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CN1254266C - 感冒胶囊及其制备方法 - Google Patents

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CN1254266C
CN1254266C CN 02148340 CN02148340A CN1254266C CN 1254266 C CN1254266 C CN 1254266C CN 02148340 CN02148340 CN 02148340 CN 02148340 A CN02148340 A CN 02148340A CN 1254266 C CN1254266 C CN 1254266C
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斯拉甫·艾白
阿不都热依木·玉苏甫
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Abstract

本发明涉及一种口服药感冒(祖卡木)胶囊，采用将薄荷、山萘、洋甘菊三味药加水浸泡，提取挥发油，蒸馏后的水溶液滤过备用，收集挥发油，用β-环糊精包结，冷藏过夜，抽滤，干燥，研细，过筛备用；药渣再加水煎煮，过滤，滤液与蒸馏后的水溶液合并备用；再将大枣、甘草、睡莲花、破布木果、蜀蔡子、大黄、罂粟壳七味药材加水煎煮，合并煎液，过滤，滤液与备用液合并，减压浓缩，加入乙醇，静置，滤过，滤液减压浓缩，浓缩液用喷雾干燥法制备浸膏粉，加入包合物混均后，加入微晶纤维素淀粉的辅料，制粒，低温干燥，整粒，加入微粉硅胶混均，灌装，即可得到祖卡木胶囊；该药对172例感冒和流行性感冒的患者采用口服祖卡木胶囊的治疗，其总治愈率为85.2%。

Description

感冒胶囊及其制备方法
                      技术领域
本发明涉及一种药感冒(维吾尔医名称为祖卡木)胶囊及其制备方法和应用，该药用于治疗感冒和流行性感冒
                      背景技术
感冒和流行性感冒病是危害人们身体健康的常见病和多发病，可引起发热、头痛、鼻塞、咳嗽、流泪流涕、咽喉充血、打喷嚏、四肢酸痛等症。维吾尔医学在治疗感冒和流行性感冒等方面有着独到的治疗方法。原祖卡木剂型为颗粒剂，服用量大，一次12克，一日三次，且含较多的蔗糖，对许多老年人和禁糖患者用药受到限制，同时原剂型制备工艺中挥发油虽然有提取工艺，但没有包结，挥发油成分仍被挥发掉了，因此成品中没有挥发油成分，影响了该药的有效性，该药的质量标准只停留在两个薄层鉴别指标上，无法代表该品种的内在质量。为了减小剂量，除去糖分，本发明将祖卡木颗粒改为胶囊剂，采用包合工艺将挥发油进行包结，从而增强了该药的疗效，以微晶纤维素和淀粉为辅料，一次口服1.4克，一日三次，服用方便，质量稳定。同时，增加了两个含量测定指标及五个薄层鉴别指标，提高了该药的质量标准。感冒(祖卡木)胶囊在临床应用多年，对治疗感冒和流行性感冒病疗效良好。
维吾尔医学理论认为，感冒有寒型、热型、干型及湿型之分，并有气质失衡，体液失调的特点。口服祖卡木胶囊兼顾寒热虚实，可调节气质体液，融成熟，清除及扶正为一体，进行多方平衡，清除异常体液，收敛正气，调节寒湿气质，从而有效的防治感冒和流行性感冒及其并发症。
                      发明内容
本发明目的在于，依据中医学理论及维吾尔医学理论二者之长处，研制一种治疗感冒和流行性感冒的口服药感冒(祖卡木)胶囊，该药是由山萘、大枣、甘草、睡莲花、薄荷、洋甘菊、破布木果、蜀葵子、大黄、罂粟壳药材组成；采用首先将薄荷、山萘、洋甘菊三味药放置提取罐中，加6-12倍量水浸泡，提取挥发油，蒸馏后的水溶液滤过备用，收集挥发油，每1毫升挥发油用5克β-环糊精包结，冷藏过夜，抽滤，干燥，研细，过120目筛备用；药渣再加6-12倍量水煎煮1小时，过滤，滤液与蒸馏后的水溶液合并备用；再将大枣、甘草、睡莲花、破布木果、蜀蔡子、大黄、罂粟壳七味药材加4-8倍量水煎煮，合并煎液，过滤，滤液于备用液合并，减压浓缩，加入乙醇，静置，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.20-1.25，浓缩液用喷雾干燥法制备浸膏粉，加入β-环糊精包结挥发油的包合物混均后，加入微晶纤维素淀粉的辅料，制粒，低温干燥，整粒，加入微粉硅胶混均，为棕黄色至棕色的颗粒，灌装胶囊，即可得到气香、味微苦的感冒(祖卡木)胶囊；该药在临床应用多年，对治疗感冒和流行性感冒疗效良好。经动物实验及临床应用观察无毒副作用，对172例感冒和流行性感冒的患者采用口服感冒(祖卡木)胶囊的治疗，一次口服1.4克，一日三次，其总治愈率为85.2％。
本发明所述的感冒(祖卡木)胶囊口服药，该口服药是由山萘、大枣、甘草、唾莲花、薄荷、洋甘菊、破布木果、蜀葵子、大黄、罂粟壳药材制成；采用首先将薄荷、山萘、洋甘菊三味药放置提取罐中，加6-12倍量水浸泡4小时，提取挥发油3-8小时，蒸馏后的水溶液滤过备用，收集挥发油，每1毫升挥发油用5克β-环糊精，30℃恒温搅拌1小时包结，冷藏过夜，抽滤，40℃下干燥2-7小时，研细，过120目筛备用；药渣再加6-12倍量水煎煮1小时，过滤，滤液与蒸馏后的水溶液合并备用；再将大枣、甘草、睡莲花、破布木果、蜀蔡子、大黄、罂粟壳七味药材加4-8倍量水煎煮3次，每次1小时，合并煎液，过滤，滤液于备用液合并，减压浓缩，加入乙醇使含醇量达50％，静置24小时，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.20-1.25，浓缩液用喷雾干燥法制备浸膏粉，加入β-环糊精包结挥发油的包合物混均后，加入15％微晶纤维素淀粉1∶1的辅料，制粒，45℃低温干燥，整粒，加入微粉硅胶混均，为棕黄色至棕色的颗粒，灌装胶囊，即可得到气香、味微苦的感冒(祖卡木)胶囊；其中各组分的配比为：山萘1份-3份、睡莲花3份-6份、薄荷8份-12份、大枣4份-7份、洋甘菊2份-4份、破布木果2份-4份、甘草0.5份-2份、蜀蔡子1份-3份、大黄1份-2份、罂粟壳1份-3份。
