CN113101331B - 一种百里香药茶及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及中药技术领域，具体涉及一种百里香药茶及其制备方法和应用；以百里香为君药，味辛性温，散寒温中、止咳化痰。臣以紫苏、香附。紫苏味辛性温，解表散寒，以助百里香解表散寒之功；香附味辛、苦、甘。辛能降，甘能和，且香能窜，能行理气，消内壅，疏导气机，辅正除邪。且紫苏血中气药，香附气中血药，二药伍用调和气血，汗顾阴阳。佐以陈皮辛温能下气燥湿，以消胸膈满闷，嗳气恶食；使以甘草，引药入中焦脾胃，立足中焦以济四方，且甘平能和中辅正，所以治瘟疫四时不正之气，兼有调和诸药之功。诸药合用，共奏解表散寒，调和气血，燥湿消满之功。

Description

一种百里香药茶及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及中药技术领域，具体涉及一种百里香药茶及其制备方法和应用。

背景技术

感冒又称上呼吸道感染。是由多种病毒所引起的常见病，但其并非是单一的疾病，而是一组疾病的统称，包括鼻腔、咽或喉部等急性炎症，主要表现为鼻塞声重、打喷嚏、流鼻涕、咽喉痛、咳嗽，还伴随有头痛、头晕、怕寒、厌食等症状，重者甚至会出现头昏发胀、浑身胀痛、身体倦怠及发热高烧等情况，其传染性强，易反复发作，给患者造成很大困扰。在现有技术中，针对感冒，西医主要采取吃药并配合点滴的方式进行解热镇痛和杀菌抗炎，虽然采用这种疗法消炎效果好，退热快，但不能从根源上进行调理，且容易对肝肾造成损坏并影响白细胞和血红蛋白等指标，副作用较大；而中医治疗感冒通常都采用金银花、连翘、甘草、茯苓、肉桂等中成药口服，虽然服用上述中药可以对感冒症状有所缓解，但疗效较慢、易反复，容易出现免疫力低和抵抗力差的现象，从而感染其它疾病。感冒发病机制症型众多，且已有药物的副作用是始终存在的，因此，如果能提供一种安全性高、价格低廉的药茶，在大大降低副作用同时也为辨证施治、药症统一打下基础。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供一种百里香药茶及其制备方法和应用。包括紫苏叶、百里香、香附、陈皮、炙甘草5味药，具有辛温解表、燥湿和胃的功效，用于单纯流行性感冒、普通四时感冒轻型疗效显著。

本发明的技术方案之一，一种百里香药茶，质量份数计，包括以下原料：百里香4份、紫苏叶12份、醋香附12份、陈皮6份、灸甘草3份。

本发明的技术方案之二，一种百里香药茶的制备方法，包括以下步骤：紫苏叶、醋香附、陈皮、灸甘草加水浸提、浓缩干燥得浸膏粉，浸膏粉和百里香粉混合得百里香药茶。

进一步地，具体包括以下步骤：

醋香附、紫苏叶、陈皮、炙甘草加12倍水，煎煮提取3次，每次2小时，滤过，滤液以60℃～80℃减压浓缩，将提取液浓缩至60℃下的相对密度为1.10-1.15，加入95％乙醇调整至提取液质量分数浓度为70％，搅拌均匀，冷藏过夜，滤过或离心后，取上清液60℃～80℃减压回收乙醇，浓缩至60℃下的相对密度为1.25-1.30，减压干燥后得浸膏粉，加入百里香粉及木糖醇、三氯蔗糖，混合均匀，制颗粒，干燥，分装，灭菌即得百里香药茶。

进一步地，所述百里香粉粒径为250±9.9μm。

进一步地，所述制颗粒、干燥包括，加入80-85％的乙醇制软材，挤压过筛制粒，60℃干燥，过14目筛整粒；所述灭菌为Co-60γ灭菌，灭菌剂量为1.5k Gy～2.5k Gy。

进一步地，所述干燥为60℃减压干燥或喷雾干燥；

喷雾干燥参数：进风口温度140～170℃；进料速度5mL﹒min^-1；雾化盘驱动压力0.03～0.05MPa；旋风气流速0.45m³﹒min^-1。

进一步地，所述三氯蔗糖的加入量为百里香药茶质量的0.3％。

本发明的技术方案之三，上述百里香药茶在制备感冒、抗病毒、抑菌、解热、镇痛药物中的应用。

进一步地，所述感冒为普通感冒或抗病毒感冒。

本发明配方组分成分：

1.醋香附，来源：本品为莎草科植物莎草Cyperus rotundus L.的干燥根茎。

2.紫苏叶，来源：本品为唇形科植物紫苏Perilla frutescens(L.)Britt.的干燥叶(或带嫩枝)。

3.陈皮，来源：本品为芸香科植物橘Citrus reticulataBlanco及其栽培变种的干燥成熟果皮。

主要成分含有橙皮苷、新橙皮苷、柚皮苷、芸香柚皮苷。

橙皮苷：分子式及分子量：C₂₈H₃₄O₁₅；610.5610。类白色或淡黄色结晶性粉末；无臭、无味。在吡啶或二甲基甲酰胺中易溶，在乙醇或水中不溶。药理作用：维生素类药，能降低毛细管的脆性，保护毛细血管，防止微血管破裂出血的作用。用于高血压病的辅助治疗；该品为维生素P类药，用于增强毛细血管的韧性。橙皮甙的衍生物甲基橙皮甙，也是维生素P类药，是日本《食品添加物公定书》中收载的品种。是治疗高血压和心肌梗塞的药物，医药工业中用作制药的原料，是中成药脉通的主要组成之一。

4.炙甘草

来源：本品为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.、胀果甘草Glycyrrhiza inflata Bat.或光果甘草Glycyrrhiza glabra L.的干燥根和根茎。

化学成份主要含有甘草酸、甘草苷、甘草苷元、异甘草苷、异甘草苷元等。

甘草酸异名甘草甜素，甘草甜素可水解生成甘草次酸和葡萄糖醛酸。分子式及分子量：C₄₂H₆₂O₁₆；822.92。物理性质：甘草酸为白色或淡黃色結晶型粉末，熔点220℃，有特殊甜味，其甜度约为蔗糖的250倍，溶于热水和热的稀乙醇，不溶于无水乙醇和乙醚。药理作用：甘草酸具有肾上腺皮质激素样作用，能抑制毛细血管通透性，减轻过敏性休克的症状。可以降低高血压病人的血清胆醇。甘草酸是甘草甜味的有效成分，通常使用的是其水溶性的盐，称为甘草甜素。它的特点是高甜度、低热能、安全无毒，起泡性和溶血作用很低。因此，在医药、食品、化妆品等行业使用广泛。甘草酸能与多种生物碱、抗生素、氨基酸等生成复盐或复方制剂，具有协同、增溶、增加药物稳定性、提高生物利用度及降低毒副作用的功效。甘草酸的许多金属盐，人体可适当吸收，不易造成元素的积蓄中毒。因此常被用来配制成健脾开胃、止咳化痰、顺气止喘、治疗慢性肝炎、降低血脂的良药。日本学者对甘草酸甜素的抗病毒性进行了筛选，表明它对艾滋病毒的增殖及对细胞变性有抑制作用。1986年日本报道甘草对艾滋病毒的抑制率高达98％，因此，甘草被称为战胜AIDS病的“仙草”。现代研究证明，甘草酸是甘草中最重要的有效成分之一。具有抗炎、抗病毒和保肝解毒及增强免疫功能等作用。由于甘草酸有糖皮质激素样药理作用而无严重不良反应，在临床中被广泛用于治疗各种急慢性肝炎、支气管炎和艾滋病。还具有抗癌防癌、干扰素诱生剂及细胞免疫调节剂等功能。

