DE60211671T2

DE60211671T2 - Verfahren zur herstellung von mit trunkamid-a verwandten verbindungen

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Publication number: DE60211671T2
Application number: DE60211671T
Authority: DE
Inventors: Fernando Albericio Palomera; Maria Josep CABA NAUDI; Ernest Giralt Lledo; Ignacio Pharma Mar S.A. MANZANARES; Ignacio Pharma Mar S.A. RODRIGUEZ
Original assignee: Pharmamar SA
Current assignee: Pharmamar SA
Priority date: 2001-04-02
Filing date: 2002-04-02
Publication date: 2007-05-10
Anticipated expiration: 2022-04-03
Also published as: JP2004534746A; AU2002251221B2; NZ528532A; MXPA03009008A; DE60211671D1; JP4249488B2; EP1373305A1; BR0208628A; CA2443207A1; ES2265494T3; US7531506B2; US20050014684A1; WO2002081506A1; EP1373305B1; WO2002081506A8; AU2002251221B8; ATE327248T1; IL158145A0; GB0108234D0

Description

Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist ein synthetisches Verfahren zur Bildung eines Trunkamids A und von verwandten Strukturen.
HINTERGRUND DER ERFINDUNG
Trunkamid A stellt ein cyclisches Heptapeptid Cyclo[D-Phe-Tzn-Thr(rPr)-Ser(rPr)-Ile-Ala-Pro) dar, das aus koloniebildenden Aszidien, Lissoclinum sp., isoliert wurde. Trunkamid A wurde erstmals von Bowden und Mitarbeitern (Carroll, A.R.; Coll, J.C.; Bourne, D.J.; McLeod, J.K.; Zabriskie, T.M.; Ireland, CM.; Bowden, B.F. Aust J. Chem. 1996, 49, 659–667) isoliert, die absolute Konfiguration des Stereozentrums exocyclisch zum heterocyclischen Ring wurde jedoch der L-Konfiguration zugeordnet. In jüngerer Zeit haben Wipf und Mitarbeiter erstmals nachgewiesen, dass die initiale Zuordnung fälschlicherweise erfolgte (Wipf, P.; Uto, Y. Tetrahedron Lett. 1999, 40, 5165–5169) und haben später nachgewiesen, dass das Stereozentrum an C(45) eine D-Konfiguration aufweist (Wipf P.; Uto, Y. J. Org. Chem. 2000, 65, 1037–1049).
Folglich sieht die Struktur von Trunkamid A wie folgt aus:
D-Phe-Tzn wird aus zwei Aminosäuren gebildet, auf die als auf Aminosäuren eins und sieben des Cycloheptapeptids verwiesen wird, wobei D-Phe für Aminosäure sieben steht.
Trunkamid A weist eine viel versprechende Antitumoraktivität auf und stellt den erfindungsgemäßen Gegenstand von WO 9739025 dar.
Im Artikel in J. Org. Chem. 2000, 65, 1037–1049, stellen Wipf und Mitarbeiter eine Synthese von Trunkamid A bereit, die einen Ringschluss in Lösung zwischen Alanin und Isoleucin zur Bildung eines Cycloheptapeptids mit einem Oxazolin anstelle des Thiazolinrings beinhaltet. Trunkamid A wird dann durch weitere Verarbeitung erhalten. Die Autoren erwähnen, dass sie andere Möglichkeiten für einen Ringschluss, wie zum Beispiel das Prolin-/Phenylalaninamid, untersucht haben, aber nicht in der Lage waren, eine brauchbare Alternative bereitzustellen.
Wipf und Mitarbeiter synthetisierten für ihre Untersuchung Trunkamid A, das als die folgende Formel 31 gezeigt wird, und Isomere mit den folgenden Strukturen:
Eine weitere Synthese in Lösung von Trunkamid A von McKeever und Pattenden kann nun auch in Tetrahedron Letters 42 (2001) 2573–2577, eingesehen werden.
Die Synthese von nicht mit Trunkamid A verwandten Heptapeptiden ist in J. Org. Chem. 64, 3095–3101 (1999) und J. Am. Chem. Soc. 116, 1746–1752 (1994), beschrieben.
ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG
Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist eine neue Synthese von Trunkamid A und verwandten Verbindungen, zusammen mit neuen Derivaten von Trunkamid A.
Gegenstand der Erfindung ist insbesondere die Herstellung eines Cycloheptapeptids durch eine Festphasensynthese eines linearen Heptapeptid-Präkursors.
Die Erfindung betrifft die Herstellung eines Cycloheptapeptids mit einem 5-gliedrigen heterocyclischen Ring als Teil der Hauptkette einer Aminosäure, wie zum Beispiel Thiazolin. Zu diesem Zweck betrifft die Erfindung die Herstellung eines Cycloheptapeptids durch eine Festphasensynthese eines linearen Heptapeptid-Präkursors, wobei der lineare Präkursor den Ring einschließt oder funktionelle Gruppen einschließt, die zur Bildung des Rings geeignet sind. In diesem erfindungsgemäßen Aspekt umfasst das Verfahren die Festphasensynthese eines zur Cyclisierung angeordneten linearen Peptid-Präkursors, wobei der Präkursor entweder für die heterocyclische Ringbildung angeordnet wird oder den heterocyclischen Ring enthält, Cyclisierung des linearen Heptapeptids und gegebenenfalls Bildung des heterocyclischen Rings.
Der 5-gliedrige heterocyclische Ring stellt die Formel dar, worin X unabhängig O, S oder NH darstellt; jedes Y unabhängig C oder CH darstellt; Z
unabhängig CH oder CH₂ darstellt; R_g für H oder eine organische Gruppe steht oder abwesend ist; und jede gestrichelte Linie eine zulässige zweite Bindung anzeigt.
Folglich nehmen durch dieses erfindungsgemäße Verfahren hergestellte Produkte die folgende Form an:
worin Aaa₂, Aaa₃, Aaa₄, Aaa₅ und Aaa₆ unabhängig α-Aminosäurereste darstellen, R₁ für H oder eine organische Gruppe steht; R_a für H oder eine Alkylgruppe steht und R_g, X, Y, Z und die gestrichelte Linie wie definiert sind. Der heterocyclische Ring wird durch Fusion eines Teils einer Aminosäure Aaa₁ mit einer Aminosäure Aaa₇ gebildet.
Das erfindungsgemäße synthetische Verfahren ermöglicht die Bildung neuer Verbindungen, wie zum Beispiel denen der folgenden Formel (III):
Formel III worin Aaa₂, Aaa₃, Aaa₄, Aaa₅ und Aaa₆ unabhängig gegebenenfalls α-Aminosäuren der L- oder D-Konfiguration darstellen; worin Aaa₁ mit Aaa₇ einen fünfgliedrigen Aminoazol-Heteroring darstellt; worin R₁, R₂, R₃, R₄, R₅, R₆, R₇, R₈ jeweils unabhängig H oder eine organische Gruppe darstellen, die aus der Gruppe ausgewählt ist, bestehend aus einer Alkylgruppe, einer Alkenylgruppe, einer Arylgruppe, einer Aralkylgruppe und ihren substituierten Derivaten mit einer Hydroxygruppe, einer Mercaptogruppe, einer Aminogruppe, einer Guanidinogruppe, einer Halogengruppe; worin X unabhängig O, S oder NH darstellt; worin R_a, R_b, R_c, R_d, R_e, R_f und R_g jeweils unabhängig H oder eine organische Gruppe darstellen, die aus der Gruppe ausgewählt ist, bestehend aus einer Alkylgruppe und R_g abwesend sein kann; worin die Paare R_a-R₁, R_b-R₃, R_c-R₅, R_d-R₆, R_e-R₇ und R_f-R₈ einen Teil der gleichen Alkylgruppe bilden können und deshalb die entsprechenden Aminosäuren cyclische darstellen; worin Y unabhängig C oder CH darstellt; worin Z unabhängig CH oder CH₂ darstellt; und die gestrichelte Linie eine zulässige zweite Bindung anzeigt; mit Ausnahme von Trunkamid A und drei aus J. Org. Chem. 2000, 65, 1037-1049, bekannten Stereoisomeren.
Pharmazeutische Zusammensetzungen der Verbindungen sind zusammen mit der Verwendung der Verbindungen bei der Herstellung solcher Zusammensetzungen und der Verwendung der Verbindungen in Behandlungsverfahren bereitgestellt.
BEVORZUGTE AUSFÜHRUNGSFORMEN DER ERFINDUNG
Die bevorzugte Festphase stellt ein superazides labiles Chlortritylchloridharz dar. Die Festphasensynthese beginnt bevorzugt mit Aminosäure sechs, dann Zufügen, in der folgenden Reihefolge, von Aminosäuren fünf vier, drei, zwei, eins und sieben. Die Nummerierung der Aminosäuren basiert auf der von Trunkamid A. Die Peptidkette wird bevorzugt unter Verwendung einer Fluorenylmethyloxycarbonyl-Basenstrategie verlängert.
Das erfindungsgemäße Verfahren betrifft die Cyclisierung eines linearen Heptapeptids und Bildung des heterocyclischen Rings. Der Cyclisierungsschritt kann vor oder nach dem Ringbildungsschritt stattfinden. Der Ring wird gewöhnlich zwischen funktionellen Gruppen aus zwei Aminosäuren des cyclischen Heptapeptids, die als Aminosäuren eins und sieben bezeichnet sind, gebildet. Die Cyclisierung tritt erfindungsgemäß in der Regel zwischen COOH von Aminosäure sechs und NH₂ von Aminosäure sieben auf, vorausgesetzt, dass der heterocyclische Ring wie durch die Fusion zwischen Aminosäuren eins und sieben gebildet wird.
