CN1795890A - 一种用于治疗慢性肾炎的药物及制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于治疗慢性肾炎的药物及其制备方法。它由下述重量份比的原料制成的：积雪草20－100份，黄芪24－96份，川芎10－40份。其方法包括以下步骤：a、按以下重量配比称取原药材：积雪草20－100份，黄芪24－96份，川芎10－40份；b、将上述药材加入8－10倍量的40％－60％浓度的乙醇，回流提取，合并提取液，回收乙醇；c、回收乙醇后的提取液加入3－5倍量的去离子水，煮沸，放冷，静置10－24小时。将上述活性成分加入常规辅料，制备成药物制剂。本发明可有效降低尿蛋白、血肌酐、尿素氮，提高血浆蛋白，改善肾功能，故可用于治疗慢性肾炎。

Description

一种用于治疗慢性肾炎的药物及制备方法

技术领域

本发明涉及医用配制品及其制备方法，具体地说是特别适用于治疗慢性肾炎的药物及制备方法。

背景技术

慢性肾小球肾炎(简称慢性肾炎)是由多种原因、多种病理类型组成的原发于肾小球的一组免疫性疾病。临床特点是起病隐匿，病程冗长，常规尿检中有不同程度的蛋白尿、血尿及管型尿，大多数病人伴有不同程度的水肿、高血压及肾功能损害。本病常呈缓慢进展性，治疗困难、预后较差，病情逐渐发展至慢性肾炎晚期时，由于肾单位不断地毁损，健存的肾单位越来越少，纤维组织增生、肾萎缩，最终导致肾功能衰竭。慢性肾炎是引起慢性肾功能衰竭的主要病因之一，它已成为影响人们健康的主要疾病。

对慢性肾炎的治疗，目前尚无特效药物。现代医学多采用降压、抗凝、利尿等疗法，但其多为对症治疗，且不能从根本上解决问题。中医学认为慢性肾炎属本虚标实证。在治疗上通常采用清热利湿、益气健脾、活血化瘀药物进行治疗，但目前尚缺乏疗效确切的成药。现已上市用于治疗慢性肾炎的中成药，很多都存在一些难以克服的问题。如雷公藤多甙、火把花根片、昆明山海棠，这些药物的活性成分都属于雷公藤属植物提取物。研究表明，雷公藤虽然具有抗炎和免疫抑制作用，但其只能控制病情，不能根治原发病。再则，雷公藤的副作用很大。近年来关于雷公藤对肾毒害的报道越来越多，已被列为肾毒性药物之一。

发明内容

本发明的目的就是提供一种疗效好、毒副作用小的用于治疗慢性肾炎的药物，同时提供一种该药物的制备方法。

本发明的目的是这样实现的：本发明药物的活性成份是由下述重量份比的原料制成的：积雪草20-100份，黄芪24-96份，川芎10-40份。

其优选方案为，它的活性成份是由下述重量份比的原料制成的：

积雪草30-60份，黄芪24-48份，川芎20-30份。

本发明药物的活性成份可采用水提取工艺，即：

称取所述重量份比的原料，加8倍量体积的水煎煮2小时，过滤，滤液留用，药渣加水煎煮两次，每次2小时，过滤，滤液合并，减压浓缩得含有活性成分的稠膏。

本发明药物的活性成份也可采用水提醇沉工艺，即：

称取所述重量份比的原料，加8倍量体积的水煎煮提取3次，每次2小时，过滤，合并滤液，减压浓缩至药材的1～2倍量体积，加乙醇至溶液中醇浓为70％，冷藏静置过夜，分离得上清液，减压回收乙醇，继续浓缩得含活性成分的稠膏。

