CZ20033067A3

CZ20033067A3 - 4-amino-5-fenyl-7-cyklobutylpyrrolo[2,3-D]pyrimidinové deriváty, způsob jejich výroby a farmaceutické prostředky, které je obsahují

Info

Publication number: CZ20033067A3
Application number: CZ20033067A
Authority: CZ
Inventors: Hans-Georg Capraro; Pascal Furet; Carlos Garcia-Echeverria; Paul William Manley
Original assignee: Novartis Ag
Priority date: 2001-05-14
Filing date: 2002-05-13
Publication date: 2004-02-18
Also published as: KR20030096386A; JP2004533454A; HUP0304082A3; DE60207241T2; AR035885A1; JP4099399B2; EP1390369A1; CN1264844C; BR0209658A; IL158697A0; RU2305682C2; US20040180911A1; CO5540346A2; AU2002312905B2; KR100583704B1; NZ529256A; DE60207241D1; WO2002092599A1; MXPA03010402A; TWI238824B

Description

OBLAST TECHNIKY z**⁹? 'Rovy.

Vynález se týká nových derivátů 4-amino-5-fenyl-7cyklobutyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidinu, způsobu jejich přípravy, jejich aplikace pro léčení lidí nebo živočichů, jejich použití - buď samostatně nebo v kombinaci jednou nebo více farmaceuticky aktivními sloučeninami - pro léčení nemocí, zejména proliferativních onemocnění, jako jsou nádorová onemocnění, způsobu léčení těchto onemocnění u savců, zejména u lidí a použití těchto sloučenin - buď samotných nebo v kombinaci s jednou nebo více farmaceuticky aktivními sloučeninami - pro přípravu farmaceutických prostředků (léčiv) pro léčení zejména prolif.erativních onemocnění, jako jsou nádory.

DOSAVADNÍ STAV TECHNIKY

Spis WO 98/41525, publikovaný 27. září 1998, nárokuje substituované deriváty 4-amino-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidinu, které mají terapeutický účinek jako inhibitory proteinu tyrozin kinázy.

PODSTATA VYNÁLEZU

S překvapením bylo nyní nalezeno, že sloučeniny obecného vzorce I, popsané níže, jsou účinnými inhibitory aktivity tyrozin kinázy, inzulínu podobného I receptoru růstového faktoru (IGF-IR) a inhibují buněčnou proliferaci závislou na IGF-IR. Přítomnost substituentů, s výhodou benzyloxy substituentů v poloze 3 fenylové skupiny skeletu 4-amino-5-fenyl-72 cyklobutyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidinu, spolu s přítomností substituentu R₂, jak je definovaný níže, jsou rozhodující pro účinnost a/nebo specificitu sloučenin podle vynálezu jako inhibitory IGF-IR tyrozin kinázy a jejich schopnosti a/nebo selektivitě inhibovat buněčnou proliferaci závislou na IGF-IR.

Sloučeniny obecného vzorce I dovolují, například, neočekávaný terapeutický přístup, zejména pro léčení onemocnění a také pro prevenci onemocnění, při kterých inhibice IGFIR tyrozin kinázy a/nebo na IGF-IR závislé proliferaci má příznivý účinek. Tato onemocnění, včetně proliferativních onemocnění, jako jsou nádory, například nádory prsu, ledvin, prostaty, konečníku, štítné žlázy, vaječníku, pankreasu, neuronální, plicní nádory, nádory dělohy, a gastrointestinální nádory, jakož i kostní sarkomy a melanomy.

Vynález se týká sloučenin obecného vzorce I

ve kterém n je od 0 do 4,

Ri je atom vodíku, nesubstituované nebo substituovaná nižší alkylová skupina nebo atom halogenu,

R₂ je nižší alkylová skupina substituovaná hydroxylovou skupinou, nesubstituovanou, mono- nebo di-substituovanou aminoskupinóu nebo heterocyklickým zbytkem; zbytek R₅(C=Y)-Z-, kde R₅ je nesubstituované nebo substituovaná nižší alkylová skupina, mono- nebo di-substituovaná aminoskupina, heterocyklický zbytek, nebo volná nebo • · · · etherifikovaná hydroxylová skupina, Y je atom kyslíku, síry nebo iminoskupina, a substituent Z buď není přítomen, nebo je nižší alkylová skupina nebo amino- nižší alkylová skupina; nebo zbytek R₆-sulfonylamino- nižší alkylová skupina, kde R₆ je nesubstituovaná nebo substituovaná nižší alkylová skupina, mono- nebo di-substituovaná aminoskupina nebo fenylová skupina případně substituovaná nižší alkylovou skupinou, nižší alkoxylovou skupinou nebo nitroskupinou, s tou výhradou, že R₂ není karboxylová skupina, nižší alkoxykarbonylová skupina nebo nižší alkylová skupina substituovaná hydroxylovou skupinou, jestliže n je 0, Ri je atom vodíku, R₄ je benzylová skupina a X je atom kyslíku,

R₃ je nižší alkylová skupina, hydroxylovou skupinou, aminoskupinou nebo atomem halogenu substituovaná nižší alkylová skupina, hydroxylová skupina, kyanoskupina, nižší alkoxylová skupina, nižší alkanoylová skupina, nižší alkanoyloxy-skupina, aminoskupina, mono- nebo di- nižší alkylaminoskupina, nižší alkanoylaminoskupina, karboxylová skupina, nižší alkoxykarbonylová skupina nebo atom halogenu, kde R₃ substituenty mohou být nezávisle na sobě vybrány jestliže n > 1,

R₄ je zbytek R₇-CR₈(R₉)-, kde R₇ je cyklobutylová skupina, cyklopentylová skupina, cyklohexylová skupina, fenylová skupina, furylová skupina, pyrrolylová skupina, thienylová skupina nebo pyridylová skupina, tyto R₇ substitutenty jsou případně substituovány jedním nebo více zbytky vybranými z nižší alkylových skupin nebo atomů halogenu a R₈ a R₉ jsou nezávisle na sobě vybrané z atomů halogenu, nižších alkylových skupin nebo atomů halogenu a

X je vybrané ze skupiny zahrnující atom kyslíku, iminoskupinu a atom síry, nebo jejich solí.

Obecné výrazy zde a následně použité mají v souvislosti s nároky následující významy, pokud není uvedeno jinak:

Tam, kde jsou zmíněny sloučeniny obecného vzorce I, pak to znamená, že také zahrnují tautomery a N-oxidy sloučenin obecného vzorce I.

Tam, kde se používá množné číslo pro sloučeniny, sole a podobně, pak to zároveň znamená jednotlivé sloučeniny, sole a podobně.

Asymetrické atomy uhlíku sloučenin obecného vzorce I, které se mohou případně vyskytovat v (R) , (S) nebo (R,S) konfiguraci, jsou s výhodou v (R) nebo (S) konfiguraci. Substituenty na dvojné vazbě nebo na kruhu se mohou vyskytovat v cis- (=Z-) nebo trans (=E—) formě. Sloučeniny mohou tak být přítomny jako směsi isomerů nebo jako čisté isomery, s výhodou jako enantiomerně čisté diastereomery.

Označení nižší' znamená zbytek obsahující až maximálně 7, zejména včetně až do maximálně 4 atomů uhlíku, přičemž tyto mohou být buď nerozvětvené nebo jednonásobně nebo vícenásobně rozvětvené.

Nižšími alkylovými skupinami jsou například, methylová skupina, ethylová skupina, n-propylová skupina, isopropylová skupina, n-butylová skupina, isobutylová skupina, sek-butylová skupina, terc-butylová skupina, n-pentylová skupina, isopentylová skupina, neopentylová skupina, n-hexylová skupina nebo n-heptylová skupina.

• · ····

Nižší alkylenová skupina je, například, methylenová skupina (-CH₂-) , ethylenová skupina (-CH₂-CH₂-) , propylenová skupina (-CH₂-CH₂-CH₂-) nebo tetramethylenová skupina (-CH₂CH₂-CH₂-CH₂-) .

Alkylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku nebo alkylové skupiny s 1 až 5 atomy uhlíku jsou buď nerozvětvené nebo rozvětvené (s jedním nebo více rozvětveními) alkylové skupiny s 1 až 6 nebo s 1 až 5 atomy uhlíku, respektive, a zahrnují methylovou skupinu, ethylovou skupinu, n-propylovou skupinu, 2-propylovou skupinu, n-butylovou skupinu, sek-butylovou skupinu, terc-butylovou skupinu a podobně.

V substituentu R₂, kterým je nižší alkylová skupina substituovaná nesubstituovanou, mono- nebo di-substituovanou aminoskupinou nebo substituovaná heterocyklickým zbytkem, je nižší alkylovou skupinou s výhodou methylová skupina.

Nižší alkylová skupina R₅ je s výhodou methylová skupina, isopropylová skupina nebo terc-butylová skupina.

Amino- nižší alkylová skupina Z je s výhodou aminomethylová skupina.

V substituentu Rg-sulfonylamino- nižší alkylové skupině, je nižší alkylová skupina s výhodou methylová skupina.

Nižší alkylová skupina R₆ je s výhodou methylová skupina, ethylová skupina nebo isopropylová skupina.

Nižší alkylová skupina substituovaná nižší alkylovou

skupinou, jak je definováno výše, kde může být přítomno jeden nebo více substituentů, je s výhodou jedním substituentem, aminoskupina, N-nižší alkylaminoskupina, N,N-di-nižší alkylaminoskupina, N-nižší alkanoylaminoskupina, N,N-di-nižší alkanoylaminoskupina, hydroxylová skupina, nižší alkoxylová skupina, nižší alkoxy- nižší alkoxylová skupina, nižší alkanoylskupina, nižší alkanoyloxyskupina, kyanoskupina, nitroskupina, karboxylové skupina, nižší alkoxykarbonylová skupina, karbamoylová skupina, amidinoskupina, guanidinoskupina, ureidoskupina, merkaptoskupina, nižší alkylthioskupina, atom halogenu nebo heterocyklický zbytek.

Substituovanou nižší alkylovou skupinou R₅ je s výhodou nižší alkylová skupina substituovaná nižší alkoxylovou skupinou, nižší alkoxy- nižší alkoxylovou skupinou nebo s výhodou heterocyklickým zbytkem.

Atomem halogenu je především atom fluoru, atom chloru, atom bromu, nebo atom jodu, zejména atom fluoru atom chloru, nebo atom bromu.

Mono- nebo di- substituovaná aminoskupina, je aminoskupina substituovaná jedním nebo dvěma substituenty vybranými na sobě nezávisle z, například, nesubstituované nižší alkylové skupiny; fenylové skupiny nebo fenyl nižší alkylové skupiny, kde fenylový zbytek je případně substituován například nesubstituovanou nebo substituovanou nižší alkylovou skupinou, aminoskupinou, N-nižší alkylaminoskupinou, N,N-di-nižší alkylaminoskupinou, N-nižší alkanoylaminoskupinou, N,N-dinižší alkanoylaminoskupinou, hydroxylovou skupinou, nižší alkoxylovou skupinou, nižší alkoxy- nižší alkoxylovou ·· ···· skupinou, nižší alkanoylovou skupinou, nižší alkanoyloxyskupinou, kyanoskupinou, nitroskupinou, karboxylovou skupinou, nižší alkoxykarbonylovou skupinou, karbamoylovou skupinou, amidinoskupinou, guanidinoskupinou, ureidoskupinou, merkaptoskupinou, nižší alkylthioskupinou nebo atomem halogenu; adamantanylovou skupinou; a heterocyklickým zbytkem.

V substituentu R₂, kterým je nižším alkylem substituovaná mono- nebo di- substituovaná aminoskupina, je tato s výhodou reprezentovaná N-nižší alkylaminoskupinou nebo N,N-di-nižší alkylaminoskupinou respektive.

Mono- nebo di- substituovaná aminoskupina R₅ je s výhodou N-nižší alkylaminoskupina nebo N,N-di-nižší alkylaminoskupina, respektive, kde nižší alkylová část je případně substituována fenylovou skupinou, nižší alkylfenylovou skupinou, nižší alkoxyfenylovou skupinou, morfolinylovou skupinou nebo N,N-di-nižší alkylaminoskupinou.

Mono- nebo di- substituovaná aminoskupina Rg je s výhodou N,N-di-nižší alkylaminoskupina.

Heterocyklický zbytek obsahuje zejména až do 20 atomů uhlíku a je s výhodou nasycený nebo nenasycený monocyklický zbytek obsahující od 4 do 8 členů v kruhu a od 1 do 3 heteroatomů, které jsou s výhodou vybrané z atomu dusíku, atomu kyslíku a atomu síry nebo bi- nebo tri- cyklické zbytky, ve kterých, například, jeden nebo dva benzenové zbytky jsou anelovány (připojeny) na uvedený monocyklický zbytek. Výhodné jsou především heterocyklické zbytky obsahující alespoň jeden atom dusíku, přičemž vazba na heterocyklický zbytek molekuly obecného vzorce I je přes atom dusíku v kruhu. Heterocyklický

zbytek je s výhodou substituován jedním nebo více zbytky, jako jako jsou například nesubstituované nebo substituované nižší alkylové skupiny, aminoskupiny, N-nižší alkylaminoskupiny, N,N-di-nižší alkylaminoskupiny, N-nižší alkanoylaminoskupiny, N,N-di-nižší alkanoylaminoskupiny, hydroxyskupiny, nižší alkoxyskupiny, nižší alkoxy- nižší alkoxylové skupiny, nižší alkanoylskupiny, nižší alkanoyloxyskupiny, kyanoskupiny, nitroskupiny, karboxylové skupiny, nižší alkoxykarbonylové skupiny, karbamoylové skupiny, amidinoskupiny, guanidinoskupiny, ureidoskupiny, merkaptoskupiny, nižší alkylthioskupiny, atomy halogenu, fenylové skupiny nebo pyridylové skupiny.

Výhodnými heterocyklickými zbytky jsou azetidinylová skupina, pyrrolidinylová skupina, piperidylová skupina, azepanylová skupina, piperazinylová skupina, tetrahydropyranylová skupina, morfolinylová skupina nebo thiomorfolinylová skupina, kde tyto zbytky jsou případně substituované jedním nebo více, s výhodou jedním nebo dvěma zbytky vybranými na sobě nezávisle ze skupiny zahrnující nižší alkylovou skupinu, hydroxy-nižší alkylovou skupinu, volnou nebo etherifikovanou hydroxylovou skupinu, nižší alkoxykarbonylovou skupinu, karbamoylskupinu, fenylovou skupinu a pyridylovou skupinu a vazba heterocyklického zbytku na zbytek molekuly obecného vzorce I je přes atom dusíku.

Jestliže R₂ je nižší alkylová skupina substituovaná heterocyklickým zbytkem, pak heterocyklický zbytek je s výhodou azetidinylovou skupinou, pyrrolidinylovou skupinou, di-nižší alkyl-pyrrolidinylovou skupinou, aminokarbonylpyrrolidinylovou skupinou, piperidylovou skupinou, hydroxy• · · · · ·

piperidylovou skupinou, aminokarbonyl-piperidylovou skupinou, azepanylovou skupinou, nižší alkyl-piperazinylovou skupinou, nižší alkoxykarbonyl-piperazinylovou skupinou, fenyl-piperazinylovou skupinou, pyridyl-piperazinylovou skupinou, morfolinylovou skupinou, di-nižší alkylmorfolinylovou skupinou nebo thiomorfolinylovou skupinou.

- Jestliže R₅ je nižší alkylová skupina substituovaná heterocyklickým zbytkem, pak heterocyklický zbytek je s výhodou piperidylová skupina nižší alkyl-piperazinylová skupina nebo morfolinylová skupina.

Heterocyklický zbytek R₅ je s výhodou pyrrolidinylová skupina, piperidylová skupina, nižší alkyl-piperazinylová skupina nebo morfolinylová skupina.

Etherifikovanou hydroxylovou skupinou je, například, alkoxylová skupina, zejména nižší alkoxylová skupina. Nižší alkylová část nižšího alkoxylu je případně substituovaná jedním nebo více, s výhodou jedním zbytkem, jako je aminoskupina, N-nižší alkylaminoskupina, N,N-di-nižší alkylaminoskupina, N-nižší alkanoylaminoskupina, N,N-di-nižší alkanoylaminoskupina, hydroxylová skupina, nižší alkoxylová skupina, nižší alkoxy- nižší alkoxylová skupina, nižší alkanoylová skupina, nižší alkanoyloxylová skupina, kyanoskupina, nitroskupina, karboxylové skupina, nižší alkoxykarbonylová skupina, karbamoylová skupina, amidinoskupina, guanidínoskupina, ureidoskupina, merkaptoskupina, nižší alkylthioskupina, atom halogenu nebo heterocyklický zbytek.

·· ···

Etherifikovanou hydroxylovou skupinou R5 je s výhodou nižší alkoxylová skupina, kde nižší alkylová část je případně substituovaná nižší alkoxylovou skupinou, N,N-di-nižší alkylaminoskupinou, nižší alkyl-piperazinylovou skupinou nebo morfolinylovou skupinou.

n je s výhodou 0.

Ri s výhodou representuje atom vodíku, nižší alkylovou skupinu nebo atom halogenu, nejlépe atom vodíku nebo nižší alkylovou skupinu.

R,4 je s výhodou benzylová skupina.

X je s výhodou atom kyslíku.

Y je s výhodou atom kyslíku.

Solemi jsou zejména farmaceuticky použitelné sole sloučenin obecného vzorce I (nebo jejich N-oxidů).

Tyto sole se tvoří, například, jako adiční sole s kyselinou, s výhodou s organickou nebo anorganickou kyselinou ze sloučenin obecného vzorce I (nebo jejich Noxidů) s bazickým atomem dusíku, zejména farmaceuticky použitelné sole.

V přítomnosti negativně nabitých zbytků, jako jsou karboxylové skupina nebo sulfoskupina, mohou se sole také vytvářet s bázemi, například, sole s kovy nebo amonné sole,

A ·

9909 jako jsou sole s alkalickými kovy nebo sole s kovy alkalických zemin, nebo amonné sole s amoniakem nebo vhodnými organickými aminy, jako jsou terciární monoaminy.

V přítomnosti bazické skupiny a kyselé skupiny ve stejné molekule, sloučenina obecného vzorce I (nebo její N-oxid) může také tvořit vnitřní sole.

Pro účely izolace nebo čištění je také možné použít farmaceuticky nepoužitelné sole, například pikráty nebo perchloráty. Pouze farmaceuticky použitelné sole nebo volné sloučeniny (jestliže tento případ nastane ve formě farmaceutických prostředků) dosahují terapeutické použití a tyto jsou proto preferovány.

Vzhledem k blízkému vztahu mezi novými sloučeninami ve volné formě a jejich solemi, včetně těch solí, které se mohou použít jako meziprodukty, například při čištění nebo identifikaci nových sloučenin, pak jakýkoli dříve nebo dále uvedený odkaz na volné sloučeniny se rozumí jako odkaz na odpovídající příslušné sole, podle toho jak je to vhodné.

Sloučeniny obecného vzorce I mají cenné farmakologické vlatnosti, jak již bylo popsáno výše a bude popsáno dále.

Účinek sloučenin podle vynálezu jako inhibitorů účinku IGF-IR tyrozin kinázy je možno prokázat použitím buněčného testu Capture ELISA. Při tomto testu se stanoví účinek sloučenin podle vynálezu proti Inzulínu podobného růstového faktoru I (IGF-I) indukovaného autofosforylací IGF-IR. Test se provádí následujícím způsobem:

% ·· · • · ·· ···* • · · · · \ ···« · ··· ··· ·· ·

Pro test se použiji NIH-3T3 myší fibroblasty transfekované s lidskou IGF-IR cDNA (úplná lidská IGF-IR cDNA : GenBank Acc. No. ΝΜ-Ό00875) , připravenou jak je popsáno v Kato aj., J. Biol. Chem. 268, 2655-61, 1993. Buňky, které přeexprimují lidskou IGF-IR se kultivují v Dulbecco minimálním základním (DMEM) mediu, obsahujícím 10 % fetální telecí sérum (FCS) . Pro test se v den 1 umístí 5.000 buněk/jamka na 96 jamkové desky (Costarftnum 3595) v normálním růstovém mediu a inkubují se 2 dny při 37° C v standardním CO₂ buněčném inkubátoru.

Hustota buněk nepřesáhne 3 den 70-80 %. V den 3 se medium vyleje a buňky se inkubují 24 hodin v minimálním mediu (DMEM, obsahujícím 0,5 % FCS). Sloučeniny obecného vzorce I [počínaje od 10 mM dimethyl sulfoxidových (DMSO) zásobních roztoků] se přidávají tak, aby se získaly konečné koncentrace 0,01, 0,03, 0,1, 0,3, 1, 3 a 10 μΜ a stanovila se tak IC50 hodnota. Buňky se inkubují 90 minut v přítomnosti sloučeniny obecného vzorce I. Pak se buňky stimulují 50 μΐ IGF-I (konečná koncentrace IGF-I v jamce =. 10 ng/ml; IGF-I je produktem Sigma; Produkt Code: I 3769) a inkubuje se 10 minut při 37°C.

Medium se vyleje a buňky se dvakrát promyjí PBS/O (=fosfátem pufrovaný solný roztok prostý CaCl₂) a lyžují se 15 minut na ledu s, 50 μΐ/jamku RIPA-pufru [50 mM Tris*HCl, pH=7,2, 120 mM NaCl, 1 mM EDTA, 6 mM EGTA, 1% NP-40, 20 mM NaF, 1 mM benzamidinu, 15 mM pyrofosfátu sodného, 1 mM fenyl methyl-sulfonyl fluoridu (PMSF) a 0,5 mM Na₃VO₄] a použitím 96 jamkové desky se 10 minut třepou (= buněčné extrakty).

Černé desky Packard HTRF-96 se potáhnou 50 μΐ IGF-IR monoklonálních protilátek (mAB) (Santa Cruz; kat. No.: SC-462)

	99 9 • · · • · Φ • 99 9 9	• 9 9 9 9 9 99 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9
13	99 9 9 ·	999 999 9 9
v koncentraci 5 μg/ml při 4°C přes	noc. Desky	se promyjí
dvakrát 0,05% (obj/obj) Tweenem-20	v fosfátem	pufrovaným

solným roztokem (PBS) a jednou nanočistou H₂0. Blokování se provádí 2 hodiny při teplotě místnosti s 3% Albuminem z hovězího séra (BSA) v TBS-T pufru (20 mM Tris*HCl, pH=7, 6,137 mM NaCl, 0,05 % Tweenu 20). Po blokováni se desky promyjí nanočistou H₂O.

Buněčné extrakty (40 μΐ/jamka) se pipetují do předem povlečených desek Packard, spolu s 40 μΐ anti-fosfotyrosinovou myší mAB PY-20 konjugovanou s alkalickou fosfatázou (AP) (1: 1000 zředěnou v RIPA pufru; protilátka byla získána od Transduction Labs; kat.No.: P11120).

Po inkubaci extraktů a sekundárních protilátek 2 hodiny při 4° C, se extrakty vyhodí, desky se dvakrát promyjí 0,05% obj/obj) Tweenem-20 v PBS a jednou nanočistou vodou. Pak se přidá 90 μΐ/jamka AP substrátu (CDP-Star; získané od Tropix; kat. No.: MS100RY) a desky se inkubují 45 minut při teplotě místnosti v temnu, načež se měří AP aktivita v Packard Top Cóunt Microplate Scintillation Counter. Hodnoty IC₅₀ pro sloučeniny obecného vzorce I se vypočítávají lineární regresní analýzou použitím the GraphPad Instat programu (GraphPad Software, USA). Byly nalezeny IC₅₀ hodnoty v rozmezí od 5 nM do 1 μΜ, zejména v rozmezí od 5 nM do 300 nM.

Aktivita in vivo u holých myší xenotransplant model: samice BALB/c. Holé myši (stáří 8-12 týdnů, Novartis Animal Farm, Sisseln, Switzerland) se udržují za sterilních podmínek a s dosahem vody a potravy ad libitum. Nádory se zavádějí podkožní injekcí nádorových buněk (lidská epithetálí buněčná linie A-431; American Type Culture Collection (ATCC), »9» ·

Rockville, MD, USA, katalog No. ATCC CRL 1555; buněčná linie od 85 let staré ženy; buněčná linie epidermoid karcinoma) do myši jako nosiče. Vzniklé nádory prošly před začátkem léčení třemi následnými transplantacemi. Nádorové fragmenty (asi 25 mg) se implantují podkožně do levé tlapky zvířete použitím trokar jehly kalibru 13, pod Forene® anestetikem (Abbott, Švýcarsko) . Ošetření testovanou sloučeninou započne ihned jakmile nádor dosáhne průměrný objem 100 mm³. Růst nádoru se měří dvakrát až třikrát za týden a 24 hodin po posledním ošetření stanovením rozměrů ve dvou perpendikulárních osách. Objem nádoru se vypočítává podle publikovaných metod (viz (Evans aj., Brit. J. Cancer 45,466-8,1982). Protinádorová účinnost se stanoví jako průměr zvýšení objemu nádoru ošetřených zvířat dělený průměrným zvětšením objemu nádorů neošetřených zvířat (kontrolních) a po násobení 100, se vyjadřuje jako T/C %. Regrese nádorů (uvedená v %) se uvádí jako nejmenší průměrný nádorový objem ve vztahu k průměrnému nádorovému objemu před startem ošetření. Testovaná sloučenina se aplikuje v denních dávkách.

Jako alternativa k buněčné linii A-431, se mohou také stejným způsobem použít jiné buněčné linie, například: buněčná linie MCF-7 prsního adenokarcinomu (AT.CC No. HTB 22; viz také J. Nati. Cancer Inst. (Bethesda) 51, 1409-16,1973); a buněčná linie DU145 karcinomu prostaty DU 145 (ATCC No. HTB 81; viz také Cancer Res. 37,4049-58,1978).

Na podkladě těchto studií sloučeniny vzorce I podle tohoto vynálezu vykazují terapeutickou účinnost zejména proti proliferativním onemocněním, které jsou citlivé na inhibici IGF-IR tyrozin kinázy.

• · ·· · ·

Obecně se vynález také týká použití sloučenin obecného vzorce I pro inhibici IGF-IR tyrozin kinázy.

Kromě inhibice IGF-IR tyrozin kinázy, sloučeniny obecného vzorce I také inhibují aktivitu tyrozin kinázy receptorů tyrozin kinázy Flt-3. Sloučeniny obecného vzorce I jsou proto také užitečné pro léčení proliferativních onemocnění, zejména nádorových onemocnění, citlivých na inhibici receptorů Flt-3 tyrozin kinázy. Tato nádorová onemocnění zahrnují, například, leukemie a myelodysplastický syndrom. Odchylná exprese Flt-3 genu byla dokumentována jak u dospělých tak dětských leukémií včetně akutní myeloidní leukémií (AML), AML s trilineage myelodysplasie (AML/TMDS), akutní lymphoblastické leukemie (ALL), a myelodysplastického syndromu (MDS). Sloučeniny obecného vzorce I jsou proto vhodné pro léčení těchto onemocnění, zejména pro léčení AML protože aktivace mutace Flt-3 receptorů byla nalezena u asi 35% pacientů s AML a je spojena se špatnou prognózou.

Flt-3 inhibiční aktivitu sloučenin obecného vzorce I je možno prokázat inhibičním testem tyrozin kinázy použitím domény cytoplasmické kinázy Flt-3. Test se provádí následujícím způsobem: Nosič dárce baculoviru pFbacGOl (GIBCO) se použije pro vytvoření rekombinantního baculoviru, který exprimuje oblast aminokyselin 563-993 domény intracytoplasmické kinázy lidské Flt-3. Zakódovaná sekvence pro cytoplasmickou doménu Flt-3 je rozvedena v PCR z lidských cDNA knihoven (Clontech). Rozvedené DNA fragmenty a pFbacGOl vektoru jsou kompatibilní pro vazbu spojením s BamHl a HindlII. Spojení těchto DNA fragmentů vede k donorovému plasmidu bakuloviru Flt-3 (1.1). Produkce virů, exprese • · ·

proteinů v Sf9 buňkách a čištění GST-kombinovaných proteinů se provádí následujícím způsobem:

Produkce viru : Transportní vektor (pFbacG01-Flt-3) obsahující Flt-3 doménu kinázy se transfekuje do DHlOBac buněčné linie (GIBCO) a buňky se nanesou na selektivní agarové desky. Kolonie bez připojení splynuté sekvence do genomu viru (přenášené bakterií) jsou modré. Jednotlivé bílé kolonie se vyjmou a virová DNA (bacmid) se izoluje z bakterie standardními postupy pro čištění plasmidů. Sf9 nebo Sf21 buňky (American Type Culture Collection) se pak transfekují v 25 cm²baňkách s virovou DNA použitím reakčního činidla Cellfectin. Stanovení proteinové exprese v malém rozsahu v Sf9 buňkách: Media obsahující virus se jímají z transfekční buněčné kultury a použijí pro infekci pro zvýšení jeho titru. Media obsahující virus po dvou kolech infekce se použijí pro expresi proteinu ve velkém měřítku. Pro expresi proteinu ve velkém se 100 cm²kulaté desky pro tkáňové kultury naočkují 5 x 10⁷ buněk/desku a infikují se 1 ml media obsahujícího virus (asi 5 MOI). Po 3 dnech se buňky seškrábou z desky a centrifugují se při 500 otáčkách za minutu po dobu 5 minut. Buněčné peletky z 10 až 20 100 cm² desek se resuspendují v 50 ml ledově chladného pufru pro lýzi (25 mM Tris HCI, pH 7,5, 2 mM EDTA, 1% NP-40, 1 mM DTT, 1 mM PMSF) . Buňky se míchají 15 minut v ledu a pak se centrifugují 20 minut při 5000 otáčkách za minutu.

