CZ23497A3 - 17alpha-dammar compounds, process of their preparation, pharmaceutical compositions containing thereof and their application - Google Patents
17alpha-dammar compounds, process of their preparation, pharmaceutical compositions containing thereof and their application Download PDFInfo
- Publication number
- CZ23497A3 CZ23497A3 CZ97234A CZ23497A CZ23497A3 CZ 23497 A3 CZ23497 A3 CZ 23497A3 CZ 97234 A CZ97234 A CZ 97234A CZ 23497 A CZ23497 A CZ 23497A CZ 23497 A3 CZ23497 A3 CZ 23497A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- compound
- dammar
- compounds
- formula
- group
- Prior art date
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 267
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 36
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims abstract description 12
- 229920002871 Dammar gum Polymers 0.000 title claims description 115
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 7
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims description 6
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 claims abstract description 10
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 8
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 claims abstract description 7
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 claims abstract description 7
- 240000000972 Agathis dammara Species 0.000 claims description 47
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 15
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 13
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 12
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims description 11
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 claims description 10
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 8
- 229940125721 immunosuppressive agent Drugs 0.000 claims description 8
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 claims description 7
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 125000002524 organometallic group Chemical group 0.000 claims description 7
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 150000001340 alkali metals Chemical group 0.000 claims description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 3
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 claims 2
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 abstract description 10
- 244000208235 Borassus flabellifer Species 0.000 abstract description 6
- 235000006520 Borassus flabellifer Nutrition 0.000 abstract description 6
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 abstract description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 5
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 abstract description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 abstract description 5
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 abstract 2
- 230000001861 immunosuppressant effect Effects 0.000 abstract 2
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 58
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 38
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 38
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 38
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 25
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 25
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 20
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N methanol Natural products OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 19
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 18
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000000047 product Substances 0.000 description 13
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 13
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 12
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 12
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 12
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 12
- 238000007799 mixed lymphocyte reaction assay Methods 0.000 description 11
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229930105110 Cyclosporin A Natural products 0.000 description 10
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 10
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 10
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 206010053613 Type IV hypersensitivity reaction Diseases 0.000 description 10
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 10
- 230000005951 type IV hypersensitivity Effects 0.000 description 10
- 208000027930 type IV hypersensitivity disease Diseases 0.000 description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 9
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 9
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 9
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 9
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 8
- MZRVEZGGRBJDDB-UHFFFAOYSA-N N-Butyllithium Chemical compound [Li]CCCC MZRVEZGGRBJDDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 8
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 8
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 8
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 8
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 8
- 230000006870 function Effects 0.000 description 8
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 8
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 7
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 7
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 7
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 7
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 7
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 7
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 7
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 6
- BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N Methyl tert-butyl ether Chemical compound COC(C)(C)C BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 6
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 6
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 6
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 6
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 5
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 5
- 210000002683 foot Anatomy 0.000 description 5
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 5
- 210000000548 hind-foot Anatomy 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 5
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 5
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 5
- -1 t-butyldimethylsilyl group Chemical group 0.000 description 5
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 4
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 4
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 4
- 150000001339 alkali metal compounds Chemical class 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 4
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 4
- 201000006512 mast cell neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 208000006971 mastocytoma Diseases 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- OSWPMRLSEDHDFF-UHFFFAOYSA-N methyl salicylate Chemical compound COC(=O)C1=CC=CC=C1O OSWPMRLSEDHDFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000001181 organosilyl group Chemical group [SiH3]* 0.000 description 4
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 4
- 230000004044 response Effects 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 4
- BCNZYOJHNLTNEZ-UHFFFAOYSA-N tert-butyldimethylsilyl chloride Chemical compound CC(C)(C)[Si](C)(C)Cl BCNZYOJHNLTNEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FPGGTKZVZWFYPV-UHFFFAOYSA-M tetrabutylammonium fluoride Chemical compound [F-].CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC FPGGTKZVZWFYPV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 3
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZGLXUQQMLLIKAN-UHFFFAOYSA-N Deoxypicropodophyllin Natural products COC1=C(OC)C(OC)=CC(C2C3=CC=4OCOC=4C=C3CC3C2C(OC3)=O)=C1 ZGLXUQQMLLIKAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 3
- 241001330988 Palmyra Species 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 3
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 3
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 3
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 3
- DOBRDRYODQBAMW-UHFFFAOYSA-N copper(i) cyanide Chemical compound [Cu+].N#[C-] DOBRDRYODQBAMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 3
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 3
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 3
- ZGLXUQQMLLIKAN-SVIJTADQSA-N deoxypodophyllotoxin Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3C[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 ZGLXUQQMLLIKAN-SVIJTADQSA-N 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000006345 epimerization reaction Methods 0.000 description 3
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 3
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 3
- 125000001183 hydrocarbyl group Chemical group 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 3
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 3
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 3
- 230000009696 proliferative response Effects 0.000 description 3
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 3
- LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N teixobactin Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H]1C(N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C[C@@H]2NC(=N)NC2)C(=O)N[C@H](C(=O)O[C@H]1C)[C@@H](C)CC)=O)NC)C1=CC=CC=C1 LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N 0.000 description 3
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 3
- DIOHEXPTUTVCNX-UHFFFAOYSA-N 1,1,1-trifluoro-n-phenyl-n-(trifluoromethylsulfonyl)methanesulfonamide Chemical compound FC(F)(F)S(=O)(=O)N(S(=O)(=O)C(F)(F)F)C1=CC=CC=C1 DIOHEXPTUTVCNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229940126062 Compound A Drugs 0.000 description 2
- 239000007818 Grignard reagent Substances 0.000 description 2
- NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N Heterophylliin A Natural products O1C2COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC2C(OC(=O)C=2C=C(O)C(O)=C(O)C=2)C(O)C1OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 NLDMNSXOCDLTTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000610640 Homo sapiens U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp3 Proteins 0.000 description 2
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 2
- 101001110823 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) 60S ribosomal protein L6-A Proteins 0.000 description 2
- 101000712176 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) 60S ribosomal protein L6-B Proteins 0.000 description 2
- 102100040374 U4/U6 small nuclear ribonucleoprotein Prp3 Human genes 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003872 anastomosis Effects 0.000 description 2
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 238000001460 carbon-13 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 2
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 2
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- JNGZXGGOCLZBFB-IVCQMTBJSA-N compound E Chemical compound N([C@@H](C)C(=O)N[C@@H]1C(N(C)C2=CC=CC=C2C(C=2C=CC=CC=2)=N1)=O)C(=O)CC1=CC(F)=CC(F)=C1 JNGZXGGOCLZBFB-IVCQMTBJSA-N 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000007336 electrophilic substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 2
- VDDXQSUSMHZCLS-UHFFFAOYSA-N ethenyl trifluoromethanesulfonate Chemical compound FC(F)(F)S(=O)(=O)OC=C VDDXQSUSMHZCLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000005678 ethenylene group Chemical group [H]C([*:1])=C([H])[*:2] 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 235000008434 ginseng Nutrition 0.000 description 2
- FVIZARNDLVOMSU-UHFFFAOYSA-N ginsenoside K Natural products C1CC(C2(CCC3C(C)(C)C(O)CCC3(C)C2CC2O)C)(C)C2C1C(C)(CCC=C(C)C)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O FVIZARNDLVOMSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 2
- 125000004356 hydroxy functional group Chemical group O* 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 230000004968 inflammatory condition Effects 0.000 description 2
- 206010023332 keratitis Diseases 0.000 description 2
- 201000010666 keratoconjunctivitis Diseases 0.000 description 2
- 150000002642 lithium compounds Chemical class 0.000 description 2
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- 229960001047 methyl salicylate Drugs 0.000 description 2
- DVSDBMFJEQPWNO-UHFFFAOYSA-N methyllithium Chemical compound C[Li] DVSDBMFJEQPWNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 125000004043 oxo group Chemical group O=* 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 201000001474 proteinuria Diseases 0.000 description 2
- LVTJOONKWUXEFR-FZRMHRINSA-N protoneodioscin Natural products O(C[C@@H](CC[C@]1(O)[C@H](C)[C@@H]2[C@]3(C)[C@H]([C@H]4[C@@H]([C@]5(C)C(=CC4)C[C@@H](O[C@@H]4[C@H](O[C@H]6[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O6)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]6[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O6)[C@H](CO)O4)CC5)CC3)C[C@@H]2O1)C)[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 LVTJOONKWUXEFR-FZRMHRINSA-N 0.000 description 2
- 239000012048 reactive intermediate Substances 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 2
- OKHUDYOUNFDWEI-BGERDNNASA-N (2s)-2-amino-1-(2-diphenoxyphosphorylpyrrolidin-1-yl)-3-(1h-imidazol-5-yl)propan-1-one Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N1C(CCC1)P(=O)(OC=1C=CC=CC=1)OC=1C=CC=CC=1)C1=CN=CN1 OKHUDYOUNFDWEI-BGERDNNASA-N 0.000 description 1
- UGRVYFQFDZRNMQ-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-tri(propan-2-yl)benzenesulfonohydrazide Chemical compound CC(C)C1=CC(C(C)C)=C(S(=O)(=O)NN)C(C(C)C)=C1 UGRVYFQFDZRNMQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NRHLYCYJQPPOEI-UHFFFAOYSA-N 3-ethenyl-2,2-dimethyloxirane Chemical compound CC1(C)OC1C=C NRHLYCYJQPPOEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 201000004384 Alopecia Diseases 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 208000032467 Aplastic anaemia Diseases 0.000 description 1
- 241000208340 Araliaceae Species 0.000 description 1
- 208000032116 Autoimmune Experimental Encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 208000008439 Biliary Liver Cirrhosis Diseases 0.000 description 1
- 208000033222 Biliary cirrhosis primary Diseases 0.000 description 1
- 208000019838 Blood disease Diseases 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241000208199 Buxus sempervirens Species 0.000 description 1
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 1
- 238000011749 CBA mouse Methods 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 1
- 208000015943 Coeliac disease Diseases 0.000 description 1
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 239000012591 Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline Substances 0.000 description 1
- 206010060742 Endocrine ophthalmopathy Diseases 0.000 description 1
- 208000009386 Experimental Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 206010018364 Glomerulonephritis Diseases 0.000 description 1
- 208000003807 Graves Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000015023 Graves' disease Diseases 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010021245 Idiopathic thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 1
- 208000029523 Interstitial Lung disease Diseases 0.000 description 1
- 206010023232 Joint swelling Diseases 0.000 description 1
- 229930194542 Keto Natural products 0.000 description 1
- 241000134253 Lanka Species 0.000 description 1
- 208000004883 Lipoid Nephrosis Diseases 0.000 description 1
- 206010024715 Liver transplant rejection Diseases 0.000 description 1
- 206010050551 Lupus-like syndrome Diseases 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 241000187480 Mycobacterium smegmatis Species 0.000 description 1
- 206010029164 Nephrotic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 240000004371 Panax ginseng Species 0.000 description 1
- 235000002789 Panax ginseng Nutrition 0.000 description 1
- 235000005035 Panax pseudoginseng ssp. pseudoginseng Nutrition 0.000 description 1
- 235000003140 Panax quinquefolius Nutrition 0.000 description 1
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 1
- 241000157426 Pernis Species 0.000 description 1
- 206010065159 Polychondritis Diseases 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000012654 Primary biliary cholangitis Diseases 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 201000001263 Psoriatic Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 208000036824 Psoriatic arthropathy Diseases 0.000 description 1
- 208000025747 Rheumatic disease Diseases 0.000 description 1
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 1
- 238000006882 Shapiro reaction Methods 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 1
- 206010046851 Uveitis Diseases 0.000 description 1
- 208000016807 X-linked intellectual disability-macrocephaly-macroorchidism syndrome Diseases 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001242 acetic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 125000004423 acyloxy group Chemical group 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 125000005210 alkyl ammonium group Chemical group 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000000947 anti-immunosuppressive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011861 anti-inflammatory therapy Methods 0.000 description 1
- 230000003460 anti-nuclear Effects 0.000 description 1
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000012300 argon atmosphere Substances 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 201000003710 autoimmune thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 230000036765 blood level Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 238000010322 bone marrow transplantation Methods 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011203 carbon fibre reinforced carbon Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol Chemical compound OC.ClC(Cl)Cl WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 1
- 238000011210 chromatographic step Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007398 colorimetric assay Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 210000004087 cornea Anatomy 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 239000002027 dichloromethane extract Substances 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N dihydroxy(oxo)silane Chemical compound O[Si](O)=O IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- KPUWHANPEXNPJT-UHFFFAOYSA-N disiloxane Chemical compound [SiH3]O[SiH3] KPUWHANPEXNPJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 1
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 201000002491 encephalomyelitis Diseases 0.000 description 1
- 150000002085 enols Chemical class 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001952 enzyme assay Methods 0.000 description 1
- DQYBDCGIPTYXML-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;hydrate Chemical compound O.CCOCC DQYBDCGIPTYXML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002024 ethyl acetate extract Substances 0.000 description 1
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 description 1
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 1
- XPBBUZJBQWWFFJ-UHFFFAOYSA-N fluorosilane Chemical group [SiH3]F XPBBUZJBQWWFFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 150000004795 grignard reagents Chemical class 0.000 description 1
- 230000003779 hair growth Effects 0.000 description 1
- 230000003676 hair loss Effects 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 208000014951 hematologic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002035 hexane extract Substances 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 208000016036 idiopathic nephrotic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 238000002650 immunosuppressive therapy Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010829 isocratic elution Methods 0.000 description 1
- 150000002641 lithium Chemical group 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 235000015250 liver sausages Nutrition 0.000 description 1
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 206010028417 myasthenia gravis Diseases 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 238000013059 nephrectomy Methods 0.000 description 1
- 201000008383 nephritis Diseases 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 229920002113 octoxynol Polymers 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 239000006186 oral dosage form Substances 0.000 description 1
- 150000002895 organic esters Chemical class 0.000 description 1
- 229940046781 other immunosuppressants in atc Drugs 0.000 description 1
- KJIFKLIQANRMOU-UHFFFAOYSA-N oxidanium;4-methylbenzenesulfonate Chemical compound O.CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 KJIFKLIQANRMOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 230000007505 plaque formation Effects 0.000 description 1
- 238000011176 pooling Methods 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- IUBQJLUDMLPAGT-UHFFFAOYSA-N potassium bis(trimethylsilyl)amide Chemical compound C[Si](C)(C)N([K])[Si](C)(C)C IUBQJLUDMLPAGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000005588 protonation Effects 0.000 description 1
- 238000012113 quantitative test Methods 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- XYSQXZCMOLNHOI-UHFFFAOYSA-N s-[2-[[4-(acetylsulfamoyl)phenyl]carbamoyl]phenyl] 5-pyridin-1-ium-1-ylpentanethioate;bromide Chemical compound [Br-].C1=CC(S(=O)(=O)NC(=O)C)=CC=C1NC(=O)C1=CC=CC=C1SC(=O)CCCC[N+]1=CC=CC=C1 XYSQXZCMOLNHOI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000000306 sarcoidosis Diseases 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- 239000002884 skin cream Substances 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 229920002994 synthetic fiber Polymers 0.000 description 1
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- DZLFLBLQUQXARW-UHFFFAOYSA-N tetrabutylammonium Chemical compound CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC DZLFLBLQUQXARW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 125000004665 trialkylsilyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000003648 triterpenes Chemical class 0.000 description 1
- 238000000825 ultraviolet detection Methods 0.000 description 1
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 125000000391 vinyl group Chemical class [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 1
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J9/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of more than two carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, coprostane
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J1/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen, not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, androstane
- C07J1/0003—Androstane derivatives
- C07J1/0014—Androstane derivatives substituted in position 17 alfa, not substituted in position 17 beta
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J51/00—Normal steroids with unmodified cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton not provided for in groups C07J1/00 - C07J43/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J7/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms
- C07J7/0005—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms not substituted in position 21
- C07J7/001—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms not substituted in position 21 substituted in position 20 by a keto group
- C07J7/0015—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms not substituted in position 21 substituted in position 20 by a keto group not substituted in position 17 alfa
- C07J7/002—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms not substituted in position 21 substituted in position 20 by a keto group not substituted in position 17 alfa not substituted in position 16
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Description
Oblast techniky
Vynález se týká dammarových sloučenin a jejich farmaceutických použití, včetně způsobu jejich přípravy a farmaceutických prostředků, které je obsahují.