5.地椒

来源：本品为唇形科植物百里香Thymus mongolicus(Ronn.)Ronn.或兴凯百里香Thymus przewalskii(Kom)Nakai的干燥地上部分。

化学成份：主要含有麝香草酚、香荆芥酚、牻牛儿醇、1,8-桉叶醇、对-聚伞花素、(E)-3,7-二甲基-2,6-辛二烯-1-醇、迷迭香酸等。

迷迭香酸：分子式及分子量：C₁₈H₁₆O₈；360.31。

物理性质：浅黄色或白色粉末；易吸潮；具有迷迭香特殊草本气味；熔点：171-175℃，遇三氯化铁-铁氰化钾溶液显蓝绿色。

药理作用：迷迭香酸是一种天然抗氧化剂，具有较强的抗氧化活性，有助于防止自由基造成的细胞受损，降低癌症和动脉硬化的风险；还具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗肿瘤的活性。

与现有技术相比，本发明的有益效果：

本发明包括紫苏叶、百里香、香附、陈皮、炙甘草5味药，具有辛温解表、燥湿和胃的功效。用于单纯流行性感冒、普通四时感冒轻型。中医辨证属于风寒袭表，兼有脾胃不和者。症见发热，恶寒或恶风，咳嗽，鼻塞，喷嚏，流清涕，全身酸痛，头痛，痞满纳呆，或见恶心呕吐者，淡红舌，苔薄白，脉浮紧或浮缓。

本发明中以百里香为君药，味辛性温，散寒温中、止咳化痰。臣以紫苏、香附。紫苏味辛性温，解表散寒，以助百里香解表散寒之功；香附味辛、苦、甘。辛能降，甘能和，且香能窜，能行理气，消内壅，疏导气机，辅正除邪。且紫苏血中气药，香附气中血药，二药伍用调和气血，汗顾阴阳。佐以陈皮辛温能下气燥湿，以消胸膈满闷，嗳气恶食；使以甘草，引药入中焦脾胃，立足中焦以济四方，且甘平能和中辅正，所以治瘟疫四时不正之气，兼有调和诸药之功。诸药合用，共奏解表散寒，调和气血，燥湿消满之功。

百里香药茶是以中医理论为基础的创新药物复方制剂，由地椒(百里香)、紫苏叶、醋香附、陈皮、炙甘草组成，具有辛温解表、清热解毒、燥湿和胃的功效。用于单纯流行性感冒、普通四时感冒轻型。数据表明其应用主要为感冒、发热、疼痛等方面。

进一步验证实验中，本发明选择以下药理试验以证明百里香药茶的药效作用：(Ⅰ)抗病毒作用：采用甲型H1N1流感病毒FM1株、PR8株感染的病毒性肺炎模型研究百里香药茶对病毒性肺炎的治疗作用及死亡保护作用；(Ⅱ)抑菌作用：采用稀释肉汤法研究百里香药茶体外抑菌作用；采用腹腔注射的细菌模型研究百里香药茶对体内细菌感染的死亡保护作用；(Ⅲ)解热作用：采用酵母致大鼠发热模型和LPS致家兔发热模型，研究百里香药茶的解热作用；(Ⅳ)镇痛作用：采用醋酸诱导小鼠扭体试验和热板试验研究百里香药茶的镇痛作用。结果表明：

其中：

(Ⅰ)百里香药茶的抗病毒作用

(1)对病毒性肺炎的治疗作用

①在滴鼻感染甲型H1N1流感病毒FM1株病毒性肺炎的模型上，百里香药茶2.4g生药/kg剂量组能够显著抑制病毒性肺炎的肺指数，肺指数抑制率为72.73％，表明百里香药茶对甲型H1N1流感病毒FM1株病毒感染的肺炎有抑制作用。

②在滴鼻感染甲型H1N1流感病毒PR8株病毒性肺炎的模型上，百里香药茶2.4g生药/kg剂量组能够显著抑制病毒性肺炎的肺指数，肺指数抑制率为77.42％，表明百里香药茶对甲型H1N1流感病毒PR8株病毒感染的肺炎有抑制作用。

(2)对病毒感染的死亡保护作用

①在滴鼻感染甲型H1N1流感病毒FM1株病毒死亡保护模型上，2.4g生药/kg、4.8g生药/kg、9.6g生药/kg三个剂量均可以延长小鼠存活天数，与模型对照组比较均有显著性差异，生命延长率分别为58.18％、70.91％和69.09％。表明百里香药茶能够延长甲型H1N1流感病毒FM1株病毒感染的小鼠的生存时间。

②在滴鼻感染甲型H1N1流感病毒PR8株病毒死亡保护模型上，9.6g生药/kg剂量组延长小鼠存活天数，与模型对照组比较有显著性差异，生命延长率为26.80％。表明百里香药茶能够延长甲型H1N1流感病毒PR8株病毒感染的小鼠的生存时间。

(Ⅱ)百里香药茶的抑菌作用

(1)体外抑菌作用

采用稀释肉汤法研究的百里香药茶体外抑菌作用试验结果表明，百里香药茶浓度为0.14mg/mL时对金黄色葡萄球菌的抑菌率达到98.6％，优于其他浓度；百里香药茶浓度为0.27mg/mL、0.55mg/mL、1.09mg/mL时对肺炎链球菌抑菌率在98％以上。

(2)对细菌感染的死亡保护作用

①在腹腔注射铜绿假单胞菌的死亡保护模型上，预防性给予百里香药茶连续5天，9.6g生药/kg剂量组死亡率为45％，死亡率明显降低。表明百里香药茶预防性给药对铜绿假单胞菌感染的小鼠具有死亡保护作用。

②在腹腔注射金黄色葡萄球菌的死亡保护模型上，治疗性给予百里香药茶，连续5天，2.4g生药/kg、4.8g生药/kg、9.6g生药/kg三个剂量组小鼠死亡率与模型对照组比较均未见显著性差异。

(Ⅲ)百里香药茶的解热作用

(1)对酵母致大鼠发热的影响

在酵母诱导大鼠发热模型上，百里香药茶对酵母致大鼠体温升高有较明显的解热作用，1.68g生药/kg剂量组于给药后2h和3h，3.36g生药/kg剂量组于给药后2h，均能明显抑制大鼠体温的升高，抑制率分别为13.03％、13.27％、14.29％，与模型组比较有显著性差异，中药阳性药感冒清热颗粒对酵母致大鼠发热则未见明显影响。

