CN1239170C - 一种用于治疗肝癌的中成药 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种用于治疗肝癌的中成药及其制备方法，它由红参、黄芪、蟾蜍、斑蝥及适量辅料制备而成；与现有技术相比，本药的疗效性和安全性更高，使一些具有抗癌活性的中药成分被充分利用，毒性成分的含量得到严格控制，具有益气扶正，消瘀散结的功能，产品用于中晚期原发性肝癌气虚淤滞证右胁腹积块，疼痛不移，腹胀食少，倦怠乏力等症疗效显著。

Description

一种用于治疗肝癌的中成药

技术领域：本发明涉及一种用于治疗肝癌的中成药及其制备方法，属于中药技术的领域。

背景技术：癌症是严重危害人民生命健康和生命的常见多发病。近年来我国每年约160万人死于癌症，而在国内癌症死亡人群中又以肝癌的死亡率位居第一。由于我国目前有1.2亿HBV携带者，因此，对肝癌病的治疗，特别是缓解中晚期肝癌病人的痛苦，延长其生存期并提高生存质量等都是本领域非常迫切解决的研究课题。目前西医治疗肝癌除手术外，主要采用化疗，化疗往往一方面进行大量的杀死癌细胞和正常细胞，另一方面又进行快速的补充高营养，使患者机体细胞始终处于极度疲劳之中，瘤体虽在短时间内可明显缩小，但很快就会复发。而传统中医药对肿瘤的治疗方式及药物也存在有用药不全面、疗效不稳定和治愈率低等问题。中国专利公报公开了名称为“含有人参和黄芪成分的注射液”、申请号为941014568的专利申请，该申请用于提高人体免疫功能、抑制肿瘤发生有一定的效果，但它至少存在三方面的问题：一是药物构成中毒性药材的用量比较大；所以副作用也比较大，影响治疗效果；二是剂型过于单一，对于患者来讲，仅仅只有注射液制剂显然难于满足医患双方的需求，给药不方便；三是生产工艺比较落后，尤其是提取精制工艺不合理，严重影响注射剂的质量，同时，注射剂工艺复杂，成本高。在充分意识到该项专利存在的缺陷之后，本发明人对其存在问题进行了技术上的详细研究；本申请人曾经于2003年8月6日向专利局提交了名称为：一种用于治疗肝癌的中成药，申请号：031344682；该申请力求解决现有技术存在的问题；但是由于当时发明尚未完全完成，所以提交的申请并不完全、完整；经过近一年的工作，现在本申请人已经基本完全完成了发明工作。

发明内容：本发明的目的在于：提供一种用于治疗肝癌的中成药及其制备方法。这种制剂的配方、比例比较合理，它的剂型选择比较适合于对肝癌这种疾病患者的治疗，而且研制的制备方法比较科学可行，得到的制成品于现有产品相比，其毒副作用小；治疗效果更加理想。本发明是这样构成的：治疗肝癌的中成药，按照重量组分计算，它主要由红参500-1500份；黄芪2000-4000份；蟾蜍2.5-5.5份；斑蝥10-30份制备而成。具体的：它由红参1000份、黄芪3000份、蟾蜍4份、斑蝥20份及适量辅料制备而成。所述辅料根据制备不同的剂型包括：淀粉、甜蜜素、橘子香精、山梨酸钾、甘露醇等。本发明所述制剂包括颗粒剂、胶囊剂、片剂、滴丸、口服液体制剂、注射剂(包括小针、输液、冻干粉针)、缓释制剂、控释制剂等。所述中成药制备成的最理想的制剂是：口服液制剂、胶囊剂、冻干粉针制剂。

这种治疗肝癌的中成药的制备方法是：将红参、黄芪、蟾蜍、斑蝥分别提取精制后，再加入适当的辅料制备成不同的制剂。

本发明中成药口服液制剂制备方法：将红参切片用乙醇回流提取3次，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成清膏1备用；药渣用水煎煮，滤过，滤液浓缩成清膏，加乙醇静置，滤取沉淀，低温干燥，得干粉1备用；黄芪切片，加水煎煮3次，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩后用乙醇沉淀，滤液回收乙醇并浓缩成清膏2备用；滤取的沉淀真空干燥，得干粉2备用；生蟾酥细粉用25倍乙醇浸泡过夜，然后回流4小时，滤过，滤液回收乙醇后得清膏3备用；生斑蝥细粉用盐酸-丙酮液浸泡，回收丙酮，残留液用乙醇-乙醚液洗涤，滤取沉淀，干燥得斑蝥提取物，加入上述3种清膏，2种干粉及甜蜜素、桔子香精、山梨酸钾，搅拌溶解，加水，调节PH值，滤过，灌装，灭菌，即得。本剂型的优点是：味道可口，起效迅速；生物利用度高。