In einer Version umfasst das Verfahren die Cyclisierung eines linearen Heptapeptids, das zur Bildung des heterocyclischen Rings angeordnet ist, zum Erhalt eines Cycloheptapeptids, das zur heterocyclischen Ringbildung angeordnet ist und dann Bildung des heterocyclischen Rings. Ein derartiges Verfahren kann den folgenden Schritt einschließen:
worin Aaa₂, Aaa₃, Aaa₄, Aaa₅ und Aaa₆ Aminosäuren darstellen, X für O oder S steht und A für O oder NH steht und R_a, wie definiert, gewöhnlich H ist. R₁ stellt H oder eine organische Gruppe dar. Der Ring des Intermediärprodukts kann dann zu einem Azolin geschlossen werden. Wenn C=X für C=S steht, stellt der Ring Thiazolin dar. C=S kann durch C=O ersetzt werden, um ein Oxazolin zu ergeben. Für ein Imidazolin wird C=S durch C=O ersetzt und OH wird durch NH₂ ersetzt. X stellt bevorzugt O oder S dar und der geschlossene Ring stellt ein Oxazolin oder Thiazolin dar, und X stellt bevorzugter S dar und der geschlossene Ring stellt ein Thiazolin dar.
In einer alternativen Version des vorliegenden Verfahrens umfasst das Verfahren die Bildung mittels Festphasensynthese eines linearen Heptapeptid-Präkursors, der den heterocyclischen Ring einschließt und dann Cyclisierung des linearen Heptapeptids. Im Allgemeinen wird der Ring gebildet, wenn Aminosäure sieben angelagert wird. Ein derartiges Verfahren kann den folgenden Schritt einschließen:
worin Fmoc eine Schutzgruppe, wie zum Beispiel Fluorenylmethyloxycarbonyl darstellt, Peptid Aaa₂, Aaa₃, Aaa₄, Aaa₅ und Aaa₆ darstellt, die Aminosäuren darstellen, der ausgefüllte Kreis eine feste Phase darstellt, R_a und R₁ wie definiert sind und D für S, O oder NH steht.
In einer Modifikation dieser alternativen Version wird der gebildete gesättigte heterocyclische Ring weiter zur Reaktion gebracht, um einen aromatischen heterocyclischen Ring zu bilden, der ein Thiazol, Oxazol oder Imidazol ergibt, wobei die Identität von D reflektiert wird.
Das erfindungsgemäße Verfahren kann insbesondere gemäß der folgenden Schritte ablaufen:
Das erfindungsgemäße Verfahren ist insbesondere für Cycloheptapeptide mit reversen Prenylsubstituenten geeignet.
Die vorliegende Erfindung ist für die Herstellung von neuen Analogen von Trunkamid A geeignet, wobei es sich um die Formel (III) handelt. Eine bevorzugte Gruppe von Verbindungen ergibt sich aus der Formel (II):
Formel II worin Aaa₂, Aaa₃, Aaa₄, Aaa5 und Aaa₆ gegebenenfalls unabhängig α-Aminosäuren der L- oder D-Konfiguration darstellen; worin Aaa₁ unabhängig einen fünfgliedrigen Aminoazol-Heterocyclus darstellt; worin R₁, R₂, R₃, R₄, R₅, R₆, R₇, R₈ jeweils unabhängig H oder eine organische Gruppe darstellen, die aus der Gruppe ausgewählt ist, bestehend aus einer Alkylgruppe, einer Alkenylgruppe, einer Arylgruppe, einer Aralkylgruppe und ihren substituierten Derivaten mit einer Hydroxygruppe, einer Mercaptogruppe, einer Aminogruppe, einer Guanidinogruppe, einer Halogengruppe; worin X unabhängig O, S oder NH darstellt; worin R_a, R_b, R_c, R_d, R_e und R_f jeweils unabhängig H oder eine organische Gruppe darstellen, die aus der Gruppe ausgewählt ist, bestehend aus einer Alkylgruppe; worin die Paare R_a-R₁, R_b-R₃, R_c-R₅, R_d-R₆, R_e-R₇ und R_f-R₈ einen Teil der gleichen Alkylgruppe bilden können und deshalb die entsprechenden Aminosäuren cyclische darstellen; worin Y unabhängig C oder CH darstellt; worin Z unabhängig CH oder CH₂ darstellt.
Wie hierin verwendet, versteht man unter dem Begriff „organische Gruppe" eine Kohlenwasserstoffgruppe, die als eine aliphatische Gruppe, cyclische Gruppe oder eine Kombination aus aliphatischen und cyclischen Gruppen (z. B. Aralkylgruppen) klassifiziert ist. Im erfindungsgemäßen Kontext versteht man unter dem Begriff „aliphatische Gruppe" einen gesättigten oder ungesättigten linearen oder verzweigten Kohlenwasserstoff. Dieser Begriff wird verwendet, um zum Beispiel Alkyl-, Alkenyl- und Alkinylgruppen einzuschließen. Unter dem Begriff „Alkylgruppe" versteht man eine gesättigte lineare oder verzweigte Kohlenwasserstoffgruppe, die zum Beispiel Methyl, Ethyl, Isopropyl, Isobutyl, t-Butyl, Heptyl, Decyl, Octadecyl, Amyl, 2-Ethylhexyl, 2-Methylbutyl, 5-Methylhexyl und dergleichen einschließt. Unter dem Begriff „Alkenylgruppe" versteht man eine ungesättigte, lineare oder verzweigte Kohlenwasserstoffgruppe mit einer oder mehr Kohlenstoff-Kohlenstoff-Doppelbindung(en), wie zum Beispiel eine Vinylgruppe. Unter dem Begriff „Alkinylgruppe" versteht man eine ungesättigte, lineare oder verzweigte Kohlenwasserstoffgruppe mit einer oder mehr Kohlenstoff Kohlenstoff-Dreifachbindung(en). Unter dem Begriff „cyclische Gruppe" versteht man eine Kohlenwasserstoffgruppe im geschlossen Ring, die als eine alicyclische Gruppe, aromatische Gruppe oder heterocyclische Gruppe klassifiziert ist. Unter dem Begriff „alicyclische Gruppe" versteht man eine cyclische Kohlenwaserstoffgruppe mit Eigenschaften, die denen von aliphatischen Gruppen ähnlich sind. Unter dem Begriff „aromatische Gruppe" oder „Arylgruppe" versteht man eine mono- oder polycyclische aromatische Kohlenwasserstoffgruppe. Unter dem Begriff „heterocyclische Gruppe" versteht man einen Kohlenwasserstoff im geschlossenen Ring, worin eines oder mehr der Atome im Ring ein Element mit Ausnahme von Kohlenstoff (z. B. Stickstoff, Sauerstoff, Schwefel usw.) darstellt.
Wie in diesem technischen Bereich gut verstanden wird, wird ein großer Substitutionsgrad nicht nur toleriert, sondern ist häufig auch ratsam. Eine Substitution wird an den erfindungsgemäßen Verbindungen antizipiert. Zum Zweck der Vereinfachung der Besprechung und des Zitierens einer bestimmten Terminologie, die in dieser Anmeldung durchweg verwendet wird, werden die Begriffe „Gruppe" und „Komponente" zur Differenzierung zwischen chemischen Spezies verwendet, die eine Substitution zulassen oder die substituiert werden können und diejenigen, die keine Substitution zulassen oder nicht substituiert werden können. Wenn folglich der Begriff „Gruppe" zur Beschreibung eines chemischen Substituenten verwendet wird, schließt das beschriebene chemische Material die unsubstituierte Gruppe und zum Beispiel die Gruppe mit O-, N- oder S-Atomen in der Kette ebenso wie eine Carbonylgruppe oder eine andere konventionelle Substitution ein. Wenn der Begriff „Komponente" zur Beschreibung einer chemischen Verbindung oder eines Substituenten verwendet wird, ist beabsichtigt, nur ein unsubstituiertes chemisches Material einzuschließen. Es ist zum Beispiel beabsichtigt, dass die Phrase „Alkylgruppe" nicht nur reine offenkettige, gesättigte Kohlenwasserstoff-Alkylsubstituenten, wie zum Beispiel Methyl, Ethyl, Propyl, Isobutyl und dergleichen, sondern auch Alkylsubstituenten, die im Stand der Technik bekannte weitere Substituenten, wie zum Beispiel Hydroxy, Alkoxy, Amino, Carboxyl, Carboxamido, Halogenatome, Cyano, Nitro, Akylsulfonyl usw. tragen, einschließt. Folglich schließt „Alkylgruppe" Ethergruppen, Haloalkyle, Alkohole, Thiole, Carboxyl, Amine, Hydroxyalkyle, Sulfoalkyle usw. ein. Die Phrase „Alkylkomponente" ist andererseits auf den Einschluss von nur reinen offenkettigen gesättigten Kohlenwasserstoff Alkylsubstituenten, wie zum Beispiel Methyl, Ethyl, Propyl, Isobutyl und dergleichen, beschränkt.
Wenn eines oder mehr der Paare R_a-R₁, R_b-R₃, R_c-R₅, R_d-R₆, R_e-R₇ und R_f-R₈ einen Teil der gleichen Alkylgruppe bildet/bilden und die entsprechenden Aminosäuren deshalb cyclische darstellen, ist es bevorzugt, dass die Aminosäure Prolin oder eine verwandte Aminosäure darstellt. Solche Erwägungen treffen insbesondere auf R_f-R₈ zu.
