CN116687795A

CN116687795A - 透明三赞胶的制备方法和应用

Info

Publication number: CN116687795A
Application number: CN202310463912.1A
Authority: CN
Inventors: 胡炎华; 于宏艳; 杨志轩; 常利斌
Original assignee: Langfang Meihua Bio Technology Development Co Ltd
Current assignee: Langfang Meihua Bio Technology Development Co Ltd
Priority date: 2023-04-26
Filing date: 2023-04-26
Publication date: 2023-09-05

Abstract

本发明公开了透明三赞胶的制备方法和应用。本发明对三赞胶发酵液进行了特殊工艺的提取和制备，采用溶菌酶、蛋白酶和脂肪酶对三赞胶发酵液或水溶液分别进行脱菌、脱蛋白和脱脂处理最终获得了透光好，粘度适中，凝胶强度优秀的透明三赞胶样品。将该样品用于洗手液基础配方的验证，制备的样品与市售产品各方面性能接近，但稳定性相较于之前样品有显著的提升。同时，将该工艺直接应用于三赞胶发酵液或高浓度三赞胶溶液中产品的提取，获得的样品在后续的洗护日化制备中均可获得很好结果，从而改善三赞胶的性能，扩展其应用领域。

Description

透明三赞胶的制备方法和应用

技术领域

本发明涉及微生物产品制备及生活日用品领域，具体地说，涉及一种透明三赞胶的制备方法和应用。

背景技术

洗护日化用品是一类用于日常清洁或护肤产品，是一种用来清洁身体各部位的护肤清洁液，通过以机械摩擦和表面活性剂的作用，配合水流来清除身体各部位的污垢和附着的细菌。洗护用品具有适宜的粘度，既可改善产品外观，又可使产品具有一定的稳定性。常规的无机电解质氯化钠作为增稠剂，虽然价格便宜，但受主成分表面活性剂的加量影响，其增稠效果而变得有限。

三赞胶作为一种新型的微生物多糖，具有增稠、乳化、悬浮稳定等多重功能，且其受pH、溶液盐度等因素的影响较小，随加量的增加，其增稠效果更为明显。因此，三赞胶具备在洗护日化产品中应用作为增稠剂的极大可行性。

市售三赞胶样品，在外观、溶液透光、微生物指标等方面具有不同程度的不足：普通产品溶液透光低，制备的最终产品外观和色泽不佳或易受影响；微生物菌落总数太高，制备的产品稳定性容易受到影响。特别是表现在透明型日化洗护用品经过低温冷冻后，在观察稳定性时出现少量絮状杂质，从而影响产品状态。CN11150049B中使用离心或板框压滤的方法去除细胞，能使三赞胶的透明度有所提高，但由于三赞胶高粘特性，使得过滤或离心方法难以实现大规模操作，影响生产效率。

因此，开发合适的透明三赞胶制备工艺，以更适合于将三赞胶应用于日化洗护工业，从而提高产品的稳定性，是很有必要的。

发明内容

本发明的目的是提供一种透明三赞胶的制备方法和应用。

为了实现本发明目的，第一方面，本发明提供一种透明三赞胶的制备方法，方法I和II任选其一：

方法I包括以下步骤：

A、将三赞胶和水按质量比(2.5～3.0):100混合，所得三赞胶溶液作为三赞胶原液；或者，将产胶量与所述三赞胶溶液相当的三赞胶发酵液作为三赞胶原液；

B、将三赞胶原液升温至50～60℃，调pH至5.0～6.0，得到溶液I；

C、向溶液I中加入溶液I质量体积百分数0.01～0.05‰的溶菌酶，保持温度50～60℃，搅拌4～10h，然后调pH至7.5～9.0，得到溶液II；

D、向溶液II中加入溶液II质量体积百分数0.3～1.5‰的蛋白酶和0.01～0.05‰的脂肪酶，保持温度50～60℃，搅拌12～20h，然后降温至35～45℃，得到溶液III；

E、向溶液III中加入溶液III质量体积百分数0.1～1.0％的食品级可溶性无机盐，搅拌均匀后静置15～40min，得到溶液IV；

F、向溶液IV中加入乙醇，使体系中乙醇的浓度达到30-40％v/v，然后调整所述体系的pH至1.0～3.0，经分离操作后，将获得的粗品以乙醇浸泡，以获得乙醇浓度为72-85％v/v的物料体系，然后调整所述物料体系的pH至6.0～8.0，并保证所述物料体系中乙醇的浓度为70-82％v/v，再次分离，然后烘干、粉碎，得到透明三赞胶成品；或

向溶液IV中加入乙醇，使体系中乙醇的浓度达到30-40％v/v，然后调整所述体系的pH至1.0～3.0，经分离操作后，将获得的粗品以乙醇浸泡，以获得乙醇浓度为72-85％v/v的物料体系，然后调整所述物料体系的pH至6.0～8.0，并保证所述物料体系中乙醇的浓度为70-82％v/v，再次分离，然后烘干，将烘干物料与日化级EDTA-2Na按质量比(10～20):1混合粉碎，过80目筛，得到透明三赞胶成品。

方法II包括以下步骤：

A′、将三赞胶和水按质量比(2.5～3.0):100混合，所得三赞胶溶液作为三赞胶原液；或者，将产胶量与所述三赞胶溶液相当的三赞胶发酵液作为三赞胶原液；

B′、将三赞胶原液升温至50～60℃，调pH至7.5～9.0，得到溶液I′；

C′、向溶液I′中加入溶液I′质量体积百分数0.3～1.5‰的蛋白酶和0.01～0.05‰的脂肪酶，保持温度50～60℃，pH7.5～9.0，搅拌12～20h，然后调pH至5.0～6.0，得到溶液II′；