最能体现本发明药物优良效果的是采用本发明所提供的制备方法，即树脂提取工艺，它包括以下步骤：

(1)提取药物活性成分：

a、按以下重量配比称取原药材：积雪草20-100份，黄芪24-96份，川芎10-40份；

b、将上述药材加入8-10倍量的40％--60％浓度的乙醇，回流提取，合并提取液，回收乙醇；

c、回收乙醇后的提取液加入3-5倍量的去离子水，煮沸，放冷，静置10-24小时；

取上清液经弱极性大孔吸附树脂处理，先用2--3倍柱体积的去离子水洗脱，再以2--3倍柱体积的20％--30％乙醇洗脱，再以1倍柱体积的40％--50％的乙醇洗脱，最后以2-3倍柱体积的80％-95％乙醇洗脱，收集80％以上乙醇洗脱的流份，减压条件下回收乙醇，蒸干，得原料药的活性成分；

该步骤中优选的工艺参数为：在取上清液经弱极性大孔吸附树脂处理时，先用3倍柱体积的去离子水洗脱，再以3倍柱体积的20％乙醇洗脱，再以1倍柱体积的40％的乙醇洗脱，最后以3倍柱体积的95％乙醇洗脱，收集95％乙醇洗脱的流份，减压条件下回收乙醇，蒸干，得原料药的活性成分；

(2)将上述活性成分加入常规辅料，制备成药物制剂。

本发明药物的活性组分可以加入制备不同剂型时所需的各种辅料，如崩解剂、润滑剂、粘合剂，以中药常规制剂方法制备成各种常用的口服剂型。如丸剂、散剂、胶囊剂、口服液等。

本发明具有显著的清热利湿、益气健脾、活血化瘀等功效。可有效降低尿蛋白、血肌酐、尿素氮，提高血浆蛋白，改善肾功能，故可用于治疗慢性肾炎。

本发明药物为纯中药制剂，经动物长期毒性实验及临床应用，未发现毒副作用。故用于治疗慢性肾炎时安全、可靠，从而有效避免了现有药物自身毒性所引发的危害。

本发明的有益效果通过下述实验得到了证实

本发明药物对慢性血清病系膜增生性肾炎的影响：

实验动物及分组

远交系健康雄性SD大鼠85只，体重150±21克，10周龄，由河北医科大学实验动物中心提供。动物经普通饲料适应性喂养1周后，尿蛋白定性结果阴性，随机分为空白组、模型组、树脂组、水提组、醇沉组、阳性对照组(其中树脂组、水提组、醇沉组统称为治疗组)，空白组10只，其余每组15只。

给药方法：

治疗组均以人体每公斤体重给药量的15倍量的本发明药物灌胃(人每日处方量按79克生药计)，空白组、模型组给与相应量的蒸馏水。

树脂组所给的本发明药物是采用本发明制备方法制备的(即采用本发明所述的树脂提取方法)。

水提组所给的本发明药物是采用水提法制备的(即本发明所述的水提取工艺)。

醇沉组所给的本发明药物是采用水提醇沉法制备的(即：本发明所述的水提醇沉工艺)。

阳性对照组以人体每公斤体重给药量的15倍量的雷公藤药物灌胃(人每日处方量按60毫克计)。

主要试剂

完全弗氏佐剂及不完全弗氏佐剂(GIBCO公司)，牛血清白蛋白(BSA)和大肠杆菌内毒素(SIGMA公司)。

大鼠实验性系膜增生性肾炎模型的复制

采用改良的慢性血清病性MsPGN模型[1]，40只雄性SD大鼠，氯胺酮静脉麻醉后经背部切除左侧肾脏，休养1周后进行预免疫。在每只大鼠背部皮下分点注射完全弗氏佐剂0.1ml加BSA3mg，于1周末、2周末背部皮下注射不完全弗氏佐剂0.1ml加BSA3mg，3周末，腹腔注射BSA连续4次，每次间隔1h，注射剂量每只分别为0.5、1、1.5、3.0mg；次日每只在腹腔注射BSA2mg。正式免疫：于预免疫完成后第一天起，尾静脉与腹腔注射隔日交替进行，每只鼠尾静脉注射BSA剂量从0.5mg开始，每次增加0.5mg，至2.5mg为止，继续每周加量0.5mg，至每日用量5mg为止。腹腔注射量是尾静脉注射量的1倍，至每日用量10mg为止。免疫2周后尾静脉注射大肠杆菌内毒素100μg/只。全部大鼠与正式免疫8周后处死取肾组织。

