CZ288029B6 - Agonizující analog amylinu, tento analog pro použití jako léčivo a farmaceutický prostředek obsahující tento analog - Google Patents
Agonizující analog amylinu, tento analog pro použití jako léčivo a farmaceutický prostředek obsahující tento analog Download PDFInfo
- Publication number
- CZ288029B6 CZ288029B6 CZ19931689A CZ168993A CZ288029B6 CZ 288029 B6 CZ288029 B6 CZ 288029B6 CZ 19931689 A CZ19931689 A CZ 19931689A CZ 168993 A CZ168993 A CZ 168993A CZ 288029 B6 CZ288029 B6 CZ 288029B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- amylin
- pro
- asn
- ser
- thr
- Prior art date
Links
- 108010041872 Islet Amyloid Polypeptide Proteins 0.000 title claims abstract description 118
- 102000036770 Islet Amyloid Polypeptide Human genes 0.000 title claims abstract description 117
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims description 9
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 title 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 claims abstract description 75
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims abstract description 7
- 125000001691 aryl alkyl amino group Chemical group 0.000 claims abstract description 5
- 125000001769 aryl amino group Chemical group 0.000 claims abstract description 4
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 claims abstract description 3
- 125000003282 alkyl amino group Chemical group 0.000 claims abstract description 3
- 125000002102 aryl alkyloxo group Chemical group 0.000 claims abstract description 3
- 125000004104 aryloxy group Chemical group 0.000 claims abstract description 3
- 125000006310 cycloalkyl amino group Chemical group 0.000 claims abstract description 3
- 125000004663 dialkyl amino group Chemical group 0.000 claims abstract description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 76
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 61
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims description 43
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 37
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 claims description 35
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 claims description 35
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 33
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 claims description 30
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 28
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 25
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 19
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 claims description 19
- -1 bromoacetyl side chain Chemical group 0.000 claims description 15
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 14
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 11
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 10
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 6
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 6
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 150000005840 aryl radicals Chemical class 0.000 claims description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N nitrogen Substances N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- QCQCHGYLTSGIGX-GHXANHINSA-N 4-[[(3ar,5ar,5br,7ar,9s,11ar,11br,13as)-5a,5b,8,8,11a-pentamethyl-3a-[(5-methylpyridine-3-carbonyl)amino]-2-oxo-1-propan-2-yl-4,5,6,7,7a,9,10,11,11b,12,13,13a-dodecahydro-3h-cyclopenta[a]chrysen-9-yl]oxy]-2,2-dimethyl-4-oxobutanoic acid Chemical compound N([C@@]12CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@H]5C(C)(C)[C@@H](OC(=O)CC(C)(C)C(O)=O)CC[C@]5(C)[C@H]4CC[C@@H]3C1=C(C(C2)=O)C(C)C)C(=O)C1=CN=CC(C)=C1 QCQCHGYLTSGIGX-GHXANHINSA-N 0.000 claims description 3
- 150000008574 D-amino acids Chemical group 0.000 claims description 3
- XTONYTDATVADQH-CIUDSAMLSA-N Lys-Cys-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O XTONYTDATVADQH-CIUDSAMLSA-N 0.000 claims description 3
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical group [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- VFRSADQPWYCXDG-LEUCUCNGSA-N ethyl (2s,5s)-5-methylpyrrolidine-2-carboxylate;2,2,2-trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.CCOC(=O)[C@@H]1CC[C@H](C)N1 VFRSADQPWYCXDG-LEUCUCNGSA-N 0.000 claims description 3
- 239000001301 oxygen Chemical group 0.000 claims description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 2
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 claims description 2
- 125000000998 L-alanino group Chemical group [H]N([*])[C@](C([H])([H])[H])([H])C(=O)O[H] 0.000 claims description 2
- FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N L-homocysteine Chemical group OC(=O)[C@@H](N)CCS FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 claims description 2
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical group [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000006615 aromatic heterocyclic group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 claims description 2
- 150000003951 lactams Chemical class 0.000 claims description 2
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000006413 ring segment Chemical group 0.000 claims description 2
- 229910052717 sulfur Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000011593 sulfur Chemical group 0.000 claims description 2
- NVGWESORMHFISY-SRVKXCTJSA-N Asn-Asn-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O NVGWESORMHFISY-SRVKXCTJSA-N 0.000 claims 1
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 claims 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 claims 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 claims 1
- 159000000021 acetate salts Chemical class 0.000 claims 1
- 150000003568 thioethers Chemical class 0.000 claims 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 abstract description 47
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 abstract description 19
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 abstract description 10
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 abstract description 8
- QMMFVYPAHWMCMS-UHFFFAOYSA-N Dimethyl sulfide Chemical compound CSC QMMFVYPAHWMCMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 51
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 44
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 44
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 35
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 34
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 33
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 32
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 30
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 23
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 22
- 238000000034 method Methods 0.000 description 20
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 20
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 19
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 19
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 19
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 17
- 239000000047 product Substances 0.000 description 17
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 16
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 16
- SHDMMLFAFLZUEV-UHFFFAOYSA-N n-methyl-1,1-diphenylmethanamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(NC)C1=CC=CC=C1 SHDMMLFAFLZUEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 15
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M Trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 15
- 238000005251 capillar electrophoresis Methods 0.000 description 15
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 15
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 15
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 14
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 14
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 13
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 13
- 238000004992 fast atom bombardment mass spectroscopy Methods 0.000 description 12
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 11
- 101001081479 Homo sapiens Islet amyloid polypeptide Proteins 0.000 description 11
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 11
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 11
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 11
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 11
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 10
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 10
- 208000013016 Hypoglycemia Diseases 0.000 description 9
- 102000051325 Glucagon Human genes 0.000 description 8
- 108060003199 Glucagon Proteins 0.000 description 8
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 8
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 8
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 8
- MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N glucagon Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N 0.000 description 8
- 229960004666 glucagon Drugs 0.000 description 8
- 229910052716 thallium Inorganic materials 0.000 description 8
- BKVIYDNLLOSFOA-UHFFFAOYSA-N thallium Chemical compound [Tl] BKVIYDNLLOSFOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 7
- 244000309466 calf Species 0.000 description 7
- 201000001421 hyperglycemia Diseases 0.000 description 7
- 230000002218 hypoglycaemic effect Effects 0.000 description 7
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 5
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002585 base Substances 0.000 description 4
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 4
- 230000003345 hyperglycaemic effect Effects 0.000 description 4
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 4
- 230000004044 response Effects 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 238000011260 co-administration Methods 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 239000004026 insulin derivative Substances 0.000 description 3
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 3
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 3
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 2
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 210000002237 B-cell of pancreatic islet Anatomy 0.000 description 2
- 102100038521 Calcitonin gene-related peptide 2 Human genes 0.000 description 2
- 101710117581 Calcitonin gene-related peptide 2 Proteins 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 108091005466 amylin receptors Proteins 0.000 description 2
- 230000003941 amyloidogenesis Effects 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 2
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- PBGKTOXHQIOBKM-FHFVDXKLSA-N insulin (human) Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H]2C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3NC=NC=3)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC1=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)=O)CSSC[C@@H](C(N2)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)C1=CN=CN1 PBGKTOXHQIOBKM-FHFVDXKLSA-N 0.000 description 2
- 210000004153 islets of langerhan Anatomy 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052751 metal Chemical class 0.000 description 2
- 239000002184 metal Chemical class 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000035408 type 1 diabetes mellitus 1 Diseases 0.000 description 2
- MIOPJNTWMNEORI-GMSGAONNSA-N (S)-camphorsulfonic acid Chemical compound C1C[C@@]2(CS(O)(=O)=O)C(=O)C[C@@H]1C2(C)C MIOPJNTWMNEORI-GMSGAONNSA-N 0.000 description 1
- 230000006269 (delayed) early viral mRNA transcription Effects 0.000 description 1
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000238876 Acari Species 0.000 description 1
- 229940127438 Amylin Agonists Drugs 0.000 description 1
- 102000001049 Amyloid Human genes 0.000 description 1
- 108010094108 Amyloid Proteins 0.000 description 1
- 208000037259 Amyloid Plaque Diseases 0.000 description 1
- 102000009091 Amyloidogenic Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010048112 Amyloidogenic Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010001478 Bacitracin Proteins 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001856 Ethyl cellulose Substances 0.000 description 1
- ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N Ethyl cellulose Chemical compound CCOCC1OC(OC)C(OCC)C(OCC)C1OC1C(O)C(O)C(OC)C(CO)O1 ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OPINTGHFESTVAX-BQBZGAKWSA-N Gln-Arg Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N OPINTGHFESTVAX-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- 101000976075 Homo sapiens Insulin Proteins 0.000 description 1
- 206010020660 Hyperlactacidaemia Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 description 1
- 125000001176 L-lysyl group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(N([H])[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 240000007472 Leucaena leucocephala Species 0.000 description 1
- 235000010643 Leucaena leucocephala Nutrition 0.000 description 1
- NPBGTPKLVJEOBE-IUCAKERBSA-N Lys-Arg Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N NPBGTPKLVJEOBE-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 125000001429 N-terminal alpha-amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 1
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 description 1
- 239000004721 Polyphenylene oxide Substances 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101001081470 Rattus norvegicus Islet amyloid polypeptide Proteins 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940100389 Sulfonylurea Drugs 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 150000001242 acetic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 210000001361 achilles tendon Anatomy 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 1
- 150000001371 alpha-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 description 1
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000003942 amyloidogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 229960003071 bacitracin Drugs 0.000 description 1
- 229930184125 bacitracin Natural products 0.000 description 1
- CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N bacitracin A Chemical compound C1SC([C@@H](N)[C@@H](C)CC)=N[C@@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]1C(=O)N[C@H](CCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2N=CNC=2)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCCCC1 CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N 0.000 description 1
- 210000000227 basophil cell of anterior lobe of hypophysis Anatomy 0.000 description 1
- 238000007664 blowing Methods 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 1
- 210000000459 calcaneus Anatomy 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000007799 cork Substances 0.000 description 1
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-UKLRSMCWSA-N dextrose-2-13c Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[13C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-UKLRSMCWSA-N 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 208000016097 disease of metabolism Diseases 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 235000019325 ethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001249 ethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- OXZOLXJZTSUDOM-UHFFFAOYSA-N fluoro 2,2,2-trifluoroacetate Chemical compound FOC(=O)C(F)(F)F OXZOLXJZTSUDOM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 239000003365 glass fiber Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940084769 humulin r Drugs 0.000 description 1
- 150000003840 hydrochlorides Chemical class 0.000 description 1
- 229940126904 hypoglycaemic agent Drugs 0.000 description 1
- 210000003016 hypothalamus Anatomy 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000012442 inert solvent Substances 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003914 insulin secretion Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000002563 ionic surfactant Substances 0.000 description 1
- AWJUIBRHMBBTKR-UHFFFAOYSA-N iso-quinoline Natural products C1=NC=CC2=CC=CC=C21 AWJUIBRHMBBTKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 1
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 230000009871 nonspecific binding Effects 0.000 description 1
- 210000001009 nucleus accumben Anatomy 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 210000002475 olfactory pathway Anatomy 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000570 polyether Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 150000003147 proline derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 210000004129 prosencephalon Anatomy 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 1
- 230000000171 quenching effect Effects 0.000 description 1
- 238000001525 receptor binding assay Methods 0.000 description 1
- 238000003345 scintillation counting Methods 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 description 1
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 description 1
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 description 1
- 210000002460 smooth muscle Anatomy 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- HELHAJAZNSDZJO-OLXYHTOASA-L sodium L-tartrate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C([O-])=O HELHAJAZNSDZJO-OLXYHTOASA-L 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229910001415 sodium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000001433 sodium tartrate Substances 0.000 description 1
- 229960002167 sodium tartrate Drugs 0.000 description 1
- 235000011004 sodium tartrates Nutrition 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 238000013222 sprague-dawley male rat Methods 0.000 description 1
- 238000012453 sprague-dawley rat model Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 238000001308 synthesis method Methods 0.000 description 1
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 1
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N triton Chemical compound [3H+] GPRLSGONYQIRFK-MNYXATJNSA-N 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
- A61P5/50—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones for increasing or potentiating the activity of insulin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Hematology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Immunology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
Řešení se týká agonizujícího analogu amylinu obecného vzorce .sup.1.n.A.sub.1.n.-X-Asn-Thr-.sup.5.n.Ala-Thr-Y-Ala-Thr-.sup.10.n.Gln-Arg-Leu-B.sub.1.n.-Asn-.sup.15.n.Phe-Leu-C.sub.1.n.-D.sub.1.n.-E.sub.1.n.-.sup.20.n.F.sub.1.n.-G.sub.1.n.-Asn-H.sub.1.n.-Gly-.sup.25.n.I.sub.1.n.-J.sub.1.n.-Leu-K.sub.1.n.-L.sub.1.n.-.sup.30.n.Thr-M.sub.1.n.-Val-Gly-Ser-.sup.35.n.Asn-Thr-Tyr-Z, ve kterém A.sub.1.n. až M.sub.1.n., X, Y a Z mají specifické významy. Dále zahrnuje farmaceutický prostředek, který obsahuje uvedený agonizující analog amylinu jako účinnou látku. Tento farmaceutický prostředek je použitelný pro léčení diabetes a dalších inzulin-vyžadujících stavů pro léčení hypoglykemie.ŕ
Description
Agonizující analog amylinu, tento analog pro použití jako léčivo a farmaceutický prostředek obsahující tento analog
Oblast techniky
Vynález se týká nového agonizujícího analogu amylinu a farmaceutického prostředku, který tento analog obsahuje jako účinnou látku a který je použitelný pro léčení diabetes a dalších inzulinvyžadujících stavů, jakož i pro léčení hypoglykemie.