感冒(祖卡木)胶囊口服药的制备方法，该口服药按下例步骤制成：
a、取将薄荷8份-12份、山萘1份-3份、洋甘菊2份-4份三味药放置提取罐中，加6-12倍量水浸泡4小时，提取挥发油3-8小时，蒸馏后的水溶液滤过备用，收集挥发油，每1毫升挥发油用5克β-环糊精，30℃恒温搅拌1小时包结，冷藏过夜，抽滤，40℃下干燥2-7小时，研细，过120目筛备用；药渣再加6-12倍量水煎煮1小时，过滤，滤液与蒸馏后的水溶液合并备用；
b、再将大枣4份-7份、甘草0.5份-2份、睡莲花3份-6份、破布木果2份-4份、蜀葵子1份-3份、大黄1份-2份、罂粟壳1份-3份七味药材加4-8倍量的水煎煮3次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液于备用液合并，减压浓缩，加入乙醇使含醇量达50％，静置24小时，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.20-1.25，浓缩液用喷雾干燥法制备浸膏粉；
c、再将浸膏粉加入用β-环糊精包结挥发油的包合物混均后，加入15％微晶纤维素淀粉1∶1的辅料，制粒，45℃低温干燥，整粒，加入微粉硅胶混均，为棕黄色至棕色的颗粒，灌装胶囊，即可得到气香、味微苦的感冒(祖卡木)胶囊。
感冒(祖卡木)胶囊作为制备治疗感冒和流行性感冒病药的应用，该药是由山萘1份-3份、睡莲花3份-6份、薄荷8份-12份、大枣4份-7份、洋甘菊2份-4份、破布木果2份-4份、甘草0.5份-2份、蜀葵子1份-3份、大黄1份-2份、罂粟壳1份-3份药材组成；首先将薄荷、山萘、洋甘菊三味药放置提取罐中，加6-12倍量水浸泡4小时，提取挥发油3-8小时，蒸馏后的水溶液滤过备用，收集挥发油，每1毫升挥发油用5克β-环糊精，30℃恒温搅拌1小时包结，冷藏过夜，抽滤，40℃下干燥2-7小时，研细，过120目筛备用；药渣再加6-12倍量水煎煮1小时，过滤，滤液与蒸馏后的水溶液合并备用；再将大枣、甘草、睡莲花、破布木果、蜀蔡子、大黄、罂粟壳七味药材加4-8倍量水煎煮3次，每次1小时，合并煎液，过滤，滤液于备用液合并，减压浓缩，加入乙醇使含醇量达50％，静置24小时，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.20-1.25，浓缩液用喷雾干燥法制备浸膏粉，加入用β-环糊精包结挥发油的包合物混均后，加入15％微晶纤维素淀粉1∶1的辅料，制粒，45℃低温干燥，整粒，加入微粉硅胶混均，为棕黄色至棕色的颗粒，灌装胶囊，即可得到气香、味微苦的感冒(祖卡木)胶囊；该药用于治疗感冒和流行性感冒。
本发明所述的感冒(祖卡木)胶囊及其制备方法，其中该药的各组分药理性能为：
山萘：为姜科植物Kaempferia gaianga L.的干燥根径。主要含挥发油，不同产地挥发油含量为0.8-2.6％；挥发油中含对甲氧基桂皮乙酯等40多种成分；另含有山奈酚、山奈素等黄酮类成分。根煎剂在试管内对许兰氏毛癣菌及几种常见致病真菌均有不同程度的抑制作用。山奈酚对动物有消炎作用及维生素P活性。
睡莲花；为睡莲科植物Nymphaea candida C.Presl的干燥花。本种国内文献未见报导，经化学成分预试，含黄酮类成分。同属植物莲花Nelumoo nucifera Gaertn，花含槲皮素，木犀草素，异槲皮甙，木樨草素葡萄糖甙，山奈酚-3-半乳糖葡萄糖甙，山奈酚葡萄糖甙等多种黄酮类成分。
薄荷：为唇形科植物Mentha haplcalyx Briq.的干燥地上部分。含挥发油1.3-2％，称薄荷油，无色至淡黄色或黄绿色，有薄荷香气，味辛辣清凉，d 0.899-0.909，n 1.460-1,465，[a]-30-37℃。有中含有1-薄荷酮77-87％，其次为1-薄荷脑油约10％及薄荷酯类3-6％等。薄荷水煎剂1∶20浓度对病毒ECHO株有抑制作用；薄荷脑有很强的杀菌作用，并有祛痰止咳作用；薄荷脑对大鼠的致死量为2.0g/kg。
大枣：为鼠李科植物Ziziphus jujuba Mill.的干燥成熟果实。主要含桦木酸，齐墩果酸，山楂酸，枣皂甙I，II，III和酸枣仁皂甙B等多种皂甙类成分；斯特法灵，N-降荷叶碱及阿西米诺宾等异哇啉类生物碱，枣碱及枣宁碱等环肽类生物碱；当药黄素等多种黄酮成分；有单糖，低聚糖，酸性多糖等；量含环磷腺甙(cAMP)100-600nmol/g(干重)，cGMP为30-60nmol/g，抗坏血酸、维生素P、维生素A、维生素B等多种成分。大枣水提液对抗IgE刺激所致人外周血嗜碱性白细胞释放白三烯(LTD)有抑制作用，并对IgE抗体产生有特异性抑制作用。与5-羟色胺和组胺有拮抗作用。大枣有保护肝脏，增加体质和增强体中的功效。临床上中医大枣治疗气虚型感冒，白细胞减少症均有较好的疗效。
洋甘菊：为菊科植物Matricaria chamommolla L.的干部全草。全草含挥发油0.46-0.67％，主要为兰香油澳等多种化合物；另含芸香甙，金丝桃甙等多种黄酮类成分；兰香油澳及其合成衍生物愈均有消炎作用，洋甘菊能增强再生过程，减弱过敏反应，可用于支气管哮喘、风湿热、过敏性胃肠炎、湿疹等；其挥发油对幼虫芽孢杆菌的抑菌作用强于大蒜。
甘草：为豆科植物乌拉尔甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.、胀果甘草G.inflata a Bat.或光果甘草G.glabr L.的干燥根及茎。甘草中主含甘草甜素，一种三萜皂甙。甘草甜素水解后生成一分子甘草次酸和二分子葡萄糖醛酸。光果甘草尚含有去氢甘草次酸I，II、18-α羟基革草次酸等。另含甘草甙，异甘草甙、甘草甙元等多种黄酮、异黄酮类成分。甘草具有皮质激素样的抗炎，抗过敏作用；甘草对多种药物中素，食物中素及细菌毒素等，均有一定的解毒能力；甘草甜素可防止化学致癌剂引起的肝损伤和肝癌作用，保护上呼吸道炎症粘膜，减少刺激，故可用于热咳、燥咳等。此外，甘草还有一定的抗菌作用。
