CZ290943B6

CZ290943B6 - Léková forma pro podávání kolagenázy na rány a způsob její výroby

Info

Publication number: CZ290943B6
Application number: CZ19972219A
Authority: CZ
Inventors: Michael Roreger; Heinz Einig
Original assignee: Knoll Ag
Priority date: 1995-02-02
Filing date: 1996-01-25
Publication date: 2002-11-13
Also published as: CZ221997A3; GR3036384T3; TR199700734T1; US6074664A; ATE201136T1; NZ300202A; EP0809489B1; SK101597A3; BG101802A; FI972949L; AU4487396A; NO973525L; PL182849B1; SK282578B6; PT809489E; AU707364B2; DE19503338C2; CN1182364A; ES2159013T3; BR9606997A

Abstract

L kov forma pro pod v n kolagen zy na r ny, kter je ve form plo n tvarovan ho f liov ho materi lu s n sleduj c kombinac specifick²ch vlastnost : je koherentn a tvarovateln², je co do aplika n plochy rozm rov stejn² nebo men ne plocha o et°ovan r ny, obsahuje mno stv kolagen zy v definovan m mno stv v homogenn rozd len form a je uzp soben ke kontrolovan mu uvol ov n kolagen zy; jako i zp sob jej v²roby.\

Description

Vynález se týká lékové formy pro podávání kolagenázy na rány a způsobu její výroby.

Dosavadní stav techniky

V oblasti léčení ran se podávají do ošetřované rány aktivní přísady, které ránu čistí a urychlují její hojení, jako je například směs enzymů, získaná z filtrátu kultury Clostridum hystolyticum, obsahující různé kolagenázy, klostripain a neutrální proteázy, dále pro zjednodušení označovaná jako kolagenáza, která, aby mohla být účinná, musí přijít do přímého styku s podkladovou oblastí rány pomocí lékové formy pro podávání, která se na základě své konzistence dá bez mezer položit na velmi nerovné plochy. K těmto lékovým formám patří roztoky, prášky, pudry a spreje nebo zpola pevné přípravky, jako jsou masti, krémy a želé.

Jejich hlavní nevýhoda spočívá v tom, že kvůli individuálnímu dávkování uživatelem nezaručují exaktní, reprodukovatelné a rovnoměrné dávkování kolagenázy po celé aplikační ploše, především při opakovaném použití. Kromě toho mají známé lékové formy další nevýhody. Roztoky, prášky, pudry nebo spreje sice umožňují vysoké využití aplikovaných kolagenáz, tj. to, že je největší díl podávané kolagenázy v ráně účinný, mají ale tu nevýhodu, že takto poskytovanou formou je možné podávání kolagenázy řídit jen ve velmi omezeném rozsahu. Má-li se například udržet v ráně rovnoměrně a po určitou dobu určitá koncentrace kolagenázy, je zapotřebí delšího ošetření, kdy se používá mnoha rychle uvolňovaných jednotlivých dávek, které se musí aplikovat v relativně krátkých intervalech. Masti a krémy nabízejí naproti tomu sice podstatně více možností k řízení uvolňování kolagenázy a prodloužení jejího působení, mají však na základě své lipofilie nevýhodu v relativně malém využití kolagenázy dodané do rány, protože velké části kolagenázy v průběhu aplikace nedifundují na okrajovou plochu směrem k ráně a tím se do ní nedají předat. Vymytím mastě nebo krému se tato část kolagenázy potom odstraní, aniž by mohla zapůsobit.

Použití moderních nosičů a dávkovacího systému účinných látek, jako například aplikovaných náplasťových systémů, které se nepřidávají do rány, ale přelepují se přes její okraje, nepřichází pro kolagenázu v úvahu, protože tato enzymová směs se smí kvůli svému proteolytickému působení dostat jen do rány, ale ne na její okraj a na okolní zdravou pokožku.

Úkolem předmětného vynálezu proto bylo nalézt nějakou lékovou formu, která se vyhýbá při ošetřování rány kolagenázou nevýhodám konvenčních lékových forem, ale uchovává si jejich výhody a umožňuje dávkování kolagenázy při opakovaném použití exaktně, rovnoměrně a reprodukované do podkladové oblasti rány.

Podstata vynálezu

Překvapivě bylo nalezeno řešení v lékové formě pro podávání kolagenázy na rány podle předmětného vynálezu, která spočívá v tom, že je ve formě plošně tvarovaného fóliovitého materiálu s následující kombinací specifických vlastností: je koherentní a tvarovatelný, je co do aplikační plochy rozměrově stejný nebo menší než plocha ošetřované rány, obsahuje množství kolagenázy v definovaném množství v homogenně rozdělené formě a je uzpůsoben ke kontrolovanému uvolňování kolagenázy.