本发明中成药胶囊剂制备方法：将红参切片用乙醇回流提取3次，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成清膏，喷雾干燥，得细粉1备用；药渣用水煎煮，滤过，滤液浓缩成清膏，加乙醇静置，滤取沉淀，低温干燥，粉碎成细粉，得细粉2备用；黄芪切片，加水煎煮3次，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩后用乙醇沉淀，滤液回收乙醇并浓缩成清膏，喷雾干燥，得细粉3备用；滤取的沉淀真空干燥，粉碎成细粉，得细粉4备用；生蟾酥细粉用25倍乙醇浸泡过夜，然后回流4小时，滤过，滤液回收乙醇，减压干燥，粉碎成细粉，得细粉5，备用；生斑蝥细粉用盐酸-丙酮液浸泡，回收丙酮，残留液用乙醇-乙醚液洗涤，滤取沉淀，干燥得斑蝥提取物，加入上述5种细粉及淀粉，混匀，乙醇制粒，过筛，干燥，整粒，灌装，即得。

本发明中成药冻干粉针制剂制备方法：生蟾酥细粉用25倍乙醇浸泡过夜，然后回流4小时，滤过，滤液回收乙醇后备用；生斑蝥细粉用盐酸-丙酮液浸泡，回收丙酮，残留液用乙醇-乙醚液洗涤，滤取沉淀，干燥得斑蝥提取物备用；红参切片，用8倍量75％乙醇回流提取3次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，浓缩后用乙醚萃取，挥去乙醚，过滤，滤液用水饱和的仲丁醇萃取，回收仲丁醇，浓缩后加乙醇冷藏过夜，滤过，滤液浓缩成清膏，得红参皂苷提取物备用；乙醇提取后的药渣用水煎煮，滤过，滤液浓缩后加乙醇静置，滤取沉淀，干燥得红参粗多糖，加水煮沸溶解，上清液浓缩，聚酰胺层析，用水洗脱，洗脱液浓缩后加乙醇静置，滤取沉淀，真空干燥，得红参多糖；黄芪切片，加水煎煮3次，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩后用乙醇沉淀，滤液回收乙醇并浓缩后加乙醇，冷藏过夜，过滤，滤液回收乙醇，浓缩后用水饱和的仲丁醇萃取，回收仲丁醇，浓缩后过滤澄明得黄芪皂苷提取液备用；滤取的沉淀真空干燥，粉碎后用蒸馏水煮沸溶解，上清液浓缩成稠膏，聚酰胺层析，用水洗脱，洗脱液滤过，滤液浓缩后加乙醇静置，滤取沉淀，真空干燥，得黄芪多糖备用；取红参皂苷提取液和黄芪皂苷提取液，加水稀释，调节pH，活性炭吸附，过滤澄明备用；取红参多糖和黄芪多糖，加水煮沸溶解，过滤澄明，加甘露醇煮沸溶解后，活性炭吸附，过滤澄明备用；取斑蝥提取物，加水，氢氧化钠液调节pH，加蟾酥提取物搅拌溶解，滤过，滤液与上述红参和黄芪皂苷提取物滤液混匀，再将此混合液加至上述多糖和甘露醇混合液中，加注射用水至全量，调节pH，精滤澄明，无菌分装，冷冻干燥，封口，即得。

鉴于原生产工艺比较落后，对于各种剂型的新工艺，我们也作了实验选择：

蟾蜍：原注射液工艺是用10倍量95％乙醇浸泡24小时，结果脂蟾毒配基和华蟾蜍次素仅被浸出50％，还有50％未被浸出，现改为25倍乙醇浸泡过夜，然后回流4小时，此种工艺有效成分含量提高1倍。

两种提取精制方法所得结果之比较

提取精制方法      提取液量(ml)    脂蟾毒配基和华蟾蜍次素总量(mg/ml)

原注射液浸泡法       100ml                     1.12

浸泡回流法           100ml                     1.51

结果表明，改进后的方法有效成分有较大提高，故选用浸泡回流法提取，冷藏过滤法精制。

斑蝥：原注射液是煎煮提取石硫法精制，此方法不但脂溶性色素等杂质未除去，呈深棕色，而且斑蝥素等有效成分损失大，严重影响注射液的质量。根据主要有效成分班蝥素、斑蝥素钠理化性质，设计了丙酮浸泡和乙醇-乙醚洗涤法及氯仿浸泡和乙醇-乙醚洗涤法两种提取精制方法。

两种提取精制方法所得结果之比较

提取精制方法    所得提取物(g)    收得率(％)    斑蝥素含量(％)

1.丙酮法           3.24             16.2          56.42

2.氯仿法           3.30             16.5          56.45

结果表明，两种方法所得结果基本一致，因丙酮为为低毒溶剂，故用丙酮法。

红参：原注射液人参药材仅用45-55％乙醇回流3次，杂质未除去，人参皂苷损失太大；人参多糖基本上未提取利用，而作为抗癌药，人参多糖是主要有效成分。

鉴于红参多糖不溶于醇而易溶于水，因此，醇提后的药渣可用水煎煮提取红参多糖。

红参皂苷提取物精制工艺

仲丁醇萃取与正丁醇萃取精制结果

考察指标                       仲丁醇萃取法     正丁醇萃取法

红参皂苷提取物(ml)                 200              200

提取物红参皂苷含(mg/ml)            11.02            10.78

提取物的固形物(mg/ml)              121.2            128.8

蛋白质                             未检出           未检出

鞣质                               未检出           未检出

树脂                               未检出           未检出

草酸盐                             未检出           未检出

钾离子                             未检出           未检出

结果表明，仲丁醇萃取精制法与正丁醇萃取精制法所得提取物样品的质量基本一致，鉴于仲丁醇沸点较低，易于回收。

红参多糖精制工艺筛选结果

考察项目          所得精制多糖量(g)     多糖含量(以葡萄糖计，％)