(2)对LPS致家兔发热的影响

在LPS致家兔发热模型上，百里香药茶对LPS致家兔体温升高亦有较明显的解热作用，其中0.89g生药/kg剂量组给药后5h明显抑制家兔体温的升高，与模型组比较有显著性差异。在解热抑制率上0.89g生药/kg与1.78g生药/kg剂量组抑制率分别为33.03％、38.09％，均高于中药阳性对照药感冒清热颗粒(27.98％)。

(Ⅳ)百里香药茶的镇痛作用

(1)对醋酸诱导的扭体反应的影响

在醋酸诱导的疼痛扭体反应模型上，百里香药茶2.4g生药/kg剂量组与模型组比较，扭体次数的减少和潜伏期的延长均有显著性差异，对扭体次数的抑制率为42.46％，对潜伏期的延长率为119.8％，表明百里香药茶对醋酸诱导疼痛有明显的镇痛作用。

(2)对热板试验舔足反应的影响

在小鼠热板试验的舔足反应上，百里香药茶三个剂量均能明显提高小鼠舔足反应潜伏期，其中给药后2h痛阈值较模型组提高最为显著，三个剂量组在4h内三个测定时间点痛阈值平均提高百分率分别为22.19％、28.01％、26.68％，表明百里香药茶对热板试验的热痛有明显的镇痛作用。

百里香药茶药理研究：使用甲型H1N1流感病毒FM1株/PR8株感染ICR小鼠肺炎模型，可显著改善模型小鼠肺指数，降低模型小鼠死亡率；对铜绿假单胞菌感染ICR小鼠的死亡保护作用；体外试验对多种病毒株和菌株有抑制作用，以及镇痛和解热作用。

百里香药茶毒理研究：大鼠灌胃4周重复给药毒性试验，通过血液学、血液生化学、尿液等生化指标及组织病理学检测评价百里香药茶的毒性，结果显示百里香药茶连续给予大鼠的无毒反应剂量大于28g生药量/kg/d，约为人临床日用剂量的52.8倍，未显示出明显的毒副作用。

具体实施方式

现详细说明本发明的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本发明的限制，而应理解为是对本发明的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。

应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本发明。另外，对于本发明中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。

除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了优选的方法和材料，但是在本发明的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。

在不背离本发明的范围或精神的情况下，可对本发明说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本发明的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见得的。本申请说明书和实施例仅是示例性的。

关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。

本发明以下产品中：

炙甘草炮制工艺：①净选：取甘草原药材，去除杂质、霉变等不符合要求部分，筛去细小杂质。②喷洗：将净选后甘草以饮用水喷洗，直至冲洗干净，以见本色、无尘土杂质为标准。③浸润：将洗净后的甘草放入润药机中，抽真空后开蒸汽阀门，浸润10-15min。④切制：取浸润后甘草，以切药机切制为2-4mm的片。⑤烘干：将切制后的甘草以烘箱进行烘干，平铺厚度不超3cm，温度为75-80℃，烘干时间为60-90min。⑥炮炙：取甘草片，加入沸水稀释的炼蜜，拌匀，闷润20-30min后，于炒药锅。⑦中炒炙，温度为120-150℃，炒炙时间为25-30min。炒至表面黄色至深黄色，不黏手时取出，放凉。每100kg甘草，用炼蜜25kg。⑧筛选：用振动式筛药机筛去药屑，即得。甘草苷的含量为0.55％，甘草酸铵的含量为1.72％，符合药典中炙甘草项下规定，即甘草苷的含量不低于0.50％，甘草酸铵的含量不低于1.0％

醋香附炮制工艺：①净选：取香附原药材，去除杂质、霉变等不符合要求部分，筛去细小杂质。②破碎：将净选后香附放入破碎机进行破碎，至颗粒大小均匀。③炮炙：取香附颗粒，加米醋拌匀，闷15-30min后，于炒药锅中炒炙，温度为120-150℃，炒炙时间为20-30min。④炒干，取出，放凉。每100kg香附颗粒，用米醋20kg。⑤筛选：用振动式筛药机筛去药屑，即得。

紫苏叶炮制工艺：取紫苏叶原药材，去除杂质、霉变等不符合要求部分，筛去细小杂质，即得。

陈皮炮制工艺：取陈皮原药材，去除杂质、霉变等不符合要求部分，筛去细小杂质，即得。橙皮苷的含量为6.58％，符合药典中陈皮项下规定，即橙皮苷的含量不低于3.5％。

百里香(地椒)炮制工艺：净选：取地椒原药材，去除杂质、霉变等不符合要求部分，筛去细小杂质；切段：将地椒用切药机切制成长度均匀的4cm左右的小段，即得。

实施例1

称取原料：地椒粉(百里香)400g、紫苏叶1200g、醋香附1200g、陈皮600g、炙甘草300g；

制备方法：以上五味，醋香附、紫苏叶、陈皮、炙甘草加12倍水煎煮提取3次，每次2小时，滤过，滤液以60℃减压浓缩，将提取液浓缩至相对密度为1.12时(60℃)，加入95％乙醇调整至提取液质量分数浓度为70％，搅拌均匀，冷藏过夜，滤过或离心后，取上清液80℃减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30(60℃)时，减压干燥后得浸膏粉，加入地椒粉及木糖醇300g、三氯蔗糖(总质量的0.3％)，混合均匀，制颗粒，干燥，制成1000g，分装，即得。

实施例2：对实施例1工艺参数进行细化研究

橙皮苷的含量测定方法：参照高效液相色谱法(《中国药典》2015年版四部0512)测定。

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇(A)-甲酸水(B，4:68)梯度洗脱，0～25min，28％～28％A，25～30min，28％～100％A，30～32min，100％～100％A，32～34min，100％～28％A，34～40min，28％～28％A。检测波长：283nm；柱温：35℃。

对照品溶液的制备精密称取橙皮苷对照品适量，置棕色量瓶中，加甲醇制成每1ml含约0.1mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取醇沉上清液适量至容量瓶中，加甲醇定容，超声20分钟，过滤，取续滤液，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

(1)水煎工艺条件

按实施例1处方比例分别称取陈皮、紫苏叶、甘草、醋香附4味药材饮片(总量99g)共9份，对影响提取效率的提取次数、煎煮时间和加水量3个因素进行考察，每个因素各选取3个水平，按L9(34)正交表安排试验，煎煮、浓缩、干燥，测定药液中橙皮苷的含量，并对结果进行统计学处理。结果见表1-3。

表1水煎煮工艺条件优选因素水平表

以药液中橙皮苷总量为指标作结果进行分析：

表2橙皮苷总量为指标测定结果表

表3橙皮苷转移率方差分析表

由橙皮苷总量方差分析结果可见，煎煮时间和加水量对结果均无显著性影响。结合直观分析结果，可以看出B₂、B₃，C₂、C₃的差异均较小，故对工艺条件为A₃B₂C₂(提取3次，10倍水，每次1.5小时)、A₃B₃C₃(提取3次，12倍水，每次2小时)进行研究，以便确定最佳提取工艺。

按处方比例分别称取陈皮、紫苏叶、甘草、醋香附4味药材饮片(总量99g)共6份，分别对12倍水，提取3次，每次2小时(工艺一)，以及10倍水，提取3次，每次1.5小时(工艺二)进行验证，优选最佳工艺。每个工艺平行操作3份，进行最佳提取工艺的三批验证试验，结果见表4。