Eine bevorzugte Ausführungsform der Verbindungen, die durch die Formel II dargestellt ist, stellt Trunkamid A (I) dar, worin Aaa-1 für D-Phe-L-Tzn (R_a = H, X = S, R₁ = Benzyl, Y = CH, Z = CH₂) steht, Aaa-2 für L-Thr(rPre) (R_b = H, R₂ = 1,1-Dimethylallyl, R₃ = Methyl) steht, Aaa-3 für L-Ser(rPre) (R_c, R₅ = H, R₄ = 1,1-Dimethylallyl) steht, Aaa-4 für L-IIe (R_d = H, R₆ = 1-Methylpropyl) steht, Aaa-5 für L-Ala (R_e = H, R₇ = Methyl) steht und Aaa-6 für L-Pro (R_f = CH₂, R₆ = CH₂-CH₂) steht.
Derivate von Trunkamid A schließen Verbindungen ein, worin R₂ und/oder R₄ eine Alkylgruppe, wie zum Beispiel Methyl, t-Butyl, eine Allylgruppe oder eine Aralkylgruppe, wie zum Beispiel Benzyl, darstellt. Weitere Derivate schließen die Verbindungen ein, worin R₁ eine substituierte Aralkylgruppe, besonders eine para-substituierte Benzylgruppe, wie zum Beispiel p-Fluor- oder p-Trifluormethylbenzyl, darstellt. Andere Beispiele schließen Verbindungen ein, worin R₁ optional substituiertes Heteroaryl, wie zum Beispiel Indol, Imidazol, Thiazol oder optional substituiertes Aryl, wie zum Beispiel Phenyl, darstellt.
Eine andere durch das vorliegende Verfahren herzustellende Verbindung stellt Mollamid dar, siehe Aust. J. Chem. 199447 61.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen besitzen Antitumoraktivität und sind in einem Verfahren zur Behandlung von jedwedem Säuger, insbesondere einem von Krebs betroffenen Menschen von Nutzen, das die Verabreichung einer therapeutisch wirksamen Menge einer erfindungsgemäßen Verbindung oder einer pharmazeutischen Zusammensetzung davon an das betroffene Individuum umfasst.
Beispiele erfindungsgemäßer pharmazeutischer Zusammensetzungen schließen jedweden Feststoff (Tabletten, Dragees, Kapseln, Granulat usw.) oder jedwede Flüssigkeit (Lösungen, Suspensionen oder Emulsionen) mit geeigneter Zusammensetzung oder zur oralen, topischen oder parenteralen Verabreichung ein, und sie können die reine Verbindung oder in Kombination mit jedwedem Träger oder anderen pharmakologisch aktiven Verbindungen enthalten. Diese Zusammensetzungen müssen gegebenenfalls steril sein, wenn sie parenteral verabreicht werden.
Die Verabreichung der erfindungsgemäßen Verbindungen oder Zusammensetzungen kann durch jedwedes geeignete Verfahren, wie zum Beispiel intravenöse Infusion, orale Präparate, intraperitoneale und intravenöse Verabreichung erfolgen. Die korrekte Dosierung der Verbindungen variiert gemäß der entsprechenden Formulierung, der Applikationsweise und dem entsprechenden Situs, Wirt und dem zu behandelnden Tumor. Andere Faktoren wie Alter, Körpergewicht, Geschlecht, Ernährung, Zeit der Verabreichung, Exkretionsrate, Zustand des Wirts, Arzneimittelkombinationen, Reaktionsüberempfindlichkeiten und der Schweregrad der Erkrankung müssen Berücksichtigung finden. Die Verabreichung kann kontinuierllich oder periodisch im Rahmen der maximal tolerierten Dosis durchgeführt werden.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen und Zusammensetzungen können mit anderen Arzneimitteln angewendet werden, um eine Kombinationstherapie bereitzustellen. Die anderen Arzneimittel können einen Teil der gleichen Zusammensetzung bilden oder als eine getrennte Zusammmensetzung zur Verabreichung zur gleichen Zeit oder einer anderen Zeit bereitgestellt werden. Die Identität des anderen Arzneimittels ist nicht besonders eingeschränkt, und zu geeigneten Kandidaten gehören die folgenden:

a) Arzneimittel mit antimitotischen Wirkungen, insbesondere diejenigen, die cytoskeletale Elemente targetieren, einschließlich Mikrotubulus-Modulatoren, wie zum Beispiel Taxan-Arzneimittel (wie zum Beispiel Taxol, Paclitaxel, Taxoter, Docetaxel), Podophylotoxine oder Vinca-Alkaloide (Vincristin, Vinblastin);
b) Antimetabolit-Arzneimittel, z. B. 5-Fluoruracil, Cytarabin, Gemcitabin, Purin-Analoge, wie zum Beispiel Pentostatin, Methotrexat);
c) Alkylierungsmittel, wie zum Beispiel Stickstoffloste (wie zum Beispiel Cyclophosphamid oder Ifosphamid);
d) Arzneimittel, welche DNA targetieren, wie zum Beispiel die Anthracyclin-Arzneimittel Adriamycin, Doxorubicin, Pharmorubicin oder Epirubicin;
e) Arzneimittel, die Topoisomerase targetieren, wie zum Beispiel Etoposid;
f) Hormone und Hormonagonisten oder -antagonisten, wie zum Beispiel Estrogene, Antiestrogene (Tamoxifen und verwandte Verbindungen) und Androgene, Flutamid, Leuprorelin, Goserelin, Cyprotron oder Octreotid;
g) Arzneimittel, welche die Signaltransduktion in Tumorzellen targetieren, einschließlich Antikörper-Derivaten, wie zum Beispiel Herceptin;
h) Alkylierungsarzneimittel, wie zum Beispiel Platin-Arzneinmittel (Cisplatin, Carboplatin, Oxaliplatin, Paraplatin) oder Nitroharnstoffe;
i) Arzneimittel, die potenziell auf Tumormetastasen einwirken, wie zum Beispiel Matrixmetalloproteinase-Inhibitoren;
j) Gentherapie und Antisense-Mittel;
k) Antikörper-Therapeutika; und
l) andere bioaktive Verbindungen von mariner Herkunft, insbesondere die Didemnine, wie zum Beispiel Aplidin und die Ecteinascidine, wie zum Beispiel Ecteinascidin 743.

Das erfindungsgemäße bevorzugte synthetische Verfahren, wenn es erläuternd zur Herstellung von Trunkamid A angewendet wird, ist am besten in Schema 1 dargestellt:
Wie vorstehend in Schema 1 gezeigt wird, basiert das bevorzugte Verfahren für die synthetische Bildung von Trunkamid A (I) und Derivaten und Analogen auf einem Festphasenansatz und umfasst die sequenziellen Schritte von:

(a) Inkorporation einer Fmoc-Aminosäure (Aaa₆) auf einem festen Träger (z. B. Polystyrol, auf Polystyrol gegraftetes Polyethylen und dergleichen), enthaltend ein(en) superazides/n labiles/n „Handle" oder „Linker" [z. B. Chlortrityl, Polyalkoxybenzyl und dergleichen), das/der eine Esterbindung bildet;
(b) Verlängerung der Peptidkette mit vier Aminosäuren (Aaa₅, Aaa₄, Aaa₃, Aaa₂) unter Verwendung einer Fmoc/t-Bu-Strategie;
(c) Inkorporation von Fmoc-Ser-OH, wobei die Seitenkettenfunktion von Hydroxy ungeschützt ist;
(d) Inkorporation von Fmoc-Phe(S)-OH durch sein 6-Nitrobenztriazol-Derivat;
(e) Spaltung des Seitenketten-geschützten Peptids vom festen Träger;
(f) Cyclisierung durch die Peptidbindung;
(g) Durchführung der Thiazolin-Bildung;
(h) gegebenenfalls Entfernung der die Seitenketten schützenden Gruppen, die sich von Isoprenyl unterscheiden.

Dieses Verfahren ist enantio- und stereokontrolliert und schnell, wobei es die Vorteile der synthetischen Festphasen-Methodologie wahrnimmt, wobei das Molekül in Konstruktion während der synthetischen Vorgänge an einen unlöslichen Träger gebunden wird, siehe Lloyd-Williams, P.; Albericio, F.; Giralt, E. Chemical Approaches to the Synthesis of Peptides and Proteins. CRC Press, Boca Raton (FL), 1997. Folglich kann der Überschuss der Reagenzien und löslichen Nebenprodukte durch einfaches Waschen des Molekül-Harzes mit geeigneten Lösungsmitteln entfernt werden. Deshalb können große Überschüsse der löslichen Reagenzien verwendet werden, um die Reaktionen in einer kurzen Zeitperiode zum Abschluss voranzutreiben, wobei gegebenenfalls die Racemisierung und andere sekundäre Reaktionen vermieden werden. Das Verfahren ist auch für die Automatisierung zugänglich.
Das erfindungsgemäße Verfahren für Trunkamid A beinhaltet einen Ringschluss zwischen Aaa-1 und Aaa-6, wobei ein Ringschluss zwischen anderen Aaa bevorzugt ist.
Ein endgültiger Schritt dieses Verfahrens für Trunkamid A nach dem Peptidringschluss beinhaltet die Bildung des Rings, bei dem es sich um einen Teil von Aaa-1 handelt. Das Verfahren wird ohne weiteres zum Erhalt anderer heterocyclischer Derivate modifiziert. Formel (II) umfasst Thiazolin, Oxazolin und Imidazolin und die aromatischen Derivate: Thiazol, Oxazol und Imidazol, während die Formel (III) auch Thiazolidin, Oxazolidin und Imidazolidin einschließt.
Für Trunkamid A findet die relevante Reaktion zwischen dem Ser-Peptid, das an das Harz gebunden ist, und Fmoc-D-Phe(S)-Bt statt, wobei sich die Thia-Verbindung ergibt. Für ein Oxa-Derivat findet sie zwischen dem Ser-Peptid, das an das Harz gebunden ist, und Fmoc-D-Phe-OH in Anwesenheit eines Kopplungsreagenzes (zum Beispiel DIPCDI) statt. Für das Azo (ein N anstelle von S oder O) findet die Reaktion zwischen einem Diaminpropionsäure-(Dapa)-Peptid, das an das Harz gebunden ist, und dem Chlorimidat von Fmoc-D-Phe-OH statt.
