CZ300570B6

CZ300570B6 - Inhibitory biosyntézy prostaglandin endoperoxid H synthasy

Info

Publication number: CZ300570B6
Application number: CZ20011481A
Authority: CZ
Inventors: A. Black@Lawrence; Basha@Anwer; Kolasa@Teodozyj; E. Kort@Michael; Liu@Huaqing; M. McCarty@Catherine; V. Patel@Meena; J. Rohde@Jeffey; J. Coghlan@Michael; O. Stewart@Andrew
Original assignee: Abbott Laboratories
Priority date: 1998-10-27
Filing date: 1999-10-27
Publication date: 2009-06-17
Also published as: HK1041876B; CA2347982A1; NO318623B1; JP2003512292A; TR200101765T2; SK5542001A3; EP1124804B1; HUP0105248A2; NO20012061D0; PL198503B1; KR100666838B1; CN1342149A; ES2249919T3; BG105523A; EP1124804A1; DE69926903T2; CZ20011481A3; ATE302759T1; BG65261B1; BR9914858A

Abstract

Predložený vynález popisuje slouceniny pyridazinonu, které jsou inhibitory cyklooxygenasy (COX), zejména jsou selektivními inhibitory cylkooxygenasy-2 (Cox-2), Cox-2 je indukovatelná izoforma související se zánetem na rozdíl od konstitutivní izoformy, cyklooxygenasy-1 (Cox-1), která je duležitým "udržujícím" enzymem v mnoha tkáních, vcetne gastrointestinálního traktu (GI) a ledvin. Selektivita techto sloucenin pro Cox-2 minimalizuje nežádoucí vedlejší úcinky GI a renální oblasti, které jsou u bežne prodávaných, nesteroidních, protizánetlivých léciv (NSAID). Farmaceutická kompozice obsahující therapeuticky úcinné množství slouceniny a farmaceuticky prijatelný nosic. Použití této slouceniny pro výrobu léciva pro inhibici biosyntézy prostaglandinu u savce pri potrebe takového ošetrení. Použití slouceniny pro výrobu léciva pro ošetrení bolesti, horecky, zánetu, revmatické artritity, osteoartritidy, adheze a karcinomu.

Description

(57) Anotace:

Předložený vynález popisuje sloučeniny pyridazínonu, které jsou inhibitory cyklooxygenasy (COX), zejména jsou selektivními inhibitory cylkooxygenasy-2 (Cox-2), Cox-2 je indukovatelnáizoforma související se zánětem na rozdíl od konstitutivní izoformy. cyklooxygenasy-1 (Cox-1), která je důležitým udržujícím enzymem v mnoha tkáních, včetně gastrointestinálního traktu (GI) a ledvin, Selektívitatěchto sloučenin pro Cox-2 minimalizuje nežádoucí vedlejší účinky Gl a renální oblasti, které jsou u běžně prodávaných, nesteroidních, protizánětlivých léčiv (NSAID). Farmaceutická kompozice obsahující therapeuticky účinné množství sloučeniny a farmaceuticky přijatelný nosič. Použití této sloučeniny pro výrobu léčiva pro inhibici biosyntézy pros tag lan dinu u savce při potřebě takového ošetření. Použití sloučeniny pro výrobu léčiva pro ošetření bolesti, horečky, zánětu, revmatické artritity, osteoartritidy, adheze a karcinomu.

Inhibitory biosyntézy prostaglandin endoperoxid H synthasy

Oblast techniky

Předložený vynález popisuje nové sloučeniny pyridazinonu, které jsou účinné při ošetření onemocnění způsobených cyklooxygenasou-2. Zejména tento vynález popisuje způsob inhibice biosyntézy prostaglandinů, zejména pak indukovanou proteinem prostaglandin endoperoxid H synthasou (PGHS-2, cyklooxygenasa-2, COX-2).

Dosavadní stav techniky

Prostaglandiny jsou velice účinné látky, které mají nejrůznější biologické účinky pohybující se v nanomolámích až pikomolámích koncentracích. Objevení dvou forem prostaglandin endoperoxid H synthasy, izoenzymů PGHS-1 a PGHS-2, které katalyzují oxidaci arachidonové kyseliny, čímž dochází k biosyntéze prostaglandinů, vedlo k obnovení výzkumu ve fyziologii a patofyziologii k vyjasnění úlohy těchto dvou izoenzymů. Ukázalo se, že tyto izoenzymy mají rozdílné genové regulace a reprezentují odlišné způsoby biosyntézy prostaglandinů. Způsob bio20 syntézy PGHS-1 se vyskytuje konstitutivně ve většině typů buněk, což odpovídá produkci prostaglandinů, které regulují akutní stavy pří vaskulámí homeostázi a mají význam při uchování žaludečních a renálních funkcí v normálním stavu. Způsob biosyntézy PGHS-2 zahrnuje indukci mechanismů souvisejících s inflamací, mitogenezí a fenoménem ovulace.

Inhibitory prostaglandinů se mohou užívat při bolestech, horečkách, zánětech a také v různých dalších terapiích, např. při ošetření revmatické artritidy a osteoartritidy. Nesteroidní protizánětlivá léčiva (NSAID), např. ibuprofen, naproxen a fenamaty, inhibují oba izoenzymy. Inhibice konstitutivního enzymu PGHS-1 má vedlejší účinky v gastrointestinální oblasti, včetně vředů, krvácení a výskytu renálních problémů s chronickou terapií. Inhibitory indukovaného izoenzymů

PGHS-2 mohou mít protizánětlivou aktivitu bez vedlejších účinků inhibitorů PGHS-1.

Problém vedlejších účinků spojených s aplikací NSAID nebyl v minulosti nikdy dořešen. Při pokusech k minimalizování toxického účinku v žaludeční oblasti byly zkoušeny tablety s enterickými povlaky a společné aplikování s misoprostolem, derivátem prostaglandinů. Z výše uvedené35 hoje zřejmé, že objevení sloučenin, které budou selektivními inhibitory indukovaného izoenzymu PGHS-2, bude velice výhodné.

Předložený vynález uvádí nové sloučeniny, které jsou selektivními inhibitory PGHS-2.

Podstata vynálezu

Předložený vynález popisuje sloučeniny pyridazinonu, které jsou selektivními inhibitory cyklooxygenasy-2 (COX-2). Sloučeniny podle předloženého vynálezu můžou být vybrány ze skupiny sestávající z následujících sloučenin:

(4-fluorfcnyl)-4-(4 hydroxy-2-methyl l-butox\)-5-[4 (methylsulfonyl)feny 1J 3(2H)pyridazinon;

2-(4-fluorfenyl)-4-(3-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(2H)pyridazinon;

2-(3,4-difluorfenyl)-4-(3-hydroxy-3-methyl-l-butoxy )-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2H)pyridazinon;

2-(3,4-difluorfenyl)-4-(3-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(2H)pyridazinon;

- I CZ 300570 B6

2-(3-chlor 4 fluorfeny 1) 4 (3 hydroxy-3-methy 1-1-butoxv)-5-|4-(ťnethyIsulfonyl)fenyl]3(2H)-pyridazinon;

2-(3-chlor—4-fluorfeny l)-4-(3-hydroxy-3-methy 1-1 -butoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl ]— 3(2H)-pyridazinon;

2-(3-chlorfenyl)-4-(3-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2H)pyridazinon;

2—(3 ehlorfeny!)-4-(3-hydroxy 3 rnethyl-l-butoxy)-5-[4(aminosulfonyl)fenyl]-3(2H)pyridazinon;

(4 -fluorfenyl)—4-(2-hydroxy 2 methy 1-1-propoxv)-5-[4-(methy Isulfony l)fenyl]-3 (2 Hýío pyridazinon;

2-(4-fluorťenyl)-4-(2-liydroxy-2-mettiyllpropoxy)5-[4-(arninosulfonyl)fenyl]-3(2H>pyridazinon;

2-(3-chlor-4-fluorfenyl )-4-( 2-hydroxy-2-methy 1-1 -propoxy )-5-[4-{ methy Isulfony l)fenyl]3(2H)-pyridazinon;

2-(3-ehlor^f-lluorfeny 1)-4 (2 hydroxy-2-methyl-l—propoxy)—5-[4—(aminosulťonyl)fenyl|3(2H)-pyndazinon;

2-(3-chlorfeny])-4-(2-hydroxy-2-methy]-l-propoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2H)pyridazinon;

2-(3-chlorfenyl)-4-(2-hydroxy—2—methy 1-1— propoxy )-5-[4—(aminosulfonyl)fenyl]-3(2H)20 pyridazinon;

2-(3-fluorfeny1)—4-(4-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(2H)pyridazinon;

2-(3,4-difluorfenyl)-4-(4-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2H)pyridazinon;

2-(3-chlor—4-fluorfenyl)-4-(4-hydroxy-3-methyl-l— butoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]3(2H)-pyridazinon;

2-(3 -ch 1 orfeny 1 )-4-(4-hydroxy-3 -m ethy 1-1 -butoxy)-5- [4-( methy 1 s u 1 fo ny 1 )feny 1 ]-3 (2 H )— pyridazinon;

2-(3,4-difluorfenyl)-4-(4-hydroxy-3-methyl-l“butoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(2H)30 pyridazinon;

(3-chlor—4-fluorfenyl)-4—(4-hydroxy-3-methyl-l-butoxy) 5 [4 (aminosulfonyl)fenylj3(2H)-pyridazinon;

2-(3-chlorfenyl)-4—(4-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyI]-3(2H)pyridazinon;

(S)-2-(4-tluo!'fenyl)-4-(3-hydroxy-2-methyl I propoxy) -5 -[4-4aminosulfonyl)fenylJ 3(2H) pyridazinon;

(R) -2-(4-fluorfenyl)-4-(3-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(2H)pyridazinon;

(5)-2 -(3 chlor 4-fluorfenyl)—4—(3-hydroxv 2-methyl-1 -propoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)40 fenyl]-3(2H)-pyridazinon;

(S) -2-(3-chlor-4-fluorfenyl)—4-(3-hydroxy-2-methyl-I-propoxy )-5-[4-(amÍnosulfonyl)fenyl]-3(2H)-pyridazinon;

(R)-2-(3-chlor—4-fluorfenyl)—4-(3-hydroxy--2-methyl-l -propoxy )-5-[4-{methy Isulfony l)fenyl]-3(2H)-pyrÍdazÍnon;

-2CZ 300570 B6 (R}-2-(3~ch lor—4—fl uorfenyl)-4—(3-hydroxy-2-methy 1-1 -propoxy)-5-[4-(am inosulfony 1 )fenyl]-3(2H)-pyridazinon;

(S)-2-(3-ch lorfeny l)-4-(3-hydroxy-2-methy l-l-propoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2H)~pyridazinon;

(S)-2-(3-ch lorfeny 1)-^4-(3-hvdroxy-2-methyl-l-propoxy)5-[4--(aminosulfonyl)fenyl]-3(2H)pyridazinon;

(R)-2-(3-ch lorfeny l)-^4-(3-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(methylsul fony l)fenyl]-3(2H)-pyridazinon;

(R) 2 (3 -ehlorfenyl)-4—(3-hydroxy-2-methy 1-1-propoxy)--5-- [4- {aminosulfonyl)fenyú-3(2H)-pyridazinon;

2-(4-fluorfenyl)-4-(3-hydroxy-2,2-dímethyl-]-propoxy)-5-[4-(methy1sulfonyl)fenyl]-3(2H)pyridazinon;

2-(4-fluorfenyl)-4-(3-hydroxy-2,2-dimethyl-l-propoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(2H)pyridazinon;

2—(3,4—difl uorfeny I )-4-( 3-hydroxy-2,2-d i methyl-l-propoxy)--5-[4-(methy lsul fony l)fenyl]— 3(2H)-pyridazinon;

2-(3,4-difluorfenyl)-4--(3-hydroxy-2,2-dimethyl-l-propoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]3 (2 H)—pyridazinon;

2—(3-chlor4-fluorfěnyl)-4—(3-hydroxy-2,2—dimethy 1-1-propoxy )-5-(4-( niethy Isulfonyl)fenyl]-3(2H)~pyridazÍnon;

2-(3-ch lor—4-fl uorfeny l)4(3hydroxy-2,2-dimethyl-l-propoxy)-5-[4-(aminosul fonyl)fenyl]-3(2H)-pyridazinon;

2-(3-chlorfenyI)—4—(3—hydřoxy—2,2-dimethyl-l—propoxy)-5—[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2H)-pyridazinon;

2-(3-chlorfenyl)-4-(3-hydroxy-2,2-dimethyl-l-propoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(2H)pyridazinon;

2-(3,4-dichlorfenyl)-4—(3-hydroxy-3-methyl-l — butoxy}5[4(methylsulfonyl)fenylJ3(2H)pyridazinon;

2-[(3-trifluormethyl)fenyl]—4-(2-hydroxy-2-methyl-I-propoxy)-5-[4-(methyIsulfonyl)fenyl]3(2H)-pyridazmon;

2—(3,4-dichlorťenyl)-4-(2-hydroxy-2-methyl-l— propoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2H)-pyridazinon; a

2—[(3-trifluormethyl)fenyl]^4-(3-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]3(2H)-pyridazinon;

nebo její farmaceuticky přijatelná sůl nebo ester.

Sloučeniny podle vynálezu můžou být rovněž vybrány ze skupiny sestávající z následujících sloučenin:

2--(2,2,2 trifluorethyl) ·4—(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]3(2H)-pyridazinon;

2-(2,2,2-trifluorethyl)-4--(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4—(am inosulfony l)fenyl]3(2H)—pyridazinon;

2-(2,2,2-trifluorethyl)-4_(3-hydroxy-2,2-dimethyl-1-propoxy)-5-[4-(methylsulfony])fenyl]—3(2H)-pyridazinon;

-3 CZ 300570 B6

2-(2,2,2—tri fl uorethy I )-4-(3“hydroxy--2,2-dimethy 1-1-propoxy)-5-[4-(aminosul fonyl)fenyl]-3(2H)-pyridazinon;

(S)-2-(2.2,2-triíluorethyl)-4 (3 hydroxy-2-methy! 1-propoxy) 5 [4 {rnethylsulfbnyl)fenyl]-3(2H)-pyridazinon;

( S )-2-(2,2,2-tr i fl uorethy 1 )-4-(3-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(aminosul fonyl)fenyl]-3(2H)-pyridazinon;

(R}-2-(2,2,2-trifluorethyl}-4-(3-hydroxy-2-methyl-1-propoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2H)-pyridazinon;

(R)-2-(2,2,2-trifl uorethy l)-4-(3-hydroxy-2-methyl-l-propoxy )-5-[4-(aminosulfonyl)feny 1 ]-3 (2 H )-py r idazi non;

2-(2,2,2-trif1uorethyl)-4-(3-hydroxy-3-methyl-l-butoxy}-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]3(2H)-pyridazinon;

2~(2,2,2-trifluorethyl)-4-(3-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]3(2H)-pyridazinon;

nebo její farmaceuticky přijatelná sůl nebo ester.

N-[[4-[2—(4-fluorfenyl)-4-(3-hydroxy-3-methyl-l-butoxy )-2H-pyridazin-3-on-5-yl]fenyl]sulfonyl]acetamid;

sodná sůl N-[[4-[2-(4-fluorfeny 1 )-4-(3-hydroxy-3-methy 1-1 -butoxy)-2H-pyridazin-3on-5-yl]fenyl]sulfonyl]acetamidu;

N-[[4-[2-(3,4-difluorťenyl)-4-(2-hydroxy-2-methyl 1 propoxy) 2H pyridazin-3 on-5yl]fenyl]sulfonyl]acetamid;

sodná sůl N-[[4-[2-(3.4-Dií1iiorfenyl) 4- (2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-2Hpyridazin-3-on-5-yl]fenyl]sulfonyl]acetamidu;

N-[[4-[2—(3-chlor-4-fluorícnyl)-4-(2-hydroxy--2-methyl-l-propoxy)-2H pyridazin 3 on-5-yl]fenyl]sulfonyl]acetamid;

sodná sůl N-[[4-[2-(3-chlor-4-fluorfenyl)-4-(2-hydroxy-2-methyl-l -propoxy)-2H— pyridazin-3-on-5-yl]fenyl]sulfonyl]acetamidu;

N-[[4-[2-(3-chlorfenyl)-4-(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-2H-pyridazin-3-on-5yl] feny l]su Ifony IJacetamid;

sodná sůl N-[[4-[2-(3-chlorfeny 1 )-4-(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-2H-pyridazin-3on-5-ylJfenylJsulfonyl]acetamidu;

N - [[4-[2—(2.2,2-triíluorethyl) -4-(2-hydroxy-2-triethyl-l-prOpoxy)-2H-pyridazin-3-on5-ylJfenylJsulfony IJacetamid;

sodná sůl N-[[4-[2-(2,2,2-trifluorethyl)-4-(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-2Hpyridazin-3-on-5-ylJfenylJsulfonylJacetamidu;

N-[[4-[2-(2,2,2-trifluorethyl)-4-(3-hydroxy-2,2-dÍmethyl-l-propoxy)-2H-pyridazin-3on-5-yl]fenyl]sulfonyl]acetamid; a sodná sůl N-[ [4-(2-(2,2,2-Trifl uorethy l)-4-(3-hydroxy-2,2-d i methyl-l-propoxy)-2Hpyridazin-3-on-5-ylJfenyl]sulfonyl]acetamidu;

nebo její farmaceuticky přijatelná sůl nebo ester.

-4CZ 300570 B6

Jiné provedení předloženého vynálezu se týká farmaceutické kompozice obsahující terapeuticky účinné množství jedné ze sloučenin uvedených výše nebo její farmaceuticky přijatelné soli nebo esteru v kombinaci s farmaceuticky přijatelným nosičem pro inhibiei biosyntézy prostaglandinu.

Sloučeniny podle vynálezu jsou užitečné při způsobu inhibice biosyntézy prostaglandinu zahrnující aplikací terapeuticky účinné množství sloučeniny nebo její farmaceuticky přijatelné soli nebo esteru.

Sloučeniny podle vynálezu jsou užitečné při ošetření bolesti, horečky, zánětu, revmatické artritidy, osteoartritidy, adheze a rakoviny zahrnující aplikaci terapeuticky účinného množství sloučeniny nebo její farmaceuticky přijatelné soli nebo esteru.

V dalším výhodném provedení popisuje předložený vynález 2 {3.4 difluorfenyl)-4-(3-hydroxy3-methyl-l-butoxy)-5-[4—(methyIsulfonyl)fenyl]-3(2//)-pyridazinon EMBED nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl nebo ester.

Sloučeniny předloženého vynálezu mohou být používány ve formě solí odvozených od anorganických nebo organických kyselin. Tyto soli zahrnují, ale není to nikterak limitováno, následující: acetát, adipát, alginát, citrát, aspartát, benzoát, benzensulfonát, bisulfát, butyrát, kamfrát, kafrosulfonát, diglukonát, cyklopentanpropionát, dodecylsulfát, ethansulfonát, glukoheptanoát, glycerofosfát, hemisulfát, heptanoát, hexanoát, fumarát, hydrochlorid, hydrobromid, hydrojodid, 2-hydroxy-ethan sulfonát, laktát, malát, methansulfonát, nikotinát, 2-naftalensulfonát, oxalát, pamoát, pektinát, persulfát, 3-fenylpropionát, pikrát, pivalát, propionát, sukcinát, tartrát, thiokyanát, p-toluensulfonát a undekanoát. Také skupiny obsahují bazický dusík mohou být kvarternízovány takovými agens jako jsou např. nižší alkyl halogen idy, např. methy leh lorid, ethy leh lorid, propylchlorid a butylchlorid, bromid a jodid; dialkylsulfáty, např. dimethyl, diethyl, dibutyl a diamylsulfáty, halogenidy s dlouhými řetězci, např. decylchlorid, laurylchlorid, myristylchlorid a stearylchlorid, bromid a jodid, aralkylhalogenidy, např. benzylbromid a fenethylbromid a další. Díky tomu jsou získány ve vodě nebo v oleji rozpustné či dispergovatelné produkty.