多次醇沉法            55.0                      58.3

聚酰胺层析法          50.2                      65.5

结果表明，聚酰胺层析法不但所得红参多糖纯度高，而且工艺简便，易于过滤澄明，省时省工省材料。

黄芪：原注射液工艺黄芪仅用水煎煮3次，并使用上世纪50年代石硫法精制，不但杂质未除去，有效成分提取也不完全。

两种提取工艺的比较

提取工艺	黄芪甲苷量(mg)	药材中甲苷量(mg)	甲苷提取转移率(％)	粗多糖及多糖百分含量(g)/(％)
					乙醇回流法水醇法	42.442.8	66.666.6	63.6664.26	4.14/50.724.51/53.12

水提醇沉法所提得的粗多糖较多，且多糖含量也较高，同时提取次数减少一半，省时、省事、省能源。

因黄芪甲苷和黄芪多糖是采取水提醇沉分离，因此只需作纯化研究。

黄芪甲苷两种方法纯化工艺结果

纯化工艺        固形物(mg/ml)    含甲苷量(mg/ml)        杂质检查

仲丁醇萃取法        57               1.63               符合要求

乙醇沉淀法          94               1.47               符合要求

以上结果表明，仲丁醇萃取法所得提取物固形物低，纯度高，黄芪甲苷含量亦更高。

黄芪多糖纯化工艺研究结果

纯化方法	所得精制多糖考察结果
				所得精制多糖量(g)	多糖含量(％)	杂质检查
	多次乙醇沉淀法聚酰胺吸附洗脱法	24.3420.42	48.1056.41				符合要求符合要求

结果表明，聚酰胺柱层析法所得精制多糖纯度高且所多糖洗脱液易于过滤澄明，所得精制多糖水易溶解澄明。

相对于已有技术(名称为“含有人参和黄芪成分的注射液”、中请号为941014568的专利申请)来讲，本申请中提高了人参和黄芪在方中的用量，而降低了蟾蜍、斑蝥在方中的用量；既保证本发明提供的药物具有有效的治疗效果；又确保其治疗过程中将毒副作用将到最低。实验如下：

试验方法

1.按对照研究原则，试验设立试验组与对照组，对照组包括空白对照和阳性对照，试验组给予本药注射液，空白对照组给予生理盐水，阳性对照药选用“含有人参和黄芪成分的注射液”、申请号为941014568的技术制备的产品。

2.剂量设置：

试验组设高、中、低三个剂量组，对照组设低剂量组。

2.1试验组给药剂量以本药注射液小鼠尾静脉给药LD50为参数，按LD50的1/15、、1/50剂量为给药剂量，依次分别为：1493mg/kg、896mg/kg、448mg/kg。对照组按LD50的1/25剂量设置剂量组，即452mg/kg；空白对照组静脉注射生理盐水，每次按0.5ml/只给予。

2.2给药容积

各组小白鼠每次经药容剂为0.5ml/只，采用等容积不等浓度给药。

2.3给药方法

试验各组的给药途径均采用与临床一致的静脉给药途径，从小白鼠尾静脉给药。试验组每日给药一次，连续给药七日。空白对照组每日给生理盐水一次，连续七日。阳性对照组每日给药一次，连续七日。

2.4试验步骤

在无菌条件下，从接种7-8天生长良好的种鼠体内抽取瘤液，取瘤液0.2ml(100万/0.1ml)接种于小白鼠右前肢腋部皮下，24小时后随机分组，各组按相应给药方法、剂量分别给药，给药后观察动物反应，于给药后第九天处死动物，记录体重，解剖后记录瘤重，计算瘤重抑制率。结果如下：

本药注射液对小鼠S180实体瘤的作用。

组别          N        剂量       抑制率        平均瘤重

模型对照组    30                                3.89±0.61

阳性对照组    30                  34.2          2.56±0.51^*

大剂量组      30                  50.6          1.92±0.49^*△

中剂量组      30                  45.5          2.12±0.78^*△△

小剂量组      30                  36.5          2.47±0.55^*

注：与模型对照组比较*P＜0.01

与阳性对照组比较△P＜0.01，△△P＜0.05

从上表可见，本药注射液小剂量组与“含有人参和黄芪成分的注射液”小剂量组对小鼠S180实体瘤的作用相比较P＜0.05，无统计学差异，说明两组的疗效相当。

二、试验方法

1.按对照研究原则，试验设立试验组与对照组，对照组包括空白对照和阳性对照，试验组给予本药注射液，空白对照组给予生理盐水，阳性对照药选用“含有人参和黄芪成分的注射液”。