蜀葵子：为锦葵科植物蜀葵Althaea rosea(L.)Car.干燥种子。蜀葵子的化学药力未见文献报导，经化学成分于预试验有黄酮类成分。
大黄：为蓼科植物掌叶大黄Rhoum palmatum L.、塘古物大黄R.tanguticum Maxim et Balf.或药用大黄R.officinale Baill.的干燥根及根茎。大黄主要成分为蒽醌衍生物，总量为3-5％部分游离，大部分与葡萄结合成蒽甙。游离型的甙元有大磺酸、大黄酚、芦荟大黄素、大黄素、在黄素甲醚等。结合蒽甙为泻下的有效成分，包括番泻甙A、B、C、D、E、F。另含鞣质等成分。大黄的抗感染作用，表现在对多种细菌均有不同程度的抑菌作用，其中以葡萄球菌、链球菌敏感；白喉杆菌，伤寒、副伤寒杆菌及痢疾杆菌也敏感，有效成分为打共酸，大黄素和芦荟大黄素的作用最强。大黄煎剂对多种真菌及流感病毒均有较强的抑制作用。大黄还对免疫功能起调节作用。
罂粟壳：为罂粟科植物Papaver somniferum L.的干燥成熟果壳。含吗啡0.015％，那可汀0.004％，可待因0.002％，罂粟碱0.0002％，原阿片碱痕量，罂粟壳碱约0.05％等多种生物碱；吗啡有显著的镇痛作用，并有高度选择性；可待因的镇痛作用为吗啡的1/4；吗啡有催眠作但睡眠浅而易醒，可待因则并不导致睡眠。吗啡对呼吸中枢有高度选择性抑制作用，在低于镇痛剂量时，对呼吸已有抑制。吗啡的止咳作用也很强，主要对咳嗽中枢的抑制。
破布木果：为紫草科植物Cordia dichotoma Forst.f.干燥成熟果实。国内文献未见报导。
本发明所述的感冒(祖卡木)胶囊的药效研究，急性毒性试验及临床试验如下：
试验目的：通过本研究观察祖卡木胶囊非特异性抗炎、解热、止咳、平喘作用。
试验动物：昆明种小鼠、NIH小鼠、Wistar大鼠、豚鼠，购自自治区医学实验动物中心，均为二级。
方法与结果
(一)祖卡木胶囊对小鼠耳壳二甲苯致肿的影响
给药剂量设计：本试验的受试物剂量是根据该药前人所进行的药效学研究资料和该制剂的最大耐受剂量决定。
(1)空白对照组：ig生理盐水，每次20ml/kg，bid×7天。
(2)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次0.45g/kg，bid×7天。
(3)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次0.90g/kg，bid×7天。
(4)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次1.80g/kg，bid×7天。
(5)阳性对照组：ig祖卡木颗粒，每次5.40g/kg，bid×7天。
方法：取小鼠60只，体重19.7±1.2g，随机分5组及灌胃给药，每日两次，连续给药7天，于末次给药后30分钟，每组小鼠右耳两面涂摸二甲苯0.1ml致炎，致炎2小时脱颈处死动物，以8mm打孔器取左右同一部位耳片，称重，以两耳片重量差值为肿胀度，进行组间均数t检验。
结果，祖卡木胶囊不同剂量ig给药，对二甲苯所致小鼠耳壳肿胀有明显地抑制作用(表1)。
表1  祖卡木胶囊对小鼠耳壳二甲苯致肿的影响( X±SD)
组别   动物(只)   剂量(g/kg.bid)   肿胀度(mg)
  空白对照组祖卡木胶囊祖卡木颗粒   1011121212   --0.450.901.805.40   27.23±3.7914.49±6.52***15.37±3.85***16.39±3.85***18.58±6.21***
注：与对照组比较***P＜0.01。
(二)祖卡木胶囊对小鼠腹腔毛细血管通透性增加的影响
分组和给药：
(1)空白对照组：ig生理盐水，每次20ml/kg，bid×7天。
(2)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次0.45g/kg，bid×7天。
(3)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次0.90g/kg，bid×7天。
(4)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次1.80g/kg，bid×7天。
(5)阳性对照组：ig祖卡木颗粒，每次5.40g/kg，bid×7天。
方法与结果：取NIH小鼠70只，体重19.5±1.3g，雌雄各半，随机分5组及灌胃给药，每日两次，连续灌胃给药7天，末次给药后1h各鼠均尾静脉注射1％伊文思蓝生理盐水溶液0.1ml/10g体重，随机腹腔注射0.6％冰醋酸0.2ml/只，20min后脱颈处死小鼠，用5ml生理盐水冲洗腹腔，收集洗涤液，1000rpm离心10min，取上清液于721分光光度计590nm处测定吸收度(OD值)，以OD值作组间均数t检验。
结果，祖卡木胶囊给药各组小鼠及祖卡木颗粒组小鼠腹腔洗涤液OD值较对照组低，表明该制剂明显抑制乙酸所致的小鼠腹腔毛细血管通透性增加(表2)。
表2  祖卡木胶囊对小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响( X±SD)
组别   动物(只)   剂量(g/kg.bid)   腹腔洗涤液(OD值)   抑制(％)
  空白对照组祖卡木胶囊祖卡木颗粒   1311131113   --0.450.901.805.40   0.531±0.0530.201±0.040***0.202±0.054***0.252±0.052***0.280±0.099***   --62.1561.9652.5447.27
