CN1931190A - 蟾皮提取物、其药物制剂及其制备方法 - Google Patents
蟾皮提取物、其药物制剂及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN1931190A CN1931190A CNA200610096075XA CN200610096075A CN1931190A CN 1931190 A CN1931190 A CN 1931190A CN A200610096075X A CNA200610096075X A CN A200610096075XA CN 200610096075 A CN200610096075 A CN 200610096075A CN 1931190 A CN1931190 A CN 1931190A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- extract
- cutis bufonis
- preparation
- amount
- ethanol
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims abstract description 62
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 18
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 33
- SCULJPGYOQQXTK-UHFFFAOYSA-N Cinobufagin Natural products CC(=O)OC1C2OC22C3CCC4CC(O)CCC4(C)C3CCC2(C)C1C=1C=CC(=O)OC=1 SCULJPGYOQQXTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- SCULJPGYOQQXTK-OLRINKBESA-N Cinobufagin Chemical compound C=1([C@@H]2[C@@]3(C)CC[C@@H]4[C@@]5(C)CC[C@H](O)C[C@H]5CC[C@H]4[C@@]43O[C@@H]4[C@@H]2OC(=O)C)C=CC(=O)OC=1 SCULJPGYOQQXTK-OLRINKBESA-N 0.000 claims abstract description 11
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 64
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 33
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 27
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 27
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 19
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 19
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims description 16
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 14
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 14
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 11
- 229930190011 Bufogenin Natural products 0.000 claims description 9
- 230000000274 adsorptive effect Effects 0.000 claims description 9
- ATLJNLYIJOCWJE-CWMZOUAVSA-N bufogenin Chemical compound C=1([C@H]2C[C@H]3O[C@@]43[C@H]3[C@@H]([C@]5(CC[C@H](O)C[C@H]5CC3)C)CC[C@@]42C)C=CC(=O)OC=1 ATLJNLYIJOCWJE-CWMZOUAVSA-N 0.000 claims description 9
- 229950006858 bufogenin Drugs 0.000 claims description 9
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 claims description 9
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 claims description 9
- 239000012567 medical material Substances 0.000 claims description 9
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 claims description 9
- 150000002475 indoles Chemical class 0.000 claims description 8
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 7