2.剂量设置：

试验组设高、中、低三个剂量组，对照组设低剂量组。

2.1试验组给药剂量以本药注射液小鼠尾静脉给药LD50为参数，按LD50的1/15、、1/50剂量为给药剂量，依次分别为：1493mg/kg、896mg/kg、448mg/kg。对照组按LD50的1/25剂量设置剂量组，即452mg/kg；空白对照组静脉注射生理盐水，每次按0.5ml/只给予。

2.2给药容积

各组小白鼠每次经药容剂为0.5ml/只，采用等容积不等浓度给药。

2.3给药方法

试验各组的给药途径均采用与临床一致的静脉给药途径，从小白鼠尾静脉给药。试验组每日给药一次，连续给药七日。空白对照组每日给生理盐水一次，连续七日。阳性对照组每日给药一次，连续七日。

2.4试验步骤

在无菌条件下，从接种7-8天生长良好的种鼠体内抽取瘤液，取瘤液0.2ml(100万/0.1ml)接种于小白鼠右前肢腋部皮下，24小时后随机分组，各组按相应给药方法、剂量分别给药，观察并记录各组小鼠生存天数，待小白鼠全部死亡后，计算生命延长率。结果如下：

本药注射液小鼠艾氏腹水瘤的作用

组别          n         剂量        生命延长率        平均生存天数

模型对照组    30                                      17.2±5.21

阳性对照组    30                    34.2              33.2±6.29^*

大剂量组      30                    50.6              39.1±6.84^*△

中剂量组      30                    45.5              35.6±6.52^*

小剂量组      30                    36.5              34.7±5.97^*

注：与模型对照组比较*P＜0.01

与阳性对照组比较△P＜0.01

从上表可见，本药注射液小剂量组与“含有人参和黄芪成分的注射液”小剂量组对小鼠S180实体瘤的作用相比较P＜0.05，无统计学差异，说明两组的疗效相当。

三、方法同上。结果如下：

本药注射液对小鼠实体型肝癌的抑制作用

组别          N        剂量        抑制率       平均瘤重

模型对照组    30                                2.56±0.37

阳性对照组    30                   17.2         2.12±0.45^*

大剂量组      30                   59.4         1.04±0.38^*△

中剂量组      30                   42.4         1.52±0.33^*△

小剂量组      30                   21.5         2.01±0.41^*

注：与模型对照组比较*P＜0.01

与阳性对照组比较△P＜0.01

从上表可见，本药注射液小剂量组与“含有人参和黄芪成分的注射液”小剂量组对小鼠实体型肝癌的抑制作用相比较P＜0.05，无统计学差异，说明两组的疗效相当。

四、急性毒性试验

“含有人参和黄芪成分的注射液”从静脉和腹腔两种给药途径对小白鼠给药后，测定出静脉注射LD50为11.27g/kg，腹腔注射LD50为15.60g/kg；本药注射液从静脉和腹腔两种给药途径对小白鼠给药后，测定出静脉注射LD50为22.4g/kg，腹腔注射LD50为27.8g/kg。从以上两组数据可见，本药注射液的LD50接近于“含有人参和黄芪成分的注射液”的两倍。

与现有技术相比，本药的疗效性和安全性更高，使一些具有抗癌活性的中药成分被充分利用，毒性成分的含量得到严格控制，具有益气扶正，消瘀散结的功能，产品用于中晚期原发性肝癌气虚淤滞证右胁腹积块，疼痛不移，腹胀食少，倦怠乏力等症疗效显著。