D′、向溶液II′中加入溶液II′质量体积百分数0.01～0.05‰的溶菌酶，保持温度50～60℃，搅拌4～10h，然后降温至35～45℃，得到溶液III′；

E′、向溶液III′中加入溶液III′质量体积百分数0.1～1.0％的食品级可溶性无机盐，搅拌均匀后静置15～40min，得到溶液IV′；

F′、向溶液IV′中加入乙醇，使体系中乙醇的浓度达到30-40％v/v，然后调整所述体系的pH至1.0～3.0，经分离操作后，将获得的粗品以乙醇浸泡，以获得乙醇浓度为72-85％v/v的物料体系，然后调整所述物料体系的pH至6.0～8.0，并保证所述物料体系中乙醇的浓度为70-82％v/v，再次分离，然后烘干、粉碎，得到透明三赞胶成品；或

向溶液IV′中加入乙醇，使体系中乙醇的浓度达到30-40％v/v，然后调整所述体系的pH至1.0～3.0，经分离操作后，将获得的粗品以乙醇浸泡，以获得乙醇浓度为72-85％v/v的物料体系，然后调整所述物料体系的pH至6.0～8.0，并保证所述物料体系中乙醇的浓度为70-82％v/v，再次分离，然后烘干，将烘干物料与日化级EDTA-2Na按质量比(10～20):1混合粉碎，过80目筛，得到透明三赞胶成品。

进一步地，步骤B和C′中用酸溶液调pH；所述酸溶液可以是无机酸或有机酸，优选盐酸、硫酸、硝酸、磷酸、亚硫酸、柠檬酸、乙酸等。

进一步地，步骤C、B’和C′中用浓度为30-40％m/v的氢氧化钠或氢氧化钾水溶液调pH。

进一步地，所用蛋白酶的酶活为5000～100000U/ml，溶菌酶的酶活为500～15000U/mg，脂肪酶的酶活为5000～50000U/g。

本发明所用蛋白酶和脂肪酶均购自诺维信(中国)生物技术有限公司。溶菌酶购自杭州安普饲料科技有限公司。

进一步地，步骤E或E′中所用食品级可溶性无机盐可选自氯化钠、氯化钾、氯化钙等中的至少一种。

进一步地，步骤F或F′在将获得的粗品以乙醇浸泡时，乙醇的加入量与粗品的体积质量比为(1-10):1mL/g，浸泡时间为15-45min。

步骤F在对所述体系的pH调整前，加入的乙醇的浓度为70-100％，优选75-95％

进一步地，步骤F或F′调整所述体系的pH至1.0～3.0时，采用的是3-12mol/L的无机酸溶液，优选6-9mol/L的盐酸或硫酸溶液，或者10-20％m/v的柠檬酸溶液。

进一步地，步骤F或F′在将获得的粗品以乙醇浸泡后，获得乙醇浓度为74-84％v/v的物料体系，然后调整pH后保证所述物料体系中乙醇的浓度为73-82％v/v，优选浸泡30min。

进一步地，步骤F或F′调整所述物料体系的pH时所用的碱为浓度为30-40％m/v的液态氢氧化钠和/或氢氧化钾；优选调整所述物料体系的pH至7.5～8.0。

进一步地，步骤F或F′再次分离后烘干的条件为：55-105℃处理2-10h。

第二方面，本发明提供按照所述方法制备的透明三赞胶的以下任一应用：

1)用于制备洗护日化用品；

2)用作增稠剂。

第三方面，本发明提供一种洗手液，包括如下质量份的各组分：表面活性剂5～30份，甘油5～15份，山梨糖醇5～15份，海藻糖3～10份，烷基多糖苷2～6份，加脂剂2～8份，珠光剂2～5份，氯化钠0.5～5份，本发明的透明三赞胶0.1～0.6份，抗硬水剂0.05～0.5份，防腐剂0.05～0.5份，香精0.05～0.5份，色素0～0.005份，用水补齐至100份。

进一步地，所述表面活性剂可以是离子型表面活性剂、非离子型表面活性剂、两性表面活性剂、混合型表面活性剂；优选阴离子表面活性剂，更优选高级脂肪酸的金属盐、硫酸盐、磺酸盐和磷酸酯盐等阴离子表面活性剂；优选胺(铵)盐类阳离子型表面活性剂；优选氨基酸、甜菜碱羧酸盐和磺酸盐等两性表面活性剂；优选聚乙二醇和多元醇型非离子表面活性剂，以及醇醚硫酸盐及醇醚羧酸盐等混合型表面活性剂，更优选脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸盐(AES或AESA)、α-烯基磺酸盐(AOS)和仲烷基磺酸钠(SAS)、十二烷基硫酸钠(K12)、椰油烷基酰胺基丙基甜菜碱(CAB)、十二烷基二甲基氧化胺(OB-2)、椰油单乙醇酰胺、烷基醇酰胺(6501)等，可根据实际需求进行匹配使用。

进一步地，所述加脂剂可选自椰子油、橄榄油、棕榈油、羊毛脂、蜂蜡、鲸蜡、霍霍巴油、矿油、矿脂、石蜡、硬脂酸及其衍生物，棕榈酸酯、椰油酸酯及它们的衍生物等中的至少一种。

进一步地，所述珠光剂可选自乙二醇单硬脂酸酯、乙二醇二硬脂酸酯等中的至少一种。

进一步地，所述抗硬水剂(主要为螯合剂)可选自乙二胺四乙酸及其钠盐(EDTA，EDTA-2Na，EDTA-3Na)、柠檬酸及其盐、磷酸盐类和氨基羧酸类等中的至少一种。

