CS207453B2 - Method of determination of substrates or enzymatic effectiveness - Google Patents
Method of determination of substrates or enzymatic effectiveness Download PDFInfo
- Publication number
- CS207453B2 CS207453B2 CS773018A CS301877A CS207453B2 CS 207453 B2 CS207453 B2 CS 207453B2 CS 773018 A CS773018 A CS 773018A CS 301877 A CS301877 A CS 301877A CS 207453 B2 CS207453 B2 CS 207453B2
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- oxidase
- ascorbate
- reaction
- ascorbate oxidase
- units
- Prior art date
Links
- 239000000758 substrate Substances 0.000 title claims abstract description 12
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 title claims abstract description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 20
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims abstract description 70
- 108010024957 Ascorbate Oxidase Proteins 0.000 claims abstract description 55
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 40
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 claims abstract description 37
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 36
- 229940072107 ascorbate Drugs 0.000 claims abstract description 13
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 12
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 12
- 238000006479 redox reaction Methods 0.000 claims abstract description 8
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 11
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 claims description 10
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 claims description 10
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 claims description 10
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 claims description 10
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 108010092464 Urate Oxidase Proteins 0.000 claims description 7
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 claims description 3
- 125000003831 tetrazolyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- 108010089254 Cholesterol oxidase Proteins 0.000 claims description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 2
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000012085 test solution Substances 0.000 claims description 2
- 241000219122 Cucurbita Species 0.000 claims 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 abstract description 14
- 239000008103 glucose Substances 0.000 abstract description 14
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 abstract description 11
- 238000005259 measurement Methods 0.000 abstract description 9
- LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N Uric Acid Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C2=C1NC(=O)N2 LEHOTFFKMJEONL-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 6
- TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N Uric acid Natural products N1C(=O)NC(=O)C2NC(=O)NC21 TVWHNULVHGKJHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 6
- 229940116269 uric acid Drugs 0.000 abstract description 6
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 abstract description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 abstract description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 abstract description 5
- YCIMNLLNPGFGHC-UHFFFAOYSA-N catechol Chemical compound OC1=CC=CC=C1O YCIMNLLNPGFGHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 5
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 5
- 102000030523 Catechol oxidase Human genes 0.000 abstract description 4
- 108010031396 Catechol oxidase Proteins 0.000 abstract description 4
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 abstract description 4
- 108010029541 Laccase Proteins 0.000 abstract description 4
- 102000003425 Tyrosinase Human genes 0.000 abstract description 4
- 108060008724 Tyrosinase Proteins 0.000 abstract description 4
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 abstract description 4
- 150000007857 hydrazones Chemical class 0.000 abstract description 4
- RDOWQLZANAYVLL-UHFFFAOYSA-N phenanthridine Chemical compound C1=CC=C2C3=CC=CC=C3C=NC2=C1 RDOWQLZANAYVLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 abstract description 2
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 abstract description 2
- JGBAASVQPMTVHO-UHFFFAOYSA-N 2,5-dihydroperoxy-2,5-dimethylhexane Chemical compound OOC(C)(C)CCC(C)(C)OO JGBAASVQPMTVHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine Chemical compound CC1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=C(C)C=2)=C1 UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- WXMQHPKQCPCDQO-UHFFFAOYSA-N 4-dimorpholin-4-ylphosphorylmorpholine Chemical compound C1COCCN1P(N1CCOCC1)(=O)N1CCOCC1 WXMQHPKQCPCDQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 26
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 24
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 16
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 12
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 11
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 11
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 7
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 6
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- RLFWWDJHLFCNIJ-UHFFFAOYSA-N 4-aminoantipyrine Chemical compound CN1C(C)=C(N)C(=O)N1C1=CC=CC=C1 RLFWWDJHLFCNIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- JRBJSXQPQWSCCF-UHFFFAOYSA-N 3,3'-Dimethoxybenzidine Chemical compound C1=C(N)C(OC)=CC(C=2C=C(OC)C(N)=CC=2)=C1 JRBJSXQPQWSCCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 4
- HFZWRUODUSTPEG-UHFFFAOYSA-N 2,4-dichlorophenol Chemical compound OC1=CC=C(Cl)C=C1Cl HFZWRUODUSTPEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N azane;(2e)-3-ethyl-2-[(e)-(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound [NH4+].[NH4+].S/1C2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N(CC)C\1=N/N=C1/SC2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N1CC OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 239000011615 dehydroascorbic acid Substances 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 3
- IEQAICDLOKRSRL-UHFFFAOYSA-N 2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-dodecoxyethoxy)ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethanol Chemical compound CCCCCCCCCCCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCOCCO IEQAICDLOKRSRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JJMQRJKPLUACSO-UHFFFAOYSA-N 3-(4-iodophenyl)-2-(4-nitrophenyl)-5-phenyl-1,3-dihydrotetrazol-3-ium;chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1N1N(C=2C=CC(I)=CC=2)[NH2+]C(C=2C=CC=CC=2)=N1 JJMQRJKPLUACSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- -1 Ascorbic acid 4-tetrazolium salt Chemical class 0.000 description 2
- BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N Bilirubin Chemical compound N1C(=O)C(C)=C(C=C)\C1=C\C1=C(C)C(CCC(O)=O)=C(CC2=C(C(C)=C(\C=C/3C(=C(C=C)C(=O)N\3)C)N2)CCC(O)=O)N1 BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N 0.000 description 2
- SBJKKFFYIZUCET-JLAZNSOCSA-N Dehydro-L-ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(=O)C1=O SBJKKFFYIZUCET-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- SBJKKFFYIZUCET-UHFFFAOYSA-N Dehydroascorbic acid Natural products OCC(O)C1OC(=O)C(=O)C1=O SBJKKFFYIZUCET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N [[(2r,3r,4r,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-3-hydroxy-4-phosphonooxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] [(2s,3r,4s,5s)-5-(3-carbamoylpyridin-1-ium-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl phosphate Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 2
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 2
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 2
- 235000020960 dehydroascorbic acid Nutrition 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 239000000852 hydrogen donor Substances 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 2
- OBHRVMZSZIDDEK-UHFFFAOYSA-N urobilinogen Chemical compound CCC1=C(C)C(=O)NC1CC1=C(C)C(CCC(O)=O)=C(CC2=C(C(C)=C(CC3C(=C(CC)C(=O)N3)C)N2)CCC(O)=O)N1 OBHRVMZSZIDDEK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XKZQKPRCPNGNFR-UHFFFAOYSA-N 2-(3-hydroxyphenyl)phenol Chemical compound OC1=CC=CC(C=2C(=CC=CC=2)O)=C1 XKZQKPRCPNGNFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100031126 6-phosphogluconolactonase Human genes 0.000 description 1
- 108010029731 6-phosphogluconolactonase Proteins 0.000 description 1
- 241001532704 Azolla Species 0.000 description 1
- 101000950981 Bacillus subtilis (strain 168) Catabolic NAD-specific glutamate dehydrogenase RocG Proteins 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000001980 Cucurbita pepo Species 0.000 description 1
- 235000009852 Cucurbita pepo Nutrition 0.000 description 1
- NBSCHQHZLSJFNQ-GASJEMHNSA-N D-Glucose 6-phosphate Chemical compound OC1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O NBSCHQHZLSJFNQ-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 102000028526 Dihydrolipoamide Dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108010028127 Dihydrolipoamide Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N Disodium Chemical compound [Na][Na] QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- VFRROHXSMXFLSN-UHFFFAOYSA-N Glc6P Natural products OP(=O)(O)OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O VFRROHXSMXFLSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010018962 Glucosephosphate Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 102000016901 Glutamate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 239000004263 Guaiac resin Substances 0.000 description 1
- 229920000932 Gum guaicum Polymers 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- 102000005548 Hexokinase Human genes 0.000 description 1
- 108700040460 Hexokinases Proteins 0.000 description 1
- 101100446506 Mus musculus Fgf3 gene Proteins 0.000 description 1
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- 101710171188 Peroxidase 63 Proteins 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- VEQOALNAAJBPNY-UHFFFAOYSA-N antipyrine Chemical compound CN1C(C)=CC(=O)N1C1=CC=CC=C1 VEQOALNAAJBPNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000012876 carrier material Substances 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 230000035602 clotting Effects 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 235000019278 guaiac resin Nutrition 0.000 description 1
- 208000035861 hematochezia Diseases 0.000 description 1
- 150000002432 hydroperoxides Chemical class 0.000 description 1
- 238000005470 impregnation Methods 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 230000031700 light absorption Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 1
- 239000012434 nucleophilic reagent Substances 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229960005222 phenazone Drugs 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- 229920006267 polyester film Polymers 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 125000000020 sulfo group Chemical group O=S(=O)([*])O[H] 0.000 description 1
- BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M sulfonate Chemical compound [O-]S(=O)=O BDHFUVZGWQCTTF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/54—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving glucose or galactose
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
Vynález se týká způsobu stanovení substrátu nebo enzymatické účinnosti při použití Redox-reakce.