原发性肝癌属中医“徵积”的范畴，既以正虚瘀结为主要证候的瘀积证，症见右胁腹积块，疼痛不移，腹胀食少，倦怠乏力等。瘀积之正虚瘀结证候是在正虚基础上，邪毒与气血相搏结而成。正气不足，邪毒留着，气血瘀滞，脉络瘀阻，故胁腹积块，痛处不移；肝气郁结，木不疏上，脾胃运化失常，故见纳减，腹胀；日久气血生化乏源，则倦怠乏力，逐渐消瘦；肝失疏泄，胆液受阻，不循常道，外溢肌表，又可见黄疸。面色多萎黄或黧黑，舌质瘀黯，脉象弦细是正虚邪实之证。根据正虚瘀结证候之正虚邪实的基本病机，扶正祛邪乃为其治疗原则。因其正气虚弱、气血瘀滞，瘀毒蕴结的病机特点，益气固本，消徵散结、解毒止痛为其治法。在以上制方中，人参味甘微苦、性平，大补元气为君，人参为中药疗虚祛邪之首，《本经》谓其“补五脏，安精神，定魂魄，止惊悸，除邪气”，《本草纲目》说：“治男妇一切虚证”，《本草经疏》述“人参能回阳气于垂绝，却虚邪于俄倾”，故本方以其为君；黄芪益气扶正为臣，《别录》称其“补丈夫虚损，五劳羸瘦”，《医学衷中参西录》说黄芪“为补气之功最优”，黄芪甘温，与人参配伍，则补气扶正功增，此君臣共效，俟气旺精血生，则可望正扶本培。真气得充，则气壮血行，方能“健行而磨物”，正如《本草经疏》所谓“邪气之所以久留不去者，无他，真气虚则不能敌，故留连而不解也。兹得补而真元充实，则邪不能自容……通脉者，血不自行，气壮则行，故通血脉，破坚积者，真气不足则不能健行而磨物”；蟾酥辛温有毒，解毒消肿止痛，斑蝥辛热有大毒，攻毒破血散结，《本草汇言》记载蟾酥“能化解一切瘀郁壅毒诸疾”，而李士材在《本草图介》中谓斑蝥“攻血积，利水道，治癥瘕……”佐使此二味以祛邪，则全方扶正祛邪功全。处方扶正固本不遗邪，解毒消不忘正。方中蟾酥、斑蝥辛温有毒，用于本方亦有“以毒攻毒”之意，然其毒性未敢稍许轻视，此两味与人参、黄芪为伍，可使其毒性得到抑制，并在制剂时通过严格控制其剂量和工艺处理而尽力避抑其毒性，故以此两味为本方佐使。本发明所述药物的全方药味不多，君臣佐使相配得当，紧守病机，遵法而伍，组方严谨，可共奏扶正祛邪、消徵散结之效能，尤适用于以正虚瘀结为主要证候的瘀积证。

疗效观察(以注射液为例)

1、诊断标准

1.1中医诊断、证候标准：

原发性肝癌属中医“徵积”的范畴，根据《新药(中药)治疗原发性肝癌临床指导原则》辨证分型标准，并结合本药的主治功效，主治气虚瘀滞型的症积(原发性肝癌)及其兼证。

气虚瘀滞证：神疲乏力、少气懒言、纳谷少馨、胸闷胁痛、腹胀、腹部肿块、舌质淡胖有齿痕，暗或有紫斑、脉虚弱或弦。

兼阴虚证；

兼血虚证；

兼湿证。

1.2西医诊断标准

根据《中国常见恶性肿瘤诊治规范》所制定的标准为依据。

1.2.1病理诊断

肝内病灶检查证实为原发性肝癌。

肝外转移灶检查证实为肝细胞性肝癌。

1.2.2细胞学诊断

a)有典型的症状及肝癌影像学；

b)腹水中查到肝癌细胞；

具有以上两项，符合细胞学诊断。

1.2.3临床诊断

a)AFP对流以流法阳性或放射免疫法≥400ng/ml并持续1月以上或AFP≥200ng/ml并持续2月以上，并能排除妊娠，活动性肝病，生殖腺胚胎源性肿瘤及转移性肝癌者；

b)影像学检查有肝内实质性占位病变；

具备以上两项者符合临床诊断。

2、纳入标准：

2.1.1所有测试病例必须符合上述诊断或辩证标准。

2.1.2估计生存期能超过2月。

2.1.3Karnofsky氏评分在40分以上。

2.1.4年龄：自≥18岁至≤75岁。

3、试验方法

3.1分组情况

458例原发性肝癌患者，随机分为治疗组和对照组，其中治疗组315例，化疗对照组143例。两组患者在性别、年龄、生存质量、癌灶大小、癌灶数、门静脉癌栓、临床分期、甲胎蛋白水平、免疫指标、中医证型及兼证情况等方面组间无显著性差异，具有可比性。

3.2用药方法

3.2.1治疗组

本发明所述药物注射液40～60cc

5％GS  500cc  静滴，每分钟30～60滴，每日1次，×45d。3.2.2对照组(FAM)