进一步地，所述防腐剂(常用的化妆品级)可选自苯甲醇、苯氧乙醇、咪唑烷基脲、苯甲酸、水杨酸、硼酸、山梨酸等醇醛或酸类及其盐或酯类衍生物中的至少一种。

香精和色素则以实际需要调至的香型和色泽进行匹配即可。

本发明对三赞胶的发酵液或水溶液进行pH调整，以适合后续操作所需。然后分别利用溶菌酶、蛋白酶和脂肪酶的处理效果，对三赞胶发酵液或水溶液进行脱菌、脱蛋白和脱脂处理。发酵液中的菌体被溶菌酶水解破裂，蛋白和细胞内容物释放；蛋白酶对部分发酵残留的蛋白及细胞内容蛋白进行水解，形成可溶性氨基酸；最后采用脂肪酶对发酵过程加入原料中残留的脂肪类物质进行分解。经上述处理的发酵液或三赞胶水溶液，经过乙醇溶剂洗涤萃取，分离和烘干得到三赞胶半成品。最后在粉碎过程中加入适量的抗硬水剂，共粉碎并最终获得透明三赞胶产品。抗硬水剂的加入，使得三赞胶样品更适合应用于洗护日化产品。此方法制备的三赞胶样品为透明型，外形清亮透明，稳定性极佳。同时制备的珠光洗手液珠光效果均匀，低温和高温稳定性极佳。室温放置6个月以上，仍不会出现析水分层或沉淀现象，相比其它市售三赞胶样品，稳定性和透光率有显著提升，且样品外观更具有吸引力。

借由上述技术方案，本发明至少具有下列优点及有益效果：

本发明对三赞胶发酵液进行了特殊工艺的提取和制备，最终获得了透光好，粘度适中，凝胶强度优秀的透明三赞胶样品。将该样品用于洗手液基础配方的验证，制备的样品与市售产品各方面性能接近，但稳定性相较于之前样品有显著的提升。同时，将该工艺直接应用于三赞胶发酵液或高浓度三赞胶溶液中产品的提取，获得的样品在后续的洗护日化制备中均可获得很好结果，从而改善三赞胶的性能，扩展其应用领域。

具体实施方式

本发明提供一种洗护日化用透明三赞胶的制备方法及其作为增稠剂的应用。

本发明采用如下技术方案：

1、按质量比(2.5～3.0):100称取市售三赞胶和水，充分溶解并搅拌均匀获得三赞胶的溶液，或产胶在此范围内的三赞胶发酵液。

2、将上述溶液或发酵液升温至50～60℃，用酸溶液调节pH至5.0～6.0备用，所述的酸溶液可采用盐酸、硫酸、硝酸、磷酸、亚硫酸、柠檬酸、乙酸等常规无机酸或有机酸。

3、按发酵液或水溶液体积，加入质量体积比为0.01～0.05‰的溶菌酶(预先用少量水溶解或分散)，保持温度并连续搅拌4～10h，搅拌速率以能将三赞胶发酵液或水溶液搅拌均匀为准。期间取三赞胶发酵液或其水溶液，然后以质量比1:9水溶液进行透光检测，至透光不再上升为止，所用溶菌酶购自杭州安普饲料科技有限公司。

4、进一步用氢氧化钠或氢氧化钾水溶液，将三赞胶发酵液或水溶液pH调至7.5～9.0，然后加入质量体积比为0.3～1.5‰的蛋白酶，同时加入质量体积比为0.01～0.05‰的脂肪酶(预先用少量无菌水溶解或分散)，保持温度并连续搅拌12～20h，搅拌速率以能将三赞胶发酵液或水溶液搅拌均匀为准。期间取三赞胶发酵液或其水溶液，然后以质量比1:9水溶液进行透光检测，至透光不再上升为止。所用蛋白酶和溶菌酶均购自诺维信(中国)生物技术有限公司，蛋白酶酶活单位为20000U/ml，脂肪酶酶活单位为10000U/g。

5、上述含三赞胶的发酵液或水溶液降温至35～45℃待用。

6、将上述含三赞胶的发酵液或水溶液的酶处理液，按质量体积比加入0.1～1.0％的食品级可溶性无机盐，充分搅拌均匀后静置15～40min。所述无机盐提前使用少量无菌水进行溶解后投入，所述无机盐选自食品级氯化钠、氯化钾、氯化钙中的一种或几种组合。

7、后续提取工艺可参照CN113248629A进行，如实施例1步骤(2)～(9)。

8、将水分烘干至＜12％的三赞胶样品进行粉碎，经过筛分，获得80目筛下物即为成品，可作为各类对产品透光有特殊要求的食品原料使用。或将烘干后的三赞胶样品与日化级EDTA-2Na以质量比(10～20):1共混粉碎并充分混合均匀后，取80目(0.175mm)筛下物作为产品包装。

以下实施例所用的发酵液参考CN113248629A，即将工程菌株MH-10(CN111057711B，其出发菌株Sphingomonassp.T-3，保藏编号GMCC NO:10150)接种于含有碳源、氮源、必要的营养物质的培养基中进行通气搅拌发酵，获得的发酵产物。

发酵培养基为：葡萄糖40g/L，玉米浆7.34g/L，MgSO₄·7H₂O 3.98g/L，CaCO₃3.34g/L，K₂HPO₄·7H₂O 0.9g/L，pH7.0。

发酵条件为：

0-20h，风量0.4～0.6vvm，温度30±0.5℃，搅拌200-400rpm；

20-24h，风量0.8～1.0vvm，温度30±0.5℃，搅拌400-500rpm；

24-48h，风量1.0～1.1vvm，温度30±0.5℃，搅拌500-650rpm；

48-72h，风量1.1～0.8vvm，温度30±0.5℃，搅拌650-70 0rpm。

发酵周期72h。

9、将上述产品用于制备洗手液，按质量份，其基本配方如下：表面活性剂5～30份，甘油5～15份，山梨糖醇5～15份，海藻糖3～10份，烷基多糖苷2～6份，加脂剂2～8份，珠光剂2～5份，氯化钠0.5～5份，本发明的透明三赞胶0.1～0.6份，抗硬水剂0.05～0.5份，防腐剂0.05～0.5份，香精0.05～0.5份，色素0～0.005份，其余以水补齐至100份。

上述所述表面活性剂，可选用离子型和非离子型，包括高级脂肪酸的金属盐、硫酸盐、磺酸盐和磷酸酯盐等阴离子表面活性剂，胺(铵)盐类阳离子型表面活性剂。也可选用氨基酸和甜菜碱羧酸盐和磺酸盐等两性表面活性剂；还可选用聚乙二醇和多元醇型非离子表面活性剂，以及醇醚硫酸盐及醇醚羧酸盐等混合型表面活性剂等，典型的如脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸盐(AES或AESA)，α-烯基磺酸盐(AOS)和仲烷基磺酸钠(SAS)、十二烷基硫酸钠(K12)、椰油烷基酰胺基丙基甜菜碱(CAB)、十二烷基二甲基氧化胺(OB-2)、椰油单乙醇酰胺、烷基醇酰胺(6501)等，可根据实际需求进行匹配使用。