Für die Herstellung der anderen Ringe findet die Schlüsselreaktion zwischen dem Fmoc-D-Phe-H (es ist das Aldehydderivat von Fmoc-D-Phe-OH) und Cys-Peptid, das an das Harz gebunden ist, für S; Ser-Peptid, das an das Harz gebunden ist, für O; und Dapa-Peptid, das an das Harz gebunden ist, für N statt.
Dieser Schritt ergibt den ungesättigten heterocyclischen Ring und ihm kann sich die Aromatisierung mit MnO₂ anschließen.
Das erfindungsgemäße Verfahren ist insbesondere für Verbindungen mit suszeptiblen Substituenten geeignet, wie zum Beispiel, bei denen ein oder beide R₂ und R₄ für 1,1-Dimethylallyl steht/stehen.
Das bevorzugte Verfahren nimmt den Vorteil des Festphasenansatzes wahr, der effizient, schnell und zuverlässig ist. Zweitens, die Herstellung der Bausteine Fmoc-Ser(rPre)-OH und Fmoc-Thr(rPre)-OH ist neu und leicht in einen größeren Maßstab überführbar. Drittens, die Einführung von Fmoc-D-Phe(S)-OH umgeht die Notwendigkeit einer Sulfurierung an der Peptidkette.
Im Vergleich zu der von Wipf [J. Org. Chem. 2000, 65, 1037–1049] vorgeschlagenen Strategie, handelt es sich bei den Hauptunterschieden im erfindungsgemäßen Verfahren um die folgenden: (i) das vorliegende Verfahren setzt den Festphasenansatz für die Verlängerung der Peptidkette ein; Wipf verwendet einen Lösungsansatz. (ii) Die Herstellung der Bausteine Fmoc-Ser(rPre)-OH und Fmoc-Thr(rPre)-OH für das vorliegende Verfahren ist einfacher, beinhaltet weniger synthetische Schritte und lässt sich leichter in einen größeren Maßstab überführen; Wipf verwendet die regioselektive Öffnung eines Aziridinrings; (iii) Wipf führt den Phe-Rest als eine Aminosäure ein; das vorliegende Verfahren führt ihn als eine Aminothiosäure ein. Wipf muss zum Erhalt eines Oxazolins eine Dehydratisierung des Peptids, dann die Öffnung des Oxazolinrings mit H₂S (eine ziemlich unangenehme Reaktion für die Bildung des Thioamidpeptids, dem gleichen Intermediärprodukt wie das erfindungsgemäße) und die endgültige Dehydratisierung mit DAST durchführen. Beide Ansätze haben diesen letzten Schritt gemein.
Zusammenfassend lässt sich sagen, dass die vorliegende Erfindung gegenüber dem von Wipf beschriebenen Verfahren Vorteile bietet.
Das erfindungsgemäße bevorzugte Verfahren wird in Schema 1 erläutert. Wie darin gezeigt wird und wie in den folgenden nachstehenden Beispielen ausführlicher besprochen wird, wurde dieses Verfahren wie folgt durchgeführt:
Die Herstellung von sowohl Fmoc-Aaa2-OH als auch Fmoc-Aaa3-OH mit der Hydroxyfunktion in der Form von Isoprenyl, wurde gegebenenfalls aus den entsprechenden Na-Fmoc-O-t-Butyl-Aminosäuren durch die folgende Reaktionskaskade durchgeführt: (a) Schutz der Carboxylgruppe in der Form von Trichlorethylester durch die Reaktion mit dem Alkohol, DIPCDI und DMAP; (ii) Entfernung der t-Butylgruppen mit TFA-H₂O (19:1); (iii) Bildung des Ethers durch die Reaktion mit dem entsprechenden Trichloracetimidat, siehe Armstrong, A.; Brackenridge, L; Jackson, R. F. W.; Kirk, J. M. Tetrahedron Letters 1988, 29, 20, 2483–2486.; (iv) teilweise Reduktion der Dreifachbindung zur Doppelbindung durch die katalytische Hydrierung in Anwesenheit von Pd/C und Chinolin; und (v) Entfernung des Trichlorethylesters mit Zn und NH₄OAc.
Fmoc-Aaa6-OH wurde in Anwesenheit von DIEA bevorzugt in ein Chlortityl-Polystyrolharz inkorporiert, siehe Barlos, K.; Gatos, D.; Schäfer, W. Angew. Chem. Int. Ed. Engl. 1991, 30, 590–593, wobei die Substitutionshöhe unter 0,5 mmol/g gehalten wurde (die Verwendung von höheren Beladungen führt zur Anwesenheit von terminierten Peptiden im Endprodukt, siehe Chiva, C; Vilaseca, M.; Giralt, E.; Albericio, F. J. Pept. Sci. 1999, 5, 131–140).
Kopplungen von Fmoc-Aaa-OH wurden 90 min mit DIPCDI (einer äquimolaren Menge bezogen auf Fmoc-Aaa-OH) in DMF durchgeführt. Für Fmoc-Aaa₅-OH und Fmoc-Aaa₄-OH wurden 5 Äquivalente eines Überschusses verwendet, während für Fmoc-Aaa₃-OH und Fmoc-Aaa₂-OH 1,7 Äquivalente und für Fmoc-Ser-OH 4 Äquivalente verwendet wurden.
Die Fmoc-Aminothiosäure wurde in der Form des 6-Nitrobenzotriazol-Derivats, (Shalaby, M.A.; Grote, C.W.; Rapoport, H. J. Org. Chem. 1996, 61, 9045–9048) 90 min mit einem Überschuss von 3 Äquivalenten inkorporiert.
Die Entfernung der Fmoc-Gruppe wurde mit Piperidin-DMF (2:8, v/v) (1 × 1 min, 3 × 5 min, 1 × 10 min) durchgeführt. Danach wurde der Ninhydrin-Kopplungstest durchgeführt, und wenn er positiv ausfiel, wurde die Kopplung unter den gleichen Bedingungen wiederholt, ansonsten wurde das Verfahren fortgesetzt. Die Wäschen zwischen der Entschützung, Kopplung und wiederum Entschützungsschritten wurden mit DMF (5 × 0,5 min) und CH₂Cl₂ (5 × 0,5 min) jedes Mal unter Verwendung von 10 ml Lösungsmittel/g Harz durchgeführt.
Die Spaltung des geschützten Peptids wurde mithilfe von HFIP-CH₂Cl₂ (1:4, 4 × 3 min) erreicht, siehe Bollhagen, R.; Schmiedberger, M.; Barlos, K.; Grell, E. J. Chem. Soc, Chem. Commun. 1994, 2559–2560.
Der Cyclisierungsschritt wurde 1 h mit PyAOP-DIEA (2:4 Äquivalenten) in DMF durchgeführt, siehe Albericio, F.; Cases, M.; Alsina, J.; Triolo, S.A.; Carpino, L.A.; Kates, S.A. Tetrahedron Lett 1997, 38, 4853–4856.
Die Bildung des Thiazolinrings wurde durch die Aktivierung der β-Hydroxygruppe von Ser, bevorzugt mithilfe des DAST-Reagenzes, siehe Halasz, S.P.; Glernser, O. Chem. Ber. 1970, 103, 594–602; (b) Lafargue, P.; Guenot, P.; Lellouche, J.P. Heterocycles 1995, 41, 947–958, und anschließende Verdrängung durch das Schwefelatom, siehe Wipf P.; Miller, C.P.; Venkatraman, S.; Fritch, P.C. Tetrahedron Lett. 1995, 36, 6395–6398, durchgeführt. Zur Verwendung anderer Aktivierungsreagenzien, wie zum Beispiel Burguess, siehe Atkins, G.M.; Burgess, E.M. J. Am. Chem. Soc. 1968, 90, 4744–4745; (b) Burguess, E.M.; Penton, H.R.; Taylor, E.A. J. Org. Chem. 1973, 38, 26–31, oder Mitsunobu, siehe Galeotti, N.; Montagne, C; Poncet, J.; Jouin, P. Tetrahedron Lett. 1992, 33, 2807–2810, die mit eindeutig geringeren Ausbeuten auch zum Targetprodukt führten. Cytotoxizität von Trunkamid A und Derivaten – IC₅₀ (molar).

Methodologie: nach Beijeron et al., Biochem. and Bioph. Res. Comm., 1484, 121, 3, 848–854 388 = Murines Lymphom. A549 = humanes Lungenkarzinom. HT-29 = humanes Kolonkarzinom. MEL-28 = humanes Melanom. DU 145 = humanes Prostatakarzinom

BEISPIELE DER ERFINDUNG
Allgemeine Verfahren. Cl-TrtCl-Harz, geschützte Fmoc-Aminosäure-Derivate, HOBt, PyAOP wurden von PerSeptive Biosystems (Framingham, MA), Bachern (Bubendorf Schweiz), Albatross (Montreal, Kanada) und NovaBiochem (Läufelfingen, Schweiz) erworben. Die Synthese von 1-(N-Fmoc-D-Thionphenylalaninyl)-6-nitrobenzotriazol wurde unter Verwendung des von Rapoport und Mitarbeitern beschriebenen Verfahrens durchgeführt. DIEA, DIPCDI, Piperidin, Fmoc-Cl, NMM, Isobutylchlorformiat, 4-Nitro-1,2-phenylendiamin, P₄S₁₀, 2-Methyl-3-butyn-2-ol, Trichloracetonitril, TFA, DMAP, DCC, HFIP, DAST, Pd-C 10%, CF₃SO₃H, 2,2,2-Trichlorethanol und Chinolin wurden von Aldrich (Milwaukee, WI) erworben. DMF, CH₂Cl₂, CHCl₃ und EtOAc wurden von SDS (Peypin, Frankreich) erworben. Acetonitril (HPLC-Grad) und THF wurden von Scharlau (Barcelona, Spanien) erworben. Hexan, Et₂O und Methanol wurden von Panreac (Moncada i Reixac, Barcelona) erworben. Alle gewerblich erhältlichen Reagenzien und Lösungsmittel wurden wie erhalten verwendet, mit Ausnahme von DMF und CH₂Cl₂, die zur Entfernung flüchtiger Kontaminanten (DMF) mit Stickstoff durchperlt und über aktivierten Molekülsieben (4 Å, Merck, Darmstadt, Deutschland), (DMF) oder CaCl₂ (CH₂Cl₂) gelagert wurden und Et₂O wurde über Na gelagert.