5-FU  300mg/m2  静滴  第1、2、4、5周

ADM  20-30mg/m2  静注  第1，4周

MMC  3-4mg/m2  静注  第1、2、4、5周

每1周用药一次，3周为1周期，共两周期。

3.3观察项目

3.3.1临床症状：

一般症候、消化系统症候、心血管系统症候、泌尿道症候、神经系统症候。

3.3.2生存期

3.3.3生存质量

3.3.4实验室检查

3.3.5心电图

3.3.6原发灶影像学检查

3.3.7其它部位影像学检查

4、疗效评定标准：

4.1肿瘤大小

4.1.1完全缓解(CR)：可见肿瘤消失并持续一个月以上。

4.1.2部分缓解(PR)：肿瘤两个最大的相互垂直的直径乘积缩小50％以上，并持续一个月以上。

4.1.3稳定(SD)：肿瘤两个最大的相互垂直的直径税种缩小不足50％，增大不超过25％，并持续一个月以上。

4.1.4恶化(PD)：肿留两个最大的相互垂直的直径乘积增大超过25％、或出现新病变。

总缓解率  CR+PR

4.2临床证候疗效标准

4.2.1单项指标评定标准

显效：该病例治疗后与治疗前比较下降二个级差者。

有效：该病例治疗后与治疗前比较下降一个级差者。

无效：未达到上述标准者。

4.2.2综合评定标准：

II期  显效：该病员单项症状中有2/3以上达到有效者。

有效：该病员单项症状中有1/2以上达到有效者。

无效：未达到上述标准者。

III期  显效：该病员单项症状中有1/2以上达到有效者。

有效：该病员单项症状中有1/3以上达到有效者。

无效：未达到上述标准者。

总有效率＝显效+有效

4.3生存质量评定标准

按Karnofsky评分治疗前、治疗后比较：

显效：治疗后比治疗前增加20分者。

有效：治疗后比治疗前增加10分者。

无效：未达到上述标准者。

总有效率＝显效+有效

4.4生存期(治后生存期)评定标准

从治疗开始时至死亡或末次随访为止。

试验结果：本发明提供的注射液和化疗组中医证候改善率分别为75.2％和46.2％；肿瘤部分缓解率为9.2％和11.9％；AFP下降为47.9％和37.1％；中位生存期为7.0月和4.0月，其中生存超过12月的为7％和3.5％；Karnofsky生活质量计分上升的分别为67.6％和36.4％；免疫指标治疗后CD4/CD8分别为1.63和1.39。和化疗相比，本发明制剂的不良反应较低，无化疗常见的骨髓抑制和消化道反应，极少数病人有泌尿道刺激症状。

此外，对于各种剂型的制备需要选用不同的辅料，我们也作了实验选择：

口服液辅料选择结果：

考察项目	辅料
				空白	淀粉	糊精
	制粒	难	易				较难
崩解时限				56	15	23
	颗粒流动性(°)	49	37				43
颗粒CRH(％)				31	53	41

胶囊剂辅料选择结果：

考察项目	辅料
					甜蜜素(g)	橘子香精(ml	山梨酸钾(g)	结果
	口感	10	5	1.5					+
15					10	2	+++
		20	15	2.5				+
气味					10	5	1.5		++
	15	10	2	+++
					20	15	2.5	+
	防腐	10	5	1.5					+
15					10	2	++
		20	15	2.5				+

甘露醇既是疏松剂又是助溶剂，常单独使用所以选用甘露醇作为疏松助溶剂。

冻干粉针剂在稀释剂中的稳定性

稳定性考察结果表明：粉针剂上述两种注射液稀释放置24小时，其外观性状、pH值和含量，均无明显变化，表明可以使用上述两种注射液稀释后静脉滴注。

具体结果见下表：

冻干粉针剂在两种输液中稳定性考察结果

考察时间	考察项目	稀释剂名称(稀释成500ml)
				5％葡萄糖注射液	0.9％氯化钠注射液
		0小时	外观性状PH值总皂苷含量(mg/瓶)总多糖含量(mg/瓶)脂蟾毒配基和华蟾蜍次素总含量(mg/瓶)			浅黄色澄明液体7.1511.141.30.13	浅黄色澄明液体7.3411.041.20.13
4小时	外观性状PH值总皂苷含量(mg/瓶)总多糖含量(mg/瓶)脂蟾毒配基和华蟾蜍次素总含量(mg/瓶)			浅黄色澄明液体7.1511.141.30.13	浅黄色澄明液体7.3411.041.20.13
		8小时	外观性状pH值总皂苷含量(mg/瓶)总多糖含量(mg/瓶)脂蟾毒配基和华蟾蜍次素总含量(mg/瓶)			浅黄色澄明液体7.1511.141.30.13	浅黄色澄明液体7.3411.041.20.13
12小时	外观性状pH值总皂苷含量(mg/瓶)总多糖含量(mg/瓶)脂蟾毒配基和华蟾蜍次素总含量(mg/瓶)			浅黄色澄明液体7.1511.141.30.13	浅黄色澄明液体7.3411.041.20.13
		24小时	外观性状pH值总皂苷含量(mg/瓶)总多糖含量(mg/瓶)脂蟾毒配基和华蟾蜍次素总含量(mg/瓶)			浅黄色澄明液体7.1511.141.30.13	浅黄色澄明液体7.3411.041.20.13

具体实施方式：

本发明的实施例1：将红参500g切片用8倍量75％乙醇回流提取3次，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成相对密度为1.0-1.2的清膏备用；药渣用8倍量水煎煮3次，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩成1.10-1.25的清膏，加乙醇达75％，静置，滤取沉淀，低温干燥备用。黄芪2000g切片，加水煎煮3次，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩后用乙醇沉淀，滤液回收乙醇并浓缩成每1ml相当于药材5-8g的清膏备用；滤取的沉淀真空干燥备用。生蟾酥2.5g成细粉用25倍乙醇浸泡过夜，然后回流4小时，滤过，滤液回收乙醇后备用；生斑蝥10g成细粉用盐酸-丙酮液浸泡，回收丙酮，残留液用乙醇-乙醚液洗涤，滤取沉淀，干燥得斑蝥提取物，加入上述清膏，药渣提取物及45g甜蜜素、30ml桔子香精、6g山梨酸钾，搅拌溶解，加水至5000ml，，调节PH值至5.5-7.0，滤过，灌装，105℃灭菌30分钟，即得。10ml/支，口服，一日2～3次，一次1支。

本发明的实施例2：将红参1500g切片用8倍量75％乙醇回流提取3次，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成相对密度为1.0-1.2的清膏，喷雾干燥备用；药渣用8倍量水煎煮3次，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩成1.10-1.25的清膏，加乙醇达75％，静置，滤取沉淀，干燥，粉碎成细粉备用。黄芪4000g切片，加水煎煮3次，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩后用乙醇沉淀，滤液回收乙醇并浓缩到每1ml相当于药材5-8g的清膏，喷雾干燥备用；滤取的沉淀真空干燥，粉碎成细粉，备用。生蟾酥5.5g成细粉用25倍乙醇浸泡过夜，然后回流4小时，滤过，滤液回收乙醇，减压干燥，粉碎成细粉。生斑蝥30g成细粉用盐酸-丙酮液浸泡，回收丙酮，残留液用乙醇-乙醚液洗涤，滤取沉淀，干燥得斑蝥提取物，加入上述细粉及420g淀粉，混匀，65％乙醇制粒，过30目筛，60℃干燥，整粒，灌装，即得。口服，一日2～3次，一次5粒。

本发明的实施例3：生蟾酥4g成细粉用25倍量乙醇浸泡，回流提取4小时，滤过，滤液回收乙醇后备用；生斑蝥20g成细粉用加5倍量盐酸-丙酮液浸泡，回收丙酮，残留液用10倍量乙醇-乙醚液洗涤，滤取沉淀，60℃下干燥得斑蝥提取物备用；红参1000g切片，用8倍量75％乙醇回流提取3次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至相对密度1.0-1.2左右，乙醚萃取3次，挥去乙醚，过滤，滤液用水饱和的等体积仲丁醇萃取4次，回收仲丁醇，浓缩至相对密度1.0～1.15(50℃)后加乙醇至45％，冷藏过夜，滤过，滤液浓缩成每1ml约相当于药材4-5g的清膏，得红参皂苷提取物备用；乙醇提取后的药渣用8倍量水煎煮3次，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.10～1.25(60℃)，加乙醇至75％，滤取沉淀，干燥得红参粗多糖，加水煮沸溶解，上清液浓缩，聚酰胺层析，用水洗脱，洗脱液浓缩后加乙醇静置，滤取沉淀，真空干燥，得红参粗多糖；加水煮沸溶解，上清液浓缩至相对密度1.10-1.20左右(60℃)，聚酰胺层析，用水洗脱，洗脱液浓缩至相对密度1.20-1.30左右(60℃)，后加乙醇达80％，滤取沉淀，真空干燥，得红参多糖；黄芪3000g切片，加水煎煮3次，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩至每1ml相当于药材1.5-2g，用乙醇沉淀(75％)，上清液同法沉淀1次，过滤，合并滤液，回收乙醇并浓缩至每1ml相当于药材8-10g，加乙醇达80％，过滤，滤液回收乙醇并浓缩至180-200ml，用水饱和的仲丁醇萃取4次，回收仲丁醇，浓缩至200ml，过滤澄明得甲苷中间体备用；滤取的沉淀70~80℃真空干燥，粉碎后用蒸馏水煮沸溶解，上清液浓缩成1.10-1.20(60℃)的稠膏，聚酰胺层析，用水洗脱，洗脱液滤过，滤液浓缩至1.20-1.30(60℃)，加乙醇达70-80％，滤取沉淀，真空干燥，得黄芪多糖备用。取红参皂苷提取液和黄芪皂苷提取液，加水稀释，调节pH7.0左右，活性炭吸附10分钟，过滤澄明备用；取红参多糖和黄芪多糖，加水煮沸溶解，过滤澄明，加甘露醇煮沸溶解后，活性炭吸附15分钟，过滤澄明备用；取斑蝥提取物，加水，氢氧化钠液调节pH9.0左右，加蟾酥提取物搅拌溶解，滤过，滤液与上述红参和黄芪皂苷提取物滤液混匀，再将此混合液加至上述多糖和甘露醇混合液中，加注射用水至3000ml，调节pH7.5左右，精滤澄明，无菌分装，冷冻干燥，封口即得。静脉滴注，成人按15mg/kg计量加入5％葡萄糖注射液或0.9％氯化钠注射液500ml中。

Claims (8)

1、一种用于治疗肝癌的中成药，其特征在于：按照重量组分计算：它主要由红参500-1500份、黄芪2000-4000份、蟾蜍2.5-5.5份、斑蝥10-30份制备而成。

2、按照权利要求1所述的用于治疗肝癌的中成药，其特征在于：按照重量组分计算：它由红参1000份、黄芪3000份、蟾蜍4份、斑蝥20份及适当辅料制备而成。

3、按照权利要求1或2所述的用于治疗肝癌的中成药，其特征在于：所述中成药制备成的制剂包括：颗粒剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、片剂、滴丸、口服液体制剂、注射剂：包括小针、输液、冻干粉针、缓释制剂、控释制剂。