Příklady kyselin, které mohou být použity k přípravě farmaceuticky přijatelných adičních solí kyselin zahrnují následující anorganické kyseliny, chlorovodíkové, sírová, fosforečná kyselina a organické kyseliny, oxalová, maleinová, sukcinová a citrónová kyselina.

Adiční soli s bází mohou být připraveny in šitu během konečné izolace a čištění sloučenin vzorců I nebo odděleně reakcí karboxylové kyseliny s vhodnou bází, např. hydroxidem, uhličitanem nebo hydrogenuhličitanem farmaceuticky přijatelného kationtů kovu nebo s amoniakem nebo s organickým primárním, sekundárním nebo terciárním aminem. Takové farmaceuticky přijatelné soli zahrnují, ale není to nikterak limitováno, kationty alkalických kovů a kovů alkalických zemin, např. soli sodíku, lithia, draslíku, vápníku, hořčíku, hliníku, apod., jakož i netoxické kationty amonné, kvatemě amonné, aminu včetně, ale není to nikterak limitováno, amoniak, tetramethy lammon i um, tetraethylammonium, methylamin, dimethylamin, tri methyl amin, triethylamin, ethylamin, apod. Jiné reprezentativní organické aminy použitelné pro tvorbu adičních solí s bází zahrnují diethy lamin, ethylendiamin, ethanolamin, diethanolamin, piperazin, apod.

Termín „farmaceuticky přijatelný ester“, jak je používán zde, se vztahuje na estery, které hydrolyzují in vivo a zahrnuje ty estery, které se ochotně odstupují v lidském těle a opustí výchozí sloučeninu nebo sůl této sloučeniny. Vhodné esterové skupiny zahrnují např. skupiny odvozené od farmaceuticky přijatelných alifatických karboxylových kyselin, zejména alkanové, alkenové, cykloalkanové a alkandiové kyseliny, ve kterých každá část alkylu nebo alkenylu má výhodně ne více jak 6 uhlíkových atomů. Příklady jednotlivých esterů zahrnují formiáty, acetáty, propíonáty, butyráty, akryláty a ethyl suke i náty.

Termín „farmaceuticky přijatelný prekurzor léčiva“, jak je používán zde, se vztahuje na proléčiva sloučenin předloženého vynálezu, které jsou v rozsahu lékařského posouzení vhodné pro použití

-5 CZ 300570 B6 při kontaktu s lidskou tkání a tkání nižších zvířat a nezpůsobují toxicitu, iritací, alergické reakce, apod. a úměrné rozumnému poměru benefít/riziko a účinné pro jejich zamýšlené užití, jakož možné formy zwitterionu, tam kde je to možné, sloučenin vynálezu.

Termín „proléčivo“, jak je používán zde, se vztahuje na sloučeninu, která se rychle transformuje in vívo na výchozí sloučeninu výše uvedeného vzorce např. hydrolýzou v krvi. Důkladný rozbor této problematiky lze nalézt v T. Higuchi and V. Stella, Prodrugs as Novel Delivery Systems, Vol. 14 of the A.C.S. Symposium Series, a v Edward B. Roche, ed., Bioreversible Carriers in Drug Design, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987.

Sloučeniny předloženého vynálezu mohou mít příslušná asymetrická centra. Předložený vynález zamýšlí jejich různé stereoizomery a směsi. Jednotlivé stereoizomery sloučenin předloženého vynálezu jsou vytvořeny při syntéze z výchozích látek majících chirální centra nebo přípravou směsi produktů enantiomerů následnou separací jako např. konverzí na směs diastereoizomerů a následnou separací rekrystalizací nebo chromatografickými technikami nebo přímou separací optických enantiomerů na chirálních ehromatografie kých sloupcích. Jednotlivé výchozí sloučeniny jsou buď komerčně dostupné, a nebo jsou připraveny způsoby uvedenými níže a štěpeny na enantiomery technikami dobře známými v oboru organické chemie.

Předložený vynález popisuje sloučeniny pyridazinonu, které jsou inhibitory cyklooxygenasy (COX) a jsou selektivními inhibitory cyklooxygenasy-2 (COX-2), COX-2 je indukovatelná izoforma související se zánětem jako opozice proti konstitutivní izoformě cyklooxygenasy-1 (COX-1), kteráje důležitým „udržujícím“ enzymem v mnoha tkáních, včetně gastrointestinálního traktu (Gl) a ledvin.

Příklady provedení vynálezu

Zkratky

Následující zkratky používané v popisné části a přiložených patentových nárocích jsou:

ACD pro kyselý citrát dextrosy, CAP pro karagenem indukované vzduchové váčky, při kterých vzniká prostaglandin, CIP pro model krysí karagenem indukované pleurální inflamace, COX-2 pro cyklooxygenasu-2, CPE pro karagenem indukovaný krysí edém paciček, DB AD pro di-/buty lazod i karboxy lát, DEAD pro diethylazodikarboxylát, DIAD pro diísopropylazodikarboxylát, DMAP pro 4-(dirnethylamino)pyridin. DME pro 1,2-dimethoxyethan, DMF pro .V,.V-dimethylformamid, DMSO pro dimethylsulfoxid, DMSO pro dimethylsulfoxid, EDTA pro ethylendiamintetraoctovou kyselinu, El A pro imunochemické stanovení enzymu, FAB pro ionizaci ostřelová40 ním rychlými atomy, Gl pro gastrointestinální, HMDS, lithium nebo Li HMDS pro 1,1,1,3,3,3hexamethyldisilazid líthný, HWPX pro celou lidskou destičku Cyclooxygenasy-1, MCPBA pro metachlorperoxybenzoovou kyselinu, NSAID pro ne steroid ní proti zánětlivé léčiva, PEG 400 pro polyethylenglykol, PGE₂ pro prostaglandin E₂, PGHS pro prostaglandin endoperoxid H synthasu, RHIJCX1 pro rekombínantní lidskou cyklooxygenasu-1, RHUCX2 pro rekombínantní lidskou cyklooxygenasu-2, r-hu Coxl pro rekombínantní lidskou cyklooxygenasu Cox-1, TEA pro triethylamin, TFA pro trifluoroctovou kyselinu a THF pro tetrahydrofuran a WISH pro lidskou anionickou celobuněčnou cyklooxygenasu-2.

Příklad 1 (referenční příklad)

Bcnzy 14 ý4-fiuorfcnyl)-5 methoxy 3(2//)-pyridazinon

Do směsi 2-bcnzyl-5 -mcthoxy 4-brom-3(2/7) pyridazinonu, připravené podle způsobu z příkladu (S. Cho et al, popsané v J. Het. Chem., (1996), 33, 1579-1582), (2,94 g; 10 mmol),

-6 CZ 300570 B6

4-fluorbenzenborité kyseliny (1,54 g; 11 mmol) a CsF (3,04 g; 22 mmol) v 25 ml bezvodého DME pod atmosférou N₂ se přidá Pd(Ph₃P)₄ (347 mg, 0,3 mmol). Po přidání se směs zahřívá při refluxu (100 °C) po dobu 18 hodin. Směs se koncentruje ve vakuu a zbytek rozdělí mezi ethylacetátovou a vodnou vrstvu. Acetátová vrstva se promyje solankou, suší síranem hořeěnatým a koncentruje ve vakuu. Zbytek ve formě pevné látky se suspenduje ve směsi ethyletheru a hexanů a filtruje, čímž se získá produkt ve formě pevné látky (výtěžek: 3,1 g; asi 100 %; > 95% čistota). 'HNMR (300 MHz, CDC1₃) δ 3,90 (s, 3H), 5,36 (s, 2H), 7,09 (t, J = 9 Hz, 2H), 3,71 (m, 3H), 7,50 (m, 4H), 7,91 (s, IH). MS (DCI/NH₃) m/z311 (M+H)⁺, 328 (M+NH₄)⁺.

io Příklad 2 (referenční příklad)

2-Benzy l^F-(4_fl uorfeny 1 )-5-hydroxy-3 (27/)-py ri dazinon

Produkt z příkladu 1 (1,24 g; 4 mmol) ve 20 ml octové kyseliny se nechá reagovat svodným roztokem 48% HBr (25 ml). Směs se zahřívá při refluxu po dobu 5 až asi 8 hodin (TLC). Směs se koncentruje ve vakuu. Produkt se rozpustí v ethylacetátu, promyje 10% hydrogenuhličitanem, solankou a koncentruje ve vakuu. Zbytek se promyje směsí diethyletheru a hexanů (2:1) a pevná látka se filtruje, čímž se získá téměř čistý produkt (výtěžek: 1,16 g; 98 %).

‘H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 5,24 (2H), 7,21 (m, 2H), 7,30 (m, 5H), 7,55 (m, 2H), 7,85 (s, IH), 11,31 (brs, IH). MS (DCI/NH₃) m/z 296 (M+H)⁺, 314 (M+NH4/.

Příklad 3 (referenční příklad)

2-Benzyl—4-(4-fluorfenyl)-5-(trifluonnethylsulfonyl0xy 3(2//)-pyridazinon

Roztok produktu z příkladu 2, (89 mg, 0,3 mmol) ve 2,5 ml bezvodého pyridinu pod atmosférou

N₂ a při udržované teplotě 0 °C se nechá po kapkách reagovat s anhydridem kyseliny triflové (Tf₂O; 0,06 ml; 0,32 mmol). Výsledná směs se míchá při teplotě 0 °C po dobu 5 minut a při pokojové teplotě po dobu 16 hodin, (kvůli dosažení dobrých výsledků by měly být pyridin a Tf₂O čisté. Někdy je třeba k dokončení reakce přidat další množství Tf₂O). Směs se pak nalije do studeného roztoku citrónové kyseliny a extrahuje ethylacetátem, čímž se získá téměř čistý pro30 dukt (výtěžek: 127 mg, asi 99 %).

'H NMR (300MHz, DMSO-d₆) δ 5,34 (s, 2H), 7,35 (m, 7H), 7,60 (m, 2H), 8,48 (s, IH). MS (DCI/NH3) m/z 429 (M+H)⁺, 446 (M+NH₄)\

Příklad 4 (referenční příklad)

2-Benzyl-4-(4-fluorfenyl)-5-[4-(methylthio)fenyl]-3(2//)-pyridazinon

Směs produkt z příkladu 3, (154 mg, 0,36 mmol), 4-(methylthio)benzenboritá kyselina (67 mg, 0,4 mmol), Et₃N (0,11 mmol; 0,8 mmol) a Pd(Ph₃P)₄ (30 mg, 0,025 mmol) v 15 ml toluenu se zahřívá při refluxu (100 °C) po dobu 45 minut. Směs se koncentruje ve vakuu a zbytek se čistí ehromatografií na sloupci silikagelu směsí hexanů a ethylacetátu (3:1), čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 98 mg, 68 %).

'H NMR (300 MHz, CDCL) δ 2,47 (s, 3H), 5,38 (s, 2H), 6,98 (m, 4H), 7,12 (m, 2H), 7,20 (m,2H), 7,35 (m, 3H), 7,54 (m, 2H), 7,86 (s, IH). MS (DCI/NH₃) m/z 403 (M+H)*, 420 (M+NH₄)⁺.

Příklad 5 (referenční příklad)

2-Benzyl-4-(4-fluorfenyl)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2//)-pyridazinon

Do roztoku produktu z příkladu 4 (140 mg, 0,348 mmol) v 10 ml CH₂C1₂ při teplotě 0 °C se přidá peroctová kyselina (CH₃COOOH; 0,5 ml; 30%). Směs se míchá při teplotě 0 °C po dobu 90 minut. Dichlormethan se odstraní ve vakuu. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu, promyje 10%

-7CZ 300570 B6

NaHCOj a solankou. Ethylacetát se odstraní za sníženého tlaku. Zbytek se chromatografuje na sloupci silikagelu směsí CH₂C1₂ a diethyletheru (19:1), čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 130 mg, 86 %).

'H NMR (300 MHz, CDCb) δ 3,04 (s, 3H), 5,40 (s, 2H), 6,95 (m, 2H), 7,16 (m, 2H), 7,33 (m, 5H), 7,55 (m, 2H), 7,86 (m, 3H). MS (DCI/NHj) m/z 434 (M+H), 452 (M+NH₄)‘.

Příklad 6 (referenční příklad)

2-(4-ťluorfenyl}4-(2-ethy 1-1-hexy loxy)--5-[4-(methy Isulfony l)fenyl]--3(27/)-pyridazinon

Do roztoku 2—ethyl—1-hexanolu (65 mg, 0,5 mmol) v THF (15 ml) při pokojové teplotě se přidá NaH (60% olejovitá suspenze) (20 mg, 0,5 mmol) a po 10 minutách se přidá 2 (4-fluorfenvl)-4tosyloxy-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2//)-pyridazinon (193 mg, 0,5 mmol). Výsledná směs se míchá při pokojové teplotě po další 2 hodiny. Směs se zháší 10% citrónovou kyselinou a extrahuje ethylaeetátem. Extrakt se promyje vodou, solankou, suší síranem hořečnatým a čistí chromatografií na sloupci silikagelu směsí hexanů a ethylacetátu (2:1), čímž se získá požadovaný produkt (výtěžek: 140 mg, 60 %). Teplota tání 120 až 122 °C.

'HNMR (300 MHz, DMSO d_ó) δ 0,75 (m, 6H), 1,1 (m, 6H), 1,20 (kvintet, J - 7 Hz, 2H), 1,44 (m, IH), 3,27 (s, 3H), 4,30 (d, J ~ 6 Hz, 2Hz), 7,37 (t, J = 9 Hz, 2H), 7,65 (m, 2H), 7,89 (d, J = 9 Hz, 2H), 8,06 (d, J = 9 Hz, 2H), 8,18 (s, IH). MS (APC1+) m/z 473 (M+H) ; (APCI-) m/z 507 (M+CI). Analyticky vypočteno pro C₂₅H₂₉FN₂O₄S.0,5 H₂O: C, 62,35; H, 6,27; N, 5,87. Zjištěno: C, 62,22; H, 6,14; N, 6,22.

Příklad 7 (referenční příklad)

Příklad 7A

2-(4-fluorfenyl)-4,5-dibrom-3(2//)-pyridazinon

Mukobromová kyselina (5,0 g, 19,4 mmol) rozpuštěná v octové kyselině (110 ml) se nechá reagovat s hydrochloridem 4-fluorfenylhydrazinu a heterogenní směs se refluxuje při teplotě lázně 115 °C po dobu 15 hodin. Během reakce se reakční směs homogenizuje na tmavě červený roztok a po ochlazení na teplotu 23 °C se vytvoří precipitát. Roztok se nalije do ledové vody (1000 ml) a míchá po dobu 20 minut. Žluté až hnědé krystaly se odfiltrují, promyjí další studenou vodou a suší ve vakuu, čímž se získá 5,8 g (86 %) produktu (J. Het. Chem., 1993, 30, 1501; Heterocycles 1985,23,2603).

'H NMR (300 MHz, DMSC+-d₆) δ 7,31 -7,41 (m, 2H), 7,57-7,64 (m, 2H), 8,29 (s, IH). MS (DCf) m/z 347 (Br₇₉Br₇₉ M+H)', m/z 349 (Br₇₉Br₈₁ M+H/, m/z 364 (Br₇₉Br₇₉ M+NH₄)⁺, a m/z 366 (Br₇₉Br_gl, M+NH₄)\

Příklad 7B

2-(4-fIuorfenyl)-4-methoxy-5-brom-3(2/y)-pyridazinon

Homogenní roztok 2-(4 fluorfenyl) 4,5-dibrom-3(2//) 5 pyridazinonu (7,18g, 20,6 mmol) o teplotě 23 °C, připravený výše, v tetrahydrofuranu (322 ml) se nechá reagovat s methanolem (0,843 ml, 20,8 mmol) a po 5 minutách s NaH (0,833 g, 20,8 mmol, 60% olejová disperze). Reakce je po několik minut exotermní, pak se pokračuje po dalších 8 hodin při teplotě 23 °C (v tomto bodě proběhlo dokonce několik reakcí). Pokud reakce nedoběhne dokonce, pak se směs refluxuje po dobu 4 hodin. Pokud stále není reakce u konce, připraví se v oddělené baňce roztok 0,1 ekviv. NaOMe podle výše uvedeného způsobu s následujícími množstvími: 32 ml tetrahydrofuranu, 0,084 ml methanolu a 83 mg 60% NaH jako olejovitá disperze. Tento roztok se injekční stříkačkou přidá do reakční směsi o teplotě 23 °C, pak se teplota zvýší a reakční směs se refluxuje po dobu 4 hodin. Pokud reakce stále nedoběhla do konce přidá se opět podle výše uvedeného

-8CZ 300570 B6 způsobu 0,1 ekviv. NaOMe podle výše uvedeného způsobu s následujícími množstvími: 32 ml tetrahydrofuranu, 0,084 ml methanolu a 83 mg 60% NaH jako olejovitá disperze. Tento roztok se injekční stříkačkou přidá do reakční směsi o teplotě 23 °C, pak se teplota zvýší a reakění směs se refluxuje po dobu 4 hodin. Pokud reakce stále nedoběhla do konce přidá se opět podle výše uvedeného způsobu 0,1 ekviv. NaOMe. Směs se ochladí na teplotu 23 °C a zředí na 2000 ml vodou. Vzniklý žlutý až bílá precipitát se odfiltruje, promyje vodou a koncentruje ve vakuu, čímž se získá 5,39 g (88 %) produktu (J. Het. Chem., 1988,25, 1757).

*H NMR (300 MHz, DMSO-d«) δ 4,13 (s, 3H), 7,30 - 7,40 (m, 2H), 7,56 - 7,62 (m, 2H), 8,22 (s, IH). MS (APCI⁺) m/z 299 (⁷⁹Br M+H)⁺ a m/z 301 (^slBr M+H)⁺.

io

Příklad 7C

2-(4-fluorfenyl)-4-methoxy-5-[4-(methylthio)fenyl ]-3(2í/)-pyri dazi non

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 1 nahrazením 2-(4-fluorfenyl)-4~ is methoxy-5-brom-3(2//)-pyridazinonu za 2-benzy 1- 4-brom-5-methoxy-3(2//)-pyridazinon a nahrazením 4-(methylthio)berizenborité kyseliny za 4-fluorbenzenboritou kyselinu (výtěžek:

mg, 61 %). *H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 2,54 (s, 3H), 4,02 (s, 3H), 7,35 (dd, J = 9,0, 9,0 Hz, 2H), 7,38 (d, J =8,5 Hz, 2H), 7,61 (d, J= 8,5 Hz, 2H), 7,65 (dd, J = 9,0, 5,0 Hz, 2H), 8,14 (s, IH). MS (APCI+) m/z 343 (M+H)\

Příklad 8 (referenční příklad)

2-(3-chlorfenyl)-4-hydroxy-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2//)-pyridazinon

Suspenze 2-(3-chlorfenyl)-4-(methoxy)- 5 -[4-(methylsulfonyl)fcnylJ-3(2/Y)-pyridazinonu (6,26 g, 16 mmol) v 5% NaOH (54 ml) a dioxanu (39,4 ml) se zahřívá při refluxu a míchá po dobu 1,5 hodiny. S postupujícím Časem je roztok oranžový a homogenní. Směs se ochladí a nalije za stálého míchání do IN HCI. Výsledná bílá pevná látka se filtruje a nalije do H₂O a nechá stát přes noc. Téměř suchý produkt se vytřepává v CH₂C1₂ a kvůli odstranění H₂O se azeotropicky destiluje s toluenem, čímž se získá bílá pevná látka (výtěžek: 6,79 g, >100 %).

^]H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 2,27 (s, 3H), 7,51 - 7,62 (m, 2H), 7,68 (m, 1H), 7,79 (m, 1H), 8,03 (m, 4H), 8,24 (s, IH). MS (DCI/NH₃) m/z 377 (M+H)⁺, 396 (M+NH4/.

Příklad 9 (referenční příklad)

2-(3-chlorfenyl)-4-tosyloxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2Z/)-pyridazÍnon

Do roztoku 2-(3 -ch lor feny 1 )-4-hydroxy-5-[4-( methy 1 su 1 fony 1 )feny 1 ]—3 (2//)-py ri dazi non u o teplotě 0 °C, připraveného v příkladu 8, (6,79 g, 16 mmol) v pyridinu (160 ml) se přidá p-toluensulfony leh lorid (3,06 g, 16 mmol). Roztok se za stálého míchání pod atm. N₂ nechá pomalu ohřát na teplotu místnosti. Po 2,5 hodinách se směs za stálého míchání nalije do H₂O.

