CN1618441A - 一种具有调节血脂作用的药物组合物及其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种具有调节血脂作用的药物组合物及其制备方法，它是由山楂4份、白术3份、泽泻3份、红曲2份为原料制成的药剂，本发明还提供了该药物组合物在制备治疗高脂血症、脂肪肝的药物中的用途。该药物制剂工艺科学合理，通过本发明药物组合物的制备方法所得的产品临床使用剂量小，原料成本低，临床疗效显著，毒副作用小，使用方便，质量稳定、可控，为临床提供了一种新的用药选择。

Description

一种具有调节血脂作用的药物组合物及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及一种药物组合物及其制备方法和用途，具体地说涉及一种以中药复方为原料制备的药物组合物及其制备方法和用途，属中药领域。

背景技术

随着人们生活水平的提高和人口老龄化，高脂血症(主要表现为血清胆固醇TC、甘油三酯TG升高，高密度脂蛋白胆固醇HDL-C降低)的发病率逐年上升，因脂质代谢紊乱引起的高脂血症，已成为脂肪肝、冠心病和动脉粥样硬化等常见病的重要发病因素。

高脂血症，属中医“痰浊”、“血瘀”等范畴，病机多为脾脏运化功能受损，津液运行不利，终致湿聚脂积，气血阻滞而成。长期大量的临床实践表明，中医药治疗高脂血症具有副作用小，疗效好的良好优势。

目前中医药治疗高脂血症的报道较多，针对不同的病因病机，辨证不同，组方也不同。杨军等报道，降脂冲剂(处方由葛根、泽泻、当归、何首乌、山楂等组成)对实验性高脂血症模型动物具有显著降脂作用，以其制成的冲剂用于治疗各型高脂血症具有肯定疗效【中草药，1997，28(4)：225-228】；董福云等报道，降脂保肝胶囊(处方何首乌、生山楂、枸杞子、泽泻、菊花等)可显著降低实验性高脂血症动物血脂【时珍国医国药，2000，18(11)：4】；李魁等报道，由糯米为发酵原料，加入泽泻、山楂、橘红、枸杞子、丹参、干姜、川芎研制而成的保健降脂米醋，具有良好降脂作用【食品工业，2000，(5)：27-28】；崔春黎等报道，复方红曲胶囊(处方由红曲、银杏、丹参等组成)临床用于高脂血症的治疗，具有可靠的临床疗效【中成药，2002，24(2)：107-110】；中国专利CN1398632公开了一种具有调节血脂的药物组合物，由绞股蓝总苷粉、红曲酶菌粉、栀子组成。陈文慧等报道了由白术、白芍、三七、青皮、山楂等9味药物组成的福而肝脂消丸临床治疗脂肪肝疗效明显【云南中医学院学报，2002，25，(30)：4-6】；赵颖等报道口服健脾消积汤(白术15g，茯苓15g，泽泻20g，山楂30g，枳壳15g，厚朴12g，姜半夏9g，石菖蒲6g，白芍10g，丹参15g)临床治疗脂肪肝疗效显著【上海中医药杂志，2002，(1)：25】。2000版《中国药典》记载了山楂的使用剂量为9～12g，白术的使用剂量为6～12g，泽泻的使用剂量为6～9g，未记载红曲及其使用剂量。成都地奥九泓制药厂生产的中药产品-“脂必妥胶囊”药品说明书中公开了其“主要药味为山楂、白术、红曲等”，即该说明书公开了与本发明组合物原料组成相近似的处方，但未公开其处方药物使用剂量及其药物制备方法(包括原料分离提取工艺、制剂加工方法)。需要进一步说明的是，复方中药处方中，各原料药物的配伍比例及使用剂量极为重要，是影响和决定复方中药疗效的主要因素。其他公开的复方中药中，未见与本发明组合物原料组成相同或类似的复方中药。

