CN118159294A

CN118159294A - 用于治疗癌症的联合疗法

Info

Publication number: CN118159294A
Application number: CN202280066897.0A
Authority: CN
Inventors: M·布鲁斯; R·卡西奥珀; I·古普塔; B·克雷默; J·林; P·帕卡; A·帕隆波; C·A·谢尔顿
Original assignee: GlaxoSmithKline Intellectual Property Development Ltd
Current assignee: GlaxoSmithKline Intellectual Property Development Ltd
Priority date: 2021-10-05
Filing date: 2022-10-04
Publication date: 2024-06-07
Also published as: EP4412713A1; JP2024537863A; CA3233953A1; WO2023057893A1

Abstract

本文公开了用于治疗癌症的方法和材料。本发明还提供了使用一种或多种抗原结合蛋白(例如抗B细胞成熟抗原(BCMA)抗原结合蛋白)和一种或多种cereblon E3连接酶调节剂(CELMOD)治疗患有癌症的受试者的方法和材料。

Description

用于治疗癌症的联合疗法

相关申请的交叉引用

本申请要求于2021年10月5日提交的美国专利申请号63/252,479的优先权，其全部内容通过引用并入本文。

序列表

本申请包含以ASCII格式电子提交的序列表，并通过引用将其全部并入本文。所述ASCII副本创建于2022年9月22日，名称为054624-09-5022-WO_Sequence_Listing.xml，大小约为32.5千字节。

技术领域

本公开涉及用于治疗癌症的方法和材料。例如，本公开提供了使用一种或多种抗体-药物偶联物(ADC)和一种或多种cereblon E3连接酶调节剂(CELMOD)治疗患有癌症的哺乳动物(例如，人)的方法和材料。本公开还提供了使用一种或多种抗原结合蛋白(例如抗B细胞成熟抗原(BCMA)抗原结合蛋白)和一种或多种CELMOD治疗患有癌症的受试者的方法和材料。

背景技术

多发性骨髓瘤(MM)是一种无法治愈的恶性肿瘤，占所有癌症的1％，占所有血液系统恶性肿瘤的10％。已经评估了多种药物和联合治疗并发现对治疗多发性骨髓瘤有效。然而，这些患者中的大多数(如果不是全部)不可避免地会复发。

目前，在免疫治疗领域仍然需要用于更有效地治疗自身免疫性疾病和癌症的替代或改进的组合物和方法。

发明内容

本公开提供了用于治疗癌症的方法和材料。例如，本公开提供了使用一种或多种分子治疗患有癌症的受试者的方法和材料，其中每种分子包括：(i)对BCMA多肽具有结合特异性的抗BCMA抗原结合蛋白或抗体-药物偶联物(ADC)和一种或多种cereblon E3连接酶调节剂(CELMOD)。在一些情况下，可以向哺乳动物(例如，人，如患有癌症的人)施用本文所公开的联合治疗，所述联合治疗包含(a)对BCMA多肽具有结合特异性的抗BCMA抗原结合蛋白或ADC和(b)一种或多种CELMOD。

本文公开了包含抗BCMA抗原结合蛋白和CELMOD的组合。在一些情况下，抗BCMA抗原结合蛋白可以包含抗体。在一些情况下，抗体是单克隆抗体。在一些情况下，单克隆抗体是IgG1。在一些实施方案中，抗体经修饰以增强效应功能。在一些情况下，抗体是非岩藻糖基化的(afucosylated)。在一些实施方案中，抗体是岩藻糖基化的。在一些实施方案中，抗体是唾液酸化的。在一些实施方案中，抗体是葡萄糖基化的。在一些实施方案中，抗体是糖基化的。在一些实施方案中，抗体是半乳糖基化的。在一些情况下，抗BCMA抗原结合蛋白是人的、人源化的或嵌合的。在一些情况下，抗BCMA抗原结合蛋白可以包含：包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的CDRH1；包含SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的CDRH2；包含SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列的CDRH3；包含SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列的CDRL1；包含SEQ IDNO:5所示的氨基酸序列的CDRL2；和包含SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列的CDRL3。在一些情况下，抗BCMA抗原结合蛋白可以包含：包含SEQ ID NO:7所示的氨基酸序列的重链可变区(VH)；和包含SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列的轻链可变区(VL)。在一些情况下，抗BCMA抗原结合蛋白可以包含：包含SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列的重链(H)和包含SEQ ID NO:10所示的氨基酸序列的轻链(L)。在一些情况下，抗BCMA抗原结合蛋白是免疫偶联物。在一些情况下，抗BCMA抗原结合蛋白是包含与细胞毒素偶联的抗体的免疫偶联物。在一些情况下，细胞毒素是MMAE或MMAF。在一些情况下，细胞毒素是MMAF。在一些实施方案中，细胞毒素是AFP、AEB、AEVB或奥瑞他汀(auristatin)E。在一些实施方案中，细胞毒素是紫杉醇、多西他赛、CC-1065、SN-38、拓扑替康、吗啉代-阿霉素(morpholino-doxorubicin)、根霉素、氰吗啉代-阿霉素(cyanomorpholino-doxorubicin)、多拉司他汀-10、棘霉素、考布他汀(combretatstatin)、卡奇霉素(calicheamicin)或纺锤菌素(netropsin)。在一些实施方案中，细胞毒素是奥瑞他汀、美登素类(maytansinoid)或卡奇霉素。在一些实施方案中，细胞毒素是AFP、MMAP、长春新碱、长春花碱、长春地辛、长春瑞滨、VP-16、喜树碱、紫杉醇、多西他赛、埃坡霉素A、埃坡霉素B、诺考达唑、秋水仙碱、秋水仙胺(colcimid)、雌莫司汀、西马多丁、圆皮海绵内酯、美登醇、美登素、DM1、DM2、DM3、DM4或五加素(eleutherobin)。在一些情况下，抗BCMA抗原结合蛋白是贝兰他单抗莫福汀(belantamab mafodotin)。在一些情况下，贝兰他单抗莫福汀以至少约0.5mg/kg、0.95mg/kg、1.25mg/kg、1.4mg/kg、1.7mg/kg、2.5mg/kg或3.4mg/kg的剂量存在于组合中。在一些实施方案中，抗BCMA抗原结合蛋白的治疗有效剂量为0.95mg/kg。在一些实施方案中，抗BCMA抗原结合蛋白的治疗有效剂量为1.0mg/kg。在一些实施方案中，抗BCMA抗原结合蛋白的治疗有效剂量为1.4mg/kg。在一些实施方案中，抗BCMA抗原结合蛋白的治疗有效剂量为1.9mg/kg。在一些实施方案中，抗BCMA抗原结合蛋白的治疗有效剂量为1.92mg/kg。在一些实施方案中，抗BCMA抗原结合蛋白的治疗有效剂量为2.5mg/kg。在一些实施方案中，抗BCMA抗原结合蛋白的治疗有效剂量为3.4mg/kg。在一些情况下，所述组合可以包含药学上可接受的载体。在一些情况下，所述组合还包含佐剂。在一些实施方案中，本文公开的CELMOD是美齐格米特(mezigdomide)(CC-92480)、伊伯多胺(iberdomide)(CC-220)、阿伐度胺(avadomide)(CC-122)、CC-90009、CC-99282、前述任一种的药学上可接受的盐或其任意组合。在一些情况下，本文公开的CELMOD以至少约0.1mg、0.2mg、0.3mg、0.4mg、0.5mg、0.6mg、0.7mg、0.8mg、0.9mg、1mg、1.1mg、1.2mg或1.3mg的剂量施用于受试者。

本文公开了治疗癌症的方法。在一些情况下，所述方法可以包括治疗有此需要的受试者的癌症，其包括向所述受试者施用治疗有效剂量的本文所公开的组合。在一些情况下，癌症选自由以下组成的组：多发性骨髓瘤、慢性淋巴细胞白血病、Waldenstrom巨球蛋白血症和非霍奇金淋巴瘤。在一些情况下，癌症是多发性骨髓瘤。在一些情况下，癌症是复发性和/或难治性多发性骨髓瘤。在一些情况下，受试者已经接受过至少一次先前的癌症治疗。在一些情况下，至少约每1-60天一次向受试者施用治疗有效剂量的组合。在一些情况下，至少约每3、4、6或8周(例如，21天)一次向受试者施用治疗有效剂量的组合。在一些情况下，至少约每8天一次向受试者施用治疗有效剂量的组合。在一些实施方案中，每周向受试者施用治疗有效剂量的抗BCMA抗原结合蛋白。在一些实施方案中，每2周向受试者施用治疗有效剂量的抗BCMA抗原结合蛋白。在一些实施方案中，每3周向受试者施用治疗有效剂量的抗BCMA抗原结合蛋白。在一些实施方案中，每4周向受试者施用治疗有效剂量的抗BCMA抗原结合蛋白。在一些实施方案中，每5周向受试者施用治疗有效剂量的抗BCMA抗原结合蛋白。在一些实施方案中，每6周向受试者施用治疗有效剂量的抗BCMA抗原结合蛋白。在一些实施方案中，在第一次施用后，抗BCMA抗原结合蛋白的治疗有效剂量的剂量逐步降低至本文所述的较低剂量。在一些情况下，与单独施用治疗有效量的抗BCMA抗原结合蛋白相比，施用治疗有效剂量的组合降低眼毒性。在一些情况下，抗BCMA抗原结合蛋白是贝兰他单抗莫福汀。在一些情况下，眼毒性至少是以下一种：角膜上皮变化、眼睛干涩、刺激、发红、视力模糊、眼睛干涩、畏光或视敏度变化。在一些情况下，通过以下方法中的至少一种来测量眼毒性：最佳矫正视力、明显屈光的记录和用于获得最佳矫正视力的方法、当前眼镜处方(如果适用)、眼内压测量、眼前节(裂隙灯)检查(包括角膜荧光素染色和晶状体检查)、散瞳眼底镜检查或眼表疾病指数(OSDI)。在一些情况下，本文公开的抗BCMA抗原结合蛋白以至少约0.5mg/kg、0.95mg/kg、1.25mg/kg、1.4mg/kg、1.7mg/kg、2.5mg/kg、3.4mg/kg或4.6mg/kg的剂量施用于受试者。在一些实施方案中，抗BCMA抗原结合蛋白的治疗有效剂量为0.95mg/kg。在一些实施方案中，抗BCMA抗原结合蛋白的治疗有效剂量为1.0mg/kg。在一些实施方案中，抗BCMA抗原结合蛋白的治疗有效剂量为1.4mg/kg。在一些实施方案中，抗BCMA抗原结合蛋白的治疗有效剂量为1.9mg/kg。在一些实施方案中，抗BCMA抗原结合蛋白的治疗有效剂量为1.92mg/kg。在一些实施方案中，抗BCMA抗原结合蛋白的治疗有效剂量为2.5mg/kg。在一些实施方案中，抗BCMA抗原结合蛋白的治疗有效剂量为3.4mg/kg。在一些实施方案中，每周向受试者施用治疗有效剂量的抗BCMA抗原结合蛋白。在一些实施方案中，每2周向受试者施用治疗有效剂量的抗BCMA抗原结合蛋白。在一些实施方案中，每3周向受试者施用治疗有效剂量的抗BCMA抗原结合蛋白。在一些实施方案中，每4周向受试者施用治疗有效剂量的抗BCMA抗原结合蛋白。在一些实施方案中，每5周向受试者施用治疗有效剂量的抗BCMA抗原结合蛋白。在一些实施方案中，每6周向受试者施用治疗有效剂量的抗BCMA抗原结合蛋白。在一些实施方案中，在第一次给药后，抗BCMA抗原结合蛋白的治疗有效剂量的剂量逐步降低至本文所述的较低剂量。在一些实施方案中，2.5mg/kg或3.4mg/kg剂量的抗BCMA抗原结合蛋白的治疗有效剂量的逐步降低至1.9mg/kg剂量。在一些实施方案中，治疗有效剂量的抗BCMA抗原结合蛋白在第1天、第8天和此后每3-12周施用于受试者。在一些情况下，组合还包含佐剂。在一些实施方案中，本文公开的CELMOD是美齐格米特(CC-92480)、伊伯多胺(CC-220)、阿伐度胺(CC-122)、CC-90009、CC-99282、前述任一种的药学上可接受的盐或其任意组合。在一些情况下，本文公开的CELMOD以至少约0.1mg、0.2mg、0.3mg、0.4mg、0.5mg、0.6mg、0.7mg、0.8mg、0.9mg、1mg、1.1mg、1.2mg或1.3mg的剂量施用于受试者。

本文公开了供使用的药物的制备。在一些情况下，本文公开了用于制备治疗癌症的药物的组合。本文公开了本文公开的组合用于治疗癌症的用途。

本文公开了试剂盒。在一些情况下，本文公开的试剂盒用于治疗癌症。在一些情况下，本文公开的试剂盒可以包含本文公开的组合和用于治疗癌症的说明书。

本文公开了预填充的注射器或自动注射器装置。在一些情况下，本文公开的预填充注射器或自动注射器装置可以包含本文公开的组合。

除非另有定义，否则本文所用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常理解的相同含义。尽管与本文所述的方法和材料类似或等同的方法和材料可用于实施本发明，但下文描述了合适的方法和材料。本文提及的所有出版物、专利申请、专利和其它参考文献均通过引用整体并入本文。此外，所述材料、方法和实施例仅是说明性的，而非限制性的。

本发明的一个或多个实施方案的细节在下面的描述中阐述。从说明书和权利要求书中，本发明的其它特征、目的和优点将是显而易见的。

具体实施方式

组合

本发明提供了用于治疗癌症的方法和材料。在一些情况下，本文公开了包含抗BCMA抗原结合蛋白和CELMOD的组合，其用于治疗癌症或其它B细胞介导的疾病或病症。

本文所述的术语“组合”是指至少两种治疗剂。如本文所用，术语“治疗剂”应理解为是指在组织、系统、动物、哺乳动物、人或其它受试者中产生所需效果的物质。在一个实施方案中，组合可以含有另外的治疗剂，如，例如另外的癌症治疗剂。在一个实施方案中，另外的癌症治疗剂可以是免疫调节酰亚胺类药物(IMiD)，例如沙利度胺、来那度胺、泊马度胺、阿普斯特、沙利度胺或其它沙利度胺类似物、硼替佐米、地塞米松或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，另外的癌症治疗剂可以是卡非佐米(carfilzomib)、达雷木单抗(daratumumab)、艾萨妥昔单抗(isatuximab)、伊沙佐米(ixazomib)、奥普佐米(oprozomib)、马利佐米(marizomib)或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，另外的癌症治疗剂是PD-1抑制剂。在一些情况下，PD-1抑制剂选自由以下组成的组：PDR001、纳武单抗(Nivolumab)、派姆单抗(Pembrolizumab)、匹迪利珠单抗(Pidilizumab)、MEDI0680、REGN2810、TSR-042、PF-06801591和AMP-224。在一些情况下，PD-1抑制剂是Jemperli。在一些实施方案中，另外的癌症治疗剂是PD-L1抑制剂。在一些情况下，PD-L1抑制剂选自由以下组成的组：FAZ053、阿替利珠单抗(Atezolizumab)、阿维鲁单抗(Avelumab)、德瓦鲁单抗(Durvalumab)和BMS-93655。在一些实施方案中，另外的癌症治疗剂是CTLA-4抑制剂。在一些情况下，CTLA-4抑制剂是伊匹木单抗(Ipilimumab)或曲美木单抗(Tremelimumab)。在一些情况下，另外的癌症治疗剂是TIM-3抑制剂。在一些情况下，TIM-3抑制剂是MGB453或TSR-022。在一些实施方案中，另外的癌症治疗剂是LAG-3抑制剂。在一些情况下，LAG-3抑制剂选自由以下组成的组：LAG525、BMS-986016和TSR-033。在一些实施方案中，另外的癌症治疗剂是mTOR抑制剂。在一些情况下，mTOR抑制剂是RAD001或雷帕霉素。

本文公开的组合的施用可以优于单独的治疗剂，因为当与单独的单一治疗剂的单独施用相比，组合可以提供一种或多种以下改进的特性：i)比最具活性的单一治疗剂更强的抗癌效果，ii)协同的或高度协同的抗癌活性，iii)提供增强的抗癌活性和降低的副作用概况的给药方案，iv)毒性作用概况的降低，v)治疗窗口的增加，或vi)一种或两种治疗剂的生物利用度的增加。

本文所述的组合可以是药物组合物的形式。“药物组合物”包含本文所述的组合和一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。载体、稀释剂或赋形剂必须在与制剂的其它成分相容的意义上是可接受的，能够用于药物制剂，并且对其接受者无害。在一个实施方案中，组合中的每种治疗剂可以单独配制成其自身的药物组合物，并且每种药物组合物可以施用以治疗癌症。在该实施方案中，每种药物组合物可以具有相同或不同的载体、稀释剂或赋形剂。

抗BCMA抗原结合蛋白

如本文所用，术语“抗BCMA抗原结合蛋白”是指能够结合BCMA的抗体和其它蛋白构建体，例如结构域。术语“BCMA结合蛋白”和“抗BCMA抗原结合蛋白”在本文中可互换使用。

本文所述的抗BCMA抗原结合蛋白可与人BCMA结合，所述人BCMA具有，包括，例如，含有GenBank登录号Q02223.2的氨基酸序列的人BCMA，或编码与其具有至少90％同源性或至少90％同一性的人BCMA的基因。