Tato léková forma je dále podle vynálezu s výhodou uzpůsobena tak, že je vložitelná do rány jako skupina menších částí.

- 1 CZ 290943 B6

I l

Léková forma je dále podle vynálezu s výhodou před aplikací vložením do rány tvarově upravitelná podle tvaru plochy rány.

Léková forma je dále podle vynálezu s výhodou v tekutině rány rozpustná nebo rozložitelná, přičemž kinetika rozkladu kolagenázy závisí na rychlosti rozpouštění nebo rozkladu lékové formy.

Léková forma je dále podle vynálezu s výhodou odbouratelná a resorbovatelná v tekutině rány.

Léková forma je dále podle vynálezu s výhodou nabobtnatelná v tekutině rány, přičemž kinetika uvolňování kolagenázy závisí na její rychlosti eroze.

Léková forma je dále podle vynálezu s výhodou inertní vůči tekutině rány a kinetika uvolňování 15 kolagenázy závisí jen na rychlosti difúze kolagenázy uvnitř lékové formy, jakož i na stykové ploše mezi přípravkem a aplikačním místem nebo tekutinou rány.

Léková forma dále podle vynálezu má s výhodou vícevrstvou strukturu.

Léková forma je dále podle vynálezu s výhodou uzpůsobená k řízenému uvolňování kolagenázy do určitého směru.

Léková forma dále podle vynálezu s výhodou obsahuje nejméně jednu pomocnou látku ze skupiny polymerů ovlivňujících rychlost uvolňování a pomocné látky ze skupiny změkčovadel.

Léková forma dále podle vynálezu s výhodou obsahuje ve vodě rozpustné polymery.

Léková forma dále podle vynálezu s výhodou obsahuje ve vodě nabobtnatelné anebo ve vodě nerozpustné polymery.

Dále se vynález týká výroby lékové formy kolagenázy na rány podle jednoho nebo více výše popsaných forem jejího provedení, který spočívá v tom, že se nejprve připraví nízkoviskózní, toku schopná hmota, roztok, disperze nebo tavenina obsahující kolagenázu v homogenně rozptýlené formě, která se pak nanese jako vrstva na plošný substrát, načež se provede zpevnění 35 hmoty odejmutím rozpouštědla nebo dispergačního prostředku nebo ochlazením u taveniny, čímž vznikne fóliovitý plošný materiál o tloušťce dané tloušťkou vrstvy, z něhož se nakonec oddělí vysekáváním nebo vystřihováním jednodávkové lékové formy stejného tvaru a stejné hmotnosti.

Léková forma pro podávání kolagenázy na rány podle předmětného vynálezu má následující 40 vlastnosti:

a) je soudržná, plošně přizpůsobivá a tvarovatelná,

b) je stejně veliká nebo menší, než plocha ošetřované rány,

c) obsahuje kolagenázu v definovaných množstvích v homogenně rozdělené formě,

d) je uzpůsobena k řízenému uvolňování kolagenázy.

Tradiční tvarovatelné, účinnou látku uvolňující lékové formy, které po vložení do rány vytváří plošné struktury, jako např. gely, masti, krémy nebo také tekuté vícesložkové systémy, které po společné aplikaci do rány mezi sebou reagují a přitom tuhnou patří podle odborné terminologie ktzv. více dávek obsahujícím lékovým formám. Znamená to, že v jedné nádobce je obsaženo takové množství této lékové formy, aby odpovídalo většímu počtu použití s odpovídajícími 55 dávkovacími postupy. Dávkování si provádí individuálně sám uživatel. Informace o dávkovaném

-2CZ 290943 B6 množství kolagenázy může mít uživatel jenom když si dávku před podáním zváží. Při opakovaném použití by byla reprodukovatelná aplikace stále stejného množství kolagenázy možná jen pomocí předřazeného postupu vážení. Toto individuální variabilní dávkování je možné jen na základě malé soudržnosti a lehké oddělitelnosti těchto lékových forem. Na druhé straně nabízí tato malá soudržnost výhodu, že může být, jak uvedeno, libovolně vytvarována a přizpůsobena k nerovným plochám.

Naproti tomu je léková forma podle předmětného vynálezu jednodávková léková forma, která je podobně jako tablety nebo kapsle soudržná a předem vytvarovaná a obsahuje definovanou dávku kolagenázy pro jedno použití v homogenně rozdělené formě. Má to tu výhodu, že se může jakkoliv často aplikovat reprodukovatelně stejné množství kolagenázy. Pod soudržností se v této souvislosti rozumí pevnost a vnitřní soudržnost lékové formy, která oproti popsaným běžným lékovým formám umožňuje, aby s ní manipuloval uživatel, přičemž se při manipulaci samotné a ne automaticky určuje dané množství lékové formy a tím dodané množství kolagenázy.