发明内容

本发明所要解决的技术方案是提供一种以中药复方为原料制备的具有调节血脂作用的药物组合物，本发明还提供了该药物组合物的制备方法和用途。

本发明提供了一种具有调节血脂作用的药物组合物，它是由下述重量配比的原料药制成的药剂：山楂4份，白术3份，泽泻3份，红曲2份。

进一步地，本发明提供一种具有调节血脂作用的药物组合物，它是由下述重量配比的原料药制成的满足成人临床用量/日的药剂：山楂4g，白术3g，泽泻3g，红曲2g，可分2～3次口服使用。

其中所述的药剂是口服制剂，优选的是胶囊剂。

其中所述的药剂的每制剂单位中含有熊果酸不少于2.2mg。其中熊果酸和齐墩果酸按熊果酸计，熊果酸作为指标性成分，通过对熊果酸的质量控制达到对整个药剂质量控制的目的。

本发明还提供了该药物组合物的制备方法，其步骤包括：

a、称取下列中药材为原料：

山楂4份，白术3份，泽泻3份，红曲2份；

b、用醇或含水乙醇共同提取以上药材，滤过，得滤液A；

c、滤液A回收乙醇，减压浓缩得浸膏B；

d、浸膏B加入适量水，静置，离心，得上清液C和沉淀D，将沉淀D干燥，作为活性成份I；

e、上清液C通过预处理好的树脂柱，水洗至无色，再用乙醇洗至无色，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥得稠膏E，作为活性成份II；

f、活性成份I、II加上药学上可接受的辅料混合，制成各种剂型。

上述方法中，步骤b所用乙醇浓度为30-95％的乙醇，优选80％乙醇，提取方法为加热回流提取，提取次数为1～3次，提取时间为0.5～1.5小时；步骤d加水量为3～7倍；步骤e所用乙醇浓度为50～80％，优选70％乙醇；步骤f中，活性成份I和II混合后再加入药学上可接受的辅料，制成各种剂型；或先在活性成份I中加入药学上可接受的辅料，再将其与活性成分II混合制成药物制剂。

为了提高除杂率，进一步达到降低给药剂量的目的，需降低其出膏率，同时最大限度保留其有效成分。本发明组合物制备方法步骤b有关提取工艺研究中，发明人对提取溶剂的选择进行了筛选研究，由于山楂、白术、泽泻、红曲四味药物的主要有效成分多为脂溶性成分(如熊果酸、白术内酯、泽泻醇等)，同时考虑中药传统用药习惯为水煎汤剂，故分别对水、50％乙醇、60％乙醇、70％乙醇、80％乙醇几种提取溶剂进行了筛选，并同时以浸出物得率及浸出物中熊果酸和总黄酮含量作为评价指标，筛选结果如下：

提取溶剂    熊果酸(mg/g)    总黄酮(mg/g)    浸出物(g/g)

水          未检出            0.525            0.395

50％乙醇    0.290             0.695            0.284

60％乙醇    0.439             0.695            0.264

70％乙醇    0.500             0.705            0.254

80％乙醇    0.540             0.705            0.226

根据以上筛选结果，选择乙醇提取优于水提取，以80％乙醇为提取溶剂所得浸出物量最少，而有效成分熊果酸、总黄酮的含量最高。

根据本发明复方中药物所含有的成分的性质及有关实验研究，本发明组合物制备方法采用水沉-树脂吸附法进行纯化除杂(见步骤d和步骤e)，以提高有效成分含量，缩小药物服用量。通过实验研究发现，若步骤d中采用常规过滤法除杂，水沉后需静置10小时，待沉淀完全沉降后才能过滤分限沉淀，操作时间长，难度大，沉淀损失大。而采用离心分离法，只需静置0.5-1小时即可进行离心，操作时间短，难度小，沉淀易分取且损失很小。提取物经水沉离心后，分为沉淀及上清液两部分，经检测，沉淀中主含熊果酸及水不溶性黄酮类成分，上清液中主要含水溶性黄酮。针对上清液中水溶性黄酮类成分，再采用大孔树脂吸附法进行分离。大孔树脂分离后所得浸膏，经检测，基本保留了黄酮类成分，除去了小分子多糖及单糖类杂质。