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 6
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims description 5
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 4
- 239000003708 ampul Substances 0.000 claims description 4
- 239000003978 infusion fluid Substances 0.000 claims description 4
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 claims description 3
- -1 and reflux Substances 0.000 claims description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 3
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 claims description 3
- QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N propylene Natural products CC=C QQONPFPTGQHPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000004805 propylene group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([*:1])C([H])([H])[*:2] 0.000 claims description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 7
- WYTGDNHDOZPMIW-RCBQFDQVSA-N alstonine Chemical compound C1=CC2=C3C=CC=CC3=NC2=C2N1C[C@H]1[C@H](C)OC=C(C(=O)OC)[C@H]1C2 WYTGDNHDOZPMIW-RCBQFDQVSA-N 0.000 abstract 2
- 229930005303 indole alkaloid Natural products 0.000 abstract 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 11
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 7
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 6
- 230000006837 decompression Effects 0.000 description 6
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 5
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 5
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 4
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 4
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 4
- QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N serotonin Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CCN)=CNC2=C1 QZAYGJVTTNCVMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000269417 Bufo Species 0.000 description 3
- 150000003797 alkaloid derivatives Chemical class 0.000 description 3
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 238000007560 sedimentation technique Methods 0.000 description 3
- KBKUJJFDSHBPPA-UHFFFAOYSA-N 5beta-hydroxylcinobufagin Natural products CC(=O)OC1C2OC22C3CCC4(O)CC(O)CCC4(C)C3CCC2(C)C1C=1C=CC(=O)OC=1 KBKUJJFDSHBPPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000272525 Anas platyrhynchos Species 0.000 description 2
- 208000000419 Chronic Hepatitis B Diseases 0.000 description 2