Výsledná bělavá pevná látka se filtruje, promyje H₂O a suší, čímž se získá požadovaný produkt (výtěžek: 6,26 g, 79 %). Teplota tání 198 až 200 °C.

'H NMR (300 MHz, DMSO-d_ó) δ 2,35 (s, 3H), 3,28 (s, 3H), 7,20 (m, 2H), 7,52 - 7,64 (m, 5H), 7,70 (m, 3H), 7,89 (m, 2H), 8,32 (s, IH). MS APCI+ 531 (M+H)\ 548 (M+H₂0)’, APCI-493 (M+35)⁺. Analyticky vypočteno pro C₂₄H_I9C1N₂O₆S: C, 54,29; H, 3,61; N, 5,28. Zjištěno: C,

54,55; H, 3,46; N, 5,57.

Příklad 10 (referenční příklad)

2-(3-chlorfenyl)—4-(2-methylpropoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2//)-pyridazinon

Do míchané suspenze 2-( 3-chlorfeny 1)-4-tosyl oxy-5-[4-( methy lsulfony l)fenyl]-3 (2//)-pyridazinonu, připraveného v příkladu 9, (0,175 g, 0,33 mmol) v THF (3,3 ml) se přidá izobutanol

-9CZ 300570 B6 (0,03 ml, 0,33 mmol) a NaH (0,0132 g, 0,33 mmol). Výsledný roztok se míchá pod atm. dusíku po dobu 1 hodiny. Reakční směs se nalije do H₂O a extrahuje ethylacetátem. Spojené organické frakce se suší síranem hořečnatým a koncentrují ve vakuu. Surová pevná látka se čistí zrychlenou chromatografii na sloupci sílikagelu v systému hexany:ethylacetát(2:l), čímž se získá požadovaný produkt (výtěžek: 0,1088 g 76 %). Teplota tání 166 až 169 °C.

'H NMR (300 MHz, DMSO d₆) δ 0,78 (d, J - 6 Hz, 6H), 1,84 (m, IH), 3,29 (s, 3H), 4,20 (d, J = 6 Hz, 2H), 7,51-7,63 (m, 3H), 7,76 (m, IH), 7,92 (m, 2H), 8,07 (m, 2H), 8,21 (s, IH). MS (DCI/NH3) m/z 433 (M+H)⁺, 450 (M+NH4)^T. Analyticky vypočteno pro C2]H₂|C1N₂O₄S: C, 57,07; H, 5,01; N, 6,33. Zjištěno: C, 57,06; H, 4,78; N, 6,13.

Příklad 11 (referenční příklad)

2-(4-fluorfenyl)-4-(3-methylbutoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2//)-pyridazinon

2-(4-Fluorfenyl)-4-methoxy-5—brom—3(2//)-pyridazi non (příklad 7B) se konvertuje na 2-(4— fluorfenyl)-4-methoxy-5—[4-(methylthio)fenyl]-3(2//)-pyridazinon podle způsobu z příkladu 7C, poté se provede oxidace podle způsobu z příkladu 5. Methoxy sloučenina se konvertuje na 2-(4-fluorfenyl)-4—hydroxy-5-[4-( methy lsul fonyi )fenyl]-3 (277)-pyr i dazínon reakcí s NaOH podle způsobu z příkladu 8. Hydroxy sloučenina se nechá reagovat s p-toluensulfonylchloridem podle způsobu z příkladu 9 za vzniku 2-(4-fluorfěnyl)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl] 4 tosy 1 oxy-3 (2 7/)-py r i dazi non u.

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 10 nahrazením 2-(4-fluorfenyl)-5[4-(methy lsul fony 1 )feny 11—4-tosy loxy-3 (2 7/)-py r i dazi n on u za 2-( 3—ch 1 orfeny 1 )-5- [4-(methy 1 sulfonyl)fenyl]—4-tosy loxy-3 (2//}--pyndazinon nahrazením 3—methyl—1-butanolu za izobutanol (výtěžek: 0,3932 g, 94 %). Teplota tání 117 až 120 °C.

‘HNMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 0,79 (d, J = 6 Hz, 6H), 1,41 - 1,59 (m, 3H), 3,30 (s, 3H), 4,42 (d, J - 5 Hz, 2H), 7,36 (m, 2H), 7,65 (m, 2H), 7,90 (m, 2H), 8,06 (m, 2H), 8,18 (s, IH). MS (DCI/NH3) m/z 431 (M+H)⁺, 448 (M+NH4)¹. Analyticky vypočteno pro C₂₂H₂3FN₂O₄S: C, 61,38; H, 5,39; N, 6,51. Zjištěno: C, 61,42; H, 5,30; N, 6,40.

Příklad 12 (referenční příklad)

2-(4-fluorfenyl)-4-[3-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(277)pyridazinon

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 6 nahrazením 3-methyl-l,3-butandioiu za 2-ethyl-l-hexanol (výtěžek: 110 mg, 61 %). Teplota tání 133 až 134 °C.

'HNMR(300 MHz, DMSO~0 δ 1,04 (s, 6H), 1,72 (t, J - 7 Hz, 2H), 3,29 (s, 3H), 4,32 (s, IH), 4,53 (t, 3 = 7 Hz, 2H), 7,37 (t, J = 9 Hz, 2H), 7,66 (m, 2H), 7,90 (d, J = 9 Hz, 2H), 8,07 (d, J = 9Hz, 2H), 8,19 (s, IH); MS (APCI+) m/z 447 (M+H/; (APCI-) m/z 481 (M+Cl)’; Analyticky vypočteno pro C₂3H₂₂FN₂O₅S.0,25 H₂O: C, 58,59; H, 5,25; N, 6,21. Zjištěno: C, 58,42; H, 5,00; N, 6,02.

Příklad 13 (referenční příklad)

-{3,4-dif1uorfenyl) 4-<2--hydroxy-2-mcthyl-l-propoxv) 5 [4 (methylsulfonyl)fenyl] 3(2/7) pyridazinon

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 6 nahrazením 2-(3,4-difluorfenyl)~

4- tosyloxy-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2//)-pyridazinonu za 2-(4-fluorfenyl)-4-tosyloxy5- [4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2/7)-pyridazinon a nahrazením 2-methyl-l,2-propandiolu za 2-ethyl-l-hexanol (výtěžek: 55 mg, 31 %).

- 10CZ 300570 B6 'Η NMR (300 MHz, DMSO-Λ) δ 0,97 (s, 6H), 3,30 (s, 3H), 4,20 (s, 2H), 4,54 (s, 1H), 7,52 (m, 1H), 7,62 (m, 1H), 7,81 (m, 1H), 7,98 (d, J = 9 Hz, 2H), 8,05 (d, J = 9 Hz, 2H), 8,21 (s, 1H). MS (APCI+) m/z 451 (M+H)’; (APCI-) m/z 485 (M+Clf; Analyticky vypočteno pro

C₂iH₂oF₂N₂0₅S: C, 55,99; H, 4,47; N, 6,21. Zjištěno: C, 56,00; H, 4,48; N, 5,87.

Příklad 14 (referenční příklad)

2-(3,4-difluorfenyl)-^-(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(2//)pyridazinon io

Do roztoku 2-(3.4 -dinuorfenyl)-4-(2-hydroxy-2-methyl--l-propc>xy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyI]-3(27/)-pyridazinonu (Příklad 13) (139 mg, 0,309 mmol) a di-Z-butylazodikarboxylátu (71,2 mg, 0,309 mmol) v THF (25 ml) při teplotě -78 °C se po kapkách přidá IM roztok NaHMDS (0,93 ml, 0,928 mmol) v THF, reakční směs se míchá dalších 45 minut při teplotě

-78 °C (dokud z TLC není evidentní, že výchozí látka zcela zreagovala), pak se nechá reagovat s IN NaOH (20 ml). Reakční směs se míchá při pokojové teplotě po dobu dalších 18 h. Přidá se trihydrát octanu sodného (758 mg, 5,57 mmol), poté hydroxylamin-čž-sulfonová kyselina (630 mg, 5,57 mmol) a H₂O (50 ml). Výsledná směs se míchá při teplotě místnosti po dobu dalších 18 hodin, extrahuje EtOAc. Extrakt se promyje vodou, solankou, suší síranem hořečna20 tým a koncentruje ve vakuu. Zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu v systému hexany:EtOAc(l:l), čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 25 mg; 18 %). Teplota tání 65 až 69 °C.

*H NMR (300 MHz, DMSO-Λ) δ 1,0 (s, 6H), 4,2 (s, 2H), 4,56 (s, IH), 7,51 (m, 3H), 7,6 (m, IH), 7,85 (m, IH), 7,95 (s, 4H), 8,21 (s, IH). MS (DCl/NH₃) m/z 451 (M+H)⁺, 467 (M+NH₄)⁺.

Příklad 15 (referenční příklad) (S)-2-(3,4-difluorfeny l)-4-(3-hydroxy-2-methyt-l-propoxy)-5-|4-(methy lsul fony l)fenyl)-3(277)-pyridazÍnon

Příklad 15A (R)-3-/-butoxy-2-methy 1-1 -propanoi

Roztok (S)-(+)-methyl-3-hydroxy-2-methy lpropionátu (1,18 g, 10 mmol) v /-butylacetátu (30 ml) se nechá reagovat s 70% HC1O₄ (0,1 ml) a reakční směs se nechá stát při pokojové teplotě v dokonale uzavřené baňce po dobu 24 hodin. Směs se nalije do nasyceného roztoku NaHCO₃ a extrahuje ethyletherem. Ether se odstraní ve vakuu a zbytek se rozpustí v THF (50 ml). Do výsledného roztoku se přidá NaBH₄ (925 mg, 25 mmol) a po kapkách při teplotě 55 °C methanol (10 ml), reakce se nechá běžet po dobu 1 hodiny při teplotě 55 °C, pak se ochladí na pokojovou teplotu, okyselí 10% kyselinou citrónovou na pH 5 a extrahuje ethylacetátem. Acetátový extrakt se promyje vodou, solankou, suší síranem hořečnatým a koncentruje ve vakuu. Zbytek se chromatografuje na sloupci silikagelu v systému hexanrethylacetát (2:1), čímž se získá (R) -3-/-butoxy-2-methyl-l-propanoI (výtěžek: 1 g, 68 %).

'HNMR (300 MHz, CDC1₃) δ 0,85 (d, J = 7 Hz, 3H), 1,20 (s, 9H), 2,03 (m, 1H), 3,30 (t, J = 12

Hz, IH), 3,53 (dd, J - 4,5 Hz, 12 Hz, IH), 3,70 (m, 2 H). MS (DCI/NH3) m/z 164 (M+NH₄)⁺.

Příklad 15B (S) -2-<3.4—difluorfenyl)-^-(3-/-butoxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4methylsulfonyl)fenyl]-3(27/)-pyridazinon

Do roztoku 2-(3,4-difluorfenyl)-4-hydroxy-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl-3(2//)-pyridazinonu (378 mg, 1 mmol), Ph₃P (524 mg, 2 mmol) a sloučeniny z příkladu 15A (146 mg, 1 mmol)

- 11 CZ 300570 B6 v THF (25 ml) při pokojové teplotě se po kapkách přidá roztok DIAD (0,4 ml, 2 mmol) v THF (5 ml). Směs se míchá při pokojové teplotě po dobu 6 hodin a koncentruje ve vakuu. Zbytek se nanese na silikagel a eluuje v systému hexany:ethylacetát, čímž se získá 550 mg zhruba čistého (S) 2 (3.4-difluorfenyl) 4 (3 t butoxy-2-mcthyl-l-propo.\y) 5 [4 (methyIsulfonyl)fenyl]-35 (2//)-pyrÍdazinonu, který je kontaminován redukovaným DIAD. MS (APCI+) m/z 507 (M+H)-; (APCI-) m/z 541 (M+Cl)“.

Příklad 15C (S)2<3,4—diíluorfenyl)4-(3-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(methylsuIfonyl)fenyl]-3io (27/)-pyridazinon

Směs z příkladu 15B (100 mg, ~0,2 mmol) v TFA (5 ml) se nechá stát při pokojové teplotě po dobu 24 hodin. Směs se koncentruje ve vakuu. Zbytek se neutralizuje nasyceným roztokem NaHCOi a extrahuje ethylacetátem. Čištěním na sloupci silikagelu v systému hexany:EtOAc(l:2) se získá pěnovitý produkt (výtěžek: 51 mg, 56 %).

^lH NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0,75 (d, J = 7 Hz, 3H), 1,81 (sextet (J - 7 Hz, IH), 3,21 (d, J = 6 Hz, 2H), 3,30 (s, 3H), 4,29 (dd, J = 6 Hz, 12 Hz, IH), 4,40 (dd, J - 6 Hz, 12 Hz, IH), 4,48 (br s,lH), 7,52 (m, IH), 7,61 (m, IH), 7,80 (m, 1H), 7,91 (d, J-9 Hz, 2H), 8,07 (d, J = 9 Hz, 2H), 8,20 (s, IH); MS (APCI+) m/z 451 (M+H)⁺; (APCI-) m/z 485 (M+Cl); Analyticky vypočteno pro C21H₂₀F₂N₂O₅S: C, 55,99; H, 4,47; N, 6,21. Zjištěno: C, 55,65; H, 4,65; N, 5,92.

Příklad 16 (referenční příklad) (R) -2-(3,4-difluorfenyl)—4—(3-hydroxy-2-methyl-l—propoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyI]-325 (2//)-pyridazinon

Požadovaná sloučenina se připraví způsobem podle příkladu 15 nahrazením (R)-(-)-methyl-3hydroxy-2-methylpropionátu za (S)—(+)-methyl-3-hydroxy-2-methylpropionát (výtěžek: 65 mg, 61 %).

'HNMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 0,75 (d, J = 7 Hz, 3H), 1,81 (sextet, J = 7 Hz, IH), 3,21 (t, J - 6 Hz, 2H), 3,30 (s, 3H), 4,29 (dd, J - 6 Hz a 12Hz, IH), 4,40 (dd, J = 6 Hz, 12 Hz, IH), 4,49 (t, J = 6Hz, IH), 7,52 (m, IH), 7,61 (m, IH), 7,80 (m, IH), 7,91 (d, J - 9 Hz, 2H), 8,07 (d, J = 9 Hz, 2H), 8,20 (s, IH); MS (APCI+) m/z 451 (M+H)^b; (APCI-), m/z 485 (M+Cl)’. Analyticky vypočteno pro C₂iH₂oF₂N₂0₅S: C, 55,99; H, 4,47; N, 6,21. Zjištěno: C, 55,62; H, 4,52; N, 6,06.

Příklad 17 (referenční příklad) (S) -2-(3,4-difluorfenyl)-4-(3-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(aminosuÍfoiiyl)fenyl]-3(2//)-pyridazinon

Do roztoku (S)-2-(3,4-difluorfenyl)-4-(3-/-butoxy-2-methyl-1-propoxy)-5-[4™(methylsulfonyl)fenyl]-3(2Z/)-pyridazinonu (příklad 15B, 450 mg, ~0,9 mmol) a DBAD (207 mg 0,9 mmol) v THF (25 ml) při teplotě -78 °C se po kapkách přidá IM roztok LiHMDS (3 ml, 3 mmol) a výsledná směs se míchá při teplotě -78 °C po dobu 2 hodin. Směs se zahřeje na pokojovou teplotu a přidá se IN NaOH (5 ml, 5 mmol). Po 12 hodinách při pokojové teplotě se přidá trihydrát octanu sodného (2,76 g, 20 mmol) a voda (10 ml), poté hydroxylamin-O-sulfonová kyselina (2 g, 15 mmol) a směs se míchá při pokojové teplotě po dobu 5 hodin. Produkt se extrahuje ethylacetátem a čistí chromatografií na sloupci silikagelu v systému hexany:EtOAc(l:2), čímž se získá surový meziprodukt (výtěžek: 160 mg, 35 %). MS (APCI+) m/z 508 (M+H) ;

(APCI-) m/z 542 (M+Cl) .

Do výše připraveného meziproduktu se přidá TFA (5 ml) a výsledný roztok se nechá stát při pokojové teplotě po dobu 24 hodin. TFA se odstraní ve vakuu a zbytek neutralizuje nasyceným

- 12CZ 300570 B6

NaHCCh a extrahuje ethylacetátem. Organická vrstva se suší síranem hořečnatým a filtruje. Filtrát se koncentruje ve vakuu a zbytek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu v systému hexany:ethylacetát (1:2), čímž se získá požadovaná sloučenina (výtěžek: 50 mg, 33 %).

'HNMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 0,76 (d, J - 7 Hz, 3H), 1,81 (sextet, J = 7 Hz, IH), 3,22 (t, J = 6 Hz, 2H), 4,28 (dd, J = 6 Hz, 12 Hz, IH), 4,40 (dd, J = 6 Hz, 12 Hz, IH), 4,50 (t, J = 6 Hz, IH), 7,51 (m, 3H), 7,61 (m, IH), 7,80 (m, IH), 7,84 (d, J = 9 Hz, 2H), 7,95 (d, J = 9 Hz, 2H), 8,20 (s, 1H); MS (APCI+) m/z 452 (M+H)-; (APCI-), m/z 486 (M+Cl)’.

Příklad 18 (referenční příklad) (R)-2-(3,4-difluorfenyl)-^-(3-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(2//)-pyridazinon

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 17 nahrazením (R)-2-(3,4-difluorfenyl)-4-(3-Z-butoxy-2-methyl-l-propoxy)-5“[4-(methyl-sulfonyl)fenyl]-3(2//)-pyridazinonu za (S)-2-(3,4-difluorfenyl)-^4-(3-/-butoxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2//)-pyridazinon (výtěžek: 30 mg, 20 %).

^]H NMR (300 MHz, DMSO~d6) δ 0,76 (d, J = 7 Hz, 3H), 1,81 (sextet, J = 7 Hz, IH), 3,22 (t, J = 6 Hz, 2H), 4,28 (dd, J - 6 Hz, 12 Hz, IH), 4,40 (dd, J = 6 Hz a 12 Hz, IH), 4,50 (t, J = 6 Hz, IH), 7,51 (m, 3H), 7,61 (m, IH), 7,80 (m, IH), 7,84 (d, J = 9 Hz, 2H), 7,95 (d, J = 9 Hz, 2H), 8,20 (s, IH); MS (APCI+) m/z 452 (M+H)⁺; (APCI-) m/z 486 (M+CI)’. Analyticky vypočteno pro C20H₁₉F₂N₃O₅S: C, 53,21; H, 4,24; N, 9,30. Zjištěno: C, 53,45; H, 5,53; N, 9,50.

Příklad 19 (referenční příklad)

2-(4-fluorfenyl)-4-(4-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-[4-(methylsu!fbnyl)fěnyI]-3(2//)pyridazinon

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 6 nahrazením 2-methyl-l,4-butandiolu za 2—ethyl-l-hexanol a separací regioizomemích produktů vícenásobnou preparativní TLC v systému ethylacetát:hexany(4:l) (výtěžek: 65 mg, 19 %).

*H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 0,87 (d, J = 8,1 Hz, 3H), 1,48 - 1,87 (m, 4H), 3,13 (s, 3H), 3,41 (dd, J=6,3, 13,5 Hz, 1H),3,46 (dd, J = 6,3, 13,5 Hz, IH), 4,48-4,63 (m, 2H), 7,15-7,24 (m, 2H), 7,58- 7,66 (m, 2H), 7,79 (d, J = 10,5 Hz, 2H), 7,91 (s, IH), 8,07 (d, J = 10,5 Hz, 2H); MS (APCI+) m/z 447 (M+H)⁺,

Příklad 20

2-(4-fluorfenyl)-4-(4-hydroxy-2-methyl-l-butoxy}-5-[4-(methylsulfonylfenyl]-3(2//)-pyridazinon

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 6 nahrazením 2-methyl-l,4-butandiolu za 2-ethyl-l-hexanol a separací regioizomemích produktů vícenásobnou preparativní TLC v systému ethylacetát:hexany(4:l) (výtěžek: 43 mg, 12 %).