正式免疫4周末，测定空白组和模型组尿蛋白量，详见表1。

表1：正式免疫4周末空白组和模型组24小时尿蛋白的比较

组别	24小时尿蛋白定量
		空白组模型组	3.43±2.368.45±3.12&

注&与空白相比P＜0.01

结果表明正式免疫4周末空白组和模型组24小时尿蛋白的比较，有显著性差异，说明模型组已经出现病理损伤。

生化及病理学检查

生化检查：(1)24小时尿蛋白定量；(2)血尿素氮、肌酐；(3)血清总蛋白、白蛋白。半自动生化分析仪检测

肾脏组织形态学的检查。

实验结果

本发明对MsPGN大鼠尿蛋白的影响

实验结束时，模型组的24小时尿蛋白定量与正常组相比明显升高，治疗各组均有不同程度的蛋白尿，但与模型组相比各治疗组显著降低。其中以树脂组的24小时尿蛋白定量最低，树脂组能明显减轻MsPGN大鼠的蛋白尿。详见表2。

表2各组24h尿蛋白定量变化情况(mg/24h)

组别	n	24h尿蛋白定量(mg/24h)
			正常组模型组树脂组水提组醇沉组阳性对照组	1015151515	4.35±3.1710.31±2.72▲4.78±3.35#5.16±3.69#6.18±2.77#15    4.94±2.14#

▲与正常组相比P＜0.01

#与模型组相比P＜0.01

本发明对MsPGN大鼠血肌酐、尿素氮及血浆蛋白的影响

实验结束时，模型组的血CRE、BUN均明显高于正常组p＜0.01，治疗组和阳性对照组的BUN与模型组相比明显降低p＜0.01。治疗组、阳性对照组的CRE与模型组相比明显降低，p＜0.01或p＜0.05，其中以树脂组和阳性对照组疗效较好。

第十周末时，模型组的血浆蛋白与正常组相比明显降低p＜0.01，树脂组的总蛋白与模型组相比明显升高p＜0.05，而其他各组与模型组相比，无明显差别。树脂组、水提组、阳性对照组的白蛋白与模型组相比明显升高，p＜0.01或p＜0.05。但以树脂组疗效较好。详见表3。

表3第十周末血肌酐、尿素氮及血浆蛋白变化情况

组别	n	尿素氮(mmol/L)	肌酐(μmol/L)	总蛋白(g/L)	白蛋白(g/L)
						正常组模型组树脂组水提组醇沉组阳性对照组	1015151515	8.51±0.86&12.64±2.948.23±1.12&@9.06±1.51&9.55±0.79&158.69±0.89&	127.21±8.27&161.65±36.42131.90±10.63#130.44±6.26#133.70±30.53▲127.21±8.27&	69.19±4.50&58.31±5.6762.98±2.86#61.48±2.69▲58.68±6.20▲61.07±3.08▲	39.77±2.64&32.90±2.5936.16±1.68&35.73±1.09&4.43±2.84▲35.41±2.74#

注&与模型组相比P＜0.01

#与模型组相比P＜0.05

▲与模型组相比P＞0.05

@与醇沉组相比P＜0.01

肾组织学光镜检查

以下结合附图，对其检查结果进行说明。

图1为正常组的病理HE染色图。

图2为模型组的病理HE染色图。

图3为树脂组的病理HE染色图。

图4为水提组的病理HE染色图。

图5为醇沉组的病理HE染色图。

图6为阳性对照组的病理HE染色图。

图7为正常组的病理染色PAS图。

图8为模型组的病理PAS染色图。

图9为树脂组的病理PAS染色图。

图10为水提组的病理PAS染色图。

图11为醇沉组的病理PAS染色图。

图12为阳性对照组的病理PAS染色图。

从图1、图7与图2-图12对比可以看出，模型组部分肾小球增大，肾小球毛细血管明显扩张，内皮细胞肿胀，炎细胞浸润，系膜细胞局灶节段性增生，部分肾小囊粘连，多数呈现弥漫的轻重不等的系膜组织增生，大部分区域为中度增生，表现为系膜区增宽，增宽的系膜区内系膜细胞和系膜基质均有增生，个别区域出现重度增生，毛细血管腔狭小，个别结构破坏，血管消失。治疗组及肾小球系膜细胞轻度增生，系膜基质轻度增宽，管腔无挤压现象，其中以树脂组和阳性对照组病理变化较轻。