注：与对照组比较***P＜0.01。
(三)祖卡木胶囊对小鼠足跖角叉菜胶致肿的影响
分组和给药：
(1)空白对照组：ig生理盐水，每次20ml/kg，bid×7天。
(2)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次0.45g/kg，bid×7天。
(3)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次0.90g/kg，bid×7天。
(4)阳性对照组：ig祖卡木颗粒，每次5.40g/kg，bid×7天。
方法与结果：取小白鼠40只，体重20±2g，雌雄各半，随机分4组，每日两次，连续灌胃给药7天，末次给药后1小时用2％角叉菜胶0.05ml注入小鼠右后足跖皮下致炎，致炎后1、3、4、5小时用千分尺测量足跖厚度，以致炎前后足跖之差为肿胀度进行组间均数t检验
结果，祖卡木胶囊不同剂量ig给药均能明显抑制角叉菜胶所引起的小鼠足跖肿胀(表3)。
表3  祖卡木胶囊对小鼠足跖角叉菜胶致肿的影响( X±SD)
组别   动物(只)   剂量(g/kg.bid)                                       肿胀度
  1h   3h   4h   5h
  空白对照组祖卡木胶囊祖卡木颗粒   10101010   -0.450.905.40   0.36±0.140.19±0.10***0.17±0.06***0.19±0.10***   0.57±0.100.34±0.14***0.29±0.14***0.35±0.14***   0.59±0.130.40±0.15*0.38±0.06***0.46±0.22*   0.57±0.150.50±0.16*0.41±0.07***0.50±0.18*
注：与同一时间的对照组比较***P＜0.01，**P＜0.05，*P＞0.05。
(四)祖卡木胶囊颗粒对小鼠的镇痛作用
1.扭体法
分组及给药：
(1)空白对照组：ig生理盐水，每次20ml/kg，bid×7天。
(2)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次0.45g/kg，bid×7天。
(3)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次0.90g/kg，bid×7天。
(4)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次1.80g/kg，bid×7天。
(5)阳性对照组：ig祖卡木颗粒，每次5.40g/kg，bid×7天。
方法与结果：取小白鼠70只，体重19.1±1.3g，雌雄各半，随机分5组及ig给药，每日两次，连续7天。末次给药后2h每鼠腹腔注射1％冰乙酸0.1ml/10g，观察20min内各鼠出现的扭体反应(腹部内凹、伸展后肢、臀部抬高)次数，以扭体反应次数作为镇痛作用比较的指标，进行组间均数t检验。
结果表明，祖卡木胶囊不同剂量ig给药均能明显减少小鼠的扭体反应次数，与空白对照组比较有极显著差异，提示该药有镇痛作用(表4)。
表4  祖卡木胶囊对小鼠的镇痛作用(扭体法)( X±SD)
组别   动物(只)   剂量(g/kg.bid) 扭体次数   抑制(％)
  空白对照组祖卡木胶囊祖卡木颗粒   1314141414   --0.450.901.805.40   46.23±9.1331.54±8.51***21.86±4.57***16.50±4.05***28.86±4.13***   --31.7852.7164.3137.57
注：与对照组比较***P＜0.01。
2.热板法
分组及给药：
(1)空白对照组：ig生理盐水，每次20ml/kg，bid×7天。
(2)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次0.45g/kg，bid×7天。
(3)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次0.90g/kg，bid×7天。
(4)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次1.80g/kg，bid×7天。
(5)阳性对照组：ig祖卡木颗粒，每次5.40g/kg，bid×7天。
取雌性小白鼠80只，给药前放于事先加热到55±0.5℃的恒温水浴箱内的烧杯中，以小鼠受热刺激出现添后足为痛反应指标，记录小鼠出现疼痛反应的时间，以两次的平均值作为给药前的疼痛阈(秒)。选取给药前疼痛阈小于30秒的小鼠60只，随机分5组，每组12只。末次给药后1、2、3小时分别测定各组小鼠的疼痛阈时间，以疼痛阈时间进行组间均数t检验。
结果表明，祖卡木胶囊不同剂量ig给药，均能明显提高小鼠的痛阈，提示该药有镇痛作用(表5)。
表5  祖卡木胶囊对小鼠的镇痛作用(热板法)( X±SD)
组别   动物(只)   剂量(g/kg.bid)   给药前痛阈值(sec)                     给药后不同时间痛阈值(sec)
  1h   2h   3h
  空白对照组组卡木胶囊祖卡木颗粒   1112121111   --0.450.901.805.40   20.78±2.6621.66±3.7421.17±3.5023.31±3.2923.08±2.24   21.67±4.78*28.14±3.50***32.20±7.80***32.95±8.46***32.02±3.97***   22.68±5.08**30.81±6.62***30.71±7.39***31.01±6.34***29.19±4.74***   22.32±2.04*36.29±6.95***30.50±7.19***30.38±6.96**27.90±5.44***