Dosavadní stav techniky
Dammarové sloučeniny představují uznávanou skupinu sloučenin patřící mezi triterpeny, a vyznačuji se základní tetracyklickou strukturou obecného vzorce I
Ve známých dammarových sloučeninách je tato základní struktura běžně substituovaná, obvykle monosubstituovaná, v poloze 3, například hydroxyskupinou (v tomto případě se jedná o dammar-3-oly) nebo oxoskupinou (jedná se o dammar-3-ony). Dammarové sloučeniny jsou rovněž běžně substituované, obvykle monosubstituované, v poloze 17, jako je tomu například v případě dammarenů, které se nacházejí v kořenech ženšenu (Panax ginseng) a jiném rostlinném materiálu a které v poloze 17 běžně nesou uhlovodíkový zbytek obsahující jednu nebo více, například jednu nebo dvě, alkenových vazeb (-C=C-). Nej typičtěji je v případě dammarenů uhlovodíkovým substituentem v poloze 17 alkenylový nebo alkadienylový zbytek s 8 atomy uhlíku, který může být dále substituován, například jednou nebo více hydroxyskupinami. Dammarové sloučeniny mohou rovněž nést jeden nebo více dalších substituentů, běžně hydroxyskupin, v jiných polohách základní struktury nebo mohou v základní struktuře obsahovat jednu nebo více nenasycených vazeb, například dvojných vazeb. V dammarových struktura, methylových 14, jak je to znázorněno v sloučeninách však zůstává nezměněná cyklická stereochemická konfigurace jakož i rozmístění skupin v polohách 4, 10, obecném vzorci I.
Podstata vynálezu
V souladu s vynálezem bylo nyní zjištěno, že dammarové sloučeniny vykazují žádoucí farmaceutické vlastnosti, zejména imunosupresivní a protizánětlivá vlastnosti.
V souladu s tím popisuje první provedení vynálezu:
a1) dammarovou sloučeninu pro použití jako léčivo, například pro použití jako imunosupresivum nebo protizánětlivé činidlo,a2) dammarovou sloučeninu pro přípravu léčiva pro terapeutické použití jako imunosupresivum nebo protizánětlivé činidlo; nebo/a a3) způsob léčení pacienta potřebujícího imunosupresivní nebo protizánštlivou terapii, při kterém se tomuto pacientovi podá účinné množství dammarové sloučeniny.
Mezi konkrétní imunosupresivní nebo/a protizánětlivé indikace a stavy zahrnuté ve výše uvedených definicích a1) až a3) patří zejména libovolné z indikací a stavů konkrétně uvedených dále.
Termínem dammarová sloučenina, jak se zde používá, se míní sloučenina obsahující charakteristickou základní strukturu obecného vzorce I jak je uvedena výše, t.j. sloučenina, která má konkrétní cyklickou strukturu, stereochemickou konfiguraci a rozmístění methylových substituentů, jak je znázorněno v obecném vzorci I. Pokud zůstává stereochemická konfigurace znázorněná v obecném vzorci I nezměněná, rozumí se, že tento termín zahrnuje sloučeniny, ve kterých základní struktura obecného vzorce I nese jeden nebo více dalších substituentů, zejména v poloze 3 nebo/a poloze 17, jakož i sloučeniny, ve které je jedna nebo více vazeb uhlík-uhlík obsažených v základní struktuře nenasycených, například ethylenicky nenasycených. Rozumí se tedy, že tento termín zahrnuje například jak dammar-3-oly tak dammar-3-ony.
Rozumí se zejména, že termín dammarové sloučeniny, jak je zde používán, zahrnuje 17C-dammarové sloučeniny, t.j. dammarové sloučeniny, které jsou substituovány v poloze 17 skupinou navázanou na polohu 17 přes atom uhlíku. Takovéto 17C-dammarové sloučeniny mohou být mono- nebo disubstituované, běžněji monosubstituované, v poloze 17.
Výhodnými dammarovými sloučeninami pro použití podle vynálezu jsou dammar-3-oly a jejich fyziologicky hydrolyzovatelné a přijatelné estery a dammar-3-ony a zejména 17C-dammarové sloučeniny. Zejména výhodnými sloučeninami pro použití podle vynálezu jsou tedy 17C-dammar-3-oly a jejich fyziologicky hydrolyzovatelné a přijatelné estery a 17C-dammar-3-ony, například sloučeniny obecného vzorce IA
R
H (IA) ve kterém a představuje skupinu >CH-ORlř kde Rj. znamená atom vodíku nebo fyziologicky odštěpitelný a přijatelný acylový zbytek, nebo skupinu >C=0, a
R představuje skupinu navázanou na atom uhlíku v poloze přes atom uhlíku.
Termínem ”fyziologicky hydrolyzovatelný a přijatelný ester, jak je zde používán, se míní jakýkoli ester, který lze štěpit za fyziologických podmínek za vzniku kyseliny, která je samotná fyziologicky tolerovatelná v dávkách, které se mají podávat. Tento termín tedy označuje prekurzorové formy jak jsou v oboru známé, například acetáty a podobně. Při aplikaci na dammar-3-oly, jak jsou definovány výše, označuje tento termín sloučeniny, ve kterých je hydroxyskupina v poloze 3 nahrazena acyloxyskupinou v poloze 3, ve kterě je acylový zbytek fyziologicky odšcěpitelný a přijatelný, to znamená, že je odštěpitelný za fyziologických podmínek za vzniku volného dammar-3-olu a kyseliny, která je fyziologicky tolerovatelná v dávkách, které se mají podávat. Je třeba vzít v úvahu, že hydroxyskupiny přítomné v dammarových sloučeninách v jiných polohách než v poloze 3 mohou být podobně esterifikovány, přičemž se rozumí, že takovéto estery jsou rovněž zahrnuty ve vynálezu.
17C-dammarové sloučeniny obecně obsahují asymetrický atom uhlíku v poloze 17. Takovéto sloučeniny tedy existují v diastereomerní formě. V případě například 17C-dammar-3-olů je v poloze 3 přítomen další asymetrický atom uhlíku, v důsledku čehož vznikají další stereoisomerní varianty. Kde takovéto isomery existují, rozumí se, že vynález zahrnuje použití jak diastereomerních směsí tak rovněž jednotlivých epimerů. Obecně je výhodné použití dammarových sloučenin v čisté nebo ve v podscě čistě formě, například ve formě čistého nebo v podstatě čistého jediného epimeru, přičemž tato forma například obsahuje alespoň 90 %, například alespoň 95 %, čisté sloučeniny nebo čistého epimeru (t.j. obsahuje 10 % nebo méně, výhodně 5 % nebo méně, jiných dammarových sloučenin nebo kontaminujících epimeru). V případě dammar-3-olů a jejich esterů je hydroxyskupina nebo esterová skupina v poloze 3 výhodně v β-konfiguraci.
Jak je uvedeno výše, jsou různé dammarové sloučeniny známé a popsané v literatuře. V případě známých dammarových sloučenin je substituent v poloze 17 charakteristicky v β-konfiguraci. Dammarové sloučeniny, ve kterých, je substituent v poloze 17 v α-konfiguraci, jsou nové a jsou zahrnuty v rozsahu vynálezu jako takové. 17a-dammarové sloučeniny výhodně vykazují lepší vlastnosti než odpovídající l^-dammarové sloučeniny, například zlepšenou stabilitu in vivo a zvýšenou biologickou účinnost, zejména in vivo.
Podle svého dalšího provedení vynález tedy rovněž popisuje:
b) 17a-dammarové sloučeniny, například 17aC-dammarové sloučeniny, jakož i
c) 17a-dammarové sloučeniny, například 17aC-dammarové sloučeniny pro použití jak je uvedeno výše v bodu a1) , pro přípravu léčiva jak je uvedena výše v bodu a2) nebo pro použití ve způsobu léčení, jak je uveden výše v bodu a3) .
Výhodnými 17a-dammarovými sloučeninami podle vynálezu jsou 17a-aammar-3-oly a jejich fyziologicky hydrolyzovatelné a přijatelné estery a 17a-dammar-3-ony, například 17ccC-dammar-3-oly a jejich fyziologicky hydrolyzovatelné a přijatelné estery a 17ctC-dammar-3-ony.
Mezi konkrétní skupiny 17a-dammarových sloučenin podle vynálezu patří:
17αβΗ-dammarové sloučeniny (t.j. dammarové sloučeniny, ve kterých je 17a-substituent jediným substituentm v poloze 17) ;
17a,12PH-dammarové sloučeniny (t.j. dammarové sloučeniny, ve kterých je jakýkoli substituent v poloze 12 v α-konfiguraci);
17a,12HH-dammarové sloučeniny (t.j. dammarové sloučeniny, ve kterých je poloha 12 nesubstituované); a
17a-dammarové sloučeniny, které jsou substituované pouze v poloze 17 a popřípadě v poloze 3;
zejména jakákoli -dammar-3-ol nebo odpovídající 17aC-dammarová sloučenina, jeho fyziologicky hydrolyzovatelný a přijatelný ester nebo -dammar-3-on, kombinace takových skupin, například sloučeniny, -dammar-3-oly atd.
jakož i libovolné 17αβΗ,12βΗ-dammarové
Konkrétní skupina 17a-dammarových sloučenin podle vynálezu zahrnuje sloučeniny obecného vzorce IB
ve kterém maj i symboly a a R významy uvedené v případě obecného vzorce IA.
17C-substituenty 17C-dammarových sloučenin pro použití podle vynálezu jakož i 17a.C-dammarových sloučenin podle vynálezu, například skupiny R v obecných vzorcích IA a IB jsou výhodně uhlovodíkové skupiny, zejména alifatické uhlovodíkové skupiny. Tyto alifatické skupiny mohou být s rozvětveným nebo přímým řetězcem, mohou být nasycené nebo nenasycené a mohou nést jeden nebo více dalších substituentů, zejména jednu nebo více hydroxyskupin. Výhodnými alifatickými skupinami jsou nesubstituované nebo hydroxysubstituované alifatické skupiny, zejména alkenylové nebo alkadienylové skupiny. Tyto výše uvedené alifatické skupiny vhodně obsahuje do 8 atomů uhlíku. Symbol R tedy vhodně představuje alifatickou skupinu s 8 atomy uhlíku, která popřípadě obsahuje 1 nebo 2 dvojné vazby a je popřípadě substituována alespoň jednou hydroxyskupinou.