示例性抗BCMA抗原结合蛋白及其制备方法公开于国际公开号WO2012/163805，其全部内容通过引用并入本文。其他示例性抗BCMA抗原结合蛋白包括WO2016/014789、WO2016/090320、WO2016/090327、WO2016/020332、WO2016/079177、WO2014/122143、WO2014/122144、WO2017/021450、WO2016/014565、WO2014/068079、WO2015/166649、WO2015/158671、WO2015/052536、WO2014/140248、WO2013/072415、WO2013/072406、WO2014/089335、US2017/165373、WO2013/154760、WO2018/201051和WO2017/051068中描述的那些，它们中的每一个通过引用整体并入本文。

本文所用的术语“抗原结合蛋白”是指能够结合抗原的抗体和其它蛋白构建体，例如结构域。

术语“抗体”在本文中以最广泛的含义使用，是指具有免疫球蛋白样结构域的分子(例如IgG、IgM、IgA、IgD或IgE)，并且包括单克隆抗体、重组抗体、多克隆抗体、嵌合抗体、人抗体、人源化抗体、多特异性抗体，包括双特异性抗体和异源缀合抗体；单可变结构域(例如，结构域抗体(DAB))、抗原结合抗体片段、Fab、F(ab’)₂、Fv、二硫键连接的Fv、单链Fv、二硫键连接的scFv、双抗体、TANDABS等，以及任何前述的修饰型式。

在一些实施方案中，本文公开的BCMA结合蛋白可来源于大鼠、小鼠、灵长类动物(例如，食蟹猴、旧大陆猴或类人猿)或人。BCMA结合蛋白可以是人、人源化或嵌合抗体。BCMA结合蛋白可包含恒定区，其可以是任何同种型或亚类。恒定区可以是IgG同种型，例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4或其变体。BCMA结合蛋白恒定区可以是IgG1。

术语“全(full)”、“完整的(whole)”或“完整的(intact)”抗体在本文中可互换使用，是指异源四聚体糖蛋白。完整的抗体可以由通过共价二硫键连接的两条相同的重链(HC)和两条相同的轻链(LC)组成。该H₂L₂结构折叠形成三个功能域，包含两个抗原结合片段(称为“Fab”片段)和一个“Fc”可结晶片段。Fab片段可以由氨基末端的可变结构域(可变重链(VH)或可变轻链(VL))和羧基末端的恒定结构域(CH1(重链)和CL(轻链))组成。Fc片段可以由成对的CH2和CH3区域二聚化形成的两个结构域组成。Fc可通过与免疫细胞上的受体结合或通过结合C1q(经典补体途径的第一组分)来引发效应功能。五类抗体IgM、IgA、IgG、IgE和IgD由不同的重链氨基酸序列定义，分别称为μ、α、γ、ε和δ，每条重链可以与K或λ轻链配对。血清中的大多数抗体属于IgG类，人IgG有四种同种型(IgG1、IgG2、IgG3和IgG4)，其序列主要在铰链区不同。

如本文所用，“约”是指正或负10％。

全人抗体可以使用多种方法获得，例如使用基于酵母的文库或可以产生人抗体库的转基因动物(例如，小鼠)。可以使用基于FACS(荧光激活细胞分选)的方法或通过使用标记的抗原在珠子上捕获来选择在其表面上呈递与感兴趣的抗原结合的人抗体的酵母。已经被修饰以表达人免疫球蛋白基因的转基因动物可以用感兴趣的抗原进行免疫并使用B细胞分选技术分离抗原特异性人抗体。然后可以表征使用这些技术产生的人抗体的所需特性，例如亲和性、可开发性和选择性。

在一些方面，可以使用替代的抗体形式。替代的抗体形式包括替代的支架，其中BCMA抗体的一个或多个CDR可以排列在合适的非免疫球蛋白蛋白支架或骨架上，例如亲和体、SpA支架、LDL受体A类结构域、avimer(参见，例如，美国专利申请公开号2005/0053973、2005/0089932、2005/0164301)或EGF结构域。

术语“结构域”是指独立于多肽的其余部分而保持其三级结构的折叠多肽结构。通常，结构域负责多肽的分离的功能特性，并且在许多情况下可以被添加、去除或转移到其它多肽中，而不会丧失蛋白质和/或结构域的其余部分的功能。

术语“单可变结构域”是指包含抗体可变结构域特征性序列的折叠多肽结构域。它可以包括完整的抗体可变结构域如VH、VHH和VL和修饰的抗体可变结构域(例如，其中一个或多个环已被非抗体可变结构域特征性的序列取代)，或已被截短或包含N-或C-末端延伸的抗体可变结构域，以及保留至少全长结构域的结合活性和特异性的可变结构域的折叠片段。单可变结构域可以独立于不同的可变区或结构域结合抗原或表位。“结构域抗体”或“DAB”可被认为与“单可变结构域”相同。单可变结构域可以是人单可变结构域，但也可以包括来自其它物种的单可变结构域，例如啮齿动物(例如，如WO 00/29004A1中所公开的)、护士鲨和骆驼科动物VHH DAB。骆驼科动物VHH是来源于包括骆驼、美洲驼、羊驼、单峰骆驼和原驼的物种的免疫球蛋白单可变结构域多肽，其产生天然缺乏轻链的重链抗体。这种VHH结构域可以根据本领域可用的标准技术进行人源化，并且这种结构域可以被认为是“单可变结构域”。如本文所用，VH包括骆驼科动物VHH结构域。

抗原结合片段、BCMA结合蛋白片段、功能片段、生物活性片段或免疫有效片段可以包含部分重链或轻链可变序列。片段的长度可以至少为：5、6、8或10个氨基酸。可选地，片段的长度可以是至少15、至少20、至少50、至少75或至少100个氨基酸。

可以通过在非抗体蛋白质支架上排列一个或多个CDR来提供抗原结合片段。如本文所用的“蛋白质支架”包括但不限于免疫球蛋白(Ig)支架，例如IgG支架，其可以是四链或两链抗体，或者其可以仅包含抗体的Fc区，或者其可以包含来自抗体的一个或多个恒定区，所述恒定区可以是人或灵长类来源的，或者可以是人和灵长类恒定区的人工嵌合体。

蛋白质支架可以是Ig支架，例如IgG或IgA支架。IgG支架可以包含抗体的一些或全部结构域(即CH1、CH2、CH3、VH、VL)。本文公开的抗原结合蛋白可包含选自IgG1、IgG2、IgG3、IgG4或IgG4PE的IgG支架。例如，支架可以是IgG1。支架可以由抗体的Fc区组成或包含抗体的Fc区，或者是抗体的Fc区的一部分。

蛋白质支架可以是选自由以下组成的组的支架的衍生物：CTLA-4、脂质运载蛋白、蛋白A衍生分子如蛋白A的Z结构域(Affibody，SPA)、A结构域(Avimer/Maxibody)；热休克蛋白如GroEL和GroES；转铁蛋白(trans-body)；锚蛋白重复蛋白(DARPin)；肽适配体；C型凝集素结构域(四连蛋白)；人γ晶体蛋白和人泛素(affilin)；PDZ结构域；人蛋白酶抑制剂的蝎毒素kunitz型结构域；和纤连蛋白/adnectin；其已经进行了蛋白质工程化以获得与除天然配体以外的抗原的结合。

术语“抗原结合位点”是指抗原结合蛋白上能够特异性结合抗原的位点，其可以是单可变结构域，或者可以是可在标准抗体上发现的成对VH/VL结构域。单链Fv(scFv)结构域也可以提供抗原结合位点。

术语多特异性抗原结合蛋白是指包含至少两个不同抗原结合位点的抗原结合蛋白。这些抗原结合位点中的每一个都能够结合不同的表位，所述表位可以存在于相同抗原或不同抗原上。多特异性抗原结合蛋白可以对多于一种抗原具有特异性，例如两种抗原，或三种抗原，或四种抗原。

双特异性抗体的分类和形式在Labrijn et al 2019和Brinkmann andKontermann 2017的综述中进行了全面描述。双特异性通常可分为具有对称或不对称结构。双特异性可以具有Fc或者可以是基于片段的(缺少Fc)。基于片段的双特异性将多个抗原结合抗体片段组合在一个分子中而没有Fc区，例如Fab-scFv、Fab-scFv₂、正交Fab-Fab、Fab-Fv、串联scFc(例如BiTE和BiKE分子)、双抗体、DART、TandAb、scDiabody、串联dAb等。

对称形式在单个多肽链或单个HL对中组合了多种结合特异性，包括基于片段的形式的Fc融合蛋白和抗体片段与常规抗体分子融合的形式。对称形式的实例可包括DVD-Ig、TVD-Ig、CODV-Ig、(scFv)4-Fc、IgG-(scFv)2、四价DART-Fc、F(ab)₄CrossMab、IgG-HC-scFv、IgG-LC-scFv、mAb-dAb等。

不对称形式通过在共表达三条(如果使用常规重链或轻链)或四条多肽链期间强制正确的HL链配对和/或促进H链异二聚化而尽可能接近地保留天然抗体的天然结构，所述多肽链例如Triomab、不对称重工程化技术免疫球蛋白(ART-Ig)、CrossMab、Biclonics通用轻链、ZW1通用轻链、DuoBody和knobs into holes(KiH)、Duetmab、κλbody、Xmab、YBODY、HET-mAb、HET-Fab、DART-Fc、SEEDbody、小鼠/大鼠嵌合IgG。

双特异性形式还包括与非Ig支架融合的抗体，例如AffiMAb、FynomAb、Zybody和Anticalin-IgG融合物、ImmTAC。在一些实施方案中，本文所述的抗原结合蛋白是多特异性抗原结合蛋白。

本文所用的术语“嵌合抗原受体”(“CAR”)是指由胞外抗原结合结构域(其通常衍生自单克隆抗体或其片段，例如scFv形式的VH结构域和VL结构域)、任选的间隔区、跨膜区和一个或多个胞内效应结构域组成的工程化受体。CAR也被称为嵌合T细胞受体或嵌合免疫受体(CIR)。CAR可以经遗传引入造血细胞，例如T细胞，以重定向T细胞对期望的细胞表面抗原的特异性，从而产生CAR-T治疗剂。在一些实施方案中，CAR包含本文公开的抗BCMA抗原结合蛋白。

本文所用的术语“间隔区”是指具有连接跨膜结构域与靶标结合结构域的功能的寡肽或多肽。该区域也可称为“铰链区”或“茎区”。间隔区的大小可以根据靶表位的位置而变化，以在CAR：靶结合时保持设定的距离(例如，14nm)。

本文所用的术语“跨膜结构域”是指CAR分子穿过细胞膜的部分。

本文所用的术语“胞内效应结构域”(也称为“信号传导结构域”)是指CAR中负责抗原结合结构域与靶标结合后的胞内信号传导的结构域。胞内效应结构域可以负责激活其中表达CAR的免疫细胞的至少一种正常的效应功能。例如，T细胞的效应功能可以是细胞溶解活性或辅助活性，包括细胞因子的分泌。

本领域技术人员应当理解，本文公开的VH和/或VL结构域可以，例如，以scFv的形式并入到CAR-T治疗剂中。

亲和力，也称为“结合亲和力”，是在单个相互作用位点，即一个分子(例如，本文公开的BCMA结合蛋白)与另一个分子(例如，其靶抗原)在单个结合位点的结合强度。抗原结合蛋白与其靶标的结合亲和力可以通过平衡法(例如，酶联免疫吸附测定(ELISA)或放射免疫测定(RIA))或动力学(例如，BIACORE分析)来确定。

亲合力，也称为功能亲和力，是在多个相互作用位点结合的累积强度，例如两个分子(或更多，例如在双特异性或多特异性分子的情况下)在多个位点彼此结合的强度的总和，例如，考虑相互作用的价。

在一个实施方案中，本文公开的抗原结合蛋白-抗原相互作用的平衡解离常数(KD)可以是100nM或更小、10nM或更小、2nM或更小或1nM或更小。可选地，KD可以在5和10nM之间；或在1和2nM之间。KD可以在1pM和500pM之间；或者在500pM和1nM之间。本领域技术人员将理解，KD数值越小，结合越强。KD的倒数(即1/KD)是具有单位M^-1的平衡缔结合常数(KA)。本领域技术人员将理解，KA数值越大，结合越强。

解离速率常数(kd)或“解离速率”描述了抗原结合蛋白-复合物的稳定性，即每秒衰变的复合物的分数。例如，0.01s^-1的kd相当于每秒衰变复合物的1％。在一个实施方案中，解离速率常数(kd)可以是1×10^-3s^-1或更小，1×10^-4s^-1或更小，1×10^-5s^-1或更小，或1×10^- ⁶s^-1或更小。kd可以在1×10^-5s^-1和1×10^-4s^-1之间；或者在1x10^-4 s^-1和1x10^-3 s^-1之间。在一些实施方案中，本文公开的抗原结合蛋白的kd可以是2.06×10^-4s^-1或更小、1.58×10^-4s^-1或更小、1.7×10^-4s^-1或更小、或5.68×10^-4s^-1或更小、6.78×10^-4s^-1或更小、8.26×10^-4s^-1或更小、5.15x10^-4 s^-1或更小，或5.68x10^-4 s^-1或更小。

结合速率常数(ka)或“结合速率”描述了抗原结合蛋白-复合物形成的速率。在实施方案中，结合速率常数(ka)可以是6.49×10⁶M^-1s^-1、4.65×10⁶M^-1s^-1、3.27×10⁶M^-1s^-1、8.28×10⁶M^-1s^-1、1.47×10⁷M^-1s^-1、1.10x10⁷M^-1s^-1或5.90x10⁶M^-1s^-1。

对于本领域的技术人员来说显而易见的是，术语“衍生的”不仅用于定义作为材料的物理来源的来源，而且还可以定义在结构上与该材料相同但不是源自参考来源的材料。

“分离的”是指将分子如BCMA结合蛋白从其可能天然存在的环境中除去。例如，可以将分子从其通常天然存在的物质中纯化出来。例如，相对于含有BCMA结合蛋白的培养基，可以将BCMA结合蛋白纯化至至少95％、96％、97％、98％或99％或更高。本文公开的BCMA结合蛋白和抗体可以是分离的BCMA结合蛋白和抗体。

“CDR”定义为抗原结合蛋白的互补决定区氨基酸序列。这些是免疫球蛋白重链和轻链的高变区。在免疫球蛋白的可变部分中有三个重链CDR和三个轻链CDR(或CDR区)。因此，本文所用“CDR”是指所有三个重链CDR、所有三个轻链CDR、所有重链和轻链CDR或至少两个CDR。

在本说明书中，全长抗原结合序列内，例如抗体重链序列或抗体轻链序列内，可变结构域序列和可变结构域区域中的氨基酸残基根据Kabat编号惯例进行编号。类似地，实施例中使用的术语“CDR”、“CDRL1”、“CDRL2”、“CDRL3”、“CDRH1”、“CDRH2”、“CDRH3”遵循Kabat编号惯例。对于进一步的信息，参见Kabat et al.,Sequences of Proteins ofImmunological Interest,4th Ed.,U.S.Department of Health and Human Services,National Institutes of Health(1987)。

变体

对于本领域技术人员显而易见的是，可变结构域序列和全长抗体序列中的氨基酸残基有可供选择的编号惯例。CDR序列也有可供选择的编号惯例，例如Chothia et al.(1989)Nature 342:877-883中提出的那些。例如，BCMA结合蛋白的结构和蛋白折叠可以意味着其它残基可以被认为是CDR序列的一部分，并且本领域技术人员将理解为如此。

本领域技术人员可获得的CDR序列的其它编号惯例包括“AbM”(巴斯大学)和“contact”(伦敦大学学院)方法。可以确定使用Kabat、Chothia、AbM和contact方法中的至少两种的最小重叠区域，以提供“最小结合单元”。最小结合单元可以是CDR的子部分。

下面的表1表示针对每个CDR或结合单元使用每个编号惯例的一个定义。表1中使用Kabat编号方案对可变结构域氨基酸序列进行编号。应当注意，一些CDR定义可能根据所使用的各个出版物而变化。

表1.每个CDR或结合单元的示例性编号惯例

相应地，提供了BCMA结合蛋白，其可以包含下列CDR中的任一种或组合：SEQ IDNO:1的CDRH1、SEQ ID NO:2的CDRH2、SEQ ID NO:3的CDRH3、SEQ ID NO:4的CDRL1、SEQ IDNO:5的CDRL2、SEQ ID NO:6的CDRL3。CDR可以通过至少一种氨基酸取代、缺失或添加来修饰，其中变体抗原结合蛋白基本上保留了未修饰蛋白的生物学特性，例如与抗原结合。

表2.抗BCMA抗原结合蛋白的示例性CDR序列

应当理解，CDR H1、H2、H3、L1、L2、L3中的每一个可以被单独修饰，或者以任何排列或组合与任何其他CDR组合修饰。在一个实施方案中，可以通过取代、缺失或添加至多3个氨基酸，例如1或2个氨基酸，例如1个氨基酸来修饰CDR。通常，修饰可以是取代，特别是保守取代，例如如下表3所示。

表3:示例性取代

侧链	成员
		疏水性的	Met,Ala,Val,Leu,Ile
中性亲水	Cys,Ser,Thr
		酸性的	Asp,Glu
碱性的	Asn,Gln,His,Lys,Arg
		影响链取向的残基	Gly,Pro
芳香族的	Trp,Tyr,Phe