注：与给药前痛阈值比较*P＞0.05，***P＜0.01。
(五)祖卡木胶囊对组胺所致豚鼠抓鼻和喷嚏的反应的影响
分组及给药：
(1)空白对照组：ig生理盐水，每次20ml/kg，bid×7天。
(2)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次0.28g/kg，bid×7天。
(3)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次0.56g/kg，bid×7天。
(4)阳性对照组：ig祖卡木颗粒，每次3.35g/kg，bid×7天。
方法与结果：取豚鼠28只，于末次给药后1h将0.6％组胺溶液用加样器滴入豚鼠鼻腔内，每侧50μl，两侧100μl，待出现抓鼻及喷嚏后观察10分钟内出现抓鼻次数及1分钟内出现的喷嚏次数，以抓鼻次数和喷嚏次数进行组间均数t检验。
结果，祖卡木胶囊不同剂量ig给药，均能明显抑制组胺所引起的豚鼠抓鼻和喷嚏反应(表6)。
表6  祖卡木胶囊对组胺所致豚鼠抓鼻和喷嚏反应的影响
                      ( X±SD)
组别   动物(只)   剂量(g/kg.bid)   10分钟内出现的抓鼻次数   1分钟内出现的喷嚏次数
  空白对照组祖卡木胶囊祖卡木颗粒   7777   --0.280.563.35   64.6±25.220.2±6.1***18.4±4.3***18.1±5.1***   28.4±11.210.1±4.6***8.3±3.1***7.5±3.0***
注：与对照组比较***P＜0.01。
(六)祖卡木胶囊对干酵母所致大鼠发热反应的影响
分组及给药：
(1)空白对照组：ig生理盐水，每次20ml/kg，bid×7天。
(2)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次0.32g/kg，bid×7天。
(3)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次0.64g/kg，bid×7天。
(4)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次1.28g/kg，bid×7天。
(5)阳性对照组：ig祖卡木颗粒，每次3.84g/kg，bid×7天。
方法与结果：取大鼠50只，雌雄各半，体重180-220g，随机分为5组，ig给药，2ml/100g/次，每日两次，连续给药7天。最后一次给药后立即于大鼠背部皮下注入20％酵母悬液10ml/kg，然后于0.5、1、2、4、6、8、10、12小时各测肛温一次。作体温变化曲线，体温差值(ΔT)组间比较。
结果，祖卡木胶囊不同剂量ig给药，对干酵母所致大鼠发热体温有良好的降温作用(表7)。
表7  祖卡木胶囊对干酵母所致大鼠发热反应的影响( X±SD)
  组别   动物(只)   剂量(g/kgbid)                               不同时间的体温变化值(-ΔT)
0.5h 1h 2h 4h
空白对照组 10 --   0.471±0.279(n＝7)   0.778±0.327(n＝9)   1.41±0.387(n＝10)   1.144±0.439(n＝9)
祖卡木胶囊 10 0.32   0.363±0.185*(n＝8)   0.590±0.233*(n＝10)   1.60±0.392*(n＝10)   0.96±0.458*(n＝10)
10 0.64   0.390±0.142*(n＝10)   0.840±0.212*(n＝10)   1.41±0.296*(n＝10)   1.18±0.316*(n＝10)
10 1.28   0.286±0.121*(n＝7)   0.640±0.227*(n＝10)   1.46±0.276*(n＝10)   1.07±0.427*(n＝10)
祖卡木颗粒 10 3.84   0.675±0.276*(n＝9)   0.867±0.391*(n＝9)   1.03±0.386*(n＝10)   0.87±0.440*(n＝10)
  组别   动物(只)   剂量(g/kgbid)                                不同时间的体温变化值(+ΔT)
6h 8h 10h 12h
空白对照组 10 --   0.675±0.354(n＝8)   1.056±0.403(n＝9)   1.38±0.391(n＝10)   1.61±0.382(n＝10)
祖卡木胶囊 10 0.32   0.68±0.377*(n＝10)   0.94±0.417*(n＝10)   1.29±0.449*(n＝10)   1.42±0.447*(n＝10)
10 0.64   0.55±0.127*(n＝10)   0.80±0.394*(n＝10)   0.55±0.135***(n＝10)   0.36±0.076***(n＝10)
10 1.28   0.588±0.203*(n＝8)   0.443±0.181**(n＝7)   0.26±0.091***(n＝10)   0.167±0.058***(n＝10)
祖卡木颗粒 10 3.84   0.789±0.392*(n＝9)   1.12±0.410*(n＝10)   0.98±0.365**(n＝10)   0.513±0.340***(n＝8)
注：与相同时间的对照组体温变化值比较*P＞0.05，**P＜0.05，***P＜0.01。
(七)祖卡木胶囊对小鼠的祛痰作用
分组及给药：
(1)空白对照组：ig生理盐水，每次20ml/kg，bid×12天。
(2)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次0.45g/kg，bid×12天。
(3)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次0.90g/kg，bid×12天。
(4)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次1.80g/kg，bid×12天。
(5)阳性对照组：ig祖卡木颗粒，每次5.40g/kg，bid×12天。
方法与结果：取小鼠60只，18-20g，雌雄各半，随机分为5组，每组12只，ig给药，每日两次，连续给药12天。最后一天上午给药后将动物禁食6小时，下午给药后1小时每鼠ip0.25％酚红生理盐水溶液0.7ml，30分钟后将动物拉颈处死。分离气管，插入7号针头，以5％碳酸氢钠生理盐水溶液冲洗气管3次，每次0.4ml，合并冲洗液，用721型分光光度计，波长546nm处测定OD值。现使用酚红作标准曲线，根据标准曲线计算酚红含量(μg/ml)，以酚红含量进行组间均数t检验。
结果，不同剂量的祖卡木胶囊及祖卡木颗粒ig给药均无祛痰作用(表8)。
表8  祖卡木胶囊对小鼠呼吸道酚红排泌量的影响( X±SD)
组别   动物数(只)   剂量(g/kg.bid)   呼吸道酚红排泌量(μg/ml)
  空白对照组祖卡木胶囊祖卡木颗粒   101010118   --0.450.901.805.40   2.65±0.342.67±0.95***2.86±0.82***2.62±0.70***2.71±0.82***
注：与空白对照组比较，***
(八)祖卡木胶囊对大鼠足跖炎症组织内前列腺素含量的影响
分组及给药：
(1)空白对照组：ig生理盐水，每次20ml/kg，bid×7天。
(2)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次0.32g/kg，bid×7天。
(3)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次0.64g/kg，bid×7天。
(4)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次1.28g/kg，bid×7天。
(5)阳性对照组：ig祖卡木颗粒，每次3.84g/kg，bid×7天。
方法与结果：取大鼠50只，雌雄各半，随机分为5组，每组10只，ig给药，每日两次，连续给药7天。第8天末次给药后30min，大鼠右跖sc2％交叉菜胶0.06ml致炎，4h后断头放血处死大鼠，将致炎足跖自踝关节上0.5cm处剪下，称重，剥皮后剪碎皮肤及除骨骼以外的其它组织，置于7ml NS中浸泡1h，3000r/min离心5min，取上清液1ml用FMJ-全自动放射免疫γ-计数器，根据6-酮-前列腺素F1α放免药盒说明书的方法，测定样品的PGF1α及TXB2的含量；同时取上述上清液0.3ml，加入0.5mol/L KOH甲醇溶液2ml，在50℃水浴异构化20min，然后加入甲醇稀释至9mL，用M 750-A型分光光度计于278nm处测定紫外OD值，以每克组织相当的OD值表示PGE2含量。结果.不同剂量的祖卡木胶囊ig给药能显著抑制炎症组织中PGE1α、及TXB2含量。
表9  祖卡木对大鼠性组织中PGE1α、及TXB2含量的影响( X±SD)
组别   动物数(只)   剂量(g/kg.bid)   PGF1α(pg/mg)   TXB2(pg/mg)
  空白对照组祖卡木胶囊祖卡木颗粒   88889   --0.320.641.283.84   1.740±0.5001.100±0.370**1.023±0.467**1.094±0.418**1.962±0.908*   0.424±0.1070.283±0.076***0.308±0.084**0.241±0.104***0.427±0.082*
注：与空白对照组比较**P＜0.05，***P＜0.01，*P＞0.05。
表10  祖卡木无糖颗粒对大鼠炎性组织中PGE2含量的影响( X±SD)
组别   动物数(只)   剂量(g/kg.bid)   OD值(×10-3) 抑制率(％)
  空白对照组祖卡木胶囊祖卡木颗粒   8981010   --0.320.641.283.84   178±4474±36***42±24***68±29***115±40***   --58.476.461.835.4
注：与空白对照组比较***P＜0.01。
结果表明，不同剂量的祖卡木胶囊ig给药，对大鼠性组织中PGE1α、及TXB2含量有明显抑制作用。
(九)止咳作用(氨水引咳法)
分组和给药：
(1)空白对照组：ig生理盐水，每次20ml/kg，bid×7天。
(2)受试药物组：ig社祖卡木胶囊，每次0.45g/kg，bid×7天。
(3)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次0.90g/kg，bid×7天。
(4)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次1.80g/kg，bid×7天。
(5)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次3.60g/kg，bid×7天。
(6)阳性对照组：ig祖卡木颗粒，每次5.40g/kg，bid×7天。
方法与结果：选取昆明种小鼠60只，体重18-22g，雌雄各半，随机分为6组，每组10只，ig给药，每日两次，连续给药7天。末次给药1h后将小鼠逐只放入500ml的广口瓶，瓶内置一棉球，向棉球注入浓氨水0.5ml/只，立即密封瓶口，5秒钟后将小鼠迅速取出，观察小鼠咳嗽潜伏期(注入浓氨水开始，至发生咳嗽所经时间为潜伏期)和注入浓氨水开始3分钟内出现的咳嗽次数。以潜伏期和3分钟内出现的咳嗽次数作为指标进行组间均数t检验。
结果，不同剂量的祖卡木胶囊ig给药，能明显延长小鼠氨水引咳潜伏期，并能明显减少3分钟内出现的咳嗽次数(表11)。