- 208000007271 Substance Withdrawal Syndrome Diseases 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YTPLMLYBLZKORZ-UHFFFAOYSA-N Thiophene Chemical compound C=1C=CSC=1 YTPLMLYBLZKORZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- VTTONGPRPXSUTJ-UHFFFAOYSA-N bufotenin Chemical compound C1=C(O)C=C2C(CCN(C)C)=CNC2=C1 VTTONGPRPXSUTJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 2
- KBKUJJFDSHBPPA-ZNCGZLKOSA-N cinobufotalin Chemical compound C=1([C@@H]2[C@@]3(C)CC[C@@H]4[C@@]5(C)CC[C@H](O)C[C@@]5(O)CC[C@H]4[C@@]43O[C@@H]4[C@@H]2OC(=O)C)C=CC(=O)OC=1 KBKUJJFDSHBPPA-ZNCGZLKOSA-N 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 238000002481 ethanol extraction Methods 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 2
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 2
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 2
- 239000012982 microporous membrane Substances 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-UHFFFAOYSA-N 3,3-dimethyl-7-oxo-6-[(2-phenylacetyl)amino]-4-thia-1-azabicyclo[3.2.0]heptane-2-carboxylic acid Chemical compound O=C1N2C(C(O)=O)C(C)(C)SC2C1NC(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000272522 Anas Species 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- 241001415440 Bufo gargarizans Species 0.000 description 1
- 241000269420 Bufonidae Species 0.000 description 1
- 206010007247 Carbuncle Diseases 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 239000003298 DNA probe Substances 0.000 description 1
- 241000725618 Duck hepatitis B virus Species 0.000 description 1
- 241001415432 Duttaphrynus melanostictus Species 0.000 description 1
- 208000031361 Hiccup Diseases 0.000 description 1
- 208000015817 Infant Nutrition disease Diseases 0.000 description 1
- 241000581650 Ivesia Species 0.000 description 1
- 241000701076 Macacine alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 206010042674 Swelling Diseases 0.000 description 1
- 206010044302 Tracheitis Diseases 0.000 description 1
- 241000934136 Verruca Species 0.000 description 1
- 208000000260 Warts Diseases 0.000 description 1
- 208000019790 abdominal distention Diseases 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 208000037842 advanced-stage tumor Diseases 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical group 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 238000000376 autoradiography Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000002934 diuretic Substances 0.000 description 1