本发明提供的该组合物制备方法，通过合理的分离提取工艺和纯化除杂工艺，有效地除去了杂质而保留了有效成分。

本发明还提供了重量配比的各原料在制备治疗高脂血症的药物中的用途。

本发明还提供了重量配比的各原料在制备治疗脂肪肝的药物中的用途。

本发明人基于长期临床治疗高脂血症的用药经验，并经过系统的实验研究和临床研究，提供一种治疗高脂血症和脂肪肝的有效中药组合物，该药物组合物的原料药少而精(由山楂、白术、泽泻、红曲四味药物组成)，具有消痰化瘀，健脾和胃的功能，用于高脂血症和脂肪肝的治疗，其每天的临床剂量仅为：山楂4g，白术3g，泽泻3g，红曲2g，可按常规方法煎煮，分2～3次口服使用；而按本发明方法制备的胶囊，则药效更好，服用更方便，该剂量为经长期临床用药总结的最适宜的成人一日有效量。中医学认为，高脂血症的基本病机为本虚标实，本虚多为脾虚或肾虚，标实多为痰浊与瘀血。处方中以山楂为君药，化食消瘀，健脾和胃；白术、泽泻、红曲为臣，与山楂相辅，共奏健脾和胃，消痰化瘀之功，切中高脂血症的中医基本病机。

本发明药物组合物具有以下显著优势特点：其一，药物配伍科学精当，药物使用剂量小，原料成本降低。全方仅由四味药物组成，四味药物配伍，相互协同增效，其使用剂量(按成人每日口服用量计)均明显低于其中现有公开文献中的使用剂量。其二，制备工艺科学合理，最大限度保留了药物的活性成分，同时大大缩小了服用药物体积，使药物制剂达到了疗效可靠，服用量小，服用方便。其三，临床疗效显著，毒副作用小。其四，制剂质量稳定、可控，通过对药剂中的熊果酸的质量控制达到整个制剂质量控制的目的。本发明药物组合物的使用为临床治疗高脂血症和脂肪肝提供了一种新的用药选择。

显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

具体实施方式

实施例1：本发明药物组合物胶囊剂的制备：

山楂2000g  泽泻1500g  白术1500g  红曲1000g

以上四味药材，加80％乙醇6倍量，共同回流提取三次，每次1.5小时。滤过，滤液回收乙醇至相对密度为1.00～1.03(60℃)，减压浓缩至相对密度为1.20～1.25(60℃)，加4～5倍量水，静置，离心，分取沉淀，干燥。上清液通过预处理好的大孔树脂柱，水洗至无色，再用70％乙醇洗至无色，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩成稠膏，干燥，与上述干燥的离心沉淀合并，粉碎，过筛，加微粉硅胶适量，混匀，分装，制成胶囊1000粒。每粒胶囊规格240mg，相当于原生药6g，即每克胶囊药粉相当于原生药25克。按照本制备方法制成的胶囊制剂，临床用于治疗高脂血症或治疗脂肪肝，每日2粒，早晚各1粒，服用量小，服用方便。

按照以上制备工艺，经检测，熊果酸转移率为94.5％，总黄酮转移率为99.7％，白术、泽泻、红曲脂溶性成分薄层层析图谱均为强阳性，而出膏率由27.9％降为3.45％，表明该制备工艺科学合理，保留了中药的主要有效成分，同时大大减少了服用药物的体积，达到了除杂的目的。