Rozumí se, še vynález zahrnuje jak jednotlivé epimery 17a-dammarových sloučenin tak rovněž jejich diastereomerní směsi, například v případě 17a-dammar-3-olů. Obecně jsou například pro farmaceutické použití podle vynálezu výhodné 17a-dammarové sloučeniny v čisté nebo ve v podstatě čisté formě (t.j. bez nebo v podstatě bez kontaminujících 17p-dammarových sloučenin), které například obsahují alespoň 90 %, například alespoň 95 % 17a-dammarové sloučeniny (t.j. obsahují méně než 10 %, například méně než 5 % kontaminujících 173-dammarových sloučenin). Pokud samotná 17a-dammarová sloučenina existuje ve více než jedné epimerní formě, je výhodné použití čistých nebo v podstatě čistých jednotlivých epimerů, například produktů obsahujících alespoň 90 %, například alespoň 95 % čistého epimeru (například obsahujících méně než 10 %, výhodně méně než 5 % jiných kontaminujících epimerů). V případě 17a-dammar-3-olů a jejich esterů je hydroxyskupina nebo esterová skupina v poloze 3 vhodně v β-konfiguraci.
Výhodnou sloučeninou podle vynálezu je sloučenina vzorce IC ((17α)-23 -(E)-dammara-20,23-άίβη-3β,25-diol) ve volné formě nebo ve formě fyziologicky hydrolyzovatelného a přijatelného esteru.
Podle vynálezu byla nová sloučenina obecného vzorce IC izolována z mouky z výhonků palmy Borassus flabellifer L. (palmyry) . Palmyra je široce rozšířená v tropických oblastech asijského kontinentu a v některých zemích tvoří hlavní složku každodenní stravy.' Na Sri Laňce se vnější část mladých výhonků, místně nazývaná Kottakilangu, používá bud' jako zelenina nebo se suší a mele na mouku. Tato mouka je vhodným zdrojem pro izolaci sloučeniny vzorce IC. Izolace a charakterizace sloučeniny vzorce IC je podrobněji popsána v příkladu 1.
V souladu s tím vynález rovněž zahrnuje způsob přípravy sloučeniny vzorce IC, který zahrnuje izolaci těto sloučeniny z rostlinného materiálu, například z palmyry, Borassus flabellifer L. .
Výhodně zahrnuje izolační postup extrakci organickým esterem, například ethylacetátem, která je následována jedním nebo více stupni chromatografického čištění.
Jsou známé mnohé dammarové sloučeniny, ve kterých je substituent v poloze 17 v β-konfiguraci, například dammareny, a lze je získat jako přírodní produkty, například jako extrakty z rostlinných zdrojů. Mnoho 17P-dammarových sloučenin lze získat například z dammarové pryskyřice (kterou dodává firma Fluka AG, CH-9470 Buchs, Švýcarsko) a jiných rostlinných zdrojů (viz například Dictionary of Steroids, editoři: Hill, Kirk, Makin a Murphy, vydal Chapman and Halí, první vydání, 1991, strany 218 - 222 a 536) . Dammarové sloučeniny lze rovněž produkovat synteticky, například vhodnou derivatizací a modifikací v přírodě se vyskytujících dammarenů. Níže jsou znázorněna schémata, která jsou obecně použitelná pro syntézu jak 17a- tak 17p-dammarových sloučenin.
Schéma A
HO
II
Stupeň 1
Stupeň 2
Stupeň 3
Stupeň 4
1
Chromatografické rozdělení diastereoisomerů
Stupeň 5
Stupeň 6
VIII
Stupeň 7
elektrofilní činidlo, např.
Stupeň 8 (IC)
Ve výše uvedeném schématu jsou stupeň 5 a následující stupně uváděny pro 17a-epimer. Tyto stupně jsou samozřejmě stejně použitelné pokud jde o 17P~epimer.
Ve stupni 1 se zavede chránící skupina hydroxyskupiny, skupina Y. Y může být libovolnou chránící skupinou hydroxyskupiny, která je kompatibilní s následujícími reakčními stupni, například je při nich stabilní. Vhodně je skupinou Y silylová chránící skupina hydroxyskupiny, například trialkylsilylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku v každé alkylové části, například terč.butyldimethylsilylová skupina. Chránící skupinu hydroxyskupiny Y lze zavést pomocí jakéhokoli ze způsobu běžně používaných v oboru, například reakcí sloučeniny vzorce II s terč.butyldimethylsilylchloridem (TBDMSC) v imidazolu.
Sloučenina obecného vzorce III se podrobí epimerizaci ve stupních 2 až 4.
Ve stupni 2 se zavede acylová nebo silylová chránící skupina W. Vhodnými acylovými nebo silylovými chránícími skupinami mohou být libovolné ze skupin, o kterých je v oboru známo, že jsou citlivé na enolové štěpení, například za použití organické sloučeniny lithia nebo alkylového Grignardova činidla. Účelně je skupinou W acylová skupina, například acetylová skupina, zavedená například reakcí sloučeniny obecného vzorce III s acetanhydridem za přítomnosti p-toluensulfonové kyseliny.
Ve stupni 3 se sloučenina obecného vzorce IV podrobí reakci s organickou sloučeninou lithia, například methyllithiem, nebo Grignardovým činidlem, za vzniku odpovídajícího enolátu kovu, přičemž M v obecném vzorci V představuje vhodně hořčík nebo výhodně lithium.
Ve stupni 4 se provede protonace sloučeniny obecného vzorce V za vzniku diastereomerní směsi sloučenin obecných vzorců III a VI. Reakci lze provést za použití libovolného vhodného protonačního činidla, například alkylamoniumchloridu nebo methylsalicylátu. Odborník bere v úvahu, že změnou parametrů, například výběrem protonačního činidla a reakčních podmínek lze stupeň 4 měnit k upřednostnění produkce například epimeru obecného vzorce VI.
Diastereomerní směsi získané ze stupně 4 se vhodně rozdělí chromatograficky podle stupně 4, jak je uveden ve schématu A.
Ve stupni 5 se provede trifláce (trifluormethansulfonace) sloučeniny obecného vzorce VI, přičemž zkratka Tf v obecném vzorci VII znamená skupinu CF3-SO2-. Triflace se vhodně provede například reakcí sloučeniny obecného vzorce VI s kalium-hexamethyldisylazanem (KHMDSA) a N-fenyl-bis(trifluormethansulfonimidem).
Ve stupni 6 se podrobí reakci sloučenina obecného vzorce VII s organickým sulfátem kovu, například trialkylstannium-kuprátem, například tributylstannium-kuprátem, přičemž symbol Z. v obecném vzorci VII představuje například tributylstannioskupinu. Tributylstannium-kuprát se vhodně tvoří in šitu, například jak je popsáno níže v příkladu 2.
Ve stupni 7 se provede Stillova reakce sloučeniny obecného vzorce VIII s vhodným elektrofilním činidlem, například za přítomnosti Pd (CH3CN) 2C12. Ve schématu A je elektrofilní činidlo vybráno tak, že se získá konkrétní konečný produkt vzorce IC.
Ve odstraní chránící známého a silylových fluoridem stupni 8 se ze sloučeniny obecného vzorce IX chránící skupina hydroxyskupiny Y. Odstranění skupiny lze provést pomocí libovolného způsobu běžné používaného v oboru, například pro odstranění chránících skupin reakcí s tetrabutylamonium(Bu,N?) .
Jak je odborníkovi zřejmé, lze výše uvedené reakční schéma upravit, zejména tak, že se produkují alternativní 17a- nebo/a 17P~dammarové sloučeniny. Je tedy třeba vzít v úvahu, že konkrétní typ substituentu v poloze 17 konečného produktu lze měnit podle potřeby vhodným výběrem elektrofilního činidla použitého ve stupni 7 nebo následující modifikací původně získaného substituentu v poloze 17. Další dammarové sloučeniny lze získat například modifikací 3-hydroxyskupiny (například pro získání odpovídájících keto-sloučenin) nebo výběrem výchozího materiálu vzorce II, ve kterém je například acetylová skupina v poloze 17 nahrazena alternativními acylovými skupinami nebo reaktivními funkčními ekvivalenty, nebo ve kterém je poloha 3 oxosubstituovaná a například transformací oxoskupiny na chráněnou skupinu, například nereaktivní funkční ekvivalent, na dobu epimerisace a elektrofilní substituce. Diastereomerní produkty lze rozdělit například po dokončení stupně 7 místo po stupni 4, a
17P-epimery lze připravit počínaje od sloučeniny vzorce II s postupem přímo přes stupeň 5 dále.
Podle alternativního schématu B uvedeného níže lze produkty ze stupně 4 schématu A podrobit elektrofilní substituci pomocí Shapirovy reakce.
Stupeň 9
Stupeň 10
Stupně 7+8
Ve stupni 9 se podrobí reakci sloučenina obecného vzorce III nebo obecného vzorce VI nebo jejich směs s trishydrazin-hydrochloridem. Pokud se reakce aplikuje na 17ct-dammarové sloučeniny a jejich syntézu, provádí se reakce výhodně za mírně kyselých podmínek, například za přítomnosti pufračních činidel. Stupeň 9 je následován reakcí sloučenin obecných vzorců Xa / Xb s organickou sloučeninou alkalického kovu, například alkyllithnou sloučeninou, například butyllithiem, ve stupni 10, za vzniku sloučenin obecných vzorců Xla / Xlb, kde Z2 představuje atom alkalického kovu, například lithia. Sloučeniny obecných vzorců Xla / Xlb se zpracují dále analogicky jako ve stupních 7 a 8 popsaných výše v případě reakčního schématu A, nejprve reakcí s CuCN pro přeměnu zbytku Z2 na komplex mědi a alkalického kovu (například mědi a lithia) a poté reakcí s vybraným elektrofilním činidlem a odstraněním chránící skupiny.
Obměny výše uvedeného způsobu, například jak jsou popsány výše pokud jde o schéma A, jsou samozřejmě možné, zejména lze použít alternativní elektrofilní činidla ve stupni 10 vedoucí k alternativní substituci v poloze 17 konečného produktu a vybrat alternativní výchozí materiály.
Jak vyplývá z výše uvedeného, vynález popisuje nový způsob přípravy 17C-dammarových sloučenin, včetně 17aC-, jakož i 17pc-dammarových sloučenin, který, při široké aplikaci, zahrnuje reakci 17-karbonyldammarové sloučeniny, například 17-acyldammarové sloučeniny, v případě potřeby v chráněné formě, s elektrofilním činidlem, například vhodným ethylenickým peroxidem, a, pokud je to žádoucí, odstranění chránících skupin nebo funkcí, například reakci sloučeniny obecného vzorce XII
s elektrofilním činidlem obecného vzorce R3-H, kde a/ představuje skupinu vzorce >CH-OH nebo >C=0 v chráněné formě a symboly R2 a R3 znamenají uhlovodíkové zbytky takové, že součet počtu atomů uhlíku ve zbytcích R2 a R3 se rovná celkovému počtu atomů uhlíku, který obsahuje požadovaný substituent v poloze 17, odstranění chránící skupiny nebo funkce a v případě potřeby acylací získaného produktu vhodnou kyselinou za vzniku sloučeniny obecného vzorce IA, jak je definována výše. Reakci s elektrofilním činidlem lze provádět libovolným vhodným způsobem, ačkoli při použití postupů podle reakčnich schémat A a B tato reakce probíhá přes 17(organokovová skupina-C)dammarovou sloučeninu (t.j. 17C-dammarovou sloučeninu, ve které je atom uhlíku 17C-substituentu přímo navázaný v poloze 17 substituován organokovovou skupinou, například trialkylstannioskupinou - srov. Zx ve sloučenině obecného vzorce VIII ve schématu A) nebo 17(alkalický kov-C)dammarovou sloučeninu (t.j. 17C-dammarovou sloučeninu, ve které je atom uhlíku substituentu v poloze 17, přímo navázaný v poloze 17 substituován atomem alkalického kovu, například lithia - srov. sloučeniny obecných vzorců Xla a Xlb ve schématu Β), například přes reaktivní meziprodukt obecného vzorce XIII
ve kterém má symbol a/ význam uvedený v případě obecného vzorce XII a Z představuje atom alkalického kovu nebo organokovovou skupinu. Výhodně Z znamená atom lithia nebo trialkylstannioskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v každé alkylové části. Tyto reaktivní meziprodukty lze v určitém stupni postupu připravit jako takové nebo mohou být v průběhu postupu vytvářeny pouze přechodně.
17P~karbonyldammarové sloučeniny, například sloučenina vzorce II uvedeného ve schématu A, jsou známé (viz například Phytochemistry 26, (12), 3365 (1987) a Tetrahedron 29, 2105 (1973)) nebo je lze připravit analogicky ke známým sloučeninám nebo jejich derivatizací. 17cc-karbonyldammarové sloučeniny, například sloučeniny obecného vzorce IV uvedeného ve schématu A, jsou nové.