例如，在变体CDR中，包含CDR的侧翼残基作为可选定义的一部分，例如Kabat或Chothia，可以被保守氨基酸残基取代。

本文公开的VH或VL(或HC或LC)序列可以是具有至多10个氨基酸取代、添加或缺失的变体序列。例如，变体序列可以具有至多9、8、7、6、5、4、3、2或1个氨基酸取代、添加或缺失。序列变化可以排除一个或多个或所有CDR，例如CDR与VH或VL(或HC或LC)序列相同，并且变化在VH或VL(或HC或LC)序列的剩余部分中，使得CDR序列是固定的和完整的。

可选地，重链可变区可与本文所述抗体的氨基酸序列具有75％或更高、80％或更高、85％或更高、90％或更高、95％或更高、98％或更高、99％或更高或100％的同一性；且轻链可变区可以与本文公开的抗体的氨基酸序列具有75％或更高、80％或更高、85％或更高、90％或更高、95％或更高、98％或更高、99％或更高或100％的同一性。

本文公开的抗体或氨基酸序列的重链可变区可以是可含有30、25、20、15、10、9、8、7、6、5、4、3、2或1个氨基酸取代、插入或缺失的变体。本文公开的抗体或氨基酸序列的轻链可变区可以是可含有30、25、20、15、10、9、8、7、6、5、4、3、2或1个氨基酸取代、插入或缺失的变体。

本文所用的术语“表位”是指与抗原结合蛋白的特定结合结构域接触的抗原部分，也称为互补位。表位可以是线性或构象/不连续的。构象或不连续的表位可以包含被其它序列分开的氨基酸残基，即通过多肽链的三级折叠组装的不在抗原的一级序列中的连续序列。尽管这些残基可以来自多肽链的不同区域，但它们在抗原的三维结构中非常接近。在多聚体抗原的情况下，构象或不连续表位可以包含来自不同肽链的残基。包含在表位内的特定残基可以通过计算机建模程序或通过本领域已知的方法(例如X射线晶体学)获得的三维结构来确定。示例性方法包括基于肽的方法，例如肽扫描(pepscan)，由此使用诸如ELISA的技术或通过肽或蛋白质突变体的大文库的体外展示(例如，在噬菌体上)来筛选一系列重叠肽的结合。详细的表位信息可以通过结构技术确定，包括X射线晶体学、溶液核磁共振(NMR)光谱和低温电子显微镜(cryo-EM)。突变，例如丙氨酸扫描，可以是一种有效的方法，由此结合分析的缺失用于表位作图。另一种方法是氢/氘交换(HDX)结合蛋白水解和液相色谱质谱(LC-MS)分析来表征不连续或构象表位。

同一性百分比

查询核酸序列和目标核酸序列之间的“同一性百分比”是使用合适的算法或软件(如BLASTN、FASTA、ClustalW、MUSCLE、MAFFT、EMBOSS Needle、T-Coffee和DNASTARLasergene)进行成对全局序列比对之后，在查询序列的整个长度上，使用合适的算法或软件(如BLASTN、FASTA、DNASTAR Lasergene、GeneDoc、Bioedit、EMBOSS needle或EMBOSSinfoalign)计算的以百分比表示的“同一性”值。在一些情况下，查询核酸序列可以通过在本文的一项或多项权利要求中指定的核酸序列来描述。

查询氨基酸序列和目标氨基酸序列之间的“同一性百分比”是使用合适的算法/软件(如BLASTP、FASTA、ClustalW、MUSCLE、MAFFT、EMBOSS Needle、T-Coffee和DNASTARLasergene)进行成对全局序列比对之后，在查询序列的整个长度上，使用合适的算法或软件(如BLASTP、FASTA、DNASTAR Lasergene、GeneDoc、Bioedit、EMBOSS needle或EMBOSSinfoalign)计算的以百分比表示的“同一性”值。在一些情况下，查询氨基酸序列可以通过在本文的一项或多项权利要求中指定的氨基酸序列来描述。

查询序列可以与目标序列100％相同，或者与目标序列相比，它可以包括至多某个整数的氨基酸或核苷酸改变，使得％同一性可以小于100％。例如，查询序列可以与目标序列至少50、60、70、75、80、85、90、95、96、97、98或99％相同。此类改变包括至少一个氨基酸缺失、取代(包括保守和非保守取代)或插入，并且其中所述改变可以发生在查询序列的氨基或羧基末端位置或这些末端位置之间的任何位置，或者单独散布在查询序列的氨基酸或核苷酸中，或者散布在查询序列内的一个或多个连续组中。

可以在包括CDR的查询序列的整个长度上确定％同一性。可选地，％同一性可以排除一个或多个或所有的CDR，例如所有的CDR可以与目标序列100％相同，并且％同一性变化可以在查询序列的剩余部分中，例如框架序列中，使得CDR序列可以是固定的和完整的。在一些实施方案中，本文公开的抗BCMA结合蛋白包含与本文公开的序列至少约50、60、70、75、80、85、90、95、96、97、98或99％相同的序列。

修饰

术语“肽”、“多肽”和“蛋白质”各自是指包含两个或多个氨基酸残基的分子。肽可以是单体或聚合物。本文公开的肽可以被修饰。

Fc工程化方法可用于修饰抗体的功能或药代动力学特性。可以通过在Fc区进行突变来改变效应功能，所述突变分别增加或减少与C1q或Fcγ受体的结合并改变CDC或ADCC活性。也可以对抗体的糖基化模式进行修饰以改变效应功能。抗体的体内半衰期可以通过产生影响Fc与FcRn(新生儿Fc受体)结合的突变来改变。

效应功能

本文所用的术语“效应功能”是指一种或多种抗体介导的效应，包括抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)、抗体介导的补体激活，包括补体依赖性细胞毒性(CDC)、补体依赖性细胞介导的吞噬作用(CDCP)、抗体依赖性补体介导的细胞裂解(ADCML)和Fc介导的吞噬作用或抗体依赖性细胞吞噬作用(ADCP)。

抗原结合蛋白或抗体的Fc区与各种Fc受体(FcR)，包括FcγRI(CD64)、FcγRII(CD32)、FcγRIII(CD16)、FcRn、C1q和II型Fc受体之间的相互作用被认为介导抗原结合蛋白或抗体的效应功能。显著的生物学效应可以是效应功能的结果。通常，介导效应功能的能力需要抗原结合蛋白或抗体与抗原的结合，并且不是所有的抗原结合蛋白或抗体都介导每种效应功能。

效应功能可以以多种方式评估，包括，例如，评估由自然杀伤(NK)细胞经由FcγRIII介导的、或由单核细胞/巨噬细胞经由FcγRI介导的包被到靶细胞的抗体的ADCC效应功能，或评估由补体级联经由C1q介导的包被到靶细胞的抗体的CDC效应功能。例如，可以在自然杀伤细胞测定中评估本发明的抗原结合蛋白的ADCC效应功能。这种测定的实例可以在Shields et al,2001,The Journal of Biological Chemistry,Vol.276,p.6591-6604；Chappel et al,1993,The Journal of Biological Chemistry,Vol 268,p.25124-25131；Lazar et al,2006,PNAS,103；4005-4010中找到。确定CDC功能的测定的实例包括在JImmMeth,1995,184:29-38中描述的那些。突变对效应功能(例如，FcRn结合、FcγRs和C1q结合、CDC、ADCML、ADCC、ADCP)的影响可以评估，例如，如Grevys et al.,J Immunol.2015Jun 1；194(11):5497–5508,或Tam et al.,Antibodies 2017,6(3)；Monnet et al.,2014mAbs,6:2,422-436中所述。在整个说明书中，抗体序列或全长抗原结合蛋白序列中的Fc区中的氨基酸残基根据EU索引编号惯例进行编号。

增强

含有特定突变的人IgG1恒定区已显示增强与Fc受体的结合。在一些情况下，这些突变也显示出增强效应功能，如ADCC和CDC，如下所述。本发明的抗原结合蛋白可包括任何以下突变。

增强的CDC：Fc工程化可用于增强基于补体的效应功能。例如(参考IgG1)，K326W/E333S；S267E/H268F/S324T；和IgG1/IgG3交叉亚类可增加C1q结合；E345R(Diebolder etal.,Science 2014；343:1260-1293)和E345R/E430G/S440Y导致预先形成的IgG六聚体(Wang et al.,Protein Cell.2018Jan；9(1):63–73)。

增强的ADCC：Fc工程化可用于增强ADCC。例如(参考IgG1)，F243L/R292P/Y300L/V305I/P396L；S239D/I332E；和S298A/E333A/K334A增加FcγRIIIa结合；S239D/I332E/A330L增加FcγRIIIA结合并降低FcγRIIb结合；G236A/S239D/I332E提高与FcγRIIa的结合，提高FcγRIIa/FcγRIIb结合比例(激活/抑制比例)，并增强巨噬细胞对抗体包被的靶细胞的吞噬作用。其中一条重链含有L234Y/L235Q/G236W/S239M/H268D/D270E/S298A突变且另一条重链含有D270E/K326D/A330M/K334E突变的不对称Fc增加对FcγRIIIa F158(亲和力较低的等位基因)和FcγRIIIa V158(亲和力较高的等位基因)的亲和力，而对抑制性FcγRIIb的结合亲和力不增加(Mimoto et al.,2013)。

增强的ADCP：Fc工程化可用于增强ADCP。例如(参考IgG1)，G236A/S239D/I332E增加FcγRIIa结合并增加FcγRIIIa结合(Richards J et al.,Mol.Cancer Ther.2008；7:2517-2527)。

增加的共同参与：Fc工程化可用于增加与FCR的共同参与。例如(参考IgG1)，S267E/L328F增加FcγRIIb结合；N325S/L328F增加FcγRIIa结合并降低FcγRIIIa结合(Wang et al.2018)。

糖基化

本发明的抗原结合蛋白可包含具有改变的糖基化概况的重链恒定区，使得抗原结合蛋白具有增强的效应功能，例如增强的ADCC、增强的CDC或增强的ADCC和CDC两者。在WO2003011878、WO2006014679和EP1229125中描述了产生具有改变的糖基化概况的抗原结合蛋白的合适方法的实例，所有这些方法都可以应用于本发明的抗原结合蛋白。

IgG1抗体的N297上的Fc聚糖部分上的α1,6最内部岩藻糖残基的缺失增强对FcγRIIIa的亲和力。因此，非岩藻糖基化或低岩藻糖基化的单克隆抗体可以具有增加的治疗功效(Shields et al.,J Biol Chem.2002,277(30):26733-40和Monnet et al.,2014,mAbs,6:2,422-436)。

Potelligent

本发明还提供生产根据本发明的抗原结合蛋白的方法，其包含以下步骤：

a)培养包含表达载体的重组宿主细胞，所述表达载体包含如本文所述的分离的核酸，其中编码α-1,6-岩藻糖基转移酶的FUT8基因已在重组宿主细胞中失活；和

b)回收抗原结合蛋白。

用于生产抗原结合蛋白的此类方法可以例如使用可从BioWa,Inc.(Princeton,NJ)获得的POTELLIGENT技术系统来进行，其中缺乏FUT8基因的功能性拷贝的CHOK1SV细胞产生相对于在US7214775、US6946292、WO0061739和WO0231240中所述的具有功能性FUT8基因的细胞中产生的相同单克隆抗体具有增强的ADCC活性的单克隆抗体，所有这些文献均通过引用并入本文。本领域普通技术人员还将认识到其它合适的系统。

在本发明的实施方案中，抗原结合蛋白在其中FUT8基因已经失活的宿主细胞中生产。在本发明的实施方案中，抗原结合蛋白在-/-FUT8宿主细胞中生产。在本发明的实施方案中，抗原结合蛋白在Asn297(IgG1)是非岩藻糖基化的。

其他修饰

在一些实施方案中，可能需要修饰本文公开的抗原结合蛋白的效应功能，例如增强ADCC或CDC、半衰期等。在实施方案中，抗原结合蛋白可以是Fc失活的。实现Fc失活的一种方式可以包括取代重链恒定区的位置235和237(EU索引编号)处的丙氨酸残基。可选地，抗原结合蛋白可以是Fc激活的，并且在235和237位不包含丙氨酸取代。抗原结合蛋白在人体内或在鼠类动物模型中的半衰期可以为至少6小时、至少1天、至少2天、至少3天、至少4天、至少5天、至少7天或至少9天。

抗体的Fc效应部分的突变变化可用于改变FcRn与抗体之间相互作用的亲和力以调节抗体周转。抗体在体内的半衰期可以延长。这可能对患者群体有益，因为维持体内IC₅₀更长时间可以达到最大剂量和最大给药频率。

在一些实施方案中，包含恒定区的抗原结合蛋白可具有降低的ADCC和/或补体激活或效应功能。恒定区可包含IgG2或IgG4同种型的天然失活恒定区或突变的IgG1恒定区。在EP0307434中描述了合适的修饰的实例。实现Fc失活的一种方式可包括取代重链恒定区的位置235和237(EU索引编号)处的丙氨酸残基，即L235A和G237A(通常称为“LAGA”突变)。另一个实例可包括在位置234和235(EU索引编号)处用丙氨酸取代，即L234A和L235A(通常称为“LALA”突变)。在一些实施方案中，可以使用LAGA突变使本文公开的抗原结合蛋白的Fc效应功能失活。

降低效应功能的其它改变和突变可包括：(参考IgG1，除非另有说明)：糖基化的N297A或N297Q或N297G；L235E；IgG4:F234A/L235A；和嵌合IgG2/IgG4。IgG2:H268Q/V309L/A330S/P331S和IgG2:V234A/G237A/P238S/H268A/V309L/A330S/P331S可减少FcγR和C1q结合(US 8,961,967)。

降低效应功能的其它突变可包括L234F/L235E/P331S；使用来自人IgG2的CH1和铰链区以及来自人IgG4的CH2和CH3区产生的嵌合抗体；IgG2m4，基于IgG2同种型，具有衍生自IgG4的四个关键氨基酸残基变化(H268Q、V309L、A330S和P331S)；IgG2σ，其含有V234A/G237A/P238S/H268A/V309L/A330S/P331S取代以消除对Fcγ受体和C1q补体蛋白的亲和力；IgG2m4(H268Q/V309L/A330S/P331S，变为IgG4)；IgG4(S228P/L234A/L235A)；huIgG1L234A/L235A(AA)；huIgG4 S228P/L234A/L235A；IgG1σ(L234A/L235A/G237A/P238S/H268A/A330S/P331S)；IgG4σ1(S228P/F234A/L235A/G237A/P238S)；和IgG4σ2(S228P/F234A/L235A/G236/G237A/P238S)。

在一些实施方案中，本文公开的抗原结合蛋白可包含选自突变的恒定结构域的一个或多个修饰，使得抗体具有增强的效应功能/ADCC和/或补体激活。在US6737056、WO2004063351和WO2004029207中描述了合适的修饰的实例。抗原结合蛋白可包含具有改变的糖基化概况的恒定结构域，使得抗原结合蛋白具有增强的效应器功能/ADCC和/或补体激活。WO2003/011878、WO2006/014679和EP1229125中描述了产生具有改变的糖基化概况的抗原结合蛋白的合适方法的实例。

半衰期

半衰期是指抗原结合蛋白的血清浓度达到其原始值的一半所需的时间。根据Kimet al.,1994,Eur.J.of Immuno.24:542-548描述的方法，可以通过药代动力学研究来测量蛋白质的血清半衰期。根据该方法，将放射性标记的蛋白质静脉注射到小鼠中，并定期测量其血浆浓度作为时间的函数，例如，在注射后约3分钟至约72小时。用于药代动力学分析和确定分子半衰期的其它方法是本领域技术人员所熟悉的。

本发明的抗原结合蛋白可具有增加恒定结构域或其片段对FcRn的亲和力的氨基酸修饰。增加治疗性和诊断性IgG抗体和其它生物活性分子的半衰期(即，血清半衰期)具有许多益处，包括减少这些分子的给药量和/或给药频率。在一个实施方案中，本发明的抗原结合蛋白包含具有一个或多个以下氨基酸修饰的IgG恒定结构域的全部或部分(FcRn结合部分)。

例如，参考IgG1，M252Y/S254T/T256E(通常称为“YTE”突变)和M428L/N434S(通常称为“LS”突变)在pH6.0增加FcRn结合(Wang et al.2018)。

T250Q/M428L、V259I/V308F/M428L、N434A和T307A/E380A/N434A突变(参考IgG1和Kabat编号)也可以增加半衰期(Monnet et al.)。

半衰期和FcRn结合也可以通过引入H433K和N434F突变(通常称为“HN”或“NHance”突变)(参考IgG1)来延长(WO2006/130834)。

WO00/42072公开了包含具有改变的FcRn结合亲和力的变体Fc区的多肽，所述多肽在Fc区(EU索引编号)的氨基酸位置238、252、253、254、255、256、265、272、286、288、303、305、307、309、311、312、317、340、356、360、362、376、378、380、386、388、400、413、415、424、433、434、435、436、439和447中的任何一处或多处包含氨基酸修饰。

WO02/060919公开了修饰的IgG，其包含IgG恒定结构域，该IgG恒定结构域包含相对于野生型IgG恒定结构域的一个或多个氨基酸修饰，其中与具有野生型IgG恒定结构域的IgG的半衰期相比，所述修饰的IgG具有增加的半衰期，并且其中所述一个或多个氨基酸修饰在251、253、255、285-290、308-314、385-389和428-435位置中的一处或多处。