Dosavadní stav techniky
Diabetes mellitus je vážným metabolickým onemocněním, které je definováno existencí chronicky zvýšené hladiny glukózy v krvi (hyperglykemie). Tento hyperglykemický stav je důsledek relativní nebo absolutní absence účinku peptidového hormonu inzulínu. Inzulín je produkován a vylučován beta-buňkami slinivky břišní. O inzulínu je známo, že podporuje spotřebu glukózy, syntézu proteinů a tvorbu a ukládání neutrálních lipidů. Glukóza, která je hlavním zdrojem uhlohydrátové energie, se v těle ukládá jako glykogen, což je forma polymemí glukózy, který může být za účelem splnění metabolických požadavků zpětně konvertován na glukózu. Za normálních podmínek je inzulín vylučován jak základní rychlostí, tak i zvýšenou rychlostí v odezvu na přítomnost nadměrného množství glukózy v krvi, přičemž toto vylučování inzulínu udržuje metabolickou homeostázu mechanismem konverze glukózy na glykogen.
Výraz diabetes mellitus zahrnuje několik různých hyperglykemických stavů. Tyto stavy zahrnují diabetes typu 1 (inzulin-dependentní diabetes mellitus nebo IDDM) a diabetes typu 2 (inzulinnedependentní diabetes mellitus nebo NIDDM). Hyperglykemie existující u jedinců trpících onemocněním diabetes mellitus typu 1 je doprovázena deficitní, sníženou nebo neexistující hladinou inzulínu, neschopnou udržet hladinu glukózy v krvi ve fyziologicky normálním rozmezí. Léčení diabetes mellitus typu 1 zahrnuje podávání náhradních dávek inzulínu, obvykle parenterální cestou.
Hyperglykemie existující u jedinců trpících onemocněním diabetes mellitus typu 2 je v počátečním stádiu doprovázena normální nebo zvýšenou hladinou inzulínu. Nicméně jedinci trpící tímto onemocněním nejsou schopni zachovat metabolickou homeostázu v důsledku rezistence vůči inzulínu v periferních tkáních a játrech a v důsledku progresivního zhoršení stavu pankreatických beta-buněk zodpovědných za vylučování inzulínu, ke kterému dochází tou měrou, jak nemoc pokračuje. Počáteční terapie onemocnění diabetes mellitus typu 2 může být tedy založena na dietě a změně životního stylu doplněnými terapií spočívající v podávání hypoglykemických činidel, jakými jsou sulfonylmočoviny. Nicméně zejména v pozdějších stádiích nemoci je mnohdy nezbytné použít inzulínovou terapii za účelem určité regulace hyperglykemie a omezení na možné minimum komplikací, které doprovázejí toto onemocnění. Mnoho diabetiků trpících diabetem typu 2 takto potřebuje inzulín, aby mohli přežít.
Amyloid je označení, kterým byla pojmenována extracelulámí depozita beta-proteinových vláken. Depozita amyloidního materiálu byla nalezena v pankreatu pacientů trpících diabetem mellitus typu 2. Některé studie uvádí, že stupeň amyloidních depozit roste s mírou hyperglykemie v lidském organismu a s vážností onemocnění diabetes mellitus typu 2. Chemická analýza pankreatického amyloidu vedla k překvapivému a neočekávanému objevu peptidového hormonu amylinu (Clark A. a kol., Lancet ii: 231-234 (1987)). Bylo zjištěno, že tento peptid obsahuje 37 aminokyselin, z nichž žádné nejsou kyselými zbytky, že má disulfidovou vazbu mezi cysteinovými zbytky v poloze 2 a 7 a že je C-terminálně amidován. Amylin je hlavní proteinovou složkou amyloidu, o kterém se uvádí, že byl nalezen v pankreatických Langerhansových ostrůvcích u pacientů trpících onemocněním diabetes mellitus typu 2.
-1CZ 288029 B6
Uvádí se, že přítomnost intramolekulámího cysteinového můstku a amidové skupiny na terminální karboxylové skupině v peptidové struktuře syntetické molekuly vykazuje největší biologickou účinnost při inhibici syntézy glykogenu ve skeletovém svalu (např. Cooper G.J.S. a kol., Proč. Nati. Acad. Sci. (USA) 84:8628-8632 (1987); Cooper G.J.S. a kol., Diabetes 1988, nakl. Larkins. R., Zimmet P. a Chisholm D. (Elsevier, Amsterodam), str.. 493-496 (1989)). Aminokyselinová sekvence amylinu(viz obr. 1) má 46% homologii s peptidem 2 souvisejícím s kalcitoninovým genem (CGRP-2, calcitonin gene related peptide 2).
V jedné zprávě se uvádí, že omezený segment amylinové molekuly, tj. zbytky 20 až 29, je potenciálním přispěvatelem ke tvorbě amyloidních fibril v Langerhansových ostrůvcích při onemocnění diabetes mellitus typu 2 (Glenner a kol., Biochem. Biophys. Res. Commun. 155:608-614 (1988). Rovněž bylo uvedeno, že rozdíly aminokyselinové sekvence mezi jednotlivými amyliny z některých druhů savců se vyskytují právě v uvedené oblasti, přičemž další výzkumy byly zaměřeny na identifikaci zbytků spojených s amyloidní formací (Westermark a kol., Proč. Nati. Acad. Sci. (USA) 87: 5036-5040 (1990)). Westermarkova studie uvádí pokusy syntetizovat různé aminokyselinové segmenty 20-29 amylinových sekvencí z různých živočišných druhů a srovnání jejich schopnosti tvořit amyloidní fibrily. Bylo zjištěno, že zbytky 25-29 lidského amylinu byly nejvíce amyloidogenní a že substituce prolinu za serin v poloze 29, jako je tomu u některých hlodavců, významně inhibuje u studovaných dekapeptidů tvorbu fibril.
Amylin je komplexním peptidem a syntéza biologicky účinných preparátů amylinu je pracná. Bylo rovněž zjištěno, že amylin má omezenou rozpustnost a omezenou stabilitu v roztoku. Zjistili jsme, že krysí amylin má vyšší rozpustnost a stabilitu v roztoku než lidský amylin. To může být do jisté míry způsobeno odlišnými agregačními vlastnostmi amylinů pocházejících z různých živočišných druhů. Uvádí se, že pouze amyliny pocházející z člověka, nečlověčího primáta a kočky se agregují in vivo za tvorby ostrůvkového amyloidu. Amylinové sekvence izolované z různých živočišných druhů jsou uvedeny na obr. 2.
U diabetů mellitus typu I je hladina amylinu velmi omezená nebo vůbec neexistuje (zjištěno srovnáním s normálními jedinci, kteří netrpí tímto onemocněním). U onemocnění diabetes mellitus typu I byly beta-buňky, které jsou producenty inzulínu a amylinu zničeny autoimunitním procesem. Bylo zjištěno, že amylin je použitelný při léčení onemocnění diabetes mellitus a hypoglykemie, včetně inzulínem indukované hypoglykemie. Rovněž bylo zjištěno, že současné podávání inzulínu s amylinem má vyšší terapeutický účinek než samotné podávání inzulínu a že současné podání amylinu s glukagonem pro léčení hypoglykemie má rovněž vyšší terapeutický účinek než dosud používané podávání samotného glukagonu. Bylo by proto velmi užitečné pro tyto a jiné účely nalézt méně složité sloučeniny, které by měly účinky nativního lidského amylinu a lepší rozpustnost nebo/a stabilitu než uvedený nativní lidský amylin. Takové sloučeniny jsou předmětem vynálezu.
Podstata vynálezu ’A,-X-Asn-Thr-5Ala-Thr-Y-Ala-Thr-,0Gln-Arg-LeuB,-Asn-15Phe-Leu-C1-D1-E,-“F,-G1-Asn-H,-Gly-25l,-J,- <«>Leu-K1-L,-3OThr-M1-Val-Gly-Ser-35Asn-Thr-Tyr-Z ve kterém
Ai znamená Lys, Ala, Ser nebo vodík,
Bi znamená Ala, Ser nebo Thr,
Cj znamená Val, Leu nebo Ile,
-2CZ 288029 B6
Di znamená His nebo Arg,
Ei znamená Ser nebo Thr,
Fi znamená Ser, Thr, Gin nebo Asn,
Gi znamená Asn, Gin nebo His,
Hi znamená Phe, Leu nebo Tyr, li znamená Ala nebo Pro,
Ji znamená Ile, Val, Ala nebo Leu,
Ki znamená Ser, Pro, Leu, Ile nebo Thr,
Li znamená Ser, Pro nebo Thr,
Mi znamená Asp, Gin nebo Asn,
X a Y znamenají aminokyselinové zbytky zvolené z množiny zahrnující Cys homoCys a tvořící disulfidovou vazbu, aminokyselinové zbytky zvolené z množiny zahrnující Lys, Asp a Glu a tvořící laktamovou vazbu, a aminokyselinové zbytky, zvolené z množiny zahrnující Cys a aminokyselinové analogy mající bromacetylový boční řetězec a tvořící thioetherovou vazbu, a
Z znamená amino-skupinu, alkylamino-skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, dialkylamino-skupinu obsahující celkem 2 až 12 uhlíkových atomů, cykloalkylaminoskupinu obsahující 5 až 8 uhlíkových atomů, arylamino-skupinu, ve které arylový zbytek znamená karbocyklickou aromatickou skupinu obsahující 5 až 14 uhlíkových atomů nebo heterocyklickou aromatickou skupinu obsahující nejvýše 12 kruhových atomů zahrnujících 1 až 3 heteroatomy, zvolené z množiny zahrnující dusík, kyslík a síru, aryloxy-skupinu, ve které arylový zbytek má stejný význam jako u arylaminoskupiny, alkoxy-skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, aralkylamino-skupinu, ve které aralkylový zbytek znamená arylovou skupinu obsahující 6 až 10 uhlíkových atomů a přímo vázanou k alkylové skupině obsahující 1 až 4 uhlíkové atomy, nebo aralkyloxy-skupinu, ve které aralkylový zbytek má stejný význam jako u aralkylamino-skupiny, s podmínkou, že když
| a) | A, | znamená Lys, | B, | znamená Ala, | c> | znamená Val, |
| Di | znamená His, | Ei | znamená Ser, | Fi | znamená Ser, | |
| Gj | znamená Asn, | Η, | znamená Phe, | li | znamená Ala, | |
| Ji | znamená Ile, | Ki | znamená Ser, | Li | znamená Ser a | |
| Mi | znamená Asn, | |||||
| b) | A. | znamená Lys, | Bi | znamená Ala, | Ci | znamená Ile, |
| Di | znamená Arg, | Ei | znamená Ser, | Fi | znamená Ser, | |
| G, | znamená Asn, | Hi | znamená Leu, | li | znamená Ala, | |
| Ji | znamená Ile, | Ki | znamená Ser, | Li | znamená Pro a | |
| Mi | znamená Asn, | |||||
| c) | Ai | znamená Lys, | Bi | znamená Ala, | Ci | znamená Val, |
| Di | znamená Arg, | Ei | znamená Thr, | Fi | znamená Ser, | |
| G, | znamená Asn, | Hi | znamená Leu, | li | znamená Ala, | |
| Ji | znamená Ile, | Ki | znamená Ser, | Li | znamená Pro a | |
| Μ, | znamená Asn, | |||||
| d) | Ai | znamená Lys, | Bi | znamená Ala, | Ci | znamená Val, |
| Di | znamená Arg, | Ei | znamená Ser, | Fi | znamená Ser, | |
| Gi | znamená Asn, | Hr | znamená Leu, | li | znamená Pro, | |
| Jr | znamená Val, | Ki | znamená Pro, | Li | znamená Ser a | |
| Μ, | znamená Asn, | |||||
| e) | Ai | znamená Lys, | Bi | znamená Ala, | Ci | znamená Val, |
| Di | znamená His, | Ei | znamená Ser, | Fi | znamená Asn, | |
| Gi | znamená Asn, | Hi | znamená Leu, | li | znamená Pro, |
-3CZ 288029 B6
| J1 | znamená Val, | Ki | znamená Ser, | Li | znamená Pro a |
| Mi | znamená Asn, nebo | ||||
| A. | znamená Lys, | Bi | znamená Thr, | C| | znamená Val, |
| Di | znamená Arg, | Ei | znamená Ser, | Fi | znamená Ser, |
| G, | znamená His, | Hi | znamená Leu, | li | znamená Ala, |
| Ji | znamená Ala, | K, | znamená Leu, | Li | znamená Pro a |
| Μ, | znamená Asp, |
potom alespoň jeden z aminokyselinových zbytků A až M ve sloučeninách definovaných v odstavcích a) až f) znamená D-aminokyselinový zbytek, a Z neznamená aminovou skupinu, a s podmínkou, že agonizujícím analogem amylinu není 23Leu-amylin, 29Pro-amylin nebo des’Lys-amylin, a jeho farmaceuticky přijatelné soli.
Agonizujícím analogem amylinu je výhodně sloučenina obecného vzorce I, ve kterém X a Y znamenají aminokyselinové zbytky Cys spojené disulfidovou vazbou a Z znamená aminoskupinu.
Agonizujícím analogem amylinu je výhodně sloučenina obecného vzorce I, ve kterém H, znamená aminokyselinový zbytek Phe.
Agonizujícím analogem amylinu je výhodně sloučenina obecného vzorce I, ve kterém Ht znamená aminokyselinový zbytek Phe a alespoň jeden z Ib Ki a Lj znamená aminokyselinový zbytek Pro.
Agonizujícím analogem amylinu je výhodně sloučenina obecného vzorce I, ve kterém Hi znamená aminokyselinový zbytek Phe a dva z Ib Ki a Li znamenají aminokyselinový zbytek Pro.
Agonizujícím analogem amylinu je výhodně sloučenina obecného vzorce I, ve kterém H] znamená aminokyselinový zbytek Phe a Ib Kj a Li znamenají aminokyselinový zbytek Pro.
Agonizujícím analogem amylinu je výhodně sloučenina obecného vzorce I, ve kterém Hi znamená aminokyselinový zbytek Phe, alespoň jeden z Ib Ki a Li znamená aminokyselinový zbytek Pro a Di znamená aminokyselinový zbytek Arg.
Agonizujícím analogem amylinu je výhodně sloučenina obecného vzorce I, ve kterém Hi znamená aminokyselinový zbytek Phe, alespoň jeden z Ib Ki a L] znamená aminokyselinový zbytek Pro a Ji znamená aminokyselinový zbytek Val.
