CN118955258A

CN118955258A - 4-o-甲基和厚朴酚的制备与抗疟疾应用

Info

Publication number: CN118955258A
Application number: CN202411172970.XA
Authority: CN
Inventors: 姜北; 肖朝江; 苟亮; 刘博超; 杜文会; 杨艺玲; 董相; 韩文萱
Original assignee: Dali University
Current assignee: Dali University
Priority date: 2024-08-26
Filing date: 2024-08-26
Publication date: 2024-11-15

Abstract

本发明涉及一个3,3’‑新木脂素类化合物4‑O‑甲基和厚朴酚的制备及其在制备抗疟产品中的应用，属于中药、天然药物制药领域。以本发明化合物4‑O‑甲基和厚朴酚为活性成分的抗疟药物。本发明拓展了长鞭红景天中3,3’‑新木脂素类化合物的药用价值。

Description

4-O-甲基和厚朴酚的制备与抗疟疾应用

技术领域

本发明属于中药、天然药物制药领域，具体地，涉及以一个3,3’-新木脂素类化合物4-O-甲基和厚朴酚的制备、以其为活性成分的药物组合，及其在抗疟疾剂中的应用。

背景技术

长鞭红景天（Rhodiola fastigiate (Hook. f. et Thoms.) S. H. Fu），别名宽叶红景天、竖枝景天、大理景天，属于红景天属（Rhodiola）植物，为多年生草本，全草药用；产于我国西藏、云南、四川等地，生于海拔2500-5400米的高山石砾中，在克什米尔地区、尼泊尔、锡金和不丹也有分布。在《四川省藏药材标准（2020年版）》中记载长鞭红景天味涩、甘、苦，性凉；有清热、利肺的功能，用于治疗感冒引起的肺热，气管炎，口臭。在《云南中药资源名录》中记载其有治疗跌打的效用。文献报道，长鞭红景天还能够治疗血瘀、肿胀和创伤（Application of microscopy in authentication of traditional Tibetan medicinalplants of five Rhodiola (Crassulaceae) alpine species by comparative anatomyand micromorphology. Microscopy Research and Technique, 2008, 71(6): 448-458）。近些年对长鞭红景天化学成分研究较少，其药理活性研究亦少见。现代药学研究表明，长鞭红景天含有有机酚酸类、糖苷类、黄酮类、挥发油、甾体和微量元素等多种化学成分，其中部分化学成分具有延缓机体衰老、清除自由基、防治老年疾病、抗氧化、抗疲劳、抗菌、抗病毒和免疫调节等功效（长鞭红景天的研究概况. 西藏科技, 2009, 26(4): 73-78）。然而，迄今为止未见长鞭红景天及其中化合物4-O-甲基和厚朴酚的抗疟活性报道。

发明内容

本发明旨在提供一个3,3’-新木脂素类化合物4-O-甲基和厚朴酚的制备方法，以其为活性成分的药物组合物，以及它在制备抗疟疾剂中的应用。

本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：

下述结构所示的3,3’-新木脂素类化合物4-O-甲基和厚朴酚，

。

4-O-甲基和厚朴酚的制备方法，取红景天属（Rhodiola）植物的根或根茎或全株，用有机溶剂石油醚或氯仿或乙酸乙酯或丙酮或甲醇或乙醇或水直接冷浸或者热回流提取，或者先用上述有机溶剂或水冷浸或回流提取后再用石油醚或乙酸乙酯萃取得到总浸膏，总浸膏经反复柱层析得到化合物4-O-甲基和厚朴酚。

本发明化合物4-O-甲基和厚朴酚的制备方法更具体地是用：

A：丙酮或甲醇或乙醇或水冷浸或热回流提取红景天属植物的根或根茎或全株得到总浸膏，石油醚或乙酸乙酯萃取得到相应萃取物，经反复柱层析可得到化合物4-O-甲基和厚朴酚。