表4以橙皮苷为指标的最佳提取工艺三批验证试验

由以上结果得知，以12倍水，提取3次，每次2小时橙皮苷总量较高，为最佳提取工艺，试验结果误差在允许范围内，该工艺具有可重复性和稳定性，拟作为处方水煎提取的工艺。

(2)浓缩工艺研究：考察陈皮等药材水煎液浓缩过程中温度对橙皮苷的影响。按实施例1处方比例称取陈皮、紫苏叶、甘草、醋香附4味药材132g，按最佳提取工艺进行提取，得药液约4030ml，取100ml留样，作为未浓缩样品，另取三份，每份1000ml，分别以60℃、70℃、80℃进行浓缩，控制真空浓缩压力为-0.08～-0.09mpa左右；浓缩5小时后，测定浓缩液体积及橙皮苷含量，结果如表5所示。

表5不同温度减压浓缩后药液中橙皮苷含量

由以上结果可以看出，60℃～80℃减压浓缩5h内基本不会对橙皮苷的含量造成影响，为提高生产效率，陈皮等药材水煎液浓缩工艺可以定为控制真空浓缩压力为-0.08～-0.09mpa左右，浓缩温度80℃及以下均可。

(3)精致工艺：由于处方出膏率较高，拟对提取液进行醇沉精制处理

①醇沉浓度考察：按实施例1处方比例称取陈皮、紫苏叶、甘草、醋香附4味药材约132g，按最佳提取工艺进行提取，取4000ml药液，减压浓缩；浓缩至相对密度为1.10(60℃)，体积为160ml，取40ml留样，作为未醇沉样品，其余浓缩液等分为3份，每份40ml，在浓缩液为50～60℃条件下加入不同体积的95％乙醇，边加边搅，使浓度分别为50％、60％、70％，搅拌均匀，冷藏，静置过夜(12～24h)。次日取出、减压过滤，得上清液，进行橙皮苷含量测定，结果如表6所示。

表6醇沉浓度考察

由以上结果可以看出，70％乙醇醇沉后含量较高，且50％、60％醇沉上清液分层不明显、且浑浊，减压过滤困难，故醇沉浓度定为70％。

②醇沉相对密度：按实施例1处方比例称取陈皮、紫苏叶、甘草、醋香附4味药材约132g，按最佳提取工艺进行提取，得药液，取40ml留样，作为未醇沉样品，剩余4000ml药液等分为4份，每份1000ml，减压浓缩；浓缩至不同相对密度，在浓缩液为50～60℃条件下加入不同体积的95％乙醇，边加边搅，使浓度为70％，搅拌均匀，冷藏，静置过夜(12～24h)。次日取出、减压过滤，得上清液，进行橙皮苷含量测定。另取一定体积上清液，水浴蒸干后，于105℃干燥5h，测定出膏率，结果如表7所示(未醇沉组按1000ml计算)。

表7醇沉相对密度考察

由以上结果可以看出，陈皮等提取液浓缩至相对密度为1.10-1.15时(2号和4号)，采用70％乙醇醇沉，橙皮苷含量较高，并且可以减低出膏率。

③醇沉工艺验证：按实施例1处方比例称取陈皮、紫苏叶、甘草、醋香附4味药材约198g，按最佳提取工艺进行提取，得药液取40ml留样，作为未醇沉样品，剩余药液以70℃进行减压浓缩，浓缩至相对密度为1.12(60℃)，所得浓缩液等分为三份，在浓缩液为50～60℃条件下加入95％乙醇，边加边搅，使浓度为70％，搅拌均匀，冷藏，静置过夜(12～24h)。次日取出、减压过滤，得上清液，进行橙皮苷含量测定，另取一定体积上清液，水浴蒸干后，于105℃干燥5h，测定出膏率，结果如表8所示。

表8醇沉工艺验证

综上，本处方的醇沉工艺稳定可行，最佳醇沉工艺为：将提取液浓缩至相对密度为1.10-1.15时(60℃)，在浓缩液为50～60℃条件下加入95％乙醇，边加边搅，使浓度为70％，搅拌均匀，冷藏，静置过夜(12～24h)后滤过或离心。

(4)干燥工艺研究

减压干燥：按实施例1处方比例称取处方量，按最佳提取工艺进行提取，得药液减压浓缩，浓缩至相对密度为1.15(60℃)，加入95％乙醇，使浓度分别为70％，搅拌均匀，冷藏，静置过夜。次日取出、减压过滤并离心，所得上清液减压浓缩至相对密度为1.20-1.30，60℃减压干燥。

喷雾干燥：按实施例1处方比例称取处方量，按最佳提取工艺进行提取，得药液减压浓缩，浓缩至相对密度为1.15(60℃)，加入95％乙醇，使浓度分别为70％，搅拌均匀，冷藏，静置过夜。次日取出、减压过滤并离心，所得上清液减压浓缩至相对密度为1.12，进行喷雾干燥。喷雾干燥参数：进风口温度140～170℃；进料速度5mL﹒min^-1；雾化盘驱动压力0.03～0.05MPa；旋风气流速0.45m³﹒min^-1。所得结果显示减压干燥与喷雾干燥所得橙皮苷含量基本无差异，考虑后期成型工艺等便易性，故选择减压干燥为本处方的干燥工艺。

(5)成型工艺研究

本品为茶剂中的袋装茶剂，其中地椒为原粉入药，其余四味制成干浸膏粉，为保证地椒原粉与干浸膏粉混合均匀，以及在后期的装袋过程中以及批内成品的均匀一致，故需将地椒原粉与干浸膏粉混合制粒后，装袋，制成袋装茶剂。所以本研究需对制粒工艺进行研究，具体内容如下：

地椒粉碎：本品为袋装颗粒冲剂，需进行制粒，故地椒药材的粉碎力度需满足制粒工艺顺利进行。经考察，地椒采用4号筛(250±9.9μm)时可较顺利过筛以及制粒。取100g地椒进行粉碎，过4号筛，称取过筛后药粉质量，以过筛后药粉质量/粉碎前质量×100％计算出粉率。实验室条件下其出粉率为85.2％。

辅料选择：本制剂采用湿法制粒，地椒药粉可充当部分辅料；且由于本品的服用方式为代茶饮，需保证冲服时的澄明度及改善口感，此外，为满足特殊用药群体需求(如糖尿病患者)，故本制剂的填充剂除地椒药粉外添加部分木糖醇。

乙醇浓度的选择：将处方提取物干燥粉与地椒混合后，添加木糖醇至一日处方量为10g混合药粉，混合均匀。分别加入70％、80％、85％、95％乙醇制软材，挤压过筛制粒，置于烘箱中60℃干燥，过14目筛整粒。结果显示用80％～85％乙醇浓度所制颗粒较易成型，因此选择用80％～85％乙醇制颗粒。