'HNMR (300 MHz, CDCh) δ 0,87 (d, J = 8,1 Hz, 3H), 1,33 - 1,46 (m, IH), 1,50- 1,67 (m, 2H), 1,93 - 2,04 (m, IH), 3,13 (s, 3H), 3,54 - 3,72 (m, 2H), 4,29 (dd, J = 6,0, 9,3 Hz, IH), 4,43 (dd, J = 6,0, 9,3 Hz, IH), 7,15 - 7,24 (m, 2H), 7,58-7,66 (m, 2H), 7,79 (d, J = 10,5 Hz, 2H), 7,91 (s, 1H), 8,07 (d, J = 10,5 Hz, 2H); MS (APCI+) m/z 447 (M+H)⁺.

Příklad 21

2-(4-fluorfenyl)-4-(3-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(2//)pyridazinon

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 14 nahrazením 2-(4-fluorfenyI)-4(3-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-[4-(methyl-sulfonyl)fenyl]-3(27/)-pyridazinonu za 2-(3,4- 13CZ 300570 B6 d i fluorfcny 1)-4-(2 hydroxy-2-methy 1-1-propoxy )-5-[4 -(methyl su liony l)fenyl]-3(2//)-pyridazinon (výtěžek: 600 mg, 60 %). Teplota tání 163 až 164 °C;

'HNMR (300 MHz, DMSO<f) δ 1,05 (s, 6H), 1,73 (t, J = 6 Hz, 2H), 4,30 (s, IH), 4,52 (t, J = 6 Hz, 2H), 7,37 (t, J = 9 Hz, IH), 7,47 (s, 2H), 7,65 (dd, J = 9 Hz, J ~ 3 Hz, 2H), 8,83 (d, J = 9 Hz,

2H), 8,95 (d, J - 9 Hz, 2H), 8,18 (s, IH); MS (DCI/NH,) m/z 448 (M+H)⁺. Analyticky vypočteno pro C₂,H₂₂FN,O₅S: C, 56,36; H, 4,95; N, 9,39. Zjištěno: C, 55,96; H, 4,89; N, 9,09.

Příklad 22

2-(3,4-difluorfenyl)-4-(3-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2Z/)io pyridazinon

Příklad 22A

3,4-difluorfenylhydrazÍn

Míchaná směs 3,4-difluoranilinu (12,9 g, 0,1 mol) v koncentrované kyselině chlorovodíkové is (60 ml) se zchladí na teplotu -10 °C v chladicí lázni složené z ledu a methanolu. Roztok dusitanu sodného (6,9 g, 0,1 mol) ve vodě (30 ml) se přidá v takové míře, aby se udržela teplota reakční směsi pod 10 °C. Po 2 hodinovém míchání se reakční směs ochladí na teplotu 0 °C a za stálého míchání se po kapkách přidá roztok chlorid cínatý (56,88 g, 0,3 mol) v koncentrované kyselině chlorovodíkové (50 ml). Do reakční směsí se přidá další koncentrovaná kyselina chlorovodíková (150 ml) a reakční směs se míchá další 2 hodiny, poté se filtrací spojí precipitované hydrochloridové soli požadované sloučeniny. Precipitát se rozpustí ve vodě (75 ml) a výsledný roztok se alkalizuje 50% vodným hydroxidem sodným a extrahuje ethylacetátem. Organické extrakty se suší (Na₂SO₄) a filtrují. Filtrát se koncentruje ve vakuu, čímž se získá požadovaný meziprodukt jako hnědý olej (8,11 g, 57,4 %).

Příklad 22 B

2-(3,4-dífluorfenyl)-4,5-dibrom-3-(27/)-pyrÍdazÍnon

Požadovaný meziprodukt se připraví způsobem podle příkladu 7A nahrazením 3,4-difluorfenylhydrazinu (příklad 22A) za hydrochlorid 4-fluorfenylhydrazinu.

Příklad 22C

2-(3,4-difluorfenyl)-4-(3-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-brom-3(27/)-pyridazÍnon

Dibromový meziprodukt z příkladu 22B se nechá reagovat podle způsobu z příkladu 7B a nahradí se 3-methy 1-1,3-butandiol za methanol, čímž se docílí selektivní reakce v poloze 4 a připraví se požadovaný meziprodukt.

Příklad 22 D

2-(3.4-dil1uor('enyl) 4--(3-hydroxy 3 -methyl-l-butoxy) 5- [4 -(nicthylthio)fenylJ 3(27/) pyridazinon

Produkt z příkladu 22C (12,79 g, 32,86 mmol) se kopuluje s 4-(methylthio)fenylboritou kyselinou (6,07 g, 36,15 mmol), K_?C(f (10 g, 72,3 mmol) a PdC^PPh^ (1,15 g, 1,64 mmol) v ethanolu (200 ml) při teplotě 60 až 65 °C po dobu 40 až 70 minut, Čímž se získá požadovaný meziprodukt (výtěžek: 9,16 g, 64,5 %).

Příklad 22E

2-(3,4 d i fluor fenyl )-4-( 3-hyd roxy-3-methy 1-1 -butoxy )-5-[4-( methyl sulfonyl)feny 1]—pyridazinon

- 14 CZ 300570 B6

Sulfid z příkladu 47ID se oxiduje na požadovanou sloučeninu způsobem podle příkladu 5 (výtěžek: 7,46 g, 76 %). Teplota tání 131 až 133 °C;

'HNMR (300 MHz, DMSO-Λ) δ 1,04 (s, 6H), 1,73 (t, J = 6 Hz, 2H), 3,29 (s, 3H), 4,43 (s, IH),

4,54 (t, J = 6 Hz, 2H), 7,52 (m, IH), 7,62 (ddd, J - 9 Hz, J - 9 Hz, J = 1,5 Hz, IH), 7,82 (ddd, J =

Hz, J = 9 Hz, J = 3 Hz, 1H); 7,91 (d, J = 9 Hz, 1H), 8,08 (d, J = 9 Hz, 2H), 8,20 (s, 1H); MS (DCI-NH₃) m/e 465 (M+H)⁺. Analyticky vypočteno pro C22H₂2F2N₂OgS: C, 56,88; H, 4,77; N, 6,03, Zjištěno: C, 56,92; H, 4,88; N, 5,94.

io Příklad 23

2~(3,4-difl uorfeny 1)—4-(3-hydroxy-3-methyl-1 -butoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)feny l]-3 (277)pyridazinon

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 14 nahrazením 2-(3,4-difluor15 fenyl)—4—(3—hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-[4—(methylsulfonyl)fenyl]-3(277)-pyridazinonu za 2-(3,4—difl uorfeny l)-4-(2-hydroxy-2-methy 1-1 -propoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3 (277)-pyridazinon (výtěžek: 300 mg, 50 %). Teplota tání 181 až 181 °C.

'HNMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 1,04 (s, 6H), 1,72 (t, J = 6 Hz, 2H), 4,43 (s, IH), 4,53 (t, J = 6 Hz, 2H), 7,49 (s, 2H), 7,53 (m, IH), 7,63 (ddd, J = 9 Hz, J = 9 Hz, J = 1,5 Hz, 1H), 7,79 (ddd, J = 9 Hz, J = 9 Hz, J = 3 Hz, IH), 7,83 (d, J = 9 Hz, IH), 7,95 (d, J = 9 Hz, 2H), 8,19 (s, IH); MS (DCI/NH₃) m/z 466 (M+H)⁺. Analyticky vypočteno pro CtiH^FiNiOjS: C, 54,12; H, 4,66; N, 8,81. Zjištěno: C, 54,19; H, 4,55; N, 9,03.

Příklad 24

2-(3-chlor-4-fluorfenyl)-4-(3-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(27/)-pyri dazinon

Požadovaná sloučenina se připraví sekvencí reakcí popsaných v příkladu 22 a nahrazením

3-chlor—4—fluorfenylhydrazinu za 3,4-difluorfenylhydrazin (výtěžek: 200 mg, 89 %). Teplota tání 108 až 110 °C;

'HNMR (300 MHz, CDCL) δ 1,24 (s, 6H), 1,89 (t, 2H, J = 6 Hz), 2,34 (s, IH), 3,12 (s, 3H), 4,57 (t, J = 6 Hz, 2H), 7,25 (t, J = 9 Hz, IH), 7,60 (m, IH), 7,78 (d, J = 6 Hz, IH), 7,79 (d, J = 9 Hz, 2H), 7,92 (s, 1H), 8,08 (d, J = 9 Hz, 2H); MS (DCI/NH₃) m/z 481 (M+H)⁺; Analyticky vypočteno pro C₂₂H₂₂FC1N₂O₅S: C, 54,94; H, 4,61; N, 5,82. Zjištěno: C, 54,87; H, 4,65; N, 5,72.

Příklad 25

2-(3-chlor~4-fluorfenyl)-4-(3-hydroxy-3-methyl-1-butoxy)-5-[4-(methyIsulfonyl)fenyl]-3(277)pyridazinon

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 14 nahrazením 2-(3-chlor-4fluorfenyl)—4-(3-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-|4-(methylsulfonyl)fenyl]3(2/7)--pyridazinonu (příklad 24) za 2-(3,4-difluorfenyl)—4-(2-hydroxy-2-methy1-1-propoxy)-5-[4(methyl sulfonyl)fenyl]-3(277)-pyridazinon (výtěžek: 160 mg, 45 %). Teplota tání 59 až 62 °C; 'HNMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 1,05 (s, 6H), 1,73 (t, 2H, J = 6 Hz), 4,32 (s, IH), 4,54 (t, J = 6 Hz, 2H), 7,50 (s, 2H), 7,60 (t, J - 9 Hz, 1H), 7,66 (m, IH), 7,73 (d, J - 9 Hz, 2H), 7,74 (d, J = 9 Hz, 2H), 7,75 (m, IH), 8,22 (s, IH); MS (DCI/NH₃) m/z 482 (M+H)*. Analyticky vypočteno pro C₂iH₂₁FClN₃O₅S: C, 52,33; H, 4,39; N, 8,71. Zjištěno: C, 52,30; H, 5,03; N, 8,10.

Příklad 26

2-(3-chlorfenyl)—4-(3-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(277)pyridazinon

- 15 CZ 300570 B6

Požadovaná sloučenina se připraví sekvencí reakcí popsaných v příkladu 22 nahrazením

3-chlorfenylhydrazinu za 3,4-difluorfenylhydrazin (výtěžek: 200 mg, 89 %).

Ή NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 8,04 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 7,91 (s, IH), 7,77 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 7,67 (m, IH), 7,57 (m, IH), 7,40 (t, J = 8,8 Hz, IH), 7,36 (m, IH), 4,54 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 3,10 (s, 3H),2,56(s, IH), 1,86 (t,J = 6,3 Hz, 2H), 1,20 (s, 6H). MS (DCOI/NH₃) m/z 462 (M+H)\

Příklad 27

2-(3-chlorfenyl)-4-(3-hydroxy-3-methy 1-1-butoxy )-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(2//)pyridazinon

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 14 nahrazením 2-(3-chlorfenyl)-4(3-hydroxy-3-m ethy 1-1 -butoxy )-5-[4-(methyl sul fonyl) fenyl ]-3(27/>-pyrid az i non u (příklad 26) za 2-{3,4-difluorfenyl)-4-(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2//)-pyridazinon.

'HNMR (300 MHz, CDCf) δ 8,03 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,91 (s, IH), 7,70 (d, J - 8,7 Hz, 2H), 7,68 (m, IH), 7,57 (m, IH), 7,41 (m, IH), 7,38 (m, IH), 5,65 (s, 2H), 4,51 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 2,70 (brs, IH), 1,87 (t, J = 6,6 Hz, 2H), l,20(s,6H); MS (DCI/NH3) m/z 463 (M+H)’.

Příklad 28

2—(4—fl uor feny 1) 4 (2--hydroxy-2-methy 1-1 -propoxy)—5—[4—( methyl sul fonyl )fenyl]-3 (2H}~ pyridazinon

4-fluorfenylhydrazinu za 3,4-difluorfenylhydrazin a nahrazením 2-methyl-l,2-propandiolu (připravený LAH redukcí methyl-2-hydroxyizobutyrátu) za 3-methyl-l,3-butandiol. Teplota tání 152 až 154 °C.

'HNMR (300 MHz, CDC1₃) δ 8,10 (d, 2H, J = 18 Hz), 7,95 (s, IH), 7,83 (d, 2H, J = 18 Hz), 7,63 (d, 1 H, J= 18 Hz), 7,61 (d, 1 H, J- 18 Hz), 4,18 (s, 2H), 3,13 (s, 3H), 1,19 (s, 6H). MS (DCI/NH) m/z 433 (M+H)⁺, 450 (M+NH₄). Analyticky vypočteno pro C₂₁H₂₁FN₂O₅S: C, 58,32; H, 4,89; N, 6,48. Zjištěno: C, 58,42: H, 5,05; N, 6,43.

Příklad 29

2-(4-fluorfenyl)-4-(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy )-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(2//)pyridazinon

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 14 nahrazením 2-(4-fluorfenyl)-4(2-hydroxy-2-methy 1-1-propoxy)-5-[4-(methyl-sulfonyl)fenyl]-3(2//)-pyridazinonu (příklad 28) za 2 <3.4-difluor-fcny 1)-1-(2-hydrox\ 2 meth\l l-propoxy} 5 [4 (methyIsulfonyl)fenyl]-3(2//)-pyridazinon. Teplota tání 155 až 158 °C;

Ή NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 8,17 (s, IH), 7,92 (s, 4H), 7,67 (d, IH, J- 18 Hz), 7,64 (d, 1 H, J - 18 Hz), 7,49 (s, 2H), 7,38 (d, 1 H, J - 18 Hz), 7,35 (d, 1 11, J = 18 Hz), 4,54 (s, IH), 4,19 (s, 2H), 1,00 (s,6H). MS (ESI+): m/z 434 (M+H)⁺, 456 (M+Na)\ 889 (2M+Na)⁺; Analyticky vypočteno pro C₂₀H₂₀FN₃O₅S: C, 55,42; H, 4,65; N, 9,69. Zjištěno: C, 55,64; H, 4,85; N, 9,53.

Příklad 30

2-(3-chlor-4-fluorfenyl)-4-(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]3(2//)-pyridazinon

- 16CZ 300570 B6

Požadovaná sloučenina se připraví sekvencí reakcí popsaných v příkladu 22 nahrazením 3-chlor4-fluorfenylhydrazinu za 3,4—difluorfenylhydrazin a nahrazením 2-methyl—1,2-propandiolu (připravený LAH redukcí methyl-2-hydroxyizobutyrátu) za 3-methyl-l,3-butandiol. Teplota tání 122 až 124 °C.

'HNMR (300 MHz, CDCI₃) δ 0,98 (s, 6H), 3,29 (s, 3H), 4,21 (s, 2H), 4,56 (s, 2s, IH), 7,61 (dd, 1 H, J = 7,17 Hz), 7,67 (ddd, 1 H, J = 2,4,7 Hz), 7,93 (dd, 1 H,J = 2,7 Hz), 7,98 (d, 2H, J - 8 Hz), 8,06 (d, 2H, J = 8 Hz), 8,22 (s, IH); MS (DCI/NH₃) m/z 465 (M-H)“. Analyticky vypočteno pro C_2lH₂₀ClFN₂O₅S: C 54,02, H 4,32, N 6,00. Zjištěno: C 54,06, H, 4,57, N, 5,95.

Příklad 31

2-(3-ehlor-4fluorfěnyt)--4-(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(aminosulfc>nyl)fenyl ]3(2//)-pyridazÍnon

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 14 nahrazením 2-(3-chlor-4— fluorfenyl)-4-(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2//)-pyridazinonu (příklad 479) za 2-(3,4-difluorfenyl)-4—(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(methylsu Ifony l)fenyl]-3(277)-pyridazinon. Teplota tání 176 až 178 °C;

*H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 1,00 (s, 6H), 4,19 (s, 2H), 4,54 (s, IH), 7,49 (s, 2H), 7,62 (t, IH,

J = 9 Hz), 7,66 (ddd, 1H, J = 2,5,9 Hz), 7,92 (s, 4,5H), 7,94 (d, 0,5 H, J = 2 Hz), 8,20 (s, 1H); MS (DCI/NH₃): m/z 468 (M+H)“; 1 Cl, 490 (M+Naý; 1C1; Analyticky vypočteno pro C₂₀Hi₉C1FN₂O₅S: C, 51,34; H, 4,09; N, 8,98. Zjištěno: C, 51,33; H, 4,23; N, 8,76.

Příklad 32

2-(3-chlorfenyl)-4-(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4'(methylsulfonyl)feny 1)-3(2//)pyridazínon

Požadovaná sloučenina se připraví sekvencí reakcí popsaných v příkladu 22 nahrazením 3-chlor30 fenylhydrazinu za 3,4—difluorfenylhydrazin a nahrazením 2-methyl-l,2-propandiolu (připravený

LAH redukcí methyl-2-hydroxyizobutyrátu) za 3-methyl-l,3-butandiol.

'HNMR (300 MHz, CDC1₃) δ 8,15 (m, 2H), 7,98 (s, IH), 7,85 (m, 2H), 7,76 (m, IH), 7,62 (m, IH), 7,43 (m, 2H), 4,22 (s, 2H), 3,15 (s, 3H), 1,21 (s, 6H); MS (DCI/NH₃) m/z 449 (M+H)⁺; Analyticky vypočteno pro C₂,H₂₁C1N₂O₅S: C 56,1 8, H 4,72, N 6,24. Zjištěno: C 56,08, H, 4,67,

N, 6,23.

Příklad 33

2-(3-chlorfenyl)-(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)feny1]-3(2//)-pyrid40 azinon

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 14 nahrazením 2-(3-chlorfenyl)-4(2--hydroxy-2-methy!-l-propoxy)-5-[4-{methyl sul fony l)fenyl]-3(2Z/)-pyridazinonu (příklad 32) za 2Ň3,4-difluorfenyl)-4-(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]45 3(2//)-pyridazinon.

'HNMR(400 MHz, DMSO-4₆) δ 8,19 (s, IH), 7,93 (m, 4H), 7,75 (m, IH), 7,61 -7,48 (m, 5H), 4,53 (s, 2H), 4,20 (s, 3H), 1,00 (s, 6H); MS (ESI-) m/z 448 (M-H)’; Analyticky vypočteno pro C₂₀H₂₀ClN₃O₅S: C, 53,39; H, 4,48; N, 9,34. Zjištěno: C, 53,11; H, 4,82; N, 9,24.

Příklad 34

2-(2,2,2-trifluorethyl)-4-(2-hydroxy-2-methyl-1-propoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyt]-3(2//)-pyridazinon

- 17CZ 300570 B6

Požadovaná sloučenina se připraví sekvencí reakcí popsaných v příkladu 22 nahrazením 2,2,2-trifluorethylhydrazinu za 3,4-difluorfenyIhydrazin a nahrazením 2 methyl l,2 propandiolu (připravený LAH redukcí methyl-2-hydroxyizobutyrátu) za 3-methyl-l,3-butandiol.

HNMR (300 MHz, CDC1₃) δ 1,18 (s, 6H), 2,62 (br s, IH), 3,15 (s, 3H), 4,20 (s, 2H), 4,85 (q, J = 9 Hz, 2H), 7,78 (d, J = 9 Hz, 2H), 7,85 (s, 1H), 8,08 (d, J “ 9 Hz, 2H); MS (DCI/NH₃) m/z 421 (M+l)“. Analyticky vypočteno pro C17H19F3N2O5S: C 48,57, H 4,56, N 6,66. Zjištěno: C 48,72, H, 4,78, N, 6,56.