Agonizujícím analogem amylinu je výhodně sloučenina obecného vzorce I, ve kterém Hi znamená aminokyselinový zbytek Phe, alespoň jeden z Ib K] a Li znamená aminokyselinový zbytek Pro, Di znamená aminokyselinový zbytek Arg a Ai znamená aminokyselinový zbytek Lys.
Agonizujícím analogem amylinu je výhodně sloučenina obecného vzorce I, ve kterém H, znamená aminokyselinový zbytek Phe, alespoň jeden z Ib Ki a Li znamená aminokyselinový zbytek Pro, Di znamená aminokyselinový zbytek Arg a Ai znamená vodík.
Agonizujícím analogem amylinu je výhodně sloučenina obecného vzorce I, ve kterém Hi znamená aminokyselinový zbytek Phe, alespoň jeden z Ib K] a Li znamená aminokyselinový zbytek Pro, Ji znamená aminokyselinový zbytek Val a Ai znamená aminokyselinový zbytek Lys.
-4CZ 288029 B6
9Q 9Q Agonizujícím analogem amylinu je výhodně sloučenina obecného vzorce I, kterou je ' Proh-amylin mající aminokyselinovou sekvenci:
I 510
Lys-Cys-Asn-Thr-Ala-Thr-Cys-Ala-Thr-Gln-
II 1520
Arg-Leu-Ala-Asn-Phe-Leu-Val-His-Ser-Ser21 2530
Asn-Asn-Phe-Gly-Pro-Ile-Leu-Pro-Pro-Thr3135
Asn-Val-Gly-Ser-Asn-Thr-Tyr-NHj.
Agonizujícím analogem amylinu je výhodně sloučenina obecného vzorce I, kterou je acetátová 25’28’29Pro-h-amylinu.
Agonizujícím analogem amylinu je výhodně sloučenina obecného vzorce 1, kterou je trifluoracetátová sůl 25,28'29Pro-h-amylinu.
Agonizujícím analogem amylinu je výhodně sloučenina obecného vzorce I, kterou je hydrochloridová sůl 25’28,29Pro-h-amylinu.
Předmětem vynálezu je také agonizující analog amylinu obecného vzorce I pro použití jako léčivo pro léčbu diabetes mellitus a jeho symptomů. Výhodně je takovým agonizujícím analogem amylinu sloučenina obecného vzorce I, ve kterém X a Y znamenají aminokyselinové zbytky Cys spojené disulfidovou vazbou a Z znamená amino-skupinu. Výhodněji je takovým agonizujícím 94 9ÍÍ 9Q analogem amylinu sloučenina obecného vzorce I, kterou je ’ ’ Pro-h-amylm.
Předmětem vynálezu je dále farmaceutický prostředek, zejména pro léčení diabetes mellitus a jeho symptomů, jehož podstata spočívá v tom, že obsahuje terapeuticky účinné množství agonizujícího analogu amylinu obecného vzore I.
Předmětem vynálezu je dále farmaceutický prostředek, zejména pro léčení diabetes mellitus a jeho symptomů, jehož podstata spočívá v tom, že obsahuje terapeuticky účinné množství agonizujícího analogu amylinu obecného vzore I, ve kterém X a Y znamenají aminokyselinové zbytky Cys spojené disulfidovou vazbou a Z znamená amino-skupinu.
Předmětem vynálezu je dále farmaceutický prostředek, zejména pro léčení diabetes mellitus a jeho symptomů, jehož podstata spočívá v tom, že obsahuje terapeuticky účinné množství agonizujícího analogu amylinu obecného vzore I, kterým je 25’28’29Pro—h—amylin.
Předmětem vynálezu je dále farmaceutický prostředek, zejména pro léčení diabetes mellitus a jeho symptomů, jehož podstata spočívá v tom, že obsahuje terapeuticky účinné množství agonizujícího analogu amylinu obecného vzorce I a inzulín přimíšený ve formě vhodné pro terapeutické podání.
Předmětem vynálezu je dále farmaceutický prostředek, zejména pro léčení diabetes mellitus a jeho symptomů, jehož podstata spočívá v tom, že obsahuje terapeuticky účinné množství agonizujícího analogu amylinu obecného vzorce I, ve kterém X a Y znamenají aminokyselinové zbytky Cys spojené disulfidovou vazbou a Z znamená amino-skupinu, a inzulín přimíšený ve formě vhodné pro terapeutické podání.
-5CZ 288029 B6 znamená Val, Kj znamená Asn, nebo
Ji
M,
f) A] znamená Lys, D] znamená Arg, Gj znamená His, Ji znamená Ala, Mi znamená Asp, znamená Ser,
Bi znamená Thr, Ei znamená Ser, H] znamená Leu, Kt znamená Leu,
Li znamená Pro a
Ci znamená Val, Fi znamená Ser, li znamená Ala,
Li znamená Pro a potom alespoň jeden z aminokyselinových zbytků A až M ve sloučeninách definovaných v odstavcích a) až f) znamená D-aminokyselinový zbytek, a Z neznamená aminovou skupinu, a s podmínkou, že agonizujícím analogem amylinu není 23Leu-amylin, 29Pro-amylin nebo des‘Lys-amylin, a jeho farmaceuticky přijatelné soli.
Agonizujícím analogem amylinu je výhodně sloučenina obecného vzorce I, ve kterém X a Y znamenají aminokyselinové zbytky Cys spojené disulfidovou vazbou a Z znamená aminoskupinu.
Agonizujícím analogem amylinu je výhodně sloučenina obecného vzorce I, ve kterém H, znamená aminokyselinový zbytek Phe.
Agonizujícím analogem amylinu je výhodně sloučenina obecného vzorce I, ve kterém H] znamená aminokyselinový zbytek Phe a alespoň jeden zl|, Kj a Li znamená aminokyselinový zbytek Pro.
Agonizujícím analogem amylinu je výhodně sloučenina obecného vzorce I, ve kterém H] znamená aminokyselinový zbytek Phe a dva z I15 K] a L! znamenají aminokyselinový zbytek Pro.
Agonizujícím analogem amylinu je výhodně sloučenina obecného vzorce I, ve kterém Hj znamená aminokyselinový zbytek Phe a I], K, a Li znamenají aminokyselinový zbytek Pro.
Agonizujícím analogem amylinu je výhodně sloučenina obecného vzorce I, ve kterém Hi znamená aminokyselinový zbytek Phe, alespoň jeden z I], Kj a Li znamená aminokyselinový zbytek Pro a Di znamená aminokyselinový zbytek Arg.
Agonizujícím analogem amylinu je výhodně sloučenina obecného vzorce I, ve kterém Hi znamená aminokyselinový zbytek Phe, alespoň jeden z L, Kt a Lj znamená aminokyselinový zbytek Pro a Ji znamená aminokyselinový zbytek Val.
Agonizujícím analogem amylinu je výhodně sloučenina obecného vzorce I, ve kterém Hi znamená aminokyselinový zbytek Phe, alespoň jeden z Ii, Ki a Li znamená aminokyselinový zbytek Pro, Di znamená aminokyselinový zbytek Arg a A] znamená aminokyselinový zbytek Lys.
Agonizujícím analogem amylinu je výhodně sloučenina obecného vzorce I, ve kterém H] znamená aminokyselinový zbytek Phe, alespoň jeden z Ij, Ki a L| znamená aminokyselinový zbytek Pro, Di znamená aminokyselinový zbytek Arg a A] znamená vodík.
Agonizujícím analogem amylinu je výhodně sloučenina obecného vzorce I, ve kterém Hi znamená aminokyselinový zbytek Phe, alespoň jeden z Ib Kj a Li znamená aminokyselinový zbytek Pro, J] znamená aminokyselinový zbytek Val a A! znamená aminokyselinový zbytek Lys.
-4CZ 288029 B6
28 29 Agonizujícím analogem amylinu je výhodně sloučenina obecného vzorce I, kterou je ' ’ Proh-amylin mající aminokyselinovou sekvenci:
I 510
Lys-Cys-Asn-Thr-Ala-Thr-Cys-Ala-Thr-Gln-
II 1520
Arg-Leu-Ala-Asn-Phe-Leu-Val-His-Ser-Ser21 2530
Asn-Asn-Phe-Gly-Pro-Ile-Leu-Pro-Pro-Thr3135
Asn-Val-Gly-Ser-Asn-Thr-Tyr-NH^·
Agonizujícím analogem amylinu je výhodně sloučenina obecného vzorce I, kterou je acetátová 25,8-29pro_h_amylinu.
Agonizujícím analogem amylinu je výhodně sloučenina obecného vzorce I, kterou je trifluoracetátová sůl 2’’28,29Pro-h-amylinu.
Agonizujícím analogem amylinu je výhodně sloučenina obecného vzorce I, kterou je hydrochloridová sůl 2>,28’29Pro-h-amylinu.
Předmětem vynálezu je také agonizující analog amylinu obecného vzorce I pro použití jako léčivo pro léčbu diabetes mellitus a jeho symptomů. Výhodně je takovým agonizujícím analogem amylinu sloučenina obecného vzorce I, ve kterém X a Y znamenají aminokyselinové zbytky Cys spojené disulfidovou vazbou a Z znamená amino-skupinu. Výhodněji je takovým agonizujícím analogem amylinu sloučenina obecného vzorce I, kterou je 25,28,29Pro-h-amylin.
Předmětem vynálezu je dále farmaceutický prostředek, zejména pro léčení diabetes mellitus a jeho symptomů, jehož podstata spočívá v tom, že obsahuje terapeuticky účinné množství agonizujícího analogu amylinu obecného vzore I.
Předmětem vynálezu je dále farmaceutický prostředek, zejména pro léčení diabetes mellitus a jeho symptomů, jehož podstata spočívá v tom, že obsahuje terapeuticky účinné množství agonizujícího analogu amylinu obecného vzore I, ve kterém X a Y znamenají aminokyselinové zbytky Cys spojené disulfidovou vazbou a Z znamená amino-skupinu.
Předmětem vynálezu je dále farmaceutický prostředek, zejména pro léčení diabetes mellitus a jeho symptomů, jehož podstata spočívá v tom, že obsahuje terapeuticky účinné množství agonizujícího analogu amylinu obecného vzore I, kterým je 25,2 ’29Pro-h-amylin.
Předmětem vynálezu je dále farmaceutický prostředek, zejména pro léčení diabetes mellitus a jeho symptomů, jehož podstata spočívá v tom, že obsahuje terapeuticky účinné množství agonizujícího analogu amylinu obecného vzorce I a inzulín přimíšený ve formě vhodné pro terapeutické podání.
Předmětem vynálezu je dále farmaceutický prostředek, zejména pro léčení diabetes mellitus a jeho symptomů, jehož podstata spočívá v tom, že obsahuje terapeuticky účinné množství agonizujícího analogu amylinu obecného vzorce I, ve kterém X a Y znamenají aminokyselinové zbytky Cys spojené disulfidovou vazbou a Z znamená amino-skupinu, a inzulín přimíšený ve formě vhodné pro terapeutické podání.
-5CZ 288029 B6
Předmětem vynálezu je dále farmaceutický prostředek, zejména pro léčení diabetes mellitus a jeho symptomů, jehož podstata spočívá v tom, že obsahuje terapeuticky účinné množství agonizujícího analogu amylinu obecného vzore I, kterým je 25,28ž9Pro-h-amylin, a inzulín přimíšený ve formě vhodné pro terapeutické podání.
Ve výše uvedených farmaceutických prostředcích je agonizujícím analogem amylinu výhodně sloučenina obecného vzorce I, kterou je des-Lys25,2 ’29Pro-h-amylin, nebo 16Ar25,28Pro-h-amylin nebo des-’Lys16Arg25’28Pro-h-amylin.
Přehled obrázků na výkresech
Na připojených výkresech obr. 1 zobrazuje aminokyselinovou sekvenci lidského amylinu, obr. 2 zobrazuje srovnání aminokyselinových sekvencí amylinů izolovaných z různých živočišných druhů a obr. 3 zobrazuje aminokyselinovou sekvenci nových amylin-agonizujících peptidů.
Sloučeniny podle vynálezu tvoří s různými anorganickými nebo organickými kyselinami a bázemi soli. Takové soli zahrnují soli připravené s organickými nebo anorganickými kyselinami, například s kyselinou chlorovodíkovou, kyselinou bromovodíkovou, kyselinou sírovou, kyselinou fosforečnou, kyselinou trifluoroctovou, kyselinou octovou, kyselinou mravenčí, kyselinou methansulfonovou, kyselinou toiuensulfonovou, kyselinou maleinovou, kyselinou fumarovou a kyselinou kafrsulfonovou. Soli připravené s bázemi zahrnují například amonné soli, soli alkalických kovů (jakými jsou sodné a draselné soli) a kovů alkalických zemin (jakými jsou vápenaté a hořečnaté soli). Výhodnými solemi jsou acetáty, hydrochloridy a trifluoracetáty.
Tyto soli mohou být připraveny konvenčním způsobem, například reakcí produktu ve formě volné kyseliny nebo ve formě volné báze s jedním nebo několika ekvivalenty příslušné báze nebo kyseliny v rozpouštědle nebo prostředí, ve kterém je vzniklá sůl nerozpustná, nebo v rozpouštědle, jakým je voda, které se potom odstraní za vakua nebo lyofilizaci, nebo výměnou iontů již existující soli za jiný iont na vhodné iontoměničové pryskyřici.
Sloučeniny podle vynálezu zahrnují různé stereoizomery. Ve výhodných sloučeninách podle vynálezu mají všechna chirální centra základního peptidového řetězce konfiguraci S.
Sloučeniny podle vynálezu mohou být připraveny za použití některých konvenčních kopulačních reakcí známých v chemii peptidů. Analogy podle vynálezu se připraví postupným přidáváním požadovaných aminokyselin k narůstajícímu peptidovému řetězci. Obvykle se alfa-Nkarbamoylem chráněná aminokyselina a aminokyselina připojená k rostoucímu peptidovému řetězci na pryskyřicovém nosiči uvedou v reakci při okolní teplotě v inertním rozpouštědle, jakým je N-methylpyrrolidon, dimethylformamid nebo methylenchlorid, v přítomnosti kopulačního činidla, jakým je dicyklohexylkarbodimid-l-hydroxybenzotriazol, a v přítomnosti báze, jakou je diizopropylethylamin. alfa-N-Karbamoylová ochranná skupina se potom z rezultujícího peptidu odstraní působením reakčního činidla, jakým je kyselina trifluoroctová nebo piperidin, a kopulační reakce se opakuje s další požadovanou N-chráněnou aminokyselinou.