实施例2  本发明药物组合物质量控制指标性成分的含量测定：

取本品10粒的内容物，混匀，取0.2g，精密称定，置100ml锥形瓶中，加乙醚20ml，超声处理10分钟(冷水浴)，滤过，用乙醚洗涤沉淀二次，每次20ml，滤液合并，蒸干，残渣加无水乙醇使溶解并转移至10ml量瓶中，并稀释至刻度，作为供试品溶液。另取熊果酸对照品，加无水乙醇制成每1ml含0.3mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液5μl，对照品溶液5μl与10μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-甲酸(38.5∶1.5∶4滴)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在110℃烘5-7分钟，至斑点色清晰，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB薄层扫描法)进行扫描，波长λ_S＝537nm，λ_R＝700nm，测量供试品吸收度与对照品吸收度积分值，计算，即得。

本品每粒含熊果酸和齐墩果酸以熊果酸(C₃₀H₄₈O₃)计，不得少于2.2mg。

以下通过药效学试验、毒理学试验证明本发明的有益效果。

试验例1  本发明药物组合物对大鼠食物性高脂血症的影响

发明人通过对该中药复方组合物与单味红曲药物的药理试验对比研究证实，该组合物用于高脂血症的治疗具有更加显著的药理活性。

1、实验材料：

药品：中药复方组合物胶囊：按实施例1方法制备，以下简称ZHHW胶囊，240mg/粒，相当于6.0g原生药，即每克胶囊药粉相当于原生药25克。

单味红曲药物：参照实施例1方法制备，以下简称DHQ，每克胶囊药粉相当于原生药35克。

试剂：血清总胆固醇(TC)试剂盒；甘油三酯(TG)试剂盒，高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)试剂盒，由上海荣盛生物技术有限公司生产。低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)试剂盒，由北京中生生物高技术公司生产。

动物：Wistar大鼠，雄性，体重150-200g，由山东省实验动物中心提供，仪器：721型分光光度计：上海申化仪表白控公司生产。离心沉淀机：LXJ-II型，上海第二分析仪器厂生产。

2、实验方法

高脂血症造模：体重150-200g的Wistar大鼠60只，分为普饲组(10只，雌雄各半)和高脂造模组(50只)，分别给予普通饲料和高脂饲料(胆固醇2％、胆盐1％、猪油5％、基础饲料92％)饲养，连续四周，第28日晚禁食，次日晨剪尾取血，分离血清。酶法测定血清TC、TG；PVS一步沉淀法测血清LDL-C；聚乙二醇法测血清HDL-C。

试验治疗：将高脂造模动物根据血脂TC水平随机分为：普饲组、模型组、本发明的中药复方组合物(以下简称ZHHW，为实施例1所得胶囊)高剂量组(按原生药计，4g/kg)、中剂量组(按原生药计，2g/kg)、低剂量组(按原生药计，1g/kg)，及单味红曲药物组(以下简称DHQ，按原生药计，4g/kg)，每组10只，雌雄各半，第29日各组同时给予0.5％羧甲基纤维素钠(CMC-Na)，ZHHW 4、2、1g/kg，DHQ 4mg/kg，。给药时各药均用0.5％CMC-Na配成混悬液，每日灌胃一次，给药容积为1ml/100g，同时继续给予高脂饲料。于给药后第2、4周取血测各项指标。