Příklad 35 (2,2,2 trifluorethyl) 4-(2-hydroxy-2-methyl 1 propoxy) 5 [4 (aminosulfonyl)fenvl|-3(27/)-pyridazinon

Požadovaná sloučenina se připraví následující sekvencí reakcí. Mukobromová kyselina se nechá reagovat podle způsobu z příkladu 7A s hydrochloridem 2,2,2-trifluorethylhydrazinu, čímž se získá 2-(2,2,2-tr ifluorethy 1)-4,5-dibrom-3(2//)-pyridazinon. Dibromový meziprodukt se nechá reagovat podle způsobu z příkladu 7B a nahrazením 2-methyl-l,2-propandiolu za methanol kvůli selektivní reakci v poloze 4 získá 2-(2,2,2-trifluorethyl)-4-(2-hydroxy-2-methyl-l20 propoxy)-5-brom-3(2//)-pyridaztnon. Tato sloučenina se substituovaným bromem v poloze 5 se kopuluje se 4—[2-(tetrahydropyranol)thio]fenylboritou kyselinou (připravenou z 4-bromthiofenolu chráněného skupinou THP a triizopropylborátu) a s K₂CO₃ a PdCl₂(Ph₃)₂ v ethanolu při teplotě 60 až 65 °C po dobu 40 až 70 minut, čímž se získá 2-(2,2,2-trifluorethyl)4 (2 hydroxy 2-methy 1-1 -propoxy)-5-[4 f2 (tetrahydropyranýl)thio]feny 1] 3(2/7) -pyridazinon. Tento mezi25 produkt, sulfid chráněný skupinou THP, se pak konvertuje na požadovanou sloučeninu reakcí s V-chlor-sukcinimidem (3,5 ekviv.) při teplotě 0 °C v THF/H₂O po dobu 15 minut až 1 hodinu. Poté se při teplotě 0 °C přidá přebytek hydroxidu amonného a reakční směs se míchá při pokojové teplotě po dobu 3 hodin. Vodným zpracováním a čištěním na sloupci silíkagelu v systému pentan:ethylacetát(80:20) se získá požadovaná sloučenina.

‘H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 1,18 (s, 6H), 2,65 (br s, IH), 4,15 (s, 2H), 4,85 (q, J “ 9 Hz, 2H), 4,9 (s, 2H), 7,75 (d, J = 9 Hz, 2H), 7,85 (s, 1H), 8,05 (d, J - 9 Hz, 2H); MS (DCI/NH₃) m/z 422 (M+H)“; Analyticky vypočteno pro Ci6Hi₈F₃N₃O₅S: C, 45,60; H, 4,30; N, 9,97. Zjištěno: C, 45,86; H, 4,63; N, 9,81.

Příklad 36

2-(2,2,2-trifluorethy 1)-4-(3-hyd roxy-2,2-d i methy 1-1 -propoxy) 5 [4-( methy Isulfony l)fenyl]3(2//)-pyridazinon

Požadovaná sloučenina se může připravit podle způsobu z příkladu 34 nahrazením neopentylglykolu za 2 methyl l.2 propandiol.

Příklad 37

2-(2,2,2-tr ifluorethy 1)4-( 3-hydroxy2.2-d i methy 1-1 -propoxy )-5-[4-(am inosulfonyl )fenyl]45 3(2//)-pyndazinon

Požadovaná sloučenina se může připravit podle způsobu z příkladu 35 nahrazením neopentylglykolu za 2-methyl-l,2-propandiol.

Příklad 38

2-(4-fluorfen\l)-4-(4-hydroxy-3-methyl l -butoxy)- 5 [4-(aminosulfonyl)fcnyl]-3(2/7)pyridazinon

- 18CZ 300570 B6

Požadovaná sloučenina se může připravit podle způsobu z příkladu 14 nahrazením 2-(4 -fluorfeny l/4-(4-hydroxy3-methyl-l--butoxy)^5-[4-(methy isulfony l)fenyl|-3(27/)-pyridazinonu (příklad 19) za 2-(3,4-difluorfenyl)-4-(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(methylsulfo5 ny l)feny l]-3 (2//)-pyridazinon.

Příklad 39

2-(3,4~difluorfényl)-4-(4-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-[4-(methylsiilfonyl)fenyl]-3(2//)io pyridazinon

Požadovaná sloučenina se může připravit podle sekvencí reakcí z příkladu 22 a nahrazením 2-methyl-l,4-butandiolu za 3-methyI-l,3-butandiol, pak separací regioizomemích produktů vícenásobnou preparativní TLC.

Příklad 40

2- (3-chlor—4-fluorfenyl)~4-(4-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2//)-pyridazinon

Požadovaná sloučenina se může připravit podle sekvencí reakcí z příkladu 22 a nahrazením

3- chlor-4-fluorfenylhydrazinu za 3,4-dífluorfenyIhydrazin a nahrazením 2-methvl-l,4-butandiolu za 3-methyl-l,3-butandiol, pak separací regioizomemích produktů vícenásobnou preparativní TLC.

Příklad 41

2- (3-chlorfenyl)-4-(4-hydroxy~3-methyl-l-butoxy)-5-f4-(methylsulfony1)fenyl]-3(2/7^r>pyridazinon

3- chlorfenylhydrazinu za 3,4-difluorfenylhydrazin a nahrazením 2-methyl-l,4-butandiolu za

3-methyl-l,3-butandiol, pak separací regioizomemích produktů vícenásobnou preparativní TLC.

Příklad 42

2-(3,4-difiuorfenyl)-4--(4-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(2//>

pyridazinon

Požadovaná sloučenina se může připravit podle způsobu z příkladu 14 a nahrazením 2-(3,4—diťluorťenyl)—4—(4-hydroxy-3-methy 1-1 -butoxy )-5- [4-(methy I sul fonyl )fenyl]-3(2//)-pyridazinonu (příklad 39) za 2-(3,4 'difiuorfenyl)-4-(2-hydroxy-2-methyl-l- propoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2//)-pyridazinon.

Příklad 43

2-(3-chlor-4-ťluorfenyl)-4-(4hydroxy-3-methyl- l-butoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]3(2//)-pyridazinon

Požadovaná sloučenina se může připravit podle způsobu z příkladu 14 a nahrazením 2-(3-chtorso 4-fluorfenyl)-4-(4-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(277)-pyridazinonu (příklad 40) za 2-(3,4-difluorfenvl)-4-(2-hydroxy-2-methyll -propoxy)-5-[4(methylsulfonyl)fenyl]-3(2Z/)-pyridazinon.

- 19CZ 300570 B6

Příklad 44

2-(3-chlorfenyl)-4-(4-hydroxy 3 methyl l -butoxv)-5-[4-(aminosu 1 fonyl)fenylJ-3(2//)pyridazinon

Požadovaná sloučenina se může připravit podle způsobu z příkladu 14 a nahrazením 2-(3-chlorfenyl)-4-(4-hydroxy-3-methyl-1-butoxy)-5-[4-{methylsulfonyl)fenyl]-3(2//)-pyridazinonu (příklad 41) za 2 (3„4-difluorfenyl)-4—(2-hydroxy 2 methyl-l-propoxy)-5-[4-(methy1sulfonyl)fenyl]-3(2//)-pyridazinon.

Příklad 45 (S)—2—(4—fl uorfeny I )-4-( 3-hyd roxy-2-methy 1-1 -pro poxy)-5-(4-(am i n os ulfonyl)fenyl )3(2//)pyridazinon

Požadovaná sloučenina se může připravit podle způsobu z příkladu 17 a nahrazením (S)-2-(4-fluorfenyl)-4-(3-Z-butoxy-2-methyl-l-propoxy )-5-[4-(methylsulf^,onyl)fenyl]-3(2//)-pyridazÍnon za (S)2(3.4-diflLiorfenyl)-4—(3-t-butoxy-2-rnethyllpropoxy)-5-|4(methylsulfonyl)fenyl]-3(2//)-pyridazinon.

Příklad 46 (R) -2-(4-fluorfenyl)-4-(3-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyI]-3(2//)pyridazinon

Požadovaná sloučenina se může připravit podle způsobu z příkladu 18 nahrazením (R)-2-(4-fl uorfeny 1)-4-(3-/-butoxy-2-methy 1-1 -propoxy )-5-[4(rnethyl sul fonvl) fenyl ]-3(2//)-pyridazinon za (R)-2-(3,4-difluorfenyl)-4—(3-z-butoxy-2-m ethyl-1 -propoxy )-5-[4(methylsu1fonyl)fenyl]-3(2//)-pyridazinon.

Příklad 47 (S)-2-(3-chlor-4 (luorfenyl) 4 (3-hydroxy-2-mcthyl l-propoxy) 5 [4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2//)-pyridazinon

Požadovaná sloučenina se může připravit podle způsobu z příkladu 15 nahrazením 2-(3-chlor4- fluorfenyl)-4-hydroxy-5-[4-(methyIsulfonyl)fenyl]-3(2H)-pyridazinonu za 2-(3,4-difluor35 fenyl)-4-hydroxy-5-[4-(methylsulfonyl)fcnyl]-3(2//)-pyridazinon.

Příklad 48 (S) 2 (3-chlor^l—fluorfenyl) 4 (3 hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5 [4 (aminosulfonyl)fenyl)-3(2//)-pyridazinon

Požadovaná sloučenina může být připravena podle způsobu z příkladu 17 nahrazením (S) 2-(3- ehIor-4-fuorfenyl)-4 (3 Z butoxy 2 methyl-1-propoxy)-5--[4 (methyIsulfony 1)fenyl]-3(2/7)-pyridazinonu za (S)-2-(3,4—dÍfluorfenyl)-4-(3-/-butoxy-2-methyl-l-propoxy }5- [4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2//)-pyridazinon.

Příklad 49 (R) 2 (3-chlor-4 lliiorfenyl)-4-(3 hydroxy-2-methyl l-propoxy)-5-|4-(methylsulťonyl)fenyl]-3(2//)-pyridazinon

-20CZ 300570 B6

Požadovaná sloučenina se může připravit podle způsobu z příkladu 16 nahrazením 2-(3-chlor4-fluorfenyl)—4-hydroxy 5- [4-(methylsulfonyl)fenylJ--3(2//)-pyridazinonu za 2-(3,4-difluorfenyl)-4-hydroxy-5[4-(methy Isulfonyl) feny 1-3(2/7)—pyridazinon.

Příklad 50 (R) -2-(3-chlor—4—ťluorťenyl)-4—(3-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(277)-pyridazinon io Požadovaná sloučenina se může připravit podle způsobu z příkladu 17 nahrazením (R)-2-(3eh lor—4-fluorfenyl)—4-(3-/-butoxy-2-methy 1-1 -propoxy)—5—[4—(methy Isul fony l)fenyl]—3(27/)pyridazinonu za (S)-2-(3,4-difluorfenyl)-4-(3-/-butoxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4—(methylsulfonyl)fenyl]-3(27/)-pyridazinon.

Příklad 51 (S) -2-(3-chlorfenyl)—4-(3-hydroxy—2-methyl—1—propoxy)—5—[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(27/)-pyridazinon

Požadovaná sloučenina se může připravit podle způsobu z příkladu 15 nahrazením 2-(3-chlorfenyl)-4-hydroxy-5-|4-(methylsulfonyl)ťenyl]-3(277)-pyridazinonu za 2-(3,4-difluorfenyl)-4— hydroxy-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl-3(27/)-pyridazinon.

Příklad 52 (S)-2--(3~chlorťenyl)4(3hydroxy-2-methy]-l -propoxy )-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(27/)pyridazinon

Požadovaná sloučenina se může připravit podle způsobu z příkladu 17 nahrazením (S)-2-(3-chlorfenyl)-4-(3-/-butoxy-2-methyl-l -propoxy )-5-[4—(methylsulfonyI)fenyl]-3(27/)-pyridazÍnonu za (S)-2-(3,4-difluorfenyl)-4-(3-r-butoxy-2-methyl-l-propoxy}-5“[4(methy 1 su 1 fony 1 )feny l]-3 (27/)-pyr idazinon.

Příklad 53 (R)-2-(3-ch lorfenyl )-4-(3-hydroxy-2-methy 1-1 -propoxy )-5-[4-{methylsulfonyl)fenyl]-3(277)-pyridazinon

Požadovaná sloučenina může být připravena podle způsobu z příkladu 16 nahrazením 2-(340 chlorfenyl)—4-hydroxy-5-[4-(methy Isulfonyl )fenyl]-3(277)-pyridazinonu za 2-(3,4-difluorfenyl)—4-hydroxy-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(277)-pyridazinon.

Příklad 54 (R)-2-(3ehlorfenyl)-4-(3-hydroxy-2-methyl-l— propoxy )-5-[4—(aminosulfonyl)fenyl]-3(27/)-pyr idazinon

Požadovaná sloučenina může být připravena podle způsobu z příkladu 17 nahrazením (R)-2-(3chlorfenyl)—4-(3-Z-butoxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(27/)-pyrid50 azinonu za (5)-2-(3,4-diíluorfenvl)-4-(3-ř-butoxy-2-methyl-l -propoxy )-5-[4h( methylsu!fonyl)fenyl]-3(27/)-pyridazinon.

-21 CZ 300570 B6

Příklad 55 (S)-2-(2,2,2-trifluorethyl)-4-(3--hydroxy-2-methyl--1 -propoxy} 5[4(am i no sulfonyl) fenyl]3(277)-pyridazÍnon

Požadovaná sloučenina se může připravit podle způsobu z příkladu 15 nahrazením 2,2,2-tritluorethyl)—4-hydroxy 5 [4-(methylsulfonyl)fcnyl ]-3(2/7)-pyridazinonu za 2-(3,4-difluorfenyl)-4-hydroxy-5-[4~(methylsulfonyl)fenyl]-3(27/)-pyridazinon.

Příklad 56 (S>-2-<2.2,2-trifluorethyl) 4 (3 -hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-|4-(aininosulfonyl)fenyl] (277)-pyridazÍ non

Požadovaná sloučenina se může připravit podle způsobu z příkladu 35 nahrazením (R}-3-Zbutoxy-2-methyl-l-propanolu (příklad 15A) za 2-methyl-l,2-propandiol. Po Suzukiho kopulaci 4-[2-(tetrahydropyranyl)thio]fenylboritou kyselinou se výsledný meziprodukt nechá reagovat s NCS a NH4OH podle způsobu z příkladu 484. Tento sulfonamidový produkt se pak nechá reagovat s TFA (podle způsobu z příkladu 15C), čímž se odštěpí Z-butylether a získá se požadovaná sloučenina.

Příklad 57 (R)-2-(2,2,2-trífluorethyl)-4-(3-bydroxy-2-methyl-l-propoxy) 5 [4 (methy]sulfonyl)fenyl]3(277)-pyridazinon

Požadovaná sloučenina se může připravit podle způsobu z příkladu 16 nahrazením 2,2,2-trifluorethyl)-4-hydroxy-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(277)-pyridazinonu za 2-(3,4-difluorfenyl)-4-hydroxy-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(277)-pyridazinon.

Příklad 58 (R) -2-(2,2,2-trifluorethyl)-[4-(3-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]3(277)-pyridazinon

Požadovaná sloučenina se může připravit podle způsobu z příkladu 56 nahrazením (S) -3-/-butoxy-2-methyÍ-1-propanolu za (R)-3-/-butoxy-2-methyl-l-propanol.

Příklad 59

2-( 4-fl u orfeny I )-4-( 3-hyd roxy-2,2-d i methy 1-1-pro poxy)-5-[4-( methy lsul fony l)fenyl]-3 (277)pyridazinon

Požadovaná sloučenina se může připravit podle sekvencí reakcí z příkladu 22 nahrazením 4-fluorfenylhydrazinu za 3,4-diíluorfenylhydrazin a nahrazením neopentylglykolu za 3-methyt1,3-butandiol.

Příklad 60

2-(4-fluorfenyl)-4-(3-hydroxy-2,2-dimethylpropoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(277)pyridazinon

-22 CZ 300570 B6

Požadovaná sloučenina se může připravit podle způsobu z příkladu 14 nahrazením 2—(4—ťluorťenv l)-4-(3-hydroxy-2,2-dimethy 1-1-propoxy )-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2//)pyridazinonu za 2—(3,4—diřluorfenyl)-4-(2~hydroxy-2-methy 1-1-propoxy)-5-[4—(methylsuliony 1 )fenyl]-3 (2//)-pyridazinon.

Příklad 61

2—(3,4-difluorfenyl)-4-(3-hydroxy-2,2-d imethy 1-1 -propoxy )-5-[4-(methylsulfony l)fenyl]3 (2Z/)-py ri dazinon

Požadovaná sloučenina se připraví sekvencí reakcí popsaných v příkladu 22 nahrazením neopentylglykolu za 3-methyl-l,3-butandiol (výtěžek: 300 mg, 71 %). Teplota tání 161 až 162 °C;

’H NMR (300 MHz, DMSO -d₆) δ 0,72 (s, 6H), 3,05 (d, J = 6 Hz, 2H), 3,30 (s, 3H), 4,19 (s, 2H), 15 4,&4 (t, J = 6 Hz, IH), 7,52 (m, IH), 7,62 (dd, J = 9 Hz, J = 9 Hz, IH), 7,82 (ddd, J -9 Hz, J - 9

Hz, J = 3 Hz, IH), 7,92 (d, J =9 Hz, IH), 8,08 (d, J = 9 Hz, 2H), 8,21 (s, IH); MS (DCI/NH₃) m/z 465 (M+H)⁺; Analyticky vypočteno pro C₂₂H₂₂F₂N₂O₅S: C, 56,88; H, 4,77; N, 6,03. Zjištěno: C, 56,84; H, 4,83; N, 5,99.

Příklad 62

2-(3,4-difluorfenyl)-4-(3-hydroxy-2,2-dimethy1-l-propoxy)-5-[4-(aminosutfbnyl)fenyl]3 (2Z/)-pyrÍdazinon

Požadovaná sloučenina se může připravit podle způsobu z příkladu 14 nahrazením 2-(3,4difluorfenyl)-4-(3-hydroxy-2,2-dimethyI-l-propoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2//)pyridazinonu za 2-(3,4-difluorfenyl)-4-(2-hydroxy-2-methyl-l -propoxy )-5-[4-(methyIsulfonyl)fenyl]-3(2/7)-pyridazinon.

Příklad 63

2- (3-chlor-4-fluorfeny 1)-4-(3-hydroxy-2,2-d i methy 1-1 -propoxy )-5-[4-(methy lsulfonyl)fenyl]-3(277)-pyridazinon

Požadovaná sloučenina se může připravit podle sekvencí reakcí z příkladu 22 nahrazením

3- chlor-4-fluorfenylhydrazinu za 3,4-difluorfenylhydrazin a nahrazením neopentylglykolu za

3-methyl-l,3-butandiol.

Příklad 64

2--(3-chlor—4-ťluorfenyl )-4-(3-hydroxy-2,2—dimethy 1-1-propoxy )-5[4(aminosu liony 1)fenyl]-3(2//)-pyridazinon

Požadovaná sloučenina se může připravit podle způsobu z příkladu 14 nahrazením 2-(3-chlor45 4-fluorfenyl)—4-(3-hydroxy-2,2-dimethyl-l-propoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)-fenyl]-3(2//)pyridazinonu za 2-(3,4-difluorfenyl)—4—(2-hy droxy-2-methy 1-1-propoxy )-5-[4—(methy 1sulfonyl)fenyl]-3-(2//)-pyridazinon.

Příklad 65

2-(3-chlorfenyl)-4(3-hydroxy2.2-dimethy 1-1-propoxy )-5-[4--(methylsiilfonyl)ťenyl|-3(2//)-pyridazinon

-23 CZ 300570 B6

3-chl orfeny! hydrazinu za 3,4-difluorfenylhydrazin a nahrazením neopentylglykolu za

3-methyI-l ,3-butandiol.

Příklad 66

2-(3—chlorfenyl) 4-<3-hydroxy-2,2-dimethyl-l-propoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenylJ 3(2//)pyridazinon io

Požadovaná sloučenina se může připravit podle způsobu z příkladu 14 nahrazením 2-(3-chl orfeny 1 )-4-(3-hydroxy-2,2-d i methy 1-1-pro poxy )-5-(4-( methy 1-sul fony l)fenyI]-3(2//)-pyridazinonu za 2-(3,4-difluorfenyl)-4-(2“hydroxy-2-methyl-1-propoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3-(2//)-pyridazinon.