Vhodnými N-ochrannými skupinami jsou známé ochranné skupiny, přičemž výhodnou ochrannou skupinou je zde terc.butyloxykarbonylová skupina.
Některé výhodné způsoby syntézy jsou popsány v související patentové přihlášce 667,040 („Synthetic Preparation of Amylin and Amylin Analogs“) podané 8. března 1991. Tyto způsoby zahrnují syntézu v pevné fázi peptidu, který zahrnuje amylin nebo analog amylinu mající zvýšenou biologickou účinnost a jsoucí prostý delece a ostatních kontaminujících peptidů, při které se uvedený peptid syntetizuje za použití postupných syntézních cyklů, přičemž v každém takovém syntézním cyklu se určená aminokyselina přidá k rostoucímu peptidovému řetězci, připojenému k nerozpustnému pryskyřicovému nosiči, vytvořením peptidové vazby mezi alfa
-6CZ 288029 B6 aminovou skupinou rostoucího peptidového řetězce a alfa-karboxylovou skupinou určené aminokyseliny, přičemž každý uvedený syntézní cyklus zahrnuje:
a) zpracování rostoucího peptidového řetězce za alfa-amino- deprotekčních podmínek za účelem odstranění alfa-amino- skupiny,
b) aktivaci alfa-karboxylové skupiny alfa-amino-chráněné určené aminokyseliny,
c) uvedení do styku rostoucího peptidového řetězce a určené aminokyseliny za kopulačních podmínek za účelem vytvoření vazby mezi volnou aminovou skupinou peptidového řetězce a aktivovanou alfa-karboxylovou skupinou určené aminokyseliny a
d) opakování stupňů b) a c) v případě, že kopulační účinnost stupně c) je menší než asi 97%.
Je výhodné opakovat stupně b) a c) v případě, že kopulační účinnost je nižší než asi 99 %. Při jiném výhodném provedení se stupně b) a c) opakují v každém syntézním cyklu. Kopulační účinnost se případně měří po každém kopulačním stupni.
Vhodné kopulační podmínky zahrnují použití rozpouštědlového systému, který maximalizuje zbobtnání pevného nosiče, minimalizuje sekundární strukturní prvky peptidového řetězce v průběhu syntézních cyklů a minimalizuje intrapeptidovou a interpeptidovou vodíkovou vazbu. Syntézní cyklus výhodně zahrnuje úpravu čepičkou po kopulačním stupni nebo kopulačních stupních, při kterém se nezreagované alfa-aminové skupiny peptidového řetězce učiní nereaktivními. Syntézní cyklus se postupně opakuje za použití příslušně chráněných alfaaminokyselin za účelem získání amylinu nebo amylinového analogu specifikované sekvence. Po dokončení postupných syntézních cyklů se uvedený amylin nebo amylinový analog odštěpí od pevného nosiče. Je výhodné, jestliže se cysteinové zbytky peptidového řetězce selektivně zbaví ochranné skupiny a jestliže se vytvoří intramolekulámí disulfídová vazba ještě před rozštěpením vazby pojící peptid k pevnému nosiči.
Vhodné alfa-amino-ochranné skupiny zahrnují terc.butoxy-karbonylovou skupinu a 9-fluorenylmethoxykarbonylovou skupinu. Při jednom výhodném provedení se jako alfa-aminoochranná skupina použije terc.butoxykarbonylová skupina, přičemž se alfa-karboxylové skupiny aktivují za použití dicyklohexylkarbodiimidu a 1-hydroxybenzotriazolu za vzniku 1-hydroxybenzotriazolesterů. Obzvláště výhodný rozpouštědlový systém zahrnuje N-methylpyrrolidon.
Příprava některých agonizujících analogů amylinu podle vynálezu je popsána v příkladech 1 až 17. Kromě toho další agonizující analogy amylinu, které mohou být připraveny podle výše uvedených postupů, jsou shrnuty v tabulce II. Sloučeniny podle vynálezu mohou být také připraveny za použití rekombinantní DNA techniky o sobě známými postupy (o tom viz. Sambrook a kol., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2. vyd., Cold Spring Harbor (1989).
Za účelem indikace peptidu, na kterém je sekvence založena, a modifikací provedených na základní peptidové amylinové sekvenci se používá obvyklá nomenklatura obdobných sloučenin. Exponent předcházející aminokyselinu v dané aminokyselinové sekvenci znamená, že uvedená aminokyselina nahrazuje aminokyselinu normálně přítomnou v základní aminokyselinové sekvenci v poloze uvedené zmíněným exponentem. Tak například specifikace „18Arg25,28Pro-hamylin“ znamená, že peptid založený na sekvenci „h-amylinu“ neboli „lidského amylinu“ má následující substituce: Arg nahrazuje His ve zbytku 18, Pro nahrazuje Ala ve zbytku 25 a Pro nahrazuje Ser ve zbytku 28. Výraz „des-'Lys-h-amylin“ znamená peptid založený na lidském amylinu s vypuštěnou první nebo N-terminální aminokyselinou.
Agonizující analogy amylinu jsou užitečnými produkty vzhledem k jejich farmakologickým vlastnostem. Sloučeniny podle vynálezu jsou zejména účinné jako amylin-agonizující činidla, jak je to demonstrováno účinností při testu stanovujícím schopnost vazby k receptoru a při testu na lýtkovém svalu, které jsou popsané v příkladech 18 a 19. Amylin-agonizující účinnost sloučenin podle vynálezu může být rovněž vyhodnocena schopností indukovat hyperlaktémii nebo/a hyperglykémii u savců. Kromě popisu sloučenin podle vynálezu provedeného na obr. 3, jsou
-7CZ 288029 B6 některé výhodné sloučeniny uvedené v dále zařazené tabulce 1. Výhodné sloučeniny podle vynálezu des-Lys-h-amylin, 28Pro-h-amylin, 25,28’29Pro-h-amylin, lsArg25,28Pro-h-amylin a des1Lys18Arg23,28Pro-h-amylin vykazují amylinovou účinnost in vivo u pokusných zvířat spočívající ve vyvolání výrazné hyperlaktémie a posléze hyperglykemie. Kromě charakteristické účinnosti amylinu mají některé z výhodných sloučenin podle vynálezu ve srovnání s lidským amylinem žádanou lepší rozpustnost a stabilitu. Těmito výhodnými sloučeninami jsou 25Pro26Val28,29Pro-h-amylin,25 2,29Pro-h-amylin a 18Arg25,28Pro-h-amylin.
Obzvláště výhodnými sloučeninami podle vynálezu jsou 18Arg25,28Pro-h-amylin, deslLys18Arg23’2SPro-h-amylin, l8Arg23,28’29Pro-h-amylin, des-1Lys18Arg25,28’29Pro-h-amylin, 2i’28’29Pro-h-amylin, des-1Lys25,28,29Pro-h-amylin a 25Pro26Val25,28Pro-h-amylin. Ještě další amylin-agonizující peptidové sloučeniny jsou uvedeny v dále zařazené tabulce II. Tyto sloučeniny zahrnují:
23Leu25Pro26Val28,29Pro-h-amylin;
23 Leu25Pro26 Val28Pro-h-amy lin; des-1Lys23Leu25Pro26Val28Pro-h-amylin; l8Arg23Leu25Pro26Val28Pro-h-amylin;
18Arg23Leu25’28,29Pro-h-amylin;
I8Arg23Leu25,28Pro-h-amylin;
17Ile23Leu25,28’29Pro-h-amylin;
17Ile25,28’29Pro-h-amylin;
des-‘Lys17Ile23Leu2 ’28,29Pro-h-amylin;
17Ile18Arg23Leu-h-amylin;
17 Ile18 Arg23Leu26 V al29Pro-h-amy lin; l7Ile18Arg23Leu25Pro26Val28,29Pro-h-amylin;
13Thr21His23Leu26Ala28Leu29Pro31Asp-h-amylin; 13Thr2IHis23Leu26Ala29Pro31Asp-h-amylin;
des-1 Lys13Thr21 His23Leu26Ala28Pro31 Asp-h-amyl in;
I3ThrI8Arg21His23Leu26Ala29Pro3IAsp-h-amylin;
13Thr18Arg21His23Leu28,29Pro3 ‘Asp-h-amylin a 13Thr18Arg21His23Leu23Pro26Ala28,29Pro31Asp-h-amylin;
Sloučeniny podle vynálezu mohou být za účelem přípravy farmaceutických forem vhodných pro parenterální podání kombinovány s farmaceutickými nosiči. Experimentálně zjištěné odezvy sloučenin podle vynálezu jsou potvrzeny klinickými aplikacemi takových farmaceutických kompozic při léčení diabetes mellitus a dalších inzulin-vyžadujících stavů, jakož i při prevenci a léčení hypoglykemických epizod. Sloučeniny podle vynálezu mohou být rovněž kombinovány s inzulínem za účelem léčení diabetes mellitus a ostatních inzulin-vyžadujících stavů. Pod pojmem „inzulín“ se rozumí polypeptid nebo jeho ekvivalent, který je použitelný pro regulaci hladiny glukózy v krvi. Obecný popis takových inzulínů je uveden v Goodmanově a Gilmanově publikaci The Pharmacological Basis of Therapeutics, 8. vyd. Pergamon Press (1990). Takové inzulíny mohou být rychle působícími, středně rychle působícími nebo dlouhodobě působícími inzulíny. Existují četné deriváty inzulínu a všechny tyto deriváty jsou použitelné v rámci vynálezu (viz např. patentové spisy US 5,049,547, 5,028,587 a 5,016,643. Rovněž mohou být použity inzulínové peptidy (viz např. patent US 5,008,241), pokud jsou inzulínovými analogy ve smyslu jeho charakteristického účinku (viz například patent US 4,992,417 a 4,992,418). Takové farmaceutické kompozice mohou být podávány libovolnou standardní cestou, včetně nazálního podání (viz, například patenty US 4,988,512 a 4,985,242 a 2 BioWorld Today, č. 125 (1991)).
Sloučeniny podle vynálezu jsou rovněž použitelné v kombinaci s glukagonem za účelem prevence a léčení hypoglykemie (viz například Young a kol., patentová přihláška US 07/640,478, podaná lO.ledna 1991 pod názvem „Hyperglykemické kompozice“.
-8CZ 288029 B6
Kompozice nebo produkty podle vynálezu mohou být formulovány ve formě roztoků vhodných pro parenterální (včetně intravenózního, intramuskulámího a subkutánního podání), nazální nebo perorální podání. V mnoha případech může být vhodné formulovat agonizující analog amylinu a inzulín, resp. glukagon v jedné a téže kompozici nebo roztoku pro společné podání obou těchto účinných látek. V jiných případech může být výhodnější podávat inzulín nebo glukagon odděleně od uvedeného agonizujícího analogu amylinu. Vhodný aplikační formát bude nejlépe stanoven ošetřujícím lékařem individuálně pro každého pacienta. Vhodné farmaceuticky přijatelné nosiče a jejich formulace jsou popsané ve standardních odborných publikacích, například v Remingtonů Pharmaceutical Sciences, E.W. Martin (rovněž viz například Wang Y.J. a Hanson M.A. „Parenteral Formulations of Proteins and Peptides: Stability and Stabilizers“, Joumal of Parenteral Science a Technology, Technical Report č. 10, Supp. 42:25 (1988). Vhodné formulace zahrnující inzulín nebo glukagon jsou velmi dobře známé.
Agonizující preparáty podle vynálezu mohou být stabilizovány při neutrálním pH. Poněvadž sloučeniny podle vynálezu mají amfotemí charakter, mohou být použity jako volné báze, adiční soli s kyselinami nebo jako soli kovů. Tyto soli musí být samozřejmě farmaceuticky přijatelné, přičemž tyto soli budou zahrnovat soli kovů, obzvláště soli alkalických kovů a kovů alkalických zemin, například draselné nebo sodné soli. Jak již bylo uvedeno výše, existuje široké spektrum farmaceuticky přijatelných adičních solí s kyselinami. Tyto soli zahrnují soli připravené s organickými i anorganickými kyselinami, výhodně s minerálními kyselinami. Typickými kyselinami, které mohou být uvedeny jako příklad, jsou kyselina.citronová, kyselina jantarová, kyselina mléčná, kyselina chlorovodíková a kyselina bromovodíková. Takové sloučeniny jsou připravitelné postupy, které jsou pro pracovníky v daném oboru velmi dobře známé.
Sloučeniny podle vynálezu budou normálně formulovány jako parenterální kompozice pro injekci nebo infuzi. Tyto sloučeniny mohou být například suspendovány v inertním oleji, jakým je vhodně rostlinný olej, jakým je sezamový olej, arašídový olej nebo olivový olej. Alternativně mohou být tyto sloučeniny suspendovány ve vodném izotonickém pufrovaném roztoku o pH asi 5,6 až 7,4. Obvyklé použitelné pufry zahrnují pufr citran sodný/kyselina citrónová a fosfát sodný/kyselina fosforečná. Rovněž mohou být použity přípravky s pomalým uvolňováním účinné látky, pomocí kterých se terapeuticky účinné množství účinné látky nebo kompozice, která ji obsahuje, uvolňuje do krevního řečiště po dobu mnoha hodin nebo dnů po transdermální injekci.
Požadované izotonicity může být dosaženo použitím chloridu sodného nebo jiného farmaceuticky přijatelného činidla, jakým je dextróza, kyselina boritá, vínan sodný, propylenglykol, polyoly (jako mannit a sorbit) nebo jiných anorganických nebo organických rozpuštěných látek. Pro pufry obsahující sodné ionty je obzvláště výhodný chlorid sodný.
V případě potřeby mohou být roztoky výše uvedených kompozic zahuštěny zahušťovadlem, jakým je ethylcelulóza. Mohou být připraveny v emulgovatelné formě a to ve formě emulzí voda-v-oleji nebo olej-ve-vodě. Přitom může být použito libovolné emulgační činidlo z širokého spektra farmaceuticky přijatelných emulgačních činidel, mezi které například patří akáciový prášek, neionogenní povrchově aktivní činidla (jakým je Tween) nebo ionogenní povrchově aktivní činidla (jakými jsou polyetheralkoholsulfíty nebo sulfonáty alkalických kovů, například Triton).
Terapeuticky použitelné kompozice podle vynálezu se připraví smíšením jednotlivých složek za použití obvyklých postupů. Tak mohou být například zvolené složky jednoduše smíšeny v mísiči nebo jiném standardním zařízení, používaném k tomuto účelu, přičemž se získá koncentrovaná směs, která může být potom nastavena na finální požadovanou koncentraci a viskozitu přidáním vody nebo zahušťovadla a případně pufru za účelem regulace pH nebo dodatečné rozpuštěné látky za účelem regulace tonicity.
Za účelem praktického použití ošetřujícím lékařem bude kompozice podle vynálezu formulována v jednotkové dávkovači formě, obsahující množství agonizující sloučeniny s inzulínem nebo
-9CZ 288029 B6 glukagonem nebo bez inzulínu nebo glukagonu, které bude účinné v jedné nebo násobné dávce při kontrole nebo opětovném nastavení cukru v krvi na zvolenou hladinu. Terapeuticky účinnými množstvími agonizujícího analogu amylinu pro léčení hypoglykemie jsou taková množství, která zvýší hladinu cukru v krvi, výhodně nad 80 mg/dl. Terapeuticky účinnými množstvími takových agonizujících analogů amylinu pro léčení diabetes mellitus nebo ostatních inzulin-vyžadujících stavů jsou množství, která jsou dostatečná pro omezení předávkování inzulínu nebo nežádoucí hypoglykemie. Pro pracovníky v daném oboru je samozřejmé, že účinné množství terapeutického činidla se mění v závislosti na mnoha činitelích, mezi které patří zejména věk a hmotnost pacienta, pacientův fyzický stav, hladina krevního cukru, která má být dosažena. Typickými dávkovými jednotkami jsou při léčení diabetes mellitus dávky obsahující asi 0,1 až 5 mg amylinagonizující sloučeniny a případně asi 0,5 až asi 10 mg inzulínu. Typickými dávkovacími jednotkami jsou při léčení hypoglykemie dávky obsahující asi 0,5 až 1,0 mg amylin-agonizující sloučeniny a případně obvykle používané množství nebo menší množství glukagonu.
Jak již bylo uvedeno výše, formulují se kompozice použitelné v rámci vynálezu standardními postupy. Tyto kompozice se rovněž podávají standardními postupy. Vhodné dávky těchto kompozic jsou pro pracovníky v daném oboru rutinní záležitostí, přičemž mohou být použity například výše uvedené dávky.
V následující části popisu bude vynález blíže objasněn pomocí konkrétních příkladů jeho provedení, které však mají pouze ilustrační charakter a nikterak neomezují rozsah vynálezu, který je jednoznačně vymezen formulací patentových nároků.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Příprava 28Pro-h-amylinu
Syntéza v pevné fázi tohoto analogu lidského (,,-h-„) amylinu za použití methylbenzhydrylaminové pryskyřicové kotvy a N3-Boc/benzyl-ochrany bočních řetězců se provádí standardní metodou syntézy peptidů. Komplex 2,7-/disulfid/amylin-MBHA-pryskyřice se získá reakcí Acm-chráněných cysteinů s trifluoracetátem v kyselině trifluoroctové. Po dokončení cyklizace se pryskyřice a ochranné skupiny bočních řetězců odštěpí kapalnou kyselinou fluorovodíkovou v přítomnosti dimethylsulfidu a anisolu. Získaný 28Pro-h-amylin se přečistí vysokotlakou kapalinovou chromatografií. Analýzou provedenou vysokotlakou kapalinovou chromatografií a kapilární elektroforézou bylo zjištěno, že získaný peptid je homogenní, přičemž jeho struktura byla potvrzena aminokyselinovou analýzou a sekvenční analýzou. Produkt poskytuje iont s požadovanou hmotou.
Hmotové spektrum (FAB, ionizace rychlými atomy): (M+l)/e = 3914.
Příklad 2
Příprava 2Pro26Val28,29Pro-h-amylinu
Syntéza v pevné fázi tohoto amylinového analogu za použití methylbenzhydíylaminové kotvy k pryskyřici a Na-Boc/benzyl-ochrany bočních řetězců byla provedena standardní metodou syntézy peptidů. Komplex 2’7-/disulfid/amylin-MBHA-pryskyřice byl získán reakcí s trifluoracetátem thallitým v kyselině trifluoroctové. Po dokončení cyklizace se pryskyřice a ochranné skupiny bočních řetězců odštěpí kapalnou kyselinou fluorovodíkovou v přítomnosti dimethylsulfidu a anisolu. Získaný 25Pro2 val28-29Pro-h-amylin se přečistí vysokotlakou kapalinovou
-10CZ 288029 B6 chromatografií. Analýzou provedenou vysokotlakou kapalinovou chromatografií a kapilární elektroforézou bylo stanoveno, že získaný peptid je homogenní, přičemž jeho struktura byla potvrzena aminokyselinovou analýzou a sekvenční analýzou. Produkt poskytuje iont s požadovanou hmotou.
Hmotové spektrum (FAB): (M+l)/e = 3936.
Příklad 3
Příprava 2'7cyklo-/2Asp,7Lys/-h-amylinu
Syntéza v pevné fázi tohoto amylinového analogu za použití vazby s pryskyřicí tvořené methylbenzhydrylaminovou kotvou a Na-Boc/benzyl-ochrany bočních řetězců byla provedena standardní metodou syntézy peptidů. 2Asp a 7Lys byly zavedeny pomoci Boc-“Asp-(Fmoc) OH a Boc-7Lys(Fmoc)-OH. Po selektivním odstranění ochranných skupin bočních řetězců piperidinem se provede cyklizace boční řetězec k bočnímu řetězci (2Asp-7Lys) za použití benzotriazol-1yloxy-tris(dimethylamino)fosfoniumhexafluorfosfátu (reakční činidlo BOP). Cyklizace se provádí postupem, popsaným vDiMaio, J. a kol., J. Med. Chem. 33:661-667 (1990) a v Felix A.M. a kol. Int. J. Pent. Prot. Res. 32:441 (1988). Komplex 2,7cyklo-/2Asp,7Lys/amylin-MBHApryskyřice, získaný po cyklizaci, se rozštěpí kapalnou kyselinou chlorovodíkovou v přítomnosti dimethylsulfidu a anisolu. Získaný 2’7cyklo-(2Asp,7Lys)-h-amylin se přečistí preparativní vysokotlakou kapalinovou chromatografií. Analýzou provedenou vysokotlakou kapalinovou chromatografií a kapilární elektroforézou bylo stanoveno, že získaný peptid je homogenní, přičemž jeho struktura byla potvrzena aminokyselinovou analýzou a sekvenční analýzou.
Hmotové spektrum (FAB): (M+l)/e = 2925.
Příklad 4
Příprava des-Lys-h-amylinu
Syntéza v pevné fázi des-Lys-h-amylinu (rovněž uváděného jako 2’37h-amylin) za použití vazby s pryskyřicí tvořené methylbenzhydrylaminovou kotvou a Na-Boc/benzyl-ochrany bočních řetězců byla provedena standardní metodou syntézy peptidů. Komplex 2’7-/disulfid/amylinMBHA-pryskyřice byl získán reakcí Acm-chráněných cysteinů s trifluoracetátem thallitým v kyselině trifluoroctové. Po dokončení cyklizace se pryskyřice a ochranné skupiny bočních řetězců odštěpí kapalnou kyselinou fluorovodíkovou v přítomnosti dimethylsulfidu a anisolu. Získaný des-Lys-h-amylin se přečistí preparativní vysokotlakou kapalinovou chromatografií s reverzní fází. Analýzou provedenou vysokotlakou kapalinovou chromatografií a kapilární elektroforézou bylo stanoveno, že získaný peptid je homogenní, přičemž jeho struktura byla potvrzena aminokyselinovou analýzou a sekvenční analýzou. Produkt poskytuje iont s požadovanou hmotností.
Hmotové spektrum (FAB): /M+H)+ = 3,775.
Příklad 5
Příprava 'Ala-h-amylinu
Syntéza v pevné fázi 'Ala-h-amylinu za použití vazby k pryskyřici tvořené methylbenzhydrylaminovou kotvou a Na-Boc/benzyl-ochrany bočních řetězců byla provedena standardní metodou syntézy peptidů. Komplex 2,7-(disuIfíd/amylin—MBHA-pryskyřice byl získán reakcí Acm
-11CZ 288029 B6 chráněných cysteinů s trifluoracetátem thallitým v kyselině trifluoroctové. Po dokončení cyklizace se pryskyřice a ochranné skupiny bočních řetězců odštěpí kapalnou kyselinou fluorovodíkovou v přítomnosti dimethylsulfidu a anisolu. Získaný *Ala-h-amylin byl přečištěn preparativní vysokotlakou kapalinovou chromatografii s reverzní fází. Analýzou provedenou vysokotlakou kapalinovou chromatografií a kapilární elektroforézou bylo zjištěno, že získaný peptid je homogenní, přičemž jeho struktura byla potvrzena aminokyselinovou analýzou a sekvenční analýzou. Produkt poskytuje iont s požadovanou hmotností.
Hmotové spektrum (FAB): (M+H)+ = 3,847.
Příklad 6
Příprava ‘Ser-h-amylinu
Syntéza v pevné fázi 'Ser-h-amylinu za použití vazby k pryskyřici tvořené methylbenzhydrylaminovou kotvou a Na-Boc/benzyl-ochrany bočních řetězců byla provedena standardní metodou syntézy peptidů. Komplex 2,7-/disulfid/amylin-MBHA-pryskyřice byl získán reakcí Acmchráněných cysteinů s trifluoracetátem thallitým v kyselině trifluoroctové. Po dokončení cyklizace se pryskyřice a ochranné skupiny bočních řetězců odštěpí kapalnou kyselinou fluorovodíkovou v přítomnosti dimethylsulfidu a anisolu. Získaný 'Ser-h-amylin se přečistí preparativní vysokotlakou kapalinovou chromatografií s reverzní fází. Analýzou provedenou vysokotlakou kapalinovou chromatografií a kapilární elektroforézou bylo stanoveno, že získaný peptid je homogenní, přičemž jeho struktura byla potvrzena aminokyselinovou analýzou a sekvenční analýzou. Produkt poskytuje iont s požadovanou hmotností.
Hmotové spektrum (FAB): (M+H)+ = 3,863.
Příklad 7
Příprava 29Pro-h-amylinu
Syntéza v pevné fázi tohoto analogu lidského amylinu za použití vazby k pryskyřici tvořené methylbenzhydrylaminovou kotvou a Na-Boc/benzyl-ochrany bočních řetězců byla provedena standardní metodou syntézy peptidů. Komplex 2,7-(disulfid)amylin-MBHA-pryskyřice byl získán reakcí Acm-chráněných cysteinů s trifluoracetátem thallitým v kyselině trifluoroctové. Po dokončení cyklizace se pryskyřice a ochranné skupiny bočních řetězců odštěpí kapalnou kyselinou fluorovodíkovou v přítomnosti dimethylsulfidu a anisolu. Získaný 29Pro-h-amylin se přečistí preparativní vysokotlakou kapalinovou chromatografií. Analýzou provedenou vysokotlakou kapalinovou chromatografií a kapilární elektroforézou bylo zjištěno, že získaný peptid je homogenní, přičemž jeho struktura byla potvrzena aminokyselinovou analýzou a sekvenční analýzou. Produkt poskytuje iont s požadovanou hmotností.
Hmotové spektrum (FAB): (M+H)+ = 3916.
Příklad 8
Příprava ’ Pro-h-amylinu
Syntéza v pevné fázi 25,28Pro-h-amylinu za použití vazby k pryskyřici tvořené methylbenzhydrylaminovou kotvou a Na-Boc/benzyl-ochrany bočních řetězců byla provedena standardní metodou syntézy peptidů. Komplex 2’7-/disulfid/amylin-MBHA-pryskyřice se získá reakcí Acm-chráněných cysteinů s trifluoracetátem thallitým v kyselině trifluoroctové. Po
-12CZ 288029 B6 dokončení cyklizace se pryskyřice a ochranné skupiny bočních řetězců odštěpí kapalnou kyselinou fluorovodíkovou v přítomnosti dimethylsulfidu a anisolu. Získaný 25,28Pro-h-amylin se přečistí preparativní kapalinovou vysokotlakou chromatografií s reverzní fází. Analýzou provedenou vysokotlakou kapalinovou chromatografií a kapilární elektroforézou bylo stanoveno, že získaný peptid je homogenní, přičemž jeho struktura byla potvrzena aminokyselinovou analýzou a sekvenční analýzou. Produkt poskytuje iont s požadovanou hmotností. Hmotové spektrum (FAB): (M+H)+ = 3,939.
Příklad 9
Příprava des-1 Lys2>,28Pro-h-amy 1 inu
Syntéza v pevné fázi des-1 Lys2a’28Pro-h-amy linu za použití vazby k pryskyřici tvořené methylbenzhydrylaminovou kotvou a Na-Boc/benzyl-ochrany bočních řetězců byla provedena standardní metodou syntézy peptidů. Komplex 2,7-/disulfld/amylin-MBHA-pryskyřice byl získán reakcí Acm-chráněných cysteinů s trifluoracetátem thallitým v kyselině trifluoroctové. Po dokončení cyklizace se pryskyřice a ochranné skupiny bočních řetězců odštěpí kapalnou kyselinou fluorovodíkovou v přítomnosti dimethylsulfidu a anisolu. Získaný des-1Lys25,28Pro-hamylin se přečistí preparativní vysokotlakou kapalinovou chromatografií s reverzní fází. Analýzou provedenou vysokotlakou kapalinovou chromatografií a kapilární elektroforézou bylo stanoveno, že získaný peptid je homogenní, přičemž jeho struktura byla potvrzena aminokyselinovou analýzou a sekvenční analýzou. Produkt poskytuje iont s požadovanou hmotností.
Hmotové spektrum (FAB): (M+H)+ = 3,811.
Příklad 10
Příprava 18Arg2:i'28Pro-h-amylinu
Syntéza v pevné fázi 18Arg2;,’28Pro-h-amylinu za použití vazby k pryskyřici tvořené methylbenzhydrylaminovou kotvou a Na-Boc/benzyl-ochrany bočních řetězců byla provedena standardní metodou syntézy peptidů. Komplex 2,7-/disulfid/amylin-MBHA-pryskyřice byl získán reakcí Acm-chráněných cysteinů s trifluoracetátem thallitým v kyselině trifluoroctové. Po dokončení cyklizace se pryskyřice a ochranné skupiny bočních řetězců odštěpí kapalnou kyselinou fluorovodíkovou v přítomnosti dimethylsulfidu a anisolu. Získaný 18Árg25, rro-h-amylin se přečistí preparativní vysokotlakou kapalinovou chromatografií s reverzní fází. Analýzou provedenou vysokotlakou kapalinovou chromatografií a kapilární elektroforézou bylo stanoveno, že získaný peptid je homogenní, přičemž jeho struktura byla potvrzena aminokyselinovou analýzou a sekvenční analýzou. Produkt poskytuje iont s požadovanou hmotností.
Hmotové spektrum (FAB): (M+H)+ = 3,959.
Příklad 11
Příprava des-lLys18Arg25,28Pro-h-amylinu
Syntéza v pevné fázi des-lLysI8Arg25,28Pro-h-amylinu za použití vazby k pryskyřici tvořené methylbenzhydrylaminovou kotvou a Na-Boc/benzyl-ochrany bočních řetězců byla provedena standardní metodou syntézy peptidů. Komplex 2,7-/disulfid/amylin-MBHA-pryskyřice se získá reakcí Acm-chráněných cysteinů s trifluoracetátem thallitým v kyselině trifluoroctové. Po dokončení cyklizace se pryskyřice a ochranné skupiny bočních řetězců odštěpí kapalnou
-13CZ 288029 B6 kyselinou fluorovodíkovou v přítomnosti dimethylsulfldu a anisolu. Des-1LysI8Arg25,28Pro-hamylin se přečistí preparativní vysokotlakou kapalinovou chromatografií s reverzní fází. Analýzou provedenou vysokotlakou kapalinovou chromatografií a kapilární elektroforézou bylo stanoveno, že získaný peptid je homogenní, přičemž jeho struktura byla potvrzena aminokyselinovou analýzou a sekvenční analýzou. Produkt poskytuje iont s požadovanou hmotností.
Hmotové spektrum (FAB): (M+H)+ = 3,832.
Příklad 12
Příprava 18Arg25,28'29Pro-h-amylinu
Syntéza v pevné fázi 18Arg23,28,29Pro-h-amylinu za použití vazby s pryskyřicí tvořené methylbenzhydrylaminovou kotvou a Na-Boc/benzyl-ochrany bočních řetězců byla provedena standardní metodou syntézy peptidů. Komplex 2'7-/disulfid/amylin-MBHA-pryskyřice byl získán reakcí Acm-chráněných cysteinů s trifluoracetátem thallitým v kyselině trifluoroctové. Po dokončení cyklizace se pryskyřice a ochranné skupiny bočních řetězců odštěpí kapalnou kyselinou fluorovodíkovou v přítomnosti dimethylsulfldu a anisolu. Získaný 18Arg25,28,29Pro-hamylin se přečistí preparativní vysokotlakou kapalinovou chromatografií s reverzní fází. Analýzou provedenou vysokotlakou kapalinovou chromatografií a kapilární elektroforézou bylo stanoveno, že získaný peptid je homogenní, přičemž jeho struktura byla potvrzena aminokyselinovou analýzou a sekvenční analýzou. Produkt poskytuje iont s požadovanou hmotností.
Hmotové spektrum (FAB): (M+H)+ = 3,971.
Příklad 13
Příprava des-‘Lysl8Arg25,28’29Pro-h-amylinu
Syntéza v pevné fázi des-’Lys18Arg25’28,29Pro-h-amylinu za použití vazby k pryskyřici tvořené methylbenzhydrylaminovou kotvou a Na-Boc/benzyl-ochrany bočních řetězců byla provedena standardní metodou syntézy peptidů. Komplex 2’7-/disulfid/amylin-MBHA-pryskyřice byl získán reakcí Acm-chráněných cysteinů s trifluoracetátem thallitým v kyselině trifluoroctové. Po dokončení cyklizace se pryskyřice a ochranné skupiny bočních řetězců odštěpí kapalnou kyselinou fluorovodíkovou v přítomnosti dimethylsulfldu a anisolu. Získaný desLys Arg ’ ’ Pro-h-amylin se přečistí preparativní vysokotlakou kapalinovou chromatografií s reverzní fází. Analýzou provedenou vysokotlakou kapalinovou chromatografií a kapilární elektroforézou bylo stanoveno, že získaný peptid je homogenní, přičemž jeho struktura byla potvrzena aminokyselinovou analýzou a sekvenční analýzou. Produkt poskytuje iont s požadovanou hmotností.
Hmotové spektrum: (M+H)+ = 3,843.
Příklad 14
Příprava 25,28,29Pro-h-amylinu
Syntéza v pevné fázi 23,28,29Pro-h-amylinu za použití vazby k pryskyřici tvořené methylbenzhydrylaminovou kotvou a Na-Boc/benzyl-ochrany bočních řetězců byla provedena standardní metodou syntézy peptidů. Komplex 2’7-/disulfid/amylin-MBHA-pryskyřice byl získán reakcí Acm-chráněných cysteinů s trifluoracetátem thallitým v kyselině trifluoroctové. Po dokončení cyklizace se pryskyřice a ochranné skupiny bočních řetězců odštěpí kapalnou
- 14CZ 288029 B6 kyselinou fluorovodíkovou v přítomnosti dimethylsulfidu a anisolu. Získaný ’ ’ Pro-h-amylin byl přečištěn preparativní vysokotlakou kapalinovou chromatografií s reverzní fází. Analýzou provedenou vysokotlakou kapalinovou chromatografií a kapilární elektroforézou bylo stanoveno, že získaný peptid je homogenní, přičemž jeho struktura byla potvrzena aminokyselinovou analýzou a sekvenční analýzou. Produkt poskytuje iont s požadovanou hmotností.
Hmotové spektrum (FAB): (M+H)+ = 3,949.
Příklad 15
Příprava des-’Lys2:>’28’29Pro-h-amylinu
Syntéza v pevné fázi des-’Lys25,28’29Pro-h-amylinu za použití vazby k pryskyřici tvořené methylbenzhydrylaminovou kotvou a Na-Boc/benzyl-ochrany bočních řetězců byla provedena standardní metodou syntézy peptidů. Komplex 2,7-/disulfid/amylin-MBHA-pryskyřice byl získán reakcí Acm-chráněných cysteinů s trifluoracetátem thallitým v kyselině tetrafluoroctové. Po dokončení cyklizace se pryskyřice a ochranné skupiny bočních řetězců odštěpí kapalnou kyselinou fluorovodíkovou v přítomnosti dimethylsulfidu a anisolu. Získaný des-Lys25,28,29Proh-amylin byl přečištěn preparativní vysokotlakou kapalinovou chromatografií s reverzní fází. Analýzou provedenou vysokotlakou kapalinovou chromatografií a kapilární elektroforézou bylo stanoveno, že získaný peptid je homogenní, přičemž jeho struktura byla potvrzena aminokyselinovou analýzou a sekvenční analýzou. Produkt poskytuje iont s požadovanou hmotností.
Hmotové spektrum (FAB): (M+H)+ = 3,823.
Příklad 16
Příprava des-lLys25Pro26Val28,29Pro-h-amylinu
Syntéza v pevné fázi tohoto h-amylinového analogu za použití vazby k pryskyřici tvořené methylbenzhydrylaminovou kotvou a Na-Boc/benzyl-ochrany bočních řetězců byla provedena standardní metodou syntézy peptidů a komplex 2,7-/disulfid/amylin-MBHA-pryskyřice byl získán reakcí s trifluoracetátem thallitým v kyselině trifluoroctové. Po dokončení cyklizace se pryskyřice a ochranné skupiny bočních řetězců odštěpí kapalnou kyselinou fluorovodíkovou v přítomnosti dimethylsulfidu a anisolu. Získaný des-Lys Pro Val ’ Pro-h-amylin se potom přečistí preparativní vysokotlakou kapalinovou chromatografií.
Příklad 17
Příprava /(D)-”Arg/-amylinu
Syntéza v pevné fázi tohoto amylinového analogu za použití vazby k pryskyřici tvořené methylbenzhydrylaminovou kotvou a Na-Boc/benzyl-ochrany bočních řetězců se provede standardní metodou syntézy peptidů. (D)-11Arg se zavede prostřednictvím (D)-nArg(Mtr)-OH. Komplex 2,7-/disulfíd/amylin-MBHA-pryskyřice se získá reakcí s trifluoracetátem thallitým v kyselině trifluoroctové. Po dokončení cyklizace se pryskyřice a ochranné skupiny bočních řetězců odštěpí kapalnou kyselinou fluorovodíkovou v přítomnosti dimethylsulfidu a anisolu. Získaný /(Dj^ArgA-amylin se potom přečistí preparativní vysokotlakou kapalinovou chromatografií.
-15CZ 288029 B6
Příklad 18
Test stanovující vazbu k receptorů
Vyhodnocení vazby sloučenin podle vynálezu k amylinovým receptorům se provádí následujícím způsobem. Při tomto testu se používá 125J-krysí amylin (Bolton-Hunter, značený na N-terminálním lysinu), který je komerčně dostupný u firmy Amersham Corporation (Arlington Heights, IL). Specifická aktivita v okamžiku použití činila 1950 až 2000 Ci/mmol. Neznačené peptidy byly získány od firmy Bachem lne. (Torrance, CA) a Peninsula Laboratories (Belmont, CA).
Krysí samečkové Sprague-Dawley s tělesnou hmotností 200 až 250 g byli usmrceni oddělením hlavy. Krysí mozek byl vypreparován a uložen do chladného fosfátem pufrovaného fyziologického roztoku (PBS). Z ventrálního povrchu byly vedeny řezy rostrálně k hypothalamu laterálně spojené čichovými trakty a vybíhající v úhlu 45° mediálně z těchto traktů. Tato bazální tkáň předního mozku, obsahující nucleus accumbens a přilehlé oblasti, se zváží a homogenizuje v ledově chladném 20mM pufru Hepes (20 mM Hepes-kyseliny, pH nastaveno na 7,4 použitím hydroxidu sodného při teplotě 23 °C). Membrány se třikrát promyjí čerstvým pufrem, přičemž mezi jednotlivými suspendováními v uvedeném pufru jsou zařazena 15 minutová odstředění při 48 000 x g. Finální membránová peleta se opětovně suspenduje ve 20 mM pufru Hepes obsahujícím 0,2 mM fenylmethylsulfonylfluoridu (PMSF).
Za účelem změření 125J-amylinové vazby se membrány ze 4 g původní vlhké tkáně inkubují s I25J-amylinem při 12-16 pM ve 20mM pufru Hepes obsahujícím 0,5 mg/ml bacitracinu, 0,5 mg/ml albuminu z bovinního séra a 0,2 nM PMSF. Roztoky se inkubují po dobu 60 minut při teplotě 23 °C. Inkubace se ukončí filtrací přes filtr ze skleněných vláken GF/B (Whatman lne., Clifton, NJ), který byl předběžně vlhčen po dobu 4 hodin v 0,3% polyethyleniminu za účelem redukce nespecifické vazby radiačně značených peptidů. Filtry byly bezprostředně před filtrací promyty 5 ml chladného PBS a bezprostředně po filtraci 15 ml chladného PBS. Filtry byly odděleny a jejich radioaktivita byla změřena gamma-počítačem s účinností 77 %. Měřením vazby v přítomnosti 10'12 až 10‘6M radiačně neznačené testované sloučeniny byly získány kompetiční křivky, které byly analyzovány nelineární regresí za použití 4-parametrových logaritmických rovnic (program Impot, GraphPAD Software, San Diego).
Při tomto testu se purifikovaný lidský amylin váže ke svému receptorů mírou vyjádřenou jako IC50 rovnou asi 50 pM. Výsledky tohoto testu získané pro testované sloučeniny podle vynálezu jsou uvedeny v dále zařazené tabulce I, ze které je zřejmé, že každá z uvedených sloučenin má významnou schopnost vazby k amylinovému receptorů.
Příklad 19
Test s lýtkovým svalem
Vyhodnocení amylin-agonizující účinnosti sloučenin podle vynálezu se provádí za použití následujícího testu s lýtkovým svalem. Při tomto testu byli použiti krysí samečkové Harlan Sprague-Dawley s přibližnou tělesnou hmotností 200 g za účelem získání hmotnosti odděleného lýtkového svalu nižší než 40 mg. Pokusná zvířata se po dobu 4 hodin před usmrcením oddělením hlavy udržují v režimu půstu. Ze zadní končetiny se stáhne kůže a končetina se fixuje na korkové destičce. Achilova šlacha se nařízne těsně nad patní kostí a musculus gastrocnemius se odchýlí od zadní části holeně. Lýtkový sval, který je malým 15 až 20 mm a 0,5 mm silným plochým svalem na kostním povrchu přivráceném k musculus gastrocnemius, se potom z kostního povrchu stáhne a obal svalových snopců (perimysium) se ze svalu odstraní za použití jemných nůžek a lékařských klíštěk. Lýtkový sval se potom rozřízne na čtyři stejné díly za použití čepelky vedené zepředu dozadu skrze bříško svalu, přičemž se získají celkem čtyři svalové proužky od každého
-16CZ 288029 B6 pokusného zvířete. Po odříznutí svalu od pokusného zvířete byl sval udržován po krátkou dobu ve fyziologickém roztoku. Nebylo nezbytné, aby byl sval udržován pod napětím, jelikož toto napětí nemělo demonstrovatelný účinek na inkorporování radiačně značené glukózy do glykogenu.
Uvedené svaly byly potom zavedeny do 50 ml Erlenmayerových baněk, obsahujících 10 ml předplyněného Krebs-Ringerova hydrogenuhličitanového pufru obsahujícího (v litru): chlorid sodný - 118,5 mmol (6,93 g), chlorid draselný - 5,94 mmol (443 mg), chlorid vápenatý 2,54 mmol (282 mg), síran hořečnatý - 1,19 mmol (143 mg), dihydrogenfosforečnan draselný 1,19 mmol (162 mg), hydrogenuhličitan sodný-25 mmol (2,1 g), 5,5 mmol glukózy (1 g) a rekombinantní lidský inzulín (Humulin-R, Eli Lilly, IN), jakož i níže specifikovanou testovanou sloučeninu. Zkontroluje se, zda pH při teplotě 37 °C leží v rozmezí mezi 7,1 a 7,4. Svaly se do jednotlivých baněk rozmístí tak, že se 4 svalové díly od každého pokusného zvířete rovnoměrně rozdělí mezi odlišné testové podmínky. Inkubační prostředí byla plyněna vháněním mírného proudu plynu s obsahem 95 % kyslíku a 5 % oxidu uhličitého nad jejich povrch za současného míchání prostředí při teplotě 37 °C pomocí oscilující vodní lázně. Po uplynutí půlhodinové „předinkubační periody“ se do každé baňky přidá 0,5 pCi U-14C-glukózy a obsahy baněk se inkubují po dobu dalších 60 minut. Každý svalový proužek se potom z baňky rychle odstraní, zbaví tekutiny vysátím, zmrazí v kapalném dusíku, zváží a uloží za účelem následného stanovení 14C-glykogenu.
Stanovení 14C-glykogenu se provádí v 7 ml scintilační nádobce. Každý zmražený vzorek svalu se umístí do uvedené nádobky a digeruje 1 ml 60% hydroxidu draselného při teplotě 70 °C po dobu 45 minut za kontinuálního míchání. Rozpuštěný glykogen se potom vysráží v nádobce přidáním 3 ml absolutního ethanolu a chladí přes noc při teplotě -20 °C. Supematant se potom opatrně odsaje, glykogen se opětovně promyje ethanolem, supematant se znovu odsaje a zbylá sraženina se vysuší za vakua. Odpaří se veškerý ethanol za účelem zabránění zhášení v průběhu scintilačního měření. Zbývající glykogen se znovu rozpustí, tentokrát v 1 ml vody a 4 ml scintilační tekutiny a potom se měří radioaktivita 14C.
Míra inkorporace glukózy do glykogenu (vyjádřená v pmol/g/h) se stanoví ze specifické aktivity !4C-glukózy v 5,5 nM glukózy inkubačního prostředí a z celkové radioaktivity l4C zbylé v glykogenu extrahovaném z každého svalu. Křivky odezva/dávka se zpracují 4-parametrovým logaritmickým modelem za použití rutinní metody nejmenších čtverců (Allfit, v2,7, NIH, MD) za účelem získání hodnot EC5o. Poněvadž EC50 je log-normálně distribuována, je vyjádřena ± standardní odchylkou logaritmu. Párové srovnání se provádí za použití rutinní metody na bázi t-testu Systat (Wilkinson, „Systat: the systém for statistics,“ Systat lne., Evanston IL (1989)).
Křivky dávka/odezva byly získány přidáním svalů k prostředí obsahujícímu 7,1 nM (1000pU/ml) inzulínu a každou testovanou sloučeninu přidanou ve finálních (nominálních) koncentracích 0, 1, 3, 10, 30, 100, 300 a 1000 nM. Při každém testu byl rovněž zahrnut vnitřní pozitivní kontrolní pokus tvořený šarží kiysího amylinu, který byl lyofílizován a uložen při teplotě -70 °C.
Lidský amylin je znám jako hyperglykemický peptid a měření EC50 amylinových preparátů při testu s lýtkovým svalem obvykle poskytuje hodnoty asi 1 až 10 nM, i když některé komerční preparáty, které mají nižší čistotu než 90 %, mají hodnoty EC50 při testu s hladkým svalem vyšší než hodnoty v uvedeném rozmezí, a to v důsledku přítomnosti kontaminujících látek, které snižují hodnotu naměřené EC50. Výsledky tohoto testu pro testované sloučeniny podle vynálezu, které jsou uvedeny v následující tabulce I, ukazují, že každá z testovaných sloučenin podle vynálezu má amylinovou účinnost.
Claims (27)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Agonizující analog amylinu obecného vzorce I ’A,-X-Asn-Thr-5Ala-Thr-Y-Ala-Thr-'°Gln-Arg-LeuB^Asn-^Phe-Leu-CrDj-^-^FrGj-Asn-HrGIy-25!,^,- <1 )> Leu-K,-L,-30Thr-M,-Val-Gly-Ser-35Asn-Thr-Tyr-Z ve kterémA] znamená Lys, Ala, Ser nebo vodík,B] znamená Ala, Ser nebo Thr,Ci znamená Val, Leu nebo Ile,Di znamená His nebo Arg,Ei znamená Ser nebo Thr,F] znamená Ser, Thr, Gin nebo Asn,Gj znamená Asn, Gin nebo His,Ht znamená Phe, Leu nebo Tyr, li znamená Ala nebo Pro,Ji znamená Ile, Val, Ala nebo Leu,K] znamená Ser, Pro, Leu, Ile nebo Thr,Li znamená Ser, Pro nebo Thr,Mi znamená Asp, Gin nebo Asn,XaY znamenají aminokyselinové zbytky zvolené z množiny zahrnující Cys, homoCys a tvořící disulfídovou vazbu, aminokyselinové zbytky zvolené z množiny zahrnující Lys, Asp a Glu a tvořící laktamovou vazbu, a aminokyselinové zbytky zvolené z množiny zahrnující Cys a aminokyselinové analogy mající bromacetylový boční řetězec a tvořící thioetherovou vazbu, aZ znamená amino-skupinu, alkylamino-skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, dialkylamino-skupinu obsahující celkem 2 až 12 uhlíkových atomů, cykloalkylaminoskupinu obsahující 5 až 8 uhlíkových atomů, aiylamino-skupinu, ve které arylový zbytek znamená karbocyklickou aromatickou skupinu obsahující 6 až 14 uhlíkových atomů nebo heterocyklickou aromatickou skupinu obsahující nejvýše 12 kruhových atomů zahrnujících 1 až 3 heteroatomy, zvolené z množiny zahrnující dusík, kyslík a síru, aryloxy-skupinu, ve které arylový zbytek má stejný význam jako u arylaminoskupiny, alkoxy-skupinu obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů, aralkylamino-skupinu, ve které aralkylový zbytek znamená aiylovou skupinu obsahující 6 až 10 uhlíkových atomů a přímo vázanou k alkylové skupině obsahující 1 až 4 uhlíkové atomy, nebo aralkyloxy-skupinu, ve které aralkylový zbytek má stejný význam jako u aralkylamino-skupiny,
s podmínkou, že když a) Ai znamená Lys, Bi znamená Ala, Ci znamená Val, Di znamená His, Ei znamená Ser, Fi znamená Ser, θι znamená Asn, Hi znamená Phe, li znamená Ala, Jt znamená Ile, Ki znamená Ser, Li znamená Ser a Mi znamená Asn, -20CZ 288029 B6b) Aj znamená Lys, Bi znamená Ala, Ci znamená Ile, Di znamená Arg, Ei znamená Ser, Fi znamená Ser, Gi znamená Asn, Η, znamená Leu, li znamená Ala, Ji znamená Ile, Ki znamená Ser, Li znamená Pro a Mi znamená Asn, c) A, znamená Lys, Bi znamená Ala, Ci znamená Val, Di znamená Arg, Ei znamená Thr, Fi znamená Ser, Gi znamená Asn, Hi znamená Leu, li znamená Ala, Ji znamená Ile, Ki znamená Ser, Li znamená Pro a M] znamená Asn, d) A] znamená Lys, Bi znamená Ala, c. znamená Val, Di znamená Arg, Ei znamená Ser, Fi znamená Ser, G, znamená Asn, Hi znamená Leu, li znamená Pro, J1 znamená Val, Kj znamená Pro, L. znamená Ser a Mi znamená Asn, e) A, znamená Lys, B, znamená Ala, Ci znamená Val, Di znamená His, E, znamená Ser, Fi znamená Asn, Gi znamená Asn, H! znamená Leu, li znamená Pro, Ji znamená Val, Ki znamená Ser, Li znamená Pro a M] znamená Asn, nebo f) Ai znamená Lys, Bi znamená Thr, Ci znamená Val, Di znamená Arg, Ei znamená Ser, F, znamená Ser, Gi znamená His, H] znamená Leu, li znamená Ala, Ji znamená Ala, Ki znamená Leu, Li znamená Pro a Mj znamená Asp, potom alespoň jeden z aminokyselinových zbytků Ai až Mi ve sloučeninách definovaných v odstavcích a) až f) znamená D-aminokyselinový zbytek, a Z neznamená aminovou skupinu, a s podmínkou, že agonizujícím analogem amylinu není 23Leu-amylin, 29Pro-amylin nebo des'Lys-amylin, a jeho farmaceuticky přijatelné soli. - 2. Agonizující analog amylinu podle nároku 1 obecného vzorce I, ve kterém X a Y znamenají aminokyselinové zbytky Cys spojené disulfidovou vazbou a Z znamená amino-skupinu.
- 3. Agonizující analog amylinu podle nároku 1 obecného vzorce I, ve kterém Hi znamená aminokyselinový zbytek Phe.
- 4. Agonizující analog amylinu podle nároku 3 obecného vzorce I, ve kterém alespoň jeden z Ib Ki a Li znamená aminokyselinový zbytek Pro.
- 5. Agonizující analog amylinu podle nároku 4 obecného vzorce I, ve kterém dva z Ib Kj a L] znamenají aminokyselinový zbytek Pro.
- 6. Agonizující analog amylinu podle nároku 4 obecného vzorce I, ve kterém Ib Kj a Li znamenají aminokyselinové zbytky Pro.
- 7. Agonizující analog amylinu podle nároku 4, 5 nebo 6 obecného vzorce I, ve kterém Di znamená aminokyselinový zbytek Arg.
- 8. Agonizující analog amylinu podle nároku 4, 5 nebo 6 obecného vzorce I, ve kterém Ji znamená aminokyselinový zbytek Val.-21 CZ 288029 B6
- 9. Agonizující analog amylinu podle nároku 7 obecného vzorce I, ve kterém A] znamená aminokyselinový zbytek Lys.5
- 10. Agonizující analog amylinu podle nároku 7 obecného vzorce I, ve kterém A] znamená vodík.
- 11. Agonizující analog amylinu podle nároku 8 obecného vzorce I, ve kterém Ai znamená aminokyselinový zbytek Lys.
- 12. Agonizující analog amylinu podle nároku 1 obecného vzorce I, kterým je 25,28,29Pro-hamylin mající aminokyselinovou sekvenci:I 510Lys-Cys-Asn-Thr-Ala-Thr-Cys-Ala-Thr-Gln-II 1520Arg-Leu-Ala-Asn-Phe-Leu-Val-His-Ser-Ser21 2530Asn-Asn-Phe-Gly-Pro-Ile-Leu-Pro-Pro-Thr3135Asn-Val-Gly-Ser-Asn-Thr-Tyr-NH^.
- 13. Agonizující analog amylinu podle nároku 1 obecného vzorce I, kterým je acetátová sůl 25,28,29Pro-h-amylinu.
- 14. Agonizující analog amylinu podle nároku 1 obecného vzorce I, kterým je trifluoracetátová 20 sůl 25,28,29Pro-h-amylinu.
- 15. Agonizující analog amylinu podle nároku 1 obecného vzorce I, kterým je hydrochloridová sůl 25’28,29Pro-h-amylinu.25
- 16. Agonizující analog amylinu podle nároku 1 obecného vzorce I pro použití jako léčivo pro léčbu diabetes mellitus a jeho symptomů.
- 17. Agonizující analog amylinu podle nároku 2 obecného vzorce I pro použití jako léčivo pro léčbu diabetes mellitus a jeho symptomů.
- 18. Agonizující analog amylinu podle nároku 1 obecného vzorce I, kterým je 25,28,29Pro-hamylin, pro použití jako léčivo pro léčbu diabetes mellitus a jeho symptomů.
- 19. Farmaceutický prostředek, zejména pro léčení diabetes mellitus a jeho symptomů, 35 vyznačený tím, že obsahuje terapeuticky účinné množství agonizujícího analogu amylinu podle nároku 1 obecného vzorce I.
- 20. Farmaceutický prostředek, zejména pro léčení diabetes mellitus a jeho symptomů, vyznačený tím, že obsahuje terapeuticky účinné množství agonizujícího analogu40 amylinu podle nároku 2 obecného vzorce I.
- 21. Farmaceutický prostředek, zejména pro léčení diabetes mellitus a jeho symptomů, vyznačený tím, že obsahuje terapeuticky účinné množství agonizujícího analogu amylinu podle nároku 1 obecného vzorce I, kterým je 25,28’29Pro-h-amylin.-22CZ 288029 B6
- 22. Farmaceutický prostředek podle nároku 19, vyznačený tím, že dále obsahuje inzulín přimíšený ve formě vhodné pro terapeutické podání.5
- 23. Farmaceutický prostředek podle nároku 20, vyznačený tím, že dále obsahuje inzulín přimíšený ve formě vhodné pro terapeutické podání.
- 24. Farmaceutický prostředek podle nároku 21, vyznačený tím, že dále obsahuje inzulín přimíšený ve formě vhodné pro terapeutické podání.