3、试验结果

结果见表1-4，各表中符合含义表示如下：

*与模型组相比；▲与给药前相比

*P＜0.05 ▲P＜0.05  **P＜0.01 ▲▲P＜0.01

               表1对高脂血症大鼠血清TC(mmol/L)的影响

药物    剂量(g/kg)    药前             药后两周            药后四周

普饲组    /        1.929±0.501**   2.080±0.605**       2.033±0.552**

模型组    Veh      3.994±0.625     5.148±1.082▲▲     6.045±1.429▲▲

          1        3.994±0.671     4.136±0.747*▲▲    4.483±1.395*▲

ZHHW组    2        4.010±0.732     3.339±0.935**▲     3.290±0.769**▲

          4        4.055±0.783     2.675±0.655**▲▲   2.628±0.475**▲▲

DHQ组     4        4.130±0.916     3.336±0.856**▲     3.148±0.524**▲▲

          表2对高脂血症大鼠血清LDL-C(mmol/L)的影响

药物    剂量(g/kg)    药前            药后两周               药后四周

普饲组    /        0.849±0.395**   0.823±0.741**       0.793±0.310**

模型组    Veh      2.769±0.597     4.201±1.308▲▲     4.031±0.966▲▲

          1        2.788±0.653     3.272±0.969*        2.930±0.409**

ZHHW组    2        2.771±0.711     1.925±0.749**▲▲   1.801±0.275**▲▲

          4        2.832±0.824     1.302±0.492**▲▲   1.101±0.290**▲▲

DHQ组     4        2.743±0.653     2.322±0.661**▲     2.184±0.253**▲

         表3对高脂血症大鼠血清HDL-C(mm0l/L)的影响

药物    剂量(g/kg)    药前              药后两周            药后四周

普饲组    /        0.908±0.226**   0.947±0.191**       0.891±0.310**

模型组    Veh      0.584±0.201     0.358±0.195▲       0.348±0.196▲▲

          1        0.565±0.161     0.518±0.263         0.468±0.113

ZHHW组    2        0.546±0.138     0.958±0.205**▲▲   0.941±0.477**▲▲

          4        0.572±0.148     1. 034±0.149**▲▲  1.138±0.439**▲▲

DHQ组     4        0.549±0.161     0.742±0.170*▲      0.764±0.365*▲

         表4对高脂血症大鼠血清TG(mmol/L)的影响

药物    剂量(g/kg)    药前           药后两周               药后四周

普饲组    /        0.786±0.244     0.925±0.260*        0.790±0.146**

模型组    Veh      1.307±0.588     1.533±0.321         1.923±0.426▲▲

          1        1.332±0.371     1.308±0.274         1.481±0.451*

ZHHW组    2        1.303±0.290     1.073±0.402**       1.165±0.324**

          4        1.309±0.439     0.926±0.278**▲     0.886±0.330**▲

DHQ组     4        1.297±0.372     1.421±0.380         1.799±0.439

表1-4结果表明，高脂饲料饲养2-4周后，高脂血症形成，造模成功。本发明的中药复方组合物ZHHW各剂量组(4g/kg、2g/kf、1g/kg)灌胃给药2-4周后，对大鼠食物性高脂血症有明显的治疗作用，表现为呈剂量依赖性抑制高脂造型大鼠血清TC、LDL-C、TG的升高，对血清HDL-C则有升高或抑制其继续降低作用。单味红曲药物DHQ组(4g/kg)具有抑制高脂造型大鼠血清TC、LDL-C升高的作用，但对大鼠血清TG和HDL-G无明显影响。在相同给药剂量下(均按相当于4g原生药/kg计)，本发明的中药复方组合物降脂作用明显优于单味红曲药物，说明本发明药物组合物，通过四味不同中药的相互配伍，符合中医药理论，发挥了协同增效作用，获得了更为理想的降脂效果。

试验例2  治疗脂肪肝的临床试验

收集20例脂肪肝患者(诊断标准：B超检查诊断脂肪肝，参照《实用消化病学》；实验室检查参照《中药新药临床指导原则》，甘油三酯(TG)＞1.7mmmol/L，胆固醇(TC)＞5.7mmol/L，血清谷丙转氨酶(ALT)＞60IU/L。)，服用实施例1的胶囊剂，用法为一次1粒，一日2次，4周为一疗程，连续治疗3个疗程。

疗效判定标准：参照《中药新药临床指导原则》、《实用消化病学》及相关文献制定标准：痊愈：自觉症状消失、TC≤5.7mmol/L、TG≤1.7mmol/L/L，ALT≤60IU/L，B超显示肝脏征象肝脏光点、其后场回声恢复正常。显效：症状明显好转、TC下降＞20％，TG下降＞40％，ALT下降≥50％或正常，B超肝脏光点密度明显好转，其后回声衰减明显减轻。有效：症状有好转、TC下降10％-20％，TG下降20％-40％，ALT下降＜50％或正常，B超肝脏征象较前好转。无效或恶化：自觉症状仍存在或加重，TC和(或)TG和(或)ALT和(或)B超声检查无变化或加重。

