[go: up one dir, main page]

CN119552171A - 大环吡唑并嘧啶类化合物及其用途 - Google Patents

大环吡唑并嘧啶类化合物及其用途 Download PDF

Info

Publication number
CN119552171A
CN119552171A CN202311138066.2A CN202311138066A CN119552171A CN 119552171 A CN119552171 A CN 119552171A CN 202311138066 A CN202311138066 A CN 202311138066A CN 119552171 A CN119552171 A CN 119552171A
Authority
CN
China
Prior art keywords
alkyl
hydrogen
mmol
membered
compound
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202311138066.2A
Other languages
English (en)
Inventor
徐盼
江静倩
陈晨辉
林杰
单佳祺
苏俊峰
曹红雪
王洁
魏忠勇
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Yang Sheng Tang Co Ltd
Zhejiang Yangshengtang Institute of Natural Medication Co Ltd
Original Assignee
Yang Sheng Tang Co Ltd
Zhejiang Yangshengtang Institute of Natural Medication Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Yang Sheng Tang Co Ltd, Zhejiang Yangshengtang Institute of Natural Medication Co Ltd filed Critical Yang Sheng Tang Co Ltd
Priority to CN202311138066.2A priority Critical patent/CN119552171A/zh
Priority to PCT/CN2024/086747 priority patent/WO2025050636A1/zh
Publication of CN119552171A publication Critical patent/CN119552171A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/529—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim forming part of bridged ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/02—Nasal agents, e.g. decongestants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/08—Bronchodilators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains four or more hetero rings

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Otolaryngology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本申请涉及生物医药领域，特别涉及大环吡唑并嘧啶类化合物，其具有更好的免疫调节活性和选择性，本发明还提供了所述大环吡唑并嘧啶类化合物用于预防或治疗与TLR7相关的疾病的用途，以及作为疫苗佐剂和光动力治疗剂及偶联药物的用途。

