CZ20021166A3

CZ20021166A3 - Chemické sloučeniny

Info

Publication number: CZ20021166A3
Application number: CZ20021166A
Authority: CZ
Inventors: Guiseppe Alvaro; Fabio Romano Di; Riccardo Giovannini; Giuseppe Guercio; Yves St-Denis; Antonella Ursini
Original assignee: Glaxo Group Limited
Priority date: 1999-10-07
Filing date: 2000-10-05
Publication date: 2002-11-13
Also published as: KR20020038800A; EP1454901B1; CA2386515A1; BR0014541A; TNSN00194A1; AR025975A1; IL148964A; ES2329130T3; PL356261A1; PT1454901E; DE60042501D1; US7345041B2; CN1391564A; US7071196B2; ZA200202589B; PL201191B1; JP2003511377A; HK1065798A1; ATE270664T1; CN100413850C

Description

Oblast techniky

Předložený vynález se týká derivátů piperazinu, způsobů jejich přípravy, farmaceutických kompozic s jejich obsahem a jejich použití v medicíně.

Konkrétně se předložený vynález týká nových sloučenin, které jsou silní a specifičtí antagonisté tachykininů, včetně substance P a dalších neurokininů.

Podstata vynálezu

Předložený vynález se týká sloučenin obecného vzorce (I)

(l) kde R představuje atom halogenu nebo Ci-C₄-alkylovou skupinu;

Ri představuje atom vodíku nebo C-i-C₄-alkylovou skupinu;

R₂ představuje atom vodíku nebo Ci-C₄-alkylovou skupinu;

R₃ představuje skupinu trifluormethyl, Ci-C₄-alkyl, Ci~C₄alkoxy, trifluormethoxy nebo atom halogenu;

R₄ představuje atom vodíku, skupinu (CH₂)_qR₇ nebo (CH2)rCO(CH₂)pR₇;

R₅ představuje atom vodíku, skupinu Ci-C₄-alkyl nebo COR₆;

Rg představuje atom vodíku, skupinu hydroxy, amino, methylamino, dimethylamino, pětičlennou heteroarylovou skupinu obsahující od 1 do 3 heteroatomů, zvolených navzájem nezávisle ze souboru, zahrnujícího atom kyslíku, atom síry a atom dusíku nebo šestičlennou heteroarylovou skupinu obsahující od 1 do 3 atomů dusíku;

R₇ představuje atom vodíku, skupinu hydroxy nebo -NRgRg, kde R₈ a R₉ představují nezávisle na sobě atom vodíku nebo Ci-C₄alkyl popřípadě substituovaný skupinou hydroxy nebo amino;

Rio představuje atom vodíku;

m je nula nebo celé číslo v rozmezí od 1 do 3; n je nula nebo celé číslo v rozmezí od 1 do 3; p a r jsou nezávisle na sobě nula nebo celé číslo v rozmezí od 1 do 4; q je celé číslo v rozmezí od 1 do 4;

a jejich farmaceuticky přijatelné sole a solváty.

Předložený vynálezu se dále týká sloučenin obecného vzorce (I) a jejich farmaceuticky přijatelných soli a solvátu, kde

R představuje atom halogenu nebo Ci-C₄-alkylovou skupinu;

Ri představuje atom vodiku nebo Ci-C₄-alkylovou skupinu;

R₂ představuje atom vodiku, skupinu Ci-C₄-alkyl, C₂-C₆-alkenyl nebo C3-C₇-cykloalkyl; nebo Ri a R₂ společně s atomem dusiku, respektive atomem uhlíku, ke kterým jsou vázány, představují 5- nebo 6-člennou heterocyklickou skupinu;

R₃ představuje skupinu trifluormethyl, Ci-C₄-alkyl, Ci-C₄alkoxy, trifluormethoxy nebo atom halogenu;

R₄ představuje atom vodíku, skupinu (CH₂)_qR₇ nebo (CH₂)rCO(CH₂)_pR7;

Rs představuje atom vodíku, skupinu Ci-C₄-alkyl nebo CORg;

R₆ představuje atom vodíku, skupinu hydroxy, amino, methylamino, dimethylamino, pětičlennou heteroarylovou skupinu, obsahující od 1 do 3 heteroatomů zvolených ze souboru, zahrnujícího atom kyslíku, atom síry a atom dusíku nebo šestičlennou heteroarylovou skupina obsahující od 1 do 3 atomů dusíku;

R₇ představuje atom vodíku, skupinu hydroxy nebo NR_SR₉, kde R₈a Rg představují nezávisle na sobě atom vodíku nebo C1-C4alkyl popřípadě substituovaný skupinou hydroxy nebo amino;

R₁₀ představuje atom vodíku, skupinu Ci-C₄-alkyl nebo R₁₀společně s R₂ představuje C₃-C₇-cykloalkylovou skupinu;

m je nula nebo celé číslo v rozmezí od 1 do 3; n je nula nebo celé číslo v rozmezí od 1 do 3; par jsou nezávisle na sobě nula nebo celé číslo v rozmezí od 1 do 4; q je celé číslo v rozmezí od 1 do 4;

s podmínkou, že pokud Ri a R₂ společně s atomem dusíku, respektive atomem uhlíku, ke kterým jsou vázány, představují 5- nebo 6-člennou heterocyklickou skupinu, i) m je 1 nebo 2, ii) pokud m je 1, R nepředstavuje atom fluoru a iii) pokud m je 2, dva substituenty R nejsou oba atom fluoru.

Vhodné farmaceuticky přijatelné sole sloučenin obecného vzorce (I) zahrnují adiční sole kyselin, vytvořené s farmaceuticky přijatelnými organickými nebo anorganickými kyselinami, například hydrochloridy, hydrobromidy, sírany, alkyl- nebo arylsulfonáty (například methansulfonáty nebo ptoluensulfonáty), fosforečnany, octany, citronany, jantarany, vínany, fumarany a maleinany.

Solváty mohou být například hydráty.

Dále uvedené reference na sloučeniny podle předloženého vynálezu zahrnují jak sloučeniny obecného vzorce (I), tak i jejich farmaceuticky přijatelné adiční sole kyselin společně s farmaceuticky přijatelnými solváty.

Odborníkovi v oboru je zřejmé, že sloučeniny obecného vzorce (I) obsahují alespoň jedno chirální centrum (konkrétně atom uhlíku označený jako * v obecném vzorci (I).

Ve sloučeninách obecného vzorce (I) mohou existovat další asymetrické atomy uhlíku.

Tak například pokud R₂ je skupina Ci-C₄-alkyl, C₂-C₆-alkenyl nebo C3-C₇-cykloalkyl a R5 a R10 jsou atomy vodíku, sloučeniny obecného vzorce (I) mají dva asymetrické atomy uhlíku a ty mohou být representovány obecnými vzorci (la, lb, lc a ld)

Klínovitě nakreslená vazba označuje, že vazba je nad rovinou papíru. Přerušovaně nakreslená vazba označuje, že vazba je pod nad rovinou papíru.

Konfigurace znázorněná pro chirální atom uhlíku, označený jako * v obecných vzorcích lb a ld, je dále označována jako β konfigurace a v obecných vzorcích la a lc jako α konfigurace.

Obecně ve specifických sloučeninách uvedených dále konfigurace β chirálního atomu uhlíku, označeného jako odpovídá izomeru S a konfigurace α odpovídá izomeru R.

Konfigurace dvou chirálních atomů uhlíků, znázorněných v obecných vzorcích la a lb je dále označována jako konfigurace anti a v obecných vzorcích lc a ld jako konfigurace syn.

Dále, pokud R₂ je skupina Ci-C₄-alkyl, C₂-C₆-alkenyl nebo C₃C₇-cykloalkyl nebo Rio je Ci-C₄-alkylová skupina a R₅ je skupina Ci-C₄-alkyl nebo CORg, sloučeniny podle předloženého vynálezu mají tři asymetrické atomy uhlíku.

Označení konfigurací R a S asymetrických atomů uhlíku sloučenin podle předloženého vynálezu bylo provedeno podle pravidel, které popsali Chán, Ingold a Prelong, 1956, 12, 81.

Rozumí se, že všechny enantiomery a diastereisomery a jejich směsi spadají do rozsahu předmětu předloženého vynálezu.

Výraz alkyl, jak je zde používán, jako skupina nebo část skupiny, označuje alkylovou skupinu s přímým nebo rozvětveným řetězcem, obsahující od 1 do 4 atomů uhlíku; příklady takových skupin zahrnují methyl, ethyl, propyl, isopropyl, nbutyl, isobutyl, nebo terc.-butyl.

Výraz halogen označuje atom fluoru, atom chloru, atom bromu nebo atom jodu.

Výraz C2-C6-alkenyl definuje uhlovodíkový zbytek s přímým nebo rozvětveným řetězcem, obsahující jednu dvojnou vazbu a 2-6 atomů uhlíku, jako je například ethenyl, 2-propenyl, 3butenyl, 2-butenyl, 2-pentenyl, 3-pentenyl, 3-methyl-2butenyl nebo 3-hexenyl.

Výraz C₃-C7-cykloalkylová skupina znamená monocyklický uhlovodíkový kruh, obsahující 3 uhlíku, jako je například cyklopropyl, cyklopentyl, cyklohexyl nebo cykloheptyl.

nearomatický až 7 atomů cyklobutyl,

Výraz Ci-C₄-alkoxy skupina může být alkoxy skupina s přímým nebo rozvětveným řetězcem, například methoxy, ethoxy, propoxy, prop-2-oxy, butoxy, but-2-oxy nebo methylprop-2-oxy.

Pokud Ri a R₂ společně s atomem dusíku, respektive atomem uhlíku, ke kterým jsou vázány, představují 5- nebo 6-člennou heterocyklickou skupinu, pak tato skupina je nasycená nebo obsahuje jednu dvojnou vazbu. Takovou skupinou může být skupina 3,6-dihydro-2H-pyridin-l-yl, piperidin-l-yl nebo pyrrolidin-l-yl.

Rg jako 5- nebo 6-členná heteroarylová skupina podle předloženého vynálezu zahrnuje furanyl, thiofenyl, imidazolyl, thiazolyl, oxa.zolyl, pyridyl nebo pyrimidinyl.

Skupina R₅ může být v poloze 3, 5 nebo 6 piperazinového kruhu sloučenin obecného vzorce (I)

O)

Pokud R představuje atom halogenu, pak je jím výhodně atom chloru nebo výhodněji atom fluoru nebo pokud R je Ci-C₄-alkyl, pak je jím výhodně methyl nebo ethyl a m je 0 nebo celé číslo v rozmezí od 1 do 2.

Vhodné hodnoty Ri zahrnují atom vodíku, skupiny methyl, ethyl nebo propyl.

Vhodné hodnoty R₂ zahrnují atom vodíku, skupinu methyl, ethyl, propyl, isopropyl, 2-propenyl nebo cyklopropyl.

Vhodné hodnoty R₃ zahrnují skupinu methyl, ethyl nebo trifluormethyl.

Pokud R₄ je (CH₂)_qR₇ nebo (CH₂) _rC0 (CH₂)_PR₇, R7 je výhodně atom vodíku, skupina hydroxy, NRgRg je například NH₂, NH(Ci-C₄alkyl) například NH-methyl nebo N(Ci~C₄-alkyl) _2ř například N (methyl) 2, NH (Ci~C₄-alkyl) NH₂ například NH (ethyl) NH₂, NH(Ci~ C₄-alkyl), kde q je 1 nebo 2 a p a r jsou nezávisle na sobě nula nebo celé číslo v rozmezí od 1 do 2.

Vhodné hodnoty R5 zahrnují atom vodíku nebo skupinu C1-C4alkyl (například methyl).

R je výhodně atom halogenu (například atom fluoru nebo atom chloru) a/nebo skupina Ci-C₄-alkyl (například methyl) a m je výhodně celé číslo od 1 do 2.

Vhodné hodnoty R₁₀ zahrnují atom vodíku, skupinu Ci~C₄-alkyl (například methyl) nebo R₁₀ společně s R₂ představuje skupinu C₃-C₇-cykloalkyl (například cyklopropyl).

Ri je výhodně atom vodíku nebo skupina methyl.

R2 je výhodně atom vodíku, skupina methyl, isopropyl, 2propenyl nebo cyklopropyl nebo R₂ společně s R_x je skupina

3,6-dihydro-2H-pyridin-7-yl, piperidin-l-yl nebo pyrrolidin1-yl.

R₃ je výhodně skupina trifluormethyl.

R4 je výhodně atom vodíku, skupina amino-Ci-C4~alkyl (například aminoethyl), aminoacetyl nebo amino(C1-C4alkylaminokarbonyl).

R(5 je výhodně atom vodíku, skupina methyl nebo ethyl.

R10 je výhodně je cyklopropyl.	atom vodíku,	skupina methyl nebo společně s	r₂
Výhodná třída	sloučenin	obecného	vzorce (	I)	jsou	ty
sloučeniny, ve	kterých atom uhlíku	označený	j ako	* je	v
konfiguraci β.
Výhodná třída	sloučenin	obecného	vzorce (	I)	jsou	ty
sloučeniny, ve	kterých R	je zvoleno	nezávisle	ze	souboru,
zahrnujícího atom halogenu	nebo skupinu methyl	, kde m je	1

nebo 2. Výhodněji je m rovno 2. V této třídě jsou obzvláště výhodné ty sloučeniny, ve kterých R je v poloze 2 a 4.

Sloučeniny obecného vzorce (I), kde R₃ je skupina trifluormethyl a n je rovno 2, představují výhodnou třídu sloučenin a v rámci této třídy je R₃ výhodně v poloze 3 a 5.

Další výhodná třída sloučenin obecného vzorce (I) jsou ty sloučeniny, ve kterých R₄ je atom vodíku, skupina (CH₂) _rC0 (CH₂)pR-7 nebo (CH₂)_qR7, kde R₇ představuje amin. V rámci této třídy jsou obzvláště výhodné ty sloučeniny, ve kterých p i r jsou nezávisle na sobě nula nebo 1 nebo q je 1 nebo 2.

Obzvláště výhodná třída sloučenin obecného vzorce (I) jsou ty sloučeniny, ve kterých R je zvoleno nezávisle ze souboru, zahrnujícího atom halogenu nebo methyl, R₃ je trifluormethyl v poloze 3 a 5, Ri je atom vodíku nebo methyl, R₂ je atom vodíku, skupina methyl, 2-propenyl, nebo cyklopropyl nebo společně s R_x vytváří skupinu 3,6-dihydro-2H-pyridin-l-yl, piperidin-l-yl nebo pyrrolidin-l-yl, R_xo představuje atom vodíku, skupinu methyl nebo R_xo společně s R₂ tvoří skupinu cyklopropyl, R₄ je atom vodíku, skupina aminoacetyl nebo aminoethyl a R₅ je atom vodíku nebo skupina methyl.

Obzvláště výhodná třída sloučenin obecného vzorce (I) je ty sloučeniny, ve kterých R je zvoleno nezávisle ze souboru, zahrnujícího atom halogenu nebo methyl, R₃ je trifluormethyl v poloze 3 a 5, R_x je atom vodíku nebo methyl, R₂ je atom vodíku, skupina methyl, 2-propenyl nebo cyklopropyl nebo společně s R_x vytváří skupinu 3,6-dihydro-2H-pyridin-l-yl, piperidin-l-yl nebo pyrrolidin-l-yl, R_x představuje atom vodíku, skupinu methyl nebo R_x společně s R₂ tvoří cyklopropyl, R₄ je atom vodíku a R5 je atom vodíku.

Další obzvláště výhodná třída sloučenin obecného vzorce (I) je ty sloučeniny, ve kterých R je zvoleno nezávisle ze souboru, zahrnujícího atom halogenu nebo methyl a m je 2, R₃je trif luormethyl v poloze 3 a 5, Ri a R2 jsou nezávisle na sobě atom vodíku nebo methyl, R₄ je atom vodíku a R₅ je atom vodíku.

Výhodné sloučeniny podle předloženého vynálezu jsou:

2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-1-karboxylová kyselina, (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-amid;

2-(2-isopropyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-amid;

2-(4-fluor-3-methy1-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-amid;

2-(2,4-difluor-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-amid;

2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, [1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)ethyl]-methyl-amid;

2-(4-fluor-fenyl)- piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,4bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-amid;

2-fenyl-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5-bistrif luormethyl-benzyl ) -methyl- amid;

2-(2,4-dichlorfenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5— bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-amid;

2-(3,4-dichlorfenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5— bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-amid;

2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-3-methyl-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-amid;

2-(2-methyl-4-fluor-fenyl)-6-methyl- piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-amid;

2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, [1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-ethyl]-methyl-amid;

4-(2-amino-acetyl)-2-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin1- karboxylová kyselina, (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)methyl-amid;

2- (S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-4-(piperidin-4-karbonyl)piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5-bis-trifluormethylbenzyl) -methyl-amid;

4-(2-amino-ethyl)-2-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-1 karboxylová kyselina, (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl amid;

2-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, [(1-3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-cyklopropyl]methyl-amid;

[2-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-pyrrolidin-l-ylJ-[2-(S)-(4fluor-2-methyl-fenyl) -piperazin-l-yl'] -methanon;

[2-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-3,6-dihydro-2H-pyridin-lyl] -[2-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-yl]-methanon;

[2-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-piperidin-l-yl]—[2—(S)—(4— fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-yl]-methanon;

2-(4-fluor-2-methy1-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, [1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-but-3-enyl]-methyl-amid;

2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, [1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-2-methy1-propyl]-methylamid;

2-(4-fluor-2-methyl-fenyl-piperazin-l-karboxylová kyselina, [(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-cyklopropyl-methyl]-methylamid;

a jejich enantiomery, farmaceuticky přijatelné sole (například hydrochloridy, methansulfonáty, acetáty) a solváty.

Obzvláště výhodné sloučeniny podle předloženého vynálezu j sou:

2-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-4-(piperidin-4-karbonyl)piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5-bis-trifluormethylbenzyl ) -methyl-amid, hydrochlorid;

[2-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-3,6-dihydro-2H-pyridin-lyl] -[2-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-yl]-methanon, hydrochlorid (enantiomer A);

4-(2-amino-acetyl)-2-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin1- karboxylová kyselina, (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)methyl-amid, hydrochlorid;

2- (S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, [1-(R)-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-ethyl]methyl-amid, methansulfonát;

2-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, [1-(R)-(3,5-bis-trifluormethylfenyl)-ethyl]-methylamid, acetát;

a jejich solváty.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu jsou antagonisté tachykininů, včetně substance P a ostatních neurokininů, a to jak in vitro, tak i in vivo a jsou tedy použitelné pro léčení stavů způsobovaných tachykininy, včetně substance P a ostatních neurokininů.

Vazebná afinita NKl-receptoru byla určena in vitro na základě schopnosti sloučenin přemisťovat [³H] - substanci P (SP) z rekombinantních lidských NKl receptorů exprimovaných v buněčných membránách vaječníkových buněk čínského křečka (Chinese Hamster Ovary - CHO).

CHO buněčné membrány byly připraveny použitím modifikace způsobu, který popsal T. Dam a R. Quirion (Peptides, 7:855864, 1986) . Ligandová vazba byla prováděna v 0,4 ml 50 mM HEPES, pH 7,4, obsahujícím 3 mM MnCl₂, 0,02% BSA, 0,5 nM [³H]Substance P (30=56 Cilmmol, Amersham), konečné membránové koncentrace 25 μς proteinu/ml a s testovanými sloučeninami. Inkubace probíhala při pokojové teplotě po 40 minut. Nespecifická vazba byla určena použitím přebytku Substance P (1 μΜ) a představuje zhruba 6% celkové vazby.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu byly dále charakterizovány ve funkčním testu pro určení jejich inhibičního účinku. Lidské NK1-CHO buňky byly stimulovány Substancí P a aktivace receptorů byla určována měřením akumulace cytidindifosfodiacylglycerolu (CDP-DAG), který je liponukleotidový prekurzor fosfatidylinositol difosfátu. CDPDAG se akumuluje v přítomnosti Li⁺ v důsledku receptorem způsobované aktivace fosfolipázy C (PLC) (Godfrey, Biochem.

J., 258:621-624, 1989). Způsob je detailně popsán v práci Ferraguti a kol. (Mol. Cell. Neurosci., 5:269-276, 1994).

Působení sloučenin podle předloženého vynálezu na NK1 receptory může být určeno použitím obvyklých testů. Schopnost vázat receptory NKl byl určena použitím modelu klepání končetiny tarbíka, jak jej popsali Rupniak a Williams, Eur. J. of Pharmacol., 1994.

Bylo také zjištěno, že sloučeniny podle předloženého vynálezu vykazují anxiolytické účinky v obvyklých testech. Například marmoset human threat test (Costall a kol., 1988).

Sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou být použitelné při léčení poruch CNS, konkrétně při léčení nebo prevenci závažných depresivních poruch včetně bipolární deprese, unipolární deprese, jednotlivých nebo rekurentních závažných depresivních episod s nebo bez psychotických znaků, katatonických znaků, melancholických znaků, atypických znaků nebo vypuknutí po porodu, léčení úzkosti a léčení panických poruch. Ostatní poruchy nálady, spadající pod výraz závažné depresivní poruchy, zahrnují dysthymickou poruchu s časným nebo pozdním nástupem a s nebo bez atypických znaků, neurotické deprese, posttraumatické stresové poruchy a sociální fóbii; demence Alzheimerova typu s časným nebo pozdním nástupem, s depresivní náladou; vaskulární demenci s depresivní náladou; poruchy nálady indukované alkoholem, amfetaminy, kokainem, halucinogeny, inhaláty, opioidy, fencyklidinem, sedativy, hypnotiky, anxiolytiky a ostatními látkami; schizoafektivní poruchy depresivního typu; a změny chování s depresivní náladou. Závažné depresivní poruchy také mohou vznikat z obecného zdravotního stavu včetně, aniž by tím byly omezeny, infarktu myokardu, diabetů, potratu nebo interupce a pod.

trigeminální neuralgie,

Sloučeniny podle předloženého vynálezu jsou použitelné jako analgetika. Jsou konkrétně použitelné při léčení traumatických bolestí jako je pooperační bolest; traumatická avulzivní bolest jako je brachial plexus; chronická bolest jako je artritická bolest jako ta, ke které dochází při osteo-, reumatoidní nebo psoriatické artritidě; neuropatická bolest jako je post-herpetická neuralgie, neuralgie, segmentální nebo interkostální fibromyalgie, kausalgie, periferální neuropatie, diabetická neuropatie, neuropatie indukovaná chemoterapií, neuropatie související s AIDS, okcipitální neuralgie, genikulární neuralgie, glosofaryngeální neuralgie, reflexní sympatetická dystrofie, fantomová limbální bolest; různé formy bolesti hlavy jako je migréna, akutní nebo chronická bolest hlavy s tenzí, temporomandibulární bolest, bolest čelistního oblouku, shluková bolest hlavy; odontalgie; rakovinná bolest; bolest vnitřního původu; gastrointestinální bolest; nervová bolest; bolest způsobená sportovním poraněním; dysmenorhea; menstruační bolest; meningitida; arachnoiditida;

muskuloskeletální bolest; bolest spodní části zad, například spinální stenóza; výhřez disku; ischias; angína; ankylózní spondyolitida; dna; bolest jizev; svědění; a talamická bolest jako je talamická bolest po mrtvici.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu jsou také použitelné při léčení poruch spánku včetně dysomnie, insomnie, spánkového apnoe, narkolepsie, poruch každodenního rytmu.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu jsou také použitelné při léčení nebo prevenci kognitivních poruch. Kognitivní poruchy zahrnují demenci, amnestické poruchy a další neurčené kognitivní poruchy.

Dále jsou sloučeniny podle předloženého vynálezu také použitelné jako látky pro posílení paměti a/nebo kognitivních funkcí u zdravých lidí bez kognitivního a/nebo paměťového deficitu.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu jsou také použitelné při léčení tolerance na řadu látek a závislosti na řadu látek. Například jsou použitelné při léčení závislosti na nikotin, alkohol, kofein, fencyklidin (fencyklidinu podobné sloučeniny), nebo při léčení tolerance a závislosti na opiátech (například marihuana, heroin, morfium) nebo benzodiazepinech; při léčení závislosti na kokainu, sedativních hypnoticích, amfetaminu nebo amfetaminových látkách (například dextroamfetaminu, methylamfetaminu) nebo na jejich kombinacích.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu jsou také použitelné jako protizánětlivá činidla. Konkrétně jsou použitelná při léčení zánětů při astmatu, horečce, chronické bronchitidě a rheumatoidní artritidě; při léčení zánětlivých onemocnění gastrointestinálního traktu jako je Crohnova nemoc, ulcerativní kolitida, zánětlivá střevní nemoc a poškození indukovaná nesteroidními protizánětlivými látkami; zánětlivá onemocnění kůže jako je herpes a ekzém; zánětlivá onemocnění močového měchýře jako je cystitida a nutkavá inkontinence; a oční a zubní záněty. Sloučeniny podle předloženého vynálezu jsou také použitelné při léčení alergických poruch, obzvláště alergických poruch kůže jako je kopřivka a alergických poruch dýchacích cest jako je rinitida.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu jsou také použitelné při léčení zvracení, to jest zvedání žaludku, nucení na zvracení a zvracení. Zvracení zahrnuje akutní zvracení, opožděné zvracení a anticipační zvracení. Sloučeniny podle předloženého vynálezu jsou použitelné při léčení zvracení jakkoli indukovaného. Například může zvracení být indukováno léky jako jsou rakovinová chemoterapeutická činidla jako jsou alkylační činidla, například cyklofosfamid, karmustin, lomustin a chlorambucil; cytotoxická antibiotika, například dactinomycin, doxorubicin, mitomycin-C a bleomycin; antimetabolity, například cytarabin, methotrexát a 5-fluoruracil; vínkové alkaloidy, například etoposid, vinblastin a vinkristin; a ostatní látky jako jsou cisplatin, dakarbazin, prokarbazin a hydroxymočovina a jejich kombinace; nemocí z ozáření; radiační terapií, například ozařováním hrudníku nebo břicha, jako při léčení rakoviny; jedy; toxiny jako jsou toxiny vzniklé při poruchách metabolismu nebo infekci, například gastritida, nebo uvolňované v průběhu bakteriální nebo virové gastrointestinální infekce; těhotenstvím; vestibulárními poruchami, jako je mořská nemoc, závrať, nevolnost typu závrati a Menierova nemoc; pooperačními obtížemi; gastrointestinální obstrukcí; sníženou gastrointestinální motilitou; vnitřní bolestí, například infarktem myokardu nebo peritonitidou; migrénou; zvýšeným nitrolebečním tlakem; sníženým nitrolebečním tlakem (například výšková nemoc); opioidními analgetiky jako je morfium; a gastro-esofageálním refluxem, překyselením žaludku, přílišnou konzumací jídla nebo pití, dávivým pálením žáhy, pálením žáhy, jako je episodální pálení žáhy, noční pálení žáhy, pálení žáhy indukované jídlem a dyspepsie.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu jsou také použitelné při léčení gastrointestinálních poruch, jako je syndrom dráždivého střeva; kožní poruchy jako je psoriáza, svědění a spálení sluncem; vasospastických onemocnění jako je angína, vaskulární bolest hlavy a Reynaudova nemoc; cerebrální ischemie jako je cerebrální vasospasmus po subarachnoidním krvácení; fibrózních a kolagenových onemocnění jako je skleroderma a eosinofilní fasciolóza; poruch vztahujících se ke zvýšení nebo supresi imunity jako je systémový lupus erytematodes a reumatických onemocnění jako je zánět vazivové tkáně; a kašle.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu jsou obzvláště užitečné při léčení depresivních stavů, při léčení úzkosti a panických poruch. Depresivní stavy zahrnují závažné depresivní poruchy včetně bipolární deprese, unipolární deprese, jednotlivých nebo rekurentních závažných depresivních episod s nebo bez psychotických znaků, katatonických znaků, melancholických znaků, atypických znaků nebo vypuknutí po porodu, dysthymické poruchy s časným nebo pozdním nástupem a s nebo bez atypických znaků, neurotické deprese a sociální fóbii; demence Alzheimerova typu s časným nebo pozdním nástupem, s depresivní náladou; vaskulární demenci s depresivní náladou; poruchy nálady alkoholem, amfetaminy, kokainem, halucinogeny, opioidy, fencyklidinem, sedativy, hypnotiky, anxiolytiky a ostatními látkami; schizoafektivní poruchy depresivního typu.

indukované inhaláty,

Sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou být podávány v kombinaci s ostatními účinnými látkami jako jsou 5HT3 antagonisté, agonisté serotoninu, selektivní inhibitory vychytávání serotoninu (selective serotonin reuptake inhibitors - SSRI), inhibitory vychytávání noradrenalinu (noradrenaline re-uptake inhibitors - SNRI), tricyklická antidepresiva nebo dopaminergní antidepresiva.

Vhodní 5HT3 antagonisté, které je možné použít v kombinaci se sloučeninami podle předloženého vynálezu, zahrnují například ondansetron, granisetron, metoklopramid.

Vhodní agonisté serotoninu, které je možné použít v kombinaci se sloučeninami podle předloženého vynálezu, zahrnují samaritan, rauwolscin, yohimbin, metoklopramid.

Vhodné SSRI, které je možné použít v kombinaci se sloučeninami podle předloženého vynálezu, zahrnují fluoxetin, atalopram, femoxetin, fluvoxamin, paroxetin, indalpin, sertralin, zimeldin.

Vhodné SNRI, které je možné použít v kombinaci se sloučeninami podle předloženého vynálezu, zahrnují venlafaxin a reboxetin.

Vhodná tricyklická antidepresiva, které je možné použít v kombinaci se sloučeninami podle předloženého vynálezu, zahrnují imipramin, amitriptilin, chlomipramin a nortriptilin.

Vhodná dopaminergní antidepresiva, které je možné použít v kombinaci se sloučeninami podle předloženého vynálezu, zahrnují bupropion a amineptin.

Je zřejmé, že sloučeniny v kombinaci nebo kompozice mohou být podávány současně (buď ve stejném nebo v odlišných farmaceutických přípravcích) nebo postupně.

Předložený vynález se proto týká sloučenin obecného vzorce (I) nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí nebo solvátů pro použití při léčení, obzvláště v humánní medicíně.

Předložený vynález se také týká použití sloučenin obecného vzorce (I) nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí nebo solvátů pro přípravu léčiv pro léčení stavů způsobovaných tachykininy, včetně substance P a ostatních neurokininů.

Předložený vynález se také ve svém provedení nebo dalším aspektu týká způsobu léčení savců, včetně člověka, obzvláště léčení stavů způsobovaných tachykininy, včetně substance P a ostatních neurokininů, zahrnujícího podávání účinného množství sloučeniny obecného vzorce (I) nebo její farmaceuticky přijatelné sole.

Je zřejmé, že reference na léčení je zamýšlena tak, že zahrnuje profylaxi stejně tak jako úlevu existujících symptomů. Sloučeniny obecného vzorce (I) mohou být podávány jako surová chemická látka, ale účinná složka je výhodně podávána ve formě farmaceutického přípravku.

V souladu s tím se předložený vynález také týká farmaceutických kompozic, které obsahují alespoň jednu sloučeninu obecného vzorce (I) nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl a jsou upraveny pro podávání libovolným způsobem. Takové kompozice jsou výhodně ve formě upravené pro použití v medicíně, obzvláště v humánní medicíně a mohou být výhodně připraveny obvyklým způsobem použitím jednoho nebo více farmaceuticky přijatelných nosičů nebo excipientů.

Sloučeniny obecného vzorce (I) mohou proto být připraveny pro podávání orální, bukání, parenterální, topické (včetně očního a nosního), nepotní nebo rektální nebo ve formě vhodné pro podávání inhalací nebo insuflací (buď ústy nebo nosem) .

Pro orální podávání mohou být farmaceutické kompozice například ve formě tablet nebo kapslí připravených obvyklými způsoby na základě farmaceuticky přijatelných excipientů jako jsou vazebná činidla (například preželatinizovaný kukuřičný škrob, polyvinylpyrolidon nebo hydroxypropylmethylce-lulóza) ; plnidla (například laktóza, mikrokrystalická celulóza nebo hydrogenfosforečnan vápenatý); lubrikanty (například stearan hořečnatý, talek nebo oxid křemičitý); desintegranty (například bramborový škrob nebo sodný glykolát škrobu); nebo smáčedla (například laurylsulfát sodný). Tablety mohou být povlékány způsoby dobře známými v oboru. Tekuté přípravky pro orální podávání mohou mít například formu roztoků, sirupů nebo suspenzí nebo mohou být připraveny ve formě bezvodého produktu pro rekonstituci vodou nebo ostatními vhodnými vehikuly před použitím. Takové tekuté přípravky mohou být připraveny obvyklými způsoby použitím farmaceuticky přijatelných aditiv jako jsou suspenzní činidla (například sorbitolový sirup, deriváty celulózy nebo hydrogenované jedlé tuky); emulzifikační činidla (například lecitin nebo arabská guma); bezvodá vehikula (například mandlový olej, olejovité estery, ethylalkohol nebo frakcionované rostlinné oleje); a konzervační činidla (například methyl nebo propyl-phydroxybenzoáty nebo kyselina sorbová). Přípravky také mohou podle potřeby obsahovat pufrové sole, chuťová činidla, barviva a sladidla. Přípravky pro orální podávání mohou být vhodně upraveny pro získání řízeného uvolňování účinné sloučeniny.

Pro bukální podávání může mít kompozice formu tablet nebo být upravena obvyklým způsobem.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou být připraveny pro parenterální podávání ve formě jednorázové injekce (bol?us) nebo kontinuální infúzí. Přípravky pro injekci mohou být připraveny ve formě jednotkové dávky, například v ampulkách nebo ve vícedávkových kontejnerech s přidaným konzervačním činidlem. Kompozice mohou také mít formu suspenzí, roztoků nebo emulzí v olejových nebo vodných vehikulech a mohou obsahovat činidla jako jsou suspenzní, stabilizační a/nebo disperzní činidla. Alternativně účinná složka může být ve formě prášku pro rekonstituci před použitím vhodným vehikulem například sterilní apyrogenní vodou.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou být upraveny pro topické podávání ve formě mastí, krémů, gelů, vod, pesarů, aerosolů nebo kapek (například očních, ušních nebo nosních kapek). Masti a krémy mohou být například upraveny s vodnou nebo olejovou bází přidáním vhodného zahušťovacího a/nebo gelujícího činidla. Masti pro podávání do očí mohou být vyrobeny sterilním způsobem za použití sterilizovaných složek.

Vody mohou být připraveny s vodnou nebo olejovou bází a obecně budou obsahovat jedno nebo více emulzifikačních činidel, stabilizačních činidel, disperzních činidel, suspenzních činidel, zahušťovadel nebo barviv. Kapky mohou může připraveny s vodnou nebo bezvodou bází a také obsahovat jedno nebo více disperzních činidel, stabilizačních činidel, solubilizačních činidel nebo suspenzních činidel. Mohou také obsahovat konzervační činidla.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou být připlaveny jako rektální kompozice jako jsou čípky nebo retenční klystýry, například obsahující obvyklé čípkové báze jako je kakaové máslo nebo ostatní glyceridy.

Sloučeniny podle předloženého vynálezu mohou také být připraveny jako depotní přípravky. Takové dlouho působící přípravky mohou být podávány implantací (například podkožně nebo nitrosvalově) nebo intramuskulární injekcí. Tak například mohou být sloučeniny podle předloženého vynálezu připraveny s vhodnými polymerními nebo hydrofobními materiály (například ve formě emulzí v přijatelném oleji) nebo iontoměničovými pryskyřicemi nebo jako málo rozpustné deriváty, například ve formě málo rozpustných solí.

Pro intranasální podávání mohou být sloučeniny podle předloženého vynálezu připraveny jako roztoky pro podávání zařízením s vhodným odměřovacím uspořádáním nebo s jednotkovou dávkou nebo alternativně ve formě práškové směsi s vhodným nosičem pro podávání vhodným podávačům zařízením.

Navrhované dávky sloučeniny podle předloženého vynálezu jsou 1 až asi 1000 mg denně. Je zřejmé, že může být nutné provést rutinní obměny dávkování v závislosti na věku a stavu pacienta a přesné dávkování bude nakonec určeno ošetřujícím lékařem nebo veterinářem. Dávkování také bude záviset na způsobu podávání a konkrétní zvolené sloučenině.

Tak pro parenterální podávání bude denní dávka typicky v rozmezí od 1 do asi 100 mg, výhodně 1 až 80 mg denně. Pro orální podávání bude denní dávka typicky v rozmezí od 1 do 300 mg, například 1 až 100 mg.

Sloučeniny obecného vzorce (I) a jejich sole a solváty mohou může připraveny obecnými způsoby naznačenými dále. V následujícím popisu mají skupiny R, Ri, R₂, R₄, Rsz R-6z R7, Rs_řR_g, Rio a čísla m, n, p, q a r stejný význam jako bylo uvedeno výše pro sloučeniny obecného vzorce (I), pokud není uvedeno j inak.

Při postupu podle obecného způsobu (A) může být sloučenina obecného vzorce (I), kde R₄ je atom vodíku nebo skupina (CH₂)_qR7z jak je definováno v obecném vzorci (I), za podmínky, že pokud R₅ je skupina Ci-C₄-alkyl nebo COR₆, R₅ není v poloze 3 piperazinového kruhu, připravena redukcí ketopiperazinu obecného vzorce (II), ve kterém R_4a je atom vodíku nebo vhodná ochranná skupina atomu dusíku nebo R_4a je skupina (CH₂)_qR₇ nebo jejích chráněný derivát, následovanou, je-li to nutné nebo potřebné, odstraněním libovolné ochranné skupiny.

(Π)

Reakce může být prováděna použitím vhodného kovového redukčního činidla jako je hydrid kovu, například hydrid bóru, nebo komplex hydridu kovu jako je hydrid lithia a hliníku, borohydrid nebo organokovový komplex jako je bormethylsulfid, 9-borabicyklononan (9-BBN), triethylsilan, triacetoxyborohydrid sodný, kyanoborohydrid sodný. Alternativně borany mohou být vytvořeny in šitu reakcí borohydridu sodného v přítomnosti jodu, anorganické kyseliny (například kyseliny sírové) nebo organické kyseliny jako je kyselina mravenčí, kyselina trifluoroctová, kyselina octová nebo kyselina methansulfonová.

Vhodná rozpouštědla pro tuto reakci jsou ethery (například tetrahydrofuran) nebo halogenuhlovodíky (například dichlormethan) nebo amidy (například N,N-dimethylformamid) za teploty v rozmezí od teploty okolí do teploty zpětného toku reakční směsi.

Sloučeniny obecného vzorce (II) mohou být připraveny zpracováním sloučenin obecného vzorce (III), ve kterém R_4a a R₅ mají význam uvedený v obecném vzorci (II)

(III) (IV) s trifosgenem v aprotickém rozpouštědle jako je dichlormethan a v přítomnosti organické báze jako je triethylamin pro vytvoření meziproduktové karbonylchloridové sloučeniny (IV), která může být izolována, je-li to požadována, s následnou reakcí sloučeniny (IV) s aminovou sloučeninou (V)

,)n p“R10

R2 (V)

Reakce výhodně probíhá v aprotickém rozpouštědle, jako je uhlovodík, halogenuhlovodík, jako je dichlormethan nebo v etheru jako je tetrahydrofuran, popřípadě v přítomnosti báze jako je terciární amin, například diisopropylethylamin.

Sloučeniny obecného vzorce (III) mohou být připraveny redukcí dihydropyrazin-2-onu (VI) použitím vhodného kovového redukčního činidla, jako je borohydrid sodný. Alternativně může být použita katalytická hydrogenace, například použitím paládia na uhlí jako katalyzátoru ve vhodném rozpouštědle jako je methanol.

(VI)

Alternativně sloučeniny obecného vzorce (III), ve kterém R₅je atom vodíku, mohou být připraveny reakcí sloučenin obecného vzorce (VII), ve kterém Rn je Ci-C4~alkylová skupina a X je vhodná odštěpitelná skupina jako je atom halogenu, například atom bromu nebo atom jodu, nebo OSO2CF3,

(R)m (VII) s ethylendiaminem. Reakce výhodně probíhá ve vhodném rozpouštědle jako je alkohol (například ethanol) za zvýšené teploty.

Při postupu podle dalšího obecného způsobu (B) sloučenina obecného vzorce (I), ve které R₄ je atom vodíku nebo (CH₂) _rC0 (CH₂)p R? je jako bylo definováno výše, může být připravena reakcí sloučeniny obecného vzorce (VIII) (R)m (Vlil) ,R5 ve kterém R_4b představuje ochrannou skupinu atomu dusíku nebo R_4b je (CH₂)_r CO(CH₂)pR₇ nebo její ochranná skupina, s trifosgenem v aprotickém rozpouštědle jako je dichlormethan nebo alkylestery (například ethylacetát) a v přítomnosti organické báze jako je triethylamin pro vytvoření meziproduktové karbonylchloridové sloučeniny (IVa), která může být izolována, je-li to požadováno, následnou reakcí sloučeniny (IV) s aminovou sloučeninou (V)

Reakce výhodně probíhá v aprotickém rozpouštědle jako je uhlovodík, halogenuhlovodík jako je dichlormethan nebo ether jako je tetrahydrofuran nebo alkylestery (například ethylacetát), popřípadě v přítomnosti báze jako je terciární amin, například diisopropylethylamin nebo triethylamin, následována odstraněním ochranných skupin, je-li to nutné.

Pokud R_4a nebo R₄b je ochranná skupina atomu dusíku, pak příklady vhodných skupin zahrnují alkoxykarbonyl, například t-butoxykarbonyl, benzyloxykarbonyl, arylsulfonyl, například fenylsulfonyl nebo 2-trimethylsilylethoxymethyl.

Ochrana a odstranění ochranných skupin může být prováděno použitím obvyklých technik, jako je způsoby popsané v monografii Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vydání, T.W. Greene a P. G. M. Wuts (John Wiley a Sons, 1991) a jak je popsáno v dále uvedených příkladech.

Sloučeniny obecného vzorce (I), ve kterém R₄ je skupina CO(CH₂)_PR₇ nebo její chráněný derivát, mohou být také připraveny reakcí sloučeniny obecného vzorce (I)

0) ve kterém R₄ je atom vodíku, s aktivovaným derivátem kyseliny R₇ (CH₂) _PCO₂H (IX) .

Aktivované deriváty karboxylové kyseliny (IX) mohou být připraveny obvyklými způsoby. Vhodné aktivované deriváty karboxylové skupiny zahrnují odpovídající halogenidy, smíšené anhydridy, aktivované estery jako je thioester nebo deriváty vytvořené mezi skupinou karboxylové kyseliny a kopulačním činidlem, jako jsou činidla, používaná v chemii peptidů, například karbonyldiimidazol nebo diimidem jako je 1—(3— dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimid.

Reakce se výhodně provádí v aprotickém rozpouštědle jako je amid, například Ν,Ν-dimethylformamid nebo acetonitril.

Sloučeniny obecného vzorce (I), ve kterém R₄ je CONR₉R₈, kde R_g nebo Rg mají význam, uvedený v obecném vzorci (I), mohou být připraveny reakcí sloučeniny obecného vzorce (I), ve kterém R₄ je atom vodíku, s trifosgenem v aprotickém rozpouštědle jako je dichlormethan a v přítomností organické báze jako je triethylamin, následovanou reakcí s aminovou sloučeninou NRgRgíX).

Alternativně sloučeniny obecného vzorce (I), ve kterém R₄ je skupina CONHRg, ve které Rg je Ci-C₄-alkyl, mohou být také připraveny reakcí s isokyanátem obecného vzorce RgNC=O (XI). Reakce se sloučeninou (XI) se výhodně provádí v rozpouštědle jako je tetrahydrofuran nebo vodný tetrahydrofuran, halogenuhlovodík (například dichlormethan) nebo acetonitril, popřípadě v přítomnosti báze, jako je triethylamin, a za teploty v rozmezí 0-80°C.

V dalším provedení sloučeniny obecného vzorce (I), ve kterém

R₄ je (CH₂)_qR₇ nebo R₄ je (CH₂) _rC0 (CH₂)_pR7z kde q, r a R₇ mají význam definovaný v obecném vzorci (I) nebo jsou její ochranné deriváty, s podmínkou, že r není nula, mohou také být připraveny reakcí sloučenin obecného vzorce (I), ve kterém R₄ je atom vodíku, se sloučeninou obecného vzorce (XII) R₇(CH₂)_qX nebo X (CH₂) _rCO (CH₂)_pR₇ (XIII), kde X je odštěpitelná skupina, jako je atom halogenu, například atom chloru, atom bromu nebo skupina mesyl nebo a tosyl.

V dalším výhodném provedení sloučeniny obecného vzorce (I), ve kterém R₄ je (CH₂)_qR₇, kde q a R₇ mají význam definovaný v obecném vzorci (I) nebo jsou ochranné deriváty, mohou být také připraveny reakcí sloučenin obecného vzorce (I), ve kterém R₄ je atom vodíku, se sloučeninou obecného vzorce (XIV) R₇(CH₂)_qCHO (XIV), kde q je nula nebo celé číslo v rozmezí od 1 do 3 a R₇ má význam definovaný v obecném vzorci (I) nebo jsou ochranné deriváty, v přítomnosti vhodného kovového redukčního činidla jako je NaCNBH3.

V dalším výhodném provedení sloučeniny obecného vzorce (I), ve kterém Ri a R₂ společně s atomem dusíku, respektive atomem uhlíku, ke kterým jsou vázány, představují 5 až 6 člennou nenasycenou heterocyklickou skupinu, mohou být připraveny reakcí uzavření kruhu změnou místa (ring metathesis reaction - RCM) sloučenin obecného vzorce (XV)

(R)m (XV) katalyzovanou komplexem přechodového kovu, alkylidenový komplex ruthenia (například bis(tricyklohexylfosfin)dichlorruthenium). Reakce se výhodně provádí v aprotickém rozpouštědle jako je dichlormethan za teploty 0 °C.

jako je benzyliden

Sloučeniny obecného vzorce (XV) mohou být připraveny z vhodných meziproduktů použitím libovolného zde popsaného způsobu přípravy sloučenin obecného vzorce (I).

Sloučenina obecného vzorce (I), ve kterém R_x a R₂ společně s atomem dusíku, respektive atomem uhlíku, ke kterým jsou vázány, představují 5 až 6 člennou nasycenou heterocyklickou skupinu, může být připravena redukcí odpovídající 5 až 6 členné nenasycené heterocyklické skupiny vhodným redukčním činidlem jako je katalytická hydrogenace ve vhodném rozpouštědlo jako je methanol za teploty okolí.

Pokud je žádoucí izolovat sloučeninu obecného vzorce (I) ve formě sole, například farmaceuticky přijatelné sole, může toho být dosaženo reakcí sloučeniny obecného vzorce (I) ve formě volné báze s přiměřeným množstvím vhodné kyseliny a ve vhodném rozpouštědle, jako je alkohol (například ethanol nebo methanol), ester (například ethylacetát) nebo ether (například diethylether, terč.-butylmethylether nebo tetrahydrofuran).

Sloučeniny obecného vzorce (V), (VI), (VI), (VIII), (IX), (X), (XII), (XIII) nebo (XIV) mohou být připraveny analogicky způsobům užívaným pro známé sloučeniny.

Tak například sloučeniny obecného vzorce (VIII) mohou být získány redukcí sloučeniny obecného vzorce (III).

Reakce může být prováděna použitím vhodného kovového redukčního činidla jako je hydrid kovu, například hydrid boru nebo komplex hydridu kovu jako je hydrid lithia a hliníku, borohydrid, nebo organokový komplex jako je boranmethylsulfid, 9-borabicyklononan (9-BBN), triethylsilan, triacetoxyborohydrid sodný, kyanoborohydrid sodný.

Alternativně borany mohou být připraveny in sítu reakcí borohydridu sodného v přítomnosti jodu, anorganické kyseliny (například sírové) nebo organické kyseliny jako je kyselina mravenčí, kyselina trifluoroctové, kyselina octová, kyselina methansulfonová.

Farmaceuticky přijatelné sole mohou také být připraveny z ostatních solí, včetně ostatních farmaceuticky přijatelných solí, sloučeniny obecného vzorce (I) použitím obvyklých způsobů.

Sloučeniny obecného vzorce (I) mohou být snadno izolovány spolu s molekulami rozpouštědla krystalizaci nebo odpařením z vhodného rozpouštědla pro získání odpovídajících solvátů.

Pokud je požadován specifický enantiomer sloučeniny obecného vzorce (I), může být získán například separací odpovídající směsi enantiomerů sloučeniny obecného vzorce (I) použitím obvyklých způsobů.

Specifické enantiomery sloučenin obecného vzorce (I), ve kterém R₄ je atom vodíku, tedy mohou být připraveny reakcí vhodného chirálního alkoholu, v přítomnosti zdroje karbonylových skupina (jako je trifosgen nebo karbonyldiimidazol) a separací výsledných diastereoisomerických karbamátů obvyklými způsoby, například chromatografií nebo frakční krystalizaci. Požadovaný enantiomer sloučeniny obecného vzorce (I) může být izolován odstraněním karbamátů a přeměnou na požadovanou volnou bázi nebo její sůl.

Vhodný chirální alkohol pro použití v uvedeném způsobu zahrnuje (R)-sek.-fenylethylalkohol a pod.

Alternativně mohou být enantiomery sloučeniny obecného vzorce (I) syntetizovány z vhodných opticky aktivních meziproduktů použitím libovolného ze zde popsaných způsobů.

Tak například požadovaný enantiomer může být připraven z odpovídacího enantiomeru aminu obecného vzorce (III) použitím libovolného ze způsobů popsaných výše pro přípravu sloučenin obecného vzorce (I) z aminu (III). Enantiomer aminu (III) může být připraven z racemického aminu (III) použitím obvyklých způsobů jako je- tvorba sole s vhodnou opticky aktivní kyselinou, jako je kyselina L ( + )-mandlová nebo kyselina (1S)- ( + )-10-kafrsulfonová.

Ve výhodném provedení předloženého vynálezu může být specifický enantiomer aminu (lila)

(Hla) připraven dynamickou kinetickou separací aminu (III) vhodnou opticky aktivní kyselinou, jako je kyselina L(+)-mandlová nebo kyselina (1S)-(+)-10-kafrsulfonová, v přítomnosti aromatického aldehydu, jako je 3, 5-dichlorsalicylaldehyd, salicylaldhyd, benzaldehyd-p-nitrobenzaldehyd.

Konkrétní výhodný aldehyd pro použití v této reakci je 3,5dichlorsalicylaldhyd.

Reakce se výhodně provádí v aprotickém rozpouštědle jako je tetrahydrofuran nebo ethylacetát za teploty v rozmezí 2060°C.

Příklady provedení vynálezu

Předložený vynález je dále ilustrován způsobem přípravy meziproduktů a příkladů, které nejsou zamýšleny jako omezení předloženého vynálezu.

V popisu přípravy meziproduktů a příkladů jsou používána následující označení, pokud není uvedeno jinak:

Teploty tání byly stanoveny na Gallenkampově zařízení pro určování teplot tání a jsou nekorigovány. Všechny teploty jsou uváděny ve °C. Infračervená spektra byla měřena na FT-IR zařízení. Protonová magnetická rezonanční (¹H-NMR) spektra byly zaznamenávána při 400 MHz, chemické posuny jsou uváděny v ppm směrem dolů (d) od Me₄Si, používaného jako vnitřní standard a jsou označeny jako singlety (s), doublety (d) , doublety doubletů (dd), triplety (t) , kvartety (q) nebo multiplety (m) . Sloupcová chromatografie byl prováděna na silikagelu (Merck AG Darmstadt, Německo). V textu jsou používány následující zkratky: AcOEt = ethylacetát, CH = cyklohexan, DCM = dichlormethan, Et₂O = dietylether, DMF = Ν,N'-dimethylformamid, DIPEA=N,N-diisopropylethylamin, MeOH = methanol, TEA = triethylamin, TFA = kyselina trifluoroctová,

THF = tetrahydrofuran. Tle označuje chromatografií na tenké vrstvě (thin layer chromatography) na destičkách oxidu křemičitého a sušený označuje roztok sušený nad bezvodým síranem sodným; r.t. (room temperature) označuje teplotu okolí.

Enantiomer A nebo enantiomer B se vztahuje k jednotlivému enantiomeru, jehož absolutní stereochemie nebyla určena.

Diastereoisomer A označuje směs sloučenin, která má konfiguraci anti, jako bylo definováno výše.

Diastereoisomer B označuje směs sloučenin, která má konfiguraci syn, jako bylo definováno výše.

Meziprodukt 1

Kyselina 2-methyl-4-fluorboronová

Do hořčíkových pilin (0,5 g) , zahřívaných na teplotu 90°C byl po kapkách přidán roztok komerčního 2-brom-5-fluortoluenu (2 ml) v THF (3 ml). Reakční směs byla zahřívána na teplotu 9095°C po dobu 1,5 hodin a potom směs byla zředěna dalším THF (10 ml) a přenesena do odkápavací nálevky. Naposledy uvedený roztok a trimethylboran (2,1 ml) byly současně přidány do míchaného Et2<0 (15 ml), udržujíce teplota pod -60°C. Reakční směs byla ponechán zahřát se na teplotu okolí, potom míchání pokračovalo po dobu 1,5 hodin. Byla přidána voda (6 ml) a reakční směs byla míchán přes noc. Byl přidán AcOEt roztok byl promýván IN HCl a solným roztokem. Organická fáze byla potom sušena a koncentrována pro získání surového produktu, který byl rozetřen ve směsi Et₂O /petroleje (25 ml/ 75 ml) pro získání sloučeniny z názvu ve formě trimeru (1,44 g, bílý prášek).

NMR (DMSO): δ (ppm) 7,87 (m, 3H), 6,99-6,93 (m, 6H), 2,6 (s,

9H) .

Meziprodukt 2

2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-pyrazin.

Směs meziproduktu 1 (1,34 g) , 2-chlorpyrazinu (1 ml) a bis[1,2-bis(difenylfosfino)ethane]-paládia(0) (0,21 g) ve směsi toluen/ 1M roztok Na₂CO3 / EtOH 95% 20 ml/20 ml/10 ml byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 2 hodin. Roztok byl vlit do AcOEt a promýván solným roztokem. Organická fáze byla potom sušena a koncentrována pro získání surového produktu, který byl čištěn mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 85:15) pro získání sloučeniny z názvu (1,4 g) ve formě bílého prášku.

Teplota tání=66-68°C

NMR (DMSO): δ (ppm) 8,81 (d, 1H), 8,72 (m, 1H), 8,63 (d, 1H), 7,52 (m, 1H), 7,22 (m, 1H), 7,17 (m, 1H), 2,35 (s, 3H).

Meziprodukt 3

2- (3-isopropyl-fenyl)-pyrazin

Do roztoku komerční kyseliny 3-isopropyl-benzenboranové (1,0 g) v 2:2:1 směsi toluen / 1 M Na₂CO₃/ EtOH (122 ml·), za teploty okolí, byly přidány 2-chlorpyrazin (599 μΐ) a katalyzátor bis[1,2-bis(difenylfosfino)ethan]-paládium(O) (110 mg). Reakční směs byla zahřívána na teplotu 80°C po dobu 3 hodin. Potom byla ochlazena a rozdělena mezi AcOEt / nasycený vodný NaCI. Fáze byly separovány a organická vrstva byla sušena. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo odpařeno. Surový olej byl čištěn mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 7:3) a tím byla získána sloučenina z názvu ve formě čirého oleje (468 mg).

NMR (CDCI3) : δ (ppm) 9,02 (d, 1H) , 8,63 (m, 1H) , 8,49 (d, 1H), 7,89 (m, 1H), 7,80 (m, 1H), 7,44 (t, 1H), 7,35 (d, 1H), 3,02 (m, 1H), 1,31 (d, 6H).

Meziprodukt 4

2-(2-isopropyl-fenyl)-pyrazin

1) Do suspenze hořčíkových pilin (134 mg) v bezvodém THF (2,5 ml), za teploty okolí a pod atmosférou N₂, byl přidán malý krystal I₂, následovaný 10% roztokem komerčního l-brom-2isopropyl-benzenu (1,0 g) v bezvodém THF (2,6 ml). Suspenze byla mírně zahřívána (zahřívací pistole) dokud nezmizela hnědá barva. Zbývající bromid byl přidán po kapkách, udržujíce reakční směs ponechanou (50-60°C) v olejové lázni. Po ukončení přidávání (15 minut) byla suspenze míchána za teploty 60°C dokud hořčíkové piliny takřka úplně nezreagovaly (2 hodin). Nový hnědý roztok byl použit v následujícím kroku.

2) Do roztoku 2-chlorpyrazinu (448 μΐ) v bezvodém THF (5,1 ml) , za teploty 0°C a pod atmosférou N₂, byly postupně přidány po kapkách [1,2-bis(difenylfosfino)ethan]dichlornikl (II) (100 mg) a Grignardův roztok. Hnědý roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 30 minut, potom za teploty zpětného toku po dobu 3 hodin. Potom byl vlit do směsi nasyceného vodného NaCl/DCM a fáze byly separovány. Vodná vrstva byla extrahována DCM (2x) a zkombinované organické extrakty byly sušeny. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo odpařeno. Získaný surový olej byl čištěn mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 7:3) a tím byla získána sloučenina z názvu ve formě žlutého oleje (676 mg).

NMR (CDC1₃) : δ (ppm) 8,67 (d, 1H) , 8,67 (m, 1H) , 8,54 (d,

1H)

7,5-7,3 (m, 4H), 3,13 (m, 1H), 1,20 (d, 6H)

Meziprodukt 5

2-(4-fluor-3-methyl-fenyl)-pyrazin

1) Do suspenze hořčíkových pilin (167 mg) v bezvodém THF (2,6 ml) byl přidán za teploty okolí a pod atmosférou N₂ malý krystal I₂, následovaný 10% roztokem komerčního 4-brom-lf luor-2-methyl-benzenu (1,0 g) v bezvodém THF (2,7 ml). Suspenze byla mírně zahřívána (zahřívací pistole) dokud hnědá barva nezmizela. Zbývající bromid byl přidán po kapkách, udržujíce reakční směs ponechanou (50-60°C) v olejové lázni. Po ukončení přidávání (15 minut) byla suspenze míchána za teploty 60°C, dokud hořčíkové piliny takřka úplně nezreagovaly (2 hodiny). Nový hnědý roztok byl použit v následujícím kroku.

2) Do roztoku 2-chlorpyrazinu (472 μΐ) v bezvodém THF (5,3 ml) byly za teploty 0°C a pod atmosférou N₂ postupně po kapkách přidány [1,2-bis(difenylfosfino)ethan]dichlornikl(II) (100 mg) a Grignardův roztok. Hnědý roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 30 minut, potom za teploty zpětného toku po dobu 3 hodin. Potom byl vlit do směsi nasycený vodný NaCl/DCM a fáze byly separovány. Vodná vrstva byla extrahována DCM (2x) a zkombinované organické extrakty byly sušeny. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo odpařeno. Získaný surový olej byl čištěn mžikovou chromatografii (CH/AcOEt 7:3) pro získání sloučeniny z názvu ve formě žlutého oleje (571 mg).

NMR (CDC1₃) : δ (ppm) 8,98 (d, IH) , 8,60 (m, IH) , 8,49 (d, IH), 7,87 (m, IH), 7,80 (m, IH), 7,13 (t, IH) , 2,37 (s, 3H) .

Meziprodukt 6

2-(2,4-Difluor-fenyl)-pyrazin

1) Do suspenze hořčíkových pilin (139 mg) v bezvodém THF (2,6 ml) byl za teploty okolí a pod atmosférou N₂ přidán malý krystal I₂, následovaný 10% roztokem komerčního l-brom-2,4dif luor-benzenu (1,0 g) v bezvodém THF (2,6 ml). Suspenze byla mírně zahřívána (zahřívací pistole) dokud hnědá barva nezmizela. Zbývající bromid byl přidán po kapkách, udržujíce reakční směs ponechánu (50-60°C) v olejové lázni. Po ukončení přidávání (15 minut) byla suspenze míchána za teploty 60°C, dokud hořčíkové piliny takřka úplně nezreagovaly (2 hodiny). Nový hnědý roztok byl použit v následujícím kroku.

2) Do roztoku 2-chlorpyrazinu (463 μΐ) v bezvodém THF (5,2 ml) byly za teploty 0°C a pod atmosférou N₂ postupně přidány po kapkách [1,2-bis(difenylfosfino)ethan]-dichlornikl(II) (50 mg) a Grignardův roztok. Hnědý roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 30 minut, potom za teploty zpětného toku po dobu 3 hodin. Potom byl vlit do směsi nasyceného vodného NaCl/DCM a fáze byly separovány. Vodná vrstva byla extrahována DCM (2x) a zkombinované organické extrakty byly sušeny. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo odpařeno. Získaný surový olej byl čištěn mžikovou chromatografii (CH-AcOEt 7:3) pro získání sloučeniny z názvu ve formě žluté pevné látky (175 mg).

NMR (CDC1₃) : δ (ppm) 9,01 (dd, 1H) , 8,78 (dd, 1H) , 8,66 (d, 1H), 7,99 (td, 1H), 7,47 (td, 1H), 7,29 (td, 1H).

Meziprodukt 7

2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin hydrochlorid

Dvouhrdlá baňka byla vybavena kondenzátorem vody a odkapávací nálevkou a byla proplachována N₂. Do baňky byly vloženy Mg piliny (1,45 g) a byly suspendovány v bezvodém THF (5 ml). Byl přidán malý krystal I₂ b pro aktivaci Mg. Odkapávací nálevka byl naplněna roztokem komerčního 2-brom-5fluortoluenu (10 g) v bezvodém THF (30 ml). Roztok bromidu byl po kapkách přidán k Mg pilinám a roztok ponechán zahřát se na přibližně 70°C. Roztok byl držen za této teploty do úplného zmizení Mg pilin.

Mezitím byl 2-chlorpyrazin (4,75 ml) rozpuštěn v bezvodém THF (30 ml) a byl přidán [1,2-bis(difenylfosfino)ethan)dichlornikl (II) (510 mg). Do této suspenze byl po kapkách přidán Grignardův roztok za teploty 0°C a pod atmosférou N₂. Po ukončení přidávání byla reakční směs zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 2 hodin. THF byl odpařen, residuum bylo vlito do nasyceného vodného NaCl a vodné fáze byly extrahovány DCM (3x). Organické extrakty byly sušeny, pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo odpařeno. Surový olej byl čištěn mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 85:15) a potom přes malou kolonu Florisilu (vymývací rozpouštědlo: DCM) pro eliminaci niklového residua (6,0 g) : 2-(4-fluor-2methyl-fenyl)-pyrazin (6,0 g) byl získán ve formě bledě žluté pevné látky.

2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-pyrazin (0,3 g) rozpuštěný v EtOH 95% (20 ml) a 37% HCl (0,2 ml) byl hydrogenován za tlaku 5 atmosfér po dobu 4 hodin v přítomnosti 20% Pd(OH)₂/C (30 mg) jako katalyzátoru. Katalyzátor byl odfiltrován a rozpouštědlo bylo odpařeno. Surové residuum bylo rozetřeno v MeOH/AcOEt (5 ml/15 ml) pro získání sloučeniny z názvu (0,08 g) ve formě bílého prášku.

Teplota tání >220 °C

NMR (DMSO): δ (ppm) 9,72 (široký, 2H) , 7,90 (d, 1H) , 7,217,17 (m, 2H), 4,85 (m, 1H), 3,57-3,2 (m, 6H), 2,40 (s, 3H).

Meziprodukt 8

3- (4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, benzylester

Do roztoku meziproduktu 7 (0,25 g) a TEA (0,5 ml) v DCM (15 ml) byl za teploty 0°C po kapkách přidán roztok benzylchlorkarbonátu (0,15 ml) v DCM (10 ml). Reakční směs byla míchána za teploty 0°C po dobu 2 hodin, potom promývána solným roztokem. Organická fáze byla sušena a koncentrována pro získání surového produktu, který byl čištěn mžikovou sloupcovou chromatografií (CH/AcOEt 25:75) pro získání sloučeniny z názvu (0,21 g) ve formě bezbarvého oleje.

NMR (CDC1₃, 40°C): 8 (ppm) 7,52 (m, 1H) , 7,4-7,3 (m, 5H) , 6,9-6,8 (m, 2H) , 5,16 (dd, 2H) , 4,12 (m, 2H) , 3,86 (m, 1H) , 3,3-2,7 (m, 4H), 2,33 (bs, 3H).

Meziprodukt 9

3- (3-isopropyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, benzylester

Do roztoku meziproduktu 3 (428 mg) v bezvodém EtOH (47 ml) byly přidány za teploty okolí a pod atmosférou N₂koncentrovaný HC1 (492 μΐ) a Pd(OH)₂/C 20% (86 mg, 20% hmot.). Černá suspenze byla vložena do Parrova přístroje a hydrogenace byla prováděna za teploty okolí pod tlakem 7 atmosfér H₂ po dobu 18 hodin. Katalyzátor byl potom filtrován na Celitu a celitový koláč byl proplachován MeOH. Filtrát byl odpařen do sucha. Šedý pevný hydrochlorid 2-(3-isopropylfenyl)-piperazinu (654 mg) byl rozpuštěn v bezvodém DCM (24 ml) , za teploty 0°C a pod atmosférou N₂ a potom byly přidány TEA (1,32 ml) a benzylchlorkarbonát (404 ml). Roztok byl míchán za teploty 0°C po dobu 2,5 hodin. Potom byl vlit do směsi DCM / nasycený vodný NaCl / nasycený vodný K2CO3 a fáze byly separovány. Vodná vrstva byla extrahována DCM (lx) a zkombinované organické extrakty byly sušeny. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo odpařeno. Surový olej byl čištěn mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 6:4) pro získání sloučeniny z názvu ve formě žlutého oleje (192 mg).

NMR (CDCI3) : δ (ppm) 7,34-7,12 (m, 8H) , 5,08 (m, 2H) , 3,89 (bd, 1H), 3,85 (bm, 1H) , 3,55 (bd, 1H) , 3,0-2,65 (bm, 6H) ,

1,17 (d, 6H).

Meziprodukt 10

3-(2-isopropyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, benzylester.

Do roztoku meziproduktu 4 (315 mg) v bezvodém EtOH (40 ml) byly přidány za teploty okolí a pod atmosférou N₂ koncentrovaný HC1 (529 μΐ) a Pd(OH)₂/C 20% (63 mg, 20% hmot.). Černá suspenze byla vložena do Parrova přístroje a hydrogenace byla prováděna za teploty okolí za tlaku 7 atmosfér H₂ po dobu 18 hodin. Katalyzátor byl potom filtrován na Celitu a celitový koláč byl proplachován MeOH. Filtrát byl odpařen do sucha. Šedý pevný hydrochlorid 2-(2-isopropylfenyl ) -piperazinu (411 mg) byl rozpuštěn v bezvodém DCM (16 ml) , za teploty 0°C a pod atmosférou N₂ a potom byly přidány TEA (886 μΐ) a benzylchlorkarbonát (272 μΐ) . Roztok byl míchán za teploty 0°C po dobu 2,5 hodin. Potom byl vlit do směsi DCM / nasycený vodný NaCl / nasycený vodný K₂CO₃ a fáze byly separovány. Vodná vrstva byla extrahována DCM (lx) a zkombinované organické extrakty byly sušeny. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo odpařeno. Surový olej byl čištěn mžikovou chromatografii (CH/AcOEt 6:4) a tím byla získána sloučenina z názvu ve formě žlutého oleje (117 mg). NMR (CDC1₃) : δ (ppm) 7,52 (d, IH) , 7,4-7,3 (m, 5H), 7,26 (d, IH), 7,21 (t, IH), 7,14 (t, IH) , 5,14 (d, IH) , 5,03 (d, IH) , 4,0-3,8 (m, 3H), 3,23 (m, IH) , 2,99 (m, IH) , 2,91 (m, IH) ,

2,8-2,0 (m, 2H), 1,19 (d, 6H).

Meziprodukt 11

3-(4-fluor-3-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, benzylester

Do roztoku meziproduktu 5 (314 mg) v bezvodém EtOH (30 ml) byly přidány za teploty okolí a pod atmosférou N₂koncentrovaný HCl (350 μΐ.) a Pd(OH)₂/C 20% (30 mg, 10% hmot.). Černá suspenze byla vložena do Parrova přístroje a hydrogenace byla prováděna za teploty okolí za tlaku 7 atmosfér H₂ po dobu 18 hodin. Katalyzátor byl potom filtrován na Celitu a celitový koláč byl proplachován MeOH. Filtrát byl odpařen do sucha. Šedý pevný hydrochlorid 2~(4-fluor-3methyl-fenyl)-piperazinu (411 mg) byl rozpuštěn v bezvodém DCM (15 ml) za teploty 0°C a pod atmosférou N₂ a potom byly přidány TEA (858 μΐ) a benzylchlorkarbonát (264 μΐ) . Roztok byl míchán za teploty 0°C po dobu 2,5 hodin. Potom byl vlit do směsi DCM / nasycený vodný NaCl / nasycený vodný K2CO3 a fáze byly separovány. Vodná vrstva byla extrahována DCM (1 x) a zkombinované organické extrakty byly sušeny. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo odpařeno. Surový olej byl čištěn mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 6:4) a tím byla získána sloučenina z názvu ve formě žlutého oleje (170 mg). NMR (CDCI3) : δ (ppm) 7,3-7,4 (m, 5H) , 7,23 (m, IH) , 7,17 (m, IH) , 6,96 (t, IH), 5,17 (m, 2H), 4,15 (m, 2H), 3,67 (m, IH), 2,7-3,2 (m, 4H), 2,27 (s, 3H).

Meziprodukt 12

3-(2,4-Difluor-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, benzylester

Do roztoku meziproduktu 6 (175 mg) v bezvodém EtOH (30 ml) byly přidány za teploty okolí a pod atmosférou N₂koncentrovaný HCl (228 μΐ, 2,5 ekvivalenty) a Pd(OH)₂/C 20% (20 mg, 10% hmot.). Černá suspenze byla vložena do Parrova přístroje a hydrogenace byla prováděna za teploty okolí za tlaku 7 atmosfér H₂ po dobu 18 hodin. Katalyzátor byl potom filtrován na Celitu a celitový koláč byl proplachován MeOH. Filtrát byl odpařen do sucha. Zelenavý pevný hydrochlorid 2(2,4-dífluor-fenyl)-piperazinu (247 mg) byl rozpuštěn v bezvodém DCM (9,1 ml) za teploty 0°C a pod atmosférou N₂ a potom byly přidány TEA (508 μΐ) a benzylchlorkarbonát (162 μΐ). Roztok byl míchán za teploty 0°C po dobu 3 hodin. Potom byl vlit do směsi DCM / nasycený vodný NaCl / nasycený vodný K₂CO₃ a fáze byly separovány. Vodná vrstva byla extrahována DCM (lx) a zkombinované organické extrakty byly sušeny. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo odpařeno. Surový olej byl čištěn mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 6:4) a tím byla získána sloučenina z názvu ve formě žlutého oleje (100 mg) .

NMR (CDCI3) : δ (ppm) 7,49 (m, 1H) , 7,3-7,4 (m, 5H) , 6,76-6,8 (m, 2H), 5,16 (s, 2H) , 4,15 (m, 2H) , 4,03 (m, 1H) , 2,8-3,15 (m, 4H).

Meziprodukt 13

4-(3, 5-bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-karbamoyl]-3-(4fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, benzylester

Roztok trifosgenu (0,02 ml) v DCM (10 ml) byl po kapkách přidán do roztoku meziproduktu 8 (0,05 g) a TEA (0,15 ml) v

DCM (10 ml) za teploty 0°C. Reakční směs byla ponechána zahřát se na teplotu okolí v 3 hodin, potom byly přidány DIPEA (0,07 ml) a hydrochlorid (3,5-bis-trifluormethylbenzyl)-methyl-aminu (53 mg). Reakční směs byla míchána za teploty zpětného toku po dobu 2 hodin a za teploty okolí přes noc, potom byla promývána IN roztokem HCl a solným roztokem. Organická fáze byla sušena a koncentrována pro získání surového produktu, který byl čištěn mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 7:3) pro získání sloučeniny z názvu (0,05 g) ve formě bezbarvého oleje.

NMR (CDCI3) : δ (ppm) 7,76 (s, 9H) , 7,49 (s, 2H) , 7,4-7,3 (m, 5H), 7,20 (dd, 1H) , 6,86 (d, 1H) , 6,79 (m, 1H) , . 5,17 (s, 2H), 4,66 (d, 1H), 4,64 (m, 1H), 4,36 (d, 1H), 3,97 (m, 2H), 3,4 (m, 2H), 3,16 (m, 2H), 2,93 (s, 3H), 2,38 (bs, 3H).

Meziprodukt 14

4-((3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-karbamoyl]-3-(3isopropyl-fenyl)piperazin-l-karboxylová kyselina, benzylester

Do roztoku meziproduktu 9 (192 mg) v bezvodém DCM (7 ml) byl za teploty 0°C a pod atmosférou N₂ přidán TEA (237 μΐ) . Potom byl po kapkách přidán roztok trifosgenu (76 mg) v bezvodém DCM (4 ml) . Reakční směs byla míchána za teploty 0°C po dobu 2 hodin. Do tohoto roztoku byly přidány DIPEA (198 μΐ) a hydrochlorid (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-aminu (200 mg) . Roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 18 hodin. Reakční směs byla zředěna DCM, promývána 10% kyselinou (1 x) a sušena. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo odpařeno. Surový olej byl čištěn mžikovou chromatografii (CH-AcOEt 65:35) pro získání sloučeniny z názvu ve formě hustého oleje (353 mg).

NMR	(CDCI3) : δ (ppm) 7,91 (bs, 1H) , 7,84 (bs,	2H) ,	7,36-7,26
(m,	5H), 7,18-7,10 (m, 2H), 7,06 (m, 2H) , 5,07	(s,	2H) , 4,76
(t,	1H), 4,50 (bs, 2H), 3,96 (dd, 1H) , 3,66	(td,	1H) , 3,57
(dd,	1H), 3,4-3,3 (m, 2H), 3,19 (m, 1H), 2,86	(s,	3H), 2,76
(m,	1H), 1,09 (2d, 6H).

Meziprodukt 15

4-[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-karbamoyl]-3-(2isopropyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, benzylester.

Do roztoku meziproduktu 10 (46 mg) v bezvodém DCM (3,9 ml) byl přidán za teploty 0°C a pod atmosférou N₂ TEA (145 μΐ) . Potom byl po kapkách přidán roztok trifosgenu (46 mg) v bezvodém OCM (3 ml). Reakčni směs byla míchána za teploty 0°C po dobu 2 hodin.

Do tohoto roztoku byly přidány DIPEA (121 μΐ) a hydrochlorid (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-aminu (122 mg). Roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 18 hodin. Reakčni směs byla zředěna DCM, promývána 10% kyselinou citrónovou (Ix) a sušena. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo odpařeno. Surový olej byl čištěn mžikovou chromatografii (CH/AcOEt 7:3) pro získání sloučeniny z názvu ve formě čirého oleje (108 mg).

NMR	(CDCls) : δ	(ppm)	7,	89 (bs, 1H),	7,71	(bs,	2H) ,	7,38	-7,	28
(m,	5H), 7,28	(dd,	1H)	, 7,23 (dd,	1H) ,	7,16	(dt,	1H) ,	7,	01
(dt,	1H), 5,14	(d,	1H)	, 5,05 (bd,	1H) ,	4,68	(dd,	1H) ,	4,	52
(2d (.	AB) , 2H),	3, 83	(dd	, 1H), 3,71	(dt,	1H) ,	3,53	(md,	1H	) ,
3,41	(dt, 1H),	3,26	(m,	1H), 3,15-3	, 05 (m	, 2H)	, 1,19 (d,	3H	) ,
1,13	(m, 3H).

Meziprodukt 16

4-[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-karbamoyl]-3- (4fluor-3-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, benzylester

Do roztoku meziproduktu 11 (170 mg) v bezvodém DCM (7 ml) byl přidán za teploty 0°C a pod atmosférou N₂ TEA (217 μΐ) . Potom byl po kapkách přidán roztok trifosgenu (69 mg) v bezvodém DCM (3 ml). Reakční směs byla míchána za teploty 0°C po dobu 2 hodin. Do tohoto roztoku byly přidány DIPEA (181 μΐ) a hydrochlorid (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-aminu (183 mg). Roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 18 hodin. Reakční směs byla zředěna DCM, promývána 10% kyselinou citrónovou (lx) a sušena. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo odpařeno. Surový olej byl čištěn mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 65:35) pro získání sloučeniny z názvu ve formě gumovité pevné látky (226 mg).

NMR	(CDC1₃) : δ	(ppm) 7,77	(m,	1H)	, 7,	60 (m,	2H), 7,	3-7,4 (m,
5H) ,	7,05-7,15	(m, 2H), 6	, 90	(m,	1H)	, 5, 14	(m, 2H)	, 4,6-4,8
(m,	1H), 4,54	+ 4,47 (AB,	2H)	, 3,	82	(bm, 1H)	, 3,73	(dd, 1H),
3, 65	(m, 1H),	3,57 (m, 1H)	, 3	,33	(m,	1H), 3,	26 (m,	1H), 2,90
(s,	3H), 2,19	(s, 3H) .

Meziprodukt 17

4-t(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-karbamoyl]-3- (2,4difluor-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, benzylester

Do roztoku meziproduktu 12 (95 mg) v bezvodém DCM (3 ml) byl přidán za teploty 0°C a pod atmosférou N₂ TEA (120 μΐ) . Potom byl po kapkách přidán roztok trifosgenu (38 mg) v bezvodém

DCM (3 ml). Reakční směs byla míchána za teploty 0°C po dobu hodin.

Do tohoto roztoku byly přidány DIPEA (100 μΐ, 2 ekvivalenty) a hydrochlorid (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-aminu (101 mg) . Roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 18 hodin. Reakční směs byla zředěna DCM, promývána 10% kyselinou citrónovou (lx) a sušena. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo odpařeno. Surový olej byl čištěn mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 7:3) pro získání sloučeniny z názvu ve formě žluté gumy (134 mg).

NMR (CDCI3) : δ (ppm) 7,76 (s, 1H) , 7,56 (s, 2H) , 7,26-7,40 (m, 6H), 6,76 (m, 2H), 5,17 (m, 2H), 4,83 (m, 1H) , 4,36-4,60 (dd + m, 2H), 3,90 (m, 1H), 3,25-3,7 (m, 2H) , 2,86 (s, 3H) .

Meziprodukt 18

4-(3, 5-bis-trifluormethyl-benzyl-karbamoyl)-3-(4-fluor-2methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, benzylester

Do roztoku meziproduktu 8 (0,15 g) a TEA (0,32 ml) v DCM (35 ml) byl po kapkách přidán za teploty 0° C roztok trifosgenu (0,065 ml) v DCM (25 ml). Reakční směs byla ponechána zahřát se na teplotu okolí během 3 hodin, potom byly přidány pyridin (0,3 ml) a hydrochlorid 3,5-bis (trifluormethyl)-benzyl-1methylaminu (53 mg). Reakční směs byla míchána za teploty okolí přes noc, potom promývána IN roztokem HC1 a solným roztokem. Organická fáze byla potom sušena a koncentrována pro získání surového produktu, který byl čištěn mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 7:3) pro získání sloučeniny z názvu (0,086 g) ve formě bledě žlutého oleje a 4-benzyloxykarbonyl2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karbonylchloridu (0,075 g).

Sloučenina z názvu: NMR (CDCI3) : δ (ppm) 7,8-7,7 (m, 1H) ,

7,5-7,4 (m, 2H) , 7,4-7,25 (m, 5H), 7,20 (m, 1H), 6,95-6,8 (m, 2H) , 5,2-5,05 (m, 2H) , 4,99 (dd, 1H) , 4,6-4,2 (m, 2H) , 4,54,15 (m, 2H) , 3,8-3,6 (m, 2H) , 4,12 (m, 1/2H) , 3,91 (m, 1/2H), 3,61 (m, 1/2H), 3,44 (m, 1/2H), 2,4-2,2 (s + s, 3H) .

Meziprodukt 19

3-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, 1- (S)-fenyl-ethylester

Do roztoku 1,1-karbonyldnmidazolu (0,162 g) v DCM (5 ml) byl přidán (S)-sek.-fenethylalkohol (0,122 g) . Po uplynutí 30 minut byl přidán roztok meziproduktu 7 (0,180 g) v acetonitrilu (5 ml) a směs bylí toku po dobu 2 hodin. Potom získání surového produktu, chromatografií (CH/AcOEt 8: 2) (směs diastereomerů) (0,180 g) NMR (DMSO): δ (ppm) 7,87 (m,

6,94 (m, 2H), 5,74 (m, 1H), 3,

4H), 2,34 (s, 3H), 2,28 (s, 3H) zahřívána na teplotu zpětného směs byla koncentrována pro který byl čištěn mžikovou pro získání sloučeniny z názvu ve formě pěny.

1H), 7,40-7,25 (m, 5H) , 7,0293-3,71 (m, 3H), 3,00-2,55 (m,

Meziprodukt 20

4-(3,5-bis-trifluořmethyl-benzyl-karbamoyl)-3-(R)-(4-fluor-2methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, l-(S)-fenylethylester (diastereomer 1)(20a)

4- (3, 5-bis-trifluormethyl-benzyl-karbamoyl) -3- (S) - (4-fluor-?2methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, l-(S)-fenylethylester (diastereomer 2) (20b)

Roztok trifosgenu (0,075 g) v DCM (5 ml) byl po kapkách přidán do roztoku meziproduktu 19 (0,180 g) a TEA (0,35 ml) v DCM (5 ml) za teploty 0° C. Po uplynutí 2 hodin byly přidány DIPEA (0,3 ml) a hydrochlorid (3,5-bistrifluormethylbenzyl)methyl-aminu (0,209 g) a směs byla ponechána za teploty okolí. Po uplynutí 4 hodin byl přidán DCM a organická fáze byla promývána HCl IN (2 x 10 ml) a solným roztokem, sušena a koncentrována pro získání surové diastereisomerické směsi. Separace mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 8:2) dala sloučeninu z názvu 20a (0,125 g) a sloučeninu z názvu 20b (0,135 g) ve formě bílých pěn.

Meziprodukt 20a: NMR (DMSO):	δ (ppm) 7,90	(s,	1H), 7,67	(s,
2H) , 7,4-7,27 (m, 6H), 6,95 (	dd, 1H), 6,80	(m,	1H) , 5,74	(q<
1H), 4,60-4,40 (dd, 2H), 4,50	(m, 1H), 3,79	(m,	3H) , 3,00	(m,

3H), 2,87 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 1,46 (d, 3H) .

Meziprodukt 20b: NMR (DMSO): δ (ppm) 7,90 (s, 1H) , 7,67 (s, 2H), 7,37-7,24 (m, 6H), 6,95 (dd, 1H) , 6,81 (m, 1H), 5,75 (q,

1H) , 4,60-4,41 (dd, 2H) , 4,52 (m, 1H) , 3, 83-3, 00 (m, 6H) ,

2,88 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 1,48 (d, 3H).

Meziprodukt 21 [1- (2,4-bis-trifluormethyl-fenyl)-ethyl]-methyl-amin

Do 2 M roztoku MeNH₂ v MeOH (10 ml) byl přidán komerční 3,5bis (trifluormethyl)acetofenon (2,1 g) . Po uplynutí 12 hodin směs byla ochlazena na teplotu 0° Ca potom byl přidán NaBH₄(0,512 g) . Po uplynutí 1 hodiny reakce byla zastavena H₂O a reakční směs byla extrahována DCM. Potom organická fáze byla sušena a koncentrována pro získání surového produktu, který byl čištěn destilací pro získání sloučeniny z názvu (1,5 g) ve formě oleje.

NMR (CDC1₃) : δ (ppm) 7,8 (m, 3H) , 3,8 (q, 1H) , 2,4 (s, 3H) ,

1,4 (d, 3H).

Meziprodukt 22

4-{[1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-ethyl]-methylkarbamoyl}-3-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-1-karboxylová kyselina, benzylester (směs enantiomerů AB) (22a)

4-{[1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-ethyl]-methylkarbamoyl}-3-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-1-karboxylová kyselina, benzylester (směs enantiomerů C,D )( 22b)

Do roztoku 4-benzyloxykarbonyl-2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)piperazin-l-karbonylchloridu (0,075 g) v DCM (5 ml) byly přidány DIPEA (0,12 ml) a meziprodukt 21 (0,1 g). Směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 2 hodin, potom byl přidán acetonitril (5 ml) a získaný roztok byl zahříván na teplotu 70° C a směs byla míchána přes noc. Potom směs byla koncentrována a residuum bylo rozpuštěno v AcOEt. Organická fáze byla promývána HC1 IN a solným roztokem a sušena. Organická fáze byla koncentrována pro získání surové směsi-, diastereomerických sloučenin, které byly separovány mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 8:2) pro získání sloučeniny z názvu

22a (0,05 g) bílých pěn.	a sloučeniny	z názvu	22b	(0,55	g)	ve formě
Meziprodukt 22a: NMR (CDCI3)	: δ (ppm)	7,78	(s,	1H) ,	7,58 (s,
2H), 7,4-7,3	(m, 5H), 7,18	(m, 1H),	6,86	(m,	1H) ,	6,77 (m,
1H) , 5,45 (m,	1H) , 5,16 (s,	2H), 4,6	(m,	1H) ,	3, 94	(m, 2H),
3,44-3,10 (m,	4H), 2,68 (s,	3H), 2,4 (	s, 3H	), 7,	49 (d, 3H) .
Meziprodukt 22b: NMR (CDC1₃)	: δ (ppm)	7,75	(s,	1H) ,	7,53 (s,
2H), 7,4-7,3	(m, 5H), 7,18	(m, 1H),	6, 87	(m,	1H) ,	6,78 (m,
1H), 5,59 (m,	1H), 5,18 (s,	2H), 4,59	(m,	1H) ,	3, 97	(m, 2H),
3,44-3,06 (m,	4H), 2,78 (s,	3H), 2,37	(s, 3H), 1	.,53	(d, 3H) .

Meziprodukt 23 (4-fluor-2-methyl-fenyl)-oxo-octová kyselina, methylester

1) Do suspenze hořčíkových pilin (617 mg) v bezvodém THF (6 ml) byl přidán za teploty okolí a pod atmosférou N₂ malý krystal I₂, následovaný 10% roztokem komerčního 2-brom-5fluortoluenu (4,0 g) v bezvodém THF (15 ml). Suspenze byla mírně zahřívána (zahřívací pistole), dokud hnědá barva nezmizela. Zbývající bromidový roztok byl po kapkách přidán, udržujíce reakční směs ponechánu (50-60°C) v olejové lázni. Po ukončení přidávání (15 minut) byla suspenze míchána za teploty 70°C, dokud hořčíkové piliny takřka úplně nezreagovaly (2 hodin). Nový hnědý roztok byl použit v následujícím kroku.

2) Roztok LiBr (4,41 g) v bezvodém THF (50 ml) byl po kapkách přidán do suspenze CuBr (3,64 g) v bezvodém THF (50 ml). Reakční směs byla míchána za teploty okolí po dobu 1 hodiny (tmavě zelený roztok s malým množstvím bílé pevné látky v suspenzi). Potom byl přidán po kapkách předem připravený Grignardův roztok (ledová lázeň byla použita pro udržení teploty pod 25°C) následovaný methyloxalylchloridem (1,95 ml) . Reakční směs byla míchána za teploty okolí po dobu 2 hodin. THF byl odpařen a residuum bylo vyjmut v AcOEt. Organická vrstva byla promývána nasyceným vodným NH₄C1 (2x) a sušena. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo odpařeno pro získání surového oleje, který byl Čištěn

mžikovou	chromatografií	(CH/AcOEt	95:5)	pro získání
sloučeniny	z názvu ve formě	čirého oleje (2,44	g) ·
NMR (CDC1₃) (s, 3H), 2,	: δ (ppm) 7,7 4 61 (s, 3H) .	(m, 1H) ,	6, 98-7,04	(m, 2H) , 3, 96

Meziprodukt 24 (4-fluor-fenyl)-oxo-octová kyselina, methylester

Do hořčíkových pilin (0,066 g) , předem zahřátých na teplotu 90°C a zakrytých THF (1 ml), byl přidán krystal jodu následovaný roztokem komerčního 4-fluor-brombenzenu (0,437 g) v THF (4 ml). Teplota byla udržována na 60°C až do spotřebování kovu. Roztok organokovového derivátu byl po kapkách přidán do roztoku CuBr (0,356 g) a LiBr (0,431 g) v THF (10 ml), předem připraveného za teploty 0°C.

Ke konci přidávání byl stříkačkou přidán methyloxalylchlorid (0,225 ml) a reakční směs byla míchána 2 hodiny za teploty okolí pře vlitím do vodného nasyceného roztoku NH₄C1 a extrakcí Et₂O. Organická fáze byla promývána solným roztokem a sušena. Surový produkt získaný po odpaření rozpouštědel byl čištěn sloupcovou chromatografií (CH/AcOEt 95:5) a tím byla získána sloučenina z názvu (0,2 g) ve formě pevné látky.

¹H-NMR (CDC1₃) : δ (ppm) 8,12 (m, 2H) , 7,20 (m, 2H) , 3,99 (s, 3H) .

Meziprodukt 25

3-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-5,6-dihydro-lH-pyrazin-2-on

Do roztoku meziproduktu 23 (2,01 g) a ethylendiaminu (684 μΐ) v toluenu (40 ml) byl přidán za teploty okolí a pod atmosférou N₂ bezvodý Na₂SO₄ (2 g) . Reakční směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 6 hodin. Potom byla ochlazena na teplotu okolí a filtrována. Pevné látky byly promývány DCM. Rozpouštědlo bylo odpařeno a surový olej byl čištěn mžikovou chromatografií (AcOEt) a tím byla získána sloučenina z názvu ve formě bílé pevné látky (1,29 g).

NMR (CDCI3) : δ (ppm) 7,33 (m, 1H) , 6, 95-6, 90 (m, 2H) , 6,56 (m, 1H), 3,97 (m, 2H), 3,58 (m, 2H), 2,31 (s, 3H).

Meziprodukt 25a

3-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-2-on

Do roztoku o teplotě 25°C, meziproduktu 25 (168 g) v methanolu (2400 ml)byl přidán pod dusíkovou atmosférou Pd/C 10% (44 g) . Reakční směs byla vložena pod H₂ atmosféru a míchána za teploty 25°C po dobu přibližně 16 hodin (dokud již další vodík nebyl spotřebováván a reakce byl ukončeno na základě TLC, EA/MeOH 9/1). Katalyzátor byl filtrován v dusíkové atmosféře a rozpouštědlo bylo odebráno pro dosažení nízkého objemu (360 ml) potom byly přidány methanol (2040 ml) a ethylacetát (9600 ml) na vrstvě oxidu křemičitého (800 g); vymytý roztok byl koncentrován pro získání sloučeniny z názvu (1:68 g).

¹H-NMR (DMSO): δ (ppm) 7,77 (bm, 1H) , 7,24 (dd, 1H) , 6,96 (dd, 1H), 6,92 (td, 1H), 4,43 (s, 1H), 3,30 (m, 1H), 3,14 (m, 1H), 2,92 (m, 1H), 2,82 (m, 2H), 2,33 (s, 3H) .

Meziprodukt 26

3-(4-fluor-fenyl)-5,6-dihydro-lH-pyrazin-2-on

Meziprodukt 24 (0,190 g) byl rozpuštěn v bezvodém toluenu (5 ml) pod inertní atmosférou; ethylenediamin (0,072 ml) byl po kapkách přidán následovaný Na₂SO4 (0,2 g) a reakční směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku 2 hodiny. Pevné látky byly odfiltrovány a surový produkt získaný po odpaření rozpouštědla byl čištěn mžikovou chromatografií (AcOEt/MeOH 9:1) a tím byla získána sloučenina z názvu (0,155 g ve formě bílé pevné látky).

Teplota tání 118-120°C ^XH-NMR (CDC1₃) : δ (ppm) 7,96 (m, 2H) , 7,08 (m, 2H) , (bs, 1H) , 3,96 (t, 2H), 3,54 (m, 2H).

Meziprodukt 27

Brom-(2,4-dichlorfenyl)-octová kyselina, methylester

Do míchaného roztoku komerční 2,4-dichlorfenyloctové kyseliny (2 g) v DCM (50 ml) byly přidány DMF (0,1 ml) a oxalylchlorid (1,7 ml) a reakční směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 1,5 hodin. Rozpouštědlo bylo odpařeno a surová sloučenina byla rozpuštěna tetrachlormethanu (40 ml). Byly přidány N-bromsukcinimid (1,8 g) a 2,2'-azobis(2methylpropionitril) (0,1 g) a reakční směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku a ozařována po dobu 2 hodin. Po ochlazení byl přidán methanol (50 ml) a reakční směs byla míchána po dobu 1 hodiny. Roztok byl koncentrován, zředěn AcOEt a promýván 3N HCl a solným roztokem. Organická fáze byla sušena a koncentrována pro získání surového residua, které bylo čištěno mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 9:1 ) pro získání směsi sloučeniny z názvu a methylesteru 2,4dichlorfenyl-octové kyseliny (1,3 g).

Tato směs byla rozpuštěna v tetrachlormethanu (20 ml) a potom byly přidány N-bromsukcinimid (0,89 g) a 2,2'-azobis(2methylpropionitril) (0,05 g) a reakční směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku a ozařována po dobu 3,5 hodin. Roztok byl koncentrován, zředěn AcOEt a promýván nasyceným roztokem Na₂CO₃ a solným roztokem. Organická fáze byla sušena a koncentrována pro získání surového residua, které bylo čištěno mžikovou sloupcovou chromatografii (CH/AcOEt 9:1) a tím byla získána sloučenina z názvu (1,14 g, bledě žlutý olej) .

NMR (CDC1₃) : δ (ppm) 7,72 (d, IH) , 7,40 (d, IH) , 7,30 (dd,

IH), 5,84 (s, IH), 3,81 (s, 3H).

Meziprodukt 28

Brom-(3,4-dichlorfenyl)-octová kyselina, methylester

DMF (0,1 ml) a oxalylchlorid (1,7 ml) byly přidány do roztoku komerční 3,4-dichlorfenyloctové kyseliny (2 g) v DCM (100 ml) a reakční směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 1,5 hodin. Po ochlazení byl přidán methanol (50 ml) a reakční směs byla míchána po dobu 1 hodiny. Rozpouštědlo bylo odpařeno a surová sloučenina byla čištěna mžikovou chromatografii (CH/AcOEt 9:1) pro získání methylesteru, který byl rozpuštěn v tetrachlormethanu (60 ml) . Byly přidány Nbromsukcinimid (2,06 g) a 2,2'-azobis(2-methylpropionitril) (0,2 g) a reakční směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku a ozařována po dobu 2 hodin. Roztok byl koncentrován, zředěn ethylacetátem a promýván nasyceným roztokem Na₂CO₃ a solným roztokem. Organická fáze byla potom sušena Na₂SO₄ a koncentrována pro získání surového residua, které bylo čištěno mžikovou chromatografii (CH/AcOEt 9:1) pro získání sloučeniny z názvu (2,0 g) ve formě oleje.

NMR (CDCI3) : δ (ppm) 7,70 (s, 7H) , 7,45 (m, 1H) , 5,25 (s,

1H), 3,80 (s, 3H).

Meziprodukt 29

3-(2,4-Dichlorfenyl)-piperazin-2-on

Do roztoku meziproduktu 27 (1,14 g) v EtOH (20 ml) byly přidány ethoxid sodný (0,34 g) a ethylendiamin (0,54 ml) a reakční směs byla míchána za teploty okolí po dobu 15 hodin. Rozpouštědlo bylo odpařeno a residuum bylo čištěno mžikovou chromatografii a tím byla získána sloučenina z názvu (0,35 g) ve formě bílé pěny.

NMR (DMSO): δ (ppm) 7,87 (široký, 1H) , 7,55 (d, 1H) , 7,41, 7,37 (d+dd, 2H) , 4,63 (s, 1H) , 3,32, 3,14 (m+m, 2H) , 3,022,90, 2,84 (m+m, 3H).

Meziprodukt 30

3-(3,4-Dichlorfenyl)-piperazin-2-on

Do roztoku meziproduktu 28 (2,0 g) v EtOH (100 ml) byly přidány ethoxid sodný (0,60 g) a ethylendiamin (0,95 ml) a reakční směs byla míchána za teploty okolí po dobu 15 hodin. Rozpouštědlo bylo odpařeno a residuum bylo zředěno ethylacetátem a promýváno solným roztokem. Organická fáze byla sušena a koncentrována pro získání sloučeniny z názvu (2,0 g) ve formě bílé pěny.

NMR (CDC1₃) : δ (ppm) 7,60 (d, 1H) , 7,42 (d, 1H) , 7,32 (dd,

1H), 5,91 (sa, 1H), 4,53 (s, 1H), 3,6-3,1 (m+m, 4H).

Meziprodukt 31

3-oxo-2-feny1-piperazin-l-karbonyIchlorid

Do míchaného roztoku trifosgenu (0,558 g) v DCM (10 ml) byl přidán za teploty 0°C pyridin (0,46 ml) a po uplynutí 10 minut 3-fenyl-piperazin-2-on (1 g). Ledová lázeň byl odstraněna a směs byla míchána za teploty okolí přes noc. Směs byla koncentrována a produkt byl čištěn mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 1:1) pro získání sloučeniny z názvu (0,253 g) ve formě pěny.

NMR (CDCI3) : δ (ppm) 7,45-7,35 (m, 5H) , 6,81 (bs, 1H) , 6,61 (bs, 1H), 5,99 (s, 1H), 4,3-4,2 (m, 1H), 3,7-3,3 (m, 3H).

Meziprodukt 32

2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-3-oxo-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-amid

Do roztoku meziproduktu 25 (63 mg) v bezvodém MeOH (6,1 ml) bylo přidáno za teploty okolí a pod atmosférou N₂ Pd/C 10% (7 mg, 10% hmot.). Reakční směs byla vložena pod H₂ atmosféru a byla míchána za teploty okolí po dobu 2 hodin. Katalyzátor byl filtrován (filtrační papír) a rozpouštědlo bylo odpařeno. Surový 3-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-2-on (64 mg) byl sušen za vysokého vakua a rozpuštěn v bezvodém DCM (4,0 ml) za teploty 0°C a pod atmosférou N₂ a byl přidán TEA (85 μΐ) . Potom byl po kapkách přidán roztok trifosgenu (37 mg) v bezvodém DCM (2 ml). Reakční směs byla míchána za teploty 0°C po dobu 2 hodin. Do tohoto roztoku byly přidány DIPEA (107 μΐ) a hydrochlorid N-methyl-bis(trifluormethyl)-benzylaminu (108 mg) . Roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 18 hodin. Reakční směs byla zředěna DCM, promývána IN HCl (lx) a sušena. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo odpařeno. Surový produkt byl čištěn mžikovou chromatografií (AcOEt) pro získání sloučeniny z názvu ve formě bílé pevné látky (93 mg).

NMR (CDCI3) : δ (ppm) 7,79 (s, IH) , 7,59 (s, 2H) , 7,20 (bs,

IH), 6,91-6,84 (m, IH), 6,07 (m, IH), 5,69 (s, IH), 4,58-4,47 (dd, IH), 3,49 (m, 4H), 2,85-2,39 (s, 6H).

Meziprodukt 33

2-(4-fluor-fenyl)-3-oxo-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,4-bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-amid

Meziprodukt 26 (0, 135 g) byl rozpuštěn v MeOH (5 ml) a teplota byla snížena na 0°C, potom byl opatrně přidán NaBH₄(0,102 g) . Po uplynutí 2 hodin byla redukce ukončena, rozpouštědlo byla odstraněno za sníženého tlaku a Byl přidán DCM. Organická fáze byla promývána H₂O a solným roztokem před sušením na Na₂SO₄. Surový 3-(4-fluor-fenyl)-piperazin-2-on (0,140 g) byl sušen za vysokého vakua a rozpuštěn v bezvodém DCM (5 ml) za teploty 0°C a byl po kapkách přidán TEA (0,433 ml). Do tohoto roztoku byl přidán roztok trifosgenu (0,09 g) v bezvodém DCM (3 ml) za teploty 0°C a pod inertní atmosférou. Teplota byla udržována na 0°C po dobu 3 hodin, potom byly přidány DIPEA (0,4 ml) následovaný hydrochloridem

3.5- bistrifluormethyl-methyl-aminu (0,27 g) . Reakční směs byla míchána za teploty okolí přes noc před zředěním DCM a promýváním IN roztokem HCl, H₂O a solným roztokem. Organická fáze byla sušena a surový produkt získaný po odpaření rozpouštědla byl čištěn mžikovou sloupcovou chromatografii (AcOEt) a tím byla získána sloučenina z názvu ve formě pěny (0,2 g).

NMR (DMSO): δ (ppm) 8,14 (bs, IH) , 7,97 (s, IH) , 7,78 (s, 2H), 7,37 (m, 2H), 7,09 (m, 2H), 5,13 (s, IH) , 4,49 (dd, 2H),

3.5- 3,25 (m, 4H), 2,80 (s, 3H).

Meziprodukt 34

3-oxo-2-fenyl-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5-bistrif luormethyl -benzyl ) -methyl-amid

Do míchaného roztoku meziproduktu 31 (0,239 g) v DMF (5 ml) byly přidány DIPEA (0,41 ml) a hydrochlorid 3,5bistrifluormethyl-methyl-aminu (0,366 g). Po uplynutí 3 hodin reakce byla zastaven solným roztokem a vodná vrstva byla extrahována AcOEt. Organická vrstva byla sušena a koncentrována za sníženého tlaku. Produkt byl čištěn mžikovou chromatografii (AcOEt) pro získání sloučeniny z názvu (0,429 g) ·

NMR (CDC1₃) : δ (ppm) 7,79 (bs, 1H) , 7,67 (bs, 2H) , 7,50 (d, 2H) , 7,35 (m, 3H) , 5,98 (s, 1H) , 5,43 (s, 1 Η) , 4,63-4,32 (dd, 2H), 3,88-3,56 (m, 2H), 3,50-3,30 (m, 2H) , 2,81(s, 3H) .

Meziprodukt 35

2-(2,4-Dichlorfenyl)-3-oxo-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-amid

Do roztoku meziproduktu 29 (0,33 g) v DCM (30 ml) byly přidány TEA (0,65 ml) a po kapkách roztok trifosgenu (0,23 g) v DCM (10 ml) . Reakční směs byla míchána za teploty okolí po dobu 1,5 hodin a potom koncentrována a čištěn mžikovou chromatografií pro získání 2-(2,4-dichlorfenyl)-3-oxopiperazin-l-karbonylchloridu (0,3g, bílá pěna). Tato sloučenina byla rozpuštěna v DCM (30 ml), potom byly přidány DIPEA (0,3 ml) a hydrochlorid (3,5-bistrifluormethylbenzyl)methyl-aminu (0,32 g). Reakční směs byla míchána za teploty zpětného toku po dobu 3 hodin, potom promývána IN roztokem HCl a solným roztokem. Organická fáze byla potom sušena a koncentrována pro získání surového produktu, který byl čištěn mžikovou chromatografií (od AcOEt 100% do AcOEt/MeOH 8:2) pro získání sloučeniny z názvu (0,45 g) ve formě bílé pěny.

NMR (DMSO): δ (ppm) 8,30 (bs, 1H) , 7,96 (bs, 1H) , 7,73 (bs, 1H) , 7,54 (d, 1H), 7,35-7,33 (d+dd, 2H) , 5,44 (s, 1H) , 4,61 (d, 1H), 4,39 (d, 1H), 3,39-3,25 (m+m, 4H), 2,76 (s, 3H).

Meziprodukt 36

2-(3,4-Dichlorfenyl)-3-oxo-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3, 5-bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-amid

Do roztoku meziproduktu 30 (0,413 g) v DCM (40 ml) byly přidány TEA (1,4 ml) a po kapkách roztok trifosgenu (0,25 g) v DCM (10 ml). Reakční směs byla míchána za teploty okolí po dobu 1,5 hodiny, potom byly přidány DIPEA (0,6 ml) a hydrochlorid (3,5-bistrifluormethylbenzyl)-methyl-aminu (0,54 g) . Reakční směs byla míchána za teploty zpětného toku po dobu 3 hodin, potom byla promývána IN roztokem HC1 a solným roztokem. Organická fáze byla potom sušena a koncentrována pro získání surového produktu, který byl čištěn mžikovou chromatografii (od AcOEt 100% do AcOEt/MeOH 8:2) pro získání sloučeniny z názvu (0,13 g, bílá pěna).

NMR (DMSO)': δ (ppm) 8,24 (bs, 1H) , 7,96 (s, 1H) , 7,75 (s, 2H), 7,54 (d, 1H), 7,51 (d,1H), 7,33 (dd, 1H), 5,11 (s, 1H) , 4,49 (dd, 2H), 3,5-3,25 (m+m, 4H), 2,82 (s, 3H) .

Meziprodukt 37

4-(3, 5-bis-trifluormethyl-benzyl-karbamoyl)-3-(4-fluor-2methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, l-(R)-fenylethylester (diastereomer 1) (37a)

4-(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl-karbamoyl)-3-(4-fluor-2methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, l-(R)-fenylethylester (diastereomer 2) (37b)

Do roztoku karbonyldiimidazolu (402 mg) v DCM (8,3 ml) byl přidán za teploty okolí a pod atmosférou N₂ (R)-sek.73 fenylethylalkohol (0,3 ml). Roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 7 hodin. Sloučenina z příkladu 11 (790 mg) v bezvodém acetonitrilu (8,3 ml) byla potom přidána do roztoku a reakčni směs byla zahřívána na teplotu 50°C bez kondenzátorů vody pro odpaření DCM. Kondenzátor vody byl připojen k baňce a reakčni směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 4 hodin. Rozpouštědlo bylo potom odpařeno a residuum bylo rozděleno mezi AcOEt/lN HCl. Fáze byly separovány a organická vrstva byla promývána nasyceným vodným NaCl (2x). Potom byla sušena a rozpouštědlo bylo odpařeno. Surový olej byl čištěn mžikovou chromatografii (CH/AcOEt 8:2). Smíšené frakce byly rechromatografovány za

stejných podmínek. Meziprodukty 37a	(242 m	g) a 37b	(152	mg)
byly získány ve formě bílých pěn.
Meziprodukt 37a: NMR (DMSO) δ (ppm)	7,90	(s, 1H),	7,67	(s,
2H), 7,37-7,24 (m, 6H), 6,95 (dd, 1H)	, 6,81	(m, 1H),	5,75	(q<
1H), 4,60-4,41 (dd, 2H) , 4,52 (m,	1H) , 3	,83-3,00	(m,	6H) ,
2,88 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 1,48 (d,	3H) .
Meziprodukt 37b: NMR (DMSO) : δ (ppm)	7,90	(s, 1H),	7, 67	(s,
2H), 7,4-7,27 (m, 6H), 6,95 (dd, 1H)	, 6,80	(m, 1H),	5,74	(q<
1H), 4,60-4,40 (dd, 2H), 4,50 (m, 1H)	, 3,79	(m, 3H),	3,00	(m,

3H), 2,87 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 1,46 (d, 3H).

Meziprodukt 38

4-{[1—(S) — (3,5-bis-1rifluormethyl-fenyl)-ethyl]-methylkarbamoyl}-3- (S) -(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-lkarboxylová kyselina, 1-(R)-fenyl-ethylester (diastereomer 1) (38a)

4-{[1-(S)-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-ethyl]-methylkarbamoyl}-3-(R)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-1karboxylová kyselina, 1-(R)-fenyl-ethylester (diastereomer 2) (38b)

Do roztoku 1,1-karbonyldiimidazolu (0,163 g) v DCM (5 ml) byl přidán (R)-sek.-fenethylalkohol (0,122 g) a směs byla míchána za teploty okolí po dobu 30 minut. Potom byl přidán roztok z příklad 10 (0,250 g) v acetonitrilu (5 ml) a směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 4 hodin. Směs byla ochlazena a AcOEt byl přidán. Organická fáze byla promývána HCI IN (2 x 50 ml) a solným roztokem, sušena a koncentrována pro získání surové směsi diastereomerů, které byly separovány mžikovou chromatografii (CH/AcOEt 8:2) pro získání sloučeniny z názvu 38a (diastereomer 1 - 0,08 g) a sloučeniny z názvu 38b (diastereomer 2 - 0,08 g).

Meziprodukt 38a: NMR (CDCI3) :	: δ (ppm)	7, 74	(s,	1H) ,	7,52	(s,
2H) , 7,40-7,24 (m, 5H), 7,18	(m, 1H) ,	6, 87	(m,	1H) ,	6, 80	(m,
1H), 5,86 (q, 1H) , 5,57 (q,	7H), 4,7-	-4, 46	(m,	1H) ,	3, 98	(m,
2H), 3,44-2,96 (m, 4H) , 2,77	(s, 3H),	2,36	(s,	3H) ,	1,54	(m,
6H) .
Meziprodukt 38b NMR (CDCI3) :	δ (ppm)	7, 74	(s,	1H) ,	7,53	(s,
2H) , 7,40-7,26 (m, 5H), 7,76	(m, 1H),	6, 87	(m,	1H) ,	6, 78	(m,
1H), 5,86 (q, 1H), 5,57 (m,	1H) , 4,62	(m,	1H) ,	4,04	(m,	1H) ,

3,84 (m, 1H), 3,50-3, 04 (m, 4H), 2,76 (s, 3H) , 2,41 (s, 3H),

1,56 (m, 6H).

Meziprodukt 39 (+)(S)-3-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-2-on

Způsob A

Do suspenze meziproduktu 25 (35 g) v AcOEt (900 ml) byla přidána L( + )-mandlová kyselina (27,3 g) . Suspenze byla míchána za teploty okolí po dobu 1 hodiny a potom za teploty 3-5°C po dobu 2 hodin, filtrována a sušen za vakua za teploty okolí pro získání surového L(+)-mandelátu 3-(4-fluor-2methyl-fenyl)-piperazin-2-onu (37 g), který byl suspendován v AcOEt (370 ml) a zahříván na teplotu zpětného toku do úplného rozpuštění a potom ochlazen na teplotu okolí a míchán po dobu dalších 2 hodin, filtrován, promýván AcOEt (150 ml) a sušen za vakua pro získání (+) L-mandlátu 3-(4-fluor-2-methylfenyl)-5,6 pyrazin-2-onu (30,4 g) ve formě bílé pevné látky. Tento materiál (30,4 g) byl suspendován v AcOEt (300 ml) a zpracováván NaOH (0,73M, 155 ml) nasyceným NaCI. Organická fáze byla potom promývána vodou (90 ml). Vodná fáze byla proti-extrahována čtyřikrát AcOEt (90 ml) . Zkombinované organické fáze (1800 ml) byly sušeny na 10 g Na₂SO₄ a koncentrovány za vakua a tím byla získána sloučenina z názvu (25,04 g) ve formě bílé pěny.

Způsob B

- 76 Do roztoku, zahřívaného na teplotu 45°C, meziproduktu 25a (168 g) v ethylacetátu (2000 ml) byly přidány L(+)-mandlová kyselina (116 g) a 3,5-dichlor-salicylaldehyd (10,8 g). Roztok byl míchán po dobu 30 minut za teploty 45°C a potom naočkován bílými krystaly L(+)-mandlátu 3-(4-fluor-2-methylfenyl)-piperazin-2-onu (0,4 g). Získaná suspenze byla míchána pod dusíkovou atmosférou za teploty 45°C po dobu 16 hodin a potom míchána po dobu dalších 4 hodin za teploty 0°C, promývána ochlazeným ethylacetátem (2x200 ml) a potom sušena za vakua za teploty okolí po dobu 2 hodin pro získání L(+)mandlátu 3-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-2-onu (126,22 g) ve formě bílo-žlutavé pevné látky, která byla suspendována v DCM (2760 ml) a potom byl přidán NaOH 0,8M v solném roztoku (17,35 g NaOH v 530 ml solného roztoku). Organická fáze byla potom promývána solným roztokem (380 ml) a vodná fáze byla zpětně extrahována čtyřikrát DCM (4x1500 ml) . Zkombinované organické fáze byly sušeny a koncentrovány pro získání sloučeniny z názvu (60,35 g).

¹H-NMR (DMSO): δ (ppm) 7,77 (bm, 1H) , 7,24 (dd, 1H) , 6,96 (dd, 1H), 6,92 (td, 1H), 4,43 (s, 1H), 3,30 (m, 1H) , 3,14 (m, 1H), 2,92 (m, 1H), 2,82 (m, 2H), 2,33 (s, 3H).

HPLC: Chiralcel OJ (4,6X250mm) Daicel; Mobilní fáze: nHexan/Ethanol 80:20 obj.; Průtok: 1 ml/minut; Detektor UV při 265nm (nebo 210 nm pro vyšší signály); Rozpouštěcí fáze: nhexan/ethanol 80/20 obj.;

Koncentrace vzorku 1 mg/ml; Injekce: 5 μΐ; Retenční doba: 2:8,4 minut.

[a]^D (rozpouštědlo CHCI3, Zdroj: Na; Objem buňky [ml]: 1;

Délka dráhy v buňce [dm]:l; Teplota buňky [°C]: 20; Vlnová délka [nm]: 589; Koncentrace vzorku [% p/v] :1,17)=+17,9.

Meziprodukt 40

2-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-3-oxo-piperazin-l-karboxylová kyselina, [1-(R)-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-ethyl]methyl-amid (40a)

2-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-3-oxo-piperazin-l-karboxylová kyselina, [1-(S)-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-ethyl]methyl-amid (40b)

Do roztoku meziproduktu 39 (12,1 g) v bezvodém DCM (270 ml) byl přidán TEA (16,4 ml). Roztok byl ochlazen na teplotu 0°C a roztok trifosgenu (7,3 g) v bezvodém DCM (60 ml) byl po kapkách přidán v průběhu 40 minut. Reakční směs byla míchána za teploty 0°C po dobu 4 hodin a byla zahřáta zpět na teplotu okolí a potom byl přidán DIPEA (20,2 ml), následovaný roztokem [1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-ethyl]-methyl-amin (23,6 g) v acetonitrilu (300 ml) a další množství acetonitrilu (300 ml). Reakční směs byla ponechána zahřát se na teplotu 95°C (olejová lázeň T°C) bez kondenzátoru vody pro odpaření DCM. Když vnitřní teplota dosáhla 70°C, baňka byla vybavena kondenzétorem vody a reakční směs byla zahřívána na teplotu 7 0°C po dobu dalších 2 hodin (4 hodin celkově) . Směs byl potom ochlazena zpět na teplotu okolí a rozpouštědlo bylo odpařeno. Residuum bylo rozděleno mezi DCM / 2% HCl a fáze byly separovány. Vodná vrstva byla extrahována DCM (lx) a zkombinované organické extrakty byly sušeny. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo odpařeno pro získání surové směsi sloučenin z názvu, které byly čištěny mžikovou chromatografií (AcOEt/CH 8:2) pro získání sloučenin z názvu 40a (8,8 g) a 40 b (9,0 g) ve formě bílých pěn.

NMR (^ςΗ, DMSO-d6) : δ 8,16 (s, 1H) , 7,98 (s, 2H) , 7,19 (dd,

1H) ,	6:97	(dd, 1H) , 6,87	(td, 1H), 5,34	(s,	1H) , 5,14	(q<
1H) ,	3,45-	•3,2 (m, 4H), 2,	53 (s, 3H), 2,27	(s,	3H) , 1,56	(d,
3H) .
Meziproduk	t 4 0b: NMR (^ΧΗ,	DMSO-d6): δ 8,16	(s,	1H), 7,95	(s,
2H) ,	7,19	(dd, 1H), 6,98	(dd, 1H), 6,90	(td,	1H) , 5,29	(q_ř
1H) ,	5,28	(s, 7H), 3,45-3,	,15 (m, 4H), 2,66	(s,	3H), 2,27	(s,
3H) ,	1, 52	(d, 3H) .

Meziprodukt 41

4-[2-(1,3-dioxo-l,3-dihydro-isoindol-2-yl)-ethyl]-2-(4-fluor2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5-bistrifluormethyl-benzyl)-methyl-amid

Do roztoku z příkladu 8 (0,05 g) v bezvodém DMF (1 ml) byly přidány pod atmosférou N₂ a za teploty okolí TEA (40 μΐ) a N(2-bromethyl)-ftalimid (28 mg). Reakční směs byla míchána za teploty 80°C po dobu 5 hodin a byla potom ochlazena na teplotu okolí. Potom byla vlita do nasyceného vodného NaCl a fáze byly separovány. Organická vrstva byla promývána nasyceným vodným NaCl (2x), sušena a rozpouštědlo bylo odpařeno. Surový produkt byl čištěn mžikovou chromatografií

(CH/AcOEt 1:1)	i pro	získání	sloučeniny z	názvu (0,	25	g:	) ve
formě žlutého	olej e	•
NMR (DMSO): δ	(ppm)	7,94 (s,	IH), 7,80-7,90 (m,	4H) ,	7,	67	(s,
2H) , 7,33 (m,	IH) ,	6,91 (dd, IH), 6,45	(td,	IH) ,	4,	60	(d,
IH), 4,34 (m,	2H) ,	3,80 (m,	IH) , 3,64 (m,	IH) ,	3,18	(ir	1/	IH) ,
2,82 (s, 3H),	2,79	(m, IH),	2,80 (m, IH),	2, 66	(m,	IH)	Z	2, 60
(m, 2H), 2,46	(m, IH), 2,26	(m, IH), 2,27	(s, 3H) .

IR (Nujol) (cm¹) 1650 - 1773.

MS (m/z) 651 [ΜΗ], 673- [M+Na]⁺.

Meziprodukt 42

1-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-propan-1,2-dion

1) Do suspenze hořčíkových pilin (283 mg) v bezvodém THF (3 ml) byl přidán za teploty okolí a pod atmosférou N₂ malý krystal I₂, následovaný 10% roztokem l-brom-4-fluor-2-methylbenzenu (2,0 g) v bezvodém THF (8 ml) . Suspenze byla mírně zahřívána (zahřívací pistole), dokud hnědá barva nezmizela. Zbývající bromid byl po kapkách přidán, udržujíce reakční směs ponechánu (50-60°C) v olejové lázni. Po ukončení přidávání (15 minut) byla suspenze míchána za teploty 70°C, dokud hořčíkové piliny takřka úplně nezreagovaly (2 hodin). Nový hnědý roztok byl použit v následujícím kroku.

2) Roztok LiBr (2,26 g) v bezvodém THF (26 ml) byl po kapkách přidán do suspenze CuBr (1,82 g) v bezvodém THF (26 ml).

Reakční směs byla míchána za teploty okolí po dobu 1 hodiny. Reakční směs byla potom ochlazena na teplotu -78 °C a dříve připravený Grignardův roztok byl po kapkách přidán následovaný pyruvylchloridem (1,13 g). Reakční směs byla míchána za teploty -78°C po dobu 2 hodin. THF byl odpařen a residuum bylo vyjmuto v AcOEt. Organická vrstva byla promývána nasyceným vodným NH₄C1 (2x), sušena a odpařena na surový olej, který byl čištěn mžikovou chromatografii (CH/AcOEt 95:5) pro získání sloučeniny z názvu ve formě žlutého oleje (0,58 g).

NMR (CDC1₃) : δ (ppm) 7,68 (m, 1H) , 6,98 (m, 2H) , 2,56-2,52 (2s, 6H).

IR (Film) (cm’¹) 1712, 1674.

Meziprodukt 43

5-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-6-methyl-2,3-dihydro-pyrazin

Do roztoku meziproduktu 42 (0,58 g) a ethylenediaminu (0,22 ml) v toluenu (13 ml) byl za teploty okolí a pod atmosférou N₂ přidán bezvodý Na₂SO₄ (2 g) . Reakční směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 6 hodin. Potom byla ochlazena na teplotu okolí a filtrována. Pevné látky byly promývány DCM. Rozpouštědlo bylo odpařeno a surový olej byl čištěn mžikovou chromatografii (AcOEt) pro získání sloučeniny z názvu ve formě oranžového oleje (0,44 g).

NMR (CDCI3) : δ (ppm) 7,18 (m, 1H) , 7,0-6,9 (m, 2H) , 3,6-3,45 (2m, 4H), 2,20 (s, 3H), 1,88 (t, 3H).

IR (Film) (cm^-1) 1612, 1530.

MS (m/z) 204 [M]⁺.

Meziprodukt 44

2-methyl-3-(2-methyl-4-fluor)-fenyl-piperazin-l-karboxylová kyselina, benzylester

Do roztoku meziproduktu 43 (554 mg) v bezvodém MeOH (11 ml) bylo pod atmosférou N₂ a za teploty okolí přidáno Pd/C 10% (110 mg) a reakční směs byla vložena pod H₂ atmosféru po dobu 2 hodin. Katalyzátor byl potom filtrován (filtrační papír) a promýván AcOEt. Rozpouštědlo bylo odpařeno a residuum bylo sušeno za vakua. 2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-3-methylpiperazin byl získaný ve formě žlutého oleje (565 mg) a byl rozpuštěn v bezvodém DCM (27 ml) za teploty -5°C a pod atmosférou N₂. TEA (549 μΐ) a benzyloxykarbonylchlorid (426 ml) byly přidány do tohoto roztoku. Roztok byl míchán za teploty -5°C po dobu 2 hodin, potom byl vlit do směsi nasyceného vodného NaHCO₃ / DCM a fáze byly separovány. Vodná vrstva byla extrahována DCM (lx) a zkombinované organické extrakty byly sušeny. Pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo odpařeno. Surový olej byl čištěn mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 1:1) pro získání sloučeniny z názvu, získané ve formě žlutého oleje (111 mg).

NMR (CDC1₃) δ (ppm)	7,45-	7,36	(m, 6H), 6,86	(m,	2H), 5,17	(m,
2H), 4,48-4,36	(m,	1H) ,	4,09-	4,04 (2d, 1H)	, 4,	05-3,94 (	2bd,
1H), 3,25-2,88	(m,	3H) ,	2,40	+ 2,28 (2 s,	3H) ,	0,97 +	0, 96
(2d, 3H).
IR (Film) (cm^-1)	1688.

MS (m/z) 343 [MH]⁺.

Meziprodukt 45

4-[(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-karbamoyl]-3-(4fluor-2-methyl-fenyl)-2-methyl-piperazin-1-karboxylová kyselina, benzylester

Do roztoku meziproduktu 44 (358 mg) v bezvodém DCM (15 ml) byl za teploty 0°C a pod atmosférou N₂ přidán TEA (292 μΐ) . Do tohoto roztoku byl přidán roztok trifosgenu (140 mg) v bezvodém DCM (6 ml). Reakční směs byla míchána za teploty 0°C po dobu 2 hodin.

Do tohoto roztoku byly přidány DIPEA (181 ml) a hydrochlorid N-methyl-bis(trifluormethyl)benzylaminu (374 mg). Roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 18 hodin. Potom byl zředěn DCM, promýván 10% kyselinou citrónovou (lx) a sušen. Rozpouštědlo bylo odpařeno a surový olej čištěn mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 6:4) pro získání sloučeniny z názvu (545 mg) ve formě bílé pěny.

NMR (CDC1	3) : 5 (ppm) 7,76 (s, 1H) , 7	,50 (s,	2H), 7,34-7,30
(m, 5H) ,	7,00 (m, 1H) , 6,85 (m,	1H) ,	6,7 6 (m	, 1H), 5,2-5,1
(dd, 2H),	4,75 (d, 1H), 4,30 (d,	1H) ,	4, 65 (m,	1H), 4,35 (m,
1H), 4,00	(m, 1H), 3,54-3,40 (m,	2H) ,	3,1 (m,	1H), 3,06 (s,
3H), 2,38	(s, 3H) , 1,05 (d, 3H) .
IR (Film)	(cm^-1) 3437, 1705, 1664.

MS (m/z) 626 [MH]⁺.

Meziprodukt 46

3-(2-methyl-4-fluor-fenyl)-5-methyl-5,6-dihydro-lH-pyrazin 2on

Pod inertní atmosférou byl meziprodukt 23 (0,2 g) rozpuštěn v bezvodém toluenu (5 ml), potom byl po kapkách přidán 1,2diaminopropan (0,102 ml), následovaný Na₂SO₄ (0,2 g) a reakční směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 2 hodin, pevné látky byly odfiltrovány a surový produkt získaný po odpaření rozpouštědla byl čištěn mžikovou chromatografii (AcOEt) a tím byla získána sloučenina z názvu ve směsi s 3(2-methyl-4-fluor-fenyl)-6-methyl-5,6-dihydro-lH-pyrazin-2onem (0,200 g).

¹H-NMR (DMSO): δ (ppm) 8,42 (bs, IH), 7,24 (m, IH), 7,02 (m,

2H), 3,85 (m, IH), 3,40 (dt, IH), 3,13 (t, IH), 2,18 (s, 3H), 1,25 (d, 3H).

IR (Nujol) (cm^-1) 345, 1682, 1614.

MS (m/z) 221 [MH]⁺.

Meziprodukt 47

3-(2-methyl-4-fluor-fenyl)-5-methyl-piperazin-2-on (směs syn enantiomerů)

Meziprodukt 46 (0,180 g) byl rozpuštěn v MeOH (4 ml) a bylo přidáno Pd/C 10% (36 mg) . Po uplynutí 2 hodin byla redukce ukončena. Reakční směs byla filtrována na vrstvě celitu, rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku a surový produkt byl čištěn mžikovou chromatografii (AcOEt/MeOH 9:1) a tím se získala 9:1 směs sloučeniny z názvu a anti enantiomerů (0,110 g) .

¹H-NMR (DMSO): δ	(ppm)	7,88	(s, 1H),	7, 07	-6, 92	(m,	3H), 4,48
(s, 1H) , 3,3 (m,	1H) ,	2,91	(m, 2H),	2,65	(bs,	1H) ,	2,34 (s,
3H), 0,95 (d, 3H)	•
IR (Nujol) (cm^-1)	3441,	3285,	1675.

MS (m/z): 223 [MH]⁺.

Meziprodukt 48

2-(2-methyl-4-fluor-fenyl)-3-oxo-piperazin-6-methyl-lkarboxylová kyselina, (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-methylamid; směs syn enantiomerů

Do roztoku meziproduktu 47 (0,105 g) a triethylaminu (0,197 ml) v bezvodém DCM (5 ml) byl po kapkách přidán, za teploty 0°C, roztok trifosgenu (0,056 g) v bezvodém DCM (3 ml) pod inertní atmosférou. Teplota byla udržována na 0°C po dobu 3 hodin před přidáním DIPEA (0,3 ml) následovaného hydrochloridem 3, 5-bis-trifluormethyl-methyl-aminu (0,166 g). Reakční směs byla míchána za teploty okolí přes noc před zředěním DCM a promývána postupně IN roztokem HCI, H₂O a solným roztokem. Organická fáze byla sušena a surový produkt získaný po odpaření rozpouštědla byl čištěn mžikovou chromatografií (AcOEt/MeOH 9:1) a tím byla získána sloučenina z názvu ve formě pěny (0,085 g).

Y NMR (DMSO): δ (ppm) 8,08 (bt, 1H) , 7,95 (s, 1H) , 7,63 (s, 2H), 7,13 (t, 1H) , 6,87 (d, 1H) , 6,79 (t, 1H) , 5,21 (s, 1H) ,

4,51 (dd, 2H), 3,64 (m, 1H), 3,30 (m, 1H), 3,78 (m, 1H) , 2,77 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 1,20 (d, 3H).

IR (Nujol) (cm¹) 1675.

MS (m/z): 506 [MH]⁺.

Meziprodukt 49

2-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-akrylová kyselina, methylester

Paládium tetrakis (trifenylfosfin) (331 g), jodid měďný (0,414 g) a methylester 2-tributylstannyl-2-propenové kyseliny (2,82 g) byly přidány do roztoku 3,5-(bis-trifluormethyl)jodbenzenu (1 g) v bezvodém DMF (10 ml) pod dusíkovou atmosférou. Roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 16 hodin, potom zředěn vodou a extrahován AcOEt. Organický extrakt byl sušen, koncentrován ve vakuu a čištěn mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 9:1) pro získání sloučeniny z názvu (180 mg).

IR (CDC1₃) : 1727 (C=O) cm'¹.

NMR (DMSO): δ (ppm) 7,95 (s, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,87 (s, 1H), 6,6 (s, 1H), 6,06 (s, 1H), 3,87 (s, 3H).

Meziprodukt 50

1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-cyklopropankarboxylová kyselina, methylester

Hydrid sodný (60% suspenze v minerálním oleji - 86 mg) byl přidán do suspenze trimethylsulfoxoniumjodidu (515 mg) v bezvodém DMF pod dusíkovou atmosférou. Suspenze byla míchána za teploty okolí po dobu 15 minut, potom byl přidán roztok meziproduktu 49 (0,58 g) v bezvodém DMF (6 ml). Směs byla míchána za teploty okolí po dobu 30 minut, potom byla zředěna solným roztokem a extrahována ethylacetátem. Organický extrakt byl sušen, koncentrován ve vakuu a čištěn mžikovou chromatografii (CH/AcOEt 9:1) pro získání sloučeniny z názvu (90 mg) ve formě bezbarvého oleje.

Meziprodukt 51

1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-cyklopropankarboxylová kyselina

Směs meziproduktu 50 (90 mg) a hydroxidu lithného (55,4 mg) v methanolu (10 ml) byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 2 hodin. Organický extrakt byl koncentrován ve vakuu a rozdělen mezi nasycený roztok chloridu amonného a AcOEt. Organická vrstva byla promývána solným roztokem, sušena a koncentrována ve vakuu pro získání sloučeniny z názvu (80 mg) ve formě bezbarvého oleje.

Meziprodukt 52

4-[1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-cyklopropylkarbamoyl]-Βίε) -(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, terč.-butylester

TEA (150 μΐ) a dif enylf osforylazid (175 μΐ) byly přidány do roztoku meziproduktu 51 (80 mg) v bezvodém toluenu (25 ml) předem ochlazeného na teplotu 0°C pod dusíkovou atmosférou. Roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 3 hodin, potom byl přidán meziprodukt 54 (88 mg) a směs byla zahřívána na teplotu 100°C po dobu 1 hodiny. Směs byla ponechána ochladit se na teplotu okolí a rozdělena mezi vodu a AcOEt. Organická vrstva byla sušena, koncentrována ve vakuu a residuum bylo čištěno mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 6:4) pro získání sloučeniny z názvu ve formě bezbarvého oleje (90 mg).

NMR (DMSO): δ (ppm) 7,75 (bs, 1H) , 7,67 (bs, 2H) , 7,29 (bs,

1H), 7,18 (dd, 1H), 6,96 (dd, 1H) , 6,86 (dt, 1H) , 5,17 (t, 1H) , 3,75-3,42 (m, 5H) , 3,18 (m, 1H) , 2,29 (s, 3H) , 1,3 (s, 9H), 1,3-1,1 (m, 4H).

MS: m/z = 590 [M+H]⁺.

Meziprodukt 53

4-{[1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-cyklopropyl]-methylkarbamoyl}-3-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-1karboxylová kyselina, terč.-butylester

Terč.-butoxid sodný (38,5 mg) byl přidán do roztoku meziproduktu 52 (80 mg) v bezvodém THF. Roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 10 minut, potom byl přidán methyljodid (40 μΐ) a míchání pokračovalo po dobu 1 hodiny. Směs byla rozdělena mezi vodu a AcOEt. Organická vrstva byla sušena, koncentrována ve vakuu pro získání sloučeniny z názvu ve formě bezbarvého oleje (90 mg).

NMR (DMSO): δ (ppm) 7,8 (bs, 1H) , 7,38 (dd, 1H) , 7,34 (bs, 2H), 6,97 (dd, 1H) , 6,93 (dt, 1H) , 4,5 (bm, 1H) , 3,64-2,97 (m, 9H), 2,28 (s, 3H), 1,38 (bs, 9H), 1,36-1,24 (2m, 4H) .

MS: m/z = 604 [M+H]⁺, 626 [M+Na]⁺.

Meziprodukt 54

1-(terč.-butoxykarbonyl)-3-(3)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)piperazin

Di-terc.-butyldikarbonát (271 mg) byl přidán do roztoku meziproduktu 81 (301 mg) a TFA (315 μΐ) v DCM (10 ml) předem ochlazeném na teplotu 0°C pod dusíkovou atmosférou. Roztok byl míchán za teploty 0°C po dobu 40 minut, potom byl koncentrován ve vakuu. Residuum bylo rozděleno mezi vodu a AcOEt. Organická vrstva byla promývána solným roztokem, sušena a koncentrována ve vakuu. Residuum bylo čištěno mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 6:4) pro získání sloučeniny z názvu (80 mg) ve formě bezbarvé gumy.

NMR (ds-DMSO): δ (ppm) 7,52 (m, 1H), 7,07-6,98 (m, 2H), 3,943,74 (m, 3H), 3,0-2,5 (m, 4H), 2,33 (s, 3H), 1,4 (s, 9H).

Meziprodukt 55

3-(3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-l-vinyl-pyrrolidin-2-on

Trimethylsilyldiazomethan (11,5 ml) byl po kapkách přidán do roztoku 3,5-bis-(trifluormethyl)-benzoové kyseliny (2 g) v bezvodém toluenu (20 ml) a methanolu (0,5 ml) předem ochlazeného na teplotu 0°C pod dusíkovou atmosférou. Roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 1 hodiny, potom byl koncentrován ve vakuu pro získání methylesteru 3,5-bis(trifluormethyl)-benzoové kyseliny (2 g) ve formě bezbarvého oleje. Roztok methylesteru 3,5-bis-(trifluormethyl)-benzoové kyseliny (2 g) a l-vinyl-2-pyrrolidinon (863 μΐ) byly přidány do směsi hydridu sodného (60% suspenze v minerálním oleji 0,41 g) v bezvodém toluenu (30 ml) předem zahřátého na teplotu zpětného toku. Směs byla míchána po dobu 12 hodin, potom byla rozdělena mezi nasycený roztok chloridu amonného a AcOEt. Organická vrstva byla sušena, koncentrována ve vakuu a residuum bylo čištěno mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 8:2) pro získání sloučeniny z názvu (1,6 g) ve formě béžového oleje.

MS: m/z = 352 [M+H]⁺.

Meziprodukt 56

5-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-3,4-dihydro-2H-pyrrol

Roztok meziproduktu 55 (1,6 g) v THF (30 ml) byl po kapkách přidán v průběhu 1,5 hodin do vroucího roztoku 6N HC1 (50 ml) destilovaného za současně s THF. Po ukončení přidávání bylo destilační zařízení odstraněno a zahřívání na teplotu zpětného toku pokračovalo po dobu další 4 hodiny. Směs byla ochlazena na teplotu 0°C a 30% KOH roztok byl přidáván dokud nebylo dosaženo pH=12. Sloučenina byla extrahována DCM (4 x 10 ml) . Zkombinované organické extrakty byly sušeny, koncentrovány ve vakuu a residuum bylo čištěno mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 7:3) pro získání sloučeniny z názvu (100 mg) ve formě bledě žlutého oleje.

NMR (DMSO): δ (ppm) 8,38 (s, 2H), 8,22 (s, 1H), 4,0 (t, 2H),

3,03 (tt, 2H), 1,99 (m, 2H) .

MS: m/z = 282 [M+H];

Meziprodukt 57

2-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-pyrrolidin

Borohydrid sodný (1,5 ekvivalenty) byl přidán do roztoku meziproduktu 56 (100 mg) v methanolu (5 ml) předem ochlazeném na teplotu 0°C pod dusíkovou atmosférou. Roztok byl zředěn vodou a extrahován AcOEt. Organický extrakt byl sušen a koncentrován ve vakuu pro získání sloučeniny z názvu (103 mg) ve formě bledě žlutého oleje.

Meziprodukty 58

4-[2-(3, 5-bis-trifluormethyl-fenyl)-pyrrolidin-l-karbonyl]-3(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, terč.-butylester (58a, enantiomer A)

4-[2-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-pyrrolidin-l-karbonyl]-3(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, terč.-butylester (58b, enantiomer B)

Roztok trifosgenu (47 mg) v DCM (2 ml) byl po kapkách přidán do roztoku meziproduktu 54 (103 mg) a TEA (97 μΐ) v acetonitrilu (3 ml) předem ochlazeného na teplotu 0°C pod dusíkovou atmosférou. Roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 2 hodin, potom byl přidán meziprodukt 56 (103 mg) a roztok byl zahříván na teplotu zpětného toku po dobu 5 hodin. Po ochlazení na teplotu okolí byl roztok zředěn vodou a extrahován AcOEt. Organická vrstva byla sušena, koncentrována ve vakuu a residuum bylo čištěno mžikovou chromatografií (CH/AcOEt od 8:2 do 7:3) pro získání sloučeniny z názvu 58a (15 mg) a sloučeniny z názvu 58b (20 mg).

Meziprodukt 59

2-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-pent-4-enová kyselina

Butyllithium (1,6 M v hexanu - 1,7 ml) bylo přidáno do roztoku diisopropylaminu (4,88 g) v bezvodém THF (40 ml) předem ochlazeného na teplotu -78°C pod dusíkovou atmosférou. Roztok byl ponechán zahřát se na teplotu 0°C a byl míchán za této teploty po dobu 1 hodiny. Potom roztok byl ochlazen na teplotu -78°C a byl přidán roztok 3,5-(bistrifluormethyl)fenyloctové kyseliny (3 g) v THF (10 ml). Roztok byl ponechán zahřát se na teplotu 0°C a míchán za této teploty po dobu 2 hodin. Roztok byl znovu ochlazen na teplotu -78°C a byl přidán 2-propenyljodid (1,2 ml). Roztok byl ponechán zahřát se na teplotu okolí a byl míchán za teploty okolí po dobu 3 hodin. Reakce byla zastavena 5N HCl až do pH=2 a roztok byl extrahován AcOEt. Organická vrstva byla sušena, koncentrována ve vakuu a residuum bylo čištěno mžikovou chromatografii (CH/AcOEt 75:25) pro získání sloučeniny z názvu (2,4 g) ve formě žlutého oleje.

Meziprodukty 60

4-[1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-but-3-enylkarbamoy1]-3(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, terč.-butylester (60a, enantiomer A)

4-[1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-but-3-enylkarbamoyl]-3(S) -(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, terč.-butylester (60b, enantiomer B)

TEA (885 μΐ) a difenylfosforylazid (1,3 g) byly přidány do roztoku meziproduktu 59 (500 mg) v bezvodém toluenu (25 ml) předem ochlazeném na teplotu 0°C pod dusíkovou atmosférou. Roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 3 hodin, potom byl přidán produkt 54 (521 mg) a směs byla zahřívána na teplotu

100°C po dobu 1 hodiny. Směs byla ponechána ochladit se na teplotu okolí a byla rozdělena mezi vodu a AcOEt. Organická vrstva byla sušena, koncentrována ve vakuu a residuum bylo čištěno mžikovou chromatografii (CH/AcOEt od 8:2 do 7:3) pro získání sloučeniny z názvu 60a (480 mg) a sloučeniny z názvu 60b (450 mg) ve formě bílých pěn.

Meziprodukt 60a NMR	(DMSO): δ (ppm) 7,94 (s, 2H) , 7,84	(s,
1H), 7,14 (t, 1H),	6,94 (dd, 1H), 6,84 (dt, 1H) , 6,66	(d,
1H), 5,62 (m, 1H) ,	5,18 (t, 1H), 5,0-4,9 (m, 2H) , 4,84	(m,
1H) , 3,82 (dt, 1H),	3,75 (m, 1H), 3,65 (bd, 1H) , 3,43	(bt,
1H), 3,52 (dd, 1H) ,	3,17 (m, 1H), 2,45 (t, 2H), 2,24 (s,	3H) ,

1,29 (m, 1H).

Meziprodukt 60b NMR (DMSO): δ (ppm) 7,84 (s, 2H) , 7,81	(s,
1H) ,	7,14 (t, 1H) , 6,97 (dd, 1H) , 6,86 (dt, 1H) ,	6, 53	(bd,
1H) ,	5,66 (m, 1H), 5,15 (t, 1H), 5,05-4,9 (m, 3H),	3,89	(dt,
1H) ,	3,75-3,65 (b, 1H) , 3,63 (bd, 1H) , 3,52 (dd,	1H) ,	3, 43

(dt, 1H), 3,2 (m, 1H) , 2,5 (t, 2H) , 2,3 (s, 3H) , 1,28 (m,

1H) .

Meziprodukt 61

4-{2-propeny1-[1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-but-3-enyl]karbamoyl}-3-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-lkarboxylová kyselina, terč.-butylester (enantiomer A)

Terč.-butoxid sodný (245 mg) byl přidán do roztoku meziproduktu 60a (480 mg) v bezvodém THF (20 ml) . Roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 10 minut, potom byl přidán 2propenyljodid (400 μΐ) a míchání pokračovalo po dobu 3 hodin. Směs byla rozdělena mezi vodu a AcOEt. Organická vrstva byla sušena a koncentrována ve vakuu pro získání sloučeniny z názvu ve formě bezbarvého oleje (540 mg).

NMR	(DMSO)	: δ (ppm) 7,94 (s,	1H) ,	7,79 (s,	2H), 7,28 (dd,
7H) ,	6, 98	(dd, 1H), 6,84 (dt,	1H) ,	5,63 (m,	1H) , 5,46 (m,
1H) ,	5,18	(t, 1H), 5,14-4,9 (m	, 4H),	4,4 (bd,	1H), 3,98 (dd,
1H) ,	3,86	(dd, 1H), 3,7-3,55 (	m, 2H	), 3,4-2,7	(m, 4H), 2,32
(S,	3H), 1	,36 (s, 9H) .

Meziprodukt 62

4-[2-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-3,6-dihydro-2H-pyridin-lkarbonyl]-3-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-lkarboxylová kyselina, terč.-butylester (enantiomer A)

Benzyliden bis(tricyklohexylfosfin)aichlorruthenium (34 mg) bylo přidáno do roztoku meziproduktu 61 (540 mg) v bezvodém

DCM (20 ml) pod dusíkovou atmosférou. Roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 4 hodin, potom byl zředěn nasyceným roztokem chloridu amonného a extrahován AcOEt. Organická vrstva byla sušena, koncentrována ve vakuu a residuum bylo čištěno mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 755) pro získání sloučeniny z názvu (0,35 g) ve formě hnědého oleje.

NMR (DMSO): δ (ppm) 7,87 (s, IH) , 7,74 (s, 2H) , 7,29 (dd, IH), 6,93 (dd, IH) , 6,81 (dt, IH) , 5,8-5,6 (m, 2H) , 5,2-4,9 (m, 4H) , 4,7 (t, IH), 4,46 (bs, IH), 4,0-2,73 (m, 10H), 2,37 (s, 3H), 1,38 (s, 9H).

Meziprodukt 63

1-(terč.-butoxykarbonyl)-3-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin

Di-terc.-butyldikarbonát (271 mg) byl přidán do roztoku meziproduktu 7 (301 mg) a TEA (315 μΐ) v DCM (10 ml), předem ochlazeného na teplotu 0°C pod dusíkovou atmosférou. Roztok byl míchán za teploty 0°C po dobu 40 minut, potom byl koncentrován ve vakuu. Residuum bylo rozděleno mezi vodu a AcOEt. Organická vrstva byla promývána solným roztokem, sušena a koncentrována ve vakuu. Residuum bylo čištěno mžikovou chromatografii (CH/AcOEt 6:4) pro získání sloučeniny z názvu (80 mg) ve formě bezbarvé gumy.

NMR (d_s-DMSO): δ (ppm) 7,52 (m, IH), 7,07-6,98 (m, 2H), 3,943,74 (m, 3H), 3,0-2,5 (m, 4H), 2,33 (s, 3H) , 1,4 (s, 9H) .

Meziprodukt 64

4-{[1-(3, 5-bis-trifluormethyl-fenyl)-but-3-enyl]-karbamoyl}3- (4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, terč.-butylester (64a, diastereoisomer A)

4- [1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-but-3-enylkarbamoyl] 1-3(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, terč.-butylester (64b, diastereoisomer B)

TEA (700 μΐ) a difenylfosforylazid (812 μΐ) byly přidány do roztoku meziproduktu 59 (400 mg) v bezvodém toluene (20 ml), předem ochlazeného na teplotu 0°C pod dusíkovou atmosférou. Roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 3 hodin, potom bylo přidáno 400 mg a směs byla zahřívána na teplotu 100°C po dobu 1 hodiny. Směs byla ponechána ochladit se na teplotu okolí a byla rozdělena mezi vodu a AcOEt. Organická vrstva byla sušena, koncentrována ve vakuu a residuum bylo čištěno mžikovou chromatografii (CH/AcOEt 8:2) pro získání sloučeniny

z názvu 64a (340 mg	) a sloučeniny z názvu	64 :	b (250	mg )	•
Meziprodukt 64a NMR	(DMSO): δ (ppm) 7,94	(s,	2H) ,	7,84	(s,
1H), 7,14 (t, 1H),	6,94 (dd, 1H), 6,84	(dt,	1H) ,	6, 66	(d,
1H), 5,62 (m, 1H) ,	5,18 (t, 1H), 5,0-4,9	(m,	2H) ,	4,84	(m,
1H) , 3,82 (dt, 1H),	3,75 (m, 1H), 3,65 (bd,	1H) ,	3,43	(bt,
1H), 3,52 (dd, 1H),	3,17 (m, 1H), 2,45 (t,	2H)	, 2,24	(s,	3H) ,
1,29 (m, 1H).
Meziprodukt 64b NMR	(DMSO): δ (ppm) 7,84	(s,	2H) ,	7,81	(s,
1H), 7,14 (t, 1H),	6,97 (dd, 1H), 6,86 (	dt,	1H) ,	6,53	(bd,

1H) ,	5, 66	(m,	1H) ,	5,15	(t, 1H), 5,	05-4,9	(m,	3H) ,	3,89	(dt,
1H) ,	3, 75-	-3, 65	(b,	1H) ,	3,63 (bd,	1H), 3,	52	(dd,	1H) ,	3,43
(dt,	1H) ,	3,2	(m,	1H) ,	2,5 (t, 2H	), 2,3	(s,	3H) ,	1,28	(m,

1H) .

Meziprodukt 65

4-{ [1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-but-3-enyl]-methylkarbamoyl}-3-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, terč.-butylester (diastereoisomer A)

Terč.-butoxid sodný (28 mg) byl přidán do roztoku meziproduktu 64a (70 mg) v bezvodém THF (10 ml) . Roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 30 minut, potom byl přidán methyljodid (37 μΐ) . Reakce byl pomalá, proto byly přidány další množství terč.-butoxidu sodného (28 mg) a methyljodidu (37 μΐ) (2x) a míchání pokračovalo po dobu 18 hodin. Směs byla rozdělena mezi vodu a AcOEt. Organická vrstva byla sušena, koncentrována ve vakuu a residuum bylo čištěno mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 8:2) pro získání sloučeniny z názvu ve formě bezbarvého oleje (44 mg).

NMR (DMSO): δ (ppm) 7,91 (bs, 1H) , 7,68 (bs, 2H) , 7,22 (dd, 1H), 6,94 (dd, 1H) , 6,78 (dt, 1H) , 5,72 (m, 1H) , 5,34 (dd, 1H), 5,2-5,06 (2m, 2H), 4,41 (dd, 1H), 3,69 (m, 1H), 3,3-2,75 (m, 9H), 2,32 (s, 3H), 1,4 (s, 9H).

Meziprodukt 66

4-{Methyl-[1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-but-3-enyl]karbamoyl}-3-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-1-karboxylová kyselina, terč.-butylester (diastereoisomer B)

Terč.-butoxid sodný (28 mg) byl přidán do roztoku meziproduktu 64b (70 mg) v bezvodém THF (10 ml) . Roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 30 minut, potom byl přidán methyljodid (37 μΐ) . Reakce byl pomalá, proto byly přidány další množství terč.-butoxidu sodného (28 mg) a methyljodidu (37 μΐ) (2x) a míchání pokračovalo po dobu 18 hodin. Směs byla rozdělena mezi vodu a AcOEt. Organická vrstva byla sušena, koncentrována ve vakuu a residuum bylo čištěno mžikovou chromatografii (CH/AcOEt 8:2) pro získání sloučeniny z názvu ve formě bezbarvého oleje (44 mg) .

NMR	(DMSO): δ	(ppm) 7,91	(bs,	1H) , 7	,81	(bs,	2H) , 7,25 (m,
1H) ,	6,94 (m,	1H), 6,84 (	m, 1H)	, 5,62	(m,	1H) ,	, 5,14-4,94 (m,
2H) ,	5,11 (t,	1H), 4,46 (	m, 1H)	, 3,7	(dd,	2H) ,	, 3,65-3,32 (m,
2H) ,	3,3 (m,	1H) , 3,0 (m	, 1H) ,	2,76	(m,	2H) ,	2,76 (s, 3H),
2,31	(s, 3H),	1,39 (s, 9H:	I .

Meziprodukt 67

4-{2-propenyl-[1- (3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-but-3-enyl]karbamoyl}-3-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-1-karboxylová kyselina, terč.-butylester (diastereoisomer A)

Terč.-butoxid sodný (113 mg) byl přidán do roztoku meziproduktu 64 a (220 mg) v bezvodém THF (15 ml). Roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 10 minut, potom byl přidán 298 propenyljodid (186 μΐ) a míchání pokračovalo po dobu 3 hodin. Směs byla rozdělena mezi vodu a AcOEt. Organická vrstva byla sušena a koncentrována ve vakuu pro získání sloučeniny z

názvu ve formě bezbarvého oleje	(180 mg).
NMR	(DMSO): δ (ppm) 7,94 (s, 1H) , 7,78 (	s, 2H),	7,27	(dd,
1H) ,	6,97 (dd, 1H) , 6,84 (dt,	1H), 5,62	(m, 1H),	5,45	(m,
1H) ,	5,17 (t, 1H), 5,08 (d, 1H),	5,04 (d,	1H), 4,99	(d,	1H) ,
4,93	(d, 1H), 4,38 (m, 1H) , 3,95	(m, 1H), 3	!,85 (dd,	1H) ,	3, 61
(m,	2H) , 3,34 (m, 2H) , 3,08 (m,	2H) , 2,66	(m, 2H),	2,31	(s,
3H) ,	1,35 (s, 9H) .

Meziprodukt 68

4-[2-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-3,6-dihydro-2H-pyridin-lkarbonyl]-3-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, terč.-butylester (diastereoisomer A)

Benzyliden bis(tricyklohexylfosfin)dichlorruthenium (5% v mol 7,7 mg) byl přidán do roztoku meziproduktu 67 (120 mg) v bezvodém DCM (5 ml) pod dusíkovou atmosférou. Roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 4 hodin, potom byl zředěn nasyceným roztokem chloridu amonného a extrahován AcOEt. Organická vrstva byla sušena, koncentrována ve vakuu a residuum bylo čištěno mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 7:3) pro získání sloučeniny z názvu (85 g) ve formě hnědého oleje. NMR (DMSO): δ (ppm) 7,9 (s, 1H), 7,69 (s, 2H), 7,26 (dd, 1H), 6,95 (dd, 1H) , 6,82 (dt, 1H) , 5,89 (m, 1H) , 5,68 (bd, 1H) ,

5,28 (d, 1H), 4,49 (dd, 4H), 4,2 (d, 1H), 3,69 (dd, 1H), 3,64 (m, 1H), 3,32 (m, 2H), 3,31 (m, 1H) , 3,1 (m, 1H) , 2,7 (bd,

1H), 2,53 (m, 1H), 2,3 (s, 3H), 1,37 (s, 9H).

Meziprodukt 69

2-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-2-methyl-propionová kyselina, methylester (Trimethylsilyl) diazomethan (2M v hexanu - 3,68 ml) byl po kapkách přidán do roztoku (3,5-bis-trifluormethyl-fenyl) octové kyseliny (500 mg) a bezvodého methanolu (82 μΐ) v bezvodém toluenu (8 ml) za teploty 0°C a pod dusíkovou atmosférou. Reakční směs byla míchána za teploty 0°C po dobu 5 minut, potom rozpouštědlo bylo odpařeno ve vakuu pro získání methylesteru (3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-octové kyseliny, bledě žlutého oleje (440 mg). Tento materiál byl rozpuštěn v bezvodém THF (4,5 ml) za teploty 0°C a pod dusíkovou atmosférou a po kapkách byl přidán bis (trimethylsilyl) amid sodný (1,0 M v THF - 4 ml). Po uplynutí deseti minut byl přidán methyljodid (958 μΐ) a reakční směs byla míchána za teploty okolí po dobu 2 hodin. Reakce byla zastavena 2N roztokem kyseliny chlorovodíkové (7 ml) a produkt byl extrahován diethyletherem (2 x 10 ml). Zkombinované organické extrakty byly sušeny a koncentrovány ve vakuu na residuum, který bylo čištěno mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 95:5) pro získání sloučeniny z názvu (184 mg) ve formě bezbarvého oleje.

NMR (dg-DMSO) : δ (ppm) 8,05 (s, 1H) , 7,9 (s, 2H) , 3,6 (s,

3H), 1,6 (s, 6H).

100

Meziprodukt 70

2-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-2-methyl-propionová kyselina

Roztok methylesteru 2-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-2methyl-propionové kyseliny (meziprodukt 69 - 184 mg) a hydroxidu draselného (131 mg) v MeOH (2,5 ml) byl zahřívaný na teplotu zpětného toku po dobu 1 hodiny, potom byl ponechán ochladit se na teplotu okolí a okyselen na pH=3 10% roztokem kyseliny chlorovodíkové a extrahován AcOEt (2 x 10 ml) . Zkombinované organické extrakty byly sušeny a koncentrovány ve vakuu na residuum, který bylo čištěno mžikovou chromatografií (CH/AcOEt od 8:2 do 6:4) pro získání sloučeniny z názvu (141 mg) ve formě bílé pevné látky.

NMR (dg-DMSO): δ (ppm) 8,05 (s, 1H) , 7,9 (s, 2H) , 1,6 (s,

6H) .

Meziprodukt 71

1-(Benzyloxykarbonyl)-3-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)piperazin

Bor v THF (23,16 ml) byl přidán do roztoku meziproduktu 39 (964 mg) v bezvodém THF (3 ml) předem ochlazeného na teplotu 0°C pod dusíkovou atmosférou. Směs byla zahřívána na teplotu 80°C po dobu 4 hodin. Byl přidán MeOH (4 ml) a směs byla koncentrována ve vakuu. Residuum bylo zpracováváno HC1 v Et₂O (38 ml) a roztok byl zahříván na teplotu 45°C po dobu 1 hodiny. Směs byla filtrována pro získání dihydrochloridu 2(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazinu (944 mg).

101

Roztok benzylchlorkarbonátu (376 μΐ) v bezvodém DCM (20 ml) byl po kapkách přidán do roztoku dihydrochloridu 2—(S)—(4— fluor-2-methyl-fenyl) -piperazinu (700 mg) a TEA (1,1 ml) v DCM (30 ml) předem ochlazeném na teplotu 0°C pod dusíkovou atmosférou. Směs byla míchána za teploty okolí po dobu 2 hodin, potom promývána solným roztokem. Organická vrstva byla sušena, koncentrována ve vakuu a residuum bylo čištěno mžikovou chromatografií (od CH/AcOEt 1:1 do AcOEt 100%) pro získání sloučeniny z názvu (750 mg) ve formě bezbarvého oleje.

NMR	(d₆~DMSO): δ (ppm) 7,51 (dd,	1H) ,	7,36·	-7,28	(m,	5H), 6,95
(m,	2H), 5,1 (dd, 2H), 3,92 (m,	2H) ,	3,74	(dd,	1H) ,	2,95 (dd,
1H) ,	2,91 (dt, 1H) , 2,72 (dt,	1H) ,	2,62	(t,	1H) ,	2,29 (s,

3H) .

Meziprodukt 72

4-[1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-1-methyl-ethylkarbamoyl] 3-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, benzylester

TEA (145 μΐ) a difenylfosforylazid (169 μΐ) byly přidány do roztoku meziproduktu 70 (96 mg) v bezvodém toluenu (1,5 ml) předem ochlazeném na teplotu 0°C pod dusíkovou atmosférou. Roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 3 hodin, byl přidán meziprodukt 71 (96 mg) a směs byla zahřívána na teplotu 100°C po dobu 1 hodiny. Směs byla ponechána ochladit se na teplotu okolí a byla rozdělena mezi vodu a AcOEt.

102

Organická vrstva byla sušena, koncentrována ve vakuu a residuum bylo čištěno mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 7:3) pro získání sloučeniny z názvu (140 mg) ve formě bledě žluté gumy.

NMR	(d₆-DMSO) :	δ (ppm)	7,8 (s,	2H) ,	7,78 (s,	1H) ,	7,38-	-7,22
(m,	5H), 7,21	(dd, 1H)	, 6,95	(dd,	1H), 6,84	(dt,	1H) ,	6,52
(s,	1H), 5,18	(t, 1H),	5,05 (s,	2H),	3,89 (dt,	1H) ,	3,79	(dd,
1H) ,	, 3,72 (dt,	, 1H), 3,	57 (dd,	1H) ,	3,44 (dt,	1H) ,	3,28	(bt,
1H) ,	, 2,23 (s,	3H), 1,55	(s, 3H)	, 1,5	(s, 3H).

MS: m/z = 626 [MH]⁺

Meziprodukt 73

4-{[1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-1-methyl-ethyl]-methylkarbamoyl}-3-(S)-4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-1karboxylová kyselina, benzylester

Terč.-butoxid sodný (53 mg) byl přidán do roztoku meziproduktu 72 (140 mg) v bezvodém THF (1,5 ml). Roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 30 minut, potom byl přidán methyljodid (69 μΐ) a míchání pokračovalo po dobu 18 hodin. Další terč.-butoxid sodný (42 mg) a methyljodid (140 μΐ) byly přidány a směs byla zahřívána na teplotu 70°C po dobu 3 hodin a potom ponechána za míchání za teploty okolí po dobu 18 hodin. Směs byla rozdělena mezi vodu a AcOEt (2 x 10 ml) . Organická vrstva byla sušena, koncentrována ve vakuu a residuum bylo čištěno mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 9:1) pro získání sloučeniny z názvu ve formě bezbarvé gumy (58 mg) .

103

NMR	(d₆-DMSO):	δ (ppm)	7,81	(s,	2H) ,	7,78	(s,	1H), 7,32-7,25
(m,	6H), 6,9	(dd, 1H),	6, 85	(td,	1H) ,	5,08	(s,	2H), 4,64 (dd,
1H) ,	3,58 (m,	3H), 3,	43 (m,	3H)	, 3,0	(s,	3H) ,	2,18 (s, 3H),
1,57	(s, 3H),	1,51 (s,	3H) .
MS:	m/z = 640	[MH]⁺.

Meziprodukt 74

2-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-3-methyl-máselná kyselina, methylester

Bis (trimethylsilyl) amid sodný (1,0 M v THF - 177 μΐ) byl po kapkách přidán do roztoku methylesteru (3,5-bistrifluormethyl-fenyl) -octové kyseliny (389 mg) v bezvodém THF (2 ml) za teploty 0°C a pod dusíkovou atmosférou. Po uplynutí deseti minut byl přidán isopropyljodid (143 μΐ) a reakční směs byla míchána za teploty 0°C po dobu 30 minut. Byl přidán další isopropyljodid (143 μΐ) a roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 1 hodiny. Reakce byla zastavena 2N roztokem kyseliny chlorovodíkové (2 ml) a produkt byl extrahován Et₂O (2x) . Zkombinované organické extrakty byly sušeny a koncentrovány ve vakuu na residuum, které bylo čištěno mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 95:5) pro získání sloučeniny z názvu (184 mg) ve formě bezbarvého oleje.

NMR (d₆-DMSO) : δ (ppm) 8,05 (bs, 3H) , 3,76 (d, 1H) , 3,67 (s, 3H), 2,33 (m, 1H), 1,01 (d, 3H), 0,69 (d, 3H).

MS: m/z = 328 [M]⁺.

Meziprodukt 75

104

2- (3,5-bis-trifluormethyl-fenyl) -3-methyl-máselná kyselina

Roztok meziproduktu 74 (280 mg) a hydroxidu draselného (191 mg) v MeOH (4 ml) byl zahřívaný na teplotu zpětného toku po dobu 1 hodiny, potom byl ponechán ochladit se na teplotu okolí a okyselen na pH=3 10% roztokem kyseliny chlorovodíkové a extrahován AcOEt (2 x 10 ml) . Zkombinované organické extrakty byly sušeny a koncentrovány ve vakuu pro získání sloučeniny z názvu (250 mg) ve formě bílé pevné látky.

NMR (d₆-DMSO) : δ (ppm) 8,05 (bs, 3H) , 3,76 (d, IH) , 2,32 (m,

IH), 1,01 (d, 3H), 0,65 (d, 3H).

Meziprodukt 76

4-(1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-2-methylpropylkarbamoyl]-3-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-1karboxylová kyselina, terč.-butylester

TEA (133 μΐ) a difenylfosforylazid (156 μΐ) byly přidány do roztoku meziproduktu 75 (78 mg) v bezvodém toluenu (1 ml) předem ochlazeném na teplotu 0°C pod dusíkovou atmosférou. Roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 3 hodin, potom byl přidán meziprodukt 63 (80 mg) a směs byla zahřívána na teplotu 100°C po dobu 2 hodin. Směs byla ponechána ochladit se na teplotu okolí a byla rozdělena mezi vodu a AcOEt. Organická vrstva byla sušena, koncentrována ve vakuu a residuum bylo čištěno mžikovou chromatografii (CH/THF 7:3) pro získání sloučeniny z názvu (140 mg) ve formě žluté gumy. IR (Nujol) 3400 (NH), 1699 (C=O) cm¹.

105

NMR (dg-DMSO) : δ (ppm) 7,93 (s, 1H+1H) , 7,84 (s, 2H) , 7:78 (s, 2H) , 7,13 (dd, 1H+1H), 6,95 (dd, 1H+1H), 6,83 (m, 1H+1H), 6,51 (d, 1H) , 6,41 (d, 1H) , 5,2 (t, 1H) , 5,16 (t, 1H) , 4,57 (t, 1H), 4,48 (t, 1H), 3,9-3,17 (m, 6H+6H), 2,3 (s, 3H) , 2,24 (s, 3H), 2,0-1,96 (m, 1H+1H), 1,28-1,27 (d, 9H+9H), 0,87 (d, 3H), 0,74 (d, 3H), 0,64 (d, 3H), 0,62 (d, 3H).

MS: m/z - 606 [MH]⁺.

Meziprodukt 77

4-{[1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-2-methyl-propyl]-methylkarbamoyl}-3-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, terč.-butylester (77a, diastereoisomer A)

4-{[1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-2-methyl-propyl]-methylkarbamoyl}-3-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, terč.-butylester (77b, diastereoisomer B)

Terč.-butoxid sodný (55 mg) byl přidán do roztoku meziproduktu 76 (140 mg) v bezvodém THF (1,5 ml). Roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 30 minut, potom byl přidán methyljodid (72 μΐ) a míchání pokračovalo po dobu 18 hodin. Byly přidány další terč.-butoxid sodný (55 mg) a methyljodid (72 μΐ) a směs byla míchána za teploty okolí po dobu 3 hodin. Směs byla rozdělena mezi vodu a AcOEt (2x) . Organická vrstva byla sušena, koncentrována ve vakuu a residuum bylo čištěno mžikovou chromatografií (CH/AcOEt 9:1) pro získání sloučeniny z názvu 77a (35 mg) a sloučeniny z názvu 77 b (37 mg) ve formě bezbarvé gumy.

106

Meziprodukt 77 a: T.l.c.: CH/AcOEt 8:2 Rf=0,62

NMR (d₆-DMSO) : δ (ppm) 8,0 (s, 1H) , 7,91 (bs, 2H) , 7,21 (m,

1H) , 6,95-6,83 (m, 2H) , 4,65 (bm, 1H) , 4,25 (bm, 1H) , 3,68 (m, 2H) , 3,25-2,81 (m + m + s, 7H) , 2,32 (s, 3H),1,38 (s, 9H), 0,68 (d, 3H) , 0,64 (d, 3H) .

MS: m/z = 620 [MH]⁺.

Meziprodukt 77b: T.l.c.: CH/AcOEt 8:2 Rf=0,62

T.l.c.: CH/AcOEt 8:2 Rf=0,73

NMR	(d₆-DMSO):	δ	(ppm)	7,96	(bs,	IH), 7,79	(bs,	2H) ,	6,99 (m,
1H) ,	6,93 (m,	IH)	¹ , 6,	6 (m,	IH) ,	4,87 (d,	IH) ,	4,27	(m, IH),
3,7-	3,2 (bm +	bm	+ s	+ s,	10H),	1,39 (s,	9H) ,	0, 88	(d, 3H),

0,73 (d, 3H).

MS: m/z = 620 [MH]⁺.

Meziprodukt 78 (3,5-bis-trifluormethyl-benzyliden)-methylamin

Roztok 3,5-bis(trifluormethyl)-benzaldehydu (412 μΐ) v bezvodém THF (5 ml) byl po kapkách přidán do roztoku methylaminu (2M v MeOH - 3,12 ml) v bezvodém THF (5 ml) za teploty 23°C pod dusíkovou .atmosférou. Reakční směs byla míchána přes noc, potom rozpouštědlo bylo odpařeno ve vakuu pro získání sloučeniny z názvu (385 m4) ve formě bezbarvého oleje.

NMR (CDC1₃) : δ (ppm) 8,4 (s, 1H) , 8,2 (s, 2H) , 7,9 (s, 1H) ,

3,6 (s, 3H).

Meziprodukt 79

107 [(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-cyklopropyl-methyl]methylamin

Roztok cyklopropylbromidu (518μ1) v bezvodém diethyletheru (15 ml) byl po kapkách přidán do hořčíkových pilin (186 mg) předem zahřívaných na teplotu 40°C pod dusíkovou atmosférou. Reakční směs byla zahříván na teplotu zpětného toku po dobu 2 hodin, potom ponechána ochladit se na teplotu okolí a usazováním zbavena přebytku hořčíku. Takto získaný cyklopropylmagnesiumbromid byl přidán do suspenze jodidu měďného (614 mg) v bezvodém THF (5 ml) předem ochlazeném na teplotu -50 °C pod dusíkovou atmosférou. Reakční směs byla míchána za teploty -50°C po dobu 20 minut, potom teplota byla snížena na -78°C a byl přidán etherát fluoridu boritého (408 μΐ). Po uplynutí 5 minut byl po kapkách přidán meziprodukt 78 ( 330 mg) a reakční směs byla míchána za teploty -50°C po dobu 3 hodin. Reakce byla zastavena směsí čpavku (30% ve vodě - 10 ml) a nasyceného roztoku chloridu amonného (10 ml), extrahována petroleumetheru (2 x 20 ml) a koncentrována ve vakuu. Potom byl přidán IN roztok kyseliny chlorovodíkové až na pH=3, vodná fáze byla promývána petroleumetherem (2 x 20 ml), potom alkalizována pevným hydroxidem draselným až na pH=9. Po extrakci pomocí AcOEt (2 x 20 ml) byla organická vrstva sušena a koncentrována ve vakuu pro získání sloučeniny z názvu (126 mg) ve formě bledě žlutého oleje.

NMR (de-DMSO) : δ (ppm) 8,03 (s, 2H) , 7,94 (s, 1H) , 2,96 (d,lH), 2,4 (bs, 1H) , 2,17 (s, 3H) , 0,92 (m, 1H) , 0,54 (m,

1H), 0,38 (m, 1H), 0,29 (t, 2H).

108

MS (ES/+): m/z=298 [MH]⁺

Meziprodukt 80

4-{[(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-cyklopropyl-methyl]methy1-karbamoyl}-3-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-lkarboxylová kyselina, terč.-butylester (diastereoisomer A)

Roztok trifosgenu (45 mg) v bezvodém DCM (0,5 ml) byl po kapkách přidán do roztoku meziproduktu 63 (100 mg) a TEA (95 ml) v bezvodém DCM (1,5 ml), předem ochlazeném na teplotu 0°C pod dusíkovou atmosférou. Reakční směs byla míchána za teploty 0°C po dobu 2 hodin, potom byl přidán roztok DIPEA (237 μΐ) v bezvodém acetonitrilu (2 ml) . Reakční směs byla zahřívána na teplotu 70°C pro odpaření DCM, potom byl přidán meziprodukt 79 (110 mg) a reakční směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku přes noc.

Směs byla zředěna AcOEt (10 ml), promývána 2N roztokem kyseliny chlorovodíkové (10 ml) a solným roztokem (10 ml), sušena a koncentrována ve vakuu na residuum, které bylo čištěno mžikovou chromatografií (CH/AcOEt od 8:2 do 7:3) a tím byla získána sloučenina z názvu (10 mg)

NMR	(d_s-DMSO) :	δ (ppm)	7,77	(s,	1H) ,	7,73	(s,	2H) ,	7,24 (m,
1H) ,	6,85 (m,	2H), 4,56	(d,	1H) ,	4,46	(bm,	1H) ,	3, 94	(m, 2H),
3,23	(m, 2H),	3,05 (m,	2H) ,	2,96	(s,	3H) ,	2,4	(s,	3H), 1,47
(s,	9H), 1,25	(m, 1H),	0,84	(m,	±H) ,	0, 43	(m,	2H) ,	0,18 (m,

1H) .

109

Meziprodukt 81 (S)-3-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin, dihydrochlorid

Do roztoku meziproduktu 39 (60,35 g) v bezvodém THF (180 ml) byl po kapkách přidán za teploty 0-3°C a pod atmosférou N₂, BH3 . THF 1 M/THF (1220 ml) . Roztok byl zahříván na teplotu zpětného toku po dobu 4 hodina potom ochlazen na teplotu 03°C a byl přidán methanol (240 ml). Reakční směs byla zahřívána na teplotu okolí a potom byla koncentrována do sucha. Residuum bylo znovu rozpuštěno v methanolu (603,5 ml), byl přidán přebytek HCl IN v Et₂O (1207 ml) a směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 2 hodin a potom chlazena na teplotu 3°C po dobu 4 hodin. Suspenze byla filtrována pro získání bílé pevné látky, která byla promývána Et₂O (60, 35 ml) a sušena a tím byla získána sloučenina z názvu (72,02 g) ¹H-NMR (DMSO): δ (ppm) 11,0-9,5 (b, 4H), 7,99-7,19 (dd-m,

3H), 4,96 (dd, IH), 3,65-3,15 (m, 6H) , 2,42 (s, 3H) .

Meziprodukt 82 (R)-3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-ethyl]-methyl-amin

Do roztoku 3,5-bis-trifluormethylacetofenonu (300 g) v MeOH (1120 ml) byl po kapkách přidán v průběhu 15 minut roztok methylaminu 8M v EtOH (372 ml) za teploty 25°C a pod atmosférou N₂. Směs byla míchána po dobu 24 hodin za teploty 25°C pod atmosférou N₂. Potom byl po částech přidán NaBH₄během 30 minut (27,9 g) za teploty 0°C. Druhé množství NaBH₄

110 bylo přidáno během 30 minut (17,7 g) a směs byla míchána po dobu dalších 1,5 hodin.

Směs byla koncentrována odpařením 600 ml rozpouštědla za vakua a potom byla pomalu vlita do směsi AcOEt (1500 ml)/ nasycený NH₄C1 (750 ml) a voda (750 ml) . Vodná fáze byl zpětně extrahována AcOEt (1500 ml). Zkombinované organické fáze byly promývána směsí voda/solný roztok (150 ml/150 ml) a potom odpařeny pro získání 3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)ethyl]-methyl-aminu (305 g) ve formě žlutého oleje.

Do roztoku 3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-ethyl]-methyl-aminu (245,6 g) v EtOAc (2380 ml) byla po částech přidána L(+)jablečná kyselina (118 g). Suspenze byla míchána po dobu 2 hodin za teploty 25°C a potom 3 hodiny za teploty 0°C. Suspenze byla filtrována a koláč byl promýván EtOAc (240 ml). Pevná látka byla sušena za vakua pro získání surového L (+) malátu 3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-ethyl]-methyl-aminu (135,3 g) ve formě bílé pevné látky, která byla suspendována v ethylacetátu (1760 ml) a potom zahřívána na teplotu zpětného toku do úplného rozpuštění a potom ochlazena na teplotu 25°C. Suspenze byla filtrována, promývána ethylacetátem (135 ml) a potom sušena pro získání L(+)-malátu 3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-ethyl]-methyl-aminu (128,5 g) . Pevná látka byla míchána ve směsi NaOH 10% obj. (720 .ml) a ethylacetátu (650 ml). Organické fáze byly promývány vodou (720 ml), potom byly koncentrovány a tím byla získána sloučenina z názvu (82,2 g).

111 ^-NMR (DMSO): δ (ppm) 7,99 (s, 2H) , 7,85 (s, 1H) , 3,78 (q,

1H) , 2,34 (s, 1H), 2,09 (s, 3H), 1,23 (d, 3H) .

Příklad 1

2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5-bistrifluormethyl-benzyl)-methyl-amid, hydrochlorid

Roztok meziproduktu 13 (0,05 g) v EtOH (10 ml) byl hydrogenován za atmosférického tlaku po dobu 3 hodin v přítomnosti 10% Pd/C (10 mg) jako katalyzátoru. Katalyzátor byl odfiltrován a rozpouštědlo bylo odpařeno. Surové residuum bylo rozpuštěno v diethyletheru a potom byl přidán 1 M roztok HC1 v Et₂O (0,1 ml). Vytvořený precipitát byl filtrován a promýván diethyletherem pro získání sloučeniny z názvu (0,02 g) ve formě bílého prášku.

Teplota tání > 220°C.

NMR	(DMSO): δ	(ppm)	9,33 (bm, 1H	), 9,18	(bm,	1H) ,	7,96	(s,
1H) ,	7,59 (s,	2H), 7	,33 (dd, 1H),	6,99 (d,	1H) ,	6, 85	(t,	1H) ,
4, 63	(d, 1H),	4,53 l	[d, 1H), 4,37	(d, 1H),	3,52	(d,	1H) ,	3,4-
s o o, í.	(m, 2H),	3,25	(m, 1H), 3,04	(t, 1H)	, 3,0	-2,8	(m,	1H) ,
2, 93	(s, 3H),	2,38 (	s, 3H) .

IR (Nujol) (cm¹) 3200, 1659. MS (m/z) 478 [M-C1]⁺

Příklad 2

2-(3-isopropyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5— bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-amid, hydrochlorid

112

Do roztoku meziproduktu 14 (0,353 g) v bezvodém EtOH (5,7 ml) bylo přidáno za teploty okolí a pod atmosférou N₂ Pd/C 10% (175 mg, 50% hmot.). Černá suspenze byla vložena pod atmosféru H₂ a byla míchána po dobu 3 hodin. Katalyzátor byl potom filtrován na Celitu a celitový koláč byl promýván EtOH. Potom byl přidán HC1 l,0M v Et₂O (1,13 ml). Rozpouštědlo bylo odpařeno a získaný olej byl rozetřen s Et₂O. Pevná látka byla filtrována, promývána Et₂O a sušena za vakua. Sloučenina z názvu byl získaný ve formě šedé pevné látky (104 mg).

Teplota tání 77-80°C

NMR (CDC1₃) : δ (ppm) 8,95 (bs, 2H) , 7,97 (s, 1H) , 7,75 (s, 1H), 7,22-7,08 (m, 4H) , 4,58-4,41 (2d, 2H) , 4,50 (dd, 1H) ,

3,44 (m, 1H) , 3,4-3,1 (m, 5H) , 2,84 (s, 3H) , 2,80 (m, 1H) , 1,12 (d, 3H), 1,07 (d, 3H).

IR (Nujol) (cm^-1) 3437, 1653.

MS (m/z) 488 [M-C1]⁺

Příklad 3

2-(2-isopropyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-amid, hydrochlorid.

Do roztoku meziproduktu 15 (0,108 g) v bezvodém EtOH (2,0 ml) bylo přidáno za teploty okolí a pod atmosférou N₂ Pd/C 10% (20 mg, 20% hmot.). Černá suspenze byla vložena pod atmosféru H₂ a byla míchána po dobu 3 hodin. Katalyzátor byl potom filtrován na Celitu a celitový koláč byl promýván EtOH. Potom byl přidán HC1 1,0 M v Et₂O (350 μΐ) . Rozpouštědlo bylo odpařeno a získaný olej byl rozetřen s Et₂O. Pevná látka byla

113 filtrována, promývána Et₂O a sušena za vakua. Sloučenina z názvu byla získána ve formě hnědé pevné látky (29 mg).

Teplota tání 108-110°C.

NMR	(CDC1	₃) : δ (ppm)	9,15	(bd,	IH) ,	8, 92	(bd,	IH) ,	7,97	(s,
IH) ,	7,66	(s, 2H), 7,	30 (m, IH)	, 7,27	(m,	IH) ,	7,19	(dt,	IH) ,
7,03	(dt,	IH) , 4,69	(dd,	IH) ,	4,55	(2d,	2H) ,	3,53	(m,	IH) ,
3,39	(m,	3H), 3,19	(bd,	IH) ,	3,04	(dt,	IH) ,	2,92	(m,	4H) ,
1, 24	(d,	3H), 1,20 (d	, 3H)

IR (Nujol) (cm^-1) 3441, 1662. MS (m/z) 489 [M-C1]⁺.

Příklad 4

2-(4-fluor-3-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3, 5-bis-trifluormethyl-benzyl)-methylamid, hydrochlorid.

Do roztoku meziproduktu 16 (0,226 g) v bezvodém EtOH (3,7 ml) bylo přidáno za teploty okolí a pod atmosférou N₂ Pd/C 10% (23 mg, 10% hmot.). Černá suspenze byla vložena pod atmosféru H₂ a míchána po dobu 3 hodin. Katalyzátor byl potom filtrován na Celitu a celitový koláč byl promýván EtOH. Potom byl přidán HCl 1,0 M v Et₂O (740 μί). Rozpouštědlo bylo odpařeno a získaný olej byl zpracováván Et₂O. Získaná pevná látka byla filtrována, promývána Et₂O a sušena za vakua pro získání sloučeniny z názvu ve formě bílé pevné látky (112 mg).

Teplota tání 70-72°C

NMR (CDC1₃) : δ (ppm) 9,08 (m, 2H) , 7,97 (s, IH) , 7,67 (s, 2H), 7,19 (m, IH), 7,14 (m, IH), 7,01 (t, IH), 4,59 (d, IH),

114

4,43 (m, 1H)', 4,40 (d, 1H) , 3,1-3,5 (m, 6H) , 2,92 (s, 3H) ,

2,14 (s, 3H).

IR (Nujol) (cm'¹) 3406, 1653.

MS (m/z) 478 [M-C1]⁺.

Příklad 5

2-(2,4-difluor-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-amid, hydrochlorid

Do roztoku meziproduktu 17 (0,134 g) v bezvodém EtOH (2,0 ml) bylo přidáno za teploty okolí a pod atmosférou N₂ Pd/C 10% (27 mg, 20% hmot.). Černá suspenze byla vložena pod atmosféru H₂ a byla míchána po dobu 3 hodin. Katalyzátor byl potom filtrován na Celitu a celitový koláč byl promýván EtOH. Potom byl přidán HC1 1,0 M v Et₂C (436 μΐ) . Rozpouštědlo bylo odpařeno a získaný olej byl rozetřen s Et₂O. Pevná látka byla filtrována, promývána Et₂O a sušena za vakua. Sloučenina z názvu byla získána ve formě žluté pevné látky (112 mg). Teplota tání 220-230°C

NMR (CDC1₃) : δ (ppm) 9,08-9,3 (m, 2H) , 7,97 (s, 1H) , 7,62 (s, 2H), 7,44 (m, 1H), 7,18 (m, 1H), 6,95 (m, 1H), 4,65 (m, 1H), 4,3-4,65 (dd, 2H) , 3,2-3,6 '(m, 4H) , 3,07 (m, 2H) , 2,92 (s,

3H) .

IR (Nujol) (cm'¹) 3400, 1656.

MS (m/z) 482 [M-C1]⁺.

Příklad 6

2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-amid, hydrochlorid

Roztok meziproduktu 18 (0,086 g) v EtOH (10 ml) byl hydrogenován za atmosférického tlaku po dobu 2 hodin, v přítomnosti 70% Pd/C (20 mg) jako katalyzátoru. Katalyzátor byl odfiltrován a rozpouštědlo bylo odpařeno. Surové residuum bylo rozpuštěno v Et₂O a potom byl přidán 1 M roztok HCl v Et₂O (0,1 ml). Rozpouštědlo bylo odpařeno pro získání sloučeniny z názvu (0,05 g) ve formě bílé pevné látky.

NMR	(DMSO): δ	(ppm)	9,	06 (m,	1H) ,	8,88	(m, 1H),	7,91	(s, 1H),
7,77	(s, 2H),	7,42	(t,	1H) ,	7,22	(dd,	1H), 7,03	(m,	1H), 6,94
(t,	1H), 5,22	(t,	1H)	, 4,34	(m,	2H) ,	3,98 (m,	1H) ,	3, 64 (m,
1H) ,	3,4-3,2 (	)m, 2H	) ,	3,22 (	m, 2H	), 2,	32 (s, 3H)

IR (Nujol) (cm¹) 3360, 1645. MS (m/z) 464 [M-C1]⁺.

Příklad 7 (+) 2-(R)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-amid, hydrochlorid

Roztok meziproduktu 20a (0,120 g) v EtOH (5 ml) byl hydrogenován za atmosférického tlaku po dobu 4 hodin v přítomnosti 10% Pd/C (25 mg) . Potom byl katalyzátor odfiltrován a rozpouštědlo bylo odpařeno. Surový produkt byl rozpuštěn v Et₂O a potom byl přidán roztok 1 M HCl v Et₂O (0,3 ml). Potom byl precipitát filtrován a promýván Et₂O pro

116 získání sloučeniny z názvu (0:057 g) ve formě bílé pevné látky.

Teplota tání>220°C.

NMR	(DMSO)	: δ (ppm)	9,11	(m,	1H), 8,83 (m,	1H) ,	7,96	(S, 1H),
7,59	(s,	2H), 7,34	(dd,	1H	), 6,94 (dd,	1H) ,	6, 86	(m, 1H) ,
4,65·	-4,35	(dd, 2H),	4,49	(m,	1H), 3,54 (m,	1H) ,	3,44-	-3,01 (m,
4H) ,	2,93	(s, 3H), 2	,90 l	Im,	1H), 2,38 (s,	3H) .

MS (m/z) 479 [MH-C1]⁺ [a]^D20 = +69, 5 C = 0,27(g/100 ml) CHC1₃

Příklad 8 (-)-2-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-amid, hydrochlorid

Způsob A

Roztok meziproduktu 20b (0,110 g) v EtOH (5 ml) byl hydrogenován za atmosférického tlaku po dobu 4 hodin v přítomnosti 10% Pd/C (25 mg) . Potom byl katalyzátor odfiltrován a rozpouštědlo bylo odpařeno. Surový produkt byl rozpuštěn v Et₂O a potom byl přidán roztok 1 M HCl v Et₂O (0,3 mi) . Potom byl precipitát filtrován a promýván diethyletherem pro získání sloučeniny z názvu (0,045 g) ve formě bílé pevné látky.

Způsob B

117

Roztok meziproduktu 37a (0,24 g) v EtOH (4 ml) byl hydrogenován za atmosférického tlaku po dobu 3 hodin v přítomnosti 10% Pd/C (73 mg) jako katalyzátoru. Katalyzátor byl odfiltrován a rozpouštědlo bylo odpařeno. Surové residuum bylo rozpuštěno v Et₂O a potom byl přidán 1 M roztok HCI v Et₂O (0,58 ml). Vytvořený precipitát byl filtrován a promýván diethyletherem pro získání sloučeniny z názvu (0,04 g) ve formě bílého prášku.

Způsob C

Do meziproduktu 39 (2,37 g) byl po kapkách přidán TEA (3,15 ml) v bezvodém DCM (57 ml) za teploty 0°C. Potom byl přidán roztok trifosgenu (1,502 g) v bezvodém DCM (12 ml) pod inertní atmosférou. Teplota byla udržována na 0°C po dobu 3 hodin před přidáním DIPEA (4 ml) následovaným 3,5-bistrifluormethylbenzyl-N-methylaminem (4,62 g) v acetonitrilu. (142 ml). Reakční směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 3 hodin a potom ochlazena na teplotu okolí a zředěna DCM (25 ml) a promývána postupně IN roztokem HCI (25 ml), H₂O (25 ml) a solným roztokem (25 ml). Organická fáze byla sušena a surový produkt získaný po odpaření rozpouštědla byl čištěn mžikovou chromatografií (od AcOEt/CH 4:1 do čistého AcOEt) pro získání 2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-3-oxopiperazin-l-karboxylové kyseliny, (3,5-bis-trifluormethylbenzyl)-methyl-amidu, ve formě pěny (1,79 g).

Tato sloučenina byl redukována pomocí BH₃.THF (17,6 ml) postupujíce podle standardní procedury (4 hodiny teplota

118 zpětného toku v 10 ml THF, potom zpracování pomocí 6 ml HC1 37% a následně neutralizace pomocí 5 g pevného NaHCO₃) pro získání sloučeniny z názvu (1,16 g).

Teplota tání>220°C

NMR	(dmso;	l : δ	(ppm)	9,11	(m,	1H), 8,83 (m, 1H),	7,96	(s, 1H),
7,59	(s,	2H) ,	7,34	(dd,	1H	), 6,94 (dd, 1H),	6,86	(m, 1H),
4, 65-	-4,35	(dd,	2H) ,	4,49	(m,	1H), 3,54 (m, 1H),	3,44-	-3,01 (m,
4H) ,	2,93	(s,	3H), 2	,90	(m,	1H), 2,38 (s, 3H).

MS (m/z) 479 [MH-C1]⁺ [a]^D2o=-72, 6 C = 0,27 (g/100 ml) CHC1₃

Příklad 9

2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, (1-(R)-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)ethyl]-methyl-amid, hydrochlorid

Roztok meziproduktu 22a (0,05 g) v EtOH (5 ml) byl hydrogenován za atmosférického tlaku po dobu 1,5 hodin v přítomnosti 10% Pd/C (15 mg). Potom byl katalyzátor odfiltrován a rozpouštědlo bylo odpařeno. Surový produkt byl rozpuštěn v Et₂O a potom byl přidán roztok 1 M HC1 v Et₂O (0,5 ml) . Potom precipitát byl filtrován a promýván pomocí Et₂O pro získání sloučeniny z názvu (0,025 g) ve formě bílého prášku.

NMR (CDC1₃) : δ (ppm) 10,2 (b, 1H) , 7,78 (s, 1H) , 7,54 (s,

2H), 7,13 (dd, 1H) , 6,88 (dd, 1H) , 6,82 (m, 1H) , 5,48 (q,

1H) , 4,57 (m, 1H), 3,6-3,5 (m, 2H), 3,38 (m, 2H), 3,3-3,0 (m,

2H), 2,71 (s, 3H), 2,48 (s, 3H), 1,44 (d, 3H).

119

IR (CDC1₃) 1663.

MS (m/z) 491 [M-C1]⁺.

Příklad 10

2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, [1-(S)-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-ethyl]-methyl-amid, hydrochlorid

Roztok meziproduktu 22b (0,05 g) v EtOH (5 ml) byl hydrogenován za atmosférického tlaku po dobu 1,5 hodin v přítomnosti 10% Pd/C (15 mg) . Potom byl katalyzátor odfiltrován a rozpouštědlo bylo odpařeno. Surový produkt byl rozpuštěn v Et₂O a potom byl přidán roztok 1 M HC1 v Et₂O (0,5 ml). Potom byl precipitát filtrován a promýván Et₂O na sloučeninu z názvu (0,057 g) ve formě bílého prášku.

NMR	(CDCI3) : δ (ppm) 10,2	(b,	1H), 7,74	(s,	1H) ,	7,41 (s,
2H) ,	7,10 (m, 1H), 6,88 (m,	1H)	, 6,80 (m,	1H) ,	5,58	(q, 1H),
4,85	(m, 1H), 3,7-2,9 (m,	6H) ,	2,80 (s,	3H) ,	2,49	(s, 3H),
1,44	(d, 3H) .

IR (CDCI3) 1662.

MS (m/z) 491 [M-C1]⁺.

Příklad 11

2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-amid

Do roztoku meziproduktu 32 (813 mg) v bezvodém THF (6,6 ml), za teploty okolí a pod atmosférou N₂ byl přidán BH3.THF 1 M v

120

THF (9,9 ml). Roztok byl zahříván na teplotu zpětného toku po dobu 3 hodin. Potom byl ochlazen zpět na teplotu okolí a pomalu byl přidán IN HCl (4 ml) pro zničení komplexů boru. Reakční směs byla míchána za teploty okolí po dobu 18 hodin. THF byl odpařen a vodná fáze byla alkalizována pomocí 10% NaOH. Potom byla extrahována EtOAc (3x) . Zkombinované organické extrakty byly sušeny, pevné látky byly filtrovány a rozpouštědlo bylo odpařeno. Sloučenina z názvu byla použita v následujícím kroku (790 mg) bez jakéhokoli dalšího čištění. NMR (CDCI3) : δ (ppm) 7,77 (s, 1H) , 7,49 (s, 2H) , 7,33 (m, 1H), 6,86 (m, 1H), 6,82 (m, 1H) , 4,65-4,46 (2d (AB) , 2H) ,

4,46 (m, 1H), 3,40-2,85 (m, 6H), 2,97 (s, 3H), 2,66 (s, 3H).

IR (CDCI3, cm¹): 1653.

MS (m/z): 478 [MH]⁺.

Příklad 12

2-(4-fluor-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,4-bistrifluormethyl-benzyl)-methyl-amid, hydrochlorid.

1M roztok BH3 v THF (1,88 ml) byl přidán velmi opatrně do roztoku meziproduktu 33 (0,180 g) v bezvodém THF (8 ml) pod inertní atmosférou a reakční směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 3 hodin. Po ukončení redukce byl přidán 37% HCl (3 ml) a reakční směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku 2 hodiny. THF byl odstraněn za sníženého tlaku, byla přidána voda (3 ml) a vodný roztok byl alkalizován použitím Na₂CO3, potom byl extrahován DCM, promýván solným roztokem a sušen. Surový produkt byl čištěn mžikovou chromatografií (AcOEt/MeOH 8:2), což dalo volný amin, který

121 byl zpracováván 1 M roztokem HCl v Et₂O (0,3 ml) a tím byla získána sloučenina z názvu (0,05 g) ve formě bílé pevné látky.

Teplota tání> 200°C

NMR	(DMSO): δ	(ppm) 9,	08	(bs,	2H) ,	7,97	(s,	1H), 7,66	(s,
2H) ,	7,35 (m,	2H), 7,10	(m,	2H) ,	4,60	(d,	1H) ,	4,46 (dd,	9H) ,
4,39	(d, 1H),	3,50-3,10	(m,	6H) ,	2, 92	(s,	3H) .

R (Nujol) (cm^-1) 3437, 1653.

MS: 464 [M-C1]⁺.

Příklad 13

2-fenyl-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5-bistrif luormethyl-benzyl) -methyl-amid, hydrochlorid.

Do míchaného roztoku meziproduktu 34 (0, 382 g) v THF (10 ml) byl přidán 1 M roztok BH3 v THF (7,66 ml). Směs byla potom zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 3 hodin. Teplota byla potom snížena a reakce byla zastavena roztokem 37% HCl (5 ml) a směs byla míchána za teploty okolí přes noc. Roztok byl potom alkalizován pomocí NaOH a produkt byl extrahován DCM, sušen a koncentrován za sníženého tlaku pro získání oleje. Olej byl potom rozpuštěn v Et₂O a byl přidán 1 M roztok HCl v Et₂O (1,6 ml). Po uplynutí několika minut roztok byl koncentrován a produkt byl rozetřen z petroleumetheru pro získání sloučeniny z názvu (0,300 g) ve formě pevné látky.

122

NMR(CDC1₃): δ (ppm) 10,15 (b, 2H) , 7,75 (s, 7H) , 7,44 (s,

2H) , 7,3 (m, 5H), 4,80-4,34 (m, 3H) , 3, 80-3, 00 (m, 6H) , 2,93 (s, 3H).

MS (m/z).·446 [M-C1]⁺.

Příklad 14

2-(2,4-Dichlorfenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5bistrifluormethyl-benzyl)-methyl-amid, hydrochlorid

Do roztoku meziproduktu 35 (0,22 g) v THF (15 ml) byl přidán 1 M roztok boru v THF (1,2 ml) a reakční směs byla míchána za teploty zpětného toku po dobu 3 hodin, potom ochlazena na teplotu okolí a po kapkách byl přidán 37% HCl (3 ml) a reakční směs byla míchána po dobu 3 hodin. Rozpouštědlo bylo odpařeno a surové residuum bylo zředěno pomocí AcOEt a promýváno nasyceným roztokem NaHCO₃ a solným roztokem. Organická fáze byla sušena a koncentrován pro získání surového produktu. Tento produkt byl rozpuštěn v Et₂O (2 ml), potom byl přidán 1 M roztok HCl v Et₂O (1 ml) . Získaný roztok byl po kapkách přidán do petroleje (30 ml) a vytvořený precipitát byl filtrován pro získání sloučeniny z názvu (0,06 g, bílá pevná látka).

NMR (DMSO): δ (ppm) 9,25, 9,15 (m+m, 2H), 7,98 (m, 1H), 7,64 (s, 2H), 7,60 (d, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,29 (dd, 1H), 4,78 (dd,

1H) , 4,63 (d, 1H), 4,35 (d, 1H), 3,59 (d, 1H), 3,40-3,25 (m,

3H), 3,07 (t, 3H), 2,95, 2,93 (s+m, 4H).

IR (Nujol) (cm¹) 3442, 1654.

MS (m/z) 515 [M-C1]⁺.

123

Příklad 15

2-(3,4-dichlorfenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5— bistrifluormethyl-benzyl)-methyl-amid, hydrochlorid

Do roztoku meziproduktu 36 (0,13 g) v THF (20 ml) byl přidán 1 M roztok boru v THF (1,96 ml) a reakční směs byla míchána za teploty zpětného toku po dobu 3 hodin, potom ochlazena na teplotu okolí, po kapkách byl přidán 37% HCl (5 ml) a reakční směs byla míchána po dobu 3 hodin. Rozpouštědlo bylo odpařeno a surové residuum bylo zředěno pomocí AcOEt a promýváno nasyceným roztokem NaHCO₃ a solným roztokem. Organická fáze byla sušena a koncentrována pro získání surového produktu. Produkt byl rozpuštěn v Et₂O (2 ml) , potom byl přidán 1 M roztok HCl v diethyletheru (1 ml). Získaný roztok byl po kapkách přidán do petroleje (30 ml) a vytvořený precipitát byl filtrován pro získání sloučeniny z názvu (0,016 g, bílá pevná látka).

NMR (DMSO): δ (ppm) 8,99 (široký, 2H), 7,98 (s, IH), 7,70 (s, 2H), 7,56 (d+d, 2H) , 7,31 (dd, IH) , 4,58 (d, IH) , 4,50 (d,

IH), 4,41 (d, IH), 3,5-3,1 (m, 4H), 2,93 (s, 3H).

IR (Nujol) (cm¹) 3436, 1653.

MS (m/z) 515 [M-Cl]⁺.

Příklad 16 (-)-2-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, (1-(S)-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-ethyl]methyl-amid, hydrochlorid

124

Roztok meziproduktu 38a (0,08 g) v EtOH (5 ml) byl hydrogenován za atmosférického tlaku po dobu 4 hodin v přítomnosti 10% Pd/C (50 mg) . Katalyzátor byl odfiltrován a rozpouštědlo bylo odpařeno. Surový produkt byl rozpuštěn v Et₂O a potom byl přidán roztok 1 M HC1 v Et₂O (0,5 ml) . Precipitát byl filtrován a promýván Et₂O pro získání sloučeniny z názvu (0,023 g).

NMR (CDCI3) : δ (ppm) 10,5-10	,0 (b, 2H), 7	,74	(s, 1H), 7,41
(s, 2H), 7,09 (m, 1H) , 6,88	(m, 1H), 6,80	(m,	1H), 5,58 (q,
1H), 4,85 (m, 1H), 3,80-3,00	(m, 6H), 2,80	(s,	3H), 2,49 (s,
3H) , 1,53 (d, 3H) .
MS (m/z) 492.
[a]^D20=-164,9, 0,12 (g/100 ml)	CHC1₃

Příklad 17 (+)-2-(R)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, (1-(S)-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)ethyl]-methylamid, hydrochlorid

Roztok meziproduktu 38b (0,08 g) v EtOH (5 ml) byl hydrogenován za atmosférického tlaku po dobu 4 hodin v přítomnosti 10% Pd/C (50 mg) . Katalyzátor byl odfiltrován a rozpouštědlo bylo odpařeno. Surový produkt byl rozpuštěn v Et₂O a potom byl přidán roztok 1M HC1 v Et₂O (0,5 ml) . Precipitát byl filtrován a promýván Et₂O pro získání sloučeniny z názvu (0,020 g).

NMR (CDC1₃) : δ (ppm) 10,5-10,0 (b, 2H) , 7,74 (s, 1H) , 7,41 (s, 2H), 7,09 (m, 1H) , 6,88 (m, 1H) , 6,80 (m, 1H) , 5,58 (q,

125

1H) , 4,85 (m, 1H), 3,80-3,00 (m, 6H) , 2,80 (s, 3H), 2,49 (s, 3H), 1,53 (d, 3H).

MS (m/z) 492.

[α]°₂₀ = +207, 0, 11 (g/100 ml) CHC1₃

Příklad 18

2-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, (1-(R)-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)ethyl]-methylamid, acetátová sůl

Do roztoku meziproduktu 40a (8,8 g) v bezvodém THF (33 ml) pod atmosférou N₂ byl přidán BH₃.THF (1M roztok v THF - 87 ml) a reakční směs byla míchána za teploty zpětného toku po dobu 3 hodin, potom ochlazena na teplotu okolí a po kapkách byl přidán HCl (37%, 30 ml), udržujíce reakční směs v ledové lázni. Reakční směs byla míchána za teploty okolí po dobu 1 hodiny. Voda byl potom přidán (70 ml) a pevný NaHCO₃ (35,2 g) byl přidán po částech až do pH 6,5. THF byl odpařen a vodná fáze byla extrahována Et₂O (3 x 88 ml). Zkombinované organické fáze byly sušeny a odpařeny a zanechaly bezbarvý olej (7,37 g).

Tento surový olej byl čištěn mžikovou chromatografii (AcOEt/MeOH 7:3). Produkt takto získaný byl suspendován v

Et₂O (125 mi) a promýván nasyceným NaHCO₃ (2 x 20 ml) . Čiré zkombinované organické fáze byly sušeny a odpařeny pro získání 2- (S)- (4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-1karboxylové kyseliny, [1-(R)-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)ethyl]-methyl-amidu, ve formě bílé pěny (5,27 g) . Tento

126 materiál (5,27 g) byl rozpuštěn v Et₂O (79 ml) a po kapkách byla přidána kyselina octová (613 μΐ) . Směs byla míchána za teploty okolí po dobu 1 hodiny a potom za teploty 0°C po dobu 1 hodiny. Suspenze byla filtrována pro získání sloučeniny z názvu (4,366 g) ve formě bílé pevné látky.

NMR	(^τΗ, DMSO-	-d6)	: δ	(ppm)	7,98	(s,	1H) ,	7,70	(S,	2H) ,	7, 87
(m,	1H), 6,91	(m,	1H)	, 6,77	(m,	1H) ,	5,29	(q.	1H) ,	4,23	(dd,
1H) ,	3,2-2,6	(m,	6H)	, 2, 68	(s,	3H) ,	2,3	(S,	3H) ,	1, 89	(s,

3H), 1,48 (d, 3H).

MS (m/z): 492 [M-CH₃COO]⁺.

[a] ^D2o=-120,4 °C Rozpouštědlo (CHCI3); Zdroj: Na; Objem buňky [ml]: 1; Délka dráhy v buňce [dm]: 1; Teplota buňky [°C]: 20; Vlnová délka [nm]:-589

Příklad 19

2-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, [1-(S)-(3;5-bis-trifluormethyl-fenyl)-ethyl]methyl-amid, acetát

Do roztoku meziproduktu 40b (2,57 g) v bezvodém THF (15,5 ml) byl za teploty 0°C a pod atmosférou N₂ přidán BH3.THF (1M roztok v THF) a roztok byl potom zahříván na teplotu zpětného toku po dobu 3 hodin. Teplota byla potom snížena zpět na teplotu okolí a 37% HCI (9 ml) byl pomalu přidán udržujíce reakční směs v ledové lázni. Reakční směs byla míchána za teploty okolí po dobu 1 hodiny. Voda byla potom přidán (20,5 ml) a pevný NaHCO₃ (10,3 g) byl přidáván po částech až do pH 7.

127

THF byl odpařen a vodná fáze byla extrahována Et₂O (3 x 25,7 ml) . Zkombinované organické fáze byly sušeny a odpařeny a zanechaly žlutý olej (2,34 g) . Tento surový olej byl rozpuštěn v Et₂O (35 ml) a po kapkách byl přidán ledový AcOH (0,245 ml). Směs byla míchána 2 hodiny za teploty 0°C, potom byla filtrována, promývána Et₂O (10 ml) a sušena za vakua pro získání sloučeniny z názvu ve formě bílé pevné látky (1,349 g) ·

NMR	(^XH, DMSO-d6): δ	(ppm)	7,92	(s,	IH) , 7,58 (s, IH),	7,29
(m,	IH) , 6,90 (m, IH	), 6,77 (m,	IH)	1 , 5,33	(q.	IH), 4,19	(m,
IH) ,	3,2-2,6 (m, 6H)	, 2,79	(s,	3H)	, 2,32	(s,	3H), 1,89	(s,

3H), 1,48 (d, 3H).

MS (m/z): 492 [M-CH₃COO]⁺.

[a]°=+2,2 °C

Rozpouštědlo (CHC1₃) ; Zdroj: Na; Objem buňky [ml]: 1; Délka dráhy v buňce [dm]: 1; Teplota buňky [°C]: 20; Vlnová délka [nm]: 589

Příklad 20

4-(2-amino-acetyl)-2- (S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazinl-karboxylová kyselina, (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)methyl-amid, hydrochlorid

Sloučenina z příkladu 8 (0,05 g) byla rozpuštěna v bezvodém

DMF (2 ml), byl přidán DIPEA (0,019 ml) a roztok takto získaný byl přidán do roztoku N-(terč.-butoxykarbonyl)glycinu

128 (0,0192 g) , 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu (0,0214 g) a 1-hydroxybenzotriazolu (0,015 g) v bezvodém DMF (5 ml) . Reakční směs byla míchána 18 hodin za teploty okolí, potom zředěna AcOEt (30 ml), promývána vodou (30 ml), hydrogenuhličitanem sodným (30 ml) a solným roztokem (30 ml). Separovaná organická vrstva byla sušena a odpařena pro získání surového produktu, který byl čištěn mžikovou chromatografií (AcOEt). Získaná sloučenina (0,043 g) byla rozpuštěna v 1 M roztoku HC1 v Et₂O (5 ml), míchána 0,5 hodin za teploty okolí a odpařena pro získání sloučeniny z názvu (0,046 g) ve formě žluté pěny.

NMR	(DMSO)	: δ	(ppm)	8,01 (bs, 3H), 7,88	(s,	1H) ,	7,67 (s,
2H) ,	7,33	(m,	1H), 6	,95 (m, 1H), 6,83 (m,	1H) ,	4,60	(m, 1H) ,
4, 60-	-4,42	(dd,	2H) ,	4,2-3,3 (m, 6H) , 3,2	(m,	2H) ,	2,89 (s,

3H), 2,4 (s, 3H).

IR (Nujol) (cm^-1) 3410, 1660.

MS (m/z) 535 [M-C1]⁺.

Příklad 21

2-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, [1-(3,5-bis-trifiuormethyl-fenyl)-1-methyl-ethyl]methyl-amid, hydrochlorid

Paládium na uhlí (10% - 17,5 mg) bylo přidáno do roztoku meziproduktu 73 (145 mg) v ethanolu (2 ml). Výsledná směs byla míchána za tlaku 1 atmosfér a teploty okolí pod vodíkovou atmosférou po dobu 2 hodin. Směs byla filtrována a koncentrována ve vakuu. Residuum bylo rozpuštěno v Et₂O (2

129 ml) a zpracováváno HCl 1M v Et₂O (1 ml). Směs byla míchána za teploty okolí po dobu 10 minut, potom koncentrována ve vakuu a residuum bylo rozetřeno ve směsi Et₂0/petrolej pro získání sloučeniny z názvu (27 mg) ve formě bílé pevné látky.

NMR (d₆-DMSO) : δ (ppm) 9,15 (bs, IH) , 8,9 (bs, IH) , 7,77 (s, IH) , 7,71 (s, 2H) , 7,31 (dd, IH) , 6,95-6, 87 (m, 2H) , 4,39 (dd, IH), 3,71 (dt, IH), 3,35-2,9 (m, 5H), 3,24 (s, 3H) , 2,23 (s, 3H),1,49 (s, 3H), 1,46 (s, 3H).

MS: m/z = 506 [MH]⁺.

Příklad 22

4-(2-amino-ethyl)-2- (S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-lkarboxylová kyselina, (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-methylamid, dihydrochloridová sůl

Do roztoku meziproduktu 41 (25 mg) v absolutním EtOH (1 ml) byl za teploty okolí přidán methylamin 8,03M v EtOH (48 μΐ). Reakční směs byla míchána za teploty okolí po dobu 5 hodin. Rozpouštědlo bylo odpařeno a surový produkt byl čištěn mžikovou chromatografií (AcOEt/MeOH/koncentrovaný NH₄OH 90:5:5). Frakce byly izolovány a rozpouštědlo bylo odpařeno. Residuum bylo rozpuštěno v Et₂O a byl přidán HCl 1,0 M v Et₂O (150 μΐ). Žlutý precipitát byl filtrován a sušen pro získání sloučeniny z názvu (19 mg) ve formě žluté pevné látky.

NMR (DMSO)	: δ	(ppm)	8, 12	(bs, 2H), 7,90	(s,	IH) ,	7, 62	(s,
2H), 7,33	(t,	IH) ,	6,95 (	dd, IH) , 6,83	(td,	IH) ,	4, 69	(m,
IH), 4,62	(d,	IH), 4	,41 (d,	IH), 3,60-3,10	(m,	10H) ,	2,94	(s,
3H), 2,40	(s,	3H) .

130

IR (Nujol) (cm'¹) 3433 - 3300, 1651.

MS (m/z) 521 [M-2HC1+H]⁺.

Příklad 23

2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-3-methyl-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-amid, hydrochloridová sůl

Do roztoku meziproduktu 45 (100 mg) v bezvodém MeOH (3 ml) a pod atmosférou N₂ bylo za teploty okolí přidáno Pd/C 10% (20 mg) . Reakční směs byla vložena pod H₂ atmosféru a míchána za teploty okolí po dobu 2 hodin. Katalyzátor byl filtrován na Celitu a celitový koláč byl promýván AcOEt. Rozpouštědlo bylo odpařeno a residuum bylo rozpuštěno v Et₂O. Byl přidán HCl

l,0N v Et₂O (	240 μΐ) a bílý	precipitát byl	filtrován a
promýván Et₂O.	Sloučenina z názvu byla získána (73 mg) ve
formě bílé pevné látky.
NMR (CDC1₃) : δ	(ppm) 9,31 + 9,01	(m, 2H), 7,99	(s, 1H), 7,70
(s, 2H) , 7,02	(m, 2H) , 6,78 (m,	1H), 4,63 (d,	1H), 4,7-4,3
(dd, 2H), 3,66	(m, 1H), 3,5-2,9	(m, 4H), 3,05	(s, 3H), 2,34
(s, 3H), 1,09 (	Id, 3H).
IR (Film) (cm'¹'	) 1659.

MS (m/z) 692 [MH-C1]⁺.

Příklad 24

2-(2-methyl-4-fluor-fenyl)-6-methyl-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-amid, hydrochloridová sůl

131

Komplex BH3.THF (1,25 ml) byl přidán velmi opatrně do roztoku meziproduktu 47 (0,080 g) v bezvodém THF (5 ml) pod inertní atmosférou a reakčni směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 3 hodin. Po ukončení redukce byl přidán 37% HCl (3 ml) a reakčni směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 2 hodin. THF byl odstraněn za sníženého tlaku, byla přidána voda (3 ml) a vodný roztok byl alkalizován pomocí Na₂CO₃, extrahován DCM, promýván solným roztokem a sušen. Surový produkt byl čištěn mžikovou chromatografii (AcOEt/MeOH 8:2) pro získání produktu, který byl rozpuštěn v Et₂O a zpracováván HCl 7,0M v Et₂O (0,3 ml) pro získání sloučeniny z názvu (0,03 mg).

H-NMR (DMSO)	: δ	(ppm) 9,12 (bs,	1H), 8,88	(bs,	1H) ,	7,93	(s,
1H), 7,56 (s,	2H)	, 7,37 (m, 1H),	6,74 (m,	2H) ,	4,71	(d,	1H) ,
4,35 (dd, 1H)	, 4,	36-4,10 (bm, 1H)	, 3,35-2,	9 (m,	5H) ,	2,99	(s,
3H), 2,28 (s,	3H)	, 1,05 (d, 3H).

MS (m/z) 492 [M - Cl]⁺. Teplota tání> 200 °C

Příklad 25

2-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, [(1-3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-cyklopropyl]methyl-amid, hydrochlorid

Koncentrovaný HCl (0,27 ml) byl přidán do roztoku meziproduktu 53 (90 mg) v methanolu (9 ml) a směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 15 minut. Směs byla koncentrována ve vakuu a residuum bylo rozetřeno Et₂O

132 pro získání sloučeniny z názvu (32 mg) ve formě bílé pevné látky.

IR (Nujol) : 3405 (NH₂ ⁺) , 1653 (C=O) cm'¹.

(DMSO): δ	(ppm) 9,42 (bs,	1H) ,	9,27	(bs,	1H), 7,79	(bs,
7,45 (dd,	1H), 7,25 (bs,	2H) ,	6,94	(m,	2H), 4,52	(dd,
3,5-3,06	(m, 9H), 2,33 (s	, 3H)	, 1,34 (m,	2H), 1,22	(m,

2H) .

MS: m/2 = 504 [M-C1]⁺.

Příklad 26 [2-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-pyrrolidin-l-yl]-[2-(S) -(4fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-yl]-methanon, hydrochlorid (enantiomer B)

Koncentrovaný HCl (0,3 ml) byl přidán do roztoku meziproduktu 58a (15 mg) v methanolu (5 ml) a směs byla zahříván na teplotu zpětného toku po dobu 2 hodin. Směs byla koncentrována ve vakuu pro získání sloučeniny z názvu (7 mg) ve formě bílé pevné látky.

IR (Nujol) 1654 (C=O) cm'¹.

NMR	(DMSO	-) : δ	(ppm) 9,17	(bs, 1H) , 8,88	(bs,	1H) ,	7,93	(s,
1H) ,	7,86	(s,	2H), 7,23 (	m, 1H), 6,94 (m,	2H) ,	4,78	(t,	1H) ,
4,46	(dd,	1H) ,	3,88-3,83	(m, 2H), 3,79 (m,	1H)	, 3,4	(m,	1H) ,
3,28	(m,	1H) ,	3,2 (d, 1H	), 3,06 (t, 1H),	2,84	(m,	1H) ,	2,31
(m,	1H) ,	2,27	(s, 3H), 1	,96 (m, 1H), 1,74	(m,	1H) ,	1,62	(m,

1H) .

MS: m/z = 504 [MH-HC1]⁺.

133

Příklad 27 [2-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-pyrrolidin-l-yl]-[2-(S) -(4fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-yl]-methanon, hydrochlorid (enantiomer B)

Koncentrovaný HC1 (0,3 ml) byl přidán do roztoku meziproduktu 58b (20 mg) v methanolu (5 ml) a směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 2 hodin. Směs byla koncentrována ve vakuu pro získání sloučeniny z názvu (11 mg) ve formě bílé pevné látky.

IR	(Nujol)	1659	(c=o:	) cm¹.
NMR	(DMSO)	: δ	(ppm)	9, 09	(bm,	1H) ,	8,89 (bm,	1H) ,	7,	83	(s,
1H)	, 7,52	(s,	2H) ,	7,45	(dd,	1H) ,	6,97 (td,	1H) ,	6,	9	(dd,
1H)	, 4,93	(dd,	1H) ,	4,39	(dd,	1H) ,	3,88-3,22	(m,	6H)	r	3, 07
(t,	1H) , 2	,99	(m, 1H), 2,	3 (m,	1H)	, 2,25 (s,	3H) ,	1,	80	(m,

1H), 1,75 (m, 1H), 1,63 (m, 1H).

MS: m/z = 504 [MH-HC1]⁺.

Příklad 28 [2-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-3,6-dihydro-2H-pyridin-lyl]-[2-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-yl]-methanon, hydrochlorid (enantiomer A)

Trifluoroctová kyselina (5 ml) byla přidána do roztoku meziproduktu 62 (172 mg) v DCM (5 ml) a výsledný roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 30 minut. Směs byla koncentrována ve vakuu, potom byla rozdělena mezi 10% roztok uhličitanu draselného a AcOEt. Organická vrstva byla sušena a koncentrována ve vakuu, residuum bylo rozpuštěno v Et₂O a

134 zpracováváno HC1 1 M v Et₂O (5 ml) . Směs byla míchána za teploty okolí po dobu 30 minut, potom byla koncentrována ve vakuu a residuum bylo rozetřeno s Et₂O pro získání sloučeniny z názvu (90 mg) ve formě bílé pevné látky.

IR (Nujol) 1656 (C=O) cm^-1.

NMR (DMSO): δ (ppm) 9,4-9,2 (bs, 2H) , 7,95 (s, 1H) , 7,54 (s, 2H) , 7,32 (dd, 1H) , 6,98 (dd, 1H) , 6,85 (dt, 1H) , 5,9 (bm, 1H), 5,72 (m, 1H) , 5,47 (d, 1H) , 4,57 (dd, 1H) , 4,41 (bd,

1H), 3,4-3,25 (m, 5H), 3,14 (t, 1H), 2,91 (t, 7H), 2,72 (dd, 1H), 2,55 (m, 1H), 2,37 (s, 3H).

Příklad 29 (2-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-piperidin-l-yl]-[2-(S)-(4fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-yl]-methanon, hydrochlorid (enantiomer A)

Paládium na uhlí (10% - 14 mg) bylo přidáno do roztoku meziproduktu 62 (145 mg) v AcOEt (5 ml). Výsledná směs byla míchána za tlaku 1 atmosféry a teploty okolí pod vodíkovou atmosférou po dobu 3 hodin. Směs byla filtrována a koncentrována ve vakuu. Do residua byly přidány DCM (5 ml) a trifluoročtová kyselina (5 ml) a výsledný roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 30 minut. Směs byla koncentrována ve vakuu, potom rozdělena mezi 10% roztok uhličitanu draselného a AcOEt. Organická vrstva byla sušena a koncentrována ve vakuu, residuum bylo rozpuštěno v Et₂O a zpracováváno HC1 1 M v Et₂O (5 ml). Směs byla míchána za teploty okolí po dobu 15 minut, potom koncentrována ve vakuu a residuum bylo rozetřeno

135 s Et₂O pro získání sloučeniny z názvu (42 mg) ve formě bílé pevné látky.

IR (Nujol) 3200-2500 (NH₂ ⁺) , 1656 (C=O) cm¹.

NMR (DMSO): δ (ppm) 9,4 (bs, 2H) , 7,92 (bs, 1H) , 7,48 (bs, 2H), 7,43 (dd, 1H) , 6,97 (dd, 1H) , 6,93 (m, 1H) , 5,25 (bm, 1H) , 4,61 (dd, 1H), 4,15 (bd, 1H), 3,5-3,2 (bm, 5H), 2,92 (t, 1H), 2,79 (m, 1H), 2,36-2,42 (m, 4H), 1,78-1,58 (m, 4H), 1,17 (m, 1H).

Příklad 30

2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, [1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-but-3-enyl]-methyl-amid, hydrochlorid (diastereoisomer A)

DCM (2 ml) a trif luoroctová kyselina (5 ml) byly přidány k meziproduktu 65 (44 mg) a výsledný roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 30 minut. Směs byla koncentrována ve vakuu, potom byla rozdělen mezi 10% roztok uhličitanu sodného a AcOEt. Organická vrstva byla sušena a koncentrována ve vakuu, residuum bylo rozpuštěno v Et₂O a zpracováváno HC1 1 M v Et₂O (5 ml) . Směs byla míchána za teploty okolí po dobu 10 minut, potom koncentrována ve vakuu pro získání sloučeniny z názvu (43 mg) ve formě bílé pevné látky.

NMR	(dmso;	): δ (ppm) 9,05	(bs,	1H) , 8,81 (bs,	1H) ,	7,96 (bs,
1H) ,	7,55	(bs, 2H), 7,25	(dd,	1H), 6,97 (dd,	1H) ,	6,	78 (dt,
1H) ,	5,7	(m, 1H), 5,35 (	dd,	1H) , 5,22-5,06	(2m,	2H	), 4,47
(dd,	1H) ,	3,5-2,37 (m, 15H	) ·

136

Příklad 31

2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, [1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-but-3-enyl]-methyl-amid, hydrochlorid (diastereoisomer B)

DCM (2 ml) a trif luoroctová kyselina (5 ml) byly přidány k meziproduktu 66 (44 mg) a výsledný roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 30 minut. Směs byla koncentrována ve vakuu, potom byla rozdělena mezi 10% roztok uhličitanu sodného a AcOEt. Organická vrstva byla sušena a koncentrována ve vakuu, residuum bylo rozpuštěno v Et₂O a zpracováváno HCl 1 M v Et₂O (5 ml). Směs byla míchána za teploty okolí po dobu 10 minut, potom byla koncentrována ve vakuu pro získání sloučeniny z názvu (39 mg) ve formě bílé pevné látky.

IR (Nujol): 3422 (NH₂ ⁺) , 1726 (C=O) cm¹.

NMR	(DMSO)	: δ	(ppm)	9,24 (bm, IH)	, 9,02 (bm,	IH), 7,99	(s,
IH) ,	7,78	(s,	2H) ,	7,26 (dd, 2H),	6,97 (dd, 1	.H), 6,87	(dt,
IH) ,	5,47	(m,	IH), 5	,2 (t, IH), 5,	03 (dd, IH),	4,89 (d,	IH) ,
4,49	(dd,	IH) ,	3,36	(m, 2H), 3,24 i	(m, 2H) , 2,97	(m, 2H),	2,85
(s,	3H) , 2	,74	(t, 2H:	), 2,37 (s, 3H)

Příklad 32

2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, (1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-2-methyl-propyl]-methylamid, hydrochlorid (diastereoisomer A)

Trifluoroctové kyselina (1 ml) byla přidána do roztoku meziproduktu 77a (35 mg) v DCM (1,5 ml) a výsledný roztok byl

137 míchán za teploty okolí po dobu 30 minut. Směs byla koncentrována ve vakuu, potom byla rozdělena mezi 10% roztok uhličitanu draselného a AcOEt. Organická vrstva byla sušena a koncentrována ve vakuu, residuum bylo rozpuštěno v Et₂O a zpracováváno HCl 1M v Et₂O (1 ml) . Směs byla míchána za teploty okolí po dobu 10 minut, potom byla koncentrována ve vakuu a residuum bylo rozetřeno s Et₂O pro získání sloučeniny z názvu {20 mg) ve formě bílé pevné látky.

NMR	(dg-DMSO) :	5 (ppm)	8,87	(bs, 2H),	8,02 (s,	1H), 7,88 (s,
1H) ,	7,26 (m,	1H) , 6,96	(m,	1H), 6,86	(m, 1H),	4,71 (bm, 1H),
4,42	(dd, 1H),	, 3,4-3,0	(m,	4H), 2,88-	2,79 (m,	5H), 2,63-2,38
(m,	4H), 0,62	(d, 3H),	0, 58	(d, 3H) .
MS:	m/z = 520	[M-C1]⁺.

Příklad 33

2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, [1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-2-methyl-propyl]-methylamid, hydrochlorid (diastereoisomer B)

Trifluoroctová kyselina (1 ml) byla přidána do roztoku meziproduktu 77b (37 mg) v DCM (1,5 ml) a výsledný roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 30 minut. Směs byla koncentrována ve vakuu, potom byla rozdělena mezi 10% roztok uhličitanu draselného a AcOEt. Organická vrstva byla sušena a koncentrována ve vakuu, residuum bylo rozpuštěno v Et₂O a zpracováváno HCl 1M v Et₂O (1 ml) . Směs byla míchána za teploty okolí po dobu 10 minut, potom byla koncentrována ve

138 vakuu a residuum bylo rozetřeno s Et₂O pro získáni sloučeniny z názvu (20 mg) ve formě bílé pevné látky.

NMR (de-DMSO): δ (ppm) 9,14-8,89 (bs, 2H), 7,96 (s, 1H), 7,69

(s, 2H), 7,02-6,95 (dd, 2H), 6,58 (m, 1H), 4,71	(d, 1H),	4,45
(dd, 1H), 3,5-3,2 (m, 4H) , 2,95-2, 80 (m, 5H) ,	2,6-2,38	(m,
4H), 0,87 (d, 3H), 0,72 (d, 3H).

MS: m/z = 520 [M-C1] ⁺ .

Příklad 34

2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, [(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-cyklopropyl-methyl]-methyl amid, hydrochlorid (diastereoisomer A)

Koncentrovaný HCI (50 μΐ) byl přidán do roztoku meziproduktu 80 (10 mg) v methanolu (1 ml) a směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 15 minut. Směs byla koncentrována ve vakuu a residuum bylo rozetřeno s Et₂O pro získání sloučeniny z názvu (4 mg) ve formě bílé pevné látky. NMR (DMSO): δ (ppm) 9,33 (bm, 1H) , 9,16 (m, 1H) , 8,0 (bs, 1H) , 7,79 (bs, 2H) , 7,3 (dd, 1H) , 6,95 (m, 2H) , 4,48 (dd, 1H), 4,27 (d, 1H), 3,5-2,8 (m, 9H) , 2,34 (s, 3H) , 1,47 (m, 1H), 0,64 (m, 1H), 0,45 (m, 1H), 0,38 (m, 1H), 0,08 (m, 1H).

Příklad 35 [2-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-3,6-dihydro-2H-pyridin-lyl] -[2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-yl]-methanon, hydrochlorid (diastereoisomer A)

139

Trifluoroctová kyselina (5 ml) byla přidána do roztoku meziproduktu 68 (172 mg) v DCM (5 ml) a výsledný roztok byl míchán za teploty okolí po dobu 30 minut. Směs byla koncentrována ve vakuu, potom byla rozdělena mezi 10% roztok uhličitanu draselného a AcOEt. Organická vrstva byla sušena a koncentrována ve vakuu, residuum bylo rozpuštěno v Et₂O a zpracováváno HCl 1 M v Et₂O. (5 ml) . Směs byla míchána za teploty okolí po dobu 30 minut, potom byla koncentrována ve vakuu a residuum bylo rozetřeno s Et₂O pro získání sloučeniny z názvu (90 mg) ve formě bílé pevné látky.

IR (Nujol) 1656 (C=O) cm'¹.

NMR	(DMSO): δ	(ppm) 9,23	(bs,	1H), 9,17	(bs, 2H),	7,89	(s,
1H) ,	7,56 (s,	2H), 7,32	(dd,	1H), 6,95	(dd, 1H),	6, 82	(dt,
1H) ,	5,9 (m,	1H), 5,72 (d	, 1H)	, 5,47 (d,	7H), 4,6	(dd,	1H) ,
4,4	(m, 1H),	3,4-3,2 (m,	6H) ,	2,94 (m,	1H), 2,7	(dd,	1H) ,
2,56	(m, 1H),	2,36 (s, 3H)

Příklad 36

2-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, [1-(R)-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-ethyl]methyl-amid, methansulfonát

Do suspenze meziproduktu 81 (4,9 kg) v AcOEt (137,2 1) byl přidán triethylamin (5,63 1). Směs byla ochlazena na teplotu 0°C a potom byl přidán roztok diterc.-buthyldikarbonátu (3,134 kg) v AcOEt (24,5 1) v průběhu 35 minut, udržujíce teplotu mezi 0 a 5°C. Suspenze byla míchána za teploty 0 °C po dobu 15 minut, za teploty 20/25°C po dobu 1 hodiny, potom byla promývána vodou (3 x 39,2 1), koncentrována na objem

140

24,5 1 a potom přidána do roztoku trifosgenu (1,97 kg) v AcOEt (24,5 1), ochlazeného na teplotu 0°C. Potom byl přidán triethylamin (3,28 1) v průběhu 40 minut, udržujíce teplotu mezi 0 a 8°C. Suspenze byla míchána po dobu 1 hodiny a 45 minut za teploty 20/25°C a 30 minut za teploty 70°C a potom byl v průběhu 30 minut přidán roztok meziproduktu 82 zředěného pomocí AcOEt (49 1) a triethylaminu (2,6 1). Směs byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 7,5 hodin.

Reakční směs, ochlazená na teplotu 20/25°C, byla zpracovávána vodným roztokem NaOH 10% obj. (36,75 1). Organická fáze byla promývána HCl 4% obj. (46,55 1) a NaCl 11,5% p/p (4 x 24,5 1) a potom koncentrována na 14,7 1 a zředěna cyklohexanem. (39,2 1). Směs byla filtrována přes vrstvu oxidu křemičitého (4,9 kg), který byl promýván dvakrát směsí CH/AcOEt 85/15 (2 x 49 1) . K vymytým fázím (14,7 1), ochlazeným na teplotu 20/25°C, byly přidány methylterc.-butylether (49 1) a kyselina methansulfonové (4,067 1). Směs byla promývána NaOH 10% obj. (31,85 1) a potom vodou (4 x 31,85 1). Organické fáze byly koncentrovány na objem 9,8 1, byl přidán methylterc.butylether (49 1) a roztok byl filtrován přes 5 mikronový filtr a potom koncentrován na objem 9,8 1. Za teploty 20/25°C byly přidány MTBE (29,4 1) a methansulfonové kyselina (1,098 1). Suspenze byla zahřívána na teplotu zpětného toku po dobu 10 minut, míchána za teploty 20/25°C po dobu 10 hodin a 2 hodiny za teploty 0 °C. Potom byl precipitát filtrován, promýván methylterc.-butyletherem (4,9 1) a sušen za vakua za teploty 20/25°C po dobu 24 hodin pro získání sloučeniny z názvu (5,519 kg) ve formě bílé pevné látky.

141

¹H-NMR (	DMSO): δ (ppm) 8,99 (bm, IH) , 8,66	(bm,	IH) , 8,00
(bs, IH)	, 7,69 (bs, 2H), 7,27 (dd, IH), 7,00	(dd,	IH), 6,83
(m, IH) ,	5,32 (q, IH), 4,47 (dd, IH), 3,50-3,2'	0 (m,	4H), 2,96
(m, 2H),	2,72 (s, 3H) , 2,37 (s, 3H) , 2,28 (s,	3H) ,	, 1,46 (d,
3H) .
ES⁺: m/z	492 (MH - CH₃SO₃H] ⁺ .
ES: m/z	586 [M - H]⁺; 95 [CH₃SO₃].
Příklad	37

2-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, [1-(R)-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-ethyl]methyl-amid

Do roztoku meziproduktu 40a (15,6 g) v bezvodém THF (94 ml) byl za teploty 0°C a pod atmosférou N₂ přidán BH₃.THF 1 M/THF (154 ml). Roztok byl zahříván na teplotu zpětného toku po dobu 3 hodin. Pomalu byl přidán 37% HCl (54 ml), udržujíce reakční směs v ledové lázni a reakční směs byla míchána za teploty okolí po dobu 1 hodiny. Potom byla přidána voda (125 ml) a pevný NaHCO₃ (62,4 g) byl přidáván po částech až do pH 6,5. Vodná fáze byla extrahována pomocí Et₂O (4x160 ml) a zkombinované organické extrakty byly sušeny nad Na₂SO₄, pevné látky byly filtrovány a odpařeny a zůstal bezbarvý olej, který byl čištěn mžikovou chromatografii (silikagel, EtOAc/methanol 7/3) . Získaný produkt byl suspendován v Et₂O (220 ml) a promýván nasyceným NaHCO₃ (2x36 ml). Zkombinované organické fáze byly sušeny (Na₂SO₄) a odpařeny pro získání sloučeniny z názvu ve formě bílé pěny (8,7 g).

142 ¹H-NMR (CDCI3) : δ (ppm) 7,78 (s, 1H) , 7,60 (s, 2H) , 7,28 (m, 1H), 6,85 (dd, 1H), 6,79 (td, 1H) , 5,53 (q, 1H) , 4,43 (dd,

1H) , 2,9-3,5 (m, 5H) , 2,78 (m, 1H) , 2,71 (s, 3H) , 2,43 (s, 3H), 1,47 (d, 3H).

Příklad 38

2-(S) -(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, [1-(R)-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-ethyl)methyl-amid, hydrochlorid

Produkt z příkladu 37 (0,1 g) byl rozpuštěn v ethyletheru (0,8 ml) za teploty okolí, potom byl přidán 1 M HC1 roztok v ethyletheru (0,6 ml). Suspenze byla míchána za teploty 3°C po dobu 3 hodin, potom byla filtrována a promývána ethyletherem (1 ml) pro získání sloučeniny z názvu (0,015 g) ve formě bílé pevné látky.

¹H-NMR (DMSO): δ (ppm) 9,31 (bm, 1H) , 9,11 (bm, 1H) , 8,02 (bs, 1H), 7,72 (bs, 2H) , 7,28 (dd, 1H) , 7,00 (dd, 1H) , 6,84 (m, 1H), 5,34 (q, 1H), 4,54 (dd, 1H), 3,50-3,20 (m, 4H) , 3,08 (m, 1H), 2,93 (m, 1H) , 2,73 (s, 3H) , 2,38 (s, 3H) , 1,48 (d, 3H) .

143

Farmakologické příklady

A. Kapsle/Tablety

Účinná složka 20,0 mg Škrob 1500 2,5 mg Mikrokrystalická celulóza 200,0 mg Sodná sůl zesíťované karboxymethylcelulózy 6,0 mg Stearan hořečnatý 1,5 mg

Účinná složka se smíchá s dalšími excipienty. Směs může být použita pro plnění želatinových kapslí nebo lisována do formy tablet použitím vhodných razidel. Tablety mohou být povlékány použitím obvyklých způsobů a povlaků.

B. Tablety

Účinná složka	20,0	mg
Laktóza	200, 0	mg
Mikrokrystalická celulóza	70, 0	mg
Povidon	25, 0	mg
Sodná sůl zesíťované karboxymethylcelulózy	6,0	mg
Stearan hořečnatý	1,5	mg

Účinná složka se smíchá celulózou a částí karboxymethylcelulózy. Směs dispergování ve vhodném s laktózou, mikrokrystalickou sodné soli zesíťované se granuluje s povidonem po rozpouštědle (například vodě).

Granule se po sušení a rozmělnění smíchají s zbývajícími

4 excipienty. Směs může být lisována užitím vhodných razidel a tablety mohou být povlékány použitím obvyklých způsobů a povlaků.

C) Bolus

Účinná složka

Fosforečnan sodný

Voda pro injekci podle potřeby do

2-60 mg/ml 1,0-50,0 mg/ml 1 ml

Přípravek může být plněn do skleněných ampulí nebo nádobek a stříkaček s gumovým uzávěrem a plastovými a kovovými uzávěry (pouze nádobky).

D) Infúze

Účinná složka

Infúzní roztok (NaCl 0,9% nebo 5% dextróza) do

2-60 mg/ml 100 ml

Přípravek může být plněn do skleněných nádobek nebo plastových sáčků.

Afinita sloučenin podle předloženého vynálezu k NK1 receptorů byla určena pomocí měření NKl-receptorové vazebné afinity in vitro pomocí sloučenin, schopných přemisťovat [³H] substanci P (SP) z rekombinantních lidských NK1 receptorů exprimovaných v buněčných membránách vaječníků čínského křečka (Chinese Hamster Qvary - CHO) . Hodnoty afinity jsou

145 vyjádřeny jako negativní logaritmus konstanty inhibice (Ki) ligandu displaceru (pKi).

Hodnoty pKi, získané jako střed alespoň dvou měření s reprezentativními sloučeninami podle předloženého vynálezu jsou uvedeny v následující tabulce:

Příklad č.	pKi
1	8,97
4	8,36
5	8,67
8	9,37
9	8,81
10	9
12	8,7
14	8,7
16	9,4
18	9,56
19	9,27
20	9,46
21	8,95
22	9,39
23	9,32
24	9, 18
25	9, 32
28	9,31
29	8,87
30	8,78
32	8,59

146

9,10

9,81

Schopnost sloučenin podle předloženého vynálezu vázat nkl receptor může být určena v modelu klepání nohy tarbíka, jak je popsáno v Rupniak & Williams, Eur. Jour. of Pharmacol., 1994.

Sloučenina byla podávána orálně a jednu hodinu později byl podán infúzí NKl agonista (například deltaAminovaleryl⁶ [Pro⁹,Me-Leu¹⁰]-substance P (7-11)) (3 (xmol v 5μ1 icv) přímo do cerebrální dutiny zvířete. Doba trvání klepání zadní končetiny, indukovaného NK1 agonistou (například deltaAminovaleryl⁶ [Pro⁹, Me-Leu¹⁰]-substancí P (7-11)) byla zaznamenávána nepřetržitě po dobu 3 minut použitím stopek. Dávka testované sloučeniny, nutné pro inhibici klepání zadní končetiny, indukovaného NK1 agonistou (například deltaAminovaleryl⁶ [Pro⁹,Me-Leu¹⁰]-substancí P (7-11)) o 50%, vyjádřená v mg/kg, byla označena jako hodnota ID50. Alternativně sloučeniny mohou být podávány subkutánně nebo intraperitoneálně.

Reprezentativní výsledky získané pro sloučeniny podle předloženého vynálezu, pokud jsou podávány orálně, jsou uvedeny v následující tabulce

147

Příklad č.

ED₅o (mg/kg p.o.)

0,04

0,065

0,4

0,05

Žádné nečekané účinky nebyly pozorovány, pokud sloučeniny podle předloženého vynálezu byly podávány tarbíkovi ve farmakologicky účinných dávkách.

Zastupuje:

dr. P. Zelený

148

JUDr. Pavel Zelený advokát

Hálkova 2,120 00 Praha 2

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Sloučenina obecného vzorce (I) (R)m

O) ve kterém R představuje atom halogenu nebo Ci-C₄-alkylovou skupinu;

Ri představuje atom vodíku nebo Ci~C₄-alkylovou skupinu;

R₂ představuje atom vodíku, skupinu Ci-C₄-alkyl, C₂-C₆-alkenyl nebo C₃-C₇-cykloalkyl; nebo R₂ a R₂ společně s atomem dusíku, respektive atomem uhlíku, ke kterým jsou vázány, představují 5-6-člennou heterocyklickou skupinu;

R₃ představuje skupinu trifluormethyi, Ci-C₄-alkyl, Οχ-Ο₄alkoxy, trifluormethoxy nebo atom halogenu;

R₄ představuje atom vodíku, skupinu (CH₂)_qR₇ nebo (CH₂) _rCO (CH₂) _DR₇;

149

R₅ představuje atom vodíku, skupinu Ci-C₄-alkyl nebo COR₆;

R₆ představuje atom vodíku, skupinu hydroxy, amino, methylamino, dimethylamino, pětičlennou heteroarylovou skupinu obsahující od 1 do 3 heteroatomů, zvolených ze souboru, zahrnujícího atom kyslíku, atom síry a atom dusíku nebo šestičlennou heteroarylovou skupinu, obsahující od 1 do 3 atomů dusíku;

R7 představuje atom vodíku, skupinu hydroxy nebo NR_gR₉, kde Rg a Rg představují nezávisle na sobě atom vodíku nebo C1-C4alkyl, popřípadě substituovaný skupinou hydroxy nebo amino;

R10 představuje atom vodíku, skupinu Ci-C₄-alkyl nebo R₁₀společně s R₂ představuje C3-C₇-cykloalkylovou skupinu;

m je nula nebo celé číslo v rozmezí od 1 do 3; n je nula nebo celé číslo v rozmezí od 1 do 3; p a r jsou nezávisle na sobě nula nebo celé číslo v rozmezí od 1 do 4; q je celé číslo v rozmezí od 1 do 4;

s podmínkou, že pokud Ri a R₂ společně s atomem dusíku, respektive atomem uhlíku, ke kterým jsou vázány, představují 5- nebo 6-člennou heterocyklickou skupinu, i) m je 1 nebo 2; ii) pokud m je 1, R nepředstavuje atom fluoru a iii) pokud m je 2, dva substituenty R nejsou oba atom fluoru, a její farmaceuticky přijatelné sole a solváty.

150
2. Sloučenina podle nároku 1, ve které n je 2 a R₃ je trífluormethyl v poloze 3 a 5.
3. Sloučenina podle nároku 1 nebo nároku 2, ve které R je zvolen nezávisle ze souboru, zahrnujícího atom halogenu nebo Ci-C4-alkylovou skupinu a m je 1 nebo 2.

4 . Sloučenina podle kteréhokoli z nároků 1 až 3, ve které m je 2, R je zvolen nezávisle ze souboru f zahrnujícího atom halogenu nebo methylovou skupinu v poloze 2 nebo 4. 5. Sloučenina podle kteréhokoli z nároků 1 až 4, ve které Rs

je atom vodíku nebo skupina methyl.

6. Sloučenina podle kteréhokoli z nároků 1 až 5, ve které Ri je atom vodíku nebo skupina methyl.

7. Sloučenina podle kteréhokoli z nároků 1 až 6, ve které R₄je atom vodíku, skupina (CH₂) _rCO (CH₂)_PR7 nebo (CH₂)_qR7_ř kde R₇představuje amin, par jsou nezávisle na sobě nula nebo 1, q je 1 nebo 2.

8. Sloučenina obecného vzorce (I) podle kteréhokoli z nároků 1 až 7, ve které R je zvolen nezávisle ze souboru, zahrnujícího atom halogenu nebo methyl, R₃ je trífluormethyl v poloze 3 i 5, R₄ je atom vodíku nebo methyl·, R₂ je atom vodíku, skupina methyl, 2-propenyl nebo cyklopropyl nebo společně s Ri tvoří skupinu 3,6-dihydro-2H-pyridin-l-yl,

151 piperidin-l-yl nebo pyrrolidin-l-yl, Rio představuje atom vodíku, methyl nebo R_i0 společně s R₂ tvoří cyklopropylovou skupinu, R₄ je atom vodíku, skupina aminoacetyl nebo aminoethyl a R₅ je atom vodíku nebo skupina methyl.

9. Sloučenina obecného vzorce (I) podle kteréhokoli z nároků 1 až 8, ve které R je zvolen nezávisle ze souboru, zahrnujícího atom halogenu nebo skupinu methyl a m je 2, R3 je trifluormethyl v poloze 3 i 5, R_x a R₂ jsou nezávisle na sobě atom vodíku nebo methyl, R₄ je atom vodíku a R₅ je atom vodíku.

10. Sloučenina zvolená ze souboru, zahrnujícího následující sloučeniny:

2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-amid;

2-(2-isopropyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-amid;

2-(4-fluor-3-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-amid;

2-(2,4-difluor-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-amid;

2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, [1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)ethyl]-methyl-amid;

152

2-(4-fluor-fenyl) - piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,4bis-trifluormethyl-benzyl)-methyl-amid;

2-fenyl-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5-bistrifluormethyl-benzyl)-methyl- amid;

2-(2,4-dichlorfenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5bistrifluormethyl-benzyi)-methyl-amid;

2-(3,4-dichlorfenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5bistrifluormethyl-benzyi)-methyl-amid;

2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-3-methyl-piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5-bis-trifluormethyl-benzyi)-methyl-amid;

2-(2-methyl-4-fluor-fenyl)-6-methyl- piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5-bis-trifluormethyl-benzyi)-methyl-amid;

2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, [1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)ethyl]-methyl-amid;
4-(2-amino-acetyl)-2-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin1- karboxylová kyselina, (3,5-bis-trifluormethyl-benzyi)methyl-amid;

2- (S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-4-(piperidin-4-karbonyl)piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5-bis-trifluormethylbenzyi) -methyl-amid;

153

4-(2-amino-ethyl-2-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-lkarboxylová kyselina, (3,5-bis-trifluormethyl-benzyl)-methylamid ;

2-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, [(1-3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-cyklopropyl]methyl-amid;

[2-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl]-pyrrolidin-1—yl]—[2—(S)—(4— fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-yl]-methanon;

[2-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-3,6-dihydro-2H-pyridin-lyl]-[2-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-yl]-methanon;

2-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-piperidin-l-yl]-[2- (S) - (4fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-yl]-methanon;

2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, [1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-but-3-enyl]-methyl-amid;

2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, [1-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-2-methyl-propyl]-methylamid;

2-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, [(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-cyklopropyl-methyl]-methylamid;

154 a její enantiomery, farmaceuticky přijatelné sole (například hydrochlorid, methansulfonát, acetát) a solváty.

11. 2-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-4-(piperidin-4-karbonyl)piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5-bis-trifluormethylbenzyl )-methyl-amid, hydrochlorid.

12. 4-(2-amino-acetyl)-2-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)piperazin-l-karboxylová kyselina, (3,5-bis-trifluormethylbenzyl) -methyl-amid, hydrochlorid.

13. 2-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, [1-(R)-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-ethyl]methyl-amid, ethansulfonát.

14. 2-(S)-(4-fluor-2-methyl-fenyl)-piperazin-l-karboxylová kyselina, [1-(R)-(3,5-bis-trifluormethyl-fenyl)-ethyl]methyl-amid, acetát.

15. Sloučenina podle kteréhokoli z nároků 1 až 14 pro použití v terapii.

16. Použití sloučeniny podle kteréhokoli z nároků 1 až 14 pro přípravu léčiva pro léčení stavů způsobovaných tachykíniny, včetně substance P a dalších neurokininů.

17. Farmaceutická kompozice vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu podle kteréhokoli z nároků 1 až 14 ve směsi s

155 jedním nebo více fyziologicky přijatelnými nosiči nebo excipienty.

18. Způsob léčení savce, včetně člověka, obzvláště léčení stavů způsobovaných tachykininy, včetně substance P a dalších neurokininů, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny podle kteréhokoli z nároků 1 až

14.

19. Způsob (A) přípravy sloučeniny obecného vzorce (I) podle nároku 1, ve které R₄ je atom vodíku nebo skupina (CH₂)_qR7, s podmínkou, že pokud R₅ je skupina Ci~C₄-alkyl nebo COR_S, R₅není v poloze 3 piperazinového kruhu, vyznačující se tím, že zahrnuje redukci sloučeniny obecného vzorce (II), ve které R_4aje atom vodíku nebo vhodná ochranná skupina atomu dusíku nebo R_4a je (CH₂)_qR₇ skupina nebo její ochranné deriváty; nebo (») způsob (B) přípravy sloučeniny obecného vzorce (I) podle nároku 1, ve kterém R₄ je atom vodíku nebo skupina

156 (CH₂) _rC0 (CH₂)_pR7, vyznačující se tím, že zahrnuje reakci sloučeniny obecného vzorce (VIII), ve kterém R_4b představuje ochrannou skupinu atomu dusíku nebo R_4b je (CH₂)_r CO(CH₂)_PR₇nebo její ochranná skupina, s trifosgenem a organickou bází, následovanou adicí aminu (V)

,)n (R)m (Vili)

R2 (V) následovanou, je-li to nutné nebo požadováno, jedním nebo více z následujících kroků:

(i) odstranění libovolné ochranné skupiny;

(ii) izolace sloučeniny ve formě její sole;

(iii) separace sloučeniny obecného vzorce (I) nebo jejího derivátu na její enantiomery.