Jak je třeba dále brát v úvahu, vynález rovněž zahrnuje způsob přípravy I7a-karbonyldammarových sloučenin, kterýžto způsob zahrnuje epimerizaci odpovídající 17P-karbonyldammarové sloučeniny v chráněné formě, jak je to potřeba, a, pokud je to žádoucí, odstranění chránících skupin nebo funkcí, například epimerizaci sloučeniny obecného vzorce Xlla
ve kterém mají symboly a a R2 významy uvedené v případě obecného vzorce XII, a, pokud je to žádoucí, odstranění chránící skupiny nebo funkce, k přípravě sloučeniny obecného vzorce Xllb
(Xllb) ve kterém a'1 představuje skupinu vzorce >CH-OH nebo >C=0 ve volné nebo chráněné formě a R2 má význam uvedený v případě obecného vzorce XII. Konkrétními způsoby pro provedení epimerizace jsou způsoby popsané výše v souvislosti se stupni 1 až 4 ve schématu A, s případným odstraněním chránících skupin nebo funkcí podle obecných postupů stupně 8.
Jak již bylo uvedeno, jsou 17ct-karbonyldammarové sloučeniny, například sloučeniny obecných vzorců Xllb a VI, nové. 17aC-dammarové sloučeniny, ve kterých je substituentem v poloze 17 některý ze substituentů uvedených ve vzorcích IV, V, VII až IX, Xa, Xb, Xla a Xlb, jsou rovněž nové. Jsou vhodné jako meziprodukty a rozumí se rovněž, že spadají do rozsahu vynálezu. Z těchto sloučenin jsou zejména zajímavé, zvláště jako meziprodukty, 17a-karbonyldammarové sloučeniny.
V souladu s tím další a specifické provedeni vynálezu zahrnuj e:
d) 17a-karbonyldammarové sloučeniny.
Výhodnými dammarovými sloučeninami spadajícími do bodu
d) jsou 17a-acyldammarové sloučeniny, například sloučeniny obecného vzorce Xllb, například 17a-acetyldammarově sloučeniny, například sloučeniny představované obecným vzorcem VI.
17(organokovová skupina-C)- a 17(alkalický kov-C)-dammarové sloučeniny, včetně jak 17β- tak zejména 17a-(organokovová skupina C) - a -(alkalický kov-C)-dammarových sloučenin, jsou rovněž zejména zajímavé, zvláště jako meziprodukty.
V souladu s tím jako ještě další a specifické provedení vynález popisuje:
e) 17(organokovová skupina-C)- a 17(alkalický kov-C)-dammarové sloučeniny.
Výhodnými sloučeninami spadajícími do bodu e) jsou 17-(1-organokovovou skupinou substituovaný vinylen)- a 17-(1-alkalickým kovem substituovaný vinylen)-dammarové sloučeniny, jejichž příkladem jsou například sloučeniny obecného vzorce XIII, například 17-(1-organokovovou skupinou substituovaný vinyl)- a 17-(1-alkalickým kovem substituovaný vinyl)-dammarové sloučeniny, jejichž příkladem jsou například sloučeniny obecných vzorců VIII, Xla a Xlb.
Vhodnými organokovovými skupinami a atomy alkalických kovů jsou skupiny a atomy popsané výše, přičemž zejména zajímavé jsou 17-(lithium-C)-, například 17-(1-lithiumvinylen)-, například 17-(1-lithiumvinyl)-dammarové sloučeniny.
Vzhledem k výborným vlastnostem konečných produktů, které z nich lze získat, jsou výhodné 17a-dammarové sloučeniny jak jsou definovány v bodu e).
Mezi konkrétní skupiny 17cc-karbonyl-, 17-(organokovová skupina-C)- a 17-(alkalický kov-C)-dammarových sloučenin d) a
e) spadajících do rozsahu vynálezu patří libovolné ze skupin sloučenin definovaných výše v souvislosti se 17a-dammarovými sloučeninami obecně, včetně například 17a-karbonyl-, 17-(organokovová skupina-C)- a 17-(alkalický kov-C)-dammar-3-olú a -dammar-3-onů, vždy ve volně formě nebo v chráněně formě, jakož i 17a-karbonyl,βΗ- a 17a,12βH-dammarových sloučenin atd.
Z výše uvedeného popisu způsobu je zřejmé, že 17-(organokovová skupina-C)-dammarové sloučeniny lze připravit například triflací 17-karbonyldammarové sloučeniny, kterou se získá 17-(trifluormethylsulfát-C)-dammarová sloučenina a podrobením této sloučeniny reakci s organickým kuprátem kovu, přičemž se výchozí materiál vhodným způsobem chrání, a tento postup je následován případným odstraněním chránících skupin nebo funkcí, například triflací (například jak je popsána výše v případě stupně 5 v reakčním schématu A) sloučeniny obecného vzorce XII, jak je definována výše, například kde zbytek R2-CO- představuje acylovou skupinu, například acylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, například acetylovou skupinu, a podrobením získaného produktu reakci s organickou sloučeninou alkalického kovu (například jak je popsáno výše v případě stupně 6 v reakčním schématu A) a popřípadě odstraněním chránících skupin nebo funkcí, čímž se získá sloučenina obecného vzorce XHIa.
a (XHIa) ve kterém má symbol a význam uvedený v případě obecného vzorce XI lb a Z představuje organokovovou skupinu, například trialkylstannioskupinu, například tributylstannioskupinu.
17-(alkalický kov-C)-dammarové sloučeniny lze připravit reakcí 17-karbonyldammarové sloučeniny s trishydrazin-hydrochloridem a reakcí získaného produktu s organickou sloučeninou alkalického kovu, například butyllithiem, přičemž se výchozí materiál vhodným způsobem chrání, a tento postup je následován případným odstraněním chránících skupin nebo funkcí, například reakcí sloučenny obecného vzorce XII, jak je definována výše, například kde zbytek R2-CO- představuje acylovou skupinu, například acylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, například acetylovou skupinu, s trishydrazin-hydrochloridem a reakcí získaného produktu s organickou sloučeninou alkalického kovu, například jak je popsáno výše, a popřípadě odstraněním chránících skupin nebo funkcí ze získaného produktu, čímž se získá sloučenina obecného vzorce XlIIa jak je uveden výše, kde má symbol a význam uvedený v případě obecného vzorce Xllb a Z představuje atom alkalického kovu, například lithia.
Je třeba vzít v úvahu, že dammarové sloučeniny pro farmaceutické použití podle vynálezu budou zejména fyziologicky tolerovatelné nebo farmaceuticky přijatelné, například budou netoxické nebo v podstatě netoxické v dávkách, které mají být podávány, nebo budou vykazovat takovou toxicitu, která je přijatelná v dávkách, které mají být podávány, například s ohledem na ošetřovanou chorobu nebo poruchu. Výběr vhodné dammarové sloučeniny pro farmaceutické použití lze provést za použití postupů známých a běžně používaných ve farmaceutickém oboru.
Dammarové sloučeniny, zejména 17ct-dammarové slučeniny jak jsou uvedeny výše, například sloučeniny vzorců I, IA, IB nebo IC, nacházejí farmaceutické využití, jak demonstrují například následující testy.
1. Proliferativní odpověď lymfocytů na allogenní stimulaci
Obousměrná MLR, (myší směsná lymfocytní reakce, murine mixed lymphocyte reaction)
0,5 x IO5 slezinných buněk ze samice myši Balb/c ve věku 8-10 týdnů se inkubuje po dobu 5 dnů společně s 0,5 x 10s slezinných buněk ze samice myši CBA ve věku 8-10 týdnů. Allogenní buňky vyvolají proliferativní odpověď v populaci slezinných buněk odpovídajícího organismu, která se měří začleněním značeného prekursoru do DNA. Testované sloučeniny se přidávají na začátku inkubace v různých koncentracích a proliferativní odpověď se srovnává s neošetřenými kontrolami. Dammarové sloučeniny v tomto testu typicky vykazují hodnoty IC50 od přibližně 100 do přibližně 10 nM nebo nižší (ve srovnání s IC50 přibližně 2 nM v případě cyklosporinu A).
Literární odkaz: T. Meo (1979) The MLR in the mouše, v
Immunological Methods, editoři L. Lefkovits a B.
Pernis, Academie Press, N.Y. str. 227-239.
Cytotoxická a cytostatické účinnost za použití linie transformovaných T-buněk člověka (Jurkat) p-nitrofenyl-N-acetyl-β-ΟTestovaně sloučeniny se χ 104 buněk Jurkat se pěstuje v konečném objemu 0,2 ml po dobu 72 hodin a poté se spočítá počet buněk pomocí enzymatického testu za použití
-glukosaminidu jako substrátu, přidávají v různých koncentracích na začátku kultivace a cytotoxicita se srovná s neošetřenými kontrolami. Zjisti se, že dammarové sloučeniny jsou neúčinné při koncentracích do 5 μΜ, což svědčí o tom, že imunosupresivní účinnost je specifická.
3. Cytotoxická a cytostatická účinnost in vitro za použití linie mastocytomových buněk P-815
Deska (Costar) s 96 jamkami se naplní mediem (100 μΐ na jamku), sloučeniny, které mají být testovány, se přidají do horní řady jamek jako vzorky o objemu 25 μΐ, 25 μΐ obsahu každé jamky se oddělí a přidá se do odpovídající jamky v následující nižší řadě. Přidáni media, mícháni a přenos 25 μΐ do následující nižší řady se opakuje, až se dojde na konec desky. Posledních 25 μΐ se odstraní. Poté se do každé jamky přidá 100 μΐ buněčné suspenze (mastocytomově buňky P-815, 30000 buněk na jamku) a po dobu 48 hodin se provádí inkubace při teplotě 37 °C ve zvlhčené atmosféře vzduchu s 5 - 7 % oxidu uhličitého. Proliferace buněk se stanoví za použiti zařízení počítajícího buňky nebo pomocí enzymatického kolorimetrického testu: desky se centrifuguji po dobu 10 minut při 3000 otáčkách za minutu (EC Centra-7R). Supernatant se opatrně odstraní, buňky se jednou promyjí PBS (fyziologický roztok pufrovaný fosfátovým pufrem, od firmy Dulbecco, bez vápníku a hořčíku), přidá se 50 μΐ na jamku 0,5% roztoku přípravku Triton-X 100 (získaného 0,5 ml přípravku Triton X-100 v 99,5 ml vody) a deska se důkladně třepe po dobu 5 až 10 minut při teplotě místnosti. Přidá se 50 μΐ na jamku substrátu (p-nitrofenyl-N-acetyl~3-D-glukosaminidu) a poté se provádí inkubace po dobu 60 minut při teplotě 37 °C. Poté se přidá 150 μΐ pufru 2 a desky se měří při vlnové délce 405 nm. Testované sloučeniny se přidávají v různých koncentracích na začátku inkubace a proliferace buněk se srovná s neošetřenými kontrolami. Zjistí se, že dammarovš sloučeniny neovlivňují proliferaci při koncentracích do 5 μΜ, což svědčí o tom, že imunosupresivní účinnost je specifická.
Literární odkaz: H. Staehelin (1962) A simple quantitative test for cytostatic agents using non-adhering cells in vitro, Med. exp. 7: 92 - 102
4. Lokalizovaná reakce štěp versus hostitel (graft versus host, GvH, reaction) u krys (Ford a kol., TRANSPL. PROČ. 10 (1979) 253) χ 107 slezinných buněk z 6 týdnů starých samic krys
Wistar/Furth (WF) se injikuje subkutánně ve dni 0 do levé zadní tlapy samic krys (F344 x WF) FL o hmotnosti přibližně 100 g. Zvířata se léčí po dobu 4 následujících dní a podkolenní lymfatické uzliny se odstraní a zváží 7. den. Rozdíl v hmotnosti mezi dvěmi lymfatickými uzlinami se bere jako parametr pro zhodnocení reakce. Testované sloučeniny se podávají denně po dobu 4 dnů v různých dávkách perorálně, a inhibice se srovná s neošetřenými kontrolami. Dammarové sloučeniny jsou účinné (inhibují GvH reakci) v tomto testovacím modelu při dávkách řádově od 10 pg do 10 mg na kg a den perorálně. Zjistí se, že 17a-dammarové sloučeniny (například sloučenina vzorce IC) jsou až přibližné lOOx účinnější než odpovídající 17P-epimery.
5. Ledvinová alloštěpová reakce u krys
Jedna ledvina ze samice krysy Fisher 344 se transplantuje na renální cévu jednostranně (levá strana) nefrektomizovaného WF krysího příjemce za použití anastomózy konec ke konci. Urethrická anastomóza je také konec ke konci. Léčba testovanou sloučeninou v různých dávkách perorálně se započne v den transplantace a pokračuje po dobu 14 dnů. Druhostranná nefrektomie se provede sedmý den po transplantaci, čímž je příjemce závislý na činnosti darované ledviny. Přežití štěpu ve srovnání s kontrolou se bere jako parametr pro funkční štěp. Dammarové sloučeniny prodlužují přežití štěpu v tomto testovacím modelu v dávkách řádově od 10 pg do 10 mg na kg a den perorálně. Zjistí se, že 17cí-dammarové sloučeniny jsou podstatně účinnější (až přibližně lOOx až lOOOx) než 17P-dammarové sloučeniny.