Description

大环吡唑并嘧啶类化合物及其用途
技术领域
本申请涉及生物医药领域，特别涉及大环吡唑并嘧啶类化合物及其用途。
背景技术
免疫系统识别并响应各种致病因子，从而保护生物体免受病原体侵害。免疫系统功能障碍会导致包括自身免疫性疾病、炎症性疾病和癌症在内的多种疾病。脊椎动物的主要免疫策略是先天免疫和适应性免疫，并且先天免疫系统是微生物识别以及清除、炎症反应、细胞死亡途径的关键。靶向先天免疫系统的蛋白质和信号通路开发疾病治疗药物，为药物研发提供了多种可能。
Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)是一类在免疫系统中扮演重要角色的蛋白质家族，是先天免疫系统的关键受体。作为一种模式识别受体(PRRs)，TLR可以识别损伤相关分子模式(DAMP)和病原体相关分子模式(PAMP)，诱导NF-κB通路的激活和细胞因子、趋化因子的分泌，从而激活先天免疫反应和适应性免疫反应。目前已发现的TLR家族成员有13个(TLR1-13)，其中人源共10种TLR(TLR1-10)，多分布于免疫细胞，且不同亚型TLR的结合配体具有特异性。由于TLR是免疫触发的关键分子，TLR靶点在抗感染、抗炎和抗肿瘤领域具有重要的价值。
TLR7基因位于基因组X染色体上的Xp22.3，TLR7蛋白被称为核酸感应分子，定位于内含体膜，能够识别细胞内病原微生物相关的核苷酸和核苷，在病毒单链RNA(ssRNA)存在的情况下被激活。TLR7分子有两个结合位点，分别与特定的配体结合，第一个结合位点可以结合腺嘌呤核苷、鸟嘌呤核苷等单核苷，也可以结合小分子核苷类似物(例如TLR7/8激动剂R848)，第二个位点结合ssRNA，第二个位点能够影响第一个结合位点与配体间的亲和力。配体与TLR7结合会激活MyD88通路，通过MyD88-NF-κB依赖性信号级联反应诱导细胞因子分泌，从而激活免疫反应。
研究表明，TLR7在炎症性疾病、病毒感染、癌症、自身免疫性疾病的药物研发中具有重要应用。TLR7激动剂具有包括抗肿瘤、抗病毒感染和用作疫苗佐剂在内的多种用途。目前多个针对TLR7的激动剂进入临床研究，但目前TLR7激动剂领域唯一上市的小分子化合物只有咪喹莫特。TLR7激动剂临床开发的主要难点是治疗效果不显著或免疫相关不良反应，因此设计新型、高效、选择性好的TLR7小分子激动剂具有重要的临床价值。
发明内容
本发明旨在提供一种新颖性结构的大环吡唑类TLR7小分子激动剂，具有更好的免疫调节活性和靶点选择性。本发明还提供了所述吡啶酮大环吡唑类TLR7小分子激动剂用于预防或治疗与TLR7相关的疾病的用途，以及作为疫苗佐剂和光动力治疗剂的用途，由此提供了以下发明：
化合物
在一个方面，本申请提供了具有如式(I)所示结构的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式，
其中，
R1选自：氢、卤素、羟基、氨基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基；
Q选自-O-、-S-、-NH-；
环A选自苯基、萘基、5-6元杂芳基和双环杂芳基，所述苯基、萘基、5-6元杂芳基和双环杂芳基任选地被1个、2个或3个选自以下的基团所取代：氢、卤素、硝基、亚硝基、氰基、羟基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、卤代C1-C6烷基、＝O、-NR3R4、-CH2Ra、-C(＝O)Rb、-ORc、C3-C6饱和或不饱和环烷基、3-6元杂环基、-SH、苯基、5-6元杂芳基、-(C1-C6烷基)OH、-(C1-C6烷基)NH2、-S(C1-C3烷基)、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)NH(C1-C3烷基)、-NRdS(＝O)(＝O)(C1-C6烷基)、-P(＝O)ReRf、磺酸基、-N＝NPh、-Si(C1-C3烷基)3、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2；其中，Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf各自独立地选自氢、-OH、-COOH、-C(＝O)H、苯基、C1-C6烷基、C1-C3烯基、C1-C6烷氧基、3-6元含氮杂环基、-NH2、-NH(C1-C6烷基)、-N(C1-C6烷基)2、C(＝O)(C1-C6烷基)；其中，R3、R4各自独立地选自氢、C1-6烷基、C(＝O)(C1-C6烷基)；任选地，所述3-6元杂环基或3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、卤素、硝基、氰基、羟基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基；
环B选自5-6元含氮杂芳基和双环杂芳基，所述5-6元含氮杂芳基和双环杂芳基任选地被1个、2个或3个选自以下的基团所取代：氢、卤素、硝基、亚硝基、氰基、羟基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、卤代C1-C6烷基、＝O、-NR3’R4’、-CH2Ra’、-C(＝O)Rb’、-ORc’、C3-C6饱和或不饱和环烷基、3-6元杂环基、-SH、苯基、5-6元杂芳基、-(C1-C6烷基)OH、-(C1-C6烷基)NH2、-S(C1-C3烷基)、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)NH(C1-C3烷基)、-NRd’S(＝O)(＝O)(C1-C6烷基)、-P(＝O)Re’Rf’、磺酸基、-N＝NPh、-Si(C1-C3烷基)3；其中，Ra’、Rb’、Rc’、Rd’、Re’、Rf’各自独立地选自氢、-OH、-COOH、-C(＝O)H、苯基、C1-C6烷基、C1-C3烯基、C1-C6烷氧基、3-6元含氮杂环基、-NH2、-NH(C1-C6烷基)、-N(C1-C6烷基)2、C(＝O)(C1-C6烷基)；其中，R3’、R4’各自独立地选自氢、C1-C6烷基、C(＝O)(C1-C6烷基)；任选地，所述3-6元杂环基或3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、卤素、硝基、氰基、羟基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基；
L选自-(CH2)m-W-(CH2)n-，其中，W选自-O-、-NH-、-N(Boc)-、-NHC(＝O)-、-CH2-、-CH(C1-C6烷基)-、-C(C1-C6烷基)(C1-C6烷基)-、-C(＝O)-、-C(＝O)NH-、-N(C1-C6烷基)-、-N(C1-C6烷基)C(＝O)-、-C(＝O)N(C1-C6烷基)-、-S-、-S(＝O)-、-S(＝O)(＝O)-、-P(＝O)(C1-C6烷基)-、-P(＝O)(C1-C6烷氧基)-、-P(＝O)(OH)-、-OC(＝O)-、-C(＝O)O-、-NHS(＝O)(＝O)-、-S(＝O)(＝O)NH-、-N(C1-C6烷基)S(＝O)(＝O)-、-S(＝O)(＝O)N(C1-C6烷基)-，m、n各自独立地选自0-6之间的整数(例如0、1、2、3、4、5或6)；
T选自-(CH-T1)p-(Z)q-(CH-T2)r-，其中，Z选自-O-、-NH-、-NHC(＝O)-、-CH2-、-CH(C1-C6烷基)-、-C(C1-C6烷基)(C1-C6烷基)-、-C(＝O)-、-C(＝O)NH-、-N(C1-C6烷基)-、-N(C1-C6烷基)C(＝O)-、-C(＝O)N(C1-C6烷基)-、-S-、-S(＝O)-、-S(＝O)(＝O)-、-P(＝O)(C1-C6烷基)-、-P(＝O)(C1-C6烷氧基)-、-P(＝O)(OH)-、-OC(＝O)-、-C(＝O)O-、-NHS(＝O)(＝O)-、-S(＝O)(＝O)NH-、-N(C1-C6烷基)S(＝O)(＝O)-、-S(＝O)(＝O)N(C1-C6烷基)-，p、q、r各自独立地选自0-6之间的整数(例如0、1、2、3、4、5或6)，且p、r不能同时为0，T1、T2各自独立地选自：氢、卤素、硝基、羟基、氰基、氨基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、巯基、-S-(C1-C6烷基)。
在某些实施方案中，R1选自：氢、卤素、C1-C6烷基、羟基。
在某些实施方案中，R1选自：氢、卤素、羟基。
在某些实施方案中，R1选自氢、卤素。
在某些实施方案中，R1选自氢。
在某些实施方案中，Q为-O-。
在某些实施方案中，环A为5-6元杂芳基，任选地，环A被1个、2个或3个取代基取代。
在某些实施方案中，环A为苯基，任选地，环A被1个、2个或3个取代基取代。
在某些实施方案中，环A的取代基选自以下的基团：氢、卤素、氰基、硝基、羟基、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、＝O、-NR3R4、-CH2Ra、-C(＝O)Rb、-ORc、C3-C6饱和或不饱和环烷基、3-6元杂环基、-SH、苯基、5-6元杂芳基、-S(C1-C3烷基)、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)NH(C1-C3烷基)、-NRdS(＝O)(＝O)(C1-C6烷基)、-P(＝O)ReRf、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2；其中，Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf各自独立地选自氢、-OH、-COOH、-C(＝O)H、苯基、C1-C6烷基、C1-C3烯基、C1-C6烷氧基、3-6元含氮杂环基、-NH2、-NH(C1-C6烷基)、-N(C1-C6烷基)2、-C(＝O)(C1-C6烷基)；其中，R3、R4各自独立地选自氢、C1-6烷基、-C(＝O)(C1-C6烷基)；任选地，所述3-6元杂环基或3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、卤素、硝基、氰基、羟基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基。
在某些实施方案中，Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf各自独立地选自氢、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、3-6元含氮杂环基、-N(C1-C6烷基)2；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、C1-C6烷基。
在某些实施方案中，R3、R4各自独立地选自氢、C1-6烷基。
在某些实施方案中，所述3-6元杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、卤素、硝基、氰基、羟基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基。
在某些实施方案中，环A的取代基选自以下的基团：氢、卤素、硝基、氰基、羟基、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、＝O、-CH2Ra、-C(＝O)Rb、-ORc、C3-C6环烷基、-S(C1-C3烷基)、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、-NRdS(＝O)(＝O)(C1-C6烷基)、-P(＝O)ReRf、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2；其中，Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf各自独立地选自氢、-OH、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、3-6元含氮杂环基、-N(C1-C6烷基)2；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、卤素、羟基、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基；
在某些实施方案中，Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf各自独立地选自氢、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、3-6元含氮杂环基、-N(C1-C6烷基)2；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、C1-C6烷基；
在某些实施方案中，环A选自苯基，所述苯基任选地被1个、2个或3个选自以下的基团所取代：卤素、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、-CH2-(3-6元含氮杂环基)、-CH2-NR3R4、-C(＝O)(C1-C6烷基)、氰基、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2、3-6元环烷基、-S(C1-C3烷基)、-NHS(＝O)(＝O)(C1-C6烷基)、-P(＝O)(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)；其中，R3、R4各自独立地选自氢和C1-C6烷基；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个C1-C6烷基所取代。
在某些实施方案中，所述环B为双环杂芳基。
在某些实施方案中，所述环B为5-6元含1、2或3个氮原子的单杂芳基。
在某些实施方案中，所述5-6元含1、2或3个氮原子的单杂芳基选自如下杂芳环形成的基团：
在某些实施方案中，环B为任选地，环B被1个、2个或3个取代基取代。
在某些实施方案中，环B为任选地，环B被1个、2个或3个取代基取代。
在某些实施方案中，环B的取代基选自以下的基团：氢、卤素、硝基、亚硝基、氰基、羟基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、卤代C1-C6烷基、＝O、-NR3’R4’、-CH2Ra’、-C(＝O)Rb’、-ORc’、C3-C6饱和或不饱和环烷基、3-6元杂环基、-SH、苯基、5-6元杂芳基、-(C1-C6烷基)OH、-(C1-C6烷基)NH2、-S(C1-C3烷基)、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)NH(C1-C3烷基)、-NRd’S(＝O)(＝O)(C1-C6烷基)、-P(＝O)Re’Rf’、磺酸基、-N＝NPh、-Si(C1-C3烷基)3；其中，Ra’、Rb’、Rc’、Rd’、Re’、Rf’各自独立地选自氢、-OH、-COOH、-C(＝O)H、苯基、C1-C6烷基、C1-C3烯基、C1-C6烷氧基、3-6元含氮杂环基、-NH2、-NH(C1-C6烷基)、-N(C1-C6烷基)2、C(＝O)(C1-C6烷基)；其中，R3’、R4’各自独立地选自氢、C1-C6烷基、C(＝O)(C1-C6烷基)；任选地，所述3-6元杂环基或3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、卤素、硝基、氰基、羟基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基。
在某些实施方案中，环B的取代基选自以下的基团：氢、卤素、硝基、亚硝基、氰基、羟基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、卤代C1-C6烷基、＝O、-NR3’R4’、-CH2Ra’、-C(＝O)Rb’、-ORc’、C3-C6饱和或不饱和环烷基、3-6元杂环基；其中，Ra’、Rb’、Rc’各自独立地选自氢、-OH、-COOH、-C(＝O)H、苯基、C1-C6烷基、C1-C3烯基、C1-C6烷氧基、3-6元含氮杂环基、-NH2、-NH(C1-C6烷基)、-N(C1-C6烷基)2、C(＝O)(C1-C6烷基)；任选地，所述3-6元杂环基或3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、卤素、硝基、氰基、羟基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基；
在某些实施方案中，环B的取代基选自以下的基团：氢、卤素、硝基、氰基、羟基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、卤代C1-C6烷基、＝O、-NR3’R4’、-CH2Ra’、-C(＝O)Rb’、-ORc’。
在某些实施方案中，Ra’、Rb’、Rc’、Rd’、Re’、Rf’各自独立地选自氢、-OH、C1-C6烷基、C1-C3烯基、C1-C6烷氧基、3-6元含氮杂环基、-N(C1-C6烷基)2；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、C1-C6烷基。
在某些实施方案中，R3’、R4’选自氢、C1-C6烷基。
在某些实施方案中，所述3-6元杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：卤素、硝基、氰基、羟基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基。
在某些实施方案中，环B的取代基选自氢、＝O、C1-C6烷基。
在某些实施方案中，环B为吡啶酮或哒嗪酮。
在某些实施方案中，环B为1H-吡啶-2-酮，结构式为：
在某些实施方案中，环B为2H-哒嗪-3-酮，结构式为：
在某些实施方案中，L选自-(CH2)m-W-(CH2)n-，其中，W选自-O-、-NH-、-N(Boc)-、-NHC(＝O)、-CH2-、-CH(C1-C6烷基)-、-C(C1-C6烷基)(C1-C6烷基)-、-C(＝O)-、-C(＝O)NH-、-N(C1-C6烷基)-、-S-、-S(＝O)-、-S(＝O)(＝O)-、-P(＝O)(OH)-、-OC(＝O)-、-C(＝O)O-、-NHS(＝O)(＝O)-、-S(＝O)(＝O)NH-，m、n各自独立地选自0、1或2。
在某些实施方案中，L选自以下结构：-O-CH2-、-NH-CH2-、-CH2-、-NH-、-NH-C(＝O)-、-CH2-O-、-CH2-O-CH2-、-CH2-CH2-、-O-CH2-CH2-、-N(Boc)-CH2-。
在某些实施方案中，L选自以下结构：-O-CH2-、-CH2-O-、-NH-CH2-、-CH2-NH-、-CH2-CH2-、-N(Boc)-CH2-。
在某些实施方案中，L选自以下结构：-NH-CH2-、-CH2-CH2-、-N(Boc)-CH2-。
在某些实施方案中，q为0。
在某些实施方案中，T选自-(CH-T1)p-，其中，p选自1-6之间的整数(例如0、1、2、3、4、5或6)，T1选自：氢、卤素、硝基、羟基、氰基、氨基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、巯基、-S-(C1-C6烷基)。
在某些实施方案中，T1选自氢、C1-C6烷基。
在某些实施方案中，T选自-CH2-。
在某些实施方案中，T为-CH(R2)-，R2选自氢或C1-C6烷基。
在某些实施方案中，本发明的化合物具有如式(I’)所示的结构，其中，R1、Q、L、环A、环B分别如上文任一项所定义。
R2选自氢或C1-C6烷基。
在某些实施方案中，R2为氢。
在某些实施方案中，R2为甲基。
在某些实施方案中，本发明的化合物具有如式(II)所示的结构：
其中，
R1、Q、L分别如上文任一项所定义；
R2选自氢或C1-C6烷基。
在某些实施方案中，R2为氢。
在某些实施方案中，R2为甲基。
在某些实施方案中，R5、R6、R7各自独立地选自：氢、卤素、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、-CH2-(3-6元含氮杂环基)、-CH2-NR3R4、-C(＝O)(C1-C6烷基)、氰基、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、-NHS(＝O)(＝O)(C1-C6烷基)、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2、3-6元环烷基、-S(C1-C3烷基)、-P(＝O)(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)；其中，R3、R4各自独立地选自氢和C1-C6烷基；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、C1-C6烷基。
在某些实施方案中，R5、R6各自独立地选自氢、卤素、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、-CH2-(3-6元含氮杂环基)、-CH2-NR3R4、-C(＝O)(C1-C6烷基)、氰基、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、-NHS(＝O)(＝O)(C1-C6烷基)、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2、3-6元环烷基、-S(C1-C3烷基)、-P(＝O)(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)；其中，R3、R4各自独立地选自氢和C1-C6烷基；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、C1-C6烷基。
在某些实施方案中，R5、R6各自独立地选自氢、卤素、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、-CH2-(3-6元含氮杂环基)、-CH2-NR3R4、-C(＝O)(C1-C6烷基)、氰基、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2、3-6元环烷基、-P(＝O)(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)；其中，R3、R4各自独立地选自氢和C1-C6烷基；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、C1-C6烷基。
在某些实施方案中，R7选自氢、C1-C6烷基(例如甲基)。
在某些实施方案中，R7为氢。
在某些实施方案中，本发明的化合物具有如式(II’)所示的结构：
R1、R2、Q、L、R5、R6、R7分别如上文任一项所定义。
在某些实施方案中，R5、R6、R7各自独立地选自：氢、卤素、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、-CH2-(3-6元含氮杂环基)、-CH2-NR3R4、-C(＝O)(C1-C6烷基)、氰基、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、-NHS(＝O)(＝O)(C1-C6烷基)、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2、3-6元环烷基、-S(C1-C3烷基)、-P(＝O)(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)；其中，R3、R4各自独立地选自氢和C1-C6烷基；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、C1-C6烷基。
在某些实施方案中，本发明的化合物具有如式(II”)所示的结构：
R1、R2、Q、L、R5、R6、R7分别如上文任一项所定义。
在某些实施方案中，R5、R6、R7各自独立地选自：氢、卤素、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、-CH2-(3-6元含氮杂环基)、-CH2-NR3R4、-C(＝O)(C1-C6烷基)、氰基、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、-NHS(＝O)(＝O)(C1-C6烷基)、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2、3-6元环烷基、-S(C1-C3烷基)、-P(＝O)(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)；其中，R3、R4各自独立地选自氢和C1-C6烷基；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、C1-C6烷基。
在某些实施方案中，本发明的化合物具有如式(III)所示的结构：
其中，
R1、Q、L、R5、R6、R7分别如上文任一项所定义；
R2选自氢或C1-C6烷基。
在某些实施方案中，R2为氢。
在某些实施方案中，R2为甲基。
在某些实施方案中，R5、R6、R7各自独立地选自：氢、卤素、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、-CH2-(3-6元含氮杂环基)、-CH2-NR3R4、-C(＝O)(C1-C6烷基)、氰基、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、-NHS(＝O)(＝O)(C1-C6烷基)、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2、3-6元环烷基、-S(C1-C3烷基)、-P(＝O)(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)；其中，R3、R4各自独立地选自氢和C1-C6烷基；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、C1-C6烷基。
在某些实施方案中，R5、R6各自独立地选自氢、卤素、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、-CH2-(3-6元含氮杂环基)、-CH2-NR3R4、-C(＝O)(C1-C6烷基)、氰基、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、-NHS(＝O)(＝O)(C1-C6烷基)、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2、3-6元环烷基、-S(C1-C3烷基)、-P(＝O)(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)；其中，R3、R4各自独立地选自氢和C1-C6烷基；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、C1-C6烷基。
在某些实施方案中，R5、R6各自独立地选自氢、卤素、卤代C1-C6烷基、-CH2-(3-6元含氮杂环基)、-CH2-NR3R4、-C(＝O)(C1-C6烷基)、氰基、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2、3-6元环烷基、-S(C1-C3烷基)、-P(＝O)(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)；其中，R3、R4各自独立地选自氢和C1-C6烷基；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、C1-C6烷基。
在某些实施方案中，R7选自氢、C1-C6烷基(例如甲基)。
在某些实施方案中，R7为氢。
在某些实施方案中，本发明的化合物具有如式(III’)所示的结构：
R1、R2、Q、L、R5、R6、R7分别如上文任一项所定义。
在某些实施方案中，R5、R6、R7各自独立地选自：氢、卤素、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、-CH2-(3-6元含氮杂环基)、-CH2-NR3R4、-C(＝O)(C1-C6烷基)、氰基、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、-NHS(＝O)(＝O)(C1-C6烷基)、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2、3-6元环烷基、-S(C1-C3烷基)、-P(＝O)(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)；其中，R3、R4各自独立地选自氢和C1-C6烷基；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、C1-C6烷基。
在某些实施方案中，本发明的化合物具有如式(III”)所示的结构：
R1、R2、Q、L、R5、R6、R7分别如上文任一项所定义。
在某些实施方案中，R5为氢。
在某些实施方案中，R5、R6、R7各自独立地选自：氢、卤素、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、-CH2-(3-6元含氮杂环基)、-CH2-NR3R4、-C(＝O)(C1-C6烷基)、氰基、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、-NHS(＝O)(＝O)(C1-C6烷基)、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2、3-6元环烷基、-S(C1-C3烷基)、-P(＝O)(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)；其中，R3、R4各自独立地选自氢和C1-C6烷基；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、C1-C6烷基。
在某些实施方案中，本发明的化合物具有如式(V)所示的结构：
其中，R1、Q、L、R5、R6、R7如上文任一项所定义；
X为C或N；
R2选自氢或C1-C6烷基。
在某些实施方案中，R1为氢。
在某些实施方案中，Q为-O-。
在某些实施方案中，R2为氢或甲基。
在某些实施方案中，R2为氢。
在某些实施方案中，R2为甲基。
在某些实施方案中，R5、R6、R7各自独立地选自：氢、卤素、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、-CH2-(3-6元含氮杂环基)、-CH2-NR3R4、-C(＝O)(C1-C6烷基)、氰基、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、-NHS(＝O)(＝O)(C1-C6烷基)、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2、3-6元环烷基、-S(C1-C3烷基)、-P(＝O)(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)；其中，R3、R4各自独立地选自氢和C1-C6烷基；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、C1-C6烷基。
在某些实施方案中，R5、R6各自独立地选自：氢、卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、3-6元环烷基、-CH2-(3-6元含氮杂环基)、-CH2-N(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)、氰基、-P(＝O)(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)、-NHS(＝O)(＝O)(C1-C6烷基)、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2、-C(＝O)(C1-C6烷基)、-S(C1-C3烷基)、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、卤代C1-C6烷基；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、C1-C6烷基。
在某些实施方案中，所述-CH2-(3-6元含氮杂环基)为
在某些实施方案中，R7选自氢、C1-C6烷基(例如甲基)。
在某些实施方案中，R7为氢。
在某些实施方案中，L为-CH2-CH2-或-NH-CH2-。
在某些实施方案中，本发明的化合物具有如式(V’)所示的结构：
R1、R2、Q、L、X、R5、R6、R7分别如上文任一项所定义。
在某些实施方案中，R5为氢。
在某些实施方案中，R6选自：氢、卤素、3-6元环烷基、-CH2-(3-6元含氮杂环基)、-CH2-N(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)、氰基、-P(＝O)(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2、-C(＝O)(C1-C6烷基)、-S(C1-C3烷基)、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、卤代C1-C6烷基；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、C1-C6烷基。
在某些实施方案中，所述-CH2-(3-6元含氮杂环基)为
在某些实施方案中，R7选自氢、C1-C6烷基(例如甲基)。
在某些实施方案中，本发明的化合物具有如式(V”)所示的结构：
R1、R2、Q、L、X、R5、R6、R7分别如上文任一项所定义。
在某些实施方案中，R5为氢。
在某些实施方案中，R6选自：氢、卤素、3-6元环烷基、-CH2-(3-6元含氮杂环基)、-CH2-N(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)、氰基、-P(＝O)(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2、-C(＝O)(C1-C6烷基)、-S(C1-C3烷基)、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、卤代C1-C6烷基；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、C1-C6烷基。
在某些实施方案中，所述-CH2-(3-6元含氮杂环基)为
在某些实施方案中，本发明的化合物具有具有如式(V”’)所示的结构：
R1、R2、Q、L、X、R5、R6、R7分别如上文任一项所定义。
在某些实施方案中，R5为氢。
在某些实施方案中，R6选自：氢、卤素、3-6元环烷基、-CH2-(3-6元含氮杂环基)、-CH2-N(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)、氰基、-P(＝O)(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2、-C(＝O)-(C1-C6烷基)、-S(C1-C3烷基)、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、卤代C1-C6烷基；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、C1-C6烷基。
在某些实施方案中，所述-CH2-(3-6元含氮杂环基)为
在某些实施方案中，R6选自：-Br、环丙基、-CH2-N(CH3)(CH3)、氰基、-P(＝O)(CH3)(CH3)、-C(OEt)＝CH2、-C(＝O)CH3、-SCH3、-S(＝O)CH3、-S(＝O)(＝O)CH3、-CF3。
在某些实施方案中，R7选自氢或C1-C6烷基。
在某些实施方案中，R7选自氢。
在某些实施方案中，R7选自甲基。
本发明化合物中的羟基和-NH-、-NH2任选地可以被取代基保护，所述取代基可以是本领域常用的羟基或氨基保护基，例如Boc(叔丁氧羰基)、TBDPS(叔丁基二苯基)等，由此形成的化合物也在本发明的保护范围之内。
本发明的化合物可以具有选自以下的结构：
药物组合物、用途、疾病的预防/治疗方法
在一个方面，本申请提供了一种药物组合物，其包含本发明的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式；任选地，所述药物组合物还包含药学上可接受的载体或赋形剂。
本发明的药物组合物可以制成药学上可接受的任一剂型，以口服、肠胃外、直肠、经肺给药、局部给药或经皮给药等方式施用于需要这种治疗的患者。用于口服方式给药时，可制成常规的固体制剂，如片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂等；也可制成口服液体制剂，如口服溶液剂、口服混悬剂、糖浆剂等。制成口服制剂时，可以加入适宜的填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂等。用于肠胃外给药时，可制成注射剂，包括注射液、注射用无菌粉末与注射用浓溶液。制成注射剂时，可采用现有制药领域中的常规方法生产，配制注射剂时，可以不加入附加剂，也可根据药物的性质加入适宜的附加剂。用于直肠给药时，可制成栓剂等。用于经肺给药时，可制成吸入剂或喷雾剂等。用于局部给药时，可以特定的剂型和装置使用或制成乳膏、凝胶等。用于经皮给药时，可制成贴剂。
在一个方面，本申请提供了本发明的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式用于制备药物中的用途，所述药物作为TLR7激动剂，用于预防或治疗与TLR7相关的疾病。
在一个方面，本申请提供了预防或治疗受试者的与TLR7相关的疾病的方法，所述方法包括给有此需要的受试者施予有效量的本发明的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式。
在一些实施方案中，所述与TLR7相关的疾病选自：
(1)肿瘤，所述肿瘤包括但不限于：乳腺癌、黑色素瘤、脑膜瘤、软组织肉瘤、唾液腺肿瘤、椎管内肿瘤、纵隔肿瘤、脑癌、骨癌、阴茎癌、骨肉瘤、颅内肿瘤、舌癌、上颌窦癌、甲状腺癌、恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤、脑垂体腺瘤、睾丸肿瘤、非何杰金氏淋巴癌、膀胱癌、白血病、胃癌、鼻咽癌、喉癌、口腔癌、食管癌、肺癌、肾癌、宫颈癌、绒毛膜癌、外阴癌、皮肤癌、子宫内膜癌、卵巢癌、前列腺癌、胰腺癌、直肠癌、大肠癌、卡波西肉瘤、非黑色素瘤皮肤癌(包括鳞状细胞癌和基底细胞癌)、血管瘤、神经胶质瘤、非霍奇金淋巴瘤(弥漫性大B细胞淋巴瘤、B细胞非霍奇金淋巴瘤)、结肠癌、肝癌、神经母细胞瘤、胶质母细胞瘤；
(2)与病毒感染相关的疾病，所述病毒包括但不限于：登革热病毒、黄热病毒、西尼罗病毒、日本脑炎病毒、蜱传脑炎病毒、昆津病毒、墨累山谷脑炎病毒、圣路易脑炎病毒、鄂木斯克出血热病毒、牛病毒性腹泻病毒、济卡病毒、HIV、HBV、HCV、HPV、RSV、SARS或流感病毒；
(3)炎性疾病、呼吸系统疾病、皮肤病、胃肠道疾病、肝胆疾病、神经系统疾病、肌肉骨骼和结缔组织疾病、或自身免疫性疾病，例如：哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、成人呼吸窘迫综合征(ARDS)、溃疡性结肠炎、克罗恩病、支气管炎、皮炎、光化性角化病、过敏性鼻炎、银屑病、硬皮病、荨麻疹、类风湿性关节炎、多发性硬化、狼疮、药物诱导过敏反应、风湿病。
所述方法中，本发明的化合物作为TLR7激动剂，进一步地，可以作为免疫调节剂。
本发明的化合物具有免疫增强的作用，因此，在一个方面，本申请提供了本发明的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式作为疫苗佐剂的用途。在某些实施方案中，所述疫苗用于预防或治疗由上文所述的任一病毒感染相关疾病。
在一个方面，本申请提供了本发明的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式作为光动力治疗剂的用途。
在一个方面，本申请提供了本发明的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式作为偶联药物(例如抗体免疫刺激偶联药物ISAC)的用途。抗体免疫刺激偶联药物(ISAC)是一种将抗体与免疫刺激剂结合的单克隆抗体，通过触发促炎细胞因子和趋化因子的产生而增强免疫应答。例如，BDC-1001是一种ISAC，包含靶向HER2的抗体和TLR7/8激动剂，目前处于临床Ⅱ期，用于治疗转移性乳腺癌。
本申请中，受试者优选为哺乳动物，例如牛科动物、马科动物、猪科动物、犬科动物、猫科动物、啮齿类动物、灵长类动物，例如人。
制备方法
路线一：
中间体1-1在碱性条件下通过烷基化经过中间体1-2生成1-3，中间体1-3在碱性条件下通过亲核进攻完成环合，得到目标产物1-4。
其中，-X1选自-OTs，-X2选自-OTBS、-COOMe、-CHO，其余取代基如前文所述。
路线二：
中间体2-1在碱性条件下通过烷基化经过中间体2-2生成2-3，中间体2-3在碱性条件下通过亲核进攻完成环合得到2-4，2-4经过一系列反应生成目标产物2-5。
其中，-X1选自-OTs，-X2选自-OTBS、-COOMe、-CHO，其余取代基如前文所述。
术语定义
在本发明中，除非另有说明，否则本文中使用的科学和技术名词具有本领域技术人员所通常理解的含义。并且，本文中所涉及的实验室操作步骤均为相应领域内广泛使用的常规步骤。同时，为了更好地理解本发明，下面提供相关术语的定义和解释。
如本文中所使用的，术语“C1-C6烷基”是指含有1-6个碳原子的直链或支链烷烃去掉一个氢原子后得到的基团，其具体实例包括但不限于：甲基、乙基、丙基、正丁基、异丁基、异丙基、叔丁基、正戊基、正己基，本发明中，优选的C1-C6烷基是C1-C4烷基。
如本文中所使用的，术语“C2-C6烯基”是指含有至少一个碳碳双键且碳原子数为2-6的直链或支链烃基，其具体实例包括但不限于乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、1,3-丁二烯基、1-戊烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、1,3-戊二烯基、1,4-戊二烯基、1-己烯基、2-己烯基、3-己烯基、1,4-己二烯基，本发明中，优选的C2-C6烯基是C2-C4烯基。