Shields et al.(2001,J Biol Chem；276:6591-604)使用丙氨酸扫描突变来改变人IgG1抗体的Fc区中的残基，然后评估与人FcRn的结合。当改变为丙氨酸时有效消除与FcRn结合的位置包括I253、S254、H435和Y436。其他位置显示出不太明显的结合减少：E233-G236、R255、K288、L309、S415和H433。当改变为丙氨酸时，几个氨基酸位置表现出FcRn结合的改善；其中值得注意的是P238、T256、E272、V305、T307、Q311、D312、K317、D376、E380、E382、S424和N434。许多其他氨基酸位置表现出FcRn结合的轻微改善(D265、N286、V303、K360、Q362和A378)或无变化(S239、K246、K248、D249、M252、E258、T260、S267、H268、S269、D270、K274、N276、Y278、D280、V282、E283、H285、T289、K290、R292、E293、E294、Q295、Y296、N297、S298、R301、N315、E318、K320、K322、S324、K326、A327、P329、P331、E333、K334、T335、S337、K338、K340、Q342、R344、E345、Q345、Q347、R356、M358、T359、K360、N361、Y373、S375、S383、N384、Q386、E388、N389、N390、K392、L398、S400、D401、K414、R416、Q418、Q419、N421、V422、E430、T437、K439、S440、S442、S444和K447)。

关于改善的FcRn结合的最显著效果是在组合变体中发现的。在pH 6.0时，相对于天然IgG1，E380A/N434A变体显示与FcRn的结合好8倍以上，而E380A为2倍，N434A为3.5倍。向其中加入T307A导致相对于天然IgG1的结合的12倍提高。在一个实施方案中，本发明的抗原结合蛋白包含E380A/N434A突变并具有增加的与FcRn的结合。

Dall’Acqua et al.(2002,J Immunol.；169:5171-80)描述了针对小鼠FcRn的人IgG1铰链Fc片段噬菌体展示文库的随机突变和筛选。他们公开了251、252、254-256、308、309、311、312、314、385-387、389、428、433、434和436位置的随机突变。IgG1-人FcRn复合物稳定性的主要改善发生在取代位于Fc-FcRn界面带中的残基时(M252、S254、T256、H433、N434和Y436)，以及在较小程度上取代外围的残基，如V308、L309、Q311、G385、Q386、P387和N389。通过组合M252Y/S254T/T256E(“YTE”)和H433K/N434F/Y436H突变获得对人FcRn具有最高亲和力的变体，并且相对于野生型IgG1表现出57倍的亲和力增加。与野生型IgG1相比，这种突变的人IgG1在食蟹猴中的体内表现展现出近4倍的血清半衰期增加。

因此，本发明提供了具有优化的与FcRn结合的抗原结合蛋白。在一些实施方案中，抗原结合蛋白在所述抗原结合蛋白的Fc区中包含至少一个氨基酸修饰，其中所述修饰在选自由以下组成的组的氨基酸位置：Fc区的226、227、228、230、231、233、234、239、241、243、246、250、252、256、259、264、265、267、269、270、276、284、285、288、289、290、291、292、294、297、298、299、301、302、303、305、307、308、309、311、315、317、320、322、325、327、330、332、334、335、338、340、342、343、345、347、350、352、354、355、356、359、360、361、362、369、370、371、375、378、380、382、384、385、386、387、389、390、392、393、394、395、396、397、398、399、400、401、403、404、408、411、412、414、415、416、418、419、420、421、422、424、426、428、433、434、438、439、440、443、444、445、446和447。

此外，各种出版物描述了通过将FcRn结合多肽引入分子中(WO97/43316、US5869046、US5747035、WO96/32478和WO91/14438)，或者通过将分子与抗体(其FcRn结合亲和力被保留，但对其他Fc受体的亲和力已大大降低)融合(WO99/43713)，或者与抗体的FcRn结合结构域融合(WO00/09560、US4703039)来获得具有改变的半衰期的生理活性分子的方法。

在pH 6.0的筛选中鉴定了FcRn亲和力增强的Fc变体，以提高抗体的细胞毒性和半衰期。所选择的IgG变体可以作为低岩藻糖基化分子产生。所得变体在hFcRn小鼠中显示出增加的血清持久性，以及保守的增强的ADCC(Monnet et al.)。示例性变体包括(参考IgG1和Kabat编号)：P230T/V303A/K322R/N389T/F404L/N434S；P228R/N434S；Q311R/K334R/Q342E/N434Y；C226G/Q386R/N434Y；T307P/N389T/N434Y；P230S/N434S；P230T/V305A/T307A/A378V/L398P/N434S；P23OT/P387S/N434S；P230Q/E269D/N434S；N276S/A378V/N434S；T307A/N315D/A330V/382V/N389T/N434Y；T256N/A378V/S383N/N434Y；N315D/A330V/N361D/A387V/N434Y；V259I/N315D/M428L/N434Y；P230S/N315D/M428L/N434Y；F241L/V264E/T307P/A378V/H433R；T250A/N389K/N434Y；V305A/N315D/A330V/P395A/N434Y；V264E/Q386R/P396L/N434S/K439R；E294del/T307P/N434Y(其中“del”表示缺失)。

抗体药物偶联物

还提供了免疫偶联物(可互换地称为“抗体-药物偶联物”、“ADC”或“抗原结合蛋白-药物偶联物”)，其包含与一种或多种药物偶联的根据本公开的抗原结合蛋白，所述药物例如细胞毒性剂，如化疗剂、免疫治疗剂、生长抑制剂、毒素(例如蛋白质毒素，如细菌、真菌、植物或动物来源的酶活性毒素或其片段)、抗病毒剂、放射性同位素(即，放射性偶联物)、抗生素或小干扰RNA(siRNA)。

在癌症的治疗中，免疫偶联物已被用于局部递送细胞毒性剂，即杀死或抑制细胞生长或增殖的药物(Lambert,J.(2005)Curr.Opinion in Pharmacology5:543-549；Wu etal.(2005)Nature Biotechnology 23(9):1137-1146；Payne,G.(2003)i 3:207-212；Syrigos and Epenetos(1999)Anticancer Research 19:605-614；Niculescu-Duvaz andSpringer(1997)Adv.Drug Deliv.Rev.26:151-172；U.S.Pat.No.4,975,278)。免疫偶联物尤其允许将药物部分靶向递送至肿瘤，并在其中细胞内积累，其中未偶联药物的全身施用可能导致对正常细胞不可接受的毒性水平(Tsuchikama和An,Protein and Cell,(2018)9:33–46)。与传统化疗相比，免疫偶联物能够选择性地将强效细胞毒性有效载荷递送至靶癌细胞，从而提高疗效，降低全身毒性，并获得更好的药代动力学(PK)/药效学(PD)和生物分布(Tsuchikama和An 2018)；Beck A.et al(2017)Nature Rev.Drug Disc.16:315-337)。

据报道，多克隆抗体和单克隆抗体在这些策略中都是有用的(Rowland et al.,(1986)Cancer Immunol.Immunother.21:183-87)。用于这些方法的药物包括道诺霉素、阿霉素、甲氨蝶呤和长春地辛(Rowland et al.,(1986)同前)。用于抗体-毒素偶联物的毒素包括细菌毒素如白喉毒素、植物毒素如蓖麻毒素、小分子毒素如格尔德霉素(Mandler etal(2000)J.Nat.Cancer Inst.92(19):1573-1581；Mandler et al(2000)Bioorganic&Med.Chem.Letters 10:1025-1028；Mandler et al(2002)Bioconjugate Chem.13:786-791),美登素类(maytansinoid)(EP 1391213；Liu et al.,(1996)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 93:8618-8623),和卡奇霉素(calicheamicin)(Lode et al(1998)Cancer Res.58:2928；Hinman et al(1993)Cancer Res.53:3336-3342)。

在某些实施方案中，免疫偶联物包含抗原结合蛋白，如抗体，和药物，如毒素，如化疗剂。药物可以被修饰(例如，经由标准合成化学)以允许其化学连接(例如，含有反应手柄以允许其化学连接)到将药物与抗原结合蛋白连接的接头的反应末端。

免疫偶联物的药物组分

本文描述了用于产生免疫偶联物的药物，例如化疗剂。可以使用的酶活性毒素及其片段包括白喉毒素A链、白喉毒素的非结合活性片段、外毒素A链(来自铜绿假单胞菌)、蓖麻毒素A链、相思豆毒素A链、modeccin A链、α-八叠球菌素(alpha-sarcin)、油桐(Aleutites fordii)蛋白、石竹素蛋白、美洲商陆(Phytolaca americana)蛋白(PAPI、PAPII和PAP-S)、苦瓜抑制剂、泻果素、巴豆素、肥皂草(sapaonaria officinalis)抑制剂、白树毒素、mitogellin、局限曲菌素、酚霉素、伊诺霉素和单端孢霉毒素(tricothecene)。参见，例如，1993年10月28日公开的WO 93/21232。

除毒素外，放射性物质，如放射性核苷酸，也可用作ADC中的药物。多种放射性核苷酸可用于生产放射性偶联抗体。实例包括212Bi、131I、131In、90Y和186Re。

本发明的抗原结合蛋白(例如抗体)也可以与一种或多种毒素偶联，所述毒素包括，但不限于，卡奇霉素、美登素类、尾海兔素(dolastatin)、aurostatin、单端孢霉毒素和CC1065，以及具有毒素活性的这些毒素的衍生物。合适的细胞毒性剂包括，但不限于，奥瑞他汀，包括多缬氨酸-缬氨酸-多莱异亮氨酸-多拉脯氨酸-苯丙氨酸(dovaline-valine-dolaisoleunine-dolaproine-phenylalanine)(MMAF)和单甲基奥瑞他汀E(MMAE)以及酯形式的MMAE、DNA小沟结合剂、DNA小沟烷基化剂、烯二炔、lexitropsin、duocarmycin、紫杉烷(如紫杉醇和多西他赛)、嘌呤霉素、尾海兔素、美登素类、长春花生物碱。特异性细胞毒性剂包括拓扑替康、吗啉代-阿霉素、根霉素、氰吗啉代-阿霉素、尾海兔素-10、棘霉素、考布他汀、卡奇霉素、美登素、DM-1、DM-4和纺锤菌素。其它合适的细胞毒性剂包括抗微管蛋白剂，如奥瑞他汀、长春花生物碱、鬼臼毒素、紫杉烷、浆果赤霉素衍生物、隐泡素(cryptophysin)、美登素类、combretastatin或尾海兔素。抗微管素剂包括二甲基缬氨酸-缬氨酸-多莱异亮氨酸-多拉脯氨酸-苯丙氨酸-对苯二胺(AFP)、MMAF、MMAE、奥瑞他汀E、长春新碱、长春花碱、长春地辛、长春瑞滨、VP-16、喜树碱、紫杉醇、多西他赛、埃坡霉素A、埃坡霉素B、诺考达唑、秋水仙碱、秋水仙胺、雌莫司汀、西马多丁、圆皮海绵内酯、美登素、DM-1、DM-4和五加素。

抗体药物偶联物可以通过将抗微管蛋白剂单甲基奥瑞他汀E(MMAE)或单甲基奥瑞他汀F(MMAF)与抗原结合蛋白(如抗体)偶联来制备。在MMAE的情况下，接头可以由巯基反应性马来酰亚胺、己酰基间隔物、二肽缬氨酸-瓜氨酸或对氨基苄氧羰基(一种自裂解(self-immolative)断裂基团)组成。在MMAF的情况下，可以使用抗蛋白酶的马来酰亚胺己酰基接头。偶联过程导致药物-抗体附接的异质性，在结合到每个抗体分子的药物数量(摩尔比[MR])和附接位点方面都不同。最普遍的种类是MR＝4的材料；MR为0、2、6和8的材料不太常见。总体平均药物-抗体MR约为4。

奥瑞他汀和尾海兔素

在一些实施方案中，免疫偶联物包含与尾海兔素或尾海兔素肽类似物或衍生物、奥瑞他汀(美国专利号5,635,483；5,780,588)偶联的抗原结合蛋白(如抗体)。尾海兔素和奥瑞他汀已显示干扰微管动力学、GTP水解以及细胞核和细胞分裂(Woyke et al.(2001)Antimicrob.Agents and Chemother.45(12):3580-3584)并具有抗癌性(美国专利号5,663,149)和抗真菌活性(Pettit etal.(1998)Antimicrob.Agents Chemother.42:2961-2965)。尾海兔素或奥瑞他汀(尾海兔素的五肽衍生物)药物部分可以通过肽药物部分的N(氨基)末端或C(羧基)末端附接至抗体(WO 02/088172)。

示例性奥瑞他汀实施方案包括N-末端连接的单甲基奥瑞他汀药物部分DE和DF，公开于“Monomethylvaline Compounds Capable of Conjugation to Ligands”，美国专利号7,498,298。如本文所用，缩写“MMAE”是指单甲基奥瑞他汀E。如本文所用，缩写“MMAF”是指多缬氨酸-缬氨酸-多莱异亮氨酸-多拉脯氨酸-苯丙氨酸(dovaline-valine-dolaisoleuine-dolaproine-phenylalanine)。

通常，基于肽的药物部分可以通过在两个或更多个氨基酸和/或肽片段之间形成肽键来制备。此类肽键可以，例如，根据肽化学领域中公知的液相合成法(参见E.Schroderand K.Lubke,"The Peptides,"volume 1,pp 76-136,1965,Academic Press)来制备。奥瑞他汀/尾海兔素药物部分可以根据以下方法制备：美国专利号5,635,483；美国专利号5,780,588；Pettit et al.(1989)J.Am.Chem.Soc.111:5463-5465；Pettit et al.(1998)Anti-Cancer Drug Design 13:243-277；Pettit,G.R.,et al.Synthesis,1996,719-725；以及Pettit et al.(1996)J.Chem.Soc.Perkin Trans.15:859-863.还参见Doronina(2003)Nat Biotechnol 21(7):778-784；"Monomethylvaline Compounds Capable ofConjugation to Ligands,"美国专利号7,498,298，(公开了，例如，用于制备单甲基缬氨酸化合物(如与接头偶联的MMAE和MMAF)的接头和方法)。作为细胞毒性剂的生物活性有机化合物，特别是五肽，公开于美国专利号6,884,869；7,498,298；7,098,308；7,256,257；和7,423,116。

美登素和美登素类

美登素类是有丝分裂抑制剂，通过抑制微管蛋白聚合起作用。美登素最早是从东非灌木齿叶美登木(Maytenus serrata)中分离出来的(美国专利号3,896,111)。随后，发现某些微生物也产生美登素类，例如美登醇和C-3美登醇酯(美国专利号4,151,042)。高细胞毒性的美登素类药物可由安丝菌素前体制备，所述安丝菌素前体由微生物(如束丝放线菌属(Actinosynnema))发酵产生。分离安丝菌素的方法描述于美国专利号6,573,074。合成的美登醇及其衍生物和类似物公开于例如美国专利号4,137,230；4,248,870；4,256,746；4,260,608；4,265,814；4,294,757；4,307,016；4,308,268；4,308,269；4,309,428；4,313,946；4,315,929；4,317,821；4,322,348；4,331,598；4,361,650；4,364,866；4,424,219；4,450,254；4,362,663；和4,371,533。

抗体-美登素类偶联物是通过将抗原结合蛋白(如抗体)与美登素类分子化学连接而制备的，不会显著降低抗体或美登素类分子的生物活性。参见，例如，美国专利号5,208,020。每个抗体分子平均偶联3-4个美登素类分子已显示出增强靶细胞的细胞毒性的功效，而不会对抗体的功能或溶解性产生负面影响，尽管甚至一个毒素/抗体分子也有望比使用裸抗体增强细胞毒性。美登素类是本领域公知的，并且可以通过已知技术合成或从天然来源分离。合适的美登素类公开于，例如，美国专利号5,208,020以及上文提及的其他专利和非专利出版物。美登素类是在美登醇分子的芳环或其他位置修饰的美登醇和美登醇类似物，如各种美登醇酯。例如，在美国专利号6,570,024和6,884,874中公开了制备用于与抗体连接的美登素类的方法。

卡奇霉素(Calicheamicin)

卡奇霉素抗生素家族能够在亚皮摩尔浓度下产生双链DNA断裂。关于卡奇霉素家族偶联物的制备，参见，例如，美国专利号5,712,374,5,714,586,5,739,116,5,767,285,5,770,701,5,770,710,5,773,001,和5,877,296。可以使用的卡奇霉素的结构类似物包括，但不限于，γ1I、α2I、α3I、N-乙酰基γ1I、PSAG和τI1(Hinman et al.,Cancer Research 53:3336-3342(1993),Lode et al.,Cancer Research 58:2925-2928(1998)和上述美国专利)。抗体可以偶联的另一种抗肿瘤药物是QFA，它是一种抗叶酸剂。卡奇霉素和QFA都具有细胞内作用位点，不容易穿过质膜。因此，通过抗体介导的内化作用，这些药物的细胞摄取大大增强了它们的细胞毒性作用。

其他细胞毒性剂

可以与抗原结合蛋白(如抗体)偶联的其它细胞毒性剂，例如抗肿瘤剂，包括BCNU、链脲霉素、长春新碱和5-氟尿嘧啶，美国专利号5,053,394和5,770,710中描述的统称为LL-E33288复合物的药剂家族，以及埃斯培拉霉素(Esperamicin)(美国专利号5,877,296)。