- 230000001882 diuretic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000000857 drug effect Effects 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 201000007227 lymph node tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 1
- 201000010153 skin papilloma Diseases 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 229930192474 thiophene Natural products 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
蟾皮提取物、其药物制剂及其制备方法，其特征是所述提取物中吲哚类生物碱的含量为25％～40％，华蟾酥毒基和脂蟾毒配基总量为0.01％～0.05％。本发明在保证药效的前提下，尽可能提高蟾皮提取物中吲哚总生物碱及华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量。通过有效控制中药制剂的原料质量，达到制剂体积小、用量少，提高临床疗效、降低副作用的效果。
Description
技术领域：
本发明涉及一种蟾皮提取物，该提取物的制备方法及所述蟾皮提取物加入药用辅料后制成的各种中药制剂。
背景技术：
蟾皮为蟾蜍科动物中华大蟾蜍Bufo bufo gargarizans Cantor或黑眶蟾蜍Bufomelanostictus Schneider的干燥全皮。蟾皮的化学成分主要有华蟾酥毒基，脂蟾毒配基，蟾毒灵等，以及由它们与琥珀酸，丁二酸，精氨酸等形成的酯类，如蟾毒灵-3-丁二酰精氨酸酯，蟾毒它灵-3-丁二酰精氨酸酯，华蟾毒精-3-丁二酰精氨酸酯，脂蟾毒配基-3-丁二酰精氨酸酯等。还含有吲哚类生物碱，如5-羟色胺，蟾蜍色胺，蟾蜍季胺，蟾蜍噻宁和脱氢蟾蜍色胺等，另外尚含氨基酸、多肽及甾醇类化合物。蟾皮具有清热解毒，利水清胀功效，用于治疗痈疽、肿毒、瘰疬、肿瘤，疳积腹胀，慢性气管炎等。目前，蟾皮提取物制剂主要有华蟾素注射液、华蟾素片剂、华蟾素口服液等，其中华蟾素注射液更是一种传统的生物药制剂、广泛用于临床，具有解毒、消肿、止痛的功效，临床上主要用于治疗中晚期肿瘤、慢性乙型肝炎，还用于治疗顽固性呃逆、扁平疣及银屑病等症。
目前相关的报导有：“一种华蟾素胶囊及其制备方法”(专利申请号98103562)其蟾皮提取工艺为水提醇沉法，虽然工艺简单，但杂质较多。“一种纳米华蟾素制剂药物及其制备方法”(专利申请号00136668)该法虽用微波萃取，但未经分离，仍然杂质较多。同时该方法对于工艺设备要求严格，目前难以实施。还有一种“华蟾素冻干粉针剂及其制备方法”(专利申请号200410083994.4)，工艺中蟾皮虽经乙醇提取，大孔吸附树脂纯化，但该工艺中使用80％的乙醇提取，且使用的大孔吸附为非极性或弱极性的树脂大孔吸附树脂洗脱的乙醇浓度为35％～45％，所以其出膏率仍比较高，1.20％～1.38％(w/w)，所含杂质量仍比较多。“一种新的华蟾素冻干粉针及其制备方法和质量控制方法”(专利申请号200510061288.4)，其中蟾皮提取物为水提醇沉法，存在的问题仍然是出膏率大，杂质含量多。“一种华蟾素冻干粉针的制备方法”(专利申请号200510115451.0)，其中蟾皮提取物仍为水提醇沉法，有效成分提取不完全，出膏率大，杂质含量多。
作为目前市场上蟾皮的主要产品，华蟾素注射液，其蟾皮提取物的制备工艺为水提醇沉，出膏率大，杂质含量高，其中吲哚类总生物碱含量仅为7.0％～10.0％，华蟾酥毒基和脂蟾毒配基总量仅为0.001％～0.005％。
发明内容：
本发明是为避免上述现有技术所存在的不足之处，提供一种蟾皮提取物、其药物制剂及其制备方法，在保证药效的前提下，尽可能提高蟾皮提取物中吲哚总生物碱及华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量。通过有效控制中药制剂的原料质量，达到制剂体积小、用量少，提高临床疗效、降低副作用的效果。
本发明的目的是通过如下的技术方案实现的：
本发明蟾皮提取物，其特征是所述提取物中吲哚类生物碱的含量为25％～40％，华蟾酥毒基和脂蟾毒配基总量为0.01％～0.05％。
本发明蟾皮提取物的中药制剂，其特征是所述中药制剂是以所述蟾皮提取物为药物有效成份，加入药用辅料后制成的注射剂、输液剂、注射用粉针剂。
本发明蟾皮提取物的制备方法，其特征是按如下步骤操作：
a、取干蟾皮，洗净，加6～7倍量85％甲醇或乙醇或丙酮浸泡2小时，回流提取60分钟，放冷，过滤，残渣加5～6倍量85％甲醇或乙醇或丙酮，回流提取50分钟，放冷，过滤，合并滤液；
b、步骤a所得滤液经减压浓缩至无溶剂味，加入相当于药材量1～2倍量的水进行溶解，静置24小时后过滤；
c、步骤b所得滤液上大孔吸附树脂柱，采用中极性或极性大孔吸附树脂，先用2～3倍柱体积水洗脱，再用3～4倍柱体积50％～65％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，60℃真空干燥，得蟾皮提取物。
本发明蟾皮提取物的制备方法的特征也在于所述中极性或极性大孔吸附树脂为聚苯乙烯型或交联丙烯树脂类，包括HPD-400、DM301或HPD-600，粒度为0.3mm～1.25mm。
本发明有益效果体现在：
1、本发明蟾皮提取物是以有效成分吲哚类总生物碱，华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量进行表征，以这一表征方式的华蟾素注射剂、华蟾素输液剂和注射用华蟾素冻干粉针剂有显著的抗肿瘤和治疗慢性乙型肝炎等作用。
2、本发明蟾皮提取物采用85％的甲醇或乙醇或丙酮进行提取，使有效成分吲哚总生物碱和蟾毒酯类成分充分提取出来，而分子量大的肽类、蛋白质等成分难以提取出来。粗提物经大孔吸附树脂分离后，去除了水溶性杂质，富集了有效成分。
3、本发明由于在提取时使用浓度为85％的溶剂，并采用中极性或极性树脂，因而使所得的蟾皮提取物出膏率降低为0.2％～1.0％，用这种蟾皮提取物制成的中药制剂体积小、服用量小，临床使用方便。
4、本发明可以满足肿瘤和乙肝患者对不同剂型的需求。
吲哚类总生物碱含量测定参照华蟾酥注射液部版标准(WS3-B-3045)进行，以5-羟色胺为对照品，以15％对-二甲氨基苯甲醛为显色剂，用紫外分光光度法测得本品含吲哚类总生物碱含量为25％～40％。
华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量测定是参照中国药典2005年版一部蟾酥项下HPLC法测定，结果本品中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的总量为0.01％～0.05％。
以下药理实验结果阐明其药效作用
1、抗乙型肝炎病毒实验研究
1目龄雄性麻鸭，体重45g±5g；鸭乙型肝炎病毒DHBV-DNA强阳性血清，采自上海麻鸭，-70℃保存。
取1日龄麻鸭，经腿胫静脉注射上海麻鸭DHBV-DNA阳性血清，每只0.2ml。DHBV感染第13天，将雏鸭随机分成3组：对照组、安徽金蟾药业总公司出品的华蟾素注射液组、本发明华蟾素输液组，每组10只。每日自麻鸭腿胫按2ml/kg体重静脉注射给药，每日1次，连续10天，阳性对照组给与等量生理盐水。以上各组分别在给药前(即感染第13天)、给药后第5天、给药后第10天、停药后第2天自鸭腿静脉采血，分离血清，-70℃保存备用。
取上述血清点于NC膜，按缺口翻译试剂盒说明书操作，用32P标记DHBV-DNA探针，作鸭血清斑点杂交，放射自显影膜片斑点，在酶标仪上测定D值(滤光片波长为490nm)，计算血清DHBV-DNA光密度。结果如下：
表1华蟾素在鸭体内对DHBV-DNA的抑制作用(
x±s)
| 组别 | 剂量 | D(490nm) | |||
| 给药前 | 给药5天 | 给药10天 | 停药3天 | ||
| 对照组华蟾素注射液组华蟾素输液组 | 1.19±0.271.40±0.381.34±0.22 | 0.91±0.391.36±0.411.23±0.31 | 0.87±0.570.72±0.34*Δ0.66±0.23*Δ | 0.82±0.430.37±0.24*Δ0.30±0.19**Δ | |
与自身给药前比较：*P＜0.05，**P＜0.01；与对照组相比：ΔP＜0.05。
2、对小鼠移植性肿瘤S180的生长抑制作用
选取接种S180瘤细胞后7天的小鼠，脱颈处死，无菌抽取腹水，用生理盐水调细胞浓度至1×107个/mL。以每只小鼠0.2mL接种于小鼠有腋下皮下，制备荷瘤小鼠模型。将荷瘤小鼠随机分成3组：对照组、安徽金蟾药业总公司出品的华蟾素注射液组、本发明华蟾素输液组，每组8只。每日小鼠尾静脉注射给药一次，按0.2ml/只给药，每日1次，连续10天，阳性对照组给与等量生理盐水。于第11日处死小鼠，小心剥离瘤块，称瘤重，计算抑瘤率。结果见表2。
表2华蟾酥输液对S180荷瘤小鼠瘤重的影响(
x±s)
| 组别 | 平均瘤重 | 抑瘤率(％) |
| 对照组华蟾素注射液组华蟾素输液组 | 2.19±0.691.07±0.34**0.99±0.29** | ---51.155.6 |
与对照组比较：*P＜0.05，**P＜0.01。
以下通过具体实施方式对本发明作进一步描述：
具体实施方式：
本实施例蟾皮提取物中吲哚类生物碱的含量为25％～40％，华蟾酥毒基和脂蟾毒配基总量为0.01％～0.05％。
本实施例蟾皮提取物中药制剂是以蟾皮提取物为药物有效成份，加入药用辅料后制成的注射剂、输液剂、注射用粉针剂。
本实施例蟾皮提取物的制备方法是按如下步骤操作：
1、取干蟾皮，洗净，加6～7倍量85％甲醇或乙醇或丙酮浸泡2小时，回流提取60分钟，放冷，过滤，残渣加5～6倍量85％甲醇或乙醇或丙酮，回流提取50分钟，放冷，过滤，合并滤液；
2、步骤1所得滤液经减压浓缩至无溶剂味，加入相当于药材量1～2倍量的水进行溶解，静置24小时后过滤；
3、步骤2所得滤液上大孔吸附树脂柱，采用中极性或极性大孔吸附树脂，具体可以是聚苯乙烯型或交联丙烯树脂类，包括HPD-400、DM301或HPD-600，粒度为0.3mm～1.25mm。先用2～3倍柱体积水洗脱，再用3～4倍柱体积50％～65％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，60℃真空干燥，得蟾皮提取物。
实施例1：
取干蟾皮500g，洗净，加6倍量85％甲醇浸泡2小时，回流提取60分钟，放冷，过滤，残渣加5倍量85％甲醇回流50分钟，放冷过滤，合并滤液。
滤液减压浓缩至无醇味，加入相当于药材1.5倍量水溶解，放置24小时，过滤。
滤液上HPD-400型大孔吸附树脂柱，先用3倍柱体积水洗脱，再用4倍柱体积50％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，于60℃真空干燥，得蟾皮提取物4.0g。
实施例2：
取干蟾皮500g，洗净，加6倍量85％乙醇浸泡2小时，回流提取60分钟，放冷，过滤，残渣加5倍量85％乙醇回流提取50分钟，放冷，过滤，合并滤液。
滤液减压浓缩至无醇味，加入相当于药材2倍量水，溶解，放置24小时，过滤。
滤液上HPD-600型大孔吸附树脂柱，先用3倍柱体积水洗脱，再用3倍柱体积50％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，于60℃真空干燥，得蟾皮提取物3.5g。
实施例3：