V klinické a farmaceutické chemii, biochemii a potravinářské chemii mají Redox-reakce ke stanovení koncentrace enzymu nebo substrátu velký význam. Vyhodnocení těchto reakcí je možno provádět fotometricky. V případě, že jsou ve zkušebním vzorku kromě žádané Redox-reakce ještě další redukující látky, je nutné počítat s větší chybou vzhledem k rušení této reakce. Zvláště často se ve vzorku vyskytuje kyselina askorbová. Jako silné redukční činidlo vede tato látka k chybám při vyšetřování farmaceutických přípravků nebo fyziologických kapalin, jako moči, rostlinných šťáv s obsahem kyseliny askorbové nebo některých potravinářských výrobků, které kyselinu askorbovou obsahují nebo k nimž byla tato kyselina přidána. Je například známo, že kyselina askorbová ruší následující reakce.
Reakce, při nichž se uvádí ve styk peroxid vodíku a donor vodíku s peroxidázou (POD) jsou rušeny následující reakcí
POD
Kyselina askorbová 4- H2O2----► —> kyselina dehydroaskorbová 4- H2O
Reakce, při nichž se redukují tetrazoliové soli redukčními činidly na formazany, jsou rušeny následující reakcí.
Kyselina askorbová 4- tetrazoliová sůl
- formazán 4- kyselina dehydroaskorbová.
Reakce, pří nichž dochází ke styku fenolů s nukleofilními reakčními složkami a tím k jejich oxidativní vazbě jsou rušeny tím, že kyselina askorbová způsobuje zatím neznámým způsobem vznik vedlejších reakcí, takže vzniká nejednotný oxidativní produkt, který se liší u absorpcí v normálním i ultrafialovém světle od běžných produktů této reakce.
К odstranění kyseliny askorbové ze vzorku jsou běžné oxidační metody zpravidla nevhodné. Oxidační činidla porušují také substráty a enzymy a rozrušují je. Redukční produkty těchto činidel, většinou dvojvazné nebo trojvazné kovové ionty často brzdí účinnost enzymů, užitých k indikační reakci. Rozrušení kyseliny askorbové kyslíkem je možno provádět pouze v silně alkalickém prostředí, např. 25 % hydroxidu sodném. Toto prostředí však rozruší substráty i enzymy.
Vynález si klade za úkol navrhnout způsob stanovení substrátů nebo enzymatické účinnosti při použití Redox-reakce tak, aby tato reakce již nebyla rušena kyselinou askorbovou.
Způsobem podle vynálezu je tento- úkol vyřešen tak, že se ke vzorku přidá askorbátoxidáza.
Askorbátoxidáza katalyzuje následující reakci:
askorbátoxidáza Kyselina askorbo-vá+1/2 O2---------> kyselina dehydroaskorbová + H2O
Podle literárních údajů, týkajících se oxidázy kyseliny askorbové by - bylo nutno očekávat, že se enzym, k uvedenému účelu nehodí. Všechny dosud získané přípravky tohoto enzymu redukují jako vedlejší reakce peroxid vodíku. Mimoto- se askorbátoxidáza velmi rychle inaktivuje vznikajícím peroxidem vodíku. (Bi-ochemical Copper Proc-eedings Symposium Harriman New York 1965, str. 305 — 337.) To- platí i pro velmi čisté přípravky, které při elektroforéze - a ultraodstředivce již -nemají žádné nečistoty. [Biochem. 4, 1362 — 1370 (1965)]. Příčinou inaktivace je -tvorba - peroxidu vodíku [Biochem. Biop-hys. Acta 56, 427 -až 439 (19612)]. Podle této citace vzniká z jedné jednotky askorbátoxidázy v roztoku kyseliny -askorbové o koncentraci 1 - mmol/litr celkem 0,7 x 10-2 mmolu/litr peroxidu vodíku. Tyto koncentrace jsou ve vzorcích často -dosaženy. - Vznikající peroxid vodíku -dále ruší enzymatickou reakci, jak je možno ukázat například na příkladu k-atalázy.
Pří provádění následující reakce
POD donor vodíku 4- H2O2----►barvivo- -|+ 2 H2O v případě fotometrického -zjištění peroxidu vodíku - dochází - při -molárním -extinkčním koeficientu přibližně 20 cm2/umol -k diferenci 0,14. Protože - rozsah měření fotometrických reakcí je 0,01 -až 1,00, je tato- chyba naprosto nepřijatelná. Stejným způsobem je rušena reakce i v tom případě, že -místo- peroxidu vodíku vznikají organické hydroperoxidy a místo POD užije hemoglobin nebo jiný katalyzátor oxidace.
Kromě toho-, že dochází k chybě, vyvolané přítomností peroxidu vodíku je z literatury také známo, - že -reakce kyseliny askorbové proběhne již dlouho- před -odstraněním této kyseliny.
Zvláště nepříznivá je tato -skutečnost při těch Red-o-x-reakcích, při nichž vzniká peroxid vodíku, protože tento -peroxid na jedné straně podporuje inaktivaci enzymu a na druhé straně vede ke - vzniku dalšího množství peroxidu působením askorbátoxldázy a tím k - naprosto- nepřehlednému průběhu reakce. Je proto překvapující, že oproti- veškerému očekávání je -možné úplně odstranit reakční chybu,- způsobenou přítomností -as korbátu přidáním askorbátoxidázy, -aniž by přitom došlo k dalším chybám, které by rušily příznivý účinek askorbázy.
Předmětem- vynálezu je tedy způsob stanovení substrátů nebo enzymatické účinnosti na bázi Redox-reakce jako měřicí - reakce, jehož -podstata spočívá -v tom, že se provádí za přítomnosti 0,002 až 100 jednotek askorbátoxidázy/ml zkušebního roztoku.
Způsob se -s výhodou užívá při reakcích, katalyzo-vaný-ch oxidázami jako jsou glukózooxidáza, urikáza, cholesteroloxidáza a podobné enzymy -a dále při reakcích, při nichž jsou redukovány tetrazoliové soli nebo při nichž dochází k reakci mezi fenolem, a nukleofilním reakčním činidlem za vzniku oxidativních -produktů. Množs-tví přidané askorbátoxidázy - se řídí podle -očekávaného množství kyseliny askorbové ve vzorku. Zpravidla se přidává 0,002 až 100, s výhodou 0,01 až 30 jednotek/ml vzorku. Hodnota- pH při reakci se řídí podle hodnoty, která je žádoucí vzhledem k použitému enzymu. Jinak je m-ožn-o reakci provádět v rozmezí 4,0 až 8,5. Zvláště výhodné je použití askorbátoxidázy z Cucurbita pepo medullosa. Je však možno užít i -askorbátoxidázu jiného původu.
Výhodné reakce -tohoto typu -obsahují v případě glukózy j-akQ1 substrátu enzymy peroxidázu, glukózooxidázu, dále o-dianisidin nebo azino-di-3-ethylbenzylthiazolinsulfonát (6) s pufrem nebo hexokinázou- glukózo-6-fosfátdehydrogenázu, diaforázu, NADP, tetrazoliovou sůl jako 3-(4-jodf-enyl)-2-(4-nitrof enyl) -5-fenyl-2H-tetrazolium.chlo-rid (INT) -a pufr. U kyseliny močové jako- substrátu sestává systém s výhodou z peroxidázy, urikázy, fenolu jako- 2,4-dichlo-rfenolu, aminoantipyrinu -a pufru. V případě stanovení glutamátu sestává systém s výhodou z glutamátdehydrogenázy, diaforázy, NAD, INT a pufru. V případě tyrosinu se užije tyrosináza, 3-methyl-6-kaliumsulfonylbenzthiazolonhydrazon, při -stanovení pyr-okatechinu se užije- difenoloxidáza, - 3-methyi-6-kaiiumsulfonylbenzthiazolonhydrazon - a -pufr.