B：有机溶剂（如：甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、石油醚、氯仿）直接冷浸或热回流提取红景天属植物的根或根茎或全株的粗粉得到总浸膏，总浸膏经反复柱层析可得到化合物4-O-甲基和厚朴酚。

更具体地，化合物4-O-甲基和厚朴酚的制备方法，是将红景天属植物的根或根茎或全株阴干，粉碎到20-30目，用95%乙醇在室温条件下浸提3次，每次24 h，提取液合并，减压浓缩提取液得浸膏后用固相萃取或液液萃取法用石油醚或乙酸乙酯为萃取溶剂萃取，得相应萃取物，萃取部位用适量氯仿/丙酮溶解后用80-100目硅胶拌样，然后用200-300目硅胶进行柱层析划段粗分，以石油醚/乙酸乙酯100:1-50:1或石油醚/丙酮100:1-50:1梯度洗脱，经薄层色谱检识合并得9个组分，组分8经反复硅胶柱层析、MCI柱层析和Sephadex LH-20柱层析得化合物4-O-甲基和厚朴酚。

抗疟疾剂，含有化合物4-O-甲基和厚朴酚和常规辅剂。

药物组合物，其中含有治疗有效量的化合物4-O-甲基和厚朴酚和药学上可接受的载体。

化合物4-O-甲基和厚朴酚在制备抗疟疾剂中的应用。

本发明用于抗疟疾的药物组合物，其中含有化合物4-O-甲基和厚朴酚和药学上可接受的载体。

本发明药物组合物中所述药学上可接受的载体是指药学领域常规的药物载体。本发明化合物可以组合物的形式通过口服、鼻吸入、直肠或肠胃外给药的方式施用于需要这种治疗的患者。用于口服时，可将其制成常规的固体制剂如片剂、粉剂、粒剂、胶囊等，制成液体制剂如油悬浮剂、糖浆、酏剂等；用于肠外给药时，可将其制成注射用的溶液等。优选的形式是片剂、胶囊和注射剂。

本发明药物组合物的各种剂型可以按照药学领域的常规生产方法制备。例如使活性成分与一种或多种载体混合，然后将其制成所需的剂型。

本发明的药物组合物优选含有重量比为0.1%-99.5%的活性成分，最优选含有重量比为0.5%-95%的活性成分。

本发明化合物的施用量可根据用药途径、患者的年龄、体重、所治疗的疾病的类型和严重程度等变化，其日剂量可以是0.01-10 mg/kg体重，优选0.1-5 mg/kg体重。可以一次或多次施用。

本发明的化合物显示出较好的抗疟疾活性。

本发明对化合物4-O-甲基和厚朴酚进行了抗疟疾活性筛选，该化合物显示较好的抗疟疾活性。在抗疟疾活性应用中，化合物4-O-甲基和厚朴酚是以如下的量施用于基材或一种群上，所述量的范围1-1000 µM，优选在10-200 µM，任选地与载体和/或媒体相结合。

具体实施方式

下面用本发明的实施例来进一步说明本发明的实质性内容，可以使本专业人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。

实施例1：

本发明化合物4-O-甲基和厚朴酚的提取、分离和纯化：

将长鞭红景天植物的全株（9.36 kg）阴干，粉碎到20-30目，用95%乙醇在室温条件下浸提3次，每次50 L、24 h，提取液合并，减压浓缩提取液得浸膏后用石油醚进行固相萃取，得石油醚萃取物（22.5 g），石油醚萃取物用适量氯仿/丙酮溶解后用80-100目硅胶拌样，然后用约10倍样品量硅胶200-300目进行柱层析划段粗分，以石油醚/乙酸乙酯100:1-50:1梯度洗脱，经薄层色谱检识合并得9个组分，组分8经反复硅胶柱层析得化合物4-O-甲基和厚朴酚。