上述实验表明，本发明可有效预防和治疗慢性肾炎。

具体实施方式

实施例1胶囊

提取药物活性成分：按以下重量配比称取原药材：积雪草100kg，黄芪96kg，川芎40kg；将上述药材加入8倍的40％浓度的乙醇，回流提取，合并提取液，回收乙醇；回收乙醇后的提取液加入3倍的去离子水，煮沸，放冷，静置24小时；取上清液经弱极性大孔吸附树脂处理，先用3倍柱体积的去离子水洗脱，再以3倍柱体积的20％乙醇洗脱，再以1倍柱体积的40％的乙醇洗脱，最后以3倍柱体积的95％乙醇洗脱，收集95％乙醇洗脱的流份，减压条件下回收乙醇，蒸干，得原料药的活性成分干浸膏；将干浸膏粉碎成细粉，装入明胶硬胶囊，0.25克/粒，每日三次，每次4-6粒。

实施例2片剂

提取药物活性成分：按以下重量配比称取原药材：积雪草20kg，黄芪24kg，川芎10kg；

将上述药材加入10倍60％浓度的乙醇，回流提取，合并提取液，回收乙醇；回收乙醇后的提取液加入5倍的去离子水，煮沸，放冷，静置10小时；取上清液经弱极性大孔吸附树脂处理，先用2倍柱体积的去离子水洗脱，再以2倍柱体积的30％乙醇洗脱，再以1倍柱体积的40％％的乙醇洗脱，最后以2倍柱体积的80％乙醇洗脱，收集80％乙醇洗脱的流份，减压条件下回收乙醇，蒸干，得含有原料药活性成分的干浸膏；将干浸膏粉碎成细粉，加入辅料，压制成片，0.5克/片。每日三次，每次2-5片。

实施例3～6中药物活性成分的提取是按照实施例1所述方法进行的，只是原料的用量配比有所不同，并按照相应的制剂常规制成不同的剂型，但均可达到本发明所述效果。

Claims (4)

1、一种用于治疗慢性肾炎的药物，其特征在于它的活性成份是由下述重量份比的原料制成的：

积雪草20-100份，黄芪24-96份，川芎10-40份。

2、权利要求1所述的用于治疗慢性肾炎的药物，其特征在于它的活性成份是由下述重量份比的原料制成的：

积雪草30-60份，黄芪24-48份，川芎20-30份。

3、一种权利要求1所述的用于治疗慢性肾炎的药物的制备方法：其特征在于它包括以下步骤：

(1)提取药物活性成分：

a)按以下重量配比称取原药材：积雪草20-100份，黄芪24-96份，川芎10-40份；

b)将上述药材加入8-10倍的40％--60％浓度的乙醇，回流提取，合并提取液，回收乙醇；

c)回收乙醇后的提取液加入3-5倍的去离子水，煮沸，放冷，静置10-24小时；

d)取上清液经弱极性大孔吸附树脂处理，先用2--3倍柱体积的去离子水洗脱，再以2--3倍柱体积的20％--30％乙醇洗脱，再以1倍柱体积的40％--50％的乙醇洗脱，最后以2-3倍柱体积的80％-95％乙醇洗脱，收集80％以上乙醇洗脱的流份，减压条件下回收乙醇，蒸干，得原料药的活性成分；

(2)将上述活性成分加入常规辅料，制备成药物制剂。

4、根据权利要求3所述的药物制备方法，其特征在于所述的d步骤为：取上清液经弱极性大孔吸附树脂处理，先用3倍柱体积的去离子水洗脱，再以3倍柱体积的20％乙醇洗脱，再以1倍柱体积的40％的乙醇洗脱，最后以3倍柱体积的95％乙醇洗脱，收集80％以上乙醇洗脱的流份，减压条件下回收乙醇，蒸干，得原料药的活性成分.

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