可以使用的酶活性毒素及其片段包括白喉毒素A链、白喉毒素的非结合活性片段、外毒素A链(来自铜绿假单胞菌)、蓖麻毒素A链、相思豆毒素A链、modeccin A链、α-八叠球菌素、油桐蛋白、石竹素蛋白、美洲商陆蛋白(PAPI、PAPII和PAP-S)、苦瓜抑制剂、泻果素、巴豆素、肥皂草抑制剂、白树毒素、mitogellin、局限曲菌素、酚霉素、伊诺霉素和单端孢霉毒素。参见，例如，于1993年10月28日公开的WO 93/21232。

本发明还涉及在抗原结合蛋白(如抗体)和具有溶核活性的化合物(例如核糖核酸酶或DNA核酸内切酶如脱氧核糖核酸酶；DNase)之间形成的免疫偶联物。

为了选择性破坏肿瘤，抗原结合蛋白(如抗体)可以包含高放射性原子。多种放射性同位素可用于生产放射性结合抗体。实例包括At211、I131、I125、Y90、Re186、Re188、Sm153、Bi212、P32、Pb212和Lu的放射性同位素。当偶联物用于检测时，它可以包含用于闪烁扫描研究的放射性原子，例如tc99m或I123，或用于核磁共振(NMR)成像(也称为磁共振成像，mri)的自旋标记，如碘-123、碘-131、铟-111、氟-19、碳-13、氮-15、氧-17、钆、锰或铁。

放射标记或其它标记可以以已知的方式掺入偶联物中。例如，肽可以是生物合成的，或者可以通过使用合适的氨基酸前体的化学氨基酸合成来合成，该氨基酸前体包括例如氟-19代替氢。标记如tc99m或I123、Re186、Re188和In111可经由肽中的半胱氨酸残基连接。钇-90可以经由赖氨酸残基连接。IODOGEN方法(Fraker et al.(1978)Biochem.Biophys.Res.Commun.80:49-57)可用于掺入碘-123。"Monoclonal Antibodiesin Immunoscintigraphy"(Chatal,CRC Press 1989)详细描述了其它方法。

在一些情况下，本文公开的抗BCMA抗原结合蛋白是包含本文所述抗原结合蛋白的免疫偶联物，所述抗原结合蛋白包括，但不限于，与一种或多种细胞毒性剂偶联的抗体，所述细胞毒剂例如化疗剂、药物、生长抑制剂、毒素(例如蛋白质毒素，细菌、真菌、植物或动物来源的酶活性毒素，或其片段)、或放射性同位素(即放射性偶联物)。在一些情况下，抗BCMA抗原结合蛋白可以与毒素如奥瑞他汀偶联，例如与单甲基奥瑞他汀E(MMAE)或单甲基奥瑞他汀F(MMAF)偶联。在一些实施方案中，抗BCMA抗原结合蛋白与AFP、MMAF、MMAE、AEB、AEVB或奥瑞他汀E偶联。在一些实施方案中，抗BCMA抗原结合蛋白与紫杉醇、多西他赛、CC-1065、SN-38、拓扑替康、吗啉代阿霉素、根霉素、氰吗啉代阿霉素、尾海兔素-10、棘霉素、考布他汀、卡奇霉素或纺锤菌素偶联。在一些实施方案中，抗BCMA抗原结合蛋白与奥瑞他汀、美登素类或卡奇霉素偶联。在一些实施方案中，抗BCMA抗原结合蛋白与AFP、MMAP、MMAE、AEB、AEVB、奥瑞他汀E、长春新碱、长春碱、长春地辛、长春瑞滨、VP-16、喜树碱、紫杉醇、多西他赛、埃坡霉素A、埃坡霉素B、诺考达唑、秋水仙碱、秋水仙胺、雌莫司汀、西马多丁、圆皮海绵内酯、美登醇、美登素、DM1、DM2、DM3、DM4或五加素偶联。

在一些情况下，与毒素偶联的抗BCMA抗原结合蛋白可包含具有V_H CDR1、V_H CDR2和V_H CDR3的重链，V_H CDR1包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列、基本由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列组成或由SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列组成，V_H CDR2包含SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列、基本由SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列组成或由SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列组成，V_H CDR3包含SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列、基本由SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列组成或由SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列组成。例如，与本文所述毒素偶联的抗BCMA抗原结合蛋白可包含重链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO:7所示的氨基酸序列。在一些情况下，与本文所述毒素偶联的抗BCMA抗原结合蛋白可包含重链，所述重链包含SEQ IDNO:9中所示的氨基酸序列。

在一些情况下，与毒素偶联的抗BCMA抗原结合蛋白可包含具有V_L CDR1、V_L CDR2和V_L CDR3的轻链，V_L CDR1包含SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列、基本由SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列组成或由SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列组成，V_L CDR2包含SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列、基本由SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列组成或由SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列组成，V_L CDR3包含SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列、基本由SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列组成或由SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列组成。与本文所述毒素偶联的抗BCMA抗原结合蛋白可包含轻链可变区，所述轻链可变区包含SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列。在一些情况下，与本文所述毒素偶联的抗BCMA抗原结合蛋白可包含轻链，所述轻链包含SEQ ID NO:10所示的氨基酸序列。

在一些情况下，与毒素偶联的抗BCMA抗原结合蛋白可以包含具有V_H CDR1(包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列)、V_H CDR2(包含SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列)和V_H CDR3(包含SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列)的重链，并且可以包含具有V_L CDR1(包含SEQ IDNO:4所示的氨基酸序列)、V_L CDR2(包含SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列)和V_L CDR3(包含SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列)的轻链。例如，与毒素偶联的抗BCMA抗原结合蛋白可包含重链可变区(包含SEQ ID NO:7所示的氨基酸序列)，并且可包含轻链可变区(包含SEQ IDNO:8所示的氨基酸序列)。在一些情况下，与本文所述毒素偶联的抗BCMA抗原结合蛋白可包含重链(包含SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列)，并且可包含轻链(包含SEQ ID NO:10所示的氨基酸序列)。

在一些实施方案中，本文公开的抗BCMA抗原结合蛋白包含SEQ ID NO:11、15或19的重链可变区。在一些实施方案中，本文公开的抗BCMA抗原结合蛋白包含SEQ ID NO:12、16或20的轻链可变区。在一些实施方案中，本文公开的抗BCMA抗原结合蛋白包含SEQ ID NO:13、17、22或24的重链区。在一些实施方案中，本文公开的抗BCMA抗原结合蛋白包含SEQ IDNO:14、18、23或25的轻链区。在一些实施方案中，本文公开的抗BCMA抗原结合蛋白包含SEQID NO:11的重链可变区和SEQ ID NO:12的轻链可变区，SEQ ID NO:15的重链可变区和SEQID NO:16的轻链可变区，或SEQ ID NO:19的重链可变区和SEQ ID NO:20的轻链可变区。在一些实施方案中，本文公开的抗BCMA抗原结合蛋白包含SEQ ID NO:13的重链区和SEQ IDNO:14的轻链区，SEQ ID NO:17的重链区和SEQ ID NO:18的轻链区，SEQ ID NO:22的重链区和SEQ ID NO:23的轻链，或SEQ ID NO:24的重链区和SEQ ID NO:25的轻链。在一些实施方案中，本文公开的抗BCMA抗原结合蛋白是包含SEQ ID NO:21的scFV-fc。

在一些情况下，抗BCMA抗原结合蛋白可以是具有以下通式结构的免疫偶联物：

ABP-((Linker)n-Ctx)m

其中

ABP是抗原结合蛋白

接头不存在或者是任何可裂解或不可裂解的接头

Ctx是本文所述的任何细胞毒性剂

n为0、1、2或3，并且

m为1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。

示例性的接头可以包括6-马来酰亚胺基己酰基(MC)、马来酰亚胺基丙酰基(MP)、缬氨酸-瓜氨酸(val-cit)、丙氨酸-苯丙氨酸(ala-phe)、对氨基苄氧羰基(PAB)、N-琥珀酰亚胺基4-(2-吡啶硫基)戊酸酯(SPP)、N-琥珀酰亚胺基4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1羧酸酯(SMCC)和N-琥珀酰亚胺基(4-碘-乙酰基)氨基苯甲酸酯(SIAB)。

在一些情况下，抗BCMA抗原结合蛋白可以是含有与MMAE或MMAF连接的单克隆抗体的免疫偶联物。在另一个实施方案中，抗BCMA抗原结合蛋白可以是含有通过MC接头与MMAE或MMAF连接的单克隆抗体的免疫偶联物，如以下结构所示：

在一些情况下，抗BCMA抗原结合蛋白可以是抗体贝兰他单抗。在另一个实施方案中，抗BCMA抗原结合蛋白可以是免疫偶联物贝兰他单抗莫福汀。

在一些情况下，本发明的偶联抗体(抗体-药物偶联物或ADC)可以是强效抗癌剂，其被设计成允许将高效细胞毒剂特异性靶向肿瘤细胞而不损伤健康组织。尽管使用了肿瘤特异性抗体，但新出现的ADC临床数据表明，在ADC达到其最佳治疗剂量之前经常发生不良事件。因此，尽管这些ADC在临床前肿瘤模型中具有高活性，但它们在临床中的治疗窗口很窄，并且给药方案似乎受到剂量限制性毒性的阻碍，而这些毒性并不总是可以根据临床前模型的数据进行预测的。

在一些情况下，可以联合使用以协同增强治疗效果而不恶化安全性概况的疗法可以是癌症患者治疗中的重大进步，特别是在治疗中出现的不良事件(如眼毒性)的发生率和严重性方面。

在一些情况下，与可增强导致总应答率(ORR)显著更高同时具有最佳效益-风险概况的给药功效的药物的组合可导致用此类抗原结合蛋白治疗的患者的管理中的范式转变。

病症

在一些情况下，本文公开的组合可以治疗B细胞病症。B细胞病症可分为B细胞发育/免疫球蛋白产生缺陷(免疫缺陷)和过度/不受控制的增殖(淋巴瘤、白血病)。如本文所用，B细胞病症是指两种类型的疾病，并且提供了用抗原结合蛋白治疗B细胞病症的方法。

癌症和特别是B细胞介导或浆细胞介导的疾病或抗体介导的疾病或病症的实例可包括多发性骨髓瘤(MM)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、滤泡性淋巴瘤(FL)、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、非分泌型多发性骨髓瘤、冒烟型多发性骨髓瘤(Smoldering multiplemyeloma)、意义未明的单克隆丙种球蛋白病(MGUS)、孤立性浆细胞瘤(骨，髓外)、淋巴浆细胞性淋巴瘤(LPL)、巨球蛋白血症、浆细胞白血病、原发性淀粉样变性(AL)、重链病、系统性红斑狼疮(SLE)、POEMS综合征/骨硬化性骨髓瘤、I型和II型冷球蛋白血症、轻链沉积病、Goodpasture综合征、特发性血小板减少性紫癜(ITP)、急性肾小球肾炎、天疱疮和类天疱疮疾病以及获得性大疱性表皮松解症；或任何非霍奇金淋巴瘤B细胞白血病(NHL)和霍奇金淋巴瘤(HL)。在一些情况下，疾病或病症可以选自由以下组成的组：多发性骨髓瘤(MM)、非霍奇金淋巴瘤B细胞白血病(NHL)、滤泡性淋巴瘤(FL)和弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)。在一些情况下，疾病可以是多发性骨髓瘤或非霍奇金淋巴瘤B细胞白血病(NHL)。在一些情况下，疾病可以是多发性骨髓瘤。

在一些情况下，癌症可以是造血(或血液或血液学或血液相关)癌症，例如，衍生自血细胞或免疫细胞的癌症，其可以称为“液体肿瘤”。在一些情况下，癌症可以是B细胞相关癌症，特别是表达BCMA的癌症。在一些情况下，癌症可以是白血病，如慢性髓细胞白血病、急性髓细胞白血病、慢性淋巴细胞白血病和急性淋巴细胞白血病。在另一种情况下，癌症可以是淋巴瘤，如非霍奇金淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤；等等。在另一种情况下，癌症可以是浆细胞恶性肿瘤，如多发性骨髓瘤和Waldenstrom巨球蛋白血症。在一些实施方案中，本文公开的组合治疗AL淀粉样变性。

在一些情况下，癌症可能是多发性骨髓瘤。在一些情况下，癌症可以是复发性和/或难治性多发性骨髓瘤。在一些情况下，患有复发性和/或难治性多发性骨髓瘤的患者先前已经用至少一种、至少两种、至少三种或至少四种治疗剂进行治疗以治疗多发性骨髓瘤。

先前治疗

在一些情况下，本文所述的受试者在用本文所述的组合治疗之前可以已经进行了0、1、2、3或4或更多种先前的治疗线。在另一个实施方案中，受试者可以患有复发性和/或难治性多发性骨髓瘤，并且在用本文所述的组合治疗之前已经进行了0、1、2、3或4或更多种先前的治疗线。在另一个实施方案中，受试者先前已经用至少3种先前线治疗，先前线可以包括以下治疗：免疫调节药物(IMiD)、蛋白酶体抑制剂(PI)和抗CD38治疗(例如达雷木单抗)或其组合。治疗线可由国际骨髓瘤研讨会(International Myeloma Workshop,IMWG)的共识小组确定。

在一些情况下，受试者在用本文所述的组合治疗之前可以已经进行了0、1、2、3或4或更多种先前的治疗线，其中一种或多种先前的治疗线是不成功的。在一些情况下，与先前的治疗线相关的不良事件迫使先前的治疗性中断。当可以如本文所述进行治疗的哺乳动物(例如，人)是在如本文所述进行治疗之前已经进行过0、1、2、3或4或更多种先前的治疗线的哺乳动物时，先前治疗可以是任何适当的治疗。例如，在如本文所述进行治疗之前已经进行过0、1、2、3或4或更多种先前的治疗线的哺乳动物，可以先前已经用免疫调节药物(IMiD)、蛋白酶体抑制剂(PI)、抗CD38治疗或其组合进行治疗。

在一些情况下，接受过先前的治疗线的受试者可以患有复发的(recurrent)、复发性(relapsed)和/或难治性癌症。在一些情况下，癌症可以是原发性癌症。在一些情况下，癌症可以是转移性癌症。在一些情况下，癌症可以是化疗耐药性的癌症。在一些情况下，癌症可以是B细胞癌症(例如，白血病和淋巴瘤)。可以如本文所述治疗的癌症的实例包括，但不限于，多发性骨髓瘤(MM)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、慢性髓细胞白血病、急性髓细胞白血病、急性淋巴细胞白血病、滤泡性淋巴瘤(FL)、弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)、非分泌型多发性骨髓瘤、冒烟型多发性骨髓瘤、意义未明的单克隆丙种球蛋白病(MGUS)、孤立性浆细胞瘤(例如，骨的孤立性浆细胞瘤和髓外孤立性浆细胞瘤)、淋巴浆细胞性淋巴瘤(LPL)、巨球蛋白血症、浆细胞白血病、原发性淀粉样变性(AL)、重链病、系统性红斑狼疮(SLE)、POEMS综合征、骨硬化性骨髓瘤、I型和II型冷球蛋白血症、轻链沉积病、Goodpasture综合征、特发性血小板减少性紫癜(ITP)、急性肾小球肾炎、天疱疮和类天疱疮疾病、获得性大疱性表皮松解症、非霍奇金淋巴瘤、B细胞白血病和霍奇金淋巴瘤。

使用声明

在一些情况下，本文公开的组合可用于治疗指示BCMA抗原结合蛋白的疾病或病况，例如癌症。此类治疗可包含：(i)抗BCMA抗原结合蛋白或对BCMA多肽具有结合特异性的ADC和(ii)一种或多种CELMOD。在一些情况下，可以向哺乳动物(例如，人，如患有癌症的人)施用：(i)抗BCMA抗原结合蛋白或对BCMA多肽具有结合特异性的ADC和(ii)一种或多种CELMOD。在一些情况下，本文公开的组合将ADC的细胞毒性剂靶向表达BCMA多肽(例如，在细胞表面表达BCMA多肽)的细胞(例如，癌细胞)，并刺激(例如，诱导或增强)针对表达癌症相关抗原的细胞(例如，癌细胞)的免疫应答。在一些情况下，BCMA抗原结合蛋白和CELMOD可以与相同的癌细胞结合。在一些情况下，抗BCMA抗原结合蛋白和CELMOD可以与不同的癌细胞结合。在一些情况下，抗BCMA抗原结合蛋白和CELMOD可以与相同或不同的癌细胞相互作用。

在一些情况下，本文公开的组合可以用于治疗受试者。术语“个体”、“受试者”和“患者”在本文中可互换使用。受试者可以是人。受试者也可以是哺乳动物，例如小鼠、大鼠或灵长类动物(例如，绒猴或猴)。受试者可以是非人动物。待治疗的受试者可以是农场动物，例如母牛或公牛、绵羊、猪、牛、山羊或马，或者可以是家畜动物，例如狗或猫。动物可以是任何年龄，或者是成熟的成年动物。在一些实施方案中，治疗可以是治疗性的、预防性的或防止性的。受试者可以是有需要的个体。那些需要治疗的个体可以包括已经患有医学疾病的个体，以及那些将来可能发展出疾病的个体。

因此，本文所述的组合物可用于预防性或防止性治疗。在这种情况下，本文所述的组合物可施用于个体以预防或延迟疾病的一个或多个方面或症状的发作。受试者可以是无症状的。受试者可以具有疾病的遗传易感性。在一些实施方案中，可以将预防有效量的本文公开的组合施用于此类个体。在一些实施方案中，预防有效量可以是预防或延迟本文所述疾病的一个或多个方面或症状发作的量。

