzinnhydrid ist.
Verfahren nach Anspruch 55, in welchem Z² Y⁵ ist, Y⁵ ein Trialkylzinnrest ist und der Cyclisierungsschritt in Anwesenheit eines Palladiumkomplexes unter Bildung eines Tetrahydrochinolins durchgeführt wird, das unter Bildung eines Epoxids oxidiert wird, wobei die Epoxide dann unter Bildung einer Alkoholverbindung reduziert werden, wobei wenn Y² von Hydroxyl verschieden ist, die Hydroxylgruppe anschließend in Y² umgewandelt wird.
Verfahren nach irgendeinem der Ansprüche 55 bis 59, in welchem Y⁴ ein Halogen, vorzugsweise I oder Br, ist.