6. Experimentálně vyvolaná alergická encefalomyelitida (EAE) u krys (Levine a kol., AM. J. PATE. 47 (1965) 61; McFarlin a kol., J. IMMUNOL. 113 (1974) 712; Borel,
TRANSPLANT and CLIN. IMMUNOL. 13 (1981) 3)
Samcům krys Wistar se injikuje do zadní tlapy směs hovězí míchy a kompletního Freundova adjuvans. Symptomy nemoci (paralyza ocasu a obou zadních končetin) se obvykle vyvinou během 16 dnů. Zaznamená se počet nemocných zvířat jakož i čas nástupu nemoci. Testovaná sloučenina se podává perorální v různých dávkách po dobu 12 dnů počínaje v době senzitizace. Dammarové sloučeniny inhibují nástup nemoci v tomto testovacím modelu v dávkách řádově od 10 μσ do 10 mg na kg a den perorálně. Zjistí se, že 17a-dammarové sloučeniny jsou podstatně účinnější (přibližně lOOx až lOOOx) než 17P-dammarové sloučeniny.
7. Artritida indukovaná Freundovým adjuvans (Winter a
Nuss, ARTHRITIS ADN RHEUMATISM 9 (1966) 394; Billingham a Davies, HANDBOOK OF EXPERIMENTAL PHARMACOL (editoři Vane a Ferreira, Springer Verlag, Berlín), 50/II, (1979) 108 - 144)
Samcům nebo samicím krys OFA a Wistar o tělesné hmotnosti 150 g se injikuje intrakutánně ke kořeni ocasu nebo do zadní tlapy 0,1 ml minerálního oleje obsahujícího 0,6 mg lyofilizovaného tepelně usmrceného Mycobacterium smegmatis. V modelu rozvíjející se artritidy se léčba testovanou sloučeninou začne bezprostředně po injekci adjuvans (dny 1 až 18); v modelu rozvinuté artritidy se léčba začíná 14. den, když je sekundární zánět dobře vyvinut (dny 14 - 20) . Na konci experimentu se měří zduření kloubů pomoci mikrokaliperu. Dammarové sloučeniny inhibují postup nemoci v modelu rozvíjející se artritidy nebo v modelu rozvinuté artritidy v denních dávkách řádově od 10 cg do 10 mg na kg.
Zjistí se, že 17a-dammarové sloučeniny jsou podstatně účinnější než 17p-dammarové sloučeniny.
8. Primární humorální imunitní odpověď na červené krvinky ovcí (MD, Mishell-Dutton) x 107 myšších slezinných buněk (OF 1, samice ve věku
8-10 týdnů) se kultivuje společně s 3 x 107 erythrocytů ovce (sheep red blood cells, SRBO) po dobu 3 dnů v konečném objemu 1 ml v deskách se 24 jamkami. Lymfocyty se izolují, promyjí a nanesou v hustotě 1 x 10s buněk na měkký agar s čerstvým antigenem (SRBC). Po inkubační době 60 - 90 minut se přidá komplement (sérum morčete), v inkubaci se pokračuje po dobu dalších 60 minut a poté se test vyhodnotí spočítáním plaků pod mikroskopem. Během třídenní inkubace se lymfocyty senzitizují na antigen (SRBC). Při nové inkubaci s antigenem vylučují B-lymfocyty specifickou protilátku, která se váže na antigen v blízkosti sekretujícího lymfocytů. Přidání komplementu způsobí lýzu erytrocytů potažených protilátkou za vzniku plaku. Každý plak reprezentuje jednu buňku produkující protilátku. Testovaná sloučenina se přidává na začátku inkubace v různých koncentracích. Dammarové sloučeniny inhibují tvorbu plaků v tomto testovacím modelu v koncentracích řádově od 10 do 100 nM.
Literární odkazy: R. I. Mishell a R. W. Dutton (1966)
Immunization of normál mouše spleen cell suspensions in vitro. Science 153: 1004 - 1006; a R. I. Mishell a R.
W. Dutton (1967) Immunization of dissociated spleen cell cultures from normál mice. J. Exp. Med. 126: 423 - 442.
9. DTH (hypersenzitivita opožděného typu, delayed-type hypersensitivity) indukovaná buňkami SRBC-TH μΐ směsi v poměru 1 : 1 (objem : objem) klonu buněk TH (senzibilizovaných červených krvinek ovce) (2 x 105) a 10% suspenze červených krvinek ovce (SRBC) se injikuje subkutánně do pravé zadní tlapky samice myši C57 BL/6 ve věku 6-12 týdnů. 50 μΐ suspenze buněk SRBC naředěné v poměru 1 : 1 (objem : objem) PBS se injikuje subkutánně do levé zadní tlapky, pro měření nespecifického zduření tlapky v důsledku injekce. 0 24 hodin později se změří tlouštka pravé a levé zadní tlapky. Testované sloučeniny se podávají 24 hodin a 2 hodiny před injekcí v různých dávkách perorálně. Na konci se vypočítá procento zvýšení tlouštíky pravé srovnání s levou tlapkou [tlouštíka pravé tlapky = x; tlouštíka levé tlapky = y; procento specifického zvýšení = z; z = ( (x-y)/y).100]. 17a-dammarově sloučeniny inhibují reakci DTH v tomto testovacím modelu v dávkách řádově 1 až 100 ^g / kg perorálně. 173-dammarové sloučeniny inhibují reakci DTH v dávkách řádově 1 až 100 mg / kg.
experimentu tlapky ve
Literární odkazy: A. T. J. Bianchi, H. Hooijkaas, R. Brenner, R. Tees, A.A. Nordin a Μ. H. Schreier (1981) Clones of helper T-cells mediate antigen specific, H-2 restricted DTH. Nátuře 290: 62 - 63; a P. herrmann, Μ. H. Schreier, J.-F. Borel a C. Feurer (1988) Mast cell degranulation as a major event in the effector phase of delayed-type hypersensitivity induced by cloned helper T cells. Int. Archs Allergy appl. Immun. 86: 102 - 105.
10. Systémový lupus erythematosus (SLE) u myši (NZB/NZW)
U samic novozélandské černo/bílě myši (NZB/NZW)Fl se spontánně vyvíjejí charakteristiky, které připomínají systémový lupus erythematosus. Ve 2 až 3 měsících se u nich vyvíjejí antinukleární protilátky, v 5 až 6 měsících se vyvíjí systémová imunitní nefritida a proteinurie a lze u nich předpovědět průběh k chronické renální mortalitě ve veku
8-9 měsíců. S léčením se začne ve věku 24 týdnu, kdy zvířata vykazují proteinurii. Sloučeniny se podávají perorálne třikrát týdně po dobu celkem 12 týdnů. Každý druhý týden se určuje stav zvířat a po skončení experimentu se zvířata pošlou na histologický rozbor. V každé skupině se použije 10 myší. 17a-dammarové sloučeniny jsou účinné při prevenci nástupu choroby ve výše uvedeném testovacím modelu při podávání každý druhý den v dávkách 5 - 10 0 ug / kg perorálně. 17P-dammarové sloučeniny jsou podobně účinně při podávání každý druhý den v dávkách 1 - 100 mg / kg perorálně.
Literární odkaz: B. S. Andrews, R. A. Eisenberg, A. N.
Theof ilopoulos, S. Izui, C. B. Wilson, P. J. Mc J. B.
Roth a F. J. Dixon (1978) Spontaneous murine lupus-like syndroms: clinícal a manifestatíon in several strains. J. Exp. Med. 148: 1198.
Dammarové sloučeniny, například 17a-dammarové sloučeniny, jak jsou popsány výše, například sloučeniny vzorců I, IA, IB nebo IC, jsou v souladu s tím vhodné jako léčiva, například jako imunosupresivní jakož i protizáněclivá činidla.
Jako imunosupresivní činidla jsou tyto sloučeniny vhodné zejména pro prevenci akutní nebo/a chronické orgánové nebo tkáňové transplantační rejekce, např. pro léčbu příjemců transplantátů srdce, plíce, kombinace srdce-plíce, jater, ledviny, slinivky břišní, kůže nebo rohovky. Jsou rovněž indikovány pro prevenci onemocnění štěp versus hostitel (graft-versus-host dísease), jako je onemocnění následující po transplantaci kostní dřeně.
Jako imunosupresivní a protizánětlivá činidla jsou tyto sloučeniny rovněž vhodné pro léčbu autoimunitních onemocnění a zánětlivých stavů, zejména zánětlivých stavů s etiologií zahrnující autoimunitní komponentu jako je artritida (např. revmatoidní artritida, chronická progredující artritida a arthritis deformans) a revmatická onemocnění. Mezi specifická autoimunitní onemocnění, při kterých lze dammarové sloučeniny použít, patří autoimunitní hematologickě poruchy (včetně například hemolytické anémie, aplastické anémie, anémie chudých červených krvinek a idiopatické trombocytopénie), systémový lupus erythematosus, polychondritida, sklerodom, Wegenerova granulomatóza, dermatomyositida, chronická aktivní hepatitida, myasthenia gravis, psoriáza, Steven-Johnsonův syndrom, idiopatická sprue, autoimunitní zánětlivá střevní onemocnění (včetně například ulcerativní kolitidy a Krohnovy nemoci) , endokrinní oftalmopatie, Gravesova choroba, sarkoidóza, roztroušená skleróza, primární biliární cirhóza, juvenilní diabetes (diabetes mellitus typu I) , uveitida (přední a zadní), suchá keratokonjunktivitida a jarní keratokonjunktivitida, intersticiální fibróza plic, psoriatická artritida a glomerulonefritida (s nebo bez nefrotického syndromu, např. včetně idiopatického nefrotického syndromu nebo nefropatie minimální výměny (minimal change nephropathy)).
Dammarové sloučeniny, například 17a-dammarové sloučeniny, jak jsou popsány výše, jsou dále indikovány pro použití k léčení plešatosti a pro podporu růstu vlasů a pro léčení astmatu, například inhalačním podáním.
Dammarové sloučeniny, například 17a-dammarové sloučeniny, jak jsou popsány výše, jsou rovněž indikovány pro použití v případě stavů, při kterých lze použít kortikosteroidy.
Pro výše uvedené indikace se bude vhodné dávkování samozřejmě lišit v závislosti například na konkrétním ošetřovaném pacientovi, způsobu podání, povaze a závažnosti ošetřovaného stavu a požadovaném účinku. Obecně se však uspokojivých výsledků u zvířat dosáhne při denních dávkách od přibližně 0,001 do 10 mg na kg a den perorálně. U větších savců, například člověka, leží indikovaná denní dávka v rozmezí od přibližně 0,05 do přibližně 500 mg sloučeniny podávané orálně najednou nebo vhodněji v dělených dávkách dvakrát až čtyřikrát denně, přičemž dávky nutné při použití 17ct-dammarových sloučenin budou na horním konci tohoto rozmezí a dávky při použití 17β-dammarových sloučenin budou na spodním konci.
Při transplantacích orgánů u člověka zahrnuje indikovaný dávkovači režim počáteční jedinou orální dávku 0,05 - 10 mg / kg sloučeniny 4-12 hodin před operací, poté se stejná dávka udržuje jako denní dávka po dobu jednoho nebo dvou týdnů po operaci, a pak se postupně snižuje podle hladiny v krvi až se dosáhne udržovací dávky přibližně 0,02-2 mg na kg a den. Pokud se tato sloučenina podává společné s jinými imunosupresivy, například jako součást terapie třemi nebo čtyřmi léčivy, lze použít nižší dávky (například 0,01 mg na kg a den intravenózně; 0,01 - 1 mg na kg a den orálně jako počáteční dávku).
Dammarové sloučeniny, například 17 a.-dammarové sloučeniny, jak jsou popsány výše, lze podávat libovolným běžným způsobem, zejména enterálně, například orálně, například ve formě roztoků k pití, tablet nebo kapslí, nebo parenterálně, například ve formě injikovatelných roztoků nebo suspenzí. Obvykle jsou pro systémové podání výhodné orální dávkovači formy, ačkoli je v některých případech, například při prevenci odmítnutí transplantátu jater, žádoucí intravenózně injikovatelná forma. Sloučeninu lze rovněž podávat místně nebo dermálně, například ve formě dermálního krému nebo gelu nebo podobného přípravku, nebo pro aplikaci do oka, ve formě očního krému, gelu nebo očních kapek. Vhodné jednotkové dávkovači formy pro orální podání obsahují například od 0,05 do 10 mg nebo 12,5 mg sloučeniny na dávku.
Farmaceutické prostředky pro podání dammarových sloučenin, například 17a-dammarových sloučenin, jak jsou popsány výše, lze připravit libovolným způsobem známým nebo běžně používaným v oboru, například důkladným smícháním s vhodnými farmaceuticky přijatelnými ředidly nebo nosiči včetně vody v čistotě vhodně pro použití v léčivech nebo injekcích. Jak je uvedeno výše, budou farmaceutické prostředky obsahující dammarové sloučeniny, například 17a-dammarovou sloučeninu, výhodně obsahovat dammarovou sloučeninu v čisté nebo ve v podstatě čisté formě, například ve formě čistého nebo v podstatě čistého jediného epimeru.
V souladu s tím, co bylo uvedeno výše, vynález rovněž zahrnuj e:
f) farmaceutický prostředek obsahující dammarovou sloučeninu, například 17a-dammarovou sloučeninu, jak jsou popsány výše, například sloučeninu vzorce I, IA, IB nebo IC, v kombinaci s farmaceuticky přijatelným ředidlem nebo nosičem.
Vynález je podrobněji popsán, avšak pouze pro ilustraci, v následujících příkladech, které mají vztah k připojeným obrázkům.
