DE2252281A1

DE2252281A1 - Enzymatisch hydrolisierte zusammensetzung und deren derivate aus hautlappen

Info

Publication number: DE2252281A1
Application number: DE2252281A
Authority: DE
Inventors: Yasuo Fujimoto; Ikuo Matsukuma; Masayuki Teranishi
Original assignee: Kyowa Hakko Kogyo Co Ltd
Current assignee: KH Neochem Co Ltd
Priority date: 1971-10-28
Filing date: 1972-10-25
Publication date: 1973-05-03
Also published as: FR2158008A1; GB1414634A; FR2158008B1; US3898129A; CA993824A; JPS4849688A; JPS5242777B2

Description

Enzymatisch hydrolisierte Zusammensetzung und deren Derivate aus. Hautlappen

Das Verfahren besteht daraus, a) einen Hautlappen (skin rag) enzymatisch zu hydrolysieren mit einer neutralen oder alkalischen Protease, welche imstande ist, Colagen anders als Collagenase zu zersetzen und b) die erhaltenen Oligopeptid-Hydrolysierungsprodukte mit einem Acylierungsmittel vom Fettsäuretyp mit 8-22 C-Atomen unter Bildung von N-acylierten Oligopeptiden zu N-acylieren, welche als Netzmittel brauchbar sind.

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Diese Erfindung betrifft a) ein Verfahren zur Gewinnung einer enzymatisch hydrolysierten Zusammensetzung aus Hautlappen durch Beihandlung dieser Hautlappen mit einer Protease, b) ein Verfahren zur Gewinnung von N-Acylderivaten durch Unterwerfung jelner enzymatisch hydrolysierten Zusammensetzung einer Acylieren gsreak ti on unter Verwendung eines Acylierungsmittels vom langkettigen Fettsäuretyp und c) die Nutzbarmachung jener N-Acylderivate als Netzmittel.

Im allgemeinen fällt eine große Menge an Hautlappen (darunter sind zu verstehen : tierische Hautlappen, wie z. B. Fellstücke, Lederlappen u. dgl.) als Abfall bei verschiedenen Läderfabriken an. Der unangenehme Geruch des Hautlappens selbst urld der Geruch, welcher während der Nachbehandlung des Lappens entwickelt wird, haben Fragen der Luftverschmutzung und der Vdlksgesundheit aufgeworfen, die aus diesem und anderen Gründen ailftauchten; der Hautlappen ist jedoch trotz des energischen Verlangens noch nicht für eine lange Zeitperiode wirkungsvoll nutzbar gemacht worden.

Di.e Collagenfaser, welche ein Teil der Hauptzusammensetzung der Heiut ist, hat eine gewundene Struktur, Man sagt, daß diese Cdllagenschraubenlinie unter normalen Bedingungen gegen Protease anders als Collagenase stabil ist. Es ist z. B. berichtet worden, daß verschiedene Enzyme, wie Pepsin, Trypsin, Promnase (Handelsprodukt, das durch die Kaken Kagaku K.K., Japan, erhältlich ist), Proctase ( Handelsprodukt, das durch die Meiji Seika K.K., Japan, erhältlich ist) u. dgl. nur den Peptid-Anteil

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(weniger als 5 % des Gesamtmoleküls) zersetzen, welcher aus der Schraubenlinien-Struktur an dem Ende eines Collagen-Moleküls herausragt, nicht aber die Schraubenlinien-Struktur selbst angreifen [_Kobunshi ( high molecule ), Band 19, Seiten 355 - 361 (1970)3

Wir' haben das Problem der ökonomischen und wirksamen Nutzung des Hautlappens umfassend untersucht und-haben jetzt die Entdedkung gemacht, daß der Hautlappen in niedermolekulare Oligopep tid'e durch einen gewissen Typ einer neutralen und/oder alkalischen Protease leicht zu zersetzen ist. Wir haben auch die interessante Tatsache entdeckt, daß eine solche Hydrolyse mit¹, einer sehr langsamen Geschwindigkeit bis zur Vollendung, d. h. den Aminosäure-Monomeren, verläuft.

Die Protein-Hydrolyse ist in drei Typen gegliedert, d.h. die saure, die alkalische und die enzymatische Hydrolyse, in Abhängigkeit von dem verwendeten Hydrolysierungsmittel. Die ersten beiden T^En der Hydrolyse haben den Nachteil, daß die Peptide und die produzierten Aminosäuren verantwortlich sind für die weitere Zersetzung in die unerwünschten Fumine {fumins). Ferner haben die beiden ersten Typen der Hydrolyse - wenn sie aui: die Hydrolyse von Proteinen zu niedermolekularen Peptiden angewendet werden, welches ein Zweck der vorliegenden Erfindung ist - den Nachteil, daß die Hydrolyse zu der Produktion von Aitdlnosäure-Monomeren infolge der Schwierigkeit der Kontrolle dieser Hydrolyse-Prozesse führt.

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Die üblichen Techniken der alkalischen Hydrolyse von Hautlappen unter Druck haben auch die zuvor erwähnten Nachteile. Ferner ist die enzymatische Hydrolyse konventionell angewendet worden entweder für den Zweck des Erhalts von Collagen mit gleichzeitiger Entfernung verschiedener Proteine { wie Albumin, Globulin und viskoses Protein), welche für die Leder-Produktion oder für den Zweck der Produktion hochmolekularer Proteine, wie Gelatine, unerwünscht sind.

Gemäß dem Verfahren der vorliegenden Erfindung ist es möglich, direkt aus Hautlappen unter milden Bedingungen ein Hydrolysat zu erhalten, welches wenig Aminosäure-Monomer enthält, unter Verwendung einer neutralen oder alkalischen Protease, welche imstande ist, Collagen anders als Collagenase zu zersetzen.

Der Hautlappen, welcher für den erfindungsgemäßen Zweck als Rohmaterial verwendet werden soll, schließt jeden und auch alle Hautlappen ein, die als Abfall bei der Lederfabrikation anfallen, üblicherweise können entweder rohe oder gegerbte Hautlappen von der Kuh, dem Pferd, der Ziege, dem Schwein, dem Schaf u. dgl. für den erfindungsgemäßen Zweck verwendet werden.

Die Hydrolyse wird ausgeführt, indem man den Hautlappen in Wasser taucht, z. B. durch Einweichen oder Einhängen. In diesem Falle wird die Wassermenge vorzugsweise ca. 4 bis 5o mal der des einzutauchenden Hautlappens betragen, obgleich es nicht notwendig ist, die Menge besonders zu begrenzen. Es ist schwierig, auf dem Hautlappen ohne Vorbehandlung eine enzymatische Einwirkung durchzuführen, und zwar wegen seiner komplizierten Struktur.

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So ist es oftmals notwendig, das Substrat vor der Zersetzung zu denaturieren. Es ist jedoch möglich, den Grad der Zersetzung zu verbessern, wenn der erfindungsgemäß verwendete Hautlappen durch Erhitzen denaturiert wird. Zum Beispiel kann der Hautlappen in Wasser getaucht oder eingeweicht werden und dann der Wärmebehandlung vor der entzymatischen Zersetzung unterworfen werden. Es ist im allgemeinen vorzuziehen, den Hautlappen ca. o,5-5 Std. auf ca. 8o-loo°C zu erhitzen. Wenn die Haut einer solchen Wärmebehandlung unterworfen wird, kann der Grad der Zersetzung weiter verbessert werden, indem man die für die Wärmebehandlung verwendete wässrige Lösung, verwirft und die enzymatische Zersetzung in frischem Wasser ausführt, in welches die Haut getaucht oder suspendiert wird.

Die für die Hydrolyse zu verwendende· Protease kann tierischen, pflanzlichen oder mikroorganischen Ursprungs sein. Jedoch kann entweder eine neutrale oder alkalische Protease, welche von Mikroorganismen (Bacillus oder Streptomyces) stammt und befähigt ist, Collagen anders als Collagenase zu zersetzen, verwendet werden, bessere Ergebnisse werden jedoch unter Verwendung einer alkalischen Protease erhalten, welche Collagen zu zersetzen vermag. Es ist auch möglich, verschiedene Enzymtypen in Kombination zu verwenden. Typische verwendbare Enzyme werden veranschaulicht durch die Protease vom Heu-Bacillus (Bacillus subtilis), Tacynase B (eine alkalische Protease, vom Bacillus subtilis stammend), wie z. B. Epolozyme (Handelsprodukt, das durch die Kyowa Hakko Kogyo K.K., Japan, erhältlich ist), Tacynase N ( eine neutrale Protease vom Streptomyces caespitosus stammend), wie z. B. Tacynase (Handelsprpdukt, das durch die Kyowa Hakko Kogyo K.K., Japan, erhältlich ist), eine alkalische Protease, vom Bacillus subtilis stammend, wie z. B. Prozyme (Handelsprodukt, das durch die Daiwa Kasei K.K., Japan, erhältlich ist) oder eine neutrale Protease, stammend vom

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Streptomyces griseus, wie ζ. B. Pronase (Handelsprodukt der Kaken Kagaku, K. K., Japan).

Die Bedingungen für die Hydrolyse hängen natürlich von dem verwendeten Enzym ab, und die wichtigsten Faktoren sind p„-Wert und Temperatur des Reaktionsgemisches. In jedem Fall sollten das p„ und die Temperatur bestimmt werden, so daß die Aktivität des verwendeten Enzyms wirkunsvoll ausgenutzt werden kann. Das p„ kann auf einen geeigneten Wert durch eine geeignete alkalische oder saure Substanz eingestellt werden, z.B. durch Natronlauge, Kalilauge, Natriumcarbonat, Natriumbicarbonat, Salzsäure, Schwefelsäure, Essigsäure u. dgl. Es ist auch möglich, eine geeignete Pufferlösung zu verwenden.

Die Hydrolyse kann auf folgende Weise ausgeführt werden.

Sofort nach dem Eintauchen oder Suspendieren des Hautlappens in Wasser oder nach der genannten Vorbehandlung wird das Reaktionsgemisch auf die optimale Temparatur ( z. B. 2o-7o C ) und auf das p_H ( z. B. 7-12 ) eingestellt, welche in Abhängigkeit von den zugesetzten Enzymtypen variieren können. Die Menge an zuzusetzendem Enzym kann in Abhängigkeit von der Aktivität variieren, und sie liegt vorzugsweise im Bereich von ca. o,l-5,o % - basierend auf dem Gewicht des Substrats. Das p„ des Reaktionsgemisches kann auf das Optimum des verwendeten Enzyme in der oben erwähnten Art während der Reaktion eingestellt werden. Falls gewünscht, kann auch ein geeignetes Antiseptikum zugefügt werden. Die Reaktion kann solange durchgeführt werden, wie das Enzym seine Aktivität zeigt und die Zersetzung beschleunigt (üblicherweise z. B. für 4-24 Std.).

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Nach Vollendung der Hydrolyse wird das Reaktionsgemisch z. B. auf ca. 8o-loo°C erhitzt, um das Enzym zu inaktivieren, und das Unlösliche wird daraus entfernt. Die Lösung wird dann konzentriert oder in üblicher Weise zur Trockne eingedampft, um ein Pulver zu ergeben. Es ist gewöhnlich vorzuziehen, die Konsentration und die Trocknung bei einer Temperatur unter ca. 6o C durchzuführen, um ein Überhitzen zu vermeiden. Das anfallende Hydrolysat ist oftmals gefärbt, weil die färbenden Substanzen, welche während der Zersetzung aus der Haut austreten, dem Hydrolysat anhaften. Falls gewünscht, kann durch die nachfolgende Behandlung ein weiter gereinigtes Hydrolysat erhalten werden.

Eine Hydrolysatlösung, aus der das Unlösliche entfernt ist, wird auf unter ca. 6o° erhitzt - gleichzeitig unter Behandlung mit Aktivkohle in einer Menge von ca. 1-10 Gew.-%, basierend auf der Menge der Feststoffe in dem Hydrolysat. Es ist auch möglich, ein geeignetes entfärbendes Harz anstelle der Aktivkohle zu verwenden. Die färbenden Stoffe können durch diese Behandlung beträchtlich entfernt werden. Wenn auch eine weitere Reinigung erforderlich ist, oder wenn feine Pulverteilchen der Aktivkohle, färbende Substanzen, anorganische Salze die hydrolysierte Lösung verunreinigen, so können Aktivkohle und ein Teil der Peptide entweder durch Konzentrierung der Lösung auf 1/10 mit anschließendem Zusatz von Methanol in lo-facher Menge (Vol.Teile) oder durch Zusatz dieses Methanols zu der konzentrierten Lösung ausgefällt werden. Nach Entfernung der Niederschläge wird eine farblose und durchsichtige Peptid-Lösung erhalten. Die Lösung kann auf übliche Weise zur Trockne gebracht werden, um ein weißes oder leicht gefärbtes Pulver zu ergeben.

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Erfindungsgemäß wird eine Hydrolyse leicht ausgeführt mit einer Ausbeute von ca. 4o-5o % durch nur eine einzige Hydrolyse-Behandlung. Der Reaktions-Rückstand kann dann weiteren Hydrolyse-Reaktionen unterworfen werden, um eine Hydrolyse-Ausbeute von ca. 85-95 % durch Wiederholung zu ergeben.

Die erfindungsgemäß erhaltene hydrolysierte Zusammensetzung enthält nur eine kleine Menge an Aminosäure-Monomeren und stellt ein Gemisch von verschiedenen Peptiden dar. Die Aminosäure-Komponenten dieses Gemisches sind reich an Glycin, Prolin und Hydroxyprolin, jedoch sehr arm an schwefelhaltigen Aminosäuren, wie Cystin, Cystein u. dgl. So ist es möglich, nicht nur die menschliche Haut durch Verwendung dieses Hydrolysats als Rohmaterial, z. B. für Kosmetika u. dgl. zu schützen, welche in direkten Kontakt mit dem menschlichen Körper gebracht werden, sondern auch schädliche Einflüsse auf den menschlichen Körper durch Verwendung dieses Hydrolysats für verschiedene Materialien zu unterbinden, welche direkt oder indirekt mit dem menschlichen Körper in Kontakt gebracht werden.

Die vorliegende Erfindung sieht ferner ein Verfahren zur Produktion von N-Acylderivaten der enzymatisch hydrolysierten Zusammensetzung von Hautlappen vor, die in der vorher dargelegten Weise erhalten wurden, indem die Zusammensetzung einer Kondensations-Reaktion mit einem Acylierungsmittel eines langkettigen Fettsäuretyps unterworfen wird, und die Erfindung sieht außerdem noch die Nutzbarmachung der Derivate als Netzmittel vor, welche als Additive zu Waschmitteln, Kosmetika u. dgl. verwendbar sind wie vollständig und deutlich hierin beschrieben.

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Im allgemeinen ist der Polymerisationsgrad der Peptide wichtig, wenn ein acyliertes Peptldprodukt als Netzmittel verwendet wird, weil es eng mit der Stabilität des Endproduktes gegen hartes Wasser und seine Wirksamkeit· als Netzmittel verbunden ist. Peptide mit einem hohen Polymerisationsgrad weisen eine ausgezeichnete Stabilität gegen hartes Wasser und/ oder Säuren auf, jedoch weisen sie auch, eine Neigung zur Herabsetzung der Wirksamkeit als Netzmittel auf. Ebenso ist das Vorhandensein von Aminosäure-Monomeren in bezug auf die Hautdurchlässigkeit nicht vorteilhaft.Es ist vorzuziehen, Peptide zu verwenden, die einen Polymerisationsgrad von ca. 2-7 haben, die ein erwünschtes Gleichgewicht als Netzmittel und wünschenswerte Eigenschaften haben.

Die erfindungsgemäß erhaltene hydrolysierte Zusammensetzung umfaßt hauptsächlich Peptide mit einem Polymerisationsgrad von ca. 4-7 und enthält wenig Aminosäure-Monomeren. Das N-acylierte Produkt dieser Peptide hat Eigenschaften von guter Benetzbarkeit, Diffusionsfähigkeit, Homogenisierung sowie Waschfähigkeit und ist ein Netzmittel, welches für geringere Stimulations-Kosmetika vorteilhaft ist.

Es ist möglich, jeden Typ an bekannten Acylierungsmitteln vom Fettsäuretyp mit 8-22 C-Atomen als Acylierungsmittel der Erfindung zu verwenden, jedoch ist vorzuziehen, Fettsäurehalogenide, insbes. Chloride, oder Fettsäurehydride zu verwenden. Als Fettsäure ist es möglich, Caprylsäure, Caprinsäure, Laurinsäure, Myristinsäure, Palmitinsäure, Stearinsäure", Arachinsäure,

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Behensäure, ölsäure, Palmitoleinsäure, Linolsäure oder deren Gemisch, z. B. Rindertalg-Fettsäure, eine Fettsäure von gehärtetem Rindertalg, eine Fettsäure von gehärtetem Walöl, Rinder-Stearinsäure, eine Fettsäure von destilliertem Rindertalg, Kokosnußöl-Fettsäure u. dgl. zu verwenden. Ein besonders gutes Ergebnis kann man durch Verwendung eines Säurechlorids dieser Fettsäuren erhalten.

Die Menge an Acylierungsmittel kann in Abhängigkeit von der Verwendung des acylierten Produktes als Netzmittel variieren. Es ist zumeist vorzuziehen, das Mittel in Äquivalenz zu der endständigen Aminogruppe zu verwenden oder die Äquivalenz nicht zu überschreiten, jedoch kann die Menge größer als die Äquivalenz sein. Es ist indessen die Verwendung des Acylierungsmittels in überschüssiger Menge nicht vorzuziehen, weil es die Ursache sein könnte für das Einbringen zu großer Mengen an nicht reagiertem Chlorid und hydrolysierter Fettsäure.

Die Kondensations-Reaktion einer hydrolysieren Zusammensetzung mit einem Acylierungsmittel kann ausgeführt werden, indem man die hydrolysierte Zusammensetzung in Wasser löst und das Acylierungsmittel unter lebhaftem Rühren in üblicher Weise unter gleichzeitigem Eintropfen von Alkali zufügt, um das Reaktionssystem in alkalischem Zustand zu halten. Es ist wünschenswert, das Acylierungsmittel allmählich unter Vermeidung von schnellem Eintropfen zutropfen zu lassen. Es ist vorzuziehen, das Reaktionssystem während des Zutropfens in einem alkalischen Zustand zu halten» Jedoch beschleunigt ein übermäßiger alkalischer Zustand die Hydrolyse des Säurechlorids, daher ist es vorzuziehen, den alkalischen Zustand im ρ -Bereich von ca. 9-12,5 zu halten.

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Die Reaktion wird durch Erhitzen des Reaktionsgemisches auf ca. 5o-6o C vollendet und ergibt N-7icylderivate der hydrolysierten Zusammensetzung. Da das Reaktionsgemisch nicht reagiertes Fettsäurechlorid, hydrolysierte Fettsäure und verschiedene Salze enthält, steigt das ölhaltige Material an die Oberfläche, wenn das Reaktionsgemisch nach Vollendung der Reaktion mit einer geeigneten Säure, z.B. Schwefelsäure, angesäuert wird. Diesem Gemisch wird ein organisches Lösungsmittel in geeigneter Menge (zweckmäßig in der halben bis doppelten Vol.Menge) unter Schütteln zugefügt und stehen gelassen, bis das Gemisch sich in drei Schichten geteilt hat, d.h. Wasser, öl und organische Lösungsmittel. Als organisches Lösungsmittel kann jedes beliebige Lösungsmittel verwendet werden, das dem Produkt gegenüber inaktiv, kaum löslich oder unlöslich in Wasser und imstande ist, die Fettsäure zu lösen. Jedoch rufen verschiedene organische Lösungsmittel Emulgierung hervor und machen es schwierig, das Gemisch in drei Schichten zu trennen. Als Lösungsmittel für eine gute Trennung ist vorzuziehen, halogenierte Kohlenwasserstoffe (Chloroform, Tetrachlorkohlenstoff, Äthylendichlorid, Tetrachloräthan, Trichloräthylen, Perchloräthylen u. dgl.) zu verwenden, Die organische.. Lösungsmittelschicht enthält die Fettsäure und ihr Chlorid, während die wässrige Schicht die Salze enthält. Nach Entfernung des' organischen Lösungsmittels und der wässrigen Schicht wird die ölschicht auf neutral oder alkalisch eingestellt, um das Alkalisalz des N-Acylderivats zu ergeben.

Das erfindungsgemäß erhaltene Produkt ist ein wasserlösliches öl mit einer klebenden Eigenschaft und ausgezeichneten Qualitäten des Lösens, Emulgierens, Dispergierens und Schäumens; es kann für

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verschiedene Zwecke verwendet werden, z. B. als Netzmittel, Dispergiermittel, Emulgiermittel, Textilbehandlungsmittel, Mittel zum Löslichraachen und zum Schäumen. Das vorliegende acylierte Derivat besteht aus Peptidverbindungen, und es ist daher im wesentlichen für den menschlichen Körper unschädlich, so daß es vorteilhaft Kosmetika, Haus-Waschmitteln u. dgl. zugesetzt werden kann.

Das erfindungngemäße Verfahren wird in den nachfolgenden Beispielen weiter beschrieben. Anstelle von tierischen Hautlappen wie in den Beispielen verwendet - können sowohl rohe als auch gegerbte Hautabfälle und Lederlappen von verschiedenen anderen Tieren auf die gleiche Weise verwendet werden. Es ist nicht notwendig, die Größe des Hautlappens zu begrenzen, es kann auch ein großes Hautstück verwendet werden, wenn es auch vorteilhaft ist, es in eine geeignete Größe zu zerschneiden, um die Hydrolysezeit abzukürzen. Es ist auch möglich, die N-Acylierung unter Verwendung der oben erwähnten verschiedenen Fettsäurechloride durchzuführen.

Bisher ist nur Collagenase als Enzym bekannt geworden, welches imstande ist, Collagen zu zersetzen. Es ist jetzt erfindungsgemäß möglich, andere Enzyme als Collagenase vorzusehen, welche imstande sind, Collagen durch Behandlung von Hautlappen mit einer neutralen oder alkalischen Protease wie hier spezifiziert - zu zersetzen.

H O Verbindungen dieser Art haben die Formel A-ft-C-B, in der A einen Oligopeptid-Rest bedeutet, der einen Polymerisationsgrad von ca. 2-7 und einen niedrigen durchschnittlichen Schwefelgehalt hat, und B für einen Fettsäure-Rest steht, der 7-21 C-Atome enthält.

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-JA- Beispiel 1

Ein Chrom-gegerbtes Stück Kuhleder (4oo g). wurde in 8 1 Wasser suspendiert und 1 Std. in kochendem Wasser erhitzt. Nach dem Abkühlen wurde das erhaltene Gemisch mit 2 η NaOH auf ein p„ von 7,5 eingestellt und auf 45°C erhitzt. Dem Gemisch wurden 2 g Tacynase (Handelsprodukt, das durch die Kyowa Hakko Kogyo K.K., Japan erhältlich ist) zugesetzt, und die Reaktion wurde in 2o Std. durchgeführt. Nach Vollendung der Reaktion wurde das Reaktionsgemisch 15 Min. auf 8o°C erhitzt, um das Enzym zu inaktivieren, und dann mit 2 η HCl angesäuert. Das Unlösliche wurde aus der Reaktionslösung entfernt, um ein Filtrat zu ergeben, welches dann bei unter 6o°C unter reduziertem Druck auf 1/3 des Volumens konzentriert und anschließend gefriergetrocknet wurde, um 158 g eines schwach gefärbten Pulvers zu ergeben. Das Produkt war hoch hygroskopisch und leicht in Wasser löslich. .

Beispiel 2

Ein Gemisch von Hautlappen von Kuh und Schwein (5oo g) wurde in Io 1 Wasser suspendiert und in kochendem Wasser 2 Std. erhitzt. Nach dem Abkühlen wurde das Reaktionsgemisch mit 2 η NaOH auf ein p_H von Io eingestellt und auf 47°C erhitzt. Dem Gemisch wurden 2,5 g Epolozyme (Handelsprodukt, das durch die Kyowa Hakko Kogyo K.K., Japan, erhältlich ist) zugesetzt, und die Reaktion lief in 24 Std. ab. Nach deren Vollendung wurde das Gemisch 30 Min. auf 8o°C erhitzt, um das Enzym zu inaktivieren, und mit 2 η HCl schwach angesäuert. Das Unlösliche wurde aus dem Reaktionsgemisch entfernt, und es fiel ein Filtrat an, welches

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bel 5o-6o°C mit Aktivkohle ( 5 %, basierend auf dem Filtrat) behandelt wurde.

Nach der Kohlebehandlung wurde das Filtrat auf 1/10 des Volumens konzentriert, und das Konzentrat wurde mit der lo-fachen Vol.-Menge an Methanol unter Rühren versetzt. Nach Entfernung des Niederschlags wurde die farblose und durchsichtige Lösung bei unter 6o C und unter reduziertem Druck konzentriert, um das Methanol fast vollständig zu verdampfen, dann setzte man frisches Wasser zu und gefriertrocknete, um 183 g eines fast weißen Pulvers zu erhalten. Das Produkt war kaum gefärbt im Vergleich zu dem im Beispiel 1 erhaltenen Produkt. Das Durchschnitts-Molekulargewicht - gemessen durch Analysieren der endständigen N-Gruppe - war ca. 6 4o. Die Zusammensetzung des erhaltenen Produktes war:

Gesamt-Stickstoff 14,3 % Asche . 1,9 % .

Das Produkt war hochhygroskopisch und in Wasser leicht löslich.

Beispiel 3

loo g der auf die gleiche im Beispiel 2 beschriebene Weise erhaltenen enzymatisch hydrolysierten Zusammensetzung wurden in 3oo ml Wasser gelöst, und das p„ des Gemisches wurde mit Io %iger NaOH-Lösung auf Io eiliges teilt. 44 g Lauroy Ich lorid wurden bei 3o°C

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1S

unter lebhaftem Rühren und unter gleichzeitiger Einstellung des ρ mit lo%iger NaOH-Lösung allmählich in die Lösung eingetropft. Nach 45 std. Eintropfen wurde das Reaktionsgemisch 1 Std. auf 5o-55°C erhitzt, um die Reaktion zu vollenden. Das anfallende Reaktionsgemisch war schwach weiß und trüb. Es wurde alsdann mit 3o%iger Schwefelsäure auf ein p„ von 3 eingestellt, worauf eine cremeartige Masse an -die Oberfläche stieg. Dem Gemisch wurde ein gleiches Volumen an Äthylendichlorid zugefügt. Nach Rühren ließ man das .Gemisch zwecks Trennung in drei Schichten Wasser, Öl und Äthylendichlorid stehen. Die ölschicht wurde abgetrennt und mit 25%iger NaOH-Lösung auf ein p„ von 8-9 eingestellt, worauf ein gelbliches und durchscheinendes Material, das stark klebende Eigenschaften hatte, erhalten wurde. Das Produkt war ein Pulver des N-acylierten Produktes der hydrolysierten Zusammensetzung, welches leicht in Wasser löslich war und eine gut schäumende Eigenschaft hatte.

Beispiel 4

Verfahren zur Herstellung einer Rasiercreme:

a) N-Lauroyl-Verbindung einer enzymatisch hydrolysierten Zusammensetzung eines Kuhhautlappens lo,p %

b) Stearinsäure lo,o %

c) Mineralöl 2,ο %

d) Butylstearat 5,ο %

e) Sperm-head-öl 5,ο %

f) Antiseptikum (Methyl-p-benzoat) o, 1 %

g) Parfüm eine kleine Menge

h) Wasser r 67,9 %

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Die oben genannten Bestandteile - mit Ausnahme des Parfüms wurden vermischt und gekocht mit nachfolgender Kühlung unter
Kneten auf unter 35°C. Dann wurde dem Gemisch das Parfüm
zugefügt und gut durchgeknetet, um eine Rasiercreme zu ergeben.

Beispiel 5

Verfahren zur Herstellung eines flüssigen Shampoons :

a) N-Stearoylverbindung einer enzymatisch hydrolysieren
Zusammensetzung aus einer Kuhhaut 3o,o %

b) Na-Arginat o,9 %

c) Propylenglykol 3,ο %

d) Antiseptikum (Methy1-p-benzoat) o,l %

e) Parfüm eine geeignete Menge

f) Wasser 66,ο %

Die oben genannten Bestandteile - mit Ausnahme von Parfüm - wurden vermischt und auf die gleiche im Beispiel 4 beschriebene
Weise behandelt, um ein flüssiges Shampoon herzustellen.

Beispiel 6

Verfahren zur Herstellung einer Feuchtigkeitscreme:

a) N-acyllertes Produkt einer enzymatisch hydrolysierten
Zusammensetzung einer Schweinehaut ^m3-t Hilfe eines mit
Fettsäurechlorid gehärteten Walöls 15,ο %

b) Stearinsäure lo,o %

c) Trläthanolamin 4,o $

d) BaOH 2,ο %

e) Antiseptikum (Methyl-p-benzoat) ο,ϊ ?

f) Wasser ge,9 %

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Gemäß den oben angegebenen Mengen wurden Wasser, Stearinsäure und Antiseptikum dem Gemisch aus dem acylierten Produkt zugesetzt und auf 7o-8o C erhitzt, alsdann fügte man ein Gemisch aus BaOH und Triathanolamin mit einer kleinen Menge Wasser zu. Das anfallende Gemisch wurde bis zum Kühlen gerührt, um eine Feuchtigkeitscreme herzustellen.

Beispiel 7

Verfahren zur Herstellung einer Verflüchtigungscreme (vanishing) :

1) Stearinsäure * 15,ο %

Ά 2) Cetylalkohol 2,5 %

3) N-acyliertes Produkt einer- enzymatisch hydrolysierten Zusammensetzung eines Kuhhautstückes mit Hilfe einer mit Fettsäurechlorid destillierten Reiskleie o,5 %

1) Triathanolamin · -~- ' 6,6 %

_B 2) Glycerin 7,ο %

3) Wasser ⁼ ——-w^ "--^Γ'^""'' ^"'■-----. 7j4, 4 %

■^ 4) Parfüm eine geeiglS^-te Menge_.._r.;~.-—~ "*""

Komponente A und Komponente-B^wurden getrennt in Lösungtergestellt, Komponente A .w^rrläe auf 85°C erhitzt und^jun-te^--lf Rühren mit Komgene'ffte B
Z us ammen&etfζung zu

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Claims

Andrejewski, Honke & Gesthuysen, Patentanwälte, 4300 Essen, Theaterplatz 3 iß Patentansprüche

1. Verfahren zur Herstellung eines partiellen Hydrolysate aus einem Hautlappen (skin rag) ,dadurch gekennzeichnet , daß ein Hautlappen zwecks Herstellung des Hydrolysats mit einer Protease - ausgewählt aus neutralen und alkalischen Proteasen oder deren Gemischen, welche imstande sind, Collagen anders als Collagenase zu zersetzen - eine genügend lange Zeit behandelt wird.

2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das Protein des Hautlappens vor der Behandlung mit der Protease denaturiert wird.

3. Das Produkt, das nach dem Verfahren des Anspruches 1 hergestellt 1st.

4. Verfahren zur Behandlung eines Hautlappens, dadurch gekennzeichnet, daß man das Hautstück der Einwirkung einer Protease - ausgewählt aus neutralen und/oder alkalischen Proteasen oder deren Gemischen, welche imstande sind, Collagen anders als Collagenase zu zersetzen - unterwirft.

5. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, daß der Hautlappen der Einwirkung der Protease eine genügend lange Zeit, um das Substrat überwiegend zu Oligopeptiden zu hydrolysieren, unterworfen v/ird.

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-VS-

6. Verfahren nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß das Protein des Hautlappens vor der Behandlung mit der Protease denaturiert wird. '

C_7*/ Verfahren zur Herstellung von Netzmitteln, dadurch gekennzeichnet, daß N-Äcylderivate von Oligopeptld-Hydrolyslerungsprodukten von Proteinen, die einen niedrigen durchschnittlichen Schwefelgehalt haben und wobei die Hydrolysierungsprodukte einen Polymerisationsgrad von ca. 2-7 haben, mit einem Acylierungsmlttel vom Fettsäuretyp mit 8-22 C-Atomen acyllert werden»

8. Verfahren nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, daß die Protein-Hydrolysierungsprodukte nach dem Verfahren¹des Anspruches 1 erhalten sind.

9. Verfahren nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, daß die Protein-Hydrolysierungsprodükte nach dem Verfahren des Anspruches 2 erhalten sind.

10. Verfahren zur Herstellung von Netzmitteln, dadurch gekennzeichnet, daß N-Acylderivate von Oligopeptiden mit einem niedrigen durchschnittlicHen'SchwefeTgerrait.i wobei die Oligopeptide einen Polymerisationsgrad von ca. 2-7 haben_f

rungsmittel vom EettSjäuretyp mit 8-22 C-Atomen acyliert werden.

11. Verfahren nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, daß das Acylierungsmittel vom Fettsäuretyp ein Fettsäurechlorid mit 8-22 C-Atomen ist.

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12. Verfahren nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, daß das Acylierungsmittel vom Fettsäuretyp ein Fettsäurechlorid mit 8-22 C-Atomen ist.

13. Verfahren nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, daß das Acylierungsmittel vom Fettsäuretyp ein Fettsäurechlorid mit 8-22 C-Atomen ist.

14. Verfahren nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, daß das Acylierungsmittel vom Fettsäuretyp ein Fettsäurechlorid mit 8-22 C-Atomen ist.

15. Verfahren, gekennzeichnet durch die Stufe der Verwendung

von Verbindungen der Formel „ _ in der A einen

I H

A-N-C-B,

Oligopeptid-Rest bedeutet) der einen Polymerisationsgrad von ca. 2-7 und einen niedrigen durchschnittlichen Schwefelgehalt hat, und B für einen Fettsäure-Rest steht, der 7-21 C-Atome enthält, als Netzmittel.

16. Verfahren, gekennzeichnet durch die Stufe der Verwendung der Produkte nach Anspruch 7 als Netzmittel.

17. Verfahren, gekennzeichnet durch die Stufe der Verwendung der Produkte nach Anspruch 8 als Netzmittel.

18. Verfahren, gekennzeichnet durch dieStufe der Verwendung der Produkte nach Anspruch Io als Netzmittel.

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Andrejewski, Honke & Gesthuysen, Patentanwälte, 4300 Essen, Theaterplatz 3

19. Eine Waschmittel-Zusammensetzung, die als deren aktiven Bestandteil Oligopeptide enthält, die einen niedrigen durchschnittlichen Schwefelgehalt haben, dadurch gekennzeichnet, daß die Oligopeptide mit einem Acylierungsmittel vom Fettsäuretyp mit 8-22 C-Atomen N-acyliert worden sind.

20. Kosmetische Zusammensetzung, die als deren aktiven Bestandteil Oligopeptide mit niedrigem durchschnittlichen Schwefelgehalt haben, dadurch gekennzeichnet, daß die Oligopeptide . mit einem Acylierungsmittel vom Fettsäuretyp mit 8-22 C-Atomen N-acyliert worden sind.

21. Waschmittel-Zusammensetzung, die als deren aktiven Bestandteil das Produkt haben, welches nach dem Verfahren des Anspruches 7 hergestellt ist.

22. Waschmittel-Zusammensetzung, die als deren aktiven Bestandteil das Produkt haben, welches nach dem Verfahren des Anspruches 8 hergestellt ist.

23. Kosmetische Zusammensetzung, die als deren aktiven Bestandteil das Produkt haben, welches nach dem Verfahren des Anspruches 7 hergestellt ist.

24. Kosmetische Zusammensetzung, die als deren aktiven Bestand- ' teil das Produkt haben, welches nach dem Verfahren des Anspruches 8 hergestellt ist.

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Andrejewski, Honke & Gesihuysen, Patentanwälte, 4300 Essen, Theaterplatz

-VZ-

25. Verfahren zur Herstellung eines partiellen Hydrolysate eines Proteins, ausgewählt aus Collagen und Gelatine, dadurch gekennzeichnet, daß das Protein mit einer Protease die aus neutralen und alkalischen Proteasen und deren Gemischen ausgewählt und imstande sind, Collagen anders als Collagenase zu zersetzen - eine genügend lange Zelt behandelt v/ird, um das Hydrolysat zu erhalten.

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