Příklad 67

N-[[4-[2-(4-fluorfenyl) 4 (3 hydroxy 3-methyl-l-buto\y)-2//-pyridazin-3-ori-5-yl]fenyl]sulfonyl]acetamid

Směs 2-(4-fluorfenyl)-4- (3 hydroxy 3 methyl-l-butoxy)-5-|4-(aminosulfonyl)fenylJ 3(2//)-pyridazinonu (příklad 21, 1 ekviv.), anhydridu octové kyseliny (3 ekviv.), 4-(dímethylamino)pyridinu (0,3 ekviv.) a triethylaminu (1,2 ekviv.) se míchá pří teplotě místnosti po dobu 16 hodin. Reakční směs se rozdělí mezi ethylacetátovou a vodnou vrstvu. Organická vrstva se promyje solankou, suší síranem hořečnatým a filtruje. Filtrát se koncentruje ve vakuu, čímž se získá požadovaná sloučenina.

Příklad 68

Sodná sůl .V-[[4-(2 -(4 fluorfenyl) 4 -(3-hydro.xy-3-methyl l butoxy) 2//-pyridazin-3-on -5-]fenyl]sulfonyl]acetamídu

Do suspenze A'-[[4-[2-(4-fluorfcny 1)—4-(3-hydroxy 3 methyl-1 -butoxy)-2//-pyridazin-3on-5-yl]fenyl]sulfonyl]acetamidu (příklad 67, 1 ekviv.) v absolutním ethanolu se přidá roztok hydroxidu sodného (1 ekviv.) v absolutním ethanolu. Směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 10 minut a koncentruje za vakua. Zbytek se suší za vysokého vakua, čímž se získá požadovaná sloučenina.

Příklad 69

ΛΖ—[ [4—[2—(3,4—difluorfenyl) 4 (2 hydroxy-2-rnethyl-l-propoxy) 2/7 pyridazin-3—on-5-yl]fenyl]sulfonyl]acetamid

Směs 2-(3,4-dífluorfenyl)-4-(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]3(2//)-pyridazinonu (příklad 14, 1 ekviv.), anhydridu octové kyseliny (3 ekviv.) 4-(dimethyl45 amino)pyridinu (0,3 ekviv.) a triethylaminu (1,2 ekviv.) se míchá při teplotě místnosti po dobu 16 hodin. Reakční směs se rozdělí mezi ethylacetátovou a vodnou vrstvu. Organická vrstva se promyje solankou, suší síranem hořečnatým a filtruje. Filtrát se koncentruje ve vakuu, čímž se získá požadovaná sloučenina.

Příklad 70 sodná sůl /V-[[4-[2-(3,4-difluorfenyl)-4-(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-2//-pyridazin-3on-5-yl]fenyl]sulfonyl]acetamidu

-24CZ 300570 B6

Do suspenze N-[[4-[2-(3,4-difluorfenyl)-4-(2-hydroxy-2-methyI -1 -propoxy)- 2//-pyridazin3-on-5-yl]fenyl]sulfonyl]acetamidu (příklad 69, 1 ekviv.) v absolutním ethanolu se přidá roztok hydroxidu sodného (1 ekviv.) v absolutním ethanolu. Směs se míchá při teplotě místnosti po dobu

10 minut a koncentruje ve vakuu. Zbytek se suší za vysokého vakua, čímž se získá požadovaná sloučenina.

Příklad 71 io A-[[4-[2-(3-chlor-^-fluorfenyl)-^F-(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-2/í-pyrÍdazin-3-on-5yl]fenyl]sulfonyl]acetamid

Směs 2-(3-chlor-4-fluorfenyl)-4-(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4~(aminosulfonyl)fenyl]-3(2//)-pyridazinonu (příklad 31, 1 ekviv.), anhydridu octové kyseliny (3 ekviv.), ís 4-(dimethylamino)pyridinu (0,3 ekviv.) a triethylaminu (1,2 ekviv.) se míchá při teplotě místnosti po dobu 16 hodin. Reakční směs se rozdělí mezi ethylacetátovou a vodnou vrstvu. Organická vrstva se promyje solankou, suší síranem horečnatým a filtruje. Filtrát se koncentruje ve vakuu, čímž se získá požadovaná sloučenina.

Příklad 72 sodná sůl /V—[[4-[2-(3-€hlor4-fluorfenyl)-4(2--hydroxy-2-methyl-l -propoxy)-2//-pyridazin-3-on-5-yl]fenyl]sulfonyl]acetamidu

Do suspenze N-[[4-[2-(3-chlor -4-fluorfenyl)-4-(2 hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-2/7-pyridazin-3-on-5-yl]fenyl]sulfonyl]acetamidu (příklad 71, 1 ekviv.) v absolutním ethanolu se přidá roztok hydroxidu sodného (1 ekviv.) v absolutním ethanolu. Směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 10 minut a koncentruje ve vakuu. Zbytek se suší za vysokého vakua, čímž se získá požadovaná sloučenina.

Příklad 73

A'N[4-[2-(3-chloríenyl)-4(2-hydroxy-2-methyl--lpropoxy)-2//-pyrida7.tn-3-on-5-yl]fenyl]sulfonyl]acetamid

Směs 2-(3-chlorfenyl)-4-(2-hydroxy-2-methyl“l-propoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(277)-pyrÍdazinonu (příklad 33, 1 ekviv.), anhydridu octové kyseliny (3 ekviv.), 4-(dimethylamino)pyridinu (0,3 ekviv.) a triethylaminu (1,2 ekviv.) se míchá při teplotě místnosti po dobu 16 hodin. Reakční směs se rozdělí mezi ethylacetátovou a vodnou vrstvu. Organická vrstva se promyje solankou, suší síranem hořečnatým a filtruje. Filtrát se koncentruje ve vakuu, čímž se získá požadovaná sloučenina.

Příklad 74 sodná sůl A' [(4-[2-(3-chlorfenyl)-4-(2-hydroxy- 2-methyl-]-propoxy)-2/Y-pyridazin-3-on5-yl]feny1]sulfonyl]acetamidu

Do suspenze N-[[4-[2-(3-chlorfenyl)-4-(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-2//-pyridazin-3on-5-yl]fenyl]sulfonyIjacetamidu (příklad 73, 1 ekviv.) v absolutním ethanolu se přidá roztok hydroxidu sodného (1 ekviv.) v absolutním ethanolu. Směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 10 minut a koncentruje ve vakuu. Zbytek se suší za vysokého vakua, čímž se získá požadovaná sloučenina.

-25CZ 300570 B6

Příklad 75

A-[(4-[2-(2,2,2-trifluorethyl)-4-(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-2//-pyridazÍn-3-on-5yljfenyljsulfonyljacetamíd

Směs 2-(2,2.2- trifluorethyl)-4-(2-hydroxy 2-mcthyl l-propoxy) 5 [4—(aminosulťonyl)fenyl]-3(2/7)-pyridazinonu (příklad 35, 1 ekviv.), anhydridu octové kyseliny (3 ekviv.), 4-(dimethylamino)pyridinu (0,3 ekviv.) a triethylaminu (1,2 ekviv.) se míchá při teplotě místnosti po dobu 16 hodin. Reakění směs se rozdělí mezi ethylacetátovou a vodnou vrstvu. Organická vrstva io se promyje solankou, suší síranem hořečnatým a filtruje. Filtrát se koncentruje ve vakuu, čímž se získá požadovaná sloučenina.

Příklad 76 sodná sůl A-[ [4-f2-(2,2.2 trifluorethy 1) 4 (2- hydroxy-2-methy 1-1 -propoxy)-277-pyridazin3- on-5-y!]fenyl]sulfonyl]acetamidu

Do suspenze N-[[4-[2-(2,2,2-trifluorethyl)-442-hydroxy-2-methyI-l-propoxy)-2//“pyridazin-3-on-5-yl] fenyl] sul fonyljacetam idu (příklad 75, 1 ekviv.) v absolutním ethanolu se přidá roztok hydroxidu sodného (1 ekviv.) v absolutním ethanolu. Směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 10 minut a koncentruje za vakua. Zbytek se suší za vysokého vakua, čímž se získá požadovaná sloučenina.

Příklad 77

A-[[4-[2-(2.2.2-trifliiorcthyl)-4-(3-hytlroxy-2,2-dimethyl]-propoxy)-2//-pyridazin-3-on5-yl]fenyl]suIfonyl]acetamid

Směs 2-(2,2.2 trifluorethyl)-4-(3-hydroxy-2,2-dimethy 1-1-propoxy)--5 -[4--(aminosulfonyl)30 feny l]-3(2//)-pyri dazi non u (příklad 37, 1 ekviv.), anhydridu octové kyseliny (3 ekviv.),

4- (dimethylamino)pyridinu (0,3 ekviv.) a triethylaminu (1,2 ekviv.) se míchá při teplotě místnosti po dobu 16 hodin. Reakění směs se rozdělí mezi ethy lacetáto vou a vodnou vrstvu. Organická vrstva se promyje solankou, suší síranem hořečnatým a filtruje. Filtrát se koncentruje ve vakuu, čímž se získá požadovaná sloučenina.

Příklad 78 sodná sůl .V-| (4-(2-(2.2.2-triíluorcthyl) 4 (3 hydroxy-2.2 dÍmethyl l-propoxy)-2/7-pyridazin-3-on-5-yl]fenyl]sulfonyl]acetamidu

Do suspenze N-[[4-[242,2,2-trifluorethyl)-4-(3-hydroxy-2,2-dimethyl-l-propoxy)-2/y-pyridazin 3 0n 5-yl]fenyl |sulfonyIjacetatnidu (příklad 77, 1 ekviv.) v absolutním ethanolu se přidá roztok hydroxidu sodného (1 ekviv.) v absolutním ethanolu. Směs sc míchá při teplotě místnosti po dobu 10 minut a koncentruje za vakua, Zbytek se suší za vysokého vakua, čímž se získá požadovaná sloučenina.

Příklad 79

2-(2,2,2-trifluorethyl)-4-(3-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2//)-pyridazinon

Požadovaná sloučenina se připraví sekvencí reakcí popsaných v příkladu 22 nahrazením 2,2,2-trifluorethylhydrazinu za 3,4-difluorfenylhydrazin. ’H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 1,25

-26CZ 300570 B6 (s, 6H), 1,88 (t, 2H, J = 9 Hz), 2,35 (br s, IH), 3,15 (s, 3H), 4,55 (t, 2H, J = 7,5 Hz), 4,85 (q, 2H, J - 9 Hz), 7,75 (d, 2H, J = 9 Hz), 7,65 (s, IH), 8,05 (d, 2H, J = 9 Hz); MS (DCI/NH₃) m/z 435 (M+H)⁺; Analyticky vypočteno pro C₁₈H₂)F₃N₂O₅S: C, 49,77; H, 4,87; N, 6,45. Zjištěno: C, 49,71; H, 4,90; N, 6,45.

Příklad 80

2-(2,2,2-trifiuorethyl)-4(3-hydroxy-3-methyl~l-butoxy)-5-[4-(amÍnosulfonyl)fenyl]-3(2//)pyridazinon

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 35 nahrazením 3-methyl-l,3butandiolu za 2-methyl-l,2-propandiol.

^]H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 1,85 (t, 2H, J = 9 Hz), 2,78 (s, 6H), 4,55 (t, 2H, J - 6 Hz), 4,85 (q, 2H, J = 9 Hz), 5,3 (s, 2H), 7,68 (d, 2H, J = 9 Hz), 7,85 (s, IH), 8,05 (d, 2H, J = 9 Hz), 8,45 (br s,

IH); MS (DCI/NH₃) m/z 436 (M+H)⁺. Analyticky vypočteno pro Ci7H₂oF₃N₃0₅S: C, 46,89; H, 4,62; N, 9,65. Zjištěno: C, 47,18; H, 4,93; N, 9,86.

Příklad 81

2-(3,4-dich]orfenyl)-4-(3-hydroxy-3-methyl-l-butoxy>-5--[4-(methylsulfonyl)ťenyl]--3(277)‘ pyridazinon

3,4-dichlorfenylhydrazinu za 3,4-difluorfenylhydrazin. Teplota tání 118 až 120 °C;

'H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 1,25 (s, 6H), 1,92 (t, J - 6 Hz, 2H), 3,13 (s, 3H), 4,07 (t, J = 6 Hz, 2H), 7,58 (d, J = 9 Hz, 1H), 7,59 (dd, J = 9 Hz, J = 2 Hz, 1H), 7,80 (d, J = 9 Hz, 2H), 7,87 (d, J = 2 Hz, IH), 7,84 (s, IH), 8,19 (d, J = 9 Hz, 2H); MS (DCI/NH₃) m/z 497 (M+H)⁺. Analyticky vypočteno pro C₂₂H₂₂C1₂N₂O₅S: C, 53,12; H, 4,45; N, 5,63. Zjištěno: C, 52,80; H, 4,53; N, 5,35.

Příklad 82

2- [(3-trifluormethyl)fenyl]—4—(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]3 (27/)-py ridazinon

3- (trifluormethyl)fenylhydrazinu za 3,4-difluorfenylhydrazin a nahrazením 2-methyl-l,2-propandíolu (připravený LAH redukcí methy 1-2-hydroxyizobutyrátu) za 3-methyl—1,3—butandiol (výtěžek: 200 mg, 75 %). Teplota tání 143 až 144 °C;

'H NMR (300 MHz, CDCl·,) δ 1,20 (s, 6H), 3,13 (s, 3H), 4,11 (s, 2H), 7,64 (m, 2H), 7,84 (d, J = 40 9 Hz, 2H), 7,90 (d, J = 9 Hz, IH), 7,97 (d, J = 9 Hz, IH), 7,98 (s,lH), 8,13 (d, J = 9 Hz, 2H); MS (DCI/NH₃) m/z 483 (M+H)⁺; Analyticky vypočteno pro C₂₂H₂iF₃N₂O5S.0,5C4H_t0O₂: C, 54,75; H, 4,79; N, 5,32. Zjištěno: C, 55,15; H, 4,77; N, 5,09.

Příklad 83

2-(3,4-dichlorfenyl)—4-(2-hydroxy-2-methy1-l-propoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]— (2//)-py ri dazi non

Požadovaná sloučenina se připraví sekvencí reakcí popsaných v příkladu 22 nahrazením 50 3,4-dichlorfenylhydrazinu za 3,4-difluorfenylhydrazin a nahrazením 2-methyl-l,2-propandiolu (připravený LAH redukcí methy 1-2-hydroxyizobutyrátu) za 3-methyl-l,3-butandiol (výtěžek: 1,7 g, 75 %). Teplota tání 108 až 110 °C;

-27CZ 300570 B6 ^fH NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 0,96 (s, 6H); 3,38 (s, 3H), 4,20 (s, 2H), 4,52 (s, 1H), 7,68 (dd, J = 9 Hz, J -- 3 Hz, 1H), 7,83 (d, J - 9 Hz, 1H), 7,78 (d, J “ 9 Hz, 2H), 7,79 (d, J = 3 Hz, 1H), 8,04 (d, J = 9 Hz, 2H), 8,22 (s, IH); MS (DCI/NH,) m/z483 (M+H)⁴; Analyticky vypočteno pro C2iH₂₀Cl2N2O₅S: C, &, 18; H, 4,17; N, 5,79. Zjištěno: C, 52,41; H, 4,22; N, 5,53.

Příklad 84 (Referenční příklad)

2-(3.4difluorfcnyl)-4-( I -butoxy} 5 [4 (methylsulfonyl)fenyl] 3(2//)—pyridazinon

Příklad 84A

2-(3,4-difluorfenyl)4 (1 butoxy}-5-chlor-3(2//)-pyridazinon

Do míchaného roztoku n-butanolu (0,81 g, 10,93 mmol, 1,1 ekviv.) v THF (20 ml) o pokojové teplotě se přidá 1,0 M bis(trimethylsilyl)amid sodný v THF (12 ml, 12 mmol, 1,2 ekviv.).

Reakční směs se míchá po dobu 0,5 hodin, vloží do roztoku 2—(3.4—ditluorfenyl)-4.5—dichlor-3(2//)-pyridazinonu (2,88 g, 10,4 mmol, 1,0 ekviv.) v THF (80 ml). Výsledná reakční směs se míchá po dobu 0,5 hodin při teplotě místnosti, čímž se získá požadovaná sloučenina (2,5 g, 79,4 %).

Příklad 84B

2—(3,4-difluorfeny 1)-4-( 1-butoxy)—5-[4-(methylth io)fenyl f-3(2//)-pyr idazi non

Kašovitá směs octanu palladnatého (9,0 mg, 0,04 mmol), trifenylfosfinu (21,0 mg, 0,08 mmol) a izopropanolu (1 ml) se míchá při pokojové teplotě po dobu 10 minut. Do této směsi se přidá

2-(3,4-difluorfenyl)—4-(l-butoxy )~-5-chlor-3(2//)-pyrÍdazinon (příklad 84A, 0,63 g, 2 mmol),

4-(methylthio)benzenboritá kyselina (0,403 mg, 2,4 mmol) a izopropanol (4 ml). Dále se přidá roztok K3PO4 (0,66 g, 3 mmol) ve vodě (1 ml) a výsledná reakční směs se deoxygenuje zavedením plynného dusíku po dobu 2 minut. Reakční směs se pak míchá pod atm. N₂ po dobu 15 hodin při teplotě 70 °C. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti a přidá se voda (15 ml) za vzniku precipitátu, který se spojí filtrací a promyje vodou, hexany, čímž se získá suchá požadovaná sloučenina. (0,77 g, 95 %).

Příklad 84C

2(3,4 difluorfenyl) 4 (l butoxy)-5--[ (methylsulfonyl)fenyfj 3(2//) pyridazinon

Do roztoku 2 (3,4 difluorfenyl) 4 ( 1 butoxy) 5 [4 (methy]thio)fenylj 3(2/7) pyridazinonu (příklad 84B, 0,6 g, 1,5 mmol) v acetonu (10 ml) při teplotě -20 °C se pomalu v průběhu 5 minut přidává 32% roztok peroctová kyseliny v octové kyselině (3,75 mmol). Reakční směs se ohřeje na teplotu místnosti a přidá se voda (30 ml). V míchání se pokračuje po následující 0,5 hodiny, poté se precipitát spojí filtrací a promyje vodou, čímž se získá požadovaná sloučenina (0,61 g, 94 %). Teplota tání 129 až 132 °C;

'HNMR (300 MHz, CDCI3) δ 0,88 (t, J = 6 Hz, 3H), 1,20- 1,36 (m, 2H), 1,54- 1,68 (m, 2H), 3,14 (s, 3H), 4,52 (t, J - 6 Hz, 2H), 7,25 -7,34 (m, IH), 7,44 - 7,50 (m, IH), 7,55 - 7,62 (m, 2H), 7,77-7,82 (m, 2H), 7,92 (s, IH), 8,05-8,10 (m, 2H); MS (DCI/NH,) m/z 435 (M+H)⁺;

Analyticky vypočteno pro C21H20F2N2O4S: C, 58,06; H, 4,64; N, 6,44. Zjištěno: C, 57,82; H, 4,53; N, 6,31.

Příklad 85

2-[3-(trif1uormethyl)fenyl]-4-{3-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl50 3(2/7)-pyridazinon

-28CZ 300570 B6

Požadovaná sloučenina se připraví podle způsobu z příkladu 84 nahrazením 3-methyl-l,3butandiolu za n-butanol a nahrazením 2-[3-( tri fluormethy 1) feny l]-4,5-d ibrom-3(2//)-py ridazinonu za 2-(3,4-difluorfenyl)—4,5-dichlor-3(2//)-pyridazinon, čímž se získá požadovaná slouče5 nina (1,2 g, 75 %). Teplota tání 90 až 93 °C;

*H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 1,14 (s, 6H), 1,90 (t, J = 6 Hz, 2H), 3,14 (s, 3H), 4,58 (t, J = 6 Hz, 2H), 7,60 - 7,70 (m, 2H), 7,79 - 7,84 (m, 2H), 7,94 (s, 1H), 7,88 - 7,98 (m, 2H), 8,06 -8,12 (m, 2H); MS (DCI/NH₃) m/z 514 (M+H/; Analyticky vypočteno pro C₂₃H2₃F₃N2O₅S: C, 55,64; H, 4,67; N, 5,64. Zjištěno: C, X6,01; H, 4,83; N, 5,06.

io

Stanovení inhibice prostaglandinu Příprava a aplikace sloučenin

Pro perorální aplikaci se testované sloučeniny suspendovaly v den použití ve 100% polyethylen15 glykolu (PEG 400) pomocí homogenizéru vybaveného pistilem potaženým teflonem a motorem (TRI-R Instrument, Jamaica, NY).