如本文中所使用的，术语“C2-C6炔基”是指含有至少一个三键且碳原子数为2-6的直链或支链烃基，其具体实例包括但不限于乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔基、1,3-丁二炔基、1-戊炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、1,3-戊二炔基、1,4-戊二炔基、1-己炔基、2-己炔基、3-己炔基、1,4-己二炔基，本发明中，优选的C2-C6炔基是C2-C4炔基。如本文中所使用的，术语“卤素”包括氟、氯、溴和碘，本发明中，优选的卤素是氟、氯、溴，更优选的是溴。
如本文中所使用的，术语“卤代”是指基团或化合物上的氢被一个或多个卤素原子取代，包括全卤代和部分卤代。
如本文中所使用的，术语“烷氧基”是指，以烷基-O-方式形成的基团。
如本文中所使用的，术语“5-6元杂芳基”是指含有5-6个环原子且至少一个环原子为杂原子的具有芳香性的单环基团，所述杂原子为氮原子、氧原子和/或硫原子，具体实施例包括但不限于：呋喃基、吡咯基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基、1,3,4-噁二唑基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基。
如本文中所使用的，术语“双环杂芳基”是指两个环(其中至少一个环具有芳香性)稠合在一起且至少一个环原子为杂原子的双环基团，所述杂原子为氮原子、氧原子和/或硫原子，所述氮和/或硫任选地被氧代。具体实施例包括但不限于：苯并吡咯、苯并呋喃、苯并噻吩、苯并噁唑、苯并异噁唑、苯并咪唑、苯并三唑、吲唑、嘌呤、吲哚、喹啉、喋啶、异喹啉、喹唑啉、喹喔啉、1,8-萘啶、1,5-萘啶、9H-嘌呤、7H-嘌呤、茚满、吲哚啉、2,3-二氢苯并呋喃、1,2,3,4-四氢萘、1,2,3,4-四氢喹啉、3,4-二氢-1H-苯并吡喃、1,4-苯并二噁烷、苯并吗啉、1,2,3,4-四氢喹喔啉。
如本文中所使用的，术语“环烷基”是指饱和或部分饱和且不具有芳香性的单环环状烷基，优选具有3-6个环原子，即3-6元饱和环烷基和3-6元部分饱和环烷基。3-6元饱和环烷基的具体实例包括但不限于环丙烷基(环丙基)、环丁烷基(环丁基)、环戊烷基(环戊基)、环己烷基(环己基)，3-6元部分饱和环烷基的具体实例包括但不限于环丙烯基、环丁烯基、环戊烯基、环戊二烯基、环己烯基、环己-1,3-二烯基、环己-1,4-二烯基、环庚烯基、环庚-1,3-二烯基、环庚-1,4-二烯基、环庚-1,3,5-三烯基、环辛烯基、环辛-1,3-二烯基、环辛-1,4-二烯基、环辛-1,5-二烯基、环辛-1,3,5-三烯基、环辛四烯基。
如本文中所使用的，术语“杂环基”是指，含有3-14个环原子、且含有至少一个杂原子(例如1、2、3、4或5个杂原子)的饱和或部分饱和的单环或稠环化合物除去一个氢原子得到的基团。术语“3-6元含氮杂环基”是指含有3、4、5或6个环原子的杂环基，其中的1、2或3个是氮原子，任选地，所述杂环基还含有1或2个氧原子或硫原子。
如本文中所使用的，术语“药学上可接受的盐”是指，(i)本发明所提供的化合物中存在的酸性官能团(例如-COOH)与适当的无机或者有机阳离子(碱)形成的盐，并且包括但不限于，碱金属盐，如钠盐、钾盐、锂盐等；碱土金属盐，如钙盐、镁盐等；其他金属盐，如铝盐、铁盐、锌盐、铜盐、镍盐、钴盐等；无机碱盐，如铵盐；有机碱盐，如叔辛基胺盐、二苄基胺盐、吗啉盐、葡糖胺盐、苯基甘氨酸烷基酯盐、乙二胺盐、N-甲基葡糖胺盐、胍盐、二乙胺盐、三乙胺盐、二环己基胺盐、N,N'-二苄基乙二胺盐、氯普鲁卡因盐、普鲁卡因盐、二乙醇胺盐、N-苄基-苯乙基胺盐、哌嗪盐、四甲基胺盐、三(羟甲基)氨基甲烷盐。以及，(ii)本发明所提供的化合物中存在的碱性官能团(例如-NH2)与适当的无机或者有机阴离子(酸)形成的盐，并且包括但不限于，氢卤酸盐，如氢氟酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐等；无机酸盐，如硝酸盐、高氯酸盐、硫酸盐、磷酸盐等；低级烷磺酸盐，如甲磺酸盐、三氟甲磺酸盐、乙磺酸盐等；芳基磺酸盐，如苯磺酸盐、对苯磺酸盐等；有机酸盐，如醋酸盐、苹果酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、草酸盐、马来酸盐等；氨基酸盐，如甘氨酸盐、三甲基甘氨酸盐、精氨酸盐、鸟氨酸盐、谷氨酸盐、天冬氨酸盐等。
如本文中所使用的，术语“药学上可接受的酯”是指，本发明所提供的化合物中存在的-COOH与适当的醇形成的酯，或者本发明所提供的化合物中存在的-OH与适当的酸(例如，羧酸或含氧无机酸)形成的酯。适宜的酯基团包括但不限于，甲酸酯、乙酸酯、丙酸酯、丁酸酯、丙烯酸酯、乙基琥珀酸酯、硬脂肪酸酯或棕榈酸酯。酯在酸或者碱存在的条件下，可以发生水解反应生成相应的酸或醇。
如本文中所使用的，术语“药学上可接受的酰胺”是指，本发明所提供的化合物中存在的-COOH与适当的胺形成的酰胺，或者本发明所提供的化合物中存在的-NH-或-NH2与适当的酸(例如，羧酸，例如乙酸)形成的酰胺。
如本文中所使用的，术语“溶剂合物”是指本发明化合物与溶剂分子缔合形成的物质。所述溶剂可以是有机溶剂(例如甲醇、乙醇、丙醇、乙腈等)，例如本发明化合物可以与乙醇形成乙醇化物。本发明化合物还可以与水形成水合物。
如本文中所使用的，术语“晶型”是指物质的晶体结构。物质在结晶时由于受各种因素影响，使分子内或分子间键合方式发生改变，致使分子或原子在晶格空间排列不同，形成不同的晶体结构。本发明化合物可以一种晶体结构存在，也可以多种晶体结构存在，即具有“多晶型”。本发明化合物可以不同的晶型存在。
如本文中所使用的，术语“立体异构体”包括构象异构体和构型异构体，其中所述构型异构体主要包括顺反异构体和旋光异构体。本发明化合物可以以立体异构体的形式存在，并因此涵盖所有可能的立体异构体形式，及其任何组合或任何混合物。例如单一对映异构体，单一非对映异构体或以上的混合物。当本发明化合物含有烯烃双键时，除非特别说明，否则其包括顺式异构体和反式异构体，以及其任何组合。
如本文中所使用的，术语“互变异构体”是指因分子中某一原子在两个位置迅速移动而产生的官能团异构体，例如烯醇式和酮式的互变异构体，本发明的化合物如存在互变异构体，则可以以单一的互变异构体或它们的混合物的形式存在，优选以较稳定的互变异构体为主的形式存在。
如本文中所使用的，术语“前药”是指可在受试者体内通过例如氧化、还原、水解等反应转化成本发明的化合物。前药自身可或不可具有式(I)化合物的生物活性(例如，调节糖脂代谢活性，抗炎活性，抗氧化活性)。例如，包括羟基或羧基的式(I)化合物可以酯的形式给药，其在体内水解转化成羟基化合物或羧基化合物。类似地，包括氨基的式(I)化合物发生酰化、烷基化或磷酸化，以形成例如二十烷酰基氨基(Eicosanoylamino)、丙氨酰氨基、新戊酰氧甲基氨基的化合物给药。关于前体药物使用的进一步信息可以参见Pro-drugs asNovel Delivery Systems，Vol.14，ACS Symposium Series(T Higuchi and W Stella)和Bioreversible Carriers in Drug Design，Pergamon Press，1987(ed.E B Roche，American Pharmaceutical Association)。根据本发明的一些前体药物实例包括：(i)若式(I)化合物含有羧酸官能团(-COOH)，则包括它的酯，例如用(C1-C8)烷基代替氢；(ii)若式(I)化合物含有醇官能团(-OH)，则包括它的醚，例如用(C1-C6)烷酰氧基甲基代替氢；和(iii)若式(I)化合物含有伯或仲氨基官能团(-NH2或-NHR，其中R不为H)，则包括它的酰胺，例如用(C1-C10)烷酰基代替一个或两个氢。此外，某些式(I)化合物本身可以充当其他式(I)化合物的前体药物。
如本文中所使用的，术语“药学上可接受的载体或赋形剂”是指，在药理学和/或生理学上与受试者和活性成分相容的载体和/或赋形剂，其是本领域公知的(参见例如Remington's Pharmaceutical Sciences.Edited by Gennaro AR,19thed.Pennsylvania:Mack Publishing Company,1995)，并且包括但不限于：崩解剂、粘合剂、表面活性剂、助流剂、润滑剂、pH调节剂、离子强度增强剂、维持渗透压的试剂、延迟吸收的试剂、稀释剂、抗氧化剂、着色剂、矫味剂、防腐剂、味道掩蔽剂等。例如，崩解剂的非限制性实例包括淀粉羟乙酸钠、羧甲基纤维素钠、羧甲基纤维素钙、交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纤维素、微晶纤维素、低级烷基-取代的羟丙基纤维素、淀粉、预胶凝化淀粉和藻酸钠。粘合剂的非限制性实例包括微晶纤维素、明胶、糖、聚乙二醇、天然与合成树胶、聚乙烯吡咯烷酮、预胶凝化淀粉、羟丙基纤维素和羟丙基甲基纤维素。稀释剂的非限制性实例包括乳糖(一水合物、喷雾干燥的一水合物、无水等)、甘露糖醇、木糖醇、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、微晶纤维素、淀粉和磷酸氢钙二水合物。表面活性剂的非限制性实例包括月桂基硫酸钠和聚山梨醇酯80。助流剂的非限制性实例包括二氧化硅和滑石。润滑剂的非限制性实例包括硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸锌、硬脂基富马酸钠以及硬脂酸镁与月桂基硫酸钠的混合物。pH调节剂的非限制性实例包括但不磷酸盐缓冲液。离子强度增强剂包括但不限于氯化钠。维持渗透压的试剂包括但不限于糖、NaCl及其类似物。延迟吸收的试剂包括但不限于单硬脂酸盐和明胶。防腐剂包括但不限于各种抗细菌试剂和抗真菌试剂，例如硫柳汞，2-苯氧乙醇，对羟苯甲酸酯，三氯叔丁醇，苯酚，山梨酸等。
如本文中所使用的，术语“预防”是指，为了阻止或延迟疾病或病症或症状在受试者体内的发生而实施的方法。如本文中所使用的，术语“治疗”是指，为了获得有益或所需临床结果而实施的方法。为了本发明的目的，有益或所需的临床结果包括但不限于，减轻症状、缩小疾病的范围、稳定(即，不再恶化)疾病的状态，延迟或减缓疾病的发展、改善或减轻疾病的状态、和缓解症状(无论部分或全部)，无论是可检测或是不可检测的。此外，“治疗”还可以指，与期望的存活期相比(如果未接受治疗)，延长存活期。
如本文中所使用的，术语“有效量”是指足以获得或至少部分获得期望的效果的量。例如，预防疾病(例如，代谢性疾病或与代谢性疾病相关的病状)有效量是指，足以预防，阻止，或延迟疾病(例如，代谢性疾病或与代谢性疾病相关的病状)的发生的量；治疗疾病有效量是指，足以治愈或至少部分阻止已患有疾病的患者的疾病和其并发症的量。测定这样的有效量完全在本领域技术人员的能力范围之内。例如，对于治疗用途有效的量将取决于待治疗的疾病的严重度、患者自己的免疫系统的总体状态、患者的一般情况例如年龄，体重和性别，药物的施用方式，以及同时施用的其他治疗等等。
具体实施方式
核磁共振以下实例之中，化合物的结构通过核磁共振(NMR)以及液质(LCMS)所确定。NMR化学位移(δ)以10-6(ppm)为单位给出。NMR测定是由Bruker AVANCE III 500MHz核磁仪器进行，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-d6)、氘代氯仿(CDCl3)、氘代甲醇(CD3OD)等，内标为四甲基硅烷(TMS)。
分析液相色谱使用分析液相进行反应体系监测以及重要中间体和目标产物的纯度分析。分析型液相系统：Agilent 1260Infinity II(配备1260Binary Pump泵,VialSampler进样器,MCT柱温箱,DAD WR检测器)；色谱柱：Waters XBridge BEH C18 3.5um,4.6*150mm。
制备液相色谱使用制备液相进行少量重要中间体以及目标产物的分离纯化。制备型液相系统：Agilent1290Infinity II(配备1290Prep Bin Pump泵,Prep ALS/FC进样/收集器,1260VWD检测器)；C18反相硅胶色谱柱。
液质联用使用LCMS进行常规反应体系检测以及目标产物的分子量信号确定。LC-MS系统:Waters UPLCH-Class超高效液相-QDa联用仪；色谱柱：Waters XBridge BEH C181.7um,2.1*75mm。
液相流动相配比酸性条件：A：0.05％甲酸水溶液，B：乙腈；碱性条件：A：0.05％氨水水溶液，B：乙腈；中性条件：A：5mM NH4HCO3水溶液，B：乙腈。上述数据为默认流动相配比，具体实施分析测试时可根据实测样品性质进行适当调整。
快速纯化系统使用快速纯化系统进行常规反应体系的化合物粗略制备纯化，仪器型号为Biotage Isolera One，其配套使用的正相柱以及反相柱均购自Santai Tech.。正相硅胶柱常用规格为12g、25g、40g、80g、120g以及330g，具体参数如下：40-63μm，反相C18柱常用规格为40g、80g、120g以及330g，具体参数如下：20-45μm，
薄层色谱使用薄层色谱法(TLC)硅胶板对反应体系进行成分定性分析或者少量样品的分离纯化。薄层色谱法进行定性分析时所使用产品为Merck薄层硅胶板，规格如下：GF254，20*20cm，玻璃板，0.25mm涂层；薄层色谱法进行分离纯化时所使用产品为乐研制备硅胶板，规格如下：GF254，20*20cm，玻璃板，1mm涂层。
化学品试剂本发明的已知起始原料可以采用或按照本领域已知的文献、专利方法等进行合成，或可购买自Alfa Aesar、Acros、Sigma-Aldrich、TCI、艾康、安耐吉、阿拉丁、百灵威(J&K)、毕得医药、乐研、麦克林、韶远(Accela)、泰坦(Adamas)、希恩思、伊诺凯等化学品试剂公司。
缩略词
保护基团缩略词：
Bn 苄基
Boc 叔丁氧羰基
Cbz 苄氧羰基
MOM 甲氧基甲基
PMB 对甲氧基苄基
TBDPS 叔丁基二苯基硅基
TBS 叔丁基二甲基硅基
THP 2-四氢吡喃基
Tos 对甲苯磺酰基
试剂缩略词：
ACN 乙腈
AIBN 偶氮二异丁腈
Boc2O 二碳酸二叔丁酯
BPO 过氧化二苯甲酰
tBuONa 叔丁醇钠
CAM 钼酸铵铈硫酸显色剂
CDI N,N'-羰基二咪唑
m-CPBA 间氯过氧苯甲酸
DABCO 三乙烯二胺
DCE 1,2-二氯乙烷
DCM 二氯甲烷
DEAD 偶氮二甲酸二乙酯
DIAD 偶氮二甲酸二异丙酯
DIBAL-H 二异丁基氢化铝
DBU 1,8-二偶氮杂双螺环[5.4.0]十一-7-烯
DHP 3,4-二氢-2H-吡喃
DIEA N,N-二异丙基乙胺
DMAP 4-二甲氨基吡啶
DMF N,N-二甲基甲酰胺
DMSO 二甲基亚砜
EA 乙酸乙酯
HMPA 六甲基磷酰胺
HATU N,N,N′,N′-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)
六氟磷酸脲
LAH 氢化铝锂
m-CPBA: 间氯过氧苯甲酸
NBS N-溴代丁二酰亚胺
PE 石油醚
PMA 磷钼酸
PyBOP 1H-苯并三唑-1-基氧三吡咯烷基六氟磷酸盐
TBAF 四丁基氟化铵
TBDPSCl 叔丁基二苯基氯硅烷
TBSCl 叔丁基二甲基氯硅烷
TEA 三乙胺
TFA 三氟乙酸
THF 四氢呋喃
TPSCl 2,4,6-三异丙基苯磺酰氯
TsCl 对甲苯磺酰氯
TsOH 对甲苯磺酸
实施例1：化合物C-1的合成
步骤A：0℃和氮气保护下，在溶解了2-(3-(溴甲基)苯基)乙酸(2.30g,10.04mmol)的四氢呋喃(30mL)中，逐滴加入硼烷的四氢呋喃溶液(20mL,1M in THF,20.00mmol)。加完后，整个混合物升温至室温搅拌3小时。在反应液中加入甲醇进行淬灭，将反应液减压浓缩得到黄色粗品。将粗品进行硅胶柱分离(PE:EA＝85:15)，该反应得到淡黄色油状物产物2-(3-(溴甲基)苯基)乙烷-1-醇(2.30g,8.56mmol,85％)。ESI-MS m/z＝215.0[M+H]+；Calcu.＝214.0。
步骤B：室温下，在溶解了2-(3-(溴甲基)苯基)乙烷-1-醇(1.47g,8.65mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中，加入碳酸钾(2.39g,17.30mmol)和6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(2.05g,9.53mmol)。加完后，整个混合物在室温下搅拌过夜。将反应液减压浓缩得到黄色固体。将残渣进行硅胶柱分离(PE:EA＝85:15)，该反应得到白色固体的产物2-(3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)苯基)乙-1-醇(888mg,2.93mmol,34％)。ESI-MS m/z＝304.0[M+H]+；Calcu.＝303.1。
步骤C：室温下，在溶解了2-(3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)苯基)乙-1-醇(888mg,2.93mmol)的二氯甲烷(15mL)中，加入三乙胺(1.7mL,11.99mmol)和4-二甲氨基吡啶(32mg,0.264mmol)以及对甲苯磺酰氯(1.14g,6.00mmol)。加完后，整个混合物在室温下搅拌过夜。将反应液减压浓缩得到黄色固体，将残渣进行硅胶柱分离(PE:EA＝85:15)，该反应得到白色固体的产物3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)苯乙基-4-甲基苯磺酸酯(739mg,1.62mmol,55％)。ESI-MS m/z＝458.0[M+H]+；Calcu.＝457.1。
步骤D：室温下，在溶解了3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)苯乙基-4-甲基苯磺酸酯(739mg,1.62mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(50mL)中，加入碳酸铯(574mg,1.76mmol)和6-氧代-1，6-二氢吡啶-3-羧酸甲酯(224mg,1.46mmol)，加完后，整个混合物室温下搅拌2小时。将反应液减压浓缩得到棕色固体，将残渣进行硅胶柱分离(DCM:MeOH＝90:10)，该反应得到白色固体的产物1-(3-(4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)苯乙基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-羧酸甲酯(500mg,粗品)。ESI-MS m/z＝439.0[M+H]+；Calcu.＝438.1。
步骤E：在室温下，在溶解了1-(3-(4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)苯乙基)-6-氧代-1，6-二氢吡啶-3-羧酸甲酯(500mg,粗品)的甲苯(25mL)中，加入二异丁基氢化铝(3mL,1M己烷溶液，3.00mmol)。加完后，整个混合物室温下搅拌过夜。将反应液减压浓缩得到黄色残渣，将残渣进行硅胶柱分离(DCM:MeOH＝90:10)，该反应得到黄色固体产物1-(3-(4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基甲基)苯乙基)-5-羟甲基吡啶-2(1H)酮(60mg,0.146mmol,两步收率10％)。ESI-MS m/z＝411.0[M+H]+；Calcu.＝410.1。
步骤F：在室温下，在溶解了1-(3-(4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基甲基)苯乙基)-5-羟甲基吡啶-2(1H)酮(9mg,0.022mmol)的乙腈(5mL)中，加入碳酸铯(143mg,0.438mmol)和碘化锂(59mg,0.438mmol)。加完后，整个混合物升温至110℃下封管加压搅拌36小时。将反应液减压浓缩得到白色粗品，将粗品进行HPLC制备分离纯化。制备条件：Waters XBridge RP18(19mm×250mm,5μm)；A:0.1％formic acid in water,B:MeCN；18mL/min；0～4min,5％ B；4～16min,5％～70％ B；16～17min,70％～100％ B；detector,UV254nm)。该反应得到化合物C-1，白色固体产物(E)-14-氨基-61，62-二氢-11H-8-氧杂-1(1，6)吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯环八聚糖-62-酮(0.2mg,0.0005mmol,2％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ7.50(s,1H),7.36-7.40(m,1H),7.31-7.16(m,3H),7.13-7.05(m,2H),6.53(s,2H),6.37(d,J＝9.3Hz,1H),5.07(s,2H),4.17(s,2H),4.05(t,J＝7.8Hz,2H),2.90(t,J＝7.8Hz,2H)。ESI-MS m/z＝375.0[M+H]+；Calcu.＝374.1。
实施例2：化合物C-2的合成
步骤A：在圆底烧瓶中依次加入6-氧代-1,6-二氢哒嗪-3-羧酸甲酯(462mg,3mmol)，DMF(20mL)，碳酸铯(977mg,3mmol)，3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)苯乙基-4-甲基苯磺酸盐(457mg,1mmol)，全部加入后室温反应。18h后停止搅拌，依次加入水(20mL)，二氯甲烷/甲醇＝8/2的混合溶液(16mL二氯甲烷+4mL甲醇)，分出有机层，水层用二氯甲烷/甲醇＝8/2((16mL二氯甲烷+4mL甲醇)×3)萃取，随后合并有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，得固体粗产物1-(3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)苯乙基)-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-3-羧酸甲酯(339mg,粗品)。粗产物直接用于下一步，无需进一步分离。ESI-MS m/z＝440.0[M+H]+；Calcu.＝439.1。
步骤B：在封管中依次加入1-(3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)苯乙基)-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-3-羧酸甲酯(150mg,0.34mmol)，四氢呋喃(20mL)，随后放入0℃冰水浴中，加入氢化锂铝(52mg,1.36mmol)，全部加入后0℃中反应。5h后加入20mL饱和氯化铵溶液，20mL二氯甲烷/甲醇＝16/4的混合溶液(16mL二氯甲烷+4mL甲醇)，分出有机层，水层用二氯甲烷/甲醇＝16/4((16mL二氯甲烷+4mL甲醇)×3)萃取，合并有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干。得(1-(3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)苯乙基)-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-3-羧酸甲酯)/(2-(3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)苯乙基)-6-(羟甲基)哒嗪-3(2H)-酮)＝41/27的粗产物(57mg,粗品)直接用于下一步。ESI-MS m/z＝412.0[M+H]+；Calcu.＝411.1。
步骤C：在封管中依次加入上一步的粗产物(10mg,0.024mmol)，碳酸铯(79mg,0.24mmol)，碘化锂(40mg,0.24mmol)，乙腈(3mL)，全部加入后拧紧封管，放入110℃油浴中反应。8h后提出油浴，恢复至室温。过滤除去碳酸铯和碘化钾，用乙腈(10mL)淋洗，减压旋干溶剂。粗产物直接进行HPLC制备分离，制备条件：YMC-Actus Triart C18(20mm×250mm,5μm)；A:0.05％ammonia water；B:MeCN；18mL/min；0～5min,5％ B；5～20min,5％～20％ B；detector,UV 254nm。得C-2，固体产物(E)-14-氨基-61,66-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,3)-哒嗪-3(1,3)-苯并环辛烷-66-酮(3mg,0.008mmol,三步收率10％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 7.92(s,1H)7.90-7.71(br,1H)7.66(s,1H)7.64-7.40(br,1H)7.25(d,J＝10.0Hz,1H)7.12(d,J＝10.0Hz,1H)7.06(t,J＝7.5Hz,2H)6.75(d,J＝10.0Hz,1H)5.33(s,2H)5.27(s,2H)4.47(t,J＝7.5Hz,2H)3.28(t,J＝7.5Hz,2H)；ESI-MSm/z＝376.0[M+H]+；Calcu.＝375.1。
实施例3：化合物C-3/C-5的合成
步骤A：在圆底烧瓶中依次加入6-氧代-1,6-二氢哒嗪-3-羧酸甲酯(706mg,4.6mmol)，碳酸铯(1.49g,4.6mmol)，N,N-二甲基甲酰胺(45mL)，5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-溴-苯乙基-4-甲基苯磺酸盐(820mg,1.5mmol)。全部加入后室温反应。24小时后停止搅拌，依次加入水(50mL)，二氯甲烷/甲醇＝45/5((45+5)mL)，分出有机层，水层用二氯甲烷/甲醇＝45/5((45+5)mL×3)萃取，随后合并有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干，得固体产物1-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-溴苯乙基)-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-3-羧酸甲酯(578mg,1.1mmol,72％)。ESI-MS m/z＝517.9[M+H]+；Calcu.＝517.0。
步骤B：在封管中依次加入1-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-溴苯乙基)-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-3-羧酸甲酯(350mg,0.68mmol)，四氢呋喃(5mL)，乙醇(45mL)，随后将封管放入0℃冰水浴中，加入硼氢化钠(128mg,3.4mmol)和氯化钙(749mg,6.8mmol)，全部加入后继续在0℃中反应，自然回复至室温。48小时加入水(50mL)，二氯甲烷/甲醇＝9/1的混合溶液(45mL二氯甲烷+5mL甲醇)，分出有机层，水层用二氯甲烷/甲醇＝9/1的混合溶液((45mL二氯甲烷+5mL甲醇)×3)萃取，合并有机层，无水硫酸钠干燥，过滤，旋干得2-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-溴-苯乙基)-6-(羟甲基)哒嗪-3(2H)-酮粗产物(186mg,粗品)，无需进一步分离直接用于下一步。ESI-MSm/z＝489.8[M+H]+；Calcu.＝489.0。
步骤C：在封管中依次加入2-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-溴-苯乙基)-6-(羟甲基)哒嗪-3(2H)-酮(180mg,0.37mmol)，碳酸铯(1.20g,3.7mmol)，碘化钾(609mg,3.7mmol)，乙腈(25mL)，全部加入后拧紧封管，放入110℃油浴中反应。8h后提出油浴，恢复至室温。过滤除去碳酸铯和碘化钾，用乙腈(20mL)淋洗，减压旋干溶剂送制备HPLC分离。制备条件：YMC-Actus Triart C18(20mm×250mm,5μm)；A:0.05％ammonia water；B:MeCN；18mL/min；0～3min,5％ B；3～4min,5％～10％ B；4～24min,10％～50％ B；detector,UV 254nm。得固体产物C-5，(E)-14-氨基-34-溴-61,66-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,3)-哒嗪-3(1,3)-苯并环辛烷-66-酮(90mg,两步收率30％)。ESI-MS m/z＝453.9[M+H]+；Calcu.＝453.1。
步骤D：将干燥的Schlenk管置换氮气三次，然后依次加入(E)-14-氨基-34-溴-61,66-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,3)-哒嗪-3(1,3)-苯并环辛烷-66-酮(45mg,0.1mmol)，1-((三氟-4-硼烷基)甲基)吡咯烷钾盐(57mg,0.3mmol)，三二亚苄基丙酮二钯(9mg,0.01mmol)，2-双环己基膦-2',4',6'-三异丙基联苯(19mg,0.04mmol)，碳酸钠(32mg,0.3mmol)，全部加入后重新置换氮气三次，依次加入1,4-二氧六环(1.6mL)，水(0.4mL)。随后将Schlenk管放入80℃油浴中反应。2小时后提出油浴，恢复至室温，旋干溶剂，送制备HPLC分离。制备条件：Waters XBridge Prep Shield RP18(19mm×250mm,5μm)；A:0.1％formic acid in water；B:MeCN；18mL/min；0～3min,5％ B；3～15min,5％～30％B；detector,UV 254nm。得固体产物C-3，(E)-14-氨基-34-(吡咯烷-1-甲基)-61,66-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,3)-哒嗪-3(1,3)-苯并环辛烷-66-酮(9mg,0.02mmol,20％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 7.90(s,1H)7.89-7.75(br,1H)7.71(s,1H)7.68-7.50(br,1H)7.29(d,J＝10.0Hz,1H)7.25-7.05(m,2H)6.79(d,J＝5.0Hz,1H)5.35(s,2H)5.24(s,2H)4.53(t,J＝5.0Hz,2H)3.50(s,2H)2.33-2.25(m,6H)1.70-1.60(m,4H)；ESI-MS m/z＝459.1[M+H]+；Calcu.＝458.2。
实施例4：化合物C-4的合成
步骤A：将干燥的Schlenk管置换氮气三次，然后依次加入(E)-14-氨基-34-溴-61,66-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,3)-哒嗪-3(1,3)-苯并环辛烷-66-酮(45mg,0.1mmol)，N,N-二甲基-1-(三氟-λ4-硼烷基)甲胺钾盐(49mg,0.3mmol)，三二亚苄基丙酮二钯(2mg,0.002mmol)，2-双环己基膦-2',4',6'-三异丙基联苯(5mg,0.01mmol)，碳酸钠(32mg,0.3mmol)，全部加入后重新置换氮气三次，依次加入1,4-二氧六环(1.6mL)，水(0.4mL)。随后将Schlenk管放入80℃油浴中反应。3h后提出油浴，恢复至室温，旋干溶剂，送制备HPLC分离。制备条件：Waters XBridge Prep Shield RP18(19mm×250mm,5μm)；A:0.1％formic acid in water；B:MeCN；18mL/min；0～3min,5％ B；3～23min,5％～30％ B；detector,UV 254nm。得固体产物C-4，(E)-14-氨基-34-((二甲基氨基)甲基)-61,66-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑[3,4-d]嘧啶-6(1,3)-哒嗪-3(1,3)-苯并环辛烷-66-酮(8mg,0.019mmol,19％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 7.90(s,1H),7.88-7.73(br,1H),7.70(s,1H),7.69-7.49(br,1H),7.29(d,J＝10.0Hz,1H),7.27-7.03(m,2H),6.78(d,J＝10.0Hz,1H),5.34(s,2H),5.25(s,2H),4.53(t,J＝5.0Hz,2H),3.50(t,J＝10.0Hz,2H),2.25-2.08(m,8H)。ESI-MS m/z＝433.1[M+H]+；Calcu.＝432.2。
实施例5：化合物C-6/C-10的合成
步骤A：在室温下，在溶解了(2-溴-5-甲基苯基)乙酸(15g,65.48mmol)的甲醇(100mL)中，加入浓硫酸(98％)(0.5mL,9.335mmol)。加完后，整个混合物升温至80℃搅拌6小时。将反应液进行减压浓缩得到淡黄色固液混合物粗品产物，加入水稀释，用乙酸乙酯萃取三次(50mL*3)，合并有机相，用饱和食盐水洗一次(50mL)，无水硫酸钠干燥，过滤后减压浓缩得到黄色油状液体粗品产物2-(2-溴-5-甲基苯基)乙酸甲酯，直接下一步。ESI-MS m/z＝244.8[M+H]+；Calcu.＝244.0。
步骤B：在室温下，在溶解了2-(2-溴-5-甲基苯基)乙酸甲酯粗品，N-溴代丁二酰亚胺(11.75g,66.02mmol)的四氯化碳(100mL)中，加入过氧化二苯甲酰(1g,4.128mmol)。加完后，整个混合物升温至80℃搅拌6小时。将反应液经过硅胶过滤，乙酸乙酯洗涤，过滤后减压浓缩得到黄色油状液体粗品产物。将残渣进行硅胶柱分离(SiO2,PE:EA＝90:10)，该反应得到无色油状液体的产物2-(2-溴-5-(溴甲基)苯基)乙酸甲酯(16.28g,50.56mmol,两步收率77％)。
步骤C：在0℃和N2保护下，在溶解了2-(2-溴-5-(溴甲基)苯基)乙酸甲酯(16.28g,50.56mmol)的甲苯(200mL)中，滴加二异丁基氢化铝(126mL,126.0mmol)。加完后，整个混合物在室温下搅拌过夜。将反应液控温在0℃，然后缓慢加入水，直至反应液不出现明显气泡，然后经过硅藻土过滤，乙酸乙酯萃取三次(50mL*3)，合并有机相，用饱和食盐水洗一次(50mL)，无水硫酸钠干燥，过滤后减压浓缩得到无色油状液体粗品产物。将残渣进行硅胶柱分离(SiO2,PE:EA＝67:33)，该反应得到白色固体的产物2-(2-溴-5-(溴甲基)苯基)乙烷-1-醇(9.04g,30.75mmol,61％)。ESI-MS m/z＝274.2[M-OH]+；Calcu.＝291.9。
步骤D：在室温下，在溶解了6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(3g,17.69mmol)，2-(2-溴-5-(溴甲基)苯基)乙烷-1-醇(7.8g,26.53mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(90mL)和四氢呋喃(90mL)中，加入碳酸钾(3.7g,26.77mmol)。加完后，整个混合物在室温下搅拌过夜。将反应液进行减压浓缩得到黄色油状液体粗品产物，将残渣进行硅胶柱分离(SiO2,DCM:MeOH＝90:10)，该反应得到白色固体的产物2-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-溴苯基)乙烷-1-醇(1.94g,5.08mmol,29％)。ESI-MS m/z＝381.8[M+H]+；Calcu.＝381.0。
步骤E：在0℃下，在溶解了2-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-溴苯基)乙烷-1-醇(1.94g,5.08mmol)，三乙胺(2.8mL,20.14mmol)的二氯甲烷(200mL)中，分批加入对甲苯磺酰氯(1.94g,10.18mmol)。加完后，整个混合物在室温下搅拌过夜。将反应液进行减压浓缩得到黄色油状液体粗品产物，将残渣进行硅胶柱分离(SiO2,DCM:MeOH＝10:1)，该反应得到淡黄色固体的产物5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-溴苯乙基-4-甲基苯磺酸盐(2.7g,5.03mmol,99％)。ESI-MS m/z＝535.8[M+H]+；Calcu.＝535.0。
步骤F：在室温下，在溶解了5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-溴苯乙基-4-甲基苯磺酸盐(500mg,0.931mmol)，5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)吡啶-2(1H)-酮(622mg,2.598mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中，加入碳酸铯(911mg,2.796mmol)。加完后，整个混合物在室温下搅拌过夜。将反应液经过硅藻土过滤，用乙酸乙酯洗涤，过滤后减压浓缩得到棕色油状液体粗品产物。将残渣进行硅胶柱分离(SiO2,PE:EA＝30:70至EA:MeOH＝90:10)，该反应得到白色固体的产物1-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-溴苯乙基)-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲酯)吡啶-2(1H)-酮(130mg,0.215mmol,23％)。ESI-MS m/z＝603.0[M+H]+；Calcu.＝602.1。
步骤G：在室温下，在溶解了1-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-溴苯乙基)-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲酯)吡啶-2(1H)-酮(130mg,0.215mmol)的四氢呋喃(20mL)中，加入四丁基氟化铵(0.6mL,0.60mmol)。加完后，整个混合物在室温下搅拌过夜。将反应液经过硅胶过滤，乙酸乙酯：甲醇＝50:50洗涤，过滤后减压浓缩得到黄色固体粗品产物1-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-溴苯乙基)-5-(羟甲基)吡啶-2(1H)-酮，直接下一步。ESI-MS m/z＝488.8[M+H]+；Calcu.＝488.0。
步骤H：在室温下，在溶解了((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-溴苯乙基)-5-(羟甲基)吡啶-2(1H)-酮粗品的乙腈(30mL)中，加入碳酸铯(790mg,2.425mmol)和碘化锂(325mg,2.428mmol)。加完后，整个混合物升温至110℃搅拌16小时。将反应液经过硅藻土过滤，用乙酸乙酯：甲醇＝50:50洗涤，过滤后减压浓缩得到黄色固体粗品产物。将残渣进行TLC分离(SiO2,乙酸乙酯：甲醇＝90:10with 1％三乙胺)，该反应得到淡黄色固体的产物(E)-14-氨基-34-溴-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环壬烷-62-酮(70mg,0.154mmol,两步收率72％)。取刮板后产物10mg进行HPLC制备分离，制备条件:Waters XBridge C18(19mm×250mm,5μm)；A:0.05％ammonia in water,B:MeCN；16mL/min；0～3min,5％ B；3～23min,5％～50％ B；23～30min,50％～100％ B；detector,UV 254nm。得到化合物C-10，白色固体产物(E)-14-氨基-34-溴-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环壬烷-62-酮(1.61mg,0.003mmol)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm8.33(d,J＝2.2Hz,1H),7.96(s,1H),7.88(d,J＝1.7Hz,1H),7.73(br s,1H),7.48(br s,1H),7.43(d,J＝8.3Hz,1H),7.37(dd,J＝9.5,2.2Hz,1H),6.95(dd,J＝8.3,1.7Hz,1H),6.28(d,J＝9.5Hz,1H),5.43(s,2H),5.07(s,2H),4.39(t,J＝5.2Hz,2H),3.30(t,J＝5.2Hz,2H)。ESI-MS m/z＝452.9[M+H]+；Calcu.＝452.1。
步骤I：在室温和N2保护下，在溶解了(E)-14-氨基-34-溴-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环壬烷-62-酮(15mg,0.033mmol)，三氟(吡咯烷-1-基甲基)硼酸钾(38mg,0.199mmol)的1,4-二氧六环(2mL)中，加入三二亚苄基丙酮二钯(6.1mg,0.007mmol)，2-双环己基膦-2',4',6'-三异丙基联苯(12.6mg,0.026mmol)，碳酸钠(21mg,0.198mmol)和水(0.5mL)。加完后，整个混合物升温至80℃和氮气保护下搅拌4小时。将反应液进行减压浓缩得到棕色固体粗品残渣，将残渣进行HPLC制备分离，制备条件:Waters XBridge C18(19mm×250mm,5μm)；A:0.05％ammonia in water,B:MeCN；16mL/min；0～3min,5％ B；3～18min,5％～95％ B；18～19min,95％～100％ B；detector,UV 254nm。得到化合物C-6，白色固体产物(E)-14-氨基-34-(吡咯烷-1-基甲基)-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛芬-62-酮(4.10mg,0.009mmol,27％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.22(d,J＝2.2Hz,1H),7.94(s,1H),7.72(br s,1H),7.62(s,1H),7.46(br s,1H),7.34(dd,J＝9.3,2.2Hz,1H),7.09(d,J＝8.0Hz,1H),6.92(dd,J＝8.0Hz,1.1Hz,1H),6.25(d,J＝9.3Hz,1H),5.40(s,2H),5.06(s,2H),4.33(t,J＝5.4Hz,2H),3.40(s,2H),3.25(t,J＝5.4Hz,2H),2.33(s,4H),1.64(s,4H)。ESI-MS m/z＝458.3[M+H]+；Calcu.＝457.2。