- 25. Farmaceutický prostředek podle nároku 19 nebo 20, vyznačený tím, že jako agonizující analog amylinu obecného vzorce I podle nároku 1 nebo 2 obsahuje des1 Ly s2:>’28’29Pro-h-amylin.15
- 26. Farmaceutický prostředek podle nároku 19 nebo 20, vyznačený tím, že jako agonizující analog amylinu obecného vzorce I podle nároku 1 nebo 2 obsahuje 18Arg2:)’28Pro-hamylin.
- 27. Farmaceutický prostředek podle nároku 19 nebo 20, vyznačený tím, že jako 20 agonizující analog amylinu obecného vzorce I podle nároku 1 nebo 2 obsahuje des1 Lys18 Arg25,28Pro-h-amy 1 in.2 výkresy-23CZ 288029 B6OBR. 1 1 Lys-Cys-Asn-Thr-5Ala-Thr-Cys-Ala-Thr- ’°Gln-Arg-Leu-AlaAsn-15Phe-Leu-Val-His-Ser-20Ser-Asn-Asn-Phe-Gly-25Alalle-Leu-Ser-Ser-30Thr-Asn-Val-Gly-Ser-35Asn-Thr-Tyr-NH2OBR. 2Amylin :člověkaKdCNTATCATQRLANFLVHSSNNFGAILSSTNVGSNTY-NH2
kočky ----------------|R_„_|_-----p------ psa -------__-------RT—L-----P— krysy ---------------„R----L-PV-PP- myši -----------------r—L-PV-PP- křečka -------------------n-l-pv-p— morčete ------------T—- R-H-L-A-LP-I 24 —OBR. 3 ’A,-X-Asn-Thr-5Ala-Thr-Y-Ala-Thr-10Gln-Arg-LeuB1-Asn-'5Phe-Leu-C1-D,-E1-2OF,-G,-Asn-H,-Gly-25lt-JLeu-K,-L,-30Thr-M,-Val-GÍy-Ser-35Asn-Thr-Tyr-Z
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US79426691A | 1991-11-19 | 1991-11-19 | |
| PCT/US1992/009842 WO1993010146A1 (en) | 1991-11-19 | 1992-11-19 | Amylin agonist peptides and uses therefor |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ168993A3 CZ168993A3 (en) | 1994-04-13 |
| CZ288029B6 true CZ288029B6 (cs) | 2001-04-11 |
Family
ID=25162163
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ19931689A CZ288029B6 (cs) | 1991-11-19 | 1992-11-19 | Agonizující analog amylinu, tento analog pro použití jako léčivo a farmaceutický prostředek obsahující tento analog |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (2) | EP0567626B1 (cs) |
| JP (4) | JP2902115B2 (cs) |
| AT (1) | ATE205854T1 (cs) |
| AU (1) | AU714439B2 (cs) |
| CA (1) | CA2100745C (cs) |
| CZ (1) | CZ288029B6 (cs) |
| DE (1) | DE69232064T2 (cs) |
| DK (1) | DK0567626T3 (cs) |
| ES (1) | ES2161697T3 (cs) |
| FI (1) | FI118601B (cs) |
| GR (1) | GR3036794T3 (cs) |
| HK (1) | HK1041891A1 (cs) |
| MD (1) | MD960317A (cs) |
| NO (2) | NO324405B1 (cs) |
| RU (1) | RU2130463C1 (cs) |
| SK (1) | SK88793A3 (cs) |
| WO (1) | WO1993010146A1 (cs) |
Families Citing this family (34)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| HU222249B1 (hu) | 1991-03-08 | 2003-05-28 | Amylin Pharmaceuticals Inc. | Eljárás amilin agonista peptidszármazékok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására |
| US5625032A (en) * | 1993-07-21 | 1997-04-29 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Selective amylin antagonist peptides and uses therefor |
| ZA946881B (en) | 1993-09-07 | 1995-10-30 | Amylin Pharmaceuticals Inc | Methods for treating gastrointestinal motility |
| US5739106A (en) * | 1995-06-07 | 1998-04-14 | Rink; Timothy J. | Appetite regulating compositions |
| US6143718A (en) * | 1995-06-07 | 2000-11-07 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Treatment of Type II diabetes mellutis with amylin agonists |
| US7312196B2 (en) | 1997-01-08 | 2007-12-25 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Formulations for amylin agonist peptides |
| US6410511B2 (en) | 1997-01-08 | 2002-06-25 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Formulations for amylin agonist peptides |
| US7101853B2 (en) * | 1997-05-06 | 2006-09-05 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Method for treating or preventing gastritis using amylin or amylin agonists |
| US7910548B2 (en) | 1997-06-06 | 2011-03-22 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Methods for treating obesity |
| AU760609B2 (en) * | 1998-01-09 | 2003-05-15 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Formulations for amylin agonist peptides |
| GB0128583D0 (en) | 2001-11-28 | 2002-01-23 | Rsr Ltd | Detection of autoantibodies indicative of diabetes |
| US8168233B2 (en) | 2002-10-18 | 2012-05-01 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Treatment of pancreatitis with amylin |
| CA2516726A1 (en) * | 2003-03-18 | 2004-09-30 | Applied Research Systems Ars Holding N.V. | Amylin aggregation inhibitors and use thereof |
| AU2005298840B2 (en) * | 2004-10-26 | 2010-09-16 | Lonza Ag | S-alkyl-sulphenyl protection groups in solid-phase synthesis |
| US20090156474A1 (en) | 2004-11-01 | 2009-06-18 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Methods for treating obesity and obesity related diseases and disorders |
| US8394765B2 (en) | 2004-11-01 | 2013-03-12 | Amylin Pharmaceuticals Llc | Methods of treating obesity with two different anti-obesity agents |
| US7671023B2 (en) | 2005-03-31 | 2010-03-02 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Amylin agonist for treating depression, anxiety disorder and schizophrenia |
| US8168592B2 (en) | 2005-10-21 | 2012-05-01 | Amgen Inc. | CGRP peptide antagonists and conjugates |
| AU2007293885A1 (en) | 2006-09-07 | 2008-03-13 | Takeda Gmbh | Combination treatment for diabetes mellitus |
| EP2120985B1 (en) | 2007-02-05 | 2012-06-27 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | FN-38 peptides for use in the treatment of psychotic and anxiety disorders |
| JP2009149684A (ja) * | 2009-03-11 | 2009-07-09 | Amylin Pharmaceut Inc | アミリン作動薬ペプチド用製剤 |
| RU2537181C2 (ru) | 2009-03-12 | 2014-12-27 | Нордик Байосайенс А/С | Лечение диабета и метаболического синдрома |
| AR097701A1 (es) * | 2013-09-19 | 2016-04-13 | Zealand Pharma As | Análogos de amilina |
| JP6657101B2 (ja) | 2013-11-05 | 2020-03-04 | ベン グリオン ユニバーシティ オブ ザ ネガフ リサーチ アンド ディベロップメント オーソリティ | 糖尿病及びそれから生じる疾患合併症の治療のための化合物 |
| CA2947587C (en) * | 2014-05-02 | 2022-10-18 | The Research Foundation For The State University Of New York | Islet amyloid polypeptides with improved solubility |
| MX2017011182A (es) * | 2015-03-18 | 2018-06-06 | Zealand Pharma As | Analogos de amilina. |
| AR109514A1 (es) | 2016-09-09 | 2018-12-19 | Zealand Pharma As | Análogos de amilina |
| US11028137B2 (en) | 2017-02-01 | 2021-06-08 | The Research Foundation For The State University Of New York | Mutant islet amyloid polypeptides with improved solubility and methods for using the same |
| KR102130354B1 (ko) * | 2019-08-14 | 2020-07-06 | 엘아이지넥스원 주식회사 | 코어 제거용 이형장치 |
| IL312600A (en) | 2022-05-30 | 2024-07-01 | Zealand Pharma As | Liquid formulations of amylin analogs |
| AU2023346836A1 (en) | 2022-09-19 | 2025-03-20 | Zealand Pharma A/S | Combination therapy |
| WO2024261259A1 (en) | 2023-06-21 | 2024-12-26 | Zealand Pharma A/S | Analogues with improved properties |
| WO2024261076A1 (en) | 2023-06-21 | 2024-12-26 | Zealand Pharma A/S | Weight loss |
| WO2025003471A1 (en) | 2023-06-30 | 2025-01-02 | Zealand Pharma A/S | Combination therapy |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB8720115D0 (en) * | 1987-08-26 | 1987-09-30 | Cooper G J S | Treatment of diabetes mellitus |
| WO1989006135A1 (en) * | 1988-01-11 | 1989-07-13 | Amylin Corporation | Treatment of type 2 diabetes mellitus |
| WO1991000737A1 (en) * | 1989-07-10 | 1991-01-24 | Amylin Corporation | Treatment of obesity and essential hypertension and related disorders |
| US5234906A (en) * | 1991-01-10 | 1993-08-10 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Hyperglycemic compositions |
| WO1992015317A1 (en) * | 1991-03-08 | 1992-09-17 | Amylin Pharmaceuticals, Inc. | Synthetic preparation of amylin and amylin analogues |
-
1992
- 1992-11-19 DK DK92924442T patent/DK0567626T3/da active
- 1992-11-19 CZ CZ19931689A patent/CZ288029B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1992-11-19 MD MD96-0317A patent/MD960317A/ro unknown
- 1992-11-19 JP JP5509441A patent/JP2902115B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1992-11-19 AT AT92924442T patent/ATE205854T1/de active
- 1992-11-19 RU RU93053497A patent/RU2130463C1/ru active
- 1992-11-19 CA CA002100745A patent/CA2100745C/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-11-19 ES ES92924442T patent/ES2161697T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1992-11-19 EP EP92924442A patent/EP0567626B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1992-11-19 SK SK887-93A patent/SK88793A3/sk unknown
- 1992-11-19 DE DE69232064T patent/DE69232064T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1992-11-19 WO PCT/US1992/009842 patent/WO1993010146A1/en active IP Right Grant
- 1992-11-19 EP EP01114132A patent/EP1162207A1/en not_active Ceased
-
1993
- 1993-07-16 FI FI933252A patent/FI118601B/fi not_active IP Right Cessation
- 1993-07-19 NO NO19932603A patent/NO324405B1/no not_active IP Right Cessation
-
1997
- 1997-01-31 AU AU12456/97A patent/AU714439B2/en not_active Expired
-
1998
- 1998-09-30 JP JP10277573A patent/JPH11152299A/ja not_active Withdrawn
-
2001
- 2001-10-04 GR GR20010401656T patent/GR3036794T3/el unknown
-
2002
- 2002-05-02 HK HK02103291.8A patent/HK1041891A1/zh unknown
-
2003
- 2003-01-15 JP JP2003007228A patent/JP2003238594A/ja not_active Withdrawn
-
2006
- 2006-02-03 JP JP2006027334A patent/JP4018116B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
2007
- 2007-06-25 NO NO20073265A patent/NO20073265L/no not_active Application Discontinuation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0567626B1 (en) | 2001-09-19 |
| AU673147B2 (en) | 1996-10-31 |
| CA2100745A1 (en) | 1993-05-20 |
| JP2003238594A (ja) | 2003-08-27 |
| DE69232064D1 (de) | 2001-10-25 |
| DK0567626T3 (da) | 2001-12-17 |
| EP0567626A1 (en) | 1993-11-03 |
| JPH11152299A (ja) | 1999-06-08 |
| MD960317A (ro) | 1998-05-31 |
| ATE205854T1 (de) | 2001-10-15 |
| RU2130463C1 (ru) | 1999-05-20 |
| FI118601B (fi) | 2008-01-15 |
| WO1993010146A1 (en) | 1993-05-27 |
| JP4018116B2 (ja) | 2007-12-05 |
| NO324405B1 (no) | 2007-10-08 |
| FI933252A0 (fi) | 1993-07-16 |
| NO932603D0 (no) | 1993-07-19 |
| AU1245697A (en) | 1997-03-27 |
| EP1162207A1 (en) | 2001-12-12 |
| GR3036794T3 (en) | 2002-01-31 |
| SK88793A3 (en) | 1994-12-07 |
| ES2161697T3 (es) | 2001-12-16 |
| AU3075392A (en) | 1993-06-15 |
| CA2100745C (en) | 2007-07-31 |
| JP2006213716A (ja) | 2006-08-17 |
| HK1041891A1 (zh) | 2002-07-26 |
| NO932603L (no) | 1993-09-17 |
| NO20073265L (no) | 1993-09-17 |
| DE69232064T2 (de) | 2002-03-28 |
| FI933252L (fi) | 1993-08-23 |
| JP2902115B2 (ja) | 1999-06-07 |
| JPH06504794A (ja) | 1994-06-02 |
| AU714439B2 (en) | 2000-01-06 |
| CZ168993A3 (en) | 1994-04-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ288029B6 (cs) | Agonizující analog amylinu, tento analog pro použití jako léčivo a farmaceutický prostředek obsahující tento analog | |
| US7271238B2 (en) | Amylin agonist peptides and uses therefor | |
| CA2337971C (en) | Novel anti-diabetic peptides | |
| JP4677095B2 (ja) | エキセンジンおよびｇｌｐ−１の変力および利尿効果 | |
| AU756836B2 (en) | Novel exendin agonist compounds | |
| ES2319936T5 (es) | Regulación de la motilidad gastrointestinal | |
| NO328077B1 (no) | Anvendelse av en eksendin eller eksendinagonist for fremstilling av en farmasoytisk formulering. | |
| JP2003522721A (ja) | 新規なエキセンジンアゴニスト化合物 | |
| JP2003501361A (ja) | 妊娠糖尿病の治療のためのエキセンジンおよびそのアゴニストの使用 | |
| AU8772998A (en) | Novel exendin agonist compounds | |
| KR20050067439A (ko) | 펩티드 및 이를 포함하는 의약조성물 | |
| JP2002522355A (ja) | 新規な混合アミリン活性化合物 | |
| AU669636B2 (en) | Amylin antagonists and agonists | |
| AU673147C (en) | Amylin agonist peptides and uses therefor | |
| KR20230106481A (ko) | 지속형 지방산-펩타이드 유도체 및 이의 용도 | |
| MXPA00001419A (en) | Novel exendin agonist compounds |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MK4A | Patent expired |
Effective date: 20121119 |