CZ299292A3

CZ299292A3 - Benzazepine compounds for treating neurological disorders

Info

Publication number: CZ299292A3
Application number: CS922992A
Authority: CZ
Inventors: Marc Jerome Chapdelain; Charles David Mclaren
Original assignee: Ici Plc
Priority date: 1991-01-02
Filing date: 1992-09-30
Publication date: 1993-01-13
Also published as: HU9202618D0; IL100484A; HUT64309A; WO1992011854A1; PL166481B1; ES2093246T3; GB2251616B; EP0517876A1; AU9134091A; NZ241197A; EP0517876B1; AU650086B2; FI923759L; US5541319A; FI923759A0; GB2251616A; GR3021440T3; FI104071B; CA2058593A1; IE920009A1

Description

Oenzazcpinové sloučeniny pru léčení neurologických poruch

Oblast techniky < Vynález se týká benz/b/azepinových sloučenin použitel», ných pro léčení neurologických poruch obecně u savců, jako jsou lidé. Zejména jsou sloučeniny podle vynálezu použitelné pro léčení mrtvičných záchvatů a/nebo jiných neurodegenerativních poruch, jako je hypoglykemie, mozková paralysa, krátkodobý mozkový ischemický atak, perinatální asfyxie, epilepsie, psychosa, Huntingtonova chorea, amyotrofická laterální sklerosa, Alzheimerova nemoc, Parkinsonova nemoc, atrofie přemostění malého mozku, virálně indukovaná degenerace nervů, jako_ iu.Jwni]«iWrtÍi|fr.n.'l1 ΐ. ^* *·>μιι*»ι·μμ)|ι0·ιμΙι«ι i ΒΜΜ» i m»·“«···wmhhmmΊι.«0 *»..< -.·.,!! JitJije syndrom získané imunodeficience a s ním spojené demence, anoxie způsobené tonutím, traumatem míchy a mozku, otrávením exogenními neurotoxiny a chronických bolestí, pro prevencisymptomů odnětí drog a alkoholu a pro inhibici tolerance a závislosti na opiátová analgetika. Vynález se zejména týká nových benz/b/azepinavých sloučenin použitelných pro snižování neurologické degenerace, která může být vyvolána záchvatem mrtvice a s tím spojených případně vznikajících funkčních poškození. Ošetření za použití sloučenin podle vynálezu může být nápravné nebo léčebné, tak že se aplikuje sloučenina po ischemické příhodě, čímž se zmírní následky této příhody. Ošetření může být také profylaktické nebo prospektivní tak, že se sloučenina aplikuje pro případ objevení se ischemické pří• ... · ->-hody, například- pacientovi, který má sklon ^mozkovému zá- “ chvatu.

Dosavadní stav techniky

Je známo, že ischemické příhody mohou spouštět dramatická zvýšení extracelulárních koncentrací dráždivých aminokyselin glutamové a aspartové, které mohou naopak způsobovat prodloužení excitace vedoucí k masivnímu přítoku kalcia z extracelulárních do intracelulárních míst v mozkových neurálních buňkách. Může tak vzniknout přebytek kalcia, který vede ke kaskádě příhod vedoucích k buněčnému katabolismu a popřípadě vede k uhynutí buňky. Předpokládá se, že N-methy1-D-aspartátový (MMOA) receptorový komplex hraje signifikantní roli v kaskadě příhod vedoucích k nekrose buněk následující po ischemické příhodě.

Podstata vynálezu

Sloučeniny podle vynálezu mohou být použitelné při různých neurodegenerativních poruchách, protože působí jako antagonisty excitačních aminokyselin. Působí tak nepřímo pres allosterickou modulaci míst vážících glútamát, specificky působí jako antagonisty receptorů glycinu necitlivého na strychnin na NMDA receptorovém komplexu. Mohou také působit přímo vazbou na samotná glutamátová místa na NMDA receptorovém kom- :

plexu.

Podstatou vynálezu jsou sloučeniny obecného vzorce I nebo obecného vzorce II

ve kterých

3 4

R , R , R a R jsou nezávisle na sobě .vybrány ze skupiny zahrnující atom vodíku, peříluoralkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, atom halogenu, nitroskupinu a kyanoskupinu, a je alkylová skupina s 1 až 5 atomy uhlíku, nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli, použitelné pro léčení neurologických poruch.

Podstatou vynálezu je dále použití sloučenin obecného vzorce I nebo II nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí pro přípravu léků k ošetřování neurologických poruch.

Podstatou vynálezu je dále farmaceutický prostředek pro ošetřování neurologických poruch, který se vyznačuje tírň, že obsahuje sloučeninu obecného vzorce I nebo II _r _i.ak^.s.Q.n_ri.R.f.i-novány výše, nebo jejich farmaceuticky přijatelnou sůl, spolu s farmaceuticky přijatelným ředidlem, nebo nosičem.

Určité sloučeniny obecného vzorce I jsou známy z britského patentu č. 1 340 334 a také z práce Oirchall a Rees, Can. J. Chem., 52, 610 (1974). Avšak nové Sloučeniny podle vynálezu zahrnují ty sloučeniny obecných vzorců I a II, ve 1 λ ? 1 kterých když R a FT jsou atomy vodíku, pak R a R nejsou oba (nezávisle) vybrány ze skupiny zahrnující atom vodíku a atom halogenu.

Aniž by se vynálezci cítili být svázáni s teorií, předpokládá se, že sloučeniny obecného vzorce II se mohou in vivo převádět na 3-hydroxyderiváty a že tedy tak mohou působit jako prodrogy.

V tamto popisu používaný výraz alkyl zahrnuje jak’prímé tak rozvětvené zbytky, avšak rozumí se sam.o_s.e.b.o.u-,--ž.e-p.n^— užije-li se název pro individuální zbytek, jako je propyl, znamená to pouze přímý řetězec,(normální )z.bytek, a pro rozvětvený zbytek se použije výraz isopropyl.

-V-ýT-a-zem-ha-1-αgen-se~mfní“atom^—fluorlTT^filoru“bromu nebo^- jodu.

Pra pracovníky pracující v oboru je samozřejmé, že mnohé sloučeniny zde zahrnuté mohou existovat a mohou být znázorněny v různých tautomerních formách a že tedy všechny odkazy na zvláštní struktury zahrnují tyto různé tautomerní formy.

- ' 4' Zvláštními významy pro alkylovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku jsou methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, pentyl, isopentyl a neopentyl.

Zvláštními významy pro perfluoralkylovou skupinu s 1 až 1 4 atomy uhlíku v substituentech R až R jsou trifluormethyl, pentafluorethyl a heptafluorpropyl.

Zvláštními významy pro atom halogenu v substituentech 1 4

R až R jsou atom fluoru, chloru, bromu nebo jodu.

Specielními významy pro alkylovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku jsou methyl, ethyl a propyl.

Specielními významy pro perfluoralkylovou skupinu s 1 až 1 4 atomy uhlíku v substituentech R až R jsou trifluormethyl a pentafluorethyl.

inwW:ii-nwr rr-r-—— - , ,»* .r —*·«ιΊ«·> ·ιμ>ιι>ι>Γ ,ι»··)ιιιι » <' i—y

Specielními vyznamy pro atom halogenu v substituentech 1 4

R až R jsou atom fluoru, chloru a bromu.

3 4

Výhodnými významy pro substituenty R , R , R a R jsou v atom vodíku a atom halogenu. /

Výhodnými významy pro alkylovou skupinu s 1 až 5 atomy uhlíku jsou methyl a ethyl.

Ještě výhodnějšími významy pro substituenty a R^ jsou atom vodíku, atom fluoru, chloru a bromu.

Ještě výhodnějšími významy pro substituenty R^ a R⁴ jsou’ atomy vodíku.