本文公开的组合也可用于治疗方法中。术语“治疗”包括缓解、减少或预防疾病的至少一个方面或症状。例如，本文公开的组合可用于改善或减轻本文所述疾病的一个或多个方面或症状。

在一些情况下，本文所述的组合可以以治疗性、预防性或防止性治疗的有效量使用。在一些情况下，本文所述的组合的治疗有效量可以是有效改善或减轻疾病的一个或多个方面或症状的量。在一些情况下，本文公开的组合还可以对受试者的健康具有通常有益的作用，例如，它可以增加受试者的预期寿命。

在一些情况下，本文所述的组合可以不需要影响完全治愈或根除疾病的每个症状或表现来构成可行的治疗性治疗。如在相关领域中所认识到的，用作治疗剂的药物可以降低给定疾病状态的严重程度，但不需要消除疾病的每一种表现被认为是有用的治疗剂。类似地，为了构成可行的预防剂，预防性施用的治疗不需要在预防疾病发作方面完全有效。仅减少疾病的影响(例如，通过减少其症状的数量或严重性，或通过增加另一种治疗的有效性，或通过产生另一种有益效果)或减少疾病在受试者中发生(例如，通过延迟疾病的发作)或恶化的可能性就足够了。

在一些情况下，本文提供的材料和方法可用于减少或消除患有癌症的哺乳动物(例如，人)体内存在的癌细胞的数量。例如，可以向有此需要的哺乳动物(例如，患有癌症的哺乳动物)施用抗BCMA抗原结合蛋白和CELMOD，以将患有癌症的哺乳动物体内存在的癌细胞的数量(例如，从患有癌症的哺乳动物获得的样品中存在的癌细胞的数量)减少例如至少约10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或更多。在一些情况下，从患有癌症的哺乳动物获得的样品中可能不存在癌细胞。例如，可以向有此需要的哺乳动物(例如，患有癌症的哺乳动物)施用抗BCMA抗原结合蛋白和CELMOD，以将患有癌症的哺乳动物体内存在的一个或多个肿瘤的大小(例如，体积)减少例如至少约10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或更多。在一些情况下，可以监测被治疗的哺乳动物体内存在的癌细胞的数量。可以使用任何合适的方法来确定哺乳动物体内存在的癌细胞数量是否减少。例如，成像技术可用于评估哺乳动物体内存在的癌细胞数量。

在一些情况下，本文提供的材料和方法可用于提高患有癌症的哺乳动物(例如，人)的存活率。例如，可以向有此需要的哺乳动物(例如，患有癌症的哺乳动物)施用抗BCMA抗原结合蛋白和CELMOD以提高哺乳动物的存活率。例如，本文所述的材料和方法可用于将患有癌症的哺乳动物的存活率提高，例如，至少约10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或更多。例如，本文所述的材料和方法可用于将患有癌症的哺乳动物的存活提高，例如，至少约3个月(例如，至少约3个月、至少约6个月、至少约8个月、至少约10个月、至少约1年、至少约1.5年、至少约2年、至少约2.5年、至少约3年、至少约4年、至少约5年或更长)。

在一些情况下，本文提供的材料和方法可用于治疗患有癌症的哺乳动物(例如，人)，使得哺乳动物可经历最小的、减少的副作用或没有副作用。例如，当施用本文公开的组合(例如抗BCMA抗原结合蛋白和CELMOD)时，与患有癌症并单独施用抗BCMA抗原结合蛋白或单独施用CELMOD的哺乳动物相比，哺乳动物可以经历最小的、减少的副作用或没有副作用。患有癌症的哺乳动物可能经历的副作用的实例包括但不限于一种或多种选自以下的副作用：视力或眼睛变化如眼科检查结果(角膜病)、视力下降或视力模糊、恶心、低血细胞计数、发热、输液相关反应、疲劳、肾或肝功能血液测试的变化、血小板减少症、眼毒性(例如，角膜上皮变化、眼睛干涩、刺激、发红、视力模糊、眼睛干涩、畏光和视力变化)。

在一些情况下，提供了包含抗BCMA抗原结合蛋白和CELMOD的组合，其用于预防和/或降低患有癌症(例如多发性骨髓瘤)的患者的眼毒性。在一个实施方案中，与单独用抗BCMA抗原结合蛋白(单一疗法)治疗的患者相比，可以预防或减少眼毒性。在一些实施方案中，与单独用抗BCMA抗原结合蛋白治疗相比，本文公开的组合例如抗BCMA抗原结合蛋白和CELMOD降低/减缓斯内伦视力(Snellen Visual Acuity)上从基线下降1行。在一些实施方案中，与单独用抗BCMA抗原结合蛋白治疗相比，本文公开的组合例如抗BCMA抗原结合蛋白和CELMOD降低/减缓斯内伦视力从基线下降2或3行。在一些实施方案中，与单独用抗BCMA抗原结合蛋白治疗相比，本文公开的组合例如抗BCMA抗原结合蛋白和CELMOD降低/减缓斯内伦视力从基线下降3行以上。在一些实施方案中，与单独用抗BCMA抗原结合蛋白治疗相比，本文公开的组合例如抗BCMA抗原结合蛋白和CELMOD降低/减缓斯内伦视力从基线的变化。在一些实施方案中，与单独用抗BCMA抗原结合蛋白治疗相比，本文公开的组合例如抗BCMA抗原结合蛋白和CELMOD降低/减缓logMAR(最小分辨角的对数)单位从基线降低。在一些实施方案中，与单独用抗BCMA抗原结合蛋白治疗相比，本文公开的组合例如抗BCMA抗原结合蛋白和CELMOD降低/减缓或预防受试者的轻度浅表角膜病、中度浅表角膜病、重度浅表角膜病或角膜上皮缺损的进展。在一些实施方案中，与单独用抗BCMA抗原结合蛋白治疗相比，本文公开的组合例如抗BCMA抗原结合蛋白和CELMOD预防受试者的轻度浅表角膜病、中度浅表角膜病、重度浅表角膜病或角膜上皮缺损。

“眼毒性”是指治疗剂对眼组织的任何非故意暴露。眼毒性可包括角膜上皮变化、眼睛干涩、刺激、发红、视力模糊、眼睛干涩、畏光和/或视敏度的变化。

眼科检查可由眼科医生或验光师进行。眼科检查可包括以下一项或多项：

1.最佳矫正视力，

2.明显屈光的记录和用于获得最佳矫正视力的方法，

3.当前的眼镜处方(如果适用)，

4.眼内压测量，

5.眼前节(裂隙灯)检查，包括角膜荧光素染色和晶状体检查；

6.散瞳眼底镜检查，和/或

7.眼表疾病指数(OSDI)，其是评估潜在的视觉变化对视觉功能和健康相关生活质量的影响的视觉功能问卷。

眼科检查可在治疗前、治疗期间和/或治疗后进行。

在一个方面，提供了治疗有此需要的受试者的癌症的方法，其包括施用治疗有效剂量的抗BCMA抗原结合蛋白和根据本公开的CELMOD。

CELMOD

本文公开了组合，其可以包含(i)抗BCMA抗原结合蛋白或对BCMA多肽具有结合特异性的ADC和(ii)一种或多种cereblon E3连接酶调节剂(CELMOD)。任何合适的CELMOD可以用于治疗患有本文所述癌症的哺乳动物(例如，人)。在一些情况下，CELMOD可以具有小于1000道尔顿的分子量。在一些情况下，CELMOD可以降解Ikaros蛋白、Aiolos蛋白或其组合。在一些情况下，CELMOD对cereblon(例如，cereblon E3连接酶)具有小于1μM的IC₅₀值。在一些情况下，CELMOD可以是美齐格米特(CC-92480)、伊伯多胺(CC-220)、阿伐度胺(CC-122)、CC-90009、CC-99282、前述任一种的药学上可接受的盐或其任何组合。在一些情况下，CELMOD可以是CC-99282或其药学上可接受的盐(例如，口服施用和/或每日一次)。在一些实施方案中，本文公开的CELMOD至少每天、每周、每两周、每三周或每月一次向受试者施用。

在一些情况下，CELMOD可以降解GSPT1，例如是CC-90009或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，CELMOD可以通过注射施用，例如静脉注射，和/或每单位剂量至少约0.6mg(例如，约：0.6-1mg、0.6-2mg、0.6-3mg、0.6-4mg、0.6-5mg、1-2mg、1-3mg、1-4mg、1-5mg、2-3mg、2-4mg、2-5mg、3-4mg、3-5mg或4-5mg)。

在一些情况下，CELMOD可以是美齐格米特(CC-92480)或其药学上可接受的盐，例如口服施用。在一些实施方案中，CELMOD在组合中可以以约1-5mg的量，例如以约1-1.6、1.6-2、1.6-3、1.6-4、1.6-5、1-2、1-3、1-4、1-5、2-3、2-4、2-5、3-4、3-5或4-5mg的量存在和/或每天一次施用。在一些实施方案中，CELMOD在组合中可以以至少约0.1mg至0.2mg、0.3mg、0.4mg、0.5mg、0.6mg、0.7mg、0.8mg、0.9mg、1mg、1.1mg、1.2mg、1.3mg、1.4mg、1.5mg或1.6mg存在。在一些实施方案中，CELMOD的化学名称可以是苯甲腈，4-[4-[[4-[[[2-[(3S)-2,6-二氧代-3-哌啶基]-2,3-二氢-1-氧代-1H-异吲哚-4-基]氧基]甲基]苯基]甲基]-1-哌嗪基]-3-氟。在一些实施方案中，CELMOD的结构式可以是

在一些情况下，CELMOD可以是伊伯多胺(CC-220)或其药学上可接受的盐，例如伊伯多胺盐酸盐。在一些实施方案中，CELMOD可以口服施用和/或每天施用至少约0.6或1mg。在一些实施方案中，CELMOD在组合中可以以至少约0.1mg、0.2mg、0.3mg、0.4mg、0.5mg、0.6mg、0.7mg、0.8mg、0.9mg、1mg、1.1mg、1.2mg或1.3mg存在。在一些实施方案中，CELMOD的单位剂量可以为约：0.3-1mg、0.3-2mg、1-2mg、1-3mg、1-4mg、1-5mg、1-10mg、2-3mg、2-4mg、2-5mg、2-6mg、2-7mg、2-8mg、2-9mg、2-10mg、3-4mg、3-5mg、3-6mg、3-7mg、3-8mg、3-9mg、3-10mg、4-5mg、6-7mg、8-9mg、9-10mg、6-8mg、6-9mg或6-10mg。在一些实施方案中，CELMOD的化学名称可以是S)-3-[4-({4-[(吗啉-4-基)甲基]苯基}甲氧基)-1-氧代-1,3-二氢-2H-异吲哚-2-基]哌啶-2,6-二酮，或者是2，6-哌啶二酮,3-[1,3-二氢-4-[[4-(4-吗啉基甲基)苯基]甲氧基]-1-氧代-2H-异吲哚-2-基]-,(3S)-。在一些实施方案中，CELMOD的结构式可以是

在一些情况下，CELMOD可以是阿伐度胺(CC-122)或其药学上可接受的盐，例如，阿伐度胺盐酸盐。在一些实施方案中，CELMOD的化学名称可以是3-(5-氨基-2-甲基-4-氧代-4H-喹唑啉-3-基)哌啶-2，6-二酮，或者是2,6-哌啶二酮,3-(5-氨基-2-甲基-4-氧代-3(4H)-喹唑啉基)-。在一些实施方案中，CELMOD的结构式可以是

在一些实施方案中，CELMOD可以以至少约2或3mg的剂量口服施用。在一些实施方案中，CELMOD的单位剂量可以为至少约：0.5-1mg、1-2mg、1-3mg、1-4mg、1-5mg、1-10mg、2-3mg、2-4mg、2-5mg、2-6mg、2-7mg、2-8mg、2-9mg、2-10mg、3-4mg、3-5mg、3-6mg、3-7mg、3-8mg、3-9mg、3-10mg、4-5mg、6-7mg、8-9mg、9-10mg、6-8mg、6-9mg或6-10mg。

剂量

在一些情况下，本文提供包含治疗有效剂量的抗BCMA抗原结合蛋白和CELMOD的组合，其用于治疗癌症，所述抗BCMA抗原结合蛋白包含根据SEQ ID NO:1的CDRH1；根据SEQ IDNO:2的CDRH2；根据SEQ ID NO:3的CDRH3；根据SEQ ID NO:4的CDRL1；根据SEQ ID NO:5的CDRL2；和根据SEQ ID NO:6的CDRL3。

在一些情况下，本文提供包含治疗有效剂量的抗BCMA抗原结合蛋白和CELMOD的组合，其用于治疗癌症，所述抗BCMA抗原结合蛋白包含根据SEQ ID NO:7的重链可变区(VH)；和根据SEQ ID NO:8的轻链可变区(VL)。

在一些情况下，本文提供包含治疗有效剂量的抗BCMA抗原结合蛋白CELMOD的组合，其用于治疗癌症，所述抗BCMA抗原结合蛋白包含根据SEQ ID NO:9的重链(H)和根据SEQID NO:10的轻链(L)。

在一些实施方案中，本文公开的抗BCMA抗原结合蛋白包含SEQ ID NO:11、15或19的重链可变区。在一些实施方案中，本文公开的抗BCMA抗原结合蛋白包含SEQ ID NO:12、16或20的轻链可变区。在一些实施方案中，本文公开的抗BCMA抗原结合蛋白包含SEQ ID NO:13、17、22或24的重链区。在一些实施方案中，本文公开的抗BCMA抗原结合蛋白包含SEQ IDNO:14、18、23或25的轻链区。在一些实施方案中，本文公开的抗BCMA抗原结合蛋白包含SEQID NO:11的重链可变区和SEQ ID NO:12的轻链可变区，SEQ ID NO:15的重链可变区和SEQID NO:16的轻链可变区，或SEQ ID NO:19的重链可变区和SEQ ID NO:20的轻链可变区。在一些实施方案中，本文公开的抗BCMA抗原结合蛋白包含SEQ ID NO:13的重链区和SEQ IDNO:14的轻链，SEQ ID NO:17的重链区和SEQ ID NO:18的轻链，SEQ ID NO:22的重链区和SEQ ID NO:23的轻链，或SEQ ID NO:24的重链区和SEQ ID NO:25的轻链。在一些实施方案中，本文公开的抗BCMA抗原结合蛋白是包含SEQ ID NO:21的scFv-fc。

在一些情况下，当在药物制剂中时，本文公开的组合可以以单位剂量形式存在。在一些实施方案中，剂量方案将由医学专业和/或临床因素确定。如医学领域所公知的，任何一名患者的剂量取决于许多因素，包括患者的体型、体表面积、年龄、给药组合、性别、给药时间和途径、总体健康状况以及同时施用的其它药物。示例性剂量可以根据被治疗的个体的大小和健康状况以及被治疗的病况而变化。

本文所述的抗BCMA抗原结合蛋白的合适剂量可根据患者的体重计算，例如合适的剂量可以在约0.1mg/kg至约20mg/kg的范围内，例如约1mg/kg至约20mg/kg，例如约10mg/kg至约20mg/kg，或例如约1mg/kg至约15mg/kg，例如约10mg/kg至约15mg/kg。

在一些情况下，抗BCMA抗原结合蛋白的治疗有效剂量可以在约0.03mg/kg至约4.6mg/kg的范围内。在又一个实施方案中，抗BCMA抗原结合蛋白的治疗有效剂量可以为约或至少：0.03mg/kg、0.06mg/kg、0.12mg/kg、0.24mg/kg、0.48mg/kg、0.96mg/kg、1.4mg/kg、1.92mg/kg、2.5mg/kg、3.4mg/kg或4.6mg/kg。在又一个实施方案中，抗BCMA抗原结合蛋白的治疗有效剂量可以是1.4mg/kg、1.9mg/kg、2.5mg/kg或3.4mg/kg。

在一些情况下，受试者已经接受过至少一种先前的癌症治疗。在一些情况下，治疗有效剂量的组合可以至少约每1-60天一次向受试者施用。在一些情况下，治疗有效剂量的组合物可以至少约每3、4、6或8周(例如21天)一次向受试者施用。在一些情况下，治疗有效剂量的组合物可以至少约每8天一次向受试者施用。

施用途径

在一些情况下，(i)抗BCMA抗原结合蛋白或对BCMA多肽具有结合特异性的ADC和(ii)一种或多种CELMOD可以同时施用于哺乳动物(例如，在单一组合物中)。在一些情况下，(i)抗BCMA抗原结合蛋白或对BCMA多肽具有结合特异性的ADC和(ii)一种或多种CELMOD可以分别施用于受试者。当分开施用时，这可以同时发生或以任何顺序相继发生(通过相同或不同的施用途径)。这种顺次给药可以在时间上接近，也可以在时间上远离。将选择组合的治疗剂或其药物组合物和其它治疗活性剂的剂量以及相对施用时间，以获得期望的联合治疗效果。

在一些实施方案中，剂量可以单次或多次施用，例如每天、每周、每两周或每月、每小时施用，或者在所治疗的疾病或病况复发(recurrence)、复发(relapse)或进展时施用。在一些实施方案中，可以通过在约2至约24小时，例如约2至约12小时，或约2至约6小时的时段内缓慢连续输注来施用剂量。