实施例6：化合物C-7的合成
步骤A：在室温和N2保护下，在溶解了(E)-14-氨基-34-溴-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环壬烷-62-酮(25mg,0.055mmol)，(吗啉-4-基)甲基三氟硼酸钾(69mg,0.288mmol)的1,4-二氧六环(4mL)中，加入三二亚苄基丙酮二钯(5mg,0.005mmol)，2-双环己基膦-2',4',6'-三异丙基联苯(12mg,0.025mmol)，碳酸钠(35mg,0.330mmol)和水(1mL)。加完后，整个混合物升温至80℃和氮气保护下搅拌4小时。将反应液进行减压浓缩得到棕色固体粗品残渣，将残渣进行HPLC制备分离，制备条件:Waters XBridge C18(19mm×250mm,5μm)；A:0.05％ammonia in water,B:MeCN；18mL/min；0～3min,10％ B；3～3.5min,10％～20％ B；3.5～15min,20％～50％ B；15～15.5min,50％～100％ B；detector,UV 254nm。得到化合物C-7，白色固体产物(E)-14-氨基-34-(吗啉甲基)-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛芬-62-酮(2.99mg,0.006mmol,11％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.19(d,J＝1.8Hz,1H),7.94(s,1H),7.71(br s,1H),7.62(s,1H),7.46(br s,1H),7.34(dd,J＝9.4,2.4Hz,1H),7.07(d,J＝7.6Hz,1H),6.92(d,J＝7.6Hz,1H),6.25(d,J＝9.4Hz,1H),5.40(s,2H),5.06(s,2H),4.34(t,J＝5.2Hz,2H),3.50(s,4H),3.25-3.30(m,4H),2.25(s,4H)。ESI-MSm/z＝474.3[M+H]+；Calcu.＝473.2。
实施例7：化合物C-8的合成
步骤A：在室温和N2保护下，在溶解了(E)-14-氨基-34-溴-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环壬烷-62-酮(25mg,0.055mmol)，二甲基氨基甲基三氟硼酸钾(55mg,0.288mmol)的1,4-二氧六环(4mL)中，加入三二亚苄基丙酮二钯(5mg,0.005mmol)，2-双环己基膦-2',4',6'-三异丙基联苯(12mg,0.025mmol)，碳酸钠(35mg,0.330mmol)和水(1mL)。加完后，整个混合物升温至80℃和氮气保护下搅拌4小时。将反应液进行减压浓缩得到棕色固体粗品残渣，将残渣进行HPLC制备分离，制备条件:Waters XBridge C18(19mm×250mm,5μm)；A:0.05％ammonia in water,B:MeCN；18mL/min；0～3min,10％ B；3～3.5min,10％～20％ B；3.5～16min,20％～60％ B；16～16.5min,60％～100％ B；detector,UV 254nm。得到化合物C-8，白色固体产物(E)-14-氨基-34-((二甲基氨基)甲基)-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛芬-62-酮(3.43mg,0.008mmol,14％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.20(d,J＝2.3Hz,1H),7.94(s,1H),7.71(br s,1H),7.64(s,1H),7.45(br s,1H),7.34(dd,J＝9.4,2.3Hz,1H),7.04(d,J＝7.8Hz,1H),6.90(d,J＝7.8Hz,1H),6.24(d,J＝9.4Hz,1H),5.41(s,2H),5.06(s,2H),4.33(t,J＝5.4Hz,2H),3.25(t,J＝5.4Hz,2H),3.18(s,2H),2.05(s,6H)。ESI-MS m/z＝432.3[M+H]+(C23H26N7O2)；Calcu.＝431.2。
实施例8：化合物C-9的合成
步骤A：在室温和N2保护下，在溶解了(E)-14-氨基-34-溴-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环壬烷-62-酮(25mg,0.055mmol)，1-甲基-4-三氟硼甲基哌嗪钾(73mg,0.288mmol)的1,4-二氧六环(4mL)中，加入三二亚苄基丙酮二钯(5mg,0.005mmol),2-双环己基膦-2',4',6'-三异丙基联苯(12mg,0.025mmol),碳酸钠(35mg,0.330mmol)和水(1mL)。加完后，整个混合物升温至80℃和氮气保护下搅拌4小时。将反应液进行减压浓缩得到棕色固体粗品残渣，将残渣进行HPLC制备分离，制备条件:Waters XBridge C18(19mm×250mm,5μm)；A:0.05％ammonia in water,B:MeCN；18mL/min；0～3min,10％ B；3～3.5min,10％～20％ B；3.5～16min,20％～50％ B；16～16.5min,50％～100％ B；detector,UV 254nm。得到化合物C-9，白色固体产物(E)-14-氨基-34-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛芬-62-酮(3.75mg,0.008mmol,14％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.18(s,1H),7.94(s,1H),7.71(br s,1H),7.59(s,1H),7.46(br s,1H),7.35(d,J＝9.2Hz,1H),7.05(d,J＝7.8Hz,1H),6.93(d,J＝7.8Hz,1H),6.26(d,J＝9.2Hz,1H),5.40(s,2H),5.06(s,2H),4.32(t,J＝5.2Hz,2H),3.27(s,2H),3.23(s,J＝5.2Hz,2H),2.18-2.34(m,8H),2.11(s,3H)。ESI-MS m/z＝487.4[M+H]+；Calcu.＝486.2。
实施例9：化合物C-11的合成
步骤A：室温下，在溶解了2-(3-氟-5-甲基苯基)乙酸(5g,29.73mmol)的甲醇(50mL)中，滴加浓硫酸(0.5mL,9.335mmol)。加完后，整个混合物100℃下搅拌3小时。反应液用氢氧化钠溶液调至中性后浓缩反应液，往反应液中加入水(50mL)，用乙酸乙酯萃取三次(50mL*3)，合并有机相，用饱和食盐水洗一次(50mL)，无水硫酸钠干燥，过滤后减压浓缩得到无色油状粗品产物2-(3-氟-5-甲基苯基)乙酸甲酯(5.14g,28.21mmol,95％)。
步骤B：室温下，在溶解了2-(3-氟-5-甲基苯基)乙酸甲酯(7.88g,43.25mmol)的四氯化碳(75mL)中，加入过氧化二苯甲酰(1.05g,4.335mmol)和N-溴代丁二酰亚胺(9.24g,51.90mmol)，加完后，整个混合物90℃下搅拌6小时。将反应液进行抽滤，抽滤后减压浓缩得到淡黄色油状粗品产物。将粗品产物进行硅胶柱分离(SiO2,PE:EA＝90:10)，该反应得到无色油状产物2-(3-(溴甲基)-5-氟苯基)乙酸甲酯(5.9g,22.60mmol,52％)。
步骤C：0℃和氮气保护下，在溶解了2-(3-(溴甲基)-5-氟苯基)乙酸甲酯(5.9g,22.60mmol)的甲苯(100mL)中，滴加二异丁基氢化铝(56.5mL,56.50mmol)，加完后，整个混合物室温下搅拌2小时。向反应液中缓慢加入甲醇至无气泡产生，过滤掉固体，将有机相进行减压浓缩得到白色粗品产物。将粗品产物进行硅胶柱分离(SiO2,PE:EA＝83:17)，该反应得到白色固体产物2-(3-(溴甲基)-5-氟苯基)乙烷-1-醇(2.5g,10.73mmol,47％)。
步骤D：室温下，在溶解了2-(3-(溴甲基)-5-氟苯基)乙烷-1-醇(2g,8.581mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(36mL)中，加入6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(1.2g,7.151mmol)和碳酸铯(3.5g,10.73mmol)，整个混合物室温下搅拌过夜。将反应液进行抽滤，抽滤后减压浓缩得到黄色油状粗品产物。将粗品产物进行硅胶柱分离(SiO2,DCM:MeOH＝97：3)该反应得到黄色固体产物2-(3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-氟苯基)乙烷-1-醇(600mg,1.865mmol,26％)。ESI-MS m/z＝321.9[M+H]+；Calcu.＝321.1。
步骤E：0℃下，在溶解了2-(3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-氟苯基)乙烷-1-醇(600mg,1.865mmol)的二氯甲烷(10mL)中，加入三乙胺(1mL,7.459mmol)和4-二甲氨基吡啶(22.8mg,0.187mmol)，随后分批加入对甲苯磺酰氯(711mg,3.730mmol)。加完后，整个混合物室温下搅拌过夜。减压浓缩得到黄色油状粗品产物。将粗品产物进行硅胶柱分离(SiO2,PE:EA＝1:1)，该反应得到淡黄色固体产物3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-氟苯乙基-4-甲基苯磺酸盐(500mg,1.051mmol,56％)。ESI-MS m/z＝476.2[M+H]+；Calcu.＝475.1。
步骤F：室温下，在溶解了3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-氟苯乙基-4-甲基苯磺酸盐(500mg,1.051mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中，加入5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)吡啶-2(1H)-酮(229mg,0.96mmol)和碳酸铯(467mg,1.433mmol)，整个混合物室温下搅拌过夜。将反应液进行抽滤，抽滤后减压浓缩得到黄色油状粗品产物。将粗品产物进行硅胶柱分离(SiO2,DCM:MeOH＝90:10)。该反应得到淡黄色固体产物1-(3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-氟苯乙基)-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基(200mg,0.368mmol,39％)。ESI-MS m/z＝543.1[M+H]+；Calcu.＝542.2。
步骤G：室温下，在溶解了1-(3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-氟苯乙基)-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基(130mg,0.239mmol)的四氢呋喃(10mL)中，滴加四丁基氟化铵(0.48mL,0.48mmol)，整个混合物室温下搅拌1.5小时。将反应液进行减压浓缩得到黄色粗品产物1-(3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-氟苯基乙基)-5-(羟甲基)吡啶-2(1H)-酮，未经分离直接进行下一步反应。ESI-MSm/z＝429.3[M+H]+；Calcu.＝428.1。
步骤H：室温下，在溶解了1-(3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-氟苯基乙基)-5-(羟甲基)吡啶-2(1H)-酮粗品的乙腈(3mL)中，加入碳酸铯(228mg,0.700mmol)和碘化锂(94mg,0.70mmol)，整个混合物在110℃下搅拌16小时。随后进行减压浓缩得到黄色粗品产物，将粗品进行HPLC制备分离，制备条件：Waters XBridge C18(10mm×150mm,5μm)；A:5mM NH3 in water,B:MeCN；5mL/min；0～3min,5％ B；3～15min,5％～50％ B；detector,UV 254nm)。该反应得到化合物C-11，白色固体产物(E)-14-氨基-35-氟-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并酸环辛芬-62-酮(5.10mg,0.013mmol,两步收率19％)。1H NMR(DMSO-d6,500MHz)δ8.07(s,1H),7.98(s,1H),7.76(br s,1H),7.55(s,2H),7.33(dd,J＝9.3,2.1Hz,1H),6.81(br d,J＝9.5Hz,1H),6.51(br d,J＝9.5Hz,1H),6.24(d,J＝9.3Hz,1H),5.45(s,2H),5.04(s,2H),4.31(br t,J＝5.6Hz,2H),3.20(br t,J＝5.6Hz,2H)。ESI-MS m/z＝393.2[M+H]+；Calcu.＝392.1。
实施例10：化合物C-12的合成
步骤A：室温下，在溶解了1-甲氧基-3,5-二甲基苯(15g,110.1mmol)，N-溴代丁二酰亚胺(20.58g,115.6mmol)的四氯化碳(150mL)中，加入偶氮二异丁腈(1.81g,11.01mmol)。加完后，整个混合物升温至80℃下搅拌8小时。将反应液冷却到室温，减压浓缩得到粗品。将粗品进行硅胶柱分离(SiO2,100％ PE)。该反应得到无色油状产物3-(溴甲基)-1-甲氧基-5-甲苯(17.25g,73％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 6.83(s,1H),6.81(d,J＝1.8Hz,1H),6.71(s,1H),4.62(s,2H),3.73(s,3H),2.26(s,3H)。
步骤B：室温下，在溶解了3-(溴甲基)-1-甲氧基-5-甲苯(5.12g,23.80mmol)，碳酸钾(4.93g,35.71mmol)的乙腈(50mL)中，加入三甲基氰基硅烷(4.72g,47.61mmol)。加完后，整个混合物升温至60℃下搅拌12小时。将反应液冷却到室温，然后加入1M氢氧化钠调至碱性，用乙酸乙酯萃取三次(50mL x 3)，合并有机相，用饱和食盐水洗一次(50mL)，无水硫酸钠干燥，过滤后减压浓缩得到粗品。将粗品进行硅胶柱分离(SiO2,PE:EA＝90:10)。该反应得到无色液体产物(5-甲氧基-3-甲基苯基)乙腈(2.52g,66％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 6.70-6.75(m,3H),3.95(s,2H),3.74(s,3H),2.28(s,3H)。
步骤C：室温下，在溶解了(5-甲氧基-3-甲基苯基)乙腈(1.90g,11.79mmol)的乙醇(18mL)中，加入3M氢氧化钾(9.036mL,27.11mmol)。加完后，整个混合物升温至80℃下搅拌12小时。将反应液减压浓缩，用EA萃取三次(10mL x 3)，水相用1M盐酸调PH至6，用(DCM:MeOH＝6:1)萃取三次(20mL x 3)，合并有机相，用饱和食盐水洗一次(10mL)，无水硫酸钠干燥，过滤后减压浓缩得到粗品产物(5-甲氧基-3-甲基苯基)乙酸(1.60g,粗品)。直接用于下一步反应。
步骤D：室温下，在溶解了(5-甲氧基-3-甲基苯基)乙酸(1.40g,7.769mmol)，N-溴代丁二酰亚胺(1.38g,7.769mmol)的四氯化碳(14mL)中，加入偶氮二异丁腈(0.13g,0.777mmol)。加完后，整个混合物升温至100℃下搅拌12小时。将反应液冷却到室温，减压浓缩得到粗品。将粗品进行硅胶柱分离(SiO2,DCM:MeOH＝97:3)，得到无色油状产物(3-(溴甲基)-5-甲氧基苯基)乙酸(2.00g,粗品)。直接用于下一步反应。
步骤E：0℃下，在溶解了(3-(溴甲基)-5-甲氧基苯基)乙酸(2.00g,7.72mmol)的四氢呋喃(20mL)中，缓慢滴加硼烷四氢呋喃(15.4mL,15.4mmol)。加完后，整个混合物缓慢回温至室温下搅拌过夜。将反应液置于冰浴中，缓慢加入甲醇淬灭。减压浓缩得到粗品。将粗品进行硅胶柱分离(SiO2,PE:EA＝75:25)。该反应得到无色油状产物2-(3-(溴甲基)-5-甲氧基苯基)乙烷-1-醇(550mg,三步收率22％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 6.87(s,1H),6.84-6.85(m,1H),6.73-6.76(m,1H),4.63(s,2H),3.74(s,3H),3.59(t,J＝7.0Hz,2H),2.68(t,J＝7.0Hz,2H)。
步骤F：室温下，在溶解了6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(230mg,1.356mmol)，碳酸钾(375mg,2.713mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(2.5mL)和四氢呋喃(2.5mL)中，加入6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(399mg,1.628mmol)。加完后，整个混合物室温下搅拌过夜。将反应液减压浓缩得到粗品。将粗品溶于甲醇(2mL)，进行反相分离，色谱柱:SantaiSepaFlash C18(Spherical C18,20-45μm,80g)；流动相:水(含有0.05％的TFA)和乙腈；流速:40毫升/分钟；梯度:在30分钟内，乙腈从0％升到100％；检测波长:254nm。减压冻干，得到黄色固体产物2-(3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-甲氧基苯基)乙烷-1-醇(80mg,16％)。ESI-MS m/z＝333.9[M+H]+；Calcu.＝333.1。
步骤G：0℃下，在溶解了2-(3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-甲氧基苯基)乙烷-1-醇(40mg,0.12mmol)，三乙胺(0.1mL,0.719mmol)和4-二甲氨基吡啶(1.46mg,0.012mmol)的二氯甲烷(2mL)中，加入对甲苯磺酰氯(91.4mg,0.479mmol)。加完后，整个混合物缓慢升至室温下搅拌3小时。将反应液减压浓缩得到粗品。将粗品进行硅胶柱分离(SiO2,PE:EA＝75:25)。该反应得白色固体产物3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-甲氧基苯乙基-4-甲基苯磺酸盐(30mg,46％)。ESI-MS m/z＝487.9[M+H]+；Calcu.＝487.1。
步骤H：室温下，在溶解了3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-甲氧基苯乙基-4-甲基苯磺酸盐(30mg,0.061mmol)，碳酸铯(60mg,0.183mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(2mL)中，加入6-氧代-1H-吡啶-3-甲醛(22.7mg,0.183mmol)。加完后，整个混合物室温下搅拌过夜。反应液减压浓缩得到白色固体粗品1-(3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-甲氧基苯乙基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲醛(40mg,粗品)。ESI-MS m/z＝438.9[M+H]+；Calcu.＝438.1。
步骤I：0℃下，在溶解了1-(3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-甲氧基苯乙基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲醛(40mg,粗品)的乙醇(2mL)中，加入硼氢化钠(10.3mg,0.27mmol)。加完后，整个混合物缓慢回复至室温下搅拌过夜。将反应液减压浓缩得到粗品。将粗品溶于甲醇(2mL)，进行反相分离，色谱柱:Santai SepaFlash C18(Spherical C18,20-45μm,40g)；流动相:水(含有0.05％的TFA)和乙腈；流速:40毫升/分钟；梯度:在30分钟内，乙腈从0％升到100％；检测波长:254nm。减压冻干，得到白色固体的产物1-(3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-甲氧基苯乙基)-5-(羟甲基)吡啶-2(1H)-酮(20mg,两步收率72％)。ESI-MS m/z＝440.9[M+H]+；Calcu.＝440.1。
步骤J：室温下，在溶解了1-(3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-甲氧基苯乙基)-5-(羟甲基)吡啶-2(1H)-酮(20mg,0.049mmol)，碳酸铯(159mg,0.49mmol)的乙腈(2mL)中，加入碘化锂(65mg,0.49mmol)。加完后，整个混合物升温至110℃下搅拌12小时。将反应液冷却到室温，过滤，然后加入甲醇(5mL)洗涤滤饼，滤液减压浓缩得到粗品。将粗品进行HPLC制备分离，制备条件:Waters XBridge Prep Shield RP18(19mm×250mm,5μm)；A:5mM NH4HCO3 in water,B:MeCN；18mL/min；0～3min,10％ B；3～3.5min,10％～20％ B；3.5～18min,20％～80％ B；detector,UV 254nm)。减压冻干，得到化合物C-12，白色固体产物(E)-14-氨基-35-甲氧基-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(2.19mg,11％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm8.06(d,J＝1.4Hz,1H),7.96(s,1H),7.71(br s,1H),7.46(br s,1H),7.33(dd,J＝9.1,2.1Hz,1H),7.25(s,1H),6.52(s,1H),6.36(s,1H),6.24(d,J＝9.3Hz,1H),5.38(s,2H),5.04(s,2H),4.28(t,J＝5.5Hz,2H),3.55(s,3H),313-3.16(m,2H)。ESI-MS m/z＝405.0[M+H]+；Calcu.＝404.2。
实施例11：化合物C-13的合成
步骤A：在20℃下，在溶解了2-(3,5-二甲基苯基)乙酸(20.0g,121.8mmol)的甲醇(10mL)中，缓慢滴加硫酸(0.65mL,12.18mmol)，然后整个混合物在70℃下搅拌2小时。将反应液直接进行减压浓缩除去大量甲醇，然后加入水(50mL)，用乙酸乙酯萃取两次(100mL*2)，合并两次有机相，用饱和氯化钠水溶液洗一次(30mL)，无水硫酸钠干燥，过滤后减压浓缩得到黄色油状物，将黄色油状物进行硅胶柱分离(SiO2,PE:EA＝83:17)。该反应得到黄色油状产物2-(3,5-二甲基苯基)乙酸甲酯(21.0g,97％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 6.88(s,1H),6.85(s,2H),3.60(s,3H),3.57(s,2H),2.24(s,6H)。
步骤B：在25℃下，在溶解了2-(3,5-二甲基苯基)乙酸甲酯(10.36g,58.13mmol)的1,2-二氯乙烷(100mL)中，加入偶氮二异丁腈(954mg,5.813mmol)，然后整个混合物升温至80℃，在80℃下，分批缓慢加入N-溴代丁二酰亚胺(20.69g,116.26mmol)，加完后整个混合物升温至90℃，并在90℃下搅拌0.5小时。将反应液冷却至室温，加入二氯甲烷(100mL)，然后用饱和碳酸氢钠水溶液洗一次(100mL)，饱和氯化钠水溶液洗一次(100mL)，无水硫酸钠干燥，过滤后减压浓缩得到固体残渣。将固体残渣进行硅胶柱分离(SiO2,PE:EA＝83:17)。该反应得到淡黄色透明油状产物2-(3,5-双(溴甲基)苯基)乙酸甲酯(10.15g,52％)。1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δppm7.43(s,1H),7.29(d,J＝1.4Hz,2H),4.69(s,4H),3.70(s,2H),3.62(s,3H)。
步骤C：在-30℃和氮气环境下，在溶解了2-(3,5-双(溴甲基)苯基)乙酸甲酯(10.15g,30.21mmol)的二氯甲烷(100mL)中，缓慢滴加入二异丁基氢化铝(45.3mL,45.3mmol)，滴加完后，整个混合物在0-5℃和氮气环境下搅拌2小时。在0-5℃下，缓慢向反应液中加入饱和氯化铵水溶液，直至没有气泡产生，加完后搅拌30分钟，然后经硅藻土过滤，收集滤液，将滤饼用二氯甲烷洗两次(200mL*2)，收集滤液，用饱和食盐水洗一次(50mL)，无水硫酸钠干燥，过滤后减压浓缩得到固体残渣。将固体残渣进行硅胶柱分离(SiO2,PE:EA＝75:25)。该反应得到淡黄色固体产物双(溴甲基)苯基)乙烷-1-醇(6.35g,68％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 7.35(s,1H)7.24(d,J＝1.2Hz,2H),4.67(s,4H),3.60(t,J＝6.9Hz,2H),2.71(t,J＝6.9Hz,2H)。
步骤D：在40℃下，在溶解了2-(3,5-双(溴甲基)苯基)乙烷-1-醇(6.35g,20.62mmol)和碳酸钾(8.55g,61.85mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中，分三批缓慢加入溶解了6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(2.80g,16.49mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(3mL)，然后整个混合物在40℃下搅拌0.5小时,然后向上混合物中加入水(3mL),然后整个混合物在40℃下搅拌16小时。将反应液直接进行减压浓缩得到固体残渣。将固体残渣进行硅胶柱分离(SiO2,DCM:MeOH＝94:6)。该反应的得到黄色油状产物2-(3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-(羟甲基)苯基)乙烷-1-醇(500mg,7％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.31(br s,1H),8.18(br s,1H),8.12(s,1H),7.05(s,1H),6.93-6.95(m,2H),5.39(s,2H),5.11(br s,1H),4.59(br s,1H),4.39(s,2H),3.55(t,J＝7.1Hz,2H),2.66(t,J＝7.0Hz,2H)。ESI-MS m/z＝334.0[M+H]+；Calcu.＝333.1。
步骤E：20℃下，在溶解了2-(3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-(羟甲基)苯基)乙烷-1-醇(500mg,1.50mmol)的二氯甲烷(5mL)和甲醇(5mL)中，缓慢加入二氧化锰(3.0g,34.51mmol)，然后整个混合物在20℃下搅拌7小时。向上混合物中补加二氧化锰(3.0g,34.51mmol),然后整个混合物继续在20℃下搅拌15小时。将反应液经过硅藻土过滤，收滤饼用甲醇淋洗三次(20mL*3)，收集滤液，直接进行减压浓缩得到固体残渣。将固体残渣进行硅胶柱分离(SiO2,DCM:MeOH＝90:10)。该反应得到白色固体产物3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-(2-羟乙基)苯甲醛(215mg,43％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm9.92(s,1H),8.42(br s,1H),8.18(br s,1H),8.16(s,1H),7.69(brs,1H),7.45-7.46(m,2H),5.52(s,2H),3.61(m,2H),2.78(t,J＝6.2Hz,2H)。ESI-MS m/z＝332.0[M+H]+；Calcu.＝331.1。
步骤F：0-5℃下，在溶解了3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-(2-羟乙基)苯甲醛(200mg,0.603mmol)，三乙胺(0.25mL,1.809mmol)和4-二甲氨基吡啶(36.8mg,0.301mmol)的中二氯甲烷(5mL)加入对甲苯磺酰氯(172mg,0.904mmol)，然后整个混合物在20℃下搅拌5小时。将反应液加入水(20mL)，然后用二氯甲烷萃取两次(40mL*2)，合并有机相，用饱和氯化钠水溶液洗一次(30mL)，无水硫酸钠干燥后，减压浓缩得到固体残渣。将固体残渣进行硅胶柱分离(SiO2,DCM:MeOH＝92:8)。该反应得到淡黄色固体产物3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-甲酰基苯乙基-4-甲基苯磺酸酯(50mg,17％)。ESI-MS m/z＝485.9[M+H]+；Calcu.＝485.1。
步骤G：在20℃下，在溶解了5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)吡啶-2(1H)-酮(207mg,0.864mmol)和3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-甲酰基苯乙基-4-甲基苯磺酸酯(140mg,0.288mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中，加入碳酸铯(188mg,0.576mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，然后整个混合物在20℃下搅拌16小时。将反应液直接减压浓缩得到固体残渣。将固体残渣进行硅胶柱分离(SiO2,DCM:MeOH＝90:10)。该反应得到白色固体产物3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-(2-(5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲酯)-2-氧代吡啶-1(2H)-基)乙基)苯甲醛(36mg,23％)。ESI-MS m/z＝553.1[M+H]+；Calcu.＝552.2。
步骤H：在0-5℃下，在溶解了3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-(2-(5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲酯)-2-氧代吡啶-1(2H)-基)乙基)苯甲醛(17mg,0.031mmol)的四氢呋喃(5mL)中缓慢滴加入四丁基氟化铵(0.046mL,0.046mmol)，滴完后整个混合物在20℃下搅拌2小时。将反应液加水(10mL)，用乙酸乙酯萃取两次(20mL*2)，合并两次有机相，用饱和氯化钠水溶液洗一次，无水硫酸钠干燥，过滤后减压浓缩得到淡黄色固体产物。不进行纯化，粗品化合物直接用于下一步。该反应得到淡黄色固体粗品产物3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-(2-(5-(羟甲基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基)乙基)苯甲醛(25mg,粗品)。ESI-MS m/z＝438.9[M+H]+；Calcu.＝438.1。
步骤I：在20℃下，在溶解了3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-(2-(5-(羟甲基)-2-氧代吡啶-1(2H)-基)乙基)苯甲醛(25mg,粗品)和四氢吡咯(0.007mL,0.085mmol)的二氯甲烷(5mL)中，加入三乙酰氧基硼氢化钠(18mg,0.085mmol)，然后整个混合物在20℃下搅拌18小时。将反应液直接进行减压浓缩得到固体残渣。将固体残渣进行硅胶柱分离(SiO2,DCM:MeOH＝90:10)。该反应得到黄色油状产物1-(3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-(吡咯烷-1-基甲基)苯乙基)-5-(羟甲基)吡啶-2(1H)-酮(28mg,粗品)。ESI-MS m/z＝494.0[M+H]+；Calcu.＝493.2。
步骤J：在20℃下，在溶解了1-(3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-(吡咯烷-1-基甲基)苯乙基)-5-(羟甲基)吡啶-2(1H)-酮(28mg,粗品)的乙腈(20mL)中，加入碳酸铯(185mg,0.57mmol)和碘化锂(37.9mg,0.28mmol)，然后整个混合物在110℃下搅拌2小时。将反应液进行硅藻土过滤，滤饼用乙酸乙酯淋洗三次(30mL*3)，收集滤液进行减压浓缩得到固体残渣，将固体残渣进行prep-HPLC制备分离，制备条件：YMC-ActusTriart C18(20mm×250mm,5μm)；5mM氨水in water；B:MeCN；18mL/min；0～3min,5％ B；3～3.5min,5％～15％ B；3。5～15min,15％～60％ B；detector,UV 254nm。该反应得到化合物C-13，白色固体产物(E)-14-氨基-35-(吡咯烷-1-基甲基)-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(0.843mg,3％)。ESI-MS m/z＝458.1[M+H]+；Calcu.＝457.2。
实施例12：化合物C-14的合成
步骤A：室温下，在溶解了(2-甲氧基-5-甲基苯基)乙酸(1.57g,8.71mmol)的甲醇(17mL)中，加入硫酸(0.05mL,0.83mmol)。加完后，整个混合物升温至80℃下加热搅拌4小时。TLC监测原料消失后，往体系中加入三乙胺溶液调节pH至中性，减压蒸除大部分甲醇，浓缩液中加入水，用二氯甲烷萃取3次，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。该反应得到呈黄色油状物的产物(2-甲氧基-5-甲基苯基)乙酸甲酯(1.64g,97％)。
步骤B：100℃下，在溶解了(2-甲氧基-5-甲基苯基)乙酸甲酯(1.64g,8.44mmol)的1,2-二氯乙烷(20mL)溶剂中，加入偶氮二异丁腈(0.14g,0.84mmol)和N-溴代丁二酰亚胺(1.81g,10.13mmol)。搅拌均匀后,反应混合物在100℃下回流搅拌7小时。待反应体系冷却到室温后，往体系中加入水20mL。混合液用二氯甲烷萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。该反应得到深棕色液体的产物2-(5-(溴甲基)-2-甲氧基苯基)乙酸甲酯(2.37g,粗品)。
步骤C：室温下，在溶解了2-(5-(溴甲基)-2-甲氧基苯基)乙酸甲酯(2.31g,8.46mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(190mL)中，依次加入6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(1.15g,6.77mmol)和碳酸铯(4.13g,112.7mmol)。搅拌4小时后HPLC检测原料消失，过滤不溶物，滤液用乙酸调节pH至中性，减压浓缩，将残渣直接进行HPLC制备分离，制备条件：Welch Xtimate C18(30mm×250mm,5μm)；A:5mM NH4HCO3 in water；B:MeCN；40mL/min，0～3min,10％ B；3～3.5min,10％～20％ B；3.5～16min,20％～90％ B；detector,UV 254nm。得到呈棕色固体的产物2-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-甲氧基苯基)乙酸甲酯(409mg,两步收率13％)。ESI-MS m/z＝361.9[M+H]+；Calcu.＝361.1。
步骤D：室温下，在溶解了2-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-甲氧基苯基)乙酸甲酯(409mg,1.13mmol)的四氢呋喃(40mL)中，加入氢化铝锂(88.0mg,2.32mmol)，加完后整个混合物室温下搅拌2h。TLC检测原料消失，往反应体系中加入水淬灭反应，加稀盐酸调节pH至溶液中性。混合加入乙酸乙酯后过滤，滤液分层，水相用乙酸乙酯萃取2次，合并有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。该反应得到呈棕黄色固体的产物2-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-甲氧基苯基)乙烷-1-醇(313mg,83％)。
步骤E：室温下，在溶解了2-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-甲氧基苯基)乙烷-1-醇(313mg,0.938mmol)的二氯甲烷(35mL)中，依次加入三乙胺(0.52mL,3.75mmol)，4-二甲氨基吡啶(11.5mg,0.094mmol)以及对甲苯磺酰氯(357mg,1.88mmol)。加完后混合物室温下搅拌过夜。TLC检测原料消失，反应液减压浓缩，将残渣进行硅胶柱分离(DCM:MeOH＝95:5)，该反应得到黄色固体产物5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-甲氧基苯乙基-4-甲基苯磺酸盐(311mg,68％)。ESI-MS m/z＝488.0[M+H]+；Calcu.＝487.1。
步骤F：室温下，在溶解了5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-甲氧基苯乙基-4-甲基苯磺酸盐(300mg,0.615mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(30mL)中，依次加入5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)吡啶-2(1H)-酮(294mg,1.23mmol)和碳酸铯(500mg,1.54mmol)，混合物搅拌5天。HPLC监测反应，原料消失后过滤反应液，加入乙酸调节pH至中性，减压蒸干N,N-二甲基甲酰胺，将残渣进行硅胶柱分离(DCM:MeOH＝95:5)，该反应得到白色固体产物1-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-甲氧基苯乙基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲酯)吡啶-2(1H)-酮(156mg,46％)。ESI-MS m/z＝555.1[M+H]+；Calcu.＝554.2。
步骤G：室温下，在溶解了1-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-甲氧基苯乙基)-5-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲酯)吡啶-2(1H)-酮(156mg,0.281mmol)的四氢呋喃(8ml)中，加入1M的四丁基氟化铵四氢呋喃溶液(0.422ml,0.422mmol)，反应液室温搅拌1.5小时后TLC监测。原料消失后，减压蒸干四氢呋喃，将残渣进行硅胶柱分离(DCM:MeOH＝95:5)，该反应得到白色固体产物1-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-甲氧基苯乙基)-5-(羟甲基)吡啶-2(1H)-酮(121mg,97％)。ESI-MS m/z＝440.9[M+H]+；Calcu.＝440.1。
步骤H：在溶解了1-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-甲氧基苯乙基)-5-(羟甲基)吡啶-2(1H)-酮(115mg,0.261mmol)的乙腈(30ml)中，加入碳酸铯(850mg,2.61mmol)和碘化锂(350mg,2.61mmol)。反应液置于110℃封管中加热10小时，HPLC监测。原料消失后反应液降温，在35℃下减压蒸干溶剂，残渣直接进行HPLC制备分离，制备条件：Welch Xtimate C18(30mm×250mm,5μm)；A:0.05％ NH3 in water；B:MeCN；40mL/min，0～3min,5％ B；3～3.5min,5％～15％ B；3.5～15min,15％～70％ B；detector,UV254nm。该反应得到化合物C-14，白色固体产物(E)-14-氨基-34-甲氧基-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(29.99mg,28％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.30(d,J＝2.2Hz,1H),7.93(s,1H),7.68(d,J＝1.6Hz,2H),7.42(s,1H),7.36(dd,J＝9.3,2.4Hz,1H),7.06(dd,J＝8.4,1.8Hz,1H),6.80(d,J＝8.5Hz,1H),6.26(d,J＝9.3Hz,1H),5.36(s,2H),5.10(s,2H),4.25-4.40(m,2H),3.66(s,3H),3.03-3.18(m,2H)。ESI-MS m/z＝405.2[M+H]+；Calcu.＝404.2。