Popis obrázků na výkresech
Na obrázku 1 je znázorněn graf představující výsledky DTH-testu (DTH = hypersenzitivita opožděného typu, delayed-type hypersensitivity) prováděného se vzorky extraktů palmyrové mouky a kontrolními vzorky. Test byl prováděn na myších za použití klonu buněk TH. Byly použity extrakty o objemu 200 ml z 10 g palmyrové mouky, aplikace byla prováděna perorálne. Na podélné ose jsou vyneseny jednotlivé typy extraktů, přičemž symbol k znamená kontrola. Na svislé ose je znázorněno zvýšení tlouštíky tlapky v setinách mm. Symbol x znamená 80 mg / kg perorálne.
Obrázek 2 představuje protonové NMR-spektrum sloučeniny izolované v příkladu 1.
Obrázek 3 představuje 13C-NMR-spektrum sloučeniny izolované v příkladu 1.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Izolace a charakterizace sloučeniny vzorce IC
Předběžné studie vzorky mouky z výhonků palmyry (Borassus flabellifer L.), každý o hmotnosti 10 g, se extrahují 200 ml následujících rozpouštědel, pro zjištění vhodného extrakčního postupu:
- ethylacetátem
- petroletherem
- methanolem
- vodou (A) (B) (C) (D) vzorek o hmotnosti 600 g se extrahuje za použití Soxhletova extraktoru hexanem o teplotě varu 60 - 70 °C po dobu 16 hodin a poté vařícím dichlormethanem po dobu 16 hodin. Tímto postupem se získá po odpaření ve vakuu 1,1639 g hexanového extraktu (E) a 0,335 g dičhlormethanového extraktu (F) .
Frakce se rozpustí v ethanolu a testují se pomocí Mishell-Duttonova testu (testu primární humorální imunitní odpovědi na červené krvinky ovcí (SRBC) in vitro, MD-testu) a testu směsné lymfocytní reakce, mixed lymphocyte reaction, MLR-test) a jejich cytotoxicita se testuje na linii mastocytcmových buněk P-815.
Výsledky s pokusnými extrakty:
Extrakty A, B a E vykazují inhibiční účinnost na aktivované lymfocyty in vitro (MD-test, výše popsaný jako test 8), přičemž extrakt A je nejúčinnější (IC50 je přibližně při koncentraci menší než zředění 1 : 4000). Nejméně účinným z účinných frakcí je extrakt E (ICS0 přibližně zředěni 1 : 200) . Nejméně toxický pro mastocytomové buňky P-815 (v testu popsaném výše jako test 3) je extrakt B. Nej lepší poměr účinnosti k toxicitě však vykazuje extrakt A, který je nejúčinnější při inhibici směsné lymfocytní reakce (v testu popsaném výše jako test 1) . Získané výsledky jsou uvedeny níže v tabulkách 1, 2 a 3.
Tabulka 1
Primární humorální imunitní odpověď (MD-test)
| extrakt | koncentrace | % inhibice | |
| A | 1 | : 40 | 100 |
| 1 | : 400 | 100 | |
| 1 | : 4000 | 76 | |
| B | 1 | : 40 | 100 |
| 1 | : 400 | 90 | |
| 1 | : 4000 | 52 | |
| C | 1 | : 40 | 100 |
| 1 | : 400 | 20 | |
| 1 | : 4000 | 5 |
Tabulka 2
Směsná lymfocytní reakce
| extrakt | koncentrace | % inhibice | |
| A | 1 | : 500 | 100 |
| 1 | : 2500 | 70 | |
| 1 | : 12500 | -50 stimulace | |
| B | 1 | : 500 | 100 |
| 1 | : 2500 | -40 | |
| 1 | : 12500 | -42 | |
| C | 1 | : 500 | -40 |
| 1 | : 2500 | -30 | |
| 1 | : 12500 | -29 |
Tabulka 3 test s mastocytomovými buňkami P-815 (test cytotoxicity)
| extrakt | koncentrace | % inhibice | |
| A | 1 | 50 | 100 |
| 1 | 250 | 100 | |
| 1 | 1250 | 38 | |
| B | 1 | 50 | 100 |
| 1 | 250 | 90 | |
| 1 | 1250 | -2 | |
| C | 1 | 50 | 100 |
| 1 | 250 | 65 | |
| 1 | 1250 | 10 |
U různých extraktů se rovněž stanovuje in vivo hypersenzitivní reakce opožděného typu (delayed-type hypersensitivity reaction, výše popsaný test 9), pro získání další informace pro rozhodnutí, které extrakty mají být použity pro extrakci ve velkém rozsahu. Pro tento účel se pěti myším hodinu před podáním antigenu jednou orálně podají stejné vzorky (extrakty z 10 g mouky) . Reakce se vyhodnotí 24 hodin po injekci antigenu. Jako pozitivní kontrola se použije cyklosporin A. Výsledky jsou uvedeny na obrázku 1. Pouze extrakt A/B (extrakty A a B v kombinaci) vykazuje výraznou inhibiční účinnost in vivo.
Extrakt A (ethylacetátový extrakt) vykazuje nej slibnější účinky in vitro a in vivo a vybere se pro extrakci ve velkém rozsahu.
Izolace a charakterizace sloučeniny vzorce IC kg palmyrově mouky (z Borassus flabellifer L.) se rozdělí na pět části po 10 kg. Každá z nich se extrahuje 20 1 ethylacetátu při teplotě místnosti a po 1 hodině se extrakt zfiltruje. Tento postup se opakuje s 15 1 ethylacetátu. Smíchané filtráty o objemu 175 1 se zahustí ve vakuu, čímž se získá hnědý olejovitý zbytek o hmotnosti 95,5 g, který se poté roztřepe třikrát v rozpouštědlovém systému tvořeném 500 ml 90% vodného methanolu a 1 1 hexanu, přičemž ze spodní fáze se po odpaření ve vakuu získá 19,8 g surové pevné látky. Tato látka se nanese na sloupec o rozměrech 8 x 3 5 cm, obsahující přibližně 2 kg silikagelu 60 a chromatograficky se zpracuje za použití směsi methylterc.butyletheru a methanolu, ve které se obsah methanolu postupně zvyšuje z 2 % na 50 %, jako elučního činidla. Odeberou se tři frakce č. 1, 2 a 3, každá o objemu 450 ml, účinné hlavně v MLR-testu.
Frakce č. 2 a 3 (o hmotnosti 1,92 g) se znovu nanesou na sloupec silikagelu o rozměrech 5,5 x 36 cm a sloupec se
- 37 promývá směsí hexanu a acetonu, ve které se obsah acetonu postupně zvyšuje z 20 % na 50 %. 22 frakcí (o hmotnosti 1,19 g) z této sloupcové chromatografie, identifikovaných pomocí chromatografie na tenké vrstvě (TLC) a testu biologické účinnosti se smíchá se zbylou frakcí č. 1 účinnou v MLR-testu (o hmotnosti 0,28 g) z předchozího chromatografického stupně. Následující purifikačni stupeň se provede na sloupci Sephadex LH-20 o rozměrech 5 x 85 cm za použití směsi díchlormethanu a methanolu v poměru 1 : 1 jako elučního činidla, s monitorováním UV-světlem při vlnové délce 220 nm, čímž se získá 6 biologicky účinných frakcí, které poskytnou 809 mg produktu. Tento produkt se dále zpracuje po rozdělení na tři stejné vzorky pomocí preparátivní vysoceúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na sloupci Spherisorb ODS-2 RP18 (5 μπι) o rozměrech 20 x 250 mm. Použije se gradientová eluce s lineárním gradientem (70 % až 100 %) směsi acetonitrilu a methylterc.butyletheru v poměru 9 : 1 ve vodě a frakce se izolují za použití monitorování UV-světlem při 220 nm.
Izoluje se 6 frakcí účinných v MLR-testu (32 mg) a separují se na stejném sloupci pro HPLC jako je uveden výše, ale za použití eluce isokratickou směsí methanolu, vody a methylterc.butyletheru v poměru 7:2:1a detekce při 220 nm, čímž se získá 7 účinných frakcí o celkové hmotnosti 9,3 mg. Tento stupeň se opakuje na stejném sloupci pro HPLC za použiti isokratické eluce směsí acetonitrilu a vody v poměru 87 : 13 a monitorování při 220 nm. Detekují se čtyři účinné frakce (1,3 mg). Nakonec se na sloupci pro HPLC Lichrospher RP18 (5 μπι) o rozměrech 4 x 250 mm separuje vzorek o hmotnosti 100 μg za použití eluce acetonitrilem s průtokem 1,5 ml za minutu. Frakce se odebírají na bázi UV-detekce za použití soustavy diod současně při 220 a 240 nm. Zjistí se, že látka účinná v MLR-testu je přítomná ve frakci s jediným a čistým pikem při HPLC při různých vlnových délkách, s retenčním časem přibližně 11,6 minuty. Zbývající účinná složka (1,1 mg) z předcházejícího stupně se zpracuje jako 11 vzorků po 100 μg přesně stejným způsobem, a z frakcí s jediným čistým pikem se po jejich spojení a zahuštění získá 0,5 mg bílé amorfní sloučeniny. Vlastnosti a fyzikální charakteristiky této sloučeniny jsou shrnuty níže v tabulce 4 .
Změří se účinnost izolované sloučeniny v testu 1 (myší směsné lymfocytní reakci, murine mixed lymphocyte reaction) a její cytotoxická a cytostatická účinnost na buňky Jurkat a P-815 (test 3), a porovná se s účinnostmi cyklosporinu A a silicicolinu ve stejných testech. Získané výsledky jsou uvedeny níže v tabulce 5.
Tabulka 4
Vlastnosti:
| 1. | vzhled | bezbarvý prášek |
| 2. | hmotové spektrum (FAB, ionizace rychlými neutrálními částicemi) | m/e = 443 (MET) |
| 3 . | molekulový vzorec | QsoH5002 |
| 4 . | UV-spektrum (methanol) | koncová absorpce |
| 5. | protonové NMR-spektrum při 500 MHz v deuterochloroformu, deutero- chloroform jako vnitřní standard | viz obrázek 2 |
| 6. | 13C-NMR-spektrum při 125,7 MHz v deuterochloroformu, deutero- chloroform jako vnitřní standard | viz obrázek 3 |
| 7. | rozpustnost | rozpustná v chloroformu methanolu, nerozpustná v vodě |
| 8. | retenčí čas při HPLC3 | 11,6 minut |
Legenda k tabulce 4:
a na sloupci Merck LiChrospher 100 RP-18 (5 μιτι) o rozměrech 4 x 250 mm, s acetonitrilem při průtoku 1,5 ml za minutu, detekce při 210 nm za použití detektoru se soustavou fotodiod Waters 996
Tabulka 5
Biologické účinnosti izolované sloučeniny in vitro, ve srovnání s cyklosporinem A a silicicolinem; · hodnoty IC50 v ng / ml
| MLR-test | test na buňkách Jurkat | test na buňkác P-815 | |
| cyklosporin A | 4 | >5000 | >5000 |
| silicicolin | 2 | 2,5 | 4 |
| sloučenina | 10,5 a 11,0 | >5000 | >5000 |
| vzorce IC |
Cyklosporin A se používá jako referenční imunosupresivní činidlo.
Silicicolin se používá jako referenční cytostatické činidlo.
Příklad 2
Syntéza (17a)-23 -(E)-dammara-20,23-dien-3P,25-diolu (sloučeniny vzorce IC)
a) Stupeň 1 postupu ve schématu A
3β-terč.butyldimethylsiloxy-17a-acetylhexanor-dammaren
K roztoku 12,0 g sloučeniny A (Phytochemistry, citováno výše) a 13,6 g imidazolu ve 450 ml dimethylformamidu se v atmosféře argonu přidá 25,0 g terč.butyldimethylchlorsilanu (TBDMSCl). Reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti, naředí se diethýletherem a promyje se vodným 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného a roztokem chloridu sodného. Organická vrstva se vysuší síranem sodným a rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku. Chromatografickým zpracováním na silikagelu za použití směsi hexanu a ethylacetátu jako elučního činidla se získá sloučenina uvedená v názvu (sloučenina B) ve formě bílé pěny.
Re (na silikagelu): 0,53 (směs hexanu a ethylacetátu v poměru
9:1) 1H-NMR (deuterochloroform), charakteristické signály: 3,15 (IH, dd, J = 5/12, H-C(3)), 2,65 - 2,45 (IH, m
H-C(17)), 2,10 (3H, s, H3CCO)
b) Stupeň 2 postupu ve schématu A
3P~terc.butyldimethylsiloxy-17-acetylhexanor-dammaren-enolacetát
Roztok 1,0 g hydrátu p-toluensulfonové kyseliny ve 200 ml acetanhydridu se zahřívá na teplotu 140 °C po dobu 30 minut. Při teplotě místnosti se přidá 3,0 g sloučeniny B a reakční směs se zahřívá po dobu 3 hodin na teplotu 14 0 °C.
Během reakční doby se pomalu oddestiluje kyselina octová. Reakční směs se zahustí za sníženého tlaku na objem přibližně 100 ml, naředí se diethyletherem a extrahuje se studeným vodným 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva se vysuší síranem sodným a rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku. Velmi rychlou chromatografií na silikagelu za použití směsi hexanu a ethylacetátu v poměru 95 : 5 se získá sloučenina uvedená v názvu (sloučenina C) ve formě bílé pevné látky, přičemž se jedná o směs dvou diastereomerních enolacetátů.