在一些实施方案中，本文公开的药物组合物可以包含用于肠胃外、经皮、管腔内、动脉内、鞘内和/或鼻内施用或通过直接注射到组织中的组合。在一些实施方案中，药物组合物可以经由输注或注射施用于患者。在一个实施方案中，提供了用于静脉内施用的包含BCMA结合蛋白和CELMOD的药物组合物。在一些实施方案中，提供了用于皮下施用的包含BCMA结合蛋白和CELMOD的药物组合物。在一些实施方案中，本文所述的药物组合物可以经动脉、皮下、皮内、瘤内、结内、髓内、肌内、通过静脉内(i.v.)注射、通过静脉内(i.v.)输注或腹膜内施用于受试者。在一些实施方案中，组合可以通过皮内或皮下注射施用于受试者。

在一个实施方案中，组合的一种或多种治疗剂可以静脉内施用。在另一个实施方案中，组合的一种或多种治疗剂可以瘤内施用。在另一个实施方案中，组合的一种或多种治疗剂可以口服施用。在另一个实施方案中，组合的一种或多种治疗剂可以全身施用，例如静脉内施用，并且组合的一种或多种其它治疗剂可以瘤内施用。在另一个实施方案中，本文公开的组合的所有治疗剂可以全身施用，例如静脉内施用。在一个可选的实施方案中，本文所述组合的所有治疗剂可以瘤内施用。在任何实施方案中，例如在本段中，本文公开的治疗剂可以作为一种或多种药物组合物施用。

药物组合物

在一些实施方案中，药物组合物可以通过本身已知的用于制备施用于受试者的药学上可接受的组合物的方法来制备，使得有效量的BCMA结合蛋白+CELMOD与药学上可接受的载体组合成混合物。合适的载体描述于，例如，Remington′s Pharmaceutical Sciences。在此基础上，组合物可以包括，尽管不完全如此，与一种或多种药学上可接受的载体或稀释剂结合的物质的溶液，其包含在具有合适的pH和与生理流体等渗的缓冲溶液中。在一些实施方案中，本文公开的药物组合物可以是酸性的。在一些实施方案中，本文公开的药物组合物可以是碱性的。在一些实施方案中，药物组合物的pH可以为约1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5、10、10.5、11、11.5、12、12.5、13、13.5或约14。

在一些实施方案中，合适的药学上可接受的载体可包括基本上化学惰性和无毒的组合物，其不干扰药物组合物的生物活性的有效性。合适的药物载体的实例包括，但不限于，水、盐溶液、甘油溶液、N-(1(2,3-二油酰氧基)丙基)N,N,N-三甲基氯化铵(DOTMA)、二油酰磷脂酰-乙醇胺(DOPE)和脂质体。在一些实施方案中，此类组合物含有治疗有效量的BCMA结合蛋白和本文公开的CELMOD，以及合适量的载体，以提供用于直接施用于受试者的形式。

药物组合物可以包括，但不限于，冻干粉末或水性或非水性无菌注射溶液或悬浮液，其可以进一步含有抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和溶质，使组合物与预期接受者的组织或血液基本相容。可存在于此类组合物中的其它组分包括例如水、表面活性剂(如吐温)、醇、防腐剂、多元醇、甘油和植物油。临时注射溶液和悬浮液可以由无菌粉末、颗粒、片剂或浓缩溶液或悬浮液制备。

本文公开的药物组合物可以配制成多种形式并通过多种不同的方式施用。药物制剂可以以含有常规可接受的载体、佐剂和所需的媒介物的制剂口服、直肠或胃肠外施用。本文所用的术语“肠胃外”包括皮下、静脉内、肌内或胸骨内注射和输注技术。施用包括注射或输注(包括动脉内、心内、脑室内、皮内、十二指肠内、髓内、肌内、骨内、腹膜内、鞘内、血管内、静脉内、玻璃体内、硬膜外和皮下)、吸入、经皮、经粘膜、舌下、口腔和局部(包括表皮、皮肤、灌肠、滴眼剂、滴耳剂、鼻内、阴道)施用。在一些示例性实施方案中，施用途径可以是经由注射，例如肌内、静脉内、皮下或腹膜内注射。

液体制剂可以包括口服制剂、静脉制剂、鼻内制剂、眼用制剂、耳用制剂、气雾剂等。在某些实施方案中，可以施用各种制剂的组合。在某些实施方案中，可以配制用于延长释放概况的组合物。

本文公开的药物组合物可以与其它治疗剂或治疗联合施用。在一些实施方案中，对受试者的治疗可以是手术、放疗、化疗、营养方案、身体活动、免疫疗法、药物组合物、细胞移植、血液融合或其任何组合。在一些情况下，本文公开的组合可以与一种或多种用于治疗癌症的另外的药剂/疗法一起施用于患有癌症的哺乳动物。用于治疗癌症的另外的药剂/疗法的实例包括但不限于手术、放疗、化疗、靶向疗法(例如，单克隆抗体疗法)、激素疗法、血管生成抑制剂、免疫抑制剂、检查点阻断疗法(例如，抗PD-1抗体疗法、抗PD-L1抗体疗法和/或抗CTLA4抗体疗法)、骨髓移植。

在一些实施方案中，另外的癌症治疗剂可以是卡非佐米(carfilzomib)、达雷木单抗(daratumumab)、艾萨妥昔单抗(isatuximab)、伊沙佐米(ixazomib)、奥泼佐米(oprozomib)、马利佐米(marizomib)或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，另外的癌症治疗剂是PD-1抑制剂。在一些情况下，PD-1抑制剂选自由以下组成的组：PDR001、纳武单抗(Nivolumab)、派姆单抗(Pembrolizumab)、匹迪利珠单抗(Pidilizumab)、MEDI0680、REGN2810、TSR-042、PF-06801591和AMP-224。在一些情况下，PD-1抑制剂是Jemperli。在一些实施方案中，另外的癌症治疗剂是PD-L1抑制剂。在一些情况下，PD-L1抑制剂选自由以下组成的组：FAZ053、阿替利珠单抗(Atezolizumab)、阿维鲁单抗(Avelumab)、德瓦鲁单抗(Durvalumab)和BMS-93655。在一些实施方案中，另外的癌症治疗剂是CTLA-4抑制剂。在一些情况下，CTLA-4抑制剂是伊匹木单抗(Ipilimumab)或曲美木单抗(Tremelimumab)。在一些情况下，另外的癌症治疗剂是TIM-3抑制剂。在一些情况下，TIM-3抑制剂是MGB453或TSR-022。在一些实施方案中，另外的癌症治疗剂是LAG-3抑制剂。在一些情况下，LAG-3抑制剂选自由以下组成的组：LAG525、BMS-986016和TSR-033。在一些实施方案中，另外的癌症治疗剂是mTOR抑制剂。在一些情况下，mTOR抑制剂是RAD001或雷帕霉素。

在一些实施方案中，本文公开的组合/制剂可以是稳定的。在一些实施方案中，“稳定”制剂是其中的组合在储存时基本上保持其物理和/或化学稳定性和/或生物活性的制剂。稳定性可以在选定的温度下在选定的时间段内测量。在一些实施方案中，制剂可以在环境温度或40℃下稳定至少1个月和/或在2-8℃下稳定至少1到2年。在一些实施方案中，制剂在冷冻(例如，至-70℃)和解冻后可以是稳定的。在一些实施方案中，如果蛋白质通过颜色和/或净度的目视检查观察到，或通过紫外线散射(测量可见聚集体)或尺寸排阻色谱(SEC)测量到其聚集、沉淀和/或变性几乎没有变化，则蛋白质在制剂中“保持其物理稳定性”。SEC测量不一定是可见聚集体的前体的可溶性聚集体。在一些实施方案中，如果在给定时间的化学稳定性使得蛋白质被认为保持其生物活性，则蛋白质在制剂中“保持其化学稳定性”。化学降解的物质可以具有生物活性和化学不稳定性。化学稳定性可以通过检测和定量蛋白质的化学改变形式来评估。化学改变可涉及大小修饰(例如，修剪)，其可使用例如SEC、SDS-PAGE和/或基质辅助激光解吸电离/飞行时间质谱(MALDI/TOF MS)进行评估。其它类型的化学改变包括电荷改变(例如，作为脱酰胺作用的结果而发生)，其可以通过例如离子交换色谱法进行评估。

在一些实施方案中，如果BCMA结合蛋白在给定时间的生物活性在制备药物制剂时表现出的生物活性的约10％以内(在测定误差范围内)，则BCMA结合蛋白在药物制剂中“保留”其生物活性，如在例如抗原结合测定中所确定的。在一些实施方案中，，如果CELMOD在给定时间的生物活性在制备药物制剂时表现出的生物活性的约10％以内(在测定误差范围内)，则CELMOD在药物制剂中“保留其生物活性”，如在例如抗原结合测定中所确定的。

在一些实施方案中，本文公开的缓冲剂是指通过其酸-碱偶联物组分的作用抵抗pH变化的缓冲溶液。在一些实施方案中，缓冲剂可以是磷酸盐、柠檬酸盐和其它有机酸。在一些实施方案中，缓冲剂可以选自由以下组成的组：乙酸钠、碳酸钠、柠檬酸盐、甘氨酰甘氨酸、组氨酸、甘氨酸、赖氨酸、精氨酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钠、柠檬酸钠、硼酸钠、三(羟甲基)-氨基甲烷、N-二甘氨酸(bicine)、三(羟甲基)甲基甘氨酸(tricine)、苹果酸、琥珀酸、马来酸、富马酸、酒石酸、天冬氨酸或其混合物。本文公开的组合物可包含抗氧化剂，包括抗坏血酸和/或甲硫氨酸。在一些实施方案中，本文公开的组合物可包含防腐剂。在一些实施方案中，防腐剂可以是化合包含在制剂中以基本上减少微生物(包括其中的细菌作用)从而促进例如多用途制剂的生产的化合物。潜在防腐剂的实例包括十八烷基二甲基苄基氯化铵；六甲氯铵；苯扎氯铵、苄索氯铵；苯酚、丁醇或苯甲醇；对羟基苯甲酸烷基酯，如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯；儿茶酚；间苯二酚；环己醇；3-戊醇；和间甲酚)；低分子量(少于约10个残基)多肽；蛋白质，如血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白；亲水性聚合物如聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、组氨酸、精氨酸或赖氨酸；单糖、二糖和其它碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合剂如EDTA；糖如蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨醇；形成盐的反离子如钠；金属络合物(例如，Zn-蛋白质络合物)；和/或非离子表面活性剂如TWEEN^TM、PLURONICS^TM或聚乙二醇(PEG)。

在一些实施方案中，本文公开的组合还可包含化疗剂、细胞毒性剂、细胞因子、生长抑制剂、抗激素剂和/或心脏保护剂。此类分子可以以对预期目的有效的量组合存在。

在一些实施方案中，本文公开的组合可以在缓释制剂中制备。缓释制剂的合适的实例包括含有所述组合或其部分的固体疏水聚合物的半透性基质，所述基质可以是成形制品的形式，例如薄膜或微胶囊。缓释基质的实例包括聚酯、水凝胶(例如，聚(2-羟乙基-甲基丙烯酸酯)或聚(乙烯醇))、聚交酯、L-谷氨酸和γ-乙基-L-谷氨酸的共聚物、不可降解的乙烯-乙酸乙烯酯、可降解的乳酸-乙醇酸共聚物如LUPRON DEPOT^TM(由乳酸-乙醇酸共聚物和醋酸亮丙瑞林组成的可注射微球)和聚-D-(-)-3-羟基丁酸。

在一些实施方案中，本文公开了包含BCMA结合蛋白和CELMOD的药物组合物，其可以以1mg/ml至500mg/ml的浓度存在，并且其中所述药物组合物具有2.0至10.0的pH。药物组合物还可以包含缓冲系统、防腐剂、张力剂、螯合剂、稳定剂和表面活性剂。在一些实施方案中，药物组合物可以是水性制剂，例如包含水的制剂。此类制剂可以是溶液或悬浮液。在另一个实施方案中，药物制剂可以是水溶液。在一些实施方案中，水性制剂可以是包含至少50％w/w水的制剂。在一些实施方案中，水溶液被定义为包含至少50％w/w水的溶液。在一些实施方案中，药物组合物可以是包含本文所述组合的稳定液体水性药物制剂。

药物组合物还可以包含另外的稳定剂，其可以进一步增强治疗活性组合的稳定性。稳定剂可以包括，但不限于，甲硫氨酸和EDTA，其保护多肽免受甲硫氨酸氧化，以及非离子表面活性剂，其保护多肽免受与冻融或机械剪切有关的聚集。在一些实施方案中，药物组合物可以进一步包含表面活性剂。表面活性剂可以选自洗涤剂、乙氧基化蓖麻油、聚乙二醇化甘油酯、乙酰化单酸甘油酯、山梨糖醇酐脂肪酸酯、聚氧丙烯-聚氧乙烯嵌段聚合物(例如泊洛沙姆，如PLURONIC F68、泊洛沙姆188和407、Triton X-100)、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯、聚氧乙烯和聚乙烯衍生物，如烷基化和烷氧基化衍生物(tween，例如Tween-20、Tween-40、Tween-80和Brij-35)、其甘油单酯或乙氧基化衍生物、其甘油二酯或聚氧乙烯衍生物、醇类、甘油、凝集素和磷脂(例如，磷脂酰丝氨酸、磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、二磷脂酰甘油和鞘磷脂)、磷脂衍生物(例如，二棕榈酰磷脂酸)和溶血磷脂(例如，棕榈酰溶血磷脂酰-L-丝氨酸和乙醇胺、胆碱、丝氨酸或苏氨酸的L-酰基-sn-甘油-3-磷酸酯)和溶血磷脂酰和磷脂酰胆碱的烷基、烷氧基(烷基酯)、烷氧基(烷基醚)-衍生物，例如溶血磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱的月桂酰基和肉豆蔻酰基衍生物，和极性头部基团的修饰物，即胆碱、乙醇胺、磷脂酸、丝氨酸、苏氨酸、甘油、肌醇和带正电荷的DODAC、DOTMA、DCP、BISHOP、溶血磷脂酰丝氨酸和溶血磷脂酰苏氨酸，和甘油磷脂(例如，脑磷脂)、甘油糖脂(例如吡喃半乳糖苷(galactopyransoide))、神经鞘糖脂(例如，神经酰胺、神经节苷脂)、十二烷基磷酸胆碱、鸡蛋溶血卵磷脂、夫西地酸衍生物(例如，牛磺-二氢夫西地酸钠等)、长链脂肪酸及其盐C6-C12(例如油酸和辛酸)，酰基肉碱和衍生物，赖氨酸、精氨酸或组氨酸的N^a-酰化衍生物，或赖氨酸或精氨酸的侧链酰化衍生物，包含赖氨酸、精氨酸或组氨酸和中性或酸性氨基酸的任意组合的二肽的N^a-酰化衍生物，包含中性氨基酸和两个带电荷氨基酸的任意组合的三肽的N^a-酰化衍生物，，DSS(多库酯钠，CAS登记号[577-11-7])、多库酯钙，CAS登记号[128-49-4])、多库酯钾，CAS登记号[7491-09-0])、SDS(十二烷基硫酸钠或月桂醇硫酸钠)、辛酸钠、胆酸或其衍生物、胆汁酸及其盐和甘氨酸或牛磺酸缀合物、熊去氧胆酸、胆酸钠、去氧胆酸钠、牛磺胆酸钠、甘胆酸钠、N-十六烷基-N,N-二甲基-3-铵基-l-丙烷磺酸盐、阴离子(烷基-芳基-磺酸盐)单价表面活性、两性离子表面活性剂(例如，N-烷基-N,N-二甲基铵-1-丙烷磺酸盐、3-胆酰胺基-1-丙基二甲基铵-1-丙烷磺酸盐、阳离子表面活性剂(季铵碱)(例如，十六烷基-三甲基溴化铵、十六烷基氯化吡啶)、非离子表面活性剂(例如，十二烷基β-D-吡喃葡糖苷)、泊洛沙明(poloxamine)(例如Tetronic′s)，它们是衍生自环氧丙烷和环氧乙烷顺序加成到乙二胺上的四官能嵌段共聚物，或者表面活性剂可以选自咪唑啉衍生物或其混合物。

试剂盒

还提供了包含药物组合物和使用说明书的试剂盒。为方便起见，试剂盒可以包含预定量的试剂，并附有使用说明书。

在一些实施方案中，本文公开了包含BCMA结合蛋白和本文公开的CELMOD的试剂盒。试剂盒可以包含多个注射器、安瓿、箔包或泡罩包装，每个包含本文所述的试剂盒组分的单个单位剂量。试剂盒的容器可以是密闭的、防水的(例如，不能渗透水分或蒸发变化)和/或不透光的。试剂盒可以包括适于组分施用的装置，例如注射器、吸入剂、移液管、镊子、量匙、滴管(例如滴眼管)、药签(例如棉签或木签)或任何此类递送装置。在一些实施方案中，装置可以是医疗植入装置，例如，包装用于外科手术插入。本文公开的试剂盒可以包含一种或多种能够实施该方法的试剂或仪器。

除上述组分外，还可以在试剂盒中提供使用说明书。这些说明书可以以多种形式存在于试剂盒中，例如在合适的介质或基质(例如，在其上印刷信息的一张或多张纸)上印刷信息、在试剂盒的包装中、在包装插页中等。在一些实施方案中，可以在记录了信息的计算机可读介质(例如，跳转/拇指驱动器、CD等)上提供使用说明书，或者在可以通过互联网访问网站上的信息的网站地址上提供使用说明书。

装置

本公开的另一方面提供了预填充的注射器或自动注射器装置，其包含本文所述的BCMA抗原结合蛋白、CELMOD或组合。在一些实施方案中，储存在容器、预填充的注射器、注射器或自动注射器装置中的组合可以含有本文公开的BCMA抗原结合蛋白和CELMOD。

