CN116570596A

CN116570596A - 维立西呱在治疗急性溃疡性结肠炎中的应用

Info

Publication number: CN116570596A
Application number: CN202310625801.6A
Authority: CN
Inventors: 张庆镐; 王旭德; 周梦茹; 张嘉琪; 秦嘉豪; 叶崇涛
Original assignee: Dalian University
Current assignee: Dalian University
Priority date: 2023-05-30
Filing date: 2023-05-30
Publication date: 2023-08-11
Anticipated expiration: 2043-05-30
Also published as: CN116570596B

Abstract

本发明涉及生物医药领域，具体涉及维立西呱(vericiguat)在治疗急性溃疡性结肠炎中的应用。本发明发现了维立西呱在改善治疗溃疡性结肠炎相关疾病中的功效，减缓由溃疡性结肠炎引起的体重下降，降低疾病活动指数，缓解结肠缩短及稀便现象，保护结肠结构完整性。本发明为研究开发治疗溃疡性结肠炎疾病的药物提供了理论基础，有广泛的临床应用价值。

Description

维立西呱在治疗急性溃疡性结肠炎中的应用

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体涉及维立西呱(vericiguat)在治疗急性溃疡性结肠炎中的应用。

背景技术

结肠炎是由多种原因导致的结肠炎症性疾病，其中包括细菌、真菌、病毒、原虫、寄生虫等的感染，遗传、免疫、应用抗生素及放疗等因素。

急性溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种主要发生在结肠的慢性非特异性炎症性肠病，其发病率在全球范围内逐年上升。UC患者的临床症状主要表现为体重下降、腹痛及血性腹泻，其发病与地理、年龄、性别、遗传和环境因素有关，但确切的发病机制尚未完全确定。近年来研究发现肠黏膜机械屏障在UC的发病机制中起重要作用，例如抗氧化能力及免疫炎症因子失衡造成结肠黏膜屏障不同程度受损，肠上皮细胞大面积凋亡，导致局部肠道环境发生病变，加快UC进程。基于UC的无法治愈性，UC患者通常需终身服用美沙拉嗪等药物，但其仍具有一定的毒副作用，因此，探索可预防UC健康无副作用的药物成为新的研究热点。

维立西呱(Vericiguat)，分子式：C₁₉H₁₆F₂N₈O₂，分子量：426.38。由拜耳公司研发，于2021年获美国FDA批准上市，成为当年第一个获批的专门治疗心衰的药物。本品是一种口服药物，用于治疗经历心力衰竭恶化事件后射血分数低于45％的症状性慢性心力衰竭患者，以降低发生心力衰竭住院或需要急诊静脉利尿剂治疗的风险。维立西呱是一种可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)刺激剂，通过直接刺激sGC，增加细胞内cGMP的水平，从而松弛平滑肌和扩张血管。不同于既往心衰药物主要作用于神经-激素机制激活和代谢炎症机制紊乱通路，维立西呱针对细胞-信号通路障碍，不依赖内源性一氧化氮(NO)，直接刺激鸟苷酸环化酶(sGC)，使cGMP生成增多；同时与内源性NO具有协同作用，可增加sGC对NO的敏感性，修复受损的NO-sGC-cGMP通路，改善血管内皮功能，进而改善心肾等靶器官功能。

维立西呱目前已被上市批准用于心衰的治疗，但是将其用于治疗溃疡性结肠炎方面还未有报道。

发明内容

本发明的目的是提供维立西呱的新应用。

为实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案：

本发明提供了维立西呱在制备预防或治疗炎症性肠病药物中的应用。

所述维立西呱结构式如下所示：

上述技术方案中，进一步地，所述炎症性肠病为急性溃疡性结肠炎疾病。

上述技术方案中，进一步地，所述维立西呱的剂量为2mg/kg～6mg/kg。

上述技术方案中，进一步地，所述药物以维立西呱为活性成分。

上述技术方案中，进一步地，所述药物以维立西呱为单一活性成分。

上述技术方案中，进一步地，所述药物为口服制剂或注射制剂。

与现有技术相比，本发明的有益效果：本发明发现了维立西呱在改善治疗溃疡性结肠炎相关疾病中的功效，减缓由溃疡性结肠炎引起的体重下降，降低疾病活动指数，缓解结肠缩短及稀便现象，保护结肠结构完整性。本发明为研究开发治疗溃疡性结肠炎疾病的药物提供了理论基础，有广泛的临床应用价值。