Všechny tyto systémy ke -stanovení substrátu - jsou známé. Při provádění způsobem podle - vynálezu je však možno užít tyto- i jiné známé systémy .ke stanovení substrátu nebo· enzymu.
Způsob podle vynálezu má zvláště velký význam i při použití k rychlé diagnostice některých poruch. Přípravky pro rychlou diagnostiku obsahují -zpravidla různé reakční složky, nutné k provádění - reakce v impregnované formě - na nosiči - nebo- spolu s pojivém na nosné fólii jako- povlak. - Při výhodné formě provedení těchto reakcí se askorbát - -oxidáza přidává к reakční směsi před impregnací - nosiče. Tímto - způsobem je možno získat například -papírky, u nichž není reakce rušena kyselinou askorbovou a jichž je možno- užít ke stanovení glukózy v moči, například podle DOS 2 338 932 ke stanovení krve v moči, -například podle P 24 60 903-8 nebo- -podle něm. patentu 2 235 152 a ke sta207453 novení krve ve výkalech. Skutečnost, že askorbát-oxidáza - ve zkušebních papírcích na krev v moči je stabilní, je nanejvýš překvapující. Tyto papírky totiž obsahují přebytek organických hydroperoxidů, které by měly způsobit inaktivaci askorbátoxidázy.
Askorbátoxidázu je však možno· také nanést- na -oddělený nosič, který se pak smísí s nosičem pro zbývající reakční složky, například se převrství, stmelí -apod. Zvláště výhodným nosičem pro- askorbát -oxidázu je v tomto případě -tzv. ve vodě -rozpustný papír, například podle DOS 2 436 598, při použití barevné reakce je pak možno- výslednou barevnou změnu zvláště dobře -odečíst. Tento způsob provedení je zvláště výhodný také v tom případě, že reakční -složky -není možno přímo- mísit s -askorbátoxidázou, přičemž jde například o- silně kyselé složky, užívané například ke stanovení urobilinogenu, bilirubinu -a nitritu.
Pří svrchu uvedeném provedení se užívá až 5000, -s výhodou až 2000 jednotek askorbátoxidázy na 1 ml roztoku. Méně než 1 jednotka na 1 ml nezajistí žádaný účinek.
Způsob podle vynálezu je možno . -provádět také tak, že se nosný materiál impregnuje v oddělených zónách -askorbátoxidázou a ostatními -reakčnímí složkami. V tomto- případě se -s výhodou uvádí nosič se zkoumaným vzorkem do styku tak, že se roztok -nejprve uvede ve styk se zónou s obsahem askorbátoxidázy, a pak teprve se zónou, která obsahuje reakční složky.
Podle dalšího výhodného- provedení způ sobu podle vynálezu se askorbátoxidáza ' váže běžnými metodami pro fixaci enzymů na nerozpustné nosiče. Tyto metody jsou známy z následujících literárních údajů:
DOS 1 768 512
128 743
260 185
260 184
426 988
603 158
915 970
Způsob podle vynálezu se s výhodou užívá při -stanovení glukózy peroxidázou -a glukózooxidázou spolu s o-dianisidinem- nebo 2,2‘-azino-di-3-ethyibenzthíazolínsulfonátem (ABTS), při stanovení glukózy pomocí hexokinázy a giukózo-6-fosfátdehydrogenázy, - -přistanovení kyseliny močové - směsí fenolu, aminoantipyrinu, peroxidázy a urikázy, - ke stanovení tyrosinu nebo pyrokatechinu -při použití (4-methyl-6-kaliumsulfonylbenzthia- zolonhydrazon (SMBTH) a tyrosinázy, popřípadě difenolo-xidázy.
Vynález bude osvětlen -následujícími příklady.
Příklad 1
Stanovení glukózy -se provádí použitím o-dianisidinu, -peroxidázy (ROD) -a glukózooxidázy (GOD) ve fotometru -při vlnové délce 432 nm a 25 °C.
| Číslo kyvety | 1 | i2 | 3 | 4 | 5 |
| fosfátový -pufr pH 7;01 M | 2,5 | 2,5 | 2,5 | 2,5 | 2,5 |
| o-dianisidin 5 mg/.ml | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 |
| POD, 180 jednotek/ml | 0,05 | 0,05 | 0,05 | 0,05 | 0,05 |
| roztok glukózy 1 mg/ml | 0,03 | 0,03 | 0,03 | 0,03 | 0,03 |
| roztoky kyseliny askorbové 10 mmolů | — | 0,1 | 0,01 | 0,1 | 0,01 |
| voda | 0,12 | 0,02 | 0,11 | — | 0,09 |
| askorbátoxidáza 500 jednotek/ml | — | — | — | 0,02 | 0,02 |
| Inkubace 1 minuta při 25 °C, odečte se E(, | |||||
| pak se -přidá | |||||
| GOD 70 jednotek/ml | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | o,i |
| Inkubace 30 minut při 25 °C, -odečte -se - Ež | |||||
| a -vypočítá ΔΕ = Ег — Ei | |||||
| AE | 0,541 | 0,010 | 0,316 | 0,540 | 0,543 |
Měření v -kyvetě 1 nebylo -ničím rušeno, protože kyveta -neobsahovala kyselinu askorbovou.
Kyvety 2 -a 3 ukazují, že přítomnost 1, popřípadě 0,1 ,umolu askorbátu ruší - první zkoušku téměř úplně, ve druhém případě na
41,5 %. Kyvety 4 a - 5 ukazují, že přidáním jednotek askorbátoxidázy je možno- úplně zrušit nepříznivý vliv askorbátu.
Příklad 2
Stanovení glukózy bylo prováděno při použití 2,2‘-azino-di- [ 3-ethyibenzthí,azoll:nsulf onát(6) ] (ABTS), -POD a GOD ve fotometru při vlnové délce 432 nm a teplotě 25 °C.
| Kyveta č. | 1 - | 2 | 3 | 4 | 5 |
| fosfátový pufr pH 5,6; 0,1 M | 2,75 | 2,75 | 2,75 | 2,75 | 2,75 |
| ABTS 50 mmolů | 0,05 | 0,05 | 0,05 | 0,05 | 0,05 |
| POD 250 jednotek/ml | 0,02 | 0,02 | 0,02 | 0,02 | 0,02 |
| roztok glukózy 0,1 mg/ml | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 |
| roztok kyseliny askorbové 1 -mmol | — | 0,1 | 0,01 | 0,1 | 0,01 |
| voda | 0,12 | 0,02 | 0,11 | — | 0,09 |
| askorbátoxidáza 500 - jednotek/ml | — | — | — | 0,02 | 0,02 |
| Po inkubaci 1 minutu při 25 °C se odečte | |||||
| Et a přidá se | |||||
| GOD 70 jednotek/ml | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 |
| Po inkubaci 30 minut -při 25 °C se odečte | |||||
| Ež a vypočítá, se ΔΕ = Ez—Ei | |||||
| ΔΕ | 0,505 | 0,000 | 0,40 | 0,502 | 0,504 |
Příklad 3
Kyveta 1 odpovídá nerušenému stanovení bez askorbátu. Kyvety 2 a 3 ukazují, že 0,1 nebo- 0,01 μ-molu a-skorbátu brzdí zkoušku v prvním případě úplně, ve druhém na 21 o/o.
V kyvetě 4 -a 5 - - je zkouška s nerušeným průběhem v - důsledku toho, že - - rušivý vliv askoobá-tu v - uvedených koncentracích byl zrušen přidáním 10 jednotek askorbátoxidázy.
Stanovení kyseliny -močové bylo prováděno -směsí fenolu, ' -aminoantipyrinu, POD a urí' kázy v automatickém analyzátoru (AutoAnalyzer ).
Princip zkoušky urikáza
Kyselina močová + O2- + H2O----> allant-oi-n- + H2O2
POD
H2O2 + 2,4-dichlorfen-ol + 4-a.mmoaatipyrin---- chinoidní barvivo· + 2 H2O .
Výroba roztoků
1, Reakční činidlo s obsahem askorbátoxidázy
V 600 ml bidestilované vody se -rozpustí obsah standardizované lahvičky. Přidá se 0,3 ml přípravku Brij-35. Směs je skladovatelná ve tmavém skle při teplotě 4 °C 4 týdny při teplotě 25 °C 1 týden.
2. Reakční činidlo- s obsahem- urikázy
V 800 ml bidestilované vody se rozpustí obsah standardizované lahvičky 2. Přidá se 2,0 - m-l přípravku Brij-35. Roztok je stálý v tmavém -skle při teplotě 4 °C 4 týdny, při teplotě 25 °C 1 týden.
Koncentrace roztoku
1. 50 mmolů fosfátového pufru o- pH 5,6
Askorbátoxid^áza v množství stejném- nebo větším vzhledem k množství, které vyplývá z obr. 2.
2. 31 molů tris/Oyselins citrónová o- pH 8,9 urikáza v množství 0,08 jednotek/ml nebo větším POD v množství 0,15 jednotek/ml nebo větším
3,0 mmolů 2,4-dichlo-rfenolu,
4,0 mmolů 4-amin-oantipyrinu
K provedení - zkoušky- se užije systému automatického zařízení z obr. 1.
Toto zařízení sestává z přívodu 1 pro vzduch, - přívodu 2 pro vzorek, přívodu 3, pro svrchu uvedené reakční činidlo 1, -přívodu 4 pro- vzduch a přívodu 5 pro- reakční činidlo- 2. Za těmito přívody je zařazen dialyzátor 6 -a za ním- reakční trubice 7, na jejímž konci se nachází fotometr 8 pro měření příslušných hodnot.
Přívodem 1 -se přivádí 0,32 ml vzduchu za minutu, přívodem 2 0,23 ml vzorku - za- ' minutu, přívodem 3 0,6 ml reakčního činidls 2 za minutu, přívodem - '4 0,32 ml - vzduchu za minutu a přívodem· 5 - 1,0 ml reakčního činidla 2 za minutu.
Výsledky zkoušek jsou graficky znázorněny na obr. 2.
Na obr. 2 jsou na ose -pořadnic znázorněny mg kyseliny močové- ve 100 ml, na ose úseček -mg kyseliny askorbové na 100 ml.
Jednotlivé křivky mají následující význam: křivka 1:
pu.fr bez asborbátoxídázy křivka 2:
0,056 jednotek/ml askorbátoxidázy křivka 3:
0,112 jednotek/ml askorbátoxidázy křivka 4:
0,225 jednotek/ml askorbátoxidázy křivka 5:
0,45 jednotek/ml askorbátoxidázy křivka 6:
0,67 jednotek/ml askorbátoxidázy křivka 7:
0,9 jednotek/ml askorbátoxidázy.
Příklad 4
Glukóza se stanoví směsí HK/G6P-DH, NADP, INT a diaforázy ve fotometru. Měře ní se provádí při vlnové délce 492 nm a - př.i inkubační 'teplotě 25 °C.
Výsledky jsou . uvedeny v -následující tabulce.
Kyveta číslo fosfátový pufr o pH 7,5, 0,1 molu NADP/INT vždy 1 -mg/ml diaforáza 5 jednote-k/ml glukóza 0,05 mg/ml roztok askorbátu 10 mmolů askorbáto-xidáza 35 jednotek/ml voda
Po- inkubaci 3 minut při 25 °C se odečte Ei a přidá se
HK/G6P-DH-roztok 56 je-dn-otek/ml Po- 15 minutách .inkubace se odečte Ez a vypočítá Δ E = Ez — Ei
ΔΕ
Kyveta 1 znamená -nerušené měření.
Kyveta 2 znamená rušení zkoušky přítomností 0,01 umolu a-skorbátu na 34 % při tvorbě sraženiny, v kyvetě 3 je tento nepříznivý vliv zcela -odstraněn přidáním. 1 jednotky askorbátoxidázy.
| 1 | 2 | 3 |
| 1,7 - | 1,7 | 1,7 |
| 0,1 | 0,1 | 0,1 |
| 0,1 | 0,1 | 0,1 |
| 0,1 | 0,1 | 0,1 |
| — | 0,01 | 0,01 |
| — | — | 0,03 |
| 0,04 | 0,03 | — |
| 0,05 | 0,05 | 0,05 |
| 0,234 | 0,307 | 0,230 |
| Příklad 5 | ||
| Stanovení | glutamátu | se provádí směsí |
G1DH, - NAD/INT/diafo-rázy ' ve fotometru při vlnové délce 492 nm a teplotě 25 °C.
| Kyveta číslo | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| fosfátový pufr pH 5,6, -0,01 mmolů roztok glutamátu | 1,30 | 1,20 | 1,29 | 1,18 | 1,27 |
| 0,2 mg/ml | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 | 0,1 |
| roztok askorbátu 5 mmolů askorbátoxidáza | — | 0,1 | 0,01 | 0,1 | 0,01 |
| 100 jednotek/ml | — | — | — | 0,02 | 0,02 |
| Po inkubaci 3 -minuty při 25 °C | se -do kyvet přidá | ||||
| 0,2 molu TRA, 0,05 molu fosfo- | |||||
| rečnanu draselného- -o- pH 8,6 s 1,5 % T.riton-X-100 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 | 1,0 |
| roztok NAD 5 mg/ml roztok Уiafzrázy | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,2 | 0,2 |
| 10 jednotek/ml | 0,05 | 0,05 | 0,05 | 0,05 | 0,05 |
| G1DI-I 1000 jednotek/ml Odečte se Ei, přidá se | 0,05 | 0,05 | 0,05 | 0,05 | 0,05 |
| roztok INT 2 mg/ml | 0,05 | 0,05 | 0,05 | 0,05 | 0,05 |
| po inkubaci 15 minut při 25 °C Δ E = Ez — Ei | se odečte | E2 a -vypočítá se | |||
| ΔΕ | 0,184 | 1,560 | 0,380 | 0,186 | 0,182 |
Kyveta 1 odpovídá nerušenému měření.
Z výsledků kyvet 2 a 3 je zřejmé, že 0,5 nebo 0,05 /^i^olu askorbátu ruší test na 100 procent při tvorbě sraženiny.
V kyvetách 4 a 5 dojde k úplnému odstranění -tohoto· -rušivého účinku přidáním 2 jednotek askorbátoxidázy.
P-íklad 6
Stanovení tyrosinu se provádí směsí 3-me-thyl-6-klaluim.sulfo.nyieenzthi.zz'Ol.nnhyda.zzonu (2) (SMBTH) a tyrosináz-y ve fotometru při vlnové délce 492 nm -a teplotě 25 °C.
Kyveta číslo
3 fosfátový pufr, pH 5,2, 0,25 molu
SMBTH 0,1 molu kyselina askorbová 10 ' mmolů voda askorbát oxidáza 500 jednotek/ml tyrosináza 60 jednotek/ml
Po inkubaci 1 minutu při 25 CC se odečte Ei a přidá se tyrosin 2 mmoly
Po inkubaci 1 hodinu . při -25 °C se odečte Ez a vypočítá - se Δ E = Ez — Ei
ΔΕ
Kyveta 1 odpovídá nerušenému měření v kyvetě 2, sníží 1 ^mol askorbátu teoretickou hodnotu o 35 %, v kyvetě 3 je tato chyba zcela odstraněna přidáním 10 jednotek askorbátoxidázy.
Kyveta číslo fosfátový pufr, 0,25 molu, pH 5,2 SMBTH 0,1 pyrokatechin 0,5 molu roztok askorbátu 20 - mmolů askorbátoxidáza 500 jednotek/ml Po 1 minutě inkubace při 25 °C se odečte Ei a přidá se difenoloxidáza- 200 jednotek/ml
Po- 17 minutách inkubace při 25 °C se odečte Ez a vypočítá se Δ E = Ez — Ei
ΔΕ
Kyveta 1 . odpovídá nerušenému měření.
V kyvetě 2 sníží 2 /xmoly askorbátu teoretickou hodnotu o 47 %, toto- snížení je v kyvetě 3 zcela odstraněno přidáním 10 jednotek askorbát-oxidázy.
Příklad 8
Testovací papírky ke stanovení glukózy v moči
Filtrační papír se ponoří do roztoku následujícího složení a pak se suší při 50 °C.
1,2 M citrátového pufru o· pH 5 50,0 ml
9- (χ-dimethylaniinooropyll -6-chlor-d-dminokaabazoIdihydíOchlorid 0,75g glukózooxidáza 104 jednotek/mg 0,25 g peroxidáza 63 jednotek/mg 0,05g askoobátoxidáza 100 -jednotek/mg 1,00 g voda 100,00ml
Papírek se po- styku -s močí, -obsahující glukózu zbarví č^rvenooranžově až červenočerveně. Po- reakční době 2 minuty dávají moce s obsahem glukózy -a kyseliny askorbové až do- koncentrace 150 mg/dl totéž zbarvení.
Při použití papírků téhož složení bez askoobátoxidázy je podle obsahu glukózy reakční zbarvení -při koncentraci kyseliny as-
| 2,77 | 2,77 | 2,77 |
| 0,05 | 0,05 | 0,05 |
| — | 0,1 | 0,1 |
| 0,12 | 0,02 | |
| — | — | 0,02 |
| 0,05 | 0,05 | 0,05 |
| 0,05 | 0,05 | 0,05 |
| 1,113 | 0,728 | 1,100 |
| Příklad 7 |
Stanovení pyrokatechinu se provádí směsí SMBTH a -difenoloxidázy.
1-2 3
| 2,80 | 2,70 | 2,68 |
| 0,05 | 0,05 | 0,05 |
| 0,10 | 0,10· | 0,10 |
| — | 0,1 | 0,1 |
| — | — | 0,02 |
| 0,05 | 0,05 | 0,05 |
| 0,890 | 0,485 | 0,896 |
korbové od 50 mg/dl oslabeno nebo zcela potlačeno.
Příklad 9
Zkušební papírky ke stanovení krve v moči
Filtrační papír se impregnuje následujícím roztokem a -pak se suší při 40- °C.
Roztok 1
1,2 M citrOtovéhopyffIl o· ppi 2,55 35,0 пП disodná sůl kyseliny etУyleodiamiotehraoctové0,- g dloktylnatriumsulfosu.kcioá,t0,5 g
2,5-dimethylhexan-2,5-diУydroιyeooxid (70 %) 1,6g trimorfolid kyseliny fosforečné 12,7 - g askorbátoxidáza 100 jednotek/mg 0,3 g methanol 30,0ml voda do 100,0ml
Roztok 2
5,5‘,5,5‘-tetrametУylbelozidio 0,3g fenanthridin 0,2g toluol/yetoolehheo (30 : 70) do- 100,0ml
Při použití- tohoto papírku je možno zjistit přítomnost 5 červených - krvinek v 1 -mm?
v -moči i za přítomnosti· 30 až 50 mg kyseliny askorbové na 100 ml. Při použití papírku téhož složení bez askorbátoxidázy není možno průkaz provádět již za přítomnosti 10 až 20 mg kyseliny askorbové/100 ml moči.
P ř í k · 1 a d 10
Zkušební papírek A
Papírek z -příkladu 9 bez -askorbátoxidázy.
Zkušební papírek B
Ve vodě -rozpustný papír z karboxymethylcelulózy o plošné váze 60 g/m2 se nasytí roztokem 20% ledové kyseliny octové v methanolu za účelem neutralizace. Pak se papírek postříká vodným roztokem askorbátoxidázy -o -koncentraci 103 jednot-ek/ml a usuší se.
Zkušební papírek B se položí na papírek A a -oba- papírky se na -sebe nataví pomocí polyesterové fólie a nylonové sítě. Zkoumaný vzorek moči se kape na takto- vzniklé proužky.
Byly získány tytéž výsledky jako v příkladu 9.
Příklad 11
Zkušební papírek ke zjištění krve ve stolici
Filtrační papír se postupně nasytí -následujícími roztoky ia suší -při teplotě 40 °C.
Roztok 1
1,2 M citrátový pufr o· pH 5,25 10 - ml askorbátoxidáza 100 jednotek/mg 0,3 g voda do 100,0 ml
Roztok 2 guajaková pryskyřice 3 g toluol do- 100,0 ml
Roztok se zfiltruje -a filtrát s-e užije k impregnaci filtračního· papíru.
Získá se zkušební papírek, na nějž se nanese vzorek stolice. V případě, že se na zadní stranu papírku nanese 3% vodný roztok peroxidu -vodíku, vytvoří se modré zbarvení v případě, že stolice obsahuje alespoň 2 % krve. Toto· zbarvení -se vyvine také za -přítomnosti kyseliny askorbové v množství 15 mg/100 g, -kdežto- při- použití zkušebního- papírku bez askorbátoxidázy se zbarvení vůbec nevyvine.
Claims (6)
- pRedmět vynalezu1. Způsob stanovení substrátů nebo- enzymatické účinnosti na bázi Redox-reakce jako měřicí reakce, vyznačující se tím, že se postup provádí za přítomnosti 0,002 až 100 jednotek askorbátoxidázy/ml zkušebního roztoku.
- 2. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se reakce provádí za -přítomnosti askorbátoxidázy -a- enzymu, vytvářejícího peroxid vodíku, například urikázy, glukózooxidázy nebo- cholesteroloxidázy.
- 3. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se reakce provádí za - přítomnosti askorbátoxidázy a tetrazoliové soli.
- 4. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se reakce provádí v přítomnosti askorbátoxidázy a fenolu, který se popřípadě podrobí oxidativní reakci s nukleofilními činidly.
- 5. Způsob podl-e bodů 1 až 4, vyznačující se tím, že se provádí při pH 4,0 až 8,5.
- 6. Způsob podle bodů 1 až 5, vyznačující se tím, že se reakce provádí za přítomnosti askorbátoxidázy z Cucurbita pepo- medullosa.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE2625834A DE2625834B2 (de) | 1976-06-09 | 1976-06-09 | Verfahren zur Bestimmung von Substraten oder Enzymaktivitäten |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS207453B2 true CS207453B2 (en) | 1981-07-31 |
Family
ID=5980154
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS773018A CS207453B2 (en) | 1976-06-09 | 1977-05-06 | Method of determination of substrates or enzymatic effectiveness |
| CS781874A CS235068B2 (en) | 1976-06-09 | 1977-05-06 | Agent for enzymatic determination of substrates |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS781874A CS235068B2 (en) | 1976-06-09 | 1977-05-06 | Agent for enzymatic determination of substrates |
Country Status (29)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4168205A (cs) |
| JP (1) | JPS52150692A (cs) |
| AR (1) | AR212763A1 (cs) |
| AT (1) | AT354640B (cs) |
| AU (1) | AU500988B2 (cs) |
| BE (1) | BE854407A (cs) |
| BR (1) | BR7703008A (cs) |
| CA (1) | CA1084393A (cs) |
| CH (1) | CH633887A5 (cs) |
| CS (2) | CS207453B2 (cs) |
| DD (1) | DD130178A5 (cs) |
| DE (1) | DE2625834B2 (cs) |
| DK (1) | DK144949C (cs) |
| ES (1) | ES458544A1 (cs) |
| FI (1) | FI60719C (cs) |
| FR (1) | FR2354561A1 (cs) |
| GB (1) | GB1519134A (cs) |
| HU (1) | HU172931B (cs) |
| IE (1) | IE45546B1 (cs) |
| IL (1) | IL52047A (cs) |
| IT (1) | IT1075527B (cs) |
| LU (1) | LU77290A1 (cs) |
| NL (1) | NL169503C (cs) |
| NO (1) | NO148340C (cs) |
| PL (2) | PL109224B1 (cs) |
| SE (1) | SE426601B (cs) |
| SU (1) | SU797592A3 (cs) |
| YU (1) | YU114477A (cs) |
| ZA (1) | ZA772716B (cs) |
Families Citing this family (115)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2834705B1 (de) * | 1978-08-08 | 1980-01-24 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren und Reagenz zur Durchfuehrung enzymatischer Bestimmungen |
| DE2907628C2 (de) * | 1979-02-27 | 1981-02-05 | C.A. Greiner Und Soehne Gmbh & Co Kg, 7440 Nuertingen | Proberöhrchen für die Untersuchung von Proben im klinischen Bereich, insbesondere von Urinproben |
| DE2914487A1 (de) * | 1979-04-10 | 1980-10-30 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren und mittel zur entfernung von ascorbinsaeure aus waessrigen fluessigkeiten |
| JPS56109595A (en) * | 1980-02-01 | 1981-08-31 | Wako Pure Chem Ind Ltd | Removal of reductive inhibitor |
| DE3012368C2 (de) * | 1980-03-29 | 1982-04-15 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Verfahren und diagnostische Mittel zum Nachweis von Redox-Reaktionen |
| DE3012314A1 (de) * | 1980-03-29 | 1981-10-15 | W. Schlafhorst & Co, 4050 Mönchengladbach | Offenend-spinnvorrichtung |
| US4310626A (en) * | 1980-06-02 | 1982-01-12 | Miles Laboratories, Inc. | Interference-resistant composition, device and method for determining a peroxidatively active substance in a test sample |
| DE3046741A1 (de) * | 1980-12-11 | 1982-07-15 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Nachweis von nad(p)h oder salicylat |
| DE3249743C2 (cs) * | 1982-02-18 | 1990-10-04 | Amano Pharmaceutical Co., Ltd., Nagoya, Aichi, Jp | |
| US4587220A (en) * | 1983-03-28 | 1986-05-06 | Miles Laboratories, Inc. | Ascorbate interference-resistant composition, device and method for the determination of peroxidatively active substances |
| DE3313178A1 (de) * | 1983-04-12 | 1984-10-18 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Verfahren zur enzymatischen bestimmung von sulfit |
| JPS59230161A (ja) * | 1983-06-13 | 1984-12-24 | Wako Pure Chem Ind Ltd | 還元性物質の分解方法及び分解用試薬 |
| US5002893A (en) * | 1985-09-19 | 1991-03-26 | Isolab, Inc. | Single color reading method for determining fructosamine |
| US5196314A (en) * | 1986-04-04 | 1993-03-23 | Boehringer Mannheim Gmbh | Process and reagent for the determination of substrates or enzyme activities |
| DE3611227A1 (de) * | 1986-04-04 | 1987-10-08 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren und reagenz zur bestimmung von substraten oder enzymaktivitaeten |
| DE3620817A1 (de) * | 1986-06-21 | 1987-12-23 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren zur spezifischen bestimmung des serumfructosamingehalts sowie hierfuer geeignetes reagenzgemisch |
| US4885240A (en) * | 1986-09-04 | 1989-12-05 | Eastman Kodak Company | Use of organic buffers to reduce dehydroascorbic acid interference in analytical methods |
| US5456932A (en) * | 1987-04-20 | 1995-10-10 | Fuisz Technologies Ltd. | Method of converting a feedstock to a shearform product and product thereof |
| US5387431A (en) * | 1991-10-25 | 1995-02-07 | Fuisz Technologies Ltd. | Saccharide-based matrix |
| US5320725A (en) * | 1989-08-02 | 1994-06-14 | E. Heller & Company | Electrode and method for the detection of hydrogen peroxide |
| US5264104A (en) * | 1989-08-02 | 1993-11-23 | Gregg Brian A | Enzyme electrodes |
| US5264105A (en) * | 1989-08-02 | 1993-11-23 | Gregg Brian A | Enzyme electrodes |
| CA2028625A1 (en) * | 1990-07-05 | 1992-01-06 | Daniel S. Daniel | Ethanol analytical element |
| US5593852A (en) | 1993-12-02 | 1997-01-14 | Heller; Adam | Subcutaneous glucose electrode |
| US5262305A (en) * | 1991-03-04 | 1993-11-16 | E. Heller & Company | Interferant eliminating biosensors |
| JPH04278450A (ja) * | 1991-03-04 | 1992-10-05 | Adam Heller | バイオセンサー及び分析物を分析する方法 |
| JPH07500242A (ja) * | 1991-05-17 | 1995-01-12 | フィズ テクノロジーズ リミテッド | 酵素系 |
| US5576042A (en) * | 1991-10-25 | 1996-11-19 | Fuisz Technologies Ltd. | High intensity particulate polysaccharide based liquids |
| WO1993011750A1 (en) * | 1991-12-17 | 1993-06-24 | Fuisz Technologies Ltd. | Ulcer prevention and treatment composition and method |
| US5346377A (en) * | 1993-10-07 | 1994-09-13 | Fuisz Technologies Ltd. | Apparatus for flash flow processing having feed rate control |
| US5445769A (en) * | 1994-06-27 | 1995-08-29 | Fuisz Technologies Ltd. | Spinner head for flash flow processing |
| US5582855A (en) * | 1994-07-01 | 1996-12-10 | Fuisz Technologies Ltd. | Flash flow formed solloid delivery systems |
| US5556652A (en) * | 1994-08-05 | 1996-09-17 | Fuisz Technologies Ltd. | Comestibles containing stabilized highly odorous flavor component delivery systems |
| JP2838866B2 (ja) * | 1995-05-10 | 1998-12-16 | 株式会社同仁化学研究所 | 酸化発色分析における還元物質の活性抑制方法 |
| US5587198A (en) * | 1995-05-31 | 1996-12-24 | Fuisz Technologies Ltd. | Positive hydration method of preparing confectionery and product therefrom |
| US5989845A (en) | 1996-04-05 | 1999-11-23 | Mercury Diagnostics, Inc. | Diagnostic compositions and devices utilizing same |
| US6040151A (en) * | 1998-03-10 | 2000-03-21 | Mercury Diagnostics, Inc. | Diagnostic compositions and devices utilizing same |
| US5776719A (en) * | 1997-07-07 | 1998-07-07 | Mercury Diagnostics, Inc. | Diagnostic compositions and devices utilizing same |
| US5824491A (en) * | 1996-05-17 | 1998-10-20 | Mercury Diagnostics, Inc. | Dry reagent test strip comprising benzidine dye precursor and antipyrine compound |
| AU6157898A (en) | 1997-02-06 | 1998-08-26 | E. Heller & Company | Small volume (in vitro) analyte sensor |
| US6103033A (en) | 1998-03-04 | 2000-08-15 | Therasense, Inc. | Process for producing an electrochemical biosensor |
| US6134461A (en) | 1998-03-04 | 2000-10-17 | E. Heller & Company | Electrochemical analyte |
| US8480580B2 (en) | 1998-04-30 | 2013-07-09 | Abbott Diabetes Care Inc. | Analyte monitoring device and methods of use |
| US6949816B2 (en) | 2003-04-21 | 2005-09-27 | Motorola, Inc. | Semiconductor component having first surface area for electrically coupling to a semiconductor chip and second surface area for electrically coupling to a substrate, and method of manufacturing same |
| US6175752B1 (en) | 1998-04-30 | 2001-01-16 | Therasense, Inc. | Analyte monitoring device and methods of use |
| US9066695B2 (en) | 1998-04-30 | 2015-06-30 | Abbott Diabetes Care Inc. | Analyte monitoring device and methods of use |
| US8346337B2 (en) | 1998-04-30 | 2013-01-01 | Abbott Diabetes Care Inc. | Analyte monitoring device and methods of use |
| US8974386B2 (en) | 1998-04-30 | 2015-03-10 | Abbott Diabetes Care Inc. | Analyte monitoring device and methods of use |
| US8688188B2 (en) | 1998-04-30 | 2014-04-01 | Abbott Diabetes Care Inc. | Analyte monitoring device and methods of use |
| US8465425B2 (en) | 1998-04-30 | 2013-06-18 | Abbott Diabetes Care Inc. | Analyte monitoring device and methods of use |
| US6251260B1 (en) | 1998-08-24 | 2001-06-26 | Therasense, Inc. | Potentiometric sensors for analytic determination |
| US6338790B1 (en) | 1998-10-08 | 2002-01-15 | Therasense, Inc. | Small volume in vitro analyte sensor with diffusible or non-leachable redox mediator |
| US6591125B1 (en) | 2000-06-27 | 2003-07-08 | Therasense, Inc. | Small volume in vitro analyte sensor with diffusible or non-leachable redox mediator |
| EP1192269A2 (en) | 1999-06-18 | 2002-04-03 | Therasense, Inc. | MASS TRANSPORT LIMITED i IN VIVO /i ANALYTE SENSOR |
| US6616819B1 (en) | 1999-11-04 | 2003-09-09 | Therasense, Inc. | Small volume in vitro analyte sensor and methods |
| US6560471B1 (en) | 2001-01-02 | 2003-05-06 | Therasense, Inc. | Analyte monitoring device and methods of use |
| WO2002078512A2 (en) | 2001-04-02 | 2002-10-10 | Therasense, Inc. | Blood glucose tracking apparatus and methods |
| US7381184B2 (en) | 2002-11-05 | 2008-06-03 | Abbott Diabetes Care Inc. | Sensor inserter assembly |
| EP2305812A3 (en) * | 2002-11-14 | 2012-06-06 | Dharmacon, Inc. | Fuctional and hyperfunctional sirna |
| WO2004061420A2 (en) | 2002-12-31 | 2004-07-22 | Therasense, Inc. | Continuous glucose monitoring system and methods of use |
| US8066639B2 (en) | 2003-06-10 | 2011-11-29 | Abbott Diabetes Care Inc. | Glucose measuring device for use in personal area network |
| USD902408S1 (en) | 2003-11-05 | 2020-11-17 | Abbott Diabetes Care Inc. | Analyte sensor control unit |
| CA2556331A1 (en) | 2004-02-17 | 2005-09-29 | Therasense, Inc. | Method and system for providing data communication in continuous glucose monitoring and management system |
| US9788771B2 (en) | 2006-10-23 | 2017-10-17 | Abbott Diabetes Care Inc. | Variable speed sensor insertion devices and methods of use |
| US9259175B2 (en) | 2006-10-23 | 2016-02-16 | Abbott Diabetes Care, Inc. | Flexible patch for fluid delivery and monitoring body analytes |
| US7883464B2 (en) | 2005-09-30 | 2011-02-08 | Abbott Diabetes Care Inc. | Integrated transmitter unit and sensor introducer mechanism and methods of use |
| US10226207B2 (en) | 2004-12-29 | 2019-03-12 | Abbott Diabetes Care Inc. | Sensor inserter having introducer |
| US7731657B2 (en) | 2005-08-30 | 2010-06-08 | Abbott Diabetes Care Inc. | Analyte sensor introducer and methods of use |
| US8571624B2 (en) | 2004-12-29 | 2013-10-29 | Abbott Diabetes Care Inc. | Method and apparatus for mounting a data transmission device in a communication system |
| US9743862B2 (en) | 2011-03-31 | 2017-08-29 | Abbott Diabetes Care Inc. | Systems and methods for transcutaneously implanting medical devices |
| US9572534B2 (en) | 2010-06-29 | 2017-02-21 | Abbott Diabetes Care Inc. | Devices, systems and methods for on-skin or on-body mounting of medical devices |
| US8333714B2 (en) | 2006-09-10 | 2012-12-18 | Abbott Diabetes Care Inc. | Method and system for providing an integrated analyte sensor insertion device and data processing unit |
| US8512243B2 (en) | 2005-09-30 | 2013-08-20 | Abbott Diabetes Care Inc. | Integrated introducer and transmitter assembly and methods of use |
| US20090105569A1 (en) | 2006-04-28 | 2009-04-23 | Abbott Diabetes Care, Inc. | Introducer Assembly and Methods of Use |
| US9351669B2 (en) | 2009-09-30 | 2016-05-31 | Abbott Diabetes Care Inc. | Interconnect for on-body analyte monitoring device |
| US7697967B2 (en) | 2005-12-28 | 2010-04-13 | Abbott Diabetes Care Inc. | Method and apparatus for providing analyte sensor insertion |
| US9398882B2 (en) | 2005-09-30 | 2016-07-26 | Abbott Diabetes Care Inc. | Method and apparatus for providing analyte sensor and data processing device |
| US8112240B2 (en) | 2005-04-29 | 2012-02-07 | Abbott Diabetes Care Inc. | Method and apparatus for providing leak detection in data monitoring and management systems |
| US9521968B2 (en) | 2005-09-30 | 2016-12-20 | Abbott Diabetes Care Inc. | Analyte sensor retention mechanism and methods of use |
| US7766829B2 (en) | 2005-11-04 | 2010-08-03 | Abbott Diabetes Care Inc. | Method and system for providing basal profile modification in analyte monitoring and management systems |
| WO2007120363A2 (en) | 2005-12-28 | 2007-10-25 | Abbott Diabetes Care, Inc. | Medical device insertion |
| US11298058B2 (en) | 2005-12-28 | 2022-04-12 | Abbott Diabetes Care Inc. | Method and apparatus for providing analyte sensor insertion |
| US7885698B2 (en) | 2006-02-28 | 2011-02-08 | Abbott Diabetes Care Inc. | Method and system for providing continuous calibration of implantable analyte sensors |
| US8226891B2 (en) | 2006-03-31 | 2012-07-24 | Abbott Diabetes Care Inc. | Analyte monitoring devices and methods therefor |
| US7620438B2 (en) | 2006-03-31 | 2009-11-17 | Abbott Diabetes Care Inc. | Method and system for powering an electronic device |
| US20080064937A1 (en) | 2006-06-07 | 2008-03-13 | Abbott Diabetes Care, Inc. | Analyte monitoring system and method |
| US8732188B2 (en) | 2007-02-18 | 2014-05-20 | Abbott Diabetes Care Inc. | Method and system for providing contextual based medication dosage determination |
| US8930203B2 (en) | 2007-02-18 | 2015-01-06 | Abbott Diabetes Care Inc. | Multi-function analyte test device and methods therefor |
| US8123686B2 (en) | 2007-03-01 | 2012-02-28 | Abbott Diabetes Care Inc. | Method and apparatus for providing rolling data in communication systems |
| US8461985B2 (en) | 2007-05-08 | 2013-06-11 | Abbott Diabetes Care Inc. | Analyte monitoring system and methods |
| US7928850B2 (en) | 2007-05-08 | 2011-04-19 | Abbott Diabetes Care Inc. | Analyte monitoring system and methods |
| US8456301B2 (en) | 2007-05-08 | 2013-06-04 | Abbott Diabetes Care Inc. | Analyte monitoring system and methods |
| US8665091B2 (en) | 2007-05-08 | 2014-03-04 | Abbott Diabetes Care Inc. | Method and device for determining elapsed sensor life |
| WO2008150917A1 (en) | 2007-05-31 | 2008-12-11 | Abbott Diabetes Care, Inc. | Insertion devices and methods |
| JP5216968B2 (ja) * | 2007-08-07 | 2013-06-19 | 株式会社シノテスト | テトラゾリウム化合物を色原体として用いる試料中の測定対象物質の測定方法及び測定試薬、非特異的発色を抑制する方法、並びに非特異的発色抑制剤 |
| US8103456B2 (en) | 2009-01-29 | 2012-01-24 | Abbott Diabetes Care Inc. | Method and device for early signal attenuation detection using blood glucose measurements |
| US9402544B2 (en) | 2009-02-03 | 2016-08-02 | Abbott Diabetes Care Inc. | Analyte sensor and apparatus for insertion of the sensor |
| US20100213057A1 (en) | 2009-02-26 | 2010-08-26 | Benjamin Feldman | Self-Powered Analyte Sensor |
| US9226701B2 (en) | 2009-04-28 | 2016-01-05 | Abbott Diabetes Care Inc. | Error detection in critical repeating data in a wireless sensor system |
| WO2011026147A1 (en) | 2009-08-31 | 2011-03-03 | Abbott Diabetes Care Inc. | Analyte signal processing device and methods |
| US8993331B2 (en) | 2009-08-31 | 2015-03-31 | Abbott Diabetes Care Inc. | Analyte monitoring system and methods for managing power and noise |
| US9320461B2 (en) | 2009-09-29 | 2016-04-26 | Abbott Diabetes Care Inc. | Method and apparatus for providing notification function in analyte monitoring systems |
| USD924406S1 (en) | 2010-02-01 | 2021-07-06 | Abbott Diabetes Care Inc. | Analyte sensor inserter |
| AU2011269796A1 (en) | 2010-03-24 | 2012-02-16 | Abbott Diabetes Care Inc. | Medical device inserters and processes of inserting and using medical devices |
| US11064921B2 (en) | 2010-06-29 | 2021-07-20 | Abbott Diabetes Care Inc. | Devices, systems and methods for on-skin or on-body mounting of medical devices |
| WO2013070794A2 (en) | 2011-11-07 | 2013-05-16 | Abbott Diabetes Care Inc. | Analyte monitoring device and methods |
| AU2012352560B2 (en) | 2011-12-11 | 2017-01-19 | Abbott Diabetes Care Inc. | Analyte sensor devices, connections, and methods |
| CN104131765A (zh) * | 2014-07-22 | 2014-11-05 | 哈尔滨盛世华林科技有限公司 | 一种门底自动密封条 |
| US10674944B2 (en) | 2015-05-14 | 2020-06-09 | Abbott Diabetes Care Inc. | Compact medical device inserters and related systems and methods |
| US10213139B2 (en) | 2015-05-14 | 2019-02-26 | Abbott Diabetes Care Inc. | Systems, devices, and methods for assembling an applicator and sensor control device |
| EP3570735A4 (en) | 2017-01-23 | 2020-10-21 | Abbott Diabetes Care Inc. | SYSTEMS, DEVICES AND METHODS FOR INSERTING ANALYTE SENSOR |
| CN108872220B (zh) * | 2018-07-11 | 2020-03-24 | 深圳华创生物医药科技有限公司 | 一种无汞对羟基苯丙氨酸检测试剂及制备方法和应用 |
| JP6703722B1 (ja) * | 2019-10-16 | 2020-06-03 | 株式会社エンザイム・センサ | Ｌ−グルタミンの測定方法、及びそのためのキット |
| US11759914B2 (en) | 2020-08-06 | 2023-09-19 | Mate Precision Technologies Inc. | Vise assembly |
| WO2022032148A1 (en) | 2020-08-06 | 2022-02-10 | Mate Precision Technologies Inc. | Tooling base assembly |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3411887A (en) * | 1964-06-15 | 1968-11-19 | Miles Lab | Diagnostic composition |
| AT308049B (de) * | 1970-08-28 | 1973-06-25 | Boehringer Mannheim Gmbh | Reagens zur Glucosebestimmung |
| JPS5033795B1 (cs) * | 1970-11-25 | 1975-11-04 | ||
| US3791988A (en) * | 1972-03-23 | 1974-02-12 | Hoffmann La Roche | Diagnostic test for glucose |
| US3992158A (en) * | 1973-08-16 | 1976-11-16 | Eastman Kodak Company | Integral analytical element |
| FR2280081A1 (fr) * | 1974-07-23 | 1976-02-20 | Kodak Pathe | Produit composite unitaire pour l'analyse chimique ou biologique |
-
1976
- 1976-06-09 DE DE2625834A patent/DE2625834B2/de active Granted
-
1977
- 1977-04-04 AT AT234077A patent/AT354640B/de not_active IP Right Cessation
- 1977-04-13 IE IE764/77A patent/IE45546B1/en not_active IP Right Cessation
- 1977-04-13 CA CA276,113A patent/CA1084393A/en not_active Expired
- 1977-04-25 AR AR267337A patent/AR212763A1/es active
- 1977-04-27 NL NLAANVRAGE7704591,A patent/NL169503C/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-04-28 FI FI771356A patent/FI60719C/fi not_active IP Right Cessation
- 1977-04-28 US US05/792,073 patent/US4168205A/en not_active Expired - Lifetime
- 1977-04-29 GB GB17993/77A patent/GB1519134A/en not_active Expired
- 1977-05-03 IT IT77@@A patent/IT1075527B/it active
- 1977-05-05 YU YU01144/77A patent/YU114477A/xx unknown
- 1977-05-06 SU SU772481956A patent/SU797592A3/ru active
- 1977-05-06 IL IL52047A patent/IL52047A/xx unknown
- 1977-05-06 CS CS773018A patent/CS207453B2/cs unknown
- 1977-05-06 JP JP5195377A patent/JPS52150692A/ja active Granted
- 1977-05-06 CS CS781874A patent/CS235068B2/cs unknown
- 1977-05-06 HU HU77BO00001667A patent/HU172931B/hu unknown
- 1977-05-06 NO NO771599A patent/NO148340C/no unknown
- 1977-05-06 ZA ZA00772716A patent/ZA772716B/xx unknown
- 1977-05-06 SE SE7705303A patent/SE426601B/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-05-06 PL PL1977197927A patent/PL109224B1/pl unknown
- 1977-05-06 ES ES458544A patent/ES458544A1/es not_active Expired
- 1977-05-06 CH CH571277A patent/CH633887A5/de not_active IP Right Cessation
- 1977-05-06 PL PL1977217830A patent/PL114343B1/pl unknown
- 1977-05-09 BR BR7703008A patent/BR7703008A/pt unknown
- 1977-05-09 DD DD7700198825A patent/DD130178A5/xx unknown
- 1977-05-09 BE BE177392A patent/BE854407A/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-05-09 AU AU25021/77A patent/AU500988B2/en not_active Expired
- 1977-05-09 LU LU77290A patent/LU77290A1/xx unknown
- 1977-05-09 DK DK202677A patent/DK144949C/da not_active IP Right Cessation
- 1977-05-09 FR FR7714090A patent/FR2354561A1/fr active Granted
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CS207453B2 (en) | Method of determination of substrates or enzymatic effectiveness | |
| CA1339058C (en) | Process and agent for the colorimetric determination of an analyte by means of enzymatic oxidation | |
| US4957872A (en) | Method for the determination of redox reactions using iodate to eliminate asorbic acid interference | |
| JP2922003B2 (ja) | 過酸化活性物質の検定のための組成物、用具及び方法の改良 | |
| US5264348A (en) | Ascorbate interference-resistant composition, device and method of assaying for predetermined analyte | |
| US4713327A (en) | Determination of total creatine kinase or an isoenzyme with a multilayer analytical element | |
| JPH047198B2 (cs) | ||
| CA2025802A1 (en) | Composition, device and method of assaying for a peroxidatively active substance | |
| US5374561A (en) | Oxidative creatinine assay | |
| JPH0555119B2 (cs) | ||
| US5182213A (en) | Method for detecting the presence of peroxidatively active substance in basic media | |
| KINOSHITA et al. | A fluorophotometric determination of serum creatinine and creatine using a creatinineamidohydrolase-creatineamidinohydrolase-sarcosine oxidase-peroxidase system and diacetyldichlorofluorescin | |
| EP0158964B1 (en) | Tester for detecting a substance in a body fluid | |
| AU9202998A (en) | Uric acid assay device with stabilized uricase reagent composition | |
| EP0141244B1 (en) | Testing agent for detecting a subtance in a body fluid | |
| JPH04504504A (ja) | 酸化還元測定システムにて妨害物質を除去するための流体不溶性酸化剤の使用 | |
| US4695539A (en) | Process for quantitative determination of substrate treated with oxidase | |
| US6753159B1 (en) | Uric acid assay device with stabilized uricase reagent composition | |
| CS227331B2 (en) | Method of glycerol determination | |
| JPH04200396A (ja) | 過酸化水素の酵素学的高感度測定法及びそのための試薬 | |
| JPH05260994A (ja) | ペルオキシド−ペルオキシダーゼ試験系を使用する唾液中の被検体の検出法 | |
| US4695540A (en) | Quantitative determination of substrate treated with oxidase | |
| JPS60262599A (ja) | アスコルビン酸の新規な分解方法 | |
| JPS622799B2 (cs) | ||
| JP2001061465A (ja) | 試料中の測定対象物質の測定器具 |