实施例13：化合物C-15的合成
步骤A：在室温下，在溶解了5-溴-1,3-二甲基苯(30g,162.1mmol)，偶氮二异丁腈(2.7g,16.21mmol)的四氯化碳(300mL)中，加入N-溴代丁二酰亚胺(28.9g,162.1mmol)加完后，整个混合物90℃下搅拌3小时。将反应液经过硅藻土过滤，过滤后减压浓缩得到黄色粗品产物。将粗品产物进行硅胶柱分离(SiO2,PE:EA＝95:5)，该反应得到无色油状产物5-溴-3-(溴甲基)-1-甲基苯(27.4g,64％)。
步骤B：在室温下，在溶解了5-溴-3-(溴甲基)-1-甲基苯(27.4g,103.8mmol)，碳酸钾(43.0g,311.4mmol)的乙腈(300mL)中，加入三甲基氰基硅烷(20.60g,207.6mmol)加完后，整个混合物升温至60℃下搅拌过夜。将反应液进行抽滤，抽滤后减压浓缩得到黄色油状粗品产物。将粗品产物进行硅胶柱分离(SiO2,PE:EA＝95:5)，该反应得到无色油状产物(3-溴-5-甲基苯基)乙腈(18.4g,84％)。
步骤C：在室温下，在溶解了(3-溴-5-甲基苯基)乙腈(18.4g,87.59mmol)的水(50mL)和乙醇(100mL)中，加入氢氧化钾(14.74g,262.8mmol)加完后，整个混合物升温90℃下搅拌过夜。将反应液冷却到室温，蒸干乙醇，加入水(50mL)，然后滴加稀盐酸调pH值至1-2，析出大量白色固体，抽滤得白色固体产物(3-溴-5-甲基苯基)乙酸(19.2g,96％)。
步骤D：在室温下，在溶解了(3-溴-5-甲基苯基)乙酸(19.24g,83.99mmol)，偶氮二异丁腈(1.38g,8.399mmol)的四氯化碳(300mL)中，加入N-溴代丁二酰亚胺(14.95g,83.99mmol)加完后，整个混合物升温至80℃搅拌过夜。将反应液进行抽滤，抽滤后减压浓缩得到淡黄色油状粗品产物2-(3-溴-5-(溴甲基)苯基)乙酸。
步骤E：在0℃和N2保护下，在溶解了上步2-(3-溴-5-(溴甲基)苯基)乙酸粗品的四氢呋喃(200mL)中，加入硼烷四氢呋喃溶液1M(14g,168.0mmol)加完后，整个混合物在室温和氮气保护下搅拌3小时。将反应液控温在0℃，然后缓慢加入甲醇淬灭反应，直至反应液不出现明显气泡，淬灭时控温不超过10℃，然后经过硅藻土过滤，减压浓缩得到黄色粗品产物。将粗品产物进行硅胶柱分离(SiO2,PE:EA＝90:10)，该反应得到白色固体产物2-(3-溴-5-(溴甲基)苯基)乙烷-1-醇(8.7g，两步收率35％)。
步骤F：在室温下，在溶解了2-(3-溴-5-(溴甲基)苯基)乙烷-1-醇(8.7g,29.59mmol)，碳酸铯(13.2g,40.61mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(140mL)中，加入6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(4.6g,27.07mmol)，加完后，整个混合物室温下搅拌过夜。将反应液进行抽滤，抽滤后减压浓缩得到黄色油状粗品产物。将粗品产物进行硅胶柱分离(SiO2,DCM:MeOH＝95:5)该反应得到淡黄色固体产物2-(3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-溴苯基)乙烷-1-醇(3g,27％)。ESI-MS m/z＝383.9[M+H]+；Calcu.＝383.0。
步骤G：室温下，在溶解了2-(3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-溴苯基)乙烷-1-醇(3g,7.840mmol)，对甲苯磺酰氯(2.99g,15.68mmol)的二氯甲烷(100mL)中，加入三乙胺(4.36mL,31.36mmol)和加入4-二甲氨基吡啶(60mg,0.523mmol)加完后，整个混合物室温下搅拌2小时，将反应液进行减压浓缩得到黄色粗品产物将粗品产物进行硅胶柱分离(SiO2,DCM:MeOH＝95:5)该反应得到淡黄色固体产物3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-溴苯乙基-4-甲基苯磺酸盐(2.3g,55％)。ESI-MS m/z＝537.8[M+H]+；Calcu.＝537.0。
步骤H：室温下，在溶解了3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-溴苯乙基-4-甲基苯磺酸盐(2.3g,4.284mmol)，6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲醛(0.69g,5.57mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中，加入碳酸铯(2.09g,6.427mmol)加完后，整个混合物室温下搅拌过夜。随后进行减压浓缩得到黄色粗品产物，将残渣溶于N,N-二甲基甲酰胺(15mL)，进行反相分离，色谱柱:X select C18(19mm x 150mm)；流动相:水(含有0.1％的甲酸)和乙腈；流速:25毫升/分钟；梯度:在30分钟内，乙腈从0％升到100％；检测波长:254nm。减压冻干，得到淡黄色固体的产物1-(3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-溴苯乙基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲醛(400mg,19％)。ESI-MS m/z＝488.8[M+H]+；Calcu.＝488.0。
步骤I：在0℃下，在溶解了1-(3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-溴苯乙基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲醛(400mg,0.82mmol)的四氢呋喃(40mL)中，加入硼氢化钠(77.6mg,2.05mmol)加完后，整个混合物室温下搅拌2小时。随后进行减压浓缩得到黄色粗品产物1-(3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-溴苯乙基)-5-(羟甲基)吡啶-2(1H)-酮。ESI-MS m/z＝490.8[M+H]+；Calcu.＝490.0。
步骤J：在室温下，在溶解了上步粗品1-(3-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-5-溴苯乙基)-5-(羟甲基)吡啶-2(1H)-酮，碳酸铯(2.7g,8.201mmol)的乙腈(60mL)中，加入碘化锂(1.1g,8.201mmol)加完后，整个混合物升温110℃下搅拌16小时,随后进行减压浓缩得到黄色粗品产物。将粗品进行HPLC制备分离，制备条件：WatersXBridge C18(10mm×150mm,5μm)；A:5mM NH3 in water,B:MeCN；5mL/min；0～3min,5％ B；3～15min,5％～50％ B；detector,UV 254nm)。该反应得到化合物C-15，白色固体产物(E)-14-氨基-35-溴-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(300mg,两步收率81％)。1H NMR(DMSO-d6,500MHz)δ8.08(d,J＝2.3Hz,1H),7.98(s,1H),7.71(s,2H),7.51(br s,1H),7.33(dd,J＝9.3,2.4Hz,1H),7.18(s,1H),6.96(s,1H),6.25(d,J＝9.3Hz,1H),5.43(s,2H),5.04(s,2H),4.30(t,J＝5.9Hz,2H),3.20(t,J＝5.7Hz,2H)。ESI-MS m/z＝453.2[M+H]+；Calcu.＝452.1。
实施例14：化合物C-16的合成
步骤A：在室温下，在溶解了(E)-14-氨基-35-溴-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(50mg,0.110mmol)，2-双环己基膦-2',4',6'-三异丙基联苯(10.5mg,0.022mmol)，碳酸钠(36.3mg,0.343mmol)的水(1mL)和二氧六环(4mL)中，加入三(二亚苄基丙酮)二钯(5.1mg,0.006mmol)，加完后整个混合物升温至80℃和氮气保护下搅拌3小时。随后进行减压浓缩得到黄色粗品产物。将粗品进行HPLC制备分离，制备条件：Waters XBridge C18(10mm×150mm,5μm)；A:5mM NH3 inwater,B:MeCN；5mL/min；0～3min,5％ B；3～15min,5％～50％B；detector,UV 254nm)。该反应得到化合物C-16，白色固体产物(E)-14-氨基-35-((二甲基氨基)甲基)-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(3.12mg,7％)。1H NMR(DMSO-d6,500MHz)δppm 8.04(d,J＝2.1Hz,1H),7.95(s,1H),7.65-7.77(m,1H),7.52(s,2H),7.31(dd,J＝9.3,2.4Hz,1H),6.82(s,1H),6.76(s,1H),6.23(d,J＝9.3Hz,1H),5.41(s,2H),5.03(s,2H),4.26-4.31(m,2H),3.15-3.18(m,2H),3.13(s,2H),1.97(s,6H)。ESI-MS m/z＝432.3[M+H]+；Calcu.＝431.2。
实施例15：化合物C-17的合成
步骤A：在室温和氮气保护下，在溶解了(E)-14-氨基-34-溴-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(60mg,0.132mmol)的1,4-二氧六环(10mL)中，加入二甲基氧化膦(31mg,0.397mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(60mg,0.066mmol)、2-双环己基膦-2',4',6'-三异丙基联苯(63mg,0.109mmol)和磷酸钾(28mg,0.396mmol)。加完后，整个混合物升温至100℃和氮气保护下搅拌18小时。将反应液进行减压浓缩得到棕色固体粗品残渣，将残渣进行HPLC制备分离，制备条件:Waters XBridge C18(30mm×250mm,5μm)；A:0.05％ammonia in water,B:MeCN；40mL/min；0～3min,5％ B；3～3.5min,5％～5％ B；3.5～15min,5％～50％ B；15～15.5min,50％～100％ B；detector,UV 254nm。得到化合物C-17，白色固体产物(E)-14-氨基-34-(二甲基磷酰基)-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(15.06mg,25％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.25(d,J＝2.0Hz,1H),7.97(s,1H),7.86(s,1H),7.73(br s,1H),7.42-7.49(m,2H),7.34(dd,J＝9.2,2.5Hz,1H),7.02(d,J＝7.8Hz,1H),6.26(d,J＝9.2Hz,1H),5.49(s,2H),5.05(s,2H),4.42(t,J＝5.3Hz,2H),3.58(t,J＝5.3Hz,2H),1.61(s,3H),1.58(s,3H)。ESI-MS m/z＝451.3[M+H]+；Calcu.＝450.2。
实施例16：化合物C-18/M-1的合成
步骤A：室温下，在溶解了5-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-羧酸(919mg,6.0mmol)的甲醇(30mL)中，加入氯化亚砜(1.7mL,24.0mmol),加完后，整个混合物在室温下搅拌，HPLC监测至原料反应完全，减压浓缩至干，所得残余物用二氯甲烷重复稀释并减压浓缩至干，加入约5mL二氯甲烷,抽滤，滤饼用少量二氯甲烷洗涤，干燥，该反应得到棕色的固体产物5-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-羧酸甲酯(660mg,66％)。ESI-MS m/z＝168.0[M+H]+；Calcu.＝167.1。
步骤B：室温下，在溶解了5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-溴苯乙基-4-甲基苯磺酸盐(805mg,1.5mmol)和5-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-羧酸甲酯(501mg,3.0mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(30mL)中，加入碳酸铯(977mg,3.0mmol)，加完后，整个混合物在室温下搅拌48h，过滤后减压浓缩得到固体残渣，经硅胶柱分离(SiO2,DCM:MeOH＝94:6)，该反应得到淡黄色固体的产物1-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-溴苯乙基)-5-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-羧酸甲酯(340mg,43％)。ESI-MSm/z＝532.8[M+H]+；Calcu.＝532.0。
步骤C：冰浴和氮气保护下，在溶解了1-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-溴苯乙基)-5-甲基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-羧酸甲酯(340mg,0.64mmol)的二氯甲烷(32mL)中，慢慢加入二异丁基氢化铝(3.2mL,3.2mmol)加完后，整个混合物在冰浴下搅拌1小时。加入约5mL甲醇淬灭反应，减压浓缩至干，将残渣进行柱层析分离(SiO2,DCM:MeOH＝93:7)。该反应得到白色的固体产物1-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-溴苯乙基)-5-(羟甲基)-3-甲基吡啶-2(1H)-酮(143mg,44％)。ESI-MS m/z＝486.8[M-OH]+；Calcu.＝504.0。
步骤D：室温下，在溶解了1-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-溴苯乙基)-5-(羟甲基)-3-甲基吡啶-2(1H)-酮(120mg,0.24mmol)的乙腈(30mL)中，加入碳酸铯(780mg,2.4mmol)和碘化锂(324mg,2.4mmol)，加完后，整个混合物升温至110℃下搅拌7小时。过滤后减压浓缩得到固体残渣，经硅胶柱分离(SiO2,EA:MeOH＝90:10)，该反应得到M-1，淡黄色的固体产物(E)-14-氨基-34-溴-63-甲基-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(52mg,47％)。ESI-MS m/z＝467.2[M+H]+；Calcu.＝466.1。
步骤E：在室温和N2保护下，在溶解了(E)-14-氨基-34-溴-63-甲基-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(26mg,0.05mmol)，1-((三氟-4-硼烷基)甲基)吡咯烷钾盐(28.6mg,0.15mmol)，碳酸钠(15.9mg,0.15mmol)和2-双环己基膦-2',4',6'-三异丙基联苯(9.5mg,0.02mmol)的1,4-二氧六环(1.6mL)和水(0.4mL)中，加入三(二亚苄基丙酮)二钯(9.1mg,0.01mmol)，加完后，整个混合物升温至90℃和氮气保护下搅拌5小时。抽滤，用少量甲醇洗涤，减压浓缩至干后将残渣进行HPLC制备分离(制备条件：YMC-Actus Triart C18(21mm×250mm,5μm)；A:0.05％ammoniawater,B:MeCN；18mL/min；0～3min,5％B；3～18min,5％～60％B；detector,UV 254nm)。该反应得到化合物C-18，白色固体产物(E)-14-氨基-63-甲基-34-(吡咯烷-1-基甲基)-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(4mg,15％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.11(d,J＝1.1Hz,1H),7.93(s,1H),7.69(brs,1H),7.62(s,1H),7.69(br s,1H),7.25(s,1H),7.10(d,J＝7.8Hz,1H),6.96(d,J＝7.9Hz,1H),5.40(s,2H),5.05(s,2H),4.34(t,J＝5.0Hz,2H),3.40(s,2H),3.24-3.27(m,2H),2.33(m,4H),1.89(s,3H),1.64(m,4H)。ESI-MS m/z＝472.3[M+H]+；Calcu.＝471.2。
实施例17：化合物C-19的合成
步骤A：在室温和N2保护下，在溶解了(E)-14-氨基-34-溴-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(20mg,0.044mmol)的2-甲基四氢呋喃(0.5mL)中，加入甲磺酰胺(7mg,0.074mmol)、氯化烯丙基钯(II)二聚物(2mg,0.005mmol)、2-二-叔丁膦基-2',4',6'-三异丙基联苯(7mg,0.016mmol)和碳酸钾(12mg,0.087mmol)。加完后，整个混合物升温至80℃和氮气保护下搅拌18小时。将反应液进行减压浓缩得到棕色固体粗品残渣，将残渣进行HPLC制备分离，制备条件:Waters XBridgeC18(19mm×250mm,5μm)；A:0.05％ammonia in water,B:MeCN；18mL/min；0～3min,5％ B；3～3.5min,5％～10％ B；3.5～15min,10％～50％B；15～15.5min,50％～100％ B；detector,UV 254nm。得到化合物C-19，白色固体产物(E)-N-(14-氨基-62-氧基-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯甲酸环辛烷-34-基)甲磺酰胺(2.48mg,8％)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.28(d,J＝2.3Hz,1H),7.94(s,1H),7.75(s,1H),7.72(br s,1H),7.46(br s,1H),7.36(dd,J＝9.4,2.3Hz,1H),7.21(br s,1H),7.12(d,J＝8.4Hz,1H),6.99(d,J＝8.4Hz,1H),6.25(d,J＝9.4Hz,1H),5.41(s,2H),5.07(s,2H),4.34(t,J＝5.3Hz,2H),3.26(t,J＝5.3Hz,2H),2.83(s,3H)。ESI-MS m/z＝468.2[M+H]+；Calcu.＝467.1。
实施例18：化合物C-20的合成
步骤A：在室温下，在溶解了(E)-14-氨基-35-溴-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(50mg,0.11mmol)，2-双环己基膦-2',4',6'-三异丙基联苯(10.5mg,0.022mmol)，碳酸钠(36.3mg,0.343mmol)的水(1mL)和二氧六环(4mL)中，加入三(二亚苄基丙酮)二钯(5.1mg,0.006mmol)，加完后整个混合物升温至80℃和氮气保护下搅拌3小时。随后进行减压浓缩得到黄色粗品产物。将粗品进行HPLC制备分离，制备条件：Waters XBridge C18(10mm×150mm,5μm)；A:5mM NH3 inwater,B:MeCN；5mL/min；0～3min,5％ B；3～15min,5％～50％B；detector,UV 254nm)。该反应得到化合物C-20，白色固体产物(E)-14-氨基-35-(吗啉甲基)-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(2.93mg,6％)。1HNMR(DMSO-d6,500MHz)δppm 7.97(s,1H),7.93(d,J＝2.3Hz,1H),7.71(br s,1H),7.52(s,2H),7.28(dd,J＝9.3,2.4Hz,1H),6.76(s,1H),6.57(s,1H),6.22(d,J＝9.3Hz,1H),5.42(s,2H),4.99(s,2H),4.27(br t,J＝5.8Hz,2H),3.43(br t,J＝4.2Hz,4H),3.12-3.19(m,4H),2.04(br s,4H)。ESI-MS m/z＝474.1[M+H]+；Calcu.＝473.2。
实施例19：化合物C-21的合成
步骤A：室温和氮气保护下，在溶解了(E)-14-氨基-34-溴-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(20mg,0.044mmol)的二氧六环(1mL)中，加入二甲基氧化膦(10mg,0.128mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(4mg,0.004mmol)、2-双环己基膦-2',4',6'-三异丙基联苯(5mg,0.009mmol)和磷酸钾(28mg,0.132mmol)。加完后，整个混合物升温至100℃和氮气保护下搅拌18小时。将反应液进行减压浓缩得到棕色固体粗品残渣，将残渣进行HPLC制备分离，制备条件:Waters XBridge C18(30mm×250mm,5μm)；A:0.05％ammonia in water,B:MeCN；40mL/min；0～3min,5％ B；3～3.5min,5％～10％ B；3.5～12min,10％～60％B；12～15min,60％～100％ B；detector,UV254nm。得到化合物C-21，白色固体产物(E)-14-氨基-35-(二甲基磷酰基)-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(12.53mg,63％)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.13(d,J＝1.6Hz,1H),7.97(s,1H),7.82(s,1H),7.75(br s,1H),7.49(br s,1H),7.32-7.41(m,3H),6.26(d,J＝9.5Hz,1H),5.48(s,2H),5.07(s,2H),4.32(t,J＝5.4Hz,2H),3.26(t,J＝5.4Hz,2H),1.51(s,3H),1.49(s,3H)。ESI-MS m/z＝451.3[M+H]+；Calcu.＝450.2。
实施例20：化合物C-22/C-30的合成
步骤A：室温和氮气保护下，在溶解了(E)-14-氨基-34-溴-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(60mg,0.132mmol)的二氧六环(10mL)中，加入三丁基(1-乙氧基乙烯)锡(143mg,0.396mmol)和1,1'-双二苯基膦二茂铁二氯化钯(97mg,0.132mmol)。加完后，整个混合物升温至85℃和氮气保护下搅拌18小时。将反应液进行减压浓缩得到棕色固体粗品残渣，将残渣进行HPLC制备分离，制备条件:Waters XBridge C18(30mm×250mm,5μm)；A:0.05％ammonia in water,B:MeCN；40mL/min；0～3min,5％ B；3～3.5min,5％～15％ B；3.5～11min,15％～60％ B；11～15min,60％～100％ B；detector,UV 254nm。得到化合物C-30，白色固体产物(E)-14-氨基-34-(1-乙氧基乙烯基)-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(16.47mg,28％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.23(d,J＝2.3Hz,1H),7.95(s,1H),7.73(s,1H),7.71(br s,1H),7.46(br s,1H),7.36(dd,J＝9.2,2.3Hz,1H),7.07(d,J＝7.8Hz,1H),6.96(d,J＝7.8Hz,1H),6.26(d,J＝9.2Hz,1H),5.45(s,2H),5.06(s,2H),4.32(t,J＝5.0Hz,2H),4.28(d,J＝1.8Hz,1H),3.99(d,J＝1.8Hz,1H),3.78(q,J＝6.8Hz,2H),3.22(t,J＝5.0Hz,2H),1.25(t,J＝6.8Hz,3H)。ESI-MS m/z＝445.3[M+H]+；Calcu.＝444.2。
步骤B：室温下，在溶解了(E)-14-氨基-34-(1-乙氧基乙烯基)-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(14.81mg,0.033mmol)的乙腈(含1％甲酸，30mL)中，整个混合物在室温下搅拌0.5小时。将反应液进行减压浓缩得到白色固体粗品残渣，将残渣进行HPLC制备分离，制备条件:YMC-Actus TriartC18(21mm×250mm,5μm)；A:0.05％ammonia in water,B:MeCN；18mL/min；0～3min,10％ B；3～3.5min,10％～20％ B；3.5～15min,20％～80％ B；15～15.5min,80％～100％ B；detector,UV 254nm。得到化合物C-22，白色固体产物(E)-34-乙酰基-14-氨基-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(0.44mg,3％)。ESI-MS m/z＝417.2[M+H]+；Calcu.＝416.2。
实施例21：化合物C-23/M-2的合成
步骤A：室温和氮气保护下，在溶解了(E)-14-氨基-34-溴-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(20mg,0.044mmol)的1,4-二氧六环(5mL)中，加入三丁基(1-乙氧基乙烯)锡(48mg,0.132mmol)和1,1'-双二苯基膦二茂铁二氯化钯(32mg,0.044mmol)。加完后，整个混合物升温至85℃和氮气保护下搅拌18小时。将反应液进行减压浓缩得到棕色固体粗品残渣，将残渣进行HPLC制备分离，制备条件:Waters XBridge C18(30mm×250mm,5μm)；A:0.05％ammonia in water,B:MeCN；40mL/min；0～3min,5％ B；3～3.5min,5％～15％ B；3.5～11min,15％～60％ B；11～15min,60％～100％ B；detector,UV 254nm。得到M-2，白色固体产物(E)-14-氨基-35-(1-乙氧基乙烯基)-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(2.45mg,12％)。ESI-MS m/z＝445.3[M+H]+；Calcu.＝444.2。
步骤B：室温下，在溶解了(E)-14-氨基-35-(1-乙氧基乙烯基)-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(2.45mg,0.006mmol)的乙腈(含1％甲酸，10mL)中，整个混合物在室温下搅拌1小时。将反应液进行减压浓缩得到白色固体粗品残渣，将残渣进行HPLC制备分离，制备条件:Waters XBridge C18(30mm×250mm,5μm)；A:0.05％ammonia in water,B:MeCN；40mL/min；0～3min,5％ B；3～3.5min,5％～15％ B；3.5～11min,15％～60％ B；11～15min,60％～100％ B；detector,UV 254nm。得到化合物C-23，白色固体产物(E)-35-乙酰基-14-氨基-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(0.36mg,16％)。ESI-MS m/z＝417.2[M+H]+；Calcu.＝416.2。
实施例22：化合物C-24的合成
步骤A:在室温下，向Schlenk反应管中依次加入(E)-14-氨基-34-溴-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(27mg,0.060mmol)，氰化锌(5.6mg,0.048mmol)，甲磺酸(2-二叔丁基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(24mg,0.030mmol)，加完后，反应体系置换氮气三次。然后加入四氢呋喃(1.3mL)和H2O(1.3mL)，并除氧(degas)操作3次，除去氧气。之后，在氮气氛围下，整个混合物升温至90℃搅拌3小时。后处理：加入甲醇(20mL)超声溶解，通过带有硅胶的砂芯漏斗过滤后减压浓缩。分离纯化：通过制备HPLC分离。色谱条件：YMC-Actus Triart C18(21mm×250mm,5μm),A:0.05％氨水,B:ACN；18mL/min；0～3.0min,10％B；3.0～3.5min,10％～30％ B；3.5～15min,30％～80％ B；15～15.5min,80％～100％B；detector,UV 254nm)，冻干后得到化合物C-24，白色固体(E)-14-氨基-62-氧基-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并氮杂环辛烷-34-腈(0.43mg,1％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.20(d,J＝2.0Hz,1H),8.01-8.03(m,1H),7.99(s,1H),7.75(br s,1H),7.57(d,J＝8.0Hz,1H),7.47(br s,1H),7.34(dd,J＝9.0,2.0Hz,1H),6.98(dd,J＝8.0,1.0Hz,1H),6.26(d,J＝9.0Hz,1H),5.53(s,2H),5.03(s,2H),4.43(t,J＝6.0Hz,2H),3.47(t,J＝6.0Hz,2H)。ESI-MS m/z＝400.2[M+H]+；Calcu.＝399.1。
实施例23：化合物C-25的合成
步骤A：在室温下，向Schlenk反应管中依次加入(E)-14-氨基-35-溴-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(10mg,0.022mmol)，氰化锌(2.0mg,0.017mmol)，甲磺酸(2-二叔丁基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(8.0mg,0.010mmol)，加完后，反应体系置换氮气三次。然后加入四氢呋喃(0.5mL)和H2O(0.5mL)，之后除气(degas)操作3次，除去氧气。之后，在氮气氛围下，整个混合物升温至90℃搅拌3小时。后处理：加入甲醇(20mL)超声溶解，通过带有硅胶的砂芯漏斗过滤后减压浓缩。分离纯化：通过制备HPLC分离。色谱条件：Waters XBridge C18(19mm×250mm,5μm),A:0.05％氨水,B:ACN；18mL/min；0～3.5min,5％B；3.5～12min,5％～50％ B；12～15min,50％～80％ B detector,UV 254nm)，冻干后，得到化合物C-25，白色固体产物(E)-14-氨基-62-氧基-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并氮杂环辛烷-35-腈(0.96mg,收率10％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.07(d,J＝2.5Hz,1H),8.04(s,1H),8.00(s,1H),7.76(br s,1H),7.53(br s,1H),7.47(s,1H),7.32(dd,J＝9.5,2.5Hz,1H),7.17(s,1H),6.25(d,J＝9.5Hz,1H),5.50(s,2H),5.04(s,2H),4.32(t,J＝5.5Hz,2H),3.25-3.27(m,2H)。ESI-MS m/z＝400.0[M+H]+；Calcu.＝399.1。
实施例24：化合物C-26的合成
步骤A：在室温下，向Schlenk反应管中一次加入(E)-14-氨基-34-溴-61,66-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,3)-哒嗪-3(1,3)苯并环辛烷-66-酮(45mg,0.099mmol)，氰化锌(18mg,0.153mmol)，甲磺酸(2-二叔丁基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(40mg,0.050mmol)。加完后，反应体系置换氮气三次。然后，加入四氢呋喃(2.0mL)和水(2.0mL)，然后除气操作3次，除去氧气。之后，在氮气氛围下，整个混合物升温至90℃搅拌5小时。加入甲醇(20mL)超声溶解，通过带有硅胶的砂芯漏斗过滤后减压浓缩。分离纯化：通过制备HPLC分离。色谱条件：Waters XBridge C18(19mm×250mm,5μm),A:0.05％氨水,B:ACN；18mL/min；0～3.0min,10％ B；3.0～17min,10％～80％ B；17～18min,80％～100％ B detector,UV 254nm)。冻干后，得到化合物C-26，白色固体产物(E)-14-氨基-66-氧基-61,66-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑[3,4-d]嘧啶-6(1,3)-哒嗪-3(1,3)苯环辛酰胺-34-腈(8.85mg,21％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm7.94(s,1H),7.89(s,1H),7.84(br s,1H),7.68(d,J＝7.5Hz,1H),7.61(br s,1H),7.26-7.32(m,2H),6.81(d,J＝10.0Hz,1H),5.36(s,2H),5.32(s,2H),4.58-4.61(m,2H),3.49-3.52(m,2H)。ESI-MS m/z＝401.0[M+H]+；Calcu.＝400.1。
实施例25：化合物C-27的合成
步骤A：室温和氮气保护下，在溶解了(E)-14-氨基-34-溴-61,66-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,3)-哒嗪-3(1,3)-苯并环辛烷-66-酮(50mg,0.11mmol)的二氧六环(10mL)中，加入二甲基氧化膦(26mg,0.333mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(50mg,0.055mmol)、2-双环己基膦-2',4',6'-三异丙基联苯(64mg,0.111mmol)和磷酸钾(70mg,0.33mmol)。加完后，整个混合物升温至100℃和氮气保护下搅拌18小时。将反应液进行减压浓缩得到棕色固体粗品残渣，将残渣进行HPLC制备分离，制备条件:Welch C18(30mm×250mm,5μm)；A:0.05％ammonia in water,B:MeCN；40mL/min；0～3min,5％ B；3～3.5min,5％～10％ B；3.5～15min,10％～50％ B；15～15.5min,50％～100％ B；detector,UV254nm。得到化合物C-27，白色固体产物(E)-14-氨基-34-(二甲基磷酰基)-61,66-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,3)-哒嗪-3(1,3)-苯并环辛烷-66-酮(18.92mg,38％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 7.93(s,1H),7.85(br s,1H),7.69(d,J＝1.7Hz,1H),7.61(br s,1H),7.52(dd,J＝13.2,8.1Hz,1H),7.27(d,J＝8.1Hz,1H),7.25(d,J＝9.8Hz,1H),6.77(d,J＝9.8Hz,1H),5.33(s,2H),5.28(s,2H),4.59(t,J＝5.6Hz,2H),3.69(t,J＝5.6Hz,2H),1.67(s,3H),1.64(s,3H)。ESI-MS m/z＝452.2[M+H]+；Calcu.＝451.2。
实施例26：化合物C-28/C-29的合成
步骤A：室温和氮气保护下，在溶解了(E)-14-氨基-34-溴-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(20mg,0.044mmol)的二甲亚砜(1mL)中，加入碘化亚铜(17mg,0.089mmol)和三乙烯二胺(20mg,0.178mmol)。加完后，整个混合物升温至145℃和氮气保护下搅拌18小时。将反应液进行减压浓缩得到棕色液体粗品残渣，将残渣进行HPLC制备分离，制备条件:Waters XBridge C18(19mm×250mm,5μm)；A:0.05％ammonia in water,B:MeCN；18mL/min；0～3min,5％B；3～13min,5％～40％B；13～20min,40％～80％ B；20～21min,80％～100％ B；detector,UV 254nm。得到C-29，白色固体产物(E)-14-氨基-35-(甲基亚磺酰基)-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(0.39mg,2％)，ESI-MS m/z＝437.2[M+H]+；Calcu.＝436.1。以及C-28，白色化合物(E)-14-氨基-35-(甲基磺酰基)-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(0.28mg,0.001mmol,1％)，ESI-MS m/z＝453.3[M+H]+；Calcu.＝452.1。
实施例27：化合物C-31/C-33的合成
步骤A：室温和氮气保护下，在溶解了(E)-14-氨基-34-溴-61,66-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,3)-哒嗪-3(1,3)-苯并环辛烷-66-酮(100mg,0.220mmol)的1,4-二氧六环(20mL)中，加入三丁基(1-乙氧基乙烯)锡(238mg,0.659mmol)和1,1'-双二苯基膦二茂铁二氯化钯(161mg,0.220mmol)。加完后，整个混合物升温至85℃和氮气保护下搅拌18小时。将反应液进行减压浓缩得到棕色固体粗品残渣，将残渣进行HPLC制备分离，制备条件:Welch C18(30mm×250mm,5μm)；A:0.05％ammonia in water,B:MeCN；40mL/min；0～3min,10％ B；3～3.5min,10％～20％ B；3.5～15min,20％～85％ B；15～15.5min,85％～100％ B；detector,UV 254nm。得到化合物C-31，白色固体产物(E)-14-氨基-34-(1-乙氧基乙烯基)-61,66-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑[3,4-d]嘧啶-6(1,3)-哒嗪-3(1,3)-苯并环辛烷-66-酮(26.83mg,27％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 7.91(s,1H),7.81(br s,1H),7.77(s,1H),7.56(br s,1H),7.35(d,J＝9.5Hz,1H),7.19(dd,J＝7.8,1.4Hz,1H),7.13(d,J＝7.8Hz,1H),6.81(d,J＝9.5Hz,1H),5.36(s,2H),5.28(s,2H),4.49(t,J＝5.4Hz,2H),4.33(d,J＝1.9Hz,1H),4.04(d,J＝1.9Hz,1H),3.82(q,J＝7.1Hz,2H),3.32(t,J＝5.4Hz,2H),1.27(t,J＝7.1Hz,3H)。ESI-MS m/z＝446.3[M+H]+；Calcu.＝445.2。
步骤B：室温下，在溶解了(E)-14-氨基-34-(1-乙氧基乙烯基)-61,66-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑[3,4-d]嘧啶-6(1,3)-哒嗪-3(1,3)-苯并环辛烷-66-酮(25mg,0.056mmol)的乙腈(含1％甲酸，20mL)中，整个混合物在室温下搅拌3小时。将反应液进行减压浓缩得到白色固体粗品残渣，将残渣进行HPLC制备分离，制备条件:YMC-Actus TriartC18(21mm×250mm,5μm)；A:0.1％formic acid in water,B:MeCN；18mL/min；0～3min,10％B；3～3.5min,10％～15％ B；3.5～15min,15％～75％ B；15～15.5min,75％～100％ B；detector,UV 254nm。得到化合物C-33，白色固体产物(E)-34-乙酰基-14-氨基-61,66-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,3)-哒嗪-3(1,3)-苯并环辛烷-66-酮(9.21mg,39％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 7.94(s,1H),7.85(br s,1H),7.69(d,J＝7.9Hz,1H),7.61(s,1H),7.60(br s,1H),7.21(d,J＝7.9Hz,1H),7.13(d,J＝9.6Hz,1H),6.68(d,J＝9.6Hz,1H),5.31(s,2H),5.28(s,2H),4.41(t,J＝6.1Hz,2H),3.50(t,J＝6.1Hz,2H),2.48(s,3H)。ESI-MS m/z＝418.2[M+H]+；Calcu.＝417.2。