附图说明

图1为本发明所述的各组小鼠体重变化；

图2为本发明所述的各组小鼠疾病活动指数(DAI)结果；

图3为本发明所述的各组小鼠结肠长度；

图4为本发明所述的各组小鼠结肠病理组织病理切片观察；

图5为本发明所述的各组小鼠结肠组织荧光共定位图像。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明作进一步说明，但不以任何方式限制本发明。

实验材料：葡聚糖硫酸钠盐(DSS)、美沙拉嗪(5-ASA)、吐温-80、维立西呱

小鼠：购自辽宁长生生物技术股份有限公司

构建的模型：雄性C57BL/6J小鼠适应性喂养7天后随机分为6组(6只/组)：空白对照组、模型组(3％DSS+1％吐温-80)、阳性对照药物组(3％DSS+150mg/kg美沙拉嗪)、维立西呱低剂量组(3％DSS+2mg/kg维立西呱)、维立西呱高剂量组(3％DSS+6mg/kg维立西呱)。维立西呱和美沙拉嗪均通过灌胃给药；造模周期为14天，前7天维立西呱给药组和阳性对照药物组给予药物预保护，即阳性对照药物组给予150mg/kg/d美沙拉嗪，维立西呱低剂量组给予2mg/kg/d维立西呱，维立西呱高剂量组给予6mg/kg/d维立西呱，第8-14天通过自由饮水给予3％的DSS进行急性UC小鼠造模(空白对照组除外)，同时，维立西呱给药组和阳性对照药物组继续上述剂量给药。

小鼠结肠组织样本的收集：在实验的最后一天，小鼠禁食12h(正常饮水)，眼球取血，静置2h后，离心取上清得到血清(3500r/min，15min)，带回实验室放置在-80摄氏度冰箱用于后续生理生化、炎症因子指标的检测。实验小鼠取血后，收集结肠并分装，一部分组织切块放在提前准备好的甲醛试剂中固定，用于组织病理切片观察；一部分组织切块液氮速冻，干冰运输至实验室，-80摄氏度冰箱冷藏保存用于后续生理生化指标分析。

(1)小鼠体重变化的测定，记录每天小鼠体重。如图1所示，在给予3％的DSS喂养7天后，模型组(3％DSS+1％吐温-80)的体重明显下降，阳性对照药物组(3％DSS+150mg/kg美沙拉嗪)的小鼠体重下降趋势较为缓慢，而维立西呱低剂量组(3％DSS+2mg/kg维立西呱)、维立西呱高剂量组(3％DSS+6mg/kg维立西呱)平均小鼠体重下降趋势均有明显的减缓。

(2)小鼠疾病活动评分指数的测定：实验期间，每日称量记录小鼠体重，收集小鼠粪便，并观察粪便性状及其便血情况。

对以下指标进行评分后相加：①体重减轻百分率(体重不变为0分，体重减轻百分率在1％～5％之间得1分，5％～10％之间得2分，11％～15％之间得3分，高于15％得4分)、②大便性状(正常为0分，松散为2分，稀便为4分)和③便血状况(正常0分，隐血阳性为2分，显性出血为4分)，三者总和除以三即为各组小鼠的疾病活动指数(Diseaseactivityindex,DAI)，DAI能反映小鼠机体疾病情况，同时也可用于判断UC模型是否建模成功。