Výhodnými sloučeninami podle vynálezu jsou :

8-chlor-2,5-dihydro-2,5-dioxo-3-hydroxy-lH-benz/b/azepin,

7- chlor-2,5-dihydro-2,5-dioxo-3-nydroxy-lH-benz/b/azepin,

8- brom-2,5-dihydro-2,5-dioxo-3-hydroxy-lH-benz/b/azepin,

8-fluar-2,5-dihydro-2,5-dioxo-3-hydroxy-lH-benz/b/azepin,

6.8- dichlor-2,5-dihydro-2,5-dioxa-3-hydroxy-lH-benz/b/azepin,

6.8- dibrom-2,5-dihydro-2,5-dioxo-3-hydroxy-.lH-benz/b/azepin,

6.8- difluor-2,5-dihydro-2,5-dioxo-3-hydroxy-lH-benz/b/azepin, a jejich alkylenolethery s 1 až 5 atomy uhlíku v alkylové skupině (t.j. sloučeniny obecného vzorce II, kde R^ je alkylová skupina s 1 až 5 atomy uhlíku), specielně methylenolether a ethylenolether.

Bcnz/b/azepiny obecného vzorce I lze*připravovat postupy známými z chemické praxe pro přípravu strukturně analogických sloučenin. Tyto postupy pro přípravu benz/b/azepinú obecného vzorce I, jak byly definovány výše, tvoří další součást předloženého vynálezu a jsou ilustrovány v následujících postupech, kde, pokud není uvedenu jinak, mají obecné symboly výše uvedené významy. Takový postup lze obecně provádět tak, že se nechá reagovat sloučenina výše uvedeného obecného vzorce II, kde R⁵ je alkylová skupina s 1 až 5 atomy uhlíku, jako je methyl nebo ethyl, s trihalogenidem boru.

Pokud nejsou obchodně dostupné, lze potřebné výchozí slou č-en-i-n-y—p-r-o—t-y-to—pos-t-up-y—p-ř-ip.r-av-0-v.a-t—s-tand.a.r-dn.ími_te.c.h.n.i.kamioráganické chemie, které jsou známy pro přípravu strukturně podobných sloučeni-n, nebo technikami analogickými postupům popsaným v příkladech provedení vynálezu.

Sloučeninu výše uvedeného, obecného vzorce II lze připravit reakcí odpovídajícího alkylenoletheru obecného vzorce III

s azidem sodným v čisté trifluormethansulfonové kyselině nebo v koncentrované kyselině sírové (Schmidtova reakce) při teplotě od asi 0 °C do asi teploty místnosti. Trifluormethansulfonavá kyselina je výhodná v případech, kdy jeden nebo ví1 4 ce ze substituentů R až R je atom halogenu. Pro usnadnění -Sehmí-d-t-o-v-y—r-eakc-e-je—v-ýhodné-použ-í-v-a-t-s-l-oučeni-ny-,—kde—R—je— methyl nebo ethyl.

Methylenolether obecného vzorce ΣΙΙ lze připravit reakcí odpovídajícího hydroxynaftochinanu obecného vzorce IV

s odpovídajícím alkoholem obecného vzorce

R⁵QH

(.(11^1171(-wM*—m·—·**·—*!!*·!··*·- ,_r “^7·..- .w 1 l> «ι*»κΐ>*ίw—wí^hOd<b^.· ΊΜϋί> J—d'· ‘fa·. J»——(^ jako je methanol nebo ethanol, v přítomnosti vhodné kyseliny, jako je bezvodý chlorovodík. ...„„ x

Hydroxynaftochinony obecného vzorce IV lze připravit '$* „$ oxidací odpovídajícího tetralonu obecného vzorce V nebo Va X % .x

(Va)

Oxidaci lze provádět vhodně jako postup v jedné nádobě ve vhodném rozpouštědle, jako je terč.butanol, a v přítomnosti vhodné base, jako je terc.butoxid draselný, přičemž se reakční směsí probublává kyslík. Pracovníkům v oboru je zřejmé, že lze použít vhodné variace tohoto postupu, a to že lze pracovat ve stupních nebu vo více nádobách.

Mnohé z tetralonú obecného vzorce V a/nebo Va, vhodných pro použití při postupu podle vynálezu, jsou obchodně dostupné nebo je lze připravit již známými postupy. Například 1-tetralon obecného vzorce V lze připravit cyklisací odpovídající kyseliny obecného vzorce VI

(VI) za kyselých podmínek; například.s polyfosforečnou kyselinouza.zahřívání. 2-tetralon obecného vzorce Va lze připravit zavedením ethylenu do odpovídajícího chloridu kyseliny fenyloctavé obecného vzorce Via

a následující cyklisací podle obecné metody popsané v práci Rosowsky a j,, J. Qrg. Chem., 22» 42QS (1968).

Sloučeniny obecného vzorce VI lze připravit redukcí odpovídajícího ketonu, například redukcí sloučeniny obecného, vzorce VII

známými způsoby, například Uolff-Kishnerovou redukcí pro redukci karbonylové skupiny za použití hydrazinu a base.

Sloučeniny obecného vzorce Via lze připravit převedením benzylalkoholu obecného vzorná VTTT ......________________________

.....M,»1«««' » WH'·'¹¹............. — ---^{1 1} * ·' ......... ' ~

(X = OH) na odpovídající benzylchlorid (X = Cl), (například reakcí s příslušným reakčním činidlem, jako je thionylchlorid) a potom reakcí takto vzniklého benzylchloridu s vhodným kyanidem alkalického kovu (například s kyanidem sodným), Čímž dojde k záměně chloridu a kyanid a vznikne odpovídající benzylkyanid (X = CN). Kyselinu obecného: vzorce Via lze připravit známým způsobem hydrolysou benzylkyanidu za kyselých podmínek.

Alternativně lze kyseliny obecného vzorce Via připravit bromací toluenu odpovídajícímu obecnému vzorci VIII, kde X = H, za vzniku odpovídajícího benzylbromidu (X = 3r) a potom nahrazením za kyanid, jak je popsáno výše při přípravě kyseliny vzorce Via.

- 9 3e třeba poznamenat, že mnohé enolethery obecného vzorce III lze také připravit způsobem podle práce S. T. Perri a j., Qrg. Syn., 69, 220 a 3.M. Heerding a H. W. Hoore, 3. Org. Chem., 56, 4043 až 4050, (1991). Tato syntesa je obecně znázorněna ve schématu I. * ,

-—Org a n oj-j-t h n á-sú-o u č a n-i-n a—1-0^ se-mů-Ž-e— necha-t—p-eago-va-t—se—sem-i---:3=. :.γ. ŤŤ.č'. -^ssr. · :τ_·.— ·?.? -ks~--S;-- -rr Λ-:—--r^: · -'-rr-T-r.T-¹-~ ;.í:-™r-”4=·.-.:· ·· ·: skvarátem nebo se semiskvarovou kyselinou 12 za vzniku

4-(disubstituovaný aryl)-3-alkoxy-4-hydroxy-2-cyklobuténonu 14. Použitá semiskvarátová sloučenina 12 je snadno dostupná podle práce Heerdinga a Moorea, jak je popsáno výše, reakcí dialkylskvarátu (jako je diethyl-, diisopropyl- nebo dibutylskvarát, všechny obchodně dostupné u firmy Aldrich) s vhodným redukčním činidlem, jako je lithiumtriterc.butoxyaluminohydrid, a potom hydrolysou takto vzniklého meziproduktu 13 ve vodné kyselině chlorovodíkové. Sloučeninu 14 lze naopak převést zahříváním ve vhodném rozpouštědle, jako je xylen, na hydrochinon 16. Tento hydrochinon 16 lze potom oxidovat (například chloridem železitým) na odpovídající naftochinon 13. Je-li to zapotřebí, může se před provedením Schmidtovy reakce naftochinon 18 transesterifikovat, například methanolickou kyselinou chlorovodíkovou, a tak se získá methoxynaftochinon 23 obecného vzorce III.

?γ4.·«ιμιιιι—prí klády”vhodných*f armáceůtickypf i'ja teΓη ýcfi*soΓί' ou*** soli tvořené s basí,která tvoří fysiologicky přijatelný kation, jako jsou suli s alkalickými kovy (například se sodíkem a draslíkem), soli s kovy alkalických zemin, hlinité soli a amoniové soli, jakož i soli s příslušnými organickými basemi, jako je triethylamin, morfolin, piperidin a triethanalamin.