4、按照权利要求3所述的用于治疗肝癌的中成药，其特征在于：所述中成药制备成的制剂是：口服液制剂、胶囊剂、冻干粉针制剂。

5、按照权利要求1-4中任意一项权利要求所述的用于治疗肝癌的中成药的制备方法，其特征在于：将红参、黄芪、蟾蜍、斑蝥分别提取精制后，再加入适当的辅料制备成不同的制剂。

6、按照权利要求5所述的用于治疗肝癌的中药制剂的制备方法，其特征在于：将红参切片用乙醇回流提取3次，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成清膏1备用；药渣用水煎煮，滤过，滤液浓缩成清膏，加乙醇静置，滤取沉淀，低温干燥，得干粉1备用；黄芪切片，加水煎煮3次，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩后用乙醇沉淀，滤液回收乙醇并浓缩成清膏2备用；滤取的沉淀真空干燥，得干粉2备用；生蟾酥细粉用25倍乙醇浸泡过夜，然后回流4小时，滤过，滤液回收乙醇后得清膏3备用；生斑蝥细粉用盐酸-丙酮液浸泡，回收丙酮，残留液用乙醇-乙醚液洗涤，滤取沉淀，干燥得斑蝥提取物，加入上述3种清膏，2种干粉及甜蜜素、桔子香精、山梨酸钾，搅拌溶解，加水，调节PH值，滤过，灌装，灭菌，即得口服液制剂。

7、按照权利要求5所述的用于治疗肝癌的中成药的制备方法，其特征在于：将红参切片用乙醇回流提取3次，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，浓缩成清膏，喷雾干燥，得细粉1备用；药渣用水煎煮，滤过，滤液浓缩成清膏，加乙醇静置，滤取沉淀，低温干燥，粉碎成细粉，得细粉2备用；黄芪切片，加水煎煮3次，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩后用乙醇沉淀，滤液回收乙醇并浓缩成清膏，喷雾干燥，得细粉3备用；滤取的沉淀真空干燥，粉碎成细粉，得细粉4备用；生蟾酥细粉用25倍乙醇浸泡过夜，然后回流4小时，滤过，滤液回收乙醇，减压干燥，粉碎成细粉，得细粉5，备用；生斑蝥细粉用盐酸-丙酮液浸泡，回收丙酮，残留液用乙醇-乙醚液洗涤，滤取沉淀，干燥得斑蝥提取物，加入上述5种细粉及淀粉，混匀，乙醇制粒，过筛，干燥，整粒，灌装，即得胶囊剂。

8、按照权利要求5所述的用于治疗肝癌的中成药的制备方法，其特征在于：生蟾酥细粉用25倍量乙醇浸泡过夜，然后回流4小时，滤过，滤液回收乙醇后备用；生斑蝥细粉用盐酸-丙酮液浸泡，回收丙酮，残留液用乙醇-乙醚液洗涤，滤取沉淀，干燥得斑蝥提取物备用；红参切片，用乙醇回流提取3次，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，浓缩后用乙醚萃取，挥去乙醚，过滤，滤液用水饱和的仲丁醇萃取，回收仲丁醇，浓缩后加乙醇冷藏过夜，滤过，滤液浓缩成清膏，得红参皂苷提取物备用；乙醇提取后的药渣用水煎煮，滤过，滤液浓缩后加乙醇静置，滤取沉淀，干燥得红参粗多糖，加水煮沸溶解，上清液浓缩，聚酰胺层析，用水洗脱，洗脱液浓缩后加乙醇静置，滤取沉淀，真空干燥，得红参多糖；黄芪切片，加水煎煮3次，合并煎煮液，滤过，滤液浓缩后用乙醇沉淀，滤液回收乙醇并浓缩后加乙醇，冷藏过夜，过滤，滤液回收乙醇，浓缩后用水饱和的仲丁醇萃取，回收仲丁醇，浓缩后过滤澄明得黄芪皂苷提取液；滤取的沉淀真空干燥，粉碎后用蒸馏水煮沸溶解，上清液浓缩成稠膏，聚酰胺层析，用水洗脱，洗脱液滤过，滤液浓缩后加乙醇静置，滤取沉淀，真空干燥，得黄芪多糖备用；取红参皂苷提取液和黄芪皂苷提取液，加水稀释，调节pH，活性炭吸附，过滤澄明备用；取红参多糖和黄芪多糖，加水煮沸溶解，过滤澄明，加甘露醇煮沸溶解后，活性炭吸附，过滤澄明备用；取斑蝥提取物，加水，氢氧化钠液调节pH，加蟾酥提取物搅拌溶解，滤过，滤液与上述红参和黄芪皂苷提取物滤液混匀，再将此混合液加至上述多糖和甘露醇混合液中，加注射用水至全量，调节pH，精滤澄明，无菌分装，冷冻干燥，封口，即得冻干粉针制剂。