饮用3％ DSS第3d末，模型组(DSS)的粪便形状和颜色正常。在第4d末，模型组有个别小鼠出现黑便、糊便状，无明显血便，其中有4只小鼠出现粪便隐血情况。直到第7d，模型组全部小鼠的粪便成黄色稀便，小鼠肛门处肉眼可观察到血迹；急性UC模型构建成功。

饮用3％ DSS后，经过维立西呱给药处理后小鼠稀便减少，且出血情况有所缓解。由于DAI是小鼠体重变化、稀便情况和粪便出血情况的综合评分指标，结合上述情况得到如图2所示结果：DSS处理后的4d～7d，模型组小鼠和维立西呱干预组小鼠的DAI评分逐渐上升；与空白对照组相比，DSS给药组的DAI评分均有增高，各组小鼠开始给DSS后第七天末的DAI评分结果显示，模型组小鼠DAI评分相较于正常小鼠极显著升高(P<0.0001)，而经过维立西呱给药处理后，溃疡性结肠炎小鼠DAI下降(P<0.05)，说明维立西呱具有缓解UC小鼠体重降低、稀便和结肠出血的作用。

(3)小鼠结肠长度的测定：在UC患者中结肠会显著缩短，病情的加重与结肠缩短情况成正相关，在UC动物实验中，也可通过观察小鼠结肠的长度判断溃疡性结肠炎小鼠的炎症情况。

如图3所示，对照组小鼠结肠光滑，没有出现水肿的情况，结肠内的粪便成颗粒状分布，也没有出现血水；相较于对照组小鼠，模型组DSS造成了UC小鼠结肠显著的结肠缩短(P<0.0001)，此外，结肠内的粪便多以黄色粘液脓便形式存在；当溃疡性结肠炎小鼠食用维立西呱后，小鼠结肠缩短的趋势得到缓解(P<0.01)，小鼠结肠内血样稀便减少，粪便少量成型，说明维立西呱具有缓解溃疡性结肠炎小鼠结肠缩短及稀便的作用，维立西呱组效果优于阳性对照组，且维立西呱高剂量组效果优于低剂量组。

(4)小鼠结肠病理组织切片的观察：如图4所示，模型组DSS小鼠结肠组织结构完整性破坏较严重，粘膜层部分或全部细胞坏死，粘膜下层发现大量炎性细胞浸润及水肿，部分炎性细胞浸润到肌层；杯状细胞明显减少，隐窝部分或完全消失，腺体结构部分或完全破坏，结肠组织杯状细胞数量较空白组明显减少；而维立西呱给药组小鼠结肠组织结构较为完整，粘膜下层未发现炎性细胞，腺体结构较为完整；维立西呱高剂量组小鼠结肠长度及完整度均优于低剂量组，高剂量组小鼠的结肠组织保护效果更显著，高低剂量组与阳性对照组相比小鼠结肠组织结构较为完整，粘膜下层未发现炎性细胞，腺体结构较为完整。

(5)小鼠结肠组织荧光共定位图像：如图5所示，模型组DSS小鼠结肠组织与空白对照组相比，NLRP3炎症小体显著表达，作为成熟小鼠巨噬细胞标志物的F4-80明显增多，而维立西呱高剂量给药组对上述情况均有缓解。

对于任何熟悉本领域的技术人员而言，在不脱离本发明技术方案范围情况下，都可利用上述揭示的技术内容对本发明技术方案作出许多可能的变动和修饰，或修改为等同变化的等效实施例。因此，凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所做的任何简单修改、等同变化及修饰，均应仍属于本发明技术方案保护的范围内。

Claims

1.维立西呱在制备预防或治疗炎症性肠病药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述炎症性肠病为急性溃疡性结肠炎疾病。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述维立西呱的剂量为2mg/kg～6mg/kg。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物以维立西呱为活性成分。

5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物以维立西呱为单一活性成分。

6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物为口服制剂或注射制剂。