矫味剂的选择：经本课题组的所有成员品尝，均认为本制剂味较苦，但并无其它不适的味道，所以将加入甜味剂对本方的苦味进行矫味。为减少服用量，在矫味剂的选择上，选择三氯蔗糖为矫味剂。经多人品尝，对三氯蔗糖的用量进行筛选，结果显示加入0.3％的三氯蔗糖可明显改善原处方的苦味。

实施例3中试生产与验证

(1)三批次生产，三批投药量均为：醋香附12kg，紫苏12kg，陈皮6kg，炙甘草3kg，地椒4kg(粉碎后)；生产过程：同实施例1。

其中第一批取所得干浸膏一半(2.46kg)加入2kg地椒药粉，混合均匀，灭菌，作为药效毒理供试品，批号20190508；另外一半干浸膏加入地椒药粉及辅料后进行制粒。三批中试生产过程及结果见表9-10。

表9中试生产过程数据记录

将上述三批药液标记批号为第一批为20190508，第二批为20190514，第三批为20190521。然后将三批颗粒进行包装，灭菌处理，得中试成品。

表10中试生产三批成品数据

(2)制剂质量研究：

性状：本品3批样品内容物均为棕褐色颗粒，气芳香，味甜、微苦。

含量测定：本试验根据制剂工艺的特点，制定了陈皮有效成分橙皮苷、地椒和紫苏叶有效成分迷迭香酸的含量测定方法。

本品所含有效成分橙皮苷、迷迭香酸的含量测定按《中国药典》2015年版含量测定方法为高效液相色谱法。经检测，橙皮苷含量，结果见表11、12；

表11 3批中试样品的含测数据(n＝2)

表12 3批中试样品的含测数据(n＝2)

根据以上3批样品含量测定结果，制定了橙皮苷和迷迭香酸的含量限度。暂定每袋含陈皮以橙皮苷(C₂₈H₃₄O₁₅)计，不得少于13.60mg；每袋含地椒和紫苏叶以迷迭香酸(C₁₈H₁₆O₈)计，不得少于7.20mg。其方法专属性强，灵敏度高，为保证制剂的质量提供了可靠的依据。本发明以下为药物的效果验证部分，其中：

受试物：百里香药茶干膏粉，由中国中医科学院中药研究所新药研发中心提供，为不含辅料的中试样品，批号：20190508，有效期：20201107。性状：棕黄色粉末、芳香味。储存条件：常温。含量：1g药粉(干膏粉)相当于4.14g生药。放置于干燥柜内，室温保存。

临床拟用剂量每日37g生药，口服，成人按70kg体重计算，其临床用量为：0.53g生药/kg体重/日。

剂量设计及给药方法：百里香药茶拟临床用量为0.53g生药/kg体重/日，口服。在动物试验中百里香药茶的剂量设计为三个水平，分别约为1/2、1、2倍临床等效剂量。按体表面积折算，则小鼠剂量分别为2.4、4.8、9.6g生药/kg，大鼠剂量分别为1.68、3.36、6.72g生药/kg，家兔剂量分别为0.89、1.78、3.56g生药/kg，均约相当于临床等效剂量的1/2、1、2倍。在每一项试验中，所有动物均采用灌胃给药。

试验对照：

空白对照组：给予等体积蒸馏水。

模型对照组：给予等体积蒸馏水。

阳性对照组：结合百里香药茶抗病毒、抑菌、解热、镇痛的功效，选择市售药物作为阳性对照药，并同时设西药的阳性对照药和中药的阳性对照药，均采用灌胃给药，剂量为临床等效剂量：

①西药阳性对照药：阿司匹林，临床用于解热镇痛，本研究中作为解热、镇痛试验的阳性对照药，按药品说明书，成人临床用量为2.0g/日，按体表面积折算临床等效剂量，分别为小鼠260mg/kg，大鼠180mg/kg，家兔93mg/kg；利巴韦林颗粒，临床用于抗病毒感染，本研究中作为抗病毒试验的阳性对照药，按药品说明书，成人临床用量为0.45g/日，按体表面积折算临床等效剂量，小鼠为58.4mg/kg；阿莫西林胶囊，临床用于治疗细菌感染，本研究中作为抑菌试验的阳性对照药，按药品说明书，成人临床用量为4.0g/日，按体表面积折算临床等效剂量，小鼠为520mg/kg；

②中药阳性对照药：感冒清热颗粒，临床上用于治疗风寒感冒、头痛发热，本研究中作为解热、镇痛试验的阳性对照药，按药品说明书，成人临床用量为12.0g/日，按体表面积折算临床等效剂量，分别为小鼠1.6g/kg，大鼠1.12g/kg，家兔0.6g/kg；清热解毒口服液，临床上用于治疗流感及上呼吸道感染，本研究中作为抗病毒试验的阳性对照药，按药品说明书，成人临床用量为60mL/日，按体表面积折算临床等效剂量，小鼠为7.8mL/kg；双黄连口服液，临床上用于治疗感冒发热、咳嗽咽痛，本研究中作为抑菌试验的阳性对照药，按药品说明书，成人临床用量为60mL/日，按体表面积折算临床等效剂量，小鼠为7.8mL/kg。

效果验证1百里香药茶的抗病毒作用

1.1对H1N1流感病毒FM1株感染ICR小鼠肺炎模型的治疗作用

1.1.1试验材料

受试药物：百里香药茶(中试样品)，由中国中医科学院中药研究所新药研发中心提供。批号：20190508，有效期：20201107。性状：棕黄色粉末。储存条件：常温干燥。含量：1g药粉相当于4.14g生药。成人按70kg体重计算，临床用法用量：0.53g生药/kg体重/日，口服。

阳性对照药：①利巴韦林颗粒：四川百利药业有限责任公司。国药准字：H51023508；批号：190119；

②清热解毒口服液：江西济民可信药业有限公司。国药准字：Z19993096；批号190701。

动物：ICR小鼠，SPF级，雌雄各半，12±1g，购于北京维通利华实验动物技术有限公司，动物许可证号：SCXK(京)2016-0006，试验期间动物饲养于中国中医科学院生物安全二级实验室(ABSL-2)，许可证号：京东卫实验室备字[2016]50号。

病毒株：甲型H1N1流感病毒FM1株，本室常规传代，-80℃冰箱保存。

试验仪器：BSA8201-CW型电子天平，SARTORIUS公司；BSA3202S-CW型电子天平，SARTORIUS公司；ThermoMSC1.8A2型生物安全柜，美国Thermo公司；IVC小鼠饲养笼，苏州教学笼具厂。

1.1.2试验方法：取ICR小鼠70只，SPF级，体重12±1g，雌雄各半。按体重等级随机分为7组，分别为正常对照组、病毒模型对照组、利巴韦林对照组、清热解毒口服液对照组、百里香药茶2.4、4.8、9.6g生药/kg 3个剂量组，每组10只。除正常对照组外，将小鼠用乙醚轻度麻醉，以15个LD₅₀流感病毒液FM1滴鼻感染，每只40μL。感染当天开始给药，每次按0.2mL/10g灌胃，每天1次，连续4天，正常对照组和模型对照组在同等条件下蒸馏水灌胃。第5天称重后解剖，称肺重，计算肺指数及肺指数抑制率。结果采用组间比较t检验进行统计学处理。