实施例28：化合物C-32的合成
步骤A：在室温下，向Schlenk反应管中依次加入(E)-14-氨基-34-溴-61,66-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,3)-哒嗪-3(1,3)-苯并环辛烷-66-酮(36mg,0.079mmol)，环丙基硼酸(70mg,0.815mmol)，甲磺酸(2-二叔丁基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(67mg,0.084mmol)，碳酸钾(77mg,0.557mmol)，加完后，反应体系置换氮气三次。然后加入1,4-二氧六环(24mL)和H2O(6mL)，除氧(degas)操作3次，除去氧气。之后，在氮气氛围下，整个混合物升温至90℃搅拌24小时。之后，加入甲醇超声溶解，过滤后减压浓缩。之后，所得混合物通过制备HPLC分离。色谱条件：Welch C18 OBD(30mm×250mm,5μm),A:0.1％ FA,B:ACN；40mL/min；0～3.0min,10％ B；3.0～15min,10％～70％B；15～15.5min,70％～100％ B detector,UV 254nm)，冻干后，得到化合物C-32，白色固体产物(E)-14-氨基-34-环丙基-61,66-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,3)-哒嗪-3(1,3)-苯并环辛烷-66-酮(4.02mg,4％)。
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 7.89(s,1H),7.79(br s,1H),7.71(s,1H),7.56(brs,1H),7.31(d,J＝10.0Hz,1H),7.12(d,J＝8.5Hz,1H),6.88(d,J＝8.5Hz,1H),6.80(d,J＝10.0Hz,1H),5.37(s,2H),5.22(s,2H),4.59(t,J＝6.0Hz,2H),3.44(t,J＝6.0Hz,2H),2.00-2.02(m,1H),0.86-0.88(m,2H),0.49-0.52(m,2H)。ESI-MS m/z＝416.0[M+H]+；Calcu.＝415.2。
实施例29：化合物C-34/C-35/C-36的合成
步骤A：室温和氮气保护下，在溶解了(E)-14-氨基-34-溴-61,66-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,3)-哒嗪-3(1,3)-苯并环辛烷-66-酮(20mg,0.044mmol)的二甲亚砜(1mL)中，加入碘化亚铜(17mg,0.089mmol)和三乙烯二胺(20mg,0.178mmol)。加完后，整个混合物升温至145℃和氮气保护下搅拌18小时。将反应液进行减压浓缩得到棕色液体粗品残渣，将残渣进行HPLC制备分离，制备条件:Waters XBridge C18(19mm×250mm,5μm)；A:0.05％ammonia in water,B:MeCN；18mL/min；0～3min,30％B；3～15min,30％～70％ B；15～16min,70％～100％ B；detector,UV 254nm。得到化合物C-34，白色固体产物(E)-14-氨基-34-(甲硫基)-61,66-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑[3,4-d]嘧啶-6(1,3)-哒嗪-3(1,3)-苯并环辛烷-66-酮(2.30mg,12.40％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 7.90(s,1H),7.80(br s,1H),7.77(s,1H),7.56(br s,1H),7.35(d,J＝9.7Hz,1H),7.27(d,J＝8.2Hz,1H),7.15(d,J＝8.2Hz,1H),6.82(d,J＝9.7Hz,1H),5.37(s,2H),5.25(s,2H),4.57(t,J＝5.4Hz,2H),3.23(t,J＝5.4Hz,2H),2.40(s,3H)。ESI-MS m/z＝422.0[M+H]+；Calcu.＝421.1。
步骤B：室温下，在溶解了(E)-14-氨基-34-(甲硫基)-61,66-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑[3,4-d]嘧啶-6(1,3)-哒嗪-3(1,3)-苯并环辛烷-66-酮(40mg,0.095mmol)的二氯甲烷(4mL)中，加入间氯过氧苯甲酸(100mg,85％纯度,0.491mmol)。加完后，整个混合物在室温下搅拌过夜。将反应液进行减压浓缩得到白色固体粗品残渣，将残渣进行HPLC制备分离，制备条件:Welch C18(30mm×250mm,5μm)；A:0.1％formic acid in water,B:MeCN；40mL/min；0～3min,10％ B；3～3.5min,10％～15％ B；3.5～15min,15％～60％ B；15～15.5min,60％～100％ B；detector,UV 254nm。得到化合物C-35，白色固体产物(E)-14-氨基-34-(甲基亚磺酰基)-61,66-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑[3,4-d]嘧啶-6(1,3)-哒嗪-3(1,3)-苯并环辛烷-66-酮(6.36mg,16％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 7.94(s,1H),7.83(br s,1H),7.76(s,1H),7.73(d,J＝8.0Hz,1H),7.59(br s,1H),7.42(dd,J＝8.0,1.4Hz,1H),7.29(d,J＝9.8Hz,1H),6.78(d,J＝9.8Hz,1H),5.27-5.38(m,4H),4.57(t,J＝6.4Hz,2H),3.32(t,J＝6.4Hz,2H),2.62(s,3H)。ESI-MS m/z＝438.0[M+H]+；Calcu.＝437.1。以及化合物C-36，白色固体化合物(E)-14-氨基-34-(甲基磺酰基)-61,66-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑[3,4-d]嘧啶-6(1,3)-哒嗪-3(1,3)-苯并环辛烷-66-酮(1.63mg,4％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 7.95(s,1H),7.80-7.87(m,3H),7.60(br s,1H),7.44(dd,J＝8.1,1.4Hz,1H),7.32(d,J＝9.6Hz,1H),6.81(d,J＝9.6Hz,1H),5.37(s,2H),5.31(s,2H),4.63(t,J＝5.6Hz,2H),3.71(t,J＝5.6Hz,2H),3.16(s,3H)。ESI-MS m/z＝454.0[M+H]+；Calcu.＝453.1。
实施例30：化合物C-37的合成
步骤A：在0℃下，在溶解了3-溴-4-(三氟甲基)苯甲酸甲酯(20g,70.66mmol)的四氢呋喃(150mL)中，加入氢化铝锂(2.68g,70.66mmol)加完后，整个混合物室温下搅拌3小时。将反应液控温在0℃，然后缓慢加入淬灭试剂甲醇，直至反应液不出现明显气泡，淬灭时控温不超过10℃，然后经过硅藻土过滤，过滤后减压浓缩得到粗品产物。将粗品进行硅胶柱分离(SiO2,PE:EA＝83:17)。该反应得到无色油状产物(3-溴-4-(三氟甲基)苯基)甲醇(13.89g,77％)。
步骤B：在0℃下，在溶解了(3-溴-4-(三氟甲基)苯基)甲醇(13.89g,54.46mmol)，三苯基膦(28.57g,108.9mmol)的二氯甲烷(200mL)中，加入N-溴代丁二酰亚胺(19.39g,108.9mmol)加完后，整个混合物室温下搅拌2小时。将反应液经过硅藻土过滤，过滤后减压浓缩得到粗品产物。将粗品进行硅胶柱分离(SiO2,PE:EA＝95:5)。该反应得到无色油状产物2-溴-4-(溴甲基)-1-(三氟甲基)苯(13.5g,78％)。
步骤C：在室温下，在溶解了2-溴-4-(溴甲基)-1-(三氟甲基)苯(13.5g,42.46mmol)，6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(7.20g,42.46mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(300mL)中，加入碳酸铯(20.75g,63.69mmol),加完后整个混合物室温下搅拌过夜。将反应液经过硅藻土过滤，过滤后减压浓缩得到粗品产物。将粗品进行硅胶柱分离(SiO2,DCM:MeOH＝95:5)。该反应得到棕色油状产物1-(3-溴-4-(三氟甲基)苄基)-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(11.35g,66％)。ESI-MS m/z＝407.8[M+H]+；Calcu.＝407.0。
步骤D：在室温和氮气保护下，在溶解了1-(3-溴-4-(三氟甲基)苄基)-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(11.35g,27.92mmol)，碳酸钾(11.57g,83.74mmol)，(E)-2-(2-乙氧基乙烯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(1.07g,5.411mmol)的H2O(100mL)和二氧六环(400mL)中，加入二氯(1,1'-二(二苯基膦)二茂铁)钯(1.02g,1.396mmol)加完后，整个混合物升温至80℃和氮气保护下搅拌过夜。将反应液进行减压浓缩得到粗品产物。将粗品进行硅胶柱分离(SiO2,PE:EA＝50:50)。该反应得到黄色固体产物(E)-6-氯-1-(3-(2-乙氧基乙烯基)-4-(三氟甲基)苄基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-4-胺(6.6g,59％)。ESI-MS m/z＝397.9[M+H]+；Calcu.＝397.1。
步骤E：在0℃下，在溶解了(E)-6-氯-1-(3-(2-乙氧基乙烯基)-4-(三氟甲基)苄基)-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-4-胺(6.6g,16.59mmol)的水(132mL)和丙酮(132mL)中，加入48％氢溴酸(132mL)加完后，整个混合物室温下搅拌过夜。将反应液控温在0℃，然后缓慢加入淬灭试剂氢氧化钠溶液，直至中性，淬灭时控温不超过10℃，用乙酸乙酯萃取三次(50mL*3)，合并有机相，用饱和食盐水洗一次(50mL)，无水硫酸钠干燥，过滤后减压浓缩得到粗品产物。该反应得到无色油状粗品2-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-(三氟甲基)苯基)乙醛(5.4g,粗品)。ESI-MS m/z＝369.9[M+H]+；Calcu.＝369.1。
步骤F：在0℃下，在溶解了粗品2-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-(三氟甲基)苯基)乙醛(5.4g,14.60mmol)的四氢呋喃(300mL)中，加入硼氢化钠(1.38g,36.51mmol)加完后，整个混合物室温下搅拌2小时。将反应液控温在0℃，然后缓慢加入淬灭试剂甲醇，直至反应液不出现明显气泡，淬灭时控温不超过10℃，然后经过硅藻土过滤，过滤后减压浓缩得到粗品产物。将粗品进行硅胶柱分离(SiO2,DCM:MeOH＝90:10)。该反应得到白色固体产物2-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-(三氟甲基)苯基)乙烷-1-醇(1.7g,两步收率27％)。ESI-MS m/z＝371.9[M+H]+；Calcu.＝371.1。
步骤G：在0℃下，在溶解了2-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-(三氟甲基)苯基)乙烷-1-醇(630mg,1.695mmol)，三乙胺(1.41mL,10.17mmol)，4-二甲氨基吡啶(20.71mg,0.170mmol)的二氯甲烷(20mL)中，加入对甲苯磺酰氯(1.29g,6.78mmol)加完后，整个混合物室温下搅拌3小时。将反应液进行减压浓缩得到棕色粗品产物，将粗品产物进行硅胶柱分离(SiO2,DCM:MeOH＝95:5)该反应得到淡黄色固体产物5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-(三氟甲基)苯乙基-4-甲基苯磺酸酯(700mg,79％)。ESI-MS m/z＝525.9[M+H]+；Calcu.＝525.1。
步骤H：在室温下，在溶解了5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-(三氟甲基)苯乙基-4-甲基苯磺酸酯(400mg,0.761mmol)，6-氧代-1,6-二氢哒嗪-3-羧酸甲酯(117mg,0.761mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(40mL)中，加入碳酸铯(372mg,1.141mmol)加完后，整个混合物室温下搅拌过夜。将反应液进行减压浓缩得到黄色粗品产物，加水析出固体，抽滤，冻干得粗品产物1-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-(三氟甲基)苯乙基)-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-3-羧酸甲酯(309mg，粗品)。ESI-MS m/z＝507.9[M+H]+；Calcu.＝507.1。
步骤I：在0℃下，在溶解了上步粗品1-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-(三氟甲基)苯乙基)-6-氧代-1,6-二氢哒嗪-3-羧酸甲酯(309mg,0.608mmol)，氯化钙(135mg,1.216mmol)的四氢呋喃(2mL)和乙醇(18mL)中，加入硼氢化钠(230mg,6.08mmol)加完后，整个混合物室温下搅拌3小时。将反应液控温在0℃，然后缓慢加入淬灭试剂甲醇，直至反应液不出现明显气泡，淬灭时控温不超过10℃，然后经过硅藻土过滤，过滤后减压浓缩得到粗品产物。加水析出固体，抽滤，冻干得粗品产物2-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-(三氟甲基)苯乙基)-6-(羟甲基)哒嗪-3(2H)-酮(294mg，粗品)。ESI-MS m/z＝479.9[M+H]+；Calcu.＝479.1。
步骤J：在室温下，在溶解了2-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-(三氟甲基)苯乙基)-6-(羟甲基)哒嗪-3(2H)-酮(294mg,0.613mmol)，碘化锂(820mg,6.13mmol)的乙腈(30mL)中，加入碳酸铯(2.0g,6.13mmol)加完后，整个混合物升温至110℃下搅拌8小时。随后进行减压浓缩得到黄色粗品产物。将粗品进行HPLC制备分离，制备条件：Waters XBridge C18(10mm×150mm,5μm)；A:5mM HCOOH in water,B:MeCN；5mL/min；0～3min,5％ B；3～15min,5％～50％ B；detector,UV 254nm)。该反应得到化合物C-37，白色固体产物(E)-14-氨基-34-(三氟甲基)-61,66-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑[3,4-d]嘧啶-6(1,3)-哒嗪-3-苯并环辛烷-66-酮(18.60mg,三步收率6％)。1H NMR(DMSO-d6,500MHz)δppm 7.95(s,1H),7.92(s,1H),7.84(br s,1H),7.61(d,J＝8.1Hz,2H),7.39(d,J＝8.2Hz,1H),7.36(d,J＝9.6Hz,1H),6.83(d,J＝9.6Hz,1H),5.37(s,2H),5.32(s,2H),4.56-4.62(m,2H),3.46-3.50(m,2H)。ESI-MS m/z＝444.0[M+H]+；Calcu.＝443.1。
实施例31：化合物C-38的合成
步骤A：在室温下，在溶解了5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-(三氟甲基)苯乙基-4-甲基苯磺酸酯(300mg,0.57mmol)，6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲醛(70.2mg,0.570mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(30mL)中，加入碳酸铯(279mg,0.856mmol)加完后，整个混合物室温下搅拌过夜。随后进行减压浓缩得到黄色粗品产物，1-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-(三氟甲基)苯乙基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲醛(900mg，粗品)。ESI-MS m/z＝476.9[M+H]+；Calcu.＝476.1。
步骤B：在0℃下，在溶解了上步粗品1-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-(三氟甲基)苯乙基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-甲醛的四氢呋喃(30mL)中，加入硼氢化钠(182mg,4.82mmol)加完后，整个混合物室温下搅拌3小时。将反应液控温在0℃，然后缓慢加入甲醇，直至反应液不出现明显气泡，淬灭时控温不超过10℃，然后经过硅藻土过滤，过滤后减压浓缩得到固体残渣。将残渣溶于N,N-二甲基甲酰胺，进行反相分离，色谱柱:X select C18(19mm x 150mm)；流动相:水(含有0.1％的HCOOH)和乙腈；流速:100毫升/分钟；梯度:在30分钟内，乙腈从0％升到50％；检测波长:254nm。减压冻干，得到淡黄色的产物1-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-(三氟甲基)苯乙基)-5-(羟甲基)吡啶-2(1H)-酮(93mg,0.194mmol，两步收率34％)。ESI-MS m/z＝479.0[M+H]+；Calcu.＝478.1。
步骤C：在室温下，在溶解了1-(5-((4-氨基-6-氯-1H-吡唑[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-(三氟甲基)苯乙基)-5-(羟甲基)吡啶-2(1H)-酮(93mg,0.194mmol)，碘化锂(260mg,1.94mmol)的乙腈(20mL)中，加入碳酸铯(633mg,1.94mmol)加完后，整个混合物升温至或降温至110℃下搅拌8小时。随后进行抽滤，减压浓缩得到黄色粗品产物。将粗品进行HPLC制备分离，制备条件：Waters XBridge C18(10mm×150mm,5μm)；A:5mM NH3in water,B:MeCN；5mL/min；0～3min,5％ B；3～15min,5％～50％ B；detector,UV 254nm)。该反应得到化合物C-38，白色固体产物(E)-14-氨基-34-(三氟甲基)-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(17.80mg,21％)。1H NMR(DMSO-d6,500MHz)δppm8.30(d,J＝2.3Hz,1H),8.04(s,1H),7.99(s,1H),7.75(br s,1H),7.51(d,J＝8.2Hz,2H),7.36(dd,J＝2.3,9.3Hz,1H),7.08(d,J＝8.1Hz,1H),6.27(d,J＝9.3Hz,1H),5.56(s,2H),5.04(s,2H),4.44(t,J＝5.4Hz,2H),3.40-3.45(m,2H)。ESI-MS m/z＝443.2[M+H]+；Calcu.＝442.1。
实施例32：化合物C-39的合成
步骤A：在室温下，向Schlenk反应管中依次加入(E)-14-氨基-34-溴-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)苯并环辛烷-62-酮(19mg,0.042mmol)，环丙基硼酸(24mg,0.279mmol),三(二亚苄基丙酮)二钯(14mg,0.015mmol)，2-双环己基膦-2',4',6'-三异丙基联苯(30mg,0.063mmol)，碳酸钾(34mg,0.246mmol)。之后，加入1,4-二氧六环(4.0mL)和水(1.0mL)。搅拌均匀后，除气(degas)操作三次，除掉溶剂中的氧气。然后，在氮气保护下，反应混合物在90℃下加热搅拌24小时。之后，经带少量硅胶的砂芯漏斗过滤，用甲醇(20mL)洗涤固体，将所得液体减压浓缩得粗品，将所得固体通过制备色谱分离纯化。色谱条件如下：Welch C18 OBD(30mm×250mm,5μm),A:0.05％ Am,B:ACN；40mL/min；0～3.0min,5％ B；3.0～3.5min,5％～15％ B；3.5～15min,15％～75％；15～17min,75％～100％ B；detector,UV 254nm)。冻干后，得到化合物C-39，白色固体产物(E)-14-氨基-34-环丙基-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(0.26mg,1％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.29(d,J＝2.5Hz,1H),7.92(s,1H),7.62-7.70(m,2H),7.44(br s,1H),7.35(dd,J＝9.0,2.5Hz,1H),6.91-6.93(m,1H),6.82(d,J＝7.5Hz,1H),6.26(d,J＝9.0Hz,1H),5.38(s,2H),5.08(s,2H),4.39-4.43(m,2H),3.37-3.40(m,2H),1.73-1.79(m,1H),0.80-0.85(m,2H),0.40-0.47(m,2H)。ESI-MS m/z＝415.3[M+H]+；Calcu.＝414.2。
实施例33：化合物C-40的合成
步骤A：在室温和氮气保护下，在溶解了(E)-14-氨基-34-溴-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(100mg,0.221mmol)的二甲亚砜(5mL)中，加入碘化亚铜(84mg,0.442mmol)和三乙烯二胺(99mg,0.884mmol)。加完后，整个混合物升温至145℃和氮气保护下搅拌18小时。将反应液进行减压浓缩得到棕色液体粗品残渣，将残渣进行HPLC制备分离，制备条件:Waters XBridge C18(19mm×250mm,5μm)；A:0.05％ammonia in water,B:MeCN；18mL/min；0～3min,5％B；3～3.5min,5％～15％ B；3.5～13min,15％～15％ B；13～13.5min,15％～100％ B；detector,UV 254nm。得到化合物C-40，白色固体产物(E)-14-氨基-34-(甲基亚磺酰基)-61,62-二氢-11H-8-氧杂-1(1,6)-吡唑[3,4-d]嘧啶-6(1,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-62-酮(1.62mg,2％)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 8.18(s,1H),7.80(s,1H),7.69(d,J＝9.5Hz,1H),7.23(d,J＝8.2Hz,1H),7.20(br s,1H),7.10(d,J＝8.2Hz,1H),7.02(s,1H),6.66(brs,1H),6.44(d,J＝9.5Hz,1H),5.30-5.35(m,1H),5.05-5.15(m,3H),4.16(t,J＝7.3Hz,2H),3.03(t,J＝7.3Hz,2H),2.64(s,3H)。ESI-MS m/z＝437.2[M+H]+；Calcu.＝436.1。
实施例34：化合物C-41的合成
步骤A：在(5-氨基-3-吡啶基)甲醇(15g,120.8mmol)的二氯甲烷(300mL)溶液中，加入咪唑(16.45g,241.7mmol)和叔丁基二甲基氯硅烷(20.03g,132.9mmol,16.4mL)。在25℃搅拌12小时。用水稀释(200mL)，二氯甲烷(200mL*3)提取，有机层在硫酸镁上干燥，过滤浓缩。得到化合物5-((叔丁基(二甲基)甲硅烷基)氧甲基)吡啶-3-胺(27.7g,96％)，为白色固体。1H NMR:(400MHz,DMSO-d6)δ7.82(d,J＝2.3Hz,1H),7.67(s,1H),6.85(s,1H),5.35(brs,2H),4.59(s,2H),0.89(s,9H),0.10-0.01(m,6H)。
步骤B：向5-((叔丁基(二甲基)甲硅烷基)氧甲基)吡啶-3-胺(27.7g,116.2mmol)的乙醇溶液(500mL)中加入二碳酸二叔丁酯(25.36g,116.2mmol,26.7mL)。在25℃下搅拌12小时。用水稀释(150mL)，用乙酸乙酯(300mL*3)提取，有机层在硫酸镁上干燥，过滤浓缩。用快速硅胶色谱法(330g硅胶柱纯化，洗脱液:0～15％乙酸乙酯/石油醚梯度@100mL/min)，得到白色固体化合物N-(5-((叔丁基(二甲基)甲硅烷基)氧甲基)-3-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(14.3g,36％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.59(s,1H),8.51(d,J＝2.3Hz,1H),8.11(d,J＝1.8Hz,1H),7.85(br s,1H),4.70(s,2H),1.48(s,9H),0.90(s,9H),0.08(s,6H)。
步骤C：在4-溴-3-甲酰基苯甲酸甲酯(10g,41.14mmol)的甲醇溶液(100mL)中，分批加入硼氢化钠(3.11g,82.29mmol,2eq)。在25℃下搅拌2小时。混合物用水(50mL)在0℃稀释，用乙酸乙酯(50mL*3)提取，用硫酸镁干燥。在减压下过滤和浓缩，得到化合物4-溴-3-(羟甲基)苯甲酸甲酯(9.76g,39.83mmol，收率97％),为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.12(d,J＝1.1Hz,1H),7.80-7.60(m,2H),5.63(t,J＝5.6Hz,1H),4.54(d,J＝5.6Hz,2H),3.86(s,3H)。
步骤D：在0℃下，将甲磺酰氯(11.47g,100.1mmol,7.75mL)加入到4-溴-3-(羟甲基)苯甲酸甲酯(9.76g,39.83mmol)和三乙胺(11.47g,113.4mmol,15.8mL)的二氯甲烷(100mL)溶液中。将混合物在0℃搅拌2小时。反应混合物用水(100mL)在0℃淬灭，二氯甲烷(100mL*3)提取。在硫酸镁上干燥，在减压下过滤和浓缩,得到白色固体化合物4-溴-3-(甲基磺酰氧基甲基)苯甲酸甲酯(11.25g，粗品)。
步骤E：N,N-二甲基甲酰胺(100mL)中加入N-(5-((叔丁基(二甲基)甲硅烷基)氧甲基)-3-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(4.82g,14.23mmol)，然后分批加入氢化钠(1.14g,28.47mmol,60％纯度)，在0℃下搅拌30分钟，然后加入4-溴-3-(甲基磺酰氧基甲基)苯甲酸甲酯(4.6g,14.23mmol)。将混合物在25℃搅拌2小时。用冰水(100mL)淬灭，乙酸乙酯(100mL*3)萃取，有机层用硫酸镁上干燥，过滤浓缩。用快速硅胶色谱法(80g硅胶柱，洗脱液为0～15％乙酸乙酯/石油醚梯度@100mL/min)纯化，得到白色固体化合物4-溴-3-((叔丁氧羰基-(5-((叔丁基(二甲基)甲硅烷基)氧甲基)-3-吡啶基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4.99g，两步收率52％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.44(d,J＝2.4Hz,1H),8.28(d,J＝1.5Hz,1H),7.89(s,1H),7.73-7.82(m,2H),7.48(s,1H),4.95(s,2H),4.70(s,2H),3.83(s,3H),1.39(s,9H),0.81(s,9H),0.00(s,6H)。ESI-MS m/z＝566.8[M+H]+；Calcu.＝566.2。
步骤F：0℃下，往4-溴-3-((叔丁氧羰基-(5-((叔丁基(二甲基)甲硅烷基)氧甲基)-3-吡啶基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(4.3g,7.60mmol)的四氢呋喃溶液(40mL)中，滴加二异丁基氢化铝(1M,38mL)，混合物在25℃搅拌2小时。用水(50mL)稀释，加入1N稀盐酸至pH＝7，然后用乙酸乙酯(50mL*3)提取，有机层用硫酸镁上干燥，过滤浓缩，得到白色固体化合物N-((2-溴-5-(羟基甲基)苯基)甲基)-N-(5-((叔丁基(二甲基)甲硅烷基)氧甲基)-3-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(3.2g,78％)。ESI-MS m/z＝539.0[M+H]+；Calcu.＝538.2。
步骤G：往N-((2-溴-5-(羟甲基)苯基)甲基)-N-(5-((叔丁基(二甲基)甲硅烷基)氧甲基)-3-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(3.1g,5.77mmol)的二氯甲烷溶液(20mL)中，加入三苯基膦(1.74g,6.63mmol)和四溴化碳(2.29g,6.92mmol)，在25℃下搅拌12小时。得到的反应液N-((2-溴-5-(溴甲基)苯基)甲基)-N-(5-((叔丁基(二甲基)甲硅烷基)氧甲基)-3-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯，未经处理和纯化直接投下一步。ESI-MS m/z＝601.1[M+H]+；Calcu.＝600.1。
步骤H：上述N-((2-溴-5-(溴甲基)苯基)甲基)-N-(5-((叔丁基(二甲基)甲硅烷基)氧甲基)-3-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(3.02g,5.03mmol)反应液倒入N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中，然后加入碳酸钾(2.09g,15.09mmol)和6-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(810.22mg,4.78mmol)，25℃下搅拌12小时。反应液浓缩，得到黄色油状物叔丁基-N-((5-((4-氨基-6-氯-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-溴-苯基)甲基)-N-(5-((叔丁基(二甲基)甲硅烷基)氧甲基)-3-吡啶基)氨基甲酸酯(2.43g，粗品)。ESI-MS m/z＝689.8[M+H]+；Calcu.＝689.1。
步骤I：在N-((5-((4-氨基-6-氯-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-溴-苯基)甲基)-N-(5-((叔丁基(二甲基)甲硅烷基)氧甲基)-3-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(2.43g,3.53mmol)的四氢呋喃溶液(30mL)中，加入四丁基氟化铵(1M,5.29mL)。在25℃搅拌2小时。混合物在50℃浓缩，得到白色固体化合物N-((5-((4-氨基-6-氯-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-溴-苯基)甲基)-N-(5-(羟甲基)-3-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(1.1g，54％)。ESI-MS m/z＝575.9[M+H]+；Calcu.＝575.1。
步骤J：在N-((5-((4-氨基-6-氯-吡唑并[3,4-d]嘧啶-1-基)甲基)-2-溴-苯基)甲基)-N-(5-(羟甲基)-3-吡啶基)氨基甲酸叔丁酯(300mg,521.87μmol)的N-甲基吡咯烷酮溶液(20mL)中，加入氢化钠(62.62mg,1.57mmol,60％纯度)，在110℃下搅拌12小时。反应混合物用水(5mL)淬灭，用乙酸乙酯(5mL*2)萃取。合并的有机层用盐水(5mL*2)洗涤，用硫酸镁燥，过滤并在减压下浓缩以得到残留物。粗产物经薄层色谱纯化得到化合物M-3，14-氨基-34-溴-11H-8-氧杂-5-氮杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(3,5)-吡啶-3(1,3)-苯并酸环辛烷-5-羧酸叔丁酯(400mg)，黄色油状物。ESI-MS m/z＝539.8[M+H]+；Calcu.＝539.1。
步骤K：将14-氨基-34-溴-11H-8-氧杂-5-氮杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(3,5)-吡啶-3(1,3)-苯并酸环辛烷-5-羧酸叔丁酯(60mg,111.0μmol),三氟(吡咯烷-1-基甲基)硼酸钾(63.63mg,333.1μmol),2-双环己基膦-2',4',6'-三异丙基联苯(5.3mg,11.1μmol),三(二亚苄基丙酮)二钯(10.2mg,11.1μmol)和碳酸钠(35.3mg,333.1μmol)加到四氢呋喃/水＝2:1(2毫升)的溶液中，氮气置换了3次,然后在氮气气氛下，80℃搅拌12小时。反应混合物用水(2mL)淬灭，用乙酸乙酯(5mL*2)萃取。合并的有机层用盐水(5mL*2)洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并在减压下浓缩，得到化合物M-4，叔丁基14-氨基-34-(吡咯烷-1-基甲基)-11H-8-氧杂-5-氮杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(3,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛甲酸叔丁酯(60mg，粗品)。ESI-MS m/z＝543.1[M+H]+；Calcu.＝542.3。
步骤L：往14-氨基-34-(吡咯烷-1-基甲基)-11H-8-氧杂-5-氮杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(3,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛甲酸叔丁酯(30mg,55.29μmol)的二氯甲烷(2mL)中，添加N,N-二异丙基乙胺(35.7mg,276.4μmol,48μL)和三氟甲磺酸三甲基硅酯(61.4mg,276.4μmol),混合物25℃下搅拌2小时。将混合物在50℃的真空中浓缩，采用反相高效液相色谱法(色谱柱:最大色谱柱C18 150*40mm*10um，流动相:[水(碳酸氢铵)-乙腈]，梯度:14％-54％ B,32min)纯化，得到化合物C-41，白色固体34-(吡咯烷-1-基甲基)-11H-8-氧杂-5-氮杂-1(1,6)-吡唑并[3,4-d]嘧啶-6(3,5)-吡啶-3(1,3)-苯并环辛烷-14-胺(2.14mg,8％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ＝7.91(s,1H),7.79(s,1H),7.75-7.58(m,3H),7.53(br s,1H),7.18(d,J＝7.6Hz,1H),7.12-7.07(m,1H),6.57-6.47(m,1H),6.13-6.01(m,1H),5.39(s,2H),5.33(s,2H),4.43-4.33(m,2H),3.67(s,2H),2.40(br s,4H),1.73(brs,4H)。ESI-MS m/z＝443.2[M+H]+；Calcu.＝442.2。
测试例1：细胞水平药效评价
目的：采用HEK-BlueTMhTLR7体外细胞模型评价化合物的TLR7和TLR8激动活性
实验材料：
1细胞株：HEK-BlueTMhTLR7(InvivoGen)、HEK-BlueTMhTLR8(InvivoGen)
2试剂：QUANTI-BlueTMSolution(InvivoGen)，DMEM(Invitrogen)，FBS(HyClone),L-glutamine(GIBCO),TrypLE Express Enzyme(GIBCO),DPBS(GIBCO),NormocinTM(InvivoGen)；Penicillin-Streptomycin(GIBCO)
3仪器：酶标仪(PerkinElmer，Multimode plate reader 2014)，CO2培养箱(THERMO，STERI-CYCLEI160)，细胞计数仪(BECKMAN COULTER，vi-cell XR)
实验方法：
步骤一：细胞铺板
a)弃去T150培养瓶中的培养基，加入10mL预热的DPBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞一次。弃去DPBS后，将8.0mL TrypLETMExpress酶加入T150培养瓶中，轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞。
b)将培养瓶中的TrypLETMExpress酶弃去，放入培养箱中1～2分钟。
c)加入含血清的培养基终止消化，收集细胞悬液，300r室温离心5分钟，弃上清。
d)加入新鲜培养基，吹打混匀细胞后用vi-cell XR细胞计数仪进行计数。
e)用新鲜培养基将细胞密度稀释到6.25*105cells/mL，向96孔板中接种80μL稀释好的细胞悬液，即5*104cells/well。
f)将96孔板置于培养箱中孵育过夜(5％ CO2，37℃)。
步骤二：药物处理
a)待测化合物用DMSO制成10mM储备液；
b)用培养基将待测化合物从10mM稀释至0.1mM，然后用含1％ DMSO的培养基化合物3倍梯度稀释，共8个浓度梯度，DMSO做阴性对照，R848及GS9620作为阳性对照。
c)取20μL稀释好的化合物加入到已接种80μL细胞的96孔板中，对药物进行5倍稀释，每孔中DMSO的终浓度为0.2％。待测化合物与对照化合物的最终浓度为20000，6667，2222，741，247，82，27，9nM。
d)将96孔板放入5％ CO2，37℃培养箱孵育24小时。
步骤三：活性检测
a)取10μL化合物孵育后的细胞上清转移到一块96孔透明检测板中，然后向检测板中每孔加入90μL QUANTI-BlueTMSolution，置5％ CO2，37℃培养箱孵育1小时。
b)用酶标仪检测分泌型碱性磷酸酶(SEAP)在650nm的光吸收。
数据分析：
使用以下公式计算激活倍数：激活倍数＝OD650处理组/OD650溶剂，采用GraphPadPrism 7软件根据化合物的各浓度与相应激活倍数拟合曲线，并计算EC50值。
对照品：R848(InvivoGen)和GS-9620(CAYMAN)，结构如下所示：
hTLR7激活实验结果如下表所示：
化合物对hTLR8的激活实验结果如下：
编号 hTLR8 EC50(nM)
R848 4549
C-6 >20000
C-27 >20000
C-37 >20000
C-39 >20000
测试例2：本发明化合物对人外周血单核细胞的激动活性测试
人外周血单核细胞(hPBMCs)代表血液中的主要人免疫细胞，包含淋巴细胞、单核细胞和树突状细胞等。这些细胞表达TLR7、TLR8或TLR9，对相应配体的刺激产生应答。本实验使用潜在TLR7激动剂刺激hPBMCs，通过检测IFN-α，TNF-α的水平来反映化合物对TLR7受体的活化作用。
实验材料：
1、细胞株：hPBMCs(sailybio)，培养条件RPMI 1640培养基+10％(v/v)FBS+1％双抗(Penicillin-Streptomycin)，5％ CO2，37℃。
2、试剂：RPMI 1640培养基(GIBCO)，FBS(GIBCO),Penicillin-Streptomycin(GIBCO)，Human IFN-alpha 2/IFNA2 DuoSet ELISA(R&D)，Human TNF-alpha ELISA(R&D)。
3、仪器：酶标仪(perkinElmer，Multimode plate reader 2014)，CO2培养箱(THERMO，STERI-CYCLEI160)，细胞计数仪(BECKMAN COULTER，vi-cell XR)。
实验方法：
a)冻存的hPBMCs在37℃水浴溶解后转移至1640完全培养基中，500r室温离心10分钟后弃上清，用1640完全培养基重悬细胞并转移至培养瓶中，在37℃、5％ CO2条件下培养过夜。
b)收集稳定培养后的hPBMCs，计数后将细胞稀释至1.11*107cells/mL，向96孔板中接种180μL稀释好的细胞悬液，即2*106cells/well，将96孔板置于恒温培养箱中孵育24h(5％ CO2，37℃)。
c)待测化合物用DMSO配成10mM储备液，并分别稀释至0.01mM(IFN-α检测)和0.1mM(TNF-α)，然后用含2％ DMSO的培养基将化合物稀释成8个浓度梯度。
d)取20μL稀释好的化合物加入到96孔细胞培养板中，每孔中DMSO的终浓度为0.2％。
e)37℃孵育24小时后，离心收集细胞培养上清，利用ELISA检测试剂盒测定上清中IFN-α、TNF-α的水平。
f)酶标仪测定450nm的光吸收，并根据相应标准曲线，定量测定相应细胞因子分泌的水平，通过拟合曲线计算EC50值。
g)实验结果如下表所示：