Rf (na silikagelu): 0,41 (směs hexanu a ethylacetátu v poměru : 5) 1H-NMR (deuterochloroform), charakteristické signály; 3,15 (IH, dd, J = 5/12, H-C(3)), 2,50 - 2,00 (3H, m H-C(13),
H2-C(16)), 2,07 a 2,06 (3H, s, diastereomerní H3CCOO)
c) Stupně 3+4 postupu ve schématu A
3P-terc.butyldimethylsiloxy-17P-acetylhexanor-dammaren
K roztoku 445 mg sloučeniny C v 10 ml absolutního diethyletheru se v atmosféře argonu při teplotě 0 °C přidá 3,75 ml 1,6M etherického roztoku methyllithia. Reakční směs se míchá po dobu 1 hodiny při teplotě 0 °C, ochladí se na
-78 °C a přidá se k ní 150 mg methylsalicylátu. Reakční směs se míchá po dobu 30 minut při teplotě -78 °C, přidá se voda a směs se extrahuje ethyletherem. Organická vrstva se vysuší síranem sodným a rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku. Chromatografickým vyčištěním na silikagelu za použití směsi hexanu a ethylacetátu v poměru 4 : 1 jako elučního činidla se získá sloučenina uvedená v názvu (sloučenina D) ve formě bílé pěny.
Re (na silikagelu) : 0,34 alfa-keton, 0,26 beta-keton (směs hexanu a ethylacetátu v poměru 95 : 5) 1H-NMR (deuterochloroform), charakteristické signály: 3,15 (IH, dd, J = 5/12, H-C(3)), 3,00 - 2,94 (IH, m
H-C(17)), 2,11 (3H, S, H3CCO)
d) Stupeň 5 postupu ve schématu A
3β-terč.butyldimethylsiloxy-20-trifluormethansulfonyloxy- 17ct-hexanor-dammar-2 0 - en
1) KN(SI(CH3)3)2
2) f enyltrifLuor m ethansulfonimid
tí
K roztoku 236 mg sloučeniny D ve 25 ml tetrahydrofuranu se v atmosféře argonu při teplotě -78 °C přidá roztok 4,0 ml kalium-bis(trímethylsilyl)amidu (15% v toluenu). Reakční směs se zahřeje na teplotu 5 °C, míchá se po dobu 0,5 hodiny při této teplotě, poté se ochladí na -30 °C a rychle se přidá 1,25 g N-fenyltrifluormethansulfonimidu v 10 ml tetrahydrofuranu. Reakční směs se zahřeje na teplotu 0 °C, míchá se při teplotě 0 °C po dobu 5 minut, vylije se do pufru o pH 7 a extrahuje se třikrát ethyletherem. Smíchané etherové fáze se vysuší síranem sodným, odpaří do sucha a chromatograficky vyčistí na silikagelu za použití směsi etheru a hexanu v poměru 3 : 97 jako elučního činidla, čímž se získá 203 mg (67 %) sloučeniny uvedené v názvu (sloučeniny H) ve formě bezbarvých krystalů.
'H-NMR (360 MHz, deuterochloroform) , charakteristické signály: 2,35 - 2,94 (široký q, IH, βΗ-<Ζ(17)), 3,20 (dd, IH, ccH-C(3)), 5,12 (široký d, IH, J = 4,
Ha-C(21)), 5,20 (d, IH, J = 4 Hz, Hb-C(21))
e) Stupeň 6 postupu ve schématu A
3β-terč. butyldimethylsiloxy-20 - tri-n-butylstannyl-17cc-hexanor-dammar-20-en
j
H
K suspenzi 3,15 g CuCN ve 200 ml tetrahydrof uranu se v atmosféře argonu při teplotě -78. °C přidá roztok 44 ml n-butyllithia (1,6N v hexanu). Směs se míchá při teplotě -50 °C po dobu 10 minut a poté se k takto získanému zelenému roztoku při teplotě -78 °C přidá 18,6 ml n-(butyl) 3SnH. Po uplynuti 10 minut se přidá 2,14 g vinyl-triflatu (= vinyl-trifluormethansulfonátu) ve 30 ml tetrahydrofuranu, reakční směs se míchá při teplotě -78 °C po dobu 10 minut, za intenzivního míchání se vylije do směsi 25% vodného chloridu amonného a hexanu v množství 0,75 1 : 0,5 1, odfiltruje se sraženina a směs se extrahuje třikrát hexanem. Smíchané organické fáze se vysuší nad síranem sodným, odpaří se do sucha a chromatograficky vyčistí na silikagelu za použití hexanu jako elučního činidla, čímž se získá sloučenina uvedená v názvu (sloučenina J, 53 %) ve formě bezbarvého viskózního oleje.
^-NMR (3 60
MHz, deuterochloroform) , charakteristické signály: 2,82 - 2,92 (široký q, IH, βΗ-<5(17)), 3,14 (dd, IH, ctH-C(3)), 5,18 (široký s, IH, H-C(21)), 5,80 (široký s, IH, H-C(21))
f) Stupeň 7 postupu ve schématu A
3β-terč.butyldimethylsiloxy-17a-23 -(E)-dammara-2 0,23-dien-25-ol
Pd(CH3CN)2C!2
K roztoku 0,4 g 2,2-dimethyl-3-vinyloxiranu (Tetrahedron, 1989, 4 5, 979) a 1,36 g sloučeniny J ve 12 ml tetrahydrofuranu se při teplotě místnosti přidá roztok 24 mg Pd(CH3CN) 2C12 v 0,3 ml vody a 12 ml dimethylformamidu. Reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti. Lehce zakalený žlutý roztok se vylije do vody a extrahuje se ethyletherem. Smíchané organické fáze se vysuší nad síranem sodným a odpaří do sucha, čímž se získá sloučenina uvedená v názvu (sloučenina K) ve formě žluté voskovité pevně látky, která se použije bez dalšího čištění v následujícím stupni.
g) Stupeň 8 postupu ve schématu A (17a)-23-(E)-dammara-20,23-άίβη-3β,25-diol
K L
Roztok 1,45 g sloučeniny K v 60 ml tetrahydrofuranu se při teplotě 60 °C nechá po dobu 1,5 hodiny reagovat se 100 ml tetrabutylamonium-fluoridu (1M roztokem v tetrahydrofuranu). Reakční směs se vylije do 1 1 plovičnš nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a extrahuje se etherem. Smíchané organické fáze se vysuší nad síranem sodným, odpaří se do sucha a chromatograficky vyčistí na silikagelu za použití směsi acetonu, etheru a hexanu v poměru 5 : 40 : 55 jako elučního činidla, čímž se získá 670 mg dammaradiendiolu L (83 % za dva stupně) ve formě bezbarvých krystalů. Vzorek se překrystaluje ze směsi etheru a hexanu. Teplota, tání produktu činí 90,6 - 91,4 °C.
[a] 589 JS = -7,45 [a] 3022S = -119,2 [a] 29S2S = -109,5 [a] 280 2S = -38,7 0 (ethanol, koncentrace = 1,06) xH-NMR-spektrum tohoto syntetického materiálu je shodné se spektrem v přírodě se vyskytující sloučeniny izolované z palmyrové mouky (z Borassus flabellifer L.) lH-NMR (360 MHz, deuterochloroform), ppm: 0,73 (široký d, IH,
J = 12,5 a 1,3, H-D(5)), 0,78 (s, 3H, H-C(28)), 0,85 (s, 3H, H-C(19)), 0,90 (s, 3H, H-C(30)), 0,95 (s, 3H,
H-C(18)), 0,98 (s, 3H, H-C(29), 1,33 (s, 6H,
H-C(26,27)), 1,19 - 1,74 (tn, 15H, H-C (1,2,6,7,9,11,
12,15)), 1,75 - 1,84 (tn, 2H, H-C(16)), 1,98 - 2,05 (tn,
IH, H-C(13)), 2,59 - 2,64 (m, IH, pH-C(17)), 2,66 (široký d, IH, J = 6,3 Hz, H-C(22)), 2,79 (široký s) ,
2,82 (dd, IH, H-C(22)), 3,18 - 3,23 (m, IH, aH-C(3)),
4,88 (s, IH, H-C(21)), 4,95 (s, IH, H-C(21)),
5,59 - 5,62 (tn, 2H, H-C(23,24))
Příklad 2' (17β)-23E-damtnara-20,23-dien-3P, 25-diol lze připravit analogicky počínaje od sloučeniny A analogickým postupem jako je popsán ve stupních a) a d) až g) v příkladu 2. Fyzikální údaje tohoto produktu jsou stejné jako údaje popsané dále v příkladu 3.
Příklad 3
Syntéza (17β)-23E-dammara-20,23-dien-3β,25-diolu (β-epimeru sloučeniny vzorce IC)
a) Stupeň 9 postupu ve schématu B
3β-terč.buLyldimethylsiloxy-17β-aceLyl-hexanor-dammaren-trisylhydrazon
S
- 47 K suspenzi 1,6 g sloučeniny B (připravené jako v příkladu 2a) a 3,3 g hydrazidu 2,4,6 -triisopropylbenzensulfonové kyseliny v 50 ml acetonitrilu se při teplotě místnosti přidá 150 μΐ koncentrované kyseliny chlorovodíkové. Tato suspenze se míchá po dobu 30 minut při teplotě místnosti, naředí se ethyletherem a promyje se vodným 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Organická vrstva se vysuší síranem sodným a rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku. Chromatografickým zpracováním na silikagelu za použití směsi hexanu a ethylacetátu v poměru 4 : 1 jako elučního činidla se získá sloučenina uvedená v názvu (sloučenina E) ve formě bílé amorfní pěny (směs diastereomerů e/z).
R£ (na silikagelu): 0,61 (směs hexanu a ethylacetátu v poměru : 1) XH-NMR (deuterochloroform), charakteristické signály: 7,24 a
7,12 (3H, s, H-C (aromatický) ) , 4,22 - 4,08 (2H, m,
H-C-C (aromatický)) , 3,15 - 3,05 (IH, m, H-C(3)),
2,92 - 2,78 (IH, m, H-C-C (aromatický) ) , 2,35 - 2,22 (IH, m, H-C(17)), 1,67 (IH, s, H3CCN)
b) Stupně 10+7 postupu ve schématu B
3P-terc.butyldimethylsiloxy-17p-23-(E)-dammara-20,23-dien-25-ol
K roztoku 161 mg sloučeniny E v 5 ml absolutního diethyletheru se při teplotě -78 °C v atmosféře argonu přidá 1,6M roztok butyllithia v hexanu (0,5 ml) . Žlutohnědý roztok se míchá při teplotě -20 °C až se přestane vyvíjet plyn. Po přidání 15 mg kyanidu měďného při teplotě -78 °C se přidá 160 μΐ 1,l-dimethyl-2-vinylepoxidu a reakční směs se míchá při teplotě -20 °C po dobu 2 hodin. Reakční směs se naředí diethyletherem a přidá se nasycený vodný roztok chloridu amonného (pH = 9) . Organická vrstva se vysuší síranem sodným a rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku, čímž se získá 190 mg amorfní pevné látky. Tento materiál se použije přímo bez dalšího čištění pro reakci k odstranění silylové chránící skupiny.
c) Stupeň 8 postupu ve schématu B
17β-23-(E)-dammara-20,23-dien-3£,25-diol
K roztoku 190 mg silyletheru F v 5 ml absolutního tetrahydrofuranu se v atmosféře argonu přidá 1 ml 1M roztoku tetrabutylamoniumfluoridu v tetrahydrofuranu. Reakční směs se míchá po dobu 12 hodin při teplotě 50 °C, naředí se diethyletherem a extrahuje se vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Odstraněním rozpouštědla a chromatografickým zpracováním na silikagelu za použití směsi hexanu a ethylacetátu v poměru 4 : 1 jako elučního činidla se získá 35 mg sloučeniny uvedené v názvu ve formě krystalického bílého produktu.
XH-NMR (deuterochloroform), charakteristické signály: 5,60 - 5,50 (2H, m, H-C(23+24)), 4,70 (IH, s, H-C(21)), 4,62 (IH, s, H-C(21)), 3,13 (IH, dd, J = 5/12, H-C(3)), 2,65 - 2,55 (2H, m, H-C(22)), 2,18 - 2,12 (IH, m, H-C(17))
Příklad 3' (17a)-23E-dammara-20,23-dien-3P,25-diol lze připravit analogicky počínaje od sloučeniny D z příkladu 2c) analogickým postupem jako je popsán ve stupních a) až c) v příkladu 3, například přes následující meziprodukty:
3β-terč . butyldime thylsiloxy-17a-acetyl-hexanor-dammarer. -trishydrazon, a
3P~terc.butyldimethylsiloxy-17a-23-(E)-dammara-20,23-aien-25-ol.
Fyzikální údaje produktu jsou stejné jako údaje uvedené výše v příkladu 2.