Die Lösungsreaktionen wurden in Rundkolben durchgeführt. Organische Lösungsmittelextrakte wurden über wasserfreiem MgSO₄ getrocknet, gefolgt von Lösungsmittelentfernung bei reduzierten Drücken und < 40°C. Die Festphasensynthese wurde in Polypropylen-Spritzen (10/20 ml), die mit einem porösen Disk aus Polyethylen versehen waren, durchgeführt. Lösungsmittel und lösliche Reagenzien wurden durch Absaugen entfernt. Die Entfernung der Fmoc-Gruppe wurde mit Piperidin-DMF (2:8, v/v) (2 × 1 min, 2 × 20 min) durchgeführt. Wäschen zwischen den Entschützungs-, Kopplungs- und wiederum Entschützungsschritten wurden mit DMF (5 × 1 min) und CH₂Cl₂ (5 × 1 min) unter Verwendung von jeweils 10 ml Lösungsmittel/g Harz durchgeführt. Die Peptidsynthese-Transformationen und -Wäschen wurden bei 25°C durchgeführt. Die HPLC-Säulen (Nucleosil-C₁₈-Umkehrphasensäule, 4,6 × 250 mm, 10 μm) wurden von Scharlau (Barcelona, Spanien) bezogen.
Die analytische HPLC wurde auf einem Shimadzu-Instrument, umfassend zwei Lösungsmittel-Förderpumpen (Modell LC-6A), einen automatischen Injektor (Modell SIL-6B), einen variablen Wellenlängendetektor (Modell SPD-6A), ein Systemsteuergerät (Modell SCL-6B) und einen Plotter (Modell C-R6A), durchgeführt. Die UV-Detektion erfolgte bei 220 nm und lineare Gradienten von CH₃CN (+0,036% TFA) in H₂O (+0,045% TFA) wurden bei 1,0 ml/min Fließrate laufen lassen von: (Bedingung A) 0:1 bis 1:0 über 30 min; (Bedingung B) 1:1 bis 10:0 über 30 min. Die Flash-Chromatographie wurde unter Verwendung von Silikagel 60 Å CC 50–70 µm SDS (Peypin, Frankreich) durchgeführt. Die optischen Drehungen wurden auf einem Perkin-Elmer 241 MC Polarimeter gemessen. Die IR-Spektren wurden auf einem Nicolet 510 FT-IR-Spektrometer gemessen. Die MALDI-TOF- und ES-MS-Analyse von Peptidproben wurden in einem PerSeptive Biosystems Voyager DE RP unter Verwendung von ACH- oder DHB-Matrizen und in einem Micromass VG-Quattro-Spektrometer durchgeführt. CI-MS-Analyse von Aminosäurederivaten wurden in einem Hewlett Packard HP-5988A Spektrometer durchgeführt. Eine ¹H-NMR- (500 MHz, 200 MHz) und ¹³C-NMR-Spektroskopie (50 MHz) wurde auf einem Bruker DMX-500 (11.7 T) und Varian Gemini 200 (4.7 T) durchgeführt. Die chemischen Verschiebungen (δ) sind in Teilen pro Million nach tieferen Feldern von TMS ausgedrückt. Die Kopplungskonstanten sind in Hertz ausgedrückt.
Die für Aminosäuren und die Bezeichnungen von Peptiden verwendeten Abkürzungen folgen den Regeln der IUPAC-IUB-Kommission für Biochemische Nomenklatur in J. Biol Chem. 1972, 247, 977–983. Die folgenden zusätzlichen Abkürzungen werden verwendet: ACH, α-Cyano-4-hydroxyzimtsäure; CI, chemische Ionisation; Cl-TrtCl-Harz, 2-Chlornitylchlorid-Harz; DAST, (Diethylamino)schwefeltrifluorid; DCC, N,N-Dicyclohexylcarbodiimid; DHB, 2,5-Dihydroxybenzoesäure; DIEA, N,N-Diisopropylethylamin; DIPCDI, N,N'- Diisopropylcarbodiimid; DMAP, 4-Dimethylaminopyridin; DMF, N,N-Dimethylformamid; ESMS, Elektrospray-Massenspektrometrie; EtOAc, Ethylacetat; Fmoc, 9-Fluorenylmethoxycarbonyl; Fmoc-Phe(S)-NBt, 1-(N-Fmoc-D-thionphenylalaninyl)-6-nitrobenzotriazol; HFIP, 1,1,1,3,3,3-Hexafluor-2-propanol; HPLC, Hochleistungsflüssigkeitschromatographie; HOBt, 1-Hydroxybenzotriazol; rPr, 1,1-Dimethylallyl, reverses Prenyl; MALDI-TOF, Matrix-unterstützte Laserdesorptions-/Ionisationszeit der Flugzeit-Massenspektrometrie; MeOH, Methanol; NMM, N-Methylmorpholin; NMR, Kernresonanz; Oxa, Oxazolin; PyAOP, 7-Azabenzotriazol-1-yl-N-oxy-tris(pyrrolidino)phosphonium-hexafluorphosphat; SPS, Festphasensynthese; Tce, Trichlorethanol; TFA, Trifluoressigsäure; THF, Tetrahydrofuran; TMS, Trimethylsilyl; Tzn, Thiazolin; UV-Ultraviolett. Die Aminosäure-Symbole kennzeichnen die L-Konfiguration, sofern nicht anderweitig angegeben wird. Alle Lösungsmittelverhältnisse sind in Volumen/Volumen, sofern nicht anderweitig angegeben wird.
BEISPIEL 1
Fmoc-Ser-OTce (Schema 2).
Fmoc-Ser(tBu)-OH (1 g, 2,6 mmol) wurde in CH₂Cl₂ (7 ml) aufgelöst. DMAP (0,15 g, 1,3 mmol, 0,5 Äq.) und 2,2,2-Trichlorethanol (Tce) (0,3 ml, 3,1 mmol, 1,2 Äq.) wurden zuerst zugefügt, und danach wurde DCC (0,63 g, 3,1 mmol, 1,2 Äq.) in CH₂Cl₂ (2,5 ml) unter einer N₂-Atmosphäre bei 0°C zugefügt. Das Reaktionsgemisch wurde 18 h bei Raumtemperatur rühren lassen. Die organische Reaktion wurde auf 0°C abgekühlt, filtriert, und das Filtrat wurde im Vakuum konzentriert Der sich ergebene Rohstoff wurde in EtOAc (7 ml) aufgelöst und mit 10%iger wässriger Citronensäure (2 × 10 ml), gesättigtem wässrigem NaHCO₃ (2 × 10 ml) und Salzlösung (2× 10 ml) gewaschen, getrocknet (MgSO₄) und im Vakuum konzentriert, um Fmoc-Ser(OtBu)-OTce (1,34 g) zu ergeben, das ohne weitere Reinigung verwendet wurde.
Fmoc-Ser(tBu)-OTce wurde in TFA-H₂O (19:1, 10 ml) aufgelöst und 5 h rühren lassen. Das Reaktionsgemisch wurde im Vakuum konzentriert und mittels Flash-Chromatographie (EtOAc-Hexan, 3:7) gereinigt, um Fmoc-Ser-OTce (0,83 g, 1,8 mmol, 69% Gesamtausbeute für die beiden Schritte) zu erhalten.
Analytische HPLC (t_R 12,2 min, Bedingung B). [α]_D-5,6° (c 0,01, CHCl₃, 23°C).
IR (Film) 3407, 1769, 1692, 1516, 1209, 1082 cm-¹.
CI-MS, berechnet für C₂₀H₁₈O₅NCl₃ 457, gefunden 475 [(M+NH₄ ⁺, 100%].
HRMS-(FAB)-ES-MS, berechnet 458,0329, gefunden 458,0332.
¹H-NMR (200 MHz, CDCl₃) δ: 7,70-7,20 (8H, m, Ar), 6,05 (1H, d, J = 8,0 Hz, NH), 4,85 (1H, d, J = 12,0 Hz, CH₂ Tce), 4,67 (1H, d, J = 12,2 Hz, CH₂ Tce), 4,60-4,54 (1H, m, α-CH Ser), 4,45-4,30 (2H, m, CH₂ Fmoc), 4,20-4,15 (1H, m, CH Fmoc), 4,10-3,85 (2H, m, β-CH₂ Ser), 3,50 (1H, bs, OH).
¹³C-NMR (50 MHz, CDCl₃) δ: 169,0 (CO-Ser), 156,2 (CO Fmoc), 143,5 (C Ar), 141,1 (C Ar), 127,6 (CH Ar), 126,9 (CH Ar), 124,9 (CH Ar), 119,8 (CH Ar), 94,2 (CCl₃ Tce), 74,4 (CH₂ Tce), 67,2 (CH₂ Fmoc), 62,6 (β-CH₂ Ser), 55,9 (α-CH Ser), 46,9 (CH Fmoc). Schema 2
BEISPIEL 2
Fmoc-Ser(rPr)-OH (Schema 3).