Claims (26)

1.具有如式(I)所示结构的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式，
其中，
R1选自：氢、卤素、羟基、氨基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基；
Q选自-O-、-S-、-NH-；
环A选自苯基、萘基、5-6元杂芳基和双环杂芳基，所述苯基、萘基、5-6元杂芳基和双环杂芳基任选地被1个、2个或3个选自以下的基团所取代：氢、卤素、硝基、亚硝基、氰基、羟基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、卤代C1-C6烷基、＝O、-NR3R4、-CH2Ra、-C(＝O)Rb、-ORc、C3-C6饱和或不饱和环烷基、3-6元杂环基、-SH、苯基、5-6元杂芳基、-(C1-C6烷基)OH、-(C1-C6烷基)NH2、-S(C1-C3烷基)、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)NH(C1-C3烷基)、-NRdS(＝O)(＝O)(C1-C6烷基)、-P(＝O)ReRf、磺酸基、-N＝NPh、-Si(C1-C3烷基)3、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2；其中，Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf各自独立地选自氢、-OH、-COOH、-C(＝O)H、苯基、C1-C6烷基、C1-C3烯基、C1-C6烷氧基、3-6元含氮杂环基、-NH2、-NH(C1-C6烷基)、-N(C1-C6烷基)2、C(＝O)(C1-C6烷基)；其中，R3、R4各自独立地选自氢、C1-6烷基、C(＝O)(C1-C6烷基)；任选地，所述3-6元杂环基或3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、卤素、硝基、氰基、羟基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基；
环B选自5-6元含氮杂芳基和双环杂芳基，所述5-6元含氮杂芳基和双环杂芳基任选地被1个、2个或3个选自以下的基团所取代：氢、卤素、硝基、亚硝基、氰基、羟基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、卤代C1-C6烷基、＝O、-NR3’R4’、-CH2Ra’、-C(＝O)Rb’、-ORc’、C3-C6饱和或不饱和环烷基、3-6元杂环基、-SH、苯基、5-6元杂芳基、-(C1-C6烷基)OH、-(C1-C6烷基)NH2、-S(C1-C3烷基)、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)NH(C1-C3烷基)、-NRd’S(＝O)(＝O)(C1-C6烷基)、-P(＝O)Re’Rf’、磺酸基、-N＝NPh、-Si(C1-C3烷基)3；其中，Ra’、Rb’、Rc’、Rd’、Re’、Rf’各自独立地选自氢、-OH、-COOH、-C(＝O)H、苯基、C1-C6烷基、C1-C3烯基、C1-C6烷氧基、3-6元含氮杂环基、-NH2、-NH(C1-C6烷基)、-N(C1-C6烷基)2、C(＝O)(C1-C6烷基)；其中，R3’、R4’各自独立地选自氢、C1-C6烷基、C(＝O)(C1-C6烷基)；任选地，所述3-6元杂环基或3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、卤素、硝基、氰基、羟基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基；
L选自-(CH2)m-W-(CH2)n-，其中，W选自-O-、-NH-、-N(Boc)-、-NHC(＝O)-、-CH2-、-CH(C1-C6烷基)-、-C(C1-C6烷基)(C1-C6烷基)-、-C(＝O)-、-C(＝O)NH-、-N(C1-C6烷基)-、-N(C1-C6烷基)C(＝O)-、-C(＝O)N(C1-C6烷基)-、-S-、-S(＝O)-、-S(＝O)(＝O)-、-P(＝O)(C1-C6烷基)-、-P(＝O)(C1-C6烷氧基)-、-P(＝O)(OH)-、-OC(＝O)-、-C(＝O)O-、-NHS(＝O)(＝O)-、-S(＝O)(＝O)NH-、-N(C1-C6烷基)S(＝O)(＝O)-、-S(＝O)(＝O)N(C1-C6烷基)-，m、n各自独立地选自0-6之间的整数(例如0、1、2、3、4、5或6)；
T选自-(CH-T1)p-(Z)q-(CH-T2)r-，其中，Z选自-O-、-NH-、-NHC(＝O)-、-CH2-、-CH(C1-C6烷基)-、-C(C1-C6烷基)(C1-C6烷基)-、-C(＝O)-、-C(＝O)NH-、-N(C1-C6烷基)-、-N(C1-C6烷基)C(＝O)-、-C(＝O)N(C1-C6烷基)-、-S-、-S(＝O)-、-S(＝O)(＝O)-、-P(＝O)(C1-C6烷基)-、-P(＝O)(C1-C6烷氧基)-、-P(＝O)(OH)-、-OC(＝O)-、-C(＝O)O-、-NHS(＝O)(＝O)-、-S(＝O)(＝O)NH-、-N(C1-C6烷基)S(＝O)(＝O)-、-S(＝O)(＝O)N(C1-C6烷基)-，p、q、r各自独立地选自0-6之间的整数(例如0、1、2、3、4、5或6)，且p、r不能同时为0，T1、T2各自独立地选自：氢、卤素、硝基、羟基、氰基、氨基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、巯基、-S-(C1-C6烷基)。
2.权利要求1的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式，其中，R1选自：氢、卤素、C1-C6烷基、羟基。
3.权利要求1或2的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式，其中，Q为-O-。
4.权利要求1-3任一项的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式，其中，环A为苯基、5-6元杂芳基，任选地，环A被1个、2个或3个取代基取代；
优选地，环A为苯基，任选地，环A被1个、2个或3个取代基取代；
优选地，环A的取代基选自以下的基团：氢、卤素、氰基、硝基、羟基、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、＝O、-NR3R4、-CH2Ra、-C(＝O)Rb、-ORc、C3-C6饱和或不饱和环烷基、3-6元杂环基、-SH、苯基、5-6元杂芳基、-S(C1-C3烷基)、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)NH(C1-C3烷基)、-NRdS(＝O)(＝O)(C1-C6烷基)、-P(＝O)ReRf、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2；其中，Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf各自独立地选自氢、-OH、-COOH、-C(＝O)H、苯基、C1-C6烷基、C1-C3烯基、C1-C6烷氧基、3-6元含氮杂环基、-NH2、-NH(C1-C6烷基)、-N(C1-C6烷基)2、-C(＝O)(C1-C6烷基)；其中，R3、R4各自独立地选自氢、C1-6烷基、-C(＝O)(C1-C6烷基)；任选地，所述3-6元杂环基或3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、卤素、硝基、氰基、羟基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基；
优选地，环A的取代基选自以下的基团：氢、卤素、硝基、氰基、羟基、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、＝O、-CH2Ra、-C(＝O)Rb、-ORc、C3-C6饱和环烷基、-S(C1-C3烷基)、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、-NRdS(＝O)(＝O)(C1-C6烷基)、-P(＝O)ReRf、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2；其中，Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf各自独立地选自氢、-OH、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、3-6元含氮杂环基、-N(C1-C6烷基)2；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、卤素、羟基、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基；
优选地，Ra、Rb、Rc、Rd、Re、Rf各自独立地选自氢、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、3-6元含氮杂环基、-N(C1-C6烷基)2；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、C1-C6烷基。
5.权利要求1-4任一项的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式，其中，所述环B为5-6元含1、2或3个氮原子的单杂芳基；
优选地，所述5-6元含1、2或3个氮原子的单杂芳基选自如下杂芳环形成的基团：
优选地，环B为任选地，环B被1个、2个或3个取代基取代；
优选地，环B为任选地，环B被1个、2个或3个取代基取代；
优选地，环B的取代基选自以下的基团：氢、卤素、硝基、亚硝基、氰基、羟基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、卤代C1-C6烷基、＝O、-NR3’R4’、-CH2Ra’、-C(＝O)Rb’、-ORc’、C3-C6饱和或不饱和环烷基、3-6元杂环基、-SH、苯基、5-6元杂芳基、-(C1-C6烷基)OH、-(C1-C6烷基)NH2、-S(C1-C3烷基)、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)NH(C1-C3烷基)、-NRd’S(＝O)(＝O)(C1-C6烷基)、-P(＝O)Re’Rf’、磺酸基、-N＝NPh、-Si(C1-C3烷基)3；其中，Ra’、Rb’、Rc’、Rd’、Re’、Rf’各自独立地选自氢、-OH、-COOH、-C(＝O)H、苯基、C1-C6烷基、C1-C3烯基、C1-C6烷氧基、3-6元含氮杂环基、-NH2、-NH(C1-C6烷基)、-N(C1-C6烷基)2、C(＝O)(C1-C6烷基)；其中，R3’、R4’各自独立地选自氢、C1-C6烷基、C(＝O)(C1-C6烷基)；任选地，所述3-6元杂环基或3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、卤素、硝基、氰基、羟基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基；
优选地，环B的取代基选自以下的基团：氢、卤素、硝基、亚硝基、氰基、羟基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、卤代C1-C6烷基、＝O、-NR3’R4’、-CH2Ra’、-C(＝O)Rb’、-ORc’、C3-C6饱和或不饱和环烷基、3-6元杂环基；其中，Ra’、Rb’、Rc’各自独立地选自氢、-OH、-COOH、-C(＝O)H、苯基、C1-C6烷基、C1-C3烯基、C1-C6烷氧基、3-6元含氮杂环基、-NH2、-NH(C1-C6烷基)、-N(C1-C6烷基)2、C(＝O)(C1-C6烷基)；任选地，所述3-6元杂环基或3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、卤素、硝基、氰基、羟基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基；
优选地，环B的取代基选自以下的基团：氢、＝O、C1-C6烷基。
6.权利要求1-5任一项的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式，其中，L选自-(CH2)m-W-(CH2)n-，其中，W选自-O-、-NH-、-N(Boc)-、-NHC(＝O)、-CH2-、-CH(C1-C6烷基)-、-C(C1-C6烷基)(C1-C6烷基)-、-C(＝O)-、-C(＝O)NH-、-N(C1-C6烷基)-、-S-、-S(＝O)-、-S(＝O)(＝O)-、-P(＝O)(OH)-、-OC(＝O)-、-C(＝O)O-、-NHS(＝O)(＝O)-、-S(＝O)(＝O)NH-，m、n各自独立地选自0、1或2；
优选地，L选自以下结构：-O-CH2-、-NH-CH2-、-CH2-、-NH-、-NH-C(＝O)-、-CH2-O-、-CH2-O-CH2-、-CH2-CH2-、-O-CH2-CH2-、-N(Boc)-CH2-；
优选地，L选自以下结构：-O-CH2-、-CH2-O-、-NH-CH2-、-CH2-NH-、-CH2-CH2-、-N(Boc)-CH2-；
优选地，L选自以下结构：-NH-CH2-、-CH2-CH2-、-N(Boc)-CH2-。
7.权利要求1-6任一项的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式，其中，q为0。
8.权利要求1-7任一项的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式，其中，T选自-(CH-T1)p-，其中，p选自1-6之间的整数，T1选自：氢、卤素、硝基、羟基、氰基、氨基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、巯基、-S-(C1-C6烷基)；
优选地，T1选自氢、C1-C6烷基；
优选地，T选自-CH2-。
9.权利要求1-8任一项的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式，所述化合物具有如式(I’)所示的结构，
其中，R1、Q、L、环A、环B分别如权利要求1-8任一项所定义；
R2选自氢或C1-C6烷基。
10.权利要求1-9任一项的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式，所述化合物具有如式(II)所示的结构：
其中，
R1、Q、L分别如权利要求1-8任一项所定义；
R2选自氢或C1-C6烷基；
R5、R6、R7各自独立地选自：氢、卤素、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、-CH2-(3-6元含氮杂环基)、-CH2-NR3R4、-C(＝O)(C1-C6烷基)、氰基、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、-NHS(＝O)(＝O)(C1-C6烷基)、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2、3-6元环烷基、-S(C1-C3烷基)、-P(＝O)(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)；其中，R3、R4各自独立地选自氢和C1-C6烷基；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、C1-C6烷基。
11.权利要求1-10任一项的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式，所述化合物具有如式(II’)所示的结构：
R1、R2、Q、L分别如权利要求1-8任一项所定义；
R5、R6、R7各自独立地选自：氢、卤素、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、-CH2-(3-6元含氮杂环基)、-CH2-NR3R4、-C(＝O)(C1-C6烷基)、氰基、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、-NHS(＝O)(＝O)(C1-C6烷基)、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2、3-6元环烷基、-S(C1-C3烷基)、-P(＝O)(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)；其中，R3、R4各自独立地选自氢和C1-C6烷基；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、C1-C6烷基。
12.权利要求1-11任一项的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式，所述化合物具有如式(II”)所示的结构：
R1、R2、Q、L分别如权利要求1-8任一项所定义；
R5、R6、R7各自独立地选自：氢、卤素、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、-CH2-(3-6元含氮杂环基)、-CH2-NR3R4、-C(＝O)(C1-C6烷基)、氰基、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、-NHS(＝O)(＝O)(C1-C6烷基)、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2、3-6元环烷基、-S(C1-C3烷基)、-P(＝O)(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)；其中，R3、R4各自独立地选自氢和C1-C6烷基；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、C1-C6烷基。
13.权利要求1-9任一项的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式，所述化合物具有如式(III)所示的结构：
其中，
R1、Q、L分别如权利要求1-8任一项所定义；
R2选自氢或C1-C6烷基；
R5、R6、R7各自独立地选自：氢、卤素、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、-CH2-(3-6元含氮杂环基)、-CH2-NR3R4、-C(＝O)(C1-C6烷基)、氰基、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、-NHS(＝O)(＝O)(C1-C6烷基)、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2、3-6元环烷基、-S(C1-C3烷基)、-P(＝O)(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)；其中，R3、R4各自独立地选自氢和C1-C6烷基；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、C1-C6烷基。
14.权利要求1-9或13任一项的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式，所述化合物具有如式(III’)所示的结构：
R1、R2、Q、L分别如权利要求1-8任一项所定义；
R5、R6、R7各自独立地选自：氢、卤素、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、-CH2-(3-6元含氮杂环基)、-CH2-NR3R4、-C(＝O)(C1-C6烷基)、氰基、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、-NHS(＝O)(＝O)(C1-C6烷基)、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2、3-6元环烷基、-S(C1-C3烷基)、-P(＝O)(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)；其中，R3、R4各自独立地选自氢和C1-C6烷基；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、C1-C6烷基。
15.权利要求1-9、13或14任一项的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式，所述化合物具有如式(III”)所示的结构：
R1、R2、Q、L分别如权利要求1-8任一项所定义；
R5、R6、R7各自独立地选自：氢、卤素、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、-CH2-(3-6元含氮杂环基)、-CH2-NR3R4、-C(＝O)(C1-C6烷基)、氰基、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、-NHS(＝O)(＝O)(C1-C6烷基)、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2、3-6元环烷基、-S(C1-C3烷基)、-P(＝O)(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)；其中，R3、R4各自独立地选自氢和C1-C6烷基；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、C1-C6烷基。
16.权利要求1-15任一项的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式，所述化合物具有如式(V)所示的结构：
其中，R1、Q、L如权利要求1-15任一项所定义；
X为C或N；
R2选自氢或C1-C6烷基；
R5、R6、R7各自独立地选自：氢、卤素、C1-C6烷基、卤代C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、-CH2-(3-6元含氮杂环基)、-CH2-NR3R4、-C(＝O)(C1-C6烷基)、氰基、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、-NHS(＝O)(＝O)(C1-C6烷基)、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2、3-6元环烷基、-S(C1-C3烷基)、-P(＝O)(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)；其中，R3、R4各自独立地选自氢和C1-C6烷基；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、C1-C6烷基；
优选地，R5、R6各自独立地选自：氢、卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、3-6元环烷基、-CH2-(3-6元含氮杂环基)、-CH2-N(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)、氰基、-P(＝O)(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)、-NHS(＝O)(＝O)(C1-C6烷基)、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2、-C(＝O)(C1-C6烷基)、-S(C1-C3烷基)、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、卤代C1-C6烷基；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、C1-C6烷基；
优选地，所述-CH2-(3-6元含氮杂环基)为
优选地，R7选自氢、C1-C6烷基(例如甲基)；
优选地，R7为氢。
17.权利要求1-16任一项的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式，所述化合物具有如式(V’)所示的结构：
R1、R2、Q、L、X、R5、R6、R7分别如权利要求1-16任一项所定义。
18.权利要求1-17任一项的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式，所述具有如式(V”)所示的结构：
R1、R2、Q、L、X、R5、R6、R7分别如权利要求1-16任一项所定义。
19.权利要求1-18任一项的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式，所述具有如式(V”’)所示的结构：
R1、R2、Q、L、X分别如权利要求1-16任一项所定义；
R5为氢；
R6选自：氢、卤素、3-6元环烷基、-CH2-(3-6元含氮杂环基)、-CH2-N(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)、氰基、-P(＝O)(C1-C3烷基)(C1-C3烷基)、-C(O-C1-C6烷基)＝CH2、-C(＝O)(C1-C6烷基)、-S(C1-C3烷基)、-S(＝O)(C1-C3烷基)、-S(＝O)(＝O)(C1-C3烷基)、卤代C1-C6烷基；任选地，所述3-6元含氮杂环基被一个或多个选自以下的基团所取代：氢、C1-C6烷基；
优选地，R6选自：-Br、环丙基、-CH2-N(CH3)(CH3)、氰基、-P(＝O)(CH3)(CH3)、-C(OEt)＝CH2、-C(＝O)CH3、-SCH3、-S(＝O)CH3、-S(＝O)(＝O)CH3、-CF3；
R7选自氢或C1-C6烷基。
20.权利要求1-19任一项的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式，所述化合物中的羟基、-NH-或-NH2被取代基(例如Boc、TBDPS)保护。
21.权利要求1-20任一项的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式，所述化合物具有选自以下的结构：
22.一种药物组合物，其包含权利要求1-21任一项的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式；任选地，所述药物组合物还包含药学上可接受的载体或赋形剂。
23.权利要求1-21任一项的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式用于制备药物中的用途，所述药物作为TLR7激动剂，用于预防或治疗与TLR7相关的疾病；
优选地，所述与TLR7相关的疾病选自：
(1)肿瘤，所述肿瘤包括但不限于：乳腺癌、黑色素瘤、脑膜瘤、软组织肉瘤、唾液腺肿瘤、椎管内肿瘤、纵隔肿瘤、脑癌、骨癌、阴茎癌、骨肉瘤、颅内肿瘤、舌癌、上颌窦癌、甲状腺癌、恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤、脑垂体腺瘤、睾丸肿瘤、非何杰金氏淋巴癌、膀胱癌、白血病、胃癌、鼻咽癌、喉癌、口腔癌、食管癌、肺癌、肾癌、宫颈癌、绒毛膜癌、外阴癌、皮肤癌、子宫内膜癌、卵巢癌、前列腺癌、胰腺癌、直肠癌、大肠癌、卡波西肉瘤、非黑色素瘤皮肤癌(包括鳞状细胞癌和基底细胞癌)、血管瘤、神经胶质瘤、非霍奇金淋巴瘤(弥漫性大B细胞淋巴瘤、B细胞非霍奇金淋巴瘤)、结肠癌、肝癌、神经母细胞瘤、胶质母细胞瘤；
(2)与病毒感染相关的疾病，所述病毒包括但不限于：登革热病毒、黄热病毒、西尼罗病毒、日本脑炎病毒、蜱传脑炎病毒、昆津病毒、墨累山谷脑炎病毒、圣路易脑炎病毒、鄂木斯克出血热病毒、牛病毒性腹泻病毒、济卡病毒、HIV、HBV、HCV、HPV、RSV、SARS或流感病毒；
(3)炎性疾病、呼吸系统疾病、皮肤病、胃肠道疾病、肝胆疾病、神经系统疾病、肌肉骨骼和结缔组织疾病或自身免疫性疾病，例如哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、成人呼吸窘迫综合征(ARDS)、溃疡性结肠炎、克罗恩病、支气管炎、皮炎、光化性角化病、过敏性鼻炎、银屑病、硬皮病、荨麻疹、类风湿性关节炎、多发性硬化、狼疮、药物诱导过敏反应、风湿病。
24.权利要求1-21任一项的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式作为疫苗佐剂的用途。
25.权利要求1-21任一项的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式作为光动力治疗剂的用途。
26.权利要求1-21任一项的化合物、其药学上可接受的盐、前药、立体异构体、互变异构体、水合物、溶剂合物、晶型、同位素标记物或它们的代谢物形式作为偶联药物(例如抗体免疫刺激偶联药物ISAC)的用途。
CN202311138066.2A 2023-09-04 2023-09-04 大环吡唑并嘧啶类化合物及其用途 Pending CN119552171A (zh)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202311138066.2A CN119552171A (zh) 2023-09-04 2023-09-04 大环吡唑并嘧啶类化合物及其用途
PCT/CN2024/086747 WO2025050636A1 (zh) 2023-09-04 2024-04-09 大环吡唑并嘧啶类化合物及其用途