治疗结果：治疗20例，痊愈3例，显效7例，有效6例，无效4例，总有效率80％。

临床试验说明，本发明药物组合物具有治疗脂肪肝的作用。

试验例3  本发明药物组合物胶囊剂的急性毒性实验

1、实验材料：

受试药物：实施例1所得胶囊，240mg/粒，相当于6.0g原生药。

动物：NIH小鼠，体重18～22g，华西医科大学实验动物中心提供。

2、实验方法

取实施例1所得胶囊药粉8g加蒸馏水22ml(刚好能灌胃的浓度)，8g本发明药物药粉相当于200g生药，每1ml药液相当于9.1g生药。取体重20±1g健康小鼠20只，雌雄各半，停食8小时后用药液按0.4ml/10g(相当于生药364g/kg)一次灌胃给药。认真观察动物给药后的毒性反应情况并记录动物的外观、行为活动、精神状态、食欲、大、小便其颜色、被毛、皮肤、呼吸、鼻、眼、口腔等有无异常分泌物，体重变化以及死亡等情况。如有死亡，及时进行尸检，如有病变做病理检查，连续观察七天。

3、实验结果

按可以灌胃的最高浓度(每ml相当于生药9.1g)给小鼠灌胃(0.4ml/10g)剂量为364g/kg，按公斤体重折算相当于成人(60kg)每日常用量的1820倍，20只小鼠七日内无一中毒及死亡，说明实施例1所得本发明药物胶囊剂口服的安全性良好。

通过上述药效学试验和毒理试验，充分说明本发明药物的四味原料药少而精，并非随意选择，而是在中医药理论指导下，科学配伍，相互协同增效，对所属领域的技术人员，并非显而易见。本发明药物组合物制剂工艺科学合理，采用本发明药物组合物的制备方法所得的药物使用剂量小，原料成本低，临床疗效显著，毒副作用小，使用方便，质量稳定，可控，为临床提供了一种新的用药选择。

Claims (8)

1、一种具有调节血脂作用的药物组合物，其特征在于：它是由下述重量配比的原料药制成的药剂：山楂4份、白术3份、泽泻，3份、红曲2份。

2、根据权利要求1所述的具有调节血脂作用的药物组合物，其特征在于：它是由下述重量配比的原料药制成的满足成人临床用量/日的药剂：山楂4g，白术3g，泽泻3g，红曲2g。

3、根据权利要求1或2所述的具有调节血脂作用的药物组合物，其特征在于：所述的药剂是口服制剂。

4、根据权利要求1、2或3所述的具有调节血脂作用的药物组合物，其特征在于：所述的口服制剂是胶囊剂。

5、根据权利要求1，2，3或4所述的具有调节血脂作用的药物组合物，其特征在于：所述的药剂的每制剂单位中含有熊果酸不少于2.2mg。

6、权利要求1所述的具有调节血脂作用的药物组合物的制备方法，其步骤包括：

a、称取下列中药材为原料：

山楂4份，白术3份，泽泻3份，红曲2份；

b、用醇或含水乙醇共同提取以上药材，滤过，得滤液A；

c、滤液A回收乙醇，减压浓缩得浸膏B；

d、浸膏B加入适量水，静置，离心，得上清液C和沉淀D，将沉淀D干燥，作为活性成份I；

e、上清液C通过预处理好的树脂柱，水洗至无色，再用乙醇洗至无色，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥得稠膏E，作为活性成份II；

f、活性成份I、II加上药学上可接受的辅料混合，制成药物制剂。

7、权利要求1所述重量配比的各原料在制备治疗高脂血症的药物中的用途。

8、权利要求1所述重量配比的各原料在制备治疗脂肪肝的药物中的用途。