取干蟾皮500g，洗净，加6倍量85％丙酮浸泡2小时，回流提取60分钟，放冷过滤，残渣加6倍量85％丙酮回流提取50分钟，放冷过滤，合并滤液。
滤液减压浓缩至无丙酮味，加入相当于药材2倍量水溶解，放置24小时，过滤。
滤液上DM301大孔吸附树脂柱，先用2倍柱体积水洗脱，再用3倍柱体积60％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，于60℃真空干燥，得蟾皮提取物2.7g。
实施例4：
取干蟾皮500g，洗净，加6倍量85％乙醇浸泡2小时，回流提取60分钟。放冷过滤，残渣加5倍量85％乙醇回流提取50分钟，放冷，过滤，合并滤液。
滤液减压浓缩至无醇味，加入相当于药材1.5倍量水溶解，放置24小时，过滤。
滤液上HPD-400大孔吸附树脂柱，先用3倍柱体积水洗脱，再用3.5倍柱体积50％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，于60℃真空干燥，得蟾皮提取物3.1g。
实施例5：
取干蟾皮500g，洗净，加6倍量85％甲醇浸泡2小时，回流提取60分钟。放冷过滤，残渣加5倍量85％甲醇回流提取50分钟，放冷，过滤，合并滤液。
滤液减压浓缩至无醇味，加入相当于药材2倍量水溶解，放置24小时，过滤。
滤液上DM301大孔吸附树脂柱，先用2倍柱体积水洗脱，再用3倍柱体积50％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，于60℃真空干燥，得蟾皮提取物3.3g。
实施例6：
取干蟾皮500g，洗净，加6倍85％丙酮浸泡2小时，回流提取60分钟，放冷，过滤，残渣加5倍量85％丙酮回流提取50分钟，放冷过滤，合并滤液。
滤液减压浓缩至无丙酮味，加入相当于药材2倍量水溶解，放置24小时，过滤。
滤液上HPD-600大孔吸附树脂柱，先用3倍柱体积水洗脱，再用4倍柱体60％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，于60℃真空干燥，得蟾皮提取物2.8g。
实施例7：华蟾素注射液
组成：蟾皮提取物 1.0～5.0g
氯化钠 9g
注射用水 1000ml
制备过程：取上述蟾皮提取物及药用辅料，加新煮沸过的注射用水溶解，并稀释至规定体积，调节pH5.0～8.0，用3号垂熔玻璃漏斗过滤，灌封，每安瓿装2ml，灭菌，即得。
实施例8：华蟾素输液
组成：蟾皮提取物 1.0～5.0g
氯化钠 45g
注射用水 5000ml
制备过程：取上述蟾皮提取物及药用辅料，加新煮沸过的注射用水溶解，并稀释至规定体积，调节pH5.0～8.0，用0.20～0.80μm微孔滤膜过滤，灌装，每瓶装250ml，灭菌，即得。
实施例9：注射用华蟾素冻干粉针
组成：蟾皮提取物 1.0～5.0g
甘露醇 100～200g
泊络沙姆 2～8g
制备过程：取上述蟾皮提取物及药用辅料，加新煮沸过的注射用水溶解，并稀释至2000ml，调节pH5.0～8.0，用0.20～0.80μm微孔滤膜过滤，灌装500个西林瓶中，冷冻干燥，即得。
Claims (4)
1、一种蟾皮提取物，其特征是所述提取物中吲哚类生物碱的含量为25％～40％，华蟾酥毒基和脂蟾毒配基总量为0.01％～0.05％。
2.一种权利要求1所述蟾皮提取物的中药制剂，其特征是所述中药制剂是以所述蟾皮提取物为药物有效成份，加入药用辅料后制成的注射剂、输液剂、注射用粉针剂。
3、根据权利要求1所述的蟾皮提取物的制备方法，其特征是按如下步骤操作：
a、取干蟾皮，洗净，加6～7倍量85％甲醇或乙醇或丙酮浸泡2小时，回流提取60分钟，放冷，过滤，残渣加5～6倍量85％甲醇或乙醇或丙酮，回流提取50分钟，放冷，过滤，合并滤液；
b、步骤a所得滤液经减压浓缩至无溶剂味，加入相当于药材量1～2倍量的水进行溶解，静置24小时后过滤；
c、步骤b所得滤液上大孔吸附树脂柱，采用中极性或极性大孔吸附树脂，先用2～3倍柱体积水洗脱，再用3～4倍柱体积50％～65％乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，减压浓缩，60℃真空干燥，得蟾皮提取物。
4、根据权利要求书3所述的制备方法，其特征是所述中极性或极性大孔吸附树脂为聚苯乙烯型或交联丙烯树脂类，包括HPD-400、DM301或HPD-600，粒度为0.3mm～1.25mm。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNA200610096075XA CN1931190A (zh) | 2006-09-13 | 2006-09-13 | 蟾皮提取物、其药物制剂及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNA200610096075XA CN1931190A (zh) | 2006-09-13 | 2006-09-13 | 蟾皮提取物、其药物制剂及其制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN1931190A true CN1931190A (zh) | 2007-03-21 |
Family
ID=37877312
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CNA200610096075XA Pending CN1931190A (zh) | 2006-09-13 | 2006-09-13 | 蟾皮提取物、其药物制剂及其制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN1931190A (zh) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102210710A (zh) * | 2011-05-31 | 2011-10-12 | 中国人民武装警察部队医学院 | 蟾皮提取物凝胶骨架缓释片及制备方法 |