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202311138066.2A CN119552171A (zh) 2023-09-04 2023-09-04 大环吡唑并嘧啶类化合物及其用途

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN119552171A true CN119552171A (zh) 2025-03-04

Family

ID=94740767

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202311138066.2A Pending CN119552171A (zh) 2023-09-04 2023-09-04 大环吡唑并嘧啶类化合物及其用途

Country Status (2)

Country Link
CN (1) CN119552171A (zh)
WO (1) WO2025050636A1 (zh)

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110372703A (zh) * 2018-04-13 2019-10-25 罗欣生物科技（上海）有限公司 五元杂环并嘧啶类化合物及其用途
JP7385602B2 (ja) * 2018-05-25 2023-11-22 チア タイ ティエンチン ファーマシューティカル グループ カンパニー リミテッド 肺癌を治療するためのｔｌｒ７アゴニストおよびその医薬の組み合わせ
WO2021168074A1 (en) * 2020-02-18 2021-08-26 Theseus Pharmaceuticals, Inc. Macrocyclic compounds and uses thereof
CN115119508B (zh) * 2021-01-20 2024-05-24 上海维申医药有限公司 大环tlr7激动剂、其制备方法、药物组合物及其用途
US11780851B2 (en) * 2021-10-27 2023-10-10 H. Lundbeck A/S LRRK2 inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
WO2025050636A1 (zh) 2025-03-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7101678B2 (ja) 免疫調節剤としての複素環式化合物
US10669252B2 (en) Benzazepine derivative, preparation method, pharmaceutical composition and use thereof
CN109071447B (zh) 四环吡啶酮化合物作为抗病毒剂
WO2021169990A1 (zh) 用于癌症治疗的kras抑制剂
US20230226062A1 (en) Heterocyclic compounds as immunomodulators
JP2021519779A (ja) 免疫調節剤としての複素環式化合物
US10988476B2 (en) Substituted pyrimidines as cyclin-dependent kinase inhibitors
JP2018530539A (ja) スルフィニルフェニル又はスルホンイミドイルフェニルベンザゼピン
KR20210121168A (ko) 복소환식 화합물인 벤조피리돈 및 그 사용
CA3216163A1 (en) Carboxy-benzimidazole glp-1r modulating compounds
CN107148417A (zh) 苯并氮杂*磺酰胺化合物
TW201509938A (zh) Ｅ１活化酶之抑制劑
CN112430234A (zh) 一种新型kras g12c蛋白抑制剂及其制备方法和用途
ES2686747T3 (es) Derivados de 4,5,6,7-tetrahidro-pirazolo[1,5-a]pirimidina y derivados de 2,3-dihidro-1H-imidazo[1,2-b]pirazol sustituidos como inhibidores de ROS1
US20250059183A1 (en) Pyridine[4,3-d]pyrimidine compound as tlr7/8 agonist
CN118974051A (zh) 作为Toll样受体激动剂的嘧啶并哒嗪酮类化合物
TW202246212A (zh) 用作sting激動劑的新型化合物及其用途
CN112142747B (zh) 一种吡唑酮并嘧啶类化合物、其制备方法及应用
CN119552171A (zh) 大环吡唑并嘧啶类化合物及其用途
JP2024516194A (ja) Ｐｄ１／ｐｄ－ｌ１阻害剤としての化合物及びその方法
JP2023542789A (ja) ピラゾール化合物並びにその調製方法及び使用
CN119192202A (zh) 含磷或含硫的大环吡唑并嘧啶类化合物及其用途
KR20210111779A (ko) C-met 억제제로서 유기 인-치환 화합물 및 이의 치료학적 용도
CN119192199A (zh) 含多芳基的大环化合物及其用途
CN118724963A (zh) 含磷或含硫的大环化合物及其用途

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination