DE3606124A1 - Kolorimetrische pruefvorrichtung zur bestimmung einer spezifischen substanz in einem fluessigen medium, und verfahren zur verwendung der vorrichtung - Google Patents

Description

Die Erfindung betrifft eine Vorrichtung nach dem Ober­ begriff des Anspruchs 1 sowie ein Verfahren zur Verwen­ dung der Vorrichtung.

Die weitverbreitete Verwendung einer Vielzahl von Sub­ stanzen unter den verschiedensten Bedingungen macht wie­ derholte Prüfungen auf das Vorhandensein spezifischer Substanzen erforderlich, um z.B. Dosierungen von Anti­ biotika zu kontrollieren oder zu bestimmen, ob Felder, die mit verschiedenen Arten von organischen Insektiziden behandelt wurden, von Feldarbeitern gefahrlos betreten werden können.

Herkömmliche Prüfverfahren erfordern die Zubereitung einer Probe der zu prüfenden Substanz. Wenn z.B. Paraquat (1,1′-Dimenthyl-4,4′-Bipyridinium-Salz) zum Besprühen von Planzungen verwendet wird, wird eine Probe der be­ sprühten Planzen ins Laboratorium gebracht und eine flüs­ sige Suspension des Paraquats hergestellt, die dann einer Reihe von herkömmlichen Laboratoriumsprüfungen unterzogen wird, um zu bestimmen, ob das Paraquat schon verflüchtigt ist oder ob die verbleibende Menge so gering ist, daß die Arbeiter das mit Paraquat besprühte Feld gefahrlos betreten können. Natürlich erfordert die Prüfung der Proben dieser Substanz an einem entfernten Ort einen erheblichen Zeitaufwand, der die Ernte oder die erfor­ derlichen Behandlungen der Ernte verzögert.

Desgleichen ist es üblich, wenn Patienten eine hohe Dosis von Antibiotika wie Neomyzin, Gentamizin und dergleichen erhalten, Blut abzuzapfen und die Blutproben ins Labora­ torium des Krankenhauses oder in ein sonstiges Laborato­ rium zu bringen, wo dann die erforderlichen Prüfungen durchgeführt werden,um die im Blut des Patienten vorhan­ dene Menge des Antibiotikums zu bestimmen. Auch hier wird durch die Prüfung an einem entfernten Ort die sofor­ tige Reaktion seitens des Krankenhauspersonals zur Dros­ selung oder Erhöhung der Antibiotikadosis aufgrund des Prüfergebnisses verzögert.

Um die Verzögerung infolge der herkömmlichen Prüfungen für verschiedene Arten von organischen Chemikalien, Anti­ biotika und dergleichen auszuschalten, haben wir eine tragbare koloritmetrische Prüfvorrichtung entwickelt, die in eine Karte eingebaut werden kann, die nicht größer als eine Kunststoff-Scheckkarte ist, wie sie üblicher­ weise in der Brieftasche getragen werden. Durch die Verwen­ dung dieser Karte zur Feststellung spezifischer Substanzen wird es möglich, Untersuchungen in situ unmittelbar am Ort vorzunehmen, an dem die Proben der Substanzen ent­ nommen werden.

So wird z.B. im Fall einer mit Paraquat behandelten Pflan­ zung eine Probe des Paraquat in einem flüssigen Medium suspendiert und unmittelbar auf die Prüfkarte gebracht, wo sie einer Reihe von Prüfschritten und Prüfsubstanzen ausgesetzt wird, welche eine sofortige Anzeige der quali­ tativen und quantitativen Aspekte des Ausmaßes liefern, in welchem das Paraquat auf den Pflanzen verblieben ist.

In gleicher Weise kann in Krankenhäusern, in denen Pa­ tienten einer massiven Behandlung mit Antibiotika un­ terzogen werden, das Blut der Patienten in ganz geringer Menge entnommen und das Blutserum z.B. durch eine Vorrich­ tung isoliert werden, wie sie in der am 15. April 1985 unter der Nummer 06/723,162 eingereichten Patentanmeldung mit dem Titel "Suspensionsflüssigkeitsabscheider" beschrie­ ben ist. Dieses Serum wird dann sofort auf die Prüföffnung der Karte gebracht, um die Notwendigkeit einer niedrigeren oder höheren Dosierung des entsprechenden Antibiotikums zu bestimmen.

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, eine kolorimetri­ sche Prüfvorrichtung zu schaffen, die am Prüfort zur Bestimmung einer spezifischen Substanz verwendet werden kann und die Notwendigkeit einer Untersuchung in einem entfernt gelegenen Laboratorium vermeidet, die in eine verhältnismäßig kleine Packung der ungefähren Größe einer Kunststoff-Scheckkarte eingebaut werden kann und damit die Verwendung, die Aufbewahrung der Prüfergebnisse und die Bereitstellung der Vorrichtung am Prüfort erleichtert, und aufgrund ihres Aufbaus und ihrer Zusammensetzung äußerst rasche Anzeigen des Vorhandenseins oder Fehlens der spezifischen festzustellenden Substanz liefert; des­ gleichen soll ein Verfahren zur Verwendung dieser Vorrich­ tung geschaffen werden.

Diese Aufgabe wird erfindungsgemäß bei einer Vorrichtung der eingangs genannten Art durch die kennzeichnenden Merkmale des Anspruchs 1 sowie des Anspruchs 14 gelöst.

Eine bevorzugte Ausführungsform der Erfindung umfaßt ein Gehäuse, das von einer vorderen und einer hinteren Wand oder Folie gebildet wird, die an einem mittleren Rahmenteil befestigt sind, um eine Filterkammer zu bilden. In der Filterkammer ist ein flaches längliches Filter angeordnet, das aus verschiedenen Materalien wie z.B. Glasfaser hergestellt ist und mit der spezifischen Substanz und den verwendeten Prüfflüssigkeiten nicht reagiert.

Ein Prüfabschnitt des Filterkörpers, enthält ein Bindesubstrat, auf das Antikörper für die zu prüfende Substanz in dichter Form aufgebracht sind. Wegen der Wirksamkeit des Substrats und der dichten Aufbringung von Antikörpern auf das Substrat können bei Verwendung der Prüfvorrichtung gemäß der Erfindung und des noch zu beschreibenden erfindungsgemäßen Verfahrens rasche Ergebnisse erzielt werden.

Außerdem weist der Filterkörper einen Kontrollabschnitt auf, der sich an den Prüfabschnitt anschließt, wobei der Kontrollabschnitt das gleiche Bindungssubstrat und den gleichen Antikörper enthält wie der Prüfabschnitt und gegen die Kontrollöffnung anliegend angeordnet ist, welche für gewisse Schritte des erfindungsgemäßen Verfahrens verwendet wird, um eine Kontrollanzeige zu liefern, die mit der Prüfanzeige verglichen wird, welche sich beim Aufbringen einer Probe der entsprechenden Substanz auf die Prüföffnung und der anschließenden Zugabe verschiedener Prüfsubstanzen und Flüssigkeiten ergibt.

Bei dem Verfahren zur Verwendung der beschriebenen Vor­ richtung gemäß der Erfindung wird zunächst eine Probe der spezifischen zu prüfenden Substanz, die in einem flüssigen Medium suspendiert ist, auf die Prüföffnung der Vorrichtung gebracht. Beim Aufbringen auf die Prüf­ öffnung wird die Probe und ihr flüssiges Medium sofort in den Prüfbereich des Filterkörpers gesaugt, und wenn in dem entsprechenden flüssigen Medium irgendwelche Anti­ gene vorhanden sind, werden diese fast sofort an die im Bindesubstrat enthaltenen Antikörper gebunden.

Nach dem Aufbringen einer Probe der spezifischen Substanz besteht der folgende Verfahrensschritt in der Zugabe einer wässerigen Lösung eines mit Enzym markierten Anti­ gens auf die Prüföffnung. Diese Lösung verdrängt sofort die Probelösung in das Filtermaterial, wobei buchstäblich keine Vermischung der Lösungen stattfindet.

In einem weiteren Schritt des Verfahrens wird eine Substrat­ lösung eingebracht, welche die Lösung verdrängt, die das nichtkombinierte mit Enzym markierte Antigen enthält. Die Zugabe des Substrats ergibt überhaupt keine Farbanzeige, wenn die Antikörper mit den in der Prüfsubstanz enthal­ tenen Antigenen gesättigt sind. Wenn andererseits weniger Antigene in der Prüfsubstanz enthalten sind, erfolgt eine geringfügige Farbentwicklung. Wenn keine Antigene vorhanden sind, ergibt sich eine vollständige Farbsättigung.

Weitere Schritte des Verfahrens umfassen die Benützung der Kontrollöffnung, um eine kolorimetrische Anzeige des Sättigungsgrades des Enzymtests zu liefern. Die Sättigung wird durch Aufbringen der markierten Antigene und des die Farbe entwickelnden Substrats auf den Kontrollbereich des Filters durch die Kontrollöffnung erzielt. Da die markierten Antigene die Antikörper sättigen, ergibt sich eine volle Farbentwicklung, die sowohl die Funktionsfähigkeit der Prüfvorrichtung oder Prüfkarte als den stärksten Farbton anzeigt, der erwartet werden kann und mit dem die Farbe der Prüfsubstanz verglichen werden kann, um sowohl qualitativ als auch quantitativ das Vorhandensein oder Fehlen der Antigene in der Prüfsubstanz zu bestimmen.

Anhand der Figuren wird eine Ausführungsform der Erfindung näher erläutert. Es zeigt:

Fig. 1 eine Draufsicht auf eine Prüfkarte gemäß der Erfindung,

Fig. 2 eine Unteransicht der Vorrichtung von Fig. 1,

Fig. 3 einen vergrößerten Teilschnitt längs der Linie 3-3 in Fig. 1 und

Fig. 4 eine auseinandergezogene Darstellung, welche die verschiedenen Bestandteile der Prüfkarte von Fig. 1 zeigt.

In der Zeichnung ist eine kolorimetrische Prüfvorrichtung 10 in eine Prüfkarte 12 eingesetzt, welche, wie bereits erwähnt, etwa das Format einer herkömmlichen Scheckkarte und ungefähr die gleiche Dicke aufweist. Die kolorimetri­ sche Prüfvorrichtung wird bei dieser Ausführungsform der Erfindung als in eine Karte eingesetzt dargestellt, doch sind selbstverständlich verschiedene andere Ausführungs­ formen denkbar.

Die Prüfkarte 12 weist im allgemeinen eine rechteckige Form auf und besteht aus einer oberen Folie 14 aus syn­ thetischem Kunststoffmaterial wie z.B. Vinylchlorid. In der oberen Folie 14 sind in der Nähe des unteren Endes Belüftungsöffnungen 15 vorgesehen, welche in noch zu beschreibender Weise der Belüftung der Karte dienen.

Die obere Folie 14 ist durch Klebung am mittleren Rahmen­ teil 18 befestigt, der aus verhältnismäßig steifem dünnen Kunsstoffmaterial wie Vinylchlorid gestanzt oder ander­ weitig hergestellt ist und eine längliche rechteckige Öffnung 20 enthält sowie eine Zahl von Fingern 22 zur Isolierung von Flüssigkeiten aufweist, die aus dem oberen Teil des Rahmenteils 18 herauragen.

Auf eine untere Folie 24 aus dem gleichen Material wie die obere Folie 14 ist eine Schicht eines druckempfind­ lichen Klebstoffs 26 an der Oberseite angebracht, die somit an der Unterseite des mittleren Rahmenteils 18 befestigt werden kann.

In der länglichen rechteckigen Öffnung 20 des Rahmenteils 18, die als Filterkammer der Vorrichtung 10 dient, ist ein flacher länglicher Filterkörper 30 untergebracht, der aus verdichteten Glasfasern oder dergleichen herge­ stellt ist und eine Zahl von nach oben vorspringenden Fingern, Teilen oder Bereichen 32 aufweist, welche in die Zwischenräume zwischen den entsprechenden Fingern 22 des mittleren Rahmenteils 18 zu einem Zweck einsetzbar sind, der noch zu beschreiben ist.

Es ist zu beachten daß, wie am besten in Fig. 1 darge­ stellt, die Belüftungsöffnungen 15 über dem unteren Ende der die Filterkammer bildenden Öffnung 20 und auch über dem unteren Ende des Filterkörpers 30 liegen.

Folglich erleichtert beim Eindringen verschiedener Flüssig­ keiten in die Prüföffnung und in die Kontrollöffnung die Verbindung zwischen der Kammer 20 und der Umgebungs­ luft die sofortige Trennung der nacheinander eingebrach­ ten Flüssigkeiten in noch zu beschreibender Weise.

Offensichtlich besteht einer der ersten Fertigungsschritte der Prüfkarte 12 in der Herstellung des Filterkörpers 30 und des mittleren Rahmenteils 18 mit den vorstehenden Fingern 32 am Filterkörper 30 und den entsprechenden isolierenden Fingern 22 am mittleren Rahmenteil 18. Dann werden die oberen und unteren Folien 14 und 24 hergestellt und bedruckt. Die obere Folie 14 wird mit der Prüföffnung 40 und der mit dieser ausgerichteten Kontrollöffnung 42 versehen, wobei neben den entsprechenden Öffnungen eine Beschriftung vorgesehen ist, um deren Benützung zu erleichtern.

Das Filter kann aus einer großen Zahl von Filtermaterialien hergestellt werden, die in Tiefenrichtung planar angeordnet und in der Lage sind, Suspensionsbestandteile oder Teil­ chen aufzufangen. Ein Beispiel eines solchen Materials ist Glas-Mikrofasermaterial, das mit verschiedenen Poren­ größen verfügbar ist.

Ein wesentliches Merkmal des zu verwendeten Filtermaterials muß darin bestehen, daß die Filterporen in der Filter­ ebene miteinander verbunden sind. Ein herkömmliches Filter, das in der Lage ist, Suspensionsbestandteile oder Teil­ chen aufzufangen, aber nicht im Rahmen der Erfindung verwendet werden kann, ist ein planares Membranfilter, dessen Poren seine entgegengesetzten Flächen miteinan­ der verbinden, das aber keinen seitlichen Strömungsweg im wesentlichen parallel zu den Flächen und zwischen denselben liefert.

Bei dem beschriebenen Aufbau dient der eigentliche Filter­ körper 30 dazu, die Flüssigkeit von den Prüf- und Kontroll­ fingern 32 abzusaugen. Dadurch wird sichergestellt, daß nachfolgende Flüssigkeitsmengen schnell in die Prüf- und Kontrollfinger gesaugt werden können, so daß die verschiedenen bei der Durchführung einer Prüfung mit einer spezifischen Prüfsubstanz eingebrachten Prüfflüssig­ keiten fast sofort wirksam werden können.

Außerdem ist die untere Folie 24 mit der in Fig. 2 darge­ stellten Legende bedruckt, um die Prüfergebnisse blei­ bend anzuzeigen. Entspricht das Prüfergebnis der positiven Darstellung, so war die Prüfung positiv, entspricht sie der negativen Darstellung, ist sie negativ; wenn sie jedoch der Anzeige für eine ungültige Prüfung entspricht, so ist die Karte nicht funktionsfähig.

Wegen den geringen Abmessungen der Karte können die Er­ gebnisse leicht in einem dauernden Archiv aufbewahrt werden. Wie aus der Legende auf der unteren Folie 24 hervorgeht, ist die Prüfung voll positiv, wenn die Prüf­ öffnung B überhaupt keine Färbung zeigt. Wenn Vollfärbung der Prüföffnung B eintritt, ist die Prüfung negativ und, wie noch zu beschreiben ist, wenn weder die Prüföffnung noch die Kontrollöffnung eine Färbung zeigt, ist die Prüfung ungültig.

Nach dem Bedrucken der oberen und unteren Folie 14 und 24 in der oben beschriebenen Weise werden die Rückseiten der Folien mit einem druckempfindlichen Kleber beschich­ tet, wie in den Figuren mit 16 und 26 bezeichnet.

Die Bestandteile der Prüfvorrichtung werden vor der Präpa­ rierung der Prüffinger und der Kontrollfinger 32 zusammen­ gebaut. Der Filterkörper wird dann in die Öffnung 20 eingesetzt, welche die Filterkammer bildet, und die obere und untere Folie 14 und 24 wird durch Kleben am Umfang des Rahmenteils 18 befestigt. Nach dem Zusammenbau der Prüfvorrichtung 12 werden die Bindesubstrate auf die Prüf- und Kontrollfinger 32 durch die Prüföffnung 40 und die Kontrollöffnung 42 gebracht. Diese Bindesubstrate müssen selbstverständlich der jeweiligen Probe entspre­ chen, die der Prüfung unterzogen werden soll.

Typische bakterielle Bindesubstrate sind staphylococcus aureus A und ähnliche Bindebakterien. Es ist auch denkbar, feste Substrate wie Mikrosphäroide aus Gummi oder Glas auf den Prüf- und Kontrollfingern 32 des Filters zu verwen­ den.

Es ist zu beachten, daß zusätzliche Finger 32 vorgesehen sind, die erforderlichenfalls für zusätzliche Prüf- oder Kontrollfunktionen verwendbar sind.

Nach Präparierung der Finger 32, welche den Prüfabschnitt und den Kontrollabschnitt des Filterkörpers 30 bilden, werden die für das zu prüfende Antigen erforderlichen Antikörper auf das Bindesubstrat der Prüf- und Kontroll­ finger aufgebracht, und es erfolgt eine maximale Sättigung mit Bindesubstrat.

Nach Bindung der Antikörper im Bindesubstrat ist die Prüfvorrichtung 12 benützungsfertig. Selbstverständlich wird die Prüfvorrichtung 12 auf entsprechenden Etiketten mit der Bezeichnung der Prüfung versehen, für die sie benützt werden soll. Es kann eine große Zahl von zusammen­ gebauten Prüfvorrichtungen 12 am Lager gehalten werden, und die Kombination der Antikörpersubstrate kann durch die Prüf- und Kontrollöffnungen 40 und 42 eingebracht werden, wenn eine bestimmte Prüfung durchgeführt werden soll.

Es ist zu beachten, daß die Prüf- und Kontrollabschnitte der Filterkörper, die durch die Finger 32 gebildet werden, zwischen die Finger 22 des mittleren Rahmenteils 18 einge­ setzt werden, wobei die Finger 22 für Flüssigkeiten un­ durchlässig sind und dazu dienen, als Isoliereinrichtung das Übertreten von Flüssigkeit zwischen den Prüf- und Kontrollfingern 32 zu verhindern.

Wenn die obere Folie 14 funktionsgemäß mit dem Rahmenteil 18 verbunden und über dem Filterkörper 30 angeordnet ist, sind die Prüföffnungen 40 und die Kontrollöffnungen 42 auf die in den Prüf- und Kontrollfingern 32 gebun­ denen Antikörper ausgerichtet, welche den Prüf- und Kon­ trollabschnitt des Filterkörpers 30 darstellen.

Die in Verbindung mit dem Bindesubstrat verwendeten und auf die Prüf- und Kontrollfinger 32 aufgebrachten Antikör­ per sind im entsprechenden Fachhandel erhältlich oder können durch Injektion von ausgewählten Antigenen mit Tieren im Laboratorium gewonnen werden. Selbstverständ­ lich müssen die Antikörper auf jeden Fall zu den Anti­ genen passen, die der Prüfung unterzogen werden sollen.

Wenn z. B. eine Prüfung für den Nachweis von Paraquat an Pflanzen durchgeführt werden soll, müssen die Antikör­ per diejenigen sein, die sich aufgrund der Anwesenheit von Paraquat-Antigenen bilden.

Wenn eine Prüfung auf Paraquat durchgeführt wird, wird eine geeignete Flüssigkeitssuspension des verdächtigten Paraquatrests durch die Prüföffnung 40 eingebracht, und wenn in der Flüssigkeitssuspension Paraquatantigene ent­ halten sind, verbinden sie sich mit den auf den Prüffingern 32 vorhandenen Antikörpern.

Das Antigen verbindet sich mit dem gebundenen Antikorper und bildet einen fast irreversiblen Komplex, wenn die Probe durch die Antikörperzone der Prüffinger 32 gesaugt wird. Die Reaktion erfolgt wegen der hohen Antikörperkon­ zentration sehr schnell innerhalb von Sekunden, und die Empfindlichkeit kann durch Erhöhung der Probendosis erhöht werden.

Wenn die Probe voll aufgesaugt ist, wird auf die Prüf­ öffnung 40 ein Tropfen wässeriger Lösung eines mit Enzym markierten Antigens gebracht. Diese Lösung verdrängt den Teil der Probenflüssigkeit, der noch nicht durch die Saugwirkung in den eigentlichen Filterkörper 30 ge­ langt ist. Die mit Enzym markierten Antigene verbinden sich mit allen noch ungebundenen Antikörpern, so daß die Menge des markierten Komplexes umgekehrt proportional zur Menge der Antigene in der Probe ist.

Nach Einbringen der mit Enzym markierten Antigene durch die Prüföffnung 40 wird eine Substratlösung in die Prüf­ öffnung 40 gebracht und verdrängt den Teil der markierten Antigenlösung, der noch in der Nähe der Öffnung 40 verbleibt. Das gebundene Enzym wirkt auf das Substrat und erzeugt eine Farbänderung, die leicht durch die Prüföffnung 40 beobachtbar ist. Wenn sich keine Färbung entwickelt, ist dies eine Anzeige dafür, daß die Probe genügend Anti­ gene enthält, um die Antikörper zu sättigen.

Wenn vollständige Farbentwicklung eintritt, zeigt dies an, daß keine nennenswerte Menge von Antigenen in der Probe vorhanden war, da die markierten Antigene alle oder die Mehrzahl der Antikörper-Standorte eingenommen haben.

Wenn eine Zwischenfärbung erfolgt, zeigt dies an, daß die Probe Antigene enthält, und die Art der Antigene bestimmt darüber, welche Entscheidung aufgrund des Teil­ nachweises von Antigenen zu treffen ist.

Da das Fehlen von Farbentwicklung in der Prüföffnung einen Hinweis auf die vollständige Sättigung der Anti­ körper durch die Antigene der Probe bildet, ist es wün­ schenswert, daß die Kontrollöffnung 42 für das Bindesub­ strat und die in den Kontrollfingern 32 enthaltenen Antikörper Zugang gewährt. Dadurch wird es der die Prüf­ karte benützende Person möglich, die markierte Antigenlösung auf die Kontrollöffnung 42 zu bringen. Selbstverständlich wird hier das markierte Antigen sich sofort mit den Anti­ körpern verbinden, und die anschließende Einbringung des die Färbung entwickelnden Substrats in die Kontroll­ öffnung 42 führt zur vollständigen Farbsättigung.

Wenn die Kombination der Antikörper mit den markierten Antigenen nicht richtig funktionieren würde, ergäbe sich keine kolorimetrische Farbentwicklung, was ein Hinweis dafür wäre, daß die Prüfkarte 12 Mängel aufweist, welche die Aussonderung der Prüfkarte 12 und die Verwendung einer Ersatzkarte rechtfertigen würden.

Von äußerster Wichtigkeit für die Funktion der Prüfvor­ richtung 12 ist die Tatsache, daß der Aufbau der Karte in seiner Kombination der Prüf- und Kontrollfinger 32 auf dem großen Filterkörper 30 mit der belüfteten Filter­ kammer 20 naturgemäß die Trennung der nacheinander einge­ brachten Lösungen mit der Probe, den mit Enzym markierten Antigenen und dem Substrat bewirkt. Die sofortige Absaugung der flüssigen Komponente der Lösungen ermöglicht es, daß die nacheinander erfolgende Einbringung der Probe, der markierten Antigene und des Entwicklungssubstrats schnell wirkt und rasche Prüfergebnisse liefert.

Außerden beschleunigen die Belüftungsöffnungen 15 in der Vorderwand 14 wesentlich den Prüfungsablauf durch Herstellen einer Verbindung mit der Umgebungsluft am unteren Ende des Filterkörpers 30, so daß die nacheinander eingebrachten Flüssigkeiten rasch nach unten durch den Filterkörper 30 fließen.

Es ist für den Fachmann leicht ersichtlich, daß die Prüf­ karte gemäß der Erfindung sowie das Verfahren zur Benützung derselben einen wesentlichen Vorteil gegenüber dem Stand der Technik bezüglich der Handlichkeit, des sofortigen Ergebnisses, der eingebauten Kontrollmöglichkeit und des allgemeinen Nutzens in einer Vielzahl von Anwendungen mit sich bringt.

Wichtig ist auch die Tatsache, daß die Dichte der in den Prüf- und Kontrollabschnitt des Filterkörpers gebrach­ ten Antikörper wesentlich die Geschwindigkeit erhöht, mit der die verschiedenen Prüfungen durchgeführt werden können. Außerdem erhöht das Vorhandensein des flachen Filterkörpers und die Verbindung desselben mit dem Prüf- und Kontrollabschnitt wesentlich die Saugwirkung für die verschiedenen in den Prüf- und Kontrollabschnitt eingebrachten Lösungen, wodurch im wesentlichen die Verdün­ nung der verschiedenen Prüfflüssigkeiten und anderer im Verlauf der Prüfungsschritte des Verfahrens gemäß der Erfindung eingebrachten Flüssigkeiten vermieden wird.

Selbstverständlich kann die Prüfvorrichtung gemäß der Erfindung, statt in eine Prüfkarte eingesetzt zu werden, in einer Vielzahl anderer Ausführungsformen verwendet werden.

Claims (17)

1. Kolorimetrische Prüfvorrichtung zur Bestimmung einer spezifischen Substanz in einem flüssigen Medium, gekennzeichnet durch ein Gehäuse mit einer Vorderwand, einer Rückwand und Seitenkanten, wobei in der Vorder­ wand eine Kontrollöffnung und eine Prüföffnung vorge­ sehen ist und das Gehäuse eine Filterkammer enthält, durch ein in der Kammer angeordnetes flaches längliches Filter, das an die Kontroll- und Prüföffnung anlie­ gende Prüfabschnitte aufweist, und durch eine Trenn­ einrichtung, die im Gehäuse zwischen dem Kontroll­ abschnitt und dem Prüfabschnitt des Filters zur Iso­ lierung dieser Abschnitte gegeneinander angeorndet ist.

2. Vorrichtung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß im Prüf- und Kontrollabschnitt des Filters jeweils ein Bindesubstrat angeordnet ist, das gegen die Kon­ trollöffnung und die Prüföffnung anliegt, und daß an das Bindesubstrat Antikörper für die spezifische Substanz gebunden sind.

3. Vorrichtung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die Kontroll- und Prüfabschnitte des Filters durch längliche Finger gebildet sind, die vom Filter­ körper vorstehen, und daß die Trenneinrichtungen zwischen den Fingern angeordnet sind, um eine Über­ tragung zwischen denselben zu verhindern.

4. Vorrichtung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die Kanten durch einen mittleren Rahmenteil ge­ bildet sind, der die Filterkammer bildet, und daß die Vorderwand und die Rückwand das Filter in der Filterkammer festhalten.

5. Vorrichtung nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß der mittlere Rahmenteil die Trenneinrichtung enthält, die zwischen dem Prüfabschnitt und dem Kon­ trollabschnitt des Filters angeordnet ist.

6. Vorrichtung nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß die Vorderwand und die Rückwand durch Klebung mit dem Rahmenteil verbunden sind, um das Austreten von Flüssigkeit aus der Filterkammer zu verhindern.

7. Vorrichtung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß eine Belüftungseinrichtung vorgesehen ist, die mit der Filterkammer in Verbindung steht.

8. Kolorimetrische Prüfvorrichtung zur Bestimmung einer spezifischen Substanz in einem flüssigen Medium, gekennzeichnet durch eine Prüfkarte mit einer Kon­ trollöffnung und einer Prüföffnung sowie einer Filter­ kammer, die mit diesen Öffnungen in Verbindung steht, durch ein in der Filterkammer angeordnetes Filter mit einem Kontrollabschnitt und einem Prüfabschnitt, welche jeweils unter der Kontrollöffnung und der Prüföffnung liegen, wobei der Kontrollabschnitt vom Prüfabschnitt des Filters isoliert ist, und durch gleichartige Bindesubstrate im Kontrollabschnitt und im Prüfabschnitt des Filters, an die Antikörper für die entsprechende Substanz gebunden sind.

9. Vorrichtung nach Anspruch 8, gekennzeichnet durch eine obere und untere Haltefolie und einen mittleren Rahmenteil, an dem die Folien befestigt sind.

10. Vorrichtung nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß am Rahmenteil Isoliereinrichtungen zwischen dem Kontrollabschnitt und dem Prüfabschnitt des Filters vorgesehen sind, um das Übertreten von Flüssigkeit zwischen denselben zu verhindern.

11. Vorrichtung nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, daß der Kontrollabschnitt und der Prüfabschnitt des Filters jeweils aus länglichen Fingern besteht, die unter der Kontrollöffnung und unter der Prüföffnung liegen.

12. Vorrichtung nach Anspruch 11, dadurch gekennzeichnet, daß der Rahmenteil eine Flüssigkeitssperreinrichtung enthält, die zwischen dem Kontrollabschnitt und dem Prüfabschnitt des Filters angeordnet ist, um das Übertreten von Flüssigkeit zwischen den Abschnitten zu verhindern.

13. Vorrichtung nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, daß eine Belüftungseinrichtung vorgesehen ist, die mit der Filterkammer in Verbindung steht.

14. Verfahren zur kolorimetrischen Prüfung zum Nachweis einer spezifischen Substanz in einem flüssigen Medium unter Verwendung einer kolorimetrischen Prüfeinrichtung, die eine Kontrollöffnung und eine Prüföffnung sowie ein Filter enthält, dessen Kontrollabschnitt und Prüfabschnitt jeweils unter der entsprechenden Öff­ nung liegt, wobei der Kontrollabschnitt und der Prüf­ abschnitt des Filters jeweils ein Bindesubstrat mit einem daran gebundenen Antikörper für die entsprechende spezifische Substanz enthält, dadurch gekennzeichnet, daß eine Probe der entsprechenden Substanz in einem flüssigen Medium durch die Prüföffnung auf die gebun­ denen Antikörper gebracht wird, um die Bindung von Antigenen in der Substanz an die Antikörper zu ge­ statten, wodurch aufgrund des Aufsaugens der Probe durch den Prüfabschnitt des Filters ein Komplex gebil­ det wird, daß anschließend das flüssige Medium der Probe durch Zugabe einer wässerigen Lösung eines mit Enzym markierten Antigens verdrängt wird um die Verbindung des mit Enzym markierten Antigens an etwaige nicht-gebundene Antikörper zu ermöglichen, daß sodann das flüssige Medium der Probe durch Zugabe einer Substratlösung durch die Prüföffnung zur Verbindung mit etwaigen gebundenen markierten Antigenen verdrängt wird, und daß die gebundenen durch Enzym markierten Antigene auf das Substrat wirken, um eine durch die Prüföffnung beobachtbare Farbveränderung zu erzeugen.

15. Verfahren nach Anspruch 14, dadurch gekennzeichnet, daß das mit Enzym markierte Antigen an der Kontroll­ öffnung eingebracht wird und daß anschließend die Substratlösung durch die Kontrollöffnung zugeführt wird, um eine kontrollierte Anzeige der Wirksamkeit der Prüfkarte zu erzielen.

16. Kolorimetrische Prüfvorrichtung zur Bestimmung einer spezifischen Substanz in einem flüssigen Medium, gekennzeichnet durch eine Prüfkarte mit einer Prüf­ öffnung und einer in der Prüfkarte angeordnete Filter­ kammer, die mit der Prüföffnung in Verbindung steht, durch ein in der Filterkammer angeordnetes Filter mit einem Prüfabschnitt, der unter der Prüföffnung liegt, und durch ein Bindesubstrat im Prüfabschnitt des Filters, an das Antikörper für die entsprechende Substanz gebunden sind.

17. Vorrichtung nach Anspruch 16, gekennzeichnet durch eine obere und untere Haltefolie und einen mittleren Rahmenteil, an dem die Folien befestigt sind.