肺指数(％)＝肺湿重(g)/体重(g)×100

试验结果以

表示，采用SPSS20.0统计软件中单因素方差分析，P<0.05表示差异有显著意义。

1.1.3试验结果：采用甲型H1N1流感病毒FM1株病毒感染小鼠后，小鼠肺指数明显增高，与正常对照组比较有显著性差异(P<0.01)；感染当天开始给药治疗4天后，所试的百里香药茶2.4g生药/kg剂量组肺指数与模型组比较有显著性差异(P<0.05)，肺指数抑制率为72.73％，见表13。

表13对H1N1流感病毒FM1株感染ICR小鼠肺炎模型的治疗作用

注：与正常组比较^##P<0.01；与模型对照组比较，^*P<0.05

1.2对H1N1流感病毒FM1株感染ICR小鼠肺炎模型的死亡保护作用

1.2.1试验材料同1.1.1

1.2.2试验方法：取ICR小鼠120只，SPF级，体重12±1g，雌雄各半。按体重等级随机分为6组，分别为模型对照组、利巴韦林对照组、清热解毒口服液组、百里香药茶2.4、4.8、9.6g生药/kg 3个剂量组，每组20只。各组小鼠用乙醚轻度麻醉，以2个LD₅₀流感病毒液FM1株滴鼻感染，每只40μL。感染当天开始给药，各组小鼠每次按0.2mL/10g灌胃，每天1次，连续5天，模型对照组在同等条件下蒸馏水灌胃。观察感染后2周内动物的死亡情况，计算死亡率、死亡保护率、平均存活天数和生命延长率。结果采用组间比较卡方检验和t检验进行统计学处理。

试验结果以

表示，采用SPSS20.0统计软件中单因素方差分析，P<0.05表示差异有显著意义。

1.2.3试验结果：采用甲型H1N1流感病毒FM1株病毒感染小鼠2周内，模型组动物死亡率为90％，平均存活天数为5.50±2.87天；治疗性给予百里香药茶，连续5天，3个剂量均可以延长小鼠存活天数，与模型对照组比较均有显著性差异(P<0.01)，生命延长率分别为69.09％、70.91％和58.18％，见表14。

表14对H1N1流感病毒FM1株感染ICR小鼠肺炎模型的死亡保护作用

注：与模型对照组比较，**P<0.01

效果验证2百里香药茶的抑菌作用

2.1百里香药茶的体外抑菌作用

2.1.1试验材料

受试药物同1.1.1；

菌株和病毒株：金黄色葡萄球菌(CMCC(B)26003)，肺炎链球菌(CICC22933，2017.9)，本室常规传代，-80℃冰箱保存。

培养基：哥伦比亚血琼脂培养基(批号：1006806800)；普通肉汤培养基(批号20180808，北京陆桥技术有限责任公司，170319)。

试验仪器：HZQ-F160振荡培养箱，哈尔滨市东联电子技术开发有限公司；DHP-9162电热恒温培养箱，上海一恒科技有限公司；ThermoMSC1.8A2型生物安全柜，美国Thermo。

2.1.2试验方法

2.1.2.1药液配制：称取6g肉汤粉置于清洁干燥的烧瓶中，加入200mL去离子水，充分混匀后，115℃、30min高压灭菌后备用；根据相同复方浓度进行计算，称取百里香药茶175mg，加入10mL生理盐水，超声溶解，过滤膜。以上述药液浓度为最高浓度，2倍倍比稀释7次，得到8个浓度药液，见表15。

表15 1-8号浓度百里香药茶含药量(mg/mL)

细菌培养：使用第5代细菌，直接接种于10％血琼脂斜面培养基上，37℃培养24h。

菌液配制：用棉签蘸取菌落，置于比浊仪试管中，用生理盐水定容至0.5倍麦氏浓度后备用。此时菌落浓度为1-1.5×10⁸CFU/mL。取20μL上述菌液，用生理盐水定容至2mL。此时菌液浓度为1-1.5×10⁶CFU/mL。再取上述菌液400μL，加入生理盐水1600μL，充分混匀。为生长对照。菌液终浓度为2-3×10⁵CFU/mL。

2.1.2.2血平板计数：将培养后的96孔板取出，震荡混匀后，分别取各孔培养液10μL，金黄色葡萄球菌用生理盐水稀释105倍(EP管内先加入990μL生理盐水，再加入10μL菌液混匀；再吸取上述混匀后的菌液10μL加入到另外准备的990μL生理盐水中混匀；再吸取上述混匀后的菌液100μL加入到900μL的生理盐水当中，获得涂布菌液)。肺炎链球菌稀释100倍。

准备40个血平板，每一个血平板一分为二，左右两个区域分别涂布。稀释后的菌液中取10μL置于血平板上，用涂布棒Z字形均匀涂开，置于35℃温箱中培养24h。取出培养后的血平板，记录菌落数，计算抑菌率。

2.1.3试验结果：百里香药茶浓度为0.14mg/mL时对金黄色葡萄球菌的抑菌率达到98.6％，优于其他浓度；百里香药茶浓度为0.27mg/mL、0.55mg/mL、1.09mg/mL时对肺炎链球菌抑菌率在98％以上，见表16。

表16百里香药茶各浓度对金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌的抑菌率(％)

2.2百里香药茶对细菌感染的死亡保护作用

2.2.1试验材料

受试药物、受试动物同1.1.1；

阳性对照药：①阿莫西林胶囊：珠海联邦制药股份有限公司中山分公司。国药准字：H51023508；批号：99050118；

②双黄连口服液：河南太龙药业股份有限公司。国药准字：Z41020565；产品批号：180822052。

2.2.2试验方法：取小鼠按体重随机分为6组：模型对照组、阿莫西林对照组、双黄连对照组、百里香药茶给药三个剂量组。每组20只，雌雄各半。每次按0.2mL/10g灌胃，每天1次，连续5天预防性给药，最后一次给药1小时后，各组小鼠以1×10⁹cfu/mL浓度腹腔注射0.5mL铜绿假单胞菌菌溶液，正常饲养72小时后观察动物的死亡情况，计算死亡率、死亡保护率。结果采用组间比较，死亡保护率进行卡方检验统计学处理。

2.2.3试验结果：各组预防性给药后感染铜绿假单胞菌，72小时后模型组小鼠死亡率为80％，百里香药茶9.6g生药/kg剂量组死亡率为45％，死亡率明显降低，与模型对照组比较有显著性差异(P<0.05)，见表17。

表17对铜绿假单胞菌感染ICR小鼠的死亡保护作用

注：与模型对照组比较，*P<0.05

效果验证3百里香药茶解热作用

3.1酵母致大鼠发热模型试验

3.1.1试验材料

受试药物同1.1.1；

动物：SD大鼠，SPF级，雄性，180-210g，购于北京维通利华实验动物技术有限公司，动物许可证号：SCXK(京)2016-0006，试验期间动物饲养于中国中医科学院GLP中心SPF动物房，实验室许可证号：SYXK(京)2019-0003。