Fmoc-Ser-OTce (0,83 g, 1,8 mmol) wurde in CH₂Cl₂-Hexan (2:1, 4 ml) und 1,1-Dimethylpropinyl-trichloracetimidat (0,41 g, 1,8 mmol, 1 Äq.) aufgelöst, und CF₃SO₃H (40 μl) wurden unter einer N₂-Atmosphäre zugefügt. Das Reaktionsgemisch wurde 4 Tage rühren lassen, wobei alle 24 h die gleichen Mengen des Trichloracetimidats und CF₃SO₃H zugefügt wurden. Das Reaktionsgemisch wurde filtriert und das Filtrat wurde im Vakuum konzentriert, in EtOAc (10 ml) aufgelöst und mit gesättigtem wässrigem NaHCO₃ (2 × 10 ml), H₂O (2 × 10 ml) und Salzlösung (2 × 10 ml) gewaschen. Die organische Lösung wurde getrocknet (MgSO₄) und im Vakuum konzentriert, um den 1,1-Dimethylpropinylether von Fmoc-Ser-OTce (0,95 g) zu erhalten, der ohne weitere Reinigung verwendet wurde.
Der 1,1-Dimethylpropinylether von Fmoc-Ser-OTce wurde in MeOH (20 ml) aufgelöst, und Pd-C 10% (38 mg, 4% des Rohgewichts) und Chinolin (0,44 ml, 0,45 ml pro g Rohstoff) wurden unter einer N₂-Atmosphäre zugefügt. Die Atmosphäre wurde von N₂ auf H₂ umgestellt und 2 h rühren lassen. Das Reaktionsgemisch wurde im Vakuum konzentriert und mittels Flash-Chromatographie (CHCl₃-Hexan, 8:2) gereinigt, um Fmoc-Ser(rPr)-OTce (0,38 g, 0,72 mmol) zu ergeben.
Analytische HPLC (t_R 20,7 min, Bedingung B).
[α]_D-26,4° (c 0,05, CHCl₃, 23°C).
IR (Film) 3442, 2979, 1782, 1506, 1451 cm^-1.
CI-MS, berechnet für C₂₅H₂₆O₅NCl₃ 525, gefunden 526 [M+H)⁺, 34%) 543 [(M+NH₄)⁺, 100%].
HRMS-(FAB)-ES-MS, berechnet 526,0955, gefunden 526,0940.
¹H-NMR (200 MHz, CDCl₃) δ: 7,80–7,22 (8H, m, Ar), 5,82-5,65 (2H, m, CH iPr, NH), 5,20-5,10 (2H, m, CH₂ iPr), 4,87 (1H, d, J = 10,8 Hz, CH₂ Tce), 4,74 (1H, d, J = 10,8 Hz, CH₂ Tce), 4,70-4,60 (1H, m, α-CH Ser), 4,50-4,35 (2H, m, CH₂ Fmoc), 4,32-4,25 (1H, m, CH Fmoc), 3,90 (1H, dd, J = 8,0, 2,8 Hz, β-CH₂ Ser), 3,60 (1H, dd, J = 8,0, 2,8 Hz, β-CH₂ Ser), 1,26 (6H, s, 2 CH₃ iPr).
¹³C-NMR (50 MHz, CDCl₃) δ: 168,1 (CO-Ser), 155,2 (CO-Fmoc), 143,2 (C Ar), 142,6 (CH iPr), 141,1 (C Ar), 127,6 (CH Ar), 126,9 (CH Ar), 125,0 (CH Ar), 119,9 (CH Ar), 114,5 (CH₂ iPr), 94,0 (CCl₃ Tce), 75,6 (C iPr), 74,5 (CH₂ Tce), 67,2 (CH₂ Fmoc), 62,5 (β-CH₂ Ser), 54,4 (α-CH Ser), 47,0 (CH Fmoc), 25,6 (CH₃ iPr), 25,3 (CH₃ iPr).
Fmoc-Ser(rPr)-OTce (0,38 g, 0,72 mmol) wurde in THF (6 ml) aufgelöst und Zn-Staub (1,56 g, 24 mmol, 33,1 Äq.) und 1 M NH₄OAc (1,35 ml, 1,3 mmol, 1,87 Äq.) wurden unter einer N₂-Ätmosphäre zugefügt. Das Reaktionsgemisch wurde 14 h rühren lassen, filtriert und im Vakuum konzentriert. Der Rohstoff wurde in EtOAc (10 ml) aufgelöst, mit 5% wässriger KHSO₄ (2 × 10 ml) und Salzlösung (2 × 10 ml) gewaschen, getrocknet (MgSO₄) und im Vakuum konzentriert, um Fmoc-Ser(rPr)-OH (0,28 g, 0,71 mmol, 40% Gesamtausbeute für 3 Schritte) zu erhalten.
Analytische HPLC (t_R 11 min, Bedingung B).
[α]_D +11° (c 0,009, CHCl₃, 23°C).
IR (Film) 2977, 1725, 1510, 1451, 1209 cm^-1.
CI-MS, berechnet für C₂₃H₂₅O₅N 395, gefunden: 396 [(M+H)⁺, 18%) 413 [(M+NH₄)⁺, 59%).
HRMS-(FAB)-ES-MS, berechnet 396,1811, gefunden 396,1814.
¹H-NMR (200 MHz, CDCl₃) δ: 7,80-7,20 (8H, m, Ar), 5,80-5,60 (2H, m, NH, CH iPr), 5,11 (1H, d, J = 19,4 Hz, CH₂ iPr), 5,00 (1H, d, J = 11,6 Hz, CH₂ iPr), 4,45-4,05 (4H, m, α-CH Ser, CH₂ Fmoc, CH Fmoc), 3,72 (1H, dd, J = 9,4, 2,6 Hz, β-CH₂ Ser), 3,48 (1H, dd, J = 9,4, 2,6 Hz, β-CH₂ Ser), 1,24 (6H, s, 2 CH₃ iPr).
¹³C-NMR (50 MHz, CDCl₃) δ: 174,0 (CO Ser), 156,0 (CO Fmoc), 143,6 (C Ar), 142,7 (CH iPr), 141,1 (C Ar), 127,5 (CH Ar), 126,9 (CH Ar), 125,0 (CH Ar), 119,8 (CH Ar), 114,4 (CH₂ iPr), 75,7 (C iPr), 67,2 (CH₂ Fmoc), 62,6 (β-CH₂ Ser), 54,3 (α-CH Ser), 47,0 (CH Fmoc), 25,5 (2 CH₃ iPr). Schema 3
BEISPIEL 3
Fmoc-Thr-OTce.
Nach dem für die Synthese von Fmoc-Ser-OTce verwendeten Verfahren, stellte Fmoc-Thr(OtBu)-OH (1 g, 2,5 mmol) Fmoc-Thr-OTce (0,81 g, 1,7 mmol, 68% Gesamtausbeute für zwei Schritte) bereit.
Analytische HPLC (t_R 14 min, Bedingung B).
CI-MS, berechnet für C₂₁H₂₀O₅NCl₃ 472, gefunden 473 [(M+H)⁺, 76%). HRMS-(FAB)-ES-MS, berechnet 472,0485, gefunden 472,0486.
¹H-NMR (200 MHz, CDCl₃) δ: 7,80-7,20 (8H, m, Ar), 5,80 (1H, d, J = 8,8 Hz, NH), 4,90 (1H, dd, J = 12 Hz, CH₂ Tce), 4,70 (1H, dd, J = 12 Hz, CH₂ Tce), 4,57-4,40 (4H, m, α-CH Thr, CH₂ Fmoc, β-CH Thr), 4,25-4,18 (1H, m, CH Fmoc), 2,41 (1H, bs, OH), 1,27 (3H, d, J = 7 Hz, γ-CH₃ Thr).
¹³C-NMR (50 MHz, CDCl₃) δ: 169,4 (CO Thr), 156,7 (CO Fmoc), 143,4 (C Ar), 141,0 (C Ar), 127,6 (CH Ar), 126,9 (CH Ar), 124,9 (CH Ar), 119,8 (CH Ar), 94,3 (Cl₃ Tce), 74,3 (CH₂ Tce), 67,5 (β-CH Thr), 67,2 (CH₂ Fmoc), 59,2 (α-CH Thr), 46,9 (CH Fmoc), 20,0 (γ-CH₃ Thr).
BEISPIEL 4
Fmoc-Thr(rPr)-OH.
Nach dem für die Synthese von Fmoc-Ser(OrPr)-OTce verwendeten Verfahren stellte Fmoc-Thr-OTce (0,81 g, 1,7 mmol) Fmoc-Thr(OrPr)-OTce (0,34 g, 0,63 mmol) bereit.
Analytische HPLC (t_R 21,5 min, Bedingung B).
[α]_D –6,9° (c 0,024, CHCl₃, 23°C).
IR (Film) 2929, 1732, 1507, 1261, 1092 cm^-1.
ES-MS, berechnet für C₂₆H₂₈O₅NCl₃ 539, gefunden: m/z 540 [M+H]⁺
HRMS-(FAB)-ES-MS, berechnet 540,1111, gefunden 540,1112.
¹H-NMR (250 MHz, CDCl₃) δ: 7,80-7,30 (8H, m, Ar), 5,81-5,70 (1H, m, CH iPr), 5,66 (1H; d, J = 9,5 Hz, NH), 5,2-5,12 (2H, m, CH₂ iPr), 4,88 (1H, dd, J = 12 Hz, CH₂ Tce), 4,62 (1H, dd, J = 12 Hz, CH₂ Tce), 4,45-4,40 (3H, m, α-CH Thr, CH₂ Fmoc), 4,35-4,20 (2H, m, CH Fmoc, β-CH Thr), 1,30-1,27 (9H, m, γ-CH₃ Thr, 2 CH₃ iPr).