所述加脂剂包括椰子油、橄榄油、棕榈油、羊毛脂、蜂蜡、鲸蜡、霍霍巴油、矿油、矿脂、石蜡、硬脂酸及其衍生物，棕榈酸酯、椰油酸酯及上述各成分的衍生物等。

所述珠光剂包括乙二醇单硬脂酸酯、乙二醇二硬脂酸酯的一种或几种。

所述抗硬水剂主要为螯合剂，包括乙二胺四乙酸及其钠盐(EDTA，EDTA-2Na，EDTA-3Na)，柠檬酸及其盐，磷酸盐类和氨基羧酸类等。

所述防腐剂为常用的化妆品级，如苯甲醇、苯氧乙醇、咪唑烷基脲、苯甲酸、水杨酸、硼酸、山梨酸等醇类、醛或酸类及其盐类或酯类衍生物中的一种或几种。

香精和色素则以实际需要调至的香型和色泽进行匹配即可。

10、洗手液制备步骤如下：

(1)将适量水、色素、山梨糖醇、表面活性剂、海藻糖、烷基多糖苷、加脂剂、抗硬水剂、防腐剂等组分按顺序及质量称好，搅拌条件下置于容器中充分溶解；

(2)称取氯化钠溶解于上述液体中；

(3)甘油、三赞胶预混合分散，并投入至上述体系中；

(4)加热上述体系溶液至75～85℃；

(5)称取珠光剂，投入上述体系中充分溶解并保温1～2h；

(6)缓慢降温至40～50℃，形成珠光效果；

(7)以10～20％柠檬酸溶液调整体系pH至所需；

(8)加入香精，然后用水补足体系，适当搅拌以使均匀；

(9)静置16～24h待测。

上述技术方案中所述原料均为日化级别市售产品，三赞胶为市售食品级或本发明方案制备样品。如进行透明型产品测试，则不加入珠光剂，并以水补足体系。

为进一步验证产品性能的差异，采用如下方式进行产品性能评价：

1)三赞胶样品的理化指标测试

三赞胶样品的基本理化指标，参照CN113248629A实验例部分进行测定。

2)洗手液pH值的测定

25℃条件下，用pH计测洗手液的pH值。

3)洗手液粘度的测定

25℃条件下，用Brookfield LVDV-II+Pro旋转粘度计，64#转子，60rpm条件下测定洗手液的粘度。

4)洗手液稳定性的测定

将不少于100mL的试样置于40±2℃的电热恒温箱中保持24h，取出恢复室温；另一份样品置于-5±2℃冰箱中保持24h，取出恢复室温，与室温放置样品统一观察现象并记录。

5)洗手液去污能力的测定

用移液管取0.25ml的洗手液产品于烧杯中，加入100ml超纯水，摇匀，滴加纯机油，振荡，滴加到最后一滴机油不溶解为止，准确记录洗手液溶解纯机油的体积，用记录体积的大小来表征洗手液去污能力的相对大小。

6)发泡力的测定

采用震荡法，在比色管中加入0.01ml待测洗手液，再加入10ml蒸馏水，盖好盖子，震摇50次(震摇方向、快慢、强度等尽可能一致)，取下盖子，加入10ml水，将比色管壁上泡沫冲下，记录泡沫的高度及泡沫破坏到原有高度一半时所需时间，以泡沫高度作为洗手液起泡性能的量度，以泡沫破坏到原有高度一半时所需时间表征泡沫的稳定性。

7)洗手液透光的测定

将洗手液按体积倍数稀释3倍，然后置于1cm比色杯中，600nm波长下测定其透光率，并记录结果。

8)感官评价

采用10人评价小组，受试者从泵头处挤压出约黄豆大小的样品，从黏度、清爽程度及洗后干燥程度，延展度和细腻性方面进行洗手液的对比感官评价，详细评分标准如表1所示：

表1洗手液的感官评价

黏度(10)	洗后干燥度(10)	清爽度(10)	延展度(10)	细腻感(10)
					黏度适中(8～10)	保持湿润(8～10)	清爽适中(8～10)	容易展开(8～10)	有细腻感(8～10)
黏度一般(6～7)	湿润一般(6～7)	有油腻感(6～7)	展开一般(6～7)	无细腻感(6～7)
					太稀没黏度(＜6)	干燥(＜6)	油腻泛光(＜6)	展开费力(＜6)	粗糙有蜂窝(＜6)

9)长期货架期观察

将洗手液样品置于室温下，定期观察样品变化，周期为每个月检查一次。第六个月为最后一次检查，普通珠光型产品不应发生沉淀，分层或絮凝现象；透明型产品不应出现不溶物。

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，所用原料均为市售商品。实施例1一种洗护日化用透明三赞胶及其制备方法及其在制备洗手液中的应用

1、将工程菌株MH-10(CN111057711B，其出发菌株Sphingomonassp.T-3)接种于含有碳源、氮源、营养物质的培养基中进行通气搅拌发酵，获得的发酵产物：产胶得率为2.65g/100g发酵液。

2、将上述发酵液升温至60℃，用6M盐酸溶液调节pH至5.2。

3、按发酵液体积加入质量体积比为0.03‰的溶菌酶(预先用100mL无菌水分散)，保持温度并连续搅拌10h，搅拌速率以能将三赞胶发酵液或水溶液搅拌均匀为准。加入溶菌酶前，及处理过程中分别取三赞胶发酵液，以质量比1:9加水搅拌均匀稀释，离心去除气泡后，在600nm波长下进行透光检测，至透光达到85.03％。

4、用35％氢氧化钠溶液，将三赞胶发酵液或水溶液pH调至8.7，然后加入质量体积比为1.2‰的蛋白酶，同时加入质量体积比为0.05‰的脂肪酶(预先用100mL无菌水分散溶解)，保持温度并连续搅拌12h，搅拌速率以能将三赞胶发酵液或水溶液搅拌均匀为准。期间取三赞胶发酵液以质量比1:9加水稀释均匀并在600nm波长下进行透光检测，至透光达到95.09％。

5、降温上述含三赞胶的酶处理液至44.8℃。

6、将上述含三赞胶的酶处理液，按质量体积比加入0.6％的食品级氯化钙(预先用100mL无菌水溶解)，充分搅拌均匀后静置30min。

7、后续提取步骤参照CN113248629A中实施例1的步骤(2)～(9)进行。具体如下：

(1)在步骤6所得溶液中加入浓度为70％(v/v)的乙醇溶液至原料液中酒精含量达到35±5％(v/v)。

(2)在步骤(1)所得溶液中加入6mol/L的硫酸溶液，搅拌同时测定物料pH至1.72，获得具有纤维物料的沉降液。

(3)分离沉降液，获得纤维状物料团块及母液。

(4)在步骤(3)获得的200g物料团块中，加入400mL 95％(v/v)的乙醇溶液，搅拌调节物料中乙醇浓度至76.5％(v/v)，浸泡30min。

(5)在上述步骤(4)所得物料中，加入40％(m/V)的NaOH溶液，调节物料pH至7.82，且乙醇浓度为75.9％(v/v)。

(6)分离上述物料，获得纤维状湿成品和母液。

(7)85℃，烘干时间6h。

(8)将上述两次分离得到的母液，采用旋转蒸发设备进行蒸馏，蒸馏温度45±0.5℃，真空度-0.08～-0.10MPa。冷却后的馏出液组分经测定乙醇含量为85.7％(v/v)，回收后可再次利用到三赞胶的提取中。

8、取水分烘干至8.7％的三赞胶样品100g，经过粉碎筛分，获得80目筛下物(0.175mm)即为成品，可作为各类对产品透光有特殊要求的食品原料使用。

9、同样取上述步骤8所述未粉碎的三赞胶的样品100g，加入5g日化级乙二胺四乙酸二钠进行共粉碎，经过筛分，获得80目筛下物(0.175mm)产品，作为下述制备洗手液用的洗护日化级三赞胶产品。

10、将上述步骤9的产品用于制备洗手液，按质量份，其基本配方如下：十二烷基醚硫酸铵/脂肪醇醚硫酸铵盐10份，椰油烷基酰胺基丙基甜菜碱3份，甘油15份，山梨糖醇10份，海藻糖4份，烷基多糖苷4份，聚乙二醇-7椰油酸甘油酯2份，乙二醇单硬脂酸酯4份，氯化钠5份，本发明所用三赞胶0.6份，尼泊金甲酯0.1份，柠檬金桔香精0.1份，乙二胺四乙酸二钠0.05份，柠檬黄色素0.001份，其余以水补齐至100份。

11、洗手液制备步骤如下：

a)将适量水、色素、山梨糖醇、表面活性剂、海藻糖、烷基多糖苷、加脂剂、抗硬水剂、防腐剂等组分按顺序及质量称好，搅拌条件下置于容器中充分溶解。

b)称取氯化钠溶解于上述液体中；

c)甘油、三赞胶预混合分散，并投入至上述体系中；

d)使用78±0.5℃水浴加热上述体系溶液至体系均匀，溶解充分；

e)称取珠光剂，投入上述体系中充分溶解并保温1h；

f)缓慢降温至47.2℃，形成珠光效果；

g)以10％柠檬酸溶液调整体系pH至4.26；

h)加入香精，然后用水补足体系，适当搅拌以使均匀；

i)静置24h待测。

实施例2一种洗护日化用透明三赞胶及其制备方法及其在制备洗手液中的应用

与实施例1不同之处在于：

1、将实施例1的发酵液升温至60℃，先用35％氢氧化钠溶液调节发酵液pH至8.5。

2、按发酵液体积加入质量体积比为1.5‰的蛋白酶，同时加入质量体积比为0.03‰的脂肪酶(预先用100mL无菌水分散溶解)，保持温度并在12h前以35％氢氧化钠溶液维持发酵液pH8.5±0.2，继续保持温度搅拌至15h，搅拌速率以能将三赞胶发酵液或水溶液搅拌均匀为准。期间取三赞胶发酵液以质量比1:9加水稀释均匀，在600nm波长下进行透光检测，至透光达到90.91％。

3、用6M盐酸溶液，将三赞胶发酵液pH调至5.5，然后加入0.02‰的溶菌酶(预先用100mL无菌水分散)，保持温度并连续搅拌8h，搅拌速率以能将三赞胶发酵液或水溶液搅拌均匀为准。加入溶菌酶前，及处理过程中分别取三赞胶发酵液，以质量比1:9加水搅拌均匀稀释，离心去除气泡后，在600nm波长下进行透光检测，至透光达到95.23％。

4、降温上述含三赞胶的酶处理液至40.2℃。

5、后续提取步骤参照实施例1。

6、洗手液的制备方法与实施例1中步骤10的区别在于，不加入乙二醇单硬脂酸酯，并以水取而代之，制得透明型洗手液样品。

实施例3一种洗护日化用透明三赞胶及其制备方法及其在制备洗手液中的应用

与实施例1差别仅在于：步骤10样品制备过程中不加入乙二醇单硬脂酸酯，并以水取而代之，制得的透明型洗手液样品。

实施例4一种洗护日化用三赞胶及其制备方法及其在制备洗手液中的应用

与实施例1差别在于：

a、样品制备过程中使用的三赞胶为普通型，参考CN113248629A中实施例1步骤(1)～(9)制备；

b、将烘干至水分含量8.2％的未粉碎样品100g，同样加入5g日化级乙二胺四乙酸二钠进行共粉碎，经过筛分获得80目筛下物(0.175mm)即为成品，制得洗手液样品。

实施例5一种洗护日化用透明三赞胶及其制备方法及其在制备洗手液中的应用

1、取市售三赞胶样品(梅花生物科技集团股份有限公司)3.0g，加水100g并充分搅拌溶解完全，配制成溶液。

2、将上述溶液升温至52℃，用6M盐酸溶液调节pH至5.8。

3、按发酵液体积加入质量体积比为0.05‰的溶菌酶(预先用100mL无菌水分散)，保持温度并连续搅拌8h，搅拌速率以能将三赞胶发酵液或水溶液搅拌均匀为准。加入溶菌酶前，及处理过程中分别取三赞胶发酵液，以质量比1:9加水搅拌均匀稀释，离心去除气泡后，在600nm波长下进行透光检测，至透光达到82.59％。

4、用35％氢氧化钠溶液，将三赞胶发酵液或水溶液pH调至7.8，然后加入质量体积比为1.5‰的蛋白酶，同时加入质量体积比为0.01‰的脂肪酶(预先用100mL无菌水分散溶解)，保持温度并连续搅拌20h，搅拌速率以能将三赞胶发酵液或水溶液搅拌均匀为准。期间取三赞胶发酵液以质量比1:9加水稀释均匀并在600nm波长下进行透光检测，至透光达到93.28％。

5、降温上述含三赞胶的酶处理液至35.1℃。

6、将上述含三赞胶的酶处理液，按质量体积比加入0.9％的食品级氯化钠(预先用100mL无菌水溶解)，充分搅拌均匀后静置40min。

7、后续提取步骤同实施例1中步骤7。

8、取水分烘干至9.2％的三赞胶样品100g，经过粉碎筛分，获得80目筛下物(0.175mm)即为成品，可作为各类对产品透光有特殊要求的食品原料使用。

9、同样取上述步骤8中的样品100g，加入10g日化级乙二胺四乙酸二钠进行共粉碎，经过筛分，获得80目筛下物(0.175mm)产品，作为下述制备洗手液用的洗护日化级三赞胶产品。

10、将上述步骤9的产品用于制备洗手液，按质量份，其基本配方如下：十二烷基醚硫酸铵/脂肪醇醚硫酸铵盐15份，椰油烷基酰胺基丙基甜菜碱2份，甘油5份，山梨糖醇15份，海藻糖10份，烷基多糖苷6份，聚乙二醇-7椰油酸甘油酯8份，乙二醇单硬脂酸酯5份，氯化钠0.5份，本发明所用三赞胶0.1份，尼泊金甲酯0.15份，柠檬金桔香精0.1份，乙二胺四乙酸二钠0.4份，柠檬黄色素0.002份，其余以水补齐至100份。

11、洗手液的制备步骤同实施例1步骤11。

实施例6一种透明三赞胶制备方法及其在制备洗手液中的应用

具体步骤同实施例5，不同之处在于：

a、制备洗手液的三赞胶由实施例5的步骤8所制备。

b、制备洗手液时，配方如实施例5中步骤10所示，区别在于乙二胺四乙酸二钠的加量为0.5份。

c、步骤10中不加入乙二醇单硬脂酸酯，而以水取而代之。

实施例7一种洗护日化用透明三赞胶及其制备方法及其在制备洗手液中的应用三赞胶选用实施例5中步骤9所述样品，不同之处在于：

a、采用实施例1中步骤10的配方及步骤11的方法制备洗手液。

b、制备洗手液是不加入乙二胺四乙酸二钠及乙二醇单硬脂酸酯，而以水取而代之。

对比例1：一种不含三赞胶的洗手液制备方法

制备洗手液的主要步骤与实施例1相同，区别仅在于：洗手液制备过程中不加入三赞胶，而以水代之。

对比例2：一种含三赞胶的洗手液制备方法

制备洗手液的主要步骤与实施例4完全相同，区别仅在于：洗手液制备过程中不加入乙二醇单硬脂酸酯，而以水代之：

对比例3：一种透明三赞胶的制备方法及其在制备洗手液中的应用

1、将实施例1所获得的发酵液升温至60.2℃，用6M盐酸溶液调节pH至5.25。

2、按实施例1步骤2进行溶菌酶处理及检测，至发酵液稀释后透光达到80.39％。

3、用35％氢氧化钠溶液调整处理液pH至7.91，然后加入质量体积比为0.05‰的脂肪酶(预先用100mL无菌水分散溶解)，保持温度及搅拌，继续处理12h至透光提升至82.48％；

4、用6M盐酸溶液调节pH至5.51，然后加入质量体积比为1.5‰的酸性蛋白酶，保持温度并连续搅拌，直至透光不再提升。最终溶液按前述检测至透光81.41％。

5、后续参照实施例1进行提取及洗手液样品制备，制备过程中不加入乙二醇单硬脂酸酯，以水补齐总量。

对比例4：一种透明三赞胶在制备洗手液中的应用

1、使用实施例1获得的三赞胶进行洗手液样品制备，按质量份，其基本配方如下：十二烷基醚硫酸铵/脂肪醇醚硫酸铵盐3份，椰油烷基酰胺基丙基甜菜碱2份，甘油15份，山梨糖醇15份，海藻糖10份，烷基多糖苷2份，聚乙二醇-7椰油酸甘油酯5份，乙二醇单硬脂酸酯5份，氯化钠3份，本发明所用三赞胶0.6份，尼泊金甲酯0.1份，柠檬金桔香精0.1份，乙二胺四乙酸二钠0.05份，柠檬黄色素0.001份，其余以水补齐至100份。

上述各实施例和对比例所用三赞胶及相关终产品检测结果如下：

1、各实施例和对比例所用亲水胶体基本指标如表2所示：

表2各实施例和对比例所用亲水胶体基本指标

注：a，样品粉碎前未加入乙二胺四乙酸二钠，用于食品级产品；

b，样品粉碎前加入乙二胺四乙酸二钠，用于洗护日化产品。

从上述结果可以看出，本发明制备的三赞胶产品在水粘度，凝胶强度以及微生物菌落总数和产品透光上更有优势，特别是产品水溶液透光，比未处理的工艺路线有非常显著的提升，更适合于对产品透光要求高的食品工业或洗护日化行业应用。

同时，本发明工艺中在粉碎过程中引入日化级乙二胺四乙酸二钠作为抗硬水剂，在后期洗护日化品应用过程中，可少加或不再添加抗硬水剂，以满足产品的需求。

2、各实施例和对比例制备的洗手液基本指标如表3所示：

表3各实施例和对比例制备的洗手液基本指标

分组

pH

粘度mPa·s

去污能力mL

发泡力mL

泡沫稳定性h

样品透光％

实施例1

4.25

2784±49

0.15±0.00

19.7±0.9

24.2±0.3

6.47±0.15

实施例2

4.27

2430±25

0.15±0.01

20.8±0.5

23.9±0.2

96.02±0.88

实施例3

4.20

2495±38

0.16±0.01

19.7±1.2

23.3±0.3

95.88±1.89

实施例4

4.21

2853±21

0.13±0.01

18.7±0.5

19.8±0.3

4.62±0.10

实施例5

4.27

2702±37

0.19±0.02

23.3±1.2

24.4±0.5

5.19±0.18

实施例6

4.23

2492±19

0.21±0.00

23.7±0.9

25.0±0.1

97.09±1.21

实施例7

4.25

2617±28

0.16±0.01

20.7±0.9

23.7±0.6

97.21±0.59

对比例1

4.24

1709±11

0.17±0.01

21.0±0.8

19.9±0.5

96.48±0.22

对比例2

4.22

2457±12

0.13±0.02

19.1±0.3

20.1±0.3

8.12±0.19

对比例3

4.23

2397±18

0.15±0.02

19.8±0.6

20.9±0.7

60.16±1.59

对比例4

4.21

227±12

0.06±0.00

10.2±0.8

4.5±0.8

97.98±0.64

市售样1

4.23

2529±95

0.15±0.00

21.0±0.8

19.5±0.4

96.57±0.16

注：市售样1为威露士健康抑菌洗手液，购自商超。下同。

从上述结果来看，本发明工艺所获得的的三赞胶样品制备的洗手液(实施例2、3、6和7)，其透光相较于非经本发明工艺制备三赞胶获得的洗手液(实施例4、对比例2)有明显提升，可达到市售产品水平；若洗手液中加入珠光剂，则其透光受珠光剂影响有所下降，属于正常现象(如实施例1和5)。同时，三赞胶增加产品最终粘度效果显著(如各实施例与对比例1的对比结果)。此外，受加入珠光剂的影响，凡加入珠光剂的产品，其粘度会有所增加，这意味着工业中可根据实际需要进行三赞胶加量的些许调整，以取得符合预期的产品粘度。

从各实施例数据也可以看出，不同实施例对比，其表面活性剂和保湿剂等基本配方有所变动，但整体对产品透光趋势影响不大，随着配方的调整，整体各配方的样品均可与市售产品接近。这意味着，工业中可根据各个配方原料的价格有所变动，只要符合最终产品的成本及质量需求即可。所制备的透明型三赞胶在不同配方的样品中均可良好使用。对比例3使用酸性蛋白酶进行处理，结果所制备的样品其透光率明显下降，表明酸性蛋白酶不适合处理三赞胶发酵液进行蛋白去除，因此不适合透明型三赞胶产品的生产。对比例4样品由于起泡去污能力较差，不符合预期。

此外，本发明工艺制备的三赞胶样品所获得的洗手液，其去污能力、起泡能力和泡沫稳定性均可达到与市售相近的程度，说明洗手液的制备工艺操作可行。

3、洗手液耐寒、耐热及长期货架期稳定性考察结果如表4所示：

表4洗手液耐寒、耐热及长期货架期稳定性考察结果

注：a,透明型产品，全程无颗粒或不溶物析出；

b,下层有析出絮状物，为珠光剂成分，随时间延长越来越明显；

c,上层显示有澄清状液体出现，随时间延长越来越明显。

上述结果证明，经过本发明工艺改进后的三赞胶产品，其用于洗手液制备中，可显著提升产品的稳定性，表现为其耐热能力的提升和货架期的延长。此现象和有益效果将有助于本发明工艺获得的产品应用于更多洗护日化品的产品状态调整中。

此外，实验发现，虽然实施例1和实施例2在酶的处理顺序上有所调整，但所制备的样品在最终产品应用过程中无明显差异；同时制备透明型洗手液也可以看出，实施例2和实施例3的洗手液均稳定无析出物。这说明，在对三赞胶发酵液或水溶液进行酶处理过程中，加酶的顺序对最终产品的指标影响不大。但由于使用碱性蛋白酶进行处理，且处理周期较长，因此若先加入蛋白酶和脂肪酶，则在该两种酶处理过程中，需要保持一段时间的pH稳定在适当范围，因此需要以碱液进行pH的调整，由此会对生产成本造成一定的增加。因此，无论调整酶的加入顺序，本发明均可制备较为理想的透明型三赞胶样品，并可应用于洗护日化产品中。

经过酶处理的三赞胶，其制备的洗手液样品稳定性有所提升，本发明所述方案制备的产品，其稳定性提升尤其明显。

4、洗手液感官测试

10名受试者对洗手液进行洗涤测试，结果如表5所示：

表5洗手液洗涤测试感官评价表

分组	黏度(10)	洗后干燥度(10)	清爽度(10)	延展度(10)	细腻感(10)
						实施例1	7.9±0.2	8.2±0.1	8.1±0.2	7.9±0.2	8.1±0.3
实施例2	8.0±0.5	8.2±0.8	8.4±0.7	7.7±0.5	8.2±0.6
						实施例3	7.1±0.2	8.3±1.0	8.3±0.8	7.8±0.1	7.9±0.2
实施例4	8.0±1.0	8.1±0.3	8.0±0.0	6.7±0.3	7.2±0.6
						实施例5	7.9±0.3	8.2±0.6	9.0±1.0	7.2±0.6	8.2±0.2
实施例6	7.2±0.9	8.2±0.2	8.9±0.6	7.9±0.2	8.0±0.4
						实施例7	7.2±1.0	8.2±0.7	9.0±0.8	7.4±0.4	8.2±0.4
对比例1	6.1±0.9	8.0±0.9	8.0±1.6	9.1±0.2	8.0±0.1
						对比例2	7.7±0.7	8.0±0.6	8.2±1.1	7.4±0.6	8.3±0.8
对比例3	8.1±1.6	8.1±0.2	8.0±0.6	7.4±0.9	8.0±1.2
						对比例4	3.2±0.6	8.7±0.5	8.2±1.0	4.5±0.8	4.6±0.4
市售样1	8.0±0.3	7.0±0.7	7.8±2.5	7.8±0.4	8.1±0.2