实施例2：

本发明化合物4-O-甲基和厚朴酚的物理和波谱数据：

4-O-甲基和厚朴酚：黄色油状液体。¹H-NMR (400 MHz, CDCl₃) δ: 7.29 (1H, dd,J = 8.3, 2.3 Hz, H-4'), 7.23 (1H, d, J = 2.3 Hz, H-6'), 7.05 (1H, dd, J =8.1, 2.2 Hz, H-2), 7.03 (1H, d, J = 2.2Hz, H-6), 6.96 (1H, d, J = 8.3 Hz, H-3'), 6.91 (1H, d, J = 8.1 Hz, H-3), 5.92-6.06 (2H, m, H-8, H-8'), 5.04-5.15(5H, m, H-9, H-9' ,2'-OH), 3.38 (3H, s, 4-OMe), 3.44 (2H, d, J = 6.7 Hz, H-7), 3.35 (2H, d, J = 6.7 Hz, H-7')；¹³C-NMR (100 MHz, CDCl₃) δ: 129.1 (s, C-1),130.6 (d, C-2), 128.9 (d, C-3), 157.1 (s, C-4), 129.9 (s, C-5), 128.0 (d, C-6), 34.4 (t, C-7), 136.6 (d, C-8), 115.7 (t, C-9), 127.9 (s, C-1'), 150.9 (s,C-2'), 111.1 (d, C-3'), 115.6 (d, C-4'), 132.2 (s, C-5'), 130.3 (d, C-6'),39.6 (t, C-7'), 137.9 (d, C-8'), 116.0 (t, C-9'), 55.7 (s, 4-OMe)。

实施例3：

本发明化合物的抗疟疾活性检测：

采用SYBR Green I法体外评价本发明化合物的抗恶性疟原虫（Plasmodium falciparum 3D7）活性。疟原虫培养在人红细胞压积为2%的RPMI 1640培养基中、温度为37°C、CO₂浓度为5%。实验用疟原虫以5%的山梨醇同步化至环期，最终检测体系中疟原虫感染率为1%，红细胞压积2%。取上述环期疟原虫与供试化合物在96孔板中共培养72 h后，加入荧光染料SYBR Green I。最后，通过酶标仪测定荧光值（激发：485 nm，发射：535 nm）检测疟原虫生长情况。抑制率按以下公式计算：

疟原虫抑制率（%）=（阴性对照组荧光值-测试样品组荧光值）/（阴性对照组荧光值-空白组荧光值）×100%。

活性数据见表1。

实施例4：

片剂：实施例1和2所得化合物4-O-甲基和厚朴酚10 mg，乳糖180 mg，淀粉55 mg，硬脂酸镁5 mg；

制备方法：将化合物、乳糖和淀粉混合，用丙二醇均匀湿润，把湿润后的混合物过筛并干燥，再过筛，加入硬脂酸镁，然后将混合物压片，每片重250 mg，化合物含量为10 mg。

实施例5：

安瓿剂：实施例1和2所得化合物4-O-甲基和厚朴酚2 mg；

制备方法：实施例1和2所得化合物4-O-甲基和厚朴酚溶解于3 mL丙二醇中，过滤所得溶液，在无菌条件下装入安瓿瓶中。

实施例6：

胶囊剂：实施例1和2所得化合物4-O-甲基和厚朴酚10 mg，乳糖187 mg，硬脂酸镁3mg；

制备方法：将化合物与助剂混合，过筛，均匀混合，把得到的混合物装入硬明胶胶囊，每个胶囊重200 mg，活性成分含量为10 mg。

Claims

1.下述结构式所述化合物4-O-甲基和厚朴酚的制备方法，

。

2.药物组合物，其中含有治疗有效量的权利要求1所述化合物和药学上可接受的载体。

3.抗疟疾剂，其中含有权利要求1所述化合物和常规辅剂。

4.权利要求1所述化合物在制备抗疟疾剂中的应用。