Čištění GST-označených proteinů : Lyzát centrifugovaných buněk se nanese na 2 ml kolonu glutathion-sefarosa (Pharmacia) a třikrát se promyje 10 ml 25 mM Tris-HCI, pH 7,5, 2 mM EDTA, 1 mM DTT, 200 mM NaCl. GST-označený protein se pak eluuje 10 dávkami (každou 1 ml) 25 mM Tris-HCI, pH 7,5, 10 mM redukovaného glutathionu, 100 mM NaCl, 1 mM DTT, 10 % Glycerol a skladuje se při -70° C.

Měření enzymatické aktivity: Testy tyrozin proteinové kinázy s vyčištěnou GST-Flt-3 se provádějí v konečném objemu 30 μΐ obsahujícím 200-1800 ng enzymového proteinu (v závislosti na specifické aktivitě), 20 mM Tris-HCl, pH 7,6, 3 mM MnC12, 3 mM MgCl2, 1 mM DTT, 10 μΜ Na₃V0₄, 3μς/τη1 póly (Glu, Tyr) 4:1, 1 %

DMSO, 8,0 μΜ ATP a 0,1 μθί [γ³³ P] ATP. Aktivita se stanoví, v přítomnosti nebo v nepřítomnosti inhibitorů, měřením inkorporace ³³P z [γ³³Ρ] ATP do póly (Glu, Tyr) substrátu. Test (30 μΐ) se provádí 96-jamkových deskách při teplotě místnosti, po dobu 20 minut za podmínek popsaných níže a ukončí se přidáním 20 μΐ 125 mM EDTA. Pak se 40 μΐ reakční směsi přenese na Immobilon-PVDF membránu (Millipore, Bedford, MA, USA) předem namočené 5 minut do methanolu, promyje se vodou a pak se na 5 minut namočí do 0,5 % H₃PO₄ a připojí se na vakuové potrubí s vzájemně nesouvisejícími zdroji vakua. Po umístění všech vzorků, připojí se vakuum a každá jamka se promyje 200 μΐ 0,5 % H₃P0₄. Membrány se odpojí a promyj i 4 x na třepačce 1,0 % H₃PO₄ a jednou ethanolem. Membrány se měří po vysušení při teplotě místnosti připojením na Packard Top Count 96jamkový rám po přidání 10 μΐ/jamku Microscint TM (Packard). ICSO hodnoty se vypočítávají lineární regresní analýzou procentní inhibice každé sloučeniny měřené v duplikátu při čtyřech koncentracích (obvykle 0,01, 0,1, 1 a 10, μΜ) . Jedna jednotka aktivity protein kinázy je definována jako 1 nmol ³³P ATP přenesené z [γ³³Ρ] ATP na proteinový substrát za minutu na mg proteinu při teplotě 37° C.

Kromě onemocnění uvedených výše se sloučeniny obecného vzorce I mohou dále použít pro léčení obezity a také jsou vhodné pro léčení ischemické retinopatie, jako je, například diabetická retinopatie a retinopatie předčasné zralosti (ROP).

Účinek sloučenin obecného vzorce I u těchto nemocí je možno prokázat použitím in vitro testů nebo in vivo testů známých z literatury.

Sloučeniny obecného vzorce I jsou také použitelné pro prevenci nebo pro boj s onemocněními spojenými s transplantacemi, například, allo- nebo xeno-transplantačními vaskulopatiemi, jako je transplantační atheroskleróza nebo chronické odmítání štěpů, například při transplantaci orgánů tkání nebo buněk, například srdce, plic, kombinace srdce a plic, jater, ledvin nebo pankreasu (pankreatických buněčných ostrůvků), nebo pro prevenci nebo pro léčení stenózy štěpů žil, restenózy a/nebo vaskulární okluze po vaskulárním úrazu, například způsobeném katetrizačními postupy nebo vaskulárními postupy odstraňování, jako jsou perkutální transluminální angioplastie, ošetření laserem nebo jiné invazivní postupy, které poruší integritu vnitřní vrstvy cévní stěny nebo endothelu.

Skupiny preferovaných sloučenin obecného vzorce I uvedených níže, obecné definice substituentů z obecných definicí uvedených výše se mohou racionálně použít, například, pro nahrazení daleko obecných definicí za specifické definice nebo zejména za definice, které jsou charakterizovány jako výhodné.

Výhodné jsou sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých: n je od 0 do 4,

• ·· · • ·

R₂ je nižší alkylová skupina substituovaná hydroxylovou skupinou, nesubstituovanou, mono- nebo di- substituovanou aminoskupinou, heterocyklickým zbytkem; zbytek R₅-(C=Y)-Zkde R5 je nesubstituované nebo substituovaná nižší alkylová skupina, nesubstituované, mono- nebo disubstituovaná aminoskupina, heterocyklický zbytek, nebo volná nebo étherifikovaná hydroxylová skupina, Y je atom kyslíku, atom síry nebo iminoskupina, a Z buď není přítomno, nebo je nižší alkylová skupina nebo amino- nižší alkylová skupina; nebo zbytek R₆-sulfonylamino- nižší alkylová skupina, kde Rg je nesubstituované nebo substituovaná. nižší alkylová skupina, nesubstituované, mono- nebo di- substituovaná aminoskupina nebo fenylová skupina případně substituovaná nižší alkylovou skupinou, nižší alkoxylovou skupinou nebo nitroskupinou, s tou výhradou, že R₂ není karboxylová skupina, nižší alkoxykarbonylová skupina nebo nižší alkylová skupina substituovaná hydroxylovou skupinou, jestliže n je 0, Ri je atom vodíku, R₄ je benzylová skupina a X je atom kyslíku,

R3 je nižší alkylová skupina nebo nižší alkoxylová skupina, kde R₃ substituenty mohou být vybrány na sobě nezávisle jestliže n > 1,

R₄ je zbytek Rr-CRsíRg)-, kde R₇ je cyklobutylová skupina, cyklopentylová skupina, cyklohexylová skupina, fenylová skupina, furylová skupina, pyrrolylová skupina, thienylová skupina, pyridylová skupina nebo fenylová skupina substituovaná jedním nebo více šubstitutenty vybranými ze skupiny zahrnující nižší alkylové skupiny a atomy halogenu a Rs a Rg jsou na sobě nezávisle atomy vodíku, nižší alkylové skupiny nebo atomy halogenu a • · · ·

X je vybrané ze skupiny zahrnující atom kyslíku, iminoskupinu, atom síry, nebo jejich sole.

Specielně výhodnými sloučeninami jsou sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých n j e 0,

R₂ je nižší alkylová skupina substituovaná nesubstituovanou nebo mono- nebo di- substituovanou aminoskupinou nebo heterocyklickým zbytkem; zbytek R₅-(C=Y)-Z-, kde R₅ je nesubstituované nebo substituovaná nižší alkylová skupina, nesubstituované, mono- nebo di- substituovaná aminoskupina, heterocyklický zbytek, nebo jestliže je přítomen substituent Z, je také volná nebo etherifikovaná hydroxylová skupina, Y je atom kyslíku, atom síry nebo iminoskupina a pokud Z není přítomné, nižší alkylová skupina nebo amino- nižší alkylová skupina; nebo zbytek R₆sulfonylamino- nižší alkylová skupina, kde R₆ je nesubstituované nebo substituovaná nižší alkylová skupina, nesubstituované, mono- nebo di- substituovaná aminoskupina nebo fenylová skupina případně substituovaná nižší alkylovou skupinou, nižší alkoxylovou skupinou nebo nitroskupinou,

R₄ je benzylová skupina, a ’

X je vybrané ze skupiny zahrnující atom kyslíku, iminoskupinu a atom síry, nebo jejich sole.

Specielně výhodné jsou dále sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých

n je O,

R₂ je nižší alkylová skupina substituovaná substituovaným heterocyklickým zbytkem; zbytek R₅-(C=Y)-Z-, ve kterém R₅ je nesubstituované nebo substituovaná nižší alkylová skupina, nesubstituované, mono- nebo di- substituovaná aminoskupina, heterocyklický zbytek, nebo jestliže je přítomem substituent Z, také volná nebo etherifikovaná hydroxylová skupina, Y je atom kyslíku, atom síry nebo iminoskupina a pokud substituent Z není přítomen, nižší alkylová skupina nebo amino- nižší alkylová skupina, s tou výhradou, že pokud Z není přítomno nebo je nižší alkylová skupina, jestliže R₅ je nižší alkylová skupina a Z je nižší alkylová skupina nebo amino- nižší alkylová skupina, jestliže R₅ je mono- nebo di- substituovaná aminoskupina nebo heterocyklický zbytek; nebo zbytek R₆-sulfonylamino- nižší alkylové skupiny, ve které R₆ je nesubstituované nebo substituovaná nižší alkylová skupina, nesubstituované, mono- nebo di- substituovaná aminoskupina nebo fenylová skupina, případně substituovaná nižší alkylovou skupinou, nižší alkoxylovou skupinou nebo nitroskupinou,

R₄ je benzylová skupina, a

Výhodné jsou zejména ty sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém n je 0,

R₂ je nižší alkylová skupina substituovaná aminoskupinou, Nnižší alkylaminoskupinou, N,N-di- nižší alkylaminoskupinou nebo nesubstituovaným heterocyklickým zbytkem; nebo zbytek R₅-(C=Y)-Z-, ve kterém R₅ je nižší alkylová skupina, mononebo di- substituovaná aminoskupina nebo heterocyklický zbytek, Y je atom kyslíku, atom síry nebo iminoskupina, a Z je amino- nižší alkylová skupina jestliže R₅ je nižší alkylová skupina a Z není přítomné jestliže R5 je heterocyklický zbytek nebo mono- nebo di- substituovaná aminoskupina,

R₄ je benzylová skupina, a

X je vybrané ze skupiny zahrnující atom kyslíku iminoskupinu a atom síry, nebo jejich sole.

Zejména výhodné jsou dále sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém n je 0,

R_x je atom vodíku, nesubstituované nebo substituovaná nižší alkylová skupina nebo atom halogenu,

R₂ je nižší alkylová skupina substituovaná nesubstituovanou, mono- nebo di- substituovanou aminoskupinou nebo heterocyklickým zbytkem s 4 až 8 atomy v kruhu a od 1 do 3 heteroatomů, přičemž alespoň jeden heteroatom je atom dusíku a vazba heterocyklického zbytku na nižší alkylovou skupinu je přes atom dusíku v kruhu; zbytek R₅-(C=Y)-Z-, kde R₅ je nižší alkylová skupina, nesubstituované, mononebo di-substituovaná aminoskupina, a heterocyklický

zbytek s 4 až 8 členy v kruhu a od 1 do 3 heteroatomů, přičemž alespoň jeden heteroatom je atom dusíku a vazba heterocyklického zbytku je přes atom dusíku v kruhu, nižší alkylová skupina substituovaná uvedeným heterocyklickým zbytkem nebo jedním nebo více zbytky vybranými na sobě nezávisle ze skupiny zahrnující aminoskupinu, N-nižší alkylaminoskupinu, N,N-di- nižší alkylaminoskupinu, Nnižší alkanoylaminoskupinu, N,N-di- nižší alkanoylaminoskupinu, hydroxylovou skupinu, nižší alkoxylovou skupinu, nižší alkoxy- nižší alkoxylovou skupinu, nižší alkanoylovou skupinu, nižší alkanoyloxyskupinu, kyanoskupinu, nitroskupinu, karboxylovou skupinu, nižší alkoxykarbonylovou skupinu, karbamoylovou skupinu, amidinoskupinu, guanidinoskupinu, ureidoskupinu, merkaptoskupinu, nižší alkylthioskupinu a atom halogenu nebo jestliže je přítomen substituent Z, je také volná nebo etherifikovaná hydroxylová skupina, Y je atom kyslíku, atom síry nebo iminoskupina, a kdy Z není přítomno, nižší alkylová skupina nebo amino- nižší alkylová skupina; nebo zbytek R₆-sulfonylamino- nižší alkylová skupina, kde R₆ je nesubstítuované nebo substituovaná nižší alkylová skupina, nesubstítuované, mono- nebo di- substituovaná aminoskupina nebo fenylové skupina případně substituovaná nižší alkylovou skupinou, nižší alkoxylovou skupinou nebo nitroskupinou,

R₄ je benzylová skupina, a

X je vybrané ze skupiny zahrnující atom kyslíku, iminoskupinu a atom síry nebo jejich sole.

Zejména velmi preferovanými sloučeninami jsou sloučeniny • · ··· · obecného vzorce I, ve kterém n je 0,

Ri je atom vodíku,

R₂ je amino- nižší alkylová skupina, N-nižší alkylamino- nižší alkylová skupina, N,N-di- nižší alkylamino- nižší alkylová skupina, morfolinyl- nižší alkylová skupina, piperidylnižší alkylová skupina, pyrrolidinyl- nižší alkylová skupina, nižší alkyl-piperazinyl- nižší alkylová skupina, adamantanyl-amino- nižší alkylová skupina, hydroxypiperidyl- nižší alkylová skupina, azepanyl- nižší alkylová skupina, di-nižší alkyl-pyrrolidinyl- nižší alkylová skupina, azetidinyl- nižší alkylová skupina, aminokarbonylpiperidyl- nižší alkylová skupina, pyridyl-piperazinylnižší alkylová skupina, thiomorfolinyl- nižší alkylová skupina, di- nižší alkyl- morfolinyl- nižší alkylová skupina, aminokarbonyl-pyrrodinyl- nižší alkylová skupina, nižší alkoxykarbonyl-piperazinyl- nižší alkylová skupina nebo fenyl-piperazinyl- nižší alkylová skupina; zbytek R₅(C=Y)-Z-, ve které R₅ je nižší alkylová skupina, aminoskupina, N-nižší alkylaminoskupina, N,N-di- nižší alkylaminoskupina, N-(fenyl- nižší alkyl)- aminoskupina, N(nižší alkyl-fenyl- nižší alkyl)-aminoskupina, N-(nižší alkoxy-fenyl-nižší alkyl)-aminoskupina, N-(morfolinylnižší alkyl)-aminoskupina, N,N-di-nižší alkylamino- nižší alkylaminoskupina, pyrrolidinylová skupina, piperidylová skupina, morfolinylová skupina, nižší alkyl-piperazinylová skupina, piperidyl- nižší alkylová skupina, morfolinylnižší alkylová skupina, nižší alkyl-piperazinyl- nižší alkylová skupina, nižší alkoxylová skupina, nižší alkoxynižší alkoxylová skupina, nižší alkoxy- nižší alkylová skupina, nižší alkoxy- nižší alkoxy- nižší alkylová ···· • · · · · · · · · · © · · · · · · · ······ · · · · · · © · · ♦ ···· ···· © ··· ··· ·· ·· skupina, N,N-di-nižší alkylamino- nižší alkoxylová skupina, morfolinyl- nižší alkoxylová skupina nebo nižší alkylpiperazinyl- nižší alkoxylová skupina, Y je atom kyslíku nebo iminoskupina, a Z není přítomno nebo amino- nižší alkylová skupina; nebo zbytek R₆-sulfonylamino- nižší alkylová skupina, ve které R6 je nižší alkylová skupina, nižší alkyl-fenylová skupina, nižší alkoxy-fenylová skupina, nitrofenylová skupina nebo N,N-di- nižší alkylaminoskupina,

R₄ je benzylová skupina, a

X je atom kyslíku, nebo jejich sole.

Zejména výhodné jsou dále také sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých n je 0,

Ri je atom vodíku, nižší alkylová skupina nebo atom halogenu,

R₂ je zbytek vybraný ze skupiny zahrnující hydroxy- nižší alkylovou skupinu, karboxylovou skupinu, nižší alkoxykarbonylovou skupinu, amino- nižší alkylovou skupinu, Nnižší alkylamino- nižší alkylovou skupinu, (tetrahydropyranylamino)- nižší alkylovou skupinu, N,N-di- nižší alkylamino- nižší alkylovou skupinu, N-nižší alkylaminokarbonylovou skupinu, Ν,Ν-dx- nižší alkylaminokarbonylovou skupinu, guanidino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkyl-sulfonylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkoxy-fenyl-sulfonylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkyl-fenyl-sulfonylamino- nižší alkylovou skupinu, nitrofenyl-sulfonylamino- nižší alkylovou skupinu, N,N-di- nižší alkylamino-sulfonylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkoxykarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkoxy26

nižší alkoxykarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, ureido- nižší alkylovou skupinu, N-nižší alkylaminokarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, N,N-di- nižší alkylaminokarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, N-(fenylnižší alkyl)-aminokarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, N-(nižší alkyl-fenyl- nižší alkyl)-amino-karbonylaminonižší alkylovou skupinu, N-(nižší alkoxy-fenyl- nižší alkyl)-amino-karbonylamino- nižší alkylovou skupinu, N(morfolinyl- nižší alkyl)-amino-karbonylamino- nižší alkylovou skupinu, N,N-di- nižší alkylamino- nižší alkylamino-karbonylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkylkarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, piperidylnižší alkylkarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, morfolinyl- nižší alkylkarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkyl-piperazinyl- nižší alkylkarbonylaminoalkylovou skupinu, morfolinyl- nižší alkylovou skupinu, piperidyl- nižší alkylovou skupinu, pyrrolidinyl- nižší alkylovou skupinu, [(hydroxy-nižši alkyl)-pyrrolidinyl]nižší alkylovou skupinu, nižší alkyl-piperazinyl- nižší alkylovou skupinu, adamantanyl-amino- nižší alkylovou skupinu, hydroxy-piperidyl- nižší alkylovou skupinu, azepanyl- nižší alkylovou skupinu, di- nižší alkylpyrrolidinyl- nižší alkylovou skupinu, azetidinyl- nižší alkylovou skupinu, aminokarbonyl-piperidyl- nižší alkylovou skupinu, pyridyl-piperazinyl- nižší alkylovou skupinu, thiomorfolinyl- nižší alkylovou skupinu, di-nižší alkylmorfolinyl- nižší alkylovou skupinu, aminokarbonylpyrrolidinyl- nižší alkylovou skupinu, nižší alkoxykarbonyl-piperazinyl- nižší alkylovou skupinu, fenylpiperazinyl-nižší alkylovou skupinu, nižší alkoxy- nižší alkylkarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkoxy27 ···· nižší alkoxylovou skupinu, nižší alkylkarbonyl- aminonižší alkylovou skupinu, pyrrolidinyl-karbonylamino- nižší alkylovou skupinu, piperidyl-karbonylamino- nižší alkylovou skupinu, morfolinyl-karbonylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkyl-piperazinyl-karbonylamino- nižší alkylovou skupinu, N,N-di- nižší alkylamino- nižší alkoxykarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, morfolinyl-nižší alkoxy karbonylamino- nižší alkylovou skupinu a nižší alkylpiperazinyl- nižší alkoxykarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, s tou výhradou, že R₂ není hydroxy- nižší alkylová skupina, karboxylové skupina nebo nižší alkoxykarbonylová skupina jestliže

Ri je atom vodíku,

R₄ je benzylová skupina, a

X je atom kyslíku, nebo jejich sole.

Nejvýhodnějšími sloučeninami jsou sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých n je 0,

Ri je atom vodíku,

R₂ je zbytek vybraný ze skupiny zahrnující amino- nižší alkylovou skupinu, N-nižší alkylamino- nižší alkylovou skupinu, N,N-di- nižší alkylamino- nižší alkylovou skupinu, N-nižší alkylaminokarbonylovou skupinu, N,N-di-nižší alkylamino-karbonylovou skupinu, guanidino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkyl-sulfonylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkoxy-fenyl-sulfonylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkyl-fenyl-sulfonylamino- nižší alkylovou skupinu, nitrofenyl-sulfonylamino- nižší alkylovou skupinu, N,N-di-nižší alkylamino-sulfonylamino- nižší alkylovou skupinu, ·· *444 • 444 4 ·

4

4444 ·

44 4 4 • 4 · 4 · · 4 4 4 • 4 4 4 *

444 ··· 44 44 nižší alkoxykarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkoxy- nižší alkoxykarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, ureido- nižší alkylovou skupinu, N-nižší alkylaminokarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, N,N-di- nižší alkylaminokarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, N-(fenylnižší alkyl)-amino-karbonylamino- nižší alkylovou skupinu,

N-(nižší alkyl-fenyl-nižší alkyl)-amino-karbonylaminonižší alkylovou skupinu, N-(nižší alkoxy-fenyl- nižší alkyl)-amino-karbonylamino- nižší alkylovou skupinu, N(morfolinyl- nižší alkyl)-amino-karbonylamino- nižší alkylovou skupinu, N,N-di- nižší alkylamino- nižší alkylaminokarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkylkarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, piperidyl- nižší alkylkarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, morfolinylnižší alkylkarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkyl-piperazinyl- nižší alkylkarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, morfolinyl- nižší alkylovou skupinu, piperidyl- nižší alkylovou skupinu, pyrrolidinyl- nižší alkylovou skupinu, nižší alkyl-piperazinyl- nižší alkylovou skupinu, adamantanyl-amino- nižší alkylovou skupinu, hydroxy-piperidyl- nižší alkylovou skupinu, azepanyl- nižší alkylovou skupinu, di-nižší alkyl-pyrrolidinyl- nižší alkylovou skupinu, azetidinyl- nižší alkylovou skupinu, aminokarbonyl-piperidyl- nižší alkylovou skupinu, pyridylpiperazinyl- nižší alkylovou skupinu, thiomorfolinyl- nižší alkylovou skupinu, di- nižší alkyl-morfolinyl- nižší alkylovou skupinu, aminokarbonyl-pyrrodinyl- nižší alkylovou skupinu, nižší alkoxykarbonyl-piperazinyl- nižší alkylovou skupinu, fenyl-piperazinyl- nižší alkylovou skupinu, nižší alkoxy- nižší alkylkarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkoxy- nižší alkoxy- nižší alkyl·· · « · · · • · · • ···· · • · ···· · · ···€ • · ·· karbonylamino- nižší alkylovou skupinu, pyrrolidinylkarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, piperidyl-karbonylamino- nižší alkylovou skupinu, morfolinyl-karbonylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkylpiperazinyl-karbonylamino- nižší alkylovou skupinu, N,N-dinižší alkylamino- nižší alkoxykarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, morfolinyl- nižší alkoxykarbonylaminonižší alkylovou skupinu a nižší alkyl-piperazinyl- nižší alkoxykarbonylamino- nižší alkylovou skupinu,

R₄ je benzylová skupina, a

X je atom kyslíku nebo jejich sole.

Zejména výhodné jsou dále sloučeniny obecného vzorce I ve kterém R₂ je v poloze 3 cyklobutanového kruhu.

Velmi speciální preferenci mají sloučeniny obecného vzorce I uvedené v příkladech níže nebo jejich sole, zejména sole farmaceuticky použitelné.

Rovněž tak speciálně preferované jsou všechny sloučeniny

obecného vzorce	I, které ve	výše	popsaném	Capture ELISA
testu mají IC₅₀	hodnotu nižší	než	300 nM,	nej lépe	ty které
mají IC₅₀ hodnotu	menší než 100	nM.
Sloučeniny	obecného vzorce	I nebo	jejich	sole se
připravují postupy známými	z literatury	(viz	také WO

97/28161), i když tyto nebyly dříve použity pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, zejména pro

a) přípravu sloučenin obecného vzorce I, ve kterém R₂ je • · · · ί» nižší alkylová skupina substituovaná aminoskupinou, se sloučenina obecného vzorce II

ve kterém n, Ri, R₃, R₄ a X mají význam definovaný pro sloučeniny obecného vzorce I, nechá ..reagovat s hydrazinem;

b) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, ve kterém R₂ je zbytek R5-(C=Y)-Z- kde R5 je nesubstituovaná, mono- nebo disubstituovaná aminoskupina, Y je atom kyslíku a substituent Z není přítomen nebo je nižší alkylová skupina, se sloučenina obecného vzorce III

ve kterém R10 je .zbytek HO-(C=O)-Z-, kde substituent Z není přítomen nebo je nižší alkylová skupina, a n, Ri, R3, R₄ a X mají význam

definovaný pro sloučeniny obecného vzorce I, nechá reagovat se sloučeninou vzorce R5-H, kde R₅ je nesubstituované, mono- nebo di- substituovaná aminoskupina;

c) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, ve kterém R₂je nižší alkylová skupina substituovaná mono- nebo disubstituovaná aminoskupina, se sloučenina obecného vzorce I, kde R₂ je zbytek R₅-(C=Y)-Z- kde R₅ je mono- nebo disubstituovaná aminoskupina, Y je atom kyslíku a substituent Z není přítomen nebo je nižší alkylová skupina, nechá reagovat s lithiumaluminiumhydridem;

d) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, ve kterém R₂ je nižší alkylová skupina substituovaná mono- nebo di- substituovanou aminoskupinou nebo heterocyklickým zbytkem obsahujícím alespoň jeden atom dusíku v kruhu, přičemž vazba na heterocyklického zbytku na nižší alkylovou skupinu je přes atom dusíku v kruhu, se sloučenina obecného vzorce IV

^(IV) kde R_1X je: nižší alkylová skupina substituovaná 4-methylfenylsulfonyloxyskupinou a n, R_x, R₃, R4 a X mají významy definované pro sloučeninu obecného vzorce I, nechají reagovat se sloučeninou R17-H, kde R17 je mono- nebo di- substituovaná aminoskupina nebo heterocyklický zbytek

obsahující alespoň jeden atom dusíku v kruhu, kde heterocyklický zbytek je připojen na atom vodíku skupiny R17-H přes atom dusíku;

e) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, ve kterém zbytek R₂ je R₆-sulfonylamino- nižší alkylová skupina, kde Rg má významy uvedené výše u vzorce I, se sloučenina obecného vzorce I, kde R₂ je amino- nižší alkylová skupina, nechá reagovat s Rg-sulfonylhalogenidem;

f) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, ve kterém R₂je zbytek R₅-(C=Y)-Z-, kde R₅ je volná nebo etherifikovaná hydroxylová skupina, Y je atom kyslíku a Z je amino- nižší alkylová skupina, se sloučenina obecného vzorce I, kde R₂ je amino- nižší alkylová skupina, se nechá reagovat se sloučeninou R₅-(C=O)-halogen, kde R₅ je volná nebo etherifikovaná hydroxylová skupina;

g) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, ve kterém R₂ je zbytek R₅-(C=Y)-Z-, kde R₅ je nesubstituované nebo monosubstituovaná aminoskupina, Y je atom kyslíku nebo atom síry a Z je amino- nižší alkylová skupina, se sloučenina obecného vzorce I, kde R₂ je amino- nižší alkylová skupina, nechá reagovat se sloučeninou obecného vzorce Ri₂-N=C=Y, kde Y je atom kyslíku nebo atom síry, zbytek R₁₂-NH- odpovídá nesubstituované nebo mono- substituované aminoskupině R₅;

h) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, ve kterém R₂ je zbytek R5-(C=Y)-Z-, kde R₅ je nesubstituované, mono- disubstituovaná aminoskupina nebo heterocyklický zbytek obsahující alespoň jeden atom dusíku v kruhu, přičemž vazba heterocyklického zbytku je přes atom dusíku v kruhu, Y je atom kyslíku a Z je amino- nižší alkylová skupina, se sloučenina obecného vzorce I, ve kterém R₂ je zbytek R₅-(C=Y)-Z-, kde R5 imidazol-l-yl, Y je atom kyslíku a Z je amino- nižší alkylová skupina, nechá reagovat se sloučeninou vzorce R5-H, kde R₅ je nesubstituované, mono- nebo di- substituovaná aminoskupina, nebo heterocyklický zbytek, který obsahuje alespoň jeden atom dusíku v kruhu;

i) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, ve kterém R₂ je zbytek R5-(C=Y)-Z-, kde R₅ je nesubstituované nebo substituovaná nižší alkylová skupina, Y je atom kyslíku a Z je amino- nižší alkylová skupina, se sloučenina obecného vzorce I, kde R₂ je amino-nižší alkylová skupina, nechá reagovat se sloučeninou vzorce R₅-(C=O)-halogen, kde R₅ je nesubstituované nebo substituovaná nižší alkylová skupina;

j) pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R₂je zbytek Rs-(C=Y)-Z-, kde R₅ je nižší alkylová skupina substituovaná heterocyklickým zbytkem obsahujícím alespoň jeden atom dusíku v kruhu, přičemž vazba heterocyklického zbytku na nižší alkylovou skupinu je přes atom dusíku v kruhu, Y je atom kyslíku á Z je amino- nižší alkylová skupina, se sloučenina obecného vzorce V

• · € · ve kterém n, Ri, R3, R4 a X mají význam definovaný pro sloučeniny obecného vzorce I, nechají reagovat se sloučeninou vzorce Ri₈-H, kde Rig je heterocyklický zbytek obsahující alespoň jeden atom dusíku v kruhu, přičemž heterocyklický zbytek je připojen na atom vodíku sloučeniny Rig-H přes atom dusíku v kruhu;

k) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, ve kterém R₂je zbytek R₅-(C=Y)-Z-, kde R₅ je nižší alkylaminoskupina, kde nižší alkylová část je substituovaná nesubstituovanou , mononebo di- substituovanou aminoskupinou nebo heterocyklickým zbytkem obsahujícím alespoň jeden atom dusíku v kruhu, přičemž vazba heterocyklického zbytku na nižší alkylovou část molekuly je přes atom dusíku v kruhu, Y je atom kyslíku nebo atom síry a Z je amino- nižší alkylová skupina, se sloučenina obecného vzorce VI

«4 4 4 ve kterém Y je atom kyslíku nebo atom síry a n, R_x, R₃, R₄ a X mají význam definovaný pro sloučeniny obecného vzorce I, nechá reagovat se sloučeninou vzorce R13-H, kde R_i3 je nesubstituované, mono- nebo di- substituovaná aminoskupina nebo heterocyklický zbytek obsahující alespoň jeden atom dusíku v kruhu, přičemž heterocyklický zbytek je připojen na atom vodíku sloučeniny R13-H přes atom dusíku v kruhu;

1) pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R₂ - je zbytek R5~(C=Y)-Z-, kde R₅ je nižší alkoxylová skupina substituovaná nesubstituovanou nebo mono- nebo disubstituovanou aminoskupinou nebo heterocyklickým zbytkem obsahujícím alespoň jeden atom dusíku v kruhu, přičemž vazba heterocyklického na nižší alkylovou část nižšího alkoxylu je přes atom dusíku v kruhu, Y je atom kyslíku a Z je aminonižší alkylová skupina, se sloučenina obecného vzorce VII

(VII)

(nižší alkylen).

H

-N

O—(nižší alkyl)-halogen ve kterém n, Ri, R₃, R4 a X mají význam definovaný pro sloučeninu obecného vzorce I, nechá reagovat se sloučeninou • · vzorce R₁₄-H, kde R14 je nesubstituované, mono- nebo disubstituovaná aminoskupina nebo heterocyklický zbytek obsahující alespoň jeden atom dusíku v kruhu, přičemž heterocyklický zbytek je připojen na atom vodíku sloučeniny Ri₄-H přes atom dusíku v kruhu;

m) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, ve kterém Ri je atom halognu, se sloučenina obecného vzorce I, kde R_x je atom vodíku, nechá reagovat s N-halogensukcinimidem;

n) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, ve kterém Ri je nižší alkylová skupina, se sloučenina obecného vzorce I, kde Ri je atom halogenu, nechá reagovat s tetra (nižší alkyl) cínem;

o) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, se sloučenina obecného vzorce IX

ve kterém n, R_lř R₃, R₄ a X mají významy definované pro sloučeninu obecného vzorce I, nechají reagovat se sloučeninou vzorce X

O r° o

(X) • · 9 «· ···· 9 ♦ · ve kterém R₂ má významy jak jsou definované pro sloučeninu obecného vzorce I;

p) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, ve kterém R₂je nižší alkylová skupina substituovaná hydroxylovou skupinou, kde hydroxylová skupina je připojena na primární atom uhlíku, se sloučenina obecného vzorce I, ve kterém R₂ je zbytek r₅-(C=Y)-Z-, kde R₅ je etherifikovaná hydroxylová skupina, Y je atom kyslíku a substituent Z není přítomen nebo je alkylovou skupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, nechá reagovat s lithiumaluminiumhydridem;

q) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, ve kterém R₂je nižší alkylová skupina substituovaná hydroxylovou skupinou, kde hydroxylová skupina je připojena na sekundární nebo terciární atom uhlíku, se sloučenina obecného vzorce XI

ve kterém

Ris je zbytek Ri₆-(C=0)-Q-, ve kterém R₁₆ je atom vodíku nebo alkylová skupina s 1 až 5 atomy uhlíku a substituent Q buď není přítomen nebo je alkylová skupina s 1 až 5 atomy uhlíku, se nechá reagovat s Grignardovým činidlem vzorce ·· ·· • · « · 4 · · ♦'· »··» ♦ » '9 9 9 * • · · · 4 · ««·· « ·» ··· ·· alkyl-Mg-halogenid s 1 až 5 atomy uhlíku v alkylové části;

přičemž funkční skupiny, které jsou přítomné ve výchozích sloučeninách postupů a) až q) a nejsou uvažovány pro použití při reakci, mohou být přítomny v případě nutnosti v chráněné formě a takto přítomné chránící skupiny se odštěpí, přičemž tyto výchozí sloučeniny mohou také existovat ve formě solí pokud tato sůl tvořící skupina je přítomna a reakce ve formě soli je možná;

a, pokud je to žádoucí, takto vzniklá sloučenina vzorce I se převede na jinou sloučeninu vzorce I, volná sloučenina se převede na jinou sloučeninu vzorce I, volná sloučenina se převede na sůl, získaná sůl sloučeniny vzorce I se převede na volnou sloučeninu nebo na jinou sůl, a/nebo směs isomerních sloučenin vzorce I se rozdělí na individuální isomery.

Popis jednotlivých variant postupů:

S ohledem na postup a):

Reakce mezi sloučeninou vzorce II a hydrazinem ve formě, například, hydrazin monohydrátu, se s výhodou provádí ve vhodném inertním rozpouštědle, zejména v alkoholech, například nižších alkoholech, jako je ethanol a v inertní atmosféře, například argonu, s výhodou při teplotě místnosti. Hydrazin se používá v přebytku, s výhodou 15 ekvivalentů, vztaženo na sloučeninu vzorce II.

S ohledem na postup b):

Reakce mezi sloučeninou vzorce III a sloučeninou vzorce R₅-H, ve kterém R₅ je nesubstituovaná, mono- nebo disubstituovaná aminoskupina, se s výhodou provádí v přitom39 nosti 0-(1,2-dihydro-2-oxo-l-pyridyl)-1,1,3,3-tetra-methyluronium tetrafluorborátu a diisopropylethylaminu, ve vhodném inertním rozpouštědle, jako je, například, N,N-dimethylformamid, s výhodou při teplotě místnosti.

S ohledem na postup c):

Reakce mezi sloučeninou vzorce I, ve kterém R₂ je zbytek R₅-(C=Y)-Z-, kde R5 je mono- nebo di- substituovaná aminoskupina, Y je atom kyslíku a substituent Z není přítomen nebo je nižší alkylová skupina a lithiumaluminiumhydridem se s výhodou provádí ve vhodném inertním rozpouštědle, jako je například bezvodý tetrahydrofuran, s výhodou při teplotě mezi 0°C a teplotou místnosti, nejlépe pomalým ohříváním reakční směsi z 0°C do teploty místnosti během asi 14 hodin.

S ohledem na postup d):

Reakce mezi sloučeninou vzorce IV a sloučeninou vzorce R17-H se s výhodou provádí při teplotě místnosti. Jestliže při reakční teplotě sloučenina vzorce R₁₇-H je ve formě kapaliny a sloučenina vzorce IV je v ní rozpuštěná, nemusí se přidávat, žádné rozpouštědlo.

S ohledem na postup e):

Reakce mezi sloučeninou vzorce I ve kterém R₂ je aminonižší alkylová skupina, a R₆-sulfonylhalogenidem, kde R₆ má význam definovaný výše ve vzorci I, se s výhodou provádí v přítomnosti triethylaminu, ve vhodném inertním rozpouštědle, jako je například dichlormethan, a v inertní atmosféře, například argonu, s výhodou při teplotě asi 0°C. V R₆sulfonylhalogenidu je halogenidem s výhodou atom chloru.

<· 0

S ohledem na postup f) :

Reakce mezi sloučeninou vzorce I, ve kterém R₂ je aminonižší alkylová skupina a sloučeninou vzorce R₅-(C=O)-halogen, kde R₅ je volná nebo etherifikovaná hydroxylová skupina a halogenem je s výhodou atom chloru se provádí v přítomnosti triethylaminu, ve vhodném inertním rozpouštědle, jako je například dichlormethan, s výhodou se provádí při teplotě místnosti.

S ohledem na postup g):

Reakce mezi sloučeninou vzorce, ve kterém R₂ je aminoϊ ’ nižší alkylová skupina, a sloučeninou vzorce Ri₂-N=C=Y se i . s výhodou provádí v inertním rozpouštědle, jako je například acetonitril, a s výhodou se provádí při teplotě místnosti.

S ohledem na postup h):

Reakce mezi sloučeninou vzorce I, ve kterém R₂ je zbytek Rs-(C=Y)-Z-, kde R₅ je imidazol-l-ylová skupina, Y je atom kyslíku a Z je amino- nižší alkylová skupina, a sloučeninou vzorce R₅-H, ve kterém R₅ je nesubstituované, mono- nebo disubstituovaná aminoskupina, nebo heterocyklický zbytek, který obsahuje alespoň jeden atom dusíku v kruhu, se s výhodou provádí v přítomnosti triethylaminu, ve vhodném inertním rozpouštědle, jako je například acetonitril, a v inertní atmosféře, například, argonu, s výhodou při teplotě místnosti.

S ohledem na postup i):

Reakce mezi sloučeninou vzorce I, ve kterém R₂ je aminonižší alkylová skupina, a sloučeninou vzorce R₅-(C=O)-halogen, kde R₅ je nesubstituované nebo substituovaná nižší alkylová

·'· · • ·>

skupina a atomem halogenu je s výhodou atom chloru se s výhodou provádí ve vhodném inertním rozpouštědle, jako je například N,N-dimethylformamid, a reakce se s výhodou provádí při teplotě místnosti.

S ohledem na postup j):

Reakce mezi sloučeninou vzorce V a sloučeninou vzorce Ri8~H se s výhodou provádí ve vhodném inertním rozpouštědle, zejména v alkoholech, jako jsou například nižší alkoholy, jako je ethanol, s výhodou při teplotě varu použitého rozpouštědla. Ve sloučenině vzorce V je atomem halogenu s výhodou atom chloru.

;S ohledem na postup k) :

Reakce mezi sloučeninou vzorce VI a sloučeninou vzorce R13-H se s výhodou provádí ve vhodném inertním rozpouštědle, zejména v alkoholech, jako jsou nižší alkoholy, jako ethanol, s výhodou při teplotě varu použitého rozpouštědla. Ve sloučenině vzorce VI je halogenem s výhodou atom chloru nebo bromu.

S ohledem na postup 1) :

Reakce mezi sloučeninou vzorce VII a sloučeninou vzorce R14-H se s výhodou provádí ve vhodném inertním rozpouštědle, jako je například acetonitril, s výhodou při teplotě varu použitého rozpouštědla. Ve sloučenině vzorce VII je atomem halogenu s výhodou atom bromu.

S ohledem na postup m):

Reakce mezi sloučeninou vzorce I, ve kterém Ri je atom vodíku a N-halogensukcinimidem, se s výhodou provádí ve vhodném inertním rozpouštědle, jako je například N,N'* '· ·* ’ dimethylformamid, a v inertní atmosféře argonu, s výhodou v temnu při teplotě místnosti. N-halogensukcinimidem je s výhodou N-bromsukcinimid.

S ohledem na postup n):

Reakce mezi sloučeninou vzorce I, ve kterém Ri je atom halogenu, a tetra- (nižším alkyl) cínem, se s výhodou provádí v přítomnosti tetrakistrifenylfosfin palladia, ve vhodném inertním rozpouštědle, jako je například N,N-dimethylformamid, a v inertní atmosféře, například argonu, s výhodou při zvýšené teplotě kolem 100°C.

S ohledem na postup o):

Reakce mezi sloučeninou vzorce IX a sloučeninou vzorce X se s výhodou provádí v přítomnosti vhodné báze, jako je uhličitan draselný a v přítomnosti 18-crown-6-etheru, ve vhodném inertním rozpouštědle, jako je například N,Ndimethylformamid, s výhodou při zvýšené teplotě, jako je teplota kolem 80°C.

S ohledem na postup p):

Reakce mezi sloučeninou vzorce I, ve kterém R₂ je zbytek R₅-(C=Y)-Z-, kde R₅ je etherifikovaná hydroxylová skupina, Y je atom kyslíku a substituent Z buď není přítomen nebo je alkylová skupina s 1 až 6 atomy uhlíku a lithiumaluminiumhydridem, se s výhodou provádí ve vhodném inertním rozpouštědle, jako je například tetrahydrofuran, s výhodou při teplotě 0°C.

S ohledem na postup q):

Reakce mezi sloučeninou vzorce XI a Grignardovým reakčním činidlem vzorce alkyl-Mg-halogenid s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části se provádí za podmínek známých z literatury, například při teplotě místnosti a použitím diethyletheru jako rozpouštědla.

Další stupně postupu.

V dalších stupních postupu, které jsou prováděny požadovaným způsobem, funkční skupiny výchozích sloučenin, které se nemají účastnit reakce, mohou být přítomny v nechráněné formě nebo mohou být chráněny například jednou nebo více chránícími skupinami. Chrániči skupiny se pak zcela nebo částečně odstraní jednou ze známých metod.

Chrániči skupiny a způsoby jakými jsou tyto zaváděny nebo odstraňovány jsou popsány, například, v Protective Groups in Organic Chemistry, Plenům Press, London, New York 1973, a v Methoden der organischen Chemie, Houben-Weyl, 4.vydání, Vol. 15/1, Georg-Thieme-Verlag, Stuttgart 1974 a v Theodora W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, New York 1981. Charakteristickou vlastností chránících skupin je snadná odstranitelnost, to je bez vzniku nežádoucích sekundárních reakcí, jako jsou například solvolýzy, redukce, fotolýza nebo alternativně za fyziologických podmínek.

Konečné produkty vzorce I mohou však také obsahovat substituenty, které se také mohou používat jako chránící skupiny ve výchozích materiálech, například, pro přípravu jiných konečných produktů vzorce I. Tak, v rozsahu tohoto textu, pouze snadno odstranitelné skupiny, které nejsou součástí požadovaných konečných sloučenin vzorce I jsou označovány jako chránící skupiny, pokud není uvedeno jinak.

9

0 9 ► 99 9 0 ·· 9900

0 ·' · ·

0 0 0’

0·· ·

0 0 9 9

009 ·· ·0

Sloučeniny obecného vzorce I se mohou převést na odpovídající N-oxidy. Reakce se provádí použitím vhodného oxidačního činidla, s výhodou peroxidu, například meta-chlorperbenzoové kyseliny ve vhodném rozpouštědle, jako jsou halogenované uhlovodíky, například chloroform nebo dichlormethan nebo nižší alkankarboxylové kyseliny, jako je kyselina octová, s výhodou při teplotě mezi 0°C a teplotou varu použité reakční směsi, zejména při teplotě místnosti.

Obecné podmínky postupů

Veškeré zde popsané stupně postupů se provádějí za známých reakčních podmínek, s výhodou za těch, které jsou specielně zmíněné, bez přítomnosti nebo obvykle v přítomnosti rozpouštědel nebo ředidel, s výhodou těch, které jsou inertní k použitým · reakčním činidlům a které jsou schopné je rozpouštět, bez přítomnosti nebo za přítomnosti katalyzátorů kondenzačních činidel nebo neutralizujících činidel, například iontoměničů, běžně kationtových iontoměničů, například v H⁺formě, v závislosti na typu reakce a/nebo reakčních činidel při snížené, normální nebo zvýšené teplotě, například v rozmezí od -100°C do asi 190°C, s výhodou od asi -80°C do asi 150°C, například od -80 do -60°C, při teplotě místnosti, při -20 do 40°C nebo při teplotě varu použitého rozpouštědla, za atmosferického tlaku nebo v uzavřené nádobě, případně potřeby za tlaku a/nebo v inertní atmosféře, například, argonu nebo dusíku.

Vynález se také týká těch provedení postupu, ve kterých se vychází se sloučeniny získatelné v kterémkoli stadiu jako meziprodukt a provedou se chybějící stupně nebo, které přeruší postup v jakémkoli stadiu nebo které tvoří výchozí materiál za • · podmínek reakce nebo kdy se používá výchozí materiál ve formě reaktivního derivátu nebo soli, nebo kdy vzniká sloučenina připravitelná postupem podle vynálezu za podmínek tohoto postupu a dále postupů přípravy těchto sloučenin in šitu. Ve výhodném provedení se vychází z těch výchozích materiálů, které vedou ke sloučeninám popsaným výše, které jsou výhodné.

Ve výhodném provedení se sloučeniny obecného vzorce I (nebo jejich N-oxidy) připravují podle postupů a stupňů postupu definovaných v příkladech.

Sloučeniny obecného vzorce I (nebo jejich N-oxidy), včetně jejich solí jsou také připravitelné ve formě hydrátů, nebo jejich krystaly mohou například obsahovat rozpouštědlo použité pro jejich krystalizaci (přítomné jako solváty).

Výchozí materiály

Nové výchozí materiály a/nebo meziprodukty, jakož i postupy pro jejich přípravu jsou rovněž předmětem tohoto vynálezu. Ve výhodném provedení se použité výchozí materiály a reakčni podmínky vybírají tak, aby se připravily výhodné sloučeniny.

Výchozí materiály použité ve výše popsaných postupech a) až q) jsou sloučeniny známé, připravitelné podle známých postupů (viz také WO 97/28161), nebo jsou to sloučeniny obchodně dostupné; zejména se mohou připravit postupy popsanými v příkladech.

Při přípravě výchozích materiálů se existující funkční skupiny, které se nezúčastní reakce, by v případě nutnosti

0» ···· • · 0 0 0

měly být chráněné. Výhodné chránící skupiny, jejich zavádění a odštěpování je popsáno výše nebo v následujících příkladech.

Místo uvedených výchozích materiálů a meziproduktů se pro reakci také mohou použít sole, za předpokladu, že jsou přítomné skupiny schopné tvorby soli a reakce se solí je také možná. Tam kde výraz výchozí materiály byl použit výše a bude použit dále, jsou jejich sole vždy zahrnuty, pokud je to racionální a možné

Sloučeniny obecného vzorce II se mohou například připravit reakcí sloučenin obecného vzorce VIII

NH.

N Ν' (VIII) ve kterém n, Ri, R3, R₄ a X mají významy definované výše pro sloučeniny obecného vzorce I s ftalimidem, v přítomnosti trifenylfosfinu a diethyl azodikarboxylátu, v inertním rozpouštědle, například v bezvodém tetrahydrofuranu, a v inertní atmosféře, například, argonu, s výhodou při teplotě místnosti.

Sloučeniny obecného vzorce VIII se mohou připravit postupy popsanými v p) nebo q).

A.-.

9444

9

4 4 9 4

9 9 4 9 9' 9 4

Sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R₂ je zbytek R5(C=Y)-Z-, kde R5 je mono- nebo di- substituovaná aminoskupina, Y je atom kyslíku a substituent Z není přítomen nebo je nižší alkylová skupina, se mohou připravit podle postupu b).

Sloučeniny obecného vzorce IV se mohou připravit například reakcí sloučenin vzorce VIII s p-toluensulfonylhalogenidem, s výhodou p-toluensulfonyl-chloridem, v inertním rozpouštědle, například pyridinu, s výhodou při teplotě -20°C.

Sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R₂ je nižší amino- nižší alkylová skupina se mohou připravit podle postupu a) .

Sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R₂ je zbytek R5(C=Y)-Z-, kde R₅ je imidazol-l-ylová skupina, Y je atom kyslíku a Z je amino- nižší alkylová skupina se mohou připravit reakcí sloučeniny obecného vzorce I, kde R₂ je amino- nižší alkylová skupina, s 1,1-karbonyldiimidazolem, v přítomnosti triethylaminu, v inertním rozpouštědle a v inertní atmosféře, například v atmosféře argonu, s výhodou při teplotě místnosti.

Sloučeniny obecného vzorce V se mohou připravit například reakcí sloučeniny obecného vzorce I, kde R₂ je aminonižší alkylová skupina, s halogen- nižším alkylkarbonyl halogenidem, s výhodou s chlor nižším alkylkarbonyl chloridem v přítomnosti triethylaminu, v inertním rozpouštědle, například acetonitrilu, s výhodou při teplotě místnosti.

Sloučeniny obecného vzorce VI se mohou připravit například reakcí sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R₂ je

9 9 • · 9

9 9

9999

9 9

9 9 • 9 9 9

9 · 9

99 amino- nižší alkylová skupina, se sloučeninou vzorce halogennižší alkyl-N=C=Y, kde Y je atom kyslíku nebo atom síry a atom halogenu je s výhodou atom chloru nebo atom bromu, v inertním rozpouštědle, například acetonitrilu, s výhodou při teplotě místnosti.

Sloučeniny obecného vzorce VII se mohou připravit například reakcí sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R₂ je amino- nižší alkylová skupina, s halogen- nižší alkyl halogen formiátem, s výhodou s brom -nižší alkyl chlorformiátem, v přítomnosti triethylaminu, v inertním rozpouštědle, například dichlormethanu, s výhodou při teplotě místnosti.

Zbylé výchozí materiály jsou sloučeniny známé, které se mohou připravit známými postupy, nebo které jsou obchodně dostupné; nebo zejména se mohou připravit postupy popsanými v příkladech.

Farmaceutické prostředky, metody, použití a kombinace

Vynález se také týká farmaceutických prostředků, které obsahují jako aktivní složku sloučeninu obecného vzorce I, nebo její farmaceuticky použitelnou sůl a které se mohou použít zejména pro léčení onemocnění zmíněných na počátku.

Vynález se také týká profarmak sloučenin obecného vzorce I, které se in vivo převádějí na sloučeninu vzorce I jako takovou. Jakýkoli odkaz na sloučeniny obecného vzorce I se proto také týká těchto odpovídajících profarmak sloučenin vzorce I, jak je to vhodné a účelné.

»· »·

Zejména výhodné jsou prostředky pro enterální aplikaci, jako jsou nasální, bukální rektální a zejména orální aplikaci a pro parenterální aplikace, jako jsou intravenózní, intramuskulámí nebo subkutální aplikace teplokrevným živočichům, zejména lidem.

Prostředky obsahují aktivní složku buď samotnou nebo s výhodou spolu s farmaceuticky použitelným nosičem. Dávka aktivní složky závisí na typu onemocnění, které se má léčit a na jeho druhu, na věku, hmotnosti a individuálním stavu a na individuálních farmakokinetických datech a na způsobu aplikace.

Vynález se také týká sloučenin obecného vzorce I nebo jejich farmaceuticky použitelných solí, jako takových nebo ve formě farmaceutických prostředků, pro použití v metodách pro profylaktické nebo zejména terapeutické léčení lidského nebo živočišného těla, postupu pro jejich přípravu (zejména ve formě prostředků pro léčení nádorů) a metody léčení výše zmíněných onemocnění, primárně ‘nádorových onemocnění, zejména těch, které byly zmíněny výše.

Vynález se také týká postupů a použití sloučenin obecného vzorce I nebo jejich farmaceuticky použitelných solí pro přípravu farmaceutických prostředků, které obsahují jako aktivní složky (aktivní ingredience) sloučeniny obecného vzorce I nebo jejich farmaceuticky použitelné sole.

Jestliže je to zapotřebí, tyto farmaceutické prostředky mohou také obsahovat další aktivní složky, jako jsou jiné chemoterapeutické látky, a/nebo se mohou použít v kombinaci • ···· · • · ··Α· · ·

s jinými terapeutickými postupy, například při aplikaci hormonální léčby nebo ozařování.

Přednost se dává těm farmaceutikým prostředkům, které jsou vhodné pro aplikace teplokrevným živočichům, zejména lidem nebo které jsou komerčně použitelné pro savce trpící onemocněním, které reaguje na inhibici IGF-IR tyrozin kinázy nebo na na IGF-IR- závislého buněčného množení, zejména neoplastického onemocnění, které jsou tvořeny účinným množstvím sloučeniny obecného vzorce I pro inhibici IGF-IR tyrozin kinázy nebo na na IGF-IR závislého buněčného množení, nebo jejich farmaceuticky použitelných solí spolu s alespoň jedním farmaceuticky použitelným nosičem.

Farmaceutický prostředek pro profylaktický nebo terapeutický management neoplastických a jiných proliferativních onemocnění teplokrevných živočichů, zejména lidí nebo komerčně užitečných savců, vyžadujících takovéto léčení, zejména trpících tímto onemocněním, obsahuje jako aktivní složku sloučeninu obecného vzorce I v množství, které je profylakticky nebo zejména terapeuticky aktivní na tato onemocnění, nebo farmaceuticky použitelnou sůl, která je rovněž preferována.

Farmaceutické prostředky obsahují od asi 1% do asi 95% aktivní složky, jedna aplikační dávka ve výhodném provedení tvoří od asi 20% do asi přibližně 90% aktivní složky a dávkové formy, které nejsou jednorázového typu obsahují od asi 5% do přibližně 20% aktivní složky. Jednotkovými dávkovými formami jsou například potažené nebo nepotažené tablety, ampule, čípky

9999 nebo kapsle. Příkladem jsou kapsle obsahující od asi 0,05 g do asi 1,0 g aktivní látky.

Farmaceutické prostředky podle vynálezu se připravují běžně známým způsobem, například použitím konvenčního míšení, granulace, povlékání, rozpouštění nebo lyofilizačních postupů.

Vynález se také týká způsobu nebo metody léčení jednoho z patologických stavů uvedených výše, zejména onemocnění, která reagují na IGF-IR tyrozin kinázu nebo na na IGF-IRzávislém buněčném množení, zejména na odpovídající neoplastická onemocnění. Sloučeniny vzorce I nebo jejich farmaceuticky použitelné sole se mohou aplikovat jako takové nebo ve formě farmaceutických prostředků profylakticky nebo léčebně účinných, s výhodou v množství, které je účinné na uvedená onemocnění, teplokrevných živočichů nebo lidí, kteří takovéto léčení vyžadují, přičemž sloučeniny se s výhodou používají ve formě farmaceutických prostředků. V případě, že jedinec má hmotnost asi 70 kg, podává se denní dávka od asi 0,1 g do asi 5 g, s výhodou od asi 0,5 g do asi 2 g, sloučeniny podle tohoto vynálezu.

Vynález se zejména týká použití sloučenin obecného vzorce I nebo jejich farmaceuticky použitelných solí, zejména sloučenin obecného vzorce I, které jsou uvedeny jako výhodné nebo jejich farmaceuticky použitelných solí, nebo ve formě farmaceutických prostředků s alespoň jedním farmaceuticky použitelným nosičem pro terapeutický nebo profylaktický management jedné nebo více nemocí uvedených výše, s výhodou onemocnění, která reagují na inhibici IGF-IR tyrozin kinázy ·· · • 4 ·

4» • ···· · • · ···· · • · ·· ···· ·« ·· · · · • 4 · · · • · · · · · • · · · 4 ·

44» 444 ·· ·· nebo na na IGF-IR závislé buněčné proliferaci, zejména neoplastických onemocnění, zejména jestliže tato onemocnění reagují na inhibici IGF-IR tyrozin kinázy nebo na na IGF-IRzávislé buněčné proliferaci.

Tento vynález se zejména také týká použití sloučenin obecného vzorce I nebo jejich farmaceuticky použitelných solí, zejména sloučenin obecného vzorce I, které jsou uvedeny jako výhodné nebo jejich farmaceuticky použitelných solí, pro přípravu farmaceutických prostředků pro terapeutický nebo profylaktický management jedné nebo více nemocí uvedených výše, zejména neoplastických onemocnění, zejména jestliže tato •onemocnění reagují na inhibici IGF-IR tyrozin kinázy nebo na na IGF-IR-závislou buněčnou proliferaci.

Sloučeniny obecného vzorce I se mohou také s výhodou použít v kombinaci s jinými antiproliferativními látkami. Takovéto antiproliferativní látky zahrnují, avšak bez omezení, inhibitory aromatázy, antiestrogeny, inhibitory topoisomerázy I, inhibitory topoisomerázy II, látky aktivně působící na mikrotubule, alkylační činidla, inhibitory hišton deacetylázy inhibitory farnesyl transferázy, inhibitory COX-2, inhibitory MMP, inhibitory mTOR, antineoplastické antimetabolity, sloučeniny platiny, sloučeniny snižující aktivitu proteinové kinázy a další anti-angiogenní sloučeniny, agonisty gonadorelinu, anti-androgeny, bengamidy, bisfosfonáty a trastuzumab.

Výraz inhibitory aromatázy, jak je zde použit se týká sloučenin, které inhibují produkci estrogenu, to je konverzi

9 ·

substrátů androstendionu a testosteronu na estron a estradiol, respektive. Výraz zahrnuje, avšak bez omezení, stéroidy, zejména exemestan a formestan a zvláště ne-Steroidní látky, zejména aminoglutethimid, vorozol, fadrozol, anastrozol a obzvláště letrozole. Exemestan se může aplikovat například ve formě v jaké je na trhu pod obchodním názvem AROMASIN .

Formestan se může aplikovat například ve formě v jaké je na trhu pod obchodním názvem LENTARON™. Fadrozol se může aplikovat například ve formě v jaké je na trhu pod obchodním názvem AFEMA™. Anastrozol se může aplikovat například ve formě v jaké je na trhu pod obchodním názvem ARIMIDEX™. Letrozol se může aplikovat například ve formě v jaké je na trhu, například pod obchodním názvem FEMARA™ nebo FEMAR™. Aminoglutethimid se může aplikovat například ve formě v jaké je na trhu, například pod obchodním názvem ORIMETEN™.

Kombinace podle vynálezu obsahující antineoplastickou látku, která je inhibitorem aromatázy jsou zejména použitelné pro léčení hormonových receptorů nádorů prsu.

Výraz antiestrogeny, jak je zde použit se týká sloučenin, které jsou antagonisty účinku, estrogenů na hladině receptoru estrogenů. Výraz zahrnuje, avšak bez omezení, tamoxifen, fulvestrant, raloxifen a raloxifen hydrochlorid. Tamoxifen se může aplikovat, například, ve formě jaká je na trhu pod obchodním názvem NOLVADEX™. Raloxifen hydrochlorid se muže aplikovat, například, ve formě, která je dostupná na trhu pod obchodním názvem EVISTA™. Fulvestrant se může aplikovat ve formě, která je nárokována v US 4,659,516 nebo se muže aplikovat, například ve formě jaká je na trhu pod φ φ φφφφ φ φ ·« φφ φ φ · φ · φφφ φ · φ φ φ ♦ φ φ φφφφ φφφ φφφ ·· φ '· obchodním názvem FASLODEX™.

Výraz inhibitory topoisomerázy jak je zde použit zahrnuje, avšak bez omezení, topotecan, irinotecan, 9nitrocamptothecin a makromolekulární camptothecinové konjugáty PNU166148 (sloučenina Al v W099/17804). Irinotecan se může aplikovat, například ve formě jaká je na trhu pod obchodním názvem CAMPTOSAR™. Topotecan se může aplikovat, například, ve formě jaká je na trhu pod obchodním názvem HYCAMTIN™.

Výraz inhibitory topoisomerázy II, jak je zde použit, avšak bez omezení, jsou antracykliny doxorubicin (včetně liposomální formulace, například, CAELYX™) , epirubicin, idarubicin a nemorubicin, anthrachinony mitoxantron a losoxantron, a podofillotoxiny etoposid a teniposid. Etoposid se může aplikovat, například ve formě jaká je na trhu pod obchodním názvem ETOPOPHOS™. Teniposid se může aplikovat, například ve formě jaká je na trhu pod obchodním názvem VM 26BRISTOL™. Doxorubicin se můře aplikovat, například ve formě jaká je na trhu pod obchodním názvem ADRIBLASTIN™. Epirubicin se může aplikovat, například ve formě jaká je na trhu pod obchodním FARMORUBICIN™. Idarubicin se může aplikovat, například ve formě jaká je na trhu pod obchodním názvem ZAVEDOS™. Mitoxantron se může aplikovat, například ve formě jaká je na trhu pod obchodním názvem NOVANTRON™.

Výraz látky aktivně působící na mikrotubule se týká látek stabilizujících mikrotubule a látek destabilizujících mikrotubule včetně, avšak bez omezení, taxanů paclitaxel a docetaxel, vinca alkaloidů, jako jsou například vinblastin, zejména vinblastin sulfát, vincristin zejména vincristin • · ·· sulfát a vinorelbin, discodermolid a epothilony, jako jsou epothilon B a D. Docetaxel se může aplikovat, například ve formě jaká je na trhu pod obchodním názvem TAXOTERE™. Vinblastin sulfát se může aplikovat, například ve formě jaká je na trhu pod obchodním názvem VINBLASTIN R.P.™. Vincristin sulfát se může aplikovat, například ve formě jaká je na trhu pod obchodním názvem FARMISTIN™. Discodermolid se může připravit například postupem nárokovaným v US 5,010,099.

Výraz alkylační látky jak je zde použit zahrnuje, avšak bez omezení, cyklofosfamid, ifosfamid a melphalan. Cyklofosfamid se může aplikovat, například ve formě jaká je na trhu pod obchodním názvem CYCLOSTIN™. Ifosfamid se může aplikovat, například ve formě jaká je na trhu pod obchodním názvem HOLOXAN™.

Výraz inhibitory histon deacetylázy se týká sloučenin, které inhibují histon deacetylázu a které vykazují antiproliferativní aktivitu.

Výraz inhibitory farnesyl transferázy se sloučenin, které inhibují farnesyl transferázu a vykazují antiproliferativní aktivitu.

týká které

Výraz COX-2 inhibitory se týká sloučenin, které inhibují enzym cyklooxygenázového typu 2 enzym (COX-2) a které vykazují antiproliferativní aktivitu, jako je celecoxib (Celebrex^<R)) a rofecoxib (Vioxx^(R)).

Výraz MMP inhibitory se týká sloučenin, které inhibují matrici metaloproteinázy (MMP) a které mají antiproliferativní aktivitu.

• ·

• «·

Výraz mTOR inhibitory se týká sloučenin které inhibují savčí cílovou skupinu rapamycin (mTOR) a které mají antiproliferativní aktivitu, jako je sirolimus (Rapamune^(R)) , everolimus (Certican™) , CCI-779 a ABT578.

Výraz antineoplastické antimetabolity zahrnuje , avšak bez omezení 5-fluoruracil, 5-fluoruracil, tegafur, capecitabin, cladribin, cytarabin, fludarabin fosfát, fluorouridin, gemcitabin, 6-merkaptopurin, hydroxymočovinu, methotrexat, edatrexat a sole těchto sloučenin a dále ZD 1694 (RALTITREXED™) , LY231514 (ALIMTA™), LY264618 (LOMOTREXOL™) a OGT719.

Výraz sloučeniny platiny jak je zde použit zahrnuje, avšak bez omezení carboplatin, cisplatin a oxaliplatin. Carboplatin se může aplikovat, například ve formě jaká je na trhu pod obchodním názvem CARBOPLAT™. Oxaliplatin se může aplikovat, například ve formě jaká je na trhu pod obchodním názvem ELOXATIN™.

Výraz sloučeniny snižující aktivitu protein kinázy a další anti-angiogenní sloučeniny jak je zde použit zahrnují, avšak bez omezení ty sloučeniny, které snižují aktivitu například vaskulárního endothelového růstového faktoru (Vascular Endothelial Growth Factor VEGF), epidermálního růstového faktoru (Epidermal Growth Factor EGF) a c-Src a anti-angiogenní sloučeniny které mají jiný mechanismus účinku než je snižování aktivity protein kinázy.

Sloučeninami, které snižují aktivitu VEGF jsou zejména sloučeniny, které inhibují VEGF receptor, zejména aktivitu • * • · tyrozin kinázy ve VEGF receptoru, a sloučeniny, které se váží na VEGF, a jsou to zejména ty sloučeniny, proteiny a monoklonální protilátky obecně a specificky nárokované v WO 98/35958 (popisující sloučeniny vzorce I), WO 00/09495, WO 00/27820, WO 00/59509, WO 98/11223, WO 00/27819, WO 01/55114, WO 01/58899 a EP 0 769 947; ty, jaké jsou popsány v pracech M. Prewett aj . , v Cancer Research 59 (1999) 5209-5218, F. Yuan aj., v Proč. Nati. Acad. Sci. USA, vol. 93, str. 14765-14770, prosinec 1996, Z. Zhu aj., v Cancer Res. 58,1998, 3209-3214, a J. Mordenti aj., v Toxicologic Pathology, vol. 27, no. 1, str. 14-21, 1999; v WO 00/37502 a WO 94/10202; Angiostatin™, popsaný v M. S. O'Reilly aj., Cell 79,1994, 315-328; a Endostatin™, popsaný M. S. O'Reilly aj . , Cell 88,1997, 277285; sloučeniny, které snižují aktivitu EGF jsou zejména ty sloučeniny, které inhibují EGF receptor, zejména aktivitu EAG receptoru tyrozin kinázy a sloučeniny, které se váží na - EGF, a jsou to především ty sloučeniny obecně a specificky nárokované v WO 97/02266 (popisující sloučeniny vzorce IV), EP 0 564 409, WO 99/03854, EP 0 520 722, EP 0 566 226, EP 0 787 722, EP 0 837 063, WO 98/10767, WO 97/30034, WO 97/49688, WO 97/38983 a zejména WO 96/33980; sloučeniny, které snižují aktivitu c-Src zahrnují, avšak bez omezení, ty sloučeniny, které inhibují aktivitu c-Src proteinu tyrozin kinázy, jak je definováno níže a interakci inhibitorů na SH2, jako jsou to ty, které jsou nárokovány v W097/07131 a W097/08193; sloučeniny, které inhibují aktivitu c-Src proteinu tyrozin kinázy zahrnují, ale bez omezení sloučeniny, které patří ke strukturním skupinám pyrrolopyrimidinů, zejména pyrrolo[2,3d]pyrimidinů, purinů, pyrazopyrimidinů, zejména pyrazo[3,4-d]pyrimidinů, pyrazopyrimidinů, zejména pyrazo[3,4-d]pyrimidinů a pyridopyrimidinů, obzvláště pyrido[2,3-d]58 • « · · · * · • * · t ♦ • » · · w ♦ · · · · · ··· ««· ·· ·· pyrimidinů. S výhodou se tento výraz týká těch sloučenin, které jsou nárokovány v WO 96/10028, WO 97/28161, W097/32879 a W097/49706; anti-angiogenních sloučenin, které mají jiné mechanismy účinku než je účinek snižující aktivitu protein kinázy, včetně, ale bez omezení jako má například thalidomid (THALOMID), SU5416, a celecoxib (Celebrex).

Výraz agonist gonadorelinu, jak je zde použit zahrnuje, avšak bez omezení, látky jako je abarelix, goserelin a goserelin acetát. Goserelin je nárokován v US 4,100,274 a může se aplikovat, například ve formě jaká je na trhu pod obchodním názvem ZOLADEX™. Abarelix se může formulovat například postupem nárokovaným US 5,843,901.

Výraz anti-androgennní jak je zde použit, avšak bez omezení, se týká bicalutamidu (CASODEX™) , který se může formulovat například postupem nárokovaným v US 4,636,505.

Výraz bengamid se týká bengamidů a jejich derivátů, které mají antiproliferativní vlastnosti a zahrnují, ale bez omezení, sloučeniny nárokované v příkladu 1 WOÓO/29382.

Výraz bisfosfonáty jak je zde použit, avšak bez omezení, zahrnuje etridonovou kyselinu, clodronovou kyselinu, tiludronovou kyselinu, pamidronovou kyselinu, alendronovou kyselinu, ibandronovou kyselinu, risedronovou kyselinu a zoledronovou kyselinu. Etridonová kyselina se může aplikovat například ve formě jaká je na trhu pod obchodním názvem DIDRONEL™. Clodronová kyselina se může aplikovat, například ve formě jaká je na trhu pod obchodním názvem BONEFOS™. Tiludronová kyselina se může aplikovat, například

Y,·

• · · · · ve formě jaká je na trhu pod obchodním názvem SKELID™. Pamidronová kyselina se může aplikovat, například ve formě jaká je na trhu pod obchodním názvem AREDIA™. Alěndronová kyselina se může aplikovat, například ve formě jaká je na trhu pod obchodním názvem FOSAMAX™. Ibandronová kyselina se může aplikovat, například ve formě jaká je na trhu pod obchodním BONDRANAT™. Risedronová kyselina se může aplikovat, například ve formě jaká je na trhu pod obchodním názvem ACTONEL™. Zoledronová kyselina se může aplikovat, například ve formě jaká je na trhu pod obchodním názvem ZOMETÁ™.

Trastuzumab se může aplikovat, například ve formě jaká je na trhu pod obchodním názvem HERCEPTIN™.

Pro léčení AML, se sloučeniny obecného vzorce mohou použít v kombinaci se standardními terapiemi leukemie, zejména v kombinaci s terapiemi používanými pro léčení AML. Sloučeniny obecného vzorce I se mohou aplikovat v kombinaci s inhibitory farnesyl- transferázy a/nebo jinými látkami používanými pro léčení AML, jako je Daunorubicin, Adriamycin, Ara-C, VP-16, Teniposid, Mitoxantron, Idarubicin a Carboplatinum.

Struktura aktivních látek je identifikována kódovými čísly, obecné a obchodní názvy se mohou vybrat z aktuálního vydání standardního kompedia The Merck Index nebo z databazí, například Patents International (například IMS World Publications).

Výše zmíněné sloučeniny, které se mohou použít v kombinaci se sloučeninami obecného vzorce I se mohou připravit postupem popsaným ve výše uvedených dokumentech.

PŘÍKLADY PROVEDENÍ VYNÁLEZU

Následující příklady slouží pro objasnění vynálezu, aniž by jeho rozsah jakýmkoli způsobem omezovaly.

Teploty jsou uvedeny ve stupních Celsia. Pokud není uvedeno jinak, reakce se provádějí při teplotě místnosti.

Podmínky analytické HPLC:

Stupeň 1: Lineární gradient během 14 min. směsí MeCN/0,1% TFA a H₂O/0,l% TFA od 1:4 do 1:0 a 5 min při 1:0, detekce při 215 nm, průtok 1,0 ml/min. Kolona: Nucleosil C18-kolona (250 x 4,6 mm, 5 pm, 100 A) .

Stupeň 2: Lineární gradient během 7 min. směsí MeCN/0,09% TFA a H₂0/0,l % TFA od 1:49 do 1:0 a 3 min při 1:0, detekce při 215 nm, průtok 2,0 mí/min. Kolona: Nucleosil C18-kolona (250 x 4,6 mm, 5 m, 100 A).

Krátce : Lineární gradient během 5 min. směsi MeCN/0,1 % TFA a H₂0/0,l% TFA od 1:4 do 1:0 a 1 min. při 1:0, detekce při 215 nm, průtok 1,0 ml/min. Kolona: Nucleosil C18-kolona (70 x 4 mm, 3 m, 100 A).

Stupeň 25: isokraticky během 25 min. směsí MeCN/0,1 % TFA a H₂O/0,l% TFA 1:1, detekce při 215 nm, průtok 1,0 ml/min. Kolona: Nucleosil C18-kolona (250 x 4,6 mm, 5 m, 100 A).

Zkrácené formy a zkratky mají následující významy:

«ř·»

aqu. vodný

S-MS elektron sprej-hmotová spektrometrie h hodiny (s)

Me methyl min minuty (s)

T.t. teplota tání

RT teplota místnosti

TFA trifluoroctová kyselina

THF tetrahydrofuran (destilovaný nad Na/benzophenonem) t_R retenční čas v-.objem

Příklad 1

K roztoku, 3,84 g (7,25 mmol) cis-2-{3-[4-amino-5-(3benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-isoindol-l,3-dionu v 100 ml suchého ethanolu se přikape v atmosféře argonu při teplotě místnosti 3,75 g (3,64 ml; 74,96 mmol) hydrazin monohydrátu. .Po 2 hodinách, kdy není ještě veškerý výchozí materiál rozpuštěný, se.přidá další 1,6 ml hydrazin monohydrátu (celkové množství: 14,8 ekvivalentu). Reakce je ukončena po 20 hodinách. Bezbarvá sraženina se odfiltruje a promyje ethanolem. Filtrát se odpaří k suchu a surová sloučenina se čistí chromatografií na silikagelu (dichlormethan : methanol : vodný koncentrovaný amoniak = 90: 10 : 1) a získá se cis-7-(3-aminomethyl-cyklobutyl)-5-(3benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin. Analytická HPLC: t_R = 7,47 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o = 400;

¹H-NMR (CDC1₃) : 8,31/s (1H) ; 7,3-7,5/m (6H) ; 7,12/s (1H);

* · · · · ·

7,05-7,08/d (2H); 6,99/m (1H); 5,17/m (1H); 5,14/s (2H);

5,04/široký s (2H); 2,87/d (2H); 2,75-2,65/m (2H); 2,2-2,1/m (2H); 1,55/široký s (2H) .

Stupeň 1.1: K roztoku 3,5 g (8,74 mmol) cis-{3-[4-amino-5-(3benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutyl}methanolu, který se připraví postupem popsaným v příkladu 47(b) patentu WO 97/28161, v 70 ml suchého tetrahydrofuranu se přidá v atmosféře argonu 2,75 g (10,5 mmol) trifenylfosfinu a 1,54 g (10,5 mmol) ftalimidu; načež se přikape 1,9 g (1,71 ml; 10,5 mmol) diethyl azodikarboxylátu (96%), roztok se zahustí k suchu a surová sloučenina se čistí rychlou chromatografií (ethylacetát) a získá se cis-2-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxyfenyl) -pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}isoindol-1,3-dion. Analytická HPLC: t_R = 11,96 min (gradient 1) ; ES-MS: m/e_o = 529,9.

Příklad 2:

K roztoku 4,15 g (7,83 mmol) trans-2-{3-[4-amino-5-(3benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl }-isoindol-1,3-dionu v 100 ml bezvodého ethanolu se přikape při teplotě místnosti v atmosféře argonu 5,87 g (5,7 ml; 117,5 mmol) hydrazin monohydrátu. Po 20 minutách se veškerý výchozí materiál rozpustí a reakce se dokončí 20 hodinovým mícháním při teplotě místnosti. Bezbarvá sraženina se odfilruje a promyje ethanolem. Filtrát se odpaří k suchu a surová sloučenina se čistí chromatograpfií na silikagelu (dichloromethan : methanol : NH₄0H vod. = 90 : 10 : 1) a získá se trans-7-(3-aminomethyl-cyklobutyl)-5-(3-benzyloxy-fenyl) 7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin.

Analytická HPLC: t_R = 7,50 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o = ¹H-NMR (CDC1₃) : 8,30/s (1H); 7,3-7,5/m (6H) ; 7,20/s (1H) ;

00;

·«·· · · • · ·

7,05-7,15/d (2H); 6,99/m (1H); 5,41/m (1H) ; 5,14/s (2H).;

5,04/široký s (2H); 2,98/d (2H); 2,54-2,69/m (2H); 2,35-2,54/m (3H); 1,73/širokýs(2H).

Stupeň 2.1: K roztoku 5 g (12,48 mmol) trans-{3-[4-amino-5(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutyl}-methanolu, který se příkladu 47(b) patentu WO postupem popsaným v v 100 ml bezvodého pripravi 97/28161, tetrahydrofuranu se přidá v atmosféře argonu 4,91 g (18,72 mmol) trifenylfosfinu a 2,75 g (18,7 mmol) of ftalimidu, načež se přikape 3,36 g (3,02 ml; 18,7 mmol) diethyl azodikarboxylátu (96%). Reakční směs se míchá 27 hodin při teplotě místnosti, načež se zahustí k suchu a surová sloučenina se čistí rychlou chromatografií (ethylacetát) a získá se trans2-{ 3-[4-amino-5-(3-benzyloxyfenyl)-pyrrolo-[2,3-d]pyrimidin-7yl]-cyklobutylmethyl}-isoindol-1,3-dion.

Analytická HPLC: t_R = 12,12 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o = 529, 9.

Příklad 3:

K roztoku 45 mg (0,11 mmol) cis-3-[4-amino-5-(3benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutankarboxylové kyseliny v 2 ml N,N-dimethylformamidu se přidá 36 mg (0,12 mmol) O-(1,2-dihydro-2-oxo-l-pyridyl)-1,1,3,3-tetramethyluronium tetrafluorborátu a 39 μΐ (0,23 mmol) di-isopropylethylaminu, načež se přidá 40 μΐ 5,6 M roztoku dimethylaminu. Roztok se míchá 15 minut při teplotě místnosi a pak se zpracuje rozdělením mezi vodu a ethylacetát. Organická fáze se vysuší síranem hořečnatým a zahuštěním ve vakuu se získá dimethylamid cis-3-[4—amino—5—(3-benzyloxy-fenyl)—pyrrolo— [2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutankarboxylové kyseliny.

Analytická HPLC: t_R = 6,81 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o = 442,0.

Stupeň 3.1 : Směs methylesteru cis/trans-3-[4-amino-5-(3benzyloxy-fenyl)-pyrrolo [2,3—d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutankarboxylové kyseliny se připraví postupem popsaným v příkladu 47 (a) patentu WO 97/28161. Methylester cis-3-[4-amino-5-(3benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutankarboxylové kyseliny se izoluje z cis/trans směsi chromatografií na silikagelu (t-butyl-methylether:ethylacetát 1:1),. Analytická HPLC: t_R = 10,59 min (gradient 1); ES-MS m/e_o=429.

Stupeň 3.2: 0,1 g (0,23 mmol) methylesteru cis-3-[4-amino-5(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutankarboxylové kyseliny se rozpustí v 1,8 ml tetrahydrofuranu/1 M LiOH (1 : 1, obj./obj.). Po 15 minutovém míchání při teplotě místnosti se přidáním 2N HC1 upraví pH na hodnotu 6 a odfiltrováním suspense se získá cis-3-[4-amino-5-(3-benzyloxyfenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutankarboxylová kyselina.

Analytická HPLC: t_R - 6,61 min (gradient 2); ES-MS: m/e₀ 415,0.

Příklad 4

Dimethylamid trans-3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo [2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutankarboxylové kyseliny se připraví postupem podle příkladu 3 vycházeje z methylesteru trans-3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutankarboxylové kyseliny [analytická HPLC: t_R= 10,71 min (gradient 1); ES-MS m/e₀ = 429], který se oddělí z cis/trans směsi (příklad 47 (a) patentu WO97/28161) chromato65

0 0 9 * • · 0 99 99 '0 9 9 9 ·

000000 · ·

0 0 ·' • 099 0 000 099 chromatografií na silikagelu (t-butyl-methyl-ether : ethylacetát =1:1).

Analytická HPLC: t_R= 6,90 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o442,0.

Příklad 5

Methylamid cis-3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutankarboxylové kyseliny se připraví postupem podle příkladu 3, použitím 8,03 M roztoku methylaminu v ethanolu.

Analytická HPLC : t_R = 6,55 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

428,1.

Příklad 6

Methylamid trans-3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutankarboxylové kyseliny se připraví postupem podle příkladu 3 z trans-3-[4-amino-5(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutankarboxylové kyseliny použitím 8,03 M roztoku methylaminu v ethanolu.

Analytická HPLC: t_R = 6,60 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

428,1.

Příklad 7

Roztok 42 mg (0,095 mmol) dimethylamido cis-3-[4-amino-5(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutankarboxylové kyseliny v 2 ml bezvodého tetrahydrofuranu se při teplotě 0° C přikape k 10 mg lithiumaluminiumhydridu suspendovanému v 2 ml bezvodého tetrahydrofuranu. Reakční směs se pomalu přes noc ohřeje na teplotu místnosti. Pro • · ··

zpracování se reakční směs ochladí na 0°C, načež se přidá voda a pak 15 % roztok hydroxidu sodného. Roztok se rozdělí mezi vodu a ethylacetát. Vysušením organické fáze síranem hořečnatým, zahuštěním ve vakuu a čištěním středně tlakou kapalinovou chromatografií se získá cis-5-(3-benzyloxy-fenyl)7- (3-dimethylaminomethyl-cyklobutyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4-yl-amin.

Analytická HPLC: t_R = 5,98 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

428,1.

Příklad 8 trans-5- (3-Benzyloxy-fenyl) -7- (3-dimethylaminomethylcyklobutyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin se připraví postupem popsaným v příkladu 7 vycházeje z dimethylamidu trans-3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl]-cyklobutankarboxylové kyseliny.

Analytická HPLC: t_R = 6,00 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

428.1.

Příklad 9 cis-5-(3-Benzyloxy-fenyl)-7-(3-methylaminomethyl-cyklobutyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin se připravuje postupem popsaným v příkladu 7 vycházeje z methylamidu cis-3-[4amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklobutankarboxylovékyseliny.

Analytická HPLC: t_R = 5,96 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

414.1.

Příklad 10 trans-5- (3-Benzyloxy-fenyl) -7- (3-methylaminomethyl-

• ·· ·· ‘ cyklobutyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin se připravuje postupem podle příkladu 7 vycházeje z methylamidu trans-3-[4amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklobutankarboxylové kyseliny.

Analytická HPLC: t_R = 5,95 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

414,1.

Příklad 11

K roztoku 110 mg (0,275 mmol) trans-7-(3-aminomethylcyklobutyl)-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin4-yl-aminu v 5 ml acetonitrilu se přidá 72 mg (0,230 mmol N,N'-bis-tect-butoxykarbonyl-l-guanylpyrazolu (Advanced ChemTech Europe, Machelen, Belgium). Po 16 hodinách při teplotě místnosti se reakční směs zředí 50 ml ethylacetátu a promyje se vodou. Vodné fáze se vylejí a organická fáze se vysuší síranem hořečnatým a odpaří k suchu. Odparek se rozpustí v 5 ml kyseliny mravenčí a roztok se míchá 1 hodinu při teplotě místnosti. Surová směs se čistí střednětlakou kapalinovou chromatografií a získá se trans-N-{3-[4-amino-5- (3-benzyloxyfenyl) -pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklo-butylmethyl}guanidin.

Analytická HPLC: t_R = 6,12 min (gradient 2); ES-MS:

m/e_o=442,0.

Příklad 12 cis-N-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-guanidin se připraví postupem podle příkladu 11 použitím cis-7-(3-aminomethyl-cyklobutyl)-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu.

Analytická HPLC: t_R = 6,07 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

442,0.

Příklad 13

K roztoku 50 mg (0,125 mmol) trans-7-(3-aminomethylcyklobutyl) -5- (3-benzyloxy-fenyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin4-yl-aminu v 2 ml bezvodého dichlormethanu se přidá při teplotě 0° C a v atmosféře argonu 10 μΐ (0,131 mmol) methansulfochloridu a 44,1 μΐ (0,313 mmol) triethylaminu. Po 20 hodinách se reakční směs rozdělí mezi vodu a dichlormethan. Surový produkt se čistí chromatografií na silikagelu (ethylacetát : methanol = 9 : 1) a získá se trans-N-{3-[4amino-5- (3-benzyloxy-fenyl) -pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-7-yl] cyklobutylmethyl}-methansulfonamid.

Analytická HPLC: t_R = 9,66 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o = 478,0.

Příklad 14 cis-N- { 3- [4-Amino-5- (3-benzyloxy-fenyl) -pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl}-methansulfonamid se připraví postupem podle příkladu 13 použitím cis-7-(3-aminomethylcyklobutyl) -5- (3-benzyloxy-fenyl) -7H-pyrrolo- [2,3-d] pyrimidin4-yl-aminu.

Analytická HPLC: t_R = 6,84 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o = 478,0.

Příklad 15 trans-N-{ 3- [4-Amino-5- (3-benzyloxy-fenyl) -pyrrolo [2,3d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl }-4-methoxy-benzensulfon-

amid se připraví postupem popsaným v příkladu 13 použitím pmethoxyfenylsulfochloridu.

Analytická HPLC: t_R = 11,1 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o = 569, 9.

Příklad 16 trans-N-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-4-methyl-benzensulfon-amid se připraví postupem podle příkladu 13 použitím ptoluensulfochloridu.

Analytická HPLC: t_R = 11,44 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o = 554.

Příklad 17 trans-N-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-4-nitro-benzensulfonamid se připraví postupem podle příkladu 13 použitím pnitrofenylsulfochloridu.

Analytická HPLC: t_R = 11,25 min (gradient 1); ES-MS: m/e =

584,9.

Příklad 18

Sůl trans-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-amidu s kyselinou propan-2-sulfonovou se připraví postupem podle příkladu 13 pužitím 2-propansulfochloridu.

Analytická HPLC: t_R= 11,14 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o =

505,9.

• 4 4·»4 • 4

Příklad 19

Sůl ethansulfonové kyseliny s trans-{3-[4-amino-5-(3benzyloxy-fenyl) -pyrrolo [2,3d]pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl}-amidem se připraví postupem popsaným v příkladu 13 použitím ethansulfochloridu.

Analytická HPLC: t_R = 10,77 min, (gradient 1); EMS: m/e_o= 492,0.

Příklad 20

N-dimethyl-sulfamido trans-{3- [4-amino-5- (3-benzyloxyfenyl) -pyrrolo [2,3d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl} -amid se připraví postupem podle příkladu 13 použitím dimethyl sulfamoylchloridu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 7,18 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

506, 9.

Příklad 21

N-dimethylsulfamido cis-{3-[4-amino-5- (3-benzyloxy-fenyl) -pyrrolo [2,3d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl}-amid se připraví postupem podle příkladu 13 použitím cis-7-(3aminomethyl-cyklobutyl) -5- (3-benzyloxy-fenyl) -7H-pyrrolo- [2,3d]pyrimidin-4-yl-aminu a dimethylsulfamoylchloridu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: tR = 7,15 min (gradient 2); ES-MS: m/e₀ =

506, 9.

Příklad 22:

K roztoku 50 mg (0,125 mmol) trans—7—(3—aminomethyl— cyklobutyl) -5- (3-benzyloxy-fenyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin·· ···· *»

4-ylaminu v 2 ml bezvodého dichlormethanu se při teplotě místnosti přidá 12 μΐ (0,150 mmol) methyl chloroformiátu (Fluka, Buchs, Švýcarsko) a 21 μΐ (0,150 mmol) triethylaminu. Reakční směs se míchá 2 hodiny při teplotě místnosti, načež se zpracuje rozdělením mezi vodu a ethylacetát.

Organická fáze se vysuší síranem hořečnatým a zahuštěním ve vakuu se získá methylester trans-{3-[4-amino-5-(3-benzyl-oxyfenyl)-pyrrolo[2,3d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutyl-methyl}karbamové kyseliny.

Analytická HPLC: t_R = 7,08 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o = 458,0.

Příklad 23

Methylester cis-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)pyrrolo[2,3-d]-pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-karbamové kyseliny se připraví postupem podle příkladu 22 použitím cis7-(3-aminomethyl-cyklobutyl)-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7Hpyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-aminu.

Analytická HPLC: t_R = 7,03 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o = 458,0.

Příklad 24

2-Methoxy-ethyl ester trans- {3-[4-amino-5-(3-benzyl-oxyfenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}karbamové kyseliny se připraví postupem popsaným v příkladu 22 použitím 2-methoxyethyl chlorformiátu (TCI America, Portland, OR, U. S. A.).

Analytická HPLC: t_R = 7,04 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o = 502,0.

Příklad 25

2-Methoxy-ethyl ester cis- {3-[4-mino-5-(3-benzyloxyfenyl) -pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl}karbamové lyseliny se připraví postupem podle příkladu 22 použitím cis-7-(3-aminomethyl-cyklobutyl)-5-(3-benzyloxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-aminu a 2-methoxyethyl chlorformiátu (TCI America, Portland, OR, U. S. A.).

Analytická HPLC: t_R = 7,02 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o = 502,0.

Příklad 26

K roztoku 50 mg (0,125 mmol) trans-7-(3-aminomethylcyklobutyl) -5-(3-benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin4-ylaminu in 4 ml bezvodého acetonitrilu se přidá při teplotě místnosti 16 μΐ (0,2 mmol) ethyl isokyanátu (Fluka, Buchs Švýcarsko). Po 16 hodinovém míchání při teplotě místnosti se reakčni směs zpracuje rozdělením mezi vodu a ethylacetát. Organická fáze se vysuší síranem hořečnatým a odpařením k suchu se získá trans-1- [3- [4-amino-5-(3-benzyl-oxy-fenyl)pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-ethylmočovina..

Analytická HPLC: t_R = 6,77 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o = 471,1.

Příklad 27 cis-{3-[4-Amino-5- (3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl}-3-ethyl-močovina se připraví postupem podle příkladu 26 použitím cis-7-(3-aminomethylcyklobutyl) -5-(3-benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo- [2,3d]pyrimidin-4-ylaminu.

·· · • · · • · © ·· 9999 ·©·· ·

Analytická HPLC: t_R = 6,71 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o = 471,0.

Příklad 28 trans-l-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-propyl-močovina se připraví postupem podle příkladu 26 použitím n-propyl isokyanátu (Fluka,Buchs, Švýcarsko) .

Analytická HPLC: t_R = 6,39 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

485,0.

Příklad 29 cis-l-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl]-3-propyl-močovina se připraví postupem podle příkladu 26 použitím cis-7-(3-amino-methylcyklobutyl)-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-4-ylaminu a n-propyl isokyanátu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 6,33 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

484,9.

Příklad 30 trans-1-3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-isopropyl-močovina se připraví postupem popsaným v příkladu 26 použitím 2-propyl-isokyanátu,(Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R= 6,28 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

485,0.

·· »··· ·· · • · · ·· ·· · · · ··· · · · · · • ···· · · · · · · · • · · · ···· *··· · ··· ··· ·♦ ··

Příklad 31 cis-l-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl}-3-isopropyl-močovina se připraví postupem podle příkladu 6 použitím cis-7-(3-aminomethyl-cyklobutyl)-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-ylaminu a 2-propyl-isokyanátu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 6,37 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

484,9.

Příklad 32 trans-l-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-butyl-močovina se připraví postupem popsaným v příkladu 26 použitím n-butyl isokyanátu (Fluka,Buchs,Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 6,53 min (gradient 2); ES-MS: m/e₀ = 499,0.

Příklad 33 cis-1-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-butyl-močovina se připraví postupem popsaným v příkladu 26 použitím cis-7-(3aminomethyl-cyklobutyl)-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu a n-butyl-isokyanátu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 6,54 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o = 499,0.

Λ*“? 1'

Ί5

Příklad 3.4 trans-1-3-[4-Amino-5- (3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl]-3-terc-butyl-močovina se připraví postupem popsaným v příkladu 26 použitím terc-butylisokyanátu (Fluka, Buchs, Švýcarsko). .

Analytická HPLC: tR = 6,60 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o = 499,0.

Příklad 35 cis-l-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl]cyklobutylmethyl}-3-terc-butyl-močovina se připraví postupem podle příkladu 26 použitím cis-7-(3-aminomethyl-cyklobutyl)-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-4-yl-aminu a terc-butyl-isokyanátu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 6,61 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

499,0.

Příklad 36 trans-l-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl}-3-benzyl-močovina se připra-ví postupem podle příkladu 26 použitím benzyl-isokyanátu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 6,88 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

532,9.

Příklad 37 trans-1-3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl}-3- (3-methyl-benzyl) -močo• · vina se připraví postupem popsaným v příkladu 26 použitím 3methylbenzyl isokyanátu (Aldrich, Buchs, Švýcarsko). Analytická HPLC: t_R = 7,50 min (gradient 2); ES-MS: m/e₀ =

546,9.

Příklad 38 cis-l-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl) -pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-(3-methyl-benzyl)-močovina se připraví postupem popsaným v příkladu 26 použitím cis-7-(3aminomethyl-cyklobutyl)-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo-[2,3d]pyrimidin-4-yl-aminu a 3-methyl-benzyl isokyanátu (Aldrich, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 7,45 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

546, 9.

Příklad 39 cis-l-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-(4-methoxy-benzyl)močovina se připraví postupem popsaným v příkladu 26 použitím cis-7-(3-aminomethyl-cyklobutyl)-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7Hpyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4 ylaminu a 4-methoxybenzyl isokyanátu (Aldrich, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 7,21 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

562, 9.

Příklad 40

K roztoku 41 mg (0,075 mmol) trans-{3-[4-amino-5-(3benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl } -3- (2-bromethyl) -močoviny, která se připraví postupem

podle příkladu 26 použitím 2-bromethyl-isokyanátu (Aldrich, Buchs, Švýcarsko), v 5 ml ethanolu se přidá 33 μΐ (0,375 mmol) morfolinu. Reakční směs se zahřívá 3 hodiny k varu a surová směs se čistí středně tlakou kapalinovou chromatografií a získá se trans-l-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-(2-morfolin-4-ylethyl)-močovina.

Analytická HPLC: t_R = 6,12 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

555,9.

Příklad 41 cis-l-{3-[4-Amino-5- (3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-(2-morfolin-4-yl-ethyl)močovina se připraví postupem popsaným v příladu 40 použitím ci.s-7- (3-aminomethyl-cyklobutyl) -5- (3-benzyloxy-fenyl) -7Hpyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-aminu jako výchozího materiálu. Analytická HPLC: t_R = 6,04 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

555,9.

Příklad 42 trans-1-3-[4-Amino-5- (3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl}-3- (2-dimethylamino-ethyl) močovina se připraví postupem popsaným v příkladu 40 použitím dimethylaminu (5,6 M roztok v ethanolu; Fluka, Buchs, (Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 6,08 min (gradient 2); ES-MS: m/e₀ = 514,0.

Příklad 43 cis-l-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3- (2-dimethylamino-ethyl) • · · « · · · · močovina se připraví postupem popsaným v příkladu 40 použitím cis-7-(3-aminomethyl-cyklobutyl)-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7Hpyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-aminu jako výchozího materiálu a dimethylaminu (5,6 M roztok v ethanolu; (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 5,98 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

514,0.

Přiklad 44 trans-l-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-(3-morfolin-4-yl-propyl)močovina se připraví postupem popsaným v příkladu 40 použitím

3-chlorpropyl isokyanátu (Aldrich, Buchs, Švýcarsko). Analytická HPLC: t_R = 6,12 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

569, 9.

Příklad 45 cis-l-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutyl-methyl}-3-(3-morfolin-4-yl-propyl)močovina se připraví postupem podle příkladu 40 použitím 7—(3— aminomethyl-cyklobutyl)-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-aminu a 3-chlorpropyl isokyanátu. Analytická HPLC: t_R = 5,93 min (gradient 2) ; ES-MS: m/e₀ = 570,0.

Příklad 46 trans-l-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutyl-methyl}-3-(3-dimethylamino-propyl)močovina se připraví postupem popsaným v příkladu 40 použitím 3-chlorpropyl-isokyanátu a dimethylaminu.

Analytická HPLC: t_R = 6,09 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

528,0.

ΊΟ

Příklad 47 cis-l-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-(3-dimethylamino-propyl)močovina se připraví postupem popsaným v příkladu 40 použitím cis-7-(3-aminomethyl-cyklobutyl)-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7Hpyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-aminu, 3-chlorpropyl-isokyanátu a dimethylaminu.

Analytická -HPLC: t_R = 5,95 min (gradient 2); ES-MS: m/e₀ = 528,0.

Příklad 48

K roztoku 50 mg (0,125 mmol) trans-7-(3-aminomethylcyklobutyl) -5-(3-benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin4- yl-aminu v 5 ml methanolu se přidá 45 mg (0,561 mmol) kyanátu draselného (Aldrich, Buchs, Švýcarsko). Reakční směs se zahřívá jeden týden k varu pod zpětným chladičem. Po zahuštění k suchu se odparek čistí rychlou chromatografií (dichlormethan : methanol = 9:1) a získá se trans-{3-[4-amino5- (3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutyl-methyl}-močovina.

Analytická HPLC: t_R = 6,43 min, (gradient 2); ES-MS: m/e₀ = 443,0.

Příklad 49 cis-{3-[4-Amino-5- (3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutyl-methyl}-močovina se připraví postupem jaký je popsaný v příkladu 48 použitím cis-7-(3aminomethyl-cyklobutyl)-5- (3-benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-aminu jako výchozího materiálu. Analytická HPLC: t_R =

442,9.

6,37 min (gradient 2); ES-MS: m/e₀ ·· ····

Příklad 50

K roztoku 50 mg (0,125 mmol) trans-7-(3-aminomethylcyklobutyl) -5- (3-benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-aminu v 2 ml bezvodého N,N-dimethylformamidu se přidá 13 μΐ (0,138 mmol) acetanhydridu (Fluka, Buchs,

Švýcarsko). Reakční směs se míchá 1 hodinu při teplotě místnosti a zpracuje se pak roztřepáním mezi vodu a ethylacetát. Organická fáze se vysuší síranem hořečnatým a odpařením k suchu se získá trans-N-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxyfenyl) -pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklobutyl-methyl}acetamid.

Analytická HPLC: t_R = 6,65 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o = 442,0.

Příklad 51 cis-N-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-acetamid se připraví postupem podle příkladu 50 použitím cis-7-(3-aminomethylcyklobutyl) -5-(3-benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin4-yl-aminu.

Analytická HPLC: t_R = 6,59 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o 442,0.

Příklad 52 trans-N-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-isobutyryl-amid se připravuje postupem popsaným v příkladu 50 použitím isobutyrylchloridu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 7,00 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

470,0.

Příklad 53 cis-N-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl}-isobutyrylamid se připraví postupem popsaným v příkladu 50 použitím cis-7-(3-aminomethylcyklobutyl)-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin4-ylaminu a isobutyrylchloridu (Fluka, Buchs, Švýcarsko). Analytická HPLC: t_R = 6,95 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

470,0.

Příklad 54 trans-N-{3-[4-Amino-5- (3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl}-2,2-dimethyl-propion-amid se připraví postupem popsaným v příkladu 50 použitím pivaloyl chloridu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 7,30 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o = 484,0.

Příklad 55 cis-N-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2, 3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl}-2,2-dimethyl-propionamid se připraví postupem podle příkladu 50 použitím cis-7-(3aminomethyl-cyklobutyl)-5- (3-benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-aminu a pivaloyl chloridu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 7,25 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o = 484,0.

Příklad 56 mg (0,1 mmol) trans-N-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxyfenyl) -pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl}-2chlor-acetamidu a 25 jíl (0,3 mmol) piperidinu v 5 ml ethanolu se zahřívají 2 hodiny k varu pod zpětným chladičem. Surová •0 ···· • · ·

9 9 9

0 · · · · 9 9 ·

099 ·· ·· reakční směs se čistí střednětlakou kapalinovou chromatografií a získá se trans-N-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutyl-methyl}-2-piperidin1-yl-acetamid.

Analytická HPLC: t_R = 6,17 min (gradient 2); ES-MS: m/e₀ = 525,0.

Stupeň 56.1

K suspenzi 210 mg (0,53 mmol) trans-7-(3-aminomethylcyklobutyl)-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin4-yl-aminu v 10 ml of acetonitrilu se přidá 49 μΐ (0,61 mmol) chloracetyl chloridu (Fluka, Buchs, Švýcarsko) a 85 μΐ (0,61 mmol) triethylaminu. Roztok se míchá 5 hodin při teplotě ;místnosti. Po čištění surové směsi střednětlakou kapalinovou chromatografií se získá trans-N-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxyenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutyl-methyl}-2chlor-acetamid.

Analytická HPLC: t_R - 6,94 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

476,0.

Příklad 57 cis-N-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-2-piperidin-l-yl-acetamid se připraví použitím postupu podle příkladu 56 z výchozího cis-7(3-aminomethyl-cyklobutyl)-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-aminu.

Analytická HPLC: t_R = 6,14 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

525,0.

Příklad 58 trans-N-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]·· ···· • ® · pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-2-morfolin-4-yl-acetamid se připraví postupem podle příkladu 56 použitím using morfolinu. Analytická HPLC: t_R = 6,03 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

526, 9.

Příklad 59 cis-N-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-2-morfolin-4-yl-acetamid se připraví postupem podle příkladu 56 použitím výchozího cis-7(3-aminomethyl-cyklobutyl)-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7Hpyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-aminu a morfolinu.

Analytichá HPLC: t_R = 5,98 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o = 527,0.

Příklad 60 trans-N-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-2-(4-methyl-piperazin-l-yl)acetamid se připraví postupem popsaným v příkladu 56 použitím výchozího 1-methyl-piperazinu.

Analytická HPLC: t_R = 5,87 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o = 539, 9.

Příklad 61 cis-N-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl)-2-(4-methyl-piperazin-l-yl)acetamid se připraví postupem popsaným v příkladu 56 použitím jako výchozího materiálu cis-7-(3-aminomethyl-cyklobutyl)-5(3-benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-aminu a 1methyl-piperazinu.

Analytická HPLC: t_R = 5,83 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o = 539, 9.

• · ·

Příklad 62

Roztok 50 mg (0,09 mmol) 3-[4-amino-5-(3-benzyloxyfenyl) -pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethylesteru trans-toluen-4-sulfonové kyseliny v 1 ml morfolinu (Fluka, Buchs, Švýcarsko) se míchá 72 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odpaří k suchu a odparek se čistí rychlou chromatografií (ethylacetát : methanol : NH₄0H vod.=95:5:1) a získá se to provide trans-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7-(3-morfolin4-ylmethyl-cyklobutyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin. Analytická HPLC: t_R = 9,29 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o =

470,0.

Stupeň 62.1

200 mg (0,49 mmol) trans- {3-[4-amino-5-(3-benzyloxyfenyl) -pyrrolo[2,3d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutyl}-methanolu, připraveného postupem popsaným v příkladu 47 (b) patentu WO

97/28161, se rozpustí v 2 ml pyridinu a roztok se ochladí na -20° C. K tomuto roztoku se přidá 153 mg (0,8 mmol) ptoluensulfonylchloriu a reakční směs se nechá stát přes noc v mrazicím boxu při -20° C. Pak se přidá 10 ml ledové vody a směs se extrahuje studeným dichlormethanem. Vodná fáze se vyleje a organická fáze se promyje studenou směsí vodné 2N kyseliny sírové a vodou. Organická fáze se vysuší síranem hořečnatým a odpařením k suchu se získá 3-[4-amino-5-(3benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethylester trans-toluen-4-sulfonové kyseliny, která se bez dalšího čištění použije v následujícím stupni. Analytická HPLC: t_R = 13,09 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o =

554,9.

Příklad 63 trans-5-(3-Benzyloxy-fenyl)-7-(3-piperidin-l-ylmethyl• · cyklobutyl) -7H-pyrrolo [2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin se připraví postupem popsaným v příkladu 62 použitím piperidinu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 9,93 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o = 468,0.

Příklad 64 trans-5-(3-Benzyloxy-fenyl)-7-(3-pyrrolidin-l-yl-methylcyklobutyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin se připraví podle postupu popsaného v příkladu 62 použitím pyrrolidinu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 9,59 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o = 454,0.

Příklad 65 trans-5-(3-Benzyloxy-fenyl)-7-[3-(4-methyl-piperazin-lylmethyl)-cyklobutyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin se připraví postupem . popsaným v příkladu 62 použitím 1-methyl piperazinu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 5,68 min (gradient 2); ES-MS: m/e₀ =

483,3.

Příklad 66 mg (0,09 mmol) 3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutyl-methylesteru transtoluen-4-sulfonové kyseliny a 34 mg (0,225 mmol) adamantan-1ylaminu (Fluka, Buchs, Švýcarsko) v 1 ml N,N-dimethylformamidu se míchá 18 hodin při teplotě místnosti a 24 hodin při 60°C. Přidá se další podíl adamantan-l-yl-aminu (34 mg) a reakční směs se míchá dále 24 hodin při 120°C. Rozpouštědlo se odpaří k suchu a odparek se čistí rychlou chromatografií • · (ethylacetát : methanol : NH₄0H vod. =95 : 5:1) a získá se trans-7-[3-(adamantan-l-ylaminomethyl)-cyklobutyl]-5-(3benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin. Analytická HPLC: t_R = 11, 14 min (gradient 1); ES-MS: m/e₀ =

533,9.

Příklad 67 trans-l-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-piperidin-4-ol se připraví postupem popsaným v příkladu 62 použitím 4-hydroxypiperidinu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 8,52 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o =

484.2.

Příklad 68 trans-7-(3-Azepan-l-ylmethyl-cyklobutyl)-5-(3-benzyl-oxyfenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin se připraví postupem připraveným v příkladu 62 použitím hexamethylen-iminu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 9,49 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o =

482.3.

Příklad 69 trans-5-(3-Benzyloxy-fenyl)-7-[3-(2,5-dimethyl-pyrrolidin-l-ylmethyl)-cyklobutyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin se připraví postupem podle příkladu 62 použitím 2,5dimethylpyrrolidinu (cis/trans) (Brunswig Chemie, Basel, Švýcars-ko) .

Analytická HPLC: t_R = 9,38 min (gradient 1); ES-MS: m/e₀ =

482,2.

Příklad 70 trans-7-(3-Azetidin-l-yl-methyl-cyklobutyl)-5-(3benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin se připraví postupem popsaným v příkladu 62 použitím trimethyleniminu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 8,89 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o =

440,2.

Příklad 71 trans-l-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-piperidin-3-karboxamid se připraví postupem podle příkladu 62 použitím R,S-nipekotamidu (Aldrich, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 8,52 min (gradient 1); ES-MS: m/e₀ = 511,0.

Příklad 72 trans-5-(3-Benzyloxy-fenyl)-7-[3-(4-pyridin-2-yl-piperazin-l-yl-methyl)-cyklobutyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4yl-amin se připraví postupem podle příkladu 62 použitím 1- (2pyridyl)-piperazinu (Aldrich, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R - 8,15 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o=

546,2.

Příklad 73 trans-5-(3-Benzyloxy-fenyl)-7-(3-thiomorfolin-4-yl-methyl-cyklobutyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin se připraví postupem popsaným v příkladu 62 použitím thiomorfolinu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 9,26 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o =

486,2.

··

Příklad 74 trans-5-(3-Benzyloxy-fenyl)-7-[3-(2,6-dimethyl-mofolin-4yl-methyl)-cyklobutyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin se připraví postupem popsaným v příkladu 62 použitím cis/trans2,6-dimethylmorfolinu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 9,39 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o =

498.2.

Příklad 75 trans-(S)-l-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-pyrrolidin-2karboxamid se připraví postupem popsaným v příkladu 62 použitím L-prolinamidu (Aldrich, Buchs, Švýcarsko). Analytická HPLC: t_R = 8,56 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o =

497.2.

Příklad 76 cis-7-(3-Azepan-l-yl-methyl-cyklobutyl)-5-(3-benzyloxyfenyl) -7H-pyrrolo [2, 3d] pyrimidin-4-yl-amin se připraví postupem popsaným v příkladu 62 použitím cis- {3-[4-amino-5(3-benzyloxy-fenyl) -pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutyl}-methanolu, jako výchozího materiálu, který se připraví postupem popsaným v příkladu 47(b) patentu WO 97/28161, a hexamethyleniminu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 9,51 min (gradient 1); ES-MS: m/e₀ =

482.2.

Příklad 77 cis-l-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl}-piperidin-4-ol se připraví postupem popsaným v příkladu 76 použitím 4-hydroxypiperidinu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 8,36 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o =

484.2.

Příklad 78

Ethylester cis-4-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo [2, 3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-piperazin-1karboxylové kyseliny se připraví postupem popsaným v příkladu 7.6 použitím 1-ethoxykarbonylpiperazínu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 9,23 min (gradient 1); ES-MS: m/e_Q =

541.2.

Příklad 79 cis-5-(3-Benzyloxy-fenyl)-7-[3-(4-fenyl-piperazin-lylmethyl)-cyklobutyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin se připraví postupem popsaným v příkladu 76 použitím

1-fenyl-piperazinu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 10,24 min (gradient 1); ES-MS: m/e₀ =

545.1.

Příklad 80 cis-5-(3-Benzyloxy-fenyl)-7-[3-(4-methyl-piperazin-l-ylmethyl)-cyklobutyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin se připraví postupem popsaným v příkladu 76 použitím 1-methylpiperazinu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 7,87 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o =

483.2.

Příklad 81 cis-5-(3-Benzyloxy-fenyl)-7-(3-thiomorfolin-4-yl-methylcyklobutyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin se připraví • ·

postupem popsaným v příkladu 76 použitím 1-methylpiperazinu a thiomorfolinu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 9,08 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o =

486.1.

Příklad 82 cis-5-(3-Benzyloxy-fenyl)-7-[3-(2,6-dimethyl-morfolin-4ylmethyl)-cyklobutyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin se připraví postupem popsaným v příkladu 76 použitím cis/trans 2,6-dimethylmorfolinu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 9,27 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o =

498,2

Příklad 83 cis-(Rj—1—{3—[4—Amino—5— (3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutyl-methyl}-pyrrolidin-2karboxamid se připraví postupem popsaným v příkladu 76 použitím L-prolinamidu (Fluka, Buchs, Švýcarsko). Analytická HPLC: t_R = 8,53 min (gradient 1); ES-MS : m/e_o =

497.1.

Příklad 84 cis-1-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl}-piperidin-3-karboxamid se připraví postupem popsaným v příkladu 76 použitím D,Lnipekotamidu (Aldrich, Buchs, Švýcarsko) .

Analytická HPLC: t_R = 8,46 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o =

511.2.

Příklad 85 trans-N-{3-(4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]Žštít·.·

pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-2-ethoxy-acetamid se připraví z výchozího trans-7-(3-aminomethyl-cyklobutyl)-5-(3-benzyloxy-fenyl) -7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-aminu a ethoxyoctové kyseliny (Fluka, Buchs, Švýcarsko), postupem známým z literatury (M. Bodanszky v Principles of Peptide Synthesis, Akad.-Verlag, 1984).

Analytická HPLC: t_R = 7,07 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

486.2.

Příklad 86 trans-N-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl]-2-(2-methoxy-ethoxy)-acetamid se připraví z výchozího trans-7-(3-aminomethylcyklobutyl) -5-(3-benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin4-yl-aminu a 2-(2-methoxyethoxy)-octové kyseliny (Fluka,

Buchs, Švýcarsko) postupem známým z literatury (M. Bodanszky v Principles of Peptide Synthesis, Akad.-Verlag, 1984).

Analytická HPLC: t_R = 6,91 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

516.2.

Příklad 87 trans-l-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-methyl-močovina se připraví postupem podle příkladu 26, použitím výchozího methylisokyanátu (ChemService lne., West Chester, PA, USA.

Analytická HPLC: t_R = 6,55 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o = 457,0.

Příklad 88 cis-1-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl]-3-methyl-močovina se při92 ····

praví postupem popsaným v příkladu 26 z výchozího cis-7 (3aminomethyl-cyklobutyl)-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-aminu a methyl-isokyanátu (ChemService lne., West Chester, PA, U.S.A.).

Analytická HPLC: t_R = 6,49 min (gradient 2); ES-MS: m/e₀ = 456, 9.

Příklad 89

K suspenzi 0,2 g (0,5 mmol) trans-7-(3-aminomethylcyklobutyl) -5-(3-benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin4-yl-aminu v 5 ml acetonitrilu se přidá v atmosféře argonu 108 mg (0,65 mmol) 1,1-karbonyldiimidazolu (Fluka, Buchs,

Švýcarsko) a 628 μΐ (4,5 mmol) triethylaminu. Reakční směs se míchá 15 minut při teplotě místnosti, načež se přidá 414 μΐ (5,0 mmol) pyrrolidinu (Fluka, Buchs, Švýcarsko). Reakční směs se dále míchá 2,5 hodiny při teplotě místnosti, zahustí se k suchu a surová sloučenina se čistí středně tlakou chromatografií na obrácených fázích a získá se {3-[4-amino-5(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklobutylmethyl}-trans-pyrrolidin-l-karboxamid.

Analytická HPLC: t_R = 7,02 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

497.2.

Příklad 90 {3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-trans-piperidin-l-karboxamid se připraví postupem podle příkladu 89 použitím výchozího piperidinu (Fluka, Buchs, Švýcarsko) .

Analytická HPLC: t_R = 7,30 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

511.2.

····

Příklad 91 {3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl)-trans-morfolin-4-karboxamid se připraví postupem podle příkladu 89 použitím výchozího morfolinu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 6,72 min (gradient 2); ES-MS: m/e₀ 513.2.

Příklad 92 trans-3-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-!,1-dimethyl-močovina se připraví postupem podle příkladu 89 použitím výchozího dimethylaminu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 6,82 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

471.3.

Příklad 93 {3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-trans-4-methyl-piperazin-lkarboxamid se připraví postupem podle příkladu 89 použitím výchozího 1-methylpiperazinu.

Analytická HPLC: t_R = 6,01 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

526.2.

Příklad 94 trans-3-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-1,1-diethyl-močovina se připraví postupem podle příkladu 89 použitím výchozího diethylaminu.

Analytická HPLC: t_R = 7,22 min (gradient 2); ES-MS: m/e₀ =

499.2.

Příklad 95

K roztoku 0,2 g (0,5 mmol) trans-7-(3-aminomethylcyklobutyl) -5-(3-benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin4-ylaminu v 5 ml dichlormethanu se přidá 55,4 μΐ (0,5 mmol) 2bromethyl chlorformiátu (Fluka, Buchs, Švýcarsko) a 70 μΐ (0,5 mmol) triethylaminu. Po 2 hodinovém míchání při teplotě místnosti se roztok zahustí k suchu. Surová sloučenina se rozpustí v 5 ml acetonitrilu a přidá se 260 μΐ (2,5 mmol) diethylaminu (Fluka, Buchs, Švýcarsko). Reakční směs se zahřívá 16 hodin k varu a surový produkt se po zahuštění čistí středně tlakou kapalinovou chromatografií. Získá se 2ethylamino-ethylester trans-{ 3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl) pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutyl-methyl}-karbamové kyseliny.

Analytická HPLC: t_R = 6,27 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

543,3.

Příklad 96

2-Morfolin-4-yl-ethyl ester trans-{3-[4-amiňo-5-(3-benzyloxy-fenyl) -pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl } -karbamové kyseliny se připraví postupem podle příkladu 95 použitím výchozího morfolinu (Fluka, Buchs, Švýcarsko). Analytická HPLC: t_R = 6,18 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

557,2.

Příklad 97

2-(4-Methyl-piperazin-l-yl)-ethyl ester trans-{3-[4amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklobutylmethyl}-karbamové kyseliny se připraví postupem podle příkladu 95 použitím výchozího 1-methylpiperazinu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 5,88 min (gradient 2); ES-MS: m/e₀ 570.2.

Příklad 98

2-Dimethylamino-ethylester trans-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl }-karbamové kyseliny se připraví postupem podle příkladu 95 použitím výchozího dimethylaminu (Fluka, Buchs, Švýcarsko). Analytická HPLC: t_R = 6,14 min (gradient 2); ES-MS: m/e_o =

515.2.

Příklad 99

Ethylester trans-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-karbamové kyseliny se připraví postupem podle příkladu 22 použitím výchozího ethyl chlorformiátu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 7,32 min (gradient 2); ES-MS: m/e₀ =

472.2.

Příklad 100

Ethylester trans-4-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo [2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-piperazin-1karboxylové kyseliny se připraví postupem popsaným v příkladu 62 použitím výchozího 1-ethoxykarbonylpiperazinu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 9,25 min (gradient 1); ES-MS: m/e₀ =

541.2.

Příklad 101 cis-5-(3-Benzyloxy-fenyl)-7-(3-pyrrolidin-l-yl-methylcyklobutyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin se připraví postupem popsaným v příkladu 76 použitím výchozího pyrrolidinu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

sL.

Analytická HPLC: t_R = 9,01 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o =

454.2.

Příklad 102 cis-7- (3-Azetidin-l-ylmethyl-cyklobutyl) -5- (3-benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo [2, 3d] pyrimidin-4-yl-amin se připraví postupem popsaným v příkladu 76 použitím výchozího triethyleniminu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 8,80 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o =

440.2.

Příklad 103:

Methylester trans-3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6brom-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-7yl] -cyklobutan—karboxylové kyseliny. K 11 g (25,67 mmol) methylesteru trans-3-[4-amino-5(3-benzyloxy-fenyl) -pyrrolo [2,3-d]pyrimidin-7-yl] -cyklobutankarboxylové kyseliny (viz příklad 4) v 275 ml bezvodého N,Ndimethylformamidu, se po malých částech přidává 5,18 g (28,24 mmol) N-bromsukcinimidu. Roztok se míchá v temnu, v atmosféře argonu při teplotě místnosti 17 hodin. Rozpouštědlo se odpaří a odparek se čistí chromatografií na koloně silikagelu (rozpouštědla: hexan-ethylacetát 3:1). Další čištění se provádí krystalizaci z acetonitrilu.

Analytická HPLC: t_R = 3,61 min (zkrácený gradient); ES-MS: m/e_o = 506,9 a 508,9; t.t.: 124-125°C;

NMR (DMSO-d6): 8,18/s (1H), 7,25-7,5/několik multipletů (6H),

7,09/d (1H); 7,04/s (1H); 6,98/d (1H); 5,38/m (1H); 5,13/s (2H); 3,69/s (3H); 3,50/m (2H); 3,29/m (1H); 2,62/m (2H).

··· ··· ·· ·· ·· ·»· • · • · · • · • · · ·· ··

Příklad 104

Methylester trans-3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6methyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutankarboxylové kyseliny.

V zatavené trubici se 4,68 g (9,02 mmol) methylesteru trans-3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-brom-pyrrolo[2, 3-d] pyrimidin-7-yl]-cyklobutankarboxylové kyseliny připraveného podle příkladu 103, 2,08 g (1,8 mmol) tetrakistrifenylfosfin palladia a 53 ml (38,05 mmol) tetramethyl cínu (Fluka, Buchs, Švýcarsko) se zahřívá 30 hodin v atmosféře argonu v 20 ml bezvodého N,N-dimethylformamidu na teplotu lázně 100-105°C. Reakční směs se přefiltruje přes supercel (Hyflo Super Cel); Fluka, Buchs, Švýcarsko), a odparek se dokonale promyje N,Ndimethylformamidem. Temně zbarvený filtrát se odpaří při 60°C k suchu, odparek se rozpustí v horkém ethylacetátu a chromatografuje se na silikagelu (hexan-ethylacetát 25:75). Sloučenina uvedená v nadpisu se získá ve formě žlutých krystalů.

Analytická HPLC: Lr = 3,54 min (zkrácený gradient); ES-MS:

m/e₀ =443;

NMR (DMSO-d6): 8,08/s (1H); 7,25-7,5/několik multipletů (6H),

6,99/d (1 H); 6,90/s (1H); 6,85/d (1H); 5,09/s (2H) ; 5,06/m (1H); 3,64/s (3H); 3,2-3,5/2 x m (3H); 2,59/m (2H) ; 2,18/s (3H).

Příklad 105 trans-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-methyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylHmethanol

2,94 g (6,64 mmol) methylesteru trans-3-[4-amino-5-(3benzyloxy-fenyl)-6-methyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyclobutan-karboxylové kyseliny připraveného podle příkladu 104 v 35 ml bezvodého tetrahydrofuranu se během 45 minut přidá ·· · k ledem ochlazenému roztoku 0,281 g (7,17 mmol) lithiumaluminiumhydridu v 30 ml bezvodého tetrahydrofuranu. Reakční směs se pak míchá při 0°C dalších 20 hodin. Ke směsi se pomalu přidá voda (0,914 ml během 20 minut; teplota <4° C), načež se přidá 0,11 ml 4N NaOH. Sraženina se odfiltruje, zbytek na filtru se promyje ethylacetátem a vodou. Filtrát se pak extrahuje ethylacetátem. Po vysušení organické fáze síranem sodným se rozpouštědlo odpaří a odparek se čistí chromatografií (rozpouštědla: ethylacetát : methanol 95:5). Sloučenina uvedená v nadpisu se získá ve formě pěny. Analytická HPLC: t_R = 3,06 min (zkrácený gradient); ES-MS: m/e_o = 415;

NMR(DMSO-d6): 8,10/s (1H), 7,25-7,5/několik multipletů (6H), 7,25/’’d (1H); 6,95/s (1H) ; 6,90/d (1H) ; 5,5-6,0/b (NH₂) ;

5,13/s (2H); 5,04/m (1H); 4,69/t (OH); 3,57/t (2H); 3,153,25/m (2H); 2,4-2,5/m (1H); 2,23/s (3H); 2,15-2,25/m (2H) .

Příklad 106

3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-methyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl ester trans-toluen-4-sulfonové kyseliny

2,57 g (6,17 mmol) trans-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxyfenyl) -6-methyl-pyrrolo[2,3d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutyl}methanolu podle příkladu 105 se rozpustí v 50 ml bezvodého pyridinu. Roztok se ochladí na asi -25°C a ve čtyřech dávkách se přidá 2,04 g (10,5 mmol) p-toluensulfonyl chloridu. Reakční směs se míchá 3 hodiny při -20°C a 24 hodin při 0-5°C, načež se přidá další p-toluensulfonyl chlorid (0,36 g; 1,85 mmol) a v míchání se pokračuje dalších 19 hodin. Reakční směs se naleje do směsi ledu a vody a extrahuje se dichlormethanem. Organická fáze se promyje vodou a roztokem chloridu sodného.

• · · ·

Po odpaření organického rozpouštědla se odparek čistí filtrací na silikagelu (ethylacetát-hexan 3:1). Sloučenina se suší 18 hodin ve vysokém vakuu při teplotě místnosti.

Analytická HPLC: t_R = 4,12 min (zkrácený gradient); ES-MS:

m/e₀ = 569,2;

NMR (DMSO-d.6): 8,09/s (1 H) ; 7,84/d (2H) ; 7,25-7,6/několikanásobný multiplet (8H); 7,06/d (1 H); 6,93/s (1H); 6,88/d (1H); 5,5-6,0/b (NH₂) ; 5,13/s (2H) ; 5,00/m (1H) ; 4,26/d (2H) ;

3,15-3,35/m (2H); 2,69/m (1H); 2,42/s (3H); 2,17/s (3H) ;

2,42/s (3H); 2,05-2,20/m (2H).

Příklad 107 trans-5-(3-Benzyloxy-fenyl)-6-methyl-7-(3-pyrrolidin-lylmethyl-cyklobutyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin. 0,335 g (0,589 mmol), 3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6methyl-pyrroío[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl ester trans-toluen-4-sulfonové kyseliny podle příkladu 106 se míchá v 3,6 ml pyrrolidinu při teplotě místnosti po dobu 3,5 hodin (kontrola chromatografií na tenké vrstvě nebo HPLC).

Přebytečné rozpouštědlo se odpaří na rotačním odpařováku a odparek se čistí chromatografií (rozpouštědla: ethylacetátMeOH-vodný NH₃ (33%) 95:5:1). Sloučenina se krystalizuje z diethyletheru.

Analytická HPLC: t_R = 9,09 min (gradient 1); t.t.: 136-140°C; ES-MS: m/e_o =468,3;

NMR (DMSO-d6); nejsou uváděny všechny signály): 8,10/s (1H);

7,25-7,5/některé multiplety (6H); 7,02/d (1H); 6,94/s (1H); 6, 89/’’d (1Ή) ; 5,5-6,0/b (NH₂) ; 5,13/s (2H) ; 5,06/m (1H) ; 2,22/s (3H).

• · · ·

100

Příklad 108 trans-5-(3-Benzyloxy-fenyl)-6-methyl-7-[3-(4-methylpiperazin-l-yl-methyl)-cyklobutyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin.

Sloučenina uvedená v nadpisu se připraví postupem podle příkladu 107 z 0,35 g (0,615 mmol) 3-[4-amino-5-(3-benzyl-oxyfenyl)-6-methyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin7-yl]-cyklobutylmethyl esteru trans-toluen-4-sulfonové kyseliny a 3,5 ml (31,2 mmol) 1-methylpiperazinu při teplotě místnosti po dobu 24 hodin. Analytická HPLC: t_R = 2,32 min (zkrácený gradient); ES-MS:

m/e_o =497,3;

NMR (DMSO-d6; nejsou uvedeny všechny .signály): 8,09/s (1H),

7,25-7,5/některé multiplety (6H) ; 7,01/d (1H); 6,94/s (1H); 6,89/d (1H); 5,5-6,0/b (NH₂) ; 5,13/s (2H) ; 5,07/m (1H) ; 2,22/s (3H); 2,13/s (3H).

Příklad 109 trans-l-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-methyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-piperidin-4-ol.

Sloučenina uvedená v nadpisu se připraví postupem podle příkladu 107 z 0,35 g (0,615 mmol) 3-[4-amino-5-(3-benzyloxyfenyl) -6-methyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl esteru trans-toluen-4-sulfonové kyseliny a celkem se přidá 0,44 g (4,3 mmol) 4-hydroxy piperidinu v 3,5 ml bezvodého N, N-dimethylacetamidu (při teplotě místnosti; 144 hodin; a po 4 6 hodinách se přidá 64 mg reakčního činidla pro dokončení reakce).

Analytická HPLC: t_R = 2,54 min (zkrácený gradient); ES-MS: m/e₀ = 4 98,3;

NMR (DMSOd6); ne všechny signály jsou uvedeny): 8,09/s (1 H);

····

101

7,25-7,5/několik multipletů (6H); 7,01/d (1 H) ; 6,94/s (1

H) ; 6, 89/d (1H); 5,5-6,0/b (NH₂) ; 5,13/s (2H) ; 5,06/m (1H) ; 4,51/d (OH); 2,22/s (3H).

Příklad 110 trans-7-(3-Azetidin-l-ylmethyl-cyklobutyl)-5-(3-benzyloxy-fenyl ) -6-methyl-7H-pyrrolo [2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin.

Sloučenina uvedená v nadpisu se připraví analogicky podle příkladu 107 z, 0,35 g (0,65 mmol) 3-[4-amino-5-(3-benzyloxyfenyl) -6-methyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin7-yl]-cyklobutylmethylesteru trans-toluen-4-sulfonové kyseliny a 0,215 ml (3,08 mmol) trimethyleniminu (Fluka, Buchs, Švýcarsko) v 3,5 ml Ν,Ν-dimethylacetamidu (teplota místnosti; reakční čas 120 hodin).

Analytická HPLC: t_R = 8,97 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o = 454,3;

NMR (DMSO-d6): 8,09/s (1H); 7,25-7,5/několik multipletů (6H); 7,01/d (1H) ; 6,93/s (1H); 6,89/d (1H) ; 5,5-6,0/b (NH₂) ; 5,13/s (2H); 5,02/m (1H); asi 3,3/m (1H); 3,2/m (2H); 3,10/t (2H); 2,54/d (2H); 2,30/m (1H); 2,21/s (3H); 2,11/m (2H) ;

1,94/m (2H).

Příklad 111 trans-5-(3-Benzyloxy-fenyl)-6-methyl-7-{3-[(tetrahydropyran-4-ylamino) -methyl] -cyklobutyl}-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin.

Sloučenina uvedená v nadpisu se připraví postupem podle přikladu 107 z 0,35 g (0,62 mmol) 3— [4—amino—5—(3—benzyloxy— fenyl)-6-methyl-pyrrolo [2,3-d]pyrimidin7-yl]-cyklobutylmethylesteru trans-toluen-4-sulfonové kyseliny a 0,446 mg (4,42 mmol) tetrahydropyran-4-ylaminu (připraveného hydro• · · · ·

102 genací z oximu tetrahydropyran-4-onu) v 3,5 ml N,Ndimethylacetamidu (při teplotě místnosti; reakční čas 310 hodin).

Analytická HPLC: t_R = 8,99 min (gradient 1); ES-MS: m/e₀ = 498,3;

NMR (DMSO-d6; ne všechny signály jsou uvedeny): 8,09/s (1 H) ;

7,25-7,5/několik multipletů (6H); 702/d (1H); 6,94/s (1H) ;

6,89/d (1H); 5,5-6,0/b (NH₂) ; 5,13/s (2H) ; 5,06/m (1H) ;

3,.82/m <2H); 2,75/d (2H) ; 2,23/s (3H) .

Příklad 112 trans-((R)-l-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-methylpyrrolo [2,3d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl} ^-pyrrolidin-2yl)-methanol.

Sloučenina uvedená v nadpisu se připraví postupem podle příkladu 107 z 0,35 g (0,62 mmol) 3-[4-amino-5-(3-benzyloxyfenyl) -6-methyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethylesteru trans-toluen-4-sulfonové kyseliny a 0,307 ml (3,08 mmol) D-prolinolu (Fluka, Buchs, Švýcarsko) v 3,5 ml Ν,Ν-dimethylacetamidu (teplota místnosti; reakční čas 114 hodin).

Analytická HPLC: t_R = 8,95 min (gradient 1); ES-MS: m/e₀ 498,3;

NMR (DMSO-d6); ne všechny signály jsou uvedeny): 8,10/s (1H);

7,25-7,5/několik multipletů, (6H); 7,02/d (1H); 6,94/s (1H); 6,92/d (1H); 5,5-6,0/b (NH₂) ; 5,13/s (2H) ; 5,06/m (1 H) ;

4,37/bs (OH); 2,23/s (3H) .

Příklad 113

Methyl ester cis-3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-brompyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutankarboxylové kyseliny.

103

Sloučenina uvedená v nadpisu se připraví postupem podle příkladu 103 z výcházeje z 12,9 g (30,11 mmol) methyl esteru cis-3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin7-yl]-cyklobutankarboxylové kyseliny (viz Stupeň 3.1 výše) a 6,07 g (33,12 mmol) N-bromsukcinimidu v 250 ml bezvodého N,Ndimethylformamidu. Po zpracování se surový materiál čistí chromatografií na silikagelu (rozpouštědla: hexan-ethylacetát 1:1).

Analytická HPLC: t_R = 11,85 min (gradient 1); ES-MS: m/e₀ = 506,9 a 509,9;

NMR (DMSO-d6) : 8,14/s (1H); 7,3-7,5/několik multipletů (6H) , 7,09/d (1H); 7,05/s (1H); 6,98/d (1H); 5,5-6,5/b (NH₂) ; 5,.13/s (2H) ; 5,11/m (1H); 3,66/s (3H) ; 3,35-3,5/m (2H) ; 3,08/m (l'H); 2,58-2,7/m (2H) .

Příklad 114

Methyl ester cis-3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6methyl-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutankarboxylové kyseliny.

Sloučenina uvedená v nadpisu se připraví analogicky podle příkladu 104 vycházeje z 6,6 g (12,6 mmol) methyl esteru cis3- [4-amino-5- (3-benzyloxy-fenyl) -6-brom-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl]-cyklobutankarboxylové kyseliny podle příkladu 113, 0,364 g (0,315 mmol) tetrakistrifenyl- palladia, a 4,39 ml (31,52 mmol) tetramethyl cínu (Fluka, Buchs; Švýcarsko) v 20 ml bezvodého N, N-dimethylformamidu, (při teplotě 100-110° C,

zatavená trubice;	reakční čas = 25	hodin).
Analytická HPLC:	t_R = 11,67 min	(gradient 1); ES-MS:	m/e_o =
443,2;
NMR (DMSO-d6; ne	všechny signály	jsou uvedeny): 8,07/s	(1H) ;
7,25-7,5/několik	multipletů (6H);	7,03/d (1H); 6,95/s	(1H) ;
6,90/d (1H);	5,5-6,0/b (NH₂) ;	5,14/s (2H); 4,90/m	(1H) ;

3,65/s (3H); 2,25/s (3H).

104

Příklad 115 cis-3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-methyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutyl}-methanol

Sloučenina uvedená v nadpisu se připraví postupem podle příkladu 105 vycházeje z 2,06 g methylesteru cis-3-[4-amino-5(3-benzyloxy-fenyl)-6-methyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklobutankarboxylové kyseliny připraveného podle příkladu 114 a 0,216 mmol lithiumaluminiumhydridu v 20 ml bezvodého tetrahydrofuranu (při teplotě 0-5° C; reakčni čas 49 hodin). Produkt se čistí rychlou chromatografií (rozpouštědlo: ethylacetát) .

Analytická HPLC: t_R = 3,13 min (zkrácený gradient); ES-MS:

m/e_o =415,4;

NMR (DMSOd6): 8,07/s (1H); 7,25-7,5/několik multipletů (6H);

7,02/d (1H) ; 6,94/s (1H) ; 6,89/d (1 Hj ; 5,5-6,0/b (NH₂) ;

5,13/s (2H); 4,84/m (1H); 4,62/t (OH); 3,53/t (2H); 2,8-2,9/m (2H); 2,35-2,45/m (2H); 2,24/s (3H); 2,2/m (1 H).

Příklad 116 čis-5-(3-Benzyloxyfenyl)-6-methyl-7-(3-pyrrolidin-l-ylmethyl-cyklobutyl)-7H-pyrrolo{2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin

K roztoku 0,2 g (0,48 mmol) cis-{3-[4-amino-5-(3benzyloxy-fenyl)-6-methyl-pyrrolo(2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklobutyl}-methanolu podle příkladu 115 v 2 ml bezvodého pyridinu ochlazeného na asi -25° C se za míchání přidá 0,159 g (0,96 mmol) p-toluensulfonyl chloridu během jedné hodiny ve třech dávkách, V míchání se pak pokračuje 1 hodinu při -20°C a přes noc při 0° C. K této reakčni směsi se během 1 hodiny přidají v atmosféře argonu 2 ml pyrrolidinu (teplota = 0-5° C) a v míchání se pokračuje další 3 hodiny. Reakčni směs se rozdělí mezi ethylacetát a vodu. Po vysušení organické fáze se

105

rozpouštědlo odpaří a odparek se chromatografuje rychlou chromatografií (rozpouštědla: ethyl acetát-MeOH-vodný NH₃(33%) 95:5:1).

Analytická HPLC: t_R	= 9,28	min (gradient 1); ES-MS:	m/e_o =
468,2;
NMR (DMSÓ-d6): 8,08/s	i (1H);	7,25-7,5/několik multipletů	(6H) ;
7,02/d(1H); 6,94/s	(1H) ;	6,89/d (1H); 5,4-5,9/b	(NH₂) ;
5,13/s (2H); 4,77/m	(1H); 2	,8-2,9/m (2H); 2,60/d (2H) ;	2,35-

asi 2,5/m (6H) ; 2,23/s (3H); asi 2,15-2,25/m (1H); 1,6-1,7/m (4H).

Příklad 117 cis-5-(3-Benzyloxy-fenyl)-6-methyl-7-[3-(4-methylpiperazin-1-yl-methyl) -cyklobutyl] -7H-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-4-yl-amin.

Sloučenina uvedená v nadpisu se připraví reakcí v jedné baňce, postupem podle příkladu 116 vycházeje z 0,35 g (0,84 mmol) cis-3-[4-amino-5- (3-benzyl-oxy-fenyl)-6-methyl-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin7-yl] -cyklobut-yl}-methanolu a 0,328 g (1,69 mmol) p-toluensulfonyl chloridu v 3,5 ml bezvodého pyridinu, a následujícím přidáním 3,5 ml (31,2 mmol) 1-methyl-piperazinu. Analytická HPLC: t_R = 8,14 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o =

497,3;

NMR (DMSO-d6; ne všechny signály jsou uvedeny): 8,08/s (1 H) ;

7,25-7,45/několik multipletů (6H); 7,02/d (1H) ; 6,94/s (1H); 6,89/d (1H); 5,4-6,0/b (NH_Z) ; 5,13/s (2H) ; 4,77/m (1H) ;

2,22/s (3H); 2,12/s (3H).

Příklad 118 cis-7- (3-Azetidin-l-yl-methyl-cyklobutyl) -5- (3-benzyloxy-fenyl) -6-methyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin

L

106

Sloučenina uvedená v nadpisu se připraví analogicky podle příkladu 116 vycházeje z 0,35 g (0,84 mmol) cis-{3- [4-amino5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-methyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklobutyl}-methanolu a 0,328 g (1,69 mmol) p-toluensulfonylchloridu v 3,5 ml bezvodého pyridinu, následovaného 0,442 ml (6,33 mmol) trimethyleniminu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R = 9,22 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o = 454,3;

NMR (DMSO-d6): 8,08/s (1H); 7,25-7,5/několik multipletů (6H);

7,02/d (1H); 6,93/s (1H); 6, 89/d (1H); 5,4-6,0/b (NH₂) ;

5,13/s (2H); 4,76/m (1H); 3,ll/t (4H); 2,75-2,90/m <2H); 2,54/d (2H); 2,35-2,45/m (2H); 2,22/s (3H); 2,03/m (1H); 1,9/2,0/m (2H).

Příklad 119 cis-l-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-methylpyrrolo [2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-piperidin4-ol

Sloučenina uvedená v nadpisu se připraví postupem podle příkladu 116 vycházeje z 0,35 g (0,84 mmol) cis-{3-[4-amino-5(3-benzyloxy-fenyl)-6-methyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]cyklobutyl}-methanolu a 0,328 g (1,69 mmol) p-toluensulfonyl chloridu v 3,5ml bezvodého pyridinu, následovaným 0,87 g (8,44 mmol) 4-hydroxypiperidinu (Fluka, Buchs, Švýcarsko). Analytická HPLC: t_R = 8,76 min (gradient 1); ES-MS: m/e₀ = 498,2;

NMR (DMSO-d6; ne všechny signály jsou uvedeny): 8,07/s (1H) ;

7,25-7,5/několik multipletů (6H); 7,01/d” (1H); 6,94/s (1H); 6,89/d (1H); 5,13/s (2H); 4,76/m (1H); 4,51/d (OH); 2,22/s (3H) .

• 9

107

Příklad 120 cis-((R)—1—{3—[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-methylpyrrolo[2,3d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-pyrrolidin-2yl)-methanol

Sloučenina uvedená v nadpisu se připraví analogicky podle příkladu 116 vycházeje z 0,35 g (0,84 mmol) cis-{3-[4amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-methyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin7-yl]-cyklobutyl[-methanolu a 0,328 g (169 mmol) ptoluensulfonylchloridu v 3,5 ml bezvodého pyridinu, následovaného 0,631 ml (6,33 mmol) D-prolinolu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC: t_R - 9,08 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o = 49.8,2;

NMR (DMSO-d6); ne všechny signály jsou uvedeny): 8,07/s (1H) ;

7,25-7,5/několik multipletů (6H); 7,02/d (1H); 6,94/s (1H); 6,89/d (1H); 5,4-6,0/b (NH₂) ; 5,13/s (2H); 4,78/m (1H) ; 4,34/b (OH); 2,22/s (3H).

Příklad 121

5-(3-Benzyloxy-fenyl)-6~brom-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin4-yl-amin

K roztoku 20 g (63,2 mmol) 5-(3-benzyloxy-fenyl)-7Hpyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-aminu (viz WO 97/28161) v 1 litru bezvodého N,N-dimethylformamidu, se přidá za míchání 12,4 g (69,5 mmol) N-bromsukcinimidu při tepote asi 10° C. V míchání se pokračuje 30 minut a pak přes noc při teplotě místnosti. Vzniklá sraženina se odfiltruje a dokonale promyje N,Ndimethylformamidem a hexanem. Po vysušení 24 hodin ve vakuu při teplotě 30-35° C ve vakuu, se sloučenina uvedená v nadpisu použije bez dalšího čištění v následujícím stupni. Další materál se může získat z matečných louhů chromatografií na silikagelu.

108 ·999

Analytická HPLC: t_R = 10,07 min (gradient 1); ES-MS: m/e₀ =

394,9 a 396,9;

NMR (DMSO-d6): 12,55/s (NH); 8,06/s (1H); 7,25-7,5/několik multipletů (6H); 7,07/d (1H); 7,03/s (1H); 6,98/d (1H);

5,5-6,0/b (NH₂) ; 5,12/s (2H) .

Příklad 122

5-(3-Benzyloxy-fenyl)-6-ethyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin

V zatavené trubici se v atmosféře argonu zahřívá na 90°C 12,53 g (31,7 mmol) 5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-brom-7H-pyrrolo[2,3d]pyrimidin-4-yl-amin, 32 ml (158,5 mmol) tetraethylcínu (Aldrich), a 7,32 g (6,34 mmol) tetrakis trifenylfosfinpalladia po dobu 66 hodin (kontrola reakce HPLC a MS). Po této době se reakční suspenze přefiltruje přes celit a rozpouštědlo se odpaří na rotačním odpařováku ve vysokém vakuu při teplotě 50-60°C. Odparek se rozdělí mezi ethylacetát a vodu. Organická fáze se vysuší síranem sodným a odpaří se. Odparek se čistí chromatografií na. silikagelu (ethylacetát-methanol 95:5). Krystalizace se provádí v acetonu.

Analytická HPLC: t_R = 10,43 min (gradient 1); ES-MS: m/e₀ =

345,1;

NMR (DMSO-d6): 11,65/s (NH); 8,03/s (1H); 7,25-7,5/m a 6,857,1/m (9H); 5,5-6,0/b (NH₂) ; 5,14/s (2H) ; 2,54/q (2H) ;

1,14/s (3H).

Příklad 123

Methylester cis a trans-3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)6-ethyl-pyrrolo[2,3d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutan-karboxylové kyseliny

Směs 1,26 g (2,74 mmol) 5- (3-benzyloxy-fenyl)-6-ethyl-7Hpyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylaminu, 1,53 g (10,9 mmol)

L ·· ··· ·

109 práškovaného uhličitanu draselného a 2,92 g (10,9 mmol) 18crown-6-etheru v 12 ml bezvodého N,N-dimethylformamidu se míchá 15 minut při teplotě 80° C. Pak se během 15 minut přikape 1,7 g (8,2 mmol) methylesteru 3-methansulfonyloxycyklobutankarboxylové kyseliny rozpuštěného v 9 ml bezvodého N,N-dimethylformamidu. Reakční směs se pak míchá 42 hodin při 80°C, načež se zpracuje filtrací reakční směsi přes celit a rozpouštědlo se odpaří ve vakuu. Odparek se rozdělí mezi vodu a ethylacetát, organická fáze se vysuší síranem sodným a zahustí se ve vakuu. Surový produkt se čistí a rozdělí rychlou chromatografií (hexan-ethylacetát 1:2). Poměr cis isomeru k trans isomeru je asi 70 : 30 (podle HPLC, gradient 25). Analytická HPLC, cis isomer: t_R = 12,27 min (gradient 1); ESMS: m/e_o = 457,0;

NMR (DMSO-d6): 8,12/s (1H); 7,3-7,5/několik multipletů (6H),

7,07/dlH) ; 6,96/s (1H) ; 6,91/d (1H) ; 5,5-6,1/b (NH₂) ;

5,15/s (2H); 4,81/m (1H); 3,67/s (3H); 3,49/q (2H); 3,03/m (1H); 2,62/m (4H); 1,08/t (3H).

Analytická HPLC, trans isomer: t_R = 12,65 min (gradient 1) ; ES-MS: m/e₀ = 457,0;

NMR (DMSO-d6): 8,37/s (1H); 7,3-7,5/několik multipletů (6H),

7,ll/d (1H); 6,97/s (1H); 6,93/d (1 H) ; 5,15/s (2H) ;

5,11/m (1H); 3,70/s (3H); 3,3-3,5/m (3H); 2,72/m (2H); 2,62/q (2H); 1,06/t (3H);

• NH₂ není viditelné.

Příklad 124 cis-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-ethyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutyl}-methanol

Postupem podle příkladu 105, se 0,73 g (1,56 mmol) methylesteru cis-3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-ethyl

110 pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutankarboxylové kyseliny podle příkladu 123 redukuje 69 mg (1,73 mmol) lithium aluminiumhydridu v tetrahydrofuranu. Reakční čas 18 hodin při teplotě 0-5°C.

Analytická HPLC: t_R = 11,15 min (gradient 1); ES-MS: m/e₀, = 429, 1;

NMR (DMSO-d6) : 8,10/s (1H); 7,3-7,5/několik multipletů (6H) ; 7,04/d (1H); 6,93/s (1H); 6,90/d (1H); 5,4-6,0/b (NH₂) ; 5,15/s (2H); 4,75/m (1H); 4,63/t (OH); 3,60/t (2H); 3,03q (2H); 2,61/q (2H); 2,14/q (2H); 2,24/m (1 H); 1,07/t (3H).

Příklad 125 trans-{3-[4-Amino-5- (3-benzyloxy-fenyl)-6-ethyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutyl}-methanol.

Postupem podle příkladu 105 se redukuje 0,49 g (1,09 mmol) methylesteru trans-3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6ethyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutankarboxylové kyseliny připraveného podle příkladu 123 použitím 46 mg (1,18 mmol) lithiumaluminiumhydridu v tetrahydrofuranu. Reakční čas: 17 hodin při teplotě 0-5°C.

Analytická HPLC: t_R = 10,91 min (gradient 1); ES-MS: m/e₀ = 429,1;

NMR (DMSO-d6) : 8,13/s (1 H) ; 7,3-7,6/několik multipletů (6H) ; 7,06/d (1H); 6,95/s (1H); 6,90/d (1H); 5,4-6,0/b (NH₂) ;

5,15/s (2H); 4,.93/m (1H); 4,68/t (OH); 3,60/m (2H); asi

3,3-3,4/m (2H); 2,95/q (2H); 2,20/m (2H); 2,24/m (1 H); 1,05/t (3H) .

Příklad 126 cis-5-(3-Benzyloxy-fenyl)-6-ethyl-7-(3-pyrrolidin-lylmethyl-cyklobutyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin.

L ·· ····

111

Sloučenina uvedená v nadpisu se připraví reakcí v jedné baňce postupem analogickým k příkladu 116 vycházeje z 0,2 g (0,46 mmol) cis-3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-ethylpyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutyl}-methanolu podle příkladu 124 a 0,18 g (0,92 mmol) p-toluensulfonyl-chloridu v 2 ml suchého pyridinu, načež se přidají 2 ml pyrrolidinu. Reakční směs se kontroluje chromatografií na tenké vrstvě.

Analytická HPLC: t_R = 9,61 min	(gradient	i);	ES-MS: m/e_o =
482,0;
NMR (DMSO-d6; ne všechny signály	j sou uvedeny) :	8,12/s	(1H) ;
6; 9-7; 5/několik . multipletů (6H);	7,05/d	(1H) ;	6,95/s	(1H) ;
6,92/d (1H); 5,4-6,0/b (NH_?) ;	5,15/s	(2H) ;	4,72/m	(1);

2,62/q (2H); 1,06/t (3H).

Příklad 127 cis-5-(3-Benzyloxy-fenyl)-6-ethyl-7-[3-(4-methylpiperazin-l-yl-methyl)-cyklobutyl]-7H-pyrrolo[2, 3-d]pyrimidin-4-ylamin.

Sloučenina uvedená v nadpisu se připraví analogicky podle příkladu 116 z cis-{ 3-[4-amino-5-_(3-benzyloxy-fenyl)-6ethyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-3-cyklobutyl)-methanolu připraveného podle příkladu 124, p-toluensulfonyl-chloridu a N-methylpiperazinu.

Analytická HPLC-MS: t_R = 1,40 min (gradient 1); ES-MS: m/e_o = 511,45.

Příklad 128 cis-7-(3-Azetidin-l-yl-methyl-cyklobutyl)-6-ethyl-5-{3[(Z)-2-eth-(E)-yliden-hexa-3,5-dienyloxy]-fenyl}-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin.

Sloučenina uvedená v nadpisu se připraví analogicky podle přikladu 116 z cis—{3— [4—amino—5—(3—benzyloxy—fenyl)—6—ethyl —

·· ····

112 • · • ·« ···« pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutyl}-methanolu připraveného podle příkladu 124, p-toluensulfonyl-chloridu a trimethyleniminu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC-MS: t_R = 1,51 min; ES-MS: m/e_o = 468,45.

Příklad 129 cis-l-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-ethyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-piperidin-4-ol.

Sloučenina uvedená v nadpisu se připraví analogicky podle příkladu 116 z cis-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6ethyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutyl}-methanolu připraveného podle příkladu 124, p-toluenesulfonyl-chloridu a 4-hydroxypiperidinu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC-MS: t_R = 1,49 min; ES-MS: m/e_o - 512,48.

Příklad 130 cis-((R)-1-{3-[4-Amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-ethylpyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-pyrrolidin-2-. yl)-methanol.

Sloučenina uvedená v nadpisu se připraví analogicky podle postupu příkladu 116 z cis-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxyfenyl) -6-ethyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutyl}methanolu připraveného podle příkladu 124, p-toluensulfonylchloridu a D-prolinolu (Fluka, Buchs, Švýcarsko).

Analytická HPLC-MS: t_R = 1,48 min; ES-MS: m/e_o = 512,48.

Příklad 131 cis-5-(3-Benzyloxy-fenyl)-6-ethyl-7-{3-[(tetrahydropyran-4-ylamino)-methyl]-cyklobutyl}-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin.

Sloučenina uvedená v nadpisu se připraví analogicky

·· ····

• · · • · · · 4 • · ···· ·

113 podle příkladu 116 z cis-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6ethyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutyl}-methanolu připraveného podle příkladu 124, p-toluensulfonyl-chloridu a tetrahydropyran-4-yl-aminu (viz příklad 111).

Analytická HPLC-MS: t_R = 1,50 min; ES-MS: m/e_o = 512,49.

Příklad 132

Test aktivity proti IGF-I indukované IGF-IR autofosforylací použitím buněčného testu Capture ELISA.

Buněčný Capture ELISA test se provádí postupem popsaným výše. Hodnoty IC50 pro některé sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou uvedeny níže:

Sloučenina podle příkladu IC₅₀ (μΜ)

1	0,062
2	0,03
9	0,042
10	0,07
14	0,03
22	0,08
23	0,031
24	0,095
26	0,055
27	0, 05
28	0,05
31	0,03
49	0,04
50	0,011
51	0,03
57	0,018
70	0,05

	···· * ·· ··· · ·· 114
75	0,05
77	0,05
81	0,08
83	0,052
88	0,057
90	0,09
95	0,08
96	0,05
98	0,04
102	0,06
109	0,15
110	0,14
112	0,09
¹¹⁶	0,15
117	0,13

Příklad 133
Tablety
Tablety obsahující 50	mg aktivní složky, například jedné

ze sloučenin vzorce I popsané v příkladech 1 až 131, a které mají následující složení se připraví běžným způsobem:

Složení:

aktivní složka	50 mg
pšeničný škrob	150 mg
laktóza	125 mg
koloidní kyselina křemičitá	12,5 mg
talek	22,5 mg
stearát hořečnatý	2, 5 mg
Celkem	362,5 mg

·· ··*· ·· · • · · • · · • ··*>· • · »«· ·

115 *··· ·

Příprava:

Aktivní složka se smísí s částí pšeničného škrobu, s laktózou a koloidní kyselinou křemičitou a směs se protlačí sítem. Z další části pšeničného škrobu se připraví na vodní lázni pasta s pětinásobkem vody a výše připravená práškovaná směs se hněte s pastou až se získá mírně plastická hmota.

Plastická hmota se lisuje přes síto o velikosti ok 3 mm a vysuší se. Vzniklé pevné granule se znovu protlačí sítem. Pak se přimísí stearát hořečnatý a směs se lisuje do tabletové formy a získají se tablety o hmotnosti 145 mg a které obsahují zářez pro dělení.

Příklad 134:

Měkké želatinové kapsle

5000 měkkých želatinových kapslí z nichž každá obsahuje 50 mg aktivní složky, například jedné ze sloučenin vzorce I, popsaných v příkladech 1 až 131, se připraví běžným způsobem:

Složení:

aktivní složka 250 g lauroglykol 2 litry

Příprava:

Práškovaná aktivní složka se suspenduje v Lauroglykol^(R>(propylenglykol laurát, Gattefossé S. A., Saint Priest, Francie) a rozemele se ve práškovači za vlhka na velikosti částic asi 1 to 3 jim. Díly 0,419 g směsi se pak dávkují do měkkých želatinových kapslí použitím plnicího zařízení.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. 4-Amino-5-fenyl-7-cyklobutyl-pyrrolo[2,3-d]-pyrimidinové deriváty obecného vzorce I, ve kterém n je od 0 do 4,

Ri je atom vodíku, nesubstituovaná nebo substituovaná nižší alkylová skupina nebo atom halogenu,

R₂ je nižší alkylová skupina substituovaná hydroxylovou skupinou, nesubstituovanou, mono- nebo di-substituovanou aminoskupinou nebo heterocyklickým zbytkem; zbytek R₅(C=Y)-Z-, kde R5 je nesubstituovaná nebo substituovaná nižší alkylová skupina, mono- nebo di- substituovaná aminoskupina, heterocyklický zbytek, nebo volná nebo etherifikovaná hydroxylová skupina, Y je atom kyslíku, síry nebo iminoskupina, a substituent Z buď není přítomen, nebo je nižší alkylová skupina nebo amino- .nižší alkylová skupina; nebo zbytek R₆-sulfonylamino- nižší alkylová skupina, kde R6 je nesubstituovaná nebo substituovaná nižší alkylová skupina, mono- nebo di- substituovaná aminoskupina nebo fenylová skupina případně substituovaná nižší alkylovou skupinou, nižší alkoxylovou skupinou nebo nitroskupinou, s tou výhradou, že R₂ není karboxylová • ·

117 skupina, nižší alkoxykarbonylová skupina nebo nižší alkylová skupina substituovaná hydroxylovou skupinou, jestliže n je 0, R_x je atom vodíku, R₄ je benzylová skupina a X je atom kyslíku,

R₃ je nižší alkylová skupina, hydroxylovou skupinou, aminoskupinou nebo atomem halogenu substituovaná nižší alkylová skupina, hydroxylová skupina, kyanoskupina, nižší alkoxylová skupina, nižší alkanoylová skupina, nižší alkanoyloxy-skupina, aminoskupina, mono- nebo di- nižší alkylaminoskupina, nižší alkanoylaminoskupina, karboxylová skupina, nižší alkoxykarbonylová skupina nebo atom halogenu, kde R₃ substituenty mohou být nezávisle na sobě vybrány jestliže n > 1,

R₄ je zbytek R₇-CR₈ (R₉)-, kde R₇ je cyklobutylová skupina, cyklopentylová skupina, cyklohexylová skupina, fenylová skupina, furylová skupina, pyrrolylová skupina, thienylová skupina nebo pyridylová skupina, tyto R₇ substitutenty jsou případně substituovány jedním nebo více zbytky vybranými ze skupiny zahrnující nižší alkylové skupiny nebo atomy halogenu a R₈ a R₉ jsou nezávisle na sobě vybrané z atomů halogenu, nižších alkylových skupin nebo atomů halogenu a

X je vybrané ze skupiny zahrnující atom kyslíku, iminoskupinu

a atom síry, nebo jejich soli. 2. Sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1, ve kterém n je od 0 do 4, Ri je atom vodíku, nesubstituované nebo substituovaná alkylová skupina nebo atom halogenu,

• ·

R₂ je nižší alkylová skupina substituovaná hydroxylovou skupinou, nesubstituovanou, mono- nebo di- substituovanou aminoskupinou, nebo heterocyklickým zbytkem; zbytek R5(C=Y)-Z-, kde R₅ je nesubstituovaná nebo substituovaná nižší alkylová skupina, nesubstituovaná, mono- nebo disubstituovaná aminoskupina, heterocyklický zbytek, nebo volná nebo etherifikovaná hydroxylová skupina, Y je atom kyslíku, atom síry nebo iminoskupina, a Z buď není přítomno, nebo je nižší alkylová skupina nebo amino- nižší alkylová skupina; nebo zbytek R₆-sulfonylamino- nižší alkylová skupina, kde Rs je nesubstituovaná nebo substituovaná nižší alkylová skupina, nesubstituovaná, mono- nebo di- substituovaná aminoskupina nebo fenylová skupina případně substituovaná nižší alkylovou skupinou, nižší alkoxylovou skupinou nebo nitroskupinou, s tou výhradou, že R₂ není karboxylová skupina, nižší alkoxykarbonylová skupina nebo nižší alkylová skupina substituovaná hydroxylovou skupinou, jestliže n je 0, Ri je atom vodíku, R₄ je benzylová skupina a X je atom kyslíku,

R3 je nižší alkylová skupina nebo nižší alkoxylová skupina, kde R₃ substituenty mohou ' být vybrány na sobě nezávisle jestliže n > 1,

R₄ je zbytek R7^-CR₈(Rg)-, kde R₇ je cyklobutylová skupina, cyklopentylová skupina, cyklohexylová skupina, fenylová skupina, furylová skupina, pyrrolylová skupina, thienylová skupina, pyridylová skupina nebo fenylová skupina substituovaná jedním nebo více substitutenty vybranými ze skupiny zahrnující nižší alkylové skupiny a atomy halogenu a R₈ a R₉ jsou na sobě nezávisle atomy vodíku, nižší alkylové skupiny nebo atomy halogenu a • · · ·

X je vybrané ze skupiny zahrnující atom kyslíku, imino skupinu, a atom síry, nebo jejich sole.

3. Sloučeniny obecného vzorce I, podle nároku 1 ve kterém n j e 0,

Ri je atom vodíku, nesubstituované nebo substituovaná nižší alkylová skupina nebo atom halogenu,

R₂ je nižší alkylová skupina substituovaná nesubstituovanou nebo mono- nebo di- substituovanou aminoskupinou nebo heterocyklickým zbytkem; zbytek R₅-(C=Y)-Z-, kde R₅ je nesubstituované nebo substituovaná nižší alkylová skupina, nesubstituované, mono- nebo di- substituovaná aminoskupina, heterocyklický zbytek, nebo jestliže je přítomen substituent Z, je také volná nebo etherifikovaná hydroxylová skupina, Y je atom kyslíku, atom síry nebo iminoskupina a pokud Z není přítomné, nižší alkylová skupina nebo amino- nižší alkylová skupina; nebo zbytek R₆sulfonylamino- nižší alkylová skupina, kde R₆ je nesubstituované nebo substituovaná nižší alkylová skupina, nesubstituované, mono- nebo di- substituovaná aminoskupina nebo fenylová skupina případně substituovaná nižší alkylovou skupinou, nižší alkoxylovou skupinou nebo nitroskupinou,

R₄ je benzylová skupina, a

X je vybrané ze skupiny zahrnující atom kyslíku, iminoskupinu a atom síry, nebo jejich sole.

4.

Sloučeniny obecného vzorce 1, podle nároku 3 ·· • · · ·

120 • · ve kterém n je 0,

R_x je atom vodíku, nesubstituované nebo substituovaná nižší alkylová skupina nebo atom halogenu, je nižší alkylová skupina substituovaná substituovaným heterocyklickým zbytkem; zbytek R₅-(C=Y)-Z-, ve kterém R5 je nesubstituované nebo substituovaná nižší alkylová skupina, nesubstituované, mono- nebo di- substituovaná aminoskupina, heterocyklický zbytek, nebo jestliže je přítomem substituent Z také volná nebo etherifikovaná hydroxylová skupina, Y je atom kyslíku, atom síry nebo pokud Z není přítomné, nižší alkylová nižší alkylová r₂ iminoskupina a skupina nebo výhradou, že aminoskupina, s tou

Z není přítomno nebo je nižší alkylová skupina, jestliže R₅ je nižší alkylová skupina a Z je nižší alkylová skupina nebo amino- nižší alkylová skupina, jestliže R₅ je mono- nebo di- substituovaná aminoskupina nebo heterocyklický zbytek; nebo zbytek R₆sulfonylamino- nižší alkylové skupiny, ve které R6 je nesubstituované nebo substituovaná nižší alkylová skupina, nesubstituované, mono- nebo di- substituovaná aminoskupina nebo fenylová skupina, případně substituovaná nižší alkylovou skupinou, nižší alkoxylovou skupinou nebo nitroskupinou,

R₄ je benzylová skupina, a

X je vybrané ze skupiny zahrnující atom kyslíku, iminoskupinu a atom síry, nebo jejich sole.

5. Sloučeniny obecného vzorce I, podle nároku 3 ve kterém n je 0,

121 ·· ··

Ri je atom vodíku, nesubstituované nebo substituovaná nižší alkylová skupina nebo atom halogenu,

R₂ je nižší alkylová skupina substituovaná aminoskupinou, Nnižší alkylaminoskupinou, N,N-di- nižší alkylaminoskupinou nebo nesubstituovaným heterocyklickým zbytkem; nebo zbytek Rs-(C=Y)-Z-, ve kterém R₅ je nižší alkylová skupina, mononebo di- substituovaná aminoskupina nebo heterocyklický zbytek, Y je atom kyslíku, atom síry nebo iminoskupina, a Z je amino- nižší alkylová skupina jestliže R₅ je nižší alkylová skupina a Z není přítomné jestliže R₅ je heterocyklický zbytek nebo mono- nebo di- substituovaná aminoskupina,

R₄ je benzylová skupina, a

X je vybrané ze skupiny zahrnující atom kyslíku iminoskupinu a atom síry, nebo jejich sole.

6. Sloučeniny obecného vzorce I, podle nároku 3, ve kterém n je 0,

Ri je atom vodíku, nesubstituované nebo substituovaná nižší alkylová skupina nebo atom halogenu,

R₂ je nižší alkylová skupina substituovaná nesubstituovanou, mono- nebo di- substituovanou aminoskupinou nebo heterocyklickým zbytkem s 4 až 8 atomy v kruhu a od 1 do 3 heteroatomů, přičemž alespoň jeden heteroatom je atom dusíku a vazba heterocyklického zbytku na nižší alkylovou skupinu je přes atom dusíku v kruhu; zbytek R₅-(C=Y)-Z-, kde R₅ je nižší alkylová skupina, nesubstituované, nebo di-substituovaná aminoskupina, a heterocyklický mono-

122 zbytek s 4 až 8 členy v kruhu a od 1 do 3 heteroatomů, přičemž alespoň jeden heteroatom je atom dusíku a vazba heterocyklického zbytku je přes atom dusíku v kruhu, nižší alkylová skupina substituovaná uvedeným heterocyklickým zbytkem nebo jedním nebo více zbytky vybranými na sobě nezávisle ze skupiny zahrnující aminoskupinu, N-nižší alkylaminoskupinu, N,N-di- nižší alkylaminoskupinu, Nnižší alkanoylaminoskupinu, N,N-di- nižší alkanoylaminoskupinu, hydroxylovou skupinu, nižší alkoxylovou skupinu, nižší alkoxy- nižší alkoxylovou skupinu, nižší alkanoylovou skupinu, nižší alkanoyloxyskupinu, kyanoskupinu, nitroskupinu, karboxylovou skupinu, nižší alkoxykarbonylovou skupinu, karbamoylovou skupinu, amidinoskupinu, guanidinoskupinu, ureidoskupinu, merkaptoskupinu, nižší alkylthioskupinu a atom halogenu nebo jestliže je přítomen substituent Z, je také volná nebo etherifikovaná hydroxylová skupina, Y je atom kyslíku, atom síry nebo iminoskupina, a kdy Z není přítomno, nižší alkylová skupina nebo amino- nižší alkylová skupina; nebo zbytek Rg-sulfonylamino- nižší alkylová skupina, kde R₆ je nesubstituované nebo substituovaná nižší alkylová skupina, nesubstituované, mono- nebo di- substituovaná aminoskupina nebo fenylová skupina případně substituovaná nižší alkylovou skupinou, nižší alkoxylovou skupinou nebo nitroskupinou,

R₄ je benzylová skupina, a

X je vybrané ze skupiny zahrnující atom kyslíku, iminoskupinu a atom síry nebo jejich sole.

7. Sloučeniny obecného vzorce I, podle nároku 3, ve kterém • 9 · ···· n je Ο,

Rx je atom vodíku,

R₂ je amino- nižší alkylová skupina, N-nižší alkylamino- nižší alkylová skupina, N,N-di- nižší alkylamino- nižší alkylová skupina, morfolinyl- nižší alkylová skupina, piperidylnižší alkylová skupina, pyrrolidinyl- nižší alkylová skupina, nižší alkyl-piperazinyl- nižší alkylová skupina, adamantanyl-amino- nižší alkylová skupina, hydroxypiperidyl- nižší alkylová skupina, azepanyl- nižší alkylová skupina, di-nižší alkyl-pyrrolidinyl- nižší alkylová skupina, azetidinyl- nižší alkylová skupina, aminokarbonylpiperidyl- nižší alkylová skupina, pyridyl-piperazinylnižší alkylová skupina, thiomorfolinyl- nižší alkylová skupina, di- nižší alkyl- morfolinyl- nižší alkylová skupina, aminokarbonyl-pyrrodinyl- nižší alkylová skupina, nižší alkoxykarbonyl-piperazinyl- nižší alkylová skupina nebo fenyl-piperazinyl- nižší alkylová skupina; zbytek R₅(C=Y)-Z-, ve které R₅ je nižší alkylová skupina, aminoskupina, N-nižší alkylaminoskupina, N,N-di- nižší alkylaminoskupina, N-(fenyl- nižší alkyl)- aminoskupina, N(nižší alkyl-fenyl- nižší alkyl)-aminoskupina, N-(nižší alkoxy-fenyl-nižší alkyl)-aminoskupina, N-(morfolinylnižší alkyl)-aminoskupina, N,N-di-nižší alkylamino- nižší alkylaminoskupina, pyrrolidinylová skupina, piperidylová skupina, morfolinylová skupina, nižší alkyl-piperazinylová skupina, piperidyl- nižší alkylová skupina, morfolinylnižší alkylová skupina, nižší alkyl-piperazinyl- nižší alkylová skupina, nižší alkoxylová skupina, nižší alkoxynižší alkoxylová skupina, nižší alkoxy- nižší alkylová skupina, nižší alkoxy- nižší alkoxy- nižší alkylová skupina, N,N-di-nižší alkylamino- nižší alkoxylová skupina, ··

124 morfolinyl- nižší alkoxylová skupina nebo nižší alkylpiperazinyl- nižší alkoxylová skupina, Y je atom kyslíku nebo iminoskupina, a Z není přítomno nebo je amino- nižší alkylová skupina; nebo zbytek R₆-sulfonylamino- nižší alkylová skupina, ve které R₆ je nižší alkylová skupina, nižší alkyl-fenylová skupina, nižší alkoxy-fenylová skupina, nitrofenylová skupina nebo N,N-di- nižší alkylaminoskupina,

R₄ je benzylová skupina, a

X je atom kyslíku, nebo jejich sole.

8. Sloučeniny obecného vzorce I, podle nároku 1 ve kterém n je 0,

Ri je atom vodíku, nižší alkylová skupina nebo atom halogenu,

R₂ je zbytek vybraný ze skupiny zahrnující hydroxy- nižší alkylovou skupinu, karboxylovoU skupinu, nižší alkoxykarbonylovou skupinu, amino- nižší alkylovou skupinu, Nnižší alkylamino- nižší alkylovou skupinu, (tetrahydropyranylamino)- nižší alkylovou skupinu, N,N-di- nižší alkylamino- nižší alkylovou skupinu, N-nižší alkylaminokarbonylovou skupinu, N,N-di- nižší alkylaminokarbonylovou skupinu, guanidino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkyl-sulfonylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkoxy-fenyl-sulfonylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkyl-fenyl-sulfonylamino- nižší alkylovou skupinu, nitrofenyl-sulfonylamino- nižší alkylovou skupinu, N,N-di- nižší alkylamino-sulfonylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkoxykarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkoxynižší alkoxykarbonylamino- nižší alkylovou skupinu,

125 ureido- nižší alkylovou skupinu, N-nižší alkylaminokarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, N,N-di- nižší alkylaminokarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, N-(fenylnižší alkyl)-aminokarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, N-(nižší alkyl-fenyl- nižší alkyl)-amino-karbonylaminonižší alkylovou skupinu, N-(nižší alkoxy-fenyl- nižší alkyl)-amino-karbonylamino- nižší alkylovou skupinu, N(morfolinyl- nižší alkyl)-amino-karbonylamino- nižší alkylovou skupinu, N,N-di- nižší alkylamino- nižší alkylamino-karbonylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkylkarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, piperidylnižší alkylkarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, morfolinyl- nižší alkylkarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkyl-piperazinyl- nižší alkylkarbonylaminoalkylovou skupinu, morfolinyl- nižší alkylovou skupinu, piperidyl- nižší alkylovou skupinu, pyrrolidinyl- nižší alkylovou skupinu, [(hydroxy-nižší alkyl)-pyrrolidinyl]nižší alkylovou skupinu, nižší alkyl-piperazinyl- nižší alkylovou skupinu, adamantanyl-amino- nižší alkylovou skupinu, hydroxy-piperidyl- nižší alkylovou skupinu, azepanyl- nižší alkylovou skupinu, di- nižší alkylpyrrolidinyl- nižší alkylovou skupinu, azetidinyl- nižší alkylovou skupinu, aminokarbonyl-piperidyl- nižší alkylovou skupinu, pyridyl-piperazinyl- nižší alkylovou skupinu, thiomorfolinyl- nižší alkylovou skupinu, di-nižší alkylmorfolinyl- nižší alkylovou skupinu, aminokarbonylpyrrolidinyl- nižší alkylovou skupinu, nižší alkoxykarbonyl-piperazinyl- nižší alkylovou skupinu, fenylpiperazinyl-nižší alkylovou skupinu, nižší alkoxy- nižší alkylkarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkoxynižší alkoxy- nižší alkylkarbonyl- amino- nižší alkylovou

126 skupinu, pyrrolidinyl-karbonylamino- nižší alkylovou skupinu, piperidyl-karbonylamino- nižší alkylovou skupinu, morfolinyl-karbonylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkyl-piperazinyl-karbonylamino- nižší alkylovou skupinu, N,N-di- nižší alkylamino- nižší alkoxykarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, morfolinyl-nižší alkoxy karbonylamino- nižší alkylovou skupinu a nižší alkylpiperazinyl- nižší alkoxykarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, s tou výhradou, že Ř₂ není hydroxy- nižší alkylová skupina, karboxylové skupina nebo nižší alkoxykarbonylová skupina jestliže

Rx je atom vodíku, ,R₄ je benzylová skupina, a

X je atom kyslíku, nebo jejich sole.

9. Sloučeniny obecného vzorce I, podle nároku 3 ve kterém n je 0,

Ri je atom vodíku,

R₂ je zbytek vybraný ze skupiny zahrnující amino- nižší alkylovou skupinu, N-nižší alkylamino- nižší alkylovou skupinu, N,N-di- nižší alkylamino- nižší alkylovou skupinu, N-nižší alkylaminokarbonylovou skupinu, N,N-di-nižší alkylamino-karbonylovou skupinu, guanidino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkyl-sulfonylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkoxy-fenyl-sulfonylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkyl—fenyl—sulfonylamino— nižší alkylovou skupinu, nitrofenyl-sulfonylamino- nižší alkylovou skupinu, N,N-di-nižší alkylamino-sulfonylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkoxykarbonylamino- nižší alkylovou

127 skupinu, nižší alkoxy- nižší alkoxykarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, ureido- nižší alkylovou skupinu, N-nižší alkylamino-karbonylamino- nižší alkylovou skupinu, N,N-dinižší alkylaminokarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, N(fenyl-nižší alkyl)-amino-karbonylamino- nižší alkylovou skupinu, N-(nižší alkyl-fenyl-nižší alkyl)-aminokarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, N-(nižší alkoxyfenyl- nižší alkyl)-amino-karbonylamino- nižší alkylovou skupinu, N-(morfolinyl- nižší alkyl)-amino-karbonylaminonižší alky-lovou skupinu, N,N-di- nižší alkylamino- nižší alkylamino-karbonylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkyl-karbonylamino- nižší alkylovou skupinu, piperidylnižší alkylkarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, morfolinyl-nižší alkylkarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkyl-piperazinyl- nižší alkylkarbonylaminonižší alky-lovou skupinu, morfolinyl- nižší alkylovou skupinu, piperidyl- nižší alkylovou skupinu, pyrrolidinylnižší alkylovou skupinu, nižší alkyl-piperazinyl- nižší alkylovou skupinu, adamantanyl-amino- nižší alkylovou skupinu, hydroxy-piperidyl- nižší alkylovou skupinu, azepanyl- nižší alkylovou skupinu, di-nižší alkylpyrrolidinyl- nižší alkylovou skupinu, azetidinyl- nižší alkylovou skupinu, aminokarbonyl-piperidyl- nižší alkylovou skupinu, pyridyl-piperazinyl- nižší alkylovou skupinu, thiomorfolinyl- nižší alkylovou skupinu, di- nižší alkylmorfolinyl- nižší alkylovou skupinu, aminokarbonylpyrrodinyl- nižší alky-lovou skupinu, nižší alkoxykarbonyl-piperazinyl- nižší alkylovou skupinu, fenylpiperazinyl- nižší alkylovou skupinu, nižší alkoxy- nižší alkylkarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkoxynižší alkoxy- nižší alkyl-karbonylamino- nižší alkylovou

128 skupinu, pyrrolidinyl-karbonylamino- nižší alkylovou skupinu, piperidyl-karbo-nylamino- nižší alkylovou skupinu, morfolinyl-karbo-nylamino- nižší alkylovou skupinu, nižší alkyl- piperazinyl-karbonylamino- nižší alkylovou skupinu, N,N-di-nižší alkylamino- nižší alkoxykarbonylamino- nižší alkylovou skupinu, morfolinyl- nižší alkoxykarbonylaminonižší alkylovou skupinu a nižší alkyl-piperazinyl- nižší alkoxykarbonylamino- nižší alkylovou skupinu,

R₄ je benzylová skupina, a

X je atom kyslíku nebo jejich sole.

10. Sloučenina obecného vzorce I, podle nároku 3 vybraná ze skupiny zahrnující cis-7-(3-aminomethyl-cyklobutyl)-5-(3-benzyloxy-fenyl) 7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin, trans-7-(3-aminomethyl-cyklobutyl)-5-(3-benzyloxyfenyl) -7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-ylamin, dimethylamid cis-3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo [2, 3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutan-karboxylové kyseliny, dimethylamid trans-3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo [2,3-d]-pyrimidin-7-yl]-cyklobutan-karboxylové kyseliny, methylamid cis-3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutan-karboxylové kyseliny, methylamid trans-3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl) pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutan-karboxylové kyseliny, cis-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7-(3-dimethylaminomethylcyklobutyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin, trans-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7-dimethylaminomethylcyklobutyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin, cis-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7-(3-methylaminomethyl129 cyklobutyl)-7H-pyrrolo [2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin, trans-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7-(3-methylaminomethylcyklobutyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin, trans-N-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-guanidin, cis-N-{3-[4-amino-5- (3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-guanidin, trans-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d) pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl} -methansulfonamid,

Oiš-N-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl)-methansulfonamid, trans-N-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2:, 3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl} -4-methoxy-benzensulfonamid · trans-N-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl}-4-methyl-benzensulfonamid, trans-N-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl) -pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl}-4-nitro-benzensulfonamid, propan-2-sulfonát trans-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fe nyl) -pyrrolo [2,3-d] -pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl}-amidu, ethansulfonát trans-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl) pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-amidu,

N-dimethyl-sulfamid trans-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy fenyl) -pyrrolo [2,3-d]pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl}-amidu

N-dimethyl-sulfamid cis-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy fenyl) -pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl}-amidu, methylester trans-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl) pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl)-karbamové kyseliny,

130 methylester cis-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl) pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-karbamové kyseliny,
2-methoxy-ethylester trans-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy fenyl) -pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}karbamové kyseliny

2-methoxy-ethylester cis-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}karbamové kyseliny, trans-l-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl}-3-ethyl-močovina, cis-l-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-ethyl-močovina, trans-l-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-propyl-močovina, cis-l-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-propyl-močovina, trans-l-{3-[4-amino-5- (3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl}-3-isopropyl-močovina cis-l-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl}-3-isopropyl-močovina trans-l-{3-[4-amino-5- (3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-butyl-močovina, cis-l-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-butyl-močovina, trans-l-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-terc.-butylmočovina, cis-l-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-terc.-butylmočovina, «0 «···

131 trans-1-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-benzyl-močovina, trans-l-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-(3-methyl-benzyl)močovina, cis-1-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-(3-methyl-benzyl)močovina, cis-l-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-(4-methoxy-benzyl)močovina, trans-l-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-(2-morfolin-4-ylethyl)-močovina, cis-l-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-(2-morfolin-4-ylethyl)-močovina, trans-l-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-(2-dimethylaminoethyl)-močovina, cis-l-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-(2-dimethylaminoethyl)-močovina trans-l-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-(3-morfolin-4-ylpropyl)-močovina, cis-1-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-(3-morfolin-4-ylpropyl)-močovina, trans-l-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-(3-dimethylaminopropyl) -močovina, • ·

132 cis-1-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl} -3- (3-dimethylaminopropyl) -močovina, trans-1-{3-[4-amino-5- (3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl} -močovina, cis-l-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-močovina, trans-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-močovina, cis-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl} -močovina, trans-N-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2., 3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl} -acetamid, cis-N-{ 3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl} -acetamid, trans-N-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl} -isobutyramid, cis-N-{ 3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl ] -cyklobutylmethyl} -isobutyramid, trans-N-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl ] -cyklobutylmethyl} -2,2-dimethylpropionamid, cis-N-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl} -2,2-dimethylpropionamid, trans-N-{3-[4-amino-5- (3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl ] -2-piperidin-l-ylacetamid, cis-N-{ 3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl} -2-piperidin-l-ylacetamid,

133 trans-N-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-2-morfolin-4-ylacetamid, cis-N-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-2-morfolin-4-ylacetamid, trans-N-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-2-(4-methylpiperazin-l-yl)-acetamid, cis-N-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-2-(4-methylpiperazin-l-yl)-acetamid, trans-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7-(3-morfolin-4-ylmethylcyklobutyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin, trans-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7-(3-piperidin[-1ylmethyl-cyklobutyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin, trans-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7-(3-pyrrolidin-lylmethyl-cyklobutyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin, trans-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7-[3-(4-methyl-piperazin1-ylmethyl)-cyklobutyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin, trans-7-[3-(adamantan-l-ylaminomethyl)-cyklobutyl]-5(3-benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin, trans-l-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-piperidin-4-ol, trans-7-(3-azepan-l-ylmethyl-cyklobutyl)-5(3-benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin, trans-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7-[3-(2,5-dimethylpyrrolidin-l-ylmethyl)-cyklobutyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]-pyrimidin-4-yl-amin, trans-7-(3-azetidin-l-ylmethyl-cyklobutyl)-5(3-benzyloxy-fenyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin • ·· ··

134 trans-l-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl}-piperidin-3karboxamid, trans-5-(3-benzyloxyfenyl)-7-[3-(4-pyridin-2-ylpiperazin-l-ylmethyl) -cyklobutyl] -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin4-yl-amin, trans-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7-(3-thiomorfolin-4-ylmethyl-cyklobutyl) -7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin trans-5- (3-benzyloxy-fenyl) -7- [3- (2,6-dimethylmorfolin-4-ylmethyl) -cyklobutyl] -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4yl-amin trans-(S)-l-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl} -pyrrolidin-2-karboxamid, cis-7-(3-azepan-l-ylmethyl-cyklobutyl)-5-(3-benzyloxyfenyl) -7H-pyrrolo [2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin, cis-l-{3-[4-amino-5- (3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl}-piperidin-4-ol, ethylester cis-4-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo [2,3-d]-pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-piperazin-1karboxylové kyseliny, cis-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7-[3-(4-fenyl-piperazin-lylmethyl) -cyklobutyl] -7H-pyrrolo [2, 3-d]pyrimidin-4-yl-amin, cis-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7-[3-(4-methyl-piperazin-lylmethyl) -cyklobutyl] -7H-pyrrolo [2,3-d] -pyrimidin-4-yl-amin, cis-5- (3-benzyloxy-fenyl) -7-3-thiomorfolin-4-ylmethylcyklobutyl) -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4-yl-amin, cis-5- (3-benzyloxy-fenyl) -7- [3- (2,6-dimethyl-morfolin-4ylmethyl) -cyklobutyl] -7H-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-4-yl-amin cis- (3-benzyloxy-phenyl) -pyrrolo [2,3-d]pyrimidin-7-yl] cyklobutylmethyl}-pyrrolidin-2-karboxamid,

• · • · ·

135 • · ·· cis-l-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-piperidin-3-karboxamid, trans-N-3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-2-ethoxy-acetamid, trans-N-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-2-(2-methoxy-ethoxy)acetamid, trans-1-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-methyl-močovina, cis-l-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-3-methyl-močovina, trans-pyrrolidin-l-karboxylát {3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl) -pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}amidu trans-piperidin-l-karboxylát {3-[4-amino-5-(3-benzyloxyfenyl )-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-amidu, trans-morfolin-4-karboxylát {3-[4-amino-5-(3-benzyloxyfenyl) -pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-amidu, trans-3-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-1,1-dimethyl-močovina, trans-4-methyl-piperazin-l-karboxylát {3-[4-amino-5(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl } -amidu, trans-3-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-1,1-diethyl-močovina,

2-diethylamino-ethyl ester trans-{3-[4-amino-5-(3benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]-pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl } -karbamové kyseliny

2-morfolin-4-yl-ethyl ester trans-{3-[4-amino-5-(3benzyloxy-fenyl)-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl } -karbamové kyseliny,

136 (4-methyl-piperazin-l-yl)-ethyl ester trans-{3-[4amino-5- (3-benzyloxy-fenyl) -pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-7-yl] cyklobutylmethyl}-karbamové kyseliny,

2-dimethylamino-ethyl trans-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxyfenyl) -pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutylmethyl} karbamové kyseliny, ethylester trans-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-karbamové kyseliny, ethylester trans-4-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-piperazin-1karboxylové kyseliny, cis-5-(3-benzyloxy-fenyl)-7-(3-pyrrolidin-l-ylmethylcyklobutyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin, cis-7-(3-azetidin-l-ylmethyl-cyklobutyl) -5-(3-benzyloxy-fenyl) -7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin a jejich farmaceuticky použitelné sole.

11. Sloučenina obecného vzorce I, podle nároku 1, vybraná ze skupiny zahrnující methyl ester trans-3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6brom-pyrroló [2,3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutankarboxylové kyseliny, methyl ester trans-3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6methyl-pyrrolo [2,3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutankarboxylové kyseliny, trans-3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-methyl-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutyl}-methanol, methyl ester cis-3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-brompyrrolo [2,3-d] pyrimidin-7-yl] -cyklobutankarboxylové kyseliny,

• · · · •« » · ·

137 methyl ester cis-3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6methyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutankarboxylové kyseliny, cis-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-methyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutyl}-methanol, methyl ester cis-3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6ethyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutankarboxylové kyseliny, methyl ester trans-3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6ethyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutankarboxylové kyseliny, cis-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-ethyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutyl}-methanol, trans-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-ethylpyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutyl}-methanol, a jejich farmaceuticky použitelné sole.

12. Sloučenina obecného vzorce I, podle nároku 3, vybraná ze skupiny zahrnující trans-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-methyl-7-(3-pyrrolidin-lylmethyl-cyklobutyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin, trans-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-methyl-7-[3-4-methylpiperazin-l-ylmethyl)-cyklobutyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin4-yl-amin, trans-l-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-methylpyrrolo [2, 3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-piperidin-4ol, trans-7-(3-azetidin-l-ylmethyl-cyklobutyl)-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-methyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl amin, trans-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-methyl-7-{3-[(tetrahydropyran-4-yl-amino)-methyl]-cyklobutyl}-7H-pyrrolo-[2,3-d]pyrimidin-4-yl amin, • · · ·

138 trans-((R)-l-{3- [4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-methylpyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-pyrrolidin-2yl)-methanolcis-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-methyl-7-(3-pyrrolidin-lylmethyl-cyklobutyl)-7H-pyrrolo[2, 3-d]pyrimidin-4-yl-amin, cis-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-methyl-7-[3-(4-methylpiperazin-l-ylmethyl)-cyklobutyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin4-yl-amin, cis-7-(3-azetidin-l-ylmethyl-cyklobutyl)-5-(3-benzyloxyfenyl) -6-methyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin, cis-l-{3-[4-amino-5- (3-benzyloxy-fenyl)-6-methyl-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl-cyklobutylmethyl}-piperidin-4-ol, cis-((R)-1-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-methylpyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-pyrrolidin-2yl)-methanol, cis-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-ethyl-7-(3-pyrrolidin-l-ylmethyl-cyklobutyl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin, cis-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-ethyl-7-[3-(4-methylpiperazin-l-ylmethyl)-cyklobutyl]-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin4-yl-amin, cis-7-(3-azetidin-l-ylmethyl-cyklobutyl)-6-ethyl-5-{3[(Z) -2-eth-(E)-yliden-hexa-3,5-dienyloxy]-fenyl}-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin, cis-l-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-ethyl-pyrrolo[2,3-d] pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl)-piperidin-4-ol, cis-((R)-1-{3-[4-amino-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-ethylpyrrolo[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-cyklobutylmethyl}-pyrrolidin-2yl)-methanol, cis-5-(3-benzyloxy-fenyl)-6-ethyl-7-{3-[(tetrahydropyran-4-ylamino)-methyl]-cyklobutyl}-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl-amin, a jejich farmaceuticky použitelné sole.

• · · její farmaceuticky

1 až 12 použitelná

139

13. Sloučenina obecného vzorce I, nebo použitelná sůl podle kteréhokoli z nároků pro léčení lidského nebo živočišného těla.

14. Farmaceutický prostředek vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu obecného vzorce I nebo její farmaceuticky použitelnou sůl podle kteréhokoli z nároků 1 až 12, společně s alespoň jedním farmaceuticky použitelným nosičem.

15. Použití sloučeniny obecného vzorce I podle kteréhokoli z nároků 1 až 12, nebo její farmaceuticky použitelné soli pro přípravu farmaceutického prostředku pro léčení onemocnění, které reagují na inhibici na IGF-IR-závislé buněčné proliferaci.

„ ·* · ** 16. Použití sloučeniny obecného vzorce I podle kteréhokoli z nároků 1 až 12, nebo její farmaceuticky použitelné soli pro přípravu farmaceutického prostředku pro

léčení onemocnění, kinázy. které reaguje na inhibici IGF-IR tyrozin 17. Způsob přípravy sloučenin obecného vzorce I podle nároku 1 nebo solí těchto sloučenin v y z n a č u j i c i se ti m, že se

a) pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R₂ je nižší alkylovou skupinou substituovaná aminoskupina, se sloučenina obecného vzorce II

140 ve kterém n, Ri, R₃, R₄ a X mají významy definované pro sloučeninu obecného vzorce I podlé bodu 1, nechá reagovat s hydrazinem;

b) pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R₂ je zbytek R₅-(C=Y)-Z-, kde R₅ je nesubstítuované, mono- nebo di- substituovaná aminoskupina, Y je atom kyslíku a substituent Z není přítomen nebo je nižší alkylová skupina, se sloučenina obecného vzorce III ve kterém R₁₀ je zbytek HÓ-(C=O)-Z-, kde substituent Z není přítomen nebo je nižší alkylová skupina a n, R_lz R₃, r₄a X

141 mají významy definované pro sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1, nechá reagovat se sloučeninou vzorce R₅-H, kde R5 je nesubstituované, mono- nebo di- substituovaná aminoskupina;

c) pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém . R₂ je nižší alkylová skupina substituovaná mono- nebo disubstituo-vanou aminoskupinou, se sloučenina obecného vzorce I ve kterém R₂ je zbytek R₅-(C=Y)-Z-, kde R5 je mono- nebo disubstituovaná aminoskupina, Y je atom kyslíku a substituent Z není přítomen nebo je nižší alkylová skupina, nechá reagovat s lithiumaluminiumhydridem;

d) pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém * R₂ je nižší alkylová skupina substituovaná mono- nebo disubstituovanou aminoskupinou nebo heterocyklickým zbytkem obsahujícím alespoň jeden atom dusíku v kruhu, přičemž vazba heterocyklického zbytku na nižší alkylovou skupinu je pře atom dusíku v kruhu, se sloučenina obecného vzorce IV ve kterém R_X1 je nižší alkylová skupina substituovaná 4methylfenylsulfonyloxyskupinou a n, R_x, R₃, R₄ a X mají významy definované pro sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1,

142 se nechá reagovat se sloučeninou vzorce R₁₇ ke R_X7 je mono- nebo di- substituovaná aminoskupina nebo heterocyklický zbytek obsahující alespoň jeden atom dusíku v kruhu, přičemž heterocyklický zbytek je vázán na atom vodíku R_X7-H přes atom dusíku V kruhu;

e) pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R₂ je zbytek R6-sulfonylamino- nižší alkylová skupina, kde R₆má významy definované pro sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1, se sloučenina obecného vzorce I podle nároku 1, kde R₂ je nižší alkylová skupina, nechá reagovat s R₆-sulfonylhalogenidem;

f) pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R₂ je zbytek R₅-(C=Y)-Z-, kde R₅ je volná nebo etherifikovaná hydroxylová skupina, Y je atom kyslíku a Z je amino- nižší alkylová skupina, se sloučenina obecného vzorce I podle nároku 1, kde R₂ je amino- nižší alkylová skupina, nechá reagovat se sloučeninou vzorce R₅-(C=0)-halogen, kde R₅ je volná nebo etherifikovaná hydroxylová skupina;

g) pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R₂ je zbytek R₅-(C=Y)-Z-, kde R₅ je nesubstituované nebo monosubstituovaná aminoskupina, Y je atom kyslíku nebo atom síry a Z je amino- nižší akylová skupina, se sloučenina obecného vzorce I podle nároku 1, kde R₂ je amino nižší alkylová skupina, nechá reagovat se sloučeninou vzorce R_X2-N=C=Y, kde Y je atom kyslíku nebo atom síry a zbytek R₁₂-NH- odpovídá nesubstituované nebo mono- substituované aminoskupinš R₅;

h) pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém

143 ···«

R₂ je zbytek R₅-(C=Y)-Z-, kde R₅ je nesubstituované, mono- nebo di- substituovaná aminoskupina, nebo heterocyklický zbytek obsahující alespoň jeden atom dusíku v kruhu, přičemž vazba heterocyklického zbytku je přes atom dusíku v kruhu, se sloučenina obecného vzorce I, podle nároku 1, kde R₂ je zbytek R₅-(C=Y)-Z-, kde R₅ je imidazol-l-yl, Y je atom kyslíku a Z je amino- nižší alkylová skupina, nechá reagovat se sloučeninou vzorce R5-H, kde R5 je nesubstituované, mono- nebo disubstituovaná aminoskupina nebo heterocyklický zbytek, který obsahuje alespoň jeden atom dusíku v kruhu;

i) pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R₂ je zbytek vzorce R₅-(C=Y)-Z-, kde R₅ je nesubstituované nebo substituovaná nižší alkylová skupina, Y je atom kyslíku a Z je amino- nižší alkylová skupina, se sloučenina obecného vzorce I, podle nároku 1, kde R₂ je amino- nižší alkylová skupina, nechá reagovat se sloučeninou vzorce R₅-(C=O)halogen, kde R₅ je nesubstituované nebo substituovaná nižší alkylová skupina;

j) pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R₂ je zbytek R₅-(C=Y)-Z~, kde R5 je nižší alkylová skupina substituovaná heterocyklickým zbytkem obsahujícím alespoň jeden atom dusíku v kruhu, přičemž vazba heterocyklického zbytku na nižší alkylovou skupinu je přes atom dusíku v kruhu, Y je atom kyslíku a Z je amino- nižší alkylová skupina, se sloučenina obecného vzorce V (V) (nižší alkylen)—N (nižší alkyl)-halogen

O ·· ·

144 ve kterém n, Ri, R₃, R₄ a X mají význam definovaný pro sloučeniny obecného vzorce I, podle nároku 1, nechají reagovat se sloučeninou vzorce Ri₈-H, kde Ri₈ je heterocyklický zbytek obsahující alespoň jeden atom dusíku v kruhu, přičemž heterocyklický zbytek je vázán k atomu vodíku sloučeniny R_i8-H přes atom dusíku v kruhu;

k) pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R₂ je zbytek R₅-(C=Y)-Z-, kde R₅ je nižší alkylaminoskupina, kde nižší alkylová část je substituovaná nesubstituovanou, mono- nebo di- substituovanou aminoskupinou nebo heterocyklickým zbytkem obsahujícím alespoň jeden atom dusíku v kruhu, přičemž vazba heterocyklického zbytku na nižší alkylovou část je přes atom dusíku v kruhu, Y je atom kyslíku nebo atom síry a Z je amino- nižší alkylová skupina, se sloučenina obecného vzorce VI ^γ ve kterém Y je atom kyslíku nebo atom síry a n, R_x, R₃, R₄ a X mají význam definovaný pro sloučeniny obecného vzorce I, podle nároku 1, nechá reagovat se sloučeninou R₁₃-H, kde R_X3 je nesubstituované, mono- nebo di- substituovaná aminoskupina nebo heterocyklický zbytek obsahující alespoň jeden atom ·· ····

145 dusíku v kruhu, kde heterocyklický zbytek je připojen k atomu vodíku sloučeniny R13-H přes atom dusíku v kruhu;

1) pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R₂ je zbytek R₅-(C=Y)-Z-, kde R₅ je nižší alkoxylová skupina substituovaná nesubstituovanou, mono- nebo di- substituovanou aminoskupinou nebo heterocyklickým zbytkem obsahujícím alespoň jeden atom dusíku v kruhu, přičemž vazba heterocyklického zbytku na nižší alkylovou část nižší alkoxylové skupiny je přes atom dusíku v kruhu, Y je atom kyslíku a Z je aminonižší alkylová skupina, se sloučenina obecného vzorce VII (VII)

O—(nižší alkyl)-halogen kde n, Ri, R3, R₄ a X mají význam definovaný pro sloučeniny obecného vzorce I, podle nároku 1, nechá reagovat se sloučeninou vzorce Ri₄-H, kde R_i4 je nesubstituované, mononebo di- substituovaná aminoskupina nebo heterocyklický zbytek obsahující alespoň jeden atom dusíku v kruhu, přičemž heterocyklický zbytek je připojen k atomu vodíku sloučeniny Ri₄-H přes atom dusíku v kruhu;

m) pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém ·· ·

146 «· ···· • · · • · ·

Ri je atom halogenu, se sloučenina obecného vzorce I, podle nároku 1, kde Ri je atom vodíku, nechá reagovat s Nhalogensukcinimidem;

n) pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém Ri je nižší alkylová skupina, se sloučenina obecného vzorce I, podle nároku 1, kde R_x je atom halogenu, nechá reagovat s tetra-(nižší alkyl) cínem;

o) pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, se sloučenina obecného vzorce IX (IX) kde n, Ri, R₃, R₄ a X mají význam jak je definovaný pro sloučeniny obecného vzorce I, podle nároku 1, nechá reagovat se sloučeninou obecného vzorce X

II o

ve kterém R₂ má významy sloučeniny obecného vzorce I, podle jak jsou nároku 1;

definované pro (X)

147

p) pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R₂ je nižší alkylová skupina substituovaná hydroxylovou skupinou, přičemž hydroxylová skupina je připojena na primární atom uhlíku, se sloučenina obecného vzorce I, podle nároku 1, kde R₂ je zbytek R₅-(C=Y)-Z-, kde R5 je etherifikovaná hydroxylová skupina, Y je atom kyslíku a substituent Z není přítomen nebo je alkylová skupina s 1 až 6 atomy uhlíku, nechá reagovat s lithiumaluminiumhydridem; nebo

q) pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R₂ je nižší alkylová skupina substituovaná hydroxylovou skupinou, kde hydroxylová skupina je připojena na sekundární nebo terciární atom uhlíku, se sloučenina obecného vzorce XI kde substituent R15 je zbytek Ri6^-(C=0)-Q-, kde Ri₆ je atom vodíku nebo alkylová skupina s 1 až 5 atomy uhlíku a substituent Q není přítomen nebo je alkylová skupina s 1 až 5 atomy uhlíku, nechá reagovat s Grignardovým činidlem vzorce alkyl-Mg-halogenid s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části;

·· ···· • ·. · • · ·

148 • · ·· c

• · • · přičemž funkční skupiny, které jsou přítomné ve výchozích sloučeninách postupů a) až q) a které se neúčatňují reakce, jsou v případě nutnosti přítomné v chráněné formě a chránící skupiny takto přítomné se odštěpují, přičemž tyto výchozí sloučeniny mohou také existovat ve formě solí, v případě, že je přítomná skupina schopná tvořit sole a reakce se sloučeninou ve formě soli je možná, a, pokud je to žádoucí, takto získaná sloučenina obecného vzorce I se převede na jinou sloučeninu obecného vzorce I, volná sloučenina se převede na sůl, získaná sůl sloučeniny obecného vzorce I se převede na volnou sloučeninu nebo jinou sůl a/nebo se směs isomerních sloučenin obecného vzorce I rozdělí na individuální isomery.