Jak je uvedeno výše, budou se dávky dammarových sloučenin pro použití podle vynálezu lišit například v závislosti na způsobu podáni, ošetřovaném stavu nebo chorobě a zejména na tom, jaká konkrétní dammarové sloučenina se použije. Hodnoty EDS0 získané pro 17a-dammarovou sloučeninu vzorce IC a její 17P-epimer [(17β)-23-(E)-dammara-20,23-άίβη-3β,25-diol] v jednom pokusu prováděném podle výše popsaných testů 9 a 10, spolu s typickými výsledky pro známé protizánětlivé a imunosupresivní činidlo cyklosporin A jsou následuj ící:
| test 9 (DTH-test) [EDS0] | test 10 (SLE-test) [ED.3O] | |
| sloučenina vzorce IC | 4,0 gg/kg perorálně | 10 gg/kg perorálně |
| β-epimer sloučeniny vzorce IC | 10 mg/kg perorálně | 10 mg/kg perorálně |
| cyklosporin A | 45 - 50 mg/kg perorálně | 75 - 100 mg/kg perorálně |
Indikované orální dávky pro protizánětlivé a imunosupresivní použití, například pro použití při léčení autoimunitních onemocnění, tedy budou:
v případě sloučeniny vzorce IC, řádově jedna tisícina až jedna desetitisícina dávky indikované při léčení za použití cyklosporinu A, například přibližně 0,4 nebo 0,5 až 4,0 nebo 5,0 pg na kg a den;
v případě 17P-epimeru sloučeniny vzorce IC, řádově jedna čtvrtina až jedna desetina dávky indikované při léčení za použití cyklosporinu A, například přibližně 0,4 nebo 0,5 až 1,0 nebo 1,25 mg na kg a den.
Claims (13)
- PATENTOVÉNÁROKY1. 17a-dammarová sloučenina.
- 2. 17a-dammarová sloučenina nebo dammarová sloučenina obecného vzorce IA ve kterém •llddIA) JAIOINISVIA OH3A01SAW0dd avy a iL 6 ί 7 Z ai^Oa g l 1; 9 o c představuje skupinu >CH-ORi, kde Rx znamená atom vodíku ’f3 nebo fyziologicky odštěpitelný a přijatelný acylový zbytek, nebo skupinu >C=O, a představuje alifatickou skupinu s 8 atomy uhlíku popřípadě obsahující jednu nebo dvě dvojné vazby a popřípadě substituovanou alespoň jednou hydroxyskupinou, pro použití jako léčivo.
- 3. Farmaceutický prostředek, vyznačuj ící se tím, že obsahuje 17a-dammarovou sloučeninu nebo dammarovou sloučeninu obecného vzorce IA podle nároku 2, v kombinaci s farmaceuticky přijatelným ředidlem nebo nosičem.
- 4. Použití 17a-dammarové sloučeniny nebo dammarové sloučeniny obecného vzorce IA podle nároku 2 pro přípravu ! S1' c S i 1Τ U T £ <; 11Ε Ε T1'- 52 léčiva pro terapeutické použití jako imunosupresivního nebo protizánětlivého činidla.
- 5. 17a-dammarová sloučenina podle nároku 1 obecného vzorce IB ve kterém mají symboly a a R významy definované v nároku 2.
- 6. 17a-dammarová sloučenina podle nároku 1, kterou je sloučenina vzorce IC, (17a)-23-(E)-dammara-20,23-dien-3P,25-diol, nebo její fyziologicky hydrolyzovatelný a přijatelný ester.
- 7. Sloučenina, která má NMR-spektrum se stejnými charakteristikami jako má NMR-spektrum znázorněné na obrázku 2 nebo obrázku 3.
- 8. l7a-karbonyldammarová sloučenina.
- 9. 17a-karbonyldammarová sloučenina podle nároku 8 obecného vzorce XIIbR.'2CHCH.(Xllb) ve kterém a představuje skupinu vzorce >CH-OH nebo >C=0 ve volné nebo chráněné formě, a substituentem v poloze 17, R2CO-, je acylová skupina.
- 10. Sloučenina obecného vzorce XlIIa ve kterém a má význam uvedený v nároku 9, aZ představuje atom alkalického kovu nebo organokovovou skupinu.
- 11. Sloučenina obecného vzorce XlIIa podle nároku 10, ve které Z představuje atom lithia nebo trialkylstannioskupinu.
- 12. Způsob přípravy ,17a-dammarové sloučeniny, vyznačující se tím,že sea) epimerizuje 17β-karbonyldamarová sloučenina pro získání17a-karbonyldammarové sloučeniny a v případě potřeby seb) tato 17a-karbonyldammarová sloučenina dále derivatizuje za použití libovolné z technik, způsobů nebo postupů popsaných výše.
- 13. Způsob přípravy 17C-dammarové sloučeniny, vyznačující se tím, že se 17-karbonyldammarová sloučenina, v případě potřeby v chráněné formě, podrobí reakci s elektrofilním činidlem, a pokud je to žádoucí, odstraní se chránící skupiny a funkce.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB9415161A GB9415161D0 (en) | 1994-07-27 | 1994-07-27 | Organic compounds |
| PCT/EP1995/002913 WO1996003419A1 (en) | 1994-07-27 | 1995-07-24 | Tetracyclic triterpenes |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ23497A3 true CZ23497A3 (en) | 1997-07-16 |
Family
ID=10758967
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ97234A CZ23497A3 (en) | 1994-07-27 | 1995-07-24 | 17alpha-dammar compounds, process of their preparation, pharmaceutical compositions containing thereof and their application |
Country Status (20)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5852005A (cs) |
| EP (1) | EP0801653A2 (cs) |
| JP (1) | JPH10503191A (cs) |
| AU (1) | AU704929B2 (cs) |
| BR (1) | BR9508344A (cs) |
| CA (1) | CA2192789A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ23497A3 (cs) |
| FI (1) | FI970320A0 (cs) |
| GB (1) | GB9415161D0 (cs) |
| HU (1) | HUT76831A (cs) |
| IL (1) | IL114723A0 (cs) |
| MX (1) | MX9700554A (cs) |
| NO (1) | NO970329L (cs) |
| NZ (1) | NZ290430A (cs) |
| PE (1) | PE35596A1 (cs) |
| PL (1) | PL318145A1 (cs) |
| SK (1) | SK11897A3 (cs) |
| TR (1) | TR199500905A2 (cs) |
| WO (1) | WO1996003419A1 (cs) |
| ZA (1) | ZA956279B (cs) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6124362A (en) * | 1998-07-17 | 2000-09-26 | The Procter & Gamble Company | Method for regulating hair growth |
| US6450168B1 (en) | 2001-04-17 | 2002-09-17 | Kellie I. Nguyen | Infant sleeping blanket/garment for use with medical devices |
| EP1768662A2 (en) | 2004-06-24 | 2007-04-04 | Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. | Small molecule immunopotentiators and assays for their detection |
| CN109985052A (zh) * | 2017-12-29 | 2019-07-09 | 上海蓝木化工有限公司 | 三萜类化合物的新用途 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3644421A (en) * | 1968-12-02 | 1972-02-22 | Syntex Corp | 4-oxa-3-keto-delta**1-pregnene derivatives |
| US3868453A (en) * | 1970-03-04 | 1975-02-25 | Philips Corp | 16-Methylene-9/beta, 10alpha-steroid compounds, pharmaceutical preparations which contain the novel compounds as active ingredients and methods of producing the said compounds and preparations |
| US4057543A (en) * | 1976-07-01 | 1977-11-08 | G. D. Searle & Co. | Process for the preparation of 17β-hydroxy-3-oxo-17α-pregn-4-ene-21-carboxylic acid γ-lactone |
| US4636496A (en) * | 1984-03-20 | 1987-01-13 | Wayne State University | Compositions inhibiting murine MXT ductal carcinoma |
| US4755504A (en) * | 1985-10-03 | 1988-07-05 | Yaguang Liu | Pharmaceutical composition from Tienchi |
| JPH04243833A (ja) * | 1991-01-28 | 1992-08-31 | Tsumura & Co | １１β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ阻害剤 |
-
1994
- 1994-07-27 GB GB9415161A patent/GB9415161D0/en active Pending
-
1995
- 1995-07-17 ZA ZA956279A patent/ZA956279B/xx unknown
- 1995-07-24 SK SK118-97A patent/SK11897A3/sk unknown
- 1995-07-24 US US08/776,442 patent/US5852005A/en not_active Expired - Fee Related
- 1995-07-24 WO PCT/EP1995/002913 patent/WO1996003419A1/en not_active Application Discontinuation
- 1995-07-24 MX MX9700554A patent/MX9700554A/es unknown
- 1995-07-24 AU AU31166/95A patent/AU704929B2/en not_active Ceased
- 1995-07-24 CZ CZ97234A patent/CZ23497A3/cs unknown
- 1995-07-24 CA CA002192789A patent/CA2192789A1/en not_active Abandoned
- 1995-07-24 EP EP95926974A patent/EP0801653A2/en not_active Withdrawn
- 1995-07-24 NZ NZ290430A patent/NZ290430A/en unknown
- 1995-07-24 JP JP8505467A patent/JPH10503191A/ja active Pending
- 1995-07-24 HU HU9700246A patent/HUT76831A/hu unknown
- 1995-07-24 PL PL95318145A patent/PL318145A1/xx unknown
- 1995-07-24 BR BR9508344A patent/BR9508344A/pt not_active Application Discontinuation
- 1995-07-25 IL IL11472395A patent/IL114723A0/xx unknown
- 1995-07-26 PE PE1995274759A patent/PE35596A1/es not_active Application Discontinuation
- 1995-07-27 TR TR95/00905A patent/TR199500905A2/xx unknown
-
1997
- 1997-01-24 FI FI970320A patent/FI970320A0/fi unknown
- 1997-01-24 NO NO970329A patent/NO970329L/no unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU704929B2 (en) | 1999-05-06 |
| CA2192789A1 (en) | 1996-02-08 |
| US5852005A (en) | 1998-12-22 |
| NZ290430A (en) | 1998-01-26 |
| HUT76831A (en) | 1997-11-28 |
| JPH10503191A (ja) | 1998-03-24 |
| GB9415161D0 (en) | 1994-09-14 |
| FI970320L (fi) | 1997-01-24 |
| ZA956279B (en) | 1997-01-27 |
| EP0801653A2 (en) | 1997-10-22 |
| SK11897A3 (en) | 1997-08-06 |
| AU3116695A (en) | 1996-02-22 |
| MX9700554A (es) | 1997-05-31 |
| NO970329D0 (no) | 1997-01-24 |
| BR9508344A (pt) | 1998-07-14 |
| PL318145A1 (en) | 1997-05-12 |
| FI970320A0 (fi) | 1997-01-24 |
| PE35596A1 (es) | 1996-09-04 |
| IL114723A0 (en) | 1995-11-27 |
| NO970329L (no) | 1997-03-25 |
| EP0801653A3 (cs) | 1997-10-29 |
| TR199500905A2 (tr) | 1996-06-21 |
| WO1996003419A1 (en) | 1996-02-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3292928B2 (ja) | 新規なプレグナ−１，４−ジエン−３，２０−ジオン−１６，１７−アセタール−２１−エステル、その製法および抗炎症用医薬組成物 | |
| US4235893A (en) | Ester derivatives of 4-hydroxy-4-androstene-3,17-dione and a method for inhibiting estrogen biosynthesis | |
| CN101239090A (zh) | 具有食欲抑制剂活性的药物组合物 | |
| US4202891A (en) | 15-Oxygenated sterol compounds and the use of such compounds to inhibit the biosynthesis of sterols | |
| SK498A3 (en) | Macrolides, a method for their preparation and a pharmaceutical composition containing the same | |
| NO158508B (no) | Analogifremgangsmaate for fremstilling av antiinflammatorisk virksomme 4-pregnenderivater. | |
| WO2002014343A1 (en) | Bufadienolide derivatives and use as immunosuppressive, antiinflammatory and analgesic agents | |
| CZ23497A3 (en) | 17alpha-dammar compounds, process of their preparation, pharmaceutical compositions containing thereof and their application | |
| JPH0314303B2 (cs) | ||
| PL138796B1 (en) | Process for preparing novel 6 alpha-methylcorticoids | |
| EP0023856A2 (fr) | Dérivés 17-((hydroxyméthyl)(formamido) méthylène) stéroides, leur préparation, leur application à l'introduction de la chaîne latérale hydroxyacétyle | |
| JPH02275884A (ja) | 置換アザトリシクロ誘導体および代謝物、それらの製法並びに医薬組成物 | |
| Li et al. | Four new immunomodulating steroidal glycosides from the stems of Stephanotis mucronata | |
| Elliger et al. | Minor petuniasterones from Petunia hybrida | |
| JP3366639B2 (ja) | コンティグナステロール化合物を含んで成る医薬組成物 | |
| CA2237157C (en) | Cyclopeptolide inhibitors of adhesion molecules | |
| SI9620030A (sl) | 17-difluormetilen-estratrieni | |
| El Masry et al. | Synthesis and biological action of two glucocorticoid alkylating agents | |
| CN1154113A (zh) | 四环三萜类 | |
| Camoutsis et al. | Formation of bishomoazasteroids by the beckmann rearrangement | |
| GB2187459A (en) | 3-deoxo-10???-alkynyl steroids and process for their preparation | |
| US3634467A (en) | 1alpha 2alpha-methylene-6-trifluoromethyl steroids | |
| JPH07500119A (ja) | アンドロスト−４−エノ〔４，５−ｂ〕ピロール誘導体およびその製造法 | |
| EP0780397A2 (de) | Neue 17alpha-Cyanomethylestra-4,9-dien-derivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende pharmazeutische Zusammensetzungen | |
| JPS6157839B2 (cs) |