Léková forma podle předmětného vynálezu se od ostatních jednodávkových lékových forem, jako jsou například tablety nebo kapsle, liší tím, že má na jedné straně soudržnost, která je potřeba k manipulaci, ale na druhé straně je ohebná a tvarovatelná, takže se po vložení do rány přizpůsobí nerovnostem podkladové vrstvy rány a dokáže se s ní dostat do styku. Předpokladem proto je, že plošné roztažení lékové formy je menší nebo maximálně stejné, jako plochy ošetřované rány. Podobně jako u uvedených pevných lékových forem se dosahuje homogenity rozdělení kolagenázy tím, že se nejprve celková hmota vyrobí ze složek tvořených pomocnými látkami a pak se v ní kolagenáza homogenně rozdělí. Z jedné takové hmoty se obvykle vyrobí v procesu tvarování lékové formy velké množství od sebe oddělených lékových forem stejného vzhledu a stejné hmotnosti, které podle toho pak všechny mají stejný obsah kolagenázy. Zpravidla se v průběhu tvarování lékové formy pomocí vhodného prostředku například vyvozením tlaku nebo chemickou reakcí provede zpevnění, které dodá oddělené jednotlivé lékové formě její soudržnost.

K výrobě lékové formy podle vynálezu se nejdříve připraví nízkoviskózní, tekutá hmota, např. roztok, disperze nebo tavenina, která obsahuje kolagenázu v homogenně rozdělené formě. Tato hmota se potom nanáší způsoby známými pro odborníka na plošný substrát. Oproti pevným lékovým formám dochází při výrobě lékové formy podle vynálezu ke zpevňujícímu procesu, který jednotlivým odděleným lékovým formám propůjčuje jejich soudržnost, ne během procesu tvarování a oddělování lékové formy, ale před tím. Kzpevnění dojde po nanesení na plošný substrát odpařením rozpouštěcího nebo dispersního média sušením, popřípadě ochlazením, jestliže se vrstva vytváří ztaveniny. Přitom vznikající nárůst kohezních sil závisí na druhu a tloušťce směsi pomocných látek, o čemž se pojednává níže. Vzniká široký, fóliovitý nekonečný pás, jehož tloušťka je dána při nanášení. Limitujícím faktorem pro tloušťku pásu je při daném složení požadavek na flexibilitu a tvarovatelnost jednotlivých oddělených lékových forem, aby se přizpůsobily ke spodní vrstvě rány po vložení do ní. Oddělení jednotlivých lékových forem s předem určenou plochou probíhá z konečného pásu známými způsoby, jako je např. vysekávání nebo stříhání. Protože se nanášení vrstvy hmoty, obsahující kolagenázu v homogenně rozdělené formě, aplikuje při dodržení konstantní hmotnosti nánosů, obsahují všechny jednotlivé oddělené lékové formy stejné množství kolagenázy v homogenním rozdělení. Tím se uživateli umožňuje exaktní a při opakovaném použití reprodukovatelně dávkování.

Protože se dá obsah kolagenázy na jednotku plochy a plocha samotná pomocí způsobu výroby plynule měnit v širokém rozmezí, nabízí léková forma podle vynálezu možnost dávkovat také velmi nepatrné množství kolagenázy exaktně a spolehlivě.

Kromě toho může uživatel provádět na každém problémovém místě a podle požadavků terapie orientované dávkování kolagenázy. Uživatel tak může například vpravit do rány více lékových forem současně a aplikovat je vedle sebe na podkladovou vrstvu rány. Může ale také z jedné lékové formy oddělit malé kousky, když je např. ošetřovaná plocha rány menší než je plocha pro

-3 CZ 290943 B6 jednotlivé lékové formy, nebo když je plochou daná dávka kolagenázy v lékové formě pro speciální ošetření příliš vysoká. Tak se může léková forma vyskytovat například ve spojitosti s inertním plošným substrátem, od kterého se dá lehce oddělit, jako je například silikonizovaná fólie a ta může mít na sobě dělení v centimetrovém měřítku. Protože je plošná dávka kolagenázy 5 u lékové formy známa, může uživatel z listové nebo srolované lékové formy vypočítat plochu a tím množství kolagenázy a vystřihnout, podle toho jaké množství považuje za potřebné z terapeutického hlediska.

V každém případě se dá dosáhnout toho, že plošná velikost lékové formy je menší nebo 10 maximálně stejná jako plocha ošetřované rány. Tím se umožní a zajistí aplikace na místo rány, aby se uvolnilo v ráně aplikované množství kolagenázy. Při aplikaci přečnívající okraj rány by se do rány uvolňovala jen ta kolagenáza, která sahá do rány, čímž by se zničila výhoda exaktního dávkování.

Další výhodou lékové formy podle vynálezu je, že se u ní může kontrolovat uvolňování kolagenázy. Protože se léková forma po aplikaci v každém případě dostane do styku s tekutinou vráně, resp. stkáňovou tekutinou, interakce stekutinou má rozhodující vliv na rozpouštění kolagenázy, což zase lze využít k řízení uvolňování. Receptura lékové formy podle vynálezu může být k dosažení relativně rychlého rozpouštění kolagenázy dimenzována tak, že je léková forma v tekutině rány rozpustná, popřípadě rozložitelná. Kinetika uvolňování kolagenázy závisí v tomto případě na rychlosti rozpouštění nebo rozpadu lékové formy. Po uplynutí času aplikace se musí rozpuštěná či rozložená léková forma, podobně jako masti či krémy, z rány vymýt, leda že by byla receptura dimenzována tak, že přípravek bude v tekutině rány zcela odbouratelný a resorbovatelný.

Zpoždění a prodloužení uvolňování kolagenázy může být dosaženo, když se zvolí takové složení, že léková forma za nabrání tekutiny z rány pouze nabobtná. Tekutina z rány rozpouští zvláště kolagenázu z lékové formy, což vede k její pomalejší erozi. V tomto případě závisí uvolňování kolagenázy na bobtnací schopnosti a rychlosti eroze lékové formy.

Ještě dále jsoucí zpoždění a prodloužení uvolňování kolagenázy se docílí, jestliže se složení lékové formy zvolí tak, že je vůči tekutině z rány netečná a neintegruje se s ní. Kinetika uvolňování kolagenázy závisí potom jen na rychlosti difuse kolagenázy uvnitř lékové formy, jakož i na hraniční ploše mezi přípravkem a spodní vrstvou rány resp. tekutinou rány.

V těchto uvedených příkladech, v nichž není léková forma rozpustná nebo rozložitelná, má uživatel tu výhodu, že ji může kdykoliv zrány bez vymývání nebo podobné manipulace zcela odstranit.

Další předností lékové formy podle vynálezu je, že je zhotovená jako vícevrstvá. Tak může být např. jedna vrstva rozpustná nebo se rozkládat v tekutině rány a sloužit tak k rychlému uvolňování kolagenázy, aby se co možná nejrychleji dosáhlo minimální potřebné koncentrace kolagenázy a daná dohromady jako laminát s nabobtnatelnou nebo netečnou vrstvou, sloužící k pomalému a rovnoměrnému rozpouštění kolagenázy a k udržení její potřebné koncentrace 45 v delším časovém období. U zvláště výhodné vícevrstvé lékové formy může tato mít uzavírací anebo řídicí prvek, který neobsahuje žádnou kolagenázu, jako je např. flexibilní fólie z polyuretanu, polyesteru nebo polypropylenu. Pomocí takového uzavíracího nebo řídicího prvku má být dávka kolagenázy vedena do určitého směru. Když se např. vytvarovatelná kolagenázu uvolňující vrstva nanese na ránu, může se pomocí nalaminované uzavírací vrstvy zabránit, aby 50 například v silně mokvající ráně byla kolagenáza předávána do okolní tekutiny, což by mohlo vést k nežádoucně silnému zřeďovacímu efektu.

V dalším výhodném provedení lékové formy podle vynálezu pro léčení ran je přípravek porézní, např. pěnový nebo houbovitý. Velikost pórů a struktura lékové formy jsou dimenzovány tak, aby bylo možné vniknutí buněk, jako například fibroblastů do nich a aby se buňkám přitom dávala

-4CZ 290943 B6 strukturální orientace, kterou je nutno odvozovat zejména ze stupně orientace s výhodou u přirozeného vaziva houbovité struktury u lékové formy podle vynálezu. Vrůstání buněk může být například nutné k odbourání přípravku nebo k odběru resp. usazování látek, které např. jsou potřebné k nové tvorbě tkáně nebo k její vaskularizaci, která má postoupit na místo lékové formy po jejím rozkladu. Předpoklady pro poréznost lékové formy se přitom dosáhnou v procesu výroby tím, že se např. do nanášené hmoty s homogenním rozdělením kolagenázy přivádí vzduch nebo že se na ploše nanesené z roztoku nebo disperze zanechají otvory, popřípadě póry, externími sušícími odpařujícího se rozpouštědla, nebo disperzního média.

Výběr materiálů a pomocných látek k výrobě lékové formy podle vynálezu se nejdříve určí podle požadavků na soudržnost, ohebnost a trvarovatelnost, jakož i podle požadavků na kinetiku uvolňování kolagenázy. Dalším omezujícím faktorem je to, že se spektrum použitelných materiálů a pomocných látek redukuje na takové, které vykazují při kontaktu stkáni rány vynikající snášenlivost. Léková forma vyrobená z kombinace materiálů a pomocných látek nemá po aplikaci do rány bránit ve funkci a v aktivitě buňkám, jako jsou např. keratinocyty, fibroblasty nebo buňky endothelu.

K. výrobě lékové formy podle vynálezu jsou nutné přinejmenším pomocné látky ze skupiny polymerů a pomocné látky ze skupiny změkčovadel. Polymery zabezpečují vnitřní soudržnost a koherenci lékové formy, která po nanesení a sušení, popřípadě ochlazení, vytvoří sítě, např. působením kovalentních vazeb, jako jsou vazby pomocí vodíkových můstků nebo výměnou iontů, které slouží k zpevnění, čímž se dosahuje potřebné soudržnosti lékové formy.Pomocí změkčovadel se nastaví konzistence lékové formy tak, aby byla ohebná a tvarovatelná a tím přizpůsobivá na místo rány. Vhodná změkčovadla s fyziologickou vhodností pro ošetřování ran jsou s výhodou nízkomolekulámí, vícemocné alkoholy, jako například glycerin, sorbitol, nízkomolekulární polyetylenglykol nebo nízkomolekulámí polypropylenglykol.

Polymery vhodné pro rychle uvolňující lékovou formu, které jsou rozpustné nebo se alespoň rozkládají v tekutině rány, jsou zejména ve vodě rozpustné polymery. Knim patří s výhodou rostlinné polysacharidy, jako algináty, pektiny, karagenany nebo xanthan, deriváty celulózy, jako je metylcelulóza, hydroxyetylcelulóza, hydroxypropylmetylcelulóza nebo natriumkarboxymetylcelulóza, škroby a škrobové deriváty, galaktomanan a galaktomananové deriváty, chitosan achitosanové deriváty, glykoproteiny, proteoglykany, glukózoaminoglykany, polyvinylalkohol, polyvinylpirrolidon, směsné kopolymery vinylpirrolidonu s vinylacetátem, vysokomolekulární polyetylenglykoly a vysokomolekulární polypropylenglykoly.

Polymery se schopností zpožděné a prodloužené doby uvolňování lékové formy, které bobtnají v tekutině rány nebo se neintegrují s tekutinou rány, jsou zejména ve vodě nabobtnatelné nebo ve vodě nerozpustné polymery. K. nim patří s výhodou celulózové deriváty, jako etylcelulóza, ftalát acetátové celulózy, ftalát celulózy, ftalát hydroxypropylmetylcelulózy, sukcinát acetátu celulózy, nebo sukcinát etylcelulózy, kopolymer polyoxyetylenu s polyoxypropylenem, polyvinylalkohol, polyakryláty a polymetakryláty, polylaktidy, polyglykolidy, jakož i polyaminokyseliny.

Léková forma může obsahovat jako další pomocné látky:

konzervační prostředky, jako například p-Cl-m-kresol, fenyletylalkohol, fenoxyetylalkohol, chlorbutanol, metylester 4-hydroxybenzoové kyseliny, propylester 4-hydroxybenzoové kyseliny, bezalkoniumchlorid, cetylpiridiniumchlorid, chlorhexidindiacetát nebo chlorhexidindiglukonát, etanol nebo propylenglykol, pH regulátory, jako např. glycinový pufr, citrátový pufr, borátový pufr, fosfátový pufr nebo pufr z fosfátu kyseliny citrónové, antioxidanty, jako např. kyselinu askorbovou, askorbylpalmitát, tokoferolacetát, propylgalát, butylhydroxyanisol nebo butylhydroxytoluol,

-5CZ 290943 B6 pomocné látky ke stabilizaci biologické aktivity účinných látek, jako je manitol, glukóza, laktóza, fruktóza, sacharóza, cyklodextrin nebo dextran, emulgovatelné pomocné látky, jako jsou oleje, tuky a vosky, stabilizátory emulze, jako jsou např. neionogenní emulgátory, amfoterní emulgátory, kationaktivní emulgátory anionaktivní emulgátory, plniva, jako jsou např. mikrokrystalická celulóza, oxid hlinitý, oxid zinečnatý, oxid titaničitý, talek, oxid křemičitý, magnéziumsilikát, magnézium-aluminiumsilikát, kaolin, hydrofobní škroby, stearát vápenatý nebo fosforečnan vápenatý, pěnicí prostředky jako saponiny, estery kyseliny alginové, aminoxidy nebo oxidy aminů 15 mastných kyselin.

Příklad 1

32 g acetonu, 14,6 g etylacetátu a 6,5 g polyetylenglykolu 400 se dají do uzavřené míchané nádoby. V směsi rozpouštědla se za stálého míchání postupně rozpouští 33,6 g kopolymeru polyvinylpyrrolidonu s polyvinylacetátem. 2 g kopolymeru polyoxyetylenu a polyoxypropylenu a 9,3 g hydroxypropylcelulózy.

Poté se v roztoku disperguje suchá směs z 1 g kolagenázy (kolagenolytická aktivita 16,67 pkat/g) a 1 g β-cyklodextrinu. Homogenní disperze se natře na silikonizovaný papír s plošnou hmotností 500 g/m a suší se konvekčně v sušícím kanálu při teplotě 45 °C a při rychlosti vzduchu asi 5 m/s. Po sušení se získá měkký, flexibilní průsvitný film nahnědlé barvy, který vykazuje plošnou hmotnost 267 g/m² a tomu odpovídající obsah enzymů 0,5 mg/cm², s kolagenolytickou aktivitou 30 8,335 nkat/cm². Z filmu se stříhají pravoúhlé přípravky s plochou 12 cm² a obsahem enzymů mg, odpovídající kolagenolytické aktivitě lOOnkat. Lékové formy se dávají do míchacího zařízení a mísí se v 50 ml 0,01 molárního roztoku kalciumacetátu při 60 ot/min. K roztoku se přidává přebytek hexapeptidů, který slouží jako substrát pro enzymatické dělení kolagenázou. Po pěti minutách se vzorek roztoku vezme a smísí se s přebytkem ninhydrinu, který s tripeptidy, jež 35 vznikají enzymatickým dělením hexapeptid-substrátu, vytváří barevný komplex, jež se měří spektrofotometricky a dává výslednou enzymatickou aktivitu 106 nkat. Kolagenáza je tedy již po pěti minutách stoprocentně uvolněna. Tím může být splněn požadavek na flexibilní film ve zvoleném složení, aby se dosáhla co nejvyšši možná koncentrace enzymů v ráně v nejkratším čase.

Příklad 2 g acetonu, 14,7 g etylacetátu a 6,5 g polyetylenglykolu 400 se dají do uzavřené míchané 45 nádoby. Ve směsi rozpouštědel se za stálého míchání rozpouští postupně 33,1 g kopolymeru polyvinylpyrrolidonu a polyvinylacetátu, 1,9 g kopolymeru polyoxyetylenu a polyoxypropylenu a 9,3 hydroxypropylcelulózy.

Poté se rozpustí v roztoku suchá směs z 1 g kolagenázy (kolagenolytická aktivita 16,67 pkat/g). 50 1 g dextranu 41 a 0,5 g kalciumacetátu. Homogenní disperze, natřená na silikonizovaném papíru, s plošnou hmotností 500 g/m², se suší konvekčně v sušícím kanálu při teplotě 45 °C a při rychlosti vzduchu 5 m/s. Po sušení se získá měkký flexibilní průsvitný film nahnědlé barvy, který vykazuje plošnou hmotnost 266,5 g/m² a tomu odpovídající enzymový obsah 0,5 mg/cm², s kolagenolytickou aktivitou 8,335 nkat/cm². Z filmu se stříhají pravoúhlé lékové formy o ploše 55 12 cm a s obsahem enzymů 6 mg, odpovídající kolagenolytické aktivitě 100 nkat. Lékové formy

-6CZ 290943 B6 se dávají do míchacího zařízení a mísí se v 50 ml 0,01molárního roztoku kalciumacetátu při 60 ot/min. K roztoku se přidává přebytek hexapeptidu, který slouží jako substrát pro enzymatické dělení kolagenázou. Po pěti minutách se vzorek roztoku odebere a smísí se s přebytkem ninhydridu, který s tripeptidy, jež vznikají enzymatickým dělením hexapeptidsubstrátu, vytváří barevný komplex, jenž se měří spektrofotometricky a dává výslednou aktivitu 92 nkat.

Kolagenáza je tedy již po pěti minutách víc než 90procentně propustná. Tím může být splněn požadavek na flexibilní film ve zvoleném složení s dextranem a kalciumacetátem ke stabilizaci aktivity kolagenázy, aby se dosáhla její nejvyšší možná koncentrace v ráně v nejkratším čase.

Příklad 3

Cílem je flexibilní film, který dokazuje ve srovnání s filmy z příkladů 1 a 2 zpomalené uvolňování. 40 g acetonu, 20 g etylacetátu a 7 g polyetylenglykolu 400 se dají do uzavřené míchací nádoby. Ve směsi se za stálého míchání rozpouští postupně 15 g kopolymeru polyvinylpirrolidonu a polyvinylacetátu. 1,2 g kopolymeru polyoxyetylenu a polyoxypropylenu, 6,5 g hydroxypropylcelulózy a 8,33 g etylcelulózy.

Poté se rozpouští v roztoku suchá směs z 1 g kolagenázy (kolagenolytická aktivita 16,67 pkat/g) a 1 g β-cyklodextrinu. Homogenní disperze, natřená na silikonizovaném papíru, s plošnou hmotností 500 g/m², se suší konvekčně v sušicím kanálu při teplotě 45 °C a při rychlosti vzduchu asi 5 m/s. Po sušení se získá měkký flexibilní, průsvitný film nahnědlé barvy, který vykazuje plošnou hmotnost 200 g/m² a tomu odpovídající obsah enzymů 0,5 mg/cm², s kolagenolytickou aktivitou 8,335 nkat/cm². Z filmu se stříhají pravoúhlé lékové formy o ploše 12 cm² a s obsahem kolagenázy 6 mg, odpovídající kolagenolytické aktivitě 100 nkat. Přípravky se dávají do míchací aparatury a mísí se v 50 ml 0,01molárního roztoku kalciumacetátu při 60 ot/min. do roztoku se přidá přebytek hexapeptidu, který slouží jako substrát pro enzymatické štěpení kolagenázou. Po pěti a šedesáti minutách se odebere vzorek roztoku a smísí se s přebytkem ninhydrinu, který s tripeptidy, vznikajícími enzymatickým dělením substrátu hexapeptidů, tvoří barevný komplex, jenž se měří spektrofotometricky a dává jako výsledek po 30 minutách enzymatickou aktivitu 94 nkat. Kolagenáza se po pěti minutách uvolní ve zřetelně menším množství, než jak je tomu v příkladech 1 a 2 a teprve po 60 minutách je více než devadesátiprocentně uvolněna. Tím může být splněn požadavek na flexibilní film ve složení s přídavkem etylcelulózy, tj. dosáhne se srovnatelně zpomaleného uvolnění kolagenázy za nejméně 60 minut.

Příklad 4

Cílem snahy je flexibilní film, který se oproti třem výše popsaným příkladům vyrábí bez použití organického rozpouštědla a dosahuje se velmi rychlého uvolňování.

67,75 g polyetylenglykolu 1500 se roztaví společně s 6,0 g polyetylenglykolu 400 při teplotě 90 °C za stálého míchání ve skleněné nádobě. V tavenině se za míchání rozpustí 20,0 g kopolymeru polyvinylpyrrolidonu s vinylacetátem při 90 °C. Po ochlazení taveniny na 45 °C se přidá po částech 6,25 % směsi z kolagenázy, dextranu 40 a kalciumacetátu (hmotnostní poměr 2:2:1), aktivita kolagenázy 16,67 pkat (1000 U/g) a při míchání se rozpustí. Homogenní hmota se poté nanese na polyetylentereftalátovou (PETP) fólii k vytvoření filmu s plošnou hmotností 400 g/m².

Po ochlazení se získá měkký, flexibilní, průhledný film nahnědlé barvy, kteiý vykazuje kolagenolytickou aktivitu 16,67 nkat/cm² (1-U/cm²). Po pokrytí druhou PETP-fólií se z tohoto filmu vysekávají čtvercové lékové formy s oblými rohy o ploše 25 cm², odpovídající 416,75 nkat (25 U) kolagenázy.

-7CZ 290943 B6

Lékové formy se úplně rozpouštějí ve fyziologickém roztoku z kuchyňské soli během pěti minut a uvolňují při tom stoprocentně aktivní přísadu, kolagenázu. Splňují tím požadavek uvolnit během velmi krátké doby velké množství aktivní přísady na aplikační místo. Tímto způsobem výroby odpadá problém vysušení zbytků rozpouštědel z filmu.

Příklad 5

Cílem je film, který se vyrábí analogicky k příkladu 4 bez použití organických rozpouštědel, 10 který však vykazuje silné zpomalení uvolňování aje rozpustný ve vodných médiích.

27,0 g vazelíny se roztaví při 120 °C s 15,0 g triglyceridů se střední délkou řetězce. Ve vzniklé tavenině se postupně roztaví nebo rozpustí za stálého míchání 20,0 g etylvinylacetátového kopolymeru. Čirá a homogenní hmota se zchladí za stálého míchání na 45 °C. K ochlazené hmotě 15 se postupně přidávají 1,75 g směsi zdextranu40 a kalciumacetátu (hmotn. poměr 2:1), 6,25 g směsi zkolagenázy, dextranu 40 a kalciumacetátu (hmotn. poměr 2:2:1), aktivita kolagenázy 16,67 pkat (1000 U/g). Násada se míchá až do dosažení makroskopicky homogenního rozdělení. Tato hmota se poté nanáší na PETP-fólii k vytvoření filmu s plošnou hmotností 400 g/m^{2 3}. Po ochlazení se získá měkký, velmi flexibilní film nahnědlé barvy, který vykazuje kolagenolytickou 20 aktivitu 16,67 nkat/cm² (1 U/cm²). Po pokryli druhou PETP-fólií se vysekávají z tohoto filmu kvadratické lékové formy s oblými rohy a plochou 25 cm², odpovídající 416,75 nkat (25 U) kolagenázy.

Průmyslové využití

Lékové formy jsou nerozpustné ve fyziologickém roztoku kuchyňské soli. Uvolňují aktivní přísady kolagenázy plynule po dobu 24 hodin, přičemž postupně ztrácejí barvu. Po úplném uvolnění aktivní přísady se nechají mezitím bílé lékové formy vzít opět vcelku z kontrolního 30 roztoku. Splňují tím požadavky:

- uvolňovat po delší době plynule aktivní přísadu a

- aby byly kdykoliv odstranitelné bez vymytí nebo podobné manipulace z místa aplikace.

Claims

1. Léková forma pro podávání kolagenázy na rány, vyznačující se t í m , že je ve formě plošně tvarovaného fóliovitého materiálu, který je koherentní a tvarovatelný a kde velikost aplikační plochy se volí tak, aby byla stejná nebo menší než plocha ošetřované rány, obsahuje

45 homogenně rozložené farmaceuticky účinné množství kolagenázy a je uzpůsobena ke kontrolovanému uvolňování kolagenázy.

2. Léková forma podle nároku 1, vyznačuj ící se t í m, že je vložitelná do rány jako skupina menších částí.

3. Léková forma podle nároku 1, vyznačující se tím, že je před aplikací vložením do rány tvarově upravitelná podle tvaru plochy rány.

-8CZ 290943 B6

4. Léková forma podle jednoho nebo více z nároků 1 až 3, vyznačující se tím, že je v tekutině rány rozpustná nebo rozložitelná, přičemž kinetika rozkladu kolagenázy závisí na rychlosti rozpouštění nebo rozkladu lékové formy.

5. Léková forma podle jednoho nebo více z nároků 1 až 4, vyznačující se tím, že je odbouratelná a resorbovatelná v tekutině rány.

6. Léková formy podle jednoho nebo více z nároků 1 až 3, vyznačující se tím, že je nabobtnatelná v tekutině rány, přičemž kinetika uvolňování kolagenázy závisí na její rychlosti eroze.

7. Léková forma podle jednoho nebo více z nároků 1 až 3, vyznačující se tím, že je inertní vůči tekutině rány a kinetika uvolňování kolagenázy závisí jen na rychlosti difúze kolagenázy uvnitř lékové formy, jakož i na stykové ploše mezi lékovou formou a aplikačním místem nebo tekutinou rány.

8. Léková forma podle jednoho nebo více z nároků 1 až 7, vyznačuj ící se tím, že má vícevrstvou strukturu.

9. Léková forma podle jednoho nebo více z nároků 1 až 8,vyznačující se tím, že je uzpůsobená k řízenému uvolňování kolagenázy do určitého směru.

10. Léková forma podle jednoho nebo více z nároků laž9, vyznačující se tím, že obsahuje nejméně jednu pomocnou látku ze skupiny polymerů ovlivňující rychlost uvolňování a pomocné látky ze skupiny změkčovadel.

11. Léková forma podle nároku 10, vyznačující se tím, že obsahuje ve vodě rozpustné polymery.

12. Léková forma podle nároku 10, vyznačující se tím, že obsahuje ve vodě nabobtnatelné anebo ve vodě nerozpustné polymery.

13. Způsob výroby lékové formy kolagenázy na rány podle nároku 1, vyznačující se t í m , že se nejprve připraví nízkoviskózní, toku schopná hmota, roztok, disperze nebo tavenina obsahující kolagenázu v homogenně rozptýlené formě, která se pak nanese jako vrstva na plošný substrát, načež se provede zpevnění hmoty odejmutím rozpouštědla nebo dispergačního prostředku nebo ochlazením u taveniny, čímž vznikne fóliovitý plošný materiál o tloušťce dané tloušťkou vrstvy, z něhož se nakonec oddělí vysekáváním nebo vystřihováním jednodávkové lékové formy stejného tvaru a stejné hmotnosti.