上述结果可以看出，三赞胶应用于洗手液中，对其黏度，延展性有较大影响，这主要来源于三赞胶良好的增稠性能。由于各实施例中表面活性剂、保湿剂、加脂剂、珠光剂等基本原料的使用和比例的相互调整，洗手液整体感官均表现较好。整体结果表面，三赞胶经过特殊工艺的提取和处理，极适用于洗手液和其它洗护日化品中的应用，以提高产品粘稠度，改善物料在身体部位皮肤上的存留时间，并提供良好的稳定性，改善产品货架期，具有极高的工业应用价值。

虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之做一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims

1.透明三赞胶的制备方法，其特征在于，方法I和II任选其一；

方法I包括以下步骤：

向溶液IV中加入乙醇，使体系中乙醇的浓度达到30-40％v/v，然后调整所述体系的pH至1.0～3.0，经分离操作后，将获得的粗品以乙醇浸泡，以获得乙醇浓度为72-85％v/v的物料体系，然后调整所述物料体系的pH至6.0～8.0，并保证所述物料体系中乙醇的浓度为70-82％v/v，再次分离，然后烘干，将烘干物料与日化级EDTA-2Na按质量比(10～20):1混合粉碎，过80目筛，得到透明三赞胶成品；

方法II包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤B或C′中用酸溶液调pH；所述酸溶液为无机酸或有机酸，优选盐酸、硫酸、硝酸、磷酸、亚硫酸、柠檬酸、乙酸；

步骤C、B′和C’中用浓度为30-40％m/v的氢氧化钠或氢氧化钾水溶液调pH。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所用蛋白酶的酶活为5000～100000U/ml，溶菌酶的酶活为500～15000U/mg，脂肪酶的酶活为5000～50000U/g。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤E或E′中所用食品级可溶性无机盐选自氯化钠、氯化钾、氯化钙中的至少一种。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤F或F′在将获得的粗品以乙醇浸泡时，乙醇的加入量与粗品的体积质量比为(1-10):1mL/g，浸泡时间为15-45min。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤F或F′在对所述体系的pH调整前，加入的乙醇的浓度为70-100％，优选75-95％；和/或，

调整所述体系的pH至1.0～3.0时，采用的是3-12mol/L的无机酸溶液，优选6-9mol/L的盐酸或硫酸溶液，或者10-20％m/v的柠檬酸溶液；和/或，

将获得的粗品以乙醇浸泡后，获得乙醇浓度为74-84％v/v的物料体系，然后调整pH后保证所述物料体系中乙醇的浓度为73-82％v/v，优选浸泡30min；和/或，

调整所述物料体系的pH时所用的碱为浓度为30-40％m/v的液态氢氧化钠和/或氢氧化钾；优选调整所述物料体系的pH至7.5～8.0。

7.根据权利要求1-6任一项所述的方法，其特征在于，步骤F或F′再次分离后烘干的条件为：55-105℃处理2-10h。

8.按照权利要求1-7任一项所述方法制备的透明三赞胶的以下任一应用：

1)用于制备洗护日化用品；

2)用作增稠剂。

9.洗手液，其特征在于，包括如下质量份的各组分：表面活性剂5～30份，甘油5～15份，山梨糖醇5～15份，海藻糖3～10份，烷基多糖苷2～6份，加脂剂2～8份，珠光剂2～5份，氯化钠0.5～5份，透明三赞胶0.1～0.6份，抗硬水剂0.05～0.5份，防腐剂0.05～0.5份，香精0.05～0.5份，色素0～0.005份，用水补齐至100份；

其中，所述透明三赞胶是按照权利要求1-7任一项所述方法制备的透明三赞胶。

10.根据权利要求9所述的洗手液，其特征在于，所述表面活性剂为离子型表面活性剂、非离子型表面活性剂、两性表面活性剂、混合型表面活性剂；优选阴离子表面活性剂，更优选高级脂肪酸的金属盐、硫酸盐、磺酸盐和磷酸酯盐阴离子表面活性剂；优选胺盐类阳离子型表面活性剂；优选氨基酸、甜菜碱羧酸盐和磺酸盐两性表面活性剂；优选聚乙二醇和多元醇型非离子表面活性剂，以及醇醚硫酸盐及醇醚羧酸盐混合型表面活性剂，更优选脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸盐、α-烯基磺酸盐和仲烷基磺酸钠、十二烷基硫酸钠、椰油烷基酰胺基丙基甜菜碱、十二烷基二甲基氧化胺、椰油单乙醇酰胺、烷基醇酰胺；和/或，

所述加脂剂选自椰子油、橄榄油、棕榈油、羊毛脂、蜂蜡、鲸蜡、霍霍巴油、矿油、矿脂、石蜡、硬脂酸及其衍生物，棕榈酸酯、椰油酸酯及它们的衍生物中的至少一种；和/或，

所述珠光剂选自乙二醇单硬脂酸酯、乙二醇二硬脂酸酯中的至少一种；和/或，

所述抗硬水剂选自乙二胺四乙酸及其钠盐、柠檬酸及其盐、磷酸盐类和氨基羧酸类中的至少一种；和/或，

所述防腐剂选自苯甲醇、苯氧乙醇、咪唑烷基脲、苯甲酸、水杨酸、硼酸、山梨酸或酸类及其盐或酯类衍生物中的至少一种。