Pro srovnání střední odezvy reagujících skupin se použila analýza rozptylu. Hodnoty procentuální inhibice (uvedené v %) se stanovovaly srovnáním jednotlivých středních hodnot reakcí se střední hodnotou kontrolní skupiny. Výpočet IC50/ED50 v příslušných stanoveních se provedl metodou lineární regrese.

Stanovení prostaglandinu pomocí metody El A

El A agens pro stanovení prostaglandinů byly zakoupeny od Perseptive Diagnosis (Cambridge,

MA). Hladiny prostaglandinu E₂ (PGE₂) u promývacích tekutin byly stanoveny po vysušení vzorků dusíkem a rekonstituovaly testovacím pufrem. Hladiny PGE₂ při stanoveních enzymu nebo médium pro kultivaci buněk se měřily oproti standardům připraveným ve stejném prostředí. Při stanoveních imunochemickou metodou se postupovalo podle doporučení výrobce. Stanovení metodou EIA se provedlo v mikrotitračních destičkách o 96 jamkách. (Nunc Roskilde, Denmark) a optická hustota byla měřena mikrodeskovým snímacím zařízením (Vmax, Moleeular Devices Corp., Menol Park, CA).

Stanovení lidských rekombinantních enzymů PGHS-1 a PGHS-2.

Inhibice biosyntézy prostaglandinu in vitro byla vyhodnocena stanovením lidského rekombinant35 ního enzymu Cox-1 (r-hu Cox-1) a enzymu Cox-2 (r-hu Cox2). Reprezentativní sloučeniny rozpuštěné v DMSO (3,3% v/v) byly předem inkubovány mikrozomy z lidských rekombinantních PGHS-1 nebo PGHS-2 exprimovaných ve směsi bakulovirů a buněčného systému Sf9 (Gierse, J. K., Hauser, S. D., Creely, D. P., Koboldt, C., Rangwala, S., H., Isakson, P. C., a Seibert, K. Expression and selective inhibition of the constitutive and inducible forms of cyclo40 oxygenase, Biochem J., 1995, 305: 479.), dohromady s kofaktory fenolem (2 mM) a hematinem (1 μΜ) po dobu 60 minut před přidáním 10 μΜ arachidonové kyseliny. Před zhášením HCI a neutralizací NaOH běžela reakce po dobu 2,5 minuty při teplotě místnosti. Produkce PGE₂ za přítomnosti nebo absence léčiva se stanovovala analýzou EIA. EIA byla prováděna na mikrotitračních destičkách o 96 jamkách (Nunc Roskilde, Denmark) a optická hustota byla měřena mikrodeskovým snímacím zařízením (Vmax, Moleeular Devices Corp., Menol Park, CA). EIA agens pro stanovení prostaglandinu se zakoupily od Perseptive Diagnostics (Cambridge, MA). Hladiny PGE₂ se měřily oproti standardům připraveným ve stejném prostředí. Při stanoveních imunochemickou metodou se postupovalo podle doporučení výrobce.

Údaje vypovídající o inhibici biosyntézy prostaglandinu in vitro sloučeninami předloženého vynálezu jsou uvedena v tabulce 1. Sloučeniny jsou očíslovány podle čísla příkladu. Sloupec 2 ukazuje procentuální inhibici Cox-1 při jednotlivých mikromolámích hladinách dávkách a

-29CZ 300570 B6 sloupec 3 ukazuje procentuální inhibici Cox-2 při jednotlivých nanomolárních hladinách dávek. Hodnoty pro inhibici cox-1 a Cox-2, které jsou parentetikální, indikují hodnoty IC₅o.

Tabulka 1

Číslo přikladu	Inhibiee RHUCX1 (%) při dávce (μΜ)	Inhibiee RHUCX1 (%) při dávce (μΜ)
11	46 při 100 31 při 10	(0,18)
12	10 při 100	(0,470)
26	Opři 100	(0,71)
22	(3,68)	(0,49)
29	33 při 100	(0,81)
77	(3,4)	(0,72)

Produkce PGE₂ indukovaná IL-1 β u buněk WISH io

Lidské amnionické buňky WISH byly kultivovány na 80% kofluenci na destičkách o 48 jamkách. Poté se odstranilo růstové médium a dvakrát se promylo roztokem Gey's Balanced Salt, do buněk se přidal 5 ng ΙΙ-Ιβ/ml (UBI, Lake Placid, NY) spolu nebo bez testovací sloučeniny v DMSO (0,01% v/v) v Neumann-Tytell Serumless Medium (GIBCO, Grand Island, NY). K dosažení maximální indukce PGHS-2 bylo potřeba 18 hodin inkubace, upravené médium se odstranilo a provedlo se výše popsané stanovení obsahu PGE₂ analýzou EIA.

Údaje vypovídající o inhibici biosyntézy prostaglandinu in vitro sloučeninami vynálezu jsou uvedena v tabulce 2. Hodnoty buněk WISH indikují procentuální inhibici při jednotlivých mikromolámích dávkách, zatímco parentetikální hodnoty indikují hodnoty IC₅₀.

Stanovení cykiooxygenasy-1 celé lidské destičky (HWCX)

Krev normálních zdravých dárců se sbírala do tub obsahujících ACD (aeid citráte dextrose) jako antikoagulant. K připravení plasmy bohaté na destičky se tato krev centrifugovala při 175 x g. Pro vytvoření pelet z bílých krvinek se tato plazma pak znovu centrifugovala při 100 x g, Čímž destičky zůstaly v supematantů. Supernatant se nanesl na 0,7 ml 10% hovězího sérového albuminu (majícího strukturu polštářovitého tvaru) v roztoku Tyrodes (Gibco; Grand Island, NY), poté se centrifugovalo při 1000 x g. Výsledný supernatant z této centrifugace se odstranil a

11 ml roztoku Tyrodes se přidalo do zbývající pelety s destičkami. Destičky se pak v alikvótních podílech rozdělily do destiček o 96jamkách. Přidaly se testované sloučeniny a nechaly předem po dobu 10 minut inkubovat. Na konci této inkubace se přidal kalciový ionofor A23187 na konečnou koncentraci 8,8 μΜ a pokračovalo se v inkubaci po následující 10 minut. Reakce se zastavila přidáním studené 6mM EDTA, inkubační směs se centrifugovala při 220 x g, poté se supematanty analyzovaly na troboxan v komerční soupravě od Cayman Chemical (Ann Arbor, MI).

-30CZ 300570 B6

Tabulka 2

Číslo příkladu	Inhibice HWPX (%) při dávce (μΜ)	Inhibice WISH (%) při dávce (μΜ)
11	(2,04)	(0,089)
12	(22,4)	(0,15)
26	50 při 100	(0,44)
22	(0,32)	(0,04)
29	(0,5)	0,108)
77	(3,5)	(0,054)

Krysí karagenanem indukovaný edém tlapky (CPE)

Edém zadních tlapek byl indukován u samčích krys podle způsobu popsaného v Winter et al, Proč. Soc. Exp. Biol Med., 1962, 111, 544. Samčím Sprague-Dawley krysám vážícím od 170 do 190 g byly aplikovány testované sloučeniny perorálně 1 hodinu před subplantámí injekcí 0,1 ml 1% karagenanu sodného (lambda carragenan, Sigam Chemical Co., St. Louis, MO) do pravé ío zadní tlapky. Objemy (ml) pravé zadní tlapky se měří bezprostředně po injekci karagenanu pro měření objemů základní linie se použilo pletysmografu Muxco (Buxco Electronics, Inc. Troy,

NY). Po 3 hodinách od injekce karagenanu se přemění pravá tlapky a vypočte se pro každou krysu edém tlapky odečtením nulového čtecího času od 3 hodiny. Data jsou uvedena v procentech střední inhibice +/- SEM. Statistický význam výsledků se analyzuje Dunnettsovým mnohoěetným srovnávacím testem, kde p<0,05 se považuje za statisticky významné.

Data ilustrující inhibiei biosyntézy prostaglandinů sloučeninami předloženého vynálezu jsou uvedena v tabulce 3. Uvedené hodnoty jsou procentuální inhibice při 10 miligramech na kilogram tělesné váhy.

Model karagenanem indukovaných vzduchových váčků (CAP), při kterých dochází k biosyntéze prostaglandinů. Vzduchové váčky se tvoří na zádech samčích krys Sprague-Dawley injekcí 20 ml sterilního vzduchu v den 0. Po 3 dnech se váčky znovu nafouknou další dávkou 10 ml sterilního vzduchu. V 7 den se do váčků k indukování zánětlivé reakce, kteráje charakterizována uvolňováním prostaglandinů, injikuje 1 ml fyziologického roztoku obsahujícího 0,2% lambda karagénan (Sigma Chemical Co.). Testované sloučeniny jsou dávkovány od 0,1 do 10 mg/kg 30 minut před karagenanem. Po 4 hodinách se karagenanem injektovaný váček vymyl a hladiny prostaglandinů se určily stanovením enzymu imunochemickou metodou komerčně dostupnými soustavami. Procentuální inhibice byly vypočteny srovnáním odezev u zvířat, kterým byl aplikován pouze nosič, oproti těm, kteiým byly aplikovány sloučeniny. Hodnoty inhibice Cox-2, kteréjsou parentetikální, indikují hodnoty ED₅₀.

Data ilustrující inhibiei biosyntézy prostaglandinů in vivo sloučeninami předloženého vynálezu jsou uvedeny v tabulce 3. Uvedené hodnoty jsou procentuální inhibice při 10 miligramech na kilogram tělesné hmotnosti pro CPE testy a při 3 miligramech na kilogram tělesné hmotnosti pro CAP testy.

-31 CZ 300570 B6

Tabulka 3

Číslo příkladu	Inhibice CPE(%) při 10 mg/kg	Inhibice CAP(%) při 3 mg/kg
11	47	77,5 ED50 — 0,57
12	ED₃₀=0,82	80,5 ED50 = 0,7
26	33	ED₃₀=l,4
22	41	EDso=O,9
29	26	75
77	40	ED₅₀=l,4

Stanovení celých lidských krevních destiček

Cyklooxygenasa-1

Krev antikoagulovaná heparinem byla inkubována léčivy rozpuštěnými v DMSO. Vzorky byly inkubovány při teplotě 37 °C po dobu 4,5 hodiny, poté byl přidán kalciový ionofor na konečnou koncentraci 30 μΜ a směs byla inkubována po dobu 30 minut. Reakce byla zastavena přidáním EGTA a studeného methanolu (50% konečné koncentrace). Po 18 hodinách při teplotě -70 °C io byly pláty centrifugo vány a supematanty analyzovány na TXB₂.

Cyklooxygenasa-2

Krev antikoagulovaná heparinem byla inkubována léčivy rozpuštěnými v DMSO. Vzorky byly inkubovány při teplotě 37 °C po dobu 15 minut, poté bylo přidáno 5gg/ml lipopolysacharid

E.coli (LPS) a směs byla inkubována po dobu 5 hodin. Reakce byla zastavena přidáním EGTA a studeného methanolu (50% konečné koncentrace). Po 18 hodinách při teplotě -70 °C byly pláty centrifugovány a supematanty analyzovány na TXB₂.

Příklad 12 - Stanovení celých lidských krevních destiček - Cox-1 -IC_5C-29,12 μΜ

Příklad 12 - Stanovení celých lidských krevních destiček - Cox-2 -1C₅₀=0,47 μΜ

Příklad 12 - Stanovení celých lidských krevních destiček - Cox-1 -55,5% při 30 μΜ Příklad 12 - Stanovení celých lidských krevních destiček - Cox-2 =85% 0,03 μΜ

Byla zjištěna překvapivě dobrá inhibice Cox-2 a aktivity in vivo sloučeninou 4-hydroxyalkoxy25 3(27/)-pyridazinon. Navíc při srovnání s 4 alkoxy 3-(2//) pyridazÍnony mají typicky hydroxyalkoxy sloučeniny lepší perorální farmakokinetický profil, např. lepší poločas plazmy, koncentrační maximum plazmy a oblast pod křivkou. Sloučenina podle příkladu 375 např. vykazuje 14-denní μΜ koncentraci (v závislosti na dávce 10 mg/kg) 0,0, zatímco sloučenina podle příkladu 451 vykazuje 3,43 μΜ hladinu. Navíc poločas u krysy IV (3 mg/kg) pro sloučeninu podle příkladu 375 byl 1,8, zatímco sloučeniny podle příkladu 451 byl 69.

Předpokládá se, že 4-hy droxy alkoxy sloučeniny jsou preferovány před výchozími alkoxy sloučeninami s ohledem na jednodenní dávkování k dosažení predikovatelných expoziční hladin v širokém rozpětí dávek při stálé produkci protizánětlivého účinku.

-32CZ 300570 B6

Farmaceutické přípravky

Předložený vynález také poskytuje farmaceutické přípravky, které obsahují sloučeniny předloženého vynálezu připravené společně s jedním nebo více netoxickými farmaceuticky přijatelnými nosiči. Farmaceutické přípravky předloženého vynálezu obsahují terapeuticky účinné množství sloučeniny předloženého vynálezu připravené dohromady s jedním nebo více farmaceuticky přijatelnými nosiči. Termín „farmaceuticky přijatelný nosič“, jak je používán zde, znamená netoxickou, inertní pevnou látku, polopevnou látku nebo tekuté plnivo, ředicí roztok, opouzdřenou látku nebo pomocnou látku jakéhokoliv typu. Příklady látek, které mohou být podávány jako farma10 ceuticky přijatelné nosiče jsou cukry, např. laktóza, glukóza a sacharóza; škroby, např. kukuřičný škrob a bramborový škrob; celulóza a její deriváty, např. natrium-karboxymethylcelulosa, ethylcelulosa a acetát celulosy; tragant rozdrcený na prášek; slad; želatina; mastek; excipienty, např. kakaové máslo a čípky z vosku; oleje, např. arašídový olej, bavlníkový olej; šafránový olej; sezamový olej; olivový olej; kukuřičný olej a sójový olej; glykoly; např. propylenglykol; estery, např. ethyloleát a ethyllaurát; agar; pufrující činidla např. hydroxid hořečnatý a hydroxid hlinitý; alginová kyselina; vodu neobsahující pyrogen; izotonický fyziologický roztok; Ringerův roztok; ethylalkohol a fosfátové pufrovaeí roztoky, jakož i jiné netoxická, slučitelná maziva, např. natři um-l aury Isulfát a stearát hořečnatý, jakož i barvicí agens, uvolňovací agens, prostředky, koutovací prostředky, sladidla, prostředky vytvářející chuť a prostředky uvolňující vonné látky, ochranné prostředky, v přípravcích mohou být také přítomny antioxidační přípravky, podle posouzení a postupů dobře známých v oboru. Farmaceutické přípravky tohoto vynálezu mohou být aplikovány lidem a jiným zvířatům perorálně, rektálně, parenterálnč, intracisterálně, intravaginálně, intraperitoneálně, místně (zásypy, mastmi, kapkami), bukálně nebo jako perorální nebo nazální spreje.

Sloučeniny předloženého vynálezu mohou být velmi účinné při ošetření různých chorob nebo stavů onemocnění, např. zánětlivých onemocnění, dysmenorei, astmatu, předčasných porodních stahů, adheze a určité pánevní adheze, osteoporózi a spondylitidy ztuhnutí kloubu. Současné léčiva Ltd, ID Patent Fast Alert, AG16, 9. 5. 1997.

Sloučeniny předloženého vynálezu mohou být velmi účinné při ošetření karcinomů a zvláště karcinomu tlustého střeva. Proč. Nati. Acad. Sci., 94, 3336-3340, 1997.

Sloučeniny předloženého vynálezu mohou být velmi účinné při poskytování farmaceutických přípravků pro inhibici biosyntézy prostaglandinu obsahujících terapeuticky účinné množství sloučeniny vzorce (I) nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl, ester nebo pro léčivo a farmaceuticky přijatelný nosič.

Navíc sloučeniny předloženého vynálezu mohou být velmi účinné při poskytování způsobu inhibiee biosyntézy prostaglandinu zahrnující aplikování savci, při potřebě takového ošetření, terapeuticky účinné množství sloučeniny podle vynálezu nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl, ester nebo proléčivo.

Navíc sloučeniny předloženého vynálezu mohou být velmi užitečné při poskytování způsobu ošetření bolesti, horečky, zánětu, revmatické artritidy, osteoartritidy, adheze a karcinomu zahrnující aplikování savci, při potřebě takového ošetření, terapeuticky účinné množství sloučeniny podle vynálezu.

Dávky v tekuté formě pro perorální aplikaci zahrnují farmaceuticky přijatelné emulze, mikro50 emulze, roztoky, suspenze, sirupy a léčebné nápoje. Kromě aktivních sloučenin, dávky v tekuté formě mohou obsahovat inertní ředicí roztoky běžně používané v oboru např. například vodu nebo jiné rozpouštědla, solubilizující agens a emulgátory, např. ethylalkohol, isopropy lalkohol, ethylkarbonát, ethylacetát, benzylalkohol, benzylbenzoát, propylenglykol, 1,3-butylenglykol, dimethylformamid, oleje (zejména bavlníkové, podzemnice olejné, kukuřičné, zárodečné, olivo-33CZ 300570 B6 vé, ricinové a sezamové oleje, apod.), glycerol, tetrahydrofurfurylalkohol, polyethylenglykoly a estery mastných kyselin sorbitanu a jejich směsi. Vedle inertních ředicích roztoků, mohou perorální přípravky také zahrnovat adjuvans, např. detergenty, emulgátory a suspenzační prostředky, přislazující prostředky, prostředky vytvářející chuť a prostředky uvolňující vonné látky.

Injikovatelné přípravky, např. sterilní injikovatelné vodné nebo olejovité suspenze mohou být připraveny, v rámci technik známých v oboru, použitím vhodných detergentů disperguj ících a suspenzačních prostředků. Sterilní injikovatelné přípravky mohou být také sterilní injikovatelné roztoky, suspenze nebo emulze v netoxických parenterálně vhodných ředicích roztocích nebo io rozpouštědlech jako např. roztok v 1,3-butandiolu. Mezi vhodné nosiče a rozpouštědla, která mohou být použita, patří voda, Ringerův roztok, izotonický roztok chloridu sodného, apod. Navíc sterilní, pevné oleje jsou konvenčně používány jako rozpouštědla nebo suspenzační médium. Pro tento účel může být používán jakýkoliv nedráždivý pevný olej včetně syntetických monoglyceridů nebo diglyceridů. Navíc mastné kyseliny, např. olejová kyselina jsou používány při přípravě inj ikovatěIných přípravků.

Injikovatelné preparáty mohou být sterilizovány jakoukoliv metodou známou v oboru např. filtrací přes filtr pracující na principu bakteriální filtrace nebo vložením sterilizujícího agens ve formě sterilních pevných přípravků, které mohou být rozpuštěny nebo před použitím dispergovány ve sterilní vodě nebo jiném sterilním, injikovatelném prostředku.

Aby se prodloužil efekt léku, je často žádoucí při podkožní a intramuskulární injekci zdržet absorpci léku, což může být dosaženo tekutými suspenzemi krystalických nebo amorfních látek se špatnou rozpustností ve vodě. Míra absorpce léku, pak závisí na jeho míře rozpouštění, která může záviset na krystalické velikosti a krystalické formě. Jiným způsobem lze pomalejší absorpce parenterálně aplikované formy léku dosáhnout rozpuštěním nebo suspendováním léku v olejovitém nosiči. Injikovatelné depotní formy jsou vyrobeny připravením mikroopouzdřených matricí léku v biologicky degradovatelných polymerech, např. po lyaktid-polyg lýko lidu. Míra uvolňování léku může být regulována v závislosti na poměru léku ku polymeru a charakteru jednotlivých používaných polymerů. Příklady dalších biologicky degradovatelných polymerů zahrnují poly(orthoestery) a poly(anhydridy). Depotní injikovatelné formulace jsou také připravovány zadržováním léku v lipozómech nebo mikroemulzích, kteréjsou vhodné pro kontakt s tkáněmi těla.

Přípravky pro rektální nebo vaginální aplikaci jsou výhodné čípky, které mohou být připraveny namícháním sloučenin tohoto vynálezu s vhodnými nedráždivými excipienty nebo nosiči, např. kakaové máslo, polyethylenglykol nebo čípky z vosku, kteréjsou pevné při pokojové teplotě, ale tekuté při teplotě těla, a tudíž roztají v konečníku nebo vaginální kavitě a uvolní tak aktivní sloučeninu.

Dávky v pevné formě pro perorální aplikaci zahrnují kapsle, tablety, pilule, zásypy a granule. V takovýchto pevných dávkovačích formách je aktivní sloučenina obvykle smíchána s alespoň jedním inertním, farmaceuticky přijatelným excipientem nebo nosičem, např. citrát sodný nebo fosforečnan divápenatý a/nebo a) plnidly nebo nastavovacími plnidly, např. škrob, laktóza, sacharóza, glukóza, mannitol a kyselina orthokřemičitá, b) pojivý, např. karboxy methy leelulosa, algi45 náty, želatina, polyvinylpyrrolidon, sacharóza a klovatina, c) zvlhčovacími prostředky, např. glycerol, d) dezíntegrujícími prostředky, např. agar-agar, uhličitan vápenatý, bramborový nebo topiokový škrob, kyselina alginová, určité silikáty a uhličitan vápenatý, e) inhibitory roztoků, např. parafin, f) akcelerátory absorpce, např. kvartémí amoniové sloučeniny, g) detergenty, např. cetylalkohol a glyeerolmonostearát, h) adsorbenty, např. kaolin a bentonitový kaolín a (i) mazivy, např. stearát vápenatý, stearát hořečnatý, pevné polyethylenglykoly, natriumlaurylsulfát ajejich směsi. V případě kapslí, tablet a pilulek mohou také dávkovači formy obsahovat pufrující agens.

Pevné přípravky podobného typu mohou být také upotřebeny jako plnidla v lehce naplněných a hustě naplněných želatinových kapslí použitím takových excipientů jako laktóza nebo mléčný cukr, jakož i polyethy lengly kolů, které mají vysokou relativní molekulovou hmotnost.

-34CZ 300570 B6

Aktivní sloučeniny mohou být také v mikrozapouzdřené formě s jedním nebo více shora uvedenými nosiči. Dávky v pevné formě, např. tablety, dražé, kapsle, pilulky a granule mohou být připraveny s povlaky a pouzdry, např. enterické povlaky, povlaky kontrolující uvolňování a s jinými povlaky dobře známými v oboru farmaceutických formulací. V takovýchto dávkovačích formách může být aktivní sloučenina přimíchána s alespoň jedním inertním ředicím roztokem, např. škrob, laktóza nebo sacharóza. Takové dávkovači formy mohou také obsahovat, což je normální praxe, další látky jiné než inertní ředící roztoky např. tabletující lubrikanty a jiné tabletující entity, např. stearát horečnatý a mikrokrystalická celulosa. V případě kapslí, tablet a pilulí mohou také dávkovači formy obsahovat pufrující agens, případně obsahovat zakalující agens a mohou také být prosty takových přípravků, které uvolňují pouze nebo přednostně aktivní složky v určité části intestinálního traktu, případně do jisté míry zpožděné. Příklady zalitých přípravků, které mohou být používány, zahrnují polymemí látky a vosky.

Formy dávky pro místní nebo transdermální aplikaci sloučeniny tohoto vynálezu dále zahrnují masti, pasty, krémy, tekuté formy ke zevnímu použití, gely, zásypy, roztoky, spreje, inhalační prostředky nebo náplasti. Účinná složka je přimíchána za sterilních podmínek s farmaceuticky přijatelným nosičem a jakýmkoliv potřebným ochranným prostředkem nebo pufrem podle potřeby. Oftalmické formulace, ušní kapky, oční masti, zásypy a roztoky jsou také zamýšleny v rozsahu předloženého vynálezu.

Masti, pasty, krémy a gely mohou obsahovat, kromě aktivní sloučeniny tohoto vynálezu, excipienty, např. zvířecí a rostlinné tuky, oleje, vosky, parafíny, škroby, tragant, deriváty celulosy, polyethylenglykoly, silikony, bentonity, kyselinu orthokřemičitou, mastek, oxid zinečnatý nebo jejich směsi.

Zásypy a spreje mohou obsahovat, kromě aktivní sloučeniny tohoto vynálezu, excipíenty, např. laktóza, mastky, kyselinu orthokřemičitou, hydroxid hlinitý, silikát vápenatý a polyamidový prášek nebo směsi těchto látek. Spreje mohou dále obsahovat obvyklé propelenty, např. chlorfluor30 uhlovodíky.

Transdermální náplasti mají navíc výhodu v tom, že poskytují přesné dodání sloučeniny do těla. Takové dávkovači formy mohou být vytvořeny rozpuštěním nebo dispergování sloučeniny ve vhodném médiu. Ty entity, které zvyšují absorpci, mohou být používány ke zvýšení proudění sloučeniny přes pokožku. Míra zvýšení může být ovládána buď kontrolováním membrány a nebo dispergováním sloučeniny v polymemí matrici nebo gelu.

Podle způsobů ošetření předloženého vynálezu jsou pacienti nebo savci ošetřeni aplikováním terapeuticky účinného množství sloučeniny vynálezu v takových množstvích a v takovou dobu, které jsou nezbytně nutné k dosažení požadovaného výsledku. Termínem „terapeuticky účinné množství“ sloučeniny vynálezu se myslí dostačující množství sloučeniny vynálezu k dosažení požadovaného zmírnění negativního stavu v rozumném poměru užitek/riziko použitelné k jakémukoliv lékařskému ošetření. Nicméně bude srozuměno, že celkové denní užívání sloučenin a přípravků předloženého vynálezu záleží na rozhodnutí ošetřujícího lékaře (důkladném lékařském úsudku). Specifická terapeuticky účinná hladina dávky pro jakéhokoliv jednotlivého pacienta bude záležet na různých faktorech zahrnujících poruchu, která je ošetřována a sílu této poruchy; aktivitě používané specifické sloučeniny; používání specifického přípravku; věku, tělesné váze, celkovém zdraví, pohlaví a životosprávě pacienta; době aplikace, způsobu aplikace a míře exkrece používané specifické sloučeniny; době trvání ošetření; léků používaných v kombi50 naci nebo ve shodě s používanou specifickou sloučeninou; a podobných faktorech dobře známých v lékařské praxi.

Celková denní dávka sloučenin předloženého vynálezu aplikovaná lidem nebo jiným savcům v jediné nebo v rozdělených dávkách může být v množstvích např. od 0,001 do asi 1000 mg/kg tělesné váhy denně nebo preferovanější je od 0,1 do asi 100 mg/kg tělesné váhy pro perorální

-35CZ 300570 B6 aplikaci 0,01 do asi 10 mg/kg pro parenterální aplikaci denně. Přípravky v jediné dávce mohou obsahovat množství nebo části těchto množství k vytvoření denní dávky.

Množství aktivní složky, které může být kombinováno s látkami nosiče k vytvoření jediné dávko5 vací formy bude variabilně záviset na ošetřovaném hostiteli a jednotlivém způsobu aplikace.

Agens, která jsou požadována pro syntézu sloučeniny předloženého vynálezu, jsou snadno komerčně dostupná u např. Aldrich Chemical Co. (Milwaukee, WI, USA); Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, USA); a Fluka Chemical Corp. (Ronkonkoma, NY, USA); Alfa Aesar (Ward io Hill, MA 01835-9953); Eastman Chemical Company (Rochester, New York 14652-3512);

Lancaster Synthesis Inc. (Windham, NH 03087-9977); Spectrum Chemical Manufacturing Corp.

(Janssen Chemical) (New Brunswick, NJ 08901); Pfaltz and Bauar (Waterbur, CT. 06708).

Sloučeniny, které nejsou komerčně dostupné, mohou být připraveny použitím známých způsobů z chemické literatury.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1, Sloučenina vybrána ze skupiny
2 (441uorfenyl) 4 <4-hydroxy-2-methyl-1-butoxy) 5-[4-(methylsLiltc>nyl)íenyl] 3(2H)pyridazinon;

25 2-(4-fluorfeny1)—4-(3-hydroxy-3-methyl-l-butoxy )-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(2H)pyridazinon;

2-(3,4-difluorfenyl)-4-(3-hydroxy-3-methy 1-1 -butoxy )-5-[4-(methylsulfony l)fenyl]-3(2H)pyridazinon;

2-(3,4-difluorfenyl>4-(3-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(2H)30 pyridazinon;

2-(3—chlor—4-fluorfenyl)-4—(3-hydroxy-3-methyl-l -butoxy )-5-[4-(methy I sulfonyl )fenyl]-3(2H)-pyridazinon;

2 (3- chlor—4-fluorfenyl) 4--(3-hydroxy 3-methyl-l-butoxy) 5 [4 <aminosulfonyl)fenyl]-3(2H)-pyridazinon;

35 2 (3-chlorfenyl) -4-(3-hydroxy-3 methyl-l butoxy)-5-[4-(metl'i\lsulfonyl)l'enyl]-3(2H) pyridazinon;

2-(3-ch lorfenyl )-4-(3-hydroxy-3-methy 1-1 -butoxy )-5-[4-(aminosu lfonyl)fenyl]-3(2 H)pyridazinon;

2-(4-fluorfenyl)-4-(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(n3ethylsulfonyl)fenyl]-3(2H)40 pyridazinon;

2-(4-fluorfenyl)-4-(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy )-5-[4-(aminosulfonyf)fenyl]-3(2H}” pyridazinon;

2 (3-chlor—4-tluorťcnyl)-4 (2 hydroxy 2-mcthyl-l -propoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyI]-3(2H)-pyridazinon;

45 2- (3—chlor 4-ťluorťenyl)—4-(2-hydroxy 2 methyl-1—propoxy)-5 [4 (aminosulfonyl)feny11-3(2H)-pyridazinon;

2-(3-ch lorfenyl )-4-( 2-hydroxy-2-methy 1-1 -propoxy )-5-[4-( methyl sulfonyl )fenylj-3(2H)pyridazinon;

-36CZ 300570 B6

2-(3-chlorfeny l)-4-(2-hydroxy-2-methyl-1 -propoxy)-5-[4—(am inosulfonyl)fenyl]-3(2H)pyridazinon;

2-(3-fluorfenyl)-4-(4-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(2H)pyridazinon;

5 2-(3,4--difluorfenyl)-4-(4-hydroxy-3-methyt-l-butoxy)-5-[4—(methylsulfonyl)ťenylJ-3(2H>pyridazinon;

2-(3-chlor—4-fluorfenyl)—4-(4-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]3(2H)—pyridazinon;

2-(3—chlorfenyl)-4-(4-hydroxy-3-methyl-l -butoxy )-5-[4-(methy Isulfony l)fenyl]-3 (2 H)io pyridazinon;

2-(3,4-diťluorfenyl)-4-(4-liydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(2H)pyridazinon;

2-(3-chlor—4-fluorfenyl)-4-(4-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(2H)-pyridazinon;

15 2-(3-chlorfenyl)-4-(4-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(2H)pyridazinon;

(S)-2-(4-fl uoríenv l)-4-(3-hydroxy-2-methyl-l--propoxy/5--[4-(am inosul fonyl) fenyl]--3(2 H)pyridazinon;

(R) -2-(4-fluorfenyl)—4-(3-hydroxy-2-methyI-l-propoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(2H)20 pyridazinon;

(S) -2-(3-chlor—4-fluorfenyl)—4-(3-hydroxy-2-methy l-l -propoxy)~5-{4-(methy Isulfony 1)fenyl]-3(2H)-pyridazinon;

(S)-2-(3-chlor—4-fluorfenyl)-4-(3-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5—[4-{aminosulfonyl)fenyl]-3(2H)-pyridazinon;

25 (R)-2-(3-chlor-4-fluorfenyl)-4-(3-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2H)-pyridazinon;

(R) -2-(3-chlor-4-fluorfenyl)-4—(3-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(aniinosulfonyl)fenyl]-3(2H)-pyridazinon;

(S) -2-(3-chlorfenyl)-4-(3-hydroxy-2-niethyl-l-propoxy)-5-[4-(methy1sulfonyl)fenyl]-330 (2H)-pyridazinon;

(S)-2-(3-chlorfenyl)-4-(3-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(2H)pyridazinon;

(R)-2-(3-chlorfěnyl)-4-(3-hydroxy-2-methyl-]-propoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2H)-pyridazinon;

35 (R)-2-(3-chlorfenyl)-4-{3-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(2H)-pyridazinon;

2-(4-fluorfenyl)-4-(3-hydroxy-2,2-dimethy]-l-propoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2H)pyridazinon;

2-{4-fluorfenyl)-4-(3-hydroxy-2,2-dimethyl-l-propoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(2H)40 pyridazinon;

2-(3,4-difluorfenyl)4(3hydroxy-2,2--dimethyl-l-propoxy)-5-f4-(methylsulfonyl)tenyIJ-3(2H)-pyridazinon;

2-(3,4-difluorfenyl)—4-(3-hydroxy-2,2-dimethyl-l-propoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(2H)-pyridazinon;

-37CZ 300570 B6

2-(3chlor^4-fluorfenyl)—4j3-hydroxy2.2-dimethyl-l-propoxy)-5-[4Hmethylsulfonyl)fenyl]-3(2H)-pyridazinon;

2 (3 chlor 4-nuorfenyl) 4 (3 hydroxy-2,2-dimethyl-l-propoxy)-5-[4 (aminosulfbnyl)fenyl]-3(2H)-pyridazinon;

5 2-(3-chlorfenyl)-4-(3-hydroxy-2,2-dimethyl--1--propoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2H)-pyridazinon;

2 (3-ehlorfeny]) 4 (3 hydroxy-2,2-dimethyl-l-propoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(2H> pyridazinon;

2-(3,4-dichlorfenyl)-4-(3-hydroxy-3-methyl-1 -butoxy )-5-(4-( methylsulfonyl)fenyl]-3(2H)ío pyridazinon;

2-[(3-trifluormethyl)fenyl]-4-(2hydroxy-2-methyl-l-propoxv )-5-(4-(methyl sulfonyl)fenyl ]3(2H)-pyridazinon;

2-(3,4-dichlorfenyl)-4-(2 hydroxy-2-methy]-l-propoxy) 5 [4 (methylsulfonyl)fenylj-3(2H)-pyridazinon; a

15 2-[(3-trifluormethyl)fenyl]^-(3-hydroxy-3-methyl--1-butoxy)5[4-(methylsiilfonyl)fenylj3(2H)-pyridazinon;

nebo její farmaceuticky přijatelná sůl nebo ester.

2. Sloučenina vybrána ze skupiny sestávaj íeí z

20 2-(2,2,2-trifluorethyl)-4-(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2H)-pyridazinon;

2-(2.2,2-trÍfliiorethyl)4-(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]-3(2H)-pyridazinon;

2-(2,2,2-trifluorethy()-4 (3-hydroxy-2,2-dimethyl-l-propoxy)-5-[4-(methylsulfonyI)fenyl]25 3(2H)-pyridazinon;

2-(2.2,2 trifluorethyl)-4-(3-hydroxy 2.2 dimethyl-l-propoxv)-5-|4-(aminosulťonyl)fenyl]3(2H)-pyridazinon;

(S)-242,2,2-trifluorethyl)-4-(3-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(methylsulfonyl)fenyl]3(2H)-pyridazinon;

30 (S) 2-(2.2,2-trinuorethyl) 4 (3 hvdroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]
3(2H)-pyridazinon;

(R)-2-{2,2,2-trifluorethyl)-
4-(3-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-5-[4-(methylsuIfonyl)fenyl]3(2H)-pyridazinon;

(R)-2-(2,2,2-trif]uorethyl)-4-(3-hydroxy-2-methyl-1-propoxy)-5-[4-(aminosulfonyl)fenyl]35 3(2H)-pyridazinon;

2-(2,2,2-trifluorethyl/4-{3-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-5-(4-(methylsulfonyl)fenyl]-3(2H)-pyridazinon; a

2—(2.2.2-trdluorethyl) 4 (3 hydroxy-3-methyl 1 butoxy>-5-|4—(aminosulfonyl)fenyl) 3(2H) pyridazinon;

40 nebo její farmaceuticky přijatelná sůl nebo ester.

3. Sloučenina vybrána ze skupiny sestávající z

N_[[4-[2-(4-fluorfenyl)-4-(3-hydroxy-3-methyl-l -butoxy )2IIpyridazin-3-on-5-yl|ťenyljsulfonyl]acetamid;

-38CZ 300570 B6 sodná sůl N-[[4-[2-(4-fluorfenyl)-4-(3-hydroxy-3-methyl-l-butoxy)-2H -pyridazin-3-on- 5 yl]fenyl]sulfonyl]acetamidu;

N-[[4-[2—(3,4—difluorfenyl)-4—(2-hydroxy-2-methyl-lpropoxy)—2H-pvridazin-3—on-5-yl ]fenyl]sulfonyl]acetamid;
5 sodná sůl N-[ [4-(2-(3,4-Difl uorfeny 1)-4-( 2-hydroxy-2-methy]-l-propoxy)--2 H-pvridazin--3on-5~yl]fenyl]sulfonyl]acetamidu;

N-[[4-[243-chlor-4—ťluorfenyl)-4—(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-2H-pyridazin-3-on-5yl]fenyl]sulfonyl]acetamid;

sodná sůl N-[[4-[2—(3—chlor-4-fluorfeny l)-4—(2-hydroxy-2-methyl-1 -propoxy)-2H-py řídlo azin-3-on-5-yl] fenyl] sul fony IJacetam idu;

N-[[4-[2-(3-chlorfenyl)-4—(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxv)-2ITpYridazin-3-on-5-yl]fenyl]sulfonyl]acetamid;

sodná sůl N-[ [4-[2—(3—chlor fenyl )-4--(2-hy droxy-2-methy l-l--propoxy)-2H-pyridazin-3—on5~yl]fenyl]sulfonyl]acetamidu;

is N-[[4-[2-(2,2,2-trifluorethyl)-4-(2-hydroxy-2-methyl-l-propoxy)-2H-pyridazin-3-on-5yl]fenyl]sulfonyl]acetamid;

sodná sůl N-[[4-[2-(2,2,2-triťluorethyl)-4-(2-hydroxy-2methyl-l-propoxy)-2H-pyridazin3—on-5--yl]fenyl]sulfonyl]acetamidu;

N—[[4—[2—·(2,2,2—tri fluore thyl)-4-(3-hydroxy-2,2-dimethyl-l-propoxy)-2H-pyridazÍn-3-on20 5-yl]fenyl]sulfonyl]acetamid; a sodná sůl N-[ [4-(2-(2,2,2-Trifluorethyl)-4-(3-hydroxy-2,2-d i methy l-l-propoxy)-2H-pyridazin-3-on-5-yl]fenyl]su!fonyl]acetamidu;

nebo její farmaceuticky přijatelná sůl nebo ester.

25 4. 2-(3,4—difluorfenyl)4-(3-hydroxy-3-methyl-l-butoxy )-5-[4-methylsulfonyl)fenyl]-3(2H)-pyridazinon nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl nebo ester.

5. Farmaceutická kompozice obsahující therapeuticky účinné množství sloučeniny podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4 a farmaceuticky přijatelný nosič.
6. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4 pro použití jako therapeutický prostředek.
7. Použití sloučeniny podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4 pro výrobu léčiva pro inhibiei biosyntézy prostaglandinu u savce při potřebě takového ošetření.
8. Použití sloučeniny podle kteréhokoliv z nároků 1 až 4 pro výrobu léčiva pro ošetření bolesti, horečky, zánětu, revmatické artritidy, osteoartritidy, adheze a karcinomu.