阳性对照药：①阿司匹林肠溶片，拜耳医药保健有限公司，规格0.1g 30片，批号BJ48022；

②感冒清热颗粒，北京同仁堂科技发展股份有限公司制药厂，规格6g 10袋，批号19110603。

试验试剂：高活性干酵母：安琪酵母股份有限公司，标准号GB/T 20886；凡士林：北京市双桥制药二厂，批号20140315。

试验仪器：BSA8201-CW型电子天平，SARTORIUS公司；BSA3202S-CW型电子天平，SARTORIUS公司；MC-347型电子体温计，OMRON公司。

3.1.2试验方法：体重180～210g，SD大鼠85只，雄性，适应性喂养3天，每天上下午各测肛温1次(体温计插入肛门2cm，测定直肠温度，测温时轻轻挤出直肠内粪块)，选取体温在36.3～38.0℃，且体温变化不超过0.5℃的大鼠制备发热模型。

试验造模当天每隔1h测肛温1次，连续2次，取其平均值作为基础体温。根据基础体温随机选取10只作为空白对照组，剩余大鼠按20mL/kg剂量背部皮下注射20％干酵母混悬液，制备大鼠干酵母发热模型，于注射4.5h后测量肛温，选取体温升高>0.6℃的大鼠60只，根据造模后体温升高值随机分为模型组、阿司匹林组(0.18g/kg)、感冒清热颗粒组(1.12g/kg)、百里香药茶1.68g生药/kg、3.36g生药/kg、6.72g生药/kg 3个剂量组，每组10只。

分组后分别灌胃给予相应药物1次，空白对照组和模型组给予等量的蒸馏水，给药体积为15mL/kg。测定给药后1h、2h、3h和4h的肛温，并按下式计算4h内解热作用抑制率：

3.1.3试验结果：大鼠皮下注射酵母混悬液后4.5h，体温较正常对照组显著升高(P<0.001)，至给药后4h仍能维持在较高温度(与正常对照组比较P<0.001)；西药阳性药阿司匹林组于药后1h至4h均能明显抑制大鼠的体温升高(P<0.001)；百里香药茶对酵母致大鼠体温升高亦具有明显的解热作用，1.68g生药/kg剂量组于给药后2h和3h，3.36g生药/kg剂量组于给药后2h，均能明显抑制大鼠体温的升高，抑制率分别为13.03％、13.27％、14.29％，与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。百里香药茶的解热作用优于中药阳性对照药感冒清热颗粒。中药阳性对照药感冒清热颗粒未见明显解热作用。结果表明百里香药茶对酵母诱导的大鼠高热具有一定的解热作用，其作用优于中药阳性对照药感冒清热颗粒。结果见表18。

表18百里香药茶对大鼠发热模型体温的影响

注：与正常对照组比较，^###P<0.001；与模型组比较，***P<0.001，**P<0.01，*P<0.05效果验证4百里香药茶镇痛作用

4.1小鼠扭体试验

4.1.1试验材料

受试药物同1.1.1；

阳性对照药：阿司匹林肠溶片，拜耳医药保健有限公司，规格0.1g 30片，批号BJ48022；

感冒清热颗粒，北京同仁堂科技发展股份有限公司制药厂，规格6g 10袋，批号19110603。

动物：KM小鼠，SPF级，雄性，18-20g，购于北京维通利华实验动物技术有限公司，动物许可证号：SCXK(京)2016-0006，试验期间动物饲养于中国中医科学院GLP中心SPF动物房，实验室许可证号：SYXK(京)2019-0003。

试验试剂：冰乙酸，北京化工厂，批号20180923。

试验仪器：BSA8201-CW型电子天平，SARTORIUS公司，BSA3202S-CW型电子天平，SARTORIUS公司。

4.1.2试验方法：体重18～20g KM小鼠72只，雄性，适应性喂养1天后按体重随机分为6组：模型组、阿司匹林组(0.26g/kg)、感冒清热颗粒组(1.6g/kg)、百里香药茶2.4、4.8、9.6g生药/kg 3个剂量组，每组12只。各给药组灌胃给予相应剂量的受试物，模型组给予等量超纯水，给药体积20mL/kg，1次/日。连续给药4天，末次给药后1h，各组动物腹腔注射1％冰乙酸10mL/kg，注射后即刻观察15min内各组小鼠出现扭体反应的潜伏期(从注射开始到第一次扭体时间)及扭体次数，15min未扭体的小鼠潜伏期以15min计，计算扭体抑制率(％)及潜伏期延长率(％)。

4.1.3试验结果：腹腔注射醋酸会引起大面积、持久的疼痛刺激致使小鼠产生“扭体”反应，西药阳性药阿司匹林组能显著减少因醋酸致小鼠的扭体次数(P<0.01)，明显延长潜伏期(P<0.01)，百里香药茶各个剂量组均能在不同程度上减少扭体次数、延长扭体潜伏期，其中，2.4g生药/kg剂量组与模型组比较，扭体次数的减少和潜伏期的延长有显著性差异(P<0.05，P<0.01)；中药阳性对照药感冒清热颗粒在本试验中的镇痛作用不明显。结果表明百里香药茶对腹腔注射醋酸引起的疼痛具有一定的镇痛作用，其作用强于中药阳性对照药感冒清热颗粒。结果见表19。

表19百里香药茶对小鼠扭体反应的影响

注：与模型组比较，**P<0.01，*P<0.05

4.2小鼠热板试验

4.2.1试验材料：同4.1.1

4.2.2试验方法：体重18～20g KM小鼠120只，全为雌性，适应性喂养1天后放置于预热至(55±0.5)℃金属板上，以小鼠舔足反应潜伏期作为痛阈指标。试验前测定痛阈值，连续两次，剔除潜伏期小于5s或大于30s动物，并以60s为截止时间，测定两次痛阈值的平均值作为给药前的基础痛阈值。合格动物按基础痛阈值随机分为空白对照组、阿司匹林组(0.26g/kg)、感冒清热颗粒组(1.6g/kg)、百里香药茶2.4、4.8、9.6g生药/kg 3个剂量组，每组14只。试验前禁食不禁水12h，各组分别灌胃给予相应药物，空白对照组给予等量的蒸馏水，给药体积为20mL/kg，1次/日。测定给药后1h、2h和4h的痛阈值，并计算4h内痛阈平均提高百分率(％)。

4.2.3试验结果：西药阳性药阿司匹林组能明显提高能明显提高小鼠舔足反应潜伏期，其中给药后1h痛阈值较模型组提高最显著(P<0.05)；百里香药茶三个剂量均能明显提高小鼠痛阈值，并在给药后2h较对照组提高最显著(P<0.05,P<0.001,P<0.01)，三个剂量组4h内3个测定时间点痛阈值平均提高百分率分别为22.19％、28.01％、26.68％，均明显高于西药阳性对照药阿司匹林和中药阳性对照药感冒清热颗粒(20.74％、20.87％)，表明百里香药茶对热板试验的热痛有明显的镇痛作用。结果见表20。

表20百里香药茶对小鼠痛阈值的影响

注：与对照组比较，***P<0.001，**P<0.01，*P<0.05。

由此得出本发明产品：功能与主治：辛温解表、清热解毒、燥湿和胃的功效。用于单纯流行性感冒、普通四时感冒轻型。中医辨证属于风寒袭表，兼有脾胃不和者。症见发热，恶寒或恶风，咳嗽，鼻塞、喷嚏、流清涕，全身酸痛，头痛，痞满纳呆、或见恶心呕吐者，淡红舌，苔薄白，脉浮紧或浮缓。