实施例

实施例1：治疗癌症

受试者将被鉴定为患有癌症。将向受试者施用包含(a)抗BCMA抗原结合蛋白或抗BCMA ADC和(b)CELMOD的组合。

实施例2：治疗癌症

受试者将被鉴定为患有癌症。将向受试者施用(a)抗BCMA抗原结合蛋白或抗-BCMAADC和(b)CELMOD，其在将被共同施用的单独的组合物中。例如，患有癌症的受试者将被共同施用包含一种或多种对BCMA多肽具有结合特异性的ADC的第一组合物和包含一种或多种CELMOD的第二组合物。

实施例3：治疗癌症

受试者将被鉴定为患有癌症。将向受试者施用(a)抗BCMA抗原结合蛋白或抗-BCMAADC和(b)CELMOD，其在将被单独施用的单独的组合物中。例如，患有癌症的受试者将被分别施用包含一种或多种对BCMA多肽具有结合特异性的ADC的第一组合物和包含一种或多种CELMOD的第二组合物。

实施例4：治疗癌症

受试者将被鉴定为患有癌症。将向受试者施用包含1)贝兰他单抗莫福汀和2)美齐格米特(CC-92480)、伊伯多胺(CC-220)、阿伐度胺(CC-122)、CC-90009、CC-99282或其药学上可接受的盐的组合。

其它实施方案

应当理解，虽然已经结合本发明的详细描述对本发明进行了描述，但是前面的描述旨在说明而不是限制本发明的范围，本发明的范围由所附权利要求的范围限定。其它方面、优点和修改在所附权利要求的范围内。

实施方案：

1.组合，其包含：

a.抗BCMA抗原结合蛋白；和

b.cereblon E3连接酶调节剂(CELMOD)。

2.如实施方案1所述的组合，其中所述抗BCMA抗原结合蛋白包含抗体。

3.如实施方案2所述的组合，其中所述抗体是单克隆抗体。

4.如实施方案3所述的组合，其中所述单克隆抗体是IgG1。

5.如实施方案2-4中任一项所述的组合，其中所述抗体是非岩藻糖基化的。

6.如实施方案1-5中任一项所述的组合，其中所述抗BCMA抗原结合蛋白是人的、人源化的或嵌合的。

7.如实施方案1-6中任一项所述的组合，其中所述抗BCMA抗原结合蛋白包含：包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的CDRH1；包含SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的CDRH2；包含SEQ ID NO:3所示氨基酸序列的CDRH3；包含SEQ ID NO:4所示氨基酸序列的CDRL1；包含SEQID NO:5所示氨基酸序列的CDRL2；和包含SEQ ID NO:6所示氨基酸序列的CDRL3。

8.如实施方案1-7中任一项所述的组合，其中所述抗BCMA抗原结合蛋白包含：包含SEQ ID NO:7所示的氨基酸序列的重链可变区(VH)；和包含SEQ ID NO:8所示氨基酸序列的轻链可变区(VL)。

9.如实施方案1-8中任一项所述的组合，其中所述抗BCMA抗原结合蛋白包含：包含SEQ ID NO:9所示的氨基酸序列的重链(H)和包含SEQ ID NO:10所示的氨基酸序列的轻链(L)。

10.如实施方案1-9中任一项所述的组合，其中所述抗BCMA抗原结合蛋白是免疫偶联物。

11.如实施方案1-10中任一项所述的组合，其中所述抗BCMA抗原结合蛋白是包含与细胞毒素偶联的抗体的免疫偶联物。

12.如实施方案11所述的组合，其中所述细胞毒素是MMAE或MMAF。

13.如实施方案12所述的组合，其中所述细胞毒素是MMAF。

14.如实施方案1-13中任一项所述的组合，其中所述抗BCMA抗原结合蛋白是贝兰他单抗莫福汀。

15.如实施方案14所述的组合，其中所述组合包含至少约0.95mg/kg、1.9mg/kg、1.4mg/kg、2.5mg/kg或3.4mg/kg的贝兰他单抗莫福汀。

16.如实施方案1-15任一项所述的组合，其中所述cereblon E3连接酶调节剂具有小于1000道尔顿的分子量。

17.如实施方案1-16中任一项所述的组合，其中所述cereblon E3连接酶调节剂降解Ikaros蛋白、Aiolos蛋白或其组合。

18.如实施方案1-17任一项所述的组合，其中所述cereblon E3连接酶调节剂对cereblon具有小于1μM的IC₅₀值。

19.如实施方案1-18任一项所述的组合，其中所述cereblon E3连接酶调节剂包含美齐格米特(CC-92480)、伊伯多胺(CC-220)、阿伐度胺(CC-122)、CC-90009、CC-99282、前述任一种的药学上可接受的盐或其任意组合。

20.如实施方案1-18任一项所述的组合，其中所述cereblon E3连接酶调节剂是美齐格米特或其药学上可接受的盐。

21.如实施例20所述的组合，其中所述组合包含至少约0.1mg、0.2mg、0.3mg、0.4mg、0.5mg、0.6mg、0.7mg、0.8mg、0.9mg或1mg的美齐格米特或其药学上可接受的盐。

22.如实施方案1-18中任一项所述的组合，其中所述cereblon E3连接酶调节剂是伊伯多胺或其药学上可接受的盐。

23.如实施方案22所述的组合，其中所述组合包含至少约0.1mg、0.2mg、0.3mg、0.4mg、0.5mg、0.6mg、0.7mg、0.8mg、0.9mg、1mg、1.1mg、1.2mg或1.3mg的伊伯多胺或其药学上可接受的盐。

24.如实施方案1-18中任一项所述的组合，其中所述cereblon E3连接酶调节剂降解GSPT1。

25.如实施方案24所述的组合，其中所述cereblon E3连接酶调节剂是CC-90009或其药学上可接受的盐。

26.如实施方案1-18中任一项所述的组合，其中所述cereblon E3连接酶调节剂是阿伐度胺或其药学上可接受的盐。

27.如实施方案1-18中任一项所述的组合，其中所述cereblon E3连接酶调节剂是CC-99282或其药学上可接受的盐。

28.如实施方案1-27中任一项所述的组合，其中所述组合还包含药学上可接受的载体。

29.如实施方案1-28中任一项所述的组合，其中所述组合还包含佐剂。

30.如实施方案1-29中任一项所述的组合，其中所述组合在抗癌活性方面比抗BCMA抗原结合蛋白与免疫调节药物(IMiD)的组合更具协同作用。

31.如实施方案30所述的组合，其中所述IMiD包含硼替佐米、泊马度胺、来那度胺、地塞米松、沙利度胺或其药学上可接受的盐。

32.在有此需要的受试者中治疗癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效剂量的实施方案1-31中任一项所述的组合。

33.如实施方案32所述的方法，其中所述癌症选自由以下组成的组：多发性骨髓瘤、慢性淋巴细胞白血病、Waldenstrom巨球蛋白血症和非霍奇金淋巴瘤。

34.如实施方案32或33所述的方法，其中所述癌症是多发性骨髓瘤。

35.如实施方案34所述的方法，其中所述癌症是复发性和/或难治性多发性骨髓瘤。

36.如实施方案32-35中任一项所述的方法，其中所述受试者已经接受至少一种先前的癌症治疗。

37.如实施方案32-36中任一项所述的方法，其中至少约每3、4、6或8周一次向所述受试者施用所述治疗有效剂量。

38.如实施方案32-37中任一项所述的方法，其中与单独施用治疗有效量的抗BCMA抗原结合蛋白相比，施用治疗有效剂量的组合降低眼毒性。

39.如实施方案38所述的方法，其中所述抗BCMA抗原结合蛋白是贝兰他单抗莫福汀。

40.如实施方案38或39所述的方法，其中所述眼毒性是以下至少一种：角膜上皮变化、眼睛干涩、刺激、发红、视力模糊、眼睛干涩、畏光或视敏度变化。

41.如实施方案38-40中任一项所述的方法，其中所述眼毒性通过至少一种下列方法测量：最佳矫正视力、明显屈光的记录和用于获得最佳矫正视力的方法、当前眼镜处方(如果适用)、眼内压测量、眼前节(裂隙灯)检查包括角膜荧光素染色和晶状体检查、散瞳眼底镜检查、或眼表疾病指数(OSDI)。

42.如实施方案32-41中任一项所述的方法，其中所述抗BCMA抗原结合蛋白以至少约0.5mg/kg、0.95mg/kg、1.25mg/kg、1.7mg/kg、2.5mg/kg或3.4mg/kg的剂量施用于所述受试者。

43.实施方案1-31任一项的组合，其用于制备治疗癌症的药物。

44.实施方案1-31任一项的组合，其用于治疗癌症。

45.试剂盒，其用于癌症治疗，所述试剂盒包含:

a.实施方案1-31中任一项所述的组合；和

b.用于所述癌症治疗的使用说明书。

46.预填充的注射器或自动注射器装置，其包含实施方案1-31中任一项所述的组合。

序列表

SEQ ID NO:1–CDRH1

SEQ ID NO:2:CDRH2

SEQ ID NO:3:CDRH3

SEQ ID NO:4:CDRL1

SEQ ID NO:5:CDRL2

SEQ ID NO:6:CDRL3

SEQ ID NO:7:重链可变区

SEQ ID NO:8:轻链可变区

SEQ ID NO:9:重链区

SEQ ID NO:10:轻链区

SEQ ID NO:11:BQ76重链可变区

SEQ ID NO:12:BQ76轻链可变区

SEQ ID NO:13:BQ76重链区

其中X为K或不存在

SEQ ID NO:14:BQ76轻链区

SEQ ID NO:15:BU76重链可变区

SEQ ID NO:16:BU76轻链可变区

SEQ ID NO:17:BU76重链区

其中X为K或不存在

SEQ ID NO:18:BU76轻链区

SEQ ID NO:19:EE11重链可变区

SEQ ID NO:20:EE11轻链可变区

SEQ ID NO:21:EE11 scFV-Fc

其中X为K或不存在

SEQ ID NO:22:EM90重链

其中X为K或不存在

SEQ ID NO:23:EM90轻链

SEQ ID NO:24:FP31重链区

SEQ ID NO:25:FP31轻链区

Claims

1.组合，其包含：

a.抗BCMA抗原结合蛋白；和

b.cereblon E3连接酶调节剂(CELMOD)。

2.如权利要求1所述的组合，其中所述抗BCMA抗原结合蛋白包含抗体。

3.如权利要求2所述的组合，其中所述抗体是单克隆抗体。

4.如权利要求3所述的组合，其中所述单克隆抗体是IgG1。

5.如权利要求2-4中任一项所述的组合，其中所述抗体是非岩藻糖基化的。

6.如权利要求1-5任一项所述的组合，其中所述抗BCMA抗原结合蛋白是人的、人源化的或嵌合的。

7.如权利要求1-6中任一项所述的组合，其中所述抗BCMA抗原结合蛋白包含：包含SEQID NO:1所示的氨基酸序列的CDRH1；包含SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的CDRH2；包含SEQID NO:3所示的氨基酸序列的CDRH3；包含SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列的CDRL1；包含SEQID NO:5所示的氨基酸序列的CDRL2；和包含SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列的CDRL3。

8.如权利要求1-7中任一项所述的组合，其中所述抗BCMA抗原结合蛋白包含：包含SEQID NO:7所示的氨基酸序列的重链可变区(VH)；和包含SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列的轻链可变区(VL)。

9.如权利要求1-8中任一项所述的组合，其中所述抗BCMA抗原结合蛋白包含：包含SEQID NO:9所示的氨基酸序列的重链(H)和包含SEQ ID NO:10所示的氨基酸序列的轻链(L)。

10.如权利要求1-9中任一项所述的组合，其中所述抗BCMA抗原结合蛋白是免疫偶联物。

11.如权利要求1-10中任一项所述的组合，其中所述抗BCMA抗原结合蛋白是包含与细胞毒素偶联的抗体的免疫偶联物。

12.如权利要求11所述的组合，其中所述细胞毒素是MMAE或MMAF。

13.如权利要求12所述的组合，其中所述细胞毒素是MMAF。

14.如权利要求1-13中任一项所述的组合，其中所述抗BCMA抗原结合蛋白是贝兰他单抗莫福汀(belantamab mafodotin)。

15.如权利要求14所述的组合，其中所述组合包含至少约0.95mg/kg、1.4mg/kg、1.9mg/kg、2.5mg/kg或3.4mg/kg的贝兰他单抗莫福汀。

16.如权利要求1-15中任一项所述的组合，其中所述cereblon E3连接酶调节剂具有小于1000道尔顿的分子量。

17.如权利要求1-16中任一项所述的组合，其中所述cereblon E3连接酶调节剂降解Ikaros蛋白、Aiolos蛋白或其组合。

18.如权利要求1-17中任一项所述的组合，其中所述cereblon E3连接酶调节剂对cereblon具有小于1μM的IC₅₀值。

19.如权利要求1-18中任一项所述的组合，其中所述cereblon E3连接酶调节剂包含美齐格米特(CC-92480)、伊伯多胺(CC-220)、阿伐度胺(CC-122)、CC-90009、CC-99282、前述任一种的药学上可接受的盐或其任意组合。

20.如权利要求1-18中任一项所述的组合，其中所述cereblon E3连接酶调节剂是美齐格米特或其药学上可接受的盐。

21.如权利要求20所述的组合，其中所述组合包含至少约0.1mg、0.2mg、0.3mg、0.4mg、0.5mg、0.6mg、0.7mg、0.8mg、0.9mg或1mg的美齐格米特或其药学上可接受的盐。

22.如权利要求1-18中任一项所述的组合，其中所述cereblon E3连接酶调节剂是伊伯多胺或其药学上可接受的盐。

23.如权利要求22所述的组合，其中所述组合包含至少约0.1mg、0.2mg、0.3mg、0.4mg、0.5mg、0.6mg、0.7mg、0.8mg、0.9mg、1mg、1.1mg、1.2mg或1.3mg的伊伯多胺或其药学上可接受的盐。

24.如权利要求1-18中任一项所述的组合，其中所述cereblon E3连接酶调节剂降解GSPT1。

25.如权利要求24所述的组合，其中所述cereblon E3连接酶调节剂是CC-90009或其药学上可接受的盐。

26.如权利要求1-18中任一项所述的组合，其中所述cereblon E3连接酶调节剂是阿伐度胺或其药学上可接受的盐。

27.如权利要求1-18中任一项所述的组合，其中所述cereblon E3连接酶调节剂是CC-99282或其药学上可接受的盐。

28.如权利要求1-27中任一项所述的组合，其中所述组合还包含药学上可接受的载体。

29.如权利要求1-28中任一项所述的组合，其中所述组合还包含佐剂。

30.如权利要求1-29中任一项所述的组合，其中所述组合在抗癌活性方面比所述抗BCMA抗原结合蛋白与免疫调节药物(IMiD)的组合更具协同作用。

31.如权利要求30所述的组合，其中所述IMiD包含硼替佐米、泊马度胺、来那度胺、地塞米松、沙利度胺或其药学上可接受的盐。

32.在有此需要的受试者中治疗癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效剂量的权利要求1-31中任一项所述的组合。

33.如权利要求32所述的方法，其中所述癌症选自由以下组成的组：多发性骨髓瘤、慢性淋巴细胞白血病、Waldenstrom巨球蛋白血症和非霍奇金淋巴瘤。

34.如权利要求32或33所述的方法，其中所述癌症是多发性骨髓瘤。

35.如权利要求34所述的方法，其中所述癌症是复发性和/或难治性多发性骨髓瘤。

36.如权利要求32-35中任一项所述的方法，其中所述受试者已经接受至少一种先前的癌症治疗。

37.如权利要求32-36中任一项所述的方法，其中至少约每3、4、6或8周一次向所述受试者施用所述治疗有效剂量。

38.如权利要求32-37中任一项所述的方法，其中与单独施用治疗有效量的所述抗BCMA抗原结合蛋白相比，施用所述治疗有效剂量的所述组合降低眼毒性。

39.如权利要求38所述的方法，其中所述抗BCMA抗原结合蛋白是贝兰他单抗莫福汀。

40.如权利要求38或39所述的方法，其中所述眼毒性是以下至少一种：角膜上皮变化、眼睛干涩、刺激、发红、视力模糊、眼睛干涩、畏光或视敏度变化。

41.如权利要求38-40中任一项所述的方法，其中所述眼毒性通过至少一种下列方法测量：最佳矫正视力、明显屈光的记录和用于获得最佳矫正视力的方法、当前眼镜处方(如果适用)、眼内压测量、眼前节(裂隙灯)检查包括角膜荧光素染色和晶状体检查、散瞳眼底镜检查或眼表疾病指数(OSDI)。

42.如权利要求32-41中任一项所述的方法，其中所述抗BCMA抗原结合蛋白以至少约0.5mg/kg、0.95mg/kg、1.25mg/kg、1.4mg/kg、1.7mg/kg、2.5mg/kg或3.4mg/kg的剂量施用于所述受试者。

43.权利要求1-31中任一项的组合，其用于制备治疗癌症的药物。

44.权利要求1-31中任一项的组合，其用于治疗癌症。

45.试剂盒，其用于癌症治疗，所述试剂盒包含：

a.权利要求1-31中任一项所述的组合；和

b.用于所述癌症治疗的说明书。

46.预填充的注射器或自动注射器装置，其包含权利要求1-31中任一项所述的组合。