| CN102302476A (zh) * | 2011-06-02 | 2012-01-04 | 张振海 | 一种脱氢蟾蜍色胺干粉吸入剂及其制备方法、应用 |
| CN102973604A (zh) * | 2011-06-02 | 2013-03-20 | 江苏省中医药研究院 | 一种蟾皮提取物干粉吸入剂及其制备方法、应用 |
| CN103070885A (zh) * | 2011-06-02 | 2013-05-01 | 江苏省中医药研究院 | 一种蟾皮提取物干粉吸入剂及其制备方法、应用 |
| CN104840488A (zh) * | 2015-05-13 | 2015-08-19 | 内蒙古康恩贝药业有限公司 | 一种中药蟾酥提取物及其制备方法 |
-
2006
- 2006-09-13 CN CNA200610096075XA patent/CN1931190A/zh active Pending
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102210710A (zh) * | 2011-05-31 | 2011-10-12 | 中国人民武装警察部队医学院 | 蟾皮提取物凝胶骨架缓释片及制备方法 |
| CN102210710B (zh) * | 2011-05-31 | 2013-01-23 | 中国人民武装警察部队后勤学院 | 蟾皮提取物凝胶骨架缓释片及制备方法 |
| CN102302476A (zh) * | 2011-06-02 | 2012-01-04 | 张振海 | 一种脱氢蟾蜍色胺干粉吸入剂及其制备方法、应用 |
| CN102973604A (zh) * | 2011-06-02 | 2013-03-20 | 江苏省中医药研究院 | 一种蟾皮提取物干粉吸入剂及其制备方法、应用 |
| CN103070885A (zh) * | 2011-06-02 | 2013-05-01 | 江苏省中医药研究院 | 一种蟾皮提取物干粉吸入剂及其制备方法、应用 |
| CN102302476B (zh) * | 2011-06-02 | 2013-09-25 | 张振海 | 一种脱氢蟾蜍色胺干粉吸入剂及其制备方法、应用 |
| CN103070885B (zh) * | 2011-06-02 | 2014-08-27 | 江苏省中医药研究院 | 一种蟾皮提取物干粉吸入剂及其制备方法、应用 |
| CN102973604B (zh) * | 2011-06-02 | 2015-05-27 | 江苏省中医药研究院 | 一种蟾皮提取物干粉吸入剂及其制备方法、应用 |
| CN104840488A (zh) * | 2015-05-13 | 2015-08-19 | 内蒙古康恩贝药业有限公司 | 一种中药蟾酥提取物及其制备方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN1857421A (zh) | 延胡索总碱提取物的制备方法及延胡索制剂 | |
| CN1931190A (zh) | 蟾皮提取物、其药物制剂及其制备方法 | |
| CN1903227A (zh) | 一种发酵虫草菌粉的水溶性活性组分及其应用 | |
| CN1273493C (zh) | 一种当归多糖及其制备方法和用途 | |
| CN101028343A (zh) | 一种岩黄连总生物碱及其纯化方法和药物组合物 | |
| CN1285344C (zh) | 一种制备刺五加注射制剂的方法 | |
| CN1141101C (zh) | 治疗乙肝的药物及其制备方法 | |
| CN101396373A (zh) | 一种华蟾素提取物及其制备方法 | |
| CN1546124A (zh) | 一种注射用生脉冻干粉及其制备方法 | |
| CN1272026C (zh) | 一种用于治疗心脑血管疾病的药物组合物及其制备方法 | |
| CN1193766C (zh) | 治疗肝炎的栀子总甙组合物及其制备方法 | |
| CN1522746A (zh) | 一种红景天药物制剂及其制备方法与用途 | |
| CN1264506C (zh) | 一种丹参素的药物组合物的制备方法 | |
| CN1698803A (zh) | 一种复方三七注射剂制剂及其制备方法 | |
| CN1686464A (zh) | 一种紫金龙注射制剂及其制备方法 | |
| CN1234399C (zh) | 一种注射用脉络宁冻干粉的制备方法 | |
| CN1406585A (zh) | 一种治疗病毒性心肌炎的药物组合物 | |
| CN101040997A (zh) | 韭菜籽总皂苷的提取方法及其应用 | |
| CN1548079A (zh) | 四物汤有效活性部位及有效成分 | |
| CN1679797A (zh) | 藤梨根抗肿瘤提取物及其制备方法和用途 | |
| CN1634241A (zh) | 治疗心脑血管疾病的复方三七制剂及其制备方法 | |
| CN1864717A (zh) | 挂金灯甾类化合物的提取方法及其药物组合物 | |
| CN1857364A (zh) | 一种含忍冬藤提取物的药物及制备方法 | |
| CN1872101A (zh) | 具抗病毒作用的小紫金牛提取物及其提取方法和应用 | |
| CN1730014A (zh) | 苦木注射剂新的给药途径及其制备工艺、新的适应症 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Open date: 20070321 |