表11  祖卡木胶囊对小鼠氨水引咳潜伏期和咳嗽次数的影响( X±SD)
组别   动物数(n)   给药量(g/kg.bid)   咳嗽前伏期(sec)   咳嗽前伏期(sec)
  空白对照组祖卡木胶囊祖卡木颗粒   101010101010   --0.450.901.803.605.40   36.92±6.2965.79±5.38***123.20±22.57***141.44±20.28***153.80±22.09***74.63±12.51***   21.1±5.1317.8±3.26***11.2±2.78***7.0±2.05***3.1±1.60***15.5±3.44***
注：与空白对照组比较***P＜0.01。
(十)平喘作用
分组及给药：
(1)空白对照组：ig生理盐水，每次20ml/kg，bid×5天。
(2)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次0.28g/kg，bid×5天。
(3)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次0.56g/kg，bid×5天。
(4)受试药物组：ig祖卡木胶囊，每次1.12g/kg，bid×5天。
(5)阳性对照组：ig祖卡木颗粒，每次3.35g/kg，bid×5天。
方法与结果：取60只豚鼠，体重150-200g，雌雄兼用。先将豚鼠逐一放在密闭的玻璃钟罩内，待安静后，启动雾化器，以恒压喷雾2％氯化乙酰胆碱和0.1％组胺等量混合液15sec引喘，喷雾停止后，立即观察6min内豚鼠出现喘息性抽搐的潜伏期(即喷雾停止后，出现出现喘息性抽搐的时间)，若潜伏期大于120-150者则落选，挑选合格动物，按体重、性别随机分为5组，，每组10只，ig给药，每日两次，连续给药5天。末次给药1h后，以同样条件引喘，观察潜伏期的变化及跌倒时间。
结果表明，祖卡木胶囊不同剂量ig连续给药5天后，明显延长豚鼠引喘潜伏期，同时出现喘息性抽搐以后的跌倒时间也明显延长。表明祖卡木胶囊有明显的平喘作用(表12)
表12  祖卡木胶囊的平喘作用( X±SD)
组别   动物数(n)   给药量(g/kg.bid)   引喘前伏期(sec)   跌倒时间(sec)
  空白对照组祖卡木胶囊祖卡木颗粒   1010101010   --0.280.561.123.35   60.7±9.6794.2±15.92***116.0±21.61***136.7±36.06***101.0±20.61***   84.5±11.55118.9±17.01***161.3±26.96***184.4±18.40***132.1±17.97***
注：与空白对照组比较***P＜0.01。
结论：
以上实验结果表明，祖卡木胶囊抑制二甲苯所致小鼠耳壳肿胀；拮抗乙酸所致的小鼠腹腔毛细血管通透性增高；抑制交叉菜胶所致小鼠足跖肿胀；同时扭体法和热板法致痛模型上抑制小鼠扭体反应及提高疼痛阔；同时干酵母所致大鼠发热反应有拮抗作用；抑制组胺引起的抓鼻和喷嚏反应；并能降低大鼠炎症组织中PGE2、PGE1α、及TXB2等的含量。同时该药能抑制浓氨水诱发的小鼠咳嗽反应；并能对抗乙酰胆碱和组胺等量混合液所致哮喘反应。
提示祖卡木胶囊有显著的抗炎、解热、镇痛以及止咳、平喘等作用。同时，其抗炎作用可能与其抑制炎症部位PGE2、PGE1α、及TXB2等的含量有关。
祖卡木胶囊动物急性毒性试验
最大耐受量测定
受试药物：祖卡木胶囊内容物为棕黄色颗粒，具浓厚香味，新疆奇康哈博维药有限公司提供。
试验动物：昆明种小鼠，一级、体重19.2±1.4，雌雄各半，检测符合标准，购自自治区医学实验动物中心。
方法与结果：应以序贯法找出胶囊引起动物0％(Dn)和100％(Dm)死亡的剂量。结果该制剂在最大浓度(150％)及最大给受试物体积(0.3ml/10g.bid，ig)的条件下，未见明显的毒性反应及动物死亡。故只进行最大耐受量试验。
选取小鼠30只，雌雄各半，ig给药，一次0.3ml/10g，连续2次，给药间隔2小时，给药后连续观察14天。结果，给药当日动物出现镇静外，未出现明显的毒性反应，摄食量也无异常。因此，祖卡木胶囊口服给药的最大耐受量为60ml/kg(18g/kg)体重。
结论：由于小鼠最大耐受量允许给药量的限制，仅作出最大耐受量为18g/kg。一般成人(60kg计算)口服量每次1.4g，每日3次，即4.2g/60kg/日，按中药药理学研究方法学“小鼠的最大耐受是倍数计算方法”计算，本试验测定小鼠最大耐受量18g/kg，为成人按体重口服量的257倍，说明祖卡木胶囊口服给药安全。
本发明所述的感冒(祖卡木)胶囊经对172例感冒和流行性感冒患者进行了口服治疗，服药方法为每天3次，每次3-5粒，疗程为3-7天，其总治愈率为85.2％。
本发明对感冒(祖卡木)胶囊进行了初步稳定性试验，其结果表明：感冒(祖卡木)胶囊临床研究用三批样品在室温条件下贮存三个月，样品外观、性状、鉴别、崩解时限、装量差异、微生物限度及含量未发生明显变化，符合该制剂质量标准规定，放置前后经薄层层析检查，其特征成分斑点无明显变化，表明高胶囊质量稳定。
                    具体实施方式
实施例1
a、取将薄荷8份、山萘1份、洋甘菊2份三味药放置提取罐中，加6倍量水浸泡4小时，提取挥发油3小时，蒸馏后的水溶液滤过备用，收集挥发油，每1毫升挥发油用5克β-环糊精，30℃恒温搅拌1小时包结，冷藏过夜，抽滤，40℃下干燥2小时，研细，过120目筛备用；药渣再加6倍量水煎煮1小时，过滤，滤液与蒸馏后的水溶液合并备用；
b、再将大枣4份、甘草0.5份、睡莲花3份、破布木果2份、蜀葵子1份、大黄1份、罂粟壳1份七味药材加4倍量的水煎煮3次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液于备用液合并，减压浓缩，加入乙醇使含醇量达50％，静置24小时，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.20-1.25，浓缩液用喷雾干燥法制备浸膏粉；