Je třeba věnovat péči tomu, aby se zabránilo používání kovů a/nebo kovových směsí, které by mohly způsobovat kovem katalysovaný rozklad účinné látky.

Při terapeutickém použití po prodělaném záchvatu mrtvice se benz/b/azepin obecného vzorce I obecně aplikuje ve formě vhodného farmaceutického prostředku, který obsahuje benz/b/azepin obecného vzorce I, jak byl definován výše, spolu s farmaceuticky přijatelným ředidlem nebo nosičem, přičemž se tento prostředek vhodným způsobem upraví na příslušný způsob aplikace. Tyto prostředky představují další rys předloženého vynálezu. Mohou se získat použitím běžných postupů, přičemž se přidávají přísady a pojidla a prostředky se mohou připravit v různých dávkových farmách. Například mohou být ve formě tablet, kapslí, roztoků nebo suspensí pro orální aplikaci, ve formě čípků pro rektální aplikaci a ve formě sterilních roztoků nebo suspensí pro aplikaci intravenosní nebo intra11 muskulární injekcí nebo infusí.

Použitá dávka sloučeniny obecného vzorce I se nutně mění podle principů běžně známých v oboru, přičemž se bere v úvahu způsob aplikace, vážnost ischemické poruchy a hmotnost a věk , pacienta. Obecně se sloučenina obecného vzorce I aplikuje teplokrevným živočichům (jako jsou lidé) tak, že se účinná dávka podává intravenosně, například v množství v rozmezí asi 0,1 až asi 10 mg/kg tělesné hmotnosti.

Odborníkům je známo, že se sloučenina obecného vzorce I může podávat současně s jinými terapeutickými nebo profylaktickými činidly a/nebo léčivy, která nejsou s ní inkompatibilní.

Působení sloučenin obecného vzorce I jako antagonistů. receptoru glycinu u NMOA-receptorového komplexu se může prokázat standardními testy, jako je test vazby /^/-glycinu, funkčními testy in vitro, jako jsou testy pro měření kontrakcí ilea morčat vyvolaných glutamátem, a testy in vivo, jako je ischemie vyvolaná oklusí krkavice u tarbíků jako modelových živočichů.

Při testu vázání /^HZ-glycinu se připraví .neuronální synaptické- membrány z dospělých.samců.krys Sorague-Oawley o (asi 250 g). Čerstvě vypreparovaná mozková kůra a mozková tkáň se homogenisují v 0,32 M sacharose (110 mg/ml). Centrifugací se isoluji synaptosomy (1000 x g, 10 min.) a supecnatant se vyvločkuje (20 000 x g, 20 min.) a znovu sa suspenduje v redestilovaná vodě. Suspense se centrifuguje po dobu 20 minut při 3 000 x g. Získaný supernatant a stěny ze_ sražených leukocytů se dvakrát promyjí (40 000 x g, 10 min., resuspandují se v redeionisované vodě). Konečné oeletky se rychle zmrazí (lázeň ze suchého ledu v ethanolu) v dvakrát “deTonŤSOvané-VOdě—a~ skl-aduj-í—se-pri—-7-3—OHV den pokusu se rozmražené synaptické membrány homogenisují v homogenisátoru pro tkáně Brinkmann Polytron (tm,

Brinkmann Instruments, Westbury, N.Y.) v 50 mM trisChydroxy(nethyl)-aminamethancitrútovém pufru, pH 7,1. Membrány se in12 kubují v 0,04 ’-í Sufact-AMPS X100 (tn, Pierce, Rockford, IL) v pufru po dobu 20 minut při teplotě 37 °C a promyjí se šestkrát centrifugací (43 000 x g, 10 min.) a resuspendují se v pufru. Konečné peletky pro test vázání na receptory se homogenisují v poměru 200 mg vlhké hmotnosti na ml pufru.

Pro vazbu /^HZ-glycinu na fí-methyl-D-aspartátový receptář se 20 nM /^H/-glycin (40 až 60 Ci/mmol, New England Nuclear, Boston, MA) inkubuje s membránami suspendpvanými v 50 mM tris(hydroxymethyl)aminamethancitrátavém pufru, pH 7,1 po dobu 30 minut při teplotě 4 °C. Pro definování nespecifické vazby se použije glycin 1 mM. Vázaný /^H/-glycin se isoluje od volného za použití Brandelova zařízení pro sbírání buněk vakuovou filtrací (Biomedical Research and Development ''L*á bci* ra t oři esT* C a 11 Herš bur'g7*^; M0 )*na* f i l‘t rtTze'**? i< í e n ěny ch* v 1 á^* ken (Uhatman GF/3, Brandel, Gaithersburg, M0) předem napojených v 0,025 % pólyethyleniminu. Vzorky, které byly zadrženy na filtrech ze skleněných vláken, se třikrát propláchnou celkem 2,5 ml ledem vychlazeného pufru. Radioaktivita se stanoví kapalnou scintilačhí metodou. Hodnoty IC^g se získají regresní analysou nejmenších čtverců logit-log transformací dat.v Typické IC5Q hodnoty pro sloučeniny posle vynálezu jsou ilustrovány .ίο sloučenině podle příkladu 1 (IC^ = 30 nrl), podle příkladu 3 (IC₅g = 97 nM) a podle příkladu la ClC^g = 1,0 /uM). .

Metodologie pro kontrakce ilea morčat vyvolané glutamátem js popsána v-práci Luzzi a j., Br. 0, Pharmacol., 95,

1271 až 1277 (1939). Odstraní se podélný sval a připojené myentericks pletiva a. umístí se do okysličeného modifikovaného Krebs-Henseleitova roztoku (113 mM NaCl, 4,7 mM KC1,

2,5 mM CaC^, 1,2 mM KH^PO^, 25 mM NaHCOj a 11 mM glukosa).,. Tkáně se suspendují na skleněných tyčinkách lázně, pro orgány za klidového napětí 0,5 g. Po počáteční depolarisaci 30 mM draslíkem se odstraní možná blokáda ΝΜ0Λ komplexu receptorového kanálku magnesiem a 100 ^uM glutamátem se vyvolají trhavé reakce. Registrují se mechanické isometrické reakce.

Tkáně se ekvilibrují alespoň 2 hodiny před přidáním sloučeniny .

Vytvoří se tak křivka závislosti na dávce testované látky podmíněná hodnotou glutamátem vyvolaných kontrakcí. Glutamátem vyvolané kontrakce se generují v 20 minutových intervalech, přičemž se testovaná sloučenina přidává 5 minut před glutamátem. Velikost kontrakce při každé dávce neznámé látky se vyjadřuje relativně vůči kontrole, třetí kontrakce se vyvolává působením 100 samotného glutamátu ve stejné lázni na tkáně. Hodnota IC^q se získá regresí nejmenších čtverců lagit-log transformací dat. Typické hodnoty pro sloučeniny podle vynálezu jsou ilustrovány pro sloučeninu podle příkladu 1 (IC^g = 0,11 ^uM) a pro sloučeninu podle příkladu 3 (IC₅₀ = 1,0 /UM). . _ . .

Po poslední kontrakci se pro křivku závislosti na dávce do lázně přidá 100 ^uM glycín, a to 10 minut po předchozím přidání glutamátu..Po 10. minutách se stanovená IC^g převede přidáním testované sloučeniny na IC^g a po 10 minutách sa přidá glutamát pra vyvolání kontrakcí. Glycinový zvrat je schopnost glycinu soutěžit s neznámou látkou a. preventivně bránit inhibici před tím vyvolanou·dávkou neznámé látky.

Při testování in vivo za použití ischemického modelu tarbík.a se dospělé samice mongolského tarbíka (50 až 70 g) anestetisují 2 až 3 % halothanem. Ma zádech se odkryjí bilaterální běžné krkavicové arterie a uzavřou se mikroaneurismatickými sponami. Po 10 minutách (pokud není uvedeno jinak) se spony odstraní a obnoví se tok krve přes krkavicové arterie a kůže se zašije. Testované sloučeniny se aplikují intraperitoneálně jak před uzavřením, tak po uzavření, n-apříklad 45 minut před a 5 minut po uzavření krkavicových arterií. XonťrolTrí—zvíŤata~se—ošetří—ste-jným-způsobem-k-romě—t-oho—ž-e— se arterie neuzavřou sponkou. Pozoruje se celkové chování a motorická aktivita se registruje dvě hodiny během prvého dne (24 hodin) po uzavření. Po 4 dnech se zvířata zabijí (dekapitací), mozky se vyjmou, fixují, rozřežou a zbarví se herna14 toxylin/eosinem a kresylvioletí.

Řezy mozku se hodnotí na poškození neuronů v hippokampu za použití následující stupnice :

= nepoškozené, normální = mírně poškozené (až do 25 %) - vymezené na hranici

CAl/subiculum = středně poškozené (až do 50 %) - dobře zřetelné poškození omezené na méně než polovinu CA1 pole = značně poškozené (až do 75 - zahrnující více než polovinu CA1 pole ~ poškození zasahující na druhou stranu CA1 pole

Výsledky se uvádějí jako procenta ochrany neuronů dosažená příslušnou dávkou a režimem dávkování.

Z každého mozku se vyhodnocují řezy (7 ^um). Občas může být pozorováno asymetrické poškození a pro hodnocení se použije průměrná hodnota obou stran. Zaznamenává se průměrné poškození mozku pro každou skupinu a stupeň poškození ze skupiny ošetřené drogou se srovnává se skupinou ošetřenou nosičem za použití Uilcoxcon-Rankova sumárního testu.

Typické hodnoty při tomto testu pro sloučeniny podle vynálezu jsou ilustrovány následujícími výsledky : pro sloučeninu podle příkladu 157% ochrana neuronů (vzhledem ke kontrole) při dvojnásobné aplikaci dávky 20 mg/kg tělesné hmotnosti intraperitoneálně (ip) podle výšo popsaného režime, % ochrana neuronů při dávce 30 mg/kg tělesné hmotnosti ip třikrát, a to 15, 30 a 45 minut po vyvolání isenemie, pro sloučeninu podle příkladu. 3 03 % ochrana neuronů při dávce dvakrát 30 mg/kg tělesné hmotnosti ip podle výše popsaného režimu, pro sloučeninu podle příkladu la 73 % ochrana neuronů při dávce dvakrát 20 mg/kg tělesné hmotnosti ip. podle výše popsaného režimu.

Předložený vynález je blíže objasněn v následujících příkladech, které jeho rozsah žádným způsobem neomezují, a kde, pokud není uvedeno jinak, jsou :

ítí <ηΐΛ·; ίλΙ, *4-VII (i) teploty uvedeny ve stupních Celsia (°C), jednotlivé operace se provádějí při teplotě místnosti, to je v teplotním rozmezí od 10 do 25 °C, (ii) odpařování rozpouštědla se provádí na rotačním odparováku za sníženého tlaku (600 až 4900 Pa) při teplotě lázně do 60 °C, (iii) rychlá chromatografie se provádí na 40 ^uM silikagelu , balení pro rychlou chromatografií od J. T. Bakera, chromatografie v tenké vrstvě (TLC) se provádí na Analtech 0,25 mm silikagelových CHLF destičkách (druh 21521), dostupných od firmy Analtech, Newark, OE, USA, _(iv) průběh reakcí se obecně sleduje TLC a reakční časy jsou uváděny pouze pro ilustraci, (v) tepl.oty tání jsou nekorigovány a (rozkl.) znamená rozklad, uvedené teploty tání jsou ty, které byly získány pro připravované látky, při některých přípravách- může při isolaci látek, s různými ..teplotami tání vzniknout polymorfismus, (vi) všechny konečné produkty byly podle TLC v podstatě čisté a mají přiměřená spektra nukleární magnetické resonance (NMR) a mikroanalytická data, (vii) výtěžky jsou uváděny pouze pro ilustraci, (viii) snížené tlaky jsou uváděny v pascalech Pa, (ix) chemické symboly mají obvyklé významy, jsou použity následující zkratky : obj. (objem), hmot. (hmotnost), t.t. (teplota tání), 1 (litry), ml (mililitry), mM (milimoly), g (gramy), mg (miligramy), _(x) poměry rozpouštědel jsou dány v poměru objem : objem (obj./obj.), pokud není uvedeno jinak, a (xi) jsou používány běžné zkratky, jako jsou NMR (nukleární magnetická resonance), br (široký), THF (tetrahydrofuTaO)~0MSO^—(-ΰτπίθΙΚγΙ’ΒαΊ'ΐαχΙ^·)—QMF“ (“dime thyl-form amird-)—T-f-A(trifluoroctová kyselina) atd.

Příklady provedeni vynálezu

Příklad 1

8-chlor-2,5-dihydro-2,5-dioxo-3-hydroxy-lH-benz/b/azepin /vzorec I, kde R¹=R²=R⁴=K₁ R³=C1/

K roztoku 1,01 ml ¢1,0 M, C^C^) bromidu boritého v 1,3 ml bezvodého methylenchloridu se v atmosféře dusíku přidá 3-chlor-2,5-dihydro-2., 5-dioxo-3-methoxy-lH-benz/b/azepin /vzorec II, kde R¹=R²=R⁴=H, R³=C1, R⁵=CH₃/ (0,0709 g, 0,332 mM). Suspenss se míchá při teplotě místnosti po dobu 0,42 hodiny. Reakční směs se naleje do 7 ml nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a míchá se po dobu 0,25 hodiny.. Pomalým přidáváním koncentrované kyseliny chlorovodíkové se pH homogenního roztoku upraví na 5. Sraženina se odfiltruje za sníženého tlaku ajpromyje se vodou, přičemž se získá ™ 0,0683 g (92 %) bílé pevné látky, která se překrystaluje z ' ml DMF a 1 ml vody. Po ochlazení v lázni s ledem se pevná látka odfiltruje za sníženého tlaku, promyje se vodou a vysuší se za sníženého tlaku při teplotě 100 °C a 15 Pa. Získá‘-se 0,056 g (75 %) produktu, t.t. 308,5 až 310,5 °C (rozkl.),

NMR (DMS0-d₆, 300 MHz) : 11,57 (s, 1H, N-H), 10,06 (br S,

1H, 0-H), 8,04 (d, 1H, 3_Qrtho=3,7 Hz), 7,54 (d, 1H, 0_meta=

2,0 Hz), 7,31 (dd, 1H, 3_ortho=e,7, J_meta=2,0 Hz), 6,41 (5,

1H).

fc.

> i|H>—

Analysa pro C^gH^ClNO^ vypočteno : 53,71 C, 2,70 H, 6,26 N nalezeno : 53,30 C, 2,74 H, 6,29 N

Příklady la až le popisují a zahrnují postupné stupně syntesy meziproduktu používaného pro přípravu sloučeniny uvedené v názvu v příkladu 1.

Příklad, la (postup A) ..

0-chlor-2,5-dihydro-2,5-dioxo-3-mcthoxy-lH-benz/b/azepin /vzorec II, kde R¹=R²=R⁴=H, R³ = C1, R⁵ = C!I-j/

K 4,1 ml koncentrované kyseliny sírové ochlazené v lázni s ledem se přidá 7-chlor-2-methoxy-l,4-naftochinon /vzorec III, kde R¹=R²=R⁴=H, R³=C1, R⁵ = CH-j/ (0,71 g, 3,2 mM).

Vzniklý studený červený roztok se míchá v atmosféře dusíku a přidá se azid sodný (0,23 g, 3,5 mM). Reakční směs sc udržuje v lázni s ledem po dobu 0,33 hodiny a potom se nechá ohřát na teplotu místnosti a udržuje se na tého teplotě po dobu 10 hodin. Reakční směs se potom znovu ochladí v lázni s ledem a .přidá ..se další. azid.„sodný. .(0., 21 g,. 3,2_;.rnM). Po. 0,33 hodinách se směs nechá ohřívat na teplotu místnosti, přičemž toto.ohřívání 'trvá 20 hodin. Pak'se směs ještě': jednou .ochladí' v lázni, s ledem a přidá se azid sodný ζ0,21 -g, 3,2 mít). Směs se udržuje v lázni s ledem po dobu 0,33 hodiny a potom při teplotě místnosti po dobu 60 hodin. Pak se reakční směs naleje do 200 ml ledem ochlazeného nasyceného vodného roztoku hydrogenuhli-. čitanu sodného. Vzniklá .sraženina se odfiltruje, promyje.vodou a po vysušení za sníženého tlaku (25 °C, 15 Pa) se získá.

0,343 g (45 %) tmavé pevné látky. Tato pevná látka se překrystaluje z 3 ml DMF a 1 ml vody a získá se 0,2 g (26 %) bílé pevné látky, NMR (DMSQ-d^, 250 MHz) : 11,39 (s, 1H, N-H),

7,93 <d, 1H, 3_o._r._tho=Q,8 Hz), 7,47 (d, 1H, □_fneta=l,7 Hz), 7,23 <dd, ^1H> ³ortho ^{= S}’^{a Hz}> ³mcta ^{= 1}>⁷ <^s> ³>^aa_

Cs, 3H).

Příklad la (postup 0)

8-chlor-2,5-dihydro-2,5-dioxo-3-methoxy-lH-benz/b/azepin /vzorec II, kde R¹=R²=R⁴=H, R³=C1, R⁵=CH₃/

IQ

K trifluornethansulfonové kyselině (153 ml) ochlazená v lázni s ledem se v atmosféře dusíku přidá 7-chlor-2-methoxy1,4-naftochinon /vzorec III, kde R^R^R^sií, R^Cl, R⁵=CH^/ (14,74 g, 66,2 tnM). Roztok se míchá v atmosféře dusíku a přidá se azid sodný (4,74 g, 73,0 mM). Reakční směs se udržuje v lázni s ledem po dobu 0,33 hodiny a potom se nechá ohřát na teplotu místnosti a na této teplotě se udržuje po dobu 90 hodin. Reakční směs se znovu ochladí v lázni s ledem a přidá se další dávka azidu sodného (2,15 g, 33,1 mM). Po 0,00 hodiny se směs nechá ohřívat na teplotu místnosti po dobu 19 hodin. Reakční směs se potom naleje do ledem ochlazeného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného (153 g, 1,32 M v 2,3 1). Vzniklá sraženina se odfiltruje, promyje vodou a po vysušení za sníženého tlaku (25 °C, 15 Pa) se získá 13,33 g světle hnědé pevné látky. Tato pevná látka se překrystaluje z 330 ml horkého DMF. Po ochlazení v lázni s ledem se pevná látka odfiltruje, promyje studeným DMF a potom vodou a po vysušení*za sníženého tlaku (25 °C, 15 Pa) se získá 3,12 g (52 %) světle hnědé pevné látky, t.t. 340 až 342 °C (rozkl.).

Analysa pro C^^HgClNO-j vypočteno : 55,60 C, 3,39 H, 5,09 N nalezeno : 55,35 C, 3,38 H, 6,07 N

Příklad lb

7-chlor-2-methoxy-l,4-naftochinon /vzorec III, kde R¹=R^=R^=

H, R³ = C1, R⁵ = CH₃/ --------- ------K 14 ml 4 % (hmot./hmot.) chlorovodíku v methanolu se v atmosféře dusíku při'teplotě místnosti přidá 7-chlor-2-hydroxy-l,4-naftochinon /vzorec III, kde R^=R^=R⁴=R^=h, R³=C1/ (0,73 g, 3,5 mM). Roztok se zahřívá k varu po dobu 0,5 hodiny. Po ochlazení na teplotu místnosti se vzniklá sraženina odfiltruje a promyje methanolem. Po vysušení za sníženého tlaku (25 °C, 15 Pa) se získá 0,72 g (92 %) oranžové pevné pevné látky, NMR (OMSQ-dg, 250 MHz) : 0,10 Cd, 1H, 2

Hz), 0,04 (d, 1H, 3_octho = 0,3 Hz), 7,71 (dd, 1H, 3_ortho=M, ³neta⁼²’^{2 Hz)}’ ^{6,19 Cs}’ ^1H)’ ³’^{92 ÍS}’ ^3Η)*

Příklad 1c

4

7-chlor-2-hydroxy-l,4-naftochinon /vzorec IV, kde R =R =R = H, R³=C1/

7-chlor-l-tetralon /vzorec V, kde R^=R²=R^=H, R³=C1/ <27,5ó g, 0,153 mol) rozpuštěný v 445 ml bezvodého terc.butanolu se při teplotě místnosti během jedné hodiny přidá do roztoku čerstvě sublimovaného terč.butoxidu draselného (102,7 g., O',91ó mol) v 1,.15 1 bezvodého terč.butanolu nasyceného kyslíkem. Roztokem.se probublává kyslík po dobu 2 hodin po skončeném přidávání. Směs .sé naleje do míchané ledem ochlazené kyseliny chlorovodíkové (1,9 1, 2 N) a extrahuje se diethyletherem. Etherové extrakty- se zahustí za sníženého tlaku a získá ss žlutá pevná látka, íterá se rozmělní s ethylacetátem. Pevná látka se-odfiltruje, promyje vodou a vysuší se za sníženého tlaku (25 °C, 15 Pa). 19,5 g této žluté pevné látky se potom vyjme do 0,5 1 horkého ethylacetátu a pak se roztok zahustí na 50 ml. Ochlazením roztoku v lázní s ledem se iniciuje krystalisace. Pevná' látka se odfiltruje, promyje studeným ethylacetátem a hexanem. Po vysušení za sníženého tlaku (25 °C, 15 Pa) se získá 7,10 g (22 ss) žlutých destiček, t.t. 215 až 216,5 °C.

l-tetralony se připraví postupem podle Newmana a Seshadriho (M. 5. Newman a S. Seshadri, 3. Org. Chem., 27, 76, (1962). 2-tetralony se připraví postupem podle Rosowskyho a

Org—Ch emT-y^ů—4-20Ů—(-1-9-6-3-)—5—7--d-i-b-r om—2—t-e-t-r-a-l-o n-s epřipraví z 3,5-dibrombenzylbromidu, který se připraví následujícím způsobem.

3,5-dibrombenzylbromid

3,5-dibromtoluen (78,92 g, 0,316 mol) se rozpustí v 1,27 chloridu uhličitého a k tomuto roztoku se při teplotě místnosti přidá N-bromsukcinimid (61,65 g, 0,346 mol). Přidá se dávka dibenzoylperoxidu (0,6 g, 0,000 ekvivalentu) a roztok se zahřívá k varu po dobu 2,5 hodiny. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti, přefiltruje se a rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku, přičemž se získá pevná látka. Tato pevná látka se rozpustí v 200 ml teplého hexanu, přefiltruje se a ochladí na teplotu místnosti. Potom následuje krystalisace, krystaly se odfiltrují a promyjí studeným hexanem a vysuší se na vzduchu. Získá se 45,15 g ( 44 ⁵í) 3,5-dibrombenzylbromidu. ^ΧΗ-ΝΗΗ (C0Cl_}) : ^7,6 (111), 7,47 (2H), 4,36 (2H).

Příklad ld

7-chlor-l-tetralon /vzorec V, kde R * = R² = R ⁴ - Η, R^Ol/ i»

Ke 150 g horké kyseliny polyfosforečné (90 °C) se přidá 4-chlorfenylbutanová kyselina /vzorec VI, kde R¹=R^=R⁴=H, r}=C1/ (26,62 g, 134,0 mM) a reakční směs se udržuje po dobu 0,33 hodiny na teplotě 90 až 95 °C. Po ochlazení na teplotu místnosti se reakční směs přidá do 400 ml ledem ochlazené vody. Roztok se nechá ohřát na teplotu místnosti a nechá se vysrážet. Pevná látka se odfiltruje, promyje vodou a vysuší se na vzduchu, čímž se získá 22,3 g (92 %) světle žluté pevné látky. Tato pevná látka se překrystaluje z 50 ml toluenu při teplotě -10 °C. Krystaly se odfiltrují a promyjí studeným toluenem a potom hexanem, přičemž se získá 13,10 g (75 %) světle žlutých krystalů, t.t. 100,3 až 101,1 °C.

Příklad ie

4-chlorfenylbutanová kyselina /vzorec VI, kde r1=r2=R⁴=h, R³=C1/

4-chlarbenzoylpropionová kyselina /vzorec VII, kde R^ = R²=R⁴=H, R⁵=C1/ (49,94 g, 234,9 mM) se rozpustí v atmosféře dusíku v 320 ml triethylenglykolu. K míchanému roztoku se při teplotě místnosti přidá hydroxid draselný (44,5 g, 794 mM) a potom 90 % hydrazinhydrát (29,0 g, 500,0 mM). Směs se zahřívá k varu (142 °C) po dobu 2 hodin. Voda a hydrazinhydrát se oddestilují za atmosférického tlaku, teplota v reakční nádobě stoupne na 195 až 200 °C. Po 0,5 hodiny při 195 až 200 °C sc směs ochladí na teplotu místnosti a zředí se 320 ml vody.

Vodný roztok se naleje do kyseliny chlorovodíkové (200 ml,

N) a zředí sc dalšími 200 ml ledové vody. Reakční směs se n-e.chá—s-t.á.t.,_v.z.nÁk.l.á_p.e.v..ná_l.á-tk.a_S-e_odfiltru ie_f promv.ie vodou a vysušením za sníženého tlaku (25 °C, 15 Pa) se získá 43,61 g (93 %) bílé pevné látky.

Příklady 2 až 6

Postupy analogickými podle příkladu 1 se připraví řada

2,5-dihydro-2,5-dioxo-3-hydroxy-lH-benz/b/azepinů obecného vzorce I. V tabulce I, níže, jsou identifikovány všechny tyto sloučeniny uvedením jejich jednotlivých substituentů R¹ (i znamená celé číslo odpovídající označení substituentu ve vzorcích) a uvedením jejich obsahů C, H a N podle analysy a dále jejich teplot tání. Tabulka II, níže, také identifikuje každou připravenou sloučeninu a uvádí dále NMR spektra.

£řlkl-a-d-y_2-3_a.ž_6.a_

Příklady 2a až 6a popisují methylethery obecného vzorce II jakožto meziprodukty pro přípravu odpovídajících sloučerfin podré^ríklačlu^-2^—áž^—67“TahUTká^-^rri“n'í*ž'e~identTfŤku-j-e všechny tyto meziprodukty a uvádí ^H-NMR spektra. Všechny tyto methylethery byly připraveny podle postupů analogických postupům podle příkladu la, postup A nebo podle příkladu la, postup B. Použité postupy pro každý meziprodukt jsou zmíněny v tabulce III.

Příklady 2b až 6b

Příklady 2b až 6a popisují řadu 2-methoxy-l,4-naftochinonů obecného vzorce III použitelných pro přípravu každého odpovídajícího methyletheru jakožto meziproduktu podle příkladů 2a až 6a. Tabulka IV identifikuje všechny tyto sloučeniny a uvádí NMR spektra.

Příklad 2c

Příklad 2c (tabulka V) popisuje ó-chlac-2-hydroxy-l,4naftochinon použitelný při přípravě odpovídajícího 6-chlormethyletheru podle příkladu 2b. Tato sloučenina byla připravena přímo podle práce J. M. Lyons a R. H. Thomson, J. Chem. Soc., 1953, 2910 až 2915. Lyons a Thomoson sice ve své práci popisují jiný isomer, ale předpokládá se, že jejich původní označení této sloučeniny bylo chybné.

Λ “J

Příklady 3c až 6c *

Příklady 3c až 6c popisují řadu 2-hydraxy-l,4-naftochinonů obecného vzorce IV, které se používají pro přípravu odpovídajících methyletherů podle příkladů 3b až 6b. Tabulka V identifikuje všechny tyto sloučeniny a uvádí NMR spektra.

Příklady 3d až 4d

Příklady 3d až 4d popisují řadu 1-tetralonů použitelných pro přípravu odpovídajících 2-hydroxy-i,4-naftochinonů podle příkladů 3c až 4c. Tabulka VI identifikuje všechny tyto sloučeniny a uvádí NMR spektra.

Příklady 5d až ód

Příklady 5d až 6d popisují řadu 2-tetralonú obecného vzorce Va použitelných pro přípravu odpovídajících 2-hydroxy1,4-naftochinonú podle příkladů 3c až 4c. Tabulka VII identifikuje všechny tyto sloučeniny a uvádí NMR spektra.

Příklad 7

Je popsán syntetický postup přípravy titulní sloučeniny podle příkladu 7 (sloučenina jo identifikována a charakteri-sov-á-Fi-a—s-v-ý-m-i— da-t-y—v—t-a-bu-l-ce—I—a—v_t.a.b.ul.c.e_I.I-)_p-O.s_t-U o_e.m podle výše uvedeného schématu I (R^=R^=F, R^=R^=H, R^=isopropoxyskupina), který se- provádí následovně :·

5.7- dif luor-2-ínethoxy-l, 4-naf tocninon (sloučenina 23)

Roztok 0,43 g (13,2 mM) bezvodého chlorovodíku v 15 ml methanolu se nechá reagovat s 0,175 g (0,694 mM) 5,7-difluor2-isopropoxy-l,4-naftocninonu. Směs se zahřívá k. varu po dobu 0,33 hodiny, ochladí se na. teplotu místnosti a zahuštěním za sníženého tlaku se získá 0,13 g produktu. ^H-NMR (OMSO-d^) : / 7,3 (m, 1H), 7,63 (dd, 1H, 3_H„_Fortho=7,5 Hz), 6,31 (s,

1H), 3,36 (s, 3H).

5.7- difluor-2-isopropoxy-1,4-naftoch.inon (sloučenina 10)

Roztok 0,55 g (2,1 mM) 5,7-difluor-1,4-dihydroxy-2-isopropoxynaftalenu v 20 ml diethyletheru se přidá během 0,05 hodiny k míchanému roztoku 4,05 g (25 mM) chloridu Železitého-..v 46_Tml,vody a 12 ml^-isopropanolu,. p rTč^žJs^é _ p rac uje^-p'ř'i“ teplotě místnosti. Směs se míchá po dobu 0,75 hodiny a potom se extrahuje ethylacetátem. Organické extrakty se vysuší síranem sodným, přefiltrují se a zahuštěním se získá 0,44 g světle hnědé pevné látky, která se překrystaluje ze 3 ml tep24 lé kyseliny octové a několika kapek vody. Po ochlazení na teplotu místnosti se pevná látka odfiltruje, promyje acetonitrilem a potom vodou, načež se vysuší za sníženého tlaku při teplotě místnosti a získá se 0,057 g žluté pevné látky, t.t. 172,0 až 173,2 °C, ¹H-HMFÍ (CDCl-*) : ^7,60 (dd, 1H), 7,15 (m, 1H), 6,09 (s, 1H), 4,55 (m, 1H), 1,45 (d, 6H).

5,7-difluor-1,4-dihydroxy-2-isopropuxynaftalen (sloučenina 16)

Roztok 2-hydroxy-3-isopropoxy-2-(3,5-difluorfenyl)-3cyklobutenonu v THF, viz dále, se zředí 49 ml ρ-xylenu a potom se zahustí na 16 ml. P-xylenový roztok se potom zředí na celkový objem 40 ml přidáním dalšího p-xylenu a zahřívá se k

.. -- -J. — ,, __tl[ —..míjí. 11' inř'.''- JH-·''· —π ,·*^ i—h* tiufcmfcmWwwiiHW la.id *'» i** “ - W*·.' varu v atmosféře argonu po dobu 0,42 hodiny. Rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku a získá se 0,37 g jantarově žlutého oleje. MS (Cl, CH^) : m/e = 255 (M⁺+l, základní pík),??

2-hydroxy-3-isopropoxy-r2-(3,5-difluorfenyl)-3-cyklobutenon (sloučenina 14)

0,753 g (3,9 mM) 3,5-difluorbrombenzenu v 24 ml bezvodsho předestilovaného THF se ochladí v atmosféře argonu na -75 °C a během 0,033 hodiny se přidá 2,34 ml n-butyllithia (1,54 M v hexanu). Směs se udržuje při teplotě -75 až -70 °C po dobu 0,42 hodiny a potom se přenese pomocí kanyly během 0,17 hodiny k -75 °C studenému roztoku 0,46 g (3,3 mM) 3-išopropoxy-3-cyklabuten-l,2-dionu v 60 ml bezvodého předestilovaného THF. Roztok se udržuje na teplotě -75 °C po dobu 0,33 hodiny, načež se přidá 1,4 ml vody a v míchání se pokračuje po dobu 0,17 hodiny.. .Reakční roztok .se potom naleje do směsi drceného ledu a diethyletheru. Fáze se oddělí a vodná fáze se|extrahuje dalším diethyletherem. Spojené organické extrakty se vysuší síranem sodným, přefiltrují se a zahuštěním se získá roztok produktu v THF. MS (Cl, CH^) : m/e = 255 (M⁺+i, základní pík).

3-isopropoxy-3-cyklobuten-l,2-dion (sloučenina 12)

7,38 g (36,9 mil) 2,3-diisopropoxy-4-hydroxy-2-cyklobutenonu ve 116 ml methylenchloridu se míchá při teplotě místnosti s 2 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové po dobu 1 hodiny. Roztek se zneutralisuje a vysuší uhličitanem draselným a síranem sodným, přefiltruje se a zahuštěním za sníženého tlaku se získá 5,14 g červeného oleje. Tento olej se čistí rychlou chromatografií na oxidu křemičitém (7,5 cm průměr x 10 cm kolona) za použití směsi diethyletheru a hexanu (1:1) jako elučního činidla. Zahuštěním hlavní frakce se získá 4,14 .□ (30 5;) žlutého oleje. ^II-MMR (CDCl?) : (f 3,43 (s, 1H), 5,02 (m, 1H), 1,49 (d, 611), MS (Cl, CH^ : m/e = 141 (M⁺ + l), 99 (základní pík).

2,3-diisopropoxy-4-hydroxy-2-cyklobutenon (sloučenina 13)

Roztok 10,02 g (50,55 mM) 3,4-diisopropoxy-3-cyklobuten1,2-dionu ve 100 ml bezvodého předestilovaného THF se ochladí na -10 °C a během 0,66 hodiny se nechá reagovat s roztokem 16,0 g (63,1 mM) lithiumtri-Ctsrc.butoxy)aluminiumhydridu v 63 ml bezvodého předestilovaného THF, přičemž se vnější teplota udržuje na -5 až -10 °C. Teplota se udržuje další 0,5 hodiny na -5 °C. Reakční směs se přidá k míchanému nasycenému vodnému roztoku vinanu sodno-draselného a 50 ml diethyletheru. Organická vrstva se oddělí a vodná fáze se extrahuje diethyletherem. Spojené extrakty se vysuší síranem sodným, přefiltrují a zahuštěním za sníženého tlaku se získá 3,12 g žlutého oleje. Tento olej se čistí rychlou chromatografií na oxidu křemičitém (kolona 7 cm průměr x 0,5 cm) za použití směsi diet h y tet her u^_a~h ex an u—(-l-;-l-)-ýj a ko-e-l-u čn-í-ho-ě-i-n-i-d-l-a-^Z-a hu-š-tě nim— hlavní frakce se získá 7,30 g (73 %j bezbarvého oleje.

H-NMR (COC1,) (m, 3H), 2,65 (br s, 1H), 1,42 (d,

6H), 1,30 (m, 6ff), MS (Cl, CJI₄) : m/e = 201 (M⁺+l), 159 (základní pík).

i

Příklad 3

V tomto příkladu jsou uvedeny representativní' farmaceutické dávkové formy obsahující sloučeninu obecného vzorce X nebo obecného vzorce II, například jak jsou popsány v kterémkoliv z. předcházejících příkladů (zde jsou označovány jako sloučenina X), pro terapeutické nebo profylaktické použití u lidí :

(a) tableta mg/tabletu

sloučenina X	50,0
mannitol, USP	223,75
sodná sůl crosčarmellošy	6,0
kukuřičný škrob	13,0
hydroxypropylmethyleelulosa (HPMC), USP	2,25 '
stearát hořečnatý	3,0
(b) kapsle
sloučenina X	10,0 ^;
mannitol, USP	403,5 *
sodná sůl croscarmellosy	15,0
stearát horečnatý	1,5

Výše uvedené přípravky se získají obvyklými postupy známými z farmaceutické praxe. Tablety mohou být povlečeny pro uvolňování ve střevech obvyklými způsoby, například mohou být povlečeny acetátftalátem celulosy.

Příklad 9

Dále je popsána příprava injikovatelnáho přípravku, obsahujícího sloučeninu podle příkladu 1.

Připraví se řada vodných roztoků sloučeniny podle příkladu 1 v různých koncentracích. Vodný roztok přípravku vhodného pro intravenosní aplikaci obsahující 3,5 mg/ml sloučeniny podle vynálezu se připraví (1) rozpuštěním Megluminu (N-methylglukamin) ve vodě v takovém množství, aby vznikl roztok obsahující 19,5 mg/ml, (2) rozpuštěním sloučeniny podle vynálezu v roztoku v takovém množství, aby se dosáhlo koncentrace sloučeniny podle vynálezu 3,5 mg/ml, a (3) přidáním chloridu sodného nebo dextrasy v takovém množství, aby se dosáhlo isotonicity.

_Lze také připravit přípravky s koncentracemi sloučeniny podle vynálezu menší než 3,5 mg/ml.

Tyto přípravky se vyrábějí typickými postupy známými pro výrobu parenterálních přípravků, například za použití ultrazvuku, aby se dosáhlo rozpuštění sloučeniny podle vynálezu.

Průmyslová využitelnost

Senz/b/azepinové.sloučeniny podle vynálezu lze použít k přípravě farmaceutických prostředků používaných pro léčení neurologických poruch.

- 23 Analytická data a teploty tání pro 2,5-dihydro-2,5-dioxo-3-hydroxy-lll-benz/b/azepiny «λΜΜΗΜ □

Claims

1. Sloučenina obecného vzorce I nebu její farmaceuticky přijatelná sůl nebo sloučenina obecného vzorce Π

ΑΛ3Γ90V n* 0 λΖΞίνΝλΛ Odd n’ UL ován (I).----Z---- 2 6 xi Q ε fť H 0 i * oas? a C 0 l

ve kterých 12 3 4

R , R , R a R jsou nezávisle na sobě vybrány ze skupiny zahrnující atom vodíku, perfluoralkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, atom halogenu, nitroskupinu a kyanoskupinu, a R^ je alkylová skupina s 1 až 5 atomy uhlíku, pro léčení neurologických poruch.

2Sloučenina- podle nároku 1, kde 12 3 4

R , R , R a R jsou nezávisle na sobě vybrány ze skupiny zahrnující atom vodíku, trifluorrnethyl, pentafluorethyl, heptafluorpropyl a atom halogenu, a j_e vybráno ze skupiny zahrnující methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, pentyl, isopentyl a neopentyl, pro léčení neurologických poruch.

5. Sloučenina podle nároku 2, kde 12 3 4

R , R , R a R jsou nezávisle na sobě vybrány ze skupiny zahrnující atom vodíku, trifluormethyl a atom halogenu,

R^ je vybráno ze skupiny zahrnující methyl, ethyl a propyl, pro léčení neurologických poruch.

4. Sloučenina podle nároku 3, kde 12 3 4

R , R , R a R jsou nezávisle na sobě vybrány ze skupiny zahrnující atom vodíku, atom fluoru, atom chloru a atom bromu, a R. je vybrána ze skupiny zahrnující methyl a ethyl, pro léčení neurologických poruch.

5. Sloučenina podle nároku 1, vybraná ze skupiny zahrnující :

3- ch lor-2,5-dihydro-2,5-dioxo-3- hydroxy- lll-benz/b/azepin,

7-chlor-2,5-dihydco-2,5-dioxo-3-hydroxy-lH-bonz/b/azepin,

3-'orom-2,5-dinydro-2,5-cioxo-3-hydroxy-lll-benz/b/azepin, 3-fluor-2,5-dihydru-2,5-dioxo-3-hydroxy-lřl-benz/b/azepin, á , u-dichlor-2,5-di hy dra-2,5-dioxo-3-'nydroxy-lil-benz/b/azepin,

6.3- dibrom-2,5-dihydro-2,5-dioxo-3-hydroxy-lll-bcnz/b/azepin,

6.3- dif.luar-2,5-dihydro-2,5-diaxo-3-hydroxy-l!f-benz/b/azepin, její farmaceuticky přijatelná sul a její alkylenolethery, kde alkylová skupina má 1 až 5 atomů uhlíku, pro léčení neurologických poruch.

ó.

Farmaceutický prostředek pro léčení neurologických _p_a.r_u.ch-,—v_y_z_n_a_č_u_j_í_c_í-s_e-t—í—m—ž-e—abs-a-hu^-esloučeninu obecného vzorce I, její farmaceuticky přijatelnou sůl· nebo sloučeninu obecného vzorce II, kde

3 4

R a R jsou nezávisle na sobě vybrány ze skupiny za ,1 n2.

_hrnující atom vodíku, pernuorarkylovou ,skupinu s. 1 _až 3_ atomy uhlíku, atom halogenu, nitroskupinu, kyanoskupinu a

R^ je alkylová skupina s 1 až 5 atomy uhlíku, spolu s farmaceuticky přijatelným ředidlem nebo nosičem.

7. Farmaceutický prostředek podle nároku 6, vyznačující se tím, že jaku sloučeninu obecného vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl nebo sloučeninu obecného vzorce II obsahuje sloučeninu, kde

R², R³ a R⁴ jsou nezávisle na sobě vybrány ze skupiny zahrnující atom vodíku, trifluormethyl, pentafluorethyl, heptafluurpropyl a atom halogenu, a

R je vybráno ze skupiny zahrnující methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isubutyl, pentyl, isopentyl a neopentyl.

0. Farmaceutický prostředek podle nároku 7, v y z na čující se tím, že jako sloučeninu obecného vzor ce I nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl nebo sloučeninu

......... ....... ·Ι·Ι1»Γ *' ,· II * IfRWWUlHW. il -X . ,, j#M obecného vzorce II obsahuje sloučeninu, kde 12 3 4

R , R , R a R jsou nezávisle na sobě vybrány ze skupiny zahrnující atom vodíku, trifluormethyl a atom halogenu, a

R je vybráno ze skupiny zahrnující methyl, ethyl a propyl.

9. Farmaceutický prostředek podle nároku 3, vyznačující se tím, že jako sluučeninu obecného vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl nebo sloučeninu obecného vzorce II obsahuje sloučeninu, kde 12 3 4

R , R , R a R jsou nezávisle na sobě vybrány ze skupiny zahrnující atom vodíku, atom fluoru, atom chloru a atom bromu,

R je vybráno ze skupiny zahrnující methyl a ethyl.

IQ. Farmaceutický prostředek podle nároku 6, vyzná čující se tím, že obsahuje sloučeninu vybranou ze skupiny zahrnující :

3-chlar~2,5-dihydro-2,5-dioxo-3-hydroxy-lH-benz/b/azepin, 7-chlor-2,5-dihydro-2,5-dioxo-3-hydroxy-lH-benz/b/azspin,

3-brom-2,5-dihydro-2,5-dioxo-3-hydroxy-lH-benz/b/azepin,

0-fluor-2,5-dihydro-2,5-dioxo-3-hydroxy-lH-benz/b/azepin,

6, Q-dichlor-2,5-dihydře-2,5-dioxo-3-hydroxy-lH-benz/b/azepin, ó,£j-dibrom-2,5-dihydro-2,5-dioxo-3-hydroxy-lH-benz/b/azepin, 6,8-difluor-2,5-dihydro-2,5-dioxo-3-hydroxy-lH-benz/b/azepin, její farmaceuticky přijatelné soli a její alkylenaletnery, kde alkylová skupina má 1 až 5 atomů uhlíku.

«,L·· -Γ κ . . <· '„·

11. Sloučenina obecného vzorce I nebo obecného vzorce II (I) cm ve kterých X 2 3 4

R , R , R a R jsou nezávisle na sobě vybrány ze skupiny zahrnující atom vodíku, perfluoralkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, atom halogenu, nitroskupinu a kyanoskupinu, a .R-L_j.e_alk-y-l-o-v-á—skjjp-i-na—s—1—a-ž—5—a-t-Om-y—u-hl-í-k-u-js tou výhradou, že když R¹ a R⁴ jsou atomy vodíku, R² a-R⁵nejsou oba (nezávisle) vybrány ze skupiny zahrnující atom vodíku a atom halogenu, a fa rm a c eu t i c k y^ p r i j at e 1 n é _r,s o.l i ₌ s 1 o u č e π i π... ob e c n é h c...: v z are e ·· I = ,

12. Sloučenina podle nároku 11, kde

17 3 4 , .

R , R , R a R jsou nezávisle na sube vybrány ze skupiny zahrnující atom vodíku, triíluormethyl, pentafluorethyl, heptafluorpropyl, a atom halogenu, a '

R^ je vybráno ze skupiny zahrnující methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, pentyl, isupentyl a neopentyl.

13. Sloučenina podle nároku 12, kde 17 3 4

R , R , R a R jsou nezávisle na sobě vybrány ze skupiny zahrnující atom vodíku, trifluormethyl a atom halogenu, a r5 j_G vybráno ze skupiny zahrnující methyl, ethyl a propyl.

14. Sloučenina podle nároku 13, .írfe •WHM a R jsou nezávisle na sobě vybrány ze skupiny zam ilWW*.. IMU.WII WIHHWII^I^.illlH.IM.mji^· _r Hl> , l> I ilf -i·»»» nmujíeí atom vodíku, atom fluoru, atom chloru a atom bromu, j_e vybráno za skupiny zahrnující methyl a ethyl.

15. Sloučenina podle nároku 11, vybraná ze skupiny zahrnující :

6.3- dichlor-2,5-dihydro-2,5-dioxo-3-hydroxy-l i 1-benz/b/azepin,

6.3- dibrom-2,5-dihydro-2,5-dioxa-3-hydroxy-lH-benz/b/azepin,

6.3- difluor-2,5-dihydro-2,5-dioxo-3-hydroxy-ΙΗ-benz/b/azepin a její alkylenolethery, kde alkylová skupina má 1 až 5 atomů uhlíku.

16. Způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelné soli, jak jsou definovány v nárocích laž3, vyznačující se tím, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce II

N

H

O

OR* (II)

39 s halogenidem boritým, a popřípadě se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce I s vhodnou basí poskytující fysiolagicky přijatelný kation, za vzniku farmaceuticky přijatelné soli.

17. Způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce II, jak je definuvána v nárocích 1 až 3, vyznačující se tím, že se nechá reagovat odpovídající alkylenoiether obecného vzorce III s azidem sodným v čisté trifluormethansulfonové kyselině nebo v koncentrované kyselině sírové.

IQ. Sloučenina vybraná ze skupiny zahrnující :

3-chlor-2,5-dihydro-2,5-dioxo-3-hydroxy-lH-benz/b/azepin,

7-chlor-2,5-dihydro-2,5-dioxo-3-hydroxy-lH-benz/b/azepin, z,

3-brom-2,5-dihydro-2,5-dioxo-3-hydroxy-lH-benz/b/azepin, a *

3-fluor-2,5-dihydro-2,5-dioxo-3-hydroxy-lH-benz/b/azepin, jejich farmaceuticky přijatelné soli a jejich alkylenolethery, kde alkylová skupina má 1 až 5 atomů uhlíku.