用法与用量：每袋5g，一次1袋，一日2次，开水冲服，代茶饮。

效果验证5感冒治疗作用

对制备的百里香药方开展临床研究实验，受试药物同1.1.1。

5.1临床资料

临床资料

1、基本资料:自2014年至2018年，选择年龄在18-65岁，100例诊断明确的风塞感冒患者，其中男性患者62例，女性患者38例，采用自身对照设计，试食过程中受试者停止服用其他感冒治疗药物。

2、诊断标准:结合患者的病史、局部症状与体征、流行情况等作出判断，诊断标准参照陈灏珠主编的《实用内科学》及《中药新药临床硏究指导原则》。西医诊断标准：1)有感冒流行接触史。2)以局部症状为主，全身症状有或不明显(①局部症状：鼻塞，流涕，咳嗽，咽痛；②全身症状：恶寒发热,全身乏力，头晕头痛，四肢酸痛，食欲不振，脘腹不适)；3)血象：白细胞计数正常或偏低。中医诊断标准参照国家中医药管理局颁布的《中医病证诊断疗效标准》；风寒证，主症:恶寒重，发热轻，无汗，头痛，肢节酸疼，鼻塞声重，时流清涕，脉浮或浮紧；次症：咽瘴，咳嗽，痰吐稀薄色白，痞满纳呆，或见恶心呕吐者，舌淡苔薄白。

3、纳入及排除标准:纳入标准：1)符合中西医诊断标准；2)年龄18-65岁；3)发病后48小时内；4)本次发病后，37.3℃≤体温<39.0℃；5)无其他呼吸系统疾病。排除标准：1)不符合纳入标准者；2)过敏体质及对多种药物过敏者；3)合并心脑血管、肝、肾系统疾病及肿瘤患者；4)妊娠或哺乳期妇女。

4、配制：本门诊部代煎提供,每日两袋,150ml袋，连续服用5天。

5、疗效评价标准：症状分级量化表(症状计分)根据感冒症状分级量化表制定,症状积分(％)＝(治前积分-治后积分)/治前积分×100％。无效：临床症状、体征无改善，甚或加重，证候积分减少<30％；有效：临床症状、体征均有改善，证候积分减少≥30％，<70％；显效：临床症状、体征明显改善，证候积分减少≥70％，<95％。

5.2治疗结果

观察100例受试者，其中男性62例，女性38例，年龄最小20岁，最大61岁，平均42.4岁，病程最短3天，用药时间5天内85例。结果见表21-24。

表21患者一般资料比较

表22主要症状改善情况

表23其他全身症状

表24功效观察情况(平均有效率)

不良反应：100例患者，服用后未发现不良反应。

5.3讨论

感冒是由于六淫、时行病毒侵袭人体而致病，以风邪为主因，与其它当令乏时气相合而伤人，一般以风寒、风热两者为多见。发病关键在于正气之强弱，同时与感邪的轻重，当卫外功能减弱，肺卫调节疏懈，而外邪乘袭时，则易感受发病。外邪从口鼻、皮毛人侵，肺卫首当其冲，感邪之后，很快出现卫表及上焦肺系症状，以致卫表不和而见恶寒、发热、头疼、身痛。香苏饮是由于考虑到麻黄汤、挂枝汤辛温解表力量太过，而选用紫苏、香附等辛温解表轻剂则无此疑虑。方中紫苏为血中气药，香附气中血药，甘草兼调气血，陈皮宣邪气之郁，从皮毛而散，另加百里香“治感冒、拮风、健脾消食、止咳化痰、温中散寒”的作用。全方具有辛温发表、除湿消满、调和气血之功。用于治疗四时之感冒，症见恶寒、发热，鼻塞、流涕、喷囔、出汗或无汗，或兼见头项强痛、咽痛、肌肉酸痛、咳嗽、咳清稀自痰、胸脯满闷，暖气恶食等症状，舌苔薄白，脉浮或浮紧。方中以百里香为君药，味辛性温，散寒温中、止咳化痰。臣以紫苏、香附。紫苏味辛性温，解表散寒，以助百里香解表散寒之功；香附味辛、苦、甘。辛能降，甘能和，且香能窜，能行理气，消内壅，疏导气机，辅正除邪。且紫苏血中气药，香附气中血药，二药伍用调和气血，汗顾阴阳。佐以陈皮辛温能下气燥湿，以消胸膈满闷，嗳气恶食；使以甘草，引药入中焦脾胃，立足中焦以济四方，且甘平能和中辅正，所以治瘟疫四时不正之气，兼有调和诸药之功。诸药合用，共奏解表散寒，调和气血，燥湿消满之功。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种百里香药茶，其特征在于，质量份数计，原料为：百里香4份、紫苏叶12份、醋香附12份、陈皮6份、灸甘草3份；所述百里香药茶的制备方法包括：将紫苏叶、醋香附、陈皮、灸甘草加水浸提、浓缩干燥得浸膏粉，浸膏粉和百里香粉混合得百里香药茶；

具体包括以下步骤：醋香附、紫苏叶、陈皮、炙甘草加12倍水，煎煮提取3次，每次2小时，过滤，滤液以60℃～80℃减压浓缩，将提取液浓缩至60℃下的相对密度为1.10-1.15，加入95％乙醇调整至提取液质量分数浓度为70％，搅拌均匀，冷藏过夜，滤过或离心后，取上清液60℃～80℃减压回收乙醇，浓缩至60℃下的相对密度为1.25-1.30，减压干燥后得浸膏粉，加入百里香粉及木糖醇、三氯蔗糖，混合均匀，制颗粒，干燥，分装，灭菌即得百里香药茶；

所述百里香药茶中百里香为君药，紫苏叶、醋香附为臣药，陈皮为佐药，甘草为使药。

2.根据权利要求1所述的百里香药茶，其特征在于，所述百里香粉粒径为250±9.9μm。

3.根据权利要求1所述的百里香药茶，其特征在于，所述制颗粒、干燥包括：加入80-85％的乙醇制软材，挤压过筛制粒，60℃干燥，过14目筛整粒；所述灭菌为Co-60γ灭菌，灭菌剂量为1.5k Gy～2.5k Gy。

4.根据权利要求1所述的百里香药茶，其特征在于，所述干燥为60℃减压干燥或喷雾干燥；

喷雾干燥参数：进风口温度140～170℃；进料速度5mL﹒min^-1；雾化盘驱动压力0.03～0.05MPa；旋风气流速0.45m³· min^-1。

5.根据权利要求1所述的百里香药茶，其特征在于，所述三氯蔗糖的加入量为百里香药茶质量的0.3％。

6.一种根据权利要求1所述的百里香药茶的应用，其特征在于，在制备治疗感冒、抗病毒、抑菌、解热、镇痛药物中的应用。

7.根据权利要求6所述的百里香药茶的应用，其特征在于，所述感冒为普通感冒或流行性感冒。