c、再将浸膏粉加入用β-环糊精包结挥发油的包合物混均后，加入15％微晶纤维素淀粉1∶1的辅料，制粒，45℃低温干燥，整粒，加入微粉硅胶混均，为棕黄色至棕色的颗粒，灌装胶囊，即可得到气香、味微苦的感冒(祖卡木)胶囊。
对患有感冒和流行性感冒者，每次3-5粒，每日3次，治愈率为85.2％，疗程为5天。
实施例2
a、取将薄荷10份、山萘2份、洋甘菊3份三味药放置提取罐中，加9倍量水浸泡4小时，提取挥发油6小时，蒸馏后的水溶液滤过备用，收集挥发油，每1毫升挥发油用5克β-环糊精，30℃恒温搅拌1小时包结，冷藏过夜，抽滤，40℃下干燥5小时，研细，过120目筛备用；药渣再加9倍量水煎煮1小时，过滤，滤液与蒸馏后的水溶液合并备用；
b、再将大枣5份、甘草1份、睡莲花4份、破布木果3份、蜀葵子2份、大黄1.5份、罂粟壳2份七味药材加6倍量的水煎煮3次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液于备用液合并，减压浓缩，加入乙醇使含醇量达50％，静置24小时，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.20-1.25，浓缩液用喷雾干燥法制备浸膏粉；
c、再将浸膏粉加入用β-环糊精包结挥发油的包合物混均后，加入15％微晶纤维素淀粉1∶1的辅料，制粒，45℃低温干燥，整粒，加入微粉硅胶混均，为棕黄色至棕色的颗粒，灌装胶囊，即可得到气香、味微苦的感冒(祖卡木)胶囊。
对患有感冒和流行性感冒者，每次3-5粒，每日3次，治愈率为88.1％，疗程为7天。
实施例3
a、取将薄荷3份、山萘3份、洋甘菊4份三味药放置提取罐中，加12倍量水浸泡4小时，提取挥发油8小时，蒸馏后的水溶液滤过备用。收集挥发油，每1毫升挥发油用5克β-环糊精，30℃恒温搅拌1小时包结，冷藏过夜，抽滤，40℃下干燥2小时，研细，过120目筛备用；药渣再加12倍量水煎煮1小时，过滤，滤液与蒸馏后的水溶液合并备用；
b、再将大枣7份、甘草2份、睡莲花6份、破布木果4份、蜀葵子3份、大黄2份、罂粟壳3份七味药材加8倍量的水煎煮3次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液于备用液合并，减压浓缩，加入乙醇使含醇量达50％，静置24小时，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.20-1.25，浓缩液用喷雾干燥法制备浸膏粉；
c、再将浸膏粉加入用β-环糊精包结挥发油的包合物混均后，加入15％微晶纤维素淀粉1∶1的辅料，制粒，45℃低温干燥，整粒，加入微粉硅胶混均，为棕黄色至棕色的颗粒，灌装胶囊，即可得到气香、味微苦的感冒(祖卡木)胶囊。
对患有感冒和流行性感冒者，每次3-5粒，每日3次，有效率为80.5％，疗程为3天。

Claims (2)

1、一种感冒胶囊口服药，其特征在于该口服药是由山萘、大枣、甘草、睡莲花、薄荷、洋甘菊、破布木果、蜀葵子、大黄、罂粟壳药材制成；首先将薄荷、山萘、洋甘菊三味药放置提取罐中，加6-12倍量水浸泡4小时，提取挥发油3-8小时，蒸馏后的水溶液滤过备用，收集挥发油，每1毫升挥发油用5克β-环糊精，30℃恒温搅拌1小时包结，冷藏过夜，抽滤，40℃下干燥2-7小时，研细，过120目筛备用；药渣再加6-12倍量水煎煮1小时，过滤，滤液与蒸馏后的水溶液合并备用；再将大枣、甘草、睡莲花、破布木果、蜀蔡子、大黄、罂粟壳七味药材加4-8倍量水煎煮3次，每次1小时，合并煎液，过滤，滤液于备用液合并，减压浓缩，加入乙醇使含醇量达50％，静置24小时，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.20-1.25，浓缩液用喷雾干燥法制备浸膏粉，加入用β-环糊精包结挥发油的包合物混均后，加入15％微晶纤维素淀粉1∶1的辅料，制粒，45℃低温干燥，整粒，加入微粉硅胶混均，为棕黄色至棕色的颗粒，灌装胶囊，即可得到气香、味微苦的感冒胶囊；其中各组分的配比为：山萘1份-3份、睡莲花3份-6份、薄荷8份-12份、大枣4份-7份、洋甘菊2份-4份、破布木果2份-4份、甘草0.5份-2份、蜀葵子1份-3份、大黄1份-2份、罂粟壳1份-3份。
2、一种感冒胶囊口服药的制备方法，其特征在于该口服药按下例步骤制成：
a、取将薄荷8份-12份、山萘1份-3份、洋甘菊2份-4份三味药放置提取罐中，加6-12倍量水浸泡4小时，提取挥发油3-8小时，蒸馏后的水溶液滤过备用，收集挥发油，每1毫升挥发油用5克β-环糊精，30℃恒温搅拌1小时包结，冷藏过夜，抽滤，40℃下干燥2-7小时，研细，过120目筛备用；药渣再加6-12倍量水煎煮1小时，过滤，滤液与蒸馏后的水溶液合并备用；
b、再将大枣4份-7份、甘草0.5份-2份、睡莲花3份-6份、破布木果2份-4份、蜀葵子1份-3份、大黄1份-2份、罂粟壳1份-3份七味药材加4-8倍量的水煎煮3次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液于备用液合并，减压浓缩，加入乙醇使含醇量达50％，静置24小时，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.20-1.25，浓缩液用喷雾干燥法制备浸膏粉；
c、再将浸膏粉加入用β-环糊精包结挥发油的包合物混均后，加入15％微晶纤维素淀粉1∶1的辅料，制粒，45℃低温干燥，整粒，加入微粉硅胶混均，为棕黄色至棕色的颗粒，灌装胶囊，即可得到气香、味微苦的感冒胶囊。
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