¹³C-NMR (50 MHz, CDCl₃) δ: 169,8 (CO Thr), 156,6 (CO Fmoc), 143,7 (C Ar), 143,5 (CH iPr), 141,3 (C Ar), 127,7 (CH Ar), 127,0 (CH Ar), 125,2 (CH Ar), 120,0 (CH Ar), 114,2 (CH₂ iPr), 94,3 (CCl₃ Tce), 76,0 (C iPr), 75,0 (CH₂ Tce), 68,0 (β-CH Thr), 67,3 (CH₂ Fmoc), 59,8 (α-CH Thr), 47,2 (CH Fmoc), 26,6 (CH₃ iPr), 26,1 (CH₃ iPr), 20,7 (γ-CH₃ Thr).
Nach dem für die Synthese von Fmoc-Ser(rPr)-OH verwendeten Verfahren stellte Fmoc-Thr(rPr)-OTce (0,34 g, 0,63 mmol) Fmoc-Thr(rPr)-OH (0,24 g, 0,6 mmol, 35% Gesamtausbeute für 3 Schritte) bereit.
Analytische HPLC (t_R 13,4 min, Bedingung B).
ES-MS, berechnet für C₂₄H₂₇O₅N 409, gefunden: m/z 410 [M+H]⁺.
HRMS-(FAB)-ES-MS, berechnet 410,1967, gefunden 410,1974.
[α]_D 18,3° (c 0,009, CHCl₃, 23°C).
IR (Film) 2979, 1726, 1506, 1451, 1211 cm^-1.
¹H-NMR (200 MHz, CDCl₃) δ: 7,80-7,20 (8H, m, Ar), 5,90-5,70 (2H, m, CH iPr, NH), 5,20 (1H, d, J = 10,2 Hz, CH₂ iPr), 5,13 (1H, d, J = 3,2 Hz, CH₂ iPr), 4,40-4,10 (5H, m, α-CH Thr, β-CH Thr, CH₂ Fmoc, CH Fmoc), 1,31 (3H, d, J = 3,0 Hz, Y-CH₃ Thr), 125 (6H, s, 2 CH₃ iPr).
¹³C-NMR (50 MHz, CDCl₃) δ: 173,6 (CO Thr), 156,3 (CO Fmoc), 143,5 (C Ar), 142,4 (CH iPr), 14l,1 (C Ar), 127,6 (CH Ar), 126,1 (CH Ar), 125,0 (CH Ar), 119,0 (CH Ar), 114,9 (CH₂ iPr), 77,1 (C iPr), 67,7 (β-CH Thr), 67,2 (CH₂ Fmoc), 58,9 (α-CH Thr), 47,0 (CH Fmoc), 26,6 (CH₃ iPr), 25,6 (CH₃ iPr), 19,1 (γ-CH₃ Thr).
BEISPIEL 5
H-Pro-O-TrtCl-Harz.
Cl-TrtCl-Harz, (1 g, 1,6 mmol/g) wurde in eine 20 ml fassende Polypropylen-Spritze gegeben, die mit einem Polyethylen-Filterdisk versehen ist. Das Harz wurde dann mit CH₂Cl₂ (5 × 1 min) gewaschen, und es wurde eine Lösung aus Fmoc-Pro-OH (0,27 g, 0,8 mmol, 0,5 Äq.) und DIEA (0,28 ml, 1,6 mmol, 2 Äq.) in CH₂Cl₂ (2,5 ml) zugefügt, und das Gemisch wurde 1 h gerührt. Die Reaktion wurde durch Zufügen von MeOH (0,8 ml) und nach weiterem 10-minütigem Rühren terminiert. Das Fmoc-Pro-O-TrtCl-Harz wurde den folgenden Wäschen/Behandlungen mit CH₂Cl₃ (3 × 0,5 min), DMF (3 × 0,5 min), Piperidin-DMF (1:4, 2 × 1, 2 × 20 min), DMF (5 × 1 min), Isopropanol (2 × 1 min), DMF (5 × 1 min), MeOH (2 × 1 min), CH₂Cl₂ (3 × 1 min) unterzogen und über einem Vakuum getrocknet.
BEISPIEL 6
H-D-Phe(S)-Ser-Thr(rPr)-Ser(rPr)-Ile-Ala-Pro-O-TrtCl-Harz.
Fmoc-Ala-OH (1,24 g, 4 mmol, 5 Äq.), Fmoc-Ile-OH (1,4 g, 4 mmol, 5 Äq.), Fmoc-Ser(rPr)-OH (0,54 g, 1,4 mmol, 1,7 Äq.), Fmoc-Thr(rPr)-OH (0,56 g, 1,4 mmol, 1,7 Äq.) und Fmoc-Ser-OH (1,05 g, 3,2 mmol, 4 Äq.) wurden dem vorstehend erhaltenden H-Pro-O-TrtCl-Harz unter Verwendung von DIPCDI (0,62 ml, 4 mmol, 5 Äq., für Ala und Ile; 0,21 ml, 1,4 mmol, 1,7 Äq., für Ser(rPr) und Thr(rPr); 0,49 ml, 3,2 mmol, 4 Äq., für Ser) und HOBt (0,54 g, 4 mmol, 5 Äq., für Ala und Ile; 0,18 g, 1,4 mmol, 1,7 Äq., für Ser(rPr) und Thr(rPr); 0,43 g, 3,2 mmol, 4 Äq., für Ser) in DMF (7 ml, für Ala, Ile und Ser) oder CH₂Cl₂ [4 ml, für Ser(rPr) und Thr(rPr)) nacheinander zugefügt. Letztendlich wurde Fmoc-D-Phe(S)-NBt (1,32 g, 2,4 mmol, 3 Äq.) in CH₂Cl₂ (7 ml) dem Peptid-Harz zugefügt. In allen Fällen war der Ninhydrin-Test nach 90-minütiger Kopplung negativ. Die Entfernung der Fmoc-Gruppe und die Wäschen wurden wie in den Allgemeinen Verfahren beschrieben durchgeführt.
BEISPIEL 7
H-D-Phe(S)-Ser-Thr(rPr)-Ser(rPr)-Ile-Ala-Pro-OH.
Das Peptid wurde aus dem Harz durch HFIP-CH₂Cl₂ (1:4, 4 × 3 min) gespalten. Die kombinierten Filtrate wurden unter reduziertem Druck bis zur Trockene verdampft, um 0,34 g der Titelverbindung mit einer Reinheit von > 63% zu ergeben, wie anhand der HPLC (t_R 21,2 min, Bedingung A) geprüft wurde.
ES-MS, berechnet für C₄₃H₆₇N₇O₁₀S 873, gefunden: m/z 874 [M+H]⁺.
BEISPIEL 8
Cyclo[D-Phe(S)-Ser-Thr(rPr)-Ser(rPr)-Ile-Ala-Pro].
Das rohe lineare Peptid (0,34 g, 0,39 mmol) wurde in CH₂Cl₂-DMF (9:1, 150 ml) aufgelöst, und es wurden PyAOP (0,41 g, 0,78 mmol, 2 Äq.) und DIEA (0,27 mL, 1,55 mmol, 4 Äq.) zugefügt. Das Gemisch wurde 1 h rühren lassen, und dann wurde das Lösungsmittel durch Verdampfung unter reduziertem Druck entfernt. Das Rohprodukt wurde mittels der Flash-Chromatographie (CHCl₃-MeOH, 9,8:0,2) gereinigt, um das Titelprodukt (100 mg, 0,12 mmol, 15% Ausbeute) zu ergeben.
Analytische HPLC (t_R 14,7 min, Bedingung B).
ES-MS, berechnet für C₄₃H₆₅N₇O₉S 855, gefunden 856 (M+H]⁺.
HRMS-(FAB)-ES-MS, berechnet 856,4642, gefunden 856,4637.
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃) in Tabelle I ersichtlich.
TABELLE I
BEISPIEL 9
Trunkamid A. Cyclo[D-Phe-Tzn-Thr(rPr)-Ser(rPr)-Ile-Ala-Pro].
Das cyclische Peptid wurde in CH₂Cl₂ (1 ml) aufgelöst und DAST (17 μl, 0,13 mmol, 1,1 Äq.) in CH₂Cl₂ (0,1 ml) wurde tropfenweise bei –20°C unter N₂-Atmosphäre zugefügt. Nach 30 min wurden weitere 1,1 Äq. DAST bei den gleichen Bedingungen zugefügt und zusätzliche 30 min rühren lassen. Das Lösungsmittel wurde durch Verdampfung unter reduziertem Druck entfernt. Das Rohprodukt wurde mittels HPLC gereinigt (Vydac C₁₈-Umkehrphasensäule, 15–20 μm, 250 × 10 mm), linearer Gradient von 55% bis 70% Acetonitril in Wasser in 30 min, 3 ml/min, Detektion bei 220 nm, um das Titelprodukt (35 mg, 0,04 mmol, 33% Ausbeute) zu ergeben.
Analytische HPLC (t_R 16,2 min, Bedingung B).
ES-MS, berechnet für C₄₃H₆₃N₇O₈S 837,5, gefunden: m/z 838,3 [M+H]⁺, 860,3 [M+Na]⁺.
HRMS-(FAB)-ES-MS, berechnet 838,4537, gefunden 838,4556.
¹H-NMR (600 MHz, CDCl₃:d⁶DMSO, 7:3), ist in Tabelle II ersichtlich.
TABELLE II
BEISPIEL 10
Cyclo[L-Phe-Tzn-Thr(rPr)-Ser(rPr)-Ile-Ala-Pro].
Es wurden, wie in Beispielen 1–9 beschrieben, experimentelle Verfahren durchgeführt, mit der einzigen Ausnahme, dass in Beispiel 6 Fmoc-D-Phe(S)-NBt durch Fmoc-L-Phe(S)-NBt ersetzt wurde, das aus Boc-L-Phe-OH hergestellt wurde. Das Produkt wurde charakterisiert.
HPLC (t_R 18,8 min, Bedingung B),
ES-MS, berechnet für C₄₃H₆₃N₇O₈S , 837,5. Gefunden: m/z 838,3 [M+H)⁺, 860,3 [M+Na]⁺
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃) ist in Tabelle III ersichtlich.
TABELLE III
BEISPIEL 11
Cyclo[L-Phe-Tzn-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Ile-Ala-Pro].
Die wie in den Beispielen 5–9 beschriebenen Verfahren, beginnend mit 500 mg Harz, wurden mit den folgenden Ausnahmen durchgeführt, in Beispiel 6 wurden Fmoc-Ser(rPr)-OH, Fmoc-Thr(rPr)-OH und Fmoc-D-Phe(S)-NBt durch Fmoc-Ser(tBu)-OH, Fmoc-Thr(tBu)-OH bzw. Fmoc-L-Phe(S)-NBt ersetzt. Das Produkt wurde charakterisiert.
HPLC [t_R 18,7 min, Bedingung B),
MALDI-TOF-MS, berechnet für C₄₁H₆₃N₇O₈S, 813,5. Gefunden: m/z 814,6
[M+H]⁺, 836,2 [M+Na]⁺, 852,7 [M+K]⁺,
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃) ist in Tabelle IV ersichtlich.
TABELLE IV
BEISPIEL 12
Cyclo[L-Phe-Oxa-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Ile-Ala-Pro].
Die in Beispielen 5–9 beschriebenen experimentellen Verfahren, beginnend mit 1 g Harz, wurden mit den folgenden Ausnahmen durchgeführt, in Beispiel 6 wurden Fmoc-Ser(rPr)-OH, Fmoc-Thr(rPr)-OH und Fmoc-D-Phe(S)-NBt durch Fmoc-Ser(tBu)-OH, Fmoc-Thr(tBu)-OH bzw. Fmoc-L-Phe(O)-OH ersetzt. Das Produkt wurde charakterisiert.
HPLC (t_R 21,1 min, Bedingung A)
ES-MS, berechnet für C₄₁H₆₃N₇O₉, 797,5. Gefunden: m/z 798,1 [M+H)⁺, ¹³C-NMR (200 MHz, CDCl₃) δ: 172,4, 170,7, 170,2, 170,1, 169,9, 168,8, 167,4, 136,3, 129,4, 128,1, 126,5, 77,2, 75,8, 73,9, 70,7, 67,8, 65,9, 61,1, 59,6, 57,5, 56,2, 55,9, 49,1, 47,7, 47,2, 37,8, 36,4, 29,7, 28,2, 27,3, 25,4, 25,1, 23,6, 18,8, 18,3, 16,0, 12,0
¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃) ist in Tabelle V ersichtlich. TABELLE V

Claims

Verfahren zur Herstellung eines Cycloheptapeptids, enthaltend einen 5-gliedrigen heterocyclischen Ring als Teil des Grundgerüsts des cyclischen Peptids, wobei das Cycloheptapeptid die Formel:
hat, wobei Aaa₂, Aaa₃, Aaa₄, Aaa₅ und Aaa₆ unabhängig α-Aminosäurereste sind, R₁ H oder eine organische Gruppe ist; X unabhängig O, S oder NH ist; jedes Y unabhängig C oder CH ist; Z unabhängig CH oder CH₂ ist; R_a H oder eine Alkylgruppe ist, R_g H oder eine organische Gruppe ist oder abwesend ist und jede gestrichelte Linie eine gestattete zweite Bindung anzeigt, welches Verfahren die Festphasensynthese eines linearen Peptidvorläufers, eingerichtet zur Cyclisierung, umfasst, wobei der Vorläufer entweder zur Erzeugung des heterocyclischen Ringes eingerichtet ist oder den heterocyclischen Ring enthält, wobei das lineare Heptapeptid cyclisiert wird und wenn notwendig der heterocyclische Ring erzeugt wird.
Verfahren nach Anspruch 1, wobei die feste Phase ein supersäurelabiles Chlortritylchlorid-Harz ist.
Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, wobei die Peptidkette unter Verwendung einer Strategie auf Fluorenylmethyloxycarbonyl-Basis verlängert wird.
Verfahren nach Anspruch 1, 2 oder 3, welches Cyclisieren eines linearen Heptapeptids, eingerichtet für die Erzeugung eines heterocyclischen Ringes, um ein Cycloheptapeptid, eingerichtet zur Erzeugung eines heterocyclischen Ringes, zu ergeben, und dann Erzeugen des heterocyclischen Rings umfasst.
Verfahren nach Anspruch 4, welches den Schritt:
einschließt, wo R_a H oder eine Alkylgruppe ist; Aaa₂, Aaa₃, Aaa₄, Aaa₅ und Aaa₆ Aminosäuren darstellen, X O oder S ist und A O oder NH ist.
Verfahren nach Anspruch 5, wo X O oder S ist und der geschlossene Ring ein Oxazolin oder Thiazolin ist.
Verfahren nach Anspruch 6, wobei X S ist und der geschlossene Ring ein Thiazolin ist.
Verfahren nach Anspruch 1, 2 oder 3, welches Erzeugen eines linearen Heptapeptidvorläufers einschließlich des heterocyclischen Rings und dann Cyclisieren des linearen Heptapeptids umfasst.
Verfahren nach Anspruch 8, welches den Schritt:
einschließt, wo Fmoc Fluorenylmethyloxycarbonyl ist, R_a H oder eine Alkylgruppe ist, R₁ H oder eine organische Gruppe ist, Peptid Aaa₂, Aaa₃, Aaa₄, Aaa₅ und Aaa₆ ist, welche Aminosäuren darstellen, der ausgefüllte Kreis eine feste Phase ist und D S, O oder NH ist.
Verfahren nach Anspruch 8 oder 9, wobei der heterocyclische Ring, erzeugt durch die Cyclisierung des linearen Heptapeptids, weiter umgesetzt wird, um einen aromatischen heterocyclischen Ring zu erzeugen.
Verbindung der folgenden Formel (III):
Formel III wobei Aaa₂, Aaa₃, Aaa₄, Aaa₅ und Aaa₆ unabhängig α-Aminosäuren mit L- oder D-Konfiguration, wenn angewendet, sind; wobei Aaa₁ unabhängig ein fünfgliedriger Aminoazol-Heterocyclus ist; wobei R₁, R₂, R₃, R₄, R₅, R₆, R₇, R₈ jeweils unabhängig H oder eine organische Gruppe sind, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus einer Alkylgruppe, einer Alkenylgruppe, einer Arylgruppe, einer Aralkylgruppe und ihren substituierten Derivaten mit einer Hydroxygruppe, einer Mercaptogruppe, einer Aminogruppe, einer Guanidinogruppe, einer Halogengruppe; wobei X unabhängig O, S oder NH ist; wobei R_a, R_b, R_c, R_d, R_e, R_f und R_g jeweils unabhängig H oder eine organische Gruppe sind, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus einer Alkylgruppe, und R_g abwesend sein kann; wobei die Paare R_a-R₁, R_b-R₃, R_c-R₅, R_d-R₆, R_e-R₇ und R_f-R₈ einen Teil der gleichen Alkylgruppe bilden können und daher die entsprechenden Aminosäuren cyclische sind; wobei Y unabhängig C oder CH ist; wobei jedes Z unabhängig CH oder CH₂ ist; und die gestrichelte Linie eine gestattete zweite Bindung anzeigt; mit der Ausnahme von Trunkamid A und seinen Isomeren mit den folgenden Formeln:
Verbindung der folgenden Formel (II):
Formel II wobei Aaa₂, Aaa₃, Aaa₄, Aaa₅ und Aaa₆ unabhängig α-Aminosäuren mit L- oder D-Konfiguration, wenn angewendet, sind; wobei Aaa₁ unabhängig ein fünfgliedriger Aminoazol-Heterocyclus ist; wobei R₁, R₂, R₃, R₄, R₅, R₆, R₇, R₈ jeweils unabhängig H oder eine organische Gruppe sind, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus einer Alkylgruppe, einer Alkenylgruppe, einer Arylgruppe, einer Aralkylgruppe und ihren substituierten Derivaten mit einer Hydroxygruppe, einer Mercaptogruppe, einer Aminogruppe, einer Guanidinogruppe, einer Halogengruppe; wobei X unabhängig O, S oder NH ist; wobei R_a, R_b, R_c, R_d, R_e und R_f jeweils unabhängig H oder eine organische Gruppe sind, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus einer Alkylgruppe; wobei die Paare R_a-R₁, R_b-R₃, R_c-R₅, R_d-R₆, R_e-R₇ und R_f-R₈ einen Teil der gleichen Alkylgruppe bilden können und daher die entsprechenden Aminosäuren cyclische sind; wobei Y unabhängig C oder CH ist; wobei Z unabhängig CH oder CH₂ ist; mit der Ausnahme von Trunkamid A und seinen Isomeren mit den folgenden Formeln:
Pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend eine Verbindung nach Anspruch 11 oder 12 zusammen mit einem pharmazeutisch verträglichen Träger.
Verwendung einer Verbindung nach Anspruch 11 oder 12 bei der Herstellung